RS66519B1 - Modulacija g protein-spregnutog receptora (gpcr) pomoću imipridona - Google Patents

Modulacija g protein-spregnutog receptora (gpcr) pomoću imipridona

Info

Publication number
RS66519B1
RS66519B1 RS20250172A RSP20250172A RS66519B1 RS 66519 B1 RS66519 B1 RS 66519B1 RS 20250172 A RS20250172 A RS 20250172A RS P20250172 A RSP20250172 A RS P20250172A RS 66519 B1 RS66519 B1 RS 66519B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
cancer
compound
subject
therapeutic agent
onc201
Prior art date
Application number
RS20250172A
Other languages
English (en)
Inventor
Joshua E Allen
Martin Stogniew
Varun Vijay Prabhu
Original Assignee
Oncoceutics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/US2016/015817 external-priority patent/WO2016123571A1/en
Application filed by Oncoceutics Inc filed Critical Oncoceutics Inc
Publication of RS66519B1 publication Critical patent/RS66519B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/5758—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumours, cancers or neoplasias, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides or metabolites
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/60—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances involving radioactive labelled substances
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6872—Intracellular protein regulatory factors and their receptors, e.g. including ion channels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/106—Pharmacogenomics, i.e. genetic variability in individual responses to drugs and drug metabolism
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/04—Screening involving studying the effect of compounds C directly on molecule A (e.g. C are potential ligands for a receptor A, or potential substrates for an enzyme A)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)

Description

Opis
STANJE TEHNIKE PRONALASKA
[0001] Humane ćelije imaju različite receptore na svojim površinama. G protein-spregnuti receptori („GPCR“ ili „GPCR“) formiraju jednu od najvećih proteinskih porodica transmembranskih receptora. Humani genom ima približno 30000 gena, od kojih čak 1000 kodira GPCR. GPCR su grupisani u pet klasa. Prva klasa je porodica receptora rodopsina ili "GPCR klase A" sa 670 receptorskih proteina. Porodica receptora za rodopsin može da reaguje sa različitim ligandima, uključujući amine (alfa grupa), peptide (beta grupa), supstance slične lipidima (gama grupa), nukleotide i glikoproteine (delta grupa), i sadrži mnogo ciljnih receptora za lek. Druga klasa je porodica receptora za sekretin i ima vezujuće domene za peptidne hormone. Receptori u ovoj porodici su povezani sa homeostazom i pojavljuju se kao važna ciljna mesta za razvoj lekova. Treća klasa je porodica adhezionih receptora, koju karakteriše GPCR proteolitičko mesto (GPS). Razvoj lekova koji ciljno deluju na ovu porodicu GPCR još uvek nije izveden, jer oni pokazuju različite N-terminalne delove i malo se zna o njihovim ligandima. Četvrta klasa je porodica glutamatnih receptora sa 22 GPCR člana koji su do sada identifikovani. Relativno malo se zna o specifičnosti svakog proteina. Poslednja klasa je porodica Frizzled/Taste2 koja obuhvata 10 Frizzled receptora za koje Wnt glikoproteini služe kao ligandi, 5 SMO (izglađenih) receptora kojima nisu potrebni ligandi i 25 Taste2 receptora koji su potrebni za osećaj različitih ukusa. Receptori uključujući GPCR se takođe klasifikuju na osnovu identifikacije endogenih liganada. Receptori se vezuju za poznata endogena jedinjenja ili su klasifikovani kao orfan receptori čiji endogeni ligandi još uvek nisu identifikovani.
[0002] GPCR se nalaze u širokom spektru tipova tkiva i ćelija i povezani su sa mnogim različitim fiziološkim mehanizmima. Oni se aktiviraju širokim spektrom liganada, npr., hormonima kao što su hormon koji stimuliše štitnu žlezdu (TSH), adrenokortikotropni hormon, glukagon i vazopresin, amini kao što je 5-HT, acetilholin (muskarinski AchR), i histamini, lipidi kao što su LPA i transmiteri signala, kao što su aminokiseline, Ca,<2+>, nukleinske kiseline, peptidi i svetlost. Široka raspodela i raznovrsnost uloga koje GPCR imaju dokaz je njihovog značaja u različitim patološkim bolestima. Zaista, GPCR su uključeni u različite bolesti uključujući bronhokonstrikciju, hipertenziju, dijabetes, inflamaciju, ćelijsku smrt, poremećaje hormona, kancer, neurotransmisije i poremećaje ponašanja. GPCR su stoga važna oblast za razvoj farmaceutskih proizvoda. Približno 360 GPCR se sada smatra dostupnim za razvoj lekova. Od toga, 46 je već korišćeno za razvoj lekova. Procenjuje se da postoji oko 150 orfan GPCR (oGPCR). U oblasti razvoja lekova, receptori ćelijske membrane deluju kao selektivna mesta za delovanje leka i odgovorni su za 50% svih ciljnih mesta lekova; Lekovi koji moduliraju GPCR aktivnost čine 30% najčešće korišćenih prvih 100 lekova (40 milijardi dolara, 9% ukupnog tržišta lekova). Stoga su GPCR među najznačajnijim ciljnim mestima za razvoj novih lekova.
[0003] GPCR imaju zajedničke strukturne karakteristike. Imaju sedam hidrofobnih domena koji obuhvataju membranu, svaki dug 20-30 aminokiselina, koji su povezani hidrofilnim aminokiselinskim sekvencama različite dužine. Receptori imaju vanćelijski N-terminus, dok se C-terminus nalazi u citoplazmi. GTP-vezujući proteini (G proteini) deluju kao medijatori prenoseći intracelularnim efektorima signale koji se generišu vezujućim hormonima ili drugim hemijskim ligandima koji stimulišu GPCR. Nakon vezivanja liganda, intracelularni domen GPCR prolazi kroz konformacionu promenu kako bi se omogućilo receptoru da stupi u interakciju sa G proteinom, koji zauzvrat aktivira intracelularne transmitere signala kao što su adenilat ciklaza, fosfolipaza C ili jonski kanali. Ovaj sistem generiše signalnu kaskadu u kojoj mnogi sekundarni prenosioci deluju kao odgovor na vezivanje jednog liganda za GPCR. Ćelije koriste ovaj mehanizam da otkriju vanćelijske promene životne sredine i da pravilno reaguju kao odgovor na promene. U celini, endogeni ligandi aktiviraju receptore uz istovremenu generisanje konformacione promene, što omogućava vezivanje između receptora i G proteina. Nedavne studije o interakciji između proteina otkrile su da se GPCR povezuju sa različitim proteinima kao što su proteini koji sadrže domene GRK ili SH2 (Src Homology 2), i adapter Grb2 kao i G protein da učestvuju u prenosu signala.
[0004] U normalnim uslovima, prenos signala dovodi do konačnog rezultata koji je aktivacija ili supresija ćelije. U fiziološkoj sredini, GPCR postoje u ravnoteži između njihovog neaktivnog i aktivnog stanja u ćelijskoj membrani. Neaktivni receptori ne mogu da ispolje biološki odgovor u kombinaciji sa putevima ćelijskog signala. Receptori pokazuju biološke odgovore preko puta prenosa signala (preko G proteina) samo kada su strukturno promenjeni u svoj aktivni oblik. Receptor se može stabilizovati u aktivni oblik pomoću jedinjenja kao što su endogeni ligandi ili lekovi. Stoga, funkcionalne studije, kao što je kloniranje takvih genskih familija, i identifikacija njihovih novih liganada, imaju isto značenje kao i razvoj novih kandidata za lekove, odnosno siRNK, antitela, polipeptida, efektora, inhibitora, agonista, antagonista.
[0005] Razvoj, diferencijacija, homeostaza, odgovori na stimuluse, kontrola ćelijskog ciklusa, kao i starenje i apoptoza živih organizama su uglavnom rezultat selektivne ekspresije specifičnih gena unutar ćelija. Ovo važi za ćelijske mehanizme povezane sa bolestima. Posebno, patološke pojave, poput onkogeneze, izazvane su mutacijama gena koje na kraju dovode do promena u ekspresiji gena.
[0006] ONC201 (7-benzil-4-(2-metilbenzil)-1,2,6,7,8,9-heksahidroimidazo [1,2-a]pirido [3,4-e]pirimidin-5(1H)-on) je jedan od osnivača klase anti-kancerogenih jedinjenja koja se nazivaju imipridoni koji se nalaze u fazi II kliničkih ispitivanja kod višestrukih uznapredovalih kancera. Od otkrića ONC201 kao p53 nezavisnog induktora transkripcije TRAIL gena, pretkliničke studije su utvrdile da ONC201 ima antiproliferativne i pro-apoptotičke efekte protiv širokog spektra tumorskih ćelija, ali ne i normalnih ćelija. Mehanizam delovanja ONC201 uključuje angažovanje PERK-nezavisne aktivacije integrisanog odgovora na stres, što dovodi do povećane regulacije tumora DR5 i dvostruke Akt/ERK inaktivacije, i posledične aktivacije Foxo3a koja dovodi do povećanja regulacije smrtnog liganda TRAIL. ONC201 je oralno aktivan sa retkim doziranjem na životinjskim modelima, izaziva trajne farmakodinamičke efekte i nije genotoksičan. Prvo kliničko ispitivanje ONC201 na ljudima kod naprednih agresivnih refraktornih solidnih tumora potvrdilo je da se dobro podnosi. Ukratko, porodica imipridona koja sadrži ONC201 i njegove hemijske analoge predstavlja novu klasu terapeutskih sredstava. US 2014/335048 opisuje jedinjenje (1) i njegovu upotrebu u lečenju kancera izabranog od kancera debelog creva, kancera dojke, multiformnog glioblastoma, limfoma mantle ćelija i kancera debelog creva.
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0007] Pronalazak je kao što je opisan u priloženim patentnim zahtevima. Takođe su ovde data
jedinjenja formule (10): , pri čemu R1i R2su nezavisno izabrani od H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, heterocikloalkil, heterocikloalkilalkil, aril, heteroaril, arilalkil, heteroarilalkil, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio i acil radikala. Ovde su takođe opisana jedinjenja, u kojima R1je CH2Ph i R2nije CH2-(2-CH3-Ph). Kada je R1jednak CH2Ph i R2je CH2-(2-CH3-Ph) (tj. ONC201) jedinjenje je kao što je opisano u priloženim patentnim zahtevima. R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2,4-di F-Ph) (tj. ONC206). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph) (tj. ONC212). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(3,4-di F-Ph) (tj. ONC213). R1može biti CH2(3,4-di-Cl-Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph) (tj. ONC234). R1može biti CH2-3-tienil i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph) (tj. ONC236).
[0008] Kao što je definisano u patentnim zahtevima, ovde je obezbeđeno jedinjenje formule (1) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju kancera centralnog nervnog sistema kod subjekta, pri čemu kancer centralnog nervnog sistema ima mutaciju histona H3. Jedinjenje je ONC201. Subjekat ima kancer. Kancer je tumor centralnog nervnog sistema (npr. tumor na mozgu). Kancer ima mutaciju histona H3 (npr., mutaciju H3.3 K27M) i takođe može imati epigenetički utišani nemetilovani gen O(6)-metilguanin-DNK metiltransferaze (MGMT). Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, kao što je psihoza, šizofrenija, bipolarni poremećaj ili veliki depresivni poremećaj. Subjekat može imati, ili može biti izložen riziku od infekcije, kao što je bakterijska infekcija, npr. gram-negativna bakterijska infekcija ili gram-pozitivna bakterijska infekcija. Bakterijska infekcija može biti infekcija bakterijom izabranom iz grupe koja se sastoji od Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, i vrste Enterobacter, na primer infekcija Staphylococcus kao što je infekcija S. aureus (npr. infekcija rezistentnim na meticilin S. aureus (MRSA)).
[0009] Ovde su takođe obezbeđeni, ali nisu deo pronalaska, postupci lečenja ili prevencije bolesti, poremećaja ili stanja kod subjekta kome je potrebna selektivna modulacija aktivnosti G proteinspregnutog receptora (GPCR) ili puta prenosa signala G protein-spregnutog receptora (GPCR). Modulacija uključuje, ali nije ograničena na, agonizam, delimični agonizam, inverzni agonizam, delimični antagonizam, antagonizam, bivalentnu modulaciju ili bitopičnu modulaciju. Postupci mogu da sadrže primenu na subjekta kome je potreban takav tretman farmaceutske kompozicije koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja formule (10) ili njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, kao što je psihoza ili šizofrenija. Subjekat može imati, ili može biti izložen riziku od infekcije, kao što je bakterijska infekcija (na primer, gram-negativna bakterijska infekcija ili gram-pozitivna bakterijska infekcija). Bakterijska infekcija može biti infekcija bakterije izabrane od Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, ili vrste Enterobacter. Bakterijska infekcija može biti infekcija Staphylococcus, kao što je infekcija S. aureus (npr. infekcija rezistentnim na meticilin S. aureus (MRSA)). Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog. GPCR može biti GPCR klase A. GPCR može biti GPR132, GPR91, MTNR1A, GPR162, GPR137, BAI3, LGR4, PTGIR, CXCR7 ili njihova kombinacija. GPCR može biti GPR132 (takođe se zove G2A). GPCR može biti GPR91. GPCR može biti MTNR1A. GPCR može biti CXCR7.
[0010] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za lečenje ili prevenciju bolesti, poremećaja ili stanja kod subjekta kome je potrebna selektivna modulacija aktivnosti dopaminskog receptora ili člana signalnog puta dopaminskog receptora. Postupci mogu da sadrže primenu na subjekta kome je potreban takav tretman farmaceutske kompozicije koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja formule (10) ili njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, kao što je psihoza ili šizofrenija. Subjekat može imati, ili može biti izložen riziku od infekcije, kao što je bakterijska infekcija, na primer gram-negativna bakterijska infekcija, ili gram-pozitivna bakterijska infekcija. Bakterijska infekcija može biti infekcija bakterijom izabranom iz grupe koja se sastoji od Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, i vrste Enterobacter. Bakterijska infekcija može biti infekcija Staphylococcus, kao što je infekcija S. aureus (npr. infekcija rezistentnim na meticilin S. aureus (MRSA)). Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog. Dopaminski receptor može biti iz porodice dopaminskih receptora sličnih D2.
[0011] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za lečenje ili prevenciju fibroze jetre ili regeneracije tkiva jetre, koji sadrže: primenu na subjekta kome je takav tretman potreban farmaceutske kompozicije koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja formule (10) ili jedinjenja formule (100) (npr. TIC-10), ili njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje može biti agonist CXCR7.
[0012] Ovde su takođe dati postupci za stimulaciju imunog sistema (npr., aktiviranje NK ćelija) kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrže: primenu na subjekta farmaceutske kompozicije koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja formule (10) ili njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje može biti agonist GPR91. Jedinjenje može biti ONC213. Subjekat ima kancer i postupak može biti postupak imunoterapije kancera. Subjekat može imati virusnu infekciju (npr., HIV). Subjekat može imati sistemski eritematozni lupus. Postupak može dalje da sadrži primenu vakcine (npr. vakcine protiv kancera) na subjekta, i jedinjenje se može primeniti kao pomoćno sredstvo.
[0013] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za identifikaciju da li je verovatno da će subjekat koji ima stanje reagovati na režim lečenja koji je ovde opisan. Postupci mogu da sadrže (i) dobijanje biološkog uzorka od subjekta; (ii) merenje nivoa ekspresije najmanje jednog dopaminskog receptora ili G protein-spregnutog receptora (GPCR) u uzorku; (iii) poređenje nivoa izmerenih u uzorku sa onima za unapred određeni standard; i (iv) utvrđivanje da li će subjekat verovatno reagovati na režim lečenja, na osnovu nivoa izmerenih u uzorku u odnosu na nivoe za unapred određeni standard. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj i/ili infekciju. Režim lečenja može dalje da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog. Dopaminski receptor može biti iz porodice dopaminskih receptora sličnih D2. GPCR može biti GPCR klase A. GPCR može biti GPR132, GPR91, MTNR1A, GPR162, GPR137, BAI3, LGR4, PTGIR, CXCR7 ili njihova kombinacija. GPCR može biti GPR132, GPR91, MTNR1A, CXCR7 ili njihova kombinacija. GPCR može biti GPR132.
[0014] Ovde su takođe obezbeđene postupci za procenu efikasnosti ovde opisanog režima lečenja, praćenje ili pružanje prognoze za subjekta sa stanjem. Postupci mogu da sadrže (i) dobijanje biološkog uzorka od subjekta; (ii) merenje nivoa ekspresije najmanje jednog dopaminskog receptora ili G protein-spregnutog receptora (GPCR) u uzorku; (iii) poređenje nivoa izmerenih u uzorku sa onima za unapred određeni standard; i (iv) određivanje prognoze ili određivanje da li subjekat reaguje na režim lečenja, na osnovu nivoa izmerenih u uzorku u odnosu na nivoe za unapred određeni standard. Postupci mogu da sadrže (i) dobijanje biološkog uzorka od subjekta; (ii) merenje broja kopija gena ili mutacija u najmanje jednom dopaminskom receptoru u uzorku; (iii) poređenje izmerenog broja kopija ili mutacija pronađenih u uzorku sa onima za unapred određeni standard; i (iv) utvrđivanje da li subjekat reaguje na režim lečenja, na osnovu izmerenog broja kopija ili mutacija pronađenih u uzorku u odnosu na one za unapred određeni standard. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, i/ili infekciju. Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog. Dopaminski receptor može biti izabran od DRD2, DRD2S, DRD2L i DRD3. Dopaminski receptor može biti iz porodice dopaminskih receptora sličnih D2. GPCR može biti GPCR klase A. GPCR može biti GPR132, GPR91, MTNR1A, GPR162, GPR137, BAI3, LGR4, PTGIR, CXCR7 ili njihova kombinacija.
[0015] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za skrining potencijalnog terapeutika za stanje. Postupak može da sadrži (i) dovođenje u kontakt najmanje jednog G protein-spregnutog receptora (GPCR) sa test molekulom za koji se sumnja da je terapeutski za neko stanje; (ii) merenje afiniteta vezivanja, interakcije ili prenosa signala GPCR test jedinjenja za GPCR; i (iii) poređenje afiniteta vezivanja, interakcije ili prenosa signala test molekula sa unapred određenim pragom. GPCR modulacija ili modulacija prenosa signala GPCR od strane test molekula uporediva sa ili veća od praga može biti indikativna za terapeutsko sredstvo za stanje, kao što je kancer. Unapred određen prag može biti modulacija GPCR ili modulacija prenosa signala GPCR terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog. GPCR može biti GPCR klase A. GPCR može biti GPR132. GPCR može biti GPR132, GPR91, MTNR1A, GPR162, GPR137, BAI3, LGR4, PTGIR, CXCR7 ili njihova kombinacija. GPCR može biti GPR132. GPCR može biti GPR91. GPCR može biti MTNR1A. GPCR može biti CXCR7.
[0016] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za skrining potencijalnog terapeutika za stanje. Postupak može da sadrži (i) dovođenje u kontakt najmanje jednog dopaminskog receptora sa test molekulom za koji se sumnja da je terapeutski za stanje; (ii) merenje afiniteta vezivanja, interakcije ili prenosa signala test molekula za najmanje jedan dopaminski receptor; i (iii) upoređivanje afiniteta vezivanja ili interakcije test molekula sa unapred određenim pragom. Modulacija dopaminskog receptora od strane test molekula uporediva sa ili veća od praga može biti indikativna za terapijski lek za stanje, kao što je kancer. Dopaminski receptor može biti član porodice dopaminskih receptora sličnih D2. Unapred određen prag može biti modulacija dopaminskog receptora ili prenosa siganala dopaminskog receptora pomoću terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog.
[0017] Ovde su dati postupci za skrining potencijalnog terapeutika za stanje. Uopotrebom procesora, postupak može da sadrži (i) upotrebu računarskog postupka spajanja za modeliranje vezivanja ili interakcije, ako ih ima, jedne ili više 3-dimenzionalnih struktura (konformacija) test molekula za koje se sumnja da su terapeutski za stanje sa 3-dimenzionalnom strukturom ili modelom najmanje jednog dopaminskog receptora; (ii) upotrebom računarskog postupka za procenu afiniteta vezivanja ili interakcije strukture test molekula sa strukturom ili modelom najmanje jednog dopaminskog receptora; i (iii) upotrebom računarskog postupka za upoređivanje afiniteta vezivanja ili interakcije test molekula sa unapred određenim pragom, pri čemu je modulacija dopaminskog receptora od strane test molekula uporediva sa ili veća od praga što je indikativno za terapeutsko sredstvo za stanje, kao što je kancer. Dopaminski receptor može biti član porodice dopaminskih receptora sličnih D2.
[0018] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za lečenje subjekta koji ima stanje. Postupak može da sadrži primenu efikasne količine terapeutskog sredstva koji ciljno deluje na najmanje jedan dopaminski receptor ili G protein-spregnuti receptor (GPCR). Terapeutsko sredstvo može biti neutralizujućo sredstvo, antagonist receptora, agonist receptora, kompetitivni inhibitor receptora u odnosu na dopamin, ili nekompetitivni inhibitor receptora u odnosu na dopamin. Terapeutsko sredstvo može biti selektivno za familiju dopaminskih receptora sličnih D2 u odnosu na familiju dopaminskih receptora sličnih D1. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, i/ili infekciju. Dopaminski receptor može biti član porodice dopaminskih receptora sličnih D2. GPCR može biti GPCR klase A. GPCR može biti GPR132, GPR91, MTNR1A, CXCR7. GPCR može biti GPR132, GPR91, MTNR1A, GPR162, GPR137, BAI3, LGR4, PTGIR, CXCR7 ili njihova kombinacija. Terapeutsko sredstvo može biti monoklonsko antitelo (npr., himerizovano ili humanizovano monoklonsko antitelo), poliklonsko antitelo (npr., himerizovano ili humanizovano poliklonsko antitelo), ili bispecifično antitelo. Terapeutsko sredstvo može biti lek ili aktivno sredstvo, kao što je sredstvo protiv kancera, konjugovano sa antitelom. Terapeutsko sredstvo može biti radioaktivno konjugovano antitelo ili antitelo konjugovano malim molekulima. Terapeutsko sredstvo može biti vektor koji eksprimira rekombinantno antitelo na dopaminski receptor ili GPCR. Terapeutsko sredstvo može biti fuzioni protein ili peptid koji ciljno deluje na dopaminski receptor ili GPCR. Terapeutsko sredstvo može biti siRNK, shRNK ili antisens oligonukleotid koji ciljno deluje na dopaminski receptor ili GPCR. Receptor dopamina ili GPCR može biti ciljno mesto interferencije pomoću CRISPR.
[0019] Ovde su takođe obezbeđeni postupci lečenja i procene efikasnosti lečenja kod subjekta koji ima to stanje. Postupak može da sadrži (i) lečenje subjekta u skladu sa postupkom lečenja koji je ovde opisan (ii) procenu kako je ovde opisana efikasnost lečenja. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov analog. Doza primenjenog terapeutika, učestalost primene jedinjenja (npr. jedinjenje formule (10)), ili oba, se bira ili prilagođava na osnovu nivoa genske ekspresije ili izmerenog broja kopija gena ili pronađenih mutacija.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0020] Gornji kratak opis, kao i sledeći detaljan opis primera izvođenja pronalaska, biće bolje razumljivi kada se čitaju zajedno sa priloženim crtežima. Trebalo bi razumeti, međutim, da pronalazak nije ograničen na precizne rasporede i prikazane instrumente. Na crtežima:
Slika 1. Antagonizam dopaminskih receptora (DRD1, DRD2S, DRD2L, DRD3, DRD4 i DRD5) pomoću ONC201.
Slika 2 ilustruje rastvorljivi prolaktin detektovan pomoću ELISA u perifernoj krvi pacijenata sa uznapredovalim solidnim tumorom na početku i nakon jedne doze ONC201 (PO 125-625 mg). Vremenske tačke za uzorkovanje nakon tretmana uključuju 6 sati, 1, 2, 7 i 21 dan nakon tretmana. Slika 3. Osetljivost tipa tumora kolekcije ćelijskih linija programa Genomska osetljivost na lekove kod kancera (GDSC). Prosečna osetljivost je određena prosečnom procenjenom IC50vrednošću iz testova vijabilnosti ćelija sprovedenih 72 sata posle tretmana. Brojevi iznad trake označavaju broj ćelijskih linija po tipu tumora.
Slika 4. ONC201 je selektivni antagonist DRD2. (A) Agonizam orfana ili poznatih GPCR ili antagonizam poznatih GPCR upotrebom reporterskog testa regrutovanja arestina (10 µM ONC201). (B) Antagonizam dopaminskih receptora stimulisanih ligandom od strane ONC201 upotrebom reporterskog testa regrutovanja arestina. Schild-ova analiza antagonizma DRD2L pomoću ONC201 upotrebom (C) regrutovanja arestina ili (D) reportera modulacije cAMP.
