RS64547B1 - Derivati 3-(((((2s,5r)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1] oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata i srodna jedinjenja kao peroralno primenjeni prolekovi inhibitora betalaktamaze za lečenje bakterijskih infekcija - Google Patents

Description

Opis

OBLAST

[0001] Ovo otkriće se odnosi na inhibitore β-laktamaze i njihove farmaceutske kompozicije i upotrebu inhibitora β-laktamaze za lečenje bakterijskih infekcija.

OSNOVA

[0002] Prekomerna, nepravilna i poljoprivredna upotreba antibiotika dovela je do pojave rezistentnih bakterija koje su otporne na iskorenjivanje konvencionalnim antiinfektivnim agensima, kao što su oni zasnovani na β-laktamima ili fluorohinolonskim arhitekturama. Alarmantno, mnoge od ovih otpornih bakterija su odgovorne za uobičajene infekcije, uključujući, na primer, upalu pluća, sepsu itd.

[0003] Razvoj rezistencije na najčešće korišćene β-laktamske antiinfektivne agense je povezan sa ekspresijom β-laktamaza od strane ciljanih bakterija. β-laktamaze tipično hidrolizuju βlaktamski prsten, čineći antibiotik neefikasnim protiv bakterija. Shodno tome, inhibicija βlaktamaza pomoću odgovarajućeg supstrata može sprečiti degradaciju β-laktamskog antibiotika, čime se povećava efikasnost primenjenog antibiotika i ublažava nastanak rezistencije.

[0004] Avibaktam je poznati inhibitor β-laktamaze koji se trenutno prodaje u kombinaciji sa ceftazidimom za lečenje gram negativnih bakterijskih infekcija. Avibaktam se mora primenjivati intravenski, što ograničava upotrebu na skupe kliničke uslove.

REZIME

[0005] Prema predmetnom pronalasku, jedinjenja imaju strukturu formule (1):

ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu,

svaki od R<5>, R<6>, i R<7>je vodonik;

A je jednostruka veza;

svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil, ili svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten;

R<2>je izabran između jednostruke veze, metan-diil i etan-diil;

R<3>je -C(O)-O-R<4>, pri čemu R<4>je izabran od C1-10alkil, C1-10heteroalkil, C5-10arilalkil, C3-6heterocikloalkil, i supstituisani C4-10heterocikloalkilalkil; i

heteroalkil se odnosi na alkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istom ili različitim heteroatomskom grupom ili grupama koje se biraju između -O-, -S-, -NH-, -N (-CH3), -SO- i -SOz-.

[0006] Prema predmetnom pronalasku, farmaceutske kompozicije sadrže jedinjenje prema predmetnom pronalasku i farmaceutski prihvatljiv vehikulum.

[0007] Prema predmetnom pronalasku, terapeutski efikasna količina jedinjenja prema predmetnom pronalasku je obezbeđena za upotrebu u postupku lečenja bakterijske infekcije kod pacijenta koji sadrži primenu na pacijenta kome je takav tretman potreban terapeutski efikasne količine jedinjenja.

[0008] U skladu sa predmetnim pronalaskom, terapeutski efikasna količina farmaceutske kompozicije prema predmetnom pronalasku je obezbeđena za upotrebu u postupku lečenja bakterijske infekcije kod pacijenta koji sadrži primenu na pacijenta kome je potrebno takvo lečenje terapeutski efikasne farmaceutske kompozicije.

[0009] U skladu sa predmetnim pronalaskom, efikasna količina jedinjenja prema predmetnom pronalasku je obezbeđena za upotrebu u postupku inhibicije β-laktamaze kod pacijenta koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja.

[0010] U skladu sa predmetnim pronalaskom, efikasna količina farmaceutske kompozicije prema predmetnom pronalasku je obezbeđena za upotrebu u postupku inhibicije β-laktamaze kod pacijenta koja sadrži primenu na pacijenta efikasne količine farmaceutske kompozicije.

DETALJAN OPIS

[0011] Crtica ("-") koja nije između dva slova ili simbola se koristi da označi tačku vezivanja za deo ili supstituent. Na primer, -CONH2je vezan preko atoma ugljenika.

[0012] "Alkil" se odnosi na zasićeni, razgranati ili pravolančani, monovalentni ugljovodonični radikal koji se dobija uklanjanjem jednog atoma vodonika sa jednog atoma ugljenika matičnog alkana. Primeri alkil grupa uključuju metil, etil; propile kao što su propan-1-il, propan-2-il, itd.; butile kao što su butan-1-il, butan-2-il, 2-metil-propan-1-il, 2-metil-propan-2-il, itd.; i slično. Alkil grupa može biti C1-6alkil, C1-5alkil, C1-4alkil, C1-3alkil, etil ili metil.

[0013] "Alkoksi" se odnosi na radikal -OR gde je R alkil kao što je ovde definisano. Primeri alkoksi grupa uključuju metoksi, etoksi, propoksi i butoksi. Alkoksi grupa može biti C1-6alkoksi, C1-5alkoksi, C1-4alkoksi, C1-3alkoksi, etoksi ili metoksi.

[0014] "Aril" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta se odnosi na monovalentni aromatični ugljovodonični radikal dobijen uklanjanjem jednog atoma vodonika sa jednog atoma ugljenika iz matičnog sistema aromatičnog prstena. Aril obuhvata 5- i 6-člane karbociklične aromatične prstenove, na primer, benzen; biciklični sistemi prstenova u kojima je najmanje jedan prsten karbocikličan i aromatičan, na primer, naftalen, indan i tetralin; i triciklični sistemi prstena u kojima je najmanje jedan prsten karbocikličan i aromatičan, na primer, fluoren. Aril obuhvata višestruke sisteme prstenova koji imaju najmanje jedan karbociklični aromatični prsten fuzionisan sa najmanje jednim karbocikličnim aromatičnim prstenom, cikloalkil prstenom ili heterocikloalkil prstenom. Na primer, aril uključuje fenil prsten fuzionisan sa 5- do 7-članim heterocikloalkilnim prstenom koji sadrži jedan ili više heteroatoma izabranih između N, O i S. Za takve kondenzovane biciklične sisteme prstenova u kojima je samo jedan od prstenova karbociklični aromatični prsten, radikal ugljenikovog atoma može biti na karbocikličnom aromatičnom prstenu ili na heterocikloalkil prstenu. Primeri aril grupa obuhvataju grupe izvedene iz aceantrilena, acenaftilena, acefenantrilena, antracena, azulena, benzena, hrizena, koronena, fluorantena, fluorena, heksacena, heksafena, heksalena, as-indacena, s-indacena, indana, indena, naftalena, oktacena, oktfena, oktalena, ovalena, pentacena, pentalena, pentafena, perilena, fenalena, fenantrena, picena, plejadena, pirena, pirantrena, rubinena, trifenilena, trinaftalena i slično. Aril grupa može biti C6-10aril, C6-9aril, C6-8aril ili fenil. Aril, međutim, ne obuhvata niti se na bilo koji način preklapa sa heteroarilom, posebno definisanim ovde.

[0015] "Arilalkil" se odnosi na aciklični alkil radikal u kome je jedan od atoma vodonika vezan za atom ugljenika zamenjen aril grupom. Primeri arilalkil grupa uključuju benzil, 2-feniletan1-il, 2-feniletan-1-il, naftilmetil, 2-naftiletan-1-il, 2-naftiletan-1-il, naftobenzil i 2-naftofeniletan-1-il. Tamo gde su predviđeni specifični alkil ostaci, koristi se nomenklatura arilalkanil, arilalkenil ili arilalkinil. Arilalkil grupa može biti C7-16arilalkil, na primer, alkanil, alkenil ili alkinil deo arilalkil grupe je C1-6a arilni deo je C6-10.Arilalkil grupa može biti C7-16arilalkil, kao što je alkanil, alkenil ili alkinil deo arilalkil grupe je C1-6i arilni deo je C6-10. Arilalkil grupa može biti C7-9arilalkil, gde je alkil deo C1-3alkil i aril deo je fenil. Arilalkil grupa može biti C7-16arilalkil, C7-14arilalkil, C7-12arilalkil, C7-10arilalkil, C7-8arilalkil ili benzil.

[0016] "Bioraspoloživost" se odnosi na brzinu i količinu leka koji dospe u sistemsku cirkulaciju pacijenta nakon primene leka ili njegovog proleka pacijentu i može se odrediti procenom, na primer, profila koncentracije leka u plazmi ili krvi u odnosu na vreme. Parametri korisni za karakterizaciju krive koncentracije u plazmi ili krvi u odnosu na vreme uključuju površinu ispod krive (AUC), vreme do maksimalne koncentracije (Tmax), i maksimalnu koncentraciju leka (Cmax), gde Cmaxje maksimalna koncentracija leka u plazmi ili krvi pacijenta nakon primene doze leka ili oblika leka pacijentu, i Tmaxje vreme do maksimalne koncentracije (Cmax) leka u plazmi ili krvi pacijenta nakon primene doze leka ili oblika leka pacijentu.

[0017] "Oralna bioraspoloživost" (F%) se odnosi na deo oralno primenjenog leka koji dospe u sistemsku cirkulaciju. Oralna bioraspoloživost je proizvod apsorbovane frakcije, frakcije koja izbegava eliminaciju iz crevnog zida i frakcije koja izbegava eliminaciju iz jetre; a faktori koji utiču na bioraspoloživost mogu se podeliti na fiziološke, fizičko-hemijske i biofarmaceutske faktore.

[0018] "Jedinjenja" i grupe koji su ovde otkriveni uključuju bilo koja specifična jedinjenja unutar ovih formula. Jedinjenja se mogu identifikovati ili po njihovoj hemijskoj strukturi i/ili hemijskom imenu. Jedinjenja se imenuju korišćenjem programa za nomenklaturu/strukturu ChemBioDraw Ultra Version 14.0.0.117 (Cambridge Soft, Cambridge, MA). Kada se hemijska struktura i hemijsko ime sukobljavaju, hemijska struktura je odlučujuća za identitet jedinjenja. Ovde opisana jedinjenja mogu da sadrže jedan ili više stereogenih centara i/ili dvostrukih veza i stoga mogu postojati kao stereoizomeri kao što su izomeri sa dvostrukom vezom (tj. geometrijski izomeri), enantiomeri, dijastereomeri ili atropizomeri. Shodno tome, bilo koje hemijske strukture u okviru specifikacije prikazane, u celini ili delimično, sa relativnom konfiguracijom obuhvataju sve moguće enantiomere i stereoizomere ilustrovanih jedinjenja uključujući stereoizomerno čist oblik (npr. geometrijski čist, enantiomerno čist ili dijastereomerno čist) i enantiomerne i stereoizomerne smeše. Enantiomerne i stereoizomerne smeše mogu da se razdvoje na njihove sastavne enantiomere ili stereoizomere korišćenjem tehnika separacije ili tehnika hiralne sinteze koje su dobro poznate stručnjaku.

[0019] Jedinjenja i grupe koje su ovde otkrivene uključuju optičke izomere jedinjenja i grupa, njihove racemate i druge njihove smeše. U takvim primerima izvođenja, pojedinačni enantiomeri ili dijastereomeri se mogu dobiti asimetričnom sintezom ili razdvajanjem racemata. Rezolucija racemata se može postići, na primer, konvencionalnim postupcima kao što je kristalizacija u prisustvu agensa za razdvajanje, ili hromatografija, koristeći, na primer, kolonu za hiralnu tečnu hromatografiju visokog pritiska (HPLC) sa hiralnim stacionarnim fazama. Pored toga, jedinjenja uključuju (Z)- i (E)-oblike (ili cis- i trans-forme) jedinjenja sa dvostrukim vezama bilo kao pojedinačni geometrijski izomeri ili njihove smeše.

[0020] Jedinjenja i delovi mogu takođe postojati u nekoliko tautomernih oblika uključujući enolni oblik, keto oblik i njihove smeše. Shodno tome, ovde prikazane hemijske strukture obuhvataju sve moguće tautomerne oblike ilustrovanih jedinjenja. Jedinjenja mogu postojati u nesolvatovanim oblicima, kao i u rastvorenim oblicima, uključujući hidratizovane oblike. Određena jedinjenja mogu postojati u više kristalnih, kokristalnih ili amorfnih oblika. Jedinjenja uključuju njihove farmaceutski prihvatljive soli, ili farmaceutski prihvatljive solvate oblika slobodne kiseline bilo kog od prethodno navedenih, kao i kristalne oblike bilo kog od prethodno navedenih

[0021] "Cikloalkil" se odnosi na zasićeni ili delimično nezasićeni ciklični alkil radikal. Cikloalkil grupa može biti C3-6cikloalkil, C3-5cikloalkil, C5-6cikloalkil, ciklopropil, ciklopentil ili cikloheksil. Cikloalkil se može izabrati između ciklopropila, ciklobutila, ciklopentila i cikloheksila.

[0022] "Cikloalkilalkil" se odnosi na aciklični alkil radikal u kome je jedan od atoma vodonika vezan za atom ugljenika zamenjen cikloalkil grupom kao što je ovde definisano. Tamo gde su predviđeni specifični alkil delovi, koristi se nomenklatura cikloalkilalkil, cikloalkilalkenil ili cikloalkilalkinil. Cikloalkilalkil grupa može biti C4-30cikloalkilalkil, na primer, alkanil, alkenil ili alkinil deo cikloalkilalkil grupe je C1-10i cikloalkil deo cikloalkilalkil dela je C3-20. Cikloalkilalkil grupa može biti C4-20cikloalkilalkil, na primer, alkanil, alkenil ili alkinil deo cikloalkilalkil grupe je C1-8a cikloalkil deo cikloalkilalkil grupe je C3-12. Cikloalkilalkil može biti C4-9cikloalkilalkil, gde je alkil deo cikloalkilalkil grupe C1-3alkil i cikloalkil deo cikloalkilalkil grupe je C3-6cikloalkil. Cikloalkilalkil grupa može biti C4-12cikloalkilalkil, C4-

10cikloalkilalkil, C4-8cikloalkilalkil, i C4-6cikloalkilalkil. Cikloalkilalkil grupa može biti ciklopropilmetil (-CH2-ciklo-C3H5), ciklopentilmetil (-CH2-ciklo-C5H9), ili cikloheksilmetil (-CH2-ciklo-C6H11). Cikloalkilalkil grupa može biti ciklopropiletenil (-CH=CH-ciklo-C3H5), ili ciklopentiletinil (-C≡C-ciklo-C5H9).

[0023] "Cikloalkilheteroalkil" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta odnosi se na heteroalkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određenih povezanih atoma vodonika) alkil grupe nezavisno zamenjeni istom ili različitim heteroatomskom grupom ili grupama i u kome je jedan od atoma vodonika vezan za atom ugljenika zamenjen cikloalkil grupom. Kada su predviđeni specifični alkil ostaci, koristi se nomenklatura cikloalkilheteroalkanil, cikloalkilheteroalkenil i cikloalkilheteroalkinil. U cikloalkilheteroalkilu, heteroatomska grupa se može izabrati između -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- i -SOz-, ili heteroatomska grupa može biti izabrana između -O- i -NH-, ili heteroatomska grupa je -O- ili -NH-.

[0024] "Cikloalkiloksi" se odnosi na radikal -OR gde je R cikloalkil kao što je ovde definisano. Primeri cikloalkiloksi grupa uključuju ciklopropiloksi, ciklobutiloksi, ciklopentiloksi i cikloheksiloksi. Cikloalkiloksi grupa može biti C3-6cikloalkiloksi, C3-5cikloalkiloksi, C5-6cikloalkiloksi, ciklopropiloksi, ciklobutiloksi, ciklopentiloksi ili cikloheksiloksi.

[0025] "Bolest" se odnosi na bolest, poremećaj, stanje ili simptom bilo čega od prethodnog.

[0026] "Fluoroalkil" se odnosi na alkil grupu kako je ovde definisano u kojoj je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno fluorom. Fluoralkil grupa može biti C1-6fluoroalkil, C1-5fluoroalkil, C1-4fluoroalkil, ili C1-3fluoroalkil. Fluoroalkil grupa može biti pentafluoroetil (-CF2CF3), ili trifluorometil (-CF3).

[0027] "Fluoroalkoksi" se odnosi na alkoksi grupu kako je ovde definisana u kojoj je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno fluorom. Fluoralkoksi grupa može biti C1-6fluoroalkoksi, C1-5fluoroalkoksi, C1-4fluoroalkoksi C1-3, fluoroalkoksi, -OCF2CF3ili -OCF3.

[0028] "Halogen" se odnosi na fluoro, hloro, bromo ili jodo grupu.

[0029] "Heteroalkoksi" se odnosi na alkoksi grupu u kojoj je jedan ili više atoma ugljenika zamenjeno heteroatomom. Heteroalkoksi grupa može biti C1-6heteroalkoksi, C1-5heteroalkoksi, C1-4heteroalkoksi, ili C1-3heteroalkoksi. U heteroalkoksi, heteroatomska grupa se može izabrati između -O-, -S-, -NH-, -NR-, -SOz- i -SOz-, ili heteroatomska grupa može biti izabrana između -O- i -NH -, ili heteroatomska grupa je -O- i -NH-. Heteroalkoksi grupa može biti C1-6heteroalkoksi, C1-5heteroalkoksi, C1-4heteroalkoksi, ili C1-3heteroalkoksi.

[0030] "Heteroalkil" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta se odnosi na alkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istom ili različitim heteroatomskom grupom ili grupama. Primeri heteroatomskih grupa uključuju -O-, -S-, -NH-, -NR-, -O-O-, -S-S-, =N-N=, -N=N-, -N=N-NR-, -PR-, -P(O)OR-, -P(O)R-, -POR-, -SO-, -SOz-, -Sn(R)2-, i slično, gde je svaki R nezavisno izabran od vodonika, C1-6alkil, supstituisani C1-6alkil, C6-12aril, supstituisani C6-12aril, C7-18arilalkil, supstituisani C7-18arilalkil, C3-7cikloalkil, supstituisani C3-7cikloalkil, C3-7heterocikloalkil, supstituisani C3-7heterocikloalkil, C1-6heteroalkil, supstituisani C1-6heteroalkil, C6-12heteroaril, supstituisani C6-12heteroaril, C7-18heteroarilalkil, i supstituisani C7-18heteroarilalkil. Svaki R može biti nezavisno izabran između vodonika i C1-3alkil. Pozivanje, na primer, na C1-

6heteroalkil, označava C1-6alkil grupu u kojoj je najmanje jedan od atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) zamenjen heteroatomom. Na primer, C1-6heteroalkil uključuje grupe koje imaju pet atoma ugljenika i jedan heteroatom, grupe koje imaju četiri atoma ugljenika i dva heteroatoma, itd. U heteroalkilu, heteroatomska grupa se može izabrati između -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- i -SOz-, ili heteroatomska grupa može biti izabrana između -O- i -NH-, ili heteroatomska grupa može biti -O- ili -NH-. Heteroalkil grupa može biti C1-6heteroalkil, C1-

5heteroalkil, ili C1-4heteroalkil, ili C1-3heteroalkil.

[0031] "Heteroaril" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta se odnosi na monovalentni heteroaromatični radikal koji je izveden uklanjanjem jednog atoma vodonika sa jednog atoma matičnog heteroaromatičnog sistema prstena. Heteroaril obuhvata višestruke sisteme prstenova koji imaju najmanje jedan heteroaromatični prsten fuzionisan sa najmanje jednim drugim prstenom, koji može biti aromatičan ili nearomatičan. Na primer, heteroaril obuhvata biciklične prstenove u kojima je jedan prsten heteroaromatičan, a drugi prsten je heterocikloalkil prsten. Za takve fuzionisane, biciklične heteroaril prstenaste sisteme u kojima samo jedan od prstenova sadrži jedan ili više heteroatoma, radikal ugljenika može biti na aromatičnom prstenu ili na heterocikloalkil prstenu. Kada ukupan broj N, S i O atoma u heteroaril grupi prelazi jedan, heteroatomi mogu, ali ne moraju biti susedni jedan drugom. Ukupan broj heteroatoma u heteroaril grupi nije veći od dva. U heteroarilu, heteroatomska grupa se može izabrati između -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -S(O)- i -SOz-, ili heteroatomska grupa može biti izabrana između -O- i -NH-, ili heteroatomska grupa može biti -O- ili -NH-. Heteroaril grupa može biti izabrana od C5-10heteroaril, C5-9heteroaril, C5-8heteroaril, C5-7heteroaril, C5-6heteroaril, C5heteroaril ili C6heteroaril.

[0032] Primeri pogodnih heteroaril grupa obuhvataju grupe izvedene iz akridina, arsindola, karbazola, α-karbolina, hromana, hromena, cinolina, furana, imidazola, indazola, indola, indolina, indolizina, izobenzofurana, izohromena, izotiazola, izoksazola, naftiridina, oksadiazola, oksazola, perimidina, fenantridina, fenantrolina, fenazina, ftalazina, pteridina, purina, pirana, pirazina, pirazola, piridazina, piridina, pirimidina, pirola, pirolizina, hinazolina, hinolina, hinolizina, hinoksalina, tetrazola, tiadiazola, tiazola, tiofena, triazola, ksantena, tiazolidina, oksazolidina i slično. Heteroaril grupa može biti izvedena iz tiofena, pirola, benzotiofena, benzofurana, indola, piridina, hinolina, imidazola, oksazola ili pirazina. Na primer, heteroaril može biti C5heteroaril i može biti izabran između furila, tienila, pirolila, imidazolila, pirazolila, izotiazolila ili izoksazolila. Heteroaril može biti C6heteroaril, i može se izabrati između piridinil, pirazinil, pirimidinil i piridazinil.

[0033] "Heteroarilalkil" se odnosi na arilalkil grupu u kojoj je jedan od atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) zamenjen heteroatomom. Heteroarilalkil grupa može biti C6-16heteroarilalkil, C6-14heteroarilalkil, C6-12heteroarilalkil, C6-10heteroarilalkil, C6-8heteroarilalkil, ili C7heteroarilalkil, ili C6heteroarilalkil. U heteroarilalkilu, heteroatomska grupa se može izabrati između -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- i -SOz-, ili heteroatomska grupa može biti izabrana između -O- i -NH-, ili heteroatomska grupa može biti -O- ili -NH-.

[0034] "Heterocikloalkil" sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta se odnosi na zasićeni ili nezasićeni ciklični alkil radikal u kome su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istim ili različitim heteroatomom; ili na matični sistem aromatičnog prstena u kome su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni pridruženi atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istim ili različitim heteroatomom tako da sistem prstenova krši Hückel-ovo pravilo. Primeri heteroatoma koji zamenjuju atom(e) ugljenika uključuju N, P, O, S i Si. Primeri heterocikloalkil grupa uključuju grupe izvedene iz epoksida, azirina, tiirana, imidazolidina, morfolina, piperazina, piperidina, pirazolidina, pirolidina i hinuklidina. Heterocikloalkil može biti C5heterocikloalkil i bira se između pirolidinila, tetrahidrofuranila, tetrahidrotiofenila, imidazolidinila, oksazolidinila, tiazolidinila, doksolanila i ditiolanila. Heterocikloalkil može biti C6heterocikloalkil i može se izabrati između piperidinila, tetrahidropiranila, piperizinila, oksazinila, ditianila i dioksanila. Heterocikloalkil grupa može biti C3-6heterocikloalkil, C3-5heterocikloalkil, C5-6heterocikloalkil, C5heterocikloalkil ili C6heterocikloalkil. U heterocikloalkilu, heteroatomska grupa se može izabrati između -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO- i -SOz-, ili heteroatomska grupa može biti izabrana između -O- i -NH-, ili heteroatomska grupa može biti -O- ili -NH-.

[0035] "Heterocikloalkilalkil" se odnosi na cikloalkilalkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određenih povezanih atoma vodonika) cikloalkilnog prstena nezavisno zamenjeni istim ili različitim heteroatomom. Heterocikloalkilalkil može biti C4-12heterocikloalkilalkil, C4-

10heterocikloalkilalkil, C4-8heterocikloalkilalkil, C4-6heterocikloalkilalkil, C6-7heterocikloalkilalkil, ili C6heterocikloalkilalkil ili C7heterocikloalkilalkil. U heterocikloalkilalkilu, heteroatomska grupa se može izabrati između -O-, -S-, -NH-, -N(-CH3)-, -SO-, i -SOz-, ili heteroatomska grupa može biti izabrana između -O- i -NH-, ili heteroatomska grupa može biti -O- ili -NH-.

[0036] "Matični aromatični sistem prstenova" se odnosi na nezasićeni ciklični ili policiklični sistem prstenova koji ima ciklični konjugovani π (pi) elektronski sistem sa 4n+2 elektrona (Hückel-ovo pravilo). U okviru definicije „matični aromatični prstenasti sistem” su spojeni sistemi prstenova u kojima je jedan ili više prstenova aromatičnih i jedan ili više prstenova zasićenih ili nezasićenih, kao što su, na primer, fluoren, indan, inden, fenalen, itd. Primeri matičnih sistema aromatičnih prstenova uključuju aceantrilen, acenaftilen, acefenantrilen, antracen, azulen, benzen, hrizen, koronen, fluoranten, fluoren, heksacen, heksafen, heksalen, sindacen, indan, inden, naftalen, oktacen, oktafen, oktalen, ovalen, pentacen, pentalen, pentafen, perilen, fenalen, fenantren, picen, plejaden, piren, pirantren, rubiken, trifenilen, trinaftalen i slično.

[0037] "Hidrati" se odnose na inkorporaciju vode u kristalnu rešetku jedinjenja opisanog ovde, u stehiometrijskim razmerama, što rezultuje formiranjem adukta. Postupci pravljenja hidrata uključuju, ali nisu ograničeni na, skladištenje u atmosferi koja sadrži vodenu paru, dozne oblike koji uključuju vodu ili rutinske korake farmaceutske obrade kao što je, na primer, kristalizacija (tj. iz vode ili mešanih vodenih rastvarača), liofilizacija, vlažna granulacija, oblaganje vodenim filmom ili sušenje raspršivanjem. Hidrati se takođe mogu formirati, pod određenim okolnostima, iz kristalnih solvata pri izlaganju vodenoj pari, ili suspenzijom anhidrovanog materijala u vodi. Hidrati takođe mogu da kristališu u više od jednog oblika što dovodi do polimorfizma hidrata.

[0038] "Metabolički intermedijer" se odnosi na jedinjenje koje se formira in vivo metabolizmom matičnog jedinjenja i to dalje prolazi kroz reakciju in vivo za oslobađanje aktivnog sredstva. Jedinjenja formule (1) su zaštićeni sulfonatni nukleofilni prolekovi inhibitora ne-β-laktam β-laktamaze koji se metabolišu in vivo da se obezbede odgovarajući metabolički intermedijeri kao što je avibaktam ([2S,5R]-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfat). Metabolički intermedijeri se podvrgavaju nukleofilnoj ciklizaciji da bi se oslobodio ne-β-laktam β-laktamazni inhibitor kao što je avibaktam i jedan ili više proizvoda reakcije. Poželjno je da proizvodi reakcije ili njihovi metaboliti ne budu toksični.

[0039] "Neopentil" se odnosi na radikal u kojem je metilen ugljenik vezan za atom ugljenika, koji je vezan za tri nevodonička supstituenta. Primeri nevodoničnih supstituenata uključuju ugljenik, kiseonik, azot i sumpor. Svaki od tri nevodoničkih supstituenata mogu biti ugljenik. Dva od tri nevodonička supstituenta mogu biti ugljenik, a treći nevodonički supstituent može biti izabran između kiseonika i azota. Neopentil grupa može imati strukturu:

gde je svaki R<1>je definisan kao za formulu (1).

[0040] "Matični aromatični prstenasti sistem" se odnosi na nezasićeni ciklični ili policiklični sistem prstenova koji ima konjugovani π elektronski sistem. Konkretno uključeni u definiciju „matični aromatični sistem prstenova“ su kondenzovani sistemi prstenova u kojima je jedan ili više prstenova aromatičnih i jedan ili više prstenova zasićenih ili nezasićenih, kao što su, na primer, fluoren, indan, inden, fenalen, itd. Primeri matičnih sistema aromatičnih prstenova uključuju aceantrilen, acenaftilen, acefenantrilen, antracen, azulen, benzen, hrizen, koronen, fluoranten, fluoren, heksacen, heksafen, heksalen, as-indacen, s-indacen, indan, inden, naftalen, oktacen, oktafen, oktalen, ovalen, penta-2,4-dien, pentacen, pentalen, pentafen, perilen, fenalen, fenantren, picen, plejaden, piren, piren, rubifen, rubifen i trinaftalin.

[0041] "Matični heteroaromatični prstenasti sistem" se odnosi na sistem aromatičnog prstena u kojem su jedan ili više atoma ugljenika (i bilo koji pridruženi atom vodonika) nezavisno zamenjeni istim ili različitim heteroatomom na način da se održava kontinuirani π-elektronski sistem karakterističan za aromatični sistemi i broj π-elektrona koji odgovara Hückel-ovom pravilu (4n 2). Primeri heteroatoma koji zamenjuju atome ugljenika uključuju N, P, O, S i Si, itd. Konkretno uključeni u definiciju "matični heteroaromatični sistemi prstenova" su spojeni sistemi prstenova u kojima su jedan ili više prstenova aromatični i jedan ili više prstenova je zasićeno ili nezasićeno, kao što su, na primer, arsindol, benzodioksan, benzofuran, hroman, hromen, indol, indolin i ksanten. Primeri matičnih heteroaromatičnih prstenastih sistema obuhvataju arsindol, karbazol, β-karbolin, hroman, hromen, cinolin, furan, imidazol, indazol, indol, indolin, indolizin, izobenzofuran, izohromen, izoindol, izoindolin, izohinolin, isotiazol, izoksazol, naftiridin, oksadiazol, oksazol, perimidin, fenantridin, fenantrolin, fenazin, ftalazin, pteridin, purin, piran, pirazin, pirazol, piridazin, piridin, pirimidin, pirol, pirolizin, hinolizolin, hinolin, hinolizin, hinoksalin, tetrazol, tiadiazol, tiazol, tiofen, triazol, ksanten, tiazolidin i oksazolidin.

[0042] "Pacijent" se odnosi na sisara, na primer, čoveka. Termin "pacijent" se koristi naizmenično sa "subjekat".

[0043] „Farmaceutski prihvatljivo“ se odnosi na odobreno ili odobreno od strane regulatorne agencije savezne ili državne vlade ili na spisak u američkoj farmakopeji ili drugoj opšte priznatoj farmakopeji za upotrebu kod životinja, a posebno kod ljudi.

[0044] "Farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na so jedinjenja, koja poseduje željenu farmakološku aktivnost matičnog jedinjenja. Takve soli uključuju kisele adicione soli, formirane sa neorganskim kiselinama i jednom ili više protonabilnih funkcionalnih grupa kao što su primarni, sekundarni ili tercijarni amini unutar matičnog jedinjenja. Primeri neorganskih kiselina su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina i slično. So se može formirati sa organskim kiselinama kao što su sirćetna kiselina, propionska kiselina, heksanska kiselina, ciklopentanpropionska kiselina, glikolna kiselina, pirogrožđana kiselina, mlečna kiselina, malonska kiselina, jantarna kiselina, jabučna kiselina, maleinska kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, benzojeva kiselina, 3-(4-hidroksibenzoil) benzojeva kiselina, cimetna kiselina, bademova kiselina, metan sulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, 1,2-etan-disulfonska kiselina, 2-hidroksietansulfonska kiselina, benzen sulfonska kiselina, 4-benzensulfonska kiselina, 2-naftalensulfonska kiselina, 4-toluensulfonska kiselina, kamforsulfonska kiselina, 4-metilbiciklo[2.22]-okt-2-en-1-karboksilna kiselina, glukoheptonska kiselina, 3-fenilpropionska kiselina, trimetilsirćetna kiselina, tercijerna butilsirćetna kiselina, lauril sumporna kiselina, glukonska kiselina, glutaminska kiselina, hidroksinaftoinska kiselina, salicilna kiselina, stearinska kiselina, mukonska kiselina i slično. So se može formirati kada se jedan ili više kiselih protona prisutnih u matičnom jedinjenju zamene jonom metala, kao što je jon alkalnog metala, zemnoalkalni jon, ili jon aluminijuma, ili njihove kombinacije; ili koordinira sa organskom bazom kao što je etanolamin, dietanolamin, trietanolamin i N-metilglukamin. Farmaceutski prihvatljiva so može biti hidrohloridna so. Farmaceutski prihvatljiva so može biti natrijumova so. U jedinjenjima koja imaju dve ili više jonizujućih grupa, farmaceutski prihvatljiva so može da sadrži jedan ili više kontrajona, kao što je bi-sol, na primer, so dihidrohlorida.

[0045] Izraz "farmaceutski prihvatljiva so" uključuje hidrate i druge solvate, kao i soli u kristalnom ili nekristalnom obliku. Tamo gde je otkrivena određena farmaceutski prihvatljiva so, podrazumeva se da je određena so, kao što je hidrohloridna so, primer soli, i da se druge soli mogu formirati korišćenjem tehnika poznatih stručnjacima u ovoj oblasti. Pored toga, stručnjak u ovoj oblasti bi mogao da konvertuje farmaceutski prihvatljivu so u odgovarajuće jedinjenje, slobodnu bazu i/ili slobodnu kiselinu, koristeći tehnike opšte poznate u struci.

[0046] "Farmaceutski prihvatljiv nosač" se odnosi na farmaceutski prihvatljiv razblaživač, farmaceutski prihvatljiv adjuvans, farmaceutski prihvatljiv ekscipijens, farmaceutski prihvatljiv nosač ili kombinaciju bilo čega od prethodnog sa kojima se pacijentu može davati jedinjenje predviđeno ovim otkrićem i koji ne uništava njegovu farmakološku aktivnost i koji je netoksičan kada se primenjuje u dozama dovoljnim da obezbede terapeutski efikasnu količinu jedinjenja.

[0047] "Farmaceutska kompozicija" se odnosi na jedinjenje Formule (1) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv vehikulum, sa kojim se jedinjenje formule (1) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daje pacijentu. Farmaceutski prihvatljivi nosači su poznati u tehnici.

[0048] „Sprečavanje“ ili „prevencija“ se odnosi na smanjenje rizika od dobijanja bolesti ili poremećaja (tj. uzrokujući da se barem jedan od kliničkih simptoma bolesti ne razvije kod pacijenta koji može biti izložen ili predisponiran za bolest, ali još ne doživljava ili ne pokazuje simptome bolesti). U nekim primerima izvođenja, "sprečavanje" ili "prevencija" se odnosi na smanjenje simptoma bolesti uzimanjem jedinjenja na preventivni način. Primena terapeutskog sredstva za prevenciju ili prevenciju bolesti poremećaja poznata je kao profilaksa. Jedinjenja obezbeđena predmetnim pronalaskom mogu obezbediti superiornu profilaksu zbog nižih dugoročnih neželjenih efekata tokom dugih vremenskih perioda.

[0049] "Prolek" se odnosi na derivat molekula leka koji zahteva transformaciju u telu da bi se oslobodio aktivni lek. Prolekovi su često, iako ne nužno, farmakološki neaktivni dok se ne pretvore u osnovni lek.

[0050] "Progrupa" se odnosi na grupu vezanu za lek, tipično za funkcionalnu grupu leka, preko veze(a) koje se mogu cepati pod određenim uslovima upotrebe. Veza(e) između leka i progrupe može da se odcepi enzimskim ili neenzimskim putem. Pod uslovima upotrebe, na primer nakon davanja pacijentu, veza(e) između leka i progrupe može da se pocepa da bi se oslobodio osnovni lek. Cepanje progrupe može se odvijati spontano, kao što je reakcija hidrolize, ili može biti katalizovano ili indukovano drugim agensom, kao što je enzim, svetlost, kiselina, ili promenom ili izlaganjem fizičkom ili parametaru životne sredine, kao što je promena temperature, pH, itd. Sredstvo može biti endogeno za uslove upotrebe, kao što je enzim prisutan u sistemskoj cirkulaciji pacijenta kome se daje prolek ili kiseli uslovi želuca ili se agens može snabdevati egzogeno. Na primer, za jedinjenje Formule (1), progrupa može imati strukturu:

gde su R<1>, R<2>, i R<3>definisani kao za formulu (1).

[0051] „Jedna veza“ kao u izrazu „R<2>je izabran iz jednostruke veze" odnosi se na deo u kome R<2>je jednostruka veza. Na primer, u ostatku koji ima strukturu -C(R<1>)2-R<2>-R<3>, gde je R<2>je jednostruka veza, -R<2>- odgovara jednostrukoj vezi, "-", a deo ima strukturu -C(R<1>)2-R<3>.

[0052] „Solvat“ se odnosi na molekularni kompleks jedinjenja sa jednim ili više molekula rastvarača u stehiometrijskoj ili nestehiometrijskoj količini. Takvi molekuli rastvarača su oni koji se obično koriste u farmaceutskoj tehnici, za koje se zna da su bezopasni za pacijenta, kao što je voda, etanol i sl. Molekularni kompleks jedinjenja ili dela jedinjenja i rastvarača može se stabilizovati nekovalentnim intramolekularnim silama kao što su, na primer, elektrostatičke sile, van der Valsove sile ili vodonične veze. Termin "hidrat" se odnosi na solvat u kome je jedan ili više molekula rastvarača voda.

[0053] "Solvati" se odnose na inkorporaciju rastvarača u kristalnu rešetku jedinjenja opisanog ovde, u stehiometrijskim razmerama, što rezultuje formiranjem adukta. Postupci pravljenja solvata uključuju, ali nisu ograničeni na, skladištenje u atmosferi koja sadrži rastvarač, dozne oblike koji uključuju rastvarač ili rutinske korake farmaceutske obrade kao što je, na primer, kristalizacija (tj. iz rastvarača ili mešanih rastvarača) difuzija pare. Solvati se takođe mogu formirati, pod određenim okolnostima, od drugih kristalnih solvata ili hidrata nakon izlaganja rastvaraču ili suspenzije materijala u rastvaraču. Solvati mogu da kristališu u više od jednog oblika što rezultuje polimorfizmom solvata.

[0054] "Supstituisani" se odnosi na grupu u kojoj su jedan ili više atoma vodonika nezavisno zamenjeni istim ili različitim supstituentima. Svaki supstituent može biti nezavisno izabran između deuterio, halogena, -OH, -CN, -CF3, -OCF3, =O, -NOz, C1-6alkoksi, C1-6alkil, -COOR, -NR2, i -CONR2; pri čemu je svaki R nezavisno izabran od vodonika i C1-6alkil. Svaki supstituent može biti nezavisno izabran između deuterio, halogena, -NH2, -OH, C1-3alkoksi, i C1-3alkil, trifluorometoksi i trifluorometil. Svaki supstituent može biti nezavisno izabran između deuterio, -OH, metil, etil, trifluorometil, metoksi, etoksi i trifluorometoksi. Svaki supstituent može biti izabran između deuterio, C1-3alkil, =O, C1-3alkil, C1-3alkoksi i fenil. Svaki supstituent može biti izabran između deuterio, -OH, -NH2, C1-3alkil, i C1-3alkoksi.

[0055] „Lečenje“ ili „tretman“ bolesti odnosi se na zaustavljanje ili ublažavanje bolesti ili bar jednog od kliničkih simptoma bolesti ili poremećaja, smanjenje rizika od dobijanja bolesti ili bar jednog od kliničkih simptoma bolesti, smanjenje razvoja bolesti ili najmanje jednog od kliničkih simptoma bolesti ili smanjenje rizika od razvoja bolesti ili bar jednog od kliničkih simptoma bolesti. "Lečenje" ili "tretman" se takođe odnosi na inhibiciju bolesti, bilo fizički (npr. stabilizacija uočljivog simptoma), fiziološki (npr. stabilizacija fizičkog parametra), ili oboje, i na inhibiciju najmanje jednog fizičkog parametra ili manifestacija koja pacijentu može ali ne mora biti uočljiva. "Lečenje" ili "tretman" se takođe odnosi na odlaganje početka bolesti ili najmanje jednog ili više njenih simptoma kod pacijenta koji može biti izložen ili predisponiran za bolest ili poremećaj iako taj pacijent još nema ili ne pokazuje simptome bolesti.

[0056] "Terapeutski efikasna količina" se odnosi na količinu jedinjenja koja je, kada se daje subjektu za lečenje bolesti, ili bar jedan od kliničkih simptoma bolesti, dovoljna da utiče na takav tretman bolesti ili njenog simptoma. "Terapeutski efikasna količina" može da varira u zavisnosti, na primer, od jedinjenja, bolesti i/ili simptoma bolesti, težine bolesti i/ili simptoma bolesti ili poremećaja, starosti, težine i/ili zdravlja pacijenta koji će biti lečen, i procene lekara koji je propisao lek. Odgovarajuću količinu u bilo kojoj datoj instanci mogu utvrditi oni koji su verzirani u ovoj oblasti ili oni koji su sposobni da to odrede rutinskim eksperimentisanjem.

[0057] "Terapeutski efikasna doza" se odnosi na dozu koja obezbeđuje efikasan tretman bolesti ili poremećaja kod pacijenta. Terapeutski efikasna doza može da varira od jedinjenja do jedinjenja, i od pacijenta do pacijenta, i može zavisiti od faktora kao što su stanje pacijenta i put isporuke. Terapeutski efikasna doza se može odrediti u skladu sa rutinskim farmakološkim procedurama poznatim stručnjacima u ovoj oblasti.

[0058] "Terapeutski efikasna količina" označava količinu jedinjenja koja je, kada se daje pacijentu za lečenje bolesti, dovoljna da utiče na takav tretman bolesti. "Terapeutski efikasna količina" će varirati u zavisnosti, na primer, od jedinjenja, bolesti i njene težine i starosti, težine, adsorpcije, distribucije, metabolizma i izlučivanja, pacijenta koji se leči.

[0059] "Vehikulum" se odnosi na razblaživač, ekscipijens ili nosač sa kojim se jedinjenje daje subjektu. U nekim primerima izvođenja, vehikulum je farmaceutski prihvatljiv.

[0060] Jedinjenja obezbeđena ovim otkrićem su sulfonatni estarski prolekovi inhibitora ne-βlaktam β-laktamaze. U prolekovima inhibitora beta-laktama β-laktamaze, nukleofilni deo je pozicioniran u blizini hidrogen sulfatne grupe. in vivo, nukleofilni deo reaguje na oslobađanje inhibitora β-laktamaze koji nije β-laktam. Primeri ne-β-laktamskih inhibitora β-laktamaze uključuju avibaktam ([2S,5R]-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfat), relebaktam ((1R,2S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfat), i nakubaktam (1R,2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfat, i derivati i analozi bilo kog od prethodno navedenih. Ova jedinjenja su inhibitori klase A, klase C i određenih β-laktamaza klase D i korisna su u lečenju bakterijskih infekcija kada se koriste u kombinaciji sa β-laktamskim antibioticima.

[0061] U jedinjenjima formule (1), jedinjenje se može izabrati od sledečih:

etil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (3);

benzil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (4);

metil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (10);

izopropil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (11);

heksil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (12);

heptil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (13);

terc-butil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (14);

2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (15);

oksetan-3-il 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (16);

etil 1-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilat (17);

etil 1-((((((2S,5R)-2-karbarnoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklopropankarboksilat (18);

etil 1-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklobutankarboksilat (19);

etil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (35);

heksil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (36);

heptil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (37);

2-metoksietil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (38);

propil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (57);

butil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (58);

(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (59); i

etil 2-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-etilbutanoat (61);

farmaceutski prihvatljiva so bilo kog od prethodno navedenih; i

kombinacija bilo čega od prethodnog.

Jedinjenje formule (1) može biti solvat, farmaceutski prihvatljiva so ili njihova kombinacija.

[0062] U jedinjenjima formule (1), farmaceutski prihvatljiva so može biti hidrohloridna so.

[0063] U jedinjenjima formule (1), farmaceutski prihvatljiva so može biti so dihidrohlorida.

[0064] Jedinjenje Formule (1) može biti farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja Formule (1), njegov hidrat ili solvat bilo kog od prethodno navedenih.

[0065] Ovde opisano jedinjenje može da se sintetiše korišćenjem metoda poznatih u tehnici. Sinteza različitih dijazabiciklo[3.2.1]oktanskih struktura opisanih ovde je konvencionalna i dobro je poznata stručnjacima u ovoj oblasti (Tandiparthi et al., objava PCT međunarodne prijave br. WO 2016/116788; Lampilas et al., U.S. Patent br. 7,112,592; King et al., ACS Chemical Biologi 2016; 11, 864; i Bush et al., Cold Spring Harb Perspect Med 2016; 6:a025247). Formiranje sulfatnih estara je takođe dobro poznato u tehnici (Simpson et al., J. Am. Chem. Soc.2006, 128, 1605; Li et al., objava U.S. prijave br.2009/0099253; Jandeleit et al., objava PCT međunarodne prijave br. WO 2009/033054; Jandeleit et al., objava PCT međunarodne prijave br. WO 2009/033079; i Jandeleit et al., objava PCT međunarodne prijave br. WO 2011/150380).

[0066] Sulfat monoestarski analozi jedinjenja koja sadrže sulfat mogu se dobiti reakcijom jedinjenja koje sadrži sulfat supstituisano hidroksilom sa hlorosulfat monoestrom da bi se dobio odgovarajući analog sulfat monoestra. Metode mogu biti korisne u pripremanju prolekova farmaceutskih jedinjenja koja sadrže sulfat.

[0067] Prolekovi su derivatizovani oblici lekova koji se nakon primene konvertuju ili metabolišu u aktivni oblik matičnog leka in vivo. Prolekovi se koriste za modifikovanje jednog ili više aspekata farmakokinetike leka na način koji poboljšava terapeutsku efikasnost matičnog leka. Na primer, prolekovi se često koriste za poboljšanje oralne bioraspoloživosti leka. Da bi bili terapeutski efikasni, lekovi koji pokazuju lošu oralnu bioraspoloživost mogu zahtevati često doziranje, velike primenjene doze ili će možda biti potrebno da se primenjuju drugim putevima osim oralnim, kao što je intravenozno. Konkretno, mnogi lekovi sa sulfatnim grupama pokazuju lošu oralnu bioraspoloživost.

[0068] Strategije prolekova intramolekularne ciklizacije su korišćene da bi se modifikovala farmakokinetika lekova. Strategije prolekova oslobađanja intramolekularne ciklizacije su primenjene na lekove koji sadrže funkcionalne grupe sulfonske kiseline. Na primer, prolekovi koji sadrže supstituisani derivat neopentil sulfonatnog estra u kome je neopentil grupa uklonjena in vivo demaskiranjem nukleofilnog heteroatoma povezanog sa supstituisanim neopentilnim delom praćenim intramolekularnom ciklizacijom da bi se dobio osnovni lek u obliku sulfonske kiseline ili sulfonske soli, opisano je, na primer, u U.S. Patentu br.7,994,218 i U.S. Patentu br. 8,168,617. U takvim prolekovima nukleofilni heteroatom može biti azot ili kiseonik, a nukleofil azota ili kiseonika može biti maskiran sa zaštitnom grupom za amin ili alkohol, respektivno, koji može da se deprotektuje in vivo.

[0069] Sulfat monoestarski analozi jedinjenja koje sadrži sulfat mogu se dobiti reakcijom hidroksil supstituisanog analoga jedinjenja koje sadrži sulfat sa hlorosulfat monoestrom pod baznim uslovima, da bi se dobio odgovarajući analog sulfat monoestra. Monoestar hlorosulfata se može dobiti reakcijom sulfuril hlorida sa alkoholom koji ima željeni deo. Neopentil alkoholi koji imaju neopentilne delove mogu se pripremiti standardnim sintetičkim postupcima kao što su oni opisane u U.S. Patentu br.7,994,218 i 8,168,617.

[0070] Na primer, sulfat monoestarski analozi avibaktama obezbeđeni ovim otkrićem mogu se sintetizovati reakcijom (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid sa hlorosulfat monoestrom koji ima željeni deo da bi se obezbedio odgovarajući (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il sulfat monoestar.

[0071] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid se može dobiti hidrogenizacijom (2S,5R)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid korišćenjem postupaka opisanih, npr. u U.S. Patentima br.8,772,490; 9,035,062; i 9,284,273.

[0072] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid može da reaguje sa hlorosulfat monoestrom u prisustvu baze da bi se dobio odgovarajući sulfat monoestar analog avibaktama. Pogodne metode su otkrivene, na primer, u J. Am. Chem. Soc.

2006, 128, 1605-1610.

[0073] Slični postupci se mogu prilagoditi za pripremu analoga sulfata monoestra relebaktama i nakubaktama. Na primer, terc-butil karboksilatom zaštićen, 6-hidroksil analog relebaktama može reagovati sa hlorosulfat monoestrom u prisustvu baze da bi se dobio odgovarajući tercbutil karboksilatom zaštićen analog sulfat monoestra relebaktama. Sa jedinjenja se zatim može ukloniti zaštita u prisustvu kiseline da bi se dobio analog sulfat monoestra relebaktama. Postupci slični onima koji se koriste za pripremu analoga sulfata monoestra relebaktama mogu se koristiti za pripremu analoga sulfat monoestra nakubaktama.

