RS65316B1 - Kombinacija lekova za upotrebu u postupku lečenja raka jetre - Google Patents

Description

Opis

I. OBLAST PRONALASKA

[0001] U ovom dokumentu je obezbeđen dioksolan nukleotid, MIV-818, njegovi dijastereoizomeri njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, za upotrebu u postupku lečenja primarnih ili metastatskih kancera u jetri, u kome se MIV-818, njegovi dijastereoizomeri njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, primenjuju oralno u kombinaciji sa parenteralno primenjenim anti-PD1 ili anti-PDL1 monoklonskim antitelom.

[0002] Ovde su takođe obezbeđene oralne kompozicije MIV-818, ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, formulisane za istovremenu ili sekvencijalnu primenu sa anti-PD1 ili anti-PDL1 monoklonskim antitelom kod sisara sa bolesnom jetrom. Predmetni pronalazak je definisan patentnim zahtevima. Svaki predmet koja se nalazi izvan opsega patentnih zahteva obezbeđen je samo kao informacija. Postupci lečenja ljudskog tela terapijom, na koje se poziva u ovom opisu, nisu deo predmetnog pronalaska kao takvog, već su ovde opisani u vezi sa jedinjenjima i farmaceutskim kompozicijama za upotrebu u navedenim postupcima za lečenje ljudskog tela terapijom, prema predmetnom pronalasku.

II.OSNOV PRONALASKA

[0003] Rak jetre je peti najčešće dijagnostikovan rak na globalnom nivou i drugi najčešći uzrok smrti usled raka. Rak jetre je maligni tumor koji raste na površini ili unutar jetre. Formira se ili od same jetre ili od struktura unutar jetre, uključujući krvne sudove ili žučni kanal.

[0004] Najčešći uzrok raka jetre je virusna infekcija virusom hepatitisa B ili virusom hepatitisa C. Rak se obično formira sekundarno u odnosu na cirozu koju uzrokuju ovi virusi. Iz tog razloga, najviše stope raka jetre javljaju se tamo gde su ovi virusi endemski, uključujući Istočnu Aziju i podsaharsku Afriku. Druge vrste raka locirane u jetri uključuju metastaze jetre, poznate i kao sekundarni rak jetre, koji predstavlja rak koji potiče iz organa u drugim delovima tela i migrira u jetru. Jetra je uobičajena lokacija za metastatsku bolest zbog svog obilnog, dvostrukog snabdevanja krvlju (hepatična arterija i portalna vena). Metastatski tumori u jetri su dvadeset puta češći od primarnih tumora. U 50% svih slučajeva, primarni tumor je tumor gastrointestinalnog trakta. Druga uobičajena mesta uključuju dojke, jajnike, bronhije i bubrege.

[0005] Najčešći rak jetre, koji čini približno 75% svih slučajeva primarnog raka jetre, je hepatocelularni karcinom (HCC).HCC je rak koga formiraju ćelije jetre poznate kao hepatociti, koje postaju maligne.Drugi tip raka koga formiraju ćelije jetre je hepatoblastom, koga specifično formiraju nezrele ćelije jetre.To je redak maligni tumor koji se prvenstveno razvija kod dece, i čini približno 1 % svih kancera kod dece i 79% svih primarnih kancera jetre kod osoba mlađih od 15 godina.

[0006] Rak jetre može takođe da se formira od drugih struktura unutar jetre, kao što su žučni kanal, krvni sudovi i imune ćelije. Rak žučnog kanala (holangiokarcinom i holangiocelularni cistadenokarcinom) čini približno 6% primarnih kancera jetre. Postoji i varijantni tip HCC koji se sastoji i od HCC i od holangiokarcinoma. Tumori krvnih sudova jetre uključuju angiosarkom i hemangioendoteliom. Embrionalni sarkom i fibrosarkom se produkuju od tipa vezivnog tkiva poznatog kao mezenhim. Slučajevi raka produkovani od mišića u jetri su lejomiosarkom i rabdomiosarkom. Drugi manje uobičajeni slučajevi raka jetre uključuju karcinosarkome, teratome, tumore žumančane vrećice, karcinoidne tumore i limfome. Limfomi obično imaju difuznu infiltraciju u jetru, ali takođe mogu formirati masu jetre u retkim prilikama.

[0007] Hirurška resekcija je često tretman izbora za necirotične jetre. Povećan rizik od komplikacija kao što je otkazivanje jetre može se javiti kod resekcije cirotičnih jetri. Stopa preživljavanja 5 godina nakon resekcije je masovno poboljšana u poslednjih nekoliko decenija i sada može da prelazi 50%. Stope recidiva nakon resekcije zbog širenja početnog tumora ili formiranja novih tumora prelazi 70%. Transplantacija jetre se takođe može koristiti u slučajevima HCC gde se ovaj oblik lečenja može tolerisati i tumor odgovara specifičnim kriterijumima (npr. Milanskim kriterijumima). Manje od 30-40% osoba sa HCC ima pravo na operaciju i transplantaciju, jer se rak često otkriva u kasnoj fazi. Takođe, HCC može da napreduje tokom vremena čekanja na transplantaciju jetre, što na kraju može da spreči transplantaciju.

[0008] Perkutana ablacija je jedini nehirurški tretman koji može da ponudi izlečenje. Postoje mnogi oblici perkutane ablacije, koji se sastoje bilo od ubrizgavanja hemikalija u jetru (etanol ili sirćetne kiseline), bilo od proizvodnje ekstremnih temperatura korišćenjem radiofrekventne ablacije, mikrotalasa, lasera ili krioterapije. Od toga, radiofrekventna ablacija ima jednu od najboljih reputacija u HCC, ali ograničenja uključuju nemogućnost lečenja tumora blizu drugih organa i krvnih sudova usled stvaranja toplote i efekta sinhronizacije toplote.

[0009] Sistemska hemoterapija se ne koristi rutinski u HCC, mada se lokalna hemoterapija može koristiti u postupku poznatom kao transarterijska hemoembolizacije (TACE). U ovoj proceduri se primenjuju citotoksični lekovi kao što su doksorubicin ili cisplatin sa lipidolom, a arterije koje snabdevaju jetru blokiraju se želatinskim sunđerom ili drugim česticama. Pošto većina sistemskih lekova nema efikasnost u lečenju HCC, istraživanja molekularnih puteva uključenih u produkovanje raka jetre proizvela su sorafenib, lek za ciljanu terapiju koji sprečava proliferaciju ćelija i rast krvnih ćelija u nekim okolnostima.

[0010] Radioterapija se ne koristi često kod HCC jer jetra nije tolerantna na zračenje. Čak i sa modernom tehnologijom koja obezbeđuje dobro ciljano zračenje na određene delove jetre, kolateralno oštećenje okolnog tkiva jetre je problem, što naglašava potrebu za boljim režimima koji "štede jetru". Dualni tretmani radioterapije i hemoembolizacije, lokalne hemoterapije, sistemske hemoterapije ili lekova za ciljanu terapiju mogu dda pokažu koristi u odnosu na samu radioterapiju.

[0011] Međunarodna patentna prijava WO2016/030335 otkriva oralno primenjene dioksolan nukleotide koji ciljano deluju na jetru, uključujući jedinjenje:

takođe poznato kao MIV-818. MIV-818 je moćan inhibitor hepatocelularnog karcinoma in vitro i in vivo (Richard Bethell et al., Selective targeting of the liver with the nucleotide prodrug MIV-818 for the treatment of liver cancers.Hepatology International, vol 11, n Suppl 1, pag S67).Međunarodna patentna prijava WO2017/1510144 otkriva anti-proliferativni sinergistički efekat za hepatocelularni karcinom in vitro, kada se MIV-818 koristi u kombinaciji sa sorafenibom.

[0012] Značaj intaktnih funkcija imunološkog nadzora u kontroli rasta neoplastičnih transformacija je opšte poznat. Utvrđeno je da visoka ekspresija PD-L1 (programirana smrtligand 1) na tumorskim ćelijama korelira sa lošom prognozom i preživljavanjem u različitim tipovima raka, uključujući karcinom jajnika. Preklinički podaci ukazuju na to da je PD-1 (programirana smrt-1 ili programirana ćelijska smrt-1) put vijabilna ciljna kategorija kod kancera jajnika. Klinički podaci o inhibiciji PD-1/PD-L1 u EOC su ograničeni, ali u studiji faze 1 anti-PD-L1 antitela BMS-936559, jedan od sedamnaest pacijenata sa EOC imao je objektivan odgovor.

[0013] Inhibicijaimunološke kontrolne tačke antitelima usmerenim na PD-1 receptor na T ćelijama ili na njegov ligand (PD-L1) na tumorskim ćelijama pokazala je obećavajuću antitumorsku aktivnost u nekim, ali ne i svim tumorima, uključujući melanom i ne-sitnoćelijski rak pluća.

[0014] PD-1 antagonist nivolumab, u potpunosti humano imunoglobulinsko G4 monoklonsko antitelo odobreno je u septembru 2017 od strane FDA za lečenje raka jetre, ali samo kao tretman druge linije nakon neuspeha sorafeniba.

[0015] Pembrolizumab, poznat i kao MK-3475 i Keytruda, je humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo usmereno na humani receptor ćelijske površine PD-1 sa potencijalnom aktivnošću imunopotencijacije.Nakon primene, pembrolizumab se vezuje za PD-1, inhibitorni signalni receptor eksprimiran na površini aktiviranih T ćelija, i blokira vezivanje za i aktivaciju PD-1 od strane njegovih liganada, što rezultira aktivacijom imunoloških odgovora na tumorske ćelije koji su posredovani T-ćelijama.Ligandi za PD-1 uključuju PD-L1, koji je eksprimiran na antigen prezentujućim ćelijama (APC) i prekomerno eksprimiran na nekim ćelijama raka, i PD-L2, koja je primarno eksprimiran na APC ćelijama.Aktivirani PD-1 negativno reguliše aktivaciju T-ćelija tako što suprimira PI3K/Akt put.Međutim, postoje izveštaji o otkazivanju jetre koje je izazvano pembrolizumabom u plućnom metastatskom raku jetre (Wu et al, Medicine (Baltimore) 2017 96(51):e9431.

[0016] Još uvek postoji značajna neispunjena potreba za lečenjem primarne i sekundarne jetre, posebno onih koji se ponavljaju nakon, ili su refraktorni posle prethodnih, terapijskih tretmana.

III.KRATAK OPIS PRONALASKA

[0017] Prvi aspekt pronalaska obezbeđuje upotrebu jedinjenja formule:

njegovih dijastereoizomera ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, u terapiji raka jetre kod sisara, koju karakteriše istovremeni ili sekvencijalni tretman sisara sa monoklonskim antitelom koji blokira vezivanje PD-L1 i/ili PD-L2 za PD-1.

[0018] Drugi aspekt pronalaska obezbeđuje jedinjenje za upotrebu u postupku za lečenje sisara pogođenog primarnim ili sekundarnim tumorom jetre, gde jedinjenje ima formulu:

njegove dijastereoizomere ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu postupak obuhvata cikličnu primenu kod subjekta terapeutski efikasne količine jedinjenja, njegovih dijastereoizomera ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i terapeutski efikasne količine anti-PD1 ili anti-PDL1 monoklonskog antitela, pri čemu se jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so primenjuje oralno.

[0019] Pronalazak se zasniva, najmanje delom, na otkriću da MIV-818, osim toga što ima direktan anti-tumorski efekat na ćelije raka jetre, može i da stimuliše imuni sistem. Ova aktivacija imunog sistema povećava efikasnost i/ili toleranciju anti-PD1 ili anti-PDL1 monoklonskih antitela tako da se dobija neočekivano poboljšanje anti-tumorske aktivnosti, u oblasti raka jetre (npr. HCC). Pretpostavljamo da se ova korisna interakcija može proširiti i na lečenje metastaza jetre.

[0020] Bez želje za ograničenjima u teoriji, dalje pretpostavljamo da neočekivana imunostimulacija kombinacije MIV-818 i agenasa kao što su PD1 i PDL1 antagonisti, može da dovede do pojačane anti-tumorske aktivnosti protiv ekstra-hepatičnih tumorskih lezija, pored primarnih lezija u jetri, usled abskopalnog efekta, pri čemu imuni sistem može da se aktivira lokalno u jetri, a zatim da migrira i napadne udaljene lezije.

[0021] U cilju praktičnosti, u ovoj specifikaciji jedinjenje formule:

njegovi dijastereoizomeri ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, generalno će se naizmenično označavati kao "MIV-818".Na nekim od pratećih crteža, MIV-818 se označava kao MDR_MV087313.

[0022] Poželjan primer izvođenja MIV-818 je dijastereoizomer sa strukturom:

MIV-818 se obično primenjuje oralno, preuzima se u krv, i koncentriše se u jetri tokom prvog metaboličkog ciklusa.MIV-818 je stabilan u humanoj plazmi, ali nažalost veoma brzo metaboliše u krvi glodara.To zauzvrat znači da u suštini svi in vivo modeli koji se uglavnom koriste u onkologiji čvrstih tumora jednostavno nisu pogodni za upotrebu, uključujući i one namenjene za procenu PK/PD, efikasnosti, mehanizma i sinergije kombinovane terapije sa inhibitorima kontrolnih tačaka kao što su PD-1 antagonisti.Razjašnjenje predmetne interakcije između oralno primenjenog MIV-808 i parenteralno primenjenog PD-1 antagonista je tako indukovano, delimično, od sofisticiranih mehaničkih modela, kao što je navedeno u primerima.

[0023] U nekim primerima izvođenja, rak ili tumor jetre je primarni tumor jetre izabran od hepatocelularnog kancera (HCC), hepatoblastoma, holangiokarcinoma ili holangiocelularnog cistadenokarcinoma, posebno HCC.

[0024] U nekim primerima izvođenja, rak ili tumor jetre je sekundarni tumor jetre, kao što su tumori koji potiču od primarnih tumora u želudačnom traktu, dojkama, jajnicima, bronhijama ili bubrezima.

[0025] U nekim primerima izvođenja, MIV-818 je formulisan u obliku oralne doze, npr. tablete ili kapsule. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje oralno kod sisara kome je to potrebno, tipično kod čoveka. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje kod sisara kome je to potrebno tokom dužeg vremenskog perioda. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje kod subjekta kome je to potrebno ciklično (npr. doziranje tokom jednog ili više dana, nakon čega sledi pauza). U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje kod sisara kome je to potrebno tokom više ciklusa doziranja.

[0026] U nekim primerima izvođenja, PD-1 inhibitor je anti-PD-1 antitelo. U jednom primeru izvođenja, antitelo je monoklonsko antitelo. U jednom primeru izvođenja, antitelo je humanizovano antitelo. U konkretnom primeru izvođenja, anti-PD-1 monoklonsko antitelo je pembrolizumab.