Slika 5. ONC201 antagonizam DRD2 je veoma specifičan među GPCR i drugim ciljnim mestima lekova protiv kancera. (A) Antagonizam GPCR upotrebom reporterskog testa za regrutovanje arestina (10 µM ONC201). Konkurencija antagonizma DRD2L posredovanog preko ONC201 dopaminom u (B) regrutovanju arestina ili (C) reporterima modulacije cAMP. (D) Antagonizam ili agonizam jedarnih hormonskih receptora pomoću ONC201 (2 ili 20 µM) sa testom reportera jedarne translokacije. (E) In vitro inhibicija enzimske aktivnosti kinaze pomoću ONC201 (1 µM). (F) DRD2L antagonistička aktivnost ONC201 ili ONC201 linearnog izomera bez biološke aktivnosti upotrebom reporterskog testa za regrutovanje arestina.
Slika 6. GBM ćelijske linije sa višom ekspresijom DRD2 bolje reaguju na ONC201. (A) Inhibicija NCI60 GBM ćelijskih linija kao funkcija koncentracije ONC201. (B) Log ONC201 GI50(M) naspram ekspresije DRD2 za svaku GBM ćelijsku liniju. R<2>= 0.8707.
Slika 7. ONC201 pokazuje bolju selektivnost među GPCR za DRD2 u poređenju sa drugim antagonistima DRD2, kao što je risperidon.
Slika 8. ONC201 ima veću selektivnost za tumorske ćelije nego antipsihotični antagonist DRD2, tioridazin.
Slika 9. Optimizacija ONC201 inhibicije fluksa DRD2 kalcijuma. HEK-293T ćelije su transfektovane ekspresionim konstruktima za divlji tip DRD2 (A) ili kontrolni GPCR (B). DRD2-specifična inhibicija fluksa kalcijuma je ispitivana pri 0.1 i 1 nM dopamina, za koncentracije ONC201 između 100 pM i 100 µM. 100 µM ONC201 je potpuno inhibirao fluks kalcijuma izazvanog DRD2 dopaminom, ali nije imao efekta na kontrolni GPCR.
Slika 10. Poređenje inhibitora DRD2. DRD2-specifična inhibicija fluksa kalcijuma je ispitivana na 1 nM dopamina, upotrebom inhibitora spiperona (kvadrati), domperidona (trouglovi) i ONC201 (krugovi) u rasponu koncentracija. Podaci za pojedinačne testove su normalizovani upotrebom neinhibitorne vrednosti (prikazano kao 10<-11>M) kao 100% aktivnost.
Slika 11. Identifikacija DRD2 grupa kritičnih za fluks kalcijuma izazvanog dopaminom. (A) Dopaminom indukovani fluks kalcijuma je analiziran kao i ranije na 1 nM dopamina, kroz celu DRD2 biblioteku skeniranja alanina. Podaci predstavljaju prosek tri eksperimenta. Smatralo se da su mutantni klonovi deficitarni za fluks kalcijuma ako su pokazali vrednosti fluksa manje od 2 standardne devijacije ispod prosečne vrednosti fluksa kalcijuma (AV - 2SD) za celu biblioteku. (B) Lokacije identifikovanih 28 mutiranih grupa su naznačene (zelene sfere) na DRD3 kristalnoj strukturi (PDB id 3PBL; Chien, E.Y. et al. (2010) Science 330:1091-5). Antagonist D2R/D3R etikloprid je prikazan kao cijan.
Slika 12. Identifikacija DRD2 grupa kritičnih za ONC201 inhibiciju dopaminom indukovanog fluksa kalcijuma. (A) Dopaminom indukovani fluks kalcijuma je analiziran kao i ranije na 1 nM dopamina, ali u prisustvu 100 µM ONC201, u celoj DRD2 biblioteci za skeniranje alanina. Podaci predstavljaju prosek tri eksperimenta normalizovan na vrednost fluksa sa divljim tipom DRD2 (%WT). Smatralo se da su mutantni klonovi kritični za inhibiciju ONC201 ako su pokazali vrednosti fluksa veće od 2 standardne devijacije iznad prosečne vrednosti fluksa kalcijuma (AV 2SD) za celu biblioteku. (B) Lokacije identifikovanih 8 mutiranih grupa su naznačene (crvene sfere) na DRD3 kristalnoj strukturi.
Slika 13. Referentno jedinjenje, (+) Butaklamol, i test jedinjenje, ONC201 dihidrohlorid, uspešno su bili u kompeticiji za [<3>H]metilspiperon, sa IC50vrednošću od 2.5 nM i 21 µM, respektivno. Slika 14. Kinetičke krive asocijacije za ONC201 dihidrohlorid sa DRD2S receptorom za određivanje Koni Koff.
Slika 15. Aktivnost jedinjenja sa izabranim GPCR i orfan GPCR biosenzorskim testovima. Jedinjenje je testirano u režimu antagonista i agonista sa željenim GPCR i orfan GPCR biosenzorskim testovima. Za testove agonista, podaci su normalizovani na maksimalni i minimalni odgovor primećen u prisustvu kontrolnog liganda i vehikuluma. Za analize antagonista, podaci su normalizovani na maksimalni i minimalni odgovor uočen u prisustvu EC80liganda i vehikuluma.
Korišćene su sledeće EC80koncentracije: CCR4 arestin: 0.0078 µM CCL22; CHRM2 arestin: 26 µM acetilholin; i MC4R arestin: 0.0026 µM Melanotan II.
Slika 16. ONC206 i ONC212 su pokazali efikasnost protiv kancera kod različitih tipova tumora u panelu ćelijske linije NCI60 kancera. ONC203 je neaktivna negativna kontrola
Slika 17. ONC206 je imipridon sa poboljšanim DRD2 antagonizmom. ONC206, analog ONC201, pokazuje bolji antagonizam porodice dopaminskih receptora sličnih D2 i zadržava visoko selektivni antagonizam dopaminskih receptora sličnih D2 u poređenju sa drugim antipsihoticima, kao što je haloperidol.
Slika 18. Kancer kostiju više reaguje na ONC206 nego na ONC201.
Slika 19. Ewing-ov sarkom je podtip kancera kostiju koji najviše reaguje na ONC206.
Slika 20. Efikasnost ONC206 protiv kancera je u nanomolarnom opsegu u 14 od 16 ćelijskih linija Ewing-ovog sarkoma. ONC206 je pokazao bolju efikasnost u poređenju sa ONC201 u svim ćelijskim linijama
Slika 21. Imipridon ONC212 ciljno deluje na orfan GPCR. On je visoko selektivan agonist GPCR tumor supresora orfan GPR132 i ne angažuje DRD2.
Slika 22. ONC212 je izazvao smrt ćelija u ćelijama kancera (HCT116), ali ne i normalnim ćelijama (MRC5) u nanomolarnim koncentracijama.
Slika 23. ONC212 indukuje integrisani odgovor na stres i inhibira Akt/ERK fosforilaciju u nanomolarnim koncentracijama i u ranijim vremenskim tačkama u poređenju sa ONC201.
Slika 24. ONC212 pokazuje oralnu i IP efikasnost protiv kancera u ksenografskim mišjim modelima kolorektalnog kancera i kancera dojke.
Slika 25. Leukemija više reaguje na ONC212 nego na ONC201.
Slika 26. ONC212 pokazuje efikasnost protiv kancera (i bolju efikasnost u poređenju sa ONC201) u nanomolarnom opsegu u 55 ćelijskih linija leukemije bez obzira na podtip.
Slika 27. GPCR su agonizovani ili antagonizovani (>50%) sa 9 testiranih imipridona. Imipridoni selektivno ciljno deluju na GPCR klase A sličnih rodopsinu.
Slika 28. Studija slučaja subjekta sa rekurentnim glioblastomom (Primer 16). (A) Veličina tumora u odnosu na početnu vrednost (%) ukupnog opterećenja tumora kod subjekta. Jedan ciklus je 3 nedelje. (B) Kontrastno MRI skeniranje na početku, 21, 27 i 36 nedelja nakon početka ONC201 jedne od 2 maligne lezije.
Slika 29. ONC212 pokazuje efekte protiv kancera u ćelijskim linijama akutne mijeloidne leukemije (AML). (A) Poređenje vitalnosti ćelija MV411 AML ćelija tretiranih sa ONC212 ili citarabinom. (B) Poređenje vitalnosti ćelija MOLM14, MV411 AML ćelija, MRC5 plućnih fibroblasta i Hs27a ćelija koštane srži tretiranih sa ONC212. (C) Vijabilnost ćelija MOLM14 i MV411 AML ćelija tretiranih sa ONC212 (250 nM) tokom 4, 8, 24, 48, 72 i 96 sati.
Slika 30. Efikasnost ONC212 u modelu ksenotransplantata AML rezistentnog na ONC201 (MV411 AML ćelije (5 × 10<6>) potkožno implantirano u bokove atimičnih golih miševa). ONC212 i ONC201 su primenjivani oralno (PO) kako je naznačeno. Zapremina tumora (A i B) i telesna težina (C) (n=10) merene su naznačenih dana. * predstavlja p < 0.05 u odnosu na vehikulum. Slika 31. Efikasnost ONC206 u modelu ksenotransplantata Ewing-ovog sarkoma (MHH-ES-1 Ewing-ove ćelije sarkoma (5×10<6>) potkožno implantirane u bokove atimičnih golih miševa). ONC206 (PO) i metotreksat (IV) su primenjivani 1. i 13. dana kako je naznačeno. Zapremina tumora (A) i telesna težina (B) (n=4) merene su na naznačene dane.
Slika 32. ONC213 (10 µM) GPCR profil upotrebom testa reportera regrutovanja β-arestina. Slika 33. ONC213 pokazao je in vitro potenciju protiv kancera u ćelijama kancera HCT116/RPMI8226 sličnim ONC212, ali in vitro toksičnost za normalne ćelije je smanjena u poređenju sa ONC212.
Slika 34. ONC237 (10 µM) GPCR profil upotrebom testa reportera regrutovanja β-arestina. Slika 35. ONC236 (10 µM) GPCR profil upotrebom testa reportera regrutovanja β-arestina. Slika 36. ONC234 (10 µM) GPCR profil upotrebom testa reportera regrutovanja β-arestina. Slika 37. ONC201 linearni izomer (TIC-10) (10 µM) GPCR profil upotrebom testa reportera regrutovanja β-arestina.
Slika 38. Broj pogođenih GPCR za nekoliko imipridona.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0021] Naučni i tehnički termini koji se ovde koriste imaju za cilj da imaju značenja koja obično razumeju stručnjaci iz date oblasti tehnike. Takvi termini se nalaze i koriste u kontekstu u raznim standardnim referencama ilustrativno uključujući J. Sambrook and D. W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; 3rd Ed., 2001; F. M. Ausubel, Ed., Short Protocols in Molecular Biology, Current Protocols; 5th Ed., 2002; B. Alberts et al., Molecular Biology of the Cell, 4th Ed., Garland, 2002; D. L. Nelson and M. M. Cox, Lehninger Principles of Biochemistry, 4th Ed., W.H. Freeman & Company, 2004; Engelke, D. R., RNA Interference (RNAi): Nuts and Bolts of RNAi Technology, DNA Press LLC, Eagleville, PA, 2003; Herdewijn, P. (Ed.), Oligonucleotide Synthesis: Methods and Applications, Methods in Molecular Biology, Humana Press, 2004; A. Nagy, M. Gertsenstein, K. Vintersten, R. Behringer, Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual, 3rd edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Dec.15, 2002, ISBN-10: 0879695919; Kursad Turksen (Ed.), Embryonic stem cells: methods and protocols in Methods Mol Biol.2002;185, Humana Press; Current Protocols in Stem Cell Biology, ISBN: 9780470151808, kao i SAD patent br.8,673,923.
[0022] Termin "supstituisan" znači da je bilo koji jedan ili više vodonika na naznačenom atomu zamenjen izborom iz naznačene grupe, pod uslovom da normalna valentnost naznačenog atoma nije prekoračena i da supstitucija rezultira stabilnim jedinjenjem. Kada je supstituent keto (tj. =O), tada se 2 vodonika na atomu zamenjuju. Keto supstituenti nisu prisutni na aromatičnim delovima. Dvostruke veze u prstenu su dvostruke veze koje se formiraju između dva susedna atoma u prstenu (npr. C=C, C=N ili N=N).
[0023] Kada se promenljiva (npr. R<4>) pojavljuje više puta u konstituentu ili formuli za jedinjenje, njegova definicija pri svakom pojavljivanju je nezavisna od njegove definicije pri svakom drugom pojavljivanju. Tako, na primer, ako se pokaže da je grupa supstituisana sa 0-3 R<4>grupe, onda grupa može izborno biti supstituisana sa do tri R<4>grupe i R<4>pri svakom pojavljivanju je izabran nezavisno od definicije R<4>. Takođe, kombinacije supstituenata i/ili promenljivih su dozvoljene, ali samo ako takve kombinacije rezultiraju stabilnim jedinjenjima.
[0024] Kada nakon atoma ili hemijske grupe sledi numerički opseg u nizu (npr. C1-6), biće jasno da ovo treba da obuhvati svaki broj unutar opsega, kao i sve međuopsege. Na primer, „C1-6alkil" značui da obuhvata alkil grupe sa 1, 2, 3, 4, 5, 6, 1-6, 1-5, 1-4, 1-3, 1-2, 2-6, 2-5, 2-4, 2-3, 3-6, 3-5, 3-4, 4-6, 4-5, i 5-6 ugljenika.
[0025] Termin "alkil" uključuje i razgranate i ravnolančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju određeni broj atoma ugljenika. Na primer, C1-6alkil treba da uključuje C1, C2, C3, C4, C5, i C6alkil grupe. Primeri alkila uključuju, ali nisu ograničeni na, metil, etil, n-propil, ipropil, n-butil, izobutil s-butil, t-butil, n-pentil, s-pentil, neopentil i n-heksil. U određenim slučajevima, alkil rzvnolančanog ili razgranatog lanca ima šest ili manje atoma ugljenika u svom osnovnom lancu (npr. C1-C6za ravan lanac, C3-C6za razgranati lanac), a u drugim slučajevima, alkil ravnog ili razgranatog lanca ima četiri ili manje atoma ugljenika. Isto tako, cikloalkili imaju od tri do osam atoma ugljenika u strukturi prstena, a u drugim slučajevima, cikloalkili imaju pet ili šest ugljenika u strukturi prstena. Najpoželjniji je C1-6alkil, posebno etil, metil, izopropil, izobutil, n-pentil, n-heksil i ciklopropilmetil.
[0026] Termin "supstituisani alkil" označava alkil kao što je gore definisan, supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta izabrana od halogena, -OH, alkoksi, -NH2, -N(CH3)2, -C(=O)OH, trifluorometil, -C=N, -C(=O)O(C1-C4)alkil, -C(=O)NH2, -SO2NH2, -C(=NH)NH2, i -NO2, koji poželjno sadrži jedan ili dva supstituenta izabrana od halogena, -OH, alkoksi, -NH2, trifluorometila, -N(CH3)2i -C(=O)OH, poželjnije izabran od halogena, alkoksi i -OH. Primeri supstituisanih alkila uključuju, ali nisu ograničeni na, 2,2-difluoropropil, 2-karboksiciklopentil i 3-hloropropil.
[0027] Osim ako je broj ugljenika drugačije specificiran, "niži alkil" je alkil grupa, kao što je gore definisana, ali ima od jednog do šest atoma ugljenika, poželjno jedan do četiri, u svojoj strukturi osnovnog lanca. "Niži alkenil" i "niži alkinil" imaju dužinu lanca od 2-6 atoma ugljenika i poželjno 2-4 atoma ugljenika.
[0028] "Alkenil" uključuje nezasićene alifatične grupe analogne po dužini i mogućoj supstituciji za alkile opisane iznad, ali koje sadrže najmanje jednu dvostruku vezu. Na primer, termin "alkenil" uključuje alkenil grupe ravnog lanca (npr. etenil, propenil, butenil, pentenil, heksenil, heptenil, oktenil, nonenil, decenil), alkenil grupe razgranatog lanca, cikloalkenil (npr. aliciklične) grupe (npr. ciklopropenil, ciklopentenil, cikloheksenil, cikloheptenil, ciklooktenil), alkil ili alkenil supstituisane cikloalkenil grupe i cikloalkil ili cikloalkenil supstituisane alkenil grupe. U određenim slučajevima, alkenil grupa ravnog ili razgranatog lanca ima šest ili manje atoma ugljenika u svom osnovnom lancu (npr., C2-C6za ravan lanac, C3-C6za razgranati lanac). Slično, cikloalkenil grupe mogu imati od tri do osam atoma ugljenika u svojoj strukturi prstena, a u nekim primerima izvođenja, cikloalkenil grupe imaju pet ili šest ugljenika u strukturi prstena. Termin „C2-C6" uključuje alkenil grupe koje sadrže dva do šest atoma ugljenika. Termin "C3-C6" uključuje alkenil grupe koje sadrže tri do šest atoma ugljenika.
[0029] "Alkinil" uključuje nezasićene alifatične grupe analogne po dužini i mogućoj supstituciji za alkile opisane iznad, ali koje sadrže najmanje jednu trostruku vezu. Na primer, "alkinil" uključuje alkinil grupe ravnog lanca (npr. etinil, propinil, butinil, pentinil, heksinil, heptinil, oktinil, noninil, decinil), alkinil grupe razgranatog lanca i cikloalkil ili cikloalkenil supstituisane alkinil grupe. U određenim primerima izvođenja, alkinil grupa ravnog ili razgranatog lanca ima šest ili manje atoma ugljenika u svom osnovnom lancu (npr. C2-C6za ravan lanac, C3-C6za razgranati lanac). Termin „C2-C6" uključuje alkinil grupe koje sadrže dva do šest atoma ugljenika. Termin "C3-C6" uključuje alkinil grupe koje sadrže tri do šest atoma ugljenika.
[0030] Termin "cikloalkil" se odnosi na monociklični ili policiklični nearomatični radikal, pri čemu, svaki od atoma koji formiraju prsten (tj. skeletni atomi) je atom ugljenika. U nekim slučajevima, cikloalkil grupa je zasićena ili delimično nezasićena. U drugim slučajevima, cikloalkil grupa je fuzionisana sa aromatičnim prstenom. Cikloalkil grupe uključuju grupe sa od 3 do 10 atoma u prstenu. Primeri cikloalkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, sledeće grupe:
[0031] Monociklični cikloalkili uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i ciklooktil. Diciklični cikloalkili uključuju, ali nisu ograničeni na, tetrahidronaftil, indanil i tetrahidropentalen. Policiklični cikloalkili uključuju adamantin i norbornan. Termin cikloalkil uključuje "nezasićene nearomatične karbociklil" ili "nearomatične nezasićene karbociklil" grupe, od kojih se obe odnose na nearomatični karbociklus kao što je ovde definisan, koji sadrži najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu ili jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu.
[0032] Termin "cikloalkilalkil" se odnosi na alkil grupu supstituisanu cikloalkil grupom. Primeri cikloalkilalkil grupa uključuju ciklopropilalkil, cikloheksilalkil.
[0033] Termin "heterocikloalkil" se odnosi na nearomatični heterociklus, pri čemu, jedan ili više atoma koji formiraju prsten su heteroatom kao što je O, N ili S atom. Heterocikloalkil grupe uključuju mono- ili policiklične (npr. sa 2, 3 ili 4 fuzionisana prstena) sisteme prstena, kao i spirocikluse. Primeri heterocikloalkil grupa uključuju morfolino, tiomorfolino, piperazinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, 2,3-dihidrobenzofuril, 1,3-benzodioksol, benzo-1,4-dioksan, piperidinil, pirolidinil, izoksazolidinil, izotiazolidinil, pirazolidinil, oksazolidinil, tiazolidinil i imidazolidinil. Takođe uključeni u definiciju heterocikloalkila mogu biti grupe koje imaju jedan ili više aromatičnih prstenova fuzionisanih (tj. imaju zajedničku vezu sa) za nearomatični heterociklični prsten, na primer hinolil, izohinolil i benzo derivate heterociklusa. Heterocikloalkil grupa koja ima jedan ili više kondenzovanih aromatičnih prstenova je vezana ili preko aromatičnog ili ne-aromatičnog dela. Takođe su uključeni u definiciju heterocikloalkila su grupe u kojima jedan ili više atoma koji formiraju prsten mogu biti supstituisani sa 1 ili 2 okso ili sulfido grupe. U nekim slučajevima, heterocikloalkil grupa ima od 1 do oko 20 atoma ugljenika, a u dodatnom slučaju od oko 3 do oko 20 atoma ugljenika. U nekim slučajevima, heterocikloalkil grupa sadrži 3 do oko 20, 3 do oko 14, 3 do oko 7 ili 5 do 6 atoma koji formiraju prsten. U nekim slučajevima, heterocikloalkil grupa ima 1 do oko 4, 1 do oko 3 ili 1 do 2 heteroatoma. U nekim slučajevima, heterocikloalkil grupa sadrži 0 do 3 dvostruke veze. U nekim slučajevima, heterocikloalkil grupa sadrži 0 do 2 trostruke veze.
[0034] Termin "heterocikloalkilalkil" se odnosi na alkil grupu supstituisanu heterocikloalkilom. Primeri heterocikloalkilalkila uključuju morfolinoalkil i piperazinilalkil.
[0035] Termin "aril" se odnosi na monociklične ili policiklične (npr., koji imaju 2, 3 ili 4 kondenzovana prstena) aromatične ugljovodonike kao što su fenil, naftil, antracenil, fenantrenil. U nekim slučajevima, aril grupa ima od 6 do oko 20 atoma ugljenika.
[0036] Termin "arilalkil" se odnosi na alkil grupu supstituisanu aril grupom. Primeri arilalkil grupa uključuju benzil i feniletil.
[0037] Termin "heteroaril" se odnosi na aromatični heterociklus koji ima najmanje jedan heteroatomski član prstena kao što je O, S ili N atom. Heteroaril grupe uključuju monociklične i policiklične (npr. sa 2, 3 ili 4 fuzionisana prstena) sisteme. N atom koji formira prsten u heteroaril grupi takođe može biti oksidovan da bi se formirao N-okso grupa. Primeri heteroaril grupa uključuju piridil, N-oksopiridil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, triazinil, furil, hinolil, izohinolil, tienil, imidazolil, tiazolil, indolil, piril, oksazolil, benzofuril, benzotienil, benzotiazolil, izoksazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, indazolil, 1,2,4-tiadiazolil, izotiazolil, benzotienil, purinil, karbazolil, benzimidazolil, indolinil. U nekim slučajevima, heteroaril grupa ima od 1 do oko 20 atoma ugljenika, a u dodatnim slučajevima od oko 3 do 20 atoma ugljenika. U nekim slučajevima, heteroaril grupa sadrži 3 do oko 14, 3 do oko 7 ili 5-6 atoma koji formiraju prsten. U nekim slučajevima, heteroaril grupa ima 1 do oko 4, 1 do oko 3 ili 1-2 heteroatoma.
[0038] "Heteroarilalkil" grupa se odnosi na alkil grupu supstituisanu heteroaril grupom. Primer heteroarilalkil grupe je piridilmetil.
[0039] Termini "halo" ili "halogen" odnose se na atom fluora (F), hlora (Cl), broma (Br) ili joda (I); poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl. Termin "perhalogenizovan" se odnosi na grupu gde su svi vodonici zamenjeni halogenima. Termin "haloalkil" se odnosi na alkil delove sa halogenom koji zamenjuje vodonik na jednom ili više ugljenika ugljovodoničnog osnovnog lanca. C1-C6haloalkil uključuje alkil ravnog ili razgranatog lanca sa šest ili manje atoma ugljenika u osnovnom lancu i halogen koji zamenjuje vodonik na jednom ili više ugljenika u osnovnom lancu.
[0040] Termin "alkoksi" ili "alkoksil" uključuje supstituisane i nesupstituisane alkil, alkenil i alkinil grupe kovalentno vezane za atom kiseonika. C1-C6alkoksi se odnosi na grupe koji imaju šest ili manje atoma ugljenika u ugljovodoničnom kičmi. Primeri alkoksi grupa (ili alkoksil radikala) uključuju metoksi, etoksi, izopropiloksi, propoksi, butoksi i pentoksi grupe. Poželjni su (C1-C3) alkoksi, posebno etoksi i metoksi. Primeri supstituisanih alkoksi grupa uključuju halogenovane alkoksi grupe.
[0041] Termin "hidroksi" ili "hidroksil" uključuje grupe sa -OH ili -O-.
[0042] Termin "farmaceutski prihvatljive soli" odnosi se na derivate jedinjenja gde je matično jedinjenje modifikovano konvertovanjem postojeće kiselinske ili bazne grupe u njen oblik soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali nisu ograničeni na, soli mineralnih ili organskih kiselina baznih grupa kao što su amini; alkalije ili organske soli kiselih grupa kao što su karboksilne kiseline. Farmaceutski prihvatljive soli obuhvataju konvencionalne netoksične soli matičnog jedinjenja formirane, na primer, od netoksičnih neorganskih ili organskih kiselina. Farmaceutski prihvatljive soli mogu se sintetisati iz matičnog jedinjenja koje sadrži baznu ili kiselu grupu konvencionalnim hemijskim postupcima. Generalno, takve soli se mogu dobiti reakcijom slobodne kiseline ili baznog oblika ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u smeši ova dva; generalno, poželjni su nevodeni medijumi kao što su etar, etil acetat, etanol, izopropanol ili acetonitril. Liste pogodnih soli mogu se naći u Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, p. 1418, Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977), i P. H. Stahl and C.
