RS66442B1 - Dvociklusna kaseta za sintezu 18f-obeleženih jedinjenja - Google Patents

Description

Opis

Tehnička oblast pronalaska

Predmetni pronalazak se odnosi na uređaje i postupke za automatizovanu sintezu [<18>F]-obeleženih jedinjenja, posebno onih pogodnih za upotrebu kao in vivo agensa za dijagnostičko slikanje za pozitronsku emisionu tomografiju (PET). Posebno je fokus predmetnog pronalaska na automatizovanoj sintezi više od jedne šarže [<18>F]-obeleženog jedinjenja upotrebom samo jedne kasete za jednokratnu upotrebu.

Opis povezane predmetne oblasti

Radioaktivno obeležena jedinjenja za upotrebu kao in vivo agensa za dijagnostičko slikanje trenutno se pripremaju pomoću automatskog aparata za sintezu (alternativno „aparat za sintezu radioaktivnih jedinjenja“). Takvi aparati za automatizovanu sintezu su komercijalno dostupni od niza dobavljača, uključujući: GE Healthcare; CTI Inc.; Ion Beam Applications S.A. (Chemin du Cyclotron 3, B-1348 Louvain-La-Neuve, Belgija); Raytest (Nemačka) i Bioscan (SAD).

Radiohemija se dešava u „kaseti“ ili „patroni“ dizajniranoj tako da može da stane uz mogućnost uklanjanja i zamene na aparat, na takav način da mehaničko kretanje pokretnih delova aparata kontroliše rad kasete. Pogodne kasete mogu da budu obezbeđene kao setovi delova koji se sklapaju na aparatu u određenom broju koraka ili mogu da budu obezbeđeni kao jedan deo koji se pričvršćuje u jednom koraku, time smanjujući rizik od ljudske greške. Raspored sa jednim delom generalno je kaseta za jednokratnu upotrebu koja sadrži sve reagense, reakcione sudove i aparate neophodne za sprovođenje pripremanja date šarže radiofarmaceutika. US2013/0144052A1 (ABX Advanced Biochemical Compounds GMBH) i US2012/0283490A1 (Siemens Medical Solutions USA Inc.) otkrivaju uređaje i sisteme za sintezu radioaktivno obeleženih jedinjenja koji sadrže više elemenata za jednokratnu upotrebu.

Komercijalno dostupna GE Healthcare FASTlab<™>kaseta je primer tipa jednodelne kasete za jednokratnu upotrebu sa unapred napunjenim reagensima koja sadrži linearni niz ventila, svaki povezan na ulaz na koji reagensi ili bočice mogu da se pričvrste. Svaki ventil ima muško-ženski zglob koji se uklapa sa odgovarajućom pokretnom rukom aparata za automatizovanu sintezu. Spoljašnja rotacija ruke tako kontroliše otvaranje ili zatvaranje ventila kada je kaseta pričvršćena na aparat. Dodatni pokretni delovi aparata su dizajnirani da se zakače na vrhove klipova špriceva i tako podižu ili spuštaju cev šprica. FASTlab<™>kaseta ima 25 identičnih 3-smernih ventila u linearnom nizu, primeri njih su prikazani na Slikama 1 i 2. Slika 1 ilustruje komercijalno dostupnu FDG fosfat

FASTlab<™>kasetu, a Slika 2 komercijalno dostupnu FDG citrat FASTlab<™>kasetu.

Sinteza [<18>F]fluorodeoksiglukoze ([<18>F]FDG) na kasetama sa Slika 1 i 2 sprovodi se nukleofilnom fluorinacijom sa [<18>F]fluoridom proizvedenim

putem<18>O(p,n)<18>F<->reakcije. [<18>F]fluorid proizveden na takav način ulazi u kasetu na poziciji 6 i putuje do kolone za ekstrakciju čvrste faze (SPE) kvaternarnog metil amonijuma za razmenu anjona (QMA) smeštene na poziciji 4 putem cevi na poziciji 5. [<18>F]fluorid se zadržava reakcijom razmene jona i<18>O-vodi se omogućuje da teče kroz zajednički put kasete, da bi se izdvojila na poziciji 1. [<18>F]fluorid zadržan na QMA-u zatim se eluira sa rastvorom eluenta (rastvor acetonitrila Kryptofix<™>222 i kalijum karbonata na poziciji 2), povlači u špric na poziciji 3 i u reakcioni sud (povezan sa tri cevi, po jednom na svaku od pozicija 7, 8 i 25). Voda se isparava i prekursor manoza triflata (iz pozicije 12) se dodaje u reakcioni sud. Zatim se [<18>F]-obeleženi manoza triflat ([<18>F]fluorotetraacetilglukoza, FTAG) hvata i tako odvaja od [<18>F]fluorida na okolišnoj tC18 SPE koloni na poziciji 18 putem cevi na poziciji 17 da bi prošao hidrolizu sa NaOH (iz bočice na poziciji 14) da bi se uklonile zaštitne grupe acetila. Dobijeni hidrolizovani bazni rastvor se zatim neutralizuje u špricu smeštenom na poziciji 24 sa fosfornom kiselinom u slučaju konfiguracije sa fosfatom (Slika 1) ili hlorovodoničnom kiselinom prisutnom u citratnom puferu u slučaju konfiguracije sa citratom (Slika 2). Uklanjanje potencijalnog rezidualnog [<18>F]fluorida dešava se na SPE koloni sa aluminijum oksidom na poziciji 20 putem cevi na poziciji 21 i uklanjanjem slabo hidrofilnih nečistoća na HLB SPE koloni (za fosfatnu kasetu sa Slike 1) ili tC18 SPE koloni (za citratnu kasetu sa Slike 2) na poziciji 22 putem cevi na poziciji 23. Konačni pročišćeni rastvor [<18>F]FDG se premešta u bočicu za sakupljanje putem duge cevi povezane na poziciji 19.

2 pozicije na FASTlab<™>kaseti su slobodne u slučaju svake od poznatih [<18>F]FDG kaseta ilustrovanih na Slikama 1 i 2, tj. pozicije 9 i 10. Na ovim pozicijama su na ventile postavljeni poklopci. WO2013/053940A1 (GE Healthcare Limited) i WO2013/053941A1 (GE Healthcare Limited) otkrivaju poboljšane postupke radioaktivne fluorinacije pogodne za automatizaciju upotrebom takvih kaseta za jednokratnu upotrebu.