[0074] Na primer, analog sulfatnog monoestra sulfatnog monoestra formule (80a) može se sintetizovati reakcijom ciklične hidroksaminske kiseline formule (80b) sa hlorosulfonat monoestrom formule (80c) pod osnovnim uslovima:

gde,

R je izabran od C1-8alkil, C1-8heteroalkil, C5-8cikloalkil, C5-8heterocikloalkil, C5-10cikloalkilalkil, C5-10heterocikloalkilalkil, C6-8aril, C5-8heteroaril, C7-10arilalkil, C5-10heteroarilalkil, supstituisani C1-8alkil, supstituisani C1-8heteroalkil, supstituisani C5-8cikloalkil, supstituisani C5-8heterocikloalkil, supstituisani C5-10cikloalkilalkil, supstituisani C5-10heterocikloalkilalkil, supstituisani C6-8aril, supstituisani C5-8heteroaril, supstituisani C7-10arilalkil, i supstituisani C5-10heteroarilalkil;

R<5>je izabran između vodonika, C1-6alkil, C5-8cikloalkil, C6-12cikloalkilalkil, C2-6heteroalkil, C5-8heterocikloalkil, C6-12heterocikloalkilalkil, supstituisani C1-6alkil, supstituisani C5-8cikloalkil, supstituisani C6-12cikloalkilalkil, supstituisani C2-6heteroalkil, supstituisani C5-8heterocikloalkil, i supstituisani C6-12heterocikloalkilalkil;

R<6>je izabran između vodonika, C1-6alkil, C5-8cikloalkil, C6-12cikloalkilalkil, C2-6heteroalkil, C5-8heterocikloalkil, C6-12heterocikloalkilalkil, supstituisani C1-6alkil, supstituisani C5-8cikloalkil, supstituisani C6-12cikloalkilalkil, supstituisani C2-6heteroalkil, supstituisani C5-8heterocikloalkil, i supstituisani C6-12heterocikloalkilalkil; i

A je jednostruka veza (-) i R<7>je vodonik, ili je A dvostruka veza (=) i R<7>je C1-3alkil.

[0075] Hlorosulfatni monoestar može da sadrži hlorosulfat neopentil estar, kao što je hlorosulfat neopentil estar formule (81):

gde,

svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-6alkil, ili svaki R<1>a geminalni atom ugljenika za koji su vezani formira C3-6cikloalkil prsten, i C3-6heterocikloalkil prsten, supstituisani C3-6cikloalkil prsten, ili supstituisani C3-6heterocikloalkil prsten;

R<2>je izabran od jednostruke veze, C1-6alkandiil, C1-6heteroalkandiil, C5-6cikloalkandiil, C5-6heterocikloalkandiil, C6arenediil, C5-6heteroarendiil, supstituisani C1-6alkandiil, supstituisani C1-6heteroalkandiil, supstituisani C5-6cikloalkandiil, supstituisani C5-6heterocikloalkandiil, supstituisani C6arenediil i supstituisani C5-6heteroarendiil; i

R<3>je izabran od C1-6alkil, -O-C(O)-R<4>, -S-C(O)-R<4>, -NH-C(O)-R<4>, -O-C(O)-O-R<4>, -S-C(O)-O-R<4>, -NH-C(O)-O-R<4>, -C(O)-O-R<4>, -C(O)-S-R<4>, -C(O)-NH-R<4>, -O-C(O)-O-R<4>, -O-C(O)-S-R<4>, -O-C(O)-NH-R<4>, -S-S-R<4>, -S-R<4>, -NH-R<4>, -CH(-NH2)(-R<4>), C5-6heterocikloalkil, C5-6heteroaril, supstituisani C5-6cikloalkil, supstituisani C5-6heterocikloalkil, supstituisani C5-6aril, supstituisani C5-6heteroaril, i -CH=C(R<4>)2, gde,

R<4>je izabran između vodonika, C1-8alkil, C1-8heteroalkil, C5-8cikloalkil, C5-8heterocikloalkil, C5-10cikloalkilalkil, C5-10heterocikloalkilalkil, C6-8aril, C5-8heteroaril, C7-10arilalkil, C5-10heteroarilalkil, supstituisani C1-8alkil, supstituisani C1-8heteroalkil, supstituisani C5-8cikloalkil, supstituisani C5-8heterocikloalkil, supstituisani C5-10cikloalkilalkil, supstituisani C5-10heterocikloalkilalkil, supstituisani C6-8aril, supstituisani C5-8heteroaril, supstituisani C7-10arilalkil, i supstituisani C5-10heteroarilalkil.

[0076] Hlorosulfatni monoestar se može sintetizovati reakcijom alkohola kao što je neopentil alkohol sa sulfuril hloridom.

[0077] Postupak se može koristiti za vezivanje bilo kog pogodnog hlorosulfonatnog estra za cikličnu hidroksaminsku kiselinu kao što je, na primer, hlorosulfonat estar formule (82) i ciklična hidroksaminska kiselina formule (83) da bi se dobio odgovarajući analog sulfat monoestra formule ( 84):

gde,

R se može izabrati iz C1-8alkil, C1-8heteroalkil, C5-8cikloalkil, C5-8heterocikloalkil, C5-10cikloalkilalkil, C5-10heterocikloalkilalkil, C6-8aril, C5-8heteroaril, C7-10arilalkil, C5-10heteroarilalkil, supstituisani C1-8alkil, supstituisani C1-8heteroalkil, supstituisani C5-8cikloalkil, supstituisani C5-8heterocikloalkil, supstituisani C5-10cikloalkilalkil, supstituisani C5-10heterocikloalkilalkil, supstituisani C6-8aril, supstituisani C5-8heteroaril, supstituisani C7-10arilalkil, i supstituisani C5-10heteroarilalkil;

n može biti ceo broj od 1 do 6;

svaki A može biti nezavisno izabran od -(CH2)-, -(CHR)-, -(CR2)-, -NH-, -NR-, O i S, gde se R nezavisno bira između vodonika, C1-8alkil, C1-8heteroalkil, C5-8cikloalkil, C5-8heterocikloalkil, C5-10cikloalkilalkil, C5-10heterocikloalkilalkil, C6-8aril, C5-8heteroaril, C7-10arilalkil, C5-10heteroarilalkil, supstituisani C1-8alkil, supstituisani C1-8heteroalkil, supstituisani C5-8cikloalkil, supstituisani C5-8heterocikloalkil, supstituisani C5-10cikloalkilalkil, supstituisani C5-10heterocikloalkilalkil, supstituisani C6-8aril, supstituisani C5-8heteroaril, supstituisani C7-10arilalkil, i supstituisani C5-10heteroarilalkil; ili je jedan A vezan za drugi A preko grupe -L-, gde je L izabran od C1-8alkil, C1-8heteroalkil, supstituisani C1-8alkil, i supstituisani C1-8heteroalkil.

[0078] R može dalje da uključuje bilo koju od progrupa koje su ovde otkrivene, kao što je progrupa koji ima strukturu:

gde je R<1>, R<2>, i R<3>su definisani kao u formuli (1).

[0079] Kompozicije date ovde sadrže terapeutski efikasne količine jednog ili više ovde datih jedinjenja koja su korisna u prevenciji, lečenju ili ublažavanju jednog ili više simptoma bolesti ili poremećaja opisanih ovde i vehikuluma. Vehikulumi pogodni za primenu jedinjenja datih ovde uključuju sve takve vehikulume za koje je stručnjacima poznato da su pogodni za određeni način primene. Pored toga, jedinjenja mogu biti formulisana kao jedini aktivni sastojak u kompoziciji ili se mogu kombinovati sa drugim aktivnim sastojcima.

[0080] Kompozicije sadrže jedno ili više jedinjenja datih ovde. Jedinjenja su, u nekim primerima izvođenja, formulisana u pogodne preparate kao što su rastvori, suspenzije, tablete, disperzibilne tablete, pilule, kapsule, praškovi, formulacije ili eliksiri sa produženim oslobađanjem, za oralnu primenu ili u sterilnim rastvorima ili suspenzijama za parenteralnu primenu, kao i kao lokalna primena, transdermalna primena i oralna inhalacija preko nebulizatora, inhalatora sa odmerenom dozom pod pritiskom i inhalatora suvog praha. U nekim primerima izvođenja, gore opisana jedinjenja su formulisana u kompozicije korišćenjem tehnika i postupaka dobro poznatih u struci (videti, npr., Ansel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, Seventh Edition (1999)).

[0081] U kompozicijama, efikasne koncentracije jednog ili više jedinjenja ili njihovih derivata se mešaju sa pogodnim vehikulumom. Jedinjenja mogu biti derivatizovana kao odgovarajuće soli, estri, enol etri ili estri, acetali, ketali, ortoestri, hemiacetali, hemiketali, kiseline, baze, solvati, jonski parovi, hidrati ili prolekovi pre formulacije, kao što je gore opisano. Koncentracije jedinjenja u kompozicijama su efikasne za isporuku količine, nakon primene koja leči, dovodi do prevencije ili ublažavanja jednog ili više simptoma bolesti ili poremećaja opisanih ovde. U nekim primerima izvođenja, kompozicije su formulisane za primenu jedne doze. Da bi se formulisala kompozicija, težinski udeo jedinjenja se rastvori, suspenduje, disperguje ili na drugi način pomeša u odabranom vehikulumu u efektivnoj koncentraciji tako da se lečeno stanje ublaži, spreči ili da se jedan ili više simptoma ublaži.

[0082] Aktivno jedinjenje je uključeno u vehikulum u količini dovoljnoj da ispolji terapeutski koristan efekat u odsustvu neželjenih sporednih efekata na lečenog pacijenta. Terapeutski efikasna koncentracija se može predvideti empirijski ispitivanjem jedinjenja u in vitro i in vivo sistemima dobro poznatim stručnjacima u ovoj oblasti i zatim ekstrapoliranjem za doze za ljude. Doze za ljude se tada obično fino podešavaju u kliničkim ispitivanjima i titriraju prema odgovoru.

[0083] Koncentracija aktivnog jedinjenja u kompoziciji zavisiće od brzine apsorpcije, inaktivacije i izlučivanja aktivnog jedinjenja, fizičko-hemijskih karakteristika jedinjenja, rasporeda doziranja i primenjene količine, kao i drugih faktora poznatih stručnjacima u ovoj oblasti. Na primer, količina koja se isporučuje je dovoljna da ublaži jedan ili više simptoma bolesti ili poremećaja kako je ovde opisano.

[0084] U slučajevima u kojima jedinjenja pokazuju nedovoljnu rastvorljivost, mogu se koristiti metode za solubilizaciju jedinjenja kao što je upotreba lipozoma, prolekova, kompleksiranje/helacija, nanočestice, ili emulzije ili tercijarni templejt. Takvi postupci su poznati stručnjacima u ovoj oblasti i uključuju, ali nisu ograničeni na, korišćenje ko-rastvarača, kao što je dimetil sulfoksid (DMSO), korišćenje surfaktanata ili površinskih modifikatora, kao što je TWEEN<®>, sredstva za stvaranje kompleksa kao što je ciklodekstrin ili rastvaranje pojačanom jonizacijom (tj. rastvaranje u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata). Derivati jedinjenja, kao što su prolekovi jedinjenja, takođe mogu da se koriste u formulisanju efikasnih kompozicija.

[0085] Nakon mešanja ili dodavanja jedinjenja (ili više njih), rezultujuća smeša može biti rastvor, suspenzija, emulzija ili slično. Oblik dobijene smeše zavisi od brojnih faktora, uključujući nameravani način primene i rastvorljivost jedinjenja u odabranom vehikulumu. Efikasna koncentracija je dovoljna za ublažavanje simptoma bolesti, poremećaja ili stanja koje se leči i može se empirijski odrediti.

[0086] Kompozicije su obezbeđene za davanje ljudima i životinjama u odgovarajućim doznim oblicima, kao što su inhalatori suvog praha (DPI), inhalatori sa odmerenom dozom pod pritiskom (pMDI), nebulizatori, tablete, kapsule, pilule, sublingvalne trake/bioerodibilne trake, tablete ili kapsule praškovi, granule, pastile, losioni, melemi, supozitorije, sredstva sa brzim rastvaranjem, transdermalni flasteri ili drugi uređaji/preparati za transdermalnu primenu, sterilni parenteralni rastvori ili suspenzije, i oralni rastvori ili suspenzije i emulzije ulje-voda koje sadrže odgovarajuće količine jedinjenja ili njihovih derivata. Terapeutski aktivna jedinjenja i njihovi derivati su, u nekim primerima izvođenja, formulisani i primenjeni u oblicima jedinične doze ili oblicima višestruke doze. Oblici jedinične doze, kako se ovde koriste, odnose se na fizički diskretne jedinice pogodne za ljude i životinje i pakovane pojedinačno kao što je poznato u tehnici. Svaka jedinična doza sadrži unapred određenu količinu terapeutski aktivnog jedinjenja dovoljnu da proizvede željeni terapeutski efekat, zajedno sa potrebnim nosačem. Primeri oblika jedinične doze uključuju ampule i špriceve i pojedinačno upakovane tablete ili kapsule. Oblici jedinične doze mogu se davati u frakcijama ili višestrukim njihovim delovima. Višedozni oblik je mnoštvo identičnih jediničnih doznih oblika upakovanih u jedan kontejner za primenu u odvojenom obliku jedinične doze. Primeri oblika sa više doza uključuju bočice, boce tableta ili kapsula ili boce od pinta ili galona. Dakle, oblik višestruke doze je višestruka jedinica doza koje nisu odvojene u pakovanju.

[0087] Tečne kompozicije se mogu, na primer, pripremiti rastvaranjem, dispergovanjem ili na drugi način mešanjem aktivnog jedinjenja kao što je gore definisano i opcionih pomoćnih sredstava u vehikulumu, kao što su, na primer, voda, fiziološki rastvor, vodeni rastvor dekstroze, glicerol, glikoli, etanol i slično, da se na taj način formira rastvor ili suspenzija, koloidna disperzija, emulzija ili lipozomska formulacija. Po želji, kompozicija koja se primenjuje može takođe da sadrži manje količine netoksičnih pomoćnih supstanci kao što su sredstva za vlaženje, emulgatori, sredstva za rastvaranje, pH puferna sredstva i slično, na primer, acetat, natrijum citrat, derivati ciklodekstrina, sorbitan monolaurat, trietanolamin natrijum acetat, trietanolamin oleat i drugi takvi agensi.

[0088] Stvarni postupci za pripremu takvih doznih oblika su poznati, ili će biti očigledni, stručnjacima u ovoj oblasti; na primer, videti Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 15th Edition, 1975 ili njihova kasnija izdanja.

[0089] Mogu se pripremiti dozni oblici ili kompozicije koje sadrže aktivni sastojak u opsegu od 0,005% do 100% sa ostatkom koji se sastoji od vehikuluma ili nosača. Postupci za pripremu ovih kompozicija su poznati stručnjacima u ovoj oblasti. Predviđene kompozicije mogu da sadrže 0,001%-100% aktivnog sastojka, u jednom primeru izvođenja 0,1-95%, u drugom primeru izvođenja 0,4-10%.

[0090] Kompozicije mogu biti kompozicije bez laktoze koje sadrže ekscipijense koji su dobro poznati u tehnici i koji su navedeni, na primer, u U.S. Pharmacopeia(USP) 25-NF20 (2002). Generalno, kompozicije bez laktoze sadrže aktivne sastojke, vezivo/punilo i lubrikant u kompatibilnim količinama. Određeni dozni oblici bez laktoze sadrže aktivne sastojke, mikrokristalnu celulozu, preželatinizovani skrob i magnezijum stearat.

[0091] Dalje su obezbeđene anhidrovane kompozicije i dozni oblici koji sadrže aktivne sastojke, pošto voda može olakšati razgradnju nekih jedinjenja. Na primer, dodavanje vode (npr., 5%) je široko prihvaćeno kao sredstvo za simulaciju dugotrajnog skladištenja kako bi se odredile karakteristike kao što su rok trajanja ili stabilnost formulacija tokom vremena. Videti, npr. Jens T. Carstensen, Drug Stability: Principles & Practice, 2d. Ed., Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pp.379-80. U stvari, voda i toplota ubrzavaju razgradnju nekih jedinjenja. Dakle, efekat vode na formulaciju može biti od velikog značaja pošto se vlaga i/ili humiditet obično susreću tokom proizvodnje, rukovanja, pakovanja, skladištenja, otpreme i upotrebe formulacija.

[0092] Anhidrovane kompozicije i oblici doze koji su ovde dati mogu se pripremiti korišćenjem anhidrovanih sastojaka ili sastojaka koji sadrže nisku vlagu i uslova niske vlažnosti ili niskog humiditeta.

[0093] Anhidrovanu kompoziciju treba pripremiti i čuvati tako da se zadrži njena anhidrovana priroda. Shodno tome, anhidrovane kompozicije se generalno pakuju korišćenjem materijala za koje je poznato da sprečavaju izlaganje vodi, tako da se mogu uključiti u odgovarajuće komplete formulacije. Primeri pogodnog pakovanja uključuju, ali nisu ograničeni na, hermetički zatvorene folije, plastiku, kontejnere za jediničnu dozu (npr. bočice), blister pakovanja i trakasta pakovanja.

[0094] Oralni dozni oblici su ili čvrsti, gel ili tečni. Čvrsti dozni oblici su tablete, kapsule, granule i rinfuzni praškovi. Tipovi oralnih tableta obuhvataju komprimovane pastile za žvakanje i tablete koje mogu biti obložene enteričnim slojem, šećerom ili filmom. Kapsule mogu biti tvrde ili meke želatinske kapsule, dok granule i praškovi mogu biti obezbeđeni u nešumećem ili šumećem obliku sa kombinacijom drugih sastojaka poznatih stručnjacima.

[0095] Formulacije mogu biti čvrsti dozni oblici kao što su, na primer, kapsule ili tablete. Tablete, pilule, kapsule, pastile i slično mogu da sadrže jedan ili više od sledećih sastojaka, ili jedinjenja slične prirode: vezivo; lubrikant; razblaživač; klizajuće sredstvo; sredstvo za dezintegraciju; sredstvo za bojenje; zaslađivač; agens za ukus; sredstvo za vlaženje; enterički premaz; sredstvo za oblaganje filma i agens za modifikovano oslobađanje. Primeri veziva uključuju mikrokristalnu celulozu, metil paraben, polialkilenokside, tragant gume, rastvor glukoze, sluz bagrema, rastvor želatina, melasu, polivinilpirolidin, povidon, krospovidon, saharozu i derivate skroba i skroba. Maziva uključuju talk, skrob, magnezijum/kalcijum stearat, likopodijum i stearinsku kiselinu. Razblaživači uključuju, na primer, laktozu, saharozu, trehalozu, lizin, leucin, lecitin, skrob, kaolin, so, manitol i dikalcijum fosfat. Sredstva za klizanje uključuju, ali nisu ograničena na, koloidni silicijum dioksid. Sredstva za dezintegraciju uključuju natrijum-karmelozu, natrijum skrob glikolat, alginsku kiselinu, kukuruzni skrob, krompirov skrob, bentonit, metilcelulozu, agar i karboksimetilcelulozu. Sredstva za bojenje uključuju, na primer, bilo koju od odobrenih sertifikovanih FD i C boja rastvorljivih u vodi, njihove mešavine; i u vodi nerastvorljive FD i C boje suspendovane na hidratu aluminijuma i napredne boje ili aditivi za bojenje protiv falsifikovanja/opalescentni aditivi koji su poznati stručnjacima u ovoj oblasti. Zaslađivači uključuju saharozu, laktozu, manitol i veštačke zaslađivače kao što je saharin i bilo koji broj aroma osušenih raspršivanjem. Sredstva za aromatiziranje uključuju prirodne arome ekstrahovane iz biljaka kao što su voće i sintetičke mešavine jedinjenja koje proizvode prijatan osećaj ili maskiraju neprijatan ukus, kao što su, ali ne ograničavajući se na pepermint i metil salicilat. Sredstva za vlaženje uključuju propilen glikol monostearat, sorbitan monooleat, dietilen glikol monolaurat i polioksietilen lauril etar. Enteričke obloge uključuju masne kiseline, masti, voskove, šelak, amonizovani šelak i celuloza acetat ftalate. Film obloge uključuju hidroksietilcelulozu, natrijum karboksimetilcelulozu, polietilen glikol 4000 i celuloza acetat ftalat. Sredstva za modifikovano oslobađanje uključuju polimere kao što je Eudragit<®>serije i estri celuloze.

[0096] Jedinjenje, ili njegov derivat, može se obezbediti u kompoziciji koja ga štiti od kiselog okruženja želuca. Na primer, kompozicija se može formulisati u enteričnom omotaču koji održava njen integritet u želucu i oslobađa aktivno jedinjenje u crevima. Kompozicija se takođe može formulisati u kombinaciji sa antacidom ili drugim takvim sastojkom.

[0097] Kada je jedinični oblik doze kapsula, ona može da sadrži, pored materijala gore navedenog tipa, tečni nosač kao što je masno ulje. Pored toga, oblici jedinične doze mogu sadržati razne druge materijale koji modifikuju fizički oblik jedinice doze, na primer, obloge od šećera i drugih enteričkih agenasa. Jedinjenja se takođe mogu davati kao komponenta eliksira, suspenzije, sirupa, vafla, prskalice, žvakaće gume ili slično. Sirup može da sadrži, pored aktivnih jedinjenja, saharozu kao zaslađivač i određene konzervanse, boje i sredstva za bojenje i ukuse.

[0098] Aktivni materijali se takođe mogu mešati sa drugim aktivnim materijalima koji ne utiču na željeno dejstvo, ili sa materijalima koji dopunjuju željeno dejstvo, kao što su antacidi, H2blokatori i diuretici. Aktivni sastojak je jedinjenje ili njegov derivat kao što je ovde opisano. Mogu se uključiti i veće koncentracije, do oko 98% težine aktivnog sastojka.

[0099] U svim primerima izvođenja, formulacije tableta i kapsula mogu biti obložene kao što je poznato stručnjacima u ovoj oblasti da bi se modifikovalo ili održalo rastvaranje aktivnog sastojka. Tako, na primer, oni mogu biti obloženi konvencionalnom oblogom koja se rasdtvara u crevima, kao što su fenilsalicilat, voskovi i celuloza acetat ftalat.

[0100] Tečni oralni dozni oblici obuhvataju vodene rastvore, emulzije, suspenzije, rastvore i/ili suspenzije rekonstituisane od ne-šumećih granula i šumeće preparate rekonstituisane iz šumećih granula. Vodeni rastvori uključuju, na primer, eliksire i sirupe. Emulzije su ili ulje u vodi ili voda u ulju.

[0101] Eliksiri su bistri, zaslađeni, hidroalkoholni preparati. Vehikulumi koji se koriste u eliksirima uključuju rastvarače. Sirupi su koncentrovani vodeni rastvori šećera, na primer, saharoze, i mogu da sadrže konzervans. Emulzija je dvofazni sistem u kome je jedna tečnost raspršena u obliku malih globula u drugoj tečnosti. Nosači koji se koriste u emulzijama su nevodene tečnosti, emulgatori i konzervansi. Suspenzije koriste sredstva za suspendovanje i konzervanse. Prihvatljive supstance koje se koriste u ne-šumećim granulama, koje se rekonstituišu u tečni oralni dozni oblik, uključuju razblaživače, zaslađivače i sredstva za vlaženje. Prihvatljive supstance koje se koriste u šumećim granulama, koje se rekonstituišu u tečni oralni dozni oblik, uključuju organske kiseline i izvor ugljen-dioksida. Sredstva za bojenje i arome se koriste u svim gore navedenim oblicima doze.

[0102] Rastvarači uključuju glicerin, sorbitol, etil alkohol i sirup. Primeri konzervansa uključuju glicerin, metil i propilparaben, benzojevu kiselinu, natrijum benzoat i alkohol. Primeri nevodenih tečnosti koje se koriste u emulzijama uključuju mineralno ulje i ulje pamučnog semena. Primeri emulgatora uključuju želatin, bagrem, tragakant, bentonit i surfaktante kao što je polioksietilen sorbitan monooleat. Sredstva za suspenziju uključuju natrijum karboksimetilcelulozu, pektin, tragant, veegum i bagrem. Zaslađivači uključuju saharozu, sirupe, glicerin i veštačke zaslađivače kao što je saharin. Sredstva za vlaženje uključuju propilen glikol monostearat, sorbitan monooleat, dietilen glikol monolaurat i polioksietilen lauril etar. Organske kiseline uključuju limunsku i vinsku kiselinu. Izvori ugljendioksida uključuju natrijum bikarbonat i natrijum karbonat. Sredstva za bojenje uključuju bilo koju od odobrenih sertifikovanih FD i C boja rastvorljivih u vodi i njihove smeše. Sredstva za aromatizovanje uključuju prirodne arome ekstrahovane iz biljaka kao što je voće, i sintetičke mešavine jedinjenja koje proizvode prijatan osećaj ukusa.

[0103] Za čvrsti oblik doze, rastvor ili suspenzija, na primer, propilen karbonat, biljna ulja ili trigliceridi, su u nekim primerima izvođenja inkapsulirani u želatinskoj kapsuli. Takvi rastvori, kao i njihova priprema i kapsuliranje, su otkriveni u U.S. Patent Nos.4,328,245; 4,409,239; i 4,410,545. Za tečni oblik doze, rastvor, npr., na primer, u polietilen glikolu, može se razblažiti sa dovoljnom količinom tečnog nosača, npr., voda, da se lako meri za primenu.

[0104] Alternativno, tečne ili polučvrste oralne formulacije mogu se pripremiti rastvaranjem ili dispergovanjem aktivnog jedinjenja ili soli u biljnim uljima, glikolima, trigliceridima, propilen glikol estrima (npr., propilen karbonat) i drugim takvim nosačima, i kapsuliranje ovih rastvora ili suspenzija u tvrde ili meke želatinske školjke kapsula. Druge korisne formulacije uključuju one navedene u U.S. Patent Nos. RE28,819 i 4,358,603. Ukratko, takve formulacije uključuju, ali nisu ograničene na, one koje sadrže jedinjenje dato ovde, dialkilovani mono- ili polialkilen glikol, uključujući, ali ne ograničavajući se na, 1,2-dimetoksietan, diglim, triglim, tetraglim, polietilen glikol-350 -dimetil etar, polietilen glikol-550-dimetil etar, polietilen glikol-750-dimetil etar pri čemu se 350, 550 i 750 odnose na približnu prosečnu molekulsku masu polietilen glikola, i jedan ili više antioksidanata, kao što je BHT, kao što je, butilovani hidroksianizol (BHA), propil galat, vitamin E, hidrohinon, hidroksikumarini, etanolamin, lecitin, cefalin, askorbinska kiselina, jabučna kiselina, sorbitol, fosforna kiselina, tiodipropionska kiselina i njeni estri i ditiokarbamati.

[0105] Druge formulacije uključuju, ali nisu ograničene na, vodene alkoholne rastvore uključujući acetal. Alkoholi koji se koriste u ovim formulacijama su svi rastvarači koji se mešaju sa vodom i imaju jednu ili više hidroksilnih grupa, uključujući, ali bez ograničenja, propilen glikol i etanol. Acetali uključuju, ali nisu ograničeni na, di(niži alkil) acetale nižih alkil aldehida kao što je acetaldehid dietil acetal.

[0106] Parenteralna primena, u nekim primerima izvođenja koju karakteriše injekcija, bilo subkutano, intramuskularno ili intravenozno, takođe je razmatrana ovde. Injekcioni preparati se mogu pripremiti u konvencionalnim oblicima, bilo kao tečni rastvori ili suspenzije, čvrsti oblici pogodni za rastvor ili suspenziju u tečnosti pre injekcije, ili kao emulzije. Injekcije, rastvori i emulzije takođe sadrže jedan ili više ekscipijenata. Pogodni ekscipijensi su, na primer, voda, fiziološki rastvor, dekstroza, glicerol ili etanol. Pored toga, ako se želi, kompozicije koje se primenjuju mogu takođe sadržati manje količine netoksičnih pomoćnih supstanci kao što su sredstva za vlaženje ili emulgovanje, pH puferski agensi, stabilizatori, pojačivači rastvorljivosti i druga takva sredstva, kao što je na primer, natrijum acetat , sorbitan monolaurat, trietanolamin oleat i ciklodekstrini.

[0107] Implantacija sistema sa sporim ili produženim oslobađanjem, tako da se održava konstantan nivo doze (videti, npr., U.S. Patent br. 3,710,795) je takođe razmatran ovde. Ukratko, ovde dato jedinjenje je dispergovano u čvrstom unutrašnjem matriksu, npr., polimetilmetakrilat, polibutilmetakrilat, plastificirani ili neplastifikovani polivinilhlorid, plastificirani najlon, plastificirani polietilentereftalat, prirodna guma, poliizopren, poliizobutilen, polibutadien, polietilen, etilen-vinilacetat kopolimeri, silikonske gume, polidimetilsiloksani, silicon karbonat kopolimeri, hidrofilni polimeri kao što su hidrogelovi estara akrilne i metakrilne kiseline, kolagen, unakrsno vezani polivinilalkohol I unakrsno vezani delimično hidrolizovani polivinil acetat, koji je okružen sa spoljnom polimernom membranom, npr., polietilen, polipropilen, etilen/propilen kopolimeri, etilene/etil akrilat koplimeri, etilen/vinilacetat kopolimeri, silikonske gume, polidimetil siloksani, neopren gume, hlorovani polietilen, polivinilhlorid, vinilhlorid kopolimeri sa vinil acetatom, viniliden hlorid, etilen i propile, jonomer polietilen tereftalat, butil guma epihlorohidrin gume, etilen/vinil alkohol kopolimer, etilen/vinil acetat/vinil alkohol terpolimer, i etilen/viniloksietanol kopolimer, koji je nerastvorljiv u telesnim tečnostima. Jedinjenje difunduje kroz spoljašnju polimernu membranu u koraku kontrole brzine oslobađanja. Procenat aktivnog jedinjenja sadržanog u takvim parenteralnim kompozicijama u velikoj meri zavisi od njihove specifične prirode, kao i od aktivnosti jedinjenja i potreba subjekta.

[0108] Parenteralna primena kompozicija uključuje intravensku, subkutanu i intramuskularnu primenu. Preparati za parenteralnu primenu obuhvataju sterilne rastvore spremne za injekcije, sterilne suve rastvorljive proizvode, kao što su liofilizovani praškovi, spremni za kombinovanje sa rastvaračem neposredno pre upotrebe, uključujući hipodermalne tablete, sterilne suspenzije spremne za injekciju, sterilne suve nerastvorljive proizvode spremne za upotrebu. u kombinaciji sa vehikulumom neposredno pre upotrebe i sterilne emulzije. Rastvori mogu biti ili vodeni ili nevodeni.

[0109] Ako se daju intravenski, pogodni nosači uključuju fiziološki rastvor ili fiziološki rastvor sa fosfatnim puferom (PBS), i rastvore koji sadrže sredstva za zgušnjavanje i solubilizaciju, kao što su glukoza, polietilen glikol i polipropilen glikol i njihove smeše.

[0110] Vehikulumi koji se koriste u parenteralnim preparatima uključuju vodena sredstva, nevodena sredstva, antimikrobne agense, izotonične agense, pufere, antioksidante, lokalne anestetike, agense za suspendovanje i dispergovanje, emulgatore, agense za sekvestriranje ili helatiranje i druge supstance.

[0111] Primeri vodenih nosača uključuju injekciju natrijum hlorida, injekciju Ringer, injekciju izotonične dekstroze, injekciju sterilne vode, dekstrozu i injekciju Ringer sa laktatom.

Nevodena parenteralna sredstva uključuju neisparljiva ulja biljnog porekla, pamučno ulje, kukuruzno ulje, susamovo ulje i ulje od kikirikija. Antimikrobni agensi u bakteriostatičkim ili fungistatičkim koncentracijama moraju se dodati parenteralnim preparatima upakovanim u kontejnere za više doza koji uključuju fenole ili krezole, živu, benzil alkohol, hlorobutanol, estre metil i propil p-hidroksibenzojeve kiseline, timerosal, benzalkonijum hlorid i benzetonijum hlorid. Izotonični agensi uključuju natrijum hlorid i dekstrozu. Puferi uključuju fosfat i citrat. Antioksidansi uključuju natrijum bisulfat. Lokalni anestetici uključuju prokain hidrohlorid. Sredstva za suspenziju i dispergovanje uključuju natrijum karboksimetilcelulozu, hidroksipropil metilcelulozu i polivinilpirolidon. Emulgatori uključuju polisorbat 80 (Tween<®>80). Sredstvo za izdvajanje ili helatiranje metalnih jona uključuje EDTA. Nosači takođe uključuju etil alkohol, polietilen glikol i propilen glikol za nosače koji se mešaju sa vodom; i natrijum hidroksid, hlorovodonična kiselina, limunska kiselina ili mlečna kiselina za podešavanje pH.

[0112] Koncentracija jedinjenja je podešena tako da injekcija obezbeđuje efikasnu količinu za postizanje željenog farmakološkog efekta. Tačna doza zavisi od starosti, težine, površine tela i stanja pacijenta ili životinje kao što je poznato u tehnici.

[0113] Parenteralni preparati sa jediničnom dozom se pakuju u ampule, bočicu ili špric sa iglom. Svi preparati za parenteralnu primenu moraju biti sterilni, kao što je poznato i praktikovano u tehnici.

[0114] Ilustrativno, intravenska ili intraarterijska infuzija sterilnog vodenog rastvora koji sadrži aktivno jedinjenje je efikasan način primene. Drugi primer izvođenja je sterilni vodeni ili uljani rastvor ili suspenzija koja sadrži aktivni materijal koji se ubrizgava po potrebi da bi se proizveo željeni farmakološki efekat.

[0115] Injekcioni rastvori su dizajnirani za lokalnu i sistemsku primenu. U nekim primerima izvođenja, terapeutski efikasna doza je formulisana tako da sadrži koncentraciju od najmanje 0,01% zapr/zapr do 90% zapr/zapr ili više, kao što je više od 0,1% zapr/zapr aktivnog jedinjenja u tretiranom tkivu ( s).

[0116] Jedinjenje može biti suspendovano u mikronizovanom ili drugom pogodnom obliku ili može biti derivatizovano da bi se proizveo rastvorljiviji aktivni proizvod ili da bi se proizveo prolek. Oblik dobijene smeše zavisi od brojnih faktora, uključujući nameravani način primene i rastvorljivost jedinjenja u izabranom nosaču ili vehikulumu. Efikasna koncentracija je dovoljna za ublažavanje simptoma stanja i može se empirijski odrediti.

[0117] Aktivni sastojci koji su ovde dati mogu se davati putem sredstava za kontrolisano oslobađanje ili pomoću uređaja za isporuku koji su dobro poznati stručnjacima iz ove oblasti.

Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, one opisane u U.S. Patent Nos.: 3,845,770; 3,916,899; 3,536,809; 3,598,123; 4,008,719; 5,674,533; 5,059,595; 5,591,767; 5,120,548; 5,073,543; 5,639,476; 5,354,556; 5,639,480; 5,733,566; 5,739,108; 5,891,474; 5,922,356; 5,972,891; 5,980,945; 5,993,855; 6,045,830; 6,087,324; 6,113,943; 6,197,350; 6,248,363; 6,264,970; 6,267,981; 6,376,461; 6,419,961; 6,589,548; 6,613,358; 6,699,500 i 6,740,634. Takvi oblici doze se mogu koristiti za obezbeđivanje sporog ili kontrolisanog oslobađanja jednog ili više aktivnih sastojaka korišćenjem, na primer, hidroksipropilmetil celuloze, drugih polimernih matrica, gelova, permeabilnih membrana, osmotskih sistema, višeslojnih premaza, mikročestica, lipozoma, mikrosfera ili njihova kombinacija da bi se obezbedio željeni profil oslobađanja u različitim proporcijama. Pogodne formulacije sa kontrolisanim oslobađanjem poznate stručnjacima, uključujući i one opisane ovde, mogu se lako izabrati za upotrebu sa aktivnim sastojcima koji su ovde dati.

[0118] Svi proizvodi sa kontrolisanim oslobađanjem imaju zajednički cilj poboljšanja terapije lekovima u odnosu na onu koju postižu njihovi odgovarajući nekontrolisani proizvodi. U idealnom slučaju, korišćenje optimalno dizajniranog preparata sa kontrolisanim oslobađanjem u medicinskom tretmanu karakteriše se minimalnim brojem lekovitih supstanci koje se koriste za lečenje ili kontrolu stanja u minimalnom vremenskom periodu. Prednosti formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem uključuju produženu aktivnost leka, smanjenu učestalost doziranja i povećanu komplajansu pacijenata. Pored toga, formulacije sa kontrolisanim oslobađanjem mogu se koristiti da utiču na vreme početka dejstva ili druge karakteristike, kao što su nivoi leka u krvi, i na taj način mogu uticati na pojavu neželjenih (npr., štetnih) efekata.

[0119] Većina formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem je dizajnirana tako da u početku oslobađa količinu leka (aktivnog sastojka) koja odmah proizvodi željeni terapeutski efekat, i postepeno i kontinuirano oslobađanje drugih količina leka kako bi se održao ovaj nivo terapeutskog ili profilaktičkog efekta tokom dužeg perioda vremena. Da bi se održao ovaj konstantan nivo leka u telu, lek se mora osloboditi iz doznog oblika brzinom koja će zameniti količinu leka koji se metaboliše i izlučuje iz tela. Kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka može biti stimulisano različitim uslovima uključujući, ali bez ograničenja, pH, temperaturu, enzime, vodu ili druge fiziološke uslove ili jedinjenja.

[0120] Sredstvo se može primeniti korišćenjem intravenske infuzije, implantabilne osmotske pumpe, transdermalnog flastera, lipozoma ili drugih načina primene. U nekim primerima izvođenja, pumpa se može koristiti (videti, Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng.14:201 (1987); Buchwald et al., Surgery 88:507 (1980); Saudek et al., N. Engl. J. Med. 321:574 (1989)). U drugim primerima izvođenja, mogu se koristiti polimerni materijali. U drugim primerima izvođenja, sistem kontrolisanog oslobađanja može biti postavljen u blizini terapeutskog cilja, tj. što zahteva samo delić sistemske doze (videti, npr. Goodson, Medical Applications of Controlled Release, vol. 2, pp. 115-138 (1984). U nekim primerima izvođenja, uređaj sa kontrolisanim oslobađanjem se uvodi u subjekta u blizini mesta neodgovarajuće imunološke aktivacije ili tumora. Drugi sistemi kontrolisanog oslobađanja su razmatrani u pregledu od strane Langer (Science 249: 1527-1533 (1990)). Aktivni sastojak se može dispergovati u čvrstoj unutrašnjoj matrici, npr., polimetilmetakrilat, polibutilmetakrilat, plastificirani ili neplastifikovani polivinilhlorid, plastificirani najlon, plastificirani polietilentereftalat, prirodna guma, poliizopren, poliizobutilen, polibutadien, polietilen, etilen-vinilacetat kopolimeri, silikonske gume, polidimetilsiloksani, silicon karbonat kopolimeri, hidrofilni polimeri kao što su hidrogelovi estara akrilne i metakrilne kiseline, kolagen, unakrsno vezani polivinilalkohol i unakrsno vezani delimično hidrolizovani polivinil acetat, koji je okružen sa spoljnom polimernom membranom, npr., polietilen, polipropilen, etilen/propilen kopolimeri, etilene/etil akrilat koplimeri, etilen/vinilacetat kopolimeri, silikonske gume, polidimetil siloksani, neopren gume, hlorovani polietilen, polivinilhlorid, vinilhlorid kopolimeri sa vinil acetatom, viniliden hlorid, etilen i propile, jonomer polietilen tereftalat, butil guma epihlorohidrin gume, etilen/vinil alkohol kopolimer, etilen/vinil acetat/vinil alkohol terpolimer, i etilen/viniloksietanol kopolimer, koji je nerastvorljiv u telesnim tečnostima. Aktivni sastojak zatim difunduje kroz spoljašnju polimernu membranu u koraku kontrole brzine oslobađanja. Procenat aktivnog sastojka sadržanog u takvim parenteralnim kompozicijama u velikoj meri zavisi od njihove specifične prirode, kao i od potreba subjekta.

[0121] Ovde su od interesa takođe liofilizovani praškovi, koji se mogu rekonstituisati za primenu kao rastvori, emulzije i druge smeše. Takođe se mogu rekonstituisati i formulisati kao čvrste materije ili gelovi.

[0122] Sterilni, liofilizovani prah se priprema rastvaranjem jedinjenja datog ovde, ili njegovog derivata, u pogodnom rastvaraču. Rastvarač može da sadrži ekscipijens koji poboljšava stabilnost ili drugu farmakološku komponentu praha ili rekonstituisanog rastvora, pripremljenog od praha. Ekscipijensi koji se mogu koristiti uključuju, ali nisu ograničeni na, antioksidans, pufer i sredstvo za povećanje zapremine. U nekim primerima izvođenja, ekscipijens se bira između dekstroze, sorbitola, fruktoze, kukuruznog sirupa, ksilitola, glicerina, glukoze, saharoze i drugih pogodnih agenasa. Rastvarač može da sadrži pufer, kao što je citrat, natrijum ili kalijum fosfat ili drugi takav pufer poznat stručnjacima na neutralnom pH. Naknadna sterilna filtracija rastvora praćena liofilizacijom pod standardnim uslovima poznatim stručnjacima daje željenu formulaciju. U nekim primerima izvođenja, rezultujući rastvor će biti raspoređen u bočice za liofilizaciju. Svaka bočica će sadržati jednu dozu ili više doza jedinjenja. Liofilizovani prah se može čuvati pod odgovarajućim uslovima, kao što je na 4 °C do sobne temperature.

[0123] Rekonstitucija ovog liofilizovanog praha sa vodom za injekcije daje formulaciju za upotrebu u parenteralnoj primeni. Za rekonstituciju, liofilizovani prah se dodaje u sterilnu vodu ili drugi pogodan nosač. Precizna količina zavisi od izabranog jedinjenja. Takav iznos se može empirijski odrediti.

[0124] Smeše za lokalnu upotrebu se pripremaju kako je opisano za lokalnu i sistemsku primenu. Dobijena smeša može biti rastvor, suspenzija, emulzije ili slično i formulisana je kao kreme, gelovi, masti, emulzije, rastvori, eliksiri, losioni, suspenzije, tinkture, paste, pene, aerosoli, navodnjavanja, sprejevi, supozitorije, zavoji, dermalni flasteri ili bilo koje druge formulacije pogodne za lokalnu primenu.

[0125] Jedinjenja ili njihovi derivati mogu se formulisati kao aerosoli za lokalnu primenu, kao što je inhalacija (videti, npr., U.S. Patente br. 4,044,126, 4,414,209, i 4,364,923, koji opisuju aerosole za isporuku steroida korisnih za lečenje inflamatornih bolesti, posebno astme). Ove formulacije za primenu u respiratorni trakt mogu biti u obliku aerosola ili rastvora za nebulizator, ili kao mikrofini prah za insuflaciju, sami ili u kombinaciji sa inertnim nosačem kao što je laktoza. U takvom slučaju, čestice formulacije će, u nekim primerima izvođenja, imati srednji geometrijski prečnik mase manji od 5 mikrona, u drugim primerima izvođenja manji od 10 mikrona.

[0126] Formulacije za oralne inhalacije jedinjenja ili derivata pogodnih za inhalaciju uključuju inhalatore sa odmerenom dozom, inhalatore suvog praha i tečne preparate za primenu iz nebulizatora ili sistema za doziranje tečnosti sa odmerenom dozom. I za inhalatore sa odmerenom dozom i za inhalatore suvog praha, kristalni oblik jedinjenja ili derivata je poželjan fizički oblik leka da bi se obezbedila duža stabilnost proizvoda.

[0127] Pored metoda smanjenja veličine čestica koje su poznate stručnjacima u ovoj oblasti, kristalne čestice jedinjenja ili derivata mogu se generisati korišćenjem superkritične obrade fluida koja nudi značajne prednosti u proizvodnji takvih čestica za inhalaciju tako što se proizvode čestice koje se mogu udisati željene veličine. u jednom koraku (npr., PCT međunarodna objava br. WO 2005/025506). Kontrolisana veličina čestica za mikrokristale se može izabrati kako bi se osiguralo da se značajan deo jedinjenja ili derivata deponuje u plućima. U nekim primerima izvođenja, ove čestice imaju srednji aerodinamički prečnik mase od 0,1 mikrona do 10 mikrona, u drugim primerima izvođenja od 1 mikrona do 5 mikrona i još u drugim primerima izvođenja od 1,2 mikrona do 3 mikrona.

[0128] Inertni i nezapaljivi HFA potisni gasovi se biraju između HFA 134a (1,1,1,2-tetrafluoroetan) i HFA 227e (1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropan) i daju se samostalno ili kao odnos da odgovara gustini kristalnih čestica jedinjenja ili derivata. Odnos je takođe odabran da obezbedi da suspenzija proizvoda izbegne štetnu sedimentaciju ili kremu (koja može da izazove nepovratnu aglomeraciju) i umesto toga promoviše slabo flokulisani sistem, koji se lako raspršuje kada se protrese. Labavo fluktuirani sistemi su dobro cenjeni da obezbeđuju optimalnu stabilnost za pMDI kanistere. Kao rezultat svojstava formulacije, formulacija nije sadržala etanol i površinski aktivne materije/agense za stabilizaciju.

[0129] Jedinjenja se mogu formulisati za lokalnu ili topikalnu primenu, kao što je za lokalnu primenu na kožu i sluzokožu, kao što je u oku, u obliku gela, krema i losiona i za primenu na oku ili za intracisternalnu ili intraspinalnu primenu. Lokalna primena je predviđena za transdermalnu isporuku i takođe za primenu u oči ili mukozu, ili za inhalacione terapije. Takođe se mogu davati nazalni rastvori aktivnog jedinjenja ili u kombinaciji sa drugim ekscipijensima.

[0130] Za nazalnu primenu, preparat može da sadrži esterifikovano fosfonatno jedinjenje rastvoreno ili suspendovano u tečnom nosaču, posebno u vodenom nosaču, za primenu u aerosolu. Nosač može da sadrži agense za rastvaranje ili suspendovanje kao što su propilen glikol, surfaktanti, pojačivači apsorpcije kao što su lecitin ili ciklodekstrin, ili konzervansi.

[0131] Rastvori, posebno oni namenjeni za oftalmičku upotrebu, mogu biti formulisani kao izotonični rastvori od 0.01% do 10%, pH 5 do 7.4, sa odgovarajućim solima.

[0132] Drugi putevi primene, kao što su transdermalni flasteri, uključujući jontoforetske i elektroforetske uređaje, i rektalna primena, takođe su razmatrani ovde.

[0133] Transdermalni flasteri, uključujući jontoforetske i elektroforetske uređaje, dobro su poznati stručnjacima u ovoj oblasti. Na primer, takvi flasteri su otkrivene u U.S. Patent Nos.

6,267,983, 6,261,595, 6,256,533, 6,167,301, 6,024,975, 6,010715, 5,985,317, 5,983,134, 5,948,433 i 5,860,957.

[0134] Na primer, dozni oblici za rektalnu primenu su rektalne supozitorije, kapsule i tablete za sistemski efekat. Rektalne supozitorije se ovde koriste kao čvrsta tela za umetanje u rektum koja se tope ili omekšavaju na telesnoj temperaturi oslobađajući jedan ili više farmakološki ili terapeutski aktivnih sastojaka. Supstance koje se koriste u rektalnim supozitorijama su baze ili sredstva i sredstva za podizanje tačke topljenja. Primeri baza uključuju kakao puter (teobroma ulje), glicerin-želatin, ugljeni vosak (polioksietilen glikol) i odgovarajuće mešavine mono-, dii triglicerida masnih kiselina. Mogu se koristiti kombinacije različitih baza. Sredstva za podizanje tačke topljenja supozitorija uključuju spermaceti i vosak. Rektalne supozitorije se mogu pripremiti ili komprimovanom metodom ili oblikovanjem. Težina rektalne supozitorije, u jednom primeru izvođenja, je 2 gm do 3 gm. Tablete i kapsule za rektalnu primenu se proizvode korišćenjem iste supstance i istim postupcima kao i formulacije za oralnu primenu.

[0135] Jedinjenja koja su ovde data, ili njihovi derivati, takođe mogu biti formulisani tako da budu ciljani na određeno tkivo, receptor ili drugu oblast tela subjekta koji se leči. Mnogi takvi postupci ciljanja su dobro poznati stručnjacima u ovoj oblasti. Svi takvi postupci ciljanja su ovde razmatrane za upotrebu u predmetnim kompozicijama. Za neograničavajuće primere postupaka ciljanja, pogledati, npr., U.S. Patente br.6,316,652, 6,274,552, 6,271,359, 6,253,872, 6,139,865, 6,131,570, 6,120,751, 6,071,495, 6,060,082, 6,048,736, 6,039,975, 6,004,534, 5,985,307, 5,972,366, 5,900,252, 5,840,674, 5,759,542 i 5,709,874.

[0136] U nekim primerima izvođenja, lipozomske suspenzije, uključujući lipozome ciljane na tkivo, kao što su tumorski ciljani lipozomi, takođe mogu biti pogodne kao nosači. Oni se mogu pripremiti prema postupcima poznatim stručnjacima u ovoj oblasti. Na primer, formulacije lipozoma se mogu pripremiti kako je opisano u U.S. Patentu br.4,522,811. Ukratko, lipozomi kao što su multilamelarne vezikule (MLV) mogu se formirati sušenjem fosfatidil holina i fosfatidil serina (molarni odnos 7:3) na unutrašnjoj strani bočice. Dodaje se rastvor jedinjenja datog ovde u fosfatnom puferu sa nedostatkom dvovalentnih katjona (PBS) i balon se mućka dok se lipidni film ne disperguje. Dobijene vezikule se isperu da bi se uklonilo nekapsulirano jedinjenje, peletiraju centrifugiranjem, a zatim resuspenduju u PBS.