G. Wermuth, editors, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, 2nd Revised edition, Weinheim/Zürich:Wiley-VCH/VHCA (2011).
[0043] Primeri pogodnih neorganskih kiselina uključuju hlorovodoničnu kiselinu, sumpornu kiselinu, fosfornu kiselinu ili bromovodončnu kiselinu, dok primeri pogodnih organskih kiselina uključuju karboksilnu kiselinu, sulfo kiselinu ili sulfonsku kiselinu, kao što su sirćetna kiselina, vinska kiselina, mlečna kiselina, propionska kiselina, glikolna kiselina, malonska kiselina, fumarna kiselina, taninska kiselina, ćilibarna kiselina, alginska kiselina, benzojeva kiselina, 2-fenoksibenzojeva kiselina, 2-acetoksibenzojeva kiselina, cimetna kiselina, bademova kiselina, limunska kiselina, maleinska kiselina, salicilna kiselina, trifluorosirćetna kiselina, 3-aminosalicilna kiselina, askorbinska kiselina, embonska kiselina, nikotinska kiselina, izonikotinska kiselina, oksalna kiselina, glukonska kiselina, aminokiseline, metansulsfonska kiselina, etansulfonska kiselina, 2-hidroksietansulfonska kiselina, etan-1,2-disulfonska kiselina, benzensulfonska kiselina, 4-metilbenzensulfonska kiselina ili naftalen-2-sulfonska kiselina. Primeri pogodnih neorganskih baza uključuju natrijum hidroksid, kalijum hidroksid i amonijak, dok primeri pogodnih organskih baza uključuju amine, npr. tercijarne amine, kao što su trimetilamin, trietilamin, piridin, N,N-dimetilanilin, hinolin, izohinolin, α-pikolin, β-pikolin, γpikolin, kinaldin ili pirimidin.
[0044] Termin "antitelo" obuhvata strukturu koja čini prirodni biološki oblik antitela. Kod većine sisara, uključujući ljude i miševe, ovaj oblik je tetramer i sastoji se od dva identična para dva lanca imunoglobulina, pri čemu svaki par ima jedan laki i jedan teški lanac, pri čemu svaki laki lanac sadrži imunoglobulinske domene VLi CLi svaki teški lanac sadrži imunoglobulinske domene VH, Cγ1, Cγ2 i Cγ3. U svakom paru, varijabilni regioni lakog i teškog lanca (VLi VH) su zajedno odgovorni za vezivanje za antigen, a konstantni regioni (CL, Cγ1, Cγ2 i Cγ3, posebno Cγ2 i Cγ3) su odgovorni za efektorske funkcije antitela. Kod nekih sisara, na primer kod kamila i lama, antitela pune dužine mogu se sastojati od samo dva teška lanca, od kojih svaki teški lanac sadrži imunoglobulinske domene VH, Cγ2 i Cγ3. Pod "imunoglobulinom (Ig)" ovde se podrazumeva protein koji se sastoji od jednog ili više polipeptida koji su u suštini kodirani imunoglobulinskim genima. Imunoglobulini uključuju, ali nisu ograničeni na antitela. Imunoglobulini mogu imati brojne strukturne oblike, uključujući antitela pune dužine, fragmente antitela i pojedinačne domene imunoglobulina uključujući VH, Cγ1, Cγ2, Cγ3, VL, i CL.
[0045] Na osnovu aminokiselinske sekvence konstantnog domena teškog lanca, intaktna antitela se mogu dodeliti različitim „klasama“. Postoji pet glavnih klasa (izotipova) intaktnih antitela: IgA, IgD, IgE, IgG i IgM, a nekoliko od njih se može dalje podeliti na „podklase“, na primer, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgA2. Konstantni domeni teškog lanca koji odgovaraju različitim klasama antitela nazivaju se alfa, delta, epsilon, gama i mu, respektivno. Strukture podjedinica i trodimenzionalne konfiguracije različitih klasa imunoglobulina su dobro poznate stručnjacima.
[0046] Termini „antitelo“ ili „fragment koji se vezuje za antigen“, respektivno, odnose se na intaktne molekule kao i na njihove funkcionalne fragmente, kao što je Fab, scFv-Fc bivalentni molekul, F(ab')2, i Fv koji su sposobni za specifičnu interakciju sa željenim ciljnim mestom. U nekim slučajevima, fragmenti koji se vezuju za antigen sadrže:
(1) Fab, fragment koji sadrži monovalentni antigen-vezujući fragment molekula antitela, koji se može proizvesti digestijom celog antitela sa enzimom papainom da bi se dobio intaktni laki lanac i deo jednog teškog lanca;
(2) Fab', fragment molekula antitela koji se može dobiti tretiranjem celog antitela pepsinom, nakon čega sledi redukcija, da bi se dobio intaktni laki lanac i deo teškog lanca; dva Fab' fragmenta se dobijaju po molekulu antitela;
(3) (Fab')2, fragment antitela koji se može dobiti tretiranjem celog antitela enzimom pepsinom bez naknadne redukcije; F(ab')2 je dimer dva Fab' fragmenta koji se drže zajedno sa dve disulfidne veze;
(4) Fv, genetski modifikovan fragment koji sadrži varijabilni region lakog lanca i varijabilni region teškog lanca eksprimiran kao dva lanca;
(5) Jednolančano antitelo („SCA“), genetski modifikovan molekul koji sadrži varijabilni region lakog lanca i varijabilni region teškog lanca, povezan odgovarajućim polipeptidnim linkerom kao genetski fuzionisani jednolančani molekul; i
(6) scFv-Fc, proizvodi se spajanjem jednolančanog Fv (scFv) sa zglobnim regionom iz imunoglobulina (Ig) kao što je IgG i Fc regiona.
[0047] Ovde je takođe obezbeđeno monoklonsko antitelo. Ovde je takođe obezbeđen jednolančani Fv (scFv), dijatelo, tandem scFv, scFv-Fc bivalentni molekul, Fab, Fab', Fv, F(ab')2ili skela za vezivanje antigena (npr., afitelo, monotelo, antikalin, DARPin, knotin).
[0048] Termin "vezuje", "vezujući" ili gramatički ekvivalenti, odnose se na kompozicije, direktno ili indirektno, koje imaju afinitet jedna prema drugoj. "Specifično vezivanje" je mesto gde je vezivanje selektivno između dva molekula. Poseban primer specifičnog vezivanja javlja se između antitela i antigena. Tipično, specifično vezivanje se može razlikovati od nespecifičnog kada je konstanta disocijacije (KD) manja od oko 1×10<-5>M ili manja od oko 1×10<-6>M ili 1×10<-7>M. Specifično vezivanje se može detektovati, na primer, pomoću ELISA, imunoprecipitacije, koprecipitacije, sa ili bez hemijskog unakrsnog vezivanja, i dvo-hibridnim testovima. Odgovarajuće kontrole se mogu koristiti za razlikovanje "specifičnog" i "nespecifičnog" vezivanja. „Afinitet“ je jačina interakcije vezivanja dva molekula, kao što je antigen i njegovo antitelo, koji je definisan za antitela i druge molekule sa više od jednog mesta vezivanja kao jačina vezivanja liganda na jednom određenom mestu vezivanja. Iako nekovalentno vezivanje liganda za antitelo ili drugi molekul obično nije tako snažno kao kovalentno vezivanje, „visoki afinitet“ je za ligand koji se vezuje za antitelo ili drugi molekul koji ima konstantu afiniteta (Ka) veću od 10<4>M<-1>, obično 10<5>-10<11>M<-1>; kako je određeno pomoću inhibicione ELISA ili ekvivalentnim afinitetom utvrđenim uporedivim tehnikama, kao što su Scatchard dijagrami ili upotrebom Kd/konstante disocijacije, koja je recipročna vrednost Ka.
[0049] Termin "selektivni" u odnosu na vezivanje, inhibiciju, stimulaciju ili modulaciju označava preferencijalno vezivanje, inhibiciju, stimulaciju ili modulaciju, respektivno, prve aktivnosti u odnosu na drugu aktivnost (npr. preferencijalno vezivanje jednog receptora za drugi receptor; preferencijalna inhibicija u odnosu na druge receptore; ili preferencijalna inhibicija mutanta prema divljem tipu ili obrnuto). U nekim slučajevima, vezivanje je više od dva puta selektivnije, više od pet puta selektivnije, više od deset puta selektivnije, više od pedeset puta selektivnije, više od 100 puta selektivnije ili više od 1000 puta selektivnije za željeno molekularno ciljno mesto ili put u odnosu na neželjeno molekularno ciljno mesto ili put. U nekim slučajevima, jedinjenje će vezati prvo molekularno ciljno mesto ili uticati na put najmanje 2 puta, najmanje 5 puta, najmanje 10 puta, najmanje 20 puta, najmanje 50 puta, najmanje 100 puta više u odnosu na drugo ciljno mesto ili put pod istim uslovima. Biće jasno da vezivanje za D2-sličnu familiju dopaminskih receptora ili njihovog člana, može biti selektivno u odnosu na D1-sličnu familiju dopaminskih receptora ili njenog člana u bilo kojoj od prethodnih količina. In vitro ili in vivo aktivnost molekularnog ciljnog mesta ili puta može se meriti bilo kojim pogodnim ponovljivim sredstvima.
[0050] Termin "modulacija" se odnosi na "stimulisanje" ili "inhibiranje" aktivnosti molekularnog ciljnog mesta ili puta. Na primer, kompozicija modulira aktivnost molekularnog ciljnog mesta ili puta ako stimuliše ili inhibira aktivnost tog ciljnog mesta ili puta za najmanje 10%, za najmanje oko 20%, za najmanje oko 25%, za najmanje oko 30%, za najmanje oko 40%, za najmanje oko 50%, za najmanje oko 60%, za najmanje oko 70%, za najmanje oko 75%, za najmanje oko 80%, za najmanje oko 90%, za najmanje oko 95%, najmanje oko 98% ili za najmanje oko 99%, ili više u odnosu na aktivnost tog molekularnog ciljnog mesta ili puta pod istim uslovima, ali bez samo prisustva kompozicije. U sledećem primeru, kompozicija modulira aktivnost molekularnog ciljnog mesta ili puta ako stimuliše ili inhibira aktivnost tog ciljnog mesta ili puta najmanje 2 puta, najmanje 5 puta, najmanje 10 puta, najmanje 20 puta, najmanje 50 puta, najmanje 100 puta u odnosu na aktivnost tog ciljnog mesta ili puta pod istim uslovima, ali bez prisustva kompozicije. Aktivnost molekularnog ciljnog mesta ili puta može se meriti na bilo koji ponovljiv način. Na primer, može se meriti aktivnost molekularnog ciljnog mesta ili puta in vitro ili in vivo pomoću odgovarajućeg testa poznatog u tehnici za merenje aktivnosti. Kontrolnim uzorcima (netretiranim kompozicijom) može se dodeliti relativna vrednost aktivnosti od 100%.
[0051] Antitelo, fragment koji se vezuje za antigen ili obeleživač afiniteta mogu da vežu svoje ciljno mesto sa KDod 0.1 nM - 10 mM, 0.1 nM - 1 mM, ili u opsegu od 0.1 nM. Antitelo, fragment koji se vezuje za antigen ili obeleživač afiniteta mogu da vežu svoje ciljno mesto sa KDod 0.1-2 nM, 0.1-1 nM, 0.05-1 nM, 0.1-0.5 nM ili 0.1-0.2 nM. Antitelo, fragment koji se vezuje za antigen ili obeleživač afiniteta može da veže svoje ciljno mesto direktno ili indirektno, na primer, vezujući se kao sekundarno antitelo koje se vezuje za antitelo vezano za ciljno mesto.
[0052] Reč "obeleživač" se odnosi na jedinjenje ili kompoziciju koja je konjugovana ili fuzionisana direktno ili indirektno sa reagensom kao što je proba nukleinske kiseline ili antitelo i olakšava detekciju reagensa na koji je konjugovan ili fuzionisan. Obeleživač može sam po sebi da se detektuje (npr. radioizotopski ili fluorescentni obeleživači) ili, u slučaju enzimskog obeleživača, može da katalizuje hemijsku promenu jedinjenja ili kompozicije supstrata, što se može detektovati.
[0053] Termin "proba" se odnosi na sintetičke ili biološki proizvedene nukleinske kiseline koje sadrže specifične nukleotidne sekvence koje se hibridizuju pod strogim uslovima sa ciljnim sekvencama nukleinskih kiselina. Termini "obeležena proba", "proba nukleinske kiseline koja je operativno povezana sa obeleživačem koji se može detektovati" ili "lanac nukleinske kiseline koji je operativno vezan za detektabilni obeleživač" odnose se na probu koja je pripremljena sa markerom ili "obeleživačem koji se može detektovati" za detekciju. Markerska grupa je vezana ili na 5' kraju, 3' kraju, iznutra, ili u njihovoj kombinaciji. To jest, jedna proba može biti vezana za višestruke markerske grupe. Poželjna grupa je identifikacioni obeleživač kao što je fluorofor. Obeležena proba može takođe da sadrži mnoštvo različitih sekvenci nukleinskih kiselina, svaka obeležena jednim ili više markerskih grupa. Svaka markerska grupa može biti ista ili različita. Možda bi bilo korisno obeležiti različite probe (npr., sekvence nukleinske kiseline) svaku sa različitom markerskom grupom. Ovo se može postići tako što se na svakoj probi nalazi jedna grupa koja se može razlikovati. Na primer, proba A je vezana za grupu X, a proba B je vezana za grupu Y. Alternativno, proba A je vezana za grupe X i Y, dok je proba B vezana za grupu Z i W. Alternativno, proba A je vezana za grupe X i Y, dok je proba B vezana za grupe Y i Z. Sve probe „A“ i „B“ iznad bi bile prepoznatljive i jedinstveno obeležene.
[0054] Pod "uzorkom tkiva" se podrazumeva kolekcija sličnih ćelija dobijenih iz tkiva subjekta ili pacijenta, poželjno koje sadrži ćelije sa jedrom sa hromozomskim materijalom. Četiri glavna humana tkiva su (1) epitel; (2) vezivna tkiva, uključujući krvne sudove, kosti i hrskavicu; (3) mišićno tkivo; i (4) nervno tkivo. Izvor uzorka tkiva može biti čvrsto tkivo iz svežeg, zamrznutog i/ili očuvanog uzorka organa ili tkiva ili biopsije ili aspirata; krvi ili njenog sastojaka; telesnih tečnosti kao što je cerebrospinalna tečnost, amnionska tečnost, peritonealna tečnost ili intersticijska tečnost; ćelije iz perioda gestacije ili razvoja subjekta. Uzorak tkiva mogu biti primarne ili kultivisane ćelije ili ćelijske linije. Uzorak tkiva može da sadrži jedinjenja koja nisu prirodno pomešana sa tkivom u prirodi, kao što su konzervansi, antikoagulansi, puferi, fiksativi, hranljivi sastojci ili antibiotici. Pod „isečkom“ uzorka tkiva podrazumeva se jedan deo ili deo uzorka tkiva, npr., tanak deo tkiva ili ćelija isečen iz uzorka tkiva. Može se uzeti više delova uzoraka tkiva i podvrgnuti analizi. „Ćelijska linija“ se odnosi na trajno uspostavljenu ćelijsku kulturu koja će se razmnožavati dajući odgovarajući svež medijum i prostor.
Postupci detekcije
[0055] Ovde su dati postupci detekcije ili merenja ciljnog receptora (npr., dopaminskog receptora ili GPCR) u biološkom uzorku. Ciljna mesta se detektuju dovođenjem u kontakt uzorka sa reagensom za detekciju ciljnog mesta, npr., antitelo ili njegov fragment i reagens za obeležavanje. Prisustvo ili odsustvo ciljnog mesta se detektuje prisustvom ili odsustvom reagensa za obeležavanje. U nekim slučajevima, uzorak se dovodi u kontakt sa detekcijom ciljnog mesta i reagensima za obeležavanje istovremeno npr., reagens za detekciju je primarno antitelo, a reagens za obeležavanje je fluorescentna boja konjugovana sa njim. Alternativno, biološki uzorak stupa u kontakt sa reagensima za detekciju i obeležavanje ciljnog mesta uzastopno, npr., reagens za detekciju je primarno antitelo, a reagens za obeležavanje uključuje sekundarno antitelo. Na primer, uzorak se inkubira sa reagensom za detekciju, u nekim slučajevima zajedno sa reagensom za obeležavanje, pod uslovima koji dozvoljavaju formiranje kompleksa između reagensa za detekciju (i reagensa za obeležavanje) i ciljnog mesta. Nakon formiranja kompleksa, uzorak se izborno ispere jednom ili više puta da bi se uklonio nevezani reagens za detekciju (i reagens za obeležavanje). Kada se uzorak dodatno dovede u kontakt sa reagensom za obeležavanje koji specifično vezuje reagens za detekciju vezan za ciljno mesto, uzorak se izborno može isprati jednom ili više puta da bi se uklonio nevezani reagens za obeležavanje. Prisustvo ili odsustvo ciljnog mesta u uzorku se zatim utvrđuje detekcijom reagensa za obeležavanje.
[0056] Postupci opisani ovde omogućavaju detekciju više ciljnih mesta u uzorku. Više ciljnih mesta se identifikuje kontaktom biološkog uzorka sa dodatnim reagensima za detekciju, nakon čega sledi dodatni reagens za obeležavanje koji je specifičan za dodatne reagense za detekciju upotrebom opisanih postupaka.
[0057] Detekciona grupa, tj. obeleživač koji se može detektovati, je supstanca koja se koristi da olakša identifikaciju i/ili kvantitativno određivanje ciljnog mesta. Detekciona grupe se direktno posmatraju ili mere ili indirektno posmatraju ili mere. Detekcione grupe uključuju, ali nisu ograničeni na, radioaktivne obeleživače koje se mogu meriti uređajima za merenje zračenja; pigmenti, boje ili drugi hromogeni koji se mogu vizuelno posmatrati ili meriti spektrofotometrom; spin obeleživači koji se mogu meriti pomoću analizatora spin obeleživača; i fluorescentne grupe, gde se izlazni signal generiše ekscitacijom odgovarajućeg molekularnog adukta i koji se može vizuelizovati ekscitacijom svetlošću koju boja apsorbuje ili se može meriti standardnim fluorometrima ili sistemima za snimanje. Detekciona grupa može biti luminiscentna supstanca kao što je fosfor ili fluorogen; bioluminiscentna supstanca; hemiluminiscentna supstanca, gde se izlazni signal generiše hemijskom modifikacijom signalnog jedinjenja; supstanca koja sadrži metal; ili enzim, gde se javlja sekundarna generacija signala zavisna od enzima, kao što je formiranje obojenog proizvoda iz bezbojnog supstrata. Detekciona grupa takođe može imati oblik hemijske ili biohemijske, ili inertne čestice, uključujući koloidno zlato, mikrosfere, kvantne tačke ili neorganske kristale kao što su nanokristali ili fosfori. Termin detekciona grupa ili detektabilni obeleživač se takođe može odnositi na "obeleživač" ili hapten koji se može selektivno vezati za obeleženi molekul tako da se obeleženi molekul, kada se naknadno doda, koristi za generisanje detektabilnog signala. Na primer, može se koristiti biotin, iminobiotin ili destiobiotin kao obeleživač, a zatim koristiti avidin ili streptavidin konjugat peroksidaze rena (HRP) da se veže za obeleživač, a zatim koristiti hromogeni supstrat (npr. za otkrivanje prisustva HRP. Slično, obeleživač može biti hapten ili antigen (npr. digoksigenin), a enzimski, fluorescentno ili radioaktivno obeleženo antitelo se može koristiti za vezivanje za obeleživač. Stručnjacima su poznati brojni obeleživači i uključuju, ali nisu ograničeni na, čestice, fluorescentne boje, haptene, enzime i njihove hromogene, fluorogene i hemiluminiscentne supstrate.
[0058] Fluorofor je hemijska grupa koja pokazuje maksimum apsorpcije preko 280 nm, i kada je kovalentno vezan u reagens za obeležavanje, zadržava svoja spektralna svojstva. Fluorofori uključuju piren, antracen, naftalen, akridin, stilben, indol ili benzindol, oksazol ili benzoksazol, tiazol ili benzotiazol, porfirin, cijanin, perilen, 4-amino-7-nitrobenz-2-oksa-1,3-diazol (NBD), karbocijanin, karbostiril, salicilat, antranilat, azulen, piridin, hinolin, borapoliazaindacen, ksanten, oksazin ili benzoksazin, karbazin, fenalenon, kumarin, benzofuran i benzfenalenon i njihovi derivati. Oksazini uključuju rezorufine, aminooksazinone, diaminooksazine i njihove benzosupstituisane analoge.
[0059] Kada je fluorofor ksanten, fluorofor može biti fluorescein, rodol ili rodamin. Fluorescein uključuje benzo- ili dibenzofluoresceine, seminaftofluoresceine ili naftofluoresceine. Slično, rodol uključuje seminaftorodafluore. Alternativno, fluorofor je ksanten koji je vezan preko jedne kovalentne veze na poziciji 9 ksantena. Poželjni ksanteni uključuju derivate 3H-ksanten-6-ol-3-ona, derivate 6-amino-3H-ksanten-3-ona ili derivate 6-amino-3H-ksanten-3-imina. Fluorofori uključuju ksanten (rodol, rodamin, fluorescein i njihove derivate), kumarin, cijanin, piren, oksazin i borapoliazaindacen. Pored toga, fluorofor može biti sulfonirani ksanteni, fluorovani ksanteni, sulfonirani kumarini, fluorovani kumarini i sulfonirani cijanini. Izbor fluorofora u reagensu za obeležavanje će odrediti svojstva apsorpcije i emisije fluorescencije reagensa za obeležavanje. Fizička svojstva obeleživača fluorofora uključuju spektralne karakteristike (apsorpcija, emisija i stokes pomeranje), intenzitet fluorescencije, životni vek, polarizaciju i brzinu beljenja na svetlosti, mogu se koristiti za razlikovanje jednog fluorofora od drugog.
[0060] Tipično, fluorofor sadrži jedan ili više aromatičnih ili heteroaromatičnih prstenova koji su izborno supstituisani sa jednim ili više različitih supstituenata, uključujući halogen, nitro, cijano, alkil, perfluoroalkil, alkoksi, alkenil, alkinil, cikloalkil, arilalkil, acil, aril ili heteroaril sistem prstena, benzo ili druge supstituente tipično prisutne na fluoroforima poznatim u tehnici.
[0061] Poželjno, grupa za detekciju je fluorescentna boja. Fluorescentne boje uključuju, na primer, fluorescein, rodamin, teksas crvenu, Cy2, Cy3, Cy5, Cy0, Cy0.5, Cy1, Cy1.5, Cy3.5, Cy7, VECTOR Red, ELF<™>(enzimski-obeležena fluorescencija), FluorX, kalcein, kalcein-AM, CRYPTOFLUOR<™>'S, narandžastu (42 kDa), tangerinu (35 kDa), zlatnu (31 kDa), crvenu (42 kDa), Crimson (40 kDa), BHMP, BHDMAP, Br-Oregon, Lucifer žutu, Alexa porodicu boja, N-(6-(7-nitrobenz-2-oksa-1,3-diazol-4-il)amino)kaproil) (NBD), BODIPY<™>, bor dipirometen difluorid, Oregon zelenu, MITOTRACKER<™>crvenu, DiOC7 (3), DiIC18, fikoeritrin, fikobiliproteine BPE (240 kDa) RPE (240 kDa) CPC (264 kDa) APC (104 kDa), spektar plave, spektar vode, spektar zelene, spektar zlatne, spektar narandžaste, spektar crvene, NADH, NADPH, FAD, Infra-crvene (IR) boje, cikličnu GDP-ribozu (cGDPR), kalcofluor belu, tirozin i triptofan. Mnogi fluorofori takođe mogu da funkcionišu kao hromofori i stoga su takođe poželjni hromofori.
[0062] Pored fluorofora, enzimi se takođe koriste kao grupe koje se mogu detektovati. Enzimi su poželjne grupe koje se mogu detektovati jer se može postići pojačanje detektabilnog signala što rezultira povećanom osetljivošću testa. Sam enzim ne proizvodi odgovor koji se može detektovati, ali razgrađuje supstrat kada dođe u kontakt sa odgovarajućim supstratom tako da konvertovani supstrat proizvodi fluorescentni, kolorimetrijski ili luminiscentni signal. Enzimi pojačavaju signal koji se može detektovati jer jedan enzim na reagensu za obeležavanje može dovesti do toga da se više supstrata pretvori u signal koji se može detektovati. Ovo je korisno kada je u uzorku prisutna mala količina ciljnog mesta ili ne postoji fluorofor koji bi dao uporediv ili jači signal od enzima. Međutim, fluorofori su poželjniji jer ne zahtevaju dodatne korake analize, i na taj način smanjuju ukupno vreme za završetak testa. Enzimski supstrat se bira tako da se dobije poželjan merljivi proizvod, npr. kolorimetrijski, fluorescentni ili hemiluminiscencijski. Takvi supstrati se ekstenzivno koriste u tehnici.