Tipična lokacija za proizvodnju [<18>F]FDG proizvodi minimalno 2 šarže [<18>F]FDG dnevno. Međutim, zbog rezidualne aktivnosti na FASTlab<™>kaseti, liniji za prenos i senci od boce za otpad nakon dovršavanja šarže, nemoguće je iz bezbednosnih razloga sprovoditi uzastopne cikluse gore opisanog procesa na istom aparatu. Ovo, u kombinaciji sa relativno velikom veličinom

FASTlab<™>aparata, znači da je, kako bi se proizvela druga šarža [<18>F]FDG u istom danu, upotrebom ovog procesa, neophodno imati drugi aparat u drugoj vrućoj ćeliji.

Bilo bi poželjno imati sredstva za proizvodnju više od jedne šarže [<18>F]FDG upotrebom FASTlab<™>aparata u istom danu i u samo jednoj vrućoj ćeliji. Za obe gore opisane komercijalno dostupne FASTlab<™>[<18>F]FDG kasete, 23 od ukupnih 25 pozicija se koristi. Stoga nije moguće smestiti sve dvostruke komponente za drugu šaržu na istu kasetu.

Sažetak pronalaska

U jednom aspektu predmetni pronalazak obezbeđuje kasetu (1) za sintezu mnoštva šarži [<18>F]-obeleženog trejsera pozitronske emisione tomografije (PET) pri čemu navedena kaseta sadrži:

(i) kolonu za razmenu anjona (3, 4) za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(ii) reakcioni sud (5);

(iii) bočicu (2) koja sadrži alikvot eluenta za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(iv) bočicu (6) koja sadrži alikvot prekursorskog jedinjenja za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(v) bočice za reagense (7, 8, 9) pri čemu svaka bočica za reagens sadrži alikvot reagensa za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(vi) opciono kolonu za ekstrakciju čvrste faze (SPE) za uklanjanje zaštite (10) i/ili jednu ili više SPE kolona za pročišćenje (11, 12); i,

(vii) sredstva za čišćenje navedenog reakcionog suda i navedene SPE kolone.

pri čemu su komponente (i)–(vii) kasete selektivno tečno povezane duž linearnog puta za tečnosti napravljenog od nesavitljivog polimernog materijala farmaceutske kvalitete koji je otporan na radijaciju.

U drugom aspektu predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za sintezu mnoštva šarži [<18>F]-obeleženog PET trejsera pri čemu navedeni postupak sadrži:

(a) hvatanje prvog alikvota [<18>F]fluorida na prvu kolonu za razmenu anjona (3);

(b) obezbeđivanje prvog alikvota prekursorskog jedinjenja u reakcionom sudu (5);

(c) propuštanje prvog alikvota eluenta kroz navedenu prvu kolonu za razmenu anjona (3) da bi se eluirao prvi alikvot [<18>F]fluorida u navedeni reakcioni sud (5);

(d) zagrevanje reakcionog suda (5) tokom unapred određenog vremena da bi se dobio [<18>F]-obeleženi PET trejser;

(e) opciono uklanjanje zaštite na navedenom sirovom [<18>F]-obeleženom PET trejseru na SPE koloni (10);

(f) opciono pročišćavanje navedenog sirovog [<18>F]-obeleženog PET trejsera na jednoj ili više SPE kolona (11, 12);

(g) čišćenje navedenog reakcionog suda (5) i navedenih SPE kolona (10, 11, 12);

(h) ponavljanje koraka (a)–(g) jednom ili više puta, svakoga puta koristeći sledeći alikvot [<18>F]fluorida, sledeću kolonu za razmenu anjona (4) i sledeći alikvot [<18>F]FDG prekursorskog jedinjenja;

pri čemu se navedeni postupak sprovodi na jednoj kaseti (1).

Ovde je opisan neprelazni medijum za skladištenje koji sadrži računarski čitljiv programski kod, pri čemu izvršavanje računarski čitljivog programskog koda uzrokuje da procesor sprovede korake postupka pronalaska kako su ovde prethodno definisani.

Predmetni pronalazak omogućuje jednom uređaju za sintezu u jednoj vrućoj ćeliji da uzastopno proizvodi više šarži [<18>F]-obeleženog PET trejsera. Ovde je pokazano da su ostvareni dobri prinosi za svaku od dve uzastopne [<18>F]FDG šarže kao i dobro hvatanje i eluiranje dolazeće aktivnosti. Analize za kontrolu kvalitete dve šarže opisane u primeru 1 navedenom u nastavku pokazuju da svaka šarža ispunjava zahteve farmakopeje za [<18>F]FDG.

Kratak opis Slika

Slika 1 i Slika 2 ilustruju primere poznatih kaseta za proizvodnju jedne šarže po kaseti [<18>F]-obeleženog jedinjenja.

Slika 3 ilustruje kasetu pogodnu za sprovođenje dva [<18>F]FDG ciklusa na FASTlab<™>aparatu.

Slika 4 ilustruje tok rada za proizvodnju dve [<18>F]FDG šarže na FASTlab<™>aparatu upotrebom jedne kasete kao što je ona ilustrovana na Slici 3.

Detaljan opis poželjnih otelotvorenja

Pod izrazom „kaseta“ podrazumeva se deo aparata za jednokratnu upotrebu dizajniran da uz mogućnost uklanjanja i zamene stane na aparat za automatizovanu sintezu, na takav način da mehaničko kretanje pokretnih delova aparata za sintezu kontroliše rad kasete iz spoljašnjosti kasete, tj. eksterno.

Izraz „jednokratna upotreba“ kako se koristi u kontekstu kasete predmetnog otelotvorenja znači da je kaseta namenjena da se upotrebi jednom, pre nego se odloži, za proizvodnju mnoštva šarži [<18>F]-obeleženog PET trejsera. Pogodne kasete sadrže linearan niz ventila, svaki povezan na ulaz na koji reagensi ili bočice mogu da se pričvrste ili putem probijanja inverzne bočice zaptivene septumom iglom ili uparivanja zglobova nepropusno za gasove. U jednom otelotvorenju svaki ventil je 3-smerni ventil. U jednom otelotvorenju, svaki ventil je zaustavni ventil koji sadrži zaustavni čep koji može da se rotira. Svaki ventil ima muško-ženski zglob koji se uklapa sa odgovarajućom pokretnom rukom aparata za automatizovanu sintezu. Spoljašnja rotacija ruke tako kontroliše otvaranje ili zatvaranje ventila kada je kaseta pričvršćena na automatski aparat za sintezu. Dodatni pokretni delovi aparata su dizajnirani da se zakače na vrhove klipova špriceva i tako podižu ili spuštaju cevi špriceva. Kaseta je svestrana, obično ima više pozicija u kojima se reagensi mogu pričvrstiti i više njih pogodnih za pričvršćivanje bočica špriceva reagensa ili kolona za hromatografiju. Kaseta uvek sadrži reakcioni sud, generalno konfigurisan tako da su 3 ili više ulaza kasete povezana sa njim da bi se omogućilo prenošenje reagensa ili rastvarača iz različitih ulaza na kaseti. Kasete moraju da budu dizajnirane da budu pogodne za proizvodnju radiofarmaceutika i stoga proizvedene od materijala koji su farmaceutske kvalitete kao i otporni na radiolizu. U jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska kaseta za jednokratnu upotrebu je FASTlab<™>kaseta, tj. kaseta koja je pogodna za upotrebu sa FASTlab<™>aparatom za automatizovanu sintezu.

U jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska razni elementi kasete su selektivno tečno povezani. Izraz „selektivno tečno povezani“ znači da je moguće odabrati da li tečnost može da prođe do i/ili od jedne karakteristike do druge karakteristike pronalaska ili ne, npr. upotrebom pogodnog ventila. U jednom otelotvorenju pronalaska, pogodni ventil je 3-smerni ventil koji ima tri ulaza i sredstva za dovođenje bilo koja dva od tri povezana ulaza u međusobnu tečnu komunikaciju uz istovremeno tečno izolovanje trećeg ulaza. U drugom otelotvorenju pronalaska, pogodan ventil je zaustavni ventil koji sadrži zaustavni čep koji može da se rotira. U jednom otelotvorenju, komponente kasete su selektivno povezane duž zajedničkog puta. Izraz „zajednički put“ treba da se razume kao put za tečnosti na koji su drugi komponente sistema ili kasete predmetnog pronalaska tečno povezane. U jednom otelotvorenju, zajednički put je linearni put za tečnosti. U jednom otelotvorenju, zajednički put je napravljen od nesavitljivog polimernog materijala farmaceutske kvalitete koji je otporan na radijaciju. Neograničavajući primeri takvih pogodnih materijala uključuju polipropilen, polietilen, polisulfon i Ultem<®>. U jednom otelotvorenju, navedeni zajednički put je napravljen od polipropilena ili polietilena.

Pod izrazom „aparat za automatizovanu sintezu“ misli se na automatizovani modul zasnovan na principu jediničnih operacija kako su opisali Satyamurthy i sar. (1999. Clin. Positr. Imag.; 2(5): 233–253). Izraz „jedinične operacije“ znači da se kompleksni procesi svode na seriju jednostavnih operacija ili reakcija, koje mogu da se primene na niz materijala. Takvi aparati za automatizovanu sintezu su poželjni za postupak predmetnog pronalaska posebno kada je poželjno radiofarmaceutsko jedinjenje. Komercijalno su dostupni od niza dobavljača (Satyamurthy i sar., u prethodnom), uključujući: GE Healthcare; CTI Inc; Ion Beam Applications S.A. (Chemin du Cyclotron 3, B-1348 Louvain-La-Neuve, Belgija); Raytest (Nemačka) i Bioscan (SAD). Aparati za automatizovanu sintezu su dizajnirani za upotrebu u pogodno konfigurisanoj ćeliji za radioaktivne radove ili „vrućoj ćeliji“, koja obezbeđuje pogodnu zaštitu od radijacije da bi zaštitila operatera od potencijalne doze radijacije, kao i ventilaciju da bi otklonila hemijska i/ili radioaktivna isparenja. Upotrebljavanjem kasete aparat za automatizovanu sintezu ima fleksibilnost za pravljenje različitih radiofarmaceutika uz minimalni rizik unakrsne kontaminacije, jednostavnom zamenom kasete. Ovaj pristup takođe ima prednosti pojednostavljenog postavljanja i time umanjenog rizika od greške operatera, poboljšane usaglašenosti sa GMP-om (dobrim praksama u proizvodnji), kapaciteta za upotrebu više trejsera, brzom izmenom između proizvodnih ciklusa, automatizovanog dijagnostičkog proveravanja kasete i reagensa pre ciklusa, automatizovane unakrsne provere bar kodova hemijskih reagensa spram sinteze koja treba da se sprovede, sledivosti reagensa, jednokratne upotrebe i time nepostojećeg rizika od unakrsne kontaminacije te otpornosti na neovlašćeno korišćenje i zloupotrebu.

Izraz „mnoštvo“ koji je ovde korišćen u kontekstu šarže [<18>F]-obeleženog PET trejsera namenjen je da se odnosi na više od jedne šarže, gde se te više od jedne šarže sintetizuju na jednoj kaseti za jednokratnu upotrebu. U jednom aspektu izraz mnoštvo se odnosi na dve šarže, tj. prvu šaržu i drugu šaržu. Izrazi „prva šarža“ i „druga šarža“ predstavljaju dve odvojene uzastopne sinteze [<18>F]-obeleženog PET trejsera proizvedene na istoj kaseti, druga se šarža proizvodi tek nakon dovršavanja proizvodnje prve šarže, tj. nakon što se produkt sakupi u bočici za sakupljanje produkta. Izraz „šarža“ se koristi za upućivanje na šaržu konačnog sintetizovanog [<18>F]-obeleženog PET trejsera. Namenjeno je da mnoštvo šarži može da se proizvede istog dana i bez potrebe za otvaranjem vruće ćelije u kojoj su prisutni kaseta i uređaj za automatizovanu sintezu.

„[<18>F]-obeleženi PET trejser“ je hemijsko jedinjenje koje sadrži<18>F atom i pogodno je za upotrebu kao PET trejser. Neograničavajući primeri [<18>F]-obeleženih PET trejsera uključuju [<18>F]fluorodeoksiglukozu ([<18>F]FDG),

[<18>F]fluoromisonidazol ([<18>F]FMISO), [<18>F]fluorotimidin ([<18>F]FLT),

[<18>F]fluoroazomicin arabinofuranozid ([<18>F]FAZA), [<18>F]fluoroetil-holin ([<18>F]FECH), [<18>F]fluorociklobutan-1-karboksilnu kiselinu ([<18>F]FACBC), [<18>F]flumanezil ([<18>F]FMZ), [<18>F]tirozin, [<18>F]altanserin, 4-[<18>F]fluoro-3-jodobenzil gvanidin ([<18>F]FIBG), meta-[<18>F]fluorobenzilgvanidin ([<18>F]mFBG) i [<18>F]5-fluorouracil. U jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska<18>F-obeleženo jedinjenje se bira između [<18>F]FDG, [<18>F]FMISO, [<18>F]FLT i [<18>F]FACBC. U drugom otelotvorenju predmetnog pronalaska<18>F-obeleženo jedinjenje je [<18>F]FDG.