[0027] U nekim primerima izvođenja, rak ili tumor jetre je recidiv ili refraktoran. U nekim primerima izvođenja, sisar koji ima bolest ili poremećaj nije reagovao na prethodni tretman. U nekim primerima izvođenja, prethodni tretman sadrži sorafenib, regorafenib ili donafenib.

[0028] U nekim primerima izvođenja, anti-PD1 monoklonsko antitelo je humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo. U jednom primeru izvođenja, humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo je pembrolizumab.

[0029] U nekim primerima izvođenja, anti-PDL1 monoklonsko antitelo je humanizovano monoklonsko IgG1 antitelo. U jednom primeru izvođenja, humanizovano monoklonsko IgG1 antitelo je durvalumab (MEDI4736).

[0030] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1 monoklonsko antitelo je pembrolizumab, MK-3475, pidilizumab ili nivolumab (BMS-936558, MDX-1106 ili ONO-4538).

[0031] U jednom primeru izvođenja, anti-PDL1 monoklonsko antitelo je BMS-936559, atezolizumab (MPDL3280A) ili durvalumab (MEDI4736).

[0032] U jednom primeru izvođenja anti-PD-L1 monoklonsko antitelo je Bavencio (avelumab), koje nije obuhvaćeno patentnim zahtevima.

[0033] U jednom primeru izvođenja, anti-PD-1 monoklonsko antitelo je Camrelizumab (SHR1210), koje nije obuhvaćeno patentnim zahtevima.

[0034] U jednom primeru izvođenja, anti-PD-1 monoklonsko antitelo je Tislelizumab (BGBA31 7), koje nije obuhvaćeno patentnim zahtevima.

[0035] U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje tokom 21 uzastopnog dana, nakon čega sledi sedam uzastopnih dana pauze, u ciklusu od 28 dana. U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje tokom 14 uzastopnih dana, nakon čega sledi sedam uzastopnih dana pauze, u ciklusu od 21 dana.

[0036] U nekim primerima izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 7. i 21. dana u ciklusu od 28 dana. U nekim primerima izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 8. i 21. dana u ciklusu od 28 dana. U nekim primerima izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 1. dana u ciklusu od 28 dana. U nekim primerima izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 1. dana u ciklusu od 21 dana.

[0037] U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje tokom 21 uzastopnog dana, nakon čega sledi sedam uzastopnih dana pauze, u ciklusu od 28 dana, a anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 7. i 21. dana u ciklusu od 28 dana. U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje tokom 21 uzastopnog dana, nakon čega sledi sedam uzastopnih dana pauze, u ciklusu od 28 dana, a anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 8. i 21. dana u ciklusu od 28 dana. U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje tokom 21 uzastopnog dana, nakon čega sledi sedam uzastopnih dana pauze u ciklusu od 28 dana, a anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 1. dana u ciklusu od 28 dana.

[0038] U specifičnom primeru izvođenja, rak jetre je HCC. U konkretnijem primeru izvođenja, HCC je recidiv ili refraktoran. U konkretnom primeru izvođenja, HCC ne reaguje ili više ne reaguje na tretman sa sorafenibom, regorafenibom ili donafenibom.

[0039] U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje tokom 14 uzastopnih dana, nakon čega sledi sedam uzastopnih dana pauzr u ciklusu od 21 dana, i anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 1. dana ciklusa od 21. dana.

[0040] U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se oralno primenjuje u količini od oko 25 mg, oko 50 mg, oko 75 mg, oko 100 mg, oko 150 mg, oko 200 mg, oko 250 mg, oko 300 mg, oko 350 mg, oko 400 mg, oko 500 mg ili oko 600 mg. U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se oralno primenjuje u količini od oko 50 mg, oko 100 mg, oko 200 mg, oko 300 mg, oko 400 mg, oko 500 mg, ili oko 600 mg dnevno.

[0041] U drugom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 600 mg dnevno. U drugom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 500 mg dnevno. U drugom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 400 mg dnevno. U drugom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 300 mg dnevno. U drugom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 200 mg dnevno. U drugom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 100 mg dnevno. U drugom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 50 mg dnevno.

[0042] U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje jednom dnevno. U nekim primerima izvođenja, MIV-818 se primenjuje dva puta dnevno. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 200 mg, oko 150 mg ili oko 100 mg, dva puta dnevno. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 200 mg, dva puta dnevno. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 150 mg, dva puta dnevno. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 100 mg, dva puta dnevno.

[0043] U nekim primerima izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje parenteralno. U nekim primerima izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonski antitelo se primenjuje u količini od oko 0,5 mg/Kg (oko 0,5 mg anti-PD1/anti-PDL1 monoklonskih antitela po kilogramu mase subjekta), oko 1 mg/Kg, oko 2 mg/Kg, oko 3 mg/Kg, oko 4 mg/Kg, oko 5 mg/Kg, oko 6 mg/Kg, oko 7 mg/Kg, oko 8 mg/Kg, oko 9 mg/Kg, oko 10 mg/Kg, oko 11 mg/Kg, oko 12 mg/Kg, oko 13 mg/Kg, oko 14 mg/Kg, oko 15 mg/Kg, oko 16 mg/Kg, oko 17 mg/Kg, oko 18 mg/Kg, oko 19 mg/Kg, ili oko 20 mg/Kg.

[0044] U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 20 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 19 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 18 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 17 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 16 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 15 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 14 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 13 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 12 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 11 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 10 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 9 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 8 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 7 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 6 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, antiPD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 5 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 4 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 3 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 2 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 1 mg/kg dnevno.U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 0,5 mg/kg dnevno.

[0045] U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1 ili anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 1500 mg dnevno. U specifičnom primeru izvođenja, anti-PD1 ili anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 1500 mg dnevno na dan 1 u ciklusu od 28 dana. U konkretnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 10 mg/kg dnevno na dan 1 u ciklusu od 28 dana, na dan 7 i 21 u ciklusu od 28 dana, ili na dane 8 i 21 u ciklusu od 28 dana. U konkretnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 10 mg/kg dnevno na dan 1 u ciklusu od 28 dana. U konkretnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 10 mg/kg dnevno na dane 7 i 21 u ciklusu od 28 dana. U konkretnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 10 mg/kg dnevno na dane 8 i 21 u ciklusu od 28 dana. U konkretnom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 5 mg/kg dnevno na dane 7 i 21 u ciklusu od 28 dana.

[0046] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1 monoklonsko antitelo je pembrolizumab i primenjuje se u vidu i.v. infuzije tokom 30 minuta.

[0047] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1 monoklonsko antitelo je MK-3475 i primenjuje se u vidu i.v. infuzije tokom 30 minuta.

[0048] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1 monoklonsko antitelo je pidilizumab i primenjuje se u vidu i.v. infuzije tokom 30 minuta.

[0049] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1 monoklonsko antitelo je nivolumab (BMS-936558, MDX-1106 ili ONO-4538) i primenjuje se u vidu i.v. infuzije tokom 30 minuta.

[0050] U jednom primeru izvođenja, anti-PDL1 monoklonsko antitelo je atezolizumab (MPDL3280A) i primenjuje se u vidu i.v. infuzije tokom 30 minuta.

[0051] U jednom primeru izvođenja, anti-PDL1 monoklonsko antitelo je durvalumab (MEDI4736) i primenjuje se u vidu i.v. infuzije tokom 30 minuta.

1

[0052] U jednom primeru izvođenja, durvalumab (MEDI4736) se primenjuje 1. dana svakog ciklusa lečenja od 28 dana, kao jedna IV infuzija od 1500 mg.

[0053] U nekim primerima izvođenja, MIV-818 je u obliku čvrste dozne jedinice, kao što je kapsula, tableta ili kaplet.

[0054] U nekim primerima izvođenja, postupak dodatno obuhvata primenu terapeutski efikasne količine dodatnog aktivnog agensa, kao što su sorafenib, regorafenib ili donafenib, sekvencijalno ili istovremeno sa MIV-818 i antagonistom PD-1.

[0055] U specifičnom primeru izvođenja, subjekt je čovek.

IV.KRATAK OPIS CRTEŽA

[0056] Aspekti pronalaska ilustrovani su uz pozivanje na primere koji slede i prateće crteže na kojima:

Sl. 1 je BioMAP očitavanje sa prikazom efekta MIV-818 u kompleksnom modelu ćelijske kulture imunskog mikrookruženja tumora, kao što je dalje opisano u primeru 1; Sl. 2 je BioMAP očitavanje kombinacije od 1000 nM MIV-818 i 50 ug/ml pembrolizumaba;

Sl. 3 je BioMAP očitavanje kombinacije 1000nM MIV-818/50 ug pembrolizumaba, superponirane na odgovarajuće pojedinačne agense;

Sl. 4 je BioMAP očitavanje kombinacije 200 nM MIV-818/10 ug/ml pembrolizumaba, superponirane na odgovarajuće pojedinačne agense;

Sl. 5 je BioMAP očitavanje kombinacije 40 nM MIV-818/2 ug/ml pembrolizumaba, superponirane na odgovarajuće pojedinačne agense;

Sl. 6 je BioMAP očitavanje kombinacije 8 nM MIV-818/0,4 ug pembrolizumaba, superponirane na odgovarajuće pojedinačne agense;

Sl. 7 je BioMAP očitavanje doznog odgovora pembrolizumaba, u cilju poređenja;

Sl. 8 je grafik koji prikazuje vezu između doze i efekata komponenti MIV-818 i pembrolizumab na stromalni IFN gama u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja;

Sl. 9 je grafik koji prikazuje vezu između doze i efekata komponenti MIV-818 i pembrolizumab na vaskularni IFN gama u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja.

Sl. 10 je grafik koji prikazuje vezu između doze i efekata komponenti MIV-818 i pembrolizumab na stromalnom IL17A u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja;

Sl. 11 je grafik koji odgovara slici 10, ali koji pokazuje da na vaskularni IL-17A kombinacija ne utiče značajno;

Sl. 12 je grafik koji prikazuje vezu između doze i efekata komponenti MIV-818 i pembrolizumab na stromalni TNF alfa u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja;

Sl. 13 je grafik koja odgovara sl. 12, ali koji pokazuje da na vaskularni TNF alfa kombinacija ne utiče značajno;

Sl. 14 je grafik koji prikazuje vezu između doze i efekata komponenti MIV-818 i pembrolizumab na stromalni IL-6 u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja;

Sl. 15 je grafik koji odgovara sl. 14, ali koji pokazuje da na vaskularni IL6 kombinacija ne utiče značajno;

Sl. 16 grafik koji prikazuje pojačanu ekspresiju IL-2 usled delovanja MIV-818 na dozno zavisan način, i poboljšanje u kombinaciji sa pembrolizumabom;

Slika 17 grafik koji prikazuje povećano ubijanje tumorskih ćelija posredovano preko PBMC, kombinacijom MIV-818 i pembrolizumaba;

Slika 18 je šema koja prikazuje sintezu nukleozidnog prekursora;

Sl 19 je šema koja prikazuje kuplovanje fosforamidnog reagensa sa nukleozidnim prekursorom.

V. DETALJAN OPIS

[0057] Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste imaju isto ono značenje koje uobičajeno podrazumeva stručnjak u oblasti.

A. Definicije

[0058] Kako se koriste u specifikaciji i pratećim zahtevima, oblici jednine imenica uključuju reference i na množinu, kao i na jedninu, izuzev ako kontekst jasno ne nalaže drugačije.

[0059] Termin "oko" ili "približno" označava prihvatljivu grešku za određenu vrednost koju određuje stručnjak u oblasti, a koja delimično zavisi od toga kako se vrednost meri ili određuje.U nekim primerima izvođenja, termin "oko" ili "približno" znači unutar 1, 2, 3 ili 4 standardne devijacije.U nekim primerima izvođenja termin "oko" ili "približno" znači unutar 30%, 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1% ili 0,05% date vrednosti ili opsega.

[0060] Kako se ovde koristi, i ukoliko nije drugačije navedeno, termini "lečiti", "lečenje" i "tretman" odnose se na iskorenjivanje ili poboljšanje bolesti ili poremećaja, ili jednog ili više simptoma povezanih sa bolešću ili poremećajem. U nekim primerima izvođenja, termini se odnose na minimiziranje širenja ili pogoršanja bolesti ili poremećaja koji su rezultat primene jednog ili više profilaktičkih ili terapeutskih sredstava na subjekt s takvom bolešću ili poremećajem. U nekim primerima izvođenja, termini se odnose na davanje jedinjenja ili doznog oblika navedenog, sa ili bez jednog ili više dodatnih aktivnih sredstva(ava), nakon pojave simptoma određene bolesti.

[0061] Kako se ovde koristi, i ako nije drugačije navedeno, termini "spreči", "sprečavanje" i "prevencija" se odnose na sprečavanje pojave, recidiva ili širenja bolesti ili poremećaja, ili jednog ili više njihovih simptoma. U nekim primerima izvođenja, termini se odnose na tretman sa ili primenu jedinjenja ili doznog oblika koji su ovde obezbeđeni, sa ili bez jednog ili više drugih dodatnih aktivnih sredstava (i), pre pojave simptoma, posebno kod subjekata koji su izloženi riziku od bolesti ili poremećaja koji su ovde navedeni. Termini obuhvataju inhibiciju ili smanjenje simptoma konkretne bolesti. Subjekti sa porodičnom istorijom bolesti naročito su kandidati za preventivne režime u nekim primerima izvođenja. Pored toga, subjekti koji imaju istoriju rekurentnih simptoma takođe su potencijalni kandidati za prevenciju. U tom smislu, termin "prevencija" može se naizmenično koristiti sa terminom "profilaktički tretman".

[0062] Kako se ovde koristi, i ako nije drugačije navedeno, termini "kontrolisati", "kontrola" i "kontrolisanje" odnose se na sprečavanje ili usporavanje napredovanja, širenje ili pogoršanje bolesti ili poremećaja, ili jednog ili više simptoma istog. Često, blagotvorni efekti koje subjekt dobija od profilaktičkog i/ili terapeutskog agensa ne rezultiraju lečenjem bolesti ili poremećaja. U tom smislu, termin "kontrolisanje" obuhvata lečenje subjekta koji je patio od određene bolesti u pokušaju da spreči ili minimizira ponavljanje bolesti.

[0063] Kako se ovde koristi, poboljšanje simptoma određenog poremećaja primenom određene farmaceutske kompozicije odnosi se ili na smanjenje, bilo trajno ili privremeno, trajno ili prolazno, što se može pripisati ili povezati sa primenom kompozicije.