[0137] Jedinjenja ili derivati mogu biti upakovani kao proizvodni predmeti koji sadrže materijal za pakovanje, jedinjenje ili njegov derivat dat ovde, koji je efikasan za lečenje, prevenciju ili ublažavanje jednog ili više simptoma bolesti ili poremećaja, supra, unutar materijala za pakovanje, i etiketu koja označava da se jedinjenje ili kompozicija ili njihov derivat koristi za lečenje, prevenciju ili ublažavanje jednog ili više simptoma bolesti ili poremećaja, supra.

[0138] Proizvodni artikli koji su ovde navedeni sadrže materijale za pakovanje. Materijali za pakovanje za upotrebu u proizvodima za pakovanje su dobro poznati stručnjacima u ovoj oblasti videti, npr., U.S. Patente br.5,323,907, 5,052,558 i 5,033,252. Primeri materijala za pakovanje uključuju, ali nisu ograničeni na, blister pakovanja, boce, tube, inhalatore, pumpe, kese, bočice, kontejnere, špriceve, boce i bilo koji materijal za pakovanje pogodan za odabranu formulaciju i predviđeni način primene i lečenja. Razmatran je širok spektar formulacija jedinjenja i kompozicija koje su ovde date, kao i različiti tretmani za bilo koju bolest ili poremećaj opisan ovde.

[0139] Za upotrebu za lečenje ili prevenciju infektivnih bolesti, ovde opisana jedinjenja ili kompozicije, ili njihove farmaceutske kompozicije, mogu se administrirati ili primeniti u terapeutski efikasnoj količini. U humanoj terapiji, lekar će odrediti režim doziranja koji je najprikladniji prema preventivnom ili kurativnom tretmanu i prema starosti, težini, stadijumu bolesti i drugim faktorima specifičnim za subjekta koji se leči. Količina aktivnog sastojka u formulacijama koje su ovde date, a koja će biti efikasna u prevenciji ili lečenju infektivne bolesti, variraće u zavisnosti od prirode i težine bolesti ili stanja, i načina na koji se aktivni sastojak primenjuje. Učestalost i doza će takođe varirati u zavisnosti od faktora specifičnih za svakog subjekta u zavisnosti od specifične terapije (npr. terapeutskih ili profilaktičkih agenasa) koja se primenjuje, težine infekcije, načina primene, kao i starosti, tela, težine, odgovora, istorije bolesti subjekta.

[0140] Primeri doza formulacije uključuju količine u miligrama ili mikrogramima aktivnog jedinjenja po kilogramu subjekta (npr. od 1 mikrograma po kilogramu do 50 miligrama po kilogramu, od 10 mikrograma po kilogramu do 30 miligrama po kilogramu, od 100 mikrograma po kilogramu do 10 miligrama po kilogramu, odnosno od 100 mikrograma po kilogramu do 5 miligrama po kilogramu).

[0141] U nekim primerima izvođenja, terapeutski efikasna doza treba da proizvede koncentraciju aktivnog sastojka u serumu od 0.001 ng/mL do 50 µg/mL do 200 µg/mL. Kompozicije, u drugim primerima izvođenja, treba da obezbede dozu od 0.0001 mg do 70 mg jedinjenja po kilogramu telesne težine dnevno. Jedinični oblici doze se pripremaju da obezbede od 0.01 mg do 0.1 mg, oblik od 1 mg do 500 mg, ili od 1000 mg do 5000 mg, a u nekim primerima izvođenja od 10 mg do 500 mg aktivnog sastojka ili kombinacije esencijalnih sastojaka po jediničnom doznom obliku.

[0142] Aktivni sastojak se može primeniti odjednom, ili se može podeliti u niz manjih doza koje se primenjuju u vremenskim intervalima. Podrazumeva se da su precizna doza i trajanje lečenja funkcija bolesti koja se leči i može se odrediti empirijski korišćenjem poznatih protokola testiranja ili ekstrapolacijom iz in vivo ili in vitro test podataka ili naknadno kliničko ispitivanje. Treba napomenuti da koncentracije i vrednosti doze takođe mogu da variraju u zavisnosti od težine stanja koje treba ublažiti. Dalje treba razumeti da za svakog određenog subjekta, specifični režimi doziranja treba da se prilagođavaju tokom vremena u skladu sa individualnim potrebama i profesionalnom procenom osobe koja primenjuje ili nadgleda davanje kompozicija i da su rasponi koncentracija koji su ovde navedeni samo kao primeri i nemaju za cilj da ograniče obim ili izvođenje kompozicija za koje se traži zaštita.

[0143] Možda će biti neophodno da se u nekim slučajevima koriste doze aktivnog sastojka izvan opsega koji su ovde otkriveni, kao što će biti očigledno stručnjacima u ovoj oblasti. Štaviše, primećuje se da će kliničar ili lekar koji leči znati kako i kada da prekine, podesi ili prekine terapiju u vezi sa odgovorom subjekta.

[0144] Za sistemsku primenu, terapeutski efikasna doza se može inicijalno proceniti iz in vitro eseji. Na primer, doza se može formulisati u životinjskim modelima da bi se postigao opseg cirkulišuće koncentracije koji uključuje IC50kako je utvrđeno u ćelijskoj kulturi (tj. koncentracija test jedinjenja koja je smrtonosna za 50% ćelijske kulture), MIC kao što je određeno u ćelijskoj kulturi (tj. minimalna inhibitorna koncentracija za rast) ili IC100kako je utvrđeno u ćelijskoj kulturi (tj. koncentracija antimikrobnog derivata sulfonamida koja je smrtonosna za 100% ćelijske kulture). Takve informacije se mogu koristiti za preciznije određivanje korisnih doza kod ljudi.

[0145] Početne doze se takođe mogu proceniti iz in vivo podataka (npr., životinjski modeli) korišćenjem tehnika koje su dobro poznate u tehnici. Stručnjak u ovoj oblasti može lako da optimizuje davanje ljudima na osnovu podataka o životinjama.

[0146] Alternativno, početne doze se mogu odrediti iz datih doza poznatih antimikrobnih agenasa upoređivanjem IC50, MIC i/ili I100specifičnog jedinjenja otkrivenog ovde sa onim poznatog antimikrobnog sredstva, i prilagođavanje početnih doza u skladu sa tim. Optimalna doza se može dobiti iz ovih početnih vrednosti rutinskom optimizacijom.

[0147] U slučajevima lokalne primene ili selektivnog unosa, efektivna lokalna koncentracija jedinjenja koja se koristi možda nije povezana sa koncentracijom u plazmi. Stručnjak u ovoj oblasti će biti u stanju da optimizuje terapeutski efikasne lokalne doze bez nepotrebnog eksperimentisanja.

[0148] U idealnom slučaju, terapeutski efikasna doza ovde opisanih jedinjenja će obezbediti terapeutsku korist bez izazivanja značajne toksičnosti. Toksičnost jedinjenja se može odrediti korišćenjem standardnih farmaceutskih procedura u ćelijskim kulturama ili eksperimentalnim životinjama, npr., utvrđivanjem LD50(doza smrtonosna za 50% populacije) ili LD100(doza smrtonosna za 100% populacije). Odnos doze između toksičnog i terapijskog efekta je terapeutski indeks. Poželjna su jedinjenja koja pokazuju visoke terapeutske indekse. Podaci dobijeni iz ovih testova ćelijske kulture i studija na životinjama mogu se koristiti za formulisanje opsega doza koji nije toksičan za upotrebu kod subjekata. Doziranje jedinjenja opisanih ovde poželjno leži u opsegu cirkulišućih koncentracija koje uključuju efektivnu dozu sa malo ili bez toksičnosti. Doziranje može da varira unutar ovog opsega u zavisnosti od upotrebljenog doznog oblika i načina primene. Tačnu formulaciju, način primene i doziranje može izabrati individualni lekar s obzirom na stanje pacijenta (videti, npr., Fingl et al., 1975, U: The Pharmacological Basis of Therapeutics, Ch.1, str.1).

[0149] Terapija se može ponavljati povremeno dok se infekcije mogu otkriti, ili čak i kada se ne mogu otkriti. Primena iste formulacije koja je ovde data može se ponoviti i primene mogu biti razdvojene za najmanje 1 dan, 2 dana, 3 dana, 5 dana, 10 dana, 15 dana, 30 dana, 45 dana, 2 meseca, 75 dana, 3 meseci, odnosno 6 meseci.

[0150] Jedinjenje Formule (1) i/ili njegova farmaceutska kompozicija se generalno može koristiti u količini efikasnoj za postizanje predviđene svrhe. Za upotrebu u lečenju bolesti kao što je bakterijska infekcija, jedinjenje Formule (1) i/ili njegove farmaceutske kompozicije, mogu se primeniti ili primeniti u terapeutski efikasnoj količini.

[0151] Količina jedinjenja formule (1) i/ili njegove farmaceutske kompozicije koja će biti efikasna u lečenju određenog poremećaja ili stanja koje je ovde otkriveno zavisiće delimično od prirode poremećaja ili stanja i može se odrediti standardom kliničke tehnike poznate u tehnici. Dodatno, in vitro ili in vivo testovi mogu opciono da se koriste da pomognu u identifikaciji optimalnih opsega doziranja. Količina jedinjenja formule (1) i/ili njegove farmaceutske kompozicije koja se primenjuje zavisiće, između ostalih faktora, od subjekta koji se leči, težine subjekta, težine bolesti, načina davanja i odluke lekara koji propisuje lek.

[0152] Jedinjenje formule (1) se može ispitati in vitro i in vivo, za željenu terapijsku aktivnost, pre upotrebe kod ljudi. Na primer, in vitro testovi se mogu koristiti da bi se utvrdilo da li je poželjna primena specifičnog jedinjenja ili kombinacije jedinjenja. Takođe se može pokazati da su jedinjenja efikasna i bezbedna korišćenjem sistema životinjskih modela.

[0153] Terapeutski efikasna doza jedinjenja formule (1) i/ili njegove farmaceutske kompozicije će obezbediti terapeutsku korist bez izazivanja značajne toksičnosti. Toksičnost jedinjenja Formule (1) i/ili njihovih farmaceutskih kompozicija može da se odredi korišćenjem standardnih farmaceutskih procedura i stručnjak može lako da je utvrdi. Odnos doze između toksičnog i terapijskog efekta je terapeutski indeks. Jedinjenje formule (1) i/ili njegova farmaceutska kompozicija pokazuje posebno visok terapeutski indeks u lečenju bolesti i poremećaja. Doza jedinjenja formule (1) i/ili njegove farmaceutske kompozicije biće unutar opsega cirkulišućih koncentracija koje uključuju efikasnu dozu sa minimalnom toksičnošću.

[0154] Jedinjenje formule (1), njegova farmaceutski prihvatljiva so ili farmaceutska kompozicija bilo kog od prethodno navedenih mogu biti uključeni u komplet koji se može koristiti za davanje jedinjenja pacijentu u terapeutske svrhe. Komplet može uključivati farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule (1) pogodno za primenu pacijentu i uputstva za davanje farmaceutske kompozicije pacijentu. Komplet za upotrebu u lečenju bakterijske infekcije kod pacijenta sadrži jedinjenje Formule (1) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, farmaceutski prihvatljiv nosač za primenu jedinjenja i uputstva za primenu jedinjenja pacijentu. Uputstva koja se isporučuju sa kompletom mogu biti odštampana i/ili isporučena, na primer, kao elektronski čitljivi medij, video kaseta, audio traka, fleš memorijski uređaj, ili mogu biti objavljena na internet veb stranici ili distribuirana pacijentu i /ili pružaoca zdravstvene zaštite kao elektronske komunikacije.

[0155] Količina jedinjenja formule (1) koja će biti efikasna u lečenju bakterijske infekcije zavisiće, bar delimično, od prirode bolesti i može se odrediti standardnim kliničkim tehnikama poznatim u tehnici. Dodatno, in vitro ili in vivo testovi se mogu koristiti da pomognu u identifikaciji optimalnih opsega doziranja. Režimi doziranja i intervali doziranja mogu se takođe odrediti postupcima poznatim stručnjacima. Količina jedinjenja formule (1) koja se primenjuje može zavisiti, između ostalih faktora, od subjekta koji se leči, težine subjekta, težine bolesti, načina primene i procene lekara koji propisuje lek.

[0156] Za sistemsku primenu, terapeutski efikasna doza se može inicijalno proceniti od in vitro eseji. Početne doze se takođe mogu proceniti iz in vivo podataka, npr., životinjske modele, koristeći tehnike koje su poznate u tehnici. Takve informacije se mogu koristiti za preciznije određivanje korisnih doza kod ljudi. Osoba koja ima uobičajene veštine u ovoj oblasti može da optimizuje davanje ljudima na osnovu podataka o životinjama.

[0157] Doza jedinjenja Formule (1) i odgovarajući intervali doziranja mogu da se izaberu da održe trajnu terapeutski efikasnu koncentraciju jedinjenja Formule (1) u krvi pacijenta, i u određenim primerima izvođenja, bez prekoračenja minimalne neželjene koncentracije.

[0158] Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje Formule (1) mogu se davati jednom dnevno, dva puta dnevno ili u intervalima većim od jednom dnevno. Doziranje se može dati samostalno ili u kombinaciji sa drugim lekovima i može se nastaviti onoliko dugo koliko je potrebno za efikasno lečenje bolesti. Doziranje se takođe može preduzeti korišćenjem kontinuirane ili polu-kontinuirane primene tokom određenog vremenskog perioda. Doziranje uključuje davanje farmaceutske kompozicije sisaru, kao što je čovek, u nahranjenom ili stanju gladovanja.

[0159] Farmaceutska kompozicija se može primeniti u jednom doznom obliku ili u višestrukim doznim oblicima ili kao kontinuirana ili akumulirana doza tokom određenog vremenskog perioda. Kada se koriste višestruki dozni oblici, količina jedinjenja Formule (1) sadržanog u svakom od višestrukih doznih oblika može biti ista ili različita.

[0160] Pogodni rasponi dnevnih doza za primenu mogu se kretati od 2 ug do 20 mg jedinjenja formule (1) po kilogramu telesne težine.

[0161] Pogodni rasponi dnevnih doza za primenu mogu se kretati od 1 µg do 50 mg jedinjenja formule (1) po kvadratnom metru (m<2>) površine tela.

[0162] Jedinjenje formule (1) može se davati za lečenje bakterijske infekcije kod pacijenta u količini od 1 mg do 2000 mg dnevno, od 100 µg do 1500 mg dnevno, od 20 µg do 1000 mg dnevno, ili u bilo koju drugu odgovarajuću dnevnu dozu.

[0163] Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje Formule (1) može se primeniti za lečenje bakterijske infekcije kod subjekta da bi se obezbedila terapeutski efikasna koncentracija jedinjenja Formule (1) u krvi ili plazmi subjekta. Terapijski efikasna koncentracija jedinjenja formule (1) u krvi ili plazmi subjekta je od 1 µg/mL do 60 µg/mL, od 2 µg/mL do 50 µg/mL, od 5 µg/mL do 40 µg/mL, od 5 µg/mL do 20 µg/mL, ili od 5 µg/mL do 10 µg/mL. Terapijski efikasna koncentracija jedinjenja formule (1) u krvi ili plazmi subjekta je najmanje 2 µg/mL, najmanje 5 µg/mL, najmanje 10 µg/mL, najmanje 15 µg/mL, pri najmanje 25 µg/mL, ili najmanje 30 µg/mL. Terapeutski efikasna koncentracija jedinjenja formule (1) u krvi ili plazmi subjekta je manja od količine koja izaziva neprihvatljive štetne efekte uključujući štetne efekte na homeostazu. Terapeutski efikasna koncentracija jedinjenja Formule (1) u krvi ili plazmi subjekta je količina dovoljna za obnavljanje i/ili održavanje homeostaze kod subjekta.

[0164] Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (1) može se primeniti za lečenje bakterijske infekcije kod pacijenta tako da se obezbedi terapeutski efikasna koncentracija jedinjenja formule (1) u krvi ili plazmi subjekta tokom dužeg perioda. vremena kao što je, na primer, najmanje 4 sata, najmanje 6 sati, najmanje 8 sati, najmanje 10 sati, ili najmanje 12 sati.

[0165] Količina jedinjenja formule (1) koja se primenjuje može da varira tokom režima lečenja.

[0166] Farmaceutske kompozicije obezbeđene ovim otkrićem mogu dalje da sadrže jedno ili više farmaceutski aktivnih jedinjenja pored jedinjenja formule (1). Takva jedinjenja se mogu obezbediti za lečenje bakterijske infekcije koja se leči jedinjenjem Formule (1) ili za lečenje bolesti, poremećaja ili stanja koje nije bakterijska infekcija koja se leči jedinjenjem Formule (1).

[0167] Jedinjenja i kompozicije opisane ovde mogu se koristiti u širokom spektru primena za lečenje infektivnih bolesti kod subjekta. Postupci generalno uključuju davanje terapeutski efikasne količine jedinjenja Formule (1) ili njegove farmaceutske kompozicije subjektu, ili davanje terapeutski efikasne količine jedinjenja Formule (1) i antibiotika, ili njegove farmaceutske kompozicije za predmet.

[0168] Jedinjenja obezbeđena predmetnim pronalaskom su prolekovi inhibitora β-laktamaze. Jedinjenja i kompozicije date predmetnim pronalaskom mogu se koristiti za lečenje bolesti kod kojih je etiologija bolesti povezana sa ekspresijom β-laktamaza. Na primer, određene bakterijske infekcije su otporne na antibiotike β-laktamaze jer β-laktamaze koje proizvode bakterije hidrolizuju β-laktamski prsten β-laktamskog antibiotika.

[0169] Jedinjenja i kompozicije obezbeđene predmetnim pronalaskom mogu se koristiti za lečenje bakterijske bolesti kod pacijenata.

[0170] Jedinjenja i kompozicije obezbeđene predmetnim pronalaskom mogu se koristiti za lečenje bakterijske infekcije. Na primer, jedinjenja i kompozicija obezbeđena ovim otkrićem mogu se koristiti za lečenje bakterijske infekcije povezane sa bakterijama kao što su obligatne aerobne bakterije, obligatne anaerobne bakterije, fakulativne anaerobne bakterije i mikroaerofilne bakterije.

[0171] Primeri obveznih aerobnih bakterija uključuju gram-negativne koke kao npr Morakella catarrhalis, Neisseria gonorrhoeae, i N. meningitidi; gram-pozitivni bacili kao npr Corinebacterium jeikeium; bacili otporni na kiselinu kao npr Micobacterium avium kompleks, M. kansasii, M. leprae, M. tuberculosis, i Nocardia sp; nefermentativne, neenterobakterije kao npr Acinetobacter calcoaceticus, Elizabethkingia meningoseptica (prethodno Flavobacterium meningosepticum), Pseudomonas aeruginosa, P. alcaligenes, druge Pseudomonas sp, i Stenotrophomonas maltophilia; izbirljivi gram-negativni kokobacili i bacili kao npr Brucella, Bordetella, Fransisella, i Legionella spp; i treponemataceae (spiralne bakterije) kao npr Leptospira sp.

[0172] Primeri obligatnih anaerobnih bakterija uključuju gram-negativne bacile kao npr Bacteroides fragilis, drugo Bacteroides sp, i Fusobacterium sp, Prevotella sp; gram-negativne koke kao npr Veillonella sp.; gram-pozitivne koke kao npr Peptococcus niger, i Peptostreptococcus sp.; gram-pozitivni bacili koji ne formiraju spore kao npr Clostridium botulinum, C. perfringens, C. tetani, drugo Clostridium sp; i gram-pozitivni bacili koji formiraju endospore kao npr Clostridium botulinum, C. perfringens, C. tetani, i drugi Clostridium sp.

[0173] Primeri fakultativnih anaerobnih bakterija uključuju gram-pozitivne koke, pozitivne na katalazu kao npr. Staphilococcus aureus (koagulaza pozitivan), S. epidermidis (koagulazanegativni) i drugi koagulaza-negativni stafilokoki; gram-pozitivne koke, katalaze-negativne kao npr Enterococcus faecalis, E. faecium, Streptococcus agalactiae (streptokoke grupe B), S. bovis, S. pneumoniae, S. piogenes (streptokoki grupe A), streptokoke grupe viridans (S. mutans, S. mitis, S. salivarius, S. sanguis), S. anginosus grupa (S. anginosus, S. milleri, S. constellatus), i Gemella morbillorum; gram-pozitivni bacili kao npr Bacillus anthracis, Erysipelothrix rhusiopathiae, i Gardnerella vaginalis (gram-varijabilna); gram-negativni bacili kao što su Enterobacteriaceae (Citrobacter sp, Enterobacter aerogenes, Escherichia coli, Klebsiella sp, Morganella morganii, Proteus sp, Plesiomonas shigelloides, Providencia rettgeri, Salmonella typhi, druge Salmonella sp, Serratia marcescens, i Shigella sp, Yersinia enterocolitica, Y. pestis); fermentativne, ne-Enterobacteriaceae kao npr Aeromonas hydrophila, Chromobacterium violaceum, i Pasteurella multocida; izbirljivi gram-negativni kokobacili i bacili kao npr Actinobacillus actinomicetemcomitans, Bartonella bacilliformis, B. henselae, B. kuintana, Eikenella corrodens, Haemophilus influenzae, i drugi Haemophilus sp; mikoplazme kao npr Mycoplasma pneumoniae; i treponemataceae (spiralne bakterije) kao npr. Borrelia burgdorferi, i Treponema pallidum.

[0174] Primeri mikroaerofilnih bakterija uključuju zakrivljene bacile kao npr Campilobacter jejuni, Helicobacter pilori, Vibrio cholerae, i V. vulnificus; obavezni intracelularni parazit; chlamidiaceae kao npr Chlamidia trachomatis, Chlamidophila pneumoniae, i C. psittaci; coxiellaceae kao npr Coxiella burnetii; i rikecije kao npr Rickettsia provazekii, R. rickettsii, R. tiphi, R. tsutsugamushi, Ehrlichia chaffeensis, i Anaplasma phagocitophilum.

[0175] Jedinjenja i kompozicije obezbeđene ovim otkrićem mogu se koristiti za lečenje bakterijske bolesti u kojoj bakterije proizvode β-laktamazu. Primeri bakterija koje proizvode βlaktamazu uključuju Mycobacterium tuberculosis, otporan na meticilin Staphilococcus aureus, Staphiloccus, Enterobacteriaceae, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Citrobacter, i Morganella.

[0176] Jedinjenja i kompozicije obezbeđene ovim otkrićem mogu se koristiti za lečenje bakterijske bolesti u kojoj je inhibitor β-laktamaze efikasan u lečenju bakterijske bolesti kao što je bakterijska infekcija.

[0177] Infektivna bolest može biti bakterijska infekcija. Bakterijska infekcija može biti infekcija gram-pozitivne bakterije. Bakterijska infekcija može biti infekcija gram-negativnih bakterija. Primeri gram-negativnih bakterija uključuju Acinetobacter, Aeromonas, Bacteroides, Burkholderia, Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, Fusobacterium, Haemophilus, Klebsiella, Moraxella, Morganella, Mycoplasma, Neisseria, Pantoea, Pasteurella, Plesiomonas, Porphyromonas, Prevotella, Proteus, Providencia, Pseudomonas, Salmonella, Serratia, Shigella, Spirillum, Stenotrophomonas, Streptobacillus, Treponema, ili Yersinia. Primeri gram-negativnih bakterija uključuju Acinetobacter baumannii, Aeromonas hydrophila, Arizona hinshawii, Bacteroides fragilis, Branhamella catarrhalis, Burkholderia cepacia, Citrobacter diversus, Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Fusobacterium nucleatum, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae, Moraxella catarrhalis, Morganella morganii, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Pantoea agglomerans, Pasteurella multocida, Plesiomonas shigelloides, Prevotella melaninogenica, Proteus mirabilis, Proteus rettgeri, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas diminuta, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas stutzeri, Salmonella enterica, Salmonella enteritidis, Salmonella typhi, Serratia marcescens, Spirillum minus, Stenotrophomonas maltophilia, Streptobacillus moniliformis, Treponema pallidum, ili Yersinia enterocolitica

[0178] Razvoj rezistencije na antibiotike nastavlja da raste kao problem sa kojim se suočavaju pacijenti i kliničari. Shodno tome, američka Uprava za hranu i lekove identifikovala je sledeće patogene kao potencijalno ozbiljnu pretnju javnom zdravlju: Acinetobacter vrste, Aspergillus vrste, Burkholderia cepacia kompleks, Campilobacter vrste, Candida vrste, Clostridium difficile, Coccidioides vrste, Criptococcus vrste, Enterobacteriaceae (npr., Klebsiella pneumoniae), Enterococcus vrste, Helicobacter pilori, Mycobacterium tuberculosis kompleks, Neisseria gonorrhoeae, N. meningitidis, netuberkulozna vrsta mikobakterija, Pseudomonas vrste, Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, S. pneumoniae, S. piogenes, i Vibrio cholerae. FDA je ove organizme označila kao "kvalifikovane patogene" za potrebe Zakona o generisanju antibiotskih podsticaja (GAIN), čiji je cilj da podstakne razvoj novih antibakterijskih i antifungalnih lekova za lečenje ozbiljnih infekcija ili infekcija opasnih po život. Druge vrste bakterija se mogu dodati ili oduzeti sa liste "kvalifikovanih patogena", a postupci koje daje ovo otkriće obuhvataju sve novododate bakterije. Jedinjenja, kompozicije, postupci i kompleti, koji su ovde otkriveni, korisni su za lečenje bolesti, infekcija, itd., takođe uzrokovanih mnogim od ovih organizama.

[0179] Ovde opisana jedinjenja i kompozicije mogu se koristiti za lečenje ili prevenciju različitih bolesti izazvanih gore navedenim bakterijama. Ovo uključuje, ali nije ograničeno na, venerične bolesti, pneumoniju, komplikovane infekcije urinarnog trakta, infekcije urinarnog trakta, komplikovane intraabdominalne infekcije i intraabdominalne infekcije.

[0180] Postupci predviđeni ovim otkrićem se takođe mogu primeniti kod pacijenta da inhibiraju β-laktamazu. Jedinjenja i kompozicije obezbeđene ovim otkrićem mogu se davati pacijentu da inhibiraju bilo koji pogodan tip β-laktamaze. Primeri tipova β-laktamaza uključuju β-laktamaze proširenog spektra kao što su TEM β-laktamaze (Klasa A), SHV β-laktamaze (Klasa A), CTX-M β-laktamaze (Klasa A), OKSA β-laktamaze (Klasa D) i druge β-laktamaze proširenog spektra kao što su PER, VEB, GES i IBC β-laktamaze; β-laktamaze otporne na inhibitore; AmpC-tip-β laktamaze (Klasa C); karbapenemaze kao što su karbapenemaze tipa IMP (metaloβ-laktamaze) (Klasa B), VIM (metalo-β-laktamaze kodirane verona integronom (Klasa B), OKSA (okcilinaza) grupe β-laktamaze (Klasa D), KPC (K. pneumoniae karbapenemaza) (Klasa A), CMI (Klasa C), SME, IMI, NMC i CcrA i NDM-1 (Nju Delhi metalo-β-laktamaza) (Klasa B).

[0181] Primeri tipova β-laktamaza uključuju cefalosporinaze, penicilinaze, cefalosporinaze, βlaktamaze širokog spektra, β-laktamaze proširenog spektra, β-laktamaze otporne na inhibitore, karbenicilinaze, kloksicilinaze, oksacilinaze, karbapenenzimaze, karbapenenzimaze.

[0182] Tipovi β-laktamaza uključuju β-laktamaze klase A, klase B, klase C i klase D.

[0183] Jedinjenja i kompozicije obezbeđene predmetnim pronalaskom mogu se davati oralno.

[0184] Jedinjenja obezbeđena ovim otkrićem, kada se oralno primenjuju, obezbeđuju poboljšanu oralnu biodostupnost inhibitora β-laktamaze u poređenju sa oralnom biodostupnošću matičnog inhibitora B-laktamaze. Na primer, jedinjenja formule (1) mogu da ispolje oralnu bioraspoloživost (%F) od najmanje 10%, najmanje 20%, najmanje 30%, najmanje 40%, najmanje 50% ili najmanje 60%.

[0185] Farmaceutske kompozicije obezbeđene ovim otkrićem mogu dalje da sadrže jedno ili više farmaceutski aktivnih jedinjenja pored jedinjenja formule (1). Takva jedinjenja se mogu obezbediti za lečenje bakterijske infekcije koja se leči jedinjenjem Formule (1) ili za lečenje bolesti, poremećaja ili stanja koje nije bakterijska infekcija koja se leči jedinjenjem Formule (1).

[0186] Jedinjenje formule (1) može da se koristi u kombinaciji sa najmanje jednim drugim terapeutskim agensom. Jedinjenje formule (1) se može primeniti kod pacijenta zajedno sa drugim jedinjenjem za lečenje bakterijske infekcije kod pacijenta. Najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo može biti različito jedinjenje formule (1). Jedinjenje formule (1) i najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo mogu delovati aditivno ili sinergistički. Najmanje jedan dodatni terapeutski agens može biti uključen u istu farmaceutsku kompoziciju ili vehikulum koji sadrži jedinjenje Formule (1) ili može biti u zasebnoj farmaceutskoj kompoziciji ili vehikulumu. Shodno tome, postupci obezbeđeni ovim otkrićem dalje uključuju, pored primene jedinjenja formule (1), davanje jednog ili više terapeutskih agenasa efikasnih za lečenje bakterijske infekcije ili druge bolesti, poremećaja ili stanja od bakterijske infekcije. Postupci predviđeni ovim otkrićem uključuju davanje jedinjenja Formule (1) i jednog ili više drugih terapeutskih agenasa pod uslovom da kombinovana primena ne inhibira terapeutsku efikasnost jedinjenja Formule (1) i/ili ne proizvodi neželjenu kombinaciju efekti.

[0187] Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje Formule (1) mogu se davati istovremeno sa primenom drugog terapeutskog agensa, koji može biti deo iste farmaceutske kompozicije kao, ili u drugoj farmaceutskoj kompoziciji od one koja sadrži jedinjenje Formule (1). Jedinjenje formule (1) se može primeniti pre ili posle primene drugog terapeutskog agensa. U određenim primerima izvođenja kombinovane terapije, kombinovana terapija može da obuhvata naizmenično davanje jedinjenja Formule (1) i kompozicije koja sadrži drugi terapeutski agens, na primer, da bi se minimizirali neželjeni efekti leka povezani sa određenim lekom. Kada se jedinjenje formule (1) primenjuje istovremeno sa drugim terapeutskim agensom koji potencijalno može da izazove neželjeni efekat leka, uključujući, na primer, toksičnost, drugi terapeutski agens se može primeniti u dozi koja pada ispod praga pri kojoj neželjeni lek izaziva reakciju.

[0188] Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje Formule (1) mogu se davati sa jednom ili više supstanci za poboljšanje, modulaciju i/ili kontrolu oslobađanja, bioraspoloživost, terapeutsku efikasnost, terapeutsku moć, stabilnost i slično jedinjenja formule (1). Na primer, da bi se poboljšala terapeutska efikasnost jedinjenja Formule (1), jedinjenje Formule (1) ili farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje Formule (1) može se davati zajedno sa jednim ili više aktivnih agenasa za povećanje apsorpcije ili difuzije jedinjenja Formule (1) iz gastrointestinalnog trakta u sistemsku cirkulaciju, ili da inhibira degradaciju jedinjenja Formule (1) u krvi subjekta. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje Formule (1) može se davati zajedno sa aktivnim agensom koji ima farmakološke efekte koji poboljšavaju terapeutsku efikasnost jedinjenja Formule (1).

[0189] Jedinjenje Formule (1) se može primeniti zajedno sa drugim terapeutskim jedinjenjem, pri čemu jedinjenje Formule (1) poboljšava efikasnost drugog terapeutskog jedinjenja. Na primer, drugo terapeutsko jedinjenje može biti antibiotik kao što je β-laktamski antibiotik, a jedinjenje formule (1), koje obezbeđuje sistemski inhibitor β-laktamaze, može poboljšati efikasnost β-laktamskog antibiotika inhibiranjem hidroliza β-laktamskog prstena pomoću βlaktamaza.

[0190] Jedinjenja i kompozicije obezbeđene ovim otkrićem mogu se davati u kombinaciji sa antibiotikom kao što je β-laktamski antibiotik.

[0191] Antibiotici uključuju, na primer, aminoglikozide kao što su amikacin, gentamicin, neomicin, streptomicin i tobramicin; β-laktami (cefalosporini, prva generacija) kao što su cefadroksil, cefazolin, cefaleksin; β-laktami (cefalosporini, druga generacija) kao što su cefaklor, cefotetan, cefoksitin, cefprozil i cefuroksim; β-laktami (cefalosporini, treća generacija) kao što su cefotaksim, cefpodoksim, ceftazidim, ceftibuten i ceftriakson; β-laktami (cefalosporini, šesta generacija) kao što je cefepim; β-laktami (cefalosporini, peta generacija) kao što je ceftarolin; β-laktami (penicilini) kao što su amoksicilin, ampicilin, dikloksacilin, nafcilin i oksacilin, penicilin G, penicilin G benzatin, penicilin G prokain, piperacilin i tikarcilin; β-laktam monobaktami kao što je aztreonam; β-laktam karbapenemi kao što su ertapenem, imipenem, meropenem i doripenem; fluorohiniolone kao što su ciprofloksacin, gemifloksacin, levofloksacin, moksifloksacin, norfloksacin i ofloksacin; makrolidi kao što su azitromicin, klaritromicin, eritromicin, fidaksomicin, laktobionat, gluceptat i telitromicin; sulfonamidi kao što su sulfizoksazol, sulfametizol, sulfametoksazol i trimetoprim; tetraciklini kao što su doksiciklin, minociklin, tetraciklin i tigeciklin; i drugi antibiotici kao što su klindamicin, hloramfenikol, kolistin (poloimiksin E), dalbavancin, daptomicin, fosfomicin, linezolid, metronidazol, nitrofurantoin, oritavancin, kinupristin, dalfoprisin, rifampin, rifapentin, vanizolicin, telavancin. Antibiotik može biti ceftazidim.

[0192] Drugi primeri antibiotika obuhvataju peniciline kao što su aminopenicilini uključujući amoksicilin i ampicilin, antipseudomonalne peniciline uključujući karbenicilin, peperacilin i tikarcilin, inhibitore β-laktamaze uključujući amoksicilin, ampicilin, piperacilin i klavulanat, prirodne peniciline uključujući penicilin g benzatin, penicillin v kalijum, I prokain penicilin, i penicilin otporan na penicilinazu uključujući oksacilin, dikloksacilin i nafcilin; tetraciklini; cefalosporini kao što su avibaktam, tazobaktam, cefadroksil, defazolin, cefaleksin i cefazolin; hinoloni kao što su lomefloksacin, ofloksacin, norfloksacin, gatifloksacin, ciprofloksacin, moksifloksacin, levofloksacin, gemifloksacin, delafoksacin, cinoksacin, nalidiksična kiselina, trovafloksacin i sparfloksacin; linkomicine kao što su linkomicin i klindamicin; makrolidi kao što su detolidi uključujući telitromicin i makrolidi kao što su eritromicin, azitromicin, klaritromicin i fidaksomicin; sulfonamidi kao što su sulfametoksazol/trimetoprim, sulfizoksazol; glikopeptidi; aminoglikozidi kao što su paromomicin, tobramicin, gentamicin, amikacin, kanamicin i neomicin; i karbapenemi kao što su doripenem, meropenem, ertapenem i cilastatin/imipenem. Primeri pogodnih β-laktamskih antibiotika uključuju pename kao što su penami osetljivi na β-laktamazu kao što su benzatin penicilin, benzilpenicilin, fenoksimetil pencilin i prokain penicilin; penami otporni na β-laktamazu kao što su kloksacilin, dikloksacilin, flukloksacilin, meticilin, nafcilin, oksacilin i temocilin; penami širokog spektra kao što su amoksicilin i ampicilin; penami proširenog spektra kao što je mecilanam; karboksipenicilini kao što su karbenicilin i tikarcilin, i ureidopenicilini kao što su azlocilin, mezlocilin i peperacilin.

[0193] Primeri pogodnih β-laktamskih antibiotika uključuju cefame kao što su cefami prve generacije uključujući cefazolin, cefaleksin, cefalosporin C, cefalotin; cefame druge generacije kao što su cefaklor, cefamoandol, cefuroksim, cefotetan i cefoksitin; cefame treće generacije kao što su cefiksim, cefotaksim, cefpodoksim, ceflazidim i ceftriakson; cefame četvrte generacije kao što su cefipim i cefpirom; i cefame pete generacije kao što je ceftarolin.

[0194] Primeri pogodnih β-laktamskih antibiotika uključuju karbapeneme i peneme kao što su biapenem, doripenem, ertapenem, faropenem, imipenem, meropenem, panipemem, razupenem, tebipenem i tienamicin.

[0195] Primeri pogodnih β-laktamskih antibiotika uključuju monobaktame kao što su aztreonam, tigemonam, nokardicin A i tabtoksinin β-laktam.

[0196] Jedinjenja i farmaceutske kompozicije obezbeđene ovim otkrićem mogu se davati sa inhibitorima β-laktamaze i/ili inhibitorima karbapenemaze ili njihovim farmaceutskim kompozicijama. Primeri pogodnih inhibitora β-laktamaze i/ili inhibitora karbapenemaze uključuju klavulansku kiselinu, sulbaktam, avibaktam, tazobaktam, relebaktam, vaborbaktam, ETKS 2514, RG6068 (tj. OP0565) (Livermore et al., J AntiMicrob Chemother 2015, 70: 3032) i RPKS7009 (Hecker et al., J Med Chem 201558: 3682-3692).

[0197] Jedinjenja i kompozicije obezbeđene predmetnim pronalaskom se koriste u kombinaciji sa jednim ili više drugih aktivnih sastojaka. Jedinjenje se može primeniti u kombinaciji, ili uzastopno, sa drugim terapeutskim agensom. Takvi drugi terapeutski agensi uključuju one koji su poznati za lečenje, prevenciju ili ublažavanje infektivnih bolesti.

[0198] Trebalo bi razumeti da se svaka pogodna kombinacija jedinjenja i farmaceutskih kompozicija datih ovde sa jednim ili više gornjih terapeutskih agenasa i opciono jednom ili više dodatnih farmakološki aktivnih supstanci smatra da je unutar obima ovog otkrića. U nekim primerima izvođenja, jedinjenja i farmaceutske kompozicije obezbeđene ovim otkrićem se daju pre ili posle jednog ili više dodatnih aktivnih sastojaka.

ASPEKTI PRONALASKA

[0199] Aspekt 1. Jedinjenje formule (1):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu,

svaki od R<5>, R<6>, i R<7>je vodonik;

A je jednostruka veza;

svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil, ili svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten;

R<2>je izabran između jednostruke veze, metan-diil i etan-diil; i

R<3>je -C(O)-O-R<4>, pri čemu R<4>je izabran od C1-10alkil, C1-10heteroalkil, C5-10arilalkil, C3-6heterocikloalkil, i supstituisani C4-10heterocikloalkilalkil; i

heteroalkil se odnosi na alkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istom ili različitim heteroatomskom grupom ili grupama koje se biraju između -O-, -S-, -NH-, -N (-CH3), -SO- i -SOz-.

[0200] Aspekt 2. Jedinjenje iz aspekta 1, gde svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil.

[0201] Aspekt 3. Jedinjenje iz aspekta 1, gde svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten.

[0202] Aspekt 4. Jedinjenje iz aspekta 1, gde R<2>jednostruka veza.

[0203] Aspekt 5. Jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 3, gde R<2>je metan-diil.

[0204] Aspekt 6. Jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 3, gde R<2>je etan-diil.

[0205] Aspekt 7. Jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 6, gde R<4>je C1-10alkil.

[0206] Aspekt 8. Jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 6, gde R<4>je C1-10heteroalkil.

[0207] Aspekt 9. Jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 6, gde R<4>je C5-10arilalkil.

[0208] Aspekt 10. Jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 6, gde R<4>je C3-6heterocikloalkil.

[0209] Aspekt 11. Jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 6, gde R<4>je zamenjen C4-10heterocikloalkilalkil.

[0210] Aspekt 12. Jedinjenje formule (1):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu,

svaki od R<5>, R<6>, i R<7>je vodonik;

A je jednostruka veza;

svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil, ili svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten;

R<2>je jednostruka veza; i

R<3>je -C(O)-O-R<4>, gde je R<4>je izabran od C1-10alkil, C1-10heteroalkil, C5-10arilalkil, C3-6heterocikloalkil, i supstituisani C4-10heterocikloalkilalkil; i

heteroalkil se odnosi na alkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istom ili različitim heteroatomskom grupom ili grupama koje se biraju između -O-, -S-, -NH-, -N (-CH3), -SO- i -SOz-.

[0211] Aspekt 13. Jedinjenje iz aspekta 12, gde svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil.

[0212] Aspekt 14. Jedinjenje iz aspekta 12, gde svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten.

[0213] Aspekt 15. Jedinjenje bilo kog od aspekata 12 do 14, gde R<4>je izabran od C1-7alkil, C1-

10heteroalkil gde je jedan ili više heteroatoma kiseonik, -CH2-C4-6cikloalkil, - (CH2)2-C4-6cikloalkil, C3-6heterocikloalkil gde je jedan ili više heteroatoma kiseonik, i -CH2-C3-6supstituisani heterocikloalkil, i -(CH2)2-C3-6supstituisani heterocikloalkil.

[0214] Aspekt 16. Jedinjenje iz aspekta 15, pri čemu u supstituisanom C3-6heterocikloalkil, jedan ili više heteroatoma je kiseonik, a jedan ili više supstituenata se nezavisno biraju od C1-3alkil i =O.

[0215] Aspekt 17. Jedinjenje bilo kog od aspekata 12 do 16, gde svaki R<1>je metil, ili svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju cikloheksil prsten ili ciklopentil prsten.

[0216] Aspekt 18. Jedinjenje bilo kog od aspekata 12 do 17, gde R<4>je izabran između metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, n-heksil, n-heptil, -CH2-CH2-O-CH3, benzil, 3-oksetanil i metil-5-metil-1,3-dioksol-2-on.

[0217] Aspekt 19. Jedinjenje iz aspekta 12, gde

svaki od R<5>, R<6>, i R<7>je vodonik;

A je jednostruka veza;

svaki R<1>je metil, ili svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju cikloheksil prsten ili ciklopentil prsten;

R<2>je jednostruka veza; i

R<3>je -C(O)-O-R<4>, pri čemu je R<4>je izabran između metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, nheksil, n-heptil, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-fenil (benzil), 3-oksetanil i metil-5-metil-1,3-dioksol-2-on.

[0218] Aspekt 20. Jedinjenje formule (1):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu,

svaki od R<5>, R<6>, i R<7>je vodonik;

A je jednostruka veza;

svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil, ili svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten;

R<2>je -(CH2)2-; i

R<3>je -C(O)-O-R<4>pri čemu je R<4>je izabran od C1-10alkil, C1-10heteroalkil, C5-10arilalkil, C3-6heterocikloalkil, i supstituisani C4-10heterocikloalkilalkil i

heteroalkil se odnosi na alkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istom ili različitim heteroatomskom grupom ili grupama koje se biraju između -O-, -S-, -NH-, -N (-CH3), -SO- i -SOz-.

[0219] Aspekt 21. Jedinjenje iz aspekta 20, gde svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil.

[0220] Aspekt 22. Jedinjenje iz aspekta 20, gde svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten.

[0221] Aspekt 23. Jedinjenje bilo kog od aspekata 20 do 22, gde R<4>je izabran od C1-7alkil, C1-

10heteroalkil gde je jedan ili više heteroatoma kiseonik, -CH2-C4-6cikloalkil, - (CH2)2-C4-6cikloalkil, C3-6heterocikloalkil gde je jedan ili više heteroatoma kiseonik, -CH2-C3-6supstituisani heterocikloalkil, i -(CH2)2-C3-6supstituisani heterocikloalkil.

[0222] Aspekt 24. Jedinjenje iz aspekta 23, pri čemu u supstituisanom C3-6heterocikloalkil, jedan ili više heteroatoma je kiseonik, a jedan ili više supstituenata se nezavisno biraju od C1-3alkil i =O.

[0223] Aspekt 25. Jedinjenje bilo kog od aspekata 20 do 22, gde R<4>je C1-10alkil.

[0224] Aspekt 26. Jedinjenje aspekta 20, gde,

svaki od R<5>, R<6>, i R<7>je vodonik;

A je jednostruka veza;

svaki R<1>je metil;

R<2>je -(CH2)2-; i

R<3>je -C(O)-O-R<4>gde je R<4>je izabran između n-heksila i n-heptil.

[0225] Aspekt 27. Jedinjenje iz aspekta 1, gde je jedinjenje odabrano od sledećih:

etil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (3);

benzil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (4);

metil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (10);

izopropil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (11);

heksil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (12);

heptil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (13);

terc-butil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (14);

2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (15);

oksetan-3-il 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (16);

etil 1-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilat (17);

etil 1-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklopropankarboksilat (18);

etil 1-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklobutankarboksilat (19);

heksil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (36);

heptil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (37);

propil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (57);

butil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (58);

(5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (59);

farmaceutski prihvatljiva so bilo kog od prethodno navedenih; i

kombinacija bilo čega od prethodnog.

[0226] Aspekt 28. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje bilo kog od aspekata 1 do 27 i farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0227] Aspekt 29. Farmaceutska kompozicija aspekta 28, koja dalje sadrži antibiotik.

[0228] Aspekt 30. Farmaceutska kompozicija aspekta 29, pri čemu antibiotik sadrži β-laktamski antibiotik.

[0229] Aspekt 31. Farmaceutska kompozicija bilo kog od aspekata 28 do 30, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži formulaciju oralne doze.

[0230] Aspekt 32. Farmaceutska kompozicija bilo kog od aspekata 28 do 31, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži oralni oblik doze.

[0231] Aspekt 33. Farmaceutska kompozicija bilo kog od aspekata 28 do 32, koja sadrži količinu jedinjenja bilo kog od aspekata 1 do 27 koja je efikasna za lečenje bakterijske infekcije kod pacijenta.

[0232] Aspekt 34. Terapeutski efikasna količina jedinjenja iz bilo kog od aspekata 1 do 27 za upotrebu u postupku lečenja bakterijske infekcije kod pacijenta koji se sastoji od davanja pacijentu kome je potreban takav tretman terapeutski efikasne količine jedinjenja.

[0233] Aspekt 35. Aspekt 34, pri čemu davanje obuhvata oralnu primenu.

[0234] Aspekt 36. Bilo koji od aspekata 34 do 35, pri čemu davanje obuhvata primenu oralnog doznog oblika.

[0235] Aspekt 37. Bilo koji od aspekata 34 do 36, koji dalje obuhvata davanje antibiotika pacijentu.

[0236] Aspekt 38. Aspekt 37, pri čemu antibiotik sadrži β-laktamski antibiotik.

[0237] Aspekt 39. Farmaceutska kompozicija bilo kog od aspekata 28 do 33 za upotrebu u postupku lečenja bakterijske infekcije kod pacijenta koji se sastoji od davanja pacijentu kome je takav tretman potreban terapeutski efikasne količine farmaceutske kompozicije.

[0238] Aspekt 40. Aspekt 39, gde davanje obuhvata oralnu primenu.

[0239] Aspekt 41. Bilo koji od aspekata 39 do 40, pri čemu davanje obuhvata primenu oralnog doznog oblika.

[0240] Aspekt 42. Bilo koji od aspekata 39 do 41, koji dalje obuhvata davanje antibiotika pacijentu.

[0241] Aspekt 43. Aspekt 42, pri čemu antibiotik sadrži β-laktamski antibiotik.

[0242] Aspekt 44. Efikasna količina jedinjenja iz bilo kog od aspekata 1 do 27 za upotrebu u postupku inhibicije β-laktamaze kod pacijenta koji se sastoji od davanja pacijentu efikasne količine jedinjenja.

[0243] Aspekt 45. Aspekt 44, gde davanje obuhvata oralnu primenu.

[0244] Aspekt 46. Bilo koji od aspekata 44 do 45, pri čemu davanje obuhvata primenu oralnog doznog oblika.

[0245] Aspekt 47. Efikasna količina farmaceutske kompozicije iz bilo kog od aspekata 28 do 33 za upotrebu u postupku inhibicije β-laktamaze kod pacijenta koji se sastoji od davanja pacijentu efikasne količine farmaceutske kompozicije.

[0246] Aspekt 48. Aspekt 47, pri čemu davanje obuhvata oralnu primenu.

[0247] Aspekt 49. Bilo koji od aspekata 47 do 48, pri čemu davanje obuhvata primenu oralnog doznog oblika.

PRIMERI

[0248] Sledeći primeri detaljno opisuju sintezu jedinjenja Formule (1), karakterizaciju jedinjenja Formule (1) i upotrebu jedinjenja Formule (1).