[0063] Poželjna kolorimetrijska ili fluorogena kombinacija supstrata i enzima koristi oksidoreduktaze kao što je peroksidaza rena i supstrat kao što su 3,3'-diaminobenzidin (DAB) i 3-amino-9-etilkarbazol-e (AEC), koji daju prepoznatljivu boju (braon i crvenu, respektivno). Drugi kolorimetrijski supstrati oksidoreduktaze koji daju proizvode koji se mogu detektovati uključuju, ali nisu ograničeni na: 2,2-azino-bis(3-etilbenzotiaz-olin-6-sulfonska kiselina) (ABTS), ofenilendiamin (OPD), 3,3',5,5'-tetrametilbenzidin (TMB), o-dianisidin, 5-aminosalicilnu kiselinu, 4-hloro-1-naftol. Fluorogeni supstrati obuhvataju, ali nisu ograničeni na, homovaniličnu kiselinu ili 4-hidroksi-3-metoksifenilsirćetnu kiselinu, redukovane fenoksazine i redukovane benzotiazine, uključujući Amplexe Red reagens i njegove varijante i redukovane dihidroksantene, uključujući dihidrofluoresceine i dihidrofluoresceine i dihidrooksidorodamin 123. Supstrati peroksidaze koji su tiramidi predstavljaju jedinstvenu klasu supstrata peroksidaze po tome što se mogu intrinzično detektovati pre dejstva enzima, ali su "fiksirani na mestu" dejstvom peroksidaze u procesu opisanom kao pojačanje tiramidnog signala (TSA). Ovi supstrati se u velikoj meri koriste za obeležavanje ciljnih mesta u uzorcima koji su ćelije, tkiva ili nizovi za njihovu naknadnu detekciju mikroskopijom, protočnom citometrijom, optičkim skeniranjem i fluorometrijom.
[0064] Dodatna kolorimetrijska (i u nekim slučajevima fluorogena) kombinacija supstrata i enzima koristi enzim fosfataze kao što je kisela fosfataza, alkalna fosfataza ili rekombinantna verzija takve fosfataze u kombinaciji sa kolorimetrijskim supstratom kao što je 5-bromo-6-hloro-3-indolil fosfat (BCIP), 6-hloro-3-indolil fosfat, 5-bromo-6-hloro-3-indolil fosfat, p-nitrofenil fosfat ili onitrofenil fosfat ili sa fluorogenim supstratom kao što je 4-metilumbeliferil fosfat, 6,8-difloro-7-hidroksi4-metilkumarinil fosfat (DiFMUP) fluorescein difosfat, 3-0-metilfluorescein fosfat, rezorufin fosfat, 9H-(1,3-dihloro-9,9-dimetilakridin-2-on-7-il) fosfat (DDAO fosfat) ili ELF 97, ELF 39 ili srodni fosfati.
[0065] Glikozidaze, posebno β-galaktozidaza, β-glukuronidaza i β-glukozidaza, su dodatni pogodni enzimi. Odgovarajući kolorimetrijski supstrati uključuju, ali nisu ograničeni na, 5-bromo4-hloro-3-indolil β-D-galaktopiranozid (X-gal) i slične indolil galaktozide, glukozide i glukuronide, o-nitrofenil β-D-galaktopiranozid (ONDPG) i p-nitrofenil β-D-galaktopiranozid. Poželjni fluorogeni supstrati uključuju rezorufin β-D-galaktopiranozid, fluorescein digalaktozid (FDG), fluorescein diglukuronid i njihove strukturne varijante, 4-metilumbeliferil β-D-galaktopiranozid, karboksiumbeliferil β-D-galaktopiranozid i fluorovane kumarin β-D-galaktopiranozide. Dodatni enzimi uključuju hidrolaze kao što su holinesteraze i peptidaze, oksidaze kao što su glukoza oksidaza i citohrom oksidaze, i reduktaze za koje su poznati pogodni supstrati.
[0066] Enzimi i njihovi odgovarajući supstrati koji proizvode hemiluminiscenciju su poželjniji za neke testove. Oni uključuju, ali nisu ograničeni na, prirodne i rekombinantne oblike luciferaza i ekvorina. Dodatno su korisni supstrati za fosfataze, glikozidaze i oksidaze koji proizvode hemiluminiscenciju, kao što su oni koji sadrže stabilne dioksetane, luminol, izoluminol i akridinijum estre. Na primer, enzim je luciferaza ili ekvorin. Supstrati su luciferin, ATP, Ca<++>i koelenterazin.
[0067] Pored enzima, hapteni kao što je biotin su korisne grupe koje se mogu detektovati. Biotin je koristan jer je u enzimskom sistemu koji može dalje pojačati detektabilni signal i može poslužiti kao obeleživač u afinitetnoj hromatografiji za potrebe izolacije. Za detekciju se koristi enzimski konjugat koji ima afinitet za biotin, kao što je avidin-HRP. Zatim se dodaje supstrat peroksidaze da bi se proizveo signal koji se može detektovati. Hapteni takođe uključuju hormone, prirodne i sintetičke lekove, zagađivače, alergene, afektorne molekule, faktore rasta, hemokine, citokine, limfokine, aminokiseline, peptide, hemijske intermedijere ili nukleotide.
[0068] U nekim slučajevima, grupa koja se može detektovati je fluorescentni protein. Primeri fluorescentnih proteina uključuju zeleni fluorescentni protein (GFP), fikobiliproteine i njihove derivate, luciferazu ili ekvorin. Fluorescentni proteini, posebno fikobiliprotein, posebno su korisni za stvaranje tandem bojom obeleženih reagenasa za obeležavanje. Ove tandem boje sastoje se od fluorescentnog proteina i fluorofora da bi se dobio veće stokes pomeranje gde je emisioni spektar dalje pomeren od spektra apsorpcije fluorescentnog proteina. Ovo je posebno korisno za detekciju male količine ciljnog mesta u uzorku gde je emitovana fluorescentna svetlost maksimalno optimizovana, drugim rečima, fluorescentni protein reabsorbuje malo ili ništa od emitovane svetlosti. Fluorescentni protein i fluorofor funkcionišu kao par za prenos energije gde fluorescentni protein emituje na talasnoj dužini koju fluorofor apsorbuje, a fluorofor zatim emituje na talasnoj dužini koja je veća od fluorescentnog proteina nego što se može dobiti samo sa fluorescentnim proteinom. Posebno korisna kombinacija su fikobiliproteini i sulforhodaminski fluorofori, ili sulfonirani cijanin fluorofori; ili derivati sulfoniranih ksantena. Alternativno, fluorofor je donor energije, a fluorescentni protein je akceptor energije.
Postupci vizuelizacije detekcione grupe zavise od obeleživača.
[0069] U nekim slučajevima, uzorak se osvetljava svetlosnom talasnom dužinom koja je izabrana tako da daje optički odgovor koji se može detektovati, i posmatra se pomoću sredstva za detekciju tog odgovora. Oprema korisna za osvetljavanje fluorescentnih jedinjenja uključuje ručne ultraljubičaste lampe, živine lučne lampe, ksenonske lampe, lasere i laserske diode. Ovi izvori osvetljenja su optički integrisani u laserske skenere, fluorescentne čitače mikroploča ili standardne ili mikrofluorometre. Stepen ili lokacija signala, u poređenju sa standardnim ili očekivanim odgovorom, pokazuje da li i u kom stepenu uzorak poseduje datu karakteristiku ili željeno ciljno mesto.
[0070] Optički odgovor se detektuje vizuelnom inspekcijom, ili upotrebom jednog od sledećih uređaja: CCD kamera, video kamera, fotografski film, uređaji za lasersko skeniranje, fluorometri, fotodiode, kvantni brojači, epifluorescentni mikroskopi, skenirajući mikroskopi, protočni citometri, čitači fluorescentnih mikroploča, ili pomoću uređaja za pojačivače signala kao što su fotomultiplajeri za pojačavanje signala. Kada se uzorak ispituje pomoću protočnog citometra, njegovo ispitivanje izborno uključuje sortiranje njegovih delova prema njihovom fluorescentnom odgovoru.
[0071] Kada se koristi obeleživač koji se može indirektno detektovati, onda osvetljavanje obično uključuje dodavanje reagensa za proizvodnju detektabilnog signala kao što je kolorimetrijski enzimski supstrat. Radioizotopi se takođe smatraju indirektno detektabilnim kada nije potreban dodatni reagens, već je radioizotop izložen rendgenskom filmu ili drugom mehanizmu za snimanje i merenje signala. Ovo važi za neke hemiluminiscentne signale koji se primećuju nakon izlaganja filmu.
I. ONC201 (JEDINJENJE (1)), NJEGOVE SOLI I SINTEZE
[0072] ONC201 (jedinjenje (1))
i njegovi analozi, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, kao i njihove sinteze, su ovde dati. U in vitro modelima, životinjskim modelima i kliničkim ispitivanjima na ljudima, ONC201 ima široku antikancerogenu aktivnost, nisku toksičnost uključujući nekoliko, ako ih ima, štetnih efekata, nisku genotoksičnost i visoku biodostupnost uključujući oralno. Ove karakteristike omogućavaju da ONC 201 i različiti analozi budu dobro prilagođeni za različite primene. ONC201 se može napraviti sintezom prikazanom na šemi 1.
[0073] Sinteza ONC201 soli dihidrohlorida počinje sa komercijalno dostupnim intermedijernim N-benzil-3-karbometoksi-4-piperidon hidrohloridom, jedinjenjem (3). Sinteza može uključiti neutralizujuće jedinjenje (3) sa bazom (korak 1) za proizvodnju jedinjenja (4), slobodne baze. Jedinjenje (3) može se neutralisati neorganskom bazom da bi se dobilo jedinjenje (4). Jedinjenje (3) se može neutralisati organskom bazom da bi se dobilo jedinjenje (4). Jedinjenje (3) može da se neutrališe u prisustvu alkohola, na primer, n-butanola. Jedinjenje (3) se može neutralisati u prisustvu najmanje jednog organskog rastvarača, na primer, n-butanola i/ili etil acetata. Jedinjenje (3) može da se neutrališe u prisustvu baze i najmanje jednog organskog rastvarača, na primer, NaHCOs i n-butanola. Jedinjenje (3) se može neutralisati u prisustvu n-butanola i trietil amina (Et3N).
[0074] Sinteza može uključiti jedinjenje (4) koje reaguje sa jedinjenjem (5) (Korak 2) da bi se proizvelo intermedijerno jedinjenje (1). Reakcija u koraku 2 može uključivati zagrevanje jedinjenja (4) sa jedinjenjem (5). Reakcija u koraku 2 može uključivati refluksujuće zagrevanje jedinjenja (4) i jedinjenja (5) u prisustvu rastvarača. Reakcija u koraku 2 može uključiti upotrebu Dean-Stark zamke za uklanjanje vode i/ili metanola (MeOH) koji nastaju u reakciji.
[0075] Može se sintetisati so ONC201 dihidrohlorida (korak 3). Ova reakcija (korak 3) može uključiti tretiranje ONC201 sa HCl u dioksanu. Korak 3 može uključiti tretiranje ONC201 sa 4N HCl u dioksanu. Sinteza izborno uključuje rekristalizaciju ONC201 di-soli. ONC201 dihidrohloridna so se može sintetisati kao što je prikazano na šemi 2.
II. LIGAND KOJI INDUKUJE APOPTOZU VEZAN ZA TNF („TRAIL“)
[0076] TRAIL protein se može ispitati u uzorku dobijenom od subjekta da bi se otkrila ekspresija TRAIL izazvana jedinjenjima i njihovim solima opisanim ovde. Imunološke analize se mogu koristiti za ispitivanje TRAIL u uzorku, uključujući enzimski imunosorbentni test (ELISA), enzimski imunofiltracioni test (ELIFA), protočnu citometriju, imunoblot, imunoprecipitaciju, imunohistohemiju, imunocitohemiju, luminiscentnu imunološku analizu (LIA), fluorescentnu imunološku analizu (FIA) i radioimunološku analizu. Analize se mogu koristiti za dobijanje kvalitativnih i/ili kvantitativnih rezultata. Specifični detalji odgovarajućih postupaka za kvalitativne i kvantitativne analize uzoraka opisani su u standardnim referencama, uključujući E. Harlow & D. Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988; F. Breitling & S. Diibel, Recombinant Antibodies, John Wiley & Sons, New York, 1999; H. Zola, Monoclonal Antibodies: Preparation and Use of Monoclonal Antibodies and Engineered Antibody Derivatives, Basics: From Background to Bench, BIOS Scientific Publishers, 2000; B.K.C. Lo, Antibody Engineering: Methods and Protocols, Methods in Molecular Biology, Humana Press, 2003; F.M. Ausubel et al., Eds., Short Protocols in Molecular Biology, Current Protocols, Wiley, 2002; S. Klussman, Ed., The Aptamer Handbook: Functional Oligonucleotides and Their Applications, Wiley, 2006; Ormerod, M.G., Flow Cytometry: a practical approach, Oxford University Press, 2000; Givan, A.L., Flow Cytometry: first principles, Wiley, New York, 2001; Gorczyca, W., Flow Cytometry in Neoplastic Hematology: morphologic-immunophenotypic correlation, Taylor & Francis, 2006; Crowther, J.R., The ELISA Guidebook (Methods in Molecular Biology), Humana Press, 2000; Wild, D., The Immunoassay Handbook, 3rd Edition, Elsevier Science, 2005, i J. Sambrook and D.W. Russell, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 3rd ed., 2001.
[0077] Protokoli za analizu i analiza uzorka za TRAIL da bi se otkrio efekat farmaceutske kompozicije opisani su u SAD patentu 8,673,923 za Wafik S. El-deiry et al.
[0078] TRAIL analize se mogu koristiti za praćenje subjekta. Na primer, uzorak se može dobiti od subjekta pre tretmana farmaceutskom kompozicijom i jednom ili više puta tokom i/ili posle tretmana da bi se procenila efikasnost tretmana. Uzorak se može dobiti od subjekta u različito vreme da bi se procenio tok ili napredak bolesti ili zarastanja. Receptori smrti iz cirkulišućih tumorskih ćelija mogu se ispitati da bi se videlo da li ovde opisani tretman povećava količinu ili vrstu receptora smrti.
[0079] Kancer koji se leči upotrebom postupaka i kompozicija opisanih ovde karakteriše abnormalna proliferacija ćelija uključujući pre-neoplastičnu hiperproliferaciju, kancer in situ, neoplazme i metastaze. Postupci i kompozicije opisani ovde mogu se koristiti za profilaksu, kao i za ublažavanje znakova ili simptoma kancera. "Lečenje" kancera kod subjekta uključuje: sprečavanje, inhibiciju ili ublažavanje kancera kod subjekta, kao što je usporavanje progresije kancera ili smanjenje ili ublažavanje znaka ili simptoma kancera. Primeri kancera uključuju kancer dojke, kancer CNS, kancer debelog creva, kancer jajnika, kancer prostate, leukemiju, kancer pluća i limfom.
III. JEDINJENJA FORMULE (10) I NJIHOVE SOLI
[0080] Ovde su data jedinjenja i soli formule (10) i postupci njihove izrade. Stručnjaci u ovoj oblasti razumeće da se opšti principi i koncepti opisani ovde u vezi sa ONC201 (jedinjenje (1)) i njegovim solima, uključujući principe i koncepte koji se odnose na postupke i farmaceutske kompozicije, primenjuju sa jednakom snagom na jedinjenja formule (10) i njegove soli.
[0081] Ovde su data jedinjenja formule (10):
pri čemu R1i R2su nezavisno izabrani od H, alkil, aril, cikloalkil, cikloalkilalkil, heterocikloalkil, heterocikloalkilalkil, heteroaril, arilalkil, heteroarilalkil, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio i acil radikala. R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2-CH3-Ph) (tj. ONC201). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2,4-di F-Ph) (tj. ONC206). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph) (tj. ONC212). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(3,4-di F-Ph) (tj. ONC213). R1može biti CH2(3,4-di-Cl-Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph) (tj. ONC234). R1može biti CH2-3-tienil i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph) (tj. ONC236).
[0082] R1i R2mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-
4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-4benzil-piperazin, C1-4alkiltienil, C1-4alkilpiridinil, C1-
4alkilizoksazolidinil, C1-4alkilmorfolinil, C1-4alkiltiazolil i C1-4alkilpirazinil gde C1-4alkil, C1-
4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-4benzilpiperazin, C1-4alkiltienil, C1-4alkilpiridinil, C1-
4alkilizoksazolidinil, C1-4alkilmorfolinil, C1-4alkiltiazolil i C1-4alkilpirazinil su izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1i/ili R2može biti supstituisani ili nesupstituisani, arilalkil ili heteroarilalkil. Heteroarilalkil može biti izabran od sledećih: C1-4alkilpirolil, C1-4alkilfuril, C1-4alkilpiridil, C1-4alkil-1,2,4-tiadiazolil, C1-
4alkilpirimidil, C1-4alkiltienil, C1-4alkilizotiazolil, C1-4alkilimidazolil, C1-4alkiltetrazolil, C1-
4alkilpirazinil, C1-4alkilpirimidil, C1-4alkilhinolil, C1-4alkilizohinolil, C1-4alkiltiofenil, C1-
4alkilbenzotienil, C1-4alkilizobenzofuril, C1-4alkilpirazolil, C1-4alkilindolil, C1-4alkilpurinil, C1-
4alkilkarbazolil, C1-4alkilbenzimidazolil i C1-4alkilizoksazolil.
[0083] R1i/ili R2može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata na benzil prstenu: X, -CH3, -NO2, -OCH3, -CN, -CXH2, -CX2H, C2-C4alkil, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CpX2p+1, -OCX3, -OCpH2p+1, -OCpX2p+1, OR<m>, SR<m>, NR<m>R<n>, NR<m>C(O)R<n>, SOR<m>, SO2R<m>, C(O)R<m>i C(O)OR<m>; R<m>i R<n>su nezavisno izabrani od H ili C1-C4alkil; i gde je p ceo broj od 2 do 20 i X je halogen, uključujući F, Cl, Br ili I; poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl.
[0084] R1može biti izabran od sledećih: H, CH3, CH2Ph, CH2-(4-CF3-Ph), CH2-(4-F-Ph), CH2-(4-Cl-Ph), CH2-(OCH3-Ph), CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2-(3-tienil), CH2-2-piridinil, CH2-4-metil-2-tiazolil, CH2-2-pirazinil, CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzilpiperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-(3,4-di Cl-Ph), CH2-(3,4-di F-Ph), CH2-(3,5-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CH(OH)Ph, (4-F-Ph)-4-oksobutil, CH2CH2NHCOOC(CH3)3, CH2CH2CH2NH2, i CD2C6D5. R2može biti izabran od sledećih: H, CH3, CH2Ph, CH2-(4-CF3-Ph), CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-((2-F)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzilpiperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-(2,4-di Cl-Ph), CH2-(3,4-di Cl-Ph), CH2-(3,4-di F-Ph), CH2-(3,5-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2(2-CH3, 4-F-Ph), CH2-((4-OCH3)-Ph), CH2-(3-piridinil), CH2-(3-izoksazolidinil), CH2CH2-(4-morfolinil), CH2-(2-F, 4-CF3-Ph), CH2CH(OH)Ph, (CH2)3CO-4F-Ph, (4-F-Ph)-4-oksobutil, CH2CH2NHCOOC(CH3)3, CH2CH2CH2NH2i CD2C6D5.
[0085] R1može biti H. R1može biti supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, npr., benzil (CH2Ph) ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo.
[0086] R2može biti supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, npr., benzil ili feniletil. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. Arilalkil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halo, CH3, CF3ili OCH3. R2može biti supstituisani ili nesupstituisani heterocikloalkilalkil, npr., piperazinilalkil ili morfolinoalkil; ili supstituisani ili nesupstituisani heteroarilalkil, npr., piridilmetil ili izoksazolidinilmetil. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa C1-4alkil, C1-
4alkoksil, hidroksil, perhalogenovani C1-4alkil, ili halo, na primer heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa najmanje jednim supstituentom izabranim od halo, CH3, CF3ili OCH3.
[0087] Jedinjenje (10) može imati strukturu formule (80):
(80), pri čemu Ra1, Ra2, Ra3, Ra4, Ra5, Rb1, Rb2, Rb3, Rb4i Rb5su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, X, -CH3, -NO2, -OCH3, -CN, -CXH2, -CX2H, C2-C4alkil, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CpX2p+1, -OCX3, -OCpH2p+1, -OCpX2p+1, OR<m>, SR<m>, NR<m>R<n>, NR<m>C(O)R<n>, SOR<m>, SO2R<m>, C(O)R<m>i C(O)OR<m>; R<m>i R<n>su nezavisno izabrani od H ili C1-C4alkila; i pri čemu p je ceo broj od 2 do 20 i X je halogen.
[0088] Jedinjenje (10) može imati strukturu formule (90)
(90), pri čemu R2je kao što je definisan gore, i pri čemu Rb1, Rb2, Rb3, Rb4i Rb5su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, X, - CH3, -NO2, -OCH3, -CN, -CXH2, -CX2H, C2-
4alkil, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CpX2p+1, -OCX3, -OCpH2p+1, -OCpX2p+1, OR<m>, SR<m>, NR<m>R<n>, NR<m>C(O)R<n>, SOR<m>, SO2R<m>, C(O)R<m>i C(O)OR<m>; R<m>i R<n>su nezavisno izabrani od H ili C1-4alkila; i pri čemu p je ceo broj od 2 do 20 i X je halogen.
[0089] Jedinjenje (10) može imati strukturu formule (40)
(40), pri čemu R1je kao što je definisan gore, i pri čemu Ra1, Ra2, Ra3, Ra4i Ra5su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, X, - CH3, -NO2, -OCH3, -CN, -CXH2, -CX2H, C2-
4alkyl, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CpX2p+1, -OCX3, -OCpH2p+1, -OCpX2p+1, OR<m>, SR<m>, NR<m>R<n>, NR<m>C(O)R<n>, SOR<m>, SO2R<m>, C(O)R<m>i C(O)OR<m>; R<m>i R<n>su nezavisno izabrani od H ili C1-4alkila; p je ceo broj od 2 do 20; i X je halogen. R1može biti H ili supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, kao što je benzil ili feniletil. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkilom, C1-4alkoksilom, hidroksilom, perhalogenisanim C1-4alkilom ili halo. Benzil može biti supstituidan sa jednim ili više halo. Benzil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halo, CH3, CF3i OCH3. Na primer, benzil je supstituisan sa jednim halo, npr., F na orto ili para položaju ili benzil je supstituisan sa dva halogena, npr., F na oba meta položaja.
[0090] Jedinjenje (10) može imati strukturu jedinjenja (45):
(45), pri čemu Ra1, Ra2, Ra3, Ra4i Ra5su kao što su definisani gore. Benzil može biti supstituisan sa jednim ili više halogena. Benzil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halo, CH3, CF3i OCH3. Ra1ili Ra5može biti halo, npr., F. Oba Ra2i Ra3mogu biti halo, npr., F.
[0091] Jedinjenje (10) može imati strukturu jedinjenja (50)
(50), pri čemu R1je kao što je definisan gore, i pri čemu Rbje izabran iz grupe koja se sastoji od H, X, -CH3, -NO2, -OCH3, -CN, -CXH2, -CX2H, C2-4alkila, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CpX2p+1, -OCX3, -OCpH2p+1, -OCpX2p+1, OR<m>, SR<m>, NR<m>R<n>, NR<m>C(O)R<n>, SOR<m>, SO2R<m>, C(O)R<m>i C(O)OR<m>; R<m>i R<n>su nezavisno izabrani od H ili C1-4alkila; i pri čemu p je ceo broj od 2 do 20 i X je halogen, i pri čemu Ra1, Ra2, Ra4i Ra5su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od H, X, -CH3, -NO2, -OCH3, -CN, -CXH2, -CX2H, C2-4alkila, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CpX2p+1, -OCX3, -OCpH2p+1, -OCpX2p+1, OR<m>, SR<m>, NR<m>R<n>, NR<m>C(O)R<n>, SOR<m>, SO2R<m>, C(O)R<m>i C(O)OR<m>; R<m>i R<n>su nezavisno izabrani od H ili C1-4alkila; i pri čemu p je ceo broj od 2 do 20 i X je halogen. R1može biti H. R1može biti supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkilom, C1-
4alkoksilom, hidroksilom, perhalogenisanim C1-4alkilom ili halo. Rbmože biti izabran od sledećih: halo, CH3, CF3i OCH3. Jedan ili više od Ra1, Ra2, Ra4i Ra5može biti izabran od halo, CH3, CF3i OCH3. Ra1, Ra2, Ra4i Ra5mogu biti H, i Rbmože biti izabran od halo, CH3, CF3i OCH3. Rbmože biti halogen, npr., F, i Ra1može biti CH3. Rbmože biti F ili Cl, i Ra2može biti F ili Cl. Rbmože biti CF3. Rbmože biti OCH3. Rbi Ra1može biti Cl.