[0064] Kako se ovde koristi, i ako nije drugačije navedeno, termini "terapeutski efikasna količina" i "efikasna količina" jedinjenja označava količinu dovoljnu da obezbedi terapeutske koristi u lečenju ili kontrolisanju bolesti ili poremećaja, ili da odloži ili minimizira jedan ili više simptoma povezanih sa bolešću ili poremećajem."Terapeutski efikasna količina" i "efikasna količina" jedinjenja označava količinu terapeutskog agensa, samog ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih agensa(asa), koja obezbeđuje terapeutsku korist u lečenju ili kontrolisanju bolesti ili poremećaja.Termini "terapeutski efikasna količina" i "efikasna količina" mogu obuhvatati količinu koja poboljšava ukupnu terapiju, smanjuje ili izbegava simptome ili uzroke bolesti ili poremećaja, ili povećava terapeutsku efikasnost drugog terapeutskog agensa.

[0065] Kako se ovde koristi, i ako nije drugačije navedeno, "profilaktički efikasna količina" jedinjenja je količina dovoljna da se spreči bolest ili poremećaj, ili spreči njegovo ponavljanje. Profilaktički efikasna količina jedinjenja označava količinu terapeutskog agensa, samog ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih agensa(asa), što obezbeđuje profilaktičku korist u prevenciji bolesti. Termin "profilaktički efikasna količina" može da obuhvati količinu koja

1

poboljšava ukupnu profilaksu ili poboljšava profilaktičku efikasnost drugog profilaktičkog sredstva.

[0066] "Tumor", kako se ovde koristi, odnosi se na rast i širenje neoplastičnih ćelija, bilo malignih ili benignih, i sve pre-kancerogene i kancerogene ćelije i tkiva. "Neoplastične", kako se ovde koristi, odnosi se na bilo koji oblik poremećene regulacije ili neregulisanog rasta ćelija, bilo malignih ili benignih, što dovodi do abnormalnog rasta tkiva. Samim tim, "neoplastične ćelije" obuhvataju maligne i benigne ćelije koje imaju poremećenu regulaciju ili neregulisani rast ćelija.

[0067] Termini "rak" i "kancerogeni" odnose se na ili opisuju fiziološko stanje kod sisara koje se obično karakteriše neregulisanim rastom ćelija. Primeri raka uključuju čvrste tumore, kao što je HCC.

[0068] Kako se ovde koristi, i ako nije drugačije naznačeno, termin "proliferativni" poremećaj ili bolest se odnosi na neželjenu proliferaciju ćelija jednog ili više podskupa ćelija u višećelijskom organizmu što dovodi do štete (tj. nelagodnosti ili smanjenog očekivanog trajanja života) višestaničnom organizmu. Na primer, kako se ovde koristi, proliferativni poremećaj ili bolest obuhvata neoplastične poremećaje i druge proliferativne poremećaje.

[0069] Kako se ovde koristi, i ako nije drugačije navedeno, termin "recidiv" odnosi se na situaciju u kojoj subjekt, koji je imao remisiju raka nakon terapije, ima povratak ćelija raka.

[0070] Kako se ovde koristi, i ako nije drugačije naznačeno, termin "refraktoran" ili "otporan" odnosi se na okolnosti u kojima subjekt, čak i nakon intenzivnog lečenja, ima rezidualne ćelije raka u telu.

[0071] Termini "kompozicija", "formulacija" i "oblik doziranja", kako se ovde koriste, namenjeni su za obuhvatanje kompozicija koje sadrže navedene sastojke (e) (u navedenim količinama, ako je naznačeno), kao i bilo koji proizvod (e) koji će rezultirati direktno ili indirektno, kombinacijom navedenih sastojaka (i) u navedenom iznosu(ima). Pod "farmaceutski" ili "farmaceutski prihvatljivo" podrazumeva se da je bilo razblaživač (i), ekscipijens (i) ili nosač (i) u kompoziciji, formulaciji ili doznom obliku kompatibilan sa drugim sastojcima (i) i da nije štetan za primaoca istog. Osim ako nije drugačije naznačeno, ovde se naizmenično koriste termini "kompozicija", "formulacija" i "dozni oblik".

[0072] Termin "trenutno oslobađanje," kada se ovde koristi u vezi sa kompozicijom, formulacijom, ili doznim oblikom, znači da kompozicija, formulacija, ili dozni oblik ne sadrži komponentu (npr., oblogu) koja služi za odlaganje prostornog i/ili vremenskog oslobađanja nekih ili svih API iz kompozicije, formulacija, ili doznog oblika izvan želuca nakon oralne primene.U nekim primerima izvođenja, kompozicija, formulacija ili dozni oblik sa trenutnim oslobađanjem, je onaj koji oslobađa API suštinski u želucu nakon oralne primene.U specifičnim primerima izvođenja, kompozicija, formulacija, ili dozni oblik sa trenutnim oslobađanjem je onaj koji nije sa odloženim oslobađanjem.U specifičnim primerima izvođenja, kompozicija, formulacija, ili dozni oblik sa trenutnim oslobađanjem je onaj koji ne sadrži enteričku oblogu.

[0073] Termin "subjekat" označava sisare, uključujući, ali ne ograničeno na, primate (npr. ljudi), krave, ovce, koze, konje, pse, mačke, zečeve, pacove, miševe i slično. U specifičnim primerima izvođenja, subjekat je čovek.

[0074] Termini "ko-administracija" i "u kombinaciji sa" uključuju primenu dva ili više terapeutskih agenasa ili istovremeno, zajedno ili sekvencijalno, bez specifičnih vremenskih ograničenja. U jednom primeru izvođenja, agensi su prisutni u ćeliji ili u telu subjekta u isto vreme ili vrše svoj biološki ili terapeutski efekat u isto vreme. U jednom primeru izvođenja, terapeutski agensi su u istoj kompoziciji ili jediničnom doznom obliku. U drugim primerima izvođenja, terapeutski agensi su u odvojenim kompozicijama ili jediničnim doznim oblicima. U nekim primerima izvođenja, prvi agens se može primeniti pre (npr. 5 minuta, 15 minuta, 30 minuta, 45 minuta, 1 sat, 2 sata, 4 sata, 6 sati, 12 sati, 24 sata, 48 sati, 72 sata, 96 sati, 1 nedelju, 2 nedelje, 3 nedelje, 4 nedelje, 5 nedelja, 6 nedelja, 8 nedelja ili 12 nedelja ranije), istovremeno sa, ili posle (npr.5 minuta, 15 minuta, 30 minuta, 45 minuta, 1 sat, 2 sata, 4 sata, 6 sati, 12 sata, 24 sata, 48 sati, 72 sata, 96 sati, 1 nedelja, 2 nedelje, 3 nedelje, 4 nedelje, 5 nedelja, 6 nedelja, 8 nedelja ili 12 nedelja posle) primene drugog terapeutskog agensa.

[0075] Termin "izotopski sastav" se odnosi na količinu svakog izotopa prisutnog na datoj poziciji u atomu, a "prirodni izotopski sastav" se odnosi na izotopski sastav ili obilnost za datu poziciju u atomu, koja se prirodno javlja. Pozicije u atomu koje sadrže svoj prirodni izotopski sastav, ovde mogu takođe da se označavaju kao "neobogaćene". Osim ako nije drugačije naznačeno, predviđeno je da pozicije u atomu ovde izlistanih jedinjenja predstavljaju stabilan izotop tog atoma. Na primer, ako nije drugačije navedeno, kada je pozicija označena specifično kao "H" ili "vodonik", smatra se da pozicija ima vodonik u svom prirodnom izotopskom sastavu.

[0076] Termin "izotopski obogaćen" odnosi se na poziciju u atomu koja ima izotopski sastav drugačiji od prirodnog izotopskog sastava tog atoma. "Izotopski obogaćen" takođe može da se odnosi na jedinjenje koje sadrži najmanje jednu poziciju u atomu koj ima izotopski sastav drugačiji od prirodnog izotopskog sastava tog atoma. Kako se ovde koristi, "izotopolog" je izotopski obogaćeno jedinjenje.

[0077] Termin "izotopsko obogaćivanje" odnosi se na procenat inkorporiranja količine specifičnog izotopa na datoj poziciji u atomu molekula, umesto prirodnog izotopskog sastava tog atoma.Na primer, obogaćivanje deuterijumom od 1% na datoj poziciji znači da 1% molekula u datom uzorku sadrži deuterijum u datoj poziciji.Usled toga što distribucija deuterijuma koja se prirodno javlja iznosi oko 0,0156%, obogaćivanje deuterijumom na bilo kojoj poziciji u jedinjenju koje se sintetiše korišćenjem neobogaćenih polaznih materijala iznosi oko 0,0156%.

1

[0078] Termin "izotopski faktor obogaćivanja" odnosi se na odnos između izotopskog sastava i prirodnog izotopskog sastava određenog izotopa.

[0079] Što se tiče jedinjenja predviđenih ovde, kada je određena atomski položaj označen kao da deuterijum ili "D", podrazumeva se da je obilje deuterijuma na toj poziciji znatno veće od prirodnog obilja deuterijuma, što je oko 0.015%. Pozicija za koju je naznačeno da sadrži deuterijum obično ima minimalni izotopski faktor obogaćivanja od, u konkretnim primerima izvođenja, najmanje 1000 (15% inkorporacija deuterijuma), najmanje 2000 (30% inkorporacija deuterijuma), najmanje 3000 (45% inkorporacija deuterijuma), najmanje 3500 (52,5% inkorporacija deuterijuma), najmanje 4000 (60% inkorporacija deuterijuma), najmanje 4500 (67,5% inkorporacija deuterijuma), najmanje 5000 (75% inkorporacija deuterijuma), najmanje 5500 (82,5% inkorporacija deuterijuma), najmanje 6000 (90% inkorporacija deuterijuma), najmanje 6333,3 (95% inkorporacija deuterijuma), ili najmanje 6466,7 (97% inkorporacija deuterijuma), najmanje 6600 (99% inkorporacija deuterijuma), ili 6633.3 (99.5% inkorporacija deuterijuma) na svakoj određenoj poziciji deuterijuma.

[0080] Izotopsko obogaćivanje i faktor izotopskog obogaćivanja ovde obezbeđenih jedinjenja može da se odredi korišćenjem konvencionalnih analitičkih metoda poznatih stručnjaku u oblasti, uključujući, npr. masenu spektrometriju, spektroskopsku nuklearnu magnetnu rezonancu i kristalografiju.

B. MIV-818

[0081] Sinteza MIV-818 je prikazana u WO2016/030335.Ukratko, nukleozidni prekursor se priprema kao što je prikazano na slici 18 i kupluje se sa fosforamidnim reagensom kao što je prikazano na slici 19.

[0082] MIV-818 je tipično >75%, kao što je >90%, poželjno >95%, i poželjnije najmanje 95% ee dijastereoizomera:

[0083] Alternativno, može da se koristi racemat na fosforu i on je tipično jeftiniji za proizvodnju.

C. Farmaceutske formulacije

1. Pregled

[0084] Ovde dati primeri izvođenja obuhvataju farmaceutske formulacije i kompozicije koje sadrže MIV-818, pri čemu su formulacije i kompozicije pripremljene za oralnu primenu. Konkretni primeri izvođenja se odnose na upotrebu MIV-818 za pripremu farmaceutskih

1

formulacija i kompozicija za lečenje određenih medicinskih indikacija, kako je ovde obezbeđeno. Ovde obezbeđene farmaceutske formulacije i kompozicije koje sadrže MIV-818, namenjene su za oralnu isporuku kod subjekata kojima je to potrebno. Formati za oralnu isporuku uključuju, ali nisu ograničeni na, tablete, kapsule, kaplete, rastvore, suspenzije, i sirupe, a takođe mogu da sadrže veći broj granula, perli, praškova ili peleta koji mogu da budu ili da ne budu inkapsulirani. Ovi formati mogu u ovom tekstu da se označavaju i kao "jezgro leka", koje sadrži MIV-818.

[0085] Konkretni primeri izvođenja u ovom tekstu obezbeđuju čvrste oblike oralnih doza koje su tablete ili kapsule. U nekim primerima izvođenja, formulacija je tableta koja sadrži MIV-818. U nekim primerima izvođenja, formulacija je kapsula koja sadrži MIV-818. U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene tablete ili kapsule opciono sadrže jedan ili više ekscipijenasa, kao što su, na primer, sredstva za klizanje, razblaživači, lubrikansi, boje, sredstva za raspadanje, sredstva za granulaciju, vezujuća sredstva, polimere i sredstva za oblaganje. U nekim primerima izvođenja, formulacija je tableta sa trenutnim oslobađanjem. U nekim primerima izvođenja, formulacija je tableta sa kontrolisanim oslobađanjem koja oslobađa API, npr. u osnovi u intestinalnom traktu. U nekim primerima izvođenja, formulacija je tvrda želatinska kapsula. U nekim primerima izvođenja, formulacija je meka želatinska kapsula. U nekim primerima izvođenja, kapsula je kapsula od hidroksipropil metilceluloze (HPMC). U nekim primerima izvođenja, formulacija je kapsula sa trenutnim oslobađanjem. U nekim primerima izvođenja, formulacija je kapsula sa trenutnim ili kontrolisanim oslobađanjem koja oslobađa API, npr., u osnovi u intestinalnom traktu.

[0086]U konkretnim primerima izvođenja, formulacije mogu da se pripremaju korišćenjem konvencionalnih metoda poznatih stručnjacima u oblasti farmaceutskog formulisanja, kao što je opisano, npr. u relevantnim udžbenicima.Videti, npr. REMINGTON, THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 20th Edition, Lippincott Williams & Wilkins, (2000); ANSEL et al.,PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS AND DRUG DELIVERY SYSTEMS, 7th Edition, Lippincott Williams & Wilkins, (1999); GIBSON, PHARMACEUTICAL PREFORMULATION AND FORMULATION, CRC Press (2001).

[0087] U konkretnim primerima izvođenja, specifična količina MIV-818 u formulaciji je, npr., oko 10 mg, oko 20 mg, oko 40 mg, oko 60 mg, oko 80 mg, oko 100 mg, oko 120 mg, oko 140 mg, oko 160 mg, oko 180 mg, oko 200 mg, oko 220 mg, najmanje oko 240 mg, oko 260 mg, oko 280 mg oko 300 mg, oko 320 mg, oko 340 mg, oko 360 mg, oko 380 mg, oko 400 mg, oko 420 mg, oko 440 mg, oko 460 mg, oko 480 mg, oko 500 mg, oko 600 mg, oko 700 mg, oko 800 mg, oko 900 mg, oko 1000 mg, oko 1100 mg, oko 1200 mg oko 1300 mg, oko 1400 mg, oko 1500 mg, oko 1600 mg, oko 1700 mg, oko 1800 mg, oko 1900 mg, oko 2000 mg, oko 2100 mg, oko

1

2200 mg, oko 2300 mg, oko 2400 mg, oko 2500 mg, oko 3000 mg, oko 4000 mg ili oko 5000 mg.