„reakcioni sud“ u kontekstu predmetnog pronalaska je spremnik kasete pronalaska gde reaktanti i reagensi potrebni za sintezu mogu da se pošalju i produkt/produkti mogu da se uklone po odgovarajućem redosledu. Reakcioni sud ima unutrašnju zapreminu pogodnu za sadržavanje reaktanata i reagensa i napravljen je od materijala farmaceutske kvalitete otpornih na radijaciju.

„Alikvot“ u kontekstu postupka predmetnog pronalaska je dovoljna količina određenog reagensa za upotrebu u sintezi jedne šarže PET trejsera.

„Prekursorsko jedinjenje“ ovde treba da se razume kao derivat radioaktivno obeleženog jedinjenja koji nije radioaktivan, dizajniran tako da se hemijska reakcija sa pogodnim hemijskim oblikom obeležja koje može da se detektuje dešava na specifičnim lokacijama u minimalnom broju koraka (idealno u jednom koraku) da bi dala poželjni radioaktivno obeleženo jedinjenje. Da bi se obezbedilo obeležavanje na specifičnoj lokaciji prekursorsko jedinjenje može da ima zaštitne grupe. Takva prekursorska jedinjenja su sintetička i mogu pogodno da se dobiju sa dobrom hemijskom čistoćom. Određen broj prekursorskih jedinjenja je dobro poznato po pogodnosti za sintezu [<18>F]-obeleženih jedinjenja, kao što se podučava na primer u Poglavlju 7 priručnika „Handbook of Radiopharmaceuticals: Radiochemistry and Applications“ (2003. John Wiley & Sons Ltd., Wench & Redvanly, Eds.).

Izraz „zaštitna grupa“ odnosi se na grupu koja inhibira ili suzbija neželjene hemijske reakcije, ali koja je dizajnirana da bude dovoljno reaktivna da može da se razdvoji od funkcionalne grupe koja je u pitanju da bi se dobio željeni produkt pod dovoljno blagim uslovima koji ne modifikuju ostatak molekula. Zaštitne grupe i postupci za njihovo uklanjanje (tj. „uklanjanje zaštite“) dobro su poznati stručnjacima u predmetnoj oblasti i opisani su u „Protective Groups in Organic Synthesis“, Theorodora W. Greene i Peter G. M. Wuts, (Četvrto izdanje, John Wiley & Sons, 2007.).

Izraz „reagens“ koji se ovde koristi je izraz namenjen da se odnosi na rastvarače i reaktante korišćene u sintezi određenog [<18>F]-obeleženog PET trejsera. Pogodno se oni skladište u bočici za reagens. Izraz „bočica za reagens“ se podrazumeva da označava bočicu koja sadrži jedan od reagensa za upotrebu u proizvodnji [<18>F]-obeleženog PET trejsera, dovoljno za proizvodnju poželjnog mnoštva šarži. Izraz „dovoljno“ označava količinu reagensa pogodnu za obezbeđivanje toga da može da se dobije mnoštvo šarži. Generalno je ova količina malo više od tačne potrebne količine. Tipična bočica za reagense je napravljena od nesavitljivog polimera farmaceutske kvalitete otpornog na radijaciju. Pogodni reagensi sadržani u navedenim bočicama za reagense uključuju etanol, acetonitril, agense za uklanjanje zaštite i pufere. U jednom otelotvorenju navedeni agens za uklanjanje zaštite se bira između HCl, NaOH i H3PO4. U jednom otelotvorenju navedeni agens za uklanjanje zaštite je NaOH. U jednom otelotvorenju navedeni pufer je zasnovan na slaboj kiselini, na primer odabran između citrata, fosfata, acetata i askorbata. Na primer, tamo gde je [<18>F]-obeleženo jedinjenje predmetnog pronalaska [<18>F]FDG, kaseta za jednokratnu upotrebu sadrži bočicu za reagens koja sadrži etanol, jednu koja sadrži acetonitril, jednu koja sadrži NaOH i još jednu koja sadrži pufer zasnovan na slaboj kiselini odabran između citrata ili fosfata.

Izraz „ekstrakcija čvrste faze (SPE)“ odnosi se na proces pripremanja uzorka kojim se jedinjenja u rastvoru odvajaju jedna od drugih na osnovu njihovih respektivnih afiniteta za čvrstu supstancu („čvrsta faza“ ili „stacionarna faza“) kroz koju se uzorak propušta i rastvarač („mobilna faza“ ili „tečna faza“) u kojem se rastvaraju. Rezultat je da se jedinjenje od interesa zadržava ili na čvrstoj fazi ili u mobilnoj fazi. Deo koji prođe kroz čvrstu fazu se sakuplja ili odbacuje, zavisno od toga da li sadrži jedinjenje od interesa. Ako deo zadržan na stacionarnoj fazi uključuje jedinjenje od interesa, onda može da se ukloni iz stacionarne faze za sakupljanje u dodatnom koraku, u kom se stacionarna faza ispere sa drugim rastvorom poznatim kao „eluent“. Za predmetni pronalazak SPE se pogodno sprovodi upotrebom „SPE kolone“ (koja se takođe često naziva „SPE patrona“), koja je komercijalno lako dostupna i tipično je u obliku kolone u obliku šprica upakovane sa čvrstom fazom. Većina poznatih čvrstih faza je zasnovana na silicijum dioksidu koji se vezao na specifičnu funkcionalnu grupu, npr. ugljovodoničke lance promenljivih dužina (pogodno za SPE obrnute faze), kvaternarni amonijum ili amino grupe (pogodno za razmenu anjona) i sulfonsku kiselinu ili karboksilne grupe (pogodno za razmenu katjona).

Izraz „eluiranje“ odnosi se na propuštanje rastvora kroz SPE kolonu s ciljem otpuštanja jednog jedinjenja ili više jedinjenja od interesa koje je ili koja su bila vezana za čvrstu fazu.