[0092] Jedinjenje (10) može imati strukturu jedinjenja (55):
(55), pri čemu Ra1, Ra2, Ra4, Ra5i Rbsu kao što su definisani gore. Rbmože biti izabran od halo, CH3, CF3i OCH3. Jedan ili više od Ra1, Ra2, Ra4i Ra5može biti izabran od halo, CH3, CF3i OCH3. Ra1, Ra2, Ra4i Ra5mogu biti H, i Rbmože biti izabran od sledećih: halo, CH3, CF3i OCH3. Rbmože biti halo, npr., F i Ra1je CH3. Rbmože biti F ili Cl, i Ra2je F ili Cl. Rbmože biti CF3. Rbmože biti OCH3. Rbi Ra1može biti Cl.
[0093] Jedinjenje (10) može imati strukturu jedinjenja (60)
(60). R1može biti H. R1može biti supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, kao što je benzil ili feniletil. R1može biti supstituisani ili nesupstituisani heterocikloalkilalkil ili supstituisani ili nesupstituisani heteroarilalkil, kao što je CH2-(2-tienil), CH2-(3-tienil), CH2-4-metil-2-tiazolil, CH2-2-pirazinil, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(3-izoksazolidinil), CH2-2-piridinil, CH2-3-piridinil i CH2CH2-(4-morfolinil). Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenisanim C1-4alkil, ili halo. Benzil može biti supstituisan sa jednim ili više halogena. Benzil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih od halo (npr., F), CH3, CF3i OCH3. Benzil može biti supstituisan na para položaju sa halo, CH3, CF3, ili OCH3supstituentom. R1može biti fluorofeniloksobutil ili hidroksifeniletil.
[0094] Šema 3 ilustruje sintezu jedinjenja formule (10):
Postupci: a. NaH, dimetil karbonat, toluen, 80°C 4h; b. 1N NaOH/CH2Cl2da se konvertuje u slobodnu bazu, zatim zagrevanje u dioksanu 70°C; c.1-butanol/refluks 3-6h (Dean Stark zamka) PPTS; d. Dioksan 70°C; e. HCl u dioksanu -25°C - RT da bi se dobila HCl so; f. Na2CO3, DIEA 80°C; g. NaOH/CH2Cl2da bi se pripremila slobodna baza, zatim MeOH refluks, 3.5h
Šema 3
[0095] Jedinjenja formule (10) (tj. imipridoni) se sintetišu počevši od supstituisanog piperidona, koji se konvertuje reakcijom sa supstituisanim aminoimidazolinom da bi se dobilo osnovno jedinjenje (10). Postoje dva puta, jedan u kome je R1supstituent prisutan u piperidonu (npr., 68).
Na tom putu, (68) je aciliran sa dimetil karbonatom upotrebom natrijum hidrida u toluenu na 80 °C da bi se formirao piperidon estar (69). Komercijalno dostupna metiltioimidazolin HI so (63) reaguje sa aminom u dioksanu na 70 °C da bi se dobio R2-supstituisani aminoimidazolin (64) kao njegova HI so. Direktna reakcija (64) sa piperidon estrom (69) u 1-butanolu na refluksu uz uklanjanje vode preko Dean-Stark zamke tokom 3-6 h daje triciklično jedinjenje (10). U varijanti ove šeme, N-BOC je zaštitio piperidon (61) se konvertuje istim postupcima u BOC zaštićeno jedinjenje (65), koje se tretira sa HCl u dioksanu da bi se uklonila BOC grupa i zatim konvertuje u slobodnu bazu od (66) sa 1N NaOH uz ekstrakciju sa metilen hloridom. Naknadni tretman (66) sa halogenidom (67) ili epoksidom (70) daje željeno jedinjenje (10).
[0096] Sirovi proizvodi se mogu prečistiti hromatografijom na koloni eluiranjem sa metilen hloridom:metanolom ili pomoću HPLC upotrebom acetonitrila:TFA:H2O za proizvodnju finalnih proizvoda kao slobodnih baza ili kao TFA soli. Tretman slobodnih baza sa HCl u dioksanu ili liofilizacija TFA soli stvara proizvode (10) kao HCl ili TFA soli. Alternativno, slobodna baza se može tretirati drugom neorganskom ili organskom kiselinom da bi se formirale druge soli, generalno izabrane od onih za koje se zna da su farmaceutski prihvatljive. Soli jedinjenja (10) su obično čvrste supstance i primeri su kristalizovani iz etanola ili drugih rastvarača da bi se dobili kristali visokog kvaliteta. Triciklična struktura je definitivno potvrđena u slučaju jedinjenja (1) rendgenskom kristalnom strukturom i NMR.
[0097] Ovde opisana jedinjenja se mogu koristiti, sa ili bez aminoalkil linkera (npr., jedinjenje (33)), da identifikuju molekule (npr., proteina) koji su u interakciji sa njima u ćelijskom kontekstu. Ekspresija ovih vezujućih ciljnih mesta može se koristiti za predviđanje odgovora na imipridone ili njihove analoge (tj. služe kao biomarkeri). Ova jedinjenja se takođe mogu koristiti za skrining na strukturno nepovezane molekule upotrebom kompetitivnih analiza poznatih u tehnici da identifikuju lekove koji mogu da nadmaše interakciju ciljnog mesta sa većim afinitetom. Pored toga, ovi molekuli mogu imati poboljšana svojstva leka ili omogućiti dodatnu primenu promenom svojstava leka uključujući bezbednost, potenciju, farmakokinetiku, biološku raspodelu ili metabolizam.
TABELA 1: PRIMERI JEDINJENJA FORMULE (10)
IV. PROCENA OSETLJIVOSTI I EFIKASNOSTI REŽIMA LEČENJA
[0098] Merenje ekspresije, genske mutacije ili broja kopija gena dopaminskog receptora ili drugog receptora, G protein-spregnutog receptora (GPCR) može se koristiti za predviđanje odgovora ili osetljivosti na postupak lečenja koji je ovde opisan i za identifikaciju subjekata koji će verovatno reagovati na postupak lečenja koji je ovde opisan, kao što je tretman jedinjenjem formule (10), njegovom farmaceutski prihvatljivom soli, ili njegovim analogom. Ovde su obezbeđeni postupci za identifikaciju da li je verovatno da će subjekat koji ima stanje reagovati na režim lečenja koji je ovde opisan. Postupci mogu da sadrže (i) dobijanje biološkog uzorka od subjekta; (ii) merenje nivoa ekspresije najmanje jednog dopaminskog receptora ili G protein-spregnutog receptora (GPCR) u uzorku; (iii) poređenje nivoa izmerenih u uzorku sa onima za unapred određeni standard; i (iv) utvrđivanje da li će subjekat verovatno reagovati na režim lečenja, na osnovu nivoa izmerenih u uzorku u odnosu na nivoe za unapred određeni standard. Korak merenja nivoa ekspresije dopaminskog receptora ili GPCR u uzorku može uključivati korake (i) dovođenja u kontakt uzorka sa antitelom ili fragmentom koji se vezuje za antigen koji se specifično vezuje za receptor da bi se formirao kompleks antitela ili antigen-vezujućeg fragmenta sa receptorom; i (ii) merenje količine kompleksa. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Na primer, subjekat može imati ili biti u opasnosti da ima neuroonkološku bolest, neuroendokrini tumor, meningiom, ependimom, gliom, neuroblastom ili difuzni intrinzični gliom ponsa. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, kao što je psihoza, bipolarni poremećaj i veliki depresivni poremećaj. Subjekat može imati, ili može biti izložen riziku od infekcije, kao što je bakterijska infekcija (na primer, gram-negativna bakterijska infekcija ili gram-pozitivna bakterijska infekcija). Bakterijska infekcija može biti infekcija bakterijom izabranom iz grupe koja se sastoji od Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, i vrste Enterobacter. Gram-pozitivna bakterijska infekcija može biti infekcija Staphylococcus, kao što je infekcija S. aureus (npr. infekcija rezistentnim na meticilin S. aureus (MRSA)). Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog. Dopaminski receptor može biti iz porodice dopaminskih receptora sličnih D2. Dopaminski receptor može biti DRD2, DRD3 ili DRD4. Dopaminski receptor može biti DRD2, DRD3 ili oba. GPCR može biti GPCR klase A. GPCR može biti GPR132. GPCR može biti izabran iz grupe koja se sastoji od GPR132, GPR91, MTNR1A, GPR162, GPR137, BAI3, LGR4, PTGIR, CXCR7 i njihovih kombinacija. Receptor dopamina može biti DRD5, režim lečenja može uključivati primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, a povećan nivo ekspresije DRD5 izmeren u uzorku u odnosu na unapred određeni standard ukazuje na to da će subjekat reagovati ili verovatno neće reagovati na režim lečenja.
[0099] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za procenu efikasnosti ovde opisanog režima lečenja, praćenje ili pružanje prognoze za subjekta sa stanjem. Postupci mogu da sadrže (i) dobijanje biološkog uzorka od subjekta; (ii) merenje nivoa ekspresije najmanje jednog dopaminskog receptora ili G protein-spregnutog receptora (GPCR) u uzorku; (iii) poređenje nivoa izmerenih u uzorku sa onima za unapred određeni standard; i (iv) određivanje prognoze ili određivanje da li subjekat reaguje na režim lečenja, na osnovu nivoa izmerenih u uzorku u odnosu na nivoe za unapred određeni standard. Korak merenja nivoa ekspresije dopaminskog receptora ili GPCR u uzorku može uključivati korake (i) dovođenja u kontakt uzorka sa antitelom ili antigen-vezujućim fragmentom koji se specifično vezuje za receptor da bi se formirao kompleks antitela ili antigenvezujućeg fragmenta sa receptorom; i (ii) merenje količine kompleksa. Postupci mogu da sadrže (i) dobijanje biološkog uzorka od subjekta; (ii) merenje broja kopija gena ili mutacija u najmanje jednom dopaminskom receptoru u uzorku; (iii) poređenje izmerenog broja kopija ili mutacija pronađenih u uzorku sa onima za unapred određeni standard; i (iv) utvrđivanje da li subjekat reaguje na režim lečenja, na osnovu izmerenog broja kopija ili mutacija pronađenih u uzorku u odnosu na one za unapred određeni standard. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Kancer može biti neuro-onkološka bolest ili neuroendokrini tumor. Kancer može biti izabran iz grupe koja se sastoji od meningioma, ependimoma, glioma, neuroblastoma i difuznog intrinzičnog glioma ponsa. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, kao što je psihoza, bipolarni poremećaj i veliki depresivni poremećaj. Subjekat može imati, ili može biti izložen riziku od infekcije, kao što je bakterijska infekcija, na primer, gram-negativna bakterijska infekcija ili gram-pozitivna bakterijska infekcija. Bakterijska infekcija može biti infekcija bakterije izabrane iz grupe koja se sastoji od Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, i vrsta Enterobacter. Grampozitivna bakterijska infekcija može biti infekcija Staphylococcus, kao što je infekcija S. aureus (npr. infekcija rezistentnog na meticilin S. aureus (MRSA)). Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10), njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegovog analoga. Dopaminski receptor može biti izabran od DRD2, DRD2S, DRD2L i DRD3. Dopaminski receptor može biti iz porodice dopaminskih receptora sličnih D2 ili porodice dopaminskih receptora sličnih D1. Dopaminski receptor može biti DRD1, DRD2, DRD3, DRD4 ili DRD5. Dopaminski receptor može biti DRD2, DRD3 ili oba. GPCR može biti GPCR klase A. GPCR može biti GPR132. GPCR može biti izabran iz grupe koja se sastoji od GPR132, GPR91, MTNR1A, GPR162, GPR137, BAI3, LGR4, PTGIR, CXCR7 i njihovih kombinacija.
[0100] Dopaminski receptor može biti DRD5, režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (10) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i povećan nivo ekspresije DRD5 izmeren u uzorku u odnosu na unapred određeni standard može ukazivati na to da je režim lečenja efikasan ili nije efikasan. Receptor dopamina može biti DRD5, režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, a mutacija DRD5 gena merena u uzorku može ukazivati na to da je režim lečenja efikasan ili nije efikasan. Receptor dopamina može biti DRD5, režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, a misens mutacija K366R u DRD5 genu merena u uzorku može ukazivati na to da je režim lečenja efikasan ili nije efikasan.
[0101] Ovde su takođe obezbeđeni postupci za identifikaciju da li je verovatno da će subjekt koji ima stanje reagovati na režim lečenja koji je ovde opisan. Postupci mogu da sadrže (i) dobijanje biološkog uzorka od subjekta; (ii) merenje broja kopija gena ili mutacija u najmanje jednom dopaminskom receptoru u uzorku; (iii) poređenje izmerenog broja kopija ili mutacija pronađenih u uzorku sa onima za unapred određeni standard; i (iv) utvrđivanje da li će subjekat verovatno reagovati na režim lečenja, na osnovu izmerenog broja kopija ili mutacija pronađenih u uzorku u odnosu na one za unapred određeni standard. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Kancer može biti neuro-onkološka bolest ili neuroendokrini tumor. Kancer može biti izabran iz grupe koja se sastoji od meningioma, ependimoma, glioma, neuroblastoma i difuznog intrinzičnog glioma ponsa. Subjekat može imati, ili može biti u opasnosti da ima, psihijatrijski poremećaj, kao što je psihoza, šizofrenija, bipolarni poremećaj i veliki depresivni poremećaj. Subjekat može imati, ili može biti izložen riziku od infekcije, kao što je bakterijska infekcija. Infekcija može biti gramnegativna bakterijska infekcija ili gram-pozitivna bakterijska infekcija. Bakterijska infekcija može biti infekcija bakterijom izabranom iz grupe koja se sastoji od Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, i vrste Enterobacter. Gram-pozitivna bakterijska infekcija može biti infekcija Staphylococcus, kao što je infekcija S. aureus (npr. infekcija rezistentnim na meticilin S. aureus (MRSA)). Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili njegov analog. Dopaminski receptor može biti iz porodice dopaminskih receptora sličnih D2. Dopaminski receptor može biti DRD1, DRD2, DRD3, DRD4 ili DRD5. Dopaminski receptor može biti DRD2, DRD3 ili oba. Dopaminski receptor može biti DRD5, režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, a mutacija DRD5 gena merena u uzorku može ukazivati na to da subjekat reaguje ili nije verovatno da će reagovati na režim lečenja. Receptor dopamina može biti DRD5, režim lečenja može da sadrži primenu količine terapeutika, kao što je jedinjenje formule (10) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, a misens mutacija Q366R u DRD5 genu merena u uzorku može ukazivati na to da subjekat reaguje ili nije verovatno da će reagovati na režim lečenja.
[0102] Pored toga, merenje ekspresije, post-translacionih modifikacija ili nivoa aktivnosti ili mutacija u eIF2-α, ATF4, CHOP, DRS, ili odcepljenom ili ukupnom citokeratinu 18 može se koristiti za predviđanje odgovora ili osetljivosti na postupak lečenja koji je ovde opisan i za identifikaciju subjekata koji će verovatno reagovati na postupak lečenja koji je ovde opisan, kao što je lečenje jedinjenjem formule (10), njegovom farmaceutski prihvatljivom soli, ili njegovim analogom. Pored toga, merenje ekspresije, post-translacionih modifikacija ili nivoa aktivnosti ili mutacija u eIF2-α, ATF4, CHOP, DRS, ili odcepljenom ili ukupnom citokeratinu 18 može se koristiti za procenu efikasnosti ili praćenje postupka lečenja koji je ovde opisan. Pored toga, merenje ekspresije, posttranslacionih modifikacija ili nivoa aktivnosti ili mutacija u eIF2-α, ATF4, CHOP, DRS, ili odcepljenom ili ukupnom citokeratinu 18 može se koristiti za skrining in vivo, in vitro, ili in silico za strukturno nepovezane molekule protiv kancera. Na primer, kompeticioni i drugi testovi poznati u tehnici mogu da se koriste za identifikaciju lekova sposobnih da nadmaše ciljnu interakciju sa većim afinitetom za upoređivanje promena u tim nivoima sa odgovarajućim promenama koje proizvodi jedinjenje formule (10) ili njegov analog. Testovi se takođe mogu izvršiti na živim ćelijama sisara, koje bliže aproksimiraju efekte određenog nivoa leka u serumu u telu, ili na mikrozomalnim ekstraktima pripremljenim od kultivisanih ćelijskih linija.
[0103] Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine imipridona, kao što je ONC201, ili njegovog analoga. Režim lečenja sadrži primenu efikasne količine ONC201. Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (10). Jedinjenje formule (10) može biti jedinjenje formule (40), npr. jedinjenje formule (45); jedinjenje formule (50), npr. jedinjenje formule (55), jedinjenje formule (80), ili jedinjenje formule (90). Jedinjenje formule (10) može biti jedinjenje formule (60). Analozi jedinjenja (1) mogu imati strukturu izabranu od struktura formule (25), formule (26), formule (27), formule (28), formule (29), formule (30), ili formule (31).
[0104] Nivoi za unapred određeni standard mogu biti, na primer, prosečni ili srednji nivoi izmereni u uzorcima od ispitanika. Nivoi za unapred određeni standard mogu se meriti pod istim ili suštinski sličnim eksperimentalnim uslovima kao kod merenja uzorka od subjekta. Nivoi za unapred određeni standard mogu se dobiti od subjekata koji reaguju na tretman sa imipridonom, kao što je ONC201, ili njegov analog. Unapred određen standard se može dobiti od subjekata koji reaguju na tretman jedinjenjem, i ako su nivoi u uzorku od subjekta slični onima u standardu, onda se subjekat može klasifikovati kao verovatno reagujući na tretman. Nivoi za unapred određeni standard mogu se dobiti od subjekata koji ne reaguju na tretman ovim jedinjenjem. Unapred određen standard se može dobiti od subjekata koji ne reaguju na tretman ovim jedinjenjem, i ako su nivoi u uzorku od subjekta različiti (npr. ushodno ili nishodno regulisani) nego u unapred određenom standardu, onda se subjekat može klasifikovati kao da će verovatno reagovati na lečenje. Nivoi za unapred određeni standard mogu se dobiti od normalnih zdravih subjekata.
[0105] Imunološke analize se mogu koristiti za ispitivanje nivoa proteina ili metilacije u uzorku, uključujući enzimski imunosorbentni test (ELISA), enzimski imunofiltracioni test (ELIFA), protočnu citometriju, imunoblot, imunoprecipitaciju, imunohistohemiju, imunocitohistohemiju, luminiscentnu imunološku analizu (LIA), fluorescentnu imunonološku analizu (FIA) i radioimunološku analizu. Nivoi metilacije m<6>A iRNK mogu se dobiti imunoprecipitacijom metilovane RNK (Me-RIP)) ili drugim kvantitativnim biohemijskim testovima poznatim u tehnici.
[0106] Mutacije nukleinske kiseline mogu se odrediti bilo kojom od brojnih poznatih postupaka. Na primer, prvo se može dobiti biološki uzorak od pojedinca. Takvi biološki uzorci uključuju, ali nisu ograničeni na, telesnu tečnost (kao što je urin, pljuvačka, plazma ili serum) ili uzorak tkiva (kao što je uzorak bukalnog tkiva ili bukalna ćelija). Biološki uzorak se zatim može sekvencirati ili skenirati upotrebom poznatih postupaka. Na primer, DNK nizovi se mogu koristiti za analizu najmanje dela genomske sekvence subjekta. Pored toga, mogu se koristiti informacije o celoj ili delimičnoj genomskoj sekvenci. Takve sekvence se mogu odrediti upotrebom standardnih postupaka sekvenciranja uključujući završetak lanca (Sanger dideoksinukleotid), sekvencioniranje terminatora boje i SOLID<™>sekvenciranje (Applied Byosistems). Cele sekvence genoma mogu biti isečene restrikcionim enzimima ili sečene (mehanički) u kraće fragmente za sekvenciranje. DNK sekvence se takođe mogu amplificirati upotrebom poznatih postupaka kao što su PCR i postupci kloniranja zasnovani na vektorima (npr., Escherichia coli). Najmanje deo genetskog materijala subjekta (npr., DNK, RNK, iRNK, cDNK, druge nukleotidne baze ili njihovi derivati) mogu se skenirati ili sekvencirati pomoću, npr., konvencionalnih DNK sekvencera ili tehnologije zasnovane na čipu, za identifikaciju prisustva ili odsustva mutacija ili varijacija broja kopija.
[0107] Ovde su dati postupci za identifikaciju i lečenje subjekta koji ima neko stanje i koji će verovatno reagovati na režim lečenja koji je ovde opisan. Postupak može da sadrži (i) identifikaciju da li će subjekat koji ima stanje verovatno reagovati na režim lečenja koji je ovde opisan; i (ii) lečenje režimom lečenja subjekta za koji je utvrđeno da će verovatno reagovati na taj režim lečenja. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine imipridona, npr., ONC201 ili njegovog analoga. Režim lečenja sadrži primenu efikasne količine jedinjenja (1). Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (10). Jedinjenje formule (10) može biti jedinjenje formule (40), npr., jedinjenje formule (45); jedinjenje formule (50), npr. jedinjenje formule (55); jedinjenje formule (80); jedinjenje formule (90); ili jedinjenje formule (60). Analozi jedinjenja (1) mogu imati strukturu izabranu od struktura formule (25), formule (26), formule (27), formule (28), formule (29), formule (30), ili formule (31).
[0108] Nivoi za unapred određeni standard mogu biti, na primer, prosečni ili srednji nivoi izmereni u uzorcima od ispitanika. Nivoi za unapred određeni standard mogu se meriti pod istim ili suštinski sličnim eksperimentalnim uslovima kao kod merenja uzorka od subjekta. Nivoi za unapred određeni standard mogu se dobiti od subjekata koji reaguju na tretman sa imipridonom, kao što je ONC201 ili njegov analog. Unapred određen standard se može dobiti od subjekata koji reaguju na tretman jedinjenjem, i ako su nivoi u uzorku od subjekta slični onima u standardu, onda se subjekt može klasifikovati kao verovatno reagujući na tretman. Nivoi za unapred određeni standard mogu se dobiti od subjekata koji ne reaguju na tretman ovim jedinjenjem. Unapred određen standard se može dobiti od subjekata koji ne reaguju na tretman jedinjenjem, i ako su nivoi u uzorku od subjekta različiti (npr. ushodno ili nishodno regulisani) od onih u unapred određenom standardu, onda se subjekat može klasifikovati kao da verovatno reaguje na tretman. Nivoi za unapred određeni standard mogu se dobiti od normalnih zdravih subjekata. Imunološki testovi se mogu koristiti za ispitivanje nivoa proteina u uzorku.
[0109] Ovde su dati postupci lečenja i procene efikasnosti lečenja kod subjekta koji ima to stanje. Postupak može da sadrži (i) lečenje subjekta u skladu sa postupkom lečenja koji je ovde opisan (ii) procenu kako je ovde opisano efikasnosti lečenja. Subjekat ima, ili je u opasnosti da ima kancer. Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine imipridona, kao što je ONC201 ili njegovog analoga. Režim lečenja može da sadrži efikasne količine jedinjenja (1). Režim lečenja može da sadrži primenu efikasne količine jedinjenja formule (10), na primer, jedinjenja formule (40), npr. jedinjenja formule (45); jedinjenja formule (50), npr. jedinjenja formule (55); jedinjenja formule (80); jedinjenja formule (90); ili jedinjenja formule (60). Analozi jedinjenja (1) mogu imati strukturu izabranu od struktura formule (25), formule (26), formule (27), formule (28), formule (29), formule (30), ili formule (31).
[0110] Druga stanja koja mogu biti pogodna za postupke opisane ovde uključuju poremećaj smanjene pažnje; zavisnost; epilepsiju; virusnu infekciju; inflamaciju; neurodegenerativne bolesti kao što su Alchajmerova bolest, Parkinsonova bolest, Hantingtonova bolest, amiotrofična lateralna skleroza; kardiovaskularne bolesti kao što su koronarna arterijska bolest, kardiomiopatija, hipertenzivna bolest srca, srčana insuficijencija, plućne bolesti srca, srčane aritmije, inflamatorne bolesti srca, endokarditis, inflamatorna kardiomegalija, miokarditis, valvularna bolest srca, cerebrovaskularna bolest, periferna arterijska bolest, kongenitalna srčana bolest; dijabetes; i amiloidoza lakog lanca.
V. KOMPOZICIJE
[0111] Takođe su obezbeđene farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenja formule (10):
ili formule (1):
i njihove farmaceutski prihvatljive soli. So može biti farmaceutski prihvatljiva mono-so jedinjenja, ili farmaceutski prihvatljiva di-so jedinjenja. So može biti farmaceutski prihvatljiva mono- ili multi-so (npr., di-so ili tri-so) izabrana iz grupe koja se sastoji od hidrohlorida, hidrobromida, hidrogensulfata, sulfata, fosfata, fumarata, sukcinata, oksalata i laktata, bisulfata, hidroksila, tartarata, nitrata, citrata, bitartrata, karbonata, malata, mmaleata, fumarata, sulfonata, metilsulfonata, formata, acetata i karboksilata. So može biti so izabrana iz grupe koja se sastoji od p-toluen-sulfonata, benzensulfonata, citrata, metansulfonata, oksalata, sukcinata, tartarata, fumarata i maleata. So može biti so izabrana iz grupe koja se sastoji od amonijuma, natrijuma, kalijuma, kalcijuma, magnezijuma, cinka, litijuma, i/ili sa protivjonima kao što su metilamino, dimetilamino, dietilamino i trietilamino protivjoni. So može biti di-hidrohloridna so ili dihidrobromidna so.