Primer 1 (intermedijerno jedinjenje)

Sinteza (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (1)

[0249]

[0250] Pozivamo se na objavu međunarodne prijave br. WO 2012/086241 i međunarodnu prijavu br. PCT/2012/016553, zajedno sa srodnim postupcima iz patentne literature. Mešana smeša (2S,5R)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (550 mg, 2.0 mmol), paladijuma na ugljeniku (10% od težina; 340 mg, 0.3 mmol) i MeOH (18 mL) je hidrogenovana pod 1 atm (balon) sve dok analiza tankoslojnom hromatografijom (TLC) nije pokazala završetak reakcije (približno 30 min; reakcija praćena TLC koristeći MeOH/ CH2Cl25:95 kao eluent). Smeša je filtrirana kroz sloj Celite<®>i jastučić je temeljno ispran sa MeOH (oko 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom (temperatura vodenog kupatila ne prelazi 25°C) da bi se dobio proizvod kao bistro i bezbojno ulje. Ulje je sušeno pod vakuumom 1 h, a ostatak je odmah upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Pretpostavljeni prinos kvantitativan. LC-MS: m/z = 186.0 [M+H]<+>.

Primer 2 (samo za referencu)

Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil benzoata (2)

[0251]

Korak 1: Sinteza 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil benzoata (2a).

[0252]

[0253] Benzoil hlorid (4.0 mL, 34.5 mmol) je dodat ukapavanjem u mešani rastvor 2,2-dimetilpropan-1,3-diola (10.8 g, 103.4 mmol), piridina (5.8 mL, 71.6 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridina (840 mg, 6.9 mmol) u dihlorometanu (207 mL) na oko 0°C. Smeša je mešana preko noći uz postepeno zagrevanje do sobne temperature, ugašena dodavanjem 1N HCl (100 mL) na 0°C i ekstrahovana dva puta dihlorometanom. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(100 mL), fiziološkim rastvorom (100 mL), osušeni (Na2SO4), filtrirani i rastvarač je koncentrovan pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je podeljen u dve serije i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (0:1 do 1:4) kao eluenta da bi se dobio proizvod (5.95 g, 99%) kao bezbojno ulje (napomena: osušeno ulje pod vakuumom 2 dana). LC-MS: m/z = 209.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): 8.05 (m, 2H), 7.58 (m, 1H), 7.45 (m, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.38 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.29 (t, J = 6.3 Hz, 1H), 1.02 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil benzoata (2b).

[0254]

[0255] Pozivamo se na J. Am. Chem. Soc.2006, 128, 1605-1610. Rastvor destilovanog sulfuril hlorida (1.2 mL, 15.8 mmol) u Et2O (15 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil benzoata (2a) (3.0 g, 14.4 mmol) i piridina (1.2 mL, 14.4 mmol) u Et2O (3.0 mL) je zatim dodavan ukapavanjem tokom 1 h preko šprica. Špric je ispran sa Et2O (3 × 1 mL), pri čemu se svako ispiranje dodaje u reakcionu smešu. Kupatilo sa acetonom/CO2je uklonjeno, i smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu, a zatim mešana na sobnoj temperaturi 4 h. TLC analiza (EtOAc/heksan; 3:7) nije pokazala završenu reakciju, pa je ponovo ohlađena na -78°C i dodat je još SO2Cl2(0.1 mL), zatim je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana još 2 h. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (3.97 g, 89%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): 8.03 (m, 2H), 7.61-7.57 (m, 1H), 7.49-7.44 (m, 2H), 4.41 (s, 2H), 4.18 (s, 2H), 1.16 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil benzoata (2).

[0256]

[0257] Pozivamo se na J. Am. Chem. Soc.2006, 128, 1605-1610. (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (370 mg, 2.0 mmol) je rastvoren u THF (7.0 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin- 2(1H)-onu (3.0 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M; 2.2 mL, 2.2 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil benzoat (2b) (674 mg, 2.2 mmol) je zatim brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana na sobnoj temperaturi dok se ne proceni da je završena pomoću LC-MS i TLC analize. Doati su EtOAc (20 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(20 mL) i organski i vodeni slojevi su podeljeni. Organski sloj je ispran vodom (3 × 20 mL), fiziološkim rastvorom (20 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom da ostane sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (400 mg, 43%) kao čvrsta supstanca. Nakon prečišćavanja hromatografijom na koloni, činilo se da se proizvod razgradi do određene mere nakon sušenja jedinjenja pod vakuumom tokom vikenda - jedan degradant je verovatno bio avibaktam pomoću LC-MS, m/z = 529.0 [2M-H]-. Deo materijala je zatim ponovo prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu korišćenjem eluentnog sistema koji je detaljno opisan gore. Proizvod je zatim čuvan na -20°C odmah nakon izolacije. LC-MS: m/z = 456.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.05 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 7.59-7.54 (m, 1H), 7.47-7.42 (m, 2H), 6.49 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.69 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.16-4.14 (m, 3H), 4.00 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 3.24-3.20 (m, 1H), 2.96 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.43-2.36 (m, 1H), 2.16-2.09 (m, 1H), 1.97-1.80 (m, 2H), 1.13 (s, 3H), 1.12 (s, 3H).<13>C NMR (300 MHz, CDCl3): δ 171.1, 167.1, 166.4, 133.3, 130.0, 129.8, 128.6, 80.7, 69.1, 62.0, 60.2, 47.1, 35.7, 21.5, 20.8, 17.6.

Primer 3

Sinteza etil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (3)

[0258]

Korak 1: Sinteza etil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (3a).

[0259]

[0260] Rastvor destilovanog sulfuril hlorida (0.55 mL, 7.5 mmol) u Et2O (10 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor etil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (2a) (1.0 g, 6.8 mmol) i piridina (0.55 mL, 6.8 mmol) u Et2O (1.0 mL) je zatim dodat ukapavanjem tokom 1 h preko šprica. Špric je ispran sa Et2O (3 × 1 mL), pri čemu je svako ispiranje dodato u reakcionu smešu. Aceton/CO2kupatilo je uklonjeno, i smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature, a zatim mešana na sobnoj temperaturi 4 h. TLC analiza (EtOAc/heksan; 3:7) nije pokazala da je reakcija završena. Smeša je ponovo ohlađena na -78°C i dodato je još SO2Cl2(0.11 mL) i smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana još 2 h. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (pretpostavljen prinos kvantitativan).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.50 (s, 2H), 4.19 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 1.31 (s, 6H), 1.28 (t, J = 6.9 Hz, 3H).

Korak 2: Sinteza etil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (3).

[0261]

[0262] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (370 mg, 2.0 mmol) rastvoren je u THF (7.0 mL) i 1,3- dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (3.0 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M; 2.2 mL, 2.2 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Rastvor etil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (3a) (538 mg, 2.2 mmol) u THF (1 mL) je zatim brzo dodat u reakcionu smešu preko šprica. Špric je ispran sa THF (3 × 0.5 mL), pri čemu je svako ispiranje dodato u reakcionu smešu. Posle 10 minuta na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi dok se ne proceni da je završena pomoću LC-MS i TLC analize (oko 2 h). EtOAc (20 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(20 mL) su dodati i organski i vodeni slojevi su podeljeni. Organski sloj je ispran zasićenim NaHCO3(20 mL), vodom (3 × 20 mL), fiziološkim rastvorom (20 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan pod vakuumom da ostane sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (318 mg, 39%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 394.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 6.50 (s, 1H), 5.78 (s, 1H), 4.71 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.22-4.12 (m, 3H), 4.05 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.34-3.30 (m, 1H), 3.01 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.46-2.40 (m, 1H), 2.18-2.12 (m, 1H), 2.00-1.79 (m, 2H), 1.28-1.24 (m, 9H).<13>C NMR (300 MHz, CDCl3): δ 174.2, 171.2, 167.1, 80.5, 61.9, 61.4, 60.2, 47.2, 42.8, 22.2, 21.7, 20.8, 17.5, 14.2.

Primer 4

Sinteza benzil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (4)

[0263]

Korak 1: Sinteza benzil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (4a).

[0264]

[0265] Rastvor destilovanog sulfuril hlorida (0.77 mL, 10.6 mmol) u Et2O (10 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor etil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (2a) (Sigma-Aldrich; 2.0 g, 9.6 mmol) i piridina (0.85 mL, 10.6 mmol) u Et2O (2.0 mL) je zatim dodavan ukapavanjem tokom 1 h preko šprica. Špric je ispran sa Et2O pri čemu je svako ispiranje dodato u reakcionu smešu. Aceton/CO2kupatilo je uklonjeno i smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature, a zatim mešana na sobnoj temperaturi 30 min. TLC analiza (EtOAc/heksan; 3:7) nije pokazala završenu reakciju, pa je ponovo ohlađena na -78°C i dodato je još SO2Cl2(0.07 mL), zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana još 1 h. Dodat je Et2O (5 mL) i smeša je mešana nekoliko minuta, zatim filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (2.19 g, 75%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.41-7.32 (m, 4H), 5.18 (s, 2H), 4.52 (s, 2H), 1.34 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza benzil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (4).

[0266]

[0267] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (370 mg, 2.0 mmol) je rastvoren u THF (7.0 mL) i dodat je 1,3-dimetiltetrahidropirimidin- 2(1H)-on (2.0 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M; 2.2 mL, 2.2 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Rastvor etil benzil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (4a) (674 mg, 2.2 mmol) u THF (1 mL) je zatim brzo dodat u reakcionu smešu preko šprica. Špric je ispran sa THF (3 × 0.5 mL), pri čemu je svako ispiranje dodato u reakcionu smešu. Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi dok se ne proceni da je završena pomoću LC-MS i TLC analize. Dodati su EtOAc (20 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(20 mL) i organski i vodeni slojevi su podeljeni. Organski sloj je ispran zasićenim NaHCO3(20 mL), vodom (3 × 20 mL), fiziološkim rastvorom (20 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan pod vakuumom da bi ostao sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (244 mg, 26%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 456.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 7.39-7.28 (m, 4H), 6.49 (s, 1H), 5.84 (s, 1H), 5.20-5.11 (m, 2H), 4.74 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.15-4.14 (m, 1H), 4.04 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.29-3.25 (m, 1H), 2.99 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.45-2.38 (m, 1H), 2.17-2.10 (m, 1H), 1.99-1.78 (m, 2H), 1.30 (s, 3H), 1.29 (s, 3H).<13>C NMR (CDCl3, 75 MHz): δ 174.1, 171.1, 167.1, 135.7, 128.7, 128.4, 128.0, 80.3, 67.0, 62.0, 60.2, 47.2, 43.0, 22.2, 21.7, 20.8, 17.5.

Primer 5 (samo za referencu)

Sinteza (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il fenil sulfata (5)

[0268]

Korak 1: Sinteza fenil sulfohloridata (5a).

[0269]

[0270] Pozivamo se na J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 10638-10641. Rastvor destilovanog sulfuril hlorida (2.6 mL, 35.1 mmol) u Et2O (30 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor fenola (3.0 g, 31.9 mmol) u Et2O (3.0 mL) i piridina (2.6 mL, 31.9 mmol) su zatim dodavani istovremeno, ali iz različitih špriceva, ukapavanjem tokom 1 h. Svaki špric je ispran sa Et2O i svako deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (4.65 g), kontaminiran drugim proizvodima i fenolom kao polaznim materijalom. Proizvod fenil sulfohloridata nije dalje prečišćen i korišćen je direktno u sledećem koraku.

Korak 2: Sinteza (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il fenil sulfata (5).

[0271]

[0272] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (370 mg, 2.0 mmol) je rastvoren u THF (7.0 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin- 2(1H)-onu (2,0 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M; 2.2 mL, 2.2 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Čisti fenil sulfohlorid (5a) (423 mg, 2.2 mmol) je zatim brzo dodat u reakcionu smešu preko šprica. Špric je ispran sa THF (3 × 0.5 mL), pri čemu je svako ispiranje dodato u reakcionu smešu. Posle 10 minuta na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi dok se ne proceni da je završena pomoću LC-MS i TLC analize (oko 1 h). Dodati su EtOAc (20 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(20 mL) i organski i vodeni slojevi su podeljeni. Organski sloj je ispran zasićenim NaHCO3(20 mL), vodom (3 × 20 mL), fiziološkim rastvorom (20 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom da bi ostao sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (126 mg, 18%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 342.2 [M+H]<+>.1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.54-7.51 (m, 2H), 7.47-7.42 (m, 2H), 7.39-7.33 (m, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.24 (fd, J = 2.4 Hz, 1H), 4.09 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.34 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.05 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.46-2.39 (m, 1H), 2.19-2.11 (m, 1H), 2.02-1.81 (m, 2H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.2, 166.8, 150.9, 130.2, 128.1, 121.3, 62.1, 60.6, 47.0, 20.8, 17.6.

Primer 6 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil benzoata (6)

[0273]

Korak 1: Sinteza 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (6a).

[0274]

[0275] Rastvor 2,2-dimetilsukcinske kiseline (10.0 g, 68.4 mmol) u THF (150 mL) je dodat ukapavanjem u suspenziju litijum aluminijum hidrida (8.3 g, 219.0 mmol) u THF (80 mL) na 0°C (ledeno kupatilo). Smeša je zagrejana do sobne temperature tokom 20 min i zatim zagrevana na refluksu 1.5 h. Po završetku (reakcija praćena TLC koristeći MeOH/CH2Cl25:95 kao eluent) reakcija je ugašena veoma pažljivo i ukapavanjem dodatkom vode (10 mL), 3 M NaOH (15 mL) i vode (20 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 min i čvrsta supstanca je filtrirana preko sloja Celite<®>. Filterski kolač je temeljno ispran sa THF. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom dajući smešu jedinjenja iz naslova i neidentifikovanih nusproizvoda kao sirovo ulje. Ulje je prečišćeno hromatografijom na koloni na silika gelu korišćenjem MeOH/CH2Cl2(0:1 do 1:9) kao eluenta da bi se dobio proizvod (4.649 g, 57%) kao ulje.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.11 (s, 2H), 3.66 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.30 (s, 2H), 1.52 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 0.89 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil benzoata (6b).

[0277] U mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (6a) (0.30 g, 2.5 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (9 mL) dodat je benzoil hlorid (0.30 mL, 2.5 mmol), Et3N (0.71 mL, 5.1 mmol) i katalitičku količinu N,N-4-dimetilaminopiridina na 0°C (ledeno kupatilo). Smeša je postepeno zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Nakon što je početni materijal potpuno potrošen (reakcija praćena TLC koristeći EtOAc/heksane 2:8 kao eluent), reakcija je ugašena dodatkom 1N HCl (20 mL) na 0°C (ledeno kupatilo) i smeša je ugašena ekstrahovan dva puta sa dihlorometanom. Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3, fiziološkim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtrirani i rastvarač je koncentrovan da bi se dobila smeša, od najmanje dva proizvoda, kao bistro i bezbojno ulje. Ulje je prečišćeno hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (0:1 do 4:6) kao eluenta da bi se dobio proizvod (0.29 g, 51%) kao ulje (koje je sušeno pod visokim vakuumom 2 dana).

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.04-8.01 (m, 2H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 4.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.41 (s, 2H), 1.78 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.70 (s, 1H), 0.99 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil benzoata (6c).

[0278]

[0279] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.11 mL, 1.5 mmol) u Et2O (3 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil benzoata (6b) (0.28 g, 1,3 mmol) i piridina (0.10 ml, 1.3 mmol) u Et2O (2 mL) je dodavan ukapavanjem (preko 1 h) u ohlađeni rastvor. Smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 30 min (reakcija je praćena pomoću TLC korišćenjem EtOAc/heksana 2:8 kao eluenta). Smeša je ponovo ohlađena na -78°C i dodat je sulfuril hlorid (0.02 mL). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 30 min. Dodat je Et2O (5 mL) i smeša je mešana nekoliko minuta. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (6c) (0.305 g, 75%). %).<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.03 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.60-7.54 (m, 1H), 7.47-7.42 (m, 2H), 4.44-4.38 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 1.89-1.85 (m, 2H), 1.13 (s, 6H).

Korak 4: Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil benzoata (6).

[0280]

[0281] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (176 mg, 1.0 mmol) rastvoren je u THF (4 mL) i 1,3- dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (1 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. NaHMDS (1.0 M u THF; 1.05 mL, 1.05 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i smeša je mešana na -78°C tokom 10 min. 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil benzoat (6c) (305 mg, 1.0 mmol) u THF (0.5 mL) je brzo dodat u smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 0.5 mL) i ovo je takođe dodato u smešu. Posle 10 min, smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana dok se TLC analizom ne proceni da je reakcija završena. EtOAc (10 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(10 mL) su dodati u smešu i organski i vodeni slojevi su podeljeni. Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL), vodom (6 × 10 mL), fiziološkim rastvorom (10 mL), osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Prečišćavanje hromatografijom na koloni na silika gelu korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta dalo je proizvod (6) (215 mg, 18%) kao čvrstu supstancu. LC-MS: 470.2 [M+H]<+>.1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.04-8.01 (m, 2H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 6.48 (s, 1H), 5.80 (s, 1H), 4.60 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 4.29 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.17-4.16 (m, 1H), 4.02 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.34-3.30 (m, 1H), 3.00 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.17-2.11 (m, 1H), 1.98-1.78 (m, 4H), 1.10 (s, 6H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.1, 167.1, 166.6, 133.1, 130.2, 129.7, 128.5, 83.7, 61.9, 61.5, 60.2, 47.2, 36.9, 34.1, 24.1, 23.8, 20.8, 17.5.

Primer 7 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil propionata (7)

[0282]

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil propionata (7a).

[0283]

[0284] Rastvor propionil hlorida (0.74 mL, 8.5 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (5 mL) je dodat u mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (6a) (1.00 g, 8.5 mmol), Et3N (2.4 mL, 16.9 mmol) i 4-N,N-dimetilaminopiridina (52 mg) u anhidrovanom dihlorometanu (20 mL) na -78 °C u atmosferi argona. Smeša je mešana 10 minuta i zatim ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu, mešana na sobnoj temperaturi 1 h, zatim ponovo ohlađena na -78°C i ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature ostavljajući smešu da ostane u hladnom kupatilu i puštajući suvi led da se podigne (preporučuje se da se omogući zagrevanje na sobnu temperaturu od -78°C nakon dodavanja svih reagenasa). Nakon što je početni materijal potpuno utrošen (TLC 50% EtOAc/heksani), reakcija je ugašena dodavanjem 0.5 N HCl (10 mL) na 0°C. Organski i vodeni slojevi su podeljeni, a vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (2 × 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL), fiziološkim rastvorom (20 mL), zatim osušeni (Na2SO4), filtrirani i rastvarač koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo sirovo ulje. Ulje je prečišćeno hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (0:1 do 4:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (7a) (463 mg, 22%) kao ulje, kontaminirano značajnim ostacima EtOAc rastvarača.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.14 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.32 (s, 2H), 2.30 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.88 (s, 1H), 1.61 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.13 (t, J = 7.5 Hz, 3H), 0.91 (fd, J = 1.2 Hz, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil propionata (7b).

[0285]

[0286] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.15 mL, 2.0 mmol) u Et2O (3.5 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Ukapavanjem je dodat rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil propionata (7a) (73% čistoće, ostatak je EtOAc; 441 mg, 1.8 mmol) i piridina (0.15 mL, 1.8 mmol) u Et2O (2.5 mL) tokom 1 h u ohlađeni rastvor. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 30 min (praćeno pomoću TLC, 30% EtOAc/heksani), ponovo ohlađena na -78°C i dodati su sulfuril hlorid (0.03 mL) i piridin (0.03 mL), zagrejana na sobnu temperaturu, i mešana 30 min. Ponovo, smeša je ponovo ohlađena do -78°C i dodat je drugi deo sulfuril hlorida (0.15 mL). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 30 min. Dodat je Et2O (5 mL) i smeša je mešana nekoliko minuta. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (7b) (401 mg, 79%).<1>H-NMR: (300 MHz, CDCl3): 4.22 (s, 2H), 4.14 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.30 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.70 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.11 (t, J = 7.7 Hz, 3H), 1.05 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil propionata (7).

[0287]

[0288] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (185 mg, 1.0 mmol) rastvoren je u THF (4 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (1 mL) u atmosferi argona. Dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C. NaHMDS (1.0 M u THF; 1.1 mL, 1.1 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i smeša je mešana 10 min. 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil propionat (7b) (272 mg, 1.0 mmol) u THF (1 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 0.5 mL) i ovo je takođe dodato u smešu. Dodatni THF (3 mL) je dodat u smešu da bi se omogućilo efikasno mešanje reakcije. Posle 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu. Po završetku (1 h; TLC, 70% EtOAc/heksani), EtOAc (10 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(10 mL) su dodati u smešu. Vodeni i organski slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL), vodom (6 × 10 mL), fiziološkim rastvorom (10 mL), zatim osušen (Na2SO4), filtriran i rastvarač je koncentrovan pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:0 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (7) (93 mg, 22%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: 422.1 [M<+>H]<+>.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.51 (s, 1H), 5.76 (s, 1H), 4.54 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17-4.12 (m, 3H), 4.04 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.36-3.32 (m, 1H), 3.02 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.32 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.18-2.15 (m, 1H), 2.00-1.79 (m, 2H), 1.75-1.61 (m, 2H), 1.13 (t, J = 7.7 Hz, 3H), 1.03 (s, 6H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.5, 171.0, 167.1, 83.6, 62.0, 60.8, 60.2, 47.2, 36.8, 34.0, 27.7, 24.1, 23.7, 20.8, 17.6, 9.2.

Primer 8 (samo za referencu)

Sinteza benzil (4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil)adipata (8)

[0289]

Korak 1: Sinteza benzil (perfluorofenil) adipata (8a).

[0290]

[0291] U mešani rastvor monobenzil estra adipinske kiseline (1.03 g, 4.3 mmol) i pentafluorofenola (0.87 g, 4.7 mmol) u EtOAc (18.7 mL) na 0°C dodat je N,N'-dicikloheksilkarbodiimid (0.97 g, 4.7 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i zatim mešana preko noći. Dobijena čvrsta supstanca je uklonjena vakuumskom filtracijom kroz jastučić od Celite<®>. Filterski kolač je ispran sa EtOAc. Filtrat je nanesen na silika gel i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (0:1 do 4:6) kao eluenta, da bi se dobio proizvod (8a) (1.59 g, 93%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.37-7.35 (m, 5 H), 5.13 (s, 2H), 2.68 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.82-1.78 (m, 4H).

Korak 2: Sinteza benzil (4-hidroksi-3,3-dimetilbutil) adipata (8b).

[0292]

[0293] U mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (6a) (0.22 g, 1.8 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (4 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo), u atmosferi argona, dodat je benzil (perfluorofenil) adipat (8a) (0.36 g, 0.9 mmol), Et3N (0.25 mL, 1.8 mmol) i katalitička količina 4-N,N-dimetilaminopiridina (mala neizmerena količina). Smeša je postepeno zagrejana do sobne temperature, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je naneta na silika gel i prečišćena hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio proizvod kontaminiran regio-izomernim proizvodom. Ova smeša je ponovo prečišćena hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio čist proizvod (8b) (113 mg 38%).<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): 7.36-7.34 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 4.14 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.34 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 2.38-2.31 (m, 4H), 1.68-1.59 (m, 6H), 0.92 (s, 6H). Reakcija se može ponoviti da bi se dobile veće količine materijala.

Korak 3: Sinteza benzil (4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil) adipata (8c).

[0294]

[0295] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.12 ml, 1.6 mmol) u Et2O (5 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor benzil (4-hidroksi-3,3-dimetilbutil) adipata (8b) (446 mg, 1.3 mmol) i piridina (0.11 mL, 1.3 mmol) u Et2O (3.5 mL) dodavan je ukapavanjem tokom 1 h u ohlađeni rastvor. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 30 min (praćeno TLC, 30% EA/heks). Reakcija nije završena, pa je smeša ponovo ohlađena na -78°C, zatim su dodati sulfuril hlorid (0.05 mL) i piridin (0.05 mL). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 30 min. Dodat je Et2O (5 mL) i smeša je mešana nekoliko minuta. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (8c) (446 mg, 77%).<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.39-7.29 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 4.22 (s, 2H), 4.15 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.40-2.29 (m, 4H), 1.73-1.59 (m, 6H), 1.06 (s, 6H). Korak 4: Sinteza benzila (4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil)adipata (8).

[0297] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (185 mg, 1.0 mmol) je rastvoren u THF (9 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (1 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. NaHMDS (1.0 M rastvor u THF; 1.1 mL, 1.1 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. Benzil (4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil) adipat (8c) (435 mg, 1.0 mmol) u THF (1 mL) je brzo dodat u smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 0.5 mL) i ovo je takođe dodato u smešu. Posle 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu. Po završetku (30 min; TLC, 70% EtOAc/heksani), dodati su EtOAc (10 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(10 mL). Vodeni i organski slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL), vodom (3 × 10 mL), fiziološkim rastvorom (10 mL), zatim osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobila čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je usitnjena sa Et2O (2 × 2 mL) da bi se dobio proizvod (8) (43 mg, 7%) kao čvrsta supstanca [zajedno sa manje čistim materijalom (99 mg, 93% čistoće), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja] . Podaci za 43 mg čistog proizvoda su detaljno navedeni u nastavku. LC-MS: 584.2 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.39-7.30 (m, 5H), 6.52 (s, 1H), 5.65 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.54 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.16-4.08 (m, 3H), 4.04 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.35-3.31 (m, 1H), 3.01 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.30 (m, 5H), 2.18-2.12 (m, 1H), 1.99-1.77 (m, 2H), 1.74-1.65 (m, 6H), 1.03 (s. 6H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.34, 173.31, 171.0, 167.1, 136.1, 128.7, 128.4, 128.3, 83.5, 66.4, 62.0, 60.9, 60.2, 47.2, 36.8, 34.0, 24.5, 24.4, 24.2, 23.8, 20.8, 17.6.

Primer 9 (samo za referencu)

Sinteza 6-(4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutoksi)-6-oksoheksanske kiseline (9)

[0298]

[0299] Paladijum na ugljeniku (10% težinski; 13 mg) je dodat u Parrov balon napunjen benzil (4-((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil)adipatom (8) (93% čistoće; 50 mg, 0.1 mmol) u MeOH (14 mL). Smeša je hidrogenizovana na 1 atm H2(balon), na sobnoj temperaturi 30 min (praćeno TLC, 100% EtOAc; PMA boja; LC-MS: sobna temperatura proizvoda = 4.66 min i m/z = 494.2 [M+H]<+>, sobna temperatura početnog materijala = 5.48 min i m/z = 584.3 [M+H]<+>). Smeša je filtrirana kroz sloj Celite<®>i filter kolač je ispran sa MeOH (oko 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom, zatim prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem MeOH/CH2Cl2(0:1 do 4:96) kao eluenta, da bi se dobio proizvod (9) (12 mg) kao čvrsta supstanca (oko 73% čistoća pomoću LC/MS). LC-MS: 494.2 [M+H]<+>.

Primer 10

Sinteza metil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (10)

[0300]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju metil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (10a).

[0301]

[0302] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (3.3 mL, 45.4 mmol) u Et2O (45 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor metil 2,2-dimetil-3-hidroksipropionata (3.0 g, 22.7 mmol) i piridina (2.2 mL, 27.2 mmol) u Et2O (20 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 30 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 5 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C do završetka (praćeno TLC, 30% EA/heks, 30 min). Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio metil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (10a) (5.6 g, 70% prinos). Smeša je čuvana na -78°C i korišćena je odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.50 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 1.31 (s, 6H).

Korak 2: Reakcija za proizvodnju metil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (10).

[0303]

[0304] (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (673 mg, 3.6 mmol) rastvoren je u THF (35 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (5 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi argona.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (4.0 mL, 4.0 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor. Nakon završenog dodavanja, smeša je mešana 10 min. Čisti metil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (10a) (1.27 g, 3.6 mmol, 1.0 ekviv., 66% čistoće) je brzo dodat u reakcionu smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 2.5 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 23°C. Po završetku TLC (30 min; 70% EtOAc/heksani), EtOAc (50 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL) su dodati u reakcionu smešu. Slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), vodom (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom da bi ostao sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana kao eluenta (1:9 do 1:0) da bi se dobio proizvod (10) (98 mg, 7% prinos). LC-MS: 380.2 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.47 (s, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.72 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.05 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.35-3.31 (m, 1H), 3.02 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.41 (m, 1H), 2.19-2.13 (m, 1H), 2.01-1.79 (m, 2H), 1.29 (s, 3H), 1.28 (s, 3H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.7, 171.1, 167.1, 80.4, 62.0, 60.2, 52.6, 47.2, 43.0, 22.2, 21.8, 20.9, 17.6

Primer 11

Sinteza izopropil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (11)

[0305]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju izopropil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (11a).

[0306]

[0307] Poziva se na nemačku prijavu br. DE3045373. Smeša 3-hidroksi-2,2-dimetilpropionske kiseline (4.7 g, 40 mmol), izopropanola (70 mL) i koncentrovane sumporne kiseline (ili pušljive sumporne kiseline; 1 mL) je zagrevana do refluksa i mešana preko noći. Nakon što je ostavljena da se ohladi, smeša je koncentrovana pod vakuumom i ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog NaHCO3(100 mL). Vodena smeša je isprana sa H2O (50 mL), zasićenim NaHCO3(50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio proizvod kao ulje. Proizvod (11a) je direktno upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 5.08-4.95 (m, 1H), 3.53 (fd, J = 1.8 Hz, 2H), 2.49 (s, 1H), 1.25 (fd, J = 2.4 Hz, 3H), 1.22 (fd, J = 2.4 Hz, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.16 (s, 3H).

Korak 2: Reakcija za proizvodnju izopropil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (11b).

[0308]

[0309] Rastvor sulfuril hlorida (2.7 mL, 37.5 mmol) u Et2O (45 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar. Rastvor izopropil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (11a) (3.0 g, 18.7 mmol) i piridina (1.82 mL, 22.5 mmol) u Et2O (20 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 30 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 5 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C do završetka pomoću TLC (30 min; 30% EA/heks). Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio izopropil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (11b) (4.1 g, 85% prinos). Smeša je čuvana na -78°C i korišćena je odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 5.10-4.98 (m, 1H), 4.49 (s, 2H), 1.29 (s, 6H), 1.26 (s, 3H), 1.24 (s, 3H).

Korak 3: Reakcija za proizvodnju izopropil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (11).

[0310]

[0311] (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (673 mg, 3.6 mmol) rastvoren je u THF (35 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (5 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (4.0 mL, 4.0 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 20 min. Čisti izopropil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (11b) (0.94 g, 3.6 mmol) je brzo dodat u reakcionu smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 3 mL) i ispiranje je takođe dodato u smešu. Posle 20 min, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Po završetku reakcije pomoću TLC (30 min; 70% EtOAc/heksani), EtOAc (50 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL) su dodati u reakcionu smešu. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), vodom (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom da bi ostao sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (40 g ISCO kolona) na silika gelu korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (11) (63 mg, 4%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: 408.2 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.50 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.02 (quint, J = 6.3 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.34-3.30 (m, 1H), 3.02 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.19-2.12 (m, 1H), 2.04-1.66 (m, 2H), 1.26-1.23 (m, 12H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.7, 171.1, 167.0, 80.6, 68.8, 62.0, 60.2, 47.2, 42.9, 22.2, 21.7, 21.6, 20.9, 17.5.

Primer 12

Sinteza heksil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (12)

[0312]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju heksil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (12a).

[0313]

[0314] Poziva se na nemačku prijavu br. DE3045373. Smeša hidroksi-2,2-dimetilpropionske kiseline (4.7 g, 40 mmol), 1-heksanola (70 mL) i koncentrovane sumporne kiseline (ili pušljive sumporne kiseline; 1 mL) je zagrejana do 80°C i mešana preko noći. Nakon što je ostavljena da se ohladi, smeša je koncentrovana pod vakuumom (potrebna je pumpa visokog vakuma) i ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(100 mL). Vodena smeša je isprana sa H2O (50 mL), zasićenim NaHCO3(50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio proizvod (12a) kao ulje. Proizvod je direktno upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.04-3.98 (m, 2H), 3.47-3.45 (m, 2H), 2.26 (s, 1H), 1.58-1.32 (m, 2H), 1.32-1.23 (m, 6H), 1.12 (s, 3H), 1.11 (s, 3H).

Korak 2: Reakcija za proizvodnju heksil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (12b).

[0315]

[0316] Rastvor sulfuril hlorida (2.1 mL, 29.7 mmol) u Et2O (40 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor heksil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (12a) (3.0 g, 14.8 mmol) i piridina (1.4 mL, 17.8 mmol) u Et2O (15 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 30 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 5 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C do završetka pomoću TLC (30 min; 30% EA/heks). Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (12b) (3.7 g, 83% prinos). Smeša je čuvana na -78 °C i korišćena je odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): 4.50 (s, 2H), 4.13 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.69-1.60 (m, 2H), 1.40-1.27 (m, 12H), 0.91-0.87 (m, 3H).

Korak 3: Reakcija za proizvodnju heksila 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (12).

[0317]

[0318] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (673 mg, 3,6 mmol) rastvoren je u THF (35 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin- 2(1H)-onu (5 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi Ar.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (4.0 mL, 4.0 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 20 min. Čisti heksil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (12b) (1.1 g, 3.6 mmol) je brzo dodat u reakcionu smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 3 mL) i ispiranje je takođe dodato u smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je zagrejana do 23°C i mešana dok se reakcija ne završi kao što je određeno pomoću TLC i LC-MS. EtOAc (50 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL) su dodati u smešu. Slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), vodom (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta, nakon čega je usledila tečna hromatografija visokih performansi da bi se dobio proizvod (12) (44 mg, 3%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: 450.1 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.49 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.71 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.60 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.17-4.04 (m, 4H), 3.34-3.30 (m, 1H), 3.04-3.00 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.18-2.13 (m, 1H), 2.01-1.79 (m, 2H), 1.66-1.59 (m, 2H), 1.37-1.27 (m, 12H), 0.91-0.86 (m, 3H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.3, 171.1, 167.0, 80.5, 65.6, 62.0, 60.2, 47.2, 43.0, 31.5, 28.6, 25.6, 22.6, 22.3, 21.8, 20.9, 17.6, 14.1.

Primer 13

Sinteza heptil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (13)

[0319]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju heptil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (13a).

[0320]

[0321] Pozivamo se na nemačku prijavu br. DE3045373. Smeša 3-hidroksi-2,2-dimetilpropionske kiseline (4.7 g, 40 mmol), 1-heptanola (70 mL) i koncentrovane sumporne kiseline (ili pušljive sumporne kiseline; 1 mL) je zagrejana do 80°C i mešana preko noći. Nakon što je smeša ostavljena da se ohladi, smeša je koncentrovana pod vakuumom (potrebna je pumpa visokog vakuma) i ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(100 mL). Vodeni rastvor je ispran sa H2O (50 mL), zasićenim NaHCO3(50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (13a) kao ulje. Proizvod je direktno upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.31 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.77 (s, 2H), 1.87-1.81 (m, 2H), 1.53-1.50 (m, 8H), 1.41 (s, 6H), 1.12-1.08 (m, 3H).

Korak 2: Reakcija za proizvodnju heptil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (13b).

[0322]

[0323] Rastvor sulfuril hlorida (2.0 mL, 27.7 mmol) u Et2O (40 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi argona. Rastvor heptil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (13a) (3.0 g, 13.9 mmol) i piridina (1.4 mL, 16.6 mmol) u Et2O (15 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 30 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 5 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C do završetka kao što je praćeno pomoću TLC (30 min; 30% EA/heks). Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio heptil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (13b) (3.3 g, 75%). Smeša je čuvana na -78°C i korišćena je odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.46 (s, 2H), 4.11-4.00 (m, 2H), 1.64-1.55 (m, 2H), 1.26-1.24 (m, 8H), 0.85-0.81 (m, 3H). Korak 3: Reakcija za proizvodnju heptil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (13).

[0324]

[0325] (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (673 mg) rastvoren je u THF (35 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin -2(1H)-onu (5 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi Ar.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (4.0 mL, 4.0 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 20 min. Čisti heptil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (13b) (1.3 g, 4.0 mmol) je brzo dodat u reakcionu smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 3 mL) i ispiranje je takođe dodato u smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je zagrejana do 23°C i mešana dok se reakcija ne završi kao što je određeno pomoću TLC i LC-MS. EtOAc (50 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL) su dodati u smešu. Vodeni i organski slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), vodom (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta, nakon čega je usledilo prečišćavanje pomoću tečne hromatografije visokih performansi da bi se dobio proizvod (13) (65 mg, 4%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: 464.3 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.71 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.18-4.04 (m, 4H), 3.34-3.29 (m, 1H), 3.02 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.19-2.11 (m, 1H), 2.01-1.79 (m, 2H), 1.66-1.59 (m, 2H), 1.37-1.26 (m, 14H), 0.90-0.86 (m, 3H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.3, 171.1, 167.0, 80.5, 65.6, 62.0, 60.2, 47.2, 43.0, 31.8, 29.0, 28.6, 25.9, 22.7, 22.2, 21.8, 20.9, 17.6, 14.2.

Primer 14

Sinteza terc-butil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (14)

[0326]

Korak 1 i Korak 2: Reakcija za proizvodnju terc-butil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (14a).

[0327]

[0328] Jedinjenje je sintetisano u skladu sa objavom PCT međunarodne prijave br. WO 2007116922. Natrijum hidrid (60% u mineralnom ulju; 2.0 g) je dodat u ohlađeni rastvor tercbutil metil malonata (4 g) u THF (100 mL) na 0°C u atmosferi Ar. Smeša je mešana na 0°C tokom 10 min. MeI (3.2 mL) je dodat u smešu i mešanje je nastavljeno 3 h (do tog vremena smeša je bila na sobnoj temperaturi). U smešu su dodati fiziološki rastvor i EtOAc i organski sloj je odvojen, osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (oko 4.5 g), koji je direktno korišćen u sledećem koraku.

[0329] Čvrsti litijum tri-terc-butoksi-aluminohidrid (7.1 g, 28 mmol) je dodavan u porcijama tokom 15 minuta u rastvor terc-butil metil 2,2-dimetil-malonata (2.2 g) u THF (100 mL) u atmosferi Ar. Smeša je zatim zagrejana do refluksa i mešana preko noći. Nakon hlađenja do sobne temperature, dodati su zasićeni rastvor NH4Cl i EtOAc i vodeni i organski slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran sa H2O i fiziološkim rastvorom, zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio proizvod (14a) (900 mg) kao ulje.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.50 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 2.53 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.14 (s, 6H)

Korak 3: Reakcija za proizvodnju terc-butil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (14b).

[0330]

[0331] Rastvor sulfuril hlorida (0.31 mL, 4.2 mmol) u Et2O (6 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar. Rastvor terc-butil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (14a) (0.49 g, 2.8 mmol) i piridina (0.25 ml, 3.1 mmol) u Et2O (6 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Smeša je mešana na -78°C tokom 90 minuta i ostavljena da se zagreje na 23°C nakon što je TLC otkrila da reakcija nije završena (10% EtOAc/heksani). Smeša je ponovo ohlađena do -78°C i dodat je dodatni 1 ekvivalent sulfuril hlorida, mešana 10 min, i smeša je ostavljena da se zagreje do 23°C (napomena: smeša je ostavljena da se meša ukupno 1 h nakon dodavanja i tokom perioda zagrevanja). Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio terc-butil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (14b) (961 mg, prinos se pretpostavlja kvantitativnim) kao bistro ulje.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.46 (fd, J = 1.5 Hz, 2H), 1.47 (fd, J = 1.2 Hz, 9H), 1.27 (s, 6H).

Korak 4: Reakcija za proizvodnju terc-butil 3-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi )-2,2-dimetilpropanoata (14).

[0332]

[0333] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (463 mg, 2.5 mmol) je rastvoren u THF (25 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (1.5 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (2.8 mL, 2.8 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i smeša je mešana 10 min. Čisti terc-butil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (14b) (0.75 g, 2.8 mmol) je brzo dodat u reakcionu smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 3 mL) i ova sredstva za ispiranje su takođe brzo dodata u smešu. Posle 20 min, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do 23°C. Posle mešanja tokom 70 min, reakcija je završena kao što je utvrđeno pomoću TLC (70% EA/heksani). Smeša je ohlađena do 0°C, razblažena sa EtOAc (50 mL) i ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL). Vodeni i organski slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), vodom (3 × 50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (14) (368 mg, 35% prinos) kao čvrsta supstanca. LC-MS: 422.1 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.50 (s, 1H), 5.85 (s, 1H), 4.66 (d, J = 9 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.04 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.33-3.29 (m, 1H), 3.02 (d, J = 12 Hz, 1H), 2.46-2.39 (m, 1H), 2.17-2.12 (m, 1H), 2.00-1.79 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.23 (s, 3H), 1.21 (s, 3H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.3, 171.1, 167.0, 81.6, 80.9, 62.0, 60.2, 47.2, 43.4, 28.0, 22.2, 21.6, 20.8, 17.6.

Primer 15

Sinteza 2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (15)

[0334]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju 2-metoksietil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (15a).

[0335]

[0336] 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanske kiseline (1.2 g, 10.3 mmol) i Cs2CO3(3.4 g, 10.4 mmol) su suspendovani u DMF (25 mL) na 23°C, zatim je dodat 2-bromoetil metil etar (1.0 mL, 10.4 mmol). Dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Posle hlađenja, smeša je filtrirana kroz jastučić od Celite<®>. Filtrat je razblažen sa EtOAc (150 mL) i smeša je isprana vodom (3 × 100 mL) i fiziološkim rastvorom i zatim osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (1:4 do 4:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (15a) (1.3 g, sirova težina) kao ulje.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.28 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.62 3.55 (m, 4H), 3.38 (s, 3H), 2.65 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.21 (s, 6H).

Korak 2: Reakcija za proizvodnju 2-metoksietil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (15b).

[0337]

[0338] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.2 mL, 2.8 mmol) u Et2O (7.0 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar. Rastvor 2-metoksietil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (15a) (0.48 g, 2.7 mmol) i piridina (0.24 mL, 3.0 mmol) u Et2O (1 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 11 min. Balon je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) koji je takođe dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C do završetka reakcije (praćeno pomoću TLC, 30% EtOAc/heks, 30 min). Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (15b) (0.5 g, 67%) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja [Napomena:<1>HNMR je pokazao željeni proizvod sa ostatkom piridina i zajedno sa početnim materijalom].

Korak 3: Reakcija za proizvodnju 2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (15).

[0339]

[0340] (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (162 mg, 0.9 mmol) rastvoren je u THF (2.5 mL) i 1, 3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (0.3 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (1.0 mL, 1.0 mmol) dodat je ukapavanjem u ohlađeni rastvor i smeša je mešana 10 min.2-Metoksietil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (15b) (0.3 g, 1.1 mmol) u THF (2 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje na 23°C i mešana je 30 min. Smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL) i vodom. Vodeni i organski slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran vodom (3 × 20 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), a zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Sirovi ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (4 g kolona) korišćenjem EtOAc/heksana (3:7 do 1:0) kao eluenta da bi se dobila nečista čvrsta supstanca. Proizvod je rastvoren u Et2O (20 mL) uz pomoć ultrazvučne obrade i istaložen heksanom. Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i osušena pod vakuumom da bi se dobio proizvod (15) (72 mg, 19.4%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 424.3 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (br. s, 1H), 5.56 (br. s, 1H), 4.62 (dd, J = 28.8, 8.7 Hz, 2H), 4.33-4.22 (m, 2H), 4.17 (br. s, 1H), 4.05 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.60 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.33 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.46-2.41 (m, 1H), 2.18-2.13 (m, 1H), 1.98-1.84 (m, 2H), 1.31 (s, 3H), 1.29 (s, 3H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3), δ 174.1, 170.8, 166.9, 80.2, 70.2, 64.1, 61.8, 60.0, 59.0, 47.1, 42.9, 22.1, 21.6, 20.7, 17.4.

Primer 16

Sinteza oksetan-3-il 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (16)

[0341]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju oksetan-3-il 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (16a).

[0342]

[0343] 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanska kiselina (4.7 g, 40 mmol) i Cs2CO3(13.0 g, 40 mmol) su suspendovani u DMF (100 mL) na 23°C, zatim je dodat 3-jodooksetan (7.4 g, 40 mmol). Dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći. Posle hlađenja, smeša je razblažena sa EtOAc (150 mL), i smeša je isprana vodom (3 × 100 mL) i fiziološkim rastvorom i zatim osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana kao eluenta da bi se dobio proizvod (16a) (3.6 g, 51%) kao ulje.

Korak 2: Reakcija za proizvodnju oksetan-3-il 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (16b).

[0344]

[0345] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.2 mL, 2.7 mmol) u Et2O (3 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar. Rastvor oksetan-3-il 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (16a) (0.46 g, 2.6 mmol) i piridina (0.2 mL, 2.7 mmol) u Et2O (2 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 11 min. Balon je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) koji je takođe dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C do završetka (praćeno pomoću TLC, 30% EtOAc/heks, 30 min). Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (16b) (0.5 g, 69%) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 5.50-5.46 (m, 1H), 4.94-4.89 (m, 2H), 4.65-4.60 (m, 2H), 4.52 (s, 2H), 1.72 (br. s, 1H), 1.36 (s, 6H).

Korak 3: Reakcija za proizvodnju oksetan-3-il 3-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (16).

[0346]

[0347] (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (200 mg, 1.1 mmol) rastvoren je u THF (3 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (2 mL), dodat je DMPU, i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi Ar. 1.0 M rastvor NaHMDS u THF (1.2 mL, 1.2 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i smeša je mešana 10 min. Reakcionoj smeši je brzo dodat rastvor oksetan-3-il 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (16b) (0.37 g, 1.4 mmol) u THF (2 mL). Posle mešanja na -78°C tokom 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje na 23°C i mešana je ukupno 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL) i H2O. Vodeni i organski slojevi su podeljeni i organski sloj ispran sa H2O (3 × 20 mL), fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (4 g kolona) korišćenjem EtOAc/heksana (3:7 do 1:0) kao eluenta da bi se dobilo ulje. Ulje je razmućeno sa Et2O uz pomoć ultrazvučne obrade, a filterski kolač je ispran sa Et2O da bi se dobio proizvod (16) (170 mg, 37%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 422.3 [M+H]<+>.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (br. s, 1H), 5.54 (br. s, 1H), 5.48-5.44 (m, 1H), 4.89 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 4.79 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.66- 4.58 (m, 3H), 4.18 (br. s, 1H), 4.05 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.33 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.44-2.42 (m, 1H), 2.20-2.16 (m, 1H), 2.00-1.80 (m, 2H), 1.32 (s, 3H), 1.31 (s, 3H).13C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.4, 170.8, 167.0, 80.0, 68.6, 76.6, 61.9, 60.2, 47.1, 42.7, 21.9, 21.6, 20.7, 17.4.

Primer 17

Sinteza etil 1-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilata (17)

[0348]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil) cikloheksankarboksilata (17a).

[0349]

[0350] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (77 µL, 1,1 mmol) u Et2O (3 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi Ar. Rastvor etil 1-(hidroksimetil)cikloheksankarboksilata (0.2 g, 1.0 mmol) i piridina (85 µL, 1.1 mmol) u Et2O (2 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 11 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 1 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakciju. Smeša je mešana na -78°C do završetka (oko 30 min; praćeno TLC, 30% EtOAc/heks). Talog je filtriran, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez prečišćavanja. Druga serija upotrebom 476 mg početnog alkohola dala je 600 mg proizvoda (17a) (približno, 85% čistoće prema<1>H-NMR).

Korak 2: Reakcija za proizvodnju etil 1-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1] oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilata (17).

[0351]

[0352] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.33 g, 1.8 mmol) je rastvoren u THF (7 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (3,5 mL), a dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi Ar.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (1.8 mL, 1.8 mmol) je dodat ukapavanjem tokom 20 min, i smeša je mešana 10 min. U reakcionu smešu je brzo dodat etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilat (17a) (0.51 g, 1.8 mmol) u THF (2 mL). Posle 10 min mešanja na -78°C smeša je ostavljena da se zagreje na 23°C i mešana je ukupno 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL) i H2O na -60°C. Vodeni i organski slojevi su podeljeni, a organski sloj je ispran sa H2O (3 × 20 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak (330 mg). Ulje je prečišćeno hromatografijom na koloni silika gela (4 g kolona) korišćenjem EtOAc/heksana (3:7 do 1:0) kao eluenta, nakon čega je usledilo prečišćavanje pomoću preparativne HPLC (10-90% MeCN/H2O tokom 20 min korišćenjem UV detekcije na 254/220 nM) da bi se dobio proizvod (17) (223 mg, 34%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 434.3 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.50 (br. s, 1H), 5.80 (br.s, 1H), 4.66 (dd, J = 48.6, 12.8 Hz, 2H), 4.21-4.15 (m, 3H), 4.04 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.31 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 3.01 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.44-2.39 (m, 1H), 2.16-1.78 (m, 5H), 1.57-1.39 (m, 8H), 1.27 (t, J = 7.1 Hz, 3H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.2, 171.0, 167.0, 80.2, 61.8, 61.1, 60.1, 47.1, 30.4, 30.0, 25.4, 22.2, 22.0, 20.7, 17.4, 14.1.

Primer 18

Sinteza etil 1-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklopentan-1-karboksilata (18)

[0353]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil)ciklopentan-1-karboksilata (18a).