[0088] U konkretnim primerima izvođenja, specifična količina MIV-818 u formulaciji je, npr., najmanje oko 10 mg, najmanje oko 20 mg, najmanje oko 40 mg, najmanje oko 60 mg, najmanje oko 80 mg, najmanje oko 100 mg, najmanje oko 120 mg, najmanje oko 140 mg, najmanje oko 160 mg, najmanje oko 180 mg, najmanje oko 200 mg, najmanje oko 220 mg najmanje oko 240 mg, najmanje oko 260 mg, najmanje oko 280 mg, najmanje oko 300 mg, najmanje oko 320 mg, najmanje oko 340 mg, najmanje oko 360 mg, najmanje oko 380 mg, najmanje oko 400 mg, najmanje oko 420 mg, najmanje oko 440 mg, najmanje oko 460 mg, najmanje oko 480 mg, najmanje oko 500 mg, najmanje oko 600 mg, najmanje oko 700 mg, najmanje oko 800 mg, najmanje oko 900 mg, najmanje oko 1000 mg, najmanje oko 1100 mg, najmanje oko 1200 mg, najmanje oko 1300 mg, najmanje oko 1400 mg, najmanje oko 1500 mg, najmanje oko 1600 mg, najmanje oko 1700 mg, najmanje oko 1800 mg, najmanje oko 1900 mg najmanje oko 2000 mg, najmanje oko 2100 mg, najmanje oko 2200 mg, najmanje oko 2300 mg, najmanje oko 2400 mg, najmanje oko 2500 mg, najmanje oko 3000 mg, najmanje oko 4000 mg, ili najmanje oko 5000 mg.

[0089] U nekim primerima izvođenja, formulacija je tableta, gde je tableta proizvedena korišćenjem standardnih procedura i opreme za obradu tableta, poznatih u stanju tehnike. U nekim primerima izvođenja, postupak za formiranja tableta je direktna kompresija praškaste, kristalne i/ili granulisane kompozicije koja se sastoji od MIV-818, samog ili u kombinaciji sa jednim ili više ekscipijenasa, kao što su, na primer, nosači, aditivi, polimeri ili slično. U nekim primerima izvođenja, kao alternativa direktnoj kompresiji, tablete mogu da se pripremaju vlažnom granulacijom ili procesima suve granulacije. U nekim primerima izvođenja, tablete se oblikuju umesto da se komprimuju, počevši od vlažnog materijala ili materijala koji na druge načine može da se oblikuje. U nekim primerima izvođenja koriste se tehnike kompresije i granulacije.

[0090] U nekim primerima izvođenja, formulacija je kapsula, pri čemu kapsule mogu da se proizvode korišćenjem standardnih procedura i opreme za obradu kapsula, poznatih u stanju tehnike. U nekim primerima izvođenja mogu da se pripremaju meke želatinske kapsule, u kojima kapsule sadrže smešu MIV-818 i biljnog ulja ili ne-vodenih materijala koji mogu da se mešaju sa vodom, kao što je, na primer, polietilen glikol i slični. U nekim primerima izvođenja mogu da se pripremaju tvrde želatinske kapsule koje sadrže granule MIV-818 u kombinaciji sa čvrstim nosačem koji može da se spraši, kao što su, na primer, laktoza, saharoza, sorbitol, manitol, krompirov skrob, kukuruzni skrob, amilopektin, derivati celuloze ili želatin. U nekim primerima izvođenja, omotač tvrde želatinske kapsule može da se priprema od kompozicije kapsule koja

1

sadrži želatin i malu količinu plastifikatora kao što je glicerol. U nekim primerima izvođenja, kao alternativa želatinu, omotač kapsule može da se pravi od ugljenohidratnog materijala. U nekim primerima izvođenja, kompozicija kapsule može dodatno da uključuje polimere, boje, arome i sredstva za zamućivanje, po potrebi. U nekim primerima izvođenja, kapsula sadrži HPMC.

[0091] U nekim primerima izvođenja, farmaceutska formulacija koja je ovde obezbeđena je komprimovana tableta koja sadrži MIV-818.Pored MIV-818, tableta opciono sadrži jedan ili više ekscipijenasa, uključujući (a) razblaživače ili punioce, koji mogu da dodaju potrebni volumen formulaciji kako bi se pripremile tablete željene veličine; (b) veziva ili adhezive, koji mogu da pospešuju adheziju čestica formulacije, omogućavajući pripremu granulacije i održavanje integriteta finalne tablete; (c) dezintegratore ili sredstva za raspadanje, koji, nakon primene, mogu da pospešuju raspadanje tableta na manje čestice kako bi dostupnost leka bila poboljšana; (d) anti-adherense, sredstva za klizanje, lubrikanse ili sredstva za podmazivanje, koji mogu da povećaju protok materijala za tabletiranja u kalup za tablete, minimiziraju habanje alata za pravljenje tableta, spreče lepljenje materijala za punjenje za alat za tablete, i proizvedu tablete koje imaju sjaj; i (e) razne dodatke, kao što su boje i arome.Nakon komprimovanja, tablete koje su ovde obezbeđene mogu da se oblože različitim materijalima kao što je ovde opisano.

[0092] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđena farmaceutska formulacija je višestruko komprimovana tableta MIV-818. Višestruko komprimovane tablete pripremaju se tako što se materijal za punjenje podvrgava više nego jednoj kompresiji. Rezultat može biti tableta sa više slojeva ili tableta-u-tableti, gde je unutrašnja tableta jezgro koje sadrži MIV-818 i opciono jedan ili više ekscipijenasa, a spoljni deo je omotač, pri čemu omotač sadrži jedan ili više ekscipijenasa, i može da sadrži ili da ne sadrži dodatni MIV-818. Slojevite tablete mogu se pripremiti početnim sabijanjem dela materijala za punjenje u matrici nakon čega sledi dodatni materijal za punjenje i kompresija, za formiranje dvoslojnih ili troslojnih tableta, u zavisnosti od broja odvojenih punila. Svaki sloj može sadržati drugačiji terapeutski agens, odvojen jedan od drugog iz razloga hemijske ili fizičke nekompatibilnosti, ili istog terapeutskog agensa za pripremljenu oslobađanje leka, ili jednostavno za jedinstvenu pojavu višeslojne tablete. Svaki deo ispune može biti različito obojen kako bi se pripremio prepoznatljiv izgled tableta. U pripremi tableta koje imaju komprimovani tabletu kao unutrašnje jezgro, specijalne mašine se mogu koristiti za postavljanje izvršili tabletu upravo unutar ishrane za naknadnu kompresiju okolnog materijala punjenja.

[0093] U nekim primerima izvođenja, komprimovana tableta MIV-818 može biti obložena obojenim ili neobojenim slojem šećera. Premaz može biti rastvorljiv u vodi i brzo rastvoren nakon oralnog uzimanja. Premaz šećera može poslužiti u svrhu zaštite priloženog leka od okoline

1

i pružanja barijere neprikladnom ukusu ili mirisu. Premaz šećera takođe može da poboljša izgled komprimovanog tableta i da omogući utisak identifikovanja informacija proizvođača. U nekim primerima izvođenja, tablete presvučene šećerom mogu biti 50% veće i teže od originalnih neobojenih tableta. Šećerni premaz tableta može se podeliti u sledećim opcionim koracima: (1) hidroizolacija i zaptivanje (ako je potrebno); (2) pod-premaz; (3) glačanje i konačno zaokruživanje; (4) završna obrada i bojenje (po želji); (5) imprinting (ako je potrebno); i (6) poliranje.

[0094] U nekim primerima izvođenja, komprimovana tableta MIV-818 može da bude obložena filmom. Tablete obložene filmom mogu da budu komprimovane tablete prevučene tankim slojem polimera sposobnog da formira film kao kožu preko tableta. Film je obično obojen i ima prednost ako je izdržljiviji, manje glomazan i kada je potrebno manje vremena za nanošenje. Po svom sastavu, obloga može biti dizajnirana da pukne i izloži jezgro tablete na željenoj lokaciji u gastrointestinalnom traktu. Proces oblaganja filmom, koji postavlja tanku priljubljenu oblogu od materijala sličnog plastičnom preko komprimovane tablete, može da proizvede obložene tablete koje imaju suštinski istu težinu, oblik i veličinu kao i originalna komprimovana tableta. Filmobloga može biti u boji kako bi se tablete učinile atraktivnim i prepoznatljivim. Rastvori za oblaganje filmom mogu biti ne-vodeni ili vodeni. U konkretnim varijantama, ne-vodene rastvori mogu opciono da sadrže jedan ili više od sledećih tipova materijala da obezbedi željeni premaz tablete: (1) sredstva za formiranje filmasposobnog za proizvodnju glatkih, tankih filmova koji se mogu reprodukovati pod konvencionalnim uslovima premaza i primeniti na različite oblika tableta, kao što su, na primer, celuloza acetat ftalat; (2) legura supstanca obezbeđuje rastvorljivost u vodi ili propustljivost za film kako bi se osiguralo prodiranje telesnih tečnosti i terapeutske dostupnosti leka, kao što su, na primer, polietilen glikol; (3) plastifikator za proizvodnju fleksibilnosti i tako obezbediti trajnost, kao što je, na primer, ricinusovo ulje; (4) surfaktant za poboljšanje rasprostranjenosti filma tokom primene, kao što su, na primer, poliokietilen sorbitan derivata; (5) neprozirne i boje da bi izgled prevučenih tableta atraktivan i prepoznatljiv, kao što su, na primer, titanijum dioksid kao neprozirna, i FD&C ili D&C pigmenti kao koloranti; (6) zaslađivača, arome, ili arome za poboljšanje prihvatljivosti tablete za subjekta, kao što su, na primer, saharin kao zaslađivača, i vanila kao sredstva za davanje ukusa i arome; (7) sjaj za tablete bez posebnog poliranja, kao što je, na primer, pčelinji vosak; i (8) isparljivi rastvarač da bi se omogućilo širenje ostalih komponenti preko tableta, dok brzo isparavanje omogućava efikasan i brz rad, kao što je, na primer, mešavina alkohol-aceton.U nekim primerima izvođenja, vodena formulacija film-obloge može da sadrži jedan ili više od sledećeg: (1) polimer za formiranje filma, kao što su, na primer, polimeri celuloznog etra kao hidroksipropil metil-celuloza, hidroksipropil celuloza i metil-celuloza; (2) plastifikator, kao što

2

su, na primer, glicerin, propilen glikol, polietilen glikol, dietil ftalat i dibutil subacetat; (3) kolorant i sredstvo za zamućivanje, kao što su, na primer, FD&C ili D&C pigmenti i pigmenti gvožđe oksida; (4) vehikulum, kao što je, na primer, voda.

[0095] U nekim primerima izvođenja, komprimovana tableta MIV-818 može da bude obložena kompresijom. Materijal za prelubrikansinje, u obliku granulacije ili praha, može se komprimirati na jezgro tablete lijeka sa specijalnom prešom za tablete.

[0096] U nekim primerima izvođenja, farmaceutska formulacija je tableta obložena želatinom MIV-818. Tableta obložena želatinom je komprimovana tableta u obliku kapsule koja omogućava premazanom proizvodu da bude manji od kapsule ispunjene sa ekvivalentnom količinom praha. Želatinski premaz olakšava gutanje i u poređenju sa nezapečaćenim kapsulama, želatinski obložene tablete mogu biti neovlašćeno očigledna.

[0097] U nekim primerima izvođenja, komprimovane tablete mogu se pripremiti vlažnom granulacijom. Vlažna granulacija je široko korišćen metod za proizvodnju komprimovanih tableta, i, naročito realizacije, zahteva jedan ili više sledećih koraka: (1) vaganje i mešanjem sastojaka; (2) priprema vlažnu masu; (3) skrining vlažnu masu u peleta ili granula; (4) sušenje granulaciju; (5) dimenzionisanje granulaciju od suvog skrininga; (6) dodavanje lubrikansi i mešanja; i (7) tabletiranje kompresijom.

[0098] U nekim primerima izvođenja, komprimovane tablete mogu se pripremiti vlažnom granulacijom. Prema suvoj metodi granulacije, smeša praha se zbija u velikim komadima i zatim razbija ili pretvara u granule. Ali ova metoda, bilo aktivni sastojak ili razblaživač ima kohezivno svojstvo. Nakon merenja težine i mešanja sastojaka, smeša praha može biti formmirana u velike komade ili komprimovana u velike ravne tablete ili pelete. Veliki komadi se zatim razbijaju ručno ili mlinom i prolaze kroz ekran željene mreže za dimenzioniranje. Lubrikans se dodaje na uobičajen način, a tablete se pripremaju kompresijom. Alternativno, umesto sporog protoka, kompaktori praha mogu da se koriste za povećanje gustine praha pritiskom između valjaka visokog pritiska. Komprimovani materijal se zatim razbija, smanjuje i podmazuje, a tablete se pripremaju kompresijom na uobičajeni način. Metoda sabijanja valjcima je često poželjnija od sporog protoka. Vezivna sredstva koja se koriste u formulacijama sabijanja valjcima uključuju metilcelulozu ili hidroksil-metilcelulozu i mogu proizvesti dobru tvrdoću i krhkost tableta.

[0099] U nekim primerima izvođenja, komprimovane tablete mogu se pripremiti direktnom kompresijom. Neke granularne hemikalije imaju svojstva slobodnog toka i kohezije koja im omogućavaju da se komprimuju direktno u mašini za tablete bez potrebe za vlažnom ili suvom granulacijom. Za hemikalije koje nemaju ovaj kvalitet mogu se koristiti specijalni farmaceutski ekscipijensi koji daju neophodne osobine za proizvodnju tableta direktnom kompresijom. Posebni ekscipijensi za tebletiranje uključuju, npr. punila, kao što su prskanjem osušena laktoze, mikro-kristali alfa-monohidrat laktoze, smeše saharoza-invertni šećer-kukuruzni skrob, mikrokristalna celuloza, kristalna maltoza, i di-kalcijum fosfat;

sredstva za raspadanje, kao što su skrob za direktnu kompresiju, natrijum karboksimetil skrob, umrežena karboksimetilcelulozna vlakana, i umreženi polivinilpirolidon;

lubrikansi, kao što su magnezijum stearat i talk; i

sredstva za klizanje, kao što je para silicijum dioksida.