Izraz „eluent“ koji je ovde prethodno korišćen u vezi sa SPE-om generalno se takođe specifično koristi u vezi sa kasetama za jednokratnu upotrebu predmetnog pronalaska za upućivanje na eluent korišćen za eluiranje [<18>F]fluorida uhvaćenog na koloni za razmenu anjona. [<18>F]fluorid pogodan za upotrebu u sintezi [<18>F]-obeleženog jedinjenja obično se dobija kao vodeni rastvor iz nuklearne reakcije<18>O(p,n)<18>F. Da bi se povećala reaktivnost [<18>F]fluorida i smanjili ili minimizirali hidroksilovani nusprodukti koji su rezultat prisustva vode, voda se tipično uklanja iz [<18>F]fluorida pre reakcije i reakcije fluorinacije se sprovode upotrebom anhidrovanih reakcionih rastvarača (Aigbirhio i sar.1995. J Fluor Chem; 70: 279–87). Dodatni korak koji se koristi za poboljšanje reaktivnosti [<18>F]fluorida za reakcije radiofluorinacije jeste dodavanje katjonskog kontrajona pre uklanjanja vode. Ovaj katjonski kontrajon se rastvara u organskom vodenom rastvoru i ovaj se rastvor koristi kao eluent za eluiranje [<18>F]fluorida iz kolone za razmenu anjona na kojoj je [<18>F]fluorid uhvaćen. U jednom otelotvorenju navedeni organski vodeni rastvor je vodeni rastvor acetonitrila ili metanola. U jednom otelotvorenju navedeni organski vodeni rastvor je vodeni rastvor acetonitrila.

Pogodno bi kontrajon trebao da ima dovoljnu rastvorljivost unutar rastvarača za anhidrovanu reakciju da bi se održala rastvorljivost [<18>F]fluorida. Stoga kontrajoni koji se tipično koriste uključuju velike ali mekane metalne jone kao što je rubidijum ili cezijum, kalijum u kompleksu sa kriptandom kao što je Kryptofix<™>222 ili soli tetraalkilamonijuma, pri čemu su poželjni kalijum u kompleksu sa kriptandom kao što je Kryptofix<™>222 ili soli tetraalkilamonijuma. Izraz Kryptofix<™>222 (ili K222) ovde se odnosi na komercijalno dostupni preparat jedinjenja 4,7,13,16,21,24-heksaoksa-1,10-diazabiciklo[8.8.8]heksakosana.

„SPE kolona za uklanjanje zaštite“ u kontekstu predmetnog pronalaska je SPE kolona koja ima čvrstu fazu na kojoj se prekursorsko jedinjenje koje ima zaštitne grupe zadržava posle reakcije [<18>F]-obeležavanja da bi se uklonile zaštitne grupe i dobio poželjni [<18>F]-obeleženi PET trejser. U jednom otelotvorenju SPE kolona za uklanjanje zaštite je SPE kolona obrnute kolone kao što je ovde definisana.

„SPE obrnute faze“ koristi nepolarnu čvrstu fazu i polarnu mobilnu fazu. Jedinjenja se zadržavaju hidrofobnim interakcijama i eluiraju upotrebom nepolarnog rastvarača za eluiranje da bi se narušile sile koje vezuju jedinjenje za čvrstu fazu. Neograničavajući primeri SPE kolona obrnute faze uključuju C18, tC18, C8, CN, Diol, HLB, Porapak, RDX i NH2 SPE kolone. U jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska, SPE kolona obrnute faze je tC18 ili HLB SPE kolona. U jednom otelotvorenju, navedena SPE kolona obrnute faze je HLB SPE kolona. U drugom otelotvorenju predmetnog pronalaska SPE kolona obrnute faze je tC18 kolona. U nekim otelotvorenjima predmetnog pronalaska tC18 kolona je okolišna tC18 kolona, koja se ponekad naziva dugom tC18 kolonom ili tC18 plus kolonom. U jednom otelotvorenju SPE kolona obrnute faze korišćena za uklanjanje zaštite je okolišna tC18 kolona.

„SPE normalne faze“ koristi polarno modifikovanu čvrstu fazu i nepolarnu mobilnu fazu. Jedinjenja se zadržavaju hidrofilnim interakcijama i eluiraju upotrebom rastvarača koji je više polaran od izvorne mobilne faze za narušavanje mehanizama vezivanja. Neograničavajući primeri SPE kolona normalne faze uključuju SPE kolone aluminijum oksida, diola i silicijum dioksida. U jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska SPE kolona normalne faze je SPE kolona aluminijum oksida.

„SPE za razmenu anjona“ koristi elektrostatičko privlačenje naelektrisanih grupa na jedinjenju prema naelektrisanoj grupi na površini sorbenta i može da se koristi za jedinjenja koja su naelektrisana u rastvoru. Primarni mehanizam zadržavanja jedinjenja zasnovan je uglavnom na elektrostatičkom privlačenju naelektrisane funkcionalne grupe na jedinjenju prema naelektrisanoj grupi koja je vezana za površinu silicijum dioksida. Rastvor koji ima pH koji neutralizuje bilo funkcionalnu grupu jedinjenja ili funkcionalnu grupu na površini sorbenta se koristi za eluiranje jedinjenja od interesa. Neograničavajući primer SPE kolone za razmenu anjona je SPE kolona kvaternarnog amonijuma za razmenu anjona (QMA).

Izraz „sredstva za čišćenje“ odnosi se na izvor reagensa koji je selektivno tečno povezan sa komponentom koju treba očistiti. Selektivna tečna veza pogodno sadrži ventil i određenu dužinu savitljive cevi. Pogodni reagensi za čišćenje uključuju etanol i acetonitril, njihove vodene rastvore i vodu. Izraz „čišćenje“ u kontekstu predmetnog pronalaska odnosi se na proces propuštanja pogodne količine jednog ili više reagensa kroz komponentu koju treba očistiti da bi se učinila pogodnom za upotrebu u pripremanju sledeće šarže [<18>F]-obeleženog PET trejsera. U jednom otelotvorenju navedena sredstva za čišćenje navedenog reakcionog suda i navedenih SPE kolona sadrže izvor vode tečno povezan sa navedenim reakcionim sudom i navedenim SPE kolonama. Pogodan izvor vode je voda za injekciju. U jednom otelotvorenju navedeni izvor vode je vreća sa vodom povezana sa navedenom kasetom. U jednom otelotvorenju navedena sredstva za čišćenje navedenog reakcionog suda i navedenih SPE kolona sadrži izvor acetonitrila tečno povezan sa navedenom SPE kolonom za uklanjanje zaštite. U jednom otelotvorenju navedena sredstva za čišćenje navedenog reakcionog suda i navedenih SPE kolona sadrži izvor etanola tečno povezan sa navedenom SPE kolonom za pročišćenje. Navedeni izvori reagensa su u jednom otelotvorenju prisutni u bočicama sadržanim u kaseti pronalaska.

Izraz „hvatanje“ odnosi se na proces, pri čemu se određeno jedinjenje ili jedinjenja vezuju za čvrstu fazu SPE kolone.