[0112] Jedinjenje (1) (ONC201) ima istu hemijsku strukturu koja bi bila otkrivena strukturnom analizom (npr., NMR, rendgenska difrakcija) jedinjenja NSC 350625, dostupnog iz National Cancer Institute's Developmental Therapeutics Program Repository.
[0113] Farmaceutska kompozicija može uključivati di-so (npr. dihidrohloridna so) ONC201 ili njen analog (npr. imipridon). Soli (npr. di-soli ili tri-soli) analoga ONC201 mogu biti pripremljene od analoga ONC201, koji se može sintetisati kao što je ovde opisano, ili upotrebom standardne hemijske sintetičke metodologije poznate prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti.
[0114] Farmaceutska kompozicija može uključivati najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. Pogodni farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju, ali nisu ograničeni na, one u Handbook of Pharmaceutical Excipients, 7th ed., edited by Raymond C. Rowe et al., American Pharmaceutical Association, Washington, USA and Pharmaceutical Press, London; and earlier editions. Exemplary pharmaceutically acceptable carriers, methods for making pharmaceutical compositions and various dosage forms, as well as administration modes are well-known in the art, for example as detailed in Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, edited by Larry L. Augsburger & Stephen W. Hoag., London: Informa Healthcare, 2008; and in L.V. Allen, Jr. et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 8th ed., Philadelphia, Pa.: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004; A.R. Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins, 21st ed., 2005, particularly chapter 89; i J.G. Hardman et al., Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill Professional, 10th ed., 2001.
[0115] Farmaceutske kompozicije mogu biti formulisane za očnu primenu ili topikalnu primenu. Farmaceutske kompozicije mogu biti formulisane kao kapi, masti ili tečnosti. Farmaceutske kompozicije mogu uključivati konvencionalne farmaceutske nosače kao što su vodene, praškaste ili uljane baze, sredstva za zgušnjavanje.
[0116] Farmaceutska kompozicija može biti formulacija za intravensku primenu koja može da sadrži jedinjenje formule (10) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so rastvorenu u rastvaraču, kao što je rastvarač koji sadrži vodu. Intravenska formulacija može uključiti jedinjenje ili njegovu so u koncentraciji od oko 0.05, oko 0.25, oko 0.5, oko 2.5, oko 5, oko 25 ili oko 50 mg/mL. Intravenska formulacija može uključivati jedinjenje ili njegovu so u koncentraciji od oko 0.05, 0.5 ili 5 mg/mL do oko 1, 10 ili 100 mg/mL. Intravenska formulacija može uključivati od oko 0.005%, 0.05%, ili 0.5% do oko 0.1%, 1% ili 10% jedinjenja ili njegovih soli, kao što je oko 0.05%, 0.5% ili 5% jedinjenja ili njegove soli. Intravenska formulacija može uključivati višu ili nižu koncentraciju jedinjenja ili njegove soli.
[0117] Intravenska formulacija može imati pH od oko 3. Formulacija se može podesiti na pH 3 pomoću fosfatnog pufera. Intravenska formulacija može uključivati dekstrozu ili natrijum hlorid. Intravenska formulacija može uključivati jedinjenje ili njegovu so u koncentraciji od oko 5 mg/mL i pH 3 i formira stabilan rastvor. Intravenska formulacija može uključivati jedinjenje ili njegovu so u koncentraciji od oko 5 mg/mL i pH < 5 i formira stabilan rastvor. Intravenska formulacija može uključiti jedinjenje ili njegovu so i jedan ili više antioksidanata. Intravenska formulacija može uključivati smešu mono- i di-hidrohloridnih soli jedinjenja. Intravenska formulacija može uključivati jedinjenje ili njegovu so kao 1% rastvor u koncentraciji od oko 10 mg/mL. Na primer, intravenska formulacija može biti rastvor sa pH od oko 3.3. pH može biti manji od 4.0.
[0118] Farmaceutska kompozicija može dalje da uključuje farmaceutski prihvatljiv nosač. Pogodan farmaceutski prihvatljiv nosač može uključiti vodeni nosač, kao što je sterilna voda.
Formulacija može da sadrži dekstrozu i/ili natrijum. Farmaceutski prihvatljiv nosač može uključivati ulje.
[0119] Intravenska formulacija može da sadrži ONC201 ili njegov analog ili njegovu dihidrohloridnu so rastvorenu u vodi od 25 mg/mL. Formulacija se može podesiti na pH 3 pomoću fosfatnog pufera. Formulacija može uključivati dekstrozu, natrijum hlorid ili oba. Formulacija može da sadrži višu ili nižu koncentraciju dihidrohloridne soli ONC201 ili njenog analoga. Formulacija može da sadrži ONC201 ili njegov analog ili njegovu dihidrohloridnu so u koncentraciji od oko 5 mg/mL. Formulacija od oko 5 mg/mL može formirati stabilan rastvor i pH 3. Formulacija od oko 5 mg/mL može imati pH < 5 i može formirati stabilan rastvor. Intravenska formulacija može uključivati ONC201 ili njegov analog ili njegovu dihidrohloridnu so i jedan ili više antioksidanata. Intravenska formulacija može uključivati smešu mono- i di-hidrohloridnih soli ONC201 ili njegovog analoga. Intravenska formulacija može uključivati ONC201 ili njegov analog ili njegovu dihidrohloridnu so kao 1% rastvor u koncentraciji od oko 10 mg/mL. Na primer, intravenska formulacija može biti rastvor koji ima pH od oko 3.3. pH može biti manji od 4.0.
[0120] Intravenska formulacija može uključivati od oko 0.5% do oko 10% (ili od oko 5 mg/mL do oko 100 mg/mL) ONC201 ili njegovog analoga ili njegove soli. Formulacija može da sadrži od oko 5% (ili oko 50 mg/mL) ONC201 ili njegovog analoga ili njegove soli. Brzina intravenske infuzije može da se uspori da bi se smanjili neželjeni efekti ONC201 ili njegovog analoga ili njegove soli.
[0121] Farmaceutska kompozicija može da sadrži oko 0.1-99% soli ONC201 ili njenog analoga; i farmaceutski prihvatljiv nosač, npr. ulje ili sterilnu vodu ili drugi vodeni nosač. Kompozicija može da sadrži mono ili di-so ONC201 ili njegov analog u opsegu od oko 5% do oko 50% za oralne dozne oblike.
[0122] Farmaceutska kompozicija može uključivati antioksidant, kao što su: derivati askorbinske kiseline kao što su askorbinska kiselina, eritorbinska kiselina, natrijum askorbat, derivati tiola kao što su tioglicerol, cistein, acetilcistein, cistin, ditioeritreitol, ditioeritreitol, glutation, tokoferoli, butilovani hidroksianizol (BHA), butilovani hidroksitoluen (BHT), soli sumporne kiseline kao što su natrijum sulfat, natrijum bisulfit, aceton natrijum bisulfit, natrijum metabisulfit, natrijum sulfit, natrijum formaldehid sulfoksilat i natrijum tiohidrogsulfat, nordihidrogvarajetinska kiselina. Treba napomenuti da antioksidanti koji se koriste za vodene formulacije tipično uključuju: natrijum sulfit, natrijum metabisulfit, natrijum formaldehid sulfoksilat i askorbinsku kiselinu i njihove kombinacije, dok antioksidanti koji se koriste u rastvorima na bazi ulja, organski rastvarači, uključuju butilovani hidroksitoluen (BHT) i butilovani hidroksianizol (BHA) i propil galat i njihove kombinacije. Antioksidant može biti jedan ili više od flavanoida, izoflavona, monotioglicerola, L-cisteina, tioglikolne kiseline, α-tokoferola, 6-palmitata askorbinske kiseline, dihidrolipoične kiseline, butilovanog hidroksitoluena (BHT), butilovanog hidroksianizola (BHA), vitamina E, propil galata, β-karotena, askorbinske kiseline. Antioksidanti se mogu tipično koristiti u oko 0.1% do 1.0% po težini, tipičnije oko 0.2%.
[0123] Farmaceutska kompozicija može uključivati imipridon, kao što je ONC201 ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo. Na primer, drugo terapeutsko sredstvo može biti izabrano iz grupe koja se sastoji od analoga hormona i antihormona, inhibitora aromataze, agonista i antagonista LHRH, inhibitora faktora rasta, antitela faktora rasta, antitela receptora faktora rasta, inhibitora tirozin kinaze; antimetabolita; antitumorskih antibiotika; derivata platine; alkilacionih sredstava; antimitotičkih sredstava; inhibitora tubulina; inhibitora PARP, inhibitora topoizomeraze, inhibitora serin/treonin kinaze, inhibitora tirozin kinaze, inhibitora interakcije protein protein, inhibitora RAF, inhibitora MEK, inhibitora ERK, inhibitora IGF-1R, inhibitora ErbB receptora, analoga rapamicina, inhibitora BTK, inhibitora CRM1 (npr., KPT185), modulatora P53 (npr., nutlina), antiangiogenika (npr., aksitiniba, aflibercepta, sorafeniba i regorafeniba), amifostina, anagrelida, klodronata, filgrastina, interferona, interferona α, leukovorina, rituksimaba, prokarbazina, levamisola, mesna, mitotana, pamidronata i porfimera, 2-hlorodezoksiadenozina, 2-fluorodezoksi-citidina, 2-metoksiestradiola, 2C4,3-aletina, 131-1-TM-601, 3CPA, 7-etil-10-hidroksikamptotecina, 16-aza-epotilona B, A 105972, A 204197, abiraterona, aldesleukina, alitretinoina, alovektina-7, altretamina, alvocidiba, amonafida, antrapirazola, AG-2037, AP-5280, apazikvona, apomina, aranoze, arglabina, arzoksifena, atamestana, atrasentana, auristatina PE, ABT-199 (veteoklaksa), ABT-263 (navitoklaksa), AVLB, AZ10992, ABX-EGF, AMG-479 (ganitumaba), ARRY 162, ARRY 438162, ARRY-300, ARRY-142886/AZD-6244 (selumetiniba), ARRY-704/AZD-8330, AR-12, AR-42, AS-703988, AXL-1717, AZD-8055, AZD-5363, AZD-6244, ARQ-736, ARQ 680, AS-703026 (primasertiba), avastina, AZD-2014, azacitidina, azaepotilona B, azonafida, BAY-43-9006, BAY 80-6946, BBR-3464, BBR-3576, bevacizumaba, BEZ-235, biricodar dicitrata, BCX-1777, BKM-120, bleocina, BLP-25, BMS-184476, BMS-247550, BMS-188797, BMS-275291, BMS-663513, BMS-754807, BNP-1350, BNP-7787, BIBW 2992 (afatiniba, tomtovoka), BIBF 1120 (vargatefa), BI 836845, BI 2536, BI 6727, BI 836845, BI 847325, BI 853520, BUB-022, bleomicinske kiseline, bleomicina A, bleomicina B, brivaniba, briostatina-1, bortezomiba, brostalicina, busulfana, BYL-719, CA-4 proleka, CA-4, CapCell, kalcitriola, kanertiniba, kanfosfamida, kapecitabina, karboksiftalatoplatina, CCl-779, CC-115, CC-223, CEP-701, CEP-751, CBT-1 cefiksima, ceflatonina, ceftriaksona, celekoksiba, celmoleukina, cemadotina, CH4987655/RO-4987655, hlorotrianisena, cilengitida, ciklosporina, CDA-II, CDC-394, CKD-602, CKI-27, klofarabina, kolhicina, kombretastatina A4, inhibitora COT, CHS-828, CH-5132799, CLL-Thera, CMT-3 kriptoficina 52, CTP-37, CTLA-4 monoklonskih antitela, CP-461, CV-247, cijanomorfolinodoksorubicina, citarabina, D 24851, decitabina, deoksorubicina, deoksirubicina, deoksikoformicina, depsipeptida, dezoksiepotilona B, deksametazona, deksrazoksaneta, dietilstilbestrola, diflomotekana, didoksa, DMDC, dolastatina 10, doranidazola, DS-7423, E7010, E-6201, edatreksata, edotreotida, efaproksirala, eflornitina, inhibitora EGFR, EKB-569, EKB-509, enzastaurina, enzalutamida, elsamitrucina, epotilona B, epratuzumaba, ER-86526, erlotiniba, ET-18-0CH3, etinilcitidina, etinilestradiola, eksatekana, eksatekan mezilata, eksemestana, eksisulinda, fenretinida, figitumumaba, floksuridina, folne kiseline, FOLFOX, FOLFOX4, FOLFIRI, formestana, fotemustina, galarubicina, galijum maltolata, gefinitiba, gemtuzumaba, gimatekana, glufosfamida, GCS-100, GDC-0623, GDC-0941 (piktrelisiba), GDC-0980, GDC-0032, GDC-0068, GDC-0349, GDC-0879, G17DT imunogena, GMK, GPX-100, gp100-peptidnih vakcina, GSK-5126766, GSK-690693, GSK-1120212 (trametiniba), GSK-2118436 (dabrafeniba), GSK-2126458, GSK-2132231A, GSK-2334470, GSK-2110183, GSK-2141795, GW2016, granisetrona, herceptina, heksametilmelamina, histamina, homoharingtonina, hijaluronske kiseline, hidroksiuree, hidroksiprogesteron kaproata, ibandronata, ibrutiniba, ibritumomaba, idatreksata, idenestrola, IDN-5109, inhibitora IGF-1R, IMC-1C11, IMC-A12 (ciksutumumaba), imunola, indisulama, interferona α-2a, interferona α-2b, pegilovanog interferona α-2b, interleukina-2, INK-1117, INK-128, INSM-18, jonafarniba, ipilimumaba, iproplatina, irofulvena, izohomohalihondrina-B, izoflavona, izotretinoina, iksabepilona, JRX-2, JSF-154, J-107088, konjugovanih estrogena, kahalida F, ketokonazola, KW-2170, KW-2450, lobaplatina, leflunomida, lenograstima, leuprolida, leuporelina, leksidronama, LGD-1550, linezolida, lutecijum teksafirina, lometreksola, lozoksantrona, LU 223651, lurtotekana, LY-S6AKT1, LY-2780301, mafosfamida, marimastata, mehloroetamina, inhibitora MEK, MEK-162, metiltestosterona, metilprednizolona, MEDI-573, MEN-10755, MDX-H210, MDX-447, MDX-1379, MGV, midostaurina, minodronske kiseline, mitomicina, mivobulina, MK-2206, MK-0646 (dalotuzumab), MLN518, moteksafa u gadolinijumu, MS-209, MS-275, MX6, neridronata, neratiniba, neksavara, neovastata, nilotiniba, nimesulida, nitroglicerina, nolatrekseda, norelina, N-acetilcisteina, 06-benzilguanina, oblimersena, omeprazola, onkofaga, onkoVEXGM-CSF, ormiplatina, ortataksela, OX44 antitela, OSI-027, OSI-906 (linsitinib), 4-1BB antitela, oksantrazola, estrogena, panitumumaba, patupilona, pegfilgrastima, PCK-3145, pegfilgrastima, PBI-1402, PBI-05204, PD0325901, PD-1 antitela, PEG-paklitaksela, albumin-stabilizovanog paklitaksela, PEP-005, PF-05197281, PF-05212384, PF-04691502, PHT-427, P-04, PKC412, P54, PI-88, pelitiniba, pemetrekseda, pentriksa, perifosina, perililalkohola, pertuzumaba, inhibitora PI3K, inhibitora PI3K/mTOR, PG-TXL, PG2, PLX-4032/RO-5185426 (vemurafeniba), PLX-3603/RO-5212054, PT-100, PWT-33597, PX-866, pikoplatina, pivaloiloksimetilbutirata, piksantrona, fenoksodiola O, PKI166, plevitrekseda, plikamicina, poliprenske kiseline, porfiromicina, prednizona, prednizolona, kvinameda, kvinupristina, R115777, RAF-265, ramosetrona, ranpirnaze, RDEA-119BAY 869766, RDEA-436, analoga rebekamicina, inhibitora receptor tirozin kinaze (RTK), regorafeniba, revimida, RG-7167, RG-7304, RG-7421, RG-7321, RG 7440, rizoksina, rhu-Mab, rinfabata, risedronata, rituksimaba, robatumumaba, rofekoksiba, RO-31-7453, RO-5126766, RO-5068760, RPR 109881A, rubidazona, rubitekana, R-flurbiprofena, RX-0201, S-9788, sabarubicina, SAHA, sargramostima, satraplatina, SB 408075, Se-015/Ve-015, SU5416, SU6668, SDX-101, semustina, seokalcitola, SM-11355, SN-38, SN-4071, SR-27897, SR-31747, SR-13668, SRL-172, sorafeniba, spiroplatina, skvalamina, suberanilohidroksamske kiseline, sutenta, T 900607, T 138067, TAK-733, TAS-103, tacedinalina, talaporfina, Tarceva, tarikvitara, tasisulama, taksotere, taksopreksina, tazarotena, tegafura, temozolamida, tesmilifena, testosterona, testosteron propionata, tesmilifena, tetraplatina, tetrodotoksina, tezacitabina, talidomida, teraluksa, terarubicina, timalfasina, timektacina, tiazofurina, tipifarniba, tirapazamina, tokladesina, tomudeksa, toremofina, trabektedina, TransMID-107, transretinske kiseline, traszutumaba, tremelimumaba, tretinoina, triacetiluridina, triapina, triciribina, trimetreksata, TLK-286TXD 258, tikerba/tiverba, urocidina, valrubicina, vatalaniba, vinkristina, vinflunina, virulizina, WX-UK1, WX-554, vectibiksa, kseloda, XELOX, XL-147, XL-228, XI,-281, XL-518/R-7420/GDC-0973, XL-765, YM-511, YM-598, ZD-4190, ZD-6474, ZD-4054, ZD-0473, ZD-6126, ZD-9331, ZD1839, ZSTK-474, zoledronata, zosukvidara i njihovih kombinacija.
[0124] Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži analog hormona, antihormon ili oba izabrane od tamoksifena, toremifena, raloksifena, fulvestranta, megestrol acetata, flutamida, nilutamida, bikalutamida, aminoglutetimida, ciproteron acetata, finasterida, buserelin acetata, fludrokortizona, fluoksimesterona, medroksi-progesterona, oktreotida i njihovih kombinacija; jednog ili više agonista i/ili antagonista LHRH izabranih od goserelin acetata, luprolid acetata, triptorelin pamoata i njihovih kombinacija i pri čemu su antagonisti LHRH su izabrani od degareliksa, cetroreliksa, abareliksa, ozareliksa, degareliksa i njihovih kombinacija; jednog ili više inhibitora faktora rasta izabranih od inhibitora sledećih: faktora rasta poreklom od trombocita (PDGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), vaskularnog endotelijalnog faktora rasta (VEGF), epidermalnog faktora rasta (EGF), insulinu-sličnog faktora rasta (IGF), humanog epidermalnog faktora rasta (HER) (kao što su HER2, HER3 i HER4) i faktora rasta hepatocita (HGF); jednog ili više inhibitora tirozin kinaze izabranog od cetuksimaba, gefitiniba, imatiniba, lapatiniba i trastuzumaba, i njihovih kombinacija; jednog ili više inhibitora aromataze izabranih od anastrozola, letrozola, liarozola, vorozola, eksemestana, atamestana i njihovih kombinacija; jednog ili više antimetabolita koji su antifolati izabrani od metotreksata, raltitrekseda i analoga pirimidina kao što su 5-fluorouracil, kapecitabin i gemcitabin; jednog ili više antimetabolita koji su analozi purina i/ili adenozina izabrani od merkaptopurina, tioguanina, kladribina i pentostatina, citarabina, fludarabina i njihovih kombinacija; jednog ili više antitumorskih antibiotika izabranih od antraciklina, doksorubicina, daunorubicina, epirubicina i idarubicina, mitomicina-C, bleomicina, daktinomicina, plikamicina, streptozocina i njihovih kombinacija; jednog ili više derivata platine izabranih od cisplatina, oksaliplatina, karboplatina i njihovih kombinacija; jednog ili više alkilacionih sredstava izabranih od estramustina, mekloretamina, melfalana, hlorambucila, busulfana, dakarbazina, ciklofosfamida, ifosfamida, temozolomida, nitrozourea i njihovih kombinacija; nitrozourea izabranih od karmustina, lomustina, tiotepa, i njihovih kombinacija; antimitotičkih sredstava izabranih od alkaloida vinke i taksana. Taksani mogu biti izabrani od paklitaksela, docetaksela i njihovih kombinacija. Alkaloidi vinke mogu biti izabrani od vinblastina, vindesina, vinorelbina, vinkristina i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži jedan ili više inhibitora topoizomeraze koji su epipodofilotoksini kao što su etoposid i etopofos, teniposid, amsakrin, topotekan, irinotekan, mitoksantron i njihove kombinacije. Drugo teraoeutsko sredstvo može da sadrži jedan ili više inhibitora serin/treonin kinaze izabrane od inhibitora PDK 1, inhibitora B-Raf, inhibitora mTOR, inhibitora mTORC1, inhibitora PI3K, dvostrukih inhibitora mTOR/PI3K, inhibitora STK 33, inhibitora AKT, inhibitora PLK 1, inhibitora CDK, inhibitora aurora kinaze i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži jedan ili više inhibitora tirozin kinaze koji su inhibitori PTK2/FAK. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži jedan ili više inhibitora interakcije protein protein izabranih od IAP, Mcl-1, MDM2/MDMX i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži jedan ili više analoga rapamicina izabranih od everolimusa, temsirolimusa, ridaforolimusa, sirolimusa i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži jedan ili više terapeutskih sredstava izabranih od amifostina, anagrelida, klodronata, filgrastina, interferona, interferona α, leukovorina, rituksimaba, prokarbazina, levamisola, mesna, mitotana, pamidronata i porfimera, i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži jedno ili više terapeutskih sredstava izabranih od 2-hlorodezoksiadenozina, 2-fluorodezoksi-citidina, 2-metoksiestradiola, 2C4,3-aletina, 131-1-TM-601, 3CPA, 7-etil-10-hidroksikamptotecina, 16-aza-epotilona B, A 105972, A 204197, abiraterona, aldesleukina, alitretinoina, alovektina-7, altretamina, alvocidiba, amonafida, antrapirazola, AG-2037, AP-5280, apazikvona, apomina, aranoze, arglabina, arzoksifena, atamestana, atrasentana, auristatina PE, ABT-199 (venetoklaksa), ABT-263 (navitoklaksa), AVLB, AZ10992, ABX-EGF, AMG-479 (ganitumaba), ARRY 162, ARRY 438162, ARRY-300, ARRY-142886/AZD-6244 (selumetiniba), ARRY-704/AZD-8330, AR-12, AR-42, AS-703988, AXL-1717, AZD-8055, AZD-5363, AZD-6244, ARQ-736, ARQ 680, AS-703026 (primasertiba), avastina, AZD-2014, azacitidina, azaepotilona B, azonafida, BAY-43-9006, BAY 80-6946, BBR-3464, BBR-3576, bevacizumaba, BEZ-235, biricodar dicitrata, BCX-1777, BKM-120, bleocina, BLP-25, BMS-184476, BMS-247550, BMS-188797, BMS-275291, BMS-663513, BMS-754807, BNP-1350, BNP-7787, BIBW 2992 (afatiniba, tomtovoka), BIBF 1120 (vargatefa), BI 836845, BI 2536, BI 6727, BI 836845, BI 847325, BI 853520, BUB-022, bleomicinske kiseline, bleomicina A, bleomicina B, brivaniba, briostatina-1, bortezomiba, brostalicina, busulfana, BYL-719, CA-4 proleka, CA-4, CapCell, kalcitriola, kanertiniba, kanfosfamida, kapecitabina, karboksiftalatoplatina, CCl-779, CC-115, CC-223, CEP-701, CEP-751, CBT-1 cefiksima, ceflatonina, ceftriaksona, celekoksiba, celmoleukina, cemadotina, CH4987655/RO-4987655, hlorotrianisena, cilengitida, ciklosporina, CDA-II, CDC-394, CKD-602, CKI-27, klofarabina, kolhicina, kombretastatina A4, inhibitora COT, CHS-828, CH-5132799, CLL-Thera, CMT-3 kriptoficina 52, CTP-37, CTLA-4 monoklonskih antitela, CP-461, CV-247, cijanomorfolinodoksorubicina, citarabina, D 24851, decitabina, deoksorubicina, deoksirubicina, deoksikoformicina, depsipeptida, dezoksiepotilona B, deksametazona, deksrazoksaneta, dietilstilbestrola, diflomotekana, didoksa, DMDC, dolastatina 10, doranidazola, DS-7423, E7010, E-6201, edatreksata, edotreotida, efaproksirala, eflomitina, inhibitora EGFR, EKB-569, EKB-509, enzastaurina, enzalutamida, elsamitrucina, epotilona B, epratuzumaba, ER-86526, erlotiniba, ET-18-0CH3, etinilcitidina, etinilestradiola, eksatekana, eksatekan mezilata, eksemestana, eksisulinda, fenretinida, figitumumaba, floksuridina, folne kiseline, FOLFOX, FOLFOX4, FOLFIRI, formestana, fotemustina, galarubicina, galijum maltolata, gefinitiba, gemtuzumaba, gimatekana, glufosfamida, GCS-100, GDC-0623, GDC-0941 (pictrelisiba), GDC-0980, GDC-0032, GDC-0068, GDC-0349, GDC-0879, G17DT imunogena, GMK, GPX-100, gp100-peptidnih vakcina, GSK-5126766, GSK-690693, GSK-1120212 (trametiniba), GSK-2118436 (dabrafeniba), GSK-2126458, GSK-2132231A, GSK-2334470, GSK-2110183, GSK-2141795, GW2016, granisetrona, herceptina, heksametilmelamina, histamina, homoharingtonina, hijaluronske kiseline, hidroksiuree, hidroksiprogesteron kaproata, ibandronata, ibrutiniba, ibritumomaba, idatreksata, idenestrola, IDN-5109, inhibitora IGF-1R, IMC-1C11, IMC-A12 (ciksutumumaba), imunola, indisulama, interferona α-2a, interferona α-2b, pegilovanog interferona α-2b, interleukina-2, INK-1117, INK-128, INSM-18, ionafamiba, ipilimumaba, iproplatina, irofulvena, izohomohalihondrina-B, izoflavona, izotretinoina, iksabepilona, JRX-2, JSF-154, J-107088, konugovanih estrogena, kahalida F, ketokonazola, KW-2170, KW-2450, lobaplatina, leflunomida, lenograstima, leuprolida, leuporelina, leksidronama, LGD-1550, linezolida, lutecijum teksafirina, lometreksola, losoksantrona, LU 223651, lurtotekana, LY-S6AKT1, LY-2780301, mafosfamida, marimastata, mehloroetamina, inhibitora MEK, MEK-162, metiltestosterona, metilprednizolona, MEDI-573, MEN-10755, MDX-H210, MDX-447, MDX-1379, MGV, midostaurina, minodronske kiseline, mitomicina, mivobulina, MK-2206, MK-0646 (dalotuzumaba), MLN518, moteksafa u gadolinijumu, MS-209, MS-275, MX6, neridronata, neratiniba, neksavara, neovastata, nilotiniba, nimesulida, nitroglicerina, nolatrekseda, norelina, N-acetilcisteina, 06-benzilguanina, oblimersena, omeprazola, onkofaga, onkoVEXGM-CSF, ormiplatina, ortataksela, OX44 antitela, OSI-027, OSI-906 (linsitiniba), 4-1BB antitela, oksantrazola, estrogena, panitumumaba, patupilona, pegfilgrastima, PCK-3145, pegfilgrastima, PBI-1402, PBI-05204, PDO325901, PD-1 antitela, PEG-paklitaksela, albuminom-stabilizovanog paklitaksela, PEP-005, PF-05197281, PF-05212384, PF-04691502, PHT-427, P-04, PKC412, P54, PI-88, pelitiniba, pemetrekseda, pentriksa, perifosina, perililalkohola, pertuzumaba, inhibitora PI3K, inhibitora PI3K/mTOR, PGTXL, PG2, PLX-4032/RO-5185426 (vemurafeniba), PLX-3603/RO-5212054, PT-100, PWT-33597, PX-866, pikoplatina, pivaloiloksimetilbutirata, piksantrona, fenoksodiola O, PKI166, plevitrekseda, plikamicina, poliprenske kiseline, porfiromicina, prednizona, prednizolona, kvinameda, kvinupristina, R115777, RAF-265, ramosetrona, ranpirnaze, RDEA-119BAY 869766, RDEA-436, analoga rebekamicina, inhibitora receptor tirozin kinaze (RTK), revimida, RG-7167, RG-7304, RG-7421, RG-7321, RG 7440, rizoksina, rhu-Mab, rinfabata, risedronata, rituksimaba, robatumumaba, rofekoksiba, RO-31-7453, RO-5126766, RO-5068760, RPR 109881A, rubidazona, rubitekana, R-flurbiprofena, RX-0201, S-9788, sabarubicina, SAHA, sargramostima, satraplatina, SB 408075, Se-015/Ve-015, SU5416, SU6668, SDX-101, semustina, seokalcitola, SM-11355, SN-38, SN-4071, SR-27897, SR-31747, SR-13668, SRL-172, sorafeniba, spiroplatina, skvalamina, suberanilohidroksamske kiseline, sutenta, T 900607, T 138067, TAK-733, TAS-103, tacedinalina, talaporfina, Tarceva, tarikvitara, tasisulama, taksotere, taksopreksina, tazarotene, tegafura, temozolamida, tesmilifena, testosterona, testosteron propionata, tesmilifena, tetraplatina, tetrodotoksina, tezacitabina, talidomida, teraluksa, terarubicina, timalfasina, timektacina, tiazofurina, tipifarniba, tirapazamina, tokladesina, tomudeksa, toremofina, trabektedina, TransMID-107, transretinske kiseline, traszutumaba, tremelimumaba, tretinoina, triacetiluridina, triapina, triciribina, trimetreksata, TLK-286TXD 258, tikerba/tiverba, urocidina, valrubicina, vatalaniba, vinkristina, vinflunina, virulizina, WX-UK1, WX-554, vectibiksa, kseloda, XELOX, XL-147, XL-228, XL-281, XL-518/R-7420/GDC-0973, XL-765, YM-511, YM-598, ZD-4190, ZD-6474, ZD-4054, ZD-0473, ZD-6126, ZD-9331, ZD1839, ZSTK-474, zoledronata, zosukvidara i njihovih kombinacija.