[0354]

[0355] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (200 µL, 2,7 mmol) u Et2O (3 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar. Rastvor etil 1-(hidroksimetil)ciklopentankarboksilata (0.48 g, 2.7 mmol) i piridina (222 µL, 2.7 mmol) u Et2O (2 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 7 minuta. Boca je isprana sa Et2O (2 × 1 mL) i oba dela dobijena ispiranjem su dodata u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 1.5 h. Talog je filtriran, a filterkolač ispran sa Et2O (4 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18a) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 2: Reakcija za proizvodnju etil 1-((((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi) metil)ciklopentan-1-karboksilata (18).

[0356]

[0357] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (200 mg, 1.1 mmol) rastvoren je u THF (5 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (2 mL), a dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (1.3 mL, 1.3 mmol. Napomena: pošto sulfonil hlorid sadrži oko 20% početnog alkohola, dodato je dodatnih 0.2 ekv. NaHMDS) tokom 10 minuta. Napomena: reakciona smeša je potopljena i podignuta iz kupatila za hlađenje, da se rastvor promeša, inače je bio gel. U reakcionu smešu je brzo dodat etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil)ciklopentankarboksilat (18a) (0.47 g, 1.7 mmol) u THF (2 × 1 mL). Posle 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje na 23°C i mešana je ukupno 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL) i fiziološkim rastvorom na -60°C. Vodeni i organski slojevi su podeljeni, a organski sloj je osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem EtOAc/heksana (3:7 do 1:0) kao eluenta, praćeno preparativnom HPLC reverzne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18) (62 mg, 14%) kao čvrst. LCMS: m/z = 420.3 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.55 (br. s, 1H), 6.15 (br. s, 1H), 4.69 (dd, J = 20.9, 9.3 Hz, 2H), 4.20-4.10 (m, 3H), 4.02 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.29 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.01 (d, J = 11.7, 1H), 2.40-2.36 (m, 1H), 2.14-1.66 (m, 11 H), 1.24 (t, J = 7.4 Hz, 3H).<13>C-NMR (75 Hz, CDCl3): δ 174.4, 171.2, 167.0, 78.9, 61.8, 61.2, 60.1, 53.0, 47.0, 33.9, 32.9, 25.6, 25.5, 20.7, 17.5, 14.1.

Primer 19

Sinteza etil 1-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklobutankarboksilata (19)

[0358]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil)ciklobutankarboksilata (19a).

[0359] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (451 µL, 6,2 mmol) u Et2O (5 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi Ar. Rastvor etil 1-(hidroksimetil)ciklobutankarboksilata (1.0 g, 6.1 mmol) i piridina (500 µL, 6.2 mmol) u Et2O (10 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 11 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 1 mL), koji je takođe dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C, koja je ostavljena da se zagreje do sobne temperature u roku od 4 h. Talog je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.2 g, 76%) u obliku ulja, koje je direktno korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Beleška:<1>HNMR je pokazao željeni proizvod (19a), zajedno sa početnim materijalom.

Korak 2: Reakcija za proizvodnju etil 1-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklobutankarboksilata (19).

[0360]

[0361] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.33 g, 1.8 mmol) je rastvoren u THF (8 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (2 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. 1.0 M rastvor NaHMDS u THF (2 mL, 2.1 mmol. Napomena: pošto sulfonil hlorid sadrži oko 30% početnog alkohola, dodato je dodatnih 0.3 ekv. NaHMDS) ukapavanjem tokom 10 min. U reakcionu smešu je brzo dodat etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil)ciklobutankarboksilat (19a) (1.0 g, 3.9 mmol) u THF (2 × 1 mL). Posle 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje do 23°C i mešana 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc (40 mL) i H2O na -60°C. Vodeni i organski slojevi su podeljeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ulje je prečišćeno preparativnom HPLC da bi se dobila čvrsta supstanca (303 mg). Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM i filtrirana kroz filter špric, da bi se dobio proizvod (19) (273 mg, 35%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 406.1 [M+H]<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.57 (br. s, 1H), 6.28 (br. s, 1H), 4.85 (dd, J = 63.9, 9.3 Hz, 2H), 4.30-4.13 (m, 3H), 4.01 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.27 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.01 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.50-2.35 (m, 3H), 2.13-1.76 (m, 8H), 1.24 (t, J = 7.3 Hz, 3H).<13>C-NMR (75 MHz, CDCl3): δ173.1, 171.3, 167.2, 77.9, 61.8, 61.2, 60.7, 60.1, 47.0, 46.3, 27.1, 26.1, 20.7, 17.5, 15.6, 14.0.

Primer 20 (samo za referencu)

Sinteza etil 2,2-dimetil-3-((((2S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)propanoata (20)

[0362]

Korak 1: Sinteza (2S,5R)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksilne kiseline (20a).

[0363]

[0364] Rastvor destilovanog sulfuril hlorida (0.61 mL, 7.5 mmol) u Et2O (10 mL) je ohlađen do -78°C pod azotom. Rastvor etil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (2a) (1.0 g, 6.8 mmol) i piridina (0.55 mL, 6.8 mmol) u Et2O (2.0 mL) je zatim dodat ukapavanjem tokom 1 h preko šprica. Reakcija je mešana na -78°C tokom 1 h, a smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je još 2 h. Nakon što je smeša filtrirana, filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (20a) kao bezbojna tečnost (1.46 g, prinos 87%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.50 (s, 2H), 4.19 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 1.31 (s, 6H), 1.28 (t, J = 6.9 Hz, 3H).

Korak 2: Sinteza terc-butil 4-((2S,SR)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (20b).

[0365]

[0366] U smešu (2S,5R)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksilne kiseline (20a) (10 g, 36.2 mmol), terc-butil 4-aminopiperidin-1-karboksilata (7.26 g, 36.2 mmol) u DCM (200 mL) je dodat HATU (13.76 g, 36.2 mmol) i DIPEA (6.31 mL, 36.2 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je isprana zasićenim rastvorom NH4Cl, vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem EtOAc/heksana (1:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (20b) (10.3 g, prinos 62%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.36-7.44 (m, 5H), 6.55 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 5.05 (d, 1H, J = 11.7 Hz), 4.90 (d, 1H, J = 11.1 Hz), 4.02 (br, s, 1H), 3.87-3.99 (m, 2H), 3.29 (s, 1H), 3.01 (d, 1H), 2.85 (t, 2H), 2.64 (d, 1H), 2.37 (dd, 1H), 1.84-2.05 (m, 4H), 1.55-1.67 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.23-1.36 (m, 2H). MS (ESI) C24H34N4O5= 459.1 (M+1)<+>.

Korak 3: Sinteza terc-butil 4-((2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (20c).

[0367]

[0368] U rastvor terc-butil 4-((2S,SR)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (20b) (0.6 g, 1.31 mmol) u MeOH (6 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (0.2 g). Reakciona smeša je mešana pod pritiskom vodonika od 1 atm tokom 1 h. Nakon što je smeša filtrirana kroz jastučić od Celite<®>, filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod (20c) (0.48 g, prinos 100%) koji je korišćen direktno za sledeći korak.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.62 (d, 1H, J = 7.8 Hz), 3.86-4.01 (m, 4H), 3.75 (s, 1H), 3.17 (d, 1H), 2.91 (t, 2H), 2.81 (d, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.13 (m, 1H), 1.88 (m, 4H), 1.74 (m, 1H), 1.45 s, 9H), 1.31 (m, 2H).

Korak 4: Sinteza terc-butil 4-((2S,SR)-6-(((3-etoksi-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (20d).

[0369]

[0370] terc-butil 4-((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilat (20c) (1.31 mmol) rastvoren je u THF (7.0 mL) i 1,3 -dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-on (3 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi azota. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M, 1.31 mL, 1.31 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Zatim je u reakcionu smešu preko šprica dodat rastvor etil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (3a) (352 mg, 1.44 mmol) u THF (1 mL). Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3, vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni upotrebom EtOAc/heksana (1:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (20d) (330 mg, prinos 44%) u vidu bele pene.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.44 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 4.59-4.73 (dd, 2H, J = 8.7 Hz), 3.89-4.23 (m, 7H), 3.28 (d, 1H), 2.83-2.92 (m, 3H), 2.42-2.49 (m, 1H), 2.14-2.17 (m, 1H), 1.80-1.97 (m, 4H), 1.46 (s, 9H), 1.58-1.23 (m, 11H). MS (ESI) C24H40N4O10S = 577 (M+1)<+>.

Korak 5: Sinteza etil 2,2-dimetil-3-((((2S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)propanoata (TFA so) (20).

[0371]

[0372] U smešu terc-butil 4-((2S,SR)-6-(((3-etoksi-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (20d) (240 mg, 0.42 mmol) u DCM (1.4 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (1.4 mL) na -10°C. Reakcija je mešana na -10°C 30 min. LC/MS analiza je pokazala da je navedeni materijal u potpunosti potrošen. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen prep-HPLC na C18 koloni eluiranjem sa MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (5-100%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20) (103 mg, prinos 42%) u obliku prljavo belog praha.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.42 (br s, 1H), 9.06 (br s, 1H), 6.71 (d, 1H, J = 7.8 Hz), 4.57-4.73 (dd, 2H, J= 9.0 Hz), 3.99-4.19 (m, 5H), 3.48 (d, 2H), 3.26 (d, 1H), 3.00 (m, 2H), 2.88 (d, 1H), 1.82-2.39 (m, 7H), 1.23-1.30 (m, 9H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.5, 168.9, 167.3, 80.8, 62.0, 61.6, 60.4, 46.8, 44.9, 43.6, 43.3, 28.7, 22.3, 21.9, 20.9, 18.0, 14.4.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -75.8. MS (ESI) C19H32N4O8S = 477 (M+1)<+>.

[0373] Analitička HPLC je izvedena na Agilent 1200 sistemu korišćenjem Phenomenex<®>C18 kolone (150 × 4.6 mm i.d.). Mobilna faza je bila linearni gradijent MeCN i vode (0.1% TFA, 5% MeCN do 100% MeCN za 15 min). Brzina protoka je održavana na 1 mL/min, a eluent je praćen UV detektorom na 220 i 254 nm. HPLC vreme zadržavanja: 7.31 min.

Primer 21 (samo za referencu)

Sinteza 2-metoksietil 2,2-dimetil-3-((((2S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6diazabiciklo[3.2.1]oktan-6)-il)oksi)sulfonil)oksi)propanoata (21).

[0374]

Korak 1: Sinteza 2-metoksietil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (21a).

[0375]

[0376] Rastvor destilovanog sulfuril hlorida (0.51 mL, 6.2 mmol) u Et2O (10 mL) je ohlađen na -78°C pod azotom. Rastvor 2-metoksietil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (15a) (1.0 g, 5.68 mmol) i piridina (0.46 mL, 5.68 mmol) u Et2O (2.0 mL) je zatim dodavan ukapavanjem tokom 1 h preko šprica. Reakcija je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim je smeša ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 2 h. Nakon što je smeša filtrirana, filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (21a) kao bezbojna tečnost (1.5 g, prinos 96%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.40 (s, 2H), 4.29 (t, 3H), 3.59 (t, 3H), 3.37 (s, 3H), 1.32 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza terc-butil 4-((2S,SR)-6-(((3-(2-metoksietoksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (21b).

[0377]

[0378] terc-Butil 4-((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilat (20c) (3.26 mmol) je rastvoren u THF (14 mL) i 1,3 -dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (6 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi azota. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M, 3.59 mL, 3.59 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Zatim je u reakcionu smešu dodat rastvor 2-metoksietil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (21a) (878 mg, 3.59 mmol) u THF (2 mL) preko šprica. Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3, vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem EtOAc/heksana (1:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (21b) (0.96 g, prinos 48%) u vidu bele pene. MS (ESI) C25H42N4O11S = 607.0 (M+1)<+>.

Korak 3: Sinteza 2-metoksietil 2,2-dimetil-3-(((((2S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)propanoata (TFA so) (21).

[0379]

[0380] U smešu od terc-butil 4-((2S,5R)-6-(((3-(2-metoksietoksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (21b) (0.86 g, 1.42 mmol) u DCM (4.3 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (4.3 mL) na -10°C. Reakciona smeša je mešana na -10°C 30 min. LC/MS analiza je pokazala da je navedeni materijal u potpunosti potrošen. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC na C18 koloni eluiranjem sa MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (5-75%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (21) (513 mg, prinos 58%) kao žuti prah.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.09 (br s, 1H), 8.75 (br s, 1H), 6.83 (d, 1H, J = 7.8 Hz), 4.59-4.71 (dd, 2H, J = 9.3 Hz), 3.99-4.36 (m, 5H), 3.60 (m, 2H), 3.50 (d, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.30 (d, 1H), 3.02 (m, 2H), 2.89 (d, 1H), 1.87-2.40 (m, 7H), 1.25-1.30 (m, 9H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.4, 168.9, 167.4, 80.6, 70.6, 64.5, 62.0, 60.4, 59.3, 46.8, 44.9, 43.6, 43.2, 28.7, 22.4, 21.8, 20.9, 18.0.19F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -75.8. MS (ESI) C20H34N4O9S = 507 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 6.75 min.

Primer 22 (samo za referencu)

Sinteza 4-((2S,5R)-6-(((3-(heksiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-ijum 2,2,2-trifluoroacetata (22).

[0381]

Korak 1: Sinteza heksil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (22a).

[0382]

[0383] Smeša 3-hidroksi-2,2-dimetilpropionske kiseline (4.7 g, 40 mmol), 1-heksanola (70 mL) i koncentrovane sumporne kiseline (ili sumporne kiseline, 1 mL) je zagrejana do 80°C i mešana preko noći. Nakon što je ostavljena da se ohladi, smeša je koncentrovana pod vakuumom (potrebna je pumpa visokog vakuma) i ostatak je zatim podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(100 mL). Vodena faza je isprana sa H2O (50 mL), zasićenim NaHCO3(50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), a zatim osušena preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio proizvod kao ulje. Proizvod je bilo teško prečistiti hromatografijom na silika gelu; i stoga je proizvod destilovan pod visokim vakuumom na 47°C da bi se dobilo 4.92 g čistog estarskog proizvoda (22a) (prinos 61%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.10 (td, J = 6.7, 1.3 Hz, 2H), 3.55 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 2.42 (s, 1H), 1.64 (s, 1H), 1.72-1.56 (m, 1H), 1.35 (s, 1H), 1.31 (s, 6H), 1.27-1.11 (m, 6H), 0.95-0.84 (m, 3H). MS (ESI) C11H22O3= 203 (M+1)<+>.

Korak 2: Sinteza heksil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (22b).

[0384]

[0385] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.60 mL, 7.4 mmol) u Et2O (10 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi N2. Rastvor heksil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (22a) (1.0 g, 4.94 mmol) i piridina (0.48 mL, 5.93 mmol) u Et2O (5 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 20 min. Balon je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C do završetka pomoću TLC (30 min; 30% EA/heksan). Precipitat je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod (22b) u vidu čvrste pene i korišćen je u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.50 (s, 2H), 4.13 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.69-1.60 (m, 2H), 1.40-1.27 (m, 12H), 0.91-0.87 (m, 3H).

Korak 3: Sinteza terc-butil 4-((2S,5R)-6-(((3-(heksiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (22d).

[0386]

[0387] Hidroksaminska kiselina (2.39 mmol) je rastvorena u THF (12 mL) i 1.3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1)H)-onu (3.4 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi N2. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (2.4 mL, 1.0 M, 2.4 mmol) i smeša je mešana 20 min. Čisti heksil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (22b) (0.973 g, 2.64 mmol) je brzo dodat u reakcionu smešu. Špric je ispran sa THF (3 × 4 mL) i ispiranje je takođe dodato u smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana dok se ne završi kao što je određeno TLC i LC-MS. EtOAc (30 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(30 mL) su dodati u smešu. Slojevi su podeljeni, a organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(30 mL), vodom (3 × 20 mL) i fiziološkim rastvorom (30 mL), a zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se ostavio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta, nakon čega je usledila tečna hromatografija visokih performansi da bi se dobio proizvod (22d) (740 mg, prinos 49% za 3 koraka) kao čvrsta pena.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6.43 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.76-4.64 (m, 1H), 4.60 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.19-4.03 (m, 5H), 3.98 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.28 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.90 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 2.45 (dd, J = 14.8, 6.2 Hz, 1H), 2.14 (s, 1H), 1.97-1.84 (m, 3H), 1.62 (q, J = 7.0 Hz, 11H), 1.46 (s, 9H), 1.34-1.19 (m, 14H), 0.88 (d, J = 7.0 Hz, 3H). MS (ESI) C28H48N4O10S = 633 (M+1)<+>.

Korak 4: Sinteza 4-((2S,5R)-6-(((3-(heksiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-ijum 2,2,2-trifluoroacetata (22).

[0389] terc-Butil 4-((2S,5R)-6-(((3-(heksiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilat (22d) (300 mg, 0.474 mmol) je rastvoren u DCM (2 mL) i ohlađen do -10°C. U rastvor je dodat TFA (2 mL) u kapima. Reakcija je praćena pomoću LCMS ili TLC do završetka (oko 10 min). Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je prečišćen upotrebom prep-HPLC sa MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (20-100%) kao eluent da bi se, posle liofilizacije, dobilo jedinjenje iz naslova (22) (212.4 mg, prinos 84%) u vidu pene.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.08 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 6.88 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.70-4.51 (m, 2H), 4.23-3.92 (m, 6H), 3.47 (d, J = 12.6 Hz, 2H), 3.31-3.19 (m, 1H), 2.95 (dd, J = 19.6, 11.0 Hz, 3H), 2.34 (dd, J = 15.0, 6.2 Hz, 1H), 2.10 (s, 2H), 1.91 (ddd, J = 15.8, 12.6, 8.0 Hz, 1H), 1.61 (ddd, J = 12.5, 8.1, 6.3 Hz, 3H), 1.40-1.16 (m, 14H), 0.91-0.80 (m, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 174.2, 168.6, 167.1, 80.4, 65.5, 61.7, 60.1, 46.6, 44.7, 43.3, 42.9, 42.9, 31.4, 31.4, 28.5, 25.6, 25.5, 22.2, 22.2, 21.6, 20.7, 17.8, 14.0.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -75.6. MS (ESI) C23H40N4O8S = 533 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 8.18 min.

Primer 23 (samo za referencu)

Sinteza 4-((2S,5R)-6-(((3-(heptiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3,2,1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-ijum 2,2,2-trifluoroacetata (23)

[0390]

Korak 1: Sinteza heptil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (23a).

[0391]

[0392] Smeša 3-hidroksi-2,2-dimetilpropionske kiseline (4.7 g, 40 mmol), 1-heptanola (70 mL) i koncentrovane sumporne kiseline (1 mL) je zagrevana do 80°C i mešana preko noći. Nakon što je ostavljena da se ohladi, smeša je koncentrovana pod vakuumom (potrebna je pumpa visokog vakuma) i ostatak je podeljen između EtOAc (100 mL) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(100 mL). Vodena faza je isprana sa H2O (50 mL), zasićenim NaHCO3(50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), a zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod kao ulje. Proizvod je destilovan pod visokim vakuumom na 65°C da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23a) kao ulje (6.7 g, 77% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.09 (td, J = 6.7, 0.9 Hz, 2H), 3.55 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 2.43 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 1.60 (d, J = 22.8 Hz, 4H), 1.3-1.58 (m, 6H), 1.27-1.14 (m, 6H), 0.92-0.83 (m, 3H).

Korak 2: Sinteza heptil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (23b)

[0393]

[0394] Rastvor sulfuril hlorida (0.6 mL, 7.4 mmol) u Et2O (15 mL) je ohlađen na -78°C u atmosferi N2. Rastvor heptil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (23a) (1.0 g, 4.94 mmol) i piridina (479 µL, 5.93 mmol) u Et2O (1 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 30 min. Balon je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana do -78°C do završetka kao što je praćeno TLC (30 min; 30% EA/heksan). Talog je filtriran, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio heptil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (23b) (1.37 g, prinos 92%). Smeša je čuvana na -78°C i korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.50 (s, 2H), 4.20-4.02 (m, 2H), 1.68 (m, 2H), 1.31 (d, J = 3.1 Hz, 13H), 1.23 (s, 1H), 0.95-0.83 (m, 3H).

Korak 3: Sinteza terc-butil 4-((2S,5R)-6-(((3-(heptiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (23c).

[0396] Hidroksaminska kiselina (1) (2.399 mmol, iz hidrogenizacije, bez daljeg prečišćavanja) rastvorena je u THF (12 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1)H)-onu (3 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen na -78°C u atmosferi azota. 1.0 M rastvor NaHMDS u THF (2.4 mL, 2.4 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 20 min. U reakcionu smešu je brzo dodat heptil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (23b) (0.79 g, 2.63 mmol) u THF (5 mL). Špric je ispran sa THF (3 × 2 mL) i deo dobijen ispiranjem je takođe dodat u smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana do završetka, kao što je određeno pomoću TLC i LC-MS. EtOAc (50 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL) su dodati u smešu. Vodeni i organski slojevi su podeljeni, a organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL), vodom (3 × 10 mL), fiziološkim rastvorom (20 mL), a zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni koristeći EtOAc/heksan (5% do 95%) kao eluent, da bi se dobilo 740.0 mg (49% prinos) proizvoda (23c).

Korak 4: Sinteza 4-((2S,5R)-6-(((3-(heptiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-ijum 2,2,2-trifluoroacetata (23).

[0397]

[0398] terc-butil 4-((2S,5R)-6-(((3-(heptiloksi)-2,2-dimetil-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilat (23c) (472.1 mg, 0.73 mmol) rastvoren u DCM (5 mL) je ohlađen do -10°C, u šta je dodavan TFA (5 mL) u kapima. Nakon završetka, rastvarač je isparavan u vakuumu, a ostatak je prečišćen prep-HPLC primenom MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (20-100%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23) (390 mg, 81% prinos) u vidu čvrste pene.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.93 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 8.62 (s, 1H), 6.90 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.70-4.51 (m, 2H), 4.18-3.92 (m, 6H), 3.48 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 3.26 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.98 (dt, J = 24.4, 11.7 Hz, 3H), 2.34 (dd, J = 15.1, 6.3 Hz, 1H), 2.10 (s, 2H), 1.60 (h, J = 6.6 Hz, 3H), 1.24 (q, J = 11.1, 9.8 Hz, 18H), 0.90 - 0.79 (m, 4H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 174.2, 168.6, 167.1, 80.3, 73.9, 65.4, 61.6, 60.1, 46.5, 44.6, 43.4, 42.8, 42.8, 31.6, 28.8, 28.4, 28.3, 25.8, 25.7, 22.5, 22.1, 22.1, 21.5, 20.6, 17.8, 14.0.

<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -75.7. MS (ESI) C24H42N4O8S = 547 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O in 0.1% TFA): 9.59 min.

Primer 24 (samo za referencu)

Sinteza 4-((2S,5R)-6-((((1-(etoksikarbonil)cikloheksil)metoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-ijum 2,2,2-trifluoroacetata (24)

[0399]

Korak 1: Sinteza etil 1-(hidroksimetil)cikloheksankarboksilata (24a).

[0400]

[0401] Dietil cikloheksan-1,1-dikarboksilat (2.12 g, 9.29 mmol) je rastvoren u THF (50 mL) i u njega je dodat LiAl(OtBu)3(5.9 g, 23.2 mmol) u porcijama. Reakciona smeša je mešana na refluksu preko noći. Reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu i pažljivo tretirana sa 10% vodenim rastvorom KHSO4(30 mL) uz mešanje 10 min. Formirani talog je filtriran kroz sloj Celite<®>. Filtrat je ekstrahovan sa EtOAc (3 × 40 mL), a organska faza je kombinovana i isprana fiziološkim rastvorom (50 mL), osušena preko NaSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen sa CombiFlash (SiO2) u 0-5% MeOH/DCM da bi se dobio željeni proizvod (24) kao ulje (1.23 g, 71% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.19 (qd, J = 7.1, 0.8 Hz, 2H), 3.62 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.46 (s, 1H), 2.00 (dt, J = 11.5, 6.4 Hz, 4H), 1.57-1.22 (m, 9H).

Korak 2: Sinteza etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilata (24b).

[0402]

[0403] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (294 µL, 3.63 mmol) u Et2O (10 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi azota. Rastvor etil 1-(hidroksimetil)cikloheksankarboksilata (24a) (0.615 g, 3.3 mmol) i piridina (294 µL, 3.63 mmol) u Et2O (6 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Balon je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) i deo dobijen ispiranjem je dodat u reakciju. Smeša je mešana na -78°C do završetka (oko 30 min; praćeno TLC, 30% EtOAc/heksan). Talog je filtriran, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (24b) kao ulje, 0.94 g u kvantitativnom prinosu, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez prečišćavanja.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.52 (s, 2H), 4.21 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.04 (s, 2H), 1.53-1.39 (m, 8H), 1.39-1.21 (m, 3H).

Korak 3: Sinteza terc-Butil 4-((2S,5R)-6-((((1-(etoksikarbonil)cikloheksil)metoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (24c).

[0404]

[0405] Hidroksaminska kiselina (2.73 mmol) je rastvorena u THF (14 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (7 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi azota. 1.0 M rastvor NaHMDS u THF (2.73 mL, 2.73 mmol) je dodat ukapavanjem tokom 20 min, i smeša je mešana 10 min. U reakcionu smešu je brzo dodat etil 1(((hlorosulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilat (24b) (0.94 g, 3.3 mmol) u THF (2 mL). Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (60 mL) i H2O na -60°C. Vodeni i organski slojevi su podeljeni, a organski sloj je ispran sa H2O (3 × 30 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL), zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak (330 mg). Ulje je prečišćeno hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem EtOAc/heksana (3:7 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (24c) (0.98 g, prinos 59%) kao čvrsta supstanca.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.43 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.75 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.59 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.28-4.05 (m, 5H), 4.04-3.90 (m, 3H), 2.87 (t, J = 12.4 Hz, 3H), 2.45 (dd, J = 15.0, 5.7 Hz, 1H), 2.08-1.84 (m, 4H), 1.56 (d, J= 10.6 Hz, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.46-1.34 (m, 5H), 1.37-1.20 (m, 8H). MS (ESI) C27H44N4O10S: 617 (M+H)<+>.

Korak 4: 4-((2S,5R)-6-((((1-(etoksikarbonil)cikloheksil)metoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-ijum 2,2,2-trifluoroacetat (24).

[0406]

[0407] terc-butil 4-((2S,5R)-6-(((1-(etoksikarbonil)cikloheksil)metoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilat (24c) (403.3 mg, 0.65 mmol) rastvoren u DCM (4 mL) je hlađen do -10°C (slano ledeno kupatilo) kome je dodavan TFA (4 mL) u kapima. Reakcija je praćena pomoću LCMS. Posle 30 minuta, bila je završena. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC u MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (20-100%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (24) (263.7 mg, prinos 78%) u vidu čvrste pene.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.02 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 8.66 (s, 1H), 6.87 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.54 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.16 (dtd, J= 12.9, 6.7, 6.3, 3.1 Hz, 4H), 4.00 (q, J= 8.7, 7.2 Hz, 3H), 3.47 (d, J = 12.3 Hz, 2H), 3.26 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.95 (dd, J = 25.8, 11.9 Hz, 3H), 2.35 (dd, J = 15.3, 6.3 Hz, 1H), 2.11 (t, J = 10.3 Hz, 4H), 1.99 (s, 2H), 2.08-1.87 (m, 2H), 1.89-1.72 (m, 4H), 1.54 (d, J = 8.0 Hz, 5H), 1.25 (dd, J = 14.4, 3.8 Hz, 2H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 173.2, 168.5, 167.0, 80.2, 61.7, 61.1, 60.0, 47.0, 46.6, 44.6, 43.3, 30.4, 29.9, 28.3, 25.3, 22.4, 22.2, 22.0, 20.6, 17.7, 14.1.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -75.7. MS (ESI) C22H36N4O8S = 517 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 8.15 min.

Primer 25 (samo za referencu)

Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 2,2-dimetil-3-(((((2)S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)propanoata (25)

[0408]

Korak 1: Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (25a).

[0409]

[0410] U mešani rastvor 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanske kiseline (4.0 g, 33.9 mmol) i kalijum karbonata (4.68 g, 33.9 mmol) u DMF (45 mL) na 0°C dodat je 4-(hidroksimetil)-5-metil-1,3-dioksol-2-on (5.03 g, 33.9 mmol) u DMF (5 mL) ukapavanjem tokom 1 h. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem EtOAc/heksana (1:4 do 2:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (25a) kao žuta tečnost (1.6 g, prinos 21%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.86 (s, 2H), 3.58 (s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.20 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (25b).

[0411] Rastvor destilovanog sulfuril hlorida (0.61 mL, 7.53 mmol) u Et2O (15 mL) je hlađen do -78°C pod azotom. Dodat je rastvor (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (25a) (1.48 g, 6.43 mmol) u Et2O (1 mL). Zatim je dodat rastvor piridina (0.55 mL, 6.86 mmol) u Et2O (1 mL) tokom perioda od 1 h. Reakcija je mešana na -78°C tokom 1 h. Nakon što je smeša filtrirana, filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (25b) kao žuto ulje (1.6 g, prinos 76%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.90 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.33 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza terc-butil 4-((2S,5R)-6-(((2,2-dimetil-3-((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi)-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (25c).

[0412]

[0413] terc-Butil 4-((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilat (20c) (2.18 mmol) je rastvoren u THF (14 mL) i 1,3 -dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-on (6 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C pod azotom. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M, 2.62 mL, 2.62 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Rastvor (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (25b) (106b) (0.86 g, 2.62 mmol) u THF (1 mL) je zatim dodat u reakcionu smešu preko šprica. Posle mešanja od 1 h na -78°C, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3, vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem EtOAc/heksana (1:3 do 1:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (25c) kao žuta pasta (0.44 g, prinos 31%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.73 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 4.78-4.98 (m, 3H), 4.47 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 3.93-4.15 (m, 5H), 3.27 (d, 1H), 2.83-2.92 (m, 3H), 2.41-2.45 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.15 (m, 1H), 1.78-1.92 (m, 4H), 1.45 (s, 9H), 1.23-1.58 (m, 8H). MS (ESI) C27H40N4O13S = 661 (M+1)<+>.

Korak 5: Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 2,2-dimetil-3-(((((2S,SR)-7-okso-2(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)propanoata (TFA so) (25).

[0414]

[0415] U rastvor terc-butil 4-((2S,5R)-6-(((2,2-dimetil-3-((5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metoksi)-3-oksopropoksi)sulfonil)oksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (25c) (100 mg, 0.15 mmol) u DCM (3 mL) dodata je trifluorosirćetna kiselina (0.4 mL) na -10°C. Reakcija je mešana na -10°C 1 h. LC/MS analiza je pokazala da je navedeni materijal potrošen. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC na C18 koloni eluiranjem korišćenjem MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (5-80%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25) u obliku prljavobelog praha (55.2 mg, prinos 55%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.43 (br s, 1H), 9.05 (br s, 1H), 7.14 (d, 1H, J = 6.9 Hz), 4.99 (d, 1H, J = 13.5 Hz), 4.95 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 4.78 (d, 1H, J = 14.1 Hz), 4.41 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 4.14 (s, 1H), 4.06 (m, 1H), 3.98 (d, 1H, J = 6.3 Hz), 3.47 (d, 2H), 3.29 (d, 1H), 3.04 (m, 2H), 2.86 (d, 1H), 1.82-2.40 (m, 11H), 1.29-1.33 (ds, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.9, 169.1, 167.3, 152.9, 141.0, 133.7, 80.3, 62.0, 60.4, 54.8, 46.8, 44.7, 43.4, 43.3, 28.5, 22.3, 22.0, 20.8, 18.0, 9.6.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -75.9. MS (ESI) C22H32N4O11S = 561 (M+1)<+>.

[0416] Analitička HPLC je izvedena na sistemu Agilent 1200 koristeći Phenomenex<®>C18 kolonu (150 × 4.6 mm i.d.). Mobilna faza je bila linearni gradijent MeCN i vode (0.1% TFA, 5% MeCN do 100% MeCN za 15 min). Brzina protoka je održavana na 1 mL/min, a eluent je praćen UV detektorom na 220 nm i 254 nm. HPLC vreme zadržavanja: 7.25 min.

Primer 26 (samo za referencu)

Sinteza (2S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfata (26)

[0417]

Korak 1: Sinteza tetrabutilamonijum (2S,5R)-2-((1-(terc-butoksikarbonil)piperidin-4-il)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il sulfata (26a).

[0418]

[0419] U rastvor terc-butil 4-((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)piperidin-1-karboksilata (20c) (1.92 g, 5.21 mmol) u DCM (30 mL) je dodat trietilamin (3 mL) i kompleks piridin-sumpor trioksid (3.34 g, 21.0 mmol). Reakcija je mešana na 35°C preko noći. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je mešan sa 0.5 N vodenim rastvorom kalijum dihidrogen fosfata (30 mL) tokom 1 h. Dobijeni rastvor je ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovani organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobila trietilamin so (2S,5R)-2-((1-(terc-butoksikarbonil)piperidin-4-il)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il sulfat (26a) (2.3 g, prinos 80%).

[0420] U rastvor gornjeg proizvoda (26a) (2.2 g, 4.0 mmol) u DCM (30 mL) dodat je 0.5 N vodeni rastvor dikalijum hidrogen fosfata (12.4 mL) na 0°C. Posle mešanja na 0°C tokom 10 min, dodat je tetrabutil amonijum hidrogen sulfat (1.49 g, 4.4 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon što je organski sloj odvojen, vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovani organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem 10% MeOH u DCM kao eluenta da bi se dobio proizvod (26a) (1.35 g, prinos 49%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.55 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 4.33 (br s, 1H), 4.03 (m, 2H), 3.91-3.95 (m, 1H), 3.86 (d, 1H), 3.48 (m, 1H), 3.25-3.31 (m, 10H), 2.85 (m, 2H), 2.73 (d, 1H), 2.39 (dd, 1H), 2.13 (m, 1H), 1.81-1.92 (m, 4H), 1.60-1.71 (m, 11H), 1.29-1.50 (m, 14H), 1.00 (t, 12H). MS (ESI) C17H28N4O8S = 446.9 (M-1)<+>.

Korak 2: Sinteza (2S,5R)-7-okso-2-(piperidin-4-ilkarbamoil)-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfata (26).

[0421]

[0422] U rastvor tetrabutilamonijum (2S,5R)-2-((1-(terc-butoksikarbonil)piperidin-4-il)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il sulfata (26a) (1.35 g, 1.96 mmol) u DCM (15 mL) na - 10°C je dodat TFA (15 mL). Nakon što je početni materijal utrošen kako je naznačeno LC/MS, smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je mešan sa dietil etrom da bi se dobio precipitat. Čvrsta supstanca je filtrirana, i isprana dva puta acetonom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26) kao beličasta čvrsta supstanca (0.56 g, prinos 82%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.30 (br s, 2H), 8.21 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 3.97 (s, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.71 (d, 1H), 3.25 (m, 2H), 2.97 (m, 4H), 2.06 (m, 1H), 1.83 (m, 3H), 1.64 (m, 4H).<13>C NMR (75 MHz, DMSO-d6): 169.5, 166.7, 59.6, 58.0, 46.7, 43.9, 42.5, 28.0, 20.6, 18.6. MS (ESI) C12H20N4O6S = 346.9 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 1.60 min.

Primer 27 (samo za referencu)

Sinteza etil 3-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (27).

[0423]

Korak 1: Sinteza N-(2-terc-Boc-aminoetoksi)ftalimida (27a).

[0424]

[0425] U smešu terc-butil (2-bromoetil)karbamata (5.0 g, 22.3 mmol) i N-hidroksiftalimida (3.64 g, 22.3 mmol) u acetonitrilu (80 mL) na sobnoj temperaturi je dodat trietilamin (7.46 mL, 53.5 mmol). Reakcija je mešana na 70°C tokom 20 h i zatim je koncentrovana. Smeša je razblažena sa etil acetatom i isprana intenzivno sa 1 N HCl, zasićenim NaHCO3, i vodom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran, i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod (27a) kao beličasta čvrsta supstanca (3.8 g, prinos 56%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.76-7.87-4.90 (m, 4H), 5.65 (m, 1H), 4.25 (t, 3H), 3.44 (t, 3H), 1.46 (s, 9H).

Korak 2: Sinteza terc-butil (2-(aminooksi)etil)karbamata (27b).

[0426]

[0427] U rastvor N-(2-terc-Boc-aminoetoksi)ftalimida (27a) (3.8 g, 12.4 mmol) u EtOH (38 mL) na sobnoj temperaturi je dodat hidrazin monohidrat (0.63 mL, 13.0 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Smeša je filtrirana i isprana etil acetatom. Filtrat je koncentrovan i nastala je bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je uklonjena filtracijom i isprana etil acetatom. Ovaj postupak je ponovljen još tri puta. Kombinovani filtrat je zatim koncentrovan da bi se dobio proizvod (27b) kao žuta pasta (2.16 g, prinos 99%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 5.46 (br s, 2H), 4.91 (br s, 1H), 3.70 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 1.44 (s, 9H). Korak 3: Sinteza terc-butil (2-(((2S,5R)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamata (27c).

[0429] U smešu (2S,5R)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksilne kiseline (20a) (3.19 g, 11.6 mmol), terc-butil (2-(aminooksi)etil)karbamata (27b) (2.06 g, 11.7 mmol) u DCM (20 mL) je dodat HATU (4.39 g, 11.6 mmol) i DIPEA (2.02 mL, 11.6 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je isprana zasićenim rastvorom NH4Cl, vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni upotrebom EtOAc/heksana (1:1 do 3:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (27c) kao bela pasta (4.0 g, prinos 79%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.46 (br, s, 1H), 7.26-7.43 (m, 5H), 5.46 (t, 1H), 4.80-5.10 (dd, 2H, J = 11.1 Hz), 2.75-3.97 (m, 8H), 1.61-2.33 (m.4H), 1.43 (t, 9H). MS (ESI) C21H30N4O6= 435 (M+1)<+>.

Korak 4: Sinteza terc-butil (2-(((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamata (27d).

[0430]

[0431] U rastvor terc-butil (2-(((2S,5R)-6-(benziloksi)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamata (27c) (1.0 g, 2.30 mmol) u MeOH (10 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (0.3 g). Reakciona smeša je mešana pod pritiskom vodonika od 1 atm tokom 1 h. Nakon što je smeša filtrirana kroz jastučić od Celite<®>, filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod (27d) (0.79 g, prinos 100%) koji je direktno korišćen u sledećem koraku.

Korak 5: Sinteza etil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo [3.2.1] oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (27e).

[0433] terc-Butil (2-(((2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamat (27d) (0.79 g, 2.30 mmol) je rastvoren u THF (14 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (6 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi azota. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M, 3.45 mL, 3.45 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Zatim je u reakcionu smešu dodat rastvor etil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (3a) (675 mg, 2.76 mmol) u THF (2 mL) preko šprica. Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3, vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (1:1 do 3:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (27e) kao sivkasto bela pena (0.68 g, prinos 54%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.60 (br, s, 1H), 5.27 (br, t, 1H), 4.58-4.73 (dd, 2H, J = 9.3 Hz), 3.02-4.22 (m, 10H), 1.62-2.40 (m.4H), 1.44 (t, 9H), 1.26-1.28 (m, 9H). MS (ESI) C21H36N4O11S = 553 (M+1)<+>.

Korak 6: Sinteza etil 3-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (27).

[0434]

[0435] U smešu etil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (27e) (340 mg, 0.62 mmol) u DCM (4 mL) dodata je trifluorosirćetna kiselina (4 mL) na -10°C. Reakciona smeša je mešana na -10°C 30 min. LC/MS analiza je pokazala da je početni materijal u potpunosti potrošen. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC na C18 koloni eluiranjem sa MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (5-80%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (27) u obliku prljavo bele pene (243 mg, prinos 72%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.10 (br s, 3H), 4.52-4.67 (dd, 2H, J = 9.3 Hz), 3.12-4.21 (m, 10H), 1.93-2.23 (m, 4H), 1.19-1.29 (m, 9H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.7, 169.5, 167.6, 80.8, 73.0, 61.7, 60.7, 60.2, 46.5, 43.1, 38.5, 22.3, 21.9, 20.6, 18.5, 14.3.

<19>F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -75.6. MS (ESI) C16H28N4O9S = 453 (M+1)<+>.

[0436] Analitička HPLC je izvedena upotrebom Agilent 1200 sistema sa Phenomenex<®>C18 kolone (150 × 4.6 mm i.d.). Mobilna faza je bila linearni gradijent MeCN i vode (0.1% TFA, 5% MeCN do 100% MeCN za 15 min). Brzina protoka je održavana na 1 mL/min, a eluent je praćen UV detektorom na 220 nm i na 254 nm. HPLC vreme zadržavanja: 7.10 min.

Primer 28 (samo za referencu)

Sinteza 2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (28)

[0437]

Korak 1: Sinteza 2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (28a).

[0438]

[0439] terc-butil (2-(((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamat (27d) (0.79 g, 2.30 mmol) je rastvoren u THF (14 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (6 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi azota. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M, 2.76 mL, 2.76 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Zatim je u reakcionu smešu dodat rastvor 2-metoksietil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (15b) (758 mg, 2.76 mmol) u THF (2 mL) preko šprica. Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim NaHCO3, vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni upotrebom EtOAc/heksana (1:1 do 3:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (28a) u vidu bele pene (0.65 g, prinos 49%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.60 (br, s, 1H), 5.30 (br, t, 1H), 4.60-4.72 (dd, 2H, J = 8.7 Hz), 3.02-4.22 (m, 15H), 1.62-2.40 (m. 4H), 1.45 (t, 9H), 1.21-1.30 (m, 6H). MS (ESI) C22H38N4O12S = 583 (M+1)<+>.

Korak 2: Sinteza 2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (28).

[0440]

[0441] U smešu 2-metoksietil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (28a) (0.33 g, 0.57 mmol) u DCM (4 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (4 mL) na -10°C. Reakcija je mešana na -10°C 30 min. LC/MS analiza je pokazala da je navedeni materijal u potpunosti potrošen. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC na C18 koloni eluiranjem upotrebom MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (5-80%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (28) u vidu sivobele pene (128 mg, prinos 39%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.10 (br s, 3H), 4.53-4.68 (dd, 2H, J = 8.7 Hz), 3.11-4.21 (m, 15H), 1.96-2.23 (m, 4H), 1.28 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.6, 169.5, 167.6, 80.6, 72.9, 70.6, 64.5, 60.6, 60.1, 59.2, 46.5, 43.2, 38.4, 22.2, 21.9, 20.5, 18.5.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3): δ 75.6.

MS (ESI) C17H30N4O10S = 483 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 6.59 min.

Primer 29 (samo za referencu)

Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((2)S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat TFA soli (29)

[0442]

Korak 1: Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((2)S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (29a).

[0443]

[0444] terc-Butil (2-(((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamat (27d) (0.80 g, 2.32 mmol) je rastvoren u THF (23 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (3.3 mL) i dobijeni rastvor je hlađen na -78°C u atmosferi azota. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M, 2.32 mL, 2.32 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Rastvor (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (25b) (916 mg, 2.8 mmol) u THF (2 mL) je zatim dodat u reakcionu smešu preko šprica. Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0-99%) kao eluenta da bi se dobio proizvod (29a) kao beličasta pena (399.8 mg, prinos 27%).<1>H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ 9.75 (s, 1H), 5.37 (s, 1H), 5.30 (d, J = 0.7 Hz, 2H), 5.00 - 4.76 (m, 2H), 4.46 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.16 - 4.00 (m, 2H), 3.94 (s, 4H), 3.42 (s, 2H), 3.38 - 3.26 (m, 4H), 3.03 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 2.19 (s, 6H), 2.16 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.02 (d, J = 14.0 Hz, 3H), 1.92 (s, 2H), 1.56 (m, 1H), 1.48 - 1.41 (m, 9H), 1.41 - 1.20 (m, 6H). MS (ESI) C24H36N4O14S: 637 (M+1)<+>.

Korak 2: Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((2)S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3 2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat TFA soli (29)

[0445]

[0446] U smešu (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (29a) (0.33 g, 0.52 mmol) u DCM (3 mL) dodata je trifluorosirćetna kiselina (0.3 mL) na -10°C. Reakcija je mešana na -10°C tokom 4 h. LC/MS analiza je pokazala da je navedeni materijal u potpunosti potrošen. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću prep-HPLC na C18 koloni eluiranjem upotrebom MeCN/H2O koji sadrži 0.1% TFA (0-80%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29) kao sivobela pena (9.1 mg, prinos 3.2%).<1>H NMR (300 MHz, MeCN-d3): δ 7.61 (s, 1H), 4.97 - 4.83 (m, 3H), 4.74 - 4.60 (m, 1H), 4.55 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.24 -4.00 (m, 2H), 3.94 - 3.83 (m, 1H), 3.73 - 3.62 (m, 2H), 3.29 (d, J = 12.3 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.15 (dq, J = 1.3, 0.6 Hz, 3H), 1.93 (s, 1H), 1.39 - 1.07 (m, 8H).<19>F NMR (282 MHz, MeCN-d3): δ -76.1, -76.3. MS (ESI) C19H28N4O12S: 537 (M+1)<+>

Primer 30 (samo za referencu)

Sinteza heksil 3-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat TFA soli (30)

[0447]

Korak 1: Sinteza heksil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (30a).

[0448]

[0449] terc-Butil (2-(((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamat (27d) (0.51 g, 1.48 mmol) je rastvoren u THF (18 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (2.8 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi azota. Ukapavanjem je dodat rastvor NaHMDS u THF (1M, 1.9 mL, 1.9 mmol) i smeša je mešana na -78°C 10 min. Zatim je u reakcionu smešu dodat rastvor heksil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (730 mg, 2.42 mmol) u THF (2 mL) preko šprica. Posle 10 min na -78°C, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen sa anhidrovanim Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0-99%) kao eluenta da bi se dobio proizvod (30a) kao beličasta pena (194.3 mg, prinos 22%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.54 (s, 1H), 5.26 (s, 1H), 4.60 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.21-4.02 (m, 7H), 3.46 (d, J = 16.3 Hz, 1H), 3.31 (s, 2H), 3.03 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.39 (dd, J = 14.9, 6.3 Hz, 1H), 2.19 (s, 1H), 2.08-1.89 (m, 2H), 1.65-1.55 (m, 2H), 1.45 (s, 10H), 1.35-1.19 (m, 10H), 0.94-0.79 (m, 3H). MS (ESI) C25H44N4O11S: 607 (M-1)<+>.

Korak 2: Sinteza heksil 3-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat TFA soli (30).

[0450]

[0451] U rastvor heksil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (30a) (144.3 mg, 0.237 mmol) u DCM (3 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (0.15 mL) na 0°C. Reakcija je mešana na 0°C tokom 1 h. LC/MS analiza je pokazala da je navedeni materijal u potpunosti potrošen. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen prep-HPLC na C18 koloni eluiranjem upotrebom MeCN/H2O koji sadrži 01% TFA (0-80%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (30) kao smeđe ulje (68.1 mg, prinos 56%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.80-7.73 (m, 2H), 6.94 (s, 1H), 4.57 (dt, J = 28.2, 14.1 Hz, 2H), 4.22 (s, 1H), 4.08 (ddt, J = 17.3, 13.2, 8.0 Hz, 6H), 3.96 (s, 2H), 3.28 (d, J = 10.2 Hz, 2H), 2.10 (s, 1H), 1.93 (s, 1H), 1.62 (m, 2H), 1.28 (ddd, J = 12.8, 6.5, 3.7 Hz, 12H), 1.19 (s, 2H), 0.94-0.82 (m, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 176.6, 174.3, 169.2, 167.3, 161.6, 118.2, 114.3, 80.4, 73.7, 72.6, 65.5, 65.3, 60.3, 59.9, 46.3, 42.9, 42.8, 38.4, 31.4, 28.4, 28.3, 25.5, 25.5, 22.5, 22.1, 22.0, 21.6, 20.3, 18.2, 14.0.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -75.8. MS (ESI) C20H36N4O9S: 509 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 8.96 min.

Primer 31 (samo za referencu)

Sinteza heptil 3-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat TFA soli (31).

[0452]

Korak 1: Sinteza heptil 3-(((((2S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (31a).

[0453]

[0454] Postupak sličan onom iz Koraka 1 Primera 30 je korišćen da se dobije 274.0 mg naslovnog jedinjenja (31a) (44% prinos) u obliku čvrste supstance bele boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.75 (s, 1H), 5.37 (t, J = 6.2 Hz, 1H), 4.72-4.52 (m, 2H), 4.09 (dddd, J = 18.6, 10.4, 3.8, 2.1 Hz, 3H), 3.91 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.51-3.19 (m, 3H), 3.05 (d, J= 12.1 Hz, 1H), 2.43-2.29 (m, 1H), 2.21-2.07 (m, 1H), 2.06-1.77 (m, 3H), 1.62 (t, J = 6.9 Hz, 2H),1.40 (s, 9H), 1.40-1.17 (m, 16H), 0.92-0.81 (m, 3H). MS (ESI) C26H46N4O11S: 523 (M+1-Boc)<+>.

Korak 2: Sinteza heptil 3-(((((2S,SR)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat TFA soli (31).