Izraz „propuštanje“ odnosi se na čin dozvoljavanja reaktantu, reagensu ili reakcionom rastvoru da teče kroz određenu komponentu selektivnim otvaranjem ventila.

Izraz „zagrevanje“ ovde znači primenu toplote da bi se promovisalo odvijanje određene hemijske reakcije. U kontekstu [<18>F]-obeležavanja kako je ovde predviđeno, toplota je poželjno temperatura u predelu 100–150 °C tokom kratkog trajanja od oko 2–10 minuta.

Izraz „pročišćavanje“ ili „pročišćenje“ kako se ovde koristi može da se razume u značenju procesa za dobivanje suštinski čistog [<18>F]-obeleženog jedinjenja. Izraz „suštinski“ odnosi se na potpunu ili skoro potpunu razmeru ili stepen dejstva, karakteristike, osobine, stanja, strukture, stavke ili rezultata. Izraz „suštinski čisto“ može da se razume u značenju potpuno čistog [<18>F]-obeleženog jedinjenja, što bi bilo idealno, ali i [<18>F]-obeleženog jedinjenja koje je dovoljno čisto da bude pogodno za upotrebu kao PET trejser. Izraz „pogodno za upotrebu kao PET trejser“ znači da je suštinski čisto [<18>F]-obeleženo jedinjenje pogodno za intravensku primenu na subjektu sisaru čemu sledi PET dijagnostičko slikanje za dobijanje jedne ili više klinički korisnih slika lokacije i/ili distribucije [<18>F]-obeleženog jedinjenja. U jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska, pročišćenje se sprovodi pomoću SPE kolone obrnute faze i/ili SPE kolone normalne faze, koje su obe ovde prethodno definisane.

Izraz „čišćenje“ u kontekstu predmetnog pronalaska odnosi se na proces propuštanja pogodne količine jednog ili više reagensa kroz komponentu koju treba očistiti da bi se učinila pogodnom za upotrebu u pripremanju sledeće šarže [<18>F]-obeleženog PET trejsera. U jednom otelotvorenju, korak čišćenja u kontekstu postupka predmetnog pronalaska sadrži ispiranje reakcionog suda i SPE kolone vodom. U drugom otelotvorenju postupka predmetnog pronalaska navedeni korak čišćenja sadrži ispiranje SPE kolone sa acetonitrilom pre ispiranja sa vodom. U drugom otelotvorenju postupka predmetnog pronalaska navedeni korak čišćenja sadrži ispiranje navedenih SPE kolona (11, 12) sa etanolom pre ispiranja sa vodom.

U jednom otelotvorenju postupka predmetnog pronalaska, koraci se izvršavaju u sekvenci.

Ilustrativni primer predmetnog pronalaska je sinteza [<18>F]FDG na FASTlab<™>(GE Healthcare) aparatu. Prva [<18>F]FDG sinteza je slična trenutnom [<18>F]FDG procesu na FASTlab<™>aparatu, koristi istu količinu reagensa. Na kraju prvog [<18>F]FDG procesa, prva šarža se šalje u prvu bočicu za sakupljanje produkta. U ovoj fazi nema dovoljno rezidualnih reagensa u različitim bočicama za drugu [<18>F]FDG sintezu. FASTlab<™>aparat ostaje u režimu čekanja nakon isporučivanja prve [<18>F]FDG šarže. Od ovog trenutka FASTlab<™>aparat je spreman da primi radioaktivnost iz ciklotrona za drugu [<18>F]FDG sintezu. Kada rastvor [<18>F]fluorida iz ciklotrona stigne u konusnu bočicu kasete [<18>F]FDG procesa, koji počinje sa čišćenjem tC18 kolone sa 1 ml acetonitrila i ispiranjem kolona za pročišćenje sa vodom za injekciju. Reakcioni sud već je očišćen tokom prve sinteze. Druga QMA kolona i cev se dodaje na kasetu da bi se obezbedilo pravilno hvatanje i eluiranje [<18>F]fluorida, pre koraka sušenja. Nakon eluiranja [<18>F]fluorida u reaktor, ostatak [<18>F]FDG procesa se izvršava na isti način kao prva [<18>F]FDG sinteza. Koristi se odvojeni izlazni vod. Kaseta omogućava dvema [<18>F]FDG masama da imaju vlastitu izlaznu liniju, filtere za sterilizaciju i bočice za sakupljanje produkta, tako da je odvajanje šarže jasno.

Slika 3 je šematski crtež neograničavajućeg primera kasete predmetnog pronalaska dizajnirane za radiosintezu 2 uzastopne šarže [<18>F]FDG.

Kratak opis primera

Primer 1 opisuje sintezu dve šarže [<18>F]FDG na jednoj FASTlab<™>kaseti. Spisak skraćenica korišćenih u primerima

[<18>F]FDG [<18>F]fluorodeoksiglukoza

[<18>F]FTAG [<18>F]fluorotetraacetilglukoza

GC gasna hromatografija

HLB hidrofilno-lipofilni balans

IC jonska hromatografija

K222 4,7,13,16,21,24-heksaoksa-1,10-diazabiciklo[8.8.8]heksakosan MeCN acetonitril

min minuta/minute

NCY nekorigovani prinos

ppm delova po milionu

QMA kvaternarni metilamonijum

SPE ekstrakcija čvrste faze

Primeri

Primer 1: Sinteza dve šarže [<18>F]FDG na jednom FASTlab<™>aparatu

Kaseta

Konfiguracija kasete kao što je ilustrovano na Slici 3 je korišćena za proizvodnju dve uzastopne šarže [<18>F]FDG upotrebom sledećih postupaka (brojevi u ovom postupku su referentni brojevi na Slici 3 osim ako su navedeni kao „pozicija“, to jeste jedna od pozicija 1–25 s leva na desno na kaseti sa Slike 3):

(i) 800 µl MeCN (iz bočice 7) je korišćeno za kondicioniranje tC18 okolišne SPE kolone (10) i 5 ml H2O je korišćeno za kondicioniranje svake od HLB SPE kolone (11) i SPE kolone aluminijum oksida (12).

(ii) [<18>F]fluorid je dobijen od bombardovanja [<18>O]-H2O sa protonskom zrakom visoke energije ekstrahovanom iz ciklotrona Cyclone 18/9 (IBA) i prenesen u kasetu putem konusnog rezervoara na poziciji 6.

(iii) [<18>F]fluorid je uhvaćen na QMA koloni (3) i odvojen od obogaćene vode koja je sakupljena u eksternoj bočici putem puta kroz pozicije 5-4-1.