[0100] U nekim primerima izvođenja, tablete koje su ovde obezbeđene mogu se pripremiti kalupljenjem. Baza za kalupljene tablete je generalno mešavina finog praha laktoze sa delom ili bez dela saharoze u prahu. U pripremi punjenja, lek se ravnomerno meša sa bazom geometrijskim razblaživanjem. Smeša u prahu može da se navlaži mešavinom vode i alkohola dovoljnom samo da ovlaži prah tako da on može da se sabije. Delovanje vode kao rastvarača na deo baze laktoze/saharoze ostvaruje vezivanje smeše praha tokom sušenja. Deo alkohola ubrzava proces sušenja.

[0101] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene farmaceutske formulacije sadrže MIV-818 i, opciono, jedan ili više ekscipijenasa, kako bi se formiralo "jezgro leka". Opcioni ekscipijensi uključuju, npr., razblaživače (sredstva za dobijanje volumena), lubrikanse, sredstva za raspadanje, punila, stabilizatore, surfaktante, konzervanse, boje, arome, vezujuća sredstva, pomoćne nosače, sredstva za klizanje, ekscipijense za poboljšanje permeacije, plastifikatore i slično, kao što je poznato u stanju tehnike. Stručnjaci u oblasti će razumeti da neke supstance imaju više od jedne funkcije u farmaceutskoj kompoziciji. Na primer, neke supstance su vezujuća sredstva koja pomažu da se tableta drži zajedno nakon kompresije, ali su i sredstva za raspadanje koja pomažu da se tableta raspadne nakon što stigne do ciljnog mesta isporuke. Izbor ekscipijenasa i količine koje se koriste može lako da odredi naučnik koji se bavi formulacijama, na osnovu iskustva i razmatranja standardnih procedura i referentnih radova dostupnih u stanju tehnike.

[0102] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene formulacije sadrže jedno ili više veziva. Veziva mogu da se koriste, npr. da obezbede kvalitet kohezije tablete, i na taj način osiguraju da tableta ostane intaktna nakon kompresije. Pogodna veziva uključuju, ali nisu ograničena na, skrob (uključujući kukuruzni skrob i preželatinizirani skrob), želatin, šećere (uključujući saharozu, glukozu, dekstrozu i laktozu), polietilen glikol, propilen glikol, voskove i prirodne i sintetičke gume, npr. natrijum alginat akacije, polivinilpirolidon, celulozne polimere (uključujući hidroksipropil celulozu, hidroksipropilmetilcelulozu, metil celulozu, etil celulozu, hidroksietil celulozu, karboksimetil celulozu, i slično), vegumu, karbomer (npr. karbopol), natrijum, dekstrin, guar gumu, hidrogenizovano biljno ulje, magnezijum aluminijum silikat, maltodekstrin, polimetakrilate, povidon (npr. KOLLIDON, PLASDONE), mikrokristalnu celulozu, između ostalih. Vezujuća sredstva uključuju, npr., akaciju, agar, alginsku kiselinu, karbomere, karagenan, celulozni acetat ftalat, ceratoniju, hitosan, poslastičarski šećer, kopovidon, dekstrate, dekstrin, dekstrozu, etilcelulozu, želatin, gliceril behenat, guar gumu, hidroksietil celulozu, hidroksietilmetil celulozu, hidroksipropil celulozu, hidroksipropil skrob, hipromelozu, inulin, laktozu, magnezijum aluminijum silikat, maltodekstrin, maltozu, metilcelulozu, poloksamer, polikarbofil, polidekstrozu, polietilen oksid, polimetilakrilate, povidon, natrijum alginat, natrijum karboksimetilcelulozu, skrob, preželatinizirani skrob, stearinsku kiselinu, saharozu i zein.

[0103] Vezujuće sredstvo može da bude, u odnosu na jezgro leka, u količini od oko 2% tež./tež. jezgra leka; oko 4% tež./tež. jezgra leka, oko 6% tež./tež. jezgra leka, oko 8% tež./tež. jezgra leka, oko 10% tež./tež. jezgra leka, oko 12% tež./tež. jezgra leka, oko 14% tež./tež. jezgra leka, oko 16% tež./tež. jezgra leka, oko 18% tež./tež. jezgra leka, oko 20% tež./tež. jezgra leka, oko 22% tež./tež. jezgra leka, oko 24% tež./tež. jezgra leka, oko 26% tež./tež. jezgra leka, oko 28% tež./tež. jezgra leka, oko 30% tež./tež. jezgra leka, oko 32% tež./tež. jezgra leka, oko 34% tež./tež. jezgra leka, oko 36% tež./tež. jezgra leka, oko 38% tež./tež. jezgra leka, oko 40% tež./tež. jezgra leka, oko 42% tež./tež. jezgra leka, oko 44% tež./tež. jezgra leka, oko 46% tež./tež. jezgra leka, oko 48% tež./tež. jezgra leka, oko 50% tež./tež. jezgra leka, oko 52% tež./tež. jezgra leka, oko 54% tež./tež. jezgra leka, oko 56% tež./tež. jezgra leka, oko 58% tež./tež. jezgra leka, oko 60% tež./tež. jezgra leka, oko 62% tež./tež. jezgra leka, oko 64% tež./tež. jezgra leka, oko 66% tež./tež. jezgra leka; oko 68% tež./tež. jezgra leka, oko 70% tež./tež. jezgra leka, oko 72% tež./tež. jezgra leka, oko 74% tež./tež. jezgra leka, oko 76% tež./tež. jezgra leka, oko 78% tež./tež. jezgra leka, oko 80% tež./tež. jezgra leka, oko 82% tež./tež. jezgra leka, oko 84% tež./tež. jezgra leka, oko 86% tež./tež. jezgra leka, oko 88% tež./tež. jezgra leka, oko 90% tež./tež. jezgra leka, oko 92% tež./tež. jezgra leka, oko 94% tež./tež. jezgra leka, oko 96% tež./tež. jezgra leka, oko 98% tež./tež. jezgra leka, ili više, ako se utvrdi da je pogodno. U nekim primerima izvođenja, pogodnu količinu konkretnog veziva utrvđuje stručnjak u oblasti.

[0104] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene formulacije sadrže jedan ili više razblaživača. Razblaživači mogu da se koriste kako bi, npr. povećali volumen tako da na kraju bude obezbeđena tableta praktične veličine. Pogodni razblaživači uključuju dikalcijum fosfat, kalcijum sulfat, laktozu, celulozu, kaolin, manitol, natrijum hlorid, suvi skrob, mikrokristalnu celulozu (npr. AVICEL), mikrofinu celulozu, preželatinizovani skrob, kalcijum karbonat, kalcijum sulfat, šećer, dekstrate, dekstrin, dekstrozu, dvobazni kalcijum fosfat dihidrat, tribazni kalcijum fosfat, kaolin, magnezijum karbonat, magnezijum oksid, maltodekstrin, manitol, polimetakrilate (npr. EUDRAGIT), kalijum hlorid, natrijum hlorid, sorbitol, i talk, između

2

ostalog. Razblaživači takođe uključuju, na primer, amonijum alginat, kalcijum karbonat, kalcijum fosfat, kalcijum sulfat, celulozu acetat, kompresibilni šećer, konditorski šećer, dekstrate, dekstrin, dekstrozu, eritritol, etilcelulozu, fruktoza, fumarnu kiselinu, gliceril palmitostearat, izomalt, kaolin, lacitol , laktozu, manitol, magnezijum karbonat, magnezijum oksid, maltodekstrin, maltozu, trigliceride srednjeg lanca, mikrokristalnu celulozu, mikrokristalnu silicil celulozu, aktivnu celuloza, polidekstrozu, polimetilakrilate, simetikon, natrijum alginat, natrijum hlorid, sorbitol, skrob, preželatinizirani skrob, saharozu , sulfobutiletar-ciklodekstrin, talk, tragakant, trehalozu i ksilitol.

[0105] Razblaživači mogu da se koriste u količinama koje su preračunate tako da se dobije željena zapremina za tabletu ili kapsulu; u nekim primerima izvođenja, razblaživač se koristi u količini od oko 5% ili više, oko 10% ili više, oko 15% ili više, oko 20% ili više, oko 22% ili više, oko 24% ili više, oko 26% ili više, oko 28% ili više, oko 30% ili više, oko 32% ili više, oko 34% ili više, oko 36% ili više, oko 38% ili više, oko 40% ili više, oko 42% ili više, oko 44% ili više, oko 46% ili više, oko 48% ili više, oko 50% ili više, oko 52% ili više, oko 54% ili više, oko 56% ili više, oko 58% ili više, oko 60% ili više, oko 62% ili više, oko 64% ili više, oko 68% ili više, oko 70% ili više, oko 72% ili više, oko 74% ili više, oko 76% ili više, oko 78% ili više, oko 80% ili više, oko 85% ili više, oko 90% ili više, ili oko 95% ili više, težine/težini jezgra leka; između oko 10% i oko 90% tež./tež. jezgra leka; između oko 20% i oko 80% tež./tež. jezgra leka; između oko 30% i oko 70% tež./tež. jezgra leka; između oko 40% i oko 60% tež./tež. jezgra leka. U nekim primerima izvođenja, pogodnu količinu konkretnog razblaživača određuje stručnjak u oblasti.

[0106] U nekim primerima izvođenja, ovde bezbeđene formulacije sadrže jedan ili više lubrikanasa. Lubrikansi mogu da se koriste kako bi npr.olakšali proizvodnju tableta; primeri pogodnih lubrikanasa uključuju, na primer, biljna ulja kao što je ulje kikirikija, ulje semena pamuka, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i teobroma ulje, glicerin, magnezijum stearat, kalcijum stearat i stearinsku kiselinu. U nekim primerima izvođenja, stearati, ukoliko su prisutni, predstavljaju ne više od približno 2 težinska % jezgra koje sadrži lek. Dalji primeri lubrikanasa uključuju npr. kalcijum stearat, glicerin monostearat, gliceril behenat, gliceril palmitostearat, magnezijum lauril sulfat, magnezijum stearat, miristinsku kiselinu, palmitinsku kiselinu, poloksamer, polietilen glikol, kalijum benzoat, natrijum benzoat, natrijum hlorid, natrijum lauril sulfat, natrijum stearil fumarat, stearinsku kiselinu, talk i cink stearat. U konkretnim primerima izvođenja, lubrikans je magnezijum stearat.

[0107] U nekim primerima izvođenja, lubrikans je prisutan, u odnosu na jezgro leka, u količini od oko 0.2% tež./tež. jezgra leka, oko 0.4% tež./tež. jezgra leka, oko 0.6% tež./tež. jezgra leka, oko 0.8% tež./tež. jezgra leka, oko 1.0% tež./tež. jezgra leka, oko 1,2% tež./tež. jezgra leka, oko 1,4% tež./tež. jezgra leka, oko 1.6% tež./tež. jezgra leka, oko 1.8% tež./tež. jezgra leka, oko 2.0% tež./tež. jezgra leka, oko 2.2% tež./tež. jezgra leka, oko 2.4% tež./tež. jezgra leka, oko 2.6% tež./tež. jezgra leka, oko 2.8% tež./tež. jezgra leka, oko 3.0% tež./tež. jezgra leka, oko 3.5% tež./tež. jezgra leka, oko 4% tež./tež. jezgra leka, oko 4.5% tež./tež. jezgra leka, oko 5% tež./tež. jezgra leka, oko 6% tež./tež. jezgra leka, oko 7% tež./tež. jezgra leka, oko 8% tež./tež. jezgra leka, oko 10% tež./tež. jezgra leka, oko 12% tež./tež. jezgra leka, oko 14% tež./tež. jezgra leka, oko 16% tež./tež. jezgra leka, oko 18% tež./tež. jezgra leka, oko 20% tež./tež. jezgra leka, oko 25% tež./tež. jezgra leka, oko 30% tež./tež. jezgra leka, oko 35% tež./tež. jezgra leka, oko 40% tež./tež. jezgra leka, između oko 0.2% i oko 10% tež./tež. jezgra leka, između oko 0.5% i oko 5% tež./tež. jezgra leka, ili između oko 1% i oko 3% tež./tež. jezgra leka. U nekim primerima izvođenja, pogodnu količinu konkretnog lubrikansa utvrđuje stručnjak u oblasti.

[0108] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene formulacije sadrže jedno ili više sredstava za raspadanje. Sredstva za raspadanje mogu da se koriste, npr., da olakšaju raspadanje tablete, i mogu da budu, npr., skrob, glina, celuloza, algini, gume ili umreženi polimera. Dezintegratori takođe uključuju, npr., alginsku kiselinu, karboksimetilcelulozni kalcijum, karboksimetilcelulozni natrijum (npr., AC-DI-SOL, PRIMELLOSE), koloidni silicijum dioksid, kroskarmeloza natrijum, krospovidon (npr. KOLLIDON, POLYPLASDONE), guar gumu, magnezijum aluminijum silikat, metil celuloza, mikrokristalna celuloza, polakrilin kalijum, prah celuloza, preželatinizovani skrob, natrijum alginat, natrijum skrob glikolat (npr. EXPLOTAB) i skrob. Dodatna sredstva za raspadanje uključuju, npr. kalcijum alginat, hitozan, natrijum dokuzat, hidroksipropil celulozu i povidon.

[0109] U nekim primerima izvođenja, sredstvo za raspadanje je, u odnosu na jezgro leka, prisutno u količini od oko 1% tež./tež. jezgra leka, oko 2% tež./tež. jezgra leka, oko 3% tež./tež. jezgra leka, oko 4% tež./tež. jezgra leka, oko 5% tež./tež. jezgra leka, oko 6% tež./tež. jezgra leka, oko 7% tež./tež. jezgra leka, oko 8% tež./tež. jezgra leka, oko 9% tež./tež. jezgra leka, oko 10% tež./tež. jezgra leka, oko 12% tež./tež. jezgra leka, oko 14% tež./tež. jezgra leka, oko 16% tež./tež. jezgra leka, oko 18% tež./tež. jezgra leka, oko 20% tež./tež. jezgra leka, oko 22% tež./tež. jezgra leka, oko 24% tež./tež. jezgra leka, oko 26% tež./tež. jezgra leka, oko 28% tež./tež. jezgra leka, oko 30% tež./tež. jezgra leka, oko 32% tež./tež. jezgra leka, veća od oko 32% tež./tež. jezgra leka, između oko 1% i oko 10% tež./tež. jezgra leka, između oko 2% i oko 8% tež./tež. jezgra leka, između oko 3% i oko 7% tež./tež. jezgra leka, ili između oko 4% i oko 6% tež./tež. jezgra leka. U nekim primerima izvođenja pogodnu količinu konkretnog sredstva za raspadanje određuje stručnjak u oblasti.