[0455]

[0456] Postupak sličan onom iz Koraka 2 Primera 30 je korišćen za dobijanje naslovnog jedinjenja (31) (214.5 mg, 93%) kao braon ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.61 (s, 1H), 8.02 (s, 3H), 4.63 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 13.3 Hz, 3H), 4.12-3.97 (m, 4H), 3.95 (s, 1H), 3.26 (s, 3H), 3.18-3.08 (m, 1H), 2.22 (s, 1H), 2.10 (s, 1H), 1.61 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 1.25 (m, 12H), 1.18 (s, 2H), 0.87 (m, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 176.5, 174.3, 169.1, 167.3, 80.3, 73.7, 72.6, 65.5, 65.3, 60.3, 59.9, 46.3, 42.9, 42.8, 38.3, 31.7, 31.7, 28.9, 28.9, 28.4, 25.8, 25.8, 22.6, 22.1, 22.0, 22.0, 21.6, 20.3, 18.3, 14.0.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -75.71. MS (ESI) C21H38N4O9S: 523 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 9.37 min.

Primer 32 (samo za referencu)

Sinteza etil 1-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilat TFA soli (32)

[0457]

Korak 1: Sinteza etil 1-(((((2S,5R)-2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo [32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilata (32a).

[0458]

[0459] Postupak sličan onom iz Koraka 1 Primera 30 primenjen je za kuplovanje između tercbutil (2-(((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamata i etil 1-(((hlorosulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilata (27d) da bi se dobilo 122.2 mg naslovnog jedinjenja (32a) (14% prinos za 3 koraka as) bele čvrste supstance.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 9.92 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.46 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.24-3.98 (m, 5H), 3.88 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.37 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.25 (dt, J = 10.1, 5.1 Hz, 2H), 3.04 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 2.30 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 2.16-1.80 (m, 6H), 1.52 (d, J = 9.3 Hz, 3H), 1.4 (s, 9H), 1.34 (m, 2H), 1.22 (td, J= 7.2, 5.0 Hz, 3H). MS (ESI) C24H40N4O11S: 593 (M+1)<+>.

Korak 2: Sinteza etil 1-(((((2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilat TFA soli (32).

[0460]

[0461] Postupak sličan onom iz Koraka 2 Primera 30 je primenjen da se dobije 91.4 mg naslovnog jedinjenja (32) (90% prinos) u obliku čvrste supstance bele boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.74 (s, 1H), 7.98 (s, 3H), 4.65 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.50 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 4.26-4.04 (m, 3H), 4.13 (s, 3H), 3.95 (s, 1H), 3.26 (d, J = 9.9 Hz, 3H), 3.14 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.02 (s, 4H), 1.92 (s, 3H), 1.50-1.22 (m, 8H), 1.22 (d, J = 7.5 Hz, 2H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 175.6, 173.5, 169.2, 167.3, 118.5, 114.6, 80.3, 73.6, 72.6, 61.3, 61.1, 60.3, 60.0, 47.2, 47.1, 46.2, 38.2, 30.6, 30.2, 30.1, 25.5, 25.3, 22.4, 22.1, 22.0, 20.3, 18.3, 14.1.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3): δ -75.7. MS (ESI) C19H32N4O9S: 493 (M+1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 8.05 min.

Primer 33 (samo za referencu)

Sinteza (2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfata (33)

[0462]

Korak 1: Sinteza tetrabutilamonijum (2S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il sulfata (33a).

[0463]

[0464] U rastvor terc-butil (2-(((2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamido)oksi)etil)karbamata (27d) (0.79 g, 2.30 mmol) u piridinu (35 mL) je dodatkompleks piridin - sumportrioksid (1.46 g, 9.2 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 64 h. Dodat je kompleks piridin-sumpor trioksida (1.46 g, 9.2 mmol) i reakcija je mešana na 35°C tokom 16 h. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. U rastvor gornjeg proizvoda u DCM (30 mL) dodat je 0.5 N vodeni rastvor dikalijum hidrogen fosfata (7.4 mL) na 0°C. Posle mešanja na 0°C tokom 10 min, dodat je tetrabutil amonijum hidrogen sulfat (0.86 g, 2.53 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon što je organski sloj odvojen, vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovani ekstrahovani organski slojevi su osušeni sa anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom 10% MeOH u DCM kao eluenta da bi se dobio proizvod (33a) kao beličasta čvrsta supstanca (0.51 g, prinos 33%). MS (ESI) C14H24N4O9S = 423 (M-1)<+>.

Korak 2: Sinteza (2S,5R)-2-((2-aminoetoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il hidrogen sulfata (33).

[0465]

[0466] U rastvor tetrabutilamonijum (2S,5R)-2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etoksi)karbamoil)-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il sulfata (33a) (0.51 g, 0.77 mmol) u DCM (10 mL) na -10°C dodat je TFA (10 mL). LC/MS analiza je pokazala da je reakcija završena nakon 1 h. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi ostatak. Ostatak je mešan sa dietil etrom da bi se dobio žuti talog. Čvrsta supstanca je filtrirana i isprana acetonom. Ostatak je rastvoren u vodi i acetonitrilu (1:1) i liofilizovan da bi se dobila žuta čvrsta supstanca. Ostatak je ponovo ispran acetonom. Ostatak je rastvoren u vodi i acetonitrilu (1:1) i liofilizovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33) kao žuta čvrsta supstanca (68 mg, prinos 27%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.84 (br s, 3H), 3.82-4.00 (m, 3H), 2.92-3.33 (m, 5H), 2.00 (m, 1H), 1.87 (m, 1H), 1.68 (m, 2H).<13>C NMR (75 MHz, DMSO-d6): 169.1, 166.5, 72.8, 58.6, 58.3, 47.7, 38.2, 21.3, 19.0. MS (ESI) C9H16N4O7S = 323 (M-1)<+>. HPLC vreme zadržavanja (MeCN/H2O u 0.1% TFA): 1.52 min.

Primer 34 (samo za referencu)

Sinteza (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il 1H-imidazol-1-sulfonata (34)

[0467]

[0468] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid(1) (741 mg, 4.0 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (36 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (2 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (4.4 mL, 4.4 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min.1-((1H-Imidazol-1-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-ijum trifluorometansulfonat (pripremljen prema Org. Lett.2013, 15, 18-21 & J. Org. Chem.2003, 68, 115-119) (2.90 g, 8.0 mmol) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je zagrejana do 0°C (reakcija je praćena TLC upotrebom 70% EtOAc/heksana). Smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, zatim razblažena sa EtOAc (50 mL) i ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL). Organski i vodeni slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), H2O (3 × 50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL) i zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom da bi ostao sirovi ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (1:9 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (34) (0.393 g, 31%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 316.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, 1,4-dioxaneds): δ 8.15 (s, 1H), 7.58 (ft, J = 1.5 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 3.95 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.08 (s, 2H), 2.23-2.17 (m, 1H), 2.04-1.97 (m, 1H), 1.88-1.74 (m, 2H).<13>C NMR (75 MHz, 1,4-dioksan-ds): δ 171.4, 167.6, 139.2, 132.0, 119.9, 62.9, 61.8, 46.9, 21.5, 18.7.

Primer 35

Sinteza etil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (35)

[0469]

Korak 1: Sinteza etil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (35a).

[0470]

[0471] U suspenziju natrijum 5-etoksi-2,2-dimetil-5-oksopentanoata (3.77 g, 17.9 mmol) u smeši tetrahidrofurana (39 mL) i DMF (13 mL) dodat je rastvor izopropil hloroformiata, 1.0 M u toluenu (27.0 mL, 27.0 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na 0°C 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 2 h. Rastvor je ohlađen na 0°C i dodat je natrijum borohidrid (1.21 g, 35.9 mmol). Smeša je mešana 20 min, a zatim je u rastvor dodat metanol (6.5 mL). Posle 10 minuta mešanja, dodati su etil acetat (25 mL) modifikovan sa nekoliko kapi trietilamina i zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (25 mL). Slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 40 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana modifikovanih sa 0.1% TEA (5:95 do 4:6) da bi se dobio proizvod (35a) (2.01 g, 64% sirovo) kao bezbojno ulje. Jedna kap trietilamina je dodata proizvodu da bi se suzbila laktonizacija.

Korak 2: Sinteza etil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (35b).

[0472]

[0473] Rastvor sulfuril hlorida (0.64 mL, 8.7 mmol) u Et2O (10 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi azota. Rastvor etil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (35a) (0.76 g, 4.4 mmol) i piridina (0.39 mL, 4.8 mmol) u Et2O (10 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Špric je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) i ovo je takođe dodato u smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 1.5 h, dodato je još piridina (0.9 ekviv.) i smeša je filtrirana kroz sloj Celute<®>. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (35b) (0.897 g) kao bezbojno ulje. Ovo je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza etil 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4 -dimetilpentanoata (35).

[0474]

[0475] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (278 mg, 1.5 mmol) rastvoren je u THF (14 mL) i HMPA (0.6 mL), i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi azota. Rastvor etil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (35b) (0.45 g, 1.6 mmol) u THF (3 mL) je ohlađen na -78°C i brzo dodat u smešu. Balon koji sadrži sulfatni reagens je ispran sa THF (1 mL), dok je temperatura balona održavana na -78°C, i ovo je brzo dodato u reakcionu smešu. Posle mešanja od 15 min, smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 45 min. Smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL) i reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(30 mL). Organski i vodeni slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran vodom (3 × 30 mL) i fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni (MgSO4) i rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (3:7 do 4:1) da bi se dobio proizvod (35) (157 mg, 25%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 422.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 5.52 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 4.49 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.21-4.08 (m, 4H), 4.03 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 3.34-3.30 (m, 1H), 3.02 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.43-2.38 (m, 1H), 2.32-2.26 (m, 2H), 2.17-2.11 (m, 1H), 1.99-1.82 (m, 2H), 1.72-1.66 (m, 3H), 1.25 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 0.98 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ173.5, 171.1, 167.1, 83.4, 62.0, 60.6, 60.3, 47.2, 34.2, 33.3, 29.3, 23.6, 23.3, 20.8, 17.6, 14.3.

Primer 36

Sinteza heksil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (36)

[0476]

Korak 1: Sinteza natrijum-5-(heksiloksi)-2,2-dimetil-5-oksopentanoata (36a).

[0477]

[0478] U rastvor 2,2-dimetilglutarnog anhidrida (5.0 g, 35.2 mmol) u 1-heksanolu (50 mL) dodat je rastvor natrijum heksana-1-olata (5.4 g, 43.5 mmol) u 1-heksanolu. Posle 20 h mešanja, rastvarač je isparavan i dobijena čvrsta supstanca je suspendovana u dietil etru (80 mL). Smeša je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana dietil etrom (2 × 40 mL). Čvrsta supstanca je osušena pod visokim vakuumom da bi se dobio proizvod (36a) (3.84 g, 41%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, D2O): δ 4.14 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.38-2.33 (m, 2H), 1.82-1.77 (m, 2H), 1.75-1.63 (m, 2H), 1.43-1.28 (m, 6H), 1.12 (s, 6H), 0.92-0.88 (m, 3H). Spektar je otkrio da je proizvod kontaminiran sa malom količinom neidentifikovane supstance.

Korak 2: Sinteza heksil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (36b).

[0479]

[0480] U suspenziju natrijum 5-(heksiloksi)-2,2-dimetil-5-okspentanoata (36a) (3.84 g, 14.4 mmol) u smeši THF (31 mL) i DMF (10 mL) dodat je izopropil hloroformat, 1.0 M u toluenu (21.6 mL, 21.6 mmol) na 0°C i smeša je mešana 10 min. Posle 3.3 h mešanja na sobnoj temperaturi, rastvor je ohlađen do 0°C i dodat je natrijum borohidrid (0.98 g, 28.8 mmol). Smeša je mešana 20 min i u rastvor je dodat MeOH (5.2 mL) (reakcija je praćena TLC upotrebom 2:8 etil acetat/heksana kao eluenta). Posle 15 minuta dodato je nekoliko kapi trietilamina. Posle još 15 minuta mešanja, dodat je etil acetat (25 mL) i zasićeni vodeni rastvora rastvor NH4Cl (25 mL). Organski i vodeni slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 40 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni (MgSO4), i filtrirani i filtrat je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana modifikovanih sa 0.1% Et3N (5:95 do 3:7) da bi se dobio proizvod (36b) (2.16 g, 65%) kao bezbojno ulje. Jedna kap Et3N je dodata da bi se suzbila laktonizacija.

Korak 3: Sinteza heksil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (36c).

[0481]

[0482] Rastvor sulfuril hlorida (0.38 mL, 5.2 mmol) u Et2O (8.5 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi azota. Rastvor heksil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (36b) (0.60 g, 2.6 mmol) i piridina (0.42 mL, 5.2 mmol) u Et2O (8.5 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Špric je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) i smeši je takođe dodato sredstvo za ispiranje. Smeša je mešana 4.5 h (reakcija je praćena TLC upotrebom 2:8 EtOAc/heksana kao eluenta). Čvrste materije su filtrirane i rastvarač je koncentrovan u vakuumu da bi se dobio proizvod (36c) kao bezbojno ulje sa kvantitativnim prinosom. Ovome je dodato 3 mL THF i rastvor je čuvan na -78°C. Ovo je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 4: Sinteza heksil 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (36).

[0483]

[0484] (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (370 mg, 2.0 mmol) rastvoren je u tetrahidrofuranu (19 mL) i HMPA (0.8 mL), i dobijeni rastvor je hlađen do -78 °C u atmosferi. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.2 mL, 2.2 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. Rastvor heksil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (36c) (0.72 g, 2.2 mmol) u THF (3 mL) je hlađen do -78°C i brzo dodat u reakcionu smešu. Balon koji je sadržao sulfatni reagens je ispran sa THF (3 × 1 mL), dok je temperatura balona održavana na -78°C i deo dobijen posle ispiranja je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle mešanja od 10 minuta smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je zatim ugašena zasićenim NaHCO3(40 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (40 mL). Organski sloj je koncentrovan i uljasti ostatak podeljen između H2O (40 mL) i EtOAc (40 mL). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana kao eluenta (1:9 do 8:2) da bi se dobio proizvod (36) (421 mg, 44%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 478.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (s, 1H), 5.59 (s, 1H), 4.51 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.22-4.18 (m, 2H), 4.08-4.04 (m, 3H), 3.36-3.32 (m, 1H), 3.02 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 2.47-2.41 (m, 1H), 2.33-2.28 (m, 2H), 2.18-2.13 (m, 1H), 2.01-1.79 (m, 2H), 1.72-1.59 (m, 4H), 1.35-1.31 (m, 6H), 0.99 (s, 6H), 0.91-0.87 (m, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.6, 170.9, 167.1, 83.5, 64.9, 62.0, 60.2, 47.3, 34.3, 33.3, 31.6, 29.3, 28.7, 25.7, 23.6, 23.3, 22.7, 20.9, 17.6, 14.1.

Primer 37

Sinteza heptil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklor[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (37)

[0485]

Korak 1: Sinteza natrijum 5-(heptiloksi)-2,2-dimetil-5-oksopentanoata (37a).

[0486]

[0487] U rastvor 2,2-dimetilglutarnog anhidrida (5.0 g, 35.2 mmol) u 1-heptanolu (40 mL) dodat je rastvor natrijum heptan-1-olata (6.01 g, 43.5 mmol) u 1-heptanolu (30 mL). Posle mešanja preko noći, rastvarač je isparavan i rezultujuća čvrsta supstanca je suspendovana u Et2O (80 mL). Smeša je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana sa Et2O (2 × 40 mL). Čvrsta supstanca je osušena pod visokim vakuumom da bi se dobio proizvod (37a) (7.89 g, 80%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, D2O): δ 4.14 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.36-2.32 (m, 2H), 1.82-1.77 (m, 2H), 1.74-1.63 (m, 2H), 1.40-1.31 (m, 8H), 1.11 (s, 6H), 0.92-0.87 (m, 3H). Spektar je otkrio da je proizvod kontaminiran sa malom količinom neidentifikovane supstance.

Korak 2: Sinteza heptil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (37b).

[0488]

[0489] U suspenziju natrijum 5-(heptiloksi)-2,2-dimetil-5-oksopentanoata (37a) (7.89 g, 28.1 mmol) u smeši THF (61 mL) i DMF (20 mL) dodat je izopropil hloroformat, 1.0 M u toluenu (42.2 mL, 42.2 mmol) na 0°C i smeša je mešana 10 min. Posle 4 h mešanja na sobnoj temperaturi, suspenzija je ohlađena do 0°C i dodat je natrijum borohidrid (1.9 g, 56.3 mmol). Smeša je mešana 20 min, a zatim je u rastvor dodat MeOH (10 mL) (reakcija je praćena pomoću TLC upotrebom 2:8 etil acetat/heksana). Posle 30 minuta mešanja, dodati su EtOAc (50 mL), nekoliko kapi Et3N i zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (50 mL). Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 80 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (80 mL) i filtrat je koncentrovan u vakuumu. Preostali rastvor je ispran sa H2O (3 × 100 mL), fiziološkim rastvorom (100 mL) i osušen (Na2SO4), i koncentrovan. Tokom svih ekstrakcija, nekoliko kapi Et3N je dodato u organski sloj da bi se suzbila laktonizacija. Ostatak je prečišćen hromatografijom na kolini silika gela upotrebom EtOAc/heksana modifikovanih sa 0.1% Et3N (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio proizvod (37b) (3.35 g, 49% sirov) kao bezbojno ulje.

Korak 3: Sinteza heptil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (37c).

[0490]

[0491] Rastvor sulfuril hlorida (0.60 mL, 8.2 mmol) u Et2O (13 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi azota. Rastvor heptil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (37b) (1.0 g, 4.1 mmol) i piridina (0.66 mL, 8.2 mmol) u Et2O (13 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Špric je ispran dietil etrom (3 × 1 mL) i ovo je takođe dodato u smešu. Smeša je mešana 4.5 h (reakcija je praćena pomoću TLC upotrebom 2:8 etil acetat/heksana kao eluenta). Čvrste materije su odfiltrirane, a filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobio proizvod (37c) (1.13 g) kao bezbojno ulje. Ovome je dodato 3 mL THF i rastvor je čuvan na -78°C. Ovo je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 4: Sinteza heptil 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (37).

[0492]

[0493] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.56 g, 3.0 mmol) rastvoren je u THF (28 mL) i HMPA (1.2 mL), i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi azota. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (3.3 mL, 3.3 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. Rastvor heptil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (37c) (1.13 g, 3.3 mmol) je rastvoren u THF (3 mL, sa temperaturom održavanom na -78°C) i brzo dodat u reakcionu smešu. Balon koji je sadržao sulfatni reagens je ispran sa THF (3 × 1 mL), dok je temperatura balona održavana na -78°C, i ovo je takođe brzo dodato u reakcionu smešu. Posle mešanja tokom 10 min, smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (60 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (60 mL). Organski sloj je koncentrovan i uljasti ostatak je razblažen sa EtOAc (60 mL) i ispran vodom (2 × 60 mL). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu sa EtOAc/heksanima (1:9 do 8:2) kao eluentom da bi se dobio proizvod (37) (473 mg, 32%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 492.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.51 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.22-4.18 (m, 2H), 4.08-4.04 (m, 3H), 3.36-3.31 (m, 1H), 3.02 (d, J= 12.6 Hz, 1H), 2.47-2.41 (m, 1H), 2.33-2.28 (m, 2H), 2.182.13 (m, 1H), 2.01-1.80 (m, 2H), 1.72-1.60 (m, 4H), 1.31-1.28 (m, 8H), 0.99 (s, 6H), 0.91-0.86 (m, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.6, 170.9, 167.1, 83.4, 64.9, 62.0, 60.2, 47.2, 34.2, 33.3, 31.8, 29.2, 29.0, 28.7, 26.0, 23.6, 23.3, 22.7, 20.8, 17.6, 14.2.

Primer 38

Sinteza 2-metoksietil 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (38)

[0494]

Korak 1: Sinteza natrijum 5-(2-metoksietoksi)-2,2-dimetil-5-oksopentanoata (38a).

[0495]

[0496] U rastvor 2,2-dimetilglutarnog anhidrida (5.0 g, 35.2 mmol) u 2-metoksietanolu (30 mL) dodat je rastvor natrijum 2-metoksietanolata (4.27 g, 43.5 mmol) u 2-metoksietanolu (30 mL). Posle 20 h mešanja, rastvarač je isparavan i dobijena čvrsta supstanca je suspendovana u Et2O (80 mL). Smeša je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana sa Et3O (2 × 40 mL). Čvrsta supstanca je osušena pod visokim vakuumom da bi se dobio proizvod (38a) (6.44 g, 76%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, D2O): δ 4.30-4.27 (m, 2H), 3.75-3.72 (m, 2H), 3.42 (s, 3H), 2.41-2.36 (m, 2H), 1.83-1.78 (m, 2H), 1.12 (s, 6H). Spektar je otkrio da je proizvod kontaminiran sa malom količinom neidentifikovane supstance.

Korak 2: Sinteza 2-metoksietil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (38b).

[0497]

[0498] U suspenziju natrijum 5-(2-metoksietoksi)-2,2-dimetil-5-oksopentanoata (38a) (6.44 g, 26.8 mmol) u smeši THF (58 mL) i DMF (19 mL) dodat je izopropil hloroformat, 1.0 M u toluenu (40.2 mL, 40.2 mmol) na 0°C i mešana je 10 min. Posle 4 h mešanja na sobnoj temperaturi, smeša je čuvana na -78°C preko noći. Suspenzija je ohlađena do 0°C i dodat je natrijum borohidrid (1.81 g, 53.6 mmol). Smeša je mešana 20 min, a zatim je u rastvor dodat MeOH (9.6 mL) (reakcija je praćena pomoću TLC upotrebom 3:7 EtOAc/heksana kao eluenta). Posle 30 minuta mešanja, dodati su EtOAc (50 mL) sa nekoliko kapi Et3N i zatim zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (50 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 80 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani i filtrat je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu da bi se dobio proizvod (38b) (2.54 g, 46% sirov).

Korak 3: Sinteza 2-metoksietil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (38c).

[0499]

[0500] Rastvor sulfuril hlorida (0.36 mL, 4.9 mmol) u Et2O (8 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi azota. Rastvor 2-metoksietil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (38b) (0.50 g, 2.4 mmol) i piridina (0.40 mL, 4.9 mmol) u Et2O (8 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Špric je ispran sa Et2O (3 × 1 mL) i smeši je takođe dodato sredstvo za ispiranje. Smeša je mešana 4.5 h (reakcija je praćena pomoću TLC upotrebom 2:8 EtOAc/heksana kao eluenta). Čvrste materije se odfiltriraju i filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobio proizvod (38c) (0.60 g, 2.0 mmol) kao bezbojno ulje. Ovome je dodato 3 mL THF i rastvor je čuvan na -78°C. Ovo je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 4: Sinteza 2-metoksietil 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoata (38).

[0501]

[0502] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (370 mg, 2.0 mmol) je rastvoren u THF (19 mL) i HMPA (0.8 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi azota.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (2.2 mL, 2.2 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. 2-metoksietil 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (38c) (0.60 g, 2.0 mmol) rastvoren u THF (3 mL, njegova temperatura održavana na -78°C) je brzo dodat u reakcionu smešu. Balon koji je sadržao sulfatni reagens je ispran sa THF (3 × 1 mL), dok je temperatura balone održavana na -78°C i ispiranje je brzo dodato u reakcionu smešu. Posle mešanja tokom 10 min, smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (40 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (40 mL). Organski sloj je koncentrovan i uljasti ostatak je podeljen između H2O (40 mL) i EtOAc (40 mL). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (1:9 do 8:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (38) (164 mg, 18%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: 452.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.53 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.51 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.24-4.18 (m, 4H), 4.05-4.03 (m, 1H), 3.61-3.58 (m, 2H), 3.39-3.32 (m, 4H), 3.01 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.47-2.33 (m, 3H), 2.18-2.13 (m, 1H), 2.00-1.82 (m, 2H), 1.73-1.68 (m, 2H), 0.99 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.6, 171.0, 167.1, 83.4, 70.6, 63.7, 62.0, 60.2, 59.1, 47.2, 34.2, 33.2, 29.1, 23.6, 23.3, 20.8, 17.6.

Primer 39 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil propionata (39)

[0503]

Korak 1: Sinteza 5,5-dimetiltetrahidro-2H-piran-2-ona (39a).

[0504]

[0505] U rastvor etil 5-hidroksi-4,4-dimetilpentanoata (35a) (26.5 g, 152.1 mmol) u dihlorometanu (683 mL) dodata je trifluorosirćetna kiselina (1.75 mL, 22.8 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 d. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (150 mL), mešana brzo 30 min, i slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (150 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na fleš koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 45:55) kao eluenta da bi se dobio proizvod (39a) (8.79 g, 45%) kao bezbojno ulje. Proizvod je upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja i kontaminiran je malim količinama neidentifikovanih nusproizvoda.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.97 (s, 2H), 2.56 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 1.69 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 1.05 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 3,3,5,5-tetrametiltetrahidro-2H-piran-2-ona (39b).

[0506]

[0507] 5,5-dimetiltetrahidro-2H-piran-2-on (39a) (8.79 g, 68.6 mmol) rastvoren je u anhidrovanom DMF (150 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do 0°C u inertnoj atmosferi argona. U jednoj porciji je dodat natrijum hidrid, 60% u mineralnom ulju (8.23 g, 205.7 mmol) i smeša je mešana 20 min. Nakon toga je ukapavanjem dodavan MeI (17.1 mL, 274.3 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na 0°C tokom 20 min, a zatim na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Smeša je razblažena sa EtOAc (350 mL) i zatim ugašena na 0°C pažljivim dodavanjem ukapavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (100 mL). Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (350 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa H2O (6 × 300 mL), fiziološkim rastvorom (300 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida upotrebom EtOAc/heksana (1:9) kao eluenta da bi se dobio proizvod (39b) (3.42 g, 32%). Proizvod je upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja i kontaminiran je malim količinama raznih neidentifikovanih nusproizvoda.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.01 (s, 2H), 1.62 (s, 2H), 1.30 (s, 6H), 1.02 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 2,2,4,4-tetrametilpentan-1,5-diola (39c).

[0508]

[0509] Balon sa okruglim dnom sa grlom koji sadrži mešajuću suspenziju 95% LiAlH4(0.87 g, 21.6 mmol) u Et2O (126 mL) je ohlađen do 0°C u atmosferi argona. Ovoj suspenziji je dodat rastvor 3,3,5,5-tetrametiltetrahidro-2H-piran-2-ona (39b) (2.94 g, 18.8 mmol) u Et2O (50 mL) u inertnoj atmosferi argona. Ovo je zagrejano do sobne temperature i mešano preko noći. Smeša je oprezno ugašena sa H2O (80 mL) zatim 3 M NaOH (120 mL) i mešana 30 min. Smeša je filtrirana kroz sloj Celite<®>, i jastučić je temeljno ispran sa Et2O. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa Et2O (3 × 100 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod vakuumom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (2:8 do 6:4) kao eluenta da bi se dobio proizvod (39c) (2.59 g, 86%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.41 (s, 4H), 2.55 (s, 2H), 1.34 (s, 2H), 0.95 (s, 12H)

Korak 4: Sinteza 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil propionata (39d).

[0510]

[0511] U mešani rastvor 2,2,4,4-tetrametilpentan-1,5-diola (39c) (0.48 g, 3.0 mmol) i piridina (0.24 mL, 3.0 mmol) u DCM (20 mL) dodat je propionil hlorid (0.26 mL, 3.0 mmol) ukapavanjem tokom 30 minuta na oko 0°C (ledeno kupatilo). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa H2O (20 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 × 20 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu sa EtOAc/heksanima (5:95 do 6:4) kao eluentom da bi se dobio proizvod (39d) (411 mg, 63%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.85 (s, 2H), 3.32 (s, 2H), 2.37 (q, J = 7.7 Hz, 2H), 1.50 (s, 1H), 1.36 (s, 2H), 1.16 (t, J= 7.5 Hz, 3H), 1.03 (s, 6H), 0.99 (s 6H).

Korak 5: Sinteza 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil propionata (39e).

[0512]

[0513] Rastvor sulfuril hlorida (0.136 mL, 1.9 mmol) u Et2O (6.4 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil propionata (39d) (404 mg, 1.9 mmol) i piridina (0.15 mL, 1.9 mmol) u Et2O (6.4 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 70 min. Čvrste materije su filtrirane da bi se dobio rastvor proizvoda (39e) u Et2O kao filtrat. Prinos je pretpostavljen kvantitativnim, a smeša je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 6: Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil propionata (39).

[0514]

[0515] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (346 mg, 1.9 mmol) je rastvoren u THF (21.8 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin- 2(1H)-onu (1.0 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.9 mL, 1.9 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 90 min. Rastvor 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil propionata (39e) (0.59 g, 1.9 mmol) u Et2O (oko 20 mL) je dodat u reakcionu smešu (kanila). Posle mešanja od 10 min smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 4 h. Reakcija je zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (40 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (40 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (3 × 40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gel koloni upotrebom EtOAc/heksana (1:9 do 8:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (39) (254 mg, 29%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 464.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.53 (s, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.53 (d, J= 9 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 9 Hz, 1H), 4.18 (m, 1H) 4.06-4.04 (m, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.36-3.32 (m, 1H), 3.01 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.33 (m, 3H), 2.19-2.13 (m, 1H), 2.01-1.79 (m, 2H), 1.43 (s, 2H), 1.16 (t, J = 7.7 Hz, 3H), 1.09 (s, 6H), 1.03 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.6, 171.1, 167.1, 84.9, 73.3, 61.9, 60.2, 47.2, 46.2, 36.0, 35.3, 27.8, 26.6, 26.3, 25.9, 25.3, 20.8, 17.5, 9.3.

Primer 40 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil benzoata (40)

Korak 1: Sinteza 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil benzoata (40a).

[0517]

[0518] U mešani rastvor 2,2,4,4-tetrametilpentan-1,5-diola (39c) (0.48 g, 3.0 mmol) i piridina (0.24 mL, 3.0 mmol) u DCM (20 mL) dodat je benzoil hlorid (0.37 mL, 3.0 mmol) ukapavanjem tokom 30 minuta na oko °C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa H2O (20 mL), a slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 × 20 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (5:95 do 1:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (40a) (548 mg, 69%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.06 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.59-7.55 (m, 1H), 7.48-7.43 (m, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.35 (s, 2H), 1.48 (s, 2H), 1.13 (s, 6H), 1.02 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil benzoata (40b).

[0519]

[0520] Rastvor sulfuril hlorida (0.15 mL, 2.0 mmol) u Et2O (8.5 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil benzoata (40a) (541 mg, 2.0 mmol) i piridina (0.17 mL, 2.0 mmol) u Et2O (8,5 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Smeša je mešana na 0°C 20 min, zatim na sobnoj temperaturi 90 min. Smeša je filtrirana i filtrat je korišćen da se dobije rastvor proizvoda (40b) u Et2O (oko 20 mL). Prinos je pretpostavljen kvantitativnim i proizvod je upotrebljen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil benzoata (40).

[0521]

[0522] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (370 mg, 2.0 mmol) je rastvoren u THF (23 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (1.5 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.0 mL, 2.0 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 90 min. Rastvor 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil benzoata (40b) (0.73 g, 2.0 mmol, 1.0 ekv.) rastvoren u Et2O (oko 20 mL) je dodat u reakcionu smešu (kanila). Posle mešanja od 10 min smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 4 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (40 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (40 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (3 × 40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (1:9 do 8:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (40) (282 mg, 27%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 512.15 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.06 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.59-7.55 (m, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 6.49 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.57 (d, J= 9 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.10-4.01 (m, 3H), 3.29-3.25 (m, 1H), 2.98 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.45-2.35 (m, 1H), 2.17-2.11 (m, 1H), 1.99-1.77 (m, 2H), 1.56 (s, 2H), 1.14-1.13 (m, 12H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.0, 167.0, 166.6, 133.1, 130.4, 129.7, 128.6, 85.0, 73.9, 61.9, 60.2, 47.2, 46.2, 36.1, 35.7, 26.7, 26.4, 25.9, 25.4, 20.8, 17.5.

Primer 41 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklor[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetilbenzoata (41)

[0523]

Korak 1: Sinteza 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetilbenzoata (41a).

[0524]

[0525] U mešani rastvor 2,2,4,4-tetrametilpentan-1,5-diola (39c) (0.48 g, 3.0 mmol) i piridina (0.24 mL, 3.0 mmol) u DCM (20 mL) dodat je 2,6-dimetilbenzoil hlorid (0.45 mL, 3.0 mmol) ukapavanjem tokom 30 minuta na 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa H2O (20 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 × 20 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (5:95 do 1:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (41a) (462 mg, 53%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.22-7.17 (m, 1H), 7.04 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 4.10 (s, 2H), 3.32 (s, 2H), 2.33 (s, 6H), 1.41 (s, 2H), 1.10 (s, 6H), 1.00 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetilbenzoata (41b).

[0526]

[0527] Rastvor sulfuril hlorida (0.11 mL, 1.5 mmol) u Et2O (7 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetilbenzoata (41a) (453 mg, 1.5 mmol) i piridina (0.13 mL, 1.5 mmol) u Et2O (7 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Smeša je mešana u ledenom kupatilu 20 min, zatim na sobnoj temperaturi 90 min. Smeša je filtrirana i filtrat je sačuvan da bi se dobio rastvor proizvoda (41b) u Et2O (oko 20 mL). Prinos je pretpostavljen kvantitativnim. Ova smeša je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (mala količina je koncentrovana pod vakuumom i uzet je NMR ostatka).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.21 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.05 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 4.20 (s, 2H), 4.07 (s, 2H), 2.32 (s, 6H), 1.50 (s, 2H), 1.14 (s, 6H), 1.12 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2, 4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetilbenzoata (41).

[0528]

[0529] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (286 mg, 1.5 mmol) je rastvoren u THF (18 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin- 2(1H)-onu (2,3 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.5 mL, 1.5 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 90 min. Rastvor 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetilbenzoata (41b) (0.61 g, 1.5 mmol) u Et2O (oko 20 mL) je dodat u reakcionu smešu (kanila). Posle mešanja od 10 min smeša je zagrejana do sobne temperature, mešana 4 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (40 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (40 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (3 × 40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (1:9 do 8:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (41) (490 mg, 58%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 540.07 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.20 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.04 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 6.50 (s, 1H), 5.63 (s, 1H), 4.54 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.23 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.06-4.03 (m, 3H), 3.34-3.29 (m, 1H), 3.00 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.18-2.14 (m, 1H), 2.00-1.78 (m, 2H), 1.49 (s, 2H), 1.11 (s, 12H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 170.9, 170.4, 167.0, 135.0, 134.2, 129.4, 127.7, 84.9, 74.5, 62.0, 60.2, 47.2, 46.2, 36.1, 35.4, 26.5, 26.4, 26.0, 25.3, 20.8, 20.0, 17.5.

Primer 42 (samo za referencu)

Sinteza (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il ((3-metil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil) sulfata (42)

[0530]

Korak 1: Sinteza (3-metil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil sulfohloridata (42a).

[0531]

[0532] Piridin (0.28 mL, 3.5 mmol) je dodat u mešanu smešu 3-(hidroksimetil)-3-metildihidrofuran-2(3H)-ona (pripremljen prema Synlett 2010, 2625-2627) (0.30 g, 2.3 mmol) i Et2O (8 mL) u atmosferi argona. Rastvor je ohlađen do -78°C i sulfuril hlorid (0.28 mL, 3.5 mmol) u Et2O (3 mL) je polako dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h i zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila piridinska so, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (42a) kao ulje, koje je direktno korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (prinos se pretpostavlja kvantitativnim).

Korak 2: Sinteza (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il ((3-metil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil)sulfata (42).

[0533]

[0534] U mešanu smešu (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (1) (0.24 g, 1.3 mmol) u THF (20 mL) u atmosferi argona je dodato nekoliko kapi 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Smeša je ohlađena do -78°C i mešana 10 min, zatim je ukapavanjem dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.4 mL, 1.4 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 8 minuta, zatim je dodat (3-metil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil sulfohlorid (42a) (0.30 g, 1.3 mmol) u THF (30 mL) na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobila čvrsta supstanca (150 mg). NMR je pokazao nečistoću u tragovima, koja je uklonjena trituracijom sa EtOAc da bi se dobio proizvod (42) (35 mg) kao čvrsta supstanca. LC/MS: m/z = 378.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 7.53 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 4.68-4.64 (m, 1H), 4.54 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.32-4.27 (m, 2H), 4.09 (s, 1H), 3.89 (d, J= 6.0Hz, 1H), 3.21-3.13(m, 2H), 2.38-2.28 (m, 1H), 2.13-2.00 (m, 2H), 1.91-1.66 (m, 3H), 1.21 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, d6-DMSO): δ 178.3, 171.0, 168.7, 77.9, 65.6, 61.7, 61.2, 46.3, 43.2, 31.2, 20.8, 19.1, 18.9.

[0535] (2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il ((3-metil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil) sulfat (42) je odvojen na svoje (S) i (R) izomere, (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il (((S)-3-metil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil)sulfat (42(S) i (2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il (((R)-3-metil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil) sulfat (42(R):

Primer 43 (samo za referencu)

Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil pivalata (43)

[0536]

Korak 1: Sinteza 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil pivalata (43a).

[0538] U mešani rastvor 2,2-dimetilpropan-1,3-diola (5.07 g, 48.7 mmol) u DCM (50 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je trimetilacetil hlorid (2.0 mL, 16.2 mmol), piridin (2.63 mL, 32.5 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.4 g, 3.2 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je hlađena do 0°C i reakcija je ugašena dodatkom 1N HCl (50 mL), a zatim ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani sa zas. natrijum bikarbonatom i fiziološkim rastvorom, zatim osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:5) kao eluenta da bi se dobio proizvod (43a) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.92 (s, 2H), 3.27 (s, 2H), 1.22 (s, 9H), 0.92 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil pivalata (43b).

[0539]

[0540] Piridin (0.75 mL, 9.3 mmol) je dodat u mešanu smešu 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil pivalata (43a) (1.17 g, 6.2 mmol) i Et2O (20 mL) u atmosferi argona. Rastvor je hlađen do -78°C i sulfuril hlorid (0.75 mL, 9.3 mmol) u Et2O (8 mL) je polako dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila piridinska so i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (43b) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (prinos se pretpostavlja kvantitativnim).

Korak 3: Reakcija za proizvodnju 3-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2 ,2-dimetilpropil pivalata (43).

[0541]

[0542] U mešanu smešu (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (1) (1.1 g, 5.9 mmol) u THF (20 mL) u atmosferi argona je dodato nekoliko kapi 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Smeša je ohlađena do -78°C i mešana 10 min, a zatim je ukapavanjem dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (6.5 mL, 6.5 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 8 minuta, zatim je dodat 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil pivalat (43b) (1.7 g, 5.9 mmol) u THF (30 mL) na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (43) (654 mg) kao čvrsta supstanca. LC/MS: m/z = 436.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (s, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.60 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.36 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.04 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.95-3.84 (q, 2H), 3.35-3.31 (m, 1H), 3.02 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.50-2.41 (m, 1H), 2.20-2.05 (m, 1H), 1.99-1.78 (m, 2H), 1.22 (s, 9H), 1.04 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 178.2, 171.1, 167.1, 80.6, 68.4, 62.0, 60.2, 47.2, 39.1, 35.6, 27.3, 21.3, 21.3, 20.8, 17.6.

Primer 44 (samo za referencu)

Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 3-hloro-2,6-dimetoksibenzoata (44)

[0543]

Korak 1: Sinteza 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetoksibenzoata (44a).

[0544]

[0545] U mešani rastvor 2,2-dimetilpropan-1,3-diola (3.89 g, 37.4 mmol) u DCM (40 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je 2,6-dimetoksibenzoil hlorid (80% čistoće 3.13 g, 12.5 mmol), piridin (2.02 mL, 24.9 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.3 g, 2.5 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je ohlađena do 0°C i reakcija je ugašena dodavanjem 1N HCl (50 mL), zatim ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani sa zas. natrijum bikarbonatom i fiziološkim rastvorom, zatim osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:5) kao eluenta da bi se dobio proizvod (44a) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.19 (t, J= 5.0 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.71 (s, 6H), 3.33 (s, 2H), 0.89 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 3-hloro-2,6-dimetoksibenzoata (44b).

[0546]

[0547] Piridin (0.16 mL, 2.0 mmol) je dodat u mešanu smešu 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetoksibenzoata (44a) (0.35 g, 1.3 mmol) i Et2O (10 mL) u atmosferi argona. Rastvor je hlađen do -78°C i sulfuril hlorid (0.16 mL, 2.0 mmol) u Et2O (8 mL) je polako dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila piridinska so i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (44b) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (prinos se pretpostavlja kvantitativnim).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.36 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.66 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 1.13 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 3-hloro-2,6-dimetoksibenzoata (44).

[0548]

[0549] U mešanu smešu (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (1) (237 mg, 1.3 mmol) u THF (15 mL) u atmosferi argona je dodato nekoliko kapi 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Smeša je hlađena do -78°C i mešana 10 min, a zatim je ukapavanjem dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.4 mL, 1.4 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 8 minuta, zatim je dodat 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 3-hloro-2,6-dimetoksibenzoat (44b) (0.47 g, 1.2 mmol) u THF ( 8 mL) na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (44) kao čvrsta supstanca. LC/MS: m/z = 550.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.36-7.32 (dd, J= 1.2 Hz, 1.2 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 4.55 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.25-4.07 (m, 3H), 4.01 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.27 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.98 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.41-2.37 (m, 1H), 2.14-2.10 (m, 1H), 1.94-1.74 (m, 2H), 1.08 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.1, 167.1, 165.2, 156.1, 153.7, 131.7, 119.8, 119.5, 107.9, 80.4, 69.3, 62.2, 62.0, 60.2, 56.3, 47.1, 35.7, 21.3, 21.2, 20.8, 17.5.

Primer 45 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil 2,6-dimetilbenzoata (45)

[0550]

Korak 1: Sinteza 2,2,3,3-tetrametilbutan-1,4-diola (45a).

[0551]

[0552] Rastvor 3,3,4,4-tetrametildihidrofuran-2(3H)-ona (pripremljen prema U.S. patentu br.

3,658,849) (1.0 g, 7.0 mmol) u Et2O (28 mL) je dodat mešanoj suspenziji LiAlH4(95%; 0.32 g, 8.1 mmol) u Et2O (28 mL) na 0°C u atmosferi argona. Smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. Polako je dodavan dekahidrat natrijum sulfata dok ne prestane efervescencija u posudi. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz jastučić od Celite<®>i jastučić je ispran sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (45a) (0.7 g) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.41 (s, 4H), 0.88 (s, 12H).

Korak 2: Sinteza 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil 2,6-dimetilbenzoata (45b).

[0553]

[0554] U mešani rastvor 2,2,3,3-tetrametilbutan-1,4-diola (45a) (0.71 g, 4.9 mmol) u DCM (15 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je 2,6 -dimetilbenzoil hlorid (0.2 mL, 1.6 mmol), piridin (0.26 mL, 3.2 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.04 g, 0.3 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je hlađena do 0°C i reakcija je ugašena dodavanjem 1N HCl (15 mL), zatim ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani zas. natrijum bikarbonatom i fiziološkim rastvorom, zatim osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (45b) kao ulje (266 mg).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.18 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 4.25 (s, 2H), 3.51 (s, 2H), 2.31 (s, 6H), 0.98 (s, 6H), 0.93 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil 2,6-dimetilbenzoata (45c).

[0555]

[0556] Piridin (0.11 mL, 1.3 mmol) je dodat u mešanu smešu 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil 2,6-dimetilbenzoata (45b) (0.26 g, 0.9 mmol) i Et2O (10 mL) u atmosferi argona. Rastvor je hlađen do -78°C i sulfuril hlorid (0.11 mL, 1.3 mmol) u Et2O (3 mL) je polako dodat na -78°C.

Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h i zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila piridinska so i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (45c) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (prinos je pretpostavljen kvantitativnim).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2, 3,3-tetrametilbutil 2,6-dimetilbenzoata (45).

[0557]

[0558] U mešanu smešu (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (1) (255 mg, 1.4 mmol) u THF (10 mL) u atmosferi argona je dodato nekoliko kapi 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Smeša je hlađena do -78°C i mešana 10 min i zatim je ukapavanjem dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.5 mL, 1.5 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 8 minuta, zatim 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil 2,6-dimetilbenzoat (45c) (0.52 g, 1.4 mmol) u THF (5 mL) je dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C 10 min i zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (45) kao čvrsta supstanca. LC/MS: m/z = 526.16 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.19 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 6.47 (s, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.76 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.20-4.16 (m, 3H), 4.04 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 3.33 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.99 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.17-2.13 (m, 1H), 2.04-1.83 (m.2H), 1.05-1.03 (m, 12H).<13>C NMR (75MHz, CDCl3): δ 170.9, 170.4, 167.1, 134.9, 134.2, 129.4, 127.6, 82.1, 70.8, 62.0, 60.2, 47.3, 39.1, 38.5, 21.0, 20.9, 20.8, 20.5, 20.3, 20.0, 17.5.

Primer 46 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil benzoata (46)

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil benzoata (46a).

[0560]

[0561] U mešani rastvor 2,2,3,3-tetrametilbutan-1,4-diola (45a) (0.74 g, 5.0 mmol) u DCM (15 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je benzoil hlorid (0.25 mL, 2.0 mmol), piridin (0.33 mL, 4.0 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.05 g, 0.4 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je hlađena do 0°C i reakcija je ugašena dodavanjem 1N HCl (15 mL), zatim ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani zas. natrijum bikarbonatom i fiziološkim rastvorom, zatim osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (46a) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.05 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.58 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.59 (s, 2H), 1.05 (s, 6H), 0.99 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil benzoata (46b).

[0562]

[0563] Piridin (0.29 mL, 3.6 mmol) je dodat u mešanu smešu 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil benzoata (46a) (0.70 g, 2.8 mmol) i Et2O (10 mL) u atmosferi argona. Rastvor je hlađen do -78°C i sulfuril hlorid (0.29 mL, 3.6 mmol) u Et2O (3 mL) je polako dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h i zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila piridinska so i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (46b) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (prinos se pretpostavlja kvantitativnim).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2, 3,3-tetrametilbutil benzoata (46).

[0564]

[0565] U mešanu smešu (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (1) (0.52 g, 2.8 mmol) u THF (10 mL) u atmosferi argona je dodato nekoliko kapi 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Smeša je hlađena do -78°C i mešana 10 min, a zatim je ukapavanjem dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (3.1 mL, 3.1 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 8 minuta, a zatim 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil benzoat (46b) (0.98 g, 2.8 mmol) u THF (5 mL) je dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min i zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (46) kao čvrsta supstanca. LC/MS: m/z = 498.10 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.05 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 7.57 (t, J= 7.4 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 6.47 (s, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.87 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.22-4.17 (m, 3H), 4.01 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.35-3.31 (m, 1H), 2.99 (d, J= 14.7 Hz, 1H), 2.43-2.39 (m, 1H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.92-1.81 (m, 2H), 1.10-1.06 (m, 12H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 170.9, 167.1, 166.6, 133.1, 130.3, 129.7, 128.6, 82.4, 70.5, 62.0, 60.2, 47.3, 39.2, 38.8, 21.1, 21.0, 20.8, 20.5, 20.3, 17.5.

Primer 47 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil propionata (47)

[0566]

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil propionata (47a).

[0567]

[0568] U mešani rastvor 2,2,3,3-tetrametilbutan-1,4-diola (45a) (0.59 g, 4.0 mmol) u DCM (15 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je propionil hlorid (0.25 mL, 3.1 mmol), piridin (0.33 mL, 4.0 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.05 g, 0.4 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je hlađena do 0°C i reakcija je ugašena dodavanjem 1N HCl (15 mL), a zatim ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani zas. natrijum bikarbonatom i fiziološkim rastvorom, zatim osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:2) kao eluenta da bi se dobio di-acilovani materijal, a zatim proizvod (47a) (300 mg) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.99 (s, 2H), 3.49 (s, 2H), 2.38-2.31 (q, 2H), 1.15 (t, J = 7.8 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 4.8 Hz, 12H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil propionata (47b).

[0569]

[0570] Piridin (0.16 mL, 1.9 mmol) je dodat u mešanu smešu 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil propionata (47a) (0.30 g, 1.5 mmol) i Et2O (10 mL) u atmosferi argona. Rastvor je hlađen do -78°C i sulfuril hlorid (0.16 mL, 1.9 mmol) u Et2O (3 mL) je polako dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila piridinska so, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (47b) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (prinos se pretpostavlja kvantitativnim).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil propionata (47).

[0571]

[0572] U mešanu smešu (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (91) (271 mg, 1.5 mmol) u THF (10 mL) u atmosferi argona je dodato nekoliko kapi 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Smeša je hlađena do -78°C i mešana 10 min, a zatim je ukapavanjem dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.6 mL, 1.6 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 8 minuta, zatim je 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil propionat (47b) (0.44 g, 1.5 mmol) u THF (5 mL) dodato na -78°C. Smeša je mešana na -78°C 10 min, zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (47) (300 mg) kao čvrsta supstanca. LC/MS: m/z = 450.09 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.49 (s, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.77 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 4.05 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 3.95 (s, 2H), 3.35 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.01 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.46-2.34 (m, 3H), 2.19-2.15 (m, 1H), 1.92-1.83 (m, 2H), 1.16 (t, J = 7.7 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 9.3 Hz, 6H), 0.96 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.5, 171.0, 167.1, 82.5, 70.0, 62.0, 60.2, 47.3, 39.1, 38.4, 27.8, 21.0, 20.9, 20.8, 20.4, 20.2, 17.5, 9.3.