[0125] Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži steroid, uključujući deksametazon, prednizolon, metil prednizolon, prednizon, hidrokortizon, triamcinolon, betametazon i kortivazol. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži antiemetik kao što su agonisti 5-HT3 receptora (npr., dolasetron, granisetron, ondansetron, tropisetron, palonosetron i mirtazapin), agonisti dopamina (npr., domperidon, olanzapin, droperidol, haloperidol, hlorpromazin, prohlorperazin, alizaprid, prohlorperazin i metoklopramid), antagonisti NK1 receptora (npr., aprepitant i kazopitant), antihistaminici (kao što su ciklizin, difenhidramin, dimenhidrinat, doksilamin, meklizin, prometazin, hidroksizin), kanabinoidi (npr., kanabis, dronabinol, nabilon i sativeks), benzodiazepini (npr., midazolam i lorazepam), antiholinergici (npr., hioscin), trimetobenzamid, đumbir, emetrol, propofol, pepermint, muscimol i ajvain.
[0126] Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži sredastvo protiv kancera, koji uključuje mitotički inhibitor kao što je taksan, na primer taksan izabran od paklitaksela i docetaksela.
[0127] Farmaceutska kompozicija može uključivati imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i najmanje jedno sredstvo protiv kancera, koje može uključivati jedan ili više od acivicina, aklarubicina, akodazola, akronina, adozelesina, aldesleukina, alitretinoina, alopurinola, altretamina, ambomicina, ametantrona, amifostina, aminoglutetimida, amsakrina, anastrozola, antramicina, arsen trioksida, asparaginaze, asperlina, azacitidina, azetepa, azotomicina, batimastata, benzodepa, bevacizumaba, bikalutamida, bisantrena, bisnafid dimesilata, bizelesina, bleomicina, brekvinara, bropirimina, busulfana, kaktinomicina, kalusterona, kapecitabina, caracemida, karbetimer, karboplatina, karmustina, karubicina, karzelesina, cedefingola, celekoksiba, hlorambucila, cirolemicina, cisplatina, kladribina, krisnatol mezilata, ciklofosfamida, citarabina, dakarbazina, daktinomicina, daunorubicina, decitabina, deksormaplatina, dezaguanina, dezaguanin mezilata, diazikvona, docetaksela, doksorubicina, droloksifena, dromostanolona, duazomicina, edatreksata, eflomitina, elsamitrucina, enloplatina, enpromata, epipropidina, epirubicina, erbulouzola, esorubicina, estramustina, etanidazola, etoposida, etoprina, fadrozola, fazarabina, fenretinida, floksuridina, fludarabina, fluorouracila, flurocitabina, foskvidona, fostriecina, fulvestranta, gemcitabina, hidroksiuree, idarubicina, ifosfamida, ilmofosina, interleukina II (IL-2, uključujući rekombinantni interleukin II ili rIL2), interferona α-2a, interferona α-2b, interferona α-n1, interferona α-n3, interferona β-Ia, interferona gama-Ib, iproplatina, irinotekana, lanreotida, letrozola, leuprolida, liarozola, lometreksola, lomustina, losoksantrona, masoprokola, majtanzina, mehloretamin hidrohlorida, megestrola, melengestrol acetata, melfalana, menogarila, merkaptopurina, metotreksata, metoprina, meturedepa, mitindomida, mitokarcina, mitokromina, mitogilina, mitomalcina, mitomicina, mitospera, mitotana, mitoksantrona, mikofenolne kiseline, nelarabina, nokodazola, nogalamicina, ormnaplatina, oksisurana, paklitaksela, pegaspargaze, peliomicina, pentamustina, peplomicina, perfosfamida, pipobromana, piposulfana, piroksantron hidrohlorida, plikamicina, plomestana, porfimera, porfiromicina, prednimustina, prokarbazina, puromicina, pirazofurina, riboprina, rogletimida, safingola, semustina, simtrazena, sparfosata, sparsomicina, spirogermanijuma, spiromustina, spiroplatina, streptonigrina, streptozocina, sulofenura, talisomicina, tamoksifena, tekogalana, tegafura, teloksantrona, temoporfina, reniposida, teroksirona, testolaktona, tiamiprina, tioguanina, tiotepa, tiazofurina, tirapazamina, topotekana, toremifena, trestolona, triciribina, trimetreksata, triptorelina, tubulozola, uracil iperita, uredepa, vapreotida, verteporfina, vinblastina, vinkristin sulfata, vindezina, vinepidina, vinglicinata, vinleurozina, vinorelbina, vinrozidina, vinzolidina, vorozola, zeniplatina, zinostatina, zoledronata, zorubicina i njihovih kombinacija.
[0128] Primeri pogodnih sredstava protiv kancera uključuju one opisane u Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 12th Ed., edited by Laurence Brunton, Bruce Chabner, Bjorn Knollman, McGraw Hill Professional, 2010.
[0129] Farmaceutska kompozicija može uključivati so (npr. mono- ili di-so) imipridona, npr., ONC201, ili njegov analog i najmanje jedno drugo terapeutsko sredstvo, pri čemu drugo terapeutsko sredstvo sadrži antiangiogeno sredstvo, na primer, bevacizumab. Anti-angiogeno sredstvo može biti izabrano od aflibercepta, aksitiniba, angiostatina, endostatina, 16kDa prolaktinskog fragmenta, laminin peptida, fibronektinskih peptida, inhibitora metaloproteinaze tkiva (TIMP 1, 2, 3, 4), inhibitora aktivatora plazminogena (PAI-1, -2), faktora α nekroze tumora (visoka doza, in vitro), TGF-β1, interferona (IFN-α, -β, γ), ELR-CXC hemokina, IL-12; SDF-1; MIG; trombocitnog faktora 4 (PF-4); IP-10, trombospondina (TSP), SPARC, 2-metoksioestradiola, proteina vezanog za proliferin, suramina, sorafeniba, regorafeniba, talidomida, kortizona, linomida, fumagilina (AGM-1470; TNP-470), tamoksifena, retinoida, CM101, deksametazona, inhibitornog faktora leukemije (LIF), inhibitora Hedgehog i njihovih kombinacija.
[0130] Farmaceutska kombinacija može uključiti prvo i drugo terapeutsko sredstvo u bilo kojoj željenoj proporciji pod uslovom da se i dalje javlja sinergistički ili kooperativni efekat. Sinergistička farmaceutska kombinacija poželjno sadrži prvo i drugo terapeutsko sredstvo u odnosu od oko 1:9 do oko 9:1. Sinergistička kombinacija može da sadrži prvo i drugo terapeutsko sredstvo u odnosu od oko 1:8 do oko 8:1, od oko 1:7 do oko 7:1, od oko 1:6 do oko 6:1, od oko 1:5 do oko 5:1, od oko 1:4 do oko 4:1, od oko 3:1 do oko 1:3, ili od oko 1:2 do oko 2:1. Sinergistička kombinacija može da sadrži terapeutska sredstva u odnosu od približno 1:1.
[0131] Drugo terapeutsko sredstvo može da se izabere od alopurinola, arsen trioksida, azacitidina, bortezomiba, bevacizumaba, kapecitabina, karboplatina, celekoksiba, hlorambucila, klofarabina, citarabina, dakarbazina, daunorubicin HCl, docetaksela, dokorubicina HCl, floksuridina, gemcitabina HCl, hidroksiuree, ifosfamida, imatinib mezilata, iksabepilona, lenalidomida, megestrol acetata, metotreksata, mitotana, mitoksantrona HCl, oksaliplatina, paklitaksela, pralatreksata, romidepsina, sorafeniba, streptozocina, tamoksifen citrata, topotekana HCl, tretinoina, vandetaniba, vismodegiba, vorinostata i njihovih kombinacija.
[0132] Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži male molekule inhibitora multi-kinaze, npr., sorafenib ili regorafenib. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži inhibitor Hedgehog puta, npr., vismodegib. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati lek izabran iz Tabele 2 ispod.
Tabela 2: Klase lekova
[0133] Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati lekove koji ciljno deluju na receptore liganda koji indukuje apoptozu (TRAIL) povezanu sa faktorom nekroze tumora. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati rekombinantni TRAIL ili agonističko antitelo koje aktivira jedan ili više TRAIL receptora. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati jedno ili više antitela ili rekombinantnog TRAIL koji aktiviraju prenos signala pomoću DR4, DR5 ili oba. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati jedan ili više AMG-655, LBY-135, mapatumumab, leksatumumab, Apomab i rhApo2L/TRAIL. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati aktivno sredstvo izabrano od kamptotecina, 5-FU, kapecitabina, cisplatina, doksorubicina, irinotekana, paklitaksela, cisplatina, bortezomiba, BH3I-2, rituksimaba, zračenja, triterpenoida, sorafeniba, gemcitabina, inhibitora HDAC, karboplatina, T-101 (derivata gosipola), ABT-263, ABT-737 i GX-15-070 (obatoklaksa), vorinostata, cetuksimaba, panitumumaba, bevacizumaba, ganitumaba, interferona gama, sorafeniba, antagonista XIAP-2, antagonista Bcl-2 i Smac mimetika.
VI. DOZA
[0134] Farmaceutska kompozicija može da sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u dozi koja je u opsegu od oko 40, 50, 60, ili 100 mg do oko 2000 mg; od oko 4, 5, 6, ili 10 mg do oko 200 mg; ili od oko 0.4, 0.5, 0.6, ili 1 mg do oko 20 mg gde težina može biti zasnovana na jedinjenju u njegovom obliku slobodne baze. Farmaceutska kompozicija može da sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u nivou doze u opsegu od oko 50 mg do oko 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, ili 2000 mg; od oko 5 mg do oko 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, and 200 mg; ili od oko 0.5 mg do oko 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, i 20 mg; i/ili nivou doze u opsegu od oko 40 mg do oko 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, ili 2000 mg; od oko 4 mg do oko 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, ili 200 mg; ili od oko 0.4 mg do oko 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 i 20 mg; i/ili nivou doze u opsegu od oko 60 mg do oko 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, ili 2000 mg; od oko 6 mg do oko 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, ili 200 mg; ili od oko 0.6 mg do oko 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20 mg; i/ili nivou doze u opsegu od oko 100 mg do oko 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900 mg, ili 2000 mg; od oko 10 mg do oko 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, ili 200 mg; ili od oko 1 mg do oko 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20 mg. Farmaceutska kompozicija može da sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u nivou doze u opsegu od oko 200 mg do oko 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, ili 2000 mg; od oko 20 mg do oko 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, ili 200 mg; ili od oko 2 mg do oko 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20 mg, na bazi jedinjenja u njegovom obliku slobodne baze; i/ili nivou doze u opsegu od oko 400 mg do oko 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, ili 2000 mg; od oko 40 mg do oko 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, ili 200 mg; ili od oko 4 mg do oko 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20 mg na bazi jedinjenja u njegovom obliku slobodne baze. Farmaceutska kompozicija može da sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u nivou doze u opsegu od oko 50 mg do oko 60, 70, 80, 90, ili 100 mg; od oko 60 mg do oko 70, 80, 90, ili 100 mg; od oko 70 mg do oko 80, 90 ili 100 mg, od oko 80 mg do oko 90 ili 100 mg; od oko 90 mg do oko 100 mg; od oko 5 mg do oko 6, 7, 8, 9, ili 10 mg; od oko 6 mg do oko 7, 8, 9, ili 10 mg; od oko 7 mg do oko 8, 9 ili 10 mg, od oko 8 mg do oko 9 ili 10 mg; od oko 9 mg do oko 10 mg; od oko 0.5 mg do oko 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, ili 1 mg; od oko 0.6 mg do oko 0.7, 0.8, 0.9, ili 1 mg; od oko 0.7 mg do oko 0.8, 0.9 ili 1 mg, od oko 0.8 mg do oko 0.9 ili 1 mg; ili od oko 0.9 mg do oko 1 mg.
[0135] Farmaceutska kompozicija može da sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u dozi u opseguod oko 1 mg/kg do oko 40 mg/kg; 0.1 mg/kg do oko 4 mg/kg; ili 0.01 mg/kg do oko 0.40 mg/kg; kao što je nivo doze u opsegu od oko 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, ili 9 mg/kg do oko 10, 20, 30, ili 40 mg/kg; od oko 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, ili 19 mg/kg do oko 20, 30, ili 40 mg/kg; od oko 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, ili 29 mg/kg do oko 30 ili 40 mg/kg; od oko 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, ili 39 mg/kg do oko 40 mg/kg; od oko 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, ili 0.9 mg/kg do oko 1, 2, 3, ili 4 mg/kg; od oko 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, ili 1.9 mg/kg do oko 2, 3, ili 4 mg/kg; od oko 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, ili 2.9 mg/kg do oko 3 ili 4 mg/kg; ili od oko 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, ili 3.9 mg/kg do oko 4 mg/kg; od oko 0.01, 0.02, 0.03, 0.04, 0.05, 0.06, 0.07, 0.08, 0.09 mg/kg do oko 0.10, 0.20, 0.30, ili 0.40 mg/kg; od oko 0.10, 0.11, 0.12, 0.13, 0.14, 0.15, 0.16, 0.17, 0.18, ili 0.19 mg/kg do oko 0.20, 0.30, ili 0.40 mg/kg; od oko 0.20, 0.21, 0.22, 0.23, 0.24, 0.25, 0.26, 0.27, 0.28, ili 0.29 mg/kg do oko 0.30 ili 0.400.mg/kg; ili od oko 0.30, 0.31, 0.32, 0.33, 0.34, 0.35, 0.36, 0.37, 0.38, ili 0.39 mg/kg do oko 0.40 mg/kg.
[0136] Farmaceutska kompozicija može da sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u dozi u opsegu od oko 37.5 mg/m<2>do oko 1500 mg/m<2>; od oko 3.75 mg/m<2>do oko 150 mg/m<2>; ili od oko 0.4 mg/m<2>do oko 15 mg/m<2>Farmaceutska kompozicija može da sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u dozi u opsegu od oko 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, 295, 300, 305, 310, 315, 320, 325, 330, 335, 340, 345, 350, 355, 360, 365, 370, 375, 380, 385, 390, 395, 400, 405, 410, 415, 420, 425, 430, 435, 440, 445, 450, 455, 460, 465, 470, 475, 480, 485, 490, 495, 500, 505, 510, 515, 520, 525, 530, 535, 540, 545, 550, 555, 560, 565, 570, 575, 580, 585, 590, 595, 600, 605, 610, 615, 620, 625, 630, 635, 640, 645, 650, 655, 660, 665, 670, 675, 680, 685, 690, 695, 700, 705, 710, 715, 720, 725, 730, 735, 740, 745, 750, 755, 760, 765, 770, 775, 780, 785, 790, 795, 800, 805, 810, 815, 820, 825, 830, 835, 840, 845, 850, 855, 860, 865, 870, 875, 880, 885, 890, 895, 900, 905, 910, 915, 920, 925, 930, 935, 940, 945, 950, 955, 960, 965, 970, 975, 980, 985, 990, 995, 1000, 1005, 1010, 1015, 1020, 1025, 1030, 1035, 1040, 1045, 1050, 1055, 1060, 1065, 1070, 1075, 1080, 1085, 1090, 1095, 1100, 1105, 1110, 1115, 1120, 1125, 1130, 1135, 1140, 1145, 1150, 1155, 1160, 1165, 1170, 1175, 1180, 1185, 1190, 1195, 1200, 1205, 1210, 1215, 1220, 1225, 1230, 1235, 1240, 1245, 1250, 1255, 1260, 1265, 1270, 1275, 1280, 1285, 1290, 1295, 1300, 1305, 1310, 1315, 1320, 1325, 1330, 1335, 1340, 1345, 1350, 1355, 1360, 1365, 1370, 1375, 1380, 1385, 1390, 1395, 1400, 1405, 1410, 1415, 1420, 1425, 1430, 1435, 1440, 1445, 1450, 1455, 1460, 1465, 1470, 1475, 1480, 1485, 1490, 1495 mg/m<2>do oko 1500 mg/m<2>; od oko 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 mg/m<2>do oko 150 mg/m<2>; ili od oko 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 111, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 mg/m<2>do oko 15 mg/m<2>.
VII. DOZNI OBLICI
[0137] Pogodne farmaceutske kompozicije za upotrebu u ovde opisanim postupcima mogu se formulisati u dozni oblik koji se može primeniti na pacijenta. Farmaceutska kompozicija može biti u obliku oralne dozne jedinice ili parenteralne dozne jedinice. Farmaceutska kompozicija može biti u obliku oralne dozne jedinice. Oralna dozna jedinica može biti frakcionisana u nekoliko, manjih doza, koje se primenjuju na subjekta tokom unapred određenog vremenskog perioda da bi se smanjila toksičnost terapeutskog sredstva koji se primenjuje. Oralna dozna jedinica se može primenjivati tabletom ili kapsulom koja sadrži formulaciju sa kontrolisanim oslobađanjem koja može uključivati više čestica, granula, peleta, minitableta ili tableta. Farmaceutska kompozicija može biti u obliku parenteralne dozne jedinice. Parenteralna dozna jedinica može biti izabrana iz grupe koja se sastoji od intravenske (IV), subkutane (SC) i intramuskularne (M), rektalne (PR) i transdermalne dozne jedinice. Kompozicija može biti u doznom obliku izabranom iz grupe koja se sastoji od sterilnih rastvora, suspenzija, supozitorija, tableta i kapsula. Kompozicija može biti oralni dozni oblik izabran iz grupe koja se sastoji od tablete, kaplete, kapsule, pastile, sirupa, tečnosti, suspenzije i eliksira. Kompozicija može biti u oralnom doznom obliku izabranom iz grupe koja se sastoji od tableta, kapsula sa tvrdom ljuskom, mekih želatinoznih kapsula, perli, granula, agregata, praškova, gelova, čvrstih supstanci i polučvrstih supstanci.
[0138] Pogodni oblici farmaceutskih kompozicija za upotrebu u postupcima opisanim ovde mogu uključivati dermatološke kompozicije prilagođene za topikalnu primenu na koži. Na primer, dermatološke kompozicije mogu uključivati kozmetički ili farmaceutski prihvatljiv medijum. Dermatološke kompozicije za topikalnu primenu mogu uključivati masti, losione, kreme, gelove, kapi, supozitorije, sprejeve, tečnosti i prahove. Konvencionalni farmaceutski nosači, vodene, praškaste ili uljane baze, sredstva za zgušnjavanje, pojačivači kože mogu biti neophodni ili poželjni i stoga se mogu koristiti. Primeri pogodnih pojačivača uključuju etre kao što je dietilen glikol monoetil etar (komercijalno dostupan kao TRANSCUTOL<®>) i dietilen glikol monometil etar; surfaktante kao što su natrijum laurat, natrijum lauril sulfat, cetiltrimetilamonijum bromid, benzalkonijum hlorid, poloksamer (231, 182, 184), Tween (20, 40, 60, 80) i lecitin (US Pat.
4,783,450); alkohole kao što su etanol, propanol, oktanol, benzil alkohol; polietilen glikol i njegovi estri kao što je polietilen glikol monolaurat; amide i druga azotna jedinjenja kao što su urea, dimetilacetamid (DMA), dimetilformamid (DMF), 2-pirolidon, l-metil-2-pirolidon, etanolamin, dietanolamin i trietanolamin; terpene; alkanone; i organske kiseline, posebno limunsku kiselinu i ćilibarnu kiselinu. AZONE<®>i sulfokside kao što su DMSO i Cι0MSO se takođe mogu koristiti, ali su manje poželjni.
[0139] Farmaceutska kompozicija može biti u doznom obliku izabranom iz grupe koja se sastoji od oblika sa produženim oslobađanjem, oblika sa kontrolisanim oslobađanjem, oblika sa odloženim oslobađanjem i oblika za oslobađanje prema odgovoru.