[0110] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene formulacije sadrže jedan ili više stabilizatora.Stabilizatori (takođe se nazivaju pojačavači apsorpcije) se mogu koristiti, npr., za

2

inhibiciju ili usporavanje reakcija razgradnje lekova koje uključuju, na primer, oksidativne reakcije.Stabilizatori uključuju, npr. d-alfa-tokoferil polietilen glikol 1000 sukcinat (Vitamin E TPGS), akaciju, albumin, alginsku kiselinu, aluminijum stearat, amonijum alginat, askorbinsku kiselinu, askorbil palmitat, bentonit, butilovani hidroksitoluen, kalcijum alginat, kalcijum karboksimetilceluloza, karagenan, ceratoniju, koloidni silicijum dioksid, ciklodekstrine, dietanolamine, edate, tilceluloza, etilenglikol, palmitostearat, glicerin monostearat, guar guma, hidroksipropil celuloza, hipromeloza, invertni šećer, lecitin, magnezijum aluminijum silikat, monoetanolamin, pektin, poloksamer, polivinil alkohol, kalijum alginat, kalijum polakrilin, povidon, propil galat, propilen glikol, propilen glikol alginat, rafinoza, natrijum acetat, natrijum alginat, natrijum karboksimetil celuloza, natrijum stearil sorbitol, stearil alkohol, sufobutil-bciklodekstrin, trehaloza, beli vosak, kantanska guma, ksilitol, žuti vosak i cink acetat.

[0111] U nekim primerima izvođenja, stabilizator je, u odnosu na jezgro leka, prisutan u količini od oko 1% tež./tež. jezgra leka, oko 2% tež./tež. jezgra leka, oko 3% tež./tež. jezgra leka, oko 4% tež./tež. jezgra leka, oko 5% tež./tež. jezgra leka, oko 6% tež./tež. jezgra leka, oko 7% tež./tež. jezgra leka, oko 8% tež./tež. jezgra leka, oko 9% tež./tež. jezgra leka, oko 10% tež./tež. jezgra leka, oko 12% tež./tež. jezgra leka, oko 14% tež./tež. jezgra leka, oko 16% tež./tež. jezgra leka, oko 18% tež./tež. jezgra leka, oko 20% tež./tež. jezgra leka, oko 22% tež./tež. jezgra leka, oko 24% tež./tež. jezgra leka, oko 26% tež./tež. jezgra leka, oko 28% tež./tež. jezgra leka, oko 30% tež./tež. jezgra leka, oko 32% tež./tež. jezgra leka, između oko 1% i oko 10% tež./tež. jezgra leka, između oko 2% i oko 8% tež./tež. jezgra leka, između oko 3% i oko 7% tež./tež. jezgra leka, ili između oko 4% i oko 6% tež./tež. jezgra leka. U nekim primerima izvođenja, pogodnu količinu konkretnog stabilizatora određuje stručnjak u oblasti.

[0112] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene formulacije sadrže jedno ili više sredstava za klizanje. Sredstva za klizanje se mogu koristiti, npr., za poboljšanje svojstava protoka sastava praha ili granulata ili za poboljšanje tačnosti doziranja. Pomoćne materije koje mogu funkcionisati kao sredstva za klizanje uključuju, npr. koloidni silicijum dioksid, magnezijum trisilikat, celulozu u prahu, skrob, tribazni kalcijum fosfat, kalcijum silikat, celulozu u prahu, koloidni silicijum dioksid, magnezijum silikat, magnezijum trisilikat, silicijum dioksid, skrob, tribazni kalcijum fosfat i talk.

[0113] U nekim primerima izvođenja, sredstvo za klizanje je, u odnosu na jezgro leka, prisutno u količini manjoj od oko 1% tež./tež. jezgra leka, oko 2% tež./tež. jezgra leka, oko 3% tež./tež. jezgra leka, oko 4% tež./tež. jezgra leka, oko 5% tež./tež. jezgra leka, oko 6% tež./tež. jezgra leka, oko 7% tež./tež. jezgra leka, oko 8% tež./tež. jezgra leka, oko 9% tež./tež. jezgra leka, oko 10% tež./tež. jezgra leka, oko 12% tež./tež. jezgra leka, oko 14% tež./tež. jezgra leka, oko 16% tež./tež. jezgra leka, oko 18% tež./tež. jezgra leka, oko 20% tež./tež. jezgra leka, oko 22%

2

tež./tež. jezgra leka, oko 24% tež./tež. jezgra leka, oko 26% tež./tež. jezgra leka, oko 28% tež./tež. jezgra leka, oko 30% tež./tež. jezgra leka, oko 32% tež./tež. jezgra leka, između oko 1% i oko 10% tež./tež. jezgra leka, između oko 2% i oko 8% tež./tež. jezgra leka, između oko 3% i oko 7% tež./tež. jezgra leka, ili između oko 4% i oko 6% tež./tež. jezgra leka. U nekim primerima izvođenja, pogodnu količinu konkretnog sredstva za klizanje određuje stručnjak u oblasti.

[0114] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđene formulacije sadrže jedan ili više pojačavača permeacije (koji se nazivaju i, npr. pojačavači propustljivosti).U nekim primerima izvođenja, pojačavač permeacije povećava preuzimanje MIV-818 kroz gastrointestinalni zid.U nekim primerima izvođenja, pojačavač permeacije menja brzinu i/ili količinu MIV-818 koji ulazi u krvotok.U konkretnim primerima izvođenja, d-alfa-tokoferil polietilen glikol-1000 sukcinat (Vitamin E TPGS) se koristi kao pojačavač permeacije.U konkretnim primerima izvođenja, koriste se jedan ili više drugih pogodnih pojačavača permeacije, uključujući, npr., bilo koji pojačavač permeacije poznat u stanju tehnike. Specifični primeri pogodnih pojačavača permeacije uključuju, npr., one navedene u nastavku:

Primer imena proizvoda, hemijsko ime, dobavljač

Pluronic F 127 Poloksamer F 127 Sigma

Lutrol F 68 Poloksamer 188 BASF

Carbopol 934-P Karbomer 934-P Spectrum

Hemikalija

Tween 80 Polisorbat 80 Sigma

Hitozan Chitosan Low Mol Wt Aldrich

Kaprinska kiselina / Na cap natrijum dekanoat Sigma

Laurinska kiselina / Na laur natrijum dodekanoat Sigma

Dinatrijum EDTA Etilendiamin tetrasirćetna kiselina Sigma

dinatrijum dehidrat

Propilen glikol 1, 2 Propandiol Sigma

CM Cellulose karboksimetil celuloza Sigma

Labrasol kaprilokaproil makrogol-8 gliceridi Gattefosse

N,N- dimetilacetamid (minimum 99%) Sigma

Vitamin E TPGS d-alfa-tokoferil polietilen Eastman

Glikol-1000 sukcinat

Solutol HS 15 polietilen glikol 66012- BASF

hidroksistearat

Labrafil M 1944 CS (2) oleil makrogolgliceridi Gattefosse

2

[0115] Ostali potencijalni pojačavači permeacije uključuju, npr., alkohole, dimetil sulfoksid, gliceril monoleat, glikoflurol, izopropil miristat, izopropil palmitat, lanolin, linolnu kiselinu, miristinsku kiselinu, oleinsku kiselinu, oleil alkohol, palmitinsku kiselinu, polioksietilen alkilni etre, 2- pirolidon, natrijum lauril sulfat i timol.

[0116] U nekim primerima izvođenja, pojačavač permeacije je prisutan u formulaciji u količini po težini, u odnosu na ukupnu težinu formulacije, od oko 0,1%, oko 0,2%, oko 0,3%, oko 0,4%, oko 0,5%, oko 0,6%, oko 0,7%, oko 0,8%, oko 0,9%, oko 1%, oko 1,1%, oko 1,2%, oko 1,3%, oko 1,4%, oko 1,5%, oko 1,6%, oko 1,7%, oko 1,8%, oko 1,9%, oko 2%, oko 2,1%, oko 2,2%, oko 2,3%, oko 2,4%, oko 2,5%, oko 2,6%, oko 2,7%, oko 2,8%, oko 2,9%, oko 3%, oko 3,1%, oko 3,2%, oko 3,3%, oko 3,4%, oko 3,5%, oko 3,6%, oko 3,7%, oko 3,8%, oko 3,9%, oko 4%, oko 4,1%, oko 4,2%, oko 4,3%, oko 4,4%, oko 4,5%, oko 4,6%, oko 4,7%, oko 4,8%, oko 4,9%, oko 5%, oko 5,1%, oko 5,2%, oko 5,3%, oko 5,4%, oko 5,5%, oko 5,6%, oko 5,7%, oko 5,8%, oko 5,9%, oko 6%, oko 6,1% oko 6,2%, oko 6,3%, oko 6,4%, oko 6,5%, oko 6,6%, oko 6,7%, oko 6,8%, oko 6,9%, oko 7%, oko 7,1% oko 7,2%, oko 7,3%, oko 7,4%, oko 7,5%, oko 7,6%, oko 7,7%, oko 7,8%, oko 7,9%, oko 8%, oko 8,1% oko 8,2%, oko 8,3%, oko 8,4%, oko 8,5%, oko 8,6%, oko 8,7%, oko 8,8%, oko 8,9%, oko 9%, oko 9,1%, oko 9,2%, oko 9,3%, oko 9,4%, oko 9,5%, oko 9,6%, oko 9,7%, oko 9,8%, oko 9,9%, oko 10%, veće od oko 10%, veće od oko 12%, veće od oko 14%, veće od oko 16%, veće od oko 18%, veće od oko 20%, veće od oko 25%, veće od oko 30%, veće od oko 35%, veće od oko 40%, veće od oko 45%, ili veće od oko 50%.U nekim primerima izvođenja, odgovarajuću količinu pogodnog pojačavača permeacije koji je ovde obezbeđen, određuje stučnjak u oblasti.

[0117] Bez namere da bude ograničen na bilo koju određenu teoriju, ovde obezbeđeni pojačavači permeacije mogu da funkcionišu, između ostalog, tako što olakšavaju (npr. povećavaju brzinu ili stepen) transporta MIV-818 kroz gastrointestinalni zid. Uopšteno govoreći, kretanje kroz gastrointestinalni zid može se desiti, npr.: pasivnom difuzijom, kao što je kretanje leka kroz membranu na način koji pokreće samo koncentracioni gradijent; putem difuzije posredovane nosačima, kao što je kretanje leka kroz ćelijske membrane preko specijalizovanog transportnog sistema ugrađenog u ćelijsku membranu; paracelularnom difuzijom, kao što je kretanje leka kroz membranu prolaskom između, a ne kroz dve ćelije; i transcelularnom difuzijom, kao što je kretanje leka kroz ćeliju.

[0118] Pored toga, postoje brojni ćelijski proteini koji mogu da spreče intracelularnu akumulaciju lekova ispumpavanjem lekova koji ulaze u ćeliju. Oni se ponekad nazivaju efluksne pumpe. Jedna takva efluksna pumpa je pumpa koja uključuje p-glikoprotein, koji je prisutan u mnogim različitim tkivima u telu (npr., creva, placentalna membrana, krvno-moždana barijera). Pojačavači permeacije mogu da funkcionišu, između ostalog, tako što olakšavaju bilo koji od

2

prethodno navedenih procesa (kao što je povećanje fluidnosti membrana, otvaranje čvrstih spojeva između ćelija i/ili inhibicija efluksa, između ostalog).

[0119] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 7. i 21. dana u ciklusu od 28 dana.

[0120] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 1. dana u ciklusu od 28 dana.

[0121] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 8. i 21. dana u ciklusu od 28 dana.

[0122] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 1. dana u ciklusu od 21 dana.

[0123] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje 1. dana u ciklusu od 14 dana.

[0124] U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 50 mg, oko 100 mg, oko 200 mg, oko 300 mg, oko 400 mg, oko 500 mg, ili oko 600 mg na dan.

[0125] U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 300 mg na dan.

[0126] U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 200 mg na dan.

[0127] U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje jedanput dnevno.

[0128] U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje dva puta na dan.

[0129] U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 200 mg, oko 150 mg ili oko 100 mg, dva puta na dan. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 200 mg, dva puta na dan. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 150 mg, dva puta na dan. U jednom primeru izvođenja, MIV-818 se primenjuje u količini od oko 100 mg, dva puta na dan.

[0130] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje parenteralno.

[0131] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje u količini od oko 0,5 mg anti-PD1/anti-PDL1 monoklonskog antitela po kilogramu mase subjekta, oko 1 mg/Kg, oko 2 mg/Kg, oko 3 mg/Kg, oko 4 mg/Kg, oko 5 mg/Kg, oko 6 mg/Kg, oko 7 mg/Kg, oko 8 mg/Kg, oko 9 mg/Kg, oko 10 mg/Kg, oko 11 mg/Kg, oko 12 mg/Kg, oko 13 mg/Kg, oko 14 mg/Kg, oko 15 mg/Kg, oko 16 mg/Kg, oko 17 mg/Kg, oko 18 mg/Kg, oko 19 mg/Kg, ili oko 20 mg/Kg.

[0132] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 10 mg/Kg dnevno.

[0133] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1/anti-PDL1 monoklonsko antitelo se primenjuje intravenski u količini od oko 10 mg/Kg dnevno, 7. i 21. dana u ciklusu od 28 dana, ili 8. i 21.

2

dana u ciklusu od 28 dana.

[0134] U jednom primeru izvođenja, anti-PD1 monoklonsko antitelo je pembrolizumab, MK-3475, pidilizumab, nivolumab (BMS-936558, MDX-1106 ili ONO-4538) i primenjuje se kao i.v. infuzija od 30 minuta.

[0135] U jednom primeru izvođenja, anti-PDL1 monoklonsko antitelo je BMS-936559, atezolizumab (MPDL3280A) ili durvalumab (MEDI4736) i primenjuje se kao i.v. infuzija od 30 minuta.

[0136] U jednom primeru izvođenja, 1500 mg durvalumaba (MEDI4736) se primenjuje 1. dana svakog ciklusa lečenja od 28 dana, putem intravenske (IV) infuzije u periodu od 1 sata.

[0137] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje MIV-818 za upotrebu u postupku lečenja tumora jetre, u kome se formulacija koja sadrži MIV-818 oralno primenjuje u vidu pojedinačne ili višestruke dnevne doze.