(iv) Eluent (iz bočice 2) je povučen u špric na poziciji 3 i propušten kroz QMA kolonu (3) da bi otpustio [<18>F]fluorid i poslao ga u reakcioni sud (5).

(v) Isparenje vode u reakcionom sudu (5) je katalizovano dodavanjem male količine od 25 mg/ml prekursora manoza triflata (bočica 6 na poziciji 12 na 120 °C.

(vi) Prekursor manoza triflata (iz bočice 6) je povučen u špric na poziciji 11 i prenesen u reakcioni sud (5) na poziciji 10 gde je sprovedena reakcija obeležavanja tokom 2 minute na 125 °C.

(vii) Dobijeni intermedijer za radioaktivno obeležavanje, [<18>F]FTAG, je uhvaćen i tako odvojen od fluorida koji nisu reagovali, na gornjoj strani tC18 okolišne kolone (10) na poziciji 18.

(viii) Natrijum hidroksid (iz bočice 8) propušten je kroz kolonu (10) da bi promenio [<18>F]FTAG u [<18>F]FDG sakupljen špricom na poziciji 24.

(ix) Neutralizacija dobijenog baznog rastvora sprovedena je upotrebom fosforne kiseline (iz bočice 9).

(x) Konačni proizvod je poslan u prvu eksternu bočicu za sakupljanje (13) povezanu na poziciji 21 putem dve kolone za pročišćenje (11, 12) u nizu (tj. HLB na poziciji 23 i aluminijum oksid na poziciji 20).

(xi) tC18 okolišna kolona je očišćena sa acetonitrilom iz pozicije 13 (bočica 7) i reaktor, kolone za pročišćenje i cevi su isprane sa vodom iz vreće sa vodom povezane na šiljak na poziciji 15.

(xii) Druga šarža [<18>F]fluorida iz ciklotrona prenesena je u kasetu kao u koraku (ii).

(iii) [<18>F]fluorid je uhvaćen na novoj QMA koloni (4) koja se nalazi na poziciji 8 i odvojen od obogaćene vode koja je sakupljena u eksternoj

bočici putem puta kroz pozicije 7-8-19-1.

(xiv) Sa [<18>F]fluoridom iz QMA (4) na poziciji 8, koraci (iv)–(ix) su sprovedeni kao za prvu šaržu.

(xv) Druga šarža [<18>F]FDG je pročišćena putem istih kolona (11, 12) na poziciji 23 (HLB) i 20 (aluminijum oksid) i zatim prenesena u novu eksternu bočicu za sakupljanje (14) povezanu cevima na poziciji 22.

Ova konfiguracija kasete ima put za recikliranje obogaćene vode na levoj strani za prvu šaržu (Slika 4 na vrhu) i na desnoj strani za drugu šaržu (Slika 4 na dnu) kasete (moguća je kontaminacija razvodnika sa obogaćenom vodom) sa aktiviranih sedam pozicija na kaseti, tj. poziciji 6 za aktivni ulaz, poziciji 1 sa vezom bočice sa obogaćenom vodom, pozicija 4 za QMA 1, pozicija 5 za cevi QMA 1, pozicija 7 za QMA 2, pozicija 8 za cevi QMA 2 i pozicija 19 za izdvajanje obogaćene vode iz šarže 2.

Početna aktivnost, konačna aktivnost i rezidualna aktivnost merene su komorom za kalibriranu jonizaciju VEENSTRA (VIK-202).

Da bi se utvrdio prinos, vršeni su sledeći izračuni prinosa:

- ako je delta Tf = vreme proteklo nakon vremena na početku sinteze u minutama

- ako je Af = konačna aktivnost u mCi

- cAf = korigovana konačna aktivnost u mCi u odnosu na početak sinteze u minutama = Af. Exp(ln(2)*(delta Tf/110)) gde je 110 = vreme poluraspada [<18>F]fluora u minutama

- ako je cAi = korigovana aktivnost u mCi u odnosu na početak sinteze u mCi

- ako je delta Ts = trajanje sinteze

- Korigovani prinos (CY) = (cAf/cAi)*100

- Nekorigovani prinos (NCY) = CY*Exp(ln(2)*(-delta Ts/110))

Rezultati dati u nastavku u odnosu na početnu aktivnost, konačnu aktivnost i rezidualne aktivnosti dobijeni su sa ovom konfiguracijom kasete:

Za kontrolu kvalitete, izvršena su merenja pH, koncentracije glukoze, koncentracije sirćetne kiseline i koncentracije K222.

pH je izmeren upotrebom Metrohm 744 merača pH vrednosti.

Koncentracija glukoze je utvrđena jonskom hromatografijom (IC) gde su analitički uslovi bili:

- Dionex IC sistem

- Kolona Dionex Carbopak PA10, 4,0 * 250 mm @ 25 °C

- Rastvarač KOH 100 mM @ 1 ml/min

- Elektrohemijski detektor @ 30 °C

Kompozicija standarda za FDG koja je korišćena je bila:

- Glukoza = 25 µg/ml

- FDM = 50 µg/ml

- FDG = 50 µg/ml

- CIDG = 50 µg/ml

Utvrđivanje količine sirćetne kiseline je ocenjivano upotrebom gasne hromatografije (GC) sprovedene na Varian CP-3800 hromatografu opremljenom CP-8400 uređajem za automatsko uzorkovanje i sledećim parametrima:

- Kolona: Macherey-Nagel Optima<®>624-LB kolona, 30 m * 0,32 mm ID, 1,80 µm film

- Injekcija: količina 1 µl, odnos razdvajanja 1:10, injektor na 250 °C

- Gasni nosač: Helijum 10 PSI 5 ml/min

- Temperatura: 80 °C od 0 do 3 min, 80 do 200 °C od 3 do 9 min na 20 °C/min i konačno 200 °C od 9 do 10 min.

- Detektor: FID na 250 °C (He 20 ml/min, H230 ml/min i komprimirani vazduh 260 ml/min)

- Korišćene reference: Rastvor sirćetne kiseline na 500 ppm tež./tež. (što odgovara jednoj desetini limita, 5000 ppm).

Količina K222 u konačnom produktu utvrđena je stavljanjem uzorka na TLC ploču koja je impregnirana rastvorom jodoplatinata za otkrivanje (0,5 g heksahidrata hloroplatinske kiseline: H2PtCl6.6H2O (!veoma higroskopno!), 9 g kalijum jodida: KI, 200 ml destilovane vode) i poređenjem toga sa standardnim rastvorima K222 od 1, 5, 10, 50 i 100 ppm). Intenzitet boje dobijenih mrlja je srazmeran količini K222 prisutnog u rastvoru.