Primer 48 (samo za referencu)

Sinteza (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1.6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il ((3-metil-2-oksotetrahidro-2H-piran-3-il)metil)sulfata (48)

[0573]

Korak 1: Sinteza 3-((benziloksi)metil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona (48a).

[0574]

[0575] δ-Valerolakton (5.23 g, 52.2 mmol) je rastvoren u smeši THF (120 mL) i HMPA (9.2 mL) u atmosferi argona. Reakciona smeša je hlađena do -78°C i mešana 10 min. Ukapavanjem je dodat rastvor litijum diizopropilamida, 2.0 M u THF (28.7 mL, 57.5 mmol) tokom 5 min. Reakcija je mešana na -78°C tokom 30 min, a zatim je čist MeI (3.3 mL, 52.8 mmol) dodat u reakciju tokom 5 min. Smeša je mešana na -78°C tokom 30 min, a zatim uklonjena iz kupatila za hlađenje i ostavljena da se zagreje do 0°C i mešana 30 min (napomena: smeša je postepeno postala žuta tokom ovog vremena). Smeša je ponovo ohlađena na -78°C i mešana 10 min, a zatim je dodata dodatna količina litijum diizopropilamida, 2.0 M u THF (28.7 mL, 57.5 mmol) tokom 5 min. Reakcija je mešana na -78°C tokom 30 min, zatim je dodat čisti benzil hlorometil etar (70%; 10.5 mL, 52.8 mmol) tokom 5 min. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 16h. Rastvarač je zatim uklonjen pod vakuumom, a ostatak je podeljen između zasićenog amonijum hlorida (200 mL) i EtOAc (200 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 100 mL), a kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 × 100 mL), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom (19 g). Ostatak je stavljen na suvo na silika gel i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (120 g kertridž) upotrebom EtOAc/heksana kao eluenta da bi se dobio proizvod kontaminiran nečistoćom (6.9 g). Ostatak je ponovo prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu upotrebom DCM/heksana (0:1 do 4:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (48a) (1.76 g) kao tečnost.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.29-7.37 (m, 5H), 4.61 (dd, J= 21.0, 12.3 Hz, 2H), 4.32-4.38 (m, 2H), 3.26-3.81 (dd, J= 15.8, 8.1 Hz, 2H), 2.21-2.30 (m, 1H), 1.87-1.94 (m, 2H), 1.59-1.66 (m, 1H), 1.23 (s, 3H).

Korak 2: Sinteza 3-(hidroksimetil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona (48b).

[0577] 3-((benziloksi)metil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-on (48a) (0.52 g, 2.2 mmol) rastvoren je u 2-propanolu (25 mL) i rastvor je degaziran i ponovo ispran argonom. (Napomena: nemojte koristiti MeOH kao rastvarač, jer može da otvori prsten laktona tokom hidrogenacije). U smešu je dodat paladijum na ugljeniku, 10% (0.26 g, 0.2 mmol), i sistem je hermetički zatvoren. Reakcija je degazirana i ponovo isprana vodonikom (3 puta) i mešana u atmosferi vodonika 2 h. Suspenzija je filtrirana kroz jastučić od Celite<®>i filter kolač je ispran svežim 2-propanolom (2 × 50 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i proizvod (48b) je upotrebljen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.27-4.45 (m, 2H), 3.67 (d, J= 11.4 Hz, 1H), 3.52 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 1.84-2.03 (m, 2H), 1.58-1.64 (m, 1H), 1.29 (s, 3H).

Korak 3: Sinteza (3-metil-2-oksotetrahidro-2H-piran-3-il)metil sulfohloridata (48c).

[0578]

[0579] Rastvor 3-(hidroksimetil)-3-metiltetrahidro-2H-piran-2-ona (48b) (0.32 g, 2.2 mmol) i piridina (0.21 mL, 2.6 mmol) u Et2O (10 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Čisti sulfuril hlorid (0.21 mL, 2.6 mmol) je dodat ukapavanjem u gornji rastvor preko šprica. Smeša je mešana na -78°C 10 min, zatim je balon zagrejan do sobne temperature i mešana 1 h (praćeno TLC EtOAc/heksani, 3:7). Nastao je talog da bi se dobila gusta suspenzija. Suspenzija je filtrirana kroz 0.45 µM Teflon<®>filter, a filter kolač ispran svežim Et2O (2 × 5 mL). Alikvot (0.5 mL) je uzet i koncentrovan i dobijen je NMR za smešu. Preostali rastvor koji sadrži proizvod (48c) je direktno upotrebljen u sledećem koraku.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.87 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.25-4.50 (m, 2H), 4.32 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 2.00-2.20 (m, 2H), 1.75-2.00 (m, 2H), 1.39 (s, 3H).

Korak 4: Sinteza (2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il ((3-metil-2-oksotetrahidro-2H-piran-3- il)metil)sulfata (48).

[0580]

[0581] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.39 g, 2.1 mmol) rastvoren je u THF (18 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (0.65 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. NaHMDS, 1.0 M u THF (2.3 mL, 2.3 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 1 h. Rastvor (3-metil-2-oksotetrahidro-2H-piran-3-il)metil sulfohloridata (48c) (0.51 g, 2.1 mmol) u Et2O (iz prethodne reakcije) je brzo dodat u reakcionu smešu. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. U reakcionu smešu su dodati fiziološki rastvor (100 mL) i EtOAc (100 mL) i vodeni i organski slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 100 mL), a kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 × 100 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je stavljen na suvo na silika gel (8 g) i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (1:4 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio željeni proizvod (48) (0.21 g,) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 392 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.55 (br. d, J= 9.3 Hz, 1H), 5.77 (br. s, 1H), 4.83-5.03 (m, 1H), 4.56 (m, 0.5H), 4.33-4.45 (m, 2.5H), 4.17 (m, 1H), 4.06 (m, 1H), 3.35 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 3.04 (m, 1H), 2.38-2.44 (m, 1H), 1.68-2.20 (m, 7H), 1.36 (d, J = 7.2 Hz, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 172.8, 172.5, 171.2, 171.0, 167.3, 167.1, 80.4, 79.9, 76.7, 70.8, 70.8, 62.0, 60.3, 60.2, 47.2, 47.1, 43.1, 43.0, 29.8, 29.6, 22.9, 22.9, 20.920.8, 20.17. (Napomena: postoji nekoliko signala koji su podeljeni zbog hiralnosti u laktonskom proizvodu).

Primer 49 (samo za referencu)

Sinteza 2-(3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil acetata (49)

[0582]

Korak 1: Sinteza etil 3-(2-metoksifenil)-2,2-dimetilpropanoata (49a).

[0583]

[0584] Mešani rastvor litijum diizopropilamida, 2.0 M u THF (26.6 mL, 53.2 mmol) je razblažen sa THF (100 mL), hlađen do -78°C u atmosferi argona, i mešan 5 min. Čisti etil izobutirat (6.68 mL, 49.7 mmol) je dodat ukapavanjem tokom 15 min, i smeša je ostavljena da se meša na -78°C tokom 1 h. Rastvor 1-(bromometil)-2-metoksibenzena (pripremljen prema J. Am. Chem. Soc. 2013, 135, 11951) (12.0 g, 59.7 mmol) u THF (100 mL) je dodavan ukapavanjem tokom 30 min. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 20 h. Reakcija je ugašena fiziološkim rastvorom (100 mL) i ekstrahovana sa Et2O (4 × 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (120 g kolona) upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 5:95) kao eluenta da bi se dobio proizvod (49a) kao tečnost (8.06 g, 68%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.18 (dt, J= 1.8, 8.1 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 6.82-6.87 (m, 2H), 4.12 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.92 (s, 2H), 1.26 (t, J= 6.9 Hz, 3H), 1.15 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 3,3-dimetilhroman-2-ona (49b).

[0585]

[0586] Etil 3-(2-metoksifenil)-2,2-dimetilpropanoat (49a) (8.1 g, 34.2 mmol) rastvoren je u DCM (200 mL) i hlađen do 0°C u atmosferi argona. Rastvor BBr3(3.6 mL, 37.7 mmol) u DCM (100 mL) je dodat ukapavanjem u hladan rastvor. Smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći (čvrsta materija nastala tokom reakcije). Obojena suspenzija je ohlađena u kupatilu sa ledenom vodom i u smešu je dodata voda (150 mL). Organski i vodeni slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 × 75 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4; Napomena: rastvor je postao tamniji), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (49b) (4.85 g, 80%) kao ulje. Ovaj materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.01-7.25 (m, 3H), 2.85 (s, 2H), 1.29 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 2-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)fenola (49c).

[0587]

[0588] LiAlH4(1.94 g, 51.1 mmol) je suspendovan u Et2O (52.5 mL) u atmosferi argona i smeša je hlađena do 0°C u kupatilu sa ledenom vodom. Rastvor 3,3-dimetilhroman-2-ona (49b) (4.85 g, 27.5 mmol) u Et2O (50 mL) i dodavan ukapavanjem u suspenziju tokom 30 min. Smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 20 h. Smeša je hlađena u kupatilu sa ledenom vodom i vodom (2 mL), 15% vodeni rastvor natrijum hidroksida (2 mL) i voda (6 mL), su uzastopno dodavani sporim dodavanjem. Smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 15 min. Anhidrovani MgSO4je dodat u suspenziju i smeša je mešana 15 min. Smeša je filtrirana i filter kolač je ispran sa Et2O (3 × 50 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (49c) (4.34 g, 88%) kao čvrsta supstanca. Ovaj materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.15 (dt, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.04 (dd, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.82-7.01 (m, 2H), 3.22 (s, 2H), 2.61 (s, 2H), 0.98 (s, 6H).

Korak 4: Sinteza 2-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenola (49d).

[0589]

[0590] Rastvor 2-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)fenola (49c) (4.0 g, 22.2 mmol) i imidazola (3.8 g, 56.0 mmol) rastvoren je u DMF (50 mL) i terc-butildimetilsilil hloridu (4.0 g, 26.6 mmol) je dodat u rastvor i mešan 2 h. Rastvarač je uklonjen pod visokim vakuumom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (40 g kertridž) sa heksanima (5:95 do 2:3) kao eluentom da bi se dobio proizvod (49d) kao ulje (7.34 g, >100%). Jedinjenje je bilo približno 90% čistoće i korišćeno je direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.11 (dt, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.10 (dd, J= 7.5, 1.8 Hz, 1H), 6.90 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 6.79 (dt, J= 6.9, 0.9 Hz, 1H), 3.17 (s, 2H), 2.57 (s, 2H), 0.97 (s, 9H), 0.92 (s, 6H), 0.13 (s, 6H).

Korak 5: Sinteza 2-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil acetata (49e).

[0591]

[0592] Rastvor 2-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenola (49d) (oko 90% čistoća; 2.5 g, 7.6 mmol) i Et3N (2.3 g, 22.9 mmol) u THF (90 mL) je hlađen do 0°C u ledenom kupatilu u atmosferi argona. Acetil hlorid (0.65 mL, 9.2 mmol) je dodat ukapavanjem u smešu, a nakon potpunog dodavanja, ledeno kupatilo je uklonjeno. Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 2 h. Suspenzija je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana svežim THF (2 × 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je suv punjen na silika gel, zatim prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (40 g kartridž) upotrebom 0-8% EtOAc/heksana (0:1 do 8:92) kao eluenta da bi se dobio proizvod (49e) (2.16 g, 84%) kao ulje.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.11-7.27 (m, 3H), 7.04 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 3.25 (s, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.30 (s, 3H), 0.93 (s, 9H), 0.81 (s, 6H), 0.06 (s, 6H).

Korak 6: Sinteza 2-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)fenil acetata i 3-(2-hidroksifenil)-2,2-dimetilpropil acetata (49f).

[0593]

[0594] Piridin hidrofluorid (70%, 1.3 mL, 10.4 mmol) je dodat u mešani rastvor 2-(3-((tercbutildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil acetata (49e) (0.70 g, 2.1 mmol) i piridina (2.5 mL, 31.2 mmol) u THF (25 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi argona, i smeša je mešana 24 h. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom (temperatura kupatila podešena do 25°C), a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 × 75 mL), osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobila smeša željenog alkohola i 3-(2-hidroksifenil)-2,2-dimetilpropil acetata u 65:35. NMR analiza je pokazala prisustvo oba estra proizvoda (49f). Ovaj materijal je direktno korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) željenog proizvoda: δ 6.8-7.26 (m, 4H), 3.79 (s, 2H), 3.27 (s, 2H), 2.62 (s, 2H), 2.53 (s, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 0.974 (s, 6H), 0.90 (s, 6H).

Korak 7: Sinteza 2-(3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil acetata (49 g).

[0595]

[0596] Rastvor sulfuril hlorida (172 µL, 2.1 mmol) u Et2O (6.8 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 2-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)fenil acetata (49f) (0.43 g, 1.9 mmol) i piridina (172 µL, 2.1 mmol) u Et2O (2.0 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida preko kanile. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, zatim je balon zagrejan do sobne temperature i mešan 1.5 h (praćeno pomoću TLC 30% EtOAc/heksani). Suspenzija je filtrirana kroz 0.45 µm PTFE filter špric i filter špric je ispran svežim Et2O (10 mL) da bi se dobio proizvod (49 g). Filtrat je korišćen odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Pretpostavljeno je da je prinos kvantitativan.

Korak 8: Sinteza 2-(3-((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2 ,2-dimetilpropil)fenil acetata (49).

[0597]

[0598] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.44 g, 2.4 mmol) rastvoren je u THF (22 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (0.8 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.1 mL, 2.1 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. Rastvor 2-(3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil acetata (49 g) (0.62 g, 1.9 mmol) u Et2O iz prethodne reakcije je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. U reakcionu smešu je dodat fiziološkim rastvorom (100 mL) i vodeni i organski slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 200 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 × 75 mL), sušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (6 mL) i filtriran kroz fritu od 0.45 µm i zatim prečišćen preparativnom HPLC sa 20-90% MeCN/vodom (bez modifikatora) kao eluentom da bi se dobio proizvod (49) (0.18 g, 20%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 470 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.23-7.29 (m, 1H), 7.18-7.20 (m, 2H), 7.08 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 6.52 (br. s, 1H), 5.78 (br. s, 1H), 4.55 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 4.19-4.22 (m, 2H), 4.05 (br. d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.30 (br. d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.51-2.62 (m, 2H), 2.39-2.44 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.10-2.19 (m, 1H), 1.84-2.00 (m, 2H), 0.98 (d, J= 3.0 Hz, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.1, 169.6, 167.1, 149.6, 132.8, 129.1, 128.0, 125.8, 122.7, 83.4, 62.0, 60.3, 47.2, 38.1, 36.3, 23.7, 21.3, 20.8, 17.6.

Primer (50) (samo za referencu)

Sinteza 2-(3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50)

[0599]

Korak 1: Sinteza 2-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50a).

[0600]

[0601] 2-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenol (0.9 g, 3.1 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.93 g, 7.6 mmol) rastvoren je u THF (50 mL) u atmosferi argona. Trimetilacetil hlorid (0.45 mL, 3.7 mmol) je dodat ukapavanjem u smešu na sobnoj temperaturi da bi se odmah formirala bela čvrsta supstanca i dodavanje je nastavljeno sve dok se ne formira suspenzija. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 h i zatim filtrirana i filterski kolač je ispran sa THF (10 mL). Filtrat je nanet na silika gel (15 g) i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela koristeći EtOAc/heksane (0:1 do 6:94) kao eluent da bi se dobio proizvod (50a) kontaminiran sa oko 3 % početnog materijala NMR analizom. Ovaj materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.27 (dd, J = 7.2, 2.1 Hz, 1H), 7.21 (dt, J = 7.5, 1.8 Hz, 1H), 7.15 (dt, J = 7.8, 1.8 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 8.1, 1.8 Hz, 1H), 3.25 (s, 2H), 2.49 (s, 2H), 1.38 (s, 9H), 0.92 (s, 9H), 0.82 (s, 6H), 0.05 (s 6H).

Korak 2: Sinteza 2-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50b).

[0602]

[0603] Piridin hidrofluorid (70%, 1.3 mL, 10.4 mmol) je dodat u mešani rastvor 2-(3-((tercbutildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50a) (0.70 g, 1.8 mmol) i piridina (2.5 mL, 31.2 mmol) u THF (25 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi argona, i smeša je mešana 24 h. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom (temperatura kupatila podešena do 25°C), a ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran fiziološkim rastvorom (3 × 75 mL), osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod (50b) kao ulje. Ovaj materijal je direktno korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.12-7.26 (m, 3H), 6.98 (m, 1H), 3.31 (s, 2H), 2.51 (s, 2H), 1.39 (s, 9H), 0.89 (s, 9H).

Korak 3: Sinteza 2-(3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50c).

[0604]

[0605] Rastvor sulfuril hlorida (173 µL, 2.1 mmol) u Et2O (7.5 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 2-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50b) (0.47 g, 1.8 mmol) i piridina (173 µL, 2.1 mmol) u Et2O (2,2 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida preko kanila. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim je balon zagrejan do sobne temperature i mešan 1.5 h (praćeno pomoću TLC 30% EtOAc/heksana). Suspenzija je filtrirana kroz 0.45-µm PTFE špric filter i filter špric je ispran svežim Et2O da bi se obezbedio proizvod (50c). Filtrat je korišćen odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. Pretpostavljeno je da je prinos kvantitativan.

Korak 4: Sinteza 2-(3-((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50).

[0606]

[0607] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.41 g, 2.2 mmol) rastvoren je u THF (23 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (0.8 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.2 mL, 2.2 mmol) dodat je ukapavanjem u ohlađeni rastvor i rastvor je mešan 10 min. Rastvor 2-(3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)fenil pivalata (50c) (0.65 g, 1.8 mmol) u Et2O iz prethodne reakcije je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći. U reakcionu smešu je dodat fiziološki rastvorom (100 mL) i vodeni i organski slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 200 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 × 75 mL), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF (6 mL) i filtriran kroz fritu od 0.45 µm, a zatim prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio proizvod (50) (0.21 g, 23%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 512 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.12-7.28 (m, 3H), 6.99 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 6.50 (br. s, 1H), 5.78 (br. s, 1H), 4.57 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17 (br. s, 1H), 4.04 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.28 (br. d, J= 11.7 Hz, 1H), 3.03 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.52-2.62 (m, 2H), 2.39-2.50 (m, 1H), 2.10-2.20 (m, 1H), 1.78-1.98 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 0.97 (d, J = 4.2 Hz, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 177.2, 171.1, 167.0, 150.1, 132.5, 129.2, 127.9, 125.6, 122.6, 83.7, 61.9, 60.2, 47.2, 39.3, 37.5, 36.2, 27.4, 23.5, 20.8, 17.6.

Primer 51 (samo za referencu)

Sinteza S-(4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1.6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil)etantioata (51)

[0608]

Korak 1: Sinteza S-(4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil) etantioata (51a).

[0609]

[0610] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (271 µL, 3.7 mmol) u Et2O (5 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor S-(4-hidroksi-3,3-dimetilbutil) etantioata (pripremljen prema Chem. Commun. 2011, 47, 2038) (500 mg, 2.8 mmol) i piridina (267 µL, 3.3 mmol) u Et2O (3 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Balon je ispran dietil etrom (2 × 5 mL) i deo dobijen posle ispiranja je takođe dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h i ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi još 20 min. Talog je filtriran (brzo) i filterski kolač je ispran sa Et2O (12 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (51a) kao ulje koje je korišćeno odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. Korak 2: Sinteza S-(4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil)etantioata (51).

[0611]

[0612] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (430 mg, 2.3 mmol) rastvoren je u piridinu (8 mL) i hlađen do 0°C pod atmosferom argona. Rastvor S-(4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil) etanetioata (51a) (0.75 g, 2.7 mmol) u THF (4 mL) je dodat u reakcionu smešu na 0°C. Dobijena smeša je mešana 1 h i rastvarači su uklonjeni pod visokim vakuumom na sobnoj temperaturi. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 9:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (50) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 424.2 [M+1]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.47 (br. s, 1H), 5.61 (br. s, 1H), 4.53 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.17 (br. s, 1H), 4.05-4.03 (m, 1H), 3.39-3.30 (m, 1H), 3.01 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 2.85-2.80 (m, 2H), 2.48-2.40 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.20 - 2.18 (m, 1H), 2.01-1.80 (m, 2H), 1.03 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 195.4, 170.9, 166.9, 83.1, 61.8, 60.0, 47.1, 38.4, 34.8, 30.5, 23.9, 23.4, 23.2, 20.6, 17.4.

Primer 52 (samo za referencu)

Sinteza S-(5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil)etantioata (52)

[0613]

Korak 1: Sinteza 5-bromo-2,2-dimetilpentan-1-ola (52a).

[0614]

[0615] DCM (18 mL) je dodat u LiBH4(0.66 g, 30.4 mmol) nakon čega je ukapavanjem dodavan anhidrovani MeOH (1.2 ml, 30.4 mmol) tokom 20 minuta u atmosferi argona. Nakon što je prestala efervescencija H2, rastvor etil 5-bromo-2,2-dimetilpentanoata (pripremljen prema objavi PCT prijave br. 2011046771) (4.5 g, 19.0 mmol) u DCM (10 mL) je dodavano ukapavanjem tokom 20 min. Reakciona smeša je zagrevana do refluksa 16 h, hlađena do sobne temperature i pažljivo hidrolizovana sa zasićenim rastvorom NH4Cl (30 mL). Suspenzija je ekstrahovana sa DCM (3 × 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa 1N HCl (26 mL) i fiziološkim rastvorom (40 mL), osušeni i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio proizvod (52a) (3.61 g, 97%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.39 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.24 (s, 2 H), 1.90-1.76 (m, 2 H), 1.48 (br. s, 1H), 1.41-1.36 (m, 2H), 0.88 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza S-(5-hidroksi-4,4-dimetilpentil) etantioata (52b).

[0616]

[0617] Rastvor 5-bromo-2,2-dimetilpentan-1-ola (52a) (2.0 g, 10.3 mmol) i kalijum tioacetata (2.34 g, 20.5 mmol) u acetonu (22 mL) je mešan u inertnoj atmosferi na sobnoj temperaturi 23 h. Posle uklanjanja rastvarača pod vakuumom na sobnoj temperaturi, ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 2:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (52b) (1.2 g, 61%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.31 (s, 2H), 2.85 (t, J= 7.8 Hz, 2H), 2.32 (s, 3 H), 1.62-1.48 (m, 2 H), 1.32-1.21 (m, 2H), 0.86 (s, 6H). Korak 3: Sinteza S-(5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil) etantioata (52c).

[0618]

[0619] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (379 µL, 5.2 mmol) u Et2O (8 mL) je hlađen do -78°C pod atmosferom argona. Rastvor S-(5-hidroksi-4,4-dimetilpentil) etantioata (52b) (700 mg, 3.6 mmol) i piridina (374 µL, 4.6 mmol) u Et2O (4 mL) su dodavani ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h i zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Talog je filtriran (brzo) i filter kolač je ispran sa Et2O (10 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (52c) kao ulje koje je korišćeno odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. Korak 4: Sinteza S-(5-((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil) etantioata (52).

[0620]

[0621] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid(1) (600 mg, 3.2 mmol) rastvoren je u piridinu (9 mL) i hlađen do 0°C pod atmosferom argona. Rastvor S(5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil) etantioata (52c) (857 mg, 3.0 mmol) u THF (5 mL) je dodat u reakcionu smešu na 0°C. Dobijena smeša je mešana 1 h i rastvarači su uklonjeni pod visokim vakuumom na sobnoj temperaturi. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 9:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (52) (70 mg, 5%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 438.2 [MH]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (br. s, 1H), 5.56 (br. s, 1H), 4.49 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.19 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.17 (br. s, 1H), 4.05-4.03 (m, 1H), 3.38-3.30 (m, 1H), 3.01 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 2.85 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 2.46-2.40 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.21-2.18 (m, 1H), 1.98-1.82 (m, 2H), 1.40-1.33 (m, 2H), 0.97 (s, 3H), 0.96 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 175.7, 170.8, 166.9, 83.6, 61.8, 60.0, 47.1, 37.4, 34.3, 30.6, 29.4, 23.9, 23.6, 23.4, 20.6, 17.4.

Primer 53 (samo za referencu)

Sinteza S-(3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)etantioata (53)

[0622]

Korak 1: Sinteza S-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil) etantioata (53a).

[0623]

[0624] Kalijum tioacetat (4.1 g, 35.8 mmol) je rastvoren u DMF (20 mL) u atmosferi argona.

3-hidroksi-2,2-dimetilpropil 4-metilbenzensulfonat (pripremljen prema objavi PCT prijave br.

2012165648) (4.2 g, 16.3 mmol) je dodat i smeša je mešana na 80°C tokom 2.5 h. Posle hlađenja, dodat je fiziološki rastvor (100 mL) i smeša je ekstrahovana sa Et2O (3 × 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (5 × 50 mL), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom (zaostali DMF je uklonjen visokim vakuumom). Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 15:85) kao eluenta da bi se dobio proizvod (53a) (1.06 g, 40%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 323 (br. s, 2H), 2.89 (s, 2H), 2.62 (br. s, 1H), 2.37 (s, 3H), 0.94 (s, 6H). Korak 2: Sinteza S-(3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil) etantioata (53b).

[0625]

[0626] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (283 µL, 3,9 mmol) u Et2O (4 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor S-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil) etantioata (53a) (520 mg, 3.1 mmol) i piridina (327 µL, 4.0 mmol) u Et2O (6 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h i zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Talog je filtriran (brzo) i filter kolač je ispran sa Et2O (10 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (53b) kao ulje koje je korišćeno odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. Korak 3: Sinteza S-(3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil)etantioata (53).

[0627]

[0628] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid(1) (600 mg, 3.2 mmol) rastvoren je u piridinu (10 mL) i hlađen do 0°C pod atmosfera argona. Rastvor S-(5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil) etantioata (53b) (800 mg, 3.1 mmol) u THF (6 mL) je dodat u reakcionu smešu na 0°C. Dobijena smeša je mešana 2 h i rastvarači su uklonjeni pod visokim vakuumom na sobnoj temperaturi. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (53) (90 mg, 7%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 410.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.47 (br. s, 1H), 5.56 (br. s, 1H), 4.51 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.17 (br. s, 1H), 4.06-4.03 (m, 1H), 3.36-3.24 (m, 1H), 3.06-2.88 (m, 2H), 2.51-2.41 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.21-2.08 (m, 1H), 1.98-1.82 (m, 2H), 1.36-1.22 (m, 1H), 1.04 (s, 3H), 1.02 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 194.7, 170.8, 166.9, 81.9, 61.8, 60.1, 47.1, 36.7, 35.6, 30.6, 23.2, 22.9, 20.6, 17.4.

Primer 54 (samo za referencu)

Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetilbenzoata (54)

[0629]

Korak 1: Sinteza 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetilbenzoata (54a).

[0630]

[0631] U mešani rastvor 2,2-dimetilpropan-1,3-diola (2.5 g, 24.3 mmol) u DCM (60 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, dodat je 2,6-dimetilbenzoil hlorid (1.2 mL, 8.1 mmol), piridin (1.1 mL, 13.7 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (99 mg, 0.8 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i smeša je mešana preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem 1N HCl, i smeša je ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i fiziološkim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (1:9 do 2:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (54a) (1.5 g, 78%) u vidu ulja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.21 (m, 1H), 7.04 (m, 2H), 4.18 (s, 2H), 3.41 (s, 2H), 2.32 (s, 6H), 2.20 (br. s, 1H), 0.99 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetilbenzoata (54b).

[0632]

[0633] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.25 mL, 3.9 mmol) u Et2O (6 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetilbenzoata (54a) (500 mg, 2.1 mmol) i piridina (0.26 mL, 3.3 mmol) u Et2O (6 mL) dodat je ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h i zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Talog je filtriran (brzo) i filter kolač je ispran sa Et2O (12 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (54b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetilbenzoata (54).

[0634]

[0635] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (420 mg, 2.3 mmol) je rastvoren u THF (12 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (0.7 mL), a dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.3 mL, 2.3 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. Reakcionoj smeši je brzo dodat rastvor 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil 2,6-dimetilbenzoata (54b) (660 mg, 2.0 mmol) u THF (8 mL). Posle mešanja na -78°C tokom 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 2 h. Dodati su EtOAc (400 mL), zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(40 mL) i voda (40 mL). Organski sloj je odvojen i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(60 mL), H2O (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (60 mL), a zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (180 mg, 19%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 484.01 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.19 (m, 1H), 7.04 (m, 2H), 6.47 (s, 1H), 5.55 (s, 1H), 4.58 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.39 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.22 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 4.16 (m, 1H), 4.11 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.04-4.02 (m, 1H), 3.33-3.29 (m, 1H), 3.01-2.98 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.20-2.08 (m, 1H), 1.93-1.76 (m, 2H), 1.10 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 170.8, 169.9, 166.9, 134.9, 133.6, 129.4, 127.5, 802, 69.1, 61.8, 60.1, 47.1, 35.2, 21.4, 21.3, 20.7, 19.8, 17.4.

Primer 55 (samo za referencu)

Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil adamantan-1-karboksilata (55)

[0636]

Korak 1: Sinteza 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil (3r,5r,7r)-adamantan-1-karboksilata (55a).

[0637]

[0638] U mešani rastvor 2,2-dimetilpropan-1,3-diola (2.5 g, 24.3 mmol) u DCM (60 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, dodat je 1-adamantan-karbonil hlorid (1.36 g, 6.9 mmol), piridin (1.1 mL, 13.7 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (99 mg, 0.8 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i smeša je mešana preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem 1N HCl, i smeša je ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i fiziološkim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio proizvod (55a) (1.82 g, 100%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.91 (s, 2H), 3.25 (s, 2H), 2.01 (br. s, 3H), 1.89 (br. s, 6H), 1.71 (br. s, 7H), 0.91 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil (3r,5r,7r)-adamantan-1-karboksilata (55b).

[0639]

[0640] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (266 µL, 3,3 mmol) u Et2O (4 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 3-hidroksi-2,2-dimetilpropil-adamantan-1-karboksilata (55a) (600 mg, 2.2 mmol) i piridina (0.28 mL, 3.5 mmol) u Et2O (4 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Balon je ispran sa Et2O (5 mL), a deo dobijen posle ispiranje je takođe dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Talog je filtriran (brzo) i filterski kolač je ispran sa Et2O (12 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (55b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil adamantan-1-karboksilata (55).

[0641]

[0642] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (442 mg, 2.4 mmol) je rastvoren u THF (14 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (0.8 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.6 mL, 2.6 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. U reakcionu smešu je brzo dodat rastvor 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropil-adamantan-1-karboksilata (55b) (750 mg, 2.1 mmol) u THF (8 mL). Posle mešanja na -78°C tokom 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 2 h. Dodati su EtOAc (400 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(40 mL) i H2O (40 mL). Organski sloj je odvojen i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(60 mL), H2O (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (60 mL), zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (55) (180 mg, 17%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 514.12 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.48 (s, 1H), 5.55 (s, 1H), 4.58 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.05 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.84 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.34-3.32 (m, 1H), 3.03-2.99 (m, 1H), 2.49-2.41 (m, 1H), 2.20-2.14 (m, 1H), 2.04 (br. s, 3H), 1.91-1.8 (m, 8H), 1.87 (br. s, 6H), 1.03 (s, 7H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 178.0, 171.7, 167.7, 81.3, 68.7, 62.6, 60.8, 47.8, 41.6, 39.5, 37.2, 36.2, 28.6, 22.0, 21.9, 21.4, 18.1.

Primer 56 (samo za referencu)

Sinteza dietil 2-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-metilmalonata (56)

Korak 1: Sinteza dietil 2-(hidroksimetil)-2-metilmalonata (56a).

[0644]

[0645] U suspenziju paraformaldehida (1.3 g, 43.3 mmol) i K2CO3(11 g, 79 mmol) u EtOH (150 mL) dodat je dietil 2-metilmalonat (4.5 mL, 26.3 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 17 h, zatim filtrirana kroz sloj Celite<®>i filter kolač je ispran sa EtOH (2 × 30 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (56a) (4.0 g, 74%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.22 (q, J = 6.9 Hz, 4H), 3.83 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.90 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.26 (t, J= 6.9 Hz, 6H).

Korak 2: Sinteza dietil 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-metilmalonata (56b).

[0646]

[0647] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (248 µL, 3.0 mmol) u Et2O (8 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor dietil 2-(hidroksimetil)-2-metilmalonata (56a) (500 mg, 2.4 mmol) i piridina (0.26 mL, 3.2 mmol) u Et2O (4 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Balon je ispran sa Et2O (5 mL) i ostatak dobijen posle ispiranja je takođe dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Talog je filtriran (brzo) i filter kolač je ispran sa Et2O (12 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (56b) kao ulje koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza dietil 2-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-metilmalonata (56).

[0648]

[0649] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (390 mg, 2.1 mmol) rastvoren je u THF (10 mL) i 1,3- dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (0.8 mL), a dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.2 mL, 2.2 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. U reakcionu smešu je brzo dodat rastvor dietil 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-metilmalonata (56b) (638 mg, 2.1 mmol) u THF (8 mL). Posle mešanja na -78°C tokom 10 min, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 2 h. Dodati su EtOAc (400 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(40 mL) i H2O (40 mL). Organski sloj je odvojen i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(60 mL), H2O (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (60 mL), zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 9:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (56) (166 mg, 17%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 452.03 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.49 (s, 1H), 5.58 (s, 1H), 5.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.24 (q, J= 7.2 Hz, 4H), 4.17 (m, 1H), 4.05 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 3.35 (m, 1H), 3.01 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 2.49-2.41 (m, 1H), 2.20-2.14 (m, 1H), 1.98-1.81 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.28 (t, J = 7.2 Hz, 6H).

<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.1, 168.6, 168.5, 167.1, 76.5, 62.3, 61.9, 60.2, 53.9, 47.1, 20.8, 17.8, 17.5, 14.0.

Primer 57

Sinteza propil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (57)

[0650]

Korak 1: Sinteza propil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (57a).

[0651]

[0652] Dodata je smeša 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoične kiseline (1.15 g, 9.7 mmol) i 1-propanol (15 mL) i konc. H2SO4(70 µL, 1.3 mmol) u mikrotalasnoj bočici od 20 mL i mešana na sobnoj temperaturi, a zatim zagrevana u mikrotalasnoj pećnici na 80°C tokom 2 h, i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je željeni proizvod identifikovan pomoću TLC (EtOAc / heksani; 3:7), smeša je koncentrovana pod vakuumom (40°C) i razblažena sa EtOAc (80 mL) i H2O (30 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (dva puta) i fiziološkim rastvorom, zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobio proizvod (57a) (1.18 g, 76%) kao ulje. Materijal je korišćen u sledećem koraku direktno bez prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.07 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.55 (s, 2H), 2.42 (br. s, 1H), 1.70-1.61 (m, 2H), 1.19 (s, 6H), 0.95 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

Korak 2: Sinteza propil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (57b).

[0653]

[0654] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (194 µL, 2.7 mmol) u Et2O (1.0 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor propil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (57a) (0.42 g, 2.6 mmol) i piridina (215 µL, 2.7 mmol) u Et2O je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 1 mL), a deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C 5 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57b) (0.56 g, 83%) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.50 (s, 2H), 4.10 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 1.72-1.64 (m, 2H), 1.32 (s, 6H), 0.95 (t, J= 7.2 Hz, 3H).

Korak 3: Sinteza propil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (57).

[0655]

[0656] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.22 g, 1.2 mmol) rastvoren je u THF (5.5 mL) i HMPA (1.0 mL), i dobijeni mešani rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.5 mL, 1.5 mmol), a zatim rastvor propil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (57b) (0.40 g, 1.5 mmol) u THF (2 × 1 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc (40 mL). Vodeni i organski slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (3:7 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio željeni proizvod (57) (190 mg, 39%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 408.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.47 (br. s, 1H), 5.57 (br. s, 1H), 4.66 (dd, J= 9.0, 35.1 Hz, 2H), 4.17-4.04 (m, 4H), 3.32 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.46-2.41 (m, 1H), 2.14-2.13 (m, 1H), 1.99-1.83 (m, 2H), 1.71-1.66 (m, 2H), 1.29 (s, 3H), 1.28 (s, 3H), 0.95 (t, J = 7.6 Hz, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ174.1, 170.9, 166.8, 80.3, 66.8, 61.8, 60.1, 47.1, 42.9, 22.1, 21.9, 21.6, 20.7, 17.4, 10.3.

Primer (58)

Sinteza butil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (58)

[0657]

Korak 1: Sinteza butil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (58a).

[0659] Dodata je smeša 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoične kiseline (1.15 g, 9.7 mmol) i 1-butanol (15 mL) i konc. H2SO4(70 µL, 1.3 mmol) u mikrotalasnoj bočici od 20 mL i mešana je na sobnoj temperaturi, zatim zagrevana u mikrotalasnoj pećnici na 80°C tokom 2 h, a zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Kada je željeni proizvod identifikovan pomoću TLC (EtOAc / heksani; 3:7), smeša je koncentrovana pod vakuumom (40°C; zajedno isparavana sa toluenom × 3) i razblažena sa EtOAc (80 mL) i H2O (30 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (dva puta) i fiziološkim rastvorom, zatim osušen (Na2SO4), filtriran i koncentrovan da bi se dobio proizvod (58a) (1.24 g, 81%) kao ulje. Materijal je korišćen u sledećem koraku direktno bez prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.11 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.55 (s, 2H), 2.42 (br. s, 1H), 1.65-1.58 (m, 2H), 1.43-1.35 (m, 2H), 1.19 (s, 6H), 0.94 (t, J= 7.5 Hz, 3H).

Korak 2: Sinteza butil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (58b).

[0660]

[0661] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (198 µL, 2.7 mmol) u Et2O (1.0 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor propil 3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (58a) (0.47 g, 2.7 mmol) i piridina (219 µL, 2.7 mmol) u Et2O je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Boca je isprana sa Et2O (3 × 1 mL), koji je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C 5 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (58b) (0.52 g, 72%) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.50 (s, 2H), 4.14 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.66-1.59 (m, 2H), 1.43-1.35 (m, 2H), 1.32 (s, 6H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

Korak 3: Sinteza butil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (58).

[0662]

[0663] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.22 g, 1.2 mmol) rastvoren je u THF (5 mL) i HMPA (1 mL), i dobijeni mešani rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. Dodat je rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.5 mL, 1.5 mmol), i smeša je mešana 10 min. U reakcionu smešu je brzo dodat rastvor butil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (58b) (0.41 g, 1.5 mmol) u THF (5 × 1 mL). Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc (40 mL). Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u DMF i prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio željeni proizvod (58) (70 mg, 14%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 422.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.47 (br. s, 1H), 5.67 (br. s, 1H), 4.65 (dd, J= 34.8, 9.0 Hz, 2H), 4.16-4.04 (m, 4H), 3.32 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 3.02 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.18-2.13 (m, 1H), 2.01-1.80 (m, 2H), 1.67-1.58 (m, 3H), 1.45-1.32 (m, 2H), 1.28 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 0.94 (t, J= 7.4 Hz, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.1, 170.8, 166.8, 80.3, 65.1, 61.8, 60.1, 47.1, 42.8, 30.5, 22.1, 21.6, 20.7, 19.0, 17.4, 13.6.

Primer 59

Sinteza (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (59)

[0664]

[0665] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.22 g, 1.2 mmol) rastvoren je u THF (10 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.3 mL, 1.3 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (0.42 g, 1.3 mmol) u THF (5 × 1 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je ohlađena na 0°C i ugašena sa H2O i razblažen sa EtOAc (40 mL). Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio željeni proizvod (59) (189 mg, 34%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 478.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.68 (br. s, 1H), 5.74 (br. s, 1H), 4.95-4.79 (m, 3H), 4.50 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.14 (br. s, 1H), 4.03 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.32 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 3.02 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.45-2.39 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 4H), 1.98-1.79 (m, 2H), 1.30 (s, 3H), 1.29 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 177.6, 171.0, 167.0, 152.2, 140.5, 133.2, 80.0, 61.8, 60.2, 54.4, 47.0, 43.0, 21.8, 21.7, 20.7, 17.5, 9.3.

Primer 60 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil pivalata (60)

[0666]

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil pivalata (60a).

[0667]

[0668] U mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (0.86 g, 7.3 mmol) u DCM (9 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, dodat je trimetilacetil hlorid (0.89 mL, 7.3 mmol), Et3N (1.17 mL, 14.5 mmol), i N,N-4-dimetilaminopiridin (katalitička količina). Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i smeša je mešana preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem 1N HCl (50 mL). Organski i vodeni slojevi su podeljeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, a zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom.

Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio željeni proizvod (60a) (0.42 g, 28%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.13 (t, J= 7.1 Hz, 2H), 3.35 (s, 2H), 1.61 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 1.19 (s, 9H), 0.93 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil pivalata (60b).

[0669]

[0670] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (153 µL, 2.1 mmol) u Et2O (4.5 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil pivalata (60a) (0.42 g, 2.1 mmol) i piridina (203 µL, 2.5 mmol) u Et2O (3 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 60 min. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 30 min. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.23 (s, 2H), 4.13 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.71 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 1.19 (s, 9H), 1.08 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3- dimetilbutil pivalata (60).

[0671]

[0672] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.41 g, 2.2 mmol) rastvoren je u THF (18.5 mL) i HMPA (0.9 mL ), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.2 mL, 2.2 mmol), i smeša je mešana 10 min. Reakcionoj smeši je brzo dodat rastvor 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil pivalata (60b) (0.73 g, 2.4 mmol) u THF (20 mL). Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 16 h. Smeša je ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (60) (176 mg) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 450.15 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.49 (br. s, 1H), 5.59 (br. s, 1H), 4.55 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.26-4.04 (m, 5H), 3.34 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.45-2.41 (m, 1H), 2.19-2.15 (m, 1H), 2.01-1.85 (m, 2H), 1.69 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 1.19 (s, 9H), 1.05 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ178.6, 171.0, 167.0, 83.8, 61.9, 60.8, 60.2, 47.2, 38.7, 36.9, 34.0, 27.2, 24.0, 23.7, 20.8, 17.5.

Primer 61

Sinteza etil 2-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-etilbutanoata (61)

[0673]

Korak 1: Sinteza etil 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-etilbutanoata (61a).

[0674]

[0675] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (126 µL, 1.7 mmol) u Et2O (3.2 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor etil 2-etil-2-(hidroksimetil)butanoata (eksenamin) (0.30 g, 1.7 mmol) i piridina (153 µL, 1.9 mmol) u Et2O (2.1 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 60 min. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 30 min. Smeša je ponovo ohlađena do -78°C i dodat je sulfuril hlorid (20 µL) i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je još 30 min. Dodat je Et2O (5 mL) i smeša je mešana 5 min, zatim filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (61a), koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.62 (s, 2H), 4.21 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 1.78-1.58 (m, 4H), 1.28 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 0.88 (t, J= 7.7 Hz, 6H).

Korak 2: Sinteza etil 2-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-etilbutanoata (61).

[0676]

[0677] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.25 g, 1.4 mmol) rastvoren je u THF (11.2 mL) i HMPA (0.6 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.4 mL, 1.4 mmol), i smeša je mešana 10 min. U reakcionu smešu je brzo dodat rastvor etil 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-etilbutanoata (61a) (0.41 g, 1.5 mmol) u THF (20 mL). Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 16 h. Smeša je ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio proizvod (61) (162 mg, 29%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 422.03 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.50 (br. s, 1H), 5.66 (br. s, 1H), 4.87 (d, J= 9.9 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.22-4.14 (m, 3H), 4.06 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.33 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 3.02 (d, J= 12.3 H, 1H), 2.47-2.41 (m, 1H), 2.22-2.12 (m, 1H), 2.01-1.60 (m, 6H), 1.27 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 0.92-0.83 (m, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 173.3, 171.1, 167.1, 75.2, 62.0, 61.1, 60.2, 50.6, 47.2, 26.2, 25.8, 20.9, 17.5, 14.3, 8.4, 8.3.

Primer 62 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetilbenzoata (62)

[0678]

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetilbenzoata (62a).

[0679]

[0680] U mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (0.84 g, 7.1 mmol) u DCM (9 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, dodat je 2,6-dimetilbenzoil hlorid (1.0 g, 5.9 mmol), piridin (0.96 mL, 11.9 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (katalitička količina). Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i smeša je mešana preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem 1N HCl (50 mL). Organski i vodeni slojevi su podeljeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim NaHCO3, a zatim osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio željeni proizvod (62a) (0.42 g, 28%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.18 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.04-7.01 (m, 2H), 4.41 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.37 (s, 2H), 2.31 (s, 6H), 1.76 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 0.97 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetilbenzoata (62b).

[0681]

[0682] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (122 µL, 1.7 mmol) u Et2O (1.0 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetilbenzoata (62a) (0.42 g, 1.7 mmol) i piridina (136 µL, 1.7 mmol) u Et2O (1.5 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), a deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (62b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (ne čisto).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.19 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 4.41 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 4.23 (s, 2H), 2.31 (s, 6H), 1.84 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.11 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetilbenzoata (62).

[0683]

[0684] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.22 g, 1.2 mmol) rastvoren je u THF (10 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.2 mL, 1.2 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetilbenzoata (62b) (0.42 g, 1.2 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je ohlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (62) (192 mg, 32%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 498.08 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.18 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 6.48 (br. s, 1H), 5.63 (br. s, 1H), 4.57 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 4.25 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17 (br. s, 1H), 4.04 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.32 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 3.00 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.18-2.14 (m, 1H), 1.97-1.80 (m, 4H), 1.08 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 170.9, 170.0, 167.1, 134.8, 133.8, 129.4, 127.6, 83.4, 61.9, 61.3, 60.1, 47.1, 36.7, 33.9, 23.9, 23.6, 20.7, 19.8, 17.4.

Primer 63 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil adamantan-1-karboksilata (63)

[0685]

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil adamantan-1-karboksilata (63a).

[0686]

[0687] U mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (0.72 g, 6. mmol) u DCM (20 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, dodat je 1-adamantan-karbonil hlorid (1.1 g, 10.1 mmol), piridin (0.82 mL, 10.1 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.03 g, 0.3 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i smeša je mešana preko noći. Smeša je ugašena dodavanjem 1N HCl. Organski i vodeni slojevi su podeljeni, a vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, a zatim osušeni (MgSO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:1) kao eluenta da bi se dobio željeni proizvod (63a) (0.49 g, 35%).

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.14-4.09 (m, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.00 (m, 3H), 1.90-1.86 (m, 6H), 1.75-1.59 (m, 6H), 1.59 (t, J= 7.1 Hz, 2H), 0.92 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil adamantan-1-karboksilata (63b).

[0688]

[0689] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (127 µL, 1.7 mmol) u Et2O (1.2 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil adamantan-1-karboksilata (63a) (0.48 g, 1.7 mmol) i piridina (141 µL, 1.7 mmol) u Et2O (1.7 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), a deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (63b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (ne čisto).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.25 (s, 2H), 4.13 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.01 (m, 3H), 1.90-1.85 (m, 6H), 1.73-1.69 (m, 8H), 1.08 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil adamantan-1-karboksilata (63).

[0690]

[0691] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.22 g, 1.2 mmol) rastvoren je u THF (10 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.2 mL, 1.2 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil adamantan-1-karboksilata (63b) (0.66 g, 1.7 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je hlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobila čvrsta supstanca, koja je triturirana sa heksanima da bi se dobio proizvod (63) (230 mg, 36%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 528.17 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.18 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 6.48 (br. s, 1H), 5.63 (br. s, 1H), 4.57 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.40 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 4.25 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.17 (br. s, 1H), 4.04 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.32 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 3.00 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.31 (s, 6H), 2.18-2.14 (m, 1H), 1.97-1.80 (m, 4H), 1.08 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 177.8, 171.0, 167.1, 83.9, 62.0, 60.7, 60.2, 47.2, 40.7, 39.0, 39.0, 37.0, 36.6, 34.1, 28.0, 24.0, 23.8, 20.8, 17.5.

Primer 64 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetoksibenzoata (64)

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetoksibenzoata (64a).

[0693]

[0694] U mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (1.85 g, 15.7 mmol) u DCM (28 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, dodat je 2,6-dimetoksibenzoil hlorid (80%; 3.93 g, 15.7 mmol), Et3N (2.5 mL, 31.3 mmol), i N,N-4-dimetilaminopiridin (katalitička količina). Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i smeša je mešana preko noći. Smeša je koncentrovana pod vakuumom i suspendovana u EtOAc, a zatim filtrirana i filterski kolač je ispran sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 2:3) kao eluenta da bi se dobio željeni proizvod (64a) (oko 80% čistoća; 0.92 g).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.29-7.26 (m, 1H), 6.57-6.53 (m, 3H), 4.43-4.39 (m, 2H), 3.83 (s, 6H), 3.36 (s, 2H), 1.74 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 0.95 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetoksibenzoata (64b).

[0695]

[0696] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.2 mL, 2.7 mmol) u Et2O (1.9 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetoksibenzoata (64a) (oko 80% čistoća; 0.97 g, 2.7 mmol) i piridina (222 µL, 2.7 mmol) u Et2O (2.7 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), a deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (64b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (ne čisto).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetoksibenzoata (64).