[0138] U konkretnim primerima izvođenja, formulacija(e) koje sadrže MIV-818 je/se oralno primenjuju jednom dnevno, dva puta dnevno, tri puta dnevno, četiri puta dnevno ili više od četiri puta dnevno.Na primer, u nekim primerima izvođenja, formulacija koja sadrži MIV-818 se primenjuje korišćenjem ciklusa tretmana koji obuhvata primenu oko 200 mg, oko 300 mg, oko 400 mg, oko 500 mg, oko 600 mg, oko 700 mg, oko 800 mg, oko 900 mg ili oko 1000 mg jednom, dva, tri ili četiri puta dnevno tokom 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 ili 30 dana.

[0139] U nekim primerima izvođenja, postupak lečenja obuhvata kontinuiranu primenu niske doze. U nekim primerima izvođenja, formulacija koja sadrži MIV-818 se primenjuje korišćenjem ciklusa tretmana koji obuhvata primenu oko 300 mg MIV-818 dva puta dnevno tokom 7 dana. U nekim primerima izvođenja, formulacija koja sadrži MIV-818 se primenjuje korišćenjem ciklusa tretmana koji obuhvata primenu oko 300 mg MIV-818 dva puta dnevno tokom 14 dana. U nekim primerima izvođenja, formulacija koja sadrži MIV-818 se primenjuje korišćenjem ciklusa tretmana koji obuhvata primenu oko 300 mg MIV-818 tri puta dnevno tokom 7 dana. U nekim primerima izvođenja, formulacija koja sadrži MIV-818 se primenjuje korišćenjem ciklusa tretmana koji obuhvata primenu oko 300 mg MIV-818 tri puta dnevno tokom 14 dana.

[0140] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđeni postupci obuhvataju primenu formulacije koja sadrži MIV-818 koristeći jedan ili više ciklusa koji su ovde navedeni i ponavljajući jedan ili više ciklusa tokom perioda od, npr.1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ili više od 12 meseci.

[0141] U nekim primerima izvođenja, ovde obezbeđeni postupci obuhvataju svakodnevnu primenu kod subjekta, oralne formulacije sa MIV-818 tokom 7 ili više, 8 ili više, 9 ili više, 10 ili više, 11 ili više, 12 ili više, 13 ili više, 14 ili više, 15 ili više, 16 ili više, 17 ili više, 18 ili više, 19 ili više, 20 ili više, ili 21 ili više dana.

[0142] U nekim primerima izvođenja, doza MIV-818 može da varira npr. između 50 mg/m<2>/dan i oko 2,000 mg/m<2>/dan, između oko 100 mg/m<2>/dan i oko 1,000 mg/m<2>/dan, između oko 100 mg/m<2>/dan i oko 500 mg/m<2>/dan, ili između oko 120 mg/m<2>/dan i oko 250 mg/m<2>/dan.U nekim primerima izvođenja, konkretne doze su npr. oko 120 mg/m<2>/dan, oko 140 mg/m<2>/dan, oko 150 mg/m<2>/dan, oko 180 mg/m<2>/dan, oko 200 mg/m<2>/dan, oko 220 mg/m<2>/dan, oko 240 mg/m<2>/dan, oko 250 mg/m<2>/dan, oko 260 mg/m<2>/dan, oko 280 mg/m<2>/dan, oko 300 mg/ m<2>/dan, oko 320 mg/m<2>/dan, oko 350 mg/m<2>/dan, oko 380 mg/m<2>/dan, oko 400 mg/m<2>/dan, oko 450 mg/m<2>/dan, ili oko 500 mg/m<2>/dan.

VI.PRIMERI

Primer 1

In vitro model za testiranje imunskog mikrookruženja tumora

[0143] Kao što je prethodno opisano, MIV-818 je izuzetno nestabilan u plazmi glodara i stoga se ne može koristiti u standardnim mišijim modelima koji odražavaju ulogu imunog sistema u onkogenezi i lečenju kancera.Stoga smo koristili kompleksni model ćelijske kulture imunskog mikrookruženja tumora, BioMAP, koga komercijalno obezbeđuje Eurofins Scientific DiscoverX ( www.discoverx.com ).Dodatna prednost ovog sistema je to što koristi ljudske ćelije, čime se omogućava korišćenje humanih PDL-1 monoklonskih kategorija (kao što je pembrolizumab) koje nisu aktivni kod miša, za razliku od mišijih modela koji zahtevaju da se PDL-1 monoklonska kategorija zameni mišijim ekvivalentom.

[0144] Kako bi se reprodukovale kompleksne signalne mreže koje se manifestuju u višekomponentnom TME, u BioMAP onkološkim sistemima se zajedno gaje primarne imune ćelije sa primarnim ćelijama tkiva, u prisustvu specifične ćelijske linije kancera. Ove ko-kulture se stimulišu submitogenim nivoima liganada za T ćelijski receptor (TCR), kako bi se inicirale, ali ne i maksimalno aktivirale T ćelije i imune ćelije modela regrutovane u intratumorsko mikrookruženje.

[0145] Postoje dva BioMAP Oncology panela koji modeliraju interakcije između imunostromalnog (fibroblasti) i imuno-vaskularnog (endotelnih ćelija) okruženja u kontekstu raka debelog creva (ćelijska linija HT-29 CRC), ili u kontekstu ne-sitnoćelijskog raka pluća (NCI-H1299 NSCLC ćelijska linija). Interakcije između tumorskih ćelija, stimulisanih imunih ćelija (mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC)) i stromalne mreže domaćina (humani neonatalni dermalni fibroblasti (HDFn)) su fiksirane u sistemima Stro Oncology. Paralelno, Vasc sistemi fiksiraju interakcije između tumorskih ćelija, aktiviranih imunih ćelija i vaskularnog tkiva (humane endotelne ćelije umbilikalne vene (HUVEC). Biomarkeri izabrani za Oncology panele daju informacije o aktivnostima u vezi sa inflamacijom, imunskom funkcijom, remodelovanjem tkiva i metastazama u kontekstu tumorskog mikrookruženja domaćina. Paneli Oncology CRC i

1

Oncology NSCLC, zajedno.

[0146] Ljudske primarne ćelije u BioMAP sistemima se koriste u ranom pasažu (pasaž 4 ili ranije) kako bi se smanjilo prilagođavanje uslovima ćelijske kulture i očuvanje fizioloških signalnih odgovora. Sve primarne ćelije su udružene od više donora (n = 3 - 6), komercijalno kupljene i obrađene prema preporukama proizvođača. Ćelijska linija HT-29 CRC i linija NCI-H1299 NSCLC kupljene su od American Type Culture Collection (ATCC). Skraćenice se koriste na sledeći način: humane endotelne ćelije umbilikalne vene (HUVEC), mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC), humani neonatalni dermalni fibroblasti (HDFn) i T ćelijski receptor (TCR). Sistemi u Oncology CRC i NSCLC panelima su stimulisani sub-mitogenim nivoima super antigena (SAg) koji deluju preko TCR tako da rekapituliraju regrutovanje imunih ćelija u tumorsko okruženje in situ. Ovi uslovi stimulacije su optimizovani za aktiviranje ili prajming T ćelija, ali ne i za proliferaciju T ćelija.

[0147] Tipovi ćelija koji se koriste u svakom od CRC sistema su: StroHT29 sistem [HT-29 ćelijska linija kolorektalnog adenokarcinoma HDFn PBMC] i VascHT29 sistem [HT-29 ćelijska linija kolorektalnog adenokarcinoma HUVEC PBMC]. Bez želje za ograničenjem u teoriji, veruje se da je StroHT29 sistem posebno pogodan za modelovanje HCC, s obzirom na značaj stromalnog tkiva u HCC, i zapažanja da su HT-29 su takođe osetljive na MIV-818 sam (oko 0,02 uM) sa uporedivim IC50sa reprezentativnih HCC ćelijskih linija (npr HepG2 oko 0,02uM).

[0148] Sve primarne humane ćelije su dobijene po protokolima koje su pregledali institucionalni odbori Institutional Review Board(s) (IRB) koji rade u skladu sa zahtevima EPA uredbe 40 CFR 26 i HHS uredbe 45 CFR 46 američkog Odeljenja za zdravstvo i ljudske resurse za zaštitu humanih istraživačkih subjekata.

[0149] Na pratećim crtežima, biomarkeri s leva na desno su:

2

[0150] U svakom od BioMAP očitavanja na slikama 1-7, Y osa je Log odnos koji se proteže od -1,0 do 1,0. MIV-818 je kodiran kao MV087313.

[0151] Adherentni tipovi ćelija se gaje u poločama sa 96 bunarčića do konfluencije, a zatim se dodaju PBMC. Test agensi pripremljeni bilo u DMSO (mali molekuli; finalna koncentracija ≤ 0,1%) ili PBS (biološki lekovi) se dodaju u navedenim koncentracijama 1 sat pre stimulacije i ostaju u kulturi 48 sati. Svaka ploča sadrži kontrole leka (npr. kontrolni test agens starijeg tipa, kolhicin), negativne kontrole (npr. nestimulisano stanje) i kontrole vehikuluma (npr. 0,1% DMSO).Direktni ELISA test se koristi za merenje nivoa biomarkera za ciljne molekule asocirane sa ćelijama i ćelijskim membranama. Solubilni faktori iz supernatanta se kvantifikuju pomoću HTRF<®>detekcije, multipleks imunoeseja na bazi perli i ELISA testa sa hvatanjem. Efekti test agenasa na vijabilnost ćelija (citotoksičnost) se mere sulforodaminom B (SRB) za adherentne ćelije (48 sati), i redukcijom sa alamarBlue<®>za ćelije u suspenziji (42 sata) u naznačenim vremenskim tačkama. Svi test agensi su testirani u standardizovanim formatima u 4 koncentracije, u triplikatu. Bunarčići stimulisani kolhicinom, bunarčići tretirani kontrolnim vehikulumom i bunarčići bez stimulacije uključeni su kao kontrole na svakoj ploči (n = 3 - 8). Kriterijumi za prihvatanje podataka zasnivaju se na performansama ploča (% CV za kontrole) i performansama pozitivnih kontrola za različite testove, uz poređenje sa ranijim kontrolama. Analiza podataka.

[0152] Merenja biomarkera su profilisana u triplikatu za uzorke tretirane test agensima, i podeljena sa prosekom za uzorke kontrole vehikuluma (najmanje 6 kontrola vehikuluma sa iste ploče) kako bi se generisao odnos koji je zatim log10 transformisan. Okviri za predikciju značajnosti izračunavaju se pomoću ranijih podataka za kontrole vehikuluma sa intervalom pouzdanosti od 95%. Statističke p-vrednosti se izračunavaju iz statističkih podataka neuparenog t-testa za neobrađene vrednosti testova u poređenju sa kontrolama vehikuluma.

[0153] Anotacija profila -Aktivnosti biomarkera se notiraju kada je najmanje jedna koncentracija test agensa izvan okvira značajnosti, gde je veličina efekta > 20% u odnosu na kontrolu vehikuluma (|log10 odnos| > 0,1) i p-vrednost < 0,01. Citotoksični uslovi se javljaju kada ukupni nivoi proteina opadnu za više od 50% (log10 odnos SRB < -0,3) i označeni su tankom crnom strelicom iznad X-ose. Koncentracije test agenasa sa detektovanom širokom citotoksičnošću su isključene iz anotacije aktivnosti biomarkera i nizvodnih referentnih analiza. Citotoksične strelice zahtevaju samo jednu koncentraciju da bi zadovoljile naznačeni prag log10 odnosa za anotaciju profila i ne uključuju zahtev p-vrednosti.

[0154] Analiza superponiranja - Profil za jednu koncentraciju test agensa se poredi sa profilom za označeno standardno jedinjenje iz liste standarda za panel BioMAP Oncology ili može da se superponira neko drugo jedinjenje sa aktuelnim projektom klijenta ili prethodnim projektom. Zajednička očitavanja biomarkera se obeležavaju kada je očitavanje za oba profila izvan okvira značajnosti, pri čemu je veličina efekta > 20% (|log10 odnos| > 0,1) u istom smeru. Diferencirajući biomarkeri se obeležavaju kada jedan profil ima očitavanje izvan okvira značajnosti, pri čemu je veličina efekta > 20% (|log10 odnos| > 0,1), a očitavanje za drugi profil je ili unutar okvira, ili u suprotnom smeru.

Analiza

[0155] Ako se sada pogleda slika 1, biće očigledno da MIV-818 kada je primenjen sam na dva panela, pokazuje prepoznatljiv obrazac za različite imunološke markere, pokazuje dobar dozni odgovor za specifične markere koji ukazuju na stimulaciju imunog sistema koja može da dovede do anti-tumorskog odgovora.Upotrebljene doze MIV-818 odgovaraju koncentracijama od 1uM, 200 nM, 40 nM i 8 nM.MIV-818 tretman vaskularnih ili stromalnih modela HT-29 i mononuklearnih ćelija periferne krvi (PBMC) dovodi do višestrukih promena sekretovanih proteina, što ukazuje na promene u različitim putevima:

4

• Aktivnosti povezane sa imunim sistemom: smanjen sIL-6; povećan sIL-17A, sIFNγ • Aktivnosti povezane sa inflamacijom: smanjen VCAM-1, IP-10

• Aktivnosti remodelovanja matriksa: smanjen kolagen III

Aktivnosti povezane sa angiogenezom: smanjen uPAR

[0156] Ovaj nalaz je iznenađujući i uzbudljiv, jer je MIV-818 prvobitno razvijen kao citotoksični lek sa direktnom aktivnošću na ćelije jetre. Ovaj nalaz se otvara mogućnosti za kombinovanje MIV-818 sa specifičnom klasom imunoonkoloških agenasa, naime, sa monoklonskim antitelima koja blokiraju vezivanje PD-L1 i/ili PD-L2 za PD-1, kao što je prikazano u sledećim primerima.

[0157] Kao poređenje, slika 7 prikazuje odgovarajući test sa samim pembrolizumabom na dva panela, u dozama koje odgovaraju koncentraciji od 50000 ng/ml, 10000 ng/ml, 2 000 ng/ml i 400 ng/ml. Naročito treba zapaziti da se obrazac odgovora (pozitivan, negativan ili bez efekta), kao i stepen doznog odgovore za pembrolizumab značajno razlikuje od slike 1.

[0158] Sl. 2 je BioMAP očitavanje kombinacije predviđene pronalaskom - stok rastvora koji prezentuje 1000 nM MIV-818 i 50 ug/ml pembrolizumaba serijski razređenog 1X, (1000 nM MIV-818 i 50 ug/ml pembrolizumaba)

0,2X, (200 nM MIV-818 i 10 ug/ml pembrolizumaba)

0,04X, (40 nM MIV-818 i 2ug/ml pembrolizumaba)

0,008X, 8nM MIV-818 i 0,4 ug/pembrolizumaba)

[0159] Kombinacija MIV-818 i pembrolizumaba dovodi do poboljšanih promena u opsegu citokina i sekretovanih proteina, osim efekata pojedinačnih agenasa.