Dobijeni su u nastavku navedeni rezultati:

_____________________

Claims (14)

PATENTNI ZAHTEVI

1. Kaseta (1) za sintezu mnoštva šarži [<18>F]-obeleženog trejsera za pozitronsku emisionu tomografiju (PET) pri čemu navedena kaseta sadrži:

(i) kolonu za razmenu anjona (3, 4) za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(ii) reakcioni sud (5);

(iii) bočicu (2) koja sadrži alikvot eluenta za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(iv) bočicu (6) koja sadrži alikvot prekursorskog jedinjenja za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(v) bočice za reagense (7, 8, 9) pri čemu svaka bočica za reagens sadrži alikvot reagensa za svaku od navedenog mnoštva šarži;

(vi) opciono kolonu za ekstrakciju čvrste faze (SPE) za uklanjanje zaštite (10) i/ili jednu ili više SPE kolona za pročišćenje (11, 12); i,

(vii) sredstva za čišćenje navedenog reakcionog suda i navedenih SPE kolona;

pri čemu su komponente (i)–(vii) kasete selektivno tečno povezane duž linearnog puta za tečnosti napravljenog od nesavitljivog polimernog materijala farmaceutske kvalitete koji je otporan na radijaciju.

2. Kaseta prema patentnom zahtevu 1, pri čemu se navedeni PET trejser bira između [<18>F]fluorodeoksiglukoze ([<18>F]FDG), [<18>F]fluoromisonidazola ([<18>F]FMISO), [<18>F]fluorotimidina ([<18>F]FLT), [<18>F]fluoroazomicin arabinofuranozida ([<18>F]FAZA), [<18>F]fluoroetil-holina ([<18>F]FECH), [<18>F]fluorociklobutan-1-karboksilne kiseline ([<18>F]FACBC), [<18>F]flumanezila ([<18>F]FMZ), [<18>F]tirozina, [<18>F]altanserina, 4-[<18>F]fluoro-3-jodobenzil gvanidina ([<18>F]FIBG), meta-[<18>F]fluorobenzilgvanidina ([<18>F]mFBG) i [<18>F]5-fluorouracila.

3. Kaseta prema bilo kom od patentnih zahteva 1–2, pri čemu je navedena kolona za razmenu anjona (3, 4) kolona kvaternarnog amonijuma za razmenu jona (QMA).

4. Kaseta prema bilo kom od patentnih zahteva 1–3, pri čemu navedeni eluent sadrži katjonski kontrajon rastvoren u organskom vodenom rastvoru.

5. Kaseta prema bilo kom patentnom zahtevu 1–4, pri čemu navedena sredstva za čišćenje navedenog reakcionog suda i navedenih SPE kolona sadrže izvor vode tečno povezan na navedeni reakcioni sud i na navedene SPE kolone.

6. Kaseta prema patentnom zahtevu 5, pri čemu navedena sredstva za čišćenje reakcionog suda i navedenih SPE kolona sadrže izvor acetonitrila tečno povezan na navedenu SPE kolonu za uklanjanje zaštite (10).

7. Kaseta prema patentnom zahtevu 5 ili patentnom zahtevu 6, pri čemu navedena sredstva za čišćenje navedenog reakcionog suda i navedenih SPE kolona sadrže izvor etanola tečno povezan na navedene SPE kolone za pročišćenje.

8. Postupak za sintezu mnoštva šarži [<18>F]-obeleženog PET trejsera, pri čemu navedeni postupak sadrži:

(a) hvatanje prvog alikvota [<18>F]fluorida na prvu kolonu za razmenu anjona (3);

(b) obezbeđivanje prvog alikvota prekursorskog jedinjenja u reakcionom sudu (5);

(c) propuštanje prvog alikvota eluenta kroz navedenu prvu kolonu za razmenu anjona (3) da bi se eluirao prvi alikvot [<18>F]fluorida u navedeni reakcioni sud (5);

(d) zagrevanje reakcionog suda (5) tokom unapred određenog vremena da bi se dobio sirovi [<18>F]-obeleženi PET trejser;

(e) opciono uklanjanje zaštite na navedenom sirovom [<18>F]-obeleženom PET trejseru na SPE koloni (10);

(f) opciono pročišćavanje navedenog sirovog [<18>F]-obeleženog PET trejsera na jednoj ili više SPE kolona (11, 12);

(g) čišćenje navedenog reakcionog suda (5) i navedenih SPE kolona (10, 11, 12);

(h) ponavljanje koraka (a)–(g) jednom ili više puta, svakoga puta koristeći sledeći alikvot [<18>F]fluorida, sledeću kolonu za razmenu anjona (4) i sledeći alikvot prekursorskog jedinjenja;

pri čemu se navedeni postupak sprovodi na jednoj kaseti (1).

9. Postupak prema patentnom zahtevu 8, pri čemu se navedeni PET trejser bira između [<18>F]fluorodeoksiglukoze ([<18>F]FDG), [<18>F]fluoromisonidazola ([<18>F]FMISO), [<18>F]fluorotimidina ([<18>F]FLT), [<18>F]fluoroazomicin arabinofuranozida ([<18>F]FAZA), [<18>F]fluoroetil-holina ([<18>F]FECH), [<18>F]fluorociklobutan-1-karboksilne kiseline ([<18>F]FACBC), [<18>F]flumanezila ([<18>F]FMZ), [<18>F]tirozina, [<18>F]altanserina, 4-[<18>F]fluoro-3-jodobenzil gvanidina ([<18>F]FIBG), meta-[<18>F]fluorobenzilgvanidina ([<18>F]mFBG) i [<18>F]5-fluorouracila.

10. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 8–9, pri čemu je svaka od navedene prve kolone za razmenu anjona (3) i navedene sledeće kolone za razmenu anjona (4) kolona kvaternarnog amonijuma za razmenu anjona (QMA).

11. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 8–10, pri čemu navedeni eluent sadrži katjonski kontrajon rastvoren u organskom vodenom rastvoru.

12. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 8–11, pri čemu navedeni korak čišćenja sadrži ispiranje navedenog reakcionog suda (5) i navedenih SPE kolona (10, 11, 12) sa vodom.

13. Postupak prema patentnom zahtevu 12, pri čemu navedeni korak čišćenja sadrži ispiranje navedene SPE kolone (10) sa acetonitrilom pre ispiranja sa vodom.

14. Postupak prema ili patentnom zahtevu 12 ili patentnom zahtevu 13, pri čemu navedeni korak čišćenja sadrži ispiranje navedenih SPE kolona (11, 12) sa etanolom pre ispiranja sa vodom.