VIII. POSTUPCI UPOTREBE
[0140] Kompozicije i postupci opisani ovde su korisni u lečenju mnogih bolesnih stanja, uključujući kancer (npr., kolorektalni, mozga i glioblastom). Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje bolesti kao što su okularni melanom, dezmoplastični tumor okruglih ćelija, hondrosarkom, leptomengijalna bolest, difuzni krupnoćelijski B-ćelijski limfom, akutna limfoblastična leukemija, akutna mijeloidna leukemija, adrenokortikalni karcinom, kanceri povezani sa SIDA-om, limfomi povezani sa SIDA-om, analni ili rektalni kancer, kancer slepog creva, astrocitomi i atipični teratoidni/rabdoidni tumor. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje bolesti kao što su karcinom bazalnih ćelija, sindrom nevusa bazalnih ćelija, sindrom Gorlin-nevusa, kancer žučnih kanala, kancer mokraćne bešike, kancer kostiju, osteosarkom i maligni fibrozni histiocitom, tumor mozga, kancer dojke, bronhijalni tumori, Burkitt-ov limfom, tumori kičmene moždine. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje bolesti kao što su karcinoidni tumor, karcinom nepoznatog primarnog mesta, atipični teratoidni/rabdoidni tumor centralnog nervnog sistema, leptomeningealna bolest, embrionalni tumori centralnog nervnog sistema, limfom centralnog nervnog sistema, kancer cerviksa, hordom, hronična limfocitna leukemija, hronična mijelogena leukemija, hronični mijeloproliferativni poremećaji, kancer debelog creva, kolorektalni kancer, kraniofaringiom i kutani T-ćelijski limfom (uključujući Sezary sindrom i mikozis fungoides (MF)). Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu se koristiti za lečenje bolesti kao što su embrionalni tumori centralnog nervnog sistema, kancer endometrijuma, ependimoblastom, ependimom, kancer jednjaka, porodica tumora Ewing-ovog sarkoma, ekstrakranijalni tumor germinativnih ćelija, ekstragonadni tumor germinativnih ćelija, ekstrahepatični kancer žučnih kanalai kancer oka, uključujući intraokularni melanom i retinoblastom. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje bolesti kao što su kancer žučne kese, gastični kancer (želudca), gastrointestinalni karcinoidni tumor, gastrointestinalni stromalni tumor (GIST), tumor germinativnih ćelija, gestacioni trofloblastični tumor i gliom. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje kancera izabranog iz grupe koja se sastoji od leukemije dlakavih ćelija, kancera glave i vrata, hepatocelularnnog kancera (jetre), histiocitoze, Hodgkin-ovog limfoma i kancera hipofarinksa. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje bolesti kao što su Kaposi-ev sarkom i kancer bubrega (bubrežnih ćelija). Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje bolesti kao što su histiocitoza Langerhansovih ćelija, kancer larinksa, kancer usne i usne duplje, kancer jetre, kancer pluća, uključujući nestinoćelijski kancer i sitnoćelijski kancer pluća, ne-Hodgkin-ov limfom i primarni limfom centralnog nervnog sistema. Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu se koristiti za lečenje bolesti kao što su Waldenström-ova makroglobulinemija (limfoplazmacitni limfom), maligni fibrozni histiocitom kostiju i osteosarkom, meduloblastom, meduloepiteliom, melanom, karcinom Merkel ćelija, mezoteliom, metastatički skvamozni kancer vrata sa okultnim primarnim, sindromom višestruke endokrine neoplazije, kancer usta, multipli mijelom/neoplazma plazma ćelija, mikozis fungoides, mijelodisplastični sindromi, složeni kariotip, leukemija blastične faze, mijelodisplastične/ mijeloproliferativne neoplazme, multipli mijelom i mijeloproliferativni poremećaji. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje kancera. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje bolesti kao što su kancer nosne šupljine i paranazalnog sinusa, nazofaringealni kancer i neuroblastom. Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu se koristiti za lečenje bolesti kao što su oralni kancer, kancer usne i usne duplje, orrofaringealni kancer, osteosarkom i maligni fibrozni histiocitom kostiju, kancer jajnika, tumor germinativnih ćelija jajnika, epitelijalni kancer jajnika i tumor jajnika niskog malignog potencijala. Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu se koristiti za lečenje bolesti kao što su kancer pankreasa, papilomatoza, kancer paranazalnih sinusa i nosne šupljine, kancer paratiroidne žlezde, kancer penisa, faringealni kancer, tumori parenhima epifize intermedijerne diferencijacije, pineoblastom i supratentorijalni primitivni neuroektodermalni tumori, tumor hipofize, pleuropulmonarni blastom, kancer u trudnoći i dojke, primarni limfom centralnog nervnog sistema i kancer prostate. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje kancera izabranog iz grupe koja se sastoji od kancera rektuma, kancera bubrežnih ćelija (bubrega), kancera bubrežne karlice i uretera, karcinoma respiratornog trakta koji uključuje NUT gen na hromozomu 15, retinoblastoma i rabdomiosarkoma. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje kancera prostate visokog stepena, kancera prostate srednjeg stepena ili kancera prostate niskog stepena. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje kancera prostate rezistentnog na kastraciju. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje tumora nervnog sistema, kao što je tumor centralnog nervnog sistema. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje tumora perifernog nervnog sistema. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje paraganglioma. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje feohromocitoma.
[0141] U in vitro modelima, na životinjskim modelima i u kliničkim ispitivanjima na ljudima, jedinjenje (1) (ONC201) ima široku antikancerogenu aktivnost, nisku toksičnost uključujući nekoliko, ako ih ima, neželjenih efekata, nisku genotoksičnost i visoku biodostupnost uključujući oralnu biodostupnost. Ove karakteristike omogućavaju da ONC 201 i različiti analozi budu posebno pogodni za pedijatrijske pacijente. Ove karakteristike takođe čine ONC 201 i razne analoge posebno pogodnim za hroničnu terapiju, za pacijente sa visokim rizikom i za obezbeđivanje dugotrajnih odgovora ili stabilne bolesti ili za sprečavanje recidiva bolesti.
[0142] Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje pedijatrijskog kancera (npr., pedijatrijskih solidnih tumora, pedijatrijskih sarkoma, pedijatrijskig Ewing-ovih sarkoma, pedijatrijskih glioma, pedijatrijskih kancera centralnog nervnog sistema, pedijatrijskog neuroblastoma, pedijatrijske leukemije i pedijatrijskog limfoma).
[0143] Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje proliferativnog poremećaja kože kao što je psorijaza. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje kancera izabranog iz grupe koja se sastoji od kancera pljuvačne žlezde, sarkoma, Sezaryevog sindroma, kancera kože, okularnog kancera, karcinoma kože, kancera tankog creva, sarkoma mekog tkiva, karcinoma skvamoznih ćelija, skvamoznog kancera vrata sa okultnim primarnim i suptratentorijalnih primitivnih neuroektodermalnih tumora. Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu se koristiti za lečenje kancera izabranog iz grupe koja se sastoji od limfoma T-ćelija, kancera testisa, kancera grla, timoma i karcinoma timusa, kancera štitne žlezde, kancera prelaznih ćelija bubrežne karlice i uretera i gestacionog trofoblastičnog tumora. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje kancera izabranog iz grupe koja se sastoji od karcinoma nepoznatog primarnog mesta, kancera nepoznatog primarnog mesta, neuobičajenih pedijatrijskog kancera, kancera prelaznih ćelija bubrežne karlice i uretera, kancera uretre i sarkoma materice. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste za lečenje kancera izabranog iz grupe koja se sastoji od vaginalnog kancera i kancera vulve. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti za lečenje kancera izabranog iz grupe koja se sastoji od Wilms-ovog tumora i ženskih kancera.
[0144] Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti kao terapija prve linije (ponekad se naziva primarna terapija), terapija druge linije ili terapija treće linije. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu se koristiti kao terapija spasavanja. Termin "terapija spasavanja" označava terapeutsko sredstvo koje se može uzimati bilo kojim režimom nakon što početni režim lečenja subjekta nije uspeo ili nakon što stanje subjekta nije reagovalo na početni tretman. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste kao terapija spasavanja, kao kada se kompozicije koriste kao sredstvo za spasavanje da se suprotstave delovanju početnog tretmana ili kao sredstvo za spasavanje koje se primenjuje na subjekta koji je razvio rezistenciju na standardni ili početni tretman. Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu se koristiti kao neoađuvantna terapija, koja može uključivati primenu jednog ili više terapijskih sredstava opisanih ovde na subjekta pre glavnog ili prve linije lečenja. Neoađuvantna terapija može smanjiti veličinu ili obim kancera koji se leči pre nego što se na subjekta koji je podvrgnut tretmanu primeni glavna ili prva linija lečenja. Kompozicije i postupci opisani ovde mogu da se koriste kao pomoćna terapija, koja može da sadrži primenu jednog ili više terapeutskih sredstava opisanih ovde na subjekta, pri čemu jedan ili više terapeutskih sredstava modifikuju efekat drugih terapeutskih sredstava koji su već primenjeni na subjekta ili se naknadno primenjuju na subjekta.
[0145] Kompozicije i postupci opisani ovde mogu pokazati smanjenu šansu za interakciju lek-lek. Imipridon, kao što je ONC201, ili njegov analog može biti eliminisan iz tela pacijenta pre nego što može da stupi u interakciju sa drugim farmaceutski aktivnim sredstvom.
[0146] Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu pokazati nivoe toksičnosti koji olakšavaju kombinacije sa drugim farmaceutskim sredstvima.
[0147] Ovde opisani postupci i kompozicije nisu ograničeni na određenu životinjsku vrstu. Subjekat koji se leči u skladu sa postupcima i upotrebom kompozicija opisanih ovde, može biti sisar ili nesisar. Sisarski subjekat sisar može uključivati, ali nije ograničen na, čoveka; primata koji nije čovek; glodara kao što je miš, pacov ili zamorac; pripitomljenog kućnog ljubimca kao što je mačka ili pas; konj, krava, svinja, ovca, koza ili zec. Subjekat koji nije sisar može uključivati, ali nije ograničen na, pticu kao što je patka, guska, pile ili ćurka. Subjekat može biti čovek. Subjekti mogu biti bilo kojeg pola i bilo kojeg uzrasta. Kompozicija i postupci se takođe mogu koristiti za prevenciju kancera. Kompozicija i postupci se takođe mogu koristiti za stimulaciju imunog sistema.
[0148] Postupci i kompozicije opisani ovde nisu ograničeni na određeni uzrast subjekta. Subjekat koji se leči prema postupcima i upotrebom kompozicija opisanih ovde može biti stariji od 50 godina, preko 55 godina, preko 60 godina ili preko 65 godina. Subjekat koji se leči u skladu sa postupcima i upotrebom kompozicija opisanih ovde može biti ispod 50 godina, ispod 55 godina, ispod 60 godina ili ispod 65 godina.
[0149] Subjekat koji se leči u skladu sa postupcima i upotrebom kompozicija opisanih ovde može biti pedijatrijski pacijent. Pedijatrijski pacijent može biti mlađi od 18 godina, mlađi od 17 godina, mlađi od 16 godina, mlađi od 15 godina, mlađi od 14 godina, mlađi od 13 godina, mlađi od 12 godina, mlađi od 11 godina, mlađi od 10 godina, mlađi od 9 godina, mlađi od 8 godina, mlađi od 7 godina, mlađi od 6 godina, mlađi od 5 godina, mlađi od 4 godine, mlađi od 3 godine, mlađi od 2 godine, mlađi od 1 godine, mlađi od 12 meseci, mlađi od 11 meseci, mlađi od 10 meseci, mlađi od 9 meseci, mlađi od 8 meseci, mlađi od 7 meseci, mlađi od 6 meseci, mlađi od 5 meseci, mlađi od 4 meseca, mlađi od 3 meseca, mlađi od 2 meseca, mlađi od 1 meseca, mlađi od 4 nedelje, mlađi od 3 nedelje, mlađi od 2 nedelje, mlađi od 1 nedelje, starosti 7 dana, mlađi od 6 dana, mlađi od 5 dana, mlađi od 4 dana, mlađi od 3 dana, mlađi od 2 dana ili mlađi od 1 dana. Pedijatrijski pacijent može biti novorođenče. Pedijatrijski pacijent može biti prevremeno rođen.
[0150] Pacijent može imati manje od 45 kg težine, manje od 40 kg u težini, manje od 35 kg težine, manje od 30 kg težine, manje od 25 kg težine, manje od 20 kg težine, manje od 15 kg težine, manje od 14 kg težine, manje od 10 kg težine, manje od 5 kg težine, manje od 4 kg težine, manje od 3 kg težine, manje od 2 kg težine ili manje od 1 kg težine.
[0151] Subjekat je možda primio najmanje jedno prethodno terapeutsko sredstvo, kao što su najmanje dva, najmanje tri ili najmanje četiri prethodna terapeutska sredstva. Prethodno terapeutsko sredstvo može biti ibrutinib, bortezomib, karfilzomib, temozolomid, bevacizumab, ciklofosfamid, hidroksidaunorubicin, hidroksidaunorubicin, vinkristin, prednizon, citarabin, cisplatin, rituksimab, 5-fluorouracil, oksaliplatin, leukovorin ili lenalidomid.
[0152] Subjekat je možda bio lečen zračenjem, operacijom i/ili adoptivnom T-ećlijskom terapijom.
[0153] Kancer možda više neće reagovati na lečenje ibrutinibom, bortezomibom, karfilzomibom, temozolomidom, bevacizumabom, ciklofosfamidom, hidroksidaunorubicinom, vinkristinom, prednizonom, citarabinom, cisplatinom, rituksimabom, 5-fluorouracilom, oksaliplatinom, leukovorinom, lenalidomidom, zračenjem, operacijom ili njihovom kombinacijom.
[0154] Kompozicije i postupci opisani ovde mogu imati odnos doze i odgovora u ćelijama kancera koji se razlikuje od odnosa doze i odgovora istih kompozicija i postupaka u normalnim ćelijama. Odnos doze i odgovora ONC201 na proliferaciju i smrt ćelije u normalnim i tumorskim ćelijama određen je merenjem vijabilnosti ćelije nakon tretmana sa ONC201 u različitim koncentracijama tokom 72 sata. Testirani tumori uključivali su humanu ćelijsku liniju kancera debelog creva (HCT116), ćelijsku liniju tumora dojke (MDA-MB-231) i humanu ćelijsku liniju primarnog glioblastoma (U87). I testirane normalne ćelije su uključivale humane fibroblaste prepucijuma (HFF), ćelije humanog fetalnog fibroblasta pluća (MRC-5) i ćelijsku liniju humanih fibroblasta pluća (VI-38). Doksorubicin je korišćen kao pozitivna kontrola pri 1 µg/mL u normalnim fibroblastima. Vijabilnost ćelija testiranih normalnih ćelija bila je najmanje oko 75% pri oko 1-5 mg/mL ONC201, dok je vijabilnost tumorskih ćelija bila značajno niža (npr., na ili ispod 50%) pri istoj koncentraciji ONC201. Pored toga, kako je koncentracija ONC201 porasla preko oko 5 mg/mL, vijabilnost tumorskih ćelija je pala do ispod 25%, dok je vijabilnost normalnih ćelija ostala na oko 75%. Testovi vijabilnosti ćelija u ćelijama humanog fetalnog plućnog fibroblasta (MRC-5) su izvedeni nakon 72-časovnog tretmana jedinjenjem (1) (5 µM) ili DMSO i perioda oporavka u potpunom medijumu bez lekova nakon tretmana. Oporavak ćelija je primećen sa ONC201, ali ne i sa DMSO.
[0155] Kompozicije i postupci opisani ovde mogu biti korisni u lečenju kancera kod subjekta, kao što je čovek. Postupak lečenja može da sadrži primenu na subjekta kome je takav tretman potreban, farmaceutski efikasne količine imipridona, kao što je ONC201, ili njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i farmaceutski prihvatljivog nosača.
[0156] Postupak lečenja može da sadrži primenu na subjekta kome je potreban takav tretman: (i) prvog terapeutskog sredstva uključujući imipridon, kao što je ONC201, ili njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u kombinaciji sa (ii) drugim terapeutskim sredstvom, pri čemu su prvo i drugo terapeutsko sredstvo primenjuju istovremeno ili uzastopno. Drugo terapeutsko sredstvo može biti bilo koje pogodno terapeutsko sredstvo, uključujući bilo koje farmaceutski aktivno sredstvo koje je ovde otkriveno. Farmaceutski prihvatljiva ONC201 so uključuje di-hidrohloridnu so ispod:
[0157] Podrazumeva se da di-hidrohloridna so ONC201 ili njen analog (uključujući jedinjenje formule (10)), ili njegovu alternativnu di-so, očigledna iz učenja ovog otkrića, može biti zamenjena za ONC201 ili njegovim analogom u kompoziciji ili režimu doziranja koji je ovde opisan.
[0158] Postupak lečenja može da sadrži primenu sinergističke farmaceutske kombinacije, bilo istovremeno ili uzastopno na subjekta kome je potreban takav tretman, pri čemu sinergistička farmaceutska kombinacija sadrži (i) prvo terapeutsko sredstvo koje sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i (ii) drugo terapeutsko sredstvo. Postupak lečenja može da sadrži primenu na subjekta kome je potreban takav tretman, bilo istovremeno ili uzastopno, terapeutski sinergistički efikasnih količina prvog terapeutskog sredstva u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvom. Postupak lečenja može da sadrži primenu na subjekta kome je takav tretman potreban, efikasne količine prvog terapeutskog sredstva u kombinaciji sa efikasnom količinom drugog terapeutskog sredstva, pri čemu kombinacija obezbeđuje sinergistički efekat u in vivo tretmanu kancera osetljivog na kombinaciju, i pri čemu se prvo i drugo terapeutsko sredstvo primenjuju ili istovremeno ili uzastopno. Postupak lečenja može da sadrži primenu na subjekta kome je takav tretman potreban, efikasne količine prvog terapeutskog sredstva u kombinaciji sa efikasnom količinom drugog terapeutskog sredstva, pri čemu kombinacija obezbeđuje sinergistički efekat u in vivo tretmanu minimalne rezidualne bolesti osetljive na kombinaciju, i pri čemu se prvo i drugo terapeutsko sredstvo primenjuju ili istovremeno ili uzastopno. Drugo terapeutsko sredstvo se može dati pre ili pre prvog terapeutskog sredstva.
[0159] Postupak lečenja može biti usmeren na kancer izabran iz grupe koja se sastoji od solidnih tumora, tečnih tumora, limfoma, leukemija ili mijeloma.
[0160] Postupak lečenja može ciljno delovati na solidni tumor, pri čemu je solidni tumor izabran iz grupe koja se sastoji od: kancera cerviksa, kancera endometrijuma, ekstrakranijalnog tumora germinativnih ćelija; ekstragonadalnog tumora germinativnih ćelija; tumora germinativnih ćelija; gestacionog trofoblastičnog tumora; kancera jajnika, tumora germinativnih ćelija jajnika, kancera epitela jajnika i tumora jajnika sa niskim malignim potencijalom; kancera penisa, kancera prostate; kancera trudnoće i dojke; kancera prostate visokog stepena; kancera prostate srednjeg stepena; kancera prostate niskog stepena; kancera prostate otpornog na kastraciju; kancera dojke; kancera žučnih kanala; kancera ekstrahepatičnog žučnog kanala; kancera žučne kese; hepatocelularnog kancera (jetre); kancera bubrega (bubrežnih ćelija); kancera jetre, kancera bubrežnih ćelija (bubrega), bubrežne karlice i uretera; karcinoma bazalnih ćelija; sindroma nevusa bazalnih ćelija, sindroma Gorlin-Nevusa, melanoma, karcinoma Merkelovih ćelija, papilomatoze, sindroma višestruke endokrine neoplazije; kancera pankreasa, kancera paratiroidne žlezde, okularnog melanoma; kancera oka; retinoblastoma; malignog fibroznog histiocitoma; familije tumora Ewingovog sarkoma; dezmoplastičnog tumora okruglih ćelija; hondrosarkoma, Kaposi-evog sarkoma, rabdomiosarkoma; tumora kičmene moždine, leptomeningealne bolesti, embrionalnih tumora centralnog nervnog sistema, hordoma, embrionalnih tumora centralnog nervnog sistema, ependimoblastoma, ependimoma, neuroblastoma; tumora parenhima epifize intermedijerne diferencijacije, pineoblastoma; adrenokortikalnog karcinoma; kancera kostiju, osteosarkoma; malignog fibroznog histiocitoma kostiju i osteosarkoma; osteosarkoma i malignog fibroznog histiocitoma kostiju; karcinoidnog tumora, karcinoma nepoznatog primarnog mesta, tumora bronhija, kancera pluća, pleuropulmonalnog blastoma; karcinom respiratornog trakta koji uključuje gen NUT na hromozomu 15, astrocitoma, atipičnog teratoidnog/rabdoidnog tumora; atipičnog teratoidnog/rabdoidnog tumora centralnog nervnog sistema, kraniofaringioma, glioma, kancera mozga, meduloblastoma, meduloepitelioma, supratentorijalnih primitivnih neuroektodermalnih tumora; tumora hipofize; gastričnog kancera (želudca), gastrointestinalnog karcinoidnog tumora, gastrointestinalnog stromalnog tumora (GIST), kancera mokraćne bešike, analnog ili rektalnog kancera, kancera slepog creva, kancera jednjaka, kancera hipofarinksa; kancera larinksa, kancera usne i usne duplje, metastatičkog skvamoznog kancera vrata sa okultnim primarnim, kancera ustaa, kancera nosne šupljine i paranazalnih sinusa, kancera nazofarinksa, oralnog kancera, kancera usne i usne duplje, kancera orofarinksa, kancera paranazalnog sinusa i nazalne šupljine; kancera farinksa; kancera glave i vrata i mezotelioma.
[0161] Postupak lečenja može ciljno delovati na limfom izabran iz grupe koja se sastoji od: difuznog krupnoćelijskog B-ćelijskog limfoma, limfoma povezanog sa SIDA-om, kožnog T-ćelijskog limfoma, Sezary-evog sindroma, mikozis fungoides (MF); histiocitoze; Burkitt-ovog limfoma i limfoma centralnog nervnog sistema; Ne-Hodgkinov-ovog limfoma i primarnog limfoma centralnog nervnog sistema, Hodgkinov-og limfoma, Waldenström-ove makroglobulinemije; mikozis fungoides; primarnog limfoma centralnog nervnog sistema; limfoplazmacitnog limfoma i primarnog limfoma centralnog nervnog sistema.
[0162] Postupak lečenja može biti usmeren na ne-Hodgkin-ov limfom (NHL) izabran iz grupe koja se sastoji od: limfoma mantle ćelija, difuznog krupnoćelijskog B-ćelijskog limfoma, folikularnog limfoma, limfoma marginalne zone, malog limfocitnog limfoma, limfoplazmacitnog NHL, Waldenstrom-ove makroglobulinemije i limfoma kože.
[0163] Postupak lečenja može ciljno da deluje na leukemiju izabranu iz grupe koja se sastoji od: akutne limfoblastične leukemije (ALL), hronične limfocitne leukemije (CLL), hroničnih mijeloproliferativnih poremećaja; leukemije dlakavih ćelija; akutna mijeloidne leukemije (AML); hronične mijelogene leukemije (CML); i histiocitoze Langerhansovih ćelija.
[0164] Postupak lečenja može ciljno da deluje na leukemiju izabranu iz grupe koja se sastoji od: akutne limfocitne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, hronične limfoblastične leukemije, hronične mijeloidne leukemije, mijelodisplastičnog sindroma i mijeloproliferativne bolesti.
[0165] Postupak lečenja može ciljno da deluje na mijelom izabran iz grupe koja se sastoji od: IgA mijeloma; IgG mijeloma; IgM mijeloma; IgD mijeloma; IgE mijeloma; mijeloma lakog lanca; nesekretornog mijeloma; složenog kariotipa, leukemije blastične faze; višestrukog mijeloma/neoplazme plazma ćelija, multiplog mijeloma, mijelodisplastičnih sindroma, mijelodisplastičnih/mijeloproliferativnih neoplazmi i mijeloproliferativnih poremećaja.
[0166] Postupak lečenja može ciljno da deluje na tumor perifernog nervnog sistema. Postupak lečenja može ciljno da deluje na paragangliom. Postupak lečenja može ciljno da deluje na feohromocitom.
[0167] Lečenje kancera može da sadrži prevenciju rasta tumora kod subjekta sa kancerom. Lečenje kancera može da sadrži prevenciju formiranja metastaza kancera kod subjekta sa kancerom. Lečenje kancera može da sadrži ciljano lečenje minimalne rezidualne bolesti kod subjekta sa kancerom za koji je poznato da ima minimalnu rezidualnu bolest kod kancera ili subjekta koji je u riziku da ima minimalnu rezidualnu bolest.
[0168] Ovo može biti indikovano posle lečenja primarnog tumora operacijom i/ili pošto je hemoterapija (radioterapija) započeta ili je utvrđeno da je efikasna. Diseminovane tumorske ćelije mogu biti u stanju mirovanja i često se ne mogu napasti hemoterapijom (radioterapijom). Tako lečeni pacijent je naizgled u izlečenom stanju i