[0160] Ključne aktivnosti kombinacije uključuju sledeće:

• Povećane aktivnosti povezane sa imunim sistemom: povećani sIL-10, sIL-17A, sGranB, sIL-2, sIFNγ; moduliran sIL-6

• Aktivnosti povezane sa inflamacijom: smanjen VCAM-1, IP-10; povećan sTNFα [0161] Sl. 3 je BioMAP očitavanje kombinacije 1000nM MIV-818/50 ug pembrolizumaba, superponirane preko odgovarajućih pojedinačnih agenasa.Treba naročito uočiti da postoji 14 diferencirajućih aktivnosti koje su označene u sledećim sistemima: StroHT29 (VCAM-1, kolagen III, IP-10, sIFNγ, sIL-17A, sIL-2, sIL-6, sTNFα) i VascHT29 (uPAR, IP-10, sIL-10, sIL-2, sIL-6, sTNFα).

[0162] Sl. 4 je BioMAP očitavanje kombinacije 200 nM MIV-818/10 ug/ml pembrolizumaba, superponirano na odgovarajuće pojedinačne agense; Postoji 12 diferencirajućih aktivnosti koje su označene unutar sledećih sistema: StroHT29 (VCAM-1, IP-10, sGranB, sIL-6, sTNFα, sVEGF) i VascHT29 (uPAR, IP-10 ,sIL-17A, sIL-2, sIL-6, sTNFα).

[0163] Sl. 5 je BioMAP očitavanje kombinacije 40 nM MIV-818/2 ug/ml pembrolizumaba, superponirano na odgovarajuće pojedinačne agense; Postoji 10 aktivnosti za diferencijaciju koje su označene unutar sledećih sistema: StroHT29 (sGranB, sIFNγ, sIL-10, sIL-17A, sIL-6, sTNFα) i VascHT29 (uPAR, sIL-2, sIL-6, sTNFα).

[0164] Sl. 6 je BioMAP očitavanje kombinacije 8 nM MIV-818/0,4 ug/ml pembrolizumaba, superponirano na odgovarajuće pojedinačne agense; Postoji 7 aktivnosti za diferencijaciju, koje su označene unutar sledećih sistema: StroHT29 (sIFNγ, sIL-17A, sIL-6, sVEGF) i VascHT29 (uPAR, sIL-10, sTNFα).

[0165] Slike 2-6 moguće je bolje razumeti ako se grafički predstave individualni markeri za diferencijaciju. Na primer, MIV-818 poboljšava imunostimulišući citokin IFN-gama u kombinaciji sa pembrolizumabom, kao što je prikazano na sl. 8, koja je grafik koji pokazuje odnos između doze i odnosa komponenti MIV-818 i pembrolizumaba na stromalnom IFN gama u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja. Interferon gama (IFNγ) je citokin uključen u urođeni i adaptivni imuni odgovor na infekcije. Solubilni IFNγ (sIFNγ) pokazuje anti- i protumorigene aktivnosti u zavisnosti od konteksta, i kategoriše se kao aktivnost povezana sa imunim sistemom u StroHT29 sistemu koji modelira interakciju između imuno-stromalne (fibroblasti) okoline u kontekstu ćelijske linije raka debelog creva (CRC HT29).

[0166] Kombinacija MIV-818 i pembrolizumab pokazuje jasan dozno zavisno poboljšan sIFNγ u stromalnom HT-29 sistemu, u poređenju sa pojedinačnim agensima, što ukazuje na indukciju pojačanog anti-tumorskog imunog odgovora. Slično tome, slika 9 prikazuje pojačan antitumorski imuni odgovor za vaskularni IFN gama.

[0167] Sl. 10 je grafik koji pokazuje odnos između doze i odnosa komponenti MIV-818 i pembrolizumaba na stromalni IL17A u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja; Interleukin 17A (IL-17A) je proinflamatorni citokin koga luči podskup aktiviranih T ćelija (Th17 ćelija), γδT ćelije i neutrofili. IL-17A pokazuje i pro-tumorske funkcije (angiogeneza i metastaza) i antitumorske funkcije (indukcija citolitičkih odgovora T ćelija).Solubilni IL-17A (sIL-17A) se kategoriše kao aktivnost povezana sa imunim sistemom u StroHT29 sistemu koji modelira interakciju između imuno-stromalne (fibroblasti) okoline u kontekstu ćelijske linije raka debelog creva (CRC HT29).

[0168] Kombinacija MIV-818 i pembrolizumab pokazuje jasan dozno zavisno poboljšan IL-17A u stromalnom HT-29 sistemu, u poređenju sa pojedinačnim agensima, što ukazuje na indukciju pojačanog anti-tumorskog imunog odgovora.Nasuprot tome, sl.11 pokazuje da na vaskularni IL-17A kombinacija ne utiče suštinski, što je u skladu sa hipotezom da je Stro HT29 panel od posebnog značaja za HCC, ali, što je važno, nije uočen dokaz za antagonizam.

[0169] Sl. 12 je grafik koji prikazuje vezu između doze i odnosa komponenti MIV-818 i pembrolizumab na stromalnom TNF alfa u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja. Faktor tumorske nekroze alfa (sTNFα) je proinflamatorni citokin koga proizvode makrofagi, monociti, neutrofili, T-ćelije i NK ćelije koje igraju glavnu ulogu u bolestima koje uključuju sistemsku inflamaciju. Kod kancera, TNFα ima plejotropne efekte koji su zavisni od konteksta i uključuju pospešivanje rasta, preživljavanje, proliferaciju, angiogenezu i smrt tumorskih ćelija. Solubilni TNFα (sTNFα) se kategoriše kao aktivnost povezana sa inflamacijom u StroHT29 sistemu koji modelira interakciju između imuno-stromalne (fibroblasti) okoline u kontekstu ćelijske linije raka debelog creva (CRC HT29).

[0170] Kombinacija MIV-818 i pembrolizumab pokazuje jasan dozno zavisno poboljšan TNFα u stromalnom HT-29 sistemu, u poređenju sa pembrolizumabom pojedinačno, što ukazuje na indukciju pojačanog anti-tumorskog imunog odgovora. Nasuprot tome, sl.13 ukazuje na to da na vaskularni TNF alfa kombinacija ne utiče značajno, ali, što je važno, nije uočen dokaz za antagonizam.

[0171] Sl. 14 je grafik koji prikazuje vezu između doze i odnosa komponenti MIV-818 i pembrolizumaba na stromalnom IL-6 u modelu ćelijske kulture tumorskog mikrookruženja; Dodavanje MIV-818 na pembrolizumab rezultira smanjenjem tumora promovisanjem citokina IL-6 za razliku od povećanja posmatranog samo kod pembrolizumaba. Interleukin 6 (IL-6) je izlučeni proinflamatorni citokin i akutni fazni reaktant koji se proizvodi fibroblastima, endotelnim ćelijama, T ćelijama, B ćelijama i monocitima.U kolorektalnom kanceru IL-6 promoviše proliferaciju i suprimira apoptozu tumorskih ćelija. Solubilni IL-6 (sIL-6) se kategoriše kao aktivnost povezana sa imunim sistemom u StroHT29 sistemu modeliranja interakcije između imuno-stromalnog (fibroblasti) okruženja u kontekstu ćelijske linije raka debelog creva (CRC HT29).

[0172] MIV-818 inhibira sIL-6 u stromalnom HT-29 sistemu sam i u kombinaciji sa pembrolizumabom, za razliku od samog pembrolizumaba, što dovodi do skromnog poboljšanja sIL-6. Sl.15 ukazuje na to da na vaskularni IL6 kombinacija u ovom sistemu ne utiče značajno.

Primer 2

In vitro stimulacija ekspresije IL-2 u imunološki stimulisanim kulturama mononuklearnih ćelija periferne krvi (PBMC)

[0173] Ključni citokin za proliferaciju T-ćelija i ubijanje tumorskih ćelija tokom imunog odgovora je IL-2. Uticaj različitih agenasa na proizvodnju imuno-citokina može da se testira u kulturama imunih ćelija (PBMC) koje su stimulisane super-antigenima, npr. stafilokokusnim enterotoksinom B (SEB). Primetili smo, iznenađujuće s obzirom na poznati mehanizam delovanja, da MIV-818 indukuje ekspresija IL-2 u ovim SEB-stimulisanim kulturama na dozno zavisni način, i da dodavanje anti-PD1 inhibitora kontrolne tačke, pembrolizumaba, poboljšava ekspresiju IL-2. Ovo sugeriše da bi kombinacija MIV-818 sa anti-PD(L)1 terapijom imala povećanu terapeutsku efikasnost prilikom lečenja raka.

Metod

[0174] Humane PBMC su izolovane od tri zdrava donora, izbrojane i zasađene pri ravnomernoj gustini. Ćelije su inkubirane sa MIV-818 samim ili u kombinaciji sa pembrolizaumabom, pri šest koncentracija tokom 1 sata pre stimulacije. Uključene su odgovarajuće kontrole: nestimulisane ćelije, ćelije stimulisane u prisustvu samo medijuma (pozitivna kontrola), ćelije stimulisane u prisustvu vehikuluma i ćelija stimulisane u prisustvu referentnog jedinjenja u jednoj koncentraciji. Ćelije su zatim inkubirani pet dana sa enterotoksinom B stafilokokusa (SEB) u jednoj koncentraciji. Proliferacija ćelija je kvantifikovana inkorporacijom timidina sa tricijumom.Supernatanti kulture su sakupljeni posle pet dana i čuvani do analize citokina IL-2 pomoću Luminex<®>testa.Kulture za svaki od uslova su uspostavljene u triplikatu. Multipleks očitavanja su izvedena po jednom u svakom bunarčiću sa kulturom.

[0175] Sl. 16 je grafik koji pokazuje povećanje citokina IL-2, kritično za pokretanje antitumorskog odgovora T-ćelija, u PBMC kulturi stimulisanoj entero-toksinom B stafilokokusa. Ekspresija IL-2 se indukuje samim MIV-818, a sa dodatkom pembrolizumaba uočava se pojačana ekspresija IL-2.

Primer 3

PBMC-posredovano ubijanje tumorskih ćelija

[0176] Kao model za ubijanje tumorskih ćelija od strane imunog sistema, poslužio je in vitro model u kome se koriste izolovane mononuklearne ćelije periferne krvi (uglavnom T-ćelije) u kojima se T-ćelije aktiviraju tako što anti-CD3 antitelo stimuliše T-ćelijski receptor (TCR). T-ćelije zatim vrše ubijanje ćelija i efekat dodavanja jedinjenja ovoj ko-kulturi može da se meri. Uočeno je da MIV-818 poboljšava ubijanje kancerskih ćelija posredovano PBMC ćelijama, što ukazuje na to da MIV-818 indukuje efekat koji deluje sinergistički sa aktivnošću inhibitora kontrolne tačke (pembrolizumab).

Metod

[0177] Korišćena je puna krv tri zdrava donora. PBMC su izolovani preko gustine gradijenta i broje pre dodavanja na NucLight Red označene ciljeve tumora u definisanom odnosu E: T u prisustvu anti-CD3 stimulacije. Ko-kulture tumorskih ćelija - PBMC su inkubirane sa testiranim jedinjenjima u osam koncentracija. Uključene su odgovarajuće kontrole: samo PBMC, samo tumorske ćelije, tumorske ćelije/PBMC u prisustvu referentnog jedinjenja u jednoj koncentraciji. Svi testirani uslovi su takođe primenjeni na tumorske ćelije u odsustvu stimulisanih PBMC u cilju detekcije direktne citotoksičnosti prema tumoru, povezane sa jedinjenjem. Ubijanje tumora je procenjeno brojanjem vijabilnih NucLight pozitivnih tumorskih ćelija tokom vremena. Pored toga, boja Caspase 3/7 je korišćena za identifikaciju apoptotskih tumorskih ćelija. Kulture su analizirane pomoću IncuCyte ZOOM mašine koja omogućava kvantitativno fluorescentno snimanje živih ćelija u realnom vremenu. Ko-kulture su snimane tokom 68 sati. Kulture za svaki od uslova su uspostavljene u triplikatu. Supernatanti ćelijske kulture su čuvani za opcionu analizu citokina.

[0178] Slika 17 je grafik koji prikazuje aktivnost ubijanja tumorskih ćelija posredovanog sa PBMC u prisustvu MIV-818 i pembrolizumaba (broj apoptotskih SK-OV-3).

[0179] PBMC su izolovane od 3 zdrava donora i dodate u ko-kulture sa anti-CD3 stimulacijom i NucLight Red obeleženim SK-OV-3 tumorskim ćelijama. Kulture su inkubirane u triplikatima sa 5000 nM MIV-818 ili kombinacijom MIV-818 pembrolizumab, pored kontrole vehikuluma. Apoptotska smrt SK-OV-3 ćelija je praćena u sistemu ko-kulture snimanjem tokom 68 sati pomoću softvera IncuCyte ZOOM. Podaci su prikazani kao srednja vrednost /- SEM (tri donora).

[0180] Predviđeno je da prethodno opisani primeri izvođenja budu samo egzemplari.

Claims (12)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule I:

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju raka jetre kod sisara, naznačeno istovremenim ili sekvencijalnim lečenjem sisara monoklonskim antitelom koje blokira vezivanje PD-L1 i/ili PD-L2 za PD-1.
2. 2. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je monoklonsko antitelo anti-PD1 monoklonsko antitelo koje je humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo.
3. 3. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 2, pri čemu je humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo pembrolizumab, pidilizumab ili nivolumab.
4. 4. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 3, pri čemu je humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo pembrolizumab.
5. 5. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 3, pri čemu je humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo nivolumab.
6. 6. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je monoklonsko antitelo anti-PDL1 monoklonsko antitelo koje je humanizovano monoklonsko IgG1 antitelo.
7. 7. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 6, pri čemu je IgG1 antitelo atezolizumab ili durvalumab.
8. 8. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 7, pri čemu je IgG1 antitelo durvalumab
9. 9. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, gde je rak hepatocelularni karcinom.
10. 10. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu se jedinjenje formule I primenjuje oralno i monoklonsko antitelo se primenjuje parenteralno.
11. 11. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje najmanje 90% ee dijastereoizomera:

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
12. 12. Jedinjenje formule I: 4

    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju sisara pogođenog primarnim ili sekundarnim tumorom jetre, putem ciklične primene kod sisara terapeutski efikasne količine jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i terapeutski efikasne količine monoklonskog antitela koje blokira vezivanje PD-L1 ili P-L2 za PD1, pri čemu se jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so primenjuje oralno, a antitelo se primenjuje parenteralno.