[0697]

[0698] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.21 g, 1.1 mmol) rastvoren je u THF (9.4 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.1 mL, 1.1 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2,6-dimetoksibenzoata (64b) (0.65 g, 1.7 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je hlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažen sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (64) (100 mg, 17%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 530.01 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.31-7.25 (m, 1H), 6.54 (d, J= 9.0 Hz, 2H), 6.50 (br. s, 1H), 5.58 (br. s, 1H), 4.54 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.28 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.16 (br. s, 1H), 4.03 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.81 (s, 6H), 3.33 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 2.44-2.39 (m, 1H), 2.21-2.13 (m, 1H), 1.93-1.79 (m, 4H), 1.07 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ171.0, 167.1, 166.7, 157.3, 131.2, 113.1, 103,9, 84.0, 62.0, 61.8, 60.2, 56.0, 47.2, 36.6, 34.1, 23.8, 23.6, 20.8, 17.5.

Primer 65 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil benzoata (65)

Korak 1: Sinteza 5-hidroksi-4,4-dimetilpentil benzoata (65a).

[0700]

[0701] U mešani rastvor 2,2-dimetilpentan-1,5-diola (J. Org. Chem.2010, 75, 1892-1897; PCT međunarodna objava br. WO 2002092606) (1.55 g, 11.7 mmol) u DCM (20 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, dodat je benzoil hlorid (1.5 mL, 12.9 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2.5 h i koncentrovana pod vakuumom. U ostatak je dodat EtOAc i smeša je mešana. Filtrat je koncentrovan ispod ostatka prečišćenog hromatografijom na koloni na silika gelu upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:4) kao eluenta da bi se dobio proizvod (65a) (1.38 g, 50%) u obliku ulja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.04 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 7.56 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.44 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 4.31 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.36 (s, 2H), 1.81-1.71 (m, 2H), 1.42-1.36 (m, 2H), 0.92 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil benzoata (65b).

[0702]

[0703] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.2 mL, 2.7 mmol) u Et2O (1.9 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilpentil benzoata (65a) (0.76 g, 3.2 mmol) i piridina (218 µL, 2.7 mmol) u Et2O (2.7 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), a deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (65b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (ne čisto).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.04 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.57-7.55 (m, 1H), 7.48-7.33 (m, 1H), 4.35-4.29 (m, 2H), 4.23 (s, 2H), 1.81-1.74 (m, 2H), 1.53-1.21 (m, 2H), 1.06 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4- dimetilpentil benzoata (65).

[0704]

[0705] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.21 g, 1.1 mmol) rastvoren je u THF (9.4 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.1 mL, 1.1 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil benzoata (65b) (0.42 g, 1.2 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je hlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (65) (160 mg, 29%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 484.10 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.04 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.57-7.54 (m, 1H), 7.47-7.42 (m, 2H), 6.43 (br. s, 1H), 5.51 (br. s, 1H), 4.56 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.32-4.17 (m, 4H), 4.02 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.28 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.97 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.44-2.40 (m, 1H), 2.20-2.14 (m, 1H), 1.94-1.72 (m, 4H), 1.51-1.45 (m, 2H), 1.02 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.0, 167.1, 166.8, 133.1, 130.4, 129.7, 128.5, 83.6, 65.3, 61.9, 60.2, 47.2, 34.8, 34.3, 23.9, 23.6, 23.3, 20.8, 17.5.

Primer 66 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (66)

[0706]

Korak 1: Sinteza 5-hidroksi-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (66a).

[0707]

[0708] U mešani rastvor 2,2-dimetilpentan-1,5-diola (1.5 g, 11.3 mmol) u piridinu (8.3 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je 2,6-dimetoksibenzoil hlorid (80%; 1.4 g, 5.6 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja i dodat je EtOAc. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio proizvod (66a) (0.65 g, 39%) kao ulje.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.31-7.26 (m, 2H), 6.55 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 4.33 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 6H), 3.33 (s, 2H), 1.77-1.67 (m, 2H), 1.41-1.35 (m, 2H), 0.92 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (66b).

[0709]

[0710] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.16 mL, 2.2 mmol) u Et2O je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 5-hidroksi-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (66a) (0.65 g, 2.2 mmol) i piridina (177 µL, 2.2 mmol) u Et2O je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), a deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (66b) kao ulje, koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (ne čisto).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.32-7.26 (m, 1H), 6.56 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 4.34 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.81 (s, 6H), 1.77-1.71 (m, 2H), 1.52-1.46 (m, 2H), 1.03 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (66).

[0711]

[0712] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.21 g, 1.1 mmol) rastvoren je u THF (9.4 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.1 mL, 1.1 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (66b) (0.49 g, 1.2 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je hlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažen sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (66) (115 mg, 18%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 544.17 [M+H]<+>& 589.11 [M+HCOOH]<+>.

<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.31-7.25 (m, 1H), 6.55 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 6.51 (br. s, 1H), 5.51 (br. s, 1H), 4.53 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.33 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 4.23-4.16 (m, 2H), 4.03 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.82 (s, 6H), 3.31 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 2.98 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.42-2.39 (m, 1H), 2.20-2.18 (m, 1H), 2.00-1.68 (m, 4H), 1.49-1.44 (m, 2H), 1.00 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.0, 167.0, 166.7, 157.4, 131.2, 110.1, 104.1, 83.9, 65.6, 62.0, 60.2, 56.1, 47.2, 34.7, 34.3, 23.8, 23.6, 23.4, 20.8, 17.6.

Primer 67 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetilbenzoata (67)

[0713]

Korak 1: Sinteza 5-hidroksi-3,3-dimetilpentil 2,6-dimetilbenzoata (67a).

[0714]

[0715] U mešani rastvor 2,2-dimetilpentan-1,5-diola (1.1 g, 8.3 mmol) u piridinu (8.3 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je 2,6-dimetilbenzoil hlorid u jednoj porciji. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature 3 h. Reakcija je koncentrovana do suva i dodat je EtOAc. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:4) kao eluenta da bi se dobio proizvod (67a) (0.44 g, 25%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.18 (t, J= 7.7 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 4.32 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.32 (s, 6H), 1.78-1.68 (m, 2H), 1.40-1.34 (m, 2H), 0.90 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetilbenzoata (67b).

[0716]

[0717] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (122 µL, 1.7 mmol) u Et2O je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 5-hidroksi-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetilbenzoata (67a) (0.44 g, 1.7 mmol) i piridina (135 µL, 1.7 mmol) u Et2O je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), a deo dobijen ispiranjem je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (67b), koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.19 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 4.33 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 4.20 (s, 2H), 2.32 (s, 6H), 1.81-1.71 (m, 2H), 1.51-1.45 (m, 2H), 1.04 (s,6H).

Korak 3: Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetilbenzoata (67).

[0718]

[0719] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.21 g, 1.1 mmol) rastvoren je u THF (9.4 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.1 mL, 1.1 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor 5-((hlorosulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2,6-dimetilbenzoata (67b) (0.49 g, 1.4 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je hlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažen sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (67) (200 mg, 32%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 512.18 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.19 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 6.45 (br. s, 1H), 5.52 (br. s, 1H), 4.54 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.31 (t, J= 7.4 Hz, 2H), 4.23-4.17 (m, 2H), 4.03 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.31 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.99 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.32 (s, 6H), 2.18-2.14 (m, 1H), 1.98-1.70 (m, 4H), 1.48-1.42 (m, 2H), 1.00 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 170.9, 170.2, 167.1,135.0, 134.1, 129.4, 127.7, 83.6, 65.4, 62.0, 60.2, 47.2, 34.9, 34.3, 23.7, 23.6, 23.3, 20.8, 19.9, 17.5.

Primer 68 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentil 2-metilbenzoata (68)

[0720]

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil 2-metilbenzoata (68a).

[0721]

[0722] U mešani rastvor 2,2-dimetilbutan-1,4-diola (0.80 g, 6.8 mmol) u piridinu (5 mL) na oko 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona, ukapavanjem je dodat toluoil hlorid (0.89 mL, 6.8 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature i smeša je mešana 4 h. Smeša je koncentrovana pod vakuumom i suspendovana u EtOAc, a zatim filtrirana i filterski kolač je ispran sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni na silika gelu upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:7) kao eluenta da bi se dobio željeni proizvod (68a) (0.7 g, 44%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (t, J= 7.1 Hz, 1H), 7.26-7.24 (m, 2H), 4.38 (t, J= 7.3 Hz, 2H), 3.41 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.78 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 0.98 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2-metilbenzoata (68b).

[0723]

[0724] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (96 µL, 1.3 mmol) u Et2O (0.8 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 4-hidroksi-3,3-dimetilbutil 2-metilbenzoata (68a) (0.31 g, 1.3 mmol) i piridina (106 µL, 1.3 mmol) u Et2O (1.1 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), koji je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 10 min, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 30 min. Smeša je filtrirana, a proizvod (68b) je upotrebljen odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.89 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.41-7.39 (m, 1H), 7.26-7.25 (m, 2H), 4.41-4.35 (m, 2H), 4.28 (s, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.87 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.13 (s, 6H).

Korak 3: Sinteza 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4- dimetilpentil 2-metilbenzoata (68).

[0725]

[0726] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.22 g, 1.2 mmol) rastvoren je u THF (10 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.2 mL, 1.2 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor 4-((hlorosulfonil)oksi)-3,3-dimetilbutil 2-metilbenzoata (68b) (0.42 g, 1.3 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je ohlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažen sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (68) (231 mg, 40%) kao čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 484.06 [M+1]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.90 (d, J= 7.5 Hz, 1H),7.40 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.26-7.24 (m, 2H), 6.44 (br. s, 1H), 5.53 (br. s, 1H), 4.60 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.35 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 4.28 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.17 (br. s, 1H), 4.03 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.33 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.99 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.18-2.14 (m, 1H), 1.95-1.82 (m, 4H), 1.10 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.0, 167.5, 167.1, 140.5, 132.2, 131.9, 130.7, 129.5, 125.9, 83.7, 62.0, 61.2, 60.2, 47.2, 36.9, 34.0, 24.1, 23.8, 21.9, 20.8, 17.5.

Primer 69 (samo za referencu)

Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil 3-hloro-2,6- dimetoksibenzoata (69)

[0727]

Korak 1: Sinteza 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil 2,6-dimetoksibenzoata (69a).

[0728]

[0729] U mešani rastvor 2,2,3,3-tetrametilbutan-1,4-diola (45a) (0.7 g, 4.8 mmol) u DCM (20 mL) na 0°C u atmosferi argona dodat je 2,6-dimetoksibenzoil hlorid (80%; 0.55 g, 2.2 mmol), piridin (0.36 mL, 4.4 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridin (0.05 g, 0.4 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je ohlađena do 0°C i reakcija je ugašena dodavanjem 1N HCl (15 mL), a zatim ekstrahovana sa DCM (dva puta). Kombinovani organski slojevi su isprani sa zas. natrijum bikarbonatom i fiziološkim rastvorom, zatim osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (69a) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.29 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 6.56 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 4.24 (s, 2H), 3.81 (s, 6H), 3.49 (s, 2H), 0.98 (s, 6H), 0.92 (s, 6H).

Korak 2: Sinteza 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil 3-hloro-2,6-dimetoksibenzoata (69b).

[0730]

[0731] Piridin (0.15 mL, 1.8 mmol) je dodat u mešanu smešu 4-hidroksi-2,2,3,3-tetrametilbutil propionata (69a) (0.30 g, 1.5 mmol) i Et2O (10 mL) u atmosferi argona. Rastvor je hlađen do -78°C i sulfuril hlorid (0.15 mL, 1.8 mmol) u Et2O (3 mL) je polako dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana da bi se uklonila piridinska so, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (69b) kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (prinos se pretpostavlja kvantitativnim).

Korak 3: Sinteza 4-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil 3-hloro-2,6-dimetoksibenzoata (69).

[0732]

[0733] U mešanu smešu (2S,5R)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamida (1) (235 mg, 1.3 mmol) u THF (10 mL) u atmosferi argona je dodato nekoliko kapi 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-ona. Smeša je hlađena do -78°C i mešana 10 min, zatim je ukapavanjem dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.4 mL, 1.4 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 8 minuta, zatim 4-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,3,3-tetrametilbutil 3-hloro-2,6-dimetoksibenzoat (69b) (0.52 g, 1.2 mmol) u THF (5 mL) je dodat na -78°C. Smeša je mešana na -78°C 10 min, zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran vodom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:0) kao eluenta da bi se dobio proizvod (69) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.33 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 4.75 (d, J= 9.6 Hz, 1H), 4.44 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.22-4.15 (m, 3H), 4.02 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.31 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 2.99 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.43-2.39 (m, 1H), 2.16-2.12 (m, 1H), 1.91-1.80 (m, 2H), 1.05-1.01 (m, 12H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.1, 167.1, 165.6, 156.0, 153.6, 131.6, 120.1, 119.5, 107.8, 82.4, 71.2, 62.2, 61.9, 60.2, 56.2, 47.2, 39.0, 38.7, 20.8, 20.7, 20.3, 20.2, 17.5.

Primer 70 (samo za referencu)

Sinteza 2-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-metilpropan-1,3-diil dibenzoata (70)

[0734]

Korak 1: Reakcija za proizvodnju 2-(hidroksimetil)-2-metilpropan-1,3-diil dibenzoata (70a).

[0735]

[0736] Benzoil hlorid (2.46 mL, 20.0 mmol) je dodat ukapavanjem u smešu 2-(hidroksimetil)-2-metilpropan-1,3-diola (1.2 g, 10.0 mmol), piridina (2.02 mL, 25.0 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridina (0.06 g, 0.4 mmol) u DCM (30 mL) na sobnoj temperaturi. Posle mešanja na sobnoj temperaturi preko noći, organska faza je isprana sa 1 M HCl, vodom i fiziološkim rastvorom, osušena (MgSO4), i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 2:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (70a) (1.3 g, 40%) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.06-8.02 (m, 4H), 7.62-7.56 (m, 2H), 7.49-7.42 (m, 4H), 4.39 (s, 2H), 4.38 (s, 2H), 3.59 (s, 2H), 1.16 (s, 3H).

Korak 2: Sinteza 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-metilpropan-1,3-diil dibenzoata (70b).

[0737]

[0738] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.3 mL, 3.7 mmol) u Et2O (5 mL) je ohlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 2-(hidroksimetil)-2-metilpropan-1,3-diil dibenzoata (70a) (800 mg, 2.4 mmol) i piridina (0.32 mL, 3.9 mmol) u Et2O (5 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Boca je isprana sa Et2O (3 mL), koji je takođe dodat u smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Talog je filtriran (brzo) i filterski kolač je ispran sa Et2O (12 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (70b) kao ulje koje je korišćeno odmah u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza 2-((((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2 -metilpropan-1,3-diil dibenzoata (70).

[0739]

[0740] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (400 mg, 2.2 mmol) je rastvoren u THF (10 mL) i HMPA (1.1 mL), i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona.1.0 M rastvor NaHMDS u THF (2.3 mL) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-metilpropan-1,3-diil dibenzoat (70b) (922 mg, 2.2 mmol) je rastvoren u THF (8 mL) i brzo je dodat u reakcionu smešu. Posle mešanja na -78°C tokom 10 min, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 2 h, dodati su EtOAc (400 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(40 mL) i H2O (40 mL). Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(60 mL), vodom (3×50 mL), fiziološkim rastvorom (60 mL), zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:9) kao eluenta da bi se dobio proizvod (70) (186 mg, 15%) kao ulje. LC-MS: m/z = 576 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.06-8.03 (m, 4H), 7.60-7.55 (m, 2H), 7.44-7.26 (m, 4H), 6.41 (s, 1H), 5.49 (s, 1H), 4.97 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.43-4.39 (m, 4H), 4.13 (m, 1H), 4.01-3.99 (m, 1H), 3.13 (m, 1H), 2.95-2.91 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 1H), 1.93-1.76 (m, 2H), 1.12 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 170.8, 167.1, 166.1, 133.3, 129.8, 129.7, 128.5, 77.2, 66.1, 65.9, 61.8, 60.1, 46.9, 39.4, 20.6, 17.4, 16.9.

Primer 71 (samo za referencu)

Sinteza 2-((((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-metilpropan-1,3-diil diacetata (71)

[0741]

Korak 1: Sinteza 2-(hidroksimetil)-2-metilpropan-1,3-diil diacetata (71a).

[0742]

[0743] Anhidrid sirćetne kiseline (3.46 mL, 36.6 mmol) je dodat ukapavanjem u smešu 2-(hidroksimetil)-2-metilpropan-1,3-diola (2.2 g, 18.0 mmol), piridina (12 mL, 25.0 mmol) i N,N-4-dimetilaminopiridina (0.05 g) na sobnoj temperaturi. Posle mešanja na sobnoj temperaturi preko noći, smeša je koncentrovana pod vakuumom. Smeša je suspendovana u EtOAc (100 mL), a H2O (20 mL) je polako dodavana na 0°C. Vodeni i organski slojevi su podeljeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), zatim koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 3:2) kao eluenta da bi se dobio proizvod (71a) (1.0 g, 26%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.02 (s, 4H), 3.41 (s, 2H), 2.08 (s, 6H), 0.96 (s, 3H).

Korak 2: Sinteza 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-metilpropan-1,3-diil diacetata (71b).

[0744]

[0745] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (0.33 mL, 4.0 mmol) u Et2O (4 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 2-(hidroksimetil)-2-metilpropan-1,3-diil diacetata (71a) (550 mg, 2.7 mmol) i piridina (0.35 mL, 4.3 mmol) u Et2O (4 mL) je dodat ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 5 min. Boca je isprana sa Et2O (5 mL), koji je takođe dodat u smešu. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, a zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Talog je filtriran (brzo) i filterski kolač je ispran sa Et2O (12 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (71b) kao ulje koje je korišćeno odmah za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza 2-((((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2 -metilpropan-1,3-diil diacetata (71).

[0746]

[0747] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (430 mg, 2,3 mmol) rastvoren je u THF (8 mL) i HMPA (0.8 mL), a dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. NaHMDS, 1.0 M u THF (2.4 mL, 2.4 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 10 min. 2-(((hlorosulfonil)oksi)metil)-2-metilpropan-1,3-diil diacetat (71b) (703 mg, 2.3 mmol) je rastvoren u THF (8 mL) i brzo je dodat u reakcionu smešu. Posle mešanja na -78°C tokom 10 min, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 2 h, dodati su EtOAc (400 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(40 mL) i H2O (40 mL). Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(60 mL), H2O (3 × 50 mL), fiziološkim rastvorom (60 mL), a zatim osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:9) kao eluenta da bi se dobio proizvod (71) (198 mg, 19%) kao ulje. LC-MS: m/z = 452 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.50 (s, 1H), 5.68 (s, 1H), 4.72 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.16 (m, 1H), 4.12-4.08 (m, 4H), 3.36-3.32 (m, 1H), 3.04-3.00 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 2.20-2.12 (m, 1H), 2.09 (s, 6H), 1.91-1.76 (m, 2H), 1.11 (s, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.1, 170.8, 170.7, 167.1, 76.9, 65.2, 61.9, 60.2, 47.1, 38.8, 20.8, 20.7, 17.5, 16.6.

Primer 72 (samo za referencu)

Sinteza 5-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (72)

[0748]

Korak 1: Sinteza 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (72a).

[0749]

[0750] U mešani rastvor 2,2,4,4-tetrametilpentan-1,5-diola (39c) (0.64 g, 4.0 mmol) i piridina (0.32 mL, 4.0 mmol) u DCM (27 mL) dodat je 2,6-dimetoksibenzoil hlorid (80%; 1.0 g, 4.0 mmol) u DCM (10 mL) ukapavanjem tokom 30 minuta na 0°C (ledeno kupatilo) u atmosferi argona. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je razblažena sa H2O (30 mL), a slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 × 30 mL), a kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 2:98) kao eluenta da bi se dobio proizvod (72a) (927 mg, 71%) kao ulje. Jedinjenje je kontaminirano, verovatno dijaciliranim nusproizvodom. Materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 2: Sinteza 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (72b).

[0751]

[0752] Rastvor sulfuril hlorida (0.21 mL, 2.8 mmol) u Et2O (13 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor 5-hidroksi-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (72a) (921 mg, 2.8 mmol) i piridina (0.23 mL, 2.8 mmol) u Et2O (13 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 10 min. Smeša je mešana na -78°C tokom 5 h. Smeša je filtrirana i filtrat je sačuvan da bi se dobio rastvor proizvoda (72b) u Et2O (oko 20 mL). Pretpostavljalo se da je prinos kvantitativan. Ova smeša je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

Korak 3: Sinteza 5-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (72).

[0753]

[0754] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (525 mg, 2.8 mmol) rastvoren je u THF (33 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (4 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (2.8 mL, 2.8 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i mešan 90 min. Rastvor 5-((hlorosulfonil)oksi)-2,2,4,4-tetrametilpentil 2,6-dimetoksibenzoata (72b) (1.2 g, 2.8 mmol) u Et2O (oko 20 mL) je dodat u reakcionu smešu (kanila). Posle mešanja od 10 min smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 2 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (40 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (40 mL). Organski sloj je ispran sa H2O (3 × 40 mL), fiziološkim rastvorom (40 mL), osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (2:3 do 9:1) kao eluenta da bi se dobio proizvod (72) (726 mg, 43%) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 572.08 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.32-7.26 (m, 1H), 6.56 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.53 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.24 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.17 (s, 1H), 4.07-4.04 (m, 3H), 3.81 (s, 6H), 3.34-3.30 (m, 1H), 3.00 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.05-1.84 (m, 2H), 1.48 (s, 2H), 1.11 (s, 6H), 1.10 (s, 6H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 171.0, 167.0, 166.8, 157.5, 131.1, 113.3, 103.9, 85.2, 74.2, 61.9, 60.2, 56.0, 47.2, 46.1, 36.0, 35.7, 26.4, 26.3, 25.9, 25.2, 20.8, 17.5.

Primer 73 (samo za referencu)

Sinteza etil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilbutanoata (73)

[0755]

Korak 1: Sinteza R/S-etil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilbutanoata (73a).

[0756]

[0757] Rastvor sveže destilovanog sulfuril hlorida (148 µL, 2.0 mmol) u Et2O (0.2 mL) je hlađen do 78°C u atmosferi argona. Rastvor etil 3-hidroksi-2,2-dimetilbutanoata (pripremljen prema J. Med. Chem. 1987, 30, 366-374 i Ad. Sinth. Catal. 2009, 351, 3128-3132) (324 mg, 2.0 mmol) i piridina (164 µL, 2.0 mmol) u Et2O (0.2 mL) je dodavan ukapavanjem u rastvor sulfuril hlorida tokom 15 min. Boca je isprana sa Et2O (2 × 20 mL), koji je dodat u reakcionu smešu. Smeša je mešana na -78°C 30 min. Smeša je filtrirana i proizvod (73a) je direktno upotrebljen u sledećem koraku sa pretpostavljenim kvantitativnim prinosom.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 5.34-5.29 (m, 1H), 4.22-4.14 (m, 2H), 1.55-1.52 (m, 3H), 1.35-1.08 (m, 9H).

Korak 2: Sinteza etil 3-(((((2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2 -dimetilbutanoata (73).

[0758]

[0759] (2S,5R)-6-Hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.22 g, 1.2 mmol) rastvoren je u THF (10 mL) i HMPA (0.5 mL), i dobijeni mešani rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. U smešu je dodat rastvor NaHMDS, 1.0 M u THF (1.2 mL, 1.2 mmol), i smeša je mešana 10 min. Rastvor etil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilbutanoata (73a) (0.51 g, 2.0 mmol) u Et2O (20 mL) je brzo dodat u reakcionu smešu. Posle 10 min mešanja na -78°C, smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 h. Smeša je hlađena do 0°C i ugašena sa H2O i razblažena sa EtOAc. Vodeni i organski slojevi su razdvojeni, a organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, osušen (Na2SO4), i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 7:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (73) (70 mg, 15%) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 6.51 (br. s, 1H), 5.66 (br. s, 1H), 5.32 (q, J= 6.3 Hz,1H), 4.21-4.14 (m, 3H), 4.07 (t, J= 6.3 Hz, 1H), 3.35-3.31 (m, 1H), 3.04-2.98 (m, 1H), 2.44-2.39 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.95-1.83 (m, 2H), 1.58-1.48 (m, 3H), 1.31-1.20 (m, 9H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 174.5, 174.4, 171.2, 171.1, 166.8, 166.6, 91.1, 90.6, 62.0, 62.0, 61.5, 61.5, 60.2, 47.2, 47.2, 47.1, 21.2, 20.9, 20.8, 20.8, 20.6, 20.3, 17.5, 17.5, 15.9, 15.5, 14.2 (Napomena:<13>C NMR je pokazao neke duplicirane pikove, zbog mešavine dijastereomera).

Primer 74 (samo za referencu)

Sinteza (2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1.6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il ((3,5,5-trimetil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil) sulfata (74)

[0760]

Korak 1: Sinteza 3,5,5-trimetildihidrofuran-2(3H)-ona (74a).

[0761]

[0762] 5,5-dimetildihidrofuran-2(3H)-on (4.7 g, 41.2 mmol) je rastvoren u THF (94 mL) i smeša je hlađena do -78°C u atmosferi argona. Ukapavanjem je dodat rastvor litijum diizopropilamida, 2.0 M rastvor u THF (22.6 mL, 45.2 mmol) tokom 10 min. Reakcija je mešana na -78°C tokom 2 h, a zatim je čist MeI (2.6 mL, 41.6 mmol) dodat u reakciju tokom 5 minuta. Reakcija je mešana na -78°C tokom 45 min, a zatim je smeša ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 16 h. Reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl (25 mL) i smeša je koncentrovana da bi se uklonio THF. Vodeni ostatak je razblažen sa H2O da se rastvori čvrsta supstanca i zatim ekstrahovana etil acetatom (3 × 40 mL). Kombinovani organski sloj je koncentrovan pod vakuumom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 2:3) kao eluenta da bi se dobila tečnost koja je očvrsnula stajanjem. Ova čvrsta supstanca je dalje prečišćena preko Kugelrohr destilacije da bi se dobio proizvod (74a) (3.2 g) kao ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 2.78-2.87 (m, 1H), 2.33 (dd, J = 9.3, 12.3 Hz, 1H), 1.71 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 1.29 (d, J= 6.9 Hz, 3H).

Korak 2: Sinteza 3-((benziloksi)metil)-3,5,5-trimetildihidrofuran-2(3)H)-ona (74b).

[0763]

[0764] 3,5,5-trimetildihidrofuran-2(3H)-on (74a) (3.2 g, 25.0 mmol) rastvoren je u THF (60 mL) i smeša je hlađena do -78°C u atmosferi argona. Ukapavanjem je dodat rastvor litijum diizopropilamida, 2.0 M u THF (13.7 mL, 27.5 mmol) tokom 10 min. Smeša je mešana na -78°C tokom 30 min, zatim je dodat čisti benzil hlorometil etar (90%; 4.2 mL, 27.5 mmol) tokom 5 min. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 16 h. Dodat je zasićeni NH4Cl (10 mL) i H2O (10 mL) i rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 75 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 × 75 mL), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod vakuumom (5.8 g). Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 2:3) kao eluenta da bi se dobio proizvod (2.27 g) i nečiste frakcije (1.35 g). Nečiste frakcije su ponovo prečišćene hromatografijom na koloni silika gela upotrebom EtOAc/heksana (0:1 do 1:4) kao eluenta da bi se dobio dodatni čisti proizvod (74b) (1.39 g). Proizvod (3.66 g) je bio ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.28-7.34 (m, 5H), 4.62 (dd, J = 11.7, 35.1 Hz, 2H), 3.61 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.32 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.48 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.89 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.45 (d, J = 6.9 Hz, 6H), 1.26 (s, 3H).

Korak 3: Sinteza 3-(hidroksimetil)-3,5,5-trimetildihidrofuran-2(3H)-ona (74c).

[0765]

[0766] 3-((benziloksi)metil)-3,5,5-trimetildihidrofuran-2(3H)-on (74b) (1.8 g, 7.2 mmol) je rastvoren u 2-propanolu (60 mL) i rastvor je degaziran argonom. Čvrsti 10.0% paladijum na ugljeniku (0.31 g, 0.3 mmol) je dodat u balon. Balon je zapečaćen i vakuumski degaziran, a zatim ponovo ispran vodonikom (3 puta). Reakcija je mešana 6 h. Suspenzija je filtrirana kroz Celite<®>i filter kolač je ispran 2-propanolom (15 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod (74c) kao sirovo ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 3.75 (dd, J = 6.9, 11.1 Hz, 1H), 3.51 (dd, J = 5.7, 11.1 Hz, 1H), 2.33 (d, J= 12.9 Hz, 1H), 2.23 (t, J = 6 Hz, 1H), 1.94 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 1.48 (d, J = 6.9 Hz, 6H), 1.32 (s, 3H).

Korak 4: Sinteza (3,5,5-trimetil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil sulfohloridata (74d).

[0767]

[0768] Rastvor 3-(hidroksimetil)-3,5,5-trimetildihidrofuran-2(3)H)-ona (74c) (0.50 g, 3.2 mmol) i piridina (0.28 mL, 3.5 mmol) u Et2O (10 mL) je hlađen do -78°C u atmosferi argona. Čisti sulfuril hlorid (0.28 mL, 3.5 mmol) je dodat ukapavanjem u gornji rastvor preko šprica. Smeša je mešana na -78°C 10 min, zatim je balon zagrejan do sobne temperature i mešan 1 h (praćeno TLC 30% EA/heksani). Nastao je talog da bi se dobila gusta suspenzija. Suspenzija je filtrirana kroz 0.45 µM Teflon<®>filter i filter kolač je ispran svežim Et2O (2 × 5 mL). Alikvot (0.5 mL) je uzet i koncentrovan i dobijen je NMR za smešu. Preostali rastvor koji sadrži proizvod (74d) je direktno upotrebljen u sledećem koraku.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 4.60 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.36 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 2.37 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.09 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 1.51 (d, J = 8.4 Hz, 6H), 1.44 (s, 3H).

Korak 5: Sinteza (2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il ((3,5,5-trimetil-2-oksotetrahidrofuran-3- il)metil)sulfata (74).

[0769]

[0770] (2S,SR)-6-hidroksi-7-okso-1,6-diazabiciklo[32.1]oktan-2-karboksamid (1) (0.64 g, 3.5 mmol) rastvoren je u THF (30 mL) i 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-onu (1.4 mL) i dobijeni rastvor je hlađen do -78°C u atmosferi argona. NaHMDS, 1.0 M rastvor u THF (3.5 mL, 3.5 mmol) je dodat ukapavanjem u ohlađeni rastvor i smeša je mešana 1 h. Rastvor (3,5,5-trimetil-2-oksotetrahidrofuran-3-il)metil sulfohloridata (74d) (0.81 g, 3.2 mmol) u Et2O iz prethodne reakcije je brzo dodat u reakcionu smešu. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana preko noći. Dodati su fiziološki rastvor (100 mL) i EtOAc (100 mL), a vodeni i organski slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 100 mL), a kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 × 100 mL), osušeni (Na2SO4), i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom EtOAc/heksana (1:4 do 1:0) kao eluenta da bi se dobila čvrsta supstanca (0.42 g). Čvrsta supstanca je usitnjena sa Et2O (100 mL) tokom 16 h, filtrirana i filter kolač je ispran svežim Et2O (3 × 20 mL) da bi se dobio proizvod (74) (0.28 g) kao čvrsta supstanca. LC-MS: m/z = 406 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ, 6.55 (br. d, J= 44.7 Hz, 1H), 5.82 (br. s, 1H), 4.86 (dd, J= 9.3, 63.6 Hz, 1H), 4.55 (dd, J = 9.3, 46.2 Hz, 1H), 4.03-4.16 (m, 2H), 3.30-3.35 (m, 1H), 3.06 (dd, J = 4.8, 12.3 Hz, 1H), 2.38-2.45 (m, 2H), 2.10-2.20 (m, 1H), 1.8-2.04 (m, 3H), 1.48 (s, 3H), 1.477 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.40 (d, J= 4.2 Hz, 3H).<13>C NMR (75 MHz, CDCl3): δ 177.3, 177.0, 170.9, 170.8, 167.3, 167.0, 82.0, 81.9, 78.6, 77.8, 61.9, 60.2, 60.2, 47.1, 46.9, 45.8, 45.7, 43.6, 43.2, 30.1, 29.8, 29.7, 22.5, 20.7, 20.7, 17.4 (Napomena:<13>C NMR je pokazao neke duplicirane pikove, zbog mešavine dijastereomera).

Primer 75 (samo za referencu)

Sinteza etil 3-(((((2S,5R)-2-karbamoil-3-metil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]okt-3-en-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoata (75)

[0771]

[0772] (2S,5R)-6-(benziloksi)-3-metil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]okt-3-en-2-karboksamid (1) (3.6 mg, 0.01 mmol) rastvoren je u mešanom rastvaraču (EtOAc/H2O/EtOH: 0.22/0.34/0.11 mL), u koji je dodat Et3N (0.25 µL, 0.002 mmol) i Pd/C (suv, 10%; 1.3 mg, 20 mol%) pod N2na sobnoj temperaturi. Balon vodonika je stavljen na reakcionu posudu da bi se zamenio azot. Reakciona smeša je degazirana pod vakuumom i ponovo napunjena vodonikom (3 puta). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 h i praćena pomoću LCMS. Kada je reakcija završena, smeša je razblažena sa EtOAc (2 mL) i isprana fiziološkim rastvorom. Organska faza je izolovana i osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak (4.3 mg, 0.02 mmol) je rastvoren u THF (0.4 mL) ohlađen do -78°C. Ukapavanjem je dodat NaHMDS (1M u THF; 21.3 µL, 0.02 mmol). Reakciona smeša je mešana na -78°C 20 min, a zatim je dodat etil 3-((hlorosulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (7.8 mg, 0.03 mmol). Reakcija je mešana na -78°C tokom 20 min, a zatim je polako zagrejana do sobne temperature i mešana preko noći (reakcija je praćena pomoću LCMS). Nakon što je reakcija završena, dodat je EtOAc (5 mL) i organski sloj je ispran zasićenim NaHCO3, a zatim fiziološkim rastvorom. Organska faza je izolovana i osušena (Na2SO4), i proizvod (75) je koncentrovan pod vakuumom. LC/MS: m/z = 406 [M+H]<+>

Primer 76

Oralna bioraspoloživost kod pacova

[0773] Farmakokinetička (PK) studija je sprovedena na tri mužjaka Sprague-Dawley (SD) pacova nakon intravenske (IV) i oralne (PO) primene avibaktama u dozi od 2 mg/kg i test jedinjenja u dozi od 10 mg/kg, respektivno, a avibaktam je izmeren u plazmi.

[0774] Avibaktam, rastvoren je u fiziološkom rastvoru puferovanom fosfatom (PBS) (pH 7.5) pri 0,4 mg/mL za intravensku (IV) injekciju. Jedinjenja za oralnu primenu su formulisana u 10% etanola / 40% polietilen glikola (PEG) 400 / 50% vode za injekcije (VFI) (pH 6.5) pri 1 mg/mL. Zapremine doziranja su bile 5 mL/kg za IV i 10 mL/kg za PO. Svi aspekti ovog postpka, uključujući smeštaj, eksperimentisanje i odlaganje životinja, obavljeni su generalno u skladu sa "Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition" (National Academies Press, Washington, D.C., 2011); and Suckow et al., Ed. The Laboratory Rat. 2nd Edition. Academic Press. New York. 2005. Životinje su imale pristup standardnoj laboratorijskoj ishrani i autoklaviranoj vodi iz česme ad libitum.

[0775] Alikvoti krvi (300 µL do 400 µL) su sakupljeni od pacova kateterizovanih u jugularnoj veni u epruvete obložene litijum heparinom u različitim vremenima. Epruvete su nežno promućkane i držane na ledu, a zatim centrifugirane na 2500 rpm tokom 15 minuta na 4° C, u roku od 1 h nakon sakupljanja. Za životinje u kontrolnim grupama, krv je sakupljena srčanom punkcijom, a plazma je sakupljena i držana zamrznuta na -70 °C do dalje analize. Beaudoin et al., Bioanalytical method validation for the simultaneous determination of ceftazidime and avibactam in rat plasma. Bioanalysis. 2016 8: 111-22.

[0776] Uzorci plazme su obrađeni precipitacijom acetonitrilom i analizirani pomoću LC-MS/MS. Kalibraciona kriva plazme je generisana sa alikvotima plazme bez lekova kojima je dodavana ispitivana supstanca na određenim nivoima koncentracije. Spajkovani uzorci plazme obrađeni su zajedno sa nepoznatim uzorcima plazme koristeći istu proceduru. Obrađeni uzorci plazme su čuvani na -70 °C do dobijanja LC-MS/MS analize, kada su zabeležene površine pikova, a koncentracije ispitivane supstance u nepoznatim uzorcima plazme su određene upotrebom odgovarajuće kalibracione krive. Određen je linearni opseg testa koji se može prijaviti, zajedno sa donjom granicom kvantitacije (LLK). Konstruisani su grafikoni koncentracije jedinjenja u plazmi u odnosu na vreme. Farmakokinetički parametri jedinjenja nakon IV i PO doziranja (AUClast, AUCINF, T1/2, Tmax, i Cmax) se dobijaju iz ne-kompartmentalne analize (NCA) plazma podataka upotrebom WinNonlin. WinNonlin<®>Certara L.P. Pharsight, St. Louis, MO.

[0777] U ovim testovima, avibaktam je pokazao oralnu bioraspoloživost (%F) od 1.2%, a jedinjenja (3), (4), (10), (11), (12), (13), (14), (15) , (16), (17), (18) i (19) su pokazali oralnu bioraspoloživost (%F) veću od 10%. Takođe, jedinjenja (36), (37), (42), (53), (57), (58) i (59) su pokazala oralnu bioraspoloživost (%F) veću od 10%.

[0778] U ovim testovima, relebaktam je pokazao oralnu bioraspoloživost (%F) od 1.8%, a jedinjenja (20), (22), (23) i (25) su pokazala oralnu bioraspoloživost (%F) veću od 5%.

Primer 77

Minimalna inhibiciona koncentracija

[0779] Vrednosti minimalne koncentracije inhibitora (MIC) ispitivanih monobaktama i inhibitora β-laktamaze određene su ispitivanjem osetljivosti na mikrodiluciju u bujonu koje je sprovedeno u skladu sa smernicama Instituta za kliničke i laboratorijske standarde (Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard-Tenth Edition. CLSI document M07-A10. CLSI, 950 West Valley Road, Suite 2500, Wayne, PA 19087-1898 USA, 2015; CLSI. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing: Twenty-Sixth Informational Supplement. CLSI document M100-S26, CLSI, 950 West Valley Road, Suite 2500, Wayne, PA 19087 USA, 2016) protiv panela bakterijskih sojeva koji eksprimiraju karakterisane βlaktamaze koje daju otpornost na β-laktame. Zasowski et al., The β-Lactams Strike Back: Ceftazidime-Avibactam. Pharmacotherapy, 2015 35:755-70; Levasseur et al., In vitro antibacterial activity of the ceftazidime-avibactam combination against enterobacteriaceae, including strains with well-characterized β-lactamases. Antimicrob Agents Chemother, 2015 59:1931-4 Jedinjenja su čuvana kao suvi prah i čuvana na -20°C pre testiranja. Ova jedinjenja i komparativni lekovi su rastvoreni u odgovarajućem rastvaraču na dan testa. Svi lekovi su testirani upotrebom opsega koncentracije leka od 0.001 µg/mL do 64 µg/mL. Inhibitori βlaktamaze su testirani pri konstantnoj koncentraciji od 4 µg/mL. Izolati su naneseni na odgovarajući medijum i inkubirani preko noći na 35°C. Vrednosti MIC su određene upotrebom Mueller Hinton bujona prilagođene katjonima (MHBII; BD, Sparks, MD) u skladu sa CLSI smernicama u pločama sa 96 bunarčića. MIC su zabeleženi nakon 18 h inkubacije na 35°C. MIC je očitan i zabeležen kao najniža koncentracija leka koji inhibira vidljivi rast organizma.

Primer 78

Oralna bioraspoloživost kod pasa

[0780] Procenjena je oralna bioraspoloživost određenih prolekova avibaktama, obezbeđena ovim otkrićem, kod pasa.

[0781] Formulacije za doziranje su pripremljene na dan doziranja. Intravenske formulacije su pripremljene u aseptičnim uslovima, sterilno filtrirane i dovedene na sobnu temperaturu pre doziranja. Intravenska formulacija je uključivala avibaktam u konačnoj koncentraciji od 2,0 mg/mL u PBS pri pH 7.5.

[0782] Formulacije za oralno doziranje imale su konačnu koncentraciju ili avibaktama ili avibaktam proleka od 2 mg/mL u rastvoru od 1 mL etanola, 4 mL PEG400 i 5 mL vode za injekcije, sa pH podešenim na 7 sa 1N NaOH.

[0783] Formulacije su davane muškim psima Bigl težine od 8 kg do 410 kg. Životinje su održavane u skladu sa Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, National Research Council, The National Academies Press, Washington, DC, 2011.

[0784] Psi su primili ili IV bolus dozu od 10 mg/kg, ili peroralnu dozu od 20 mg/kg. Nivoi doze su odabrani da bi se premostio jaz između primarnih istorijskih kontrolnih podataka i NHP studije (American Veterinary Medcial Association. AVMA Guidelines on Euthanasia. 2013) kako bi se precizno predvidela aktivnost prolekova kod ljudi. Intravenska primena je izvršena u cefaličnu venu nakon čega je usledilo ispiranje od 0,5 mL sterilnim fiziološkim rastvorom. Oralna primena u stomak upotrebom 18-francuskog katetera nakon čega sledi ispiranje od 15 ml dejonizovanom vodom. Dva psa su korišćena za svaki od puteva studije.

[0785] Koncentracija avibaktama u plazmi je merena u intervalima nakon primene. U roku od 2 minuta od sakupljanja, 100 µL pune krvi je prebačeno u K2EDTA epruvete koje sadrže 300 µL acetonitrila. Svaki otvor sa mešavinom krv/acetonitril je mešan vorteksom oko 30 sekundi i odmah zamrznut na suvom ledu i držan zamrznut (-55 °C do -85 °C) do analize. Koncentracija avibaktama je određena upotrebom LC/MS/MS.

[0786] Površina ispod krive koncentracije u odnosu na vreme (AUC) izračunata je metodom linearnog trapeza sa linearnom interpolacijom. Procenat oralne bioraspoloživosti (%F) avibaktama je određen poređenjem AUC posle oralne primene sa AUC posle IV primene na bazi normalizovane doze.

[0787] Jedinjenja (3), (13) i (15) su pokazala oralnu bioraspoloživost avibaktama kod muških pasa Bigl veću od 50% F.

Primer 79

Oralna bioraspoloživost kod majmuna

[0788] Procenjena je oralna bioraspoloživost određenih prolekova avibaktama predviđena ovim otkrićem, kod mužjaka makaki majmuna.

[0789] Formulacije za doziranje su pripremljene na dan doziranja. Intravenske formulacije su pripremljene u aseptičnim uslovima, sterilno filtrirane i dovedene na sobnu temperaturu pre doziranja. Intravenska formulacija je uključivala avibaktam u konačnoj koncentraciji od 2.0 mg/mL u PBS pri pH 7.5.

[0790] Formulacije za oralno doziranje imale su konačnu koncentraciju ili avibaktama ili avibaktam proleka od 2 mg/mL u rastvoru od 1 mL etanola, 4 mL PEG400 i 5 mL vode za injekcije, sa pH podešenim na 7 sa 1N NaOH.

[0791] Formulacije su davane mužjacima makaki majmuna težine od 2 kg do 4 kg. Životinje su održavane u skladu sa Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, National Research Council, The National Academies Press, Washington, DC, 2011.

[0792] Majmuni su primili ili IV bolus dozu od 10 mg/kg, ili peroralnu dozu od 20 mg/kg. Nivoi doziranja su odabrani da oponašaju terapeutski efikasne sistemske koncentracije kod ljudi. Intravenska primena je bila u safenoznu venu. Oralna primena je bila putem oralne intubacije preko fleksibilne oralne cevi. Dva majmuna su korišćena za svaki od puteva studije.

[0793] Koncentracija avibaktama u plazmi je merena u intervalima nakon primene. U roku od 2 minuta od sakupljanja, 100 µL pune krvi je prebačeno u K2EDTA epruvete koje sadrže 300 µL acetonitrila. Svaki otvor sa mešavinom krv/acetonitril je mešan vorteksom oko 30 sekundi i odmah zamrznut na suvom ledu i držan zamrznut (-55°C do -85°C) do analize. Koncentracija avibaktama je određena upotrebom LC/MS/MS.

[0794] Površina ispod krive koncentracije u odnosu na vreme (AUC) izračunata je metodom linearnog trapeza sa linearnom interpolacijom. Procenat oralne bioraspoloživosti (%F) avibaktama je određen poređenjem AUC posle oralne primene sa AUC posle IV primene na bazi normalizovane doze.

[0795] Jedinjenja (3), (13) i (15) su pokazala oralnu bioraspoloživost avibaktama kod makaki majmuna veću od 50% F.

Claims (19)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (1):

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu, svaki od R<5>, R<6>, i R<7>je vodonik; A je jednostruka veza; svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil, ili svaki R<1>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil prsten; R<2>je izabran između jednostruke veze, metan-diil i etan-diil; R<3>je -C(O)-O-R<4>, pri čemu je R<4>je izabran od C1-10alkil, C1-10heteroalkil, C5-10arilalkil, C3-6heterocikloalkil, i supstituisani C4-10heterocikloalkilalkil; i heteroalkil se odnosi na alkil grupu u kojoj su jedan ili više atoma ugljenika (i određeni povezani atomi vodonika) nezavisno zamenjeni istom ili različitim heteroatomskom grupom ili grupama koje se biraju između -O-, -S-, -NH-, -N (-CH3), -SO i SO2-.
2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time da svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-3alkil.
3. 3. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 2, naznačeno time da, R<2>je jednostruka veza.
4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time da R<4>je C1-10alkil.
5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, naznačeno time da, R<1>je nezavisno C1-3alkil; R<2>jednostruka veza; i R<4>je C1-10alkil.
6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time da, svaki R<1>je metil; R<2>je jednostruka veza; i R<4>je izabran između metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, n-heksil, n-heptil, - CH2-CH2-O-CH3, benzil, 3-oksetanil i metil-5-metil-1,3-dioksol-2-on.
7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time da je jedinjenje izabrano od: etil3-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (3); benzil 3-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (4); metil 3-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2- dimetilpropanoat (10); izopropil 3-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (11); heksil 3-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2- dimetilpropanoat (12); heptil 3-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2- dimetilpropanoat (13); terc-butil 3-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2, 2-dimetilpropanoat (14); 2-metoksietil 3-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (15); oksetan-3-il 3-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo [3.2.1] oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)- 2,2-dimetilpropanoat (16); etil 1-((((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)cikloheksankarboksilat (17); etil 1-((((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklopropankarboksilat (18); etil 1-((((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)ciklobutankarboksilat (19); etil 5-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (35); heksil 5-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4- dimetilpentanoat (36); heptil 5-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4- dimetilpentanoat (37); 2-metoksietil 5-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (38); propil 3-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (57); butil 3-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (58); (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil 3-(((((1R,2S,SR)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2). 1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (59); etil 2-((((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)metil)-2-etilbutanoat (61); farmaceutski prihvatljive soli bilo kog od prethodno navedenih; i kombinacije bilo čega od prethodnog.
8. 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što jedinjenje je etil 3-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (3)

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 8, naznačeno time što jedinjenje je etil 3-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-2,2-dimetilpropanoat (3).
10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što jedinjenje je etil 5-(((((1R,2S,5R)-2-karbamoil-7-okso-1,6-diazabiciklo[3.2.1]oktan-6-il)oksi)sulfonil)oksi)-4,4-dimetilpentanoat (35):

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
11. 11. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv vehikulum.
12. 12. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 11, koja dalje sadrži β-laktamski antibiotik.
13. 13. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 12, naznačena time da je β-laktamski antibiotik cefotaksim, cefpodoksim, ceftazidim, ceftibuten ili ceftriakson.
14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u postupku lečenja bakterijske infekcije kod pacijenta, naznačeno time da postupak sadrži primenu na pacijenta kome je potrebno takvo lečenje terapeutski efikasne količine jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i terapeutski efikasne količine β-laktamskog antibiotika, pri čemu bakterijska infekcija je bakterijska infekcija uzrokovana bakterijama koje proizvode βlaktamazu.
15. 15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u postupku lečenja bakterijske infekcije kod pacijenta, naznačeno time da postupak sadrži primenu na pacijenta kome je potrebno takvo lečenje terapeutski efikasne količine jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i terapeutski efikasne količine β-laktamskog antibiotika, pri čemu bakterijska infekcija je bakterijska infekcija u kojoj je inhibitor β-laktamaze efikasan u lečenju bakterijske infekcije .
16. 16. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 10 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u postupku inhibicije enzima β-laktamaze kod pacijenta, naznačeno time da postupak sadrži primenu na pacijenta efikasne količine jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10, ili njegove farmaceutski soli.
17. 17. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 14 do 16, naznačeno time da primena sadrži oralnu primenu.
18. 18. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 14 ili 15, naznačeno time što β-laktamski antibiotik je cefotaksim, cefpodoksim, ceftazidim, ceftibuten ili ceftriakson.
19. 19. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 14 ili 15, naznačeno time da bakterijska infekcija je venerična bolest, pneumonija, komplikovana infekcija urinarnog trakta, infekcija urinarnog trakta, komplikovana intraabdominalna infekcija ili intraabdominalna infekcija. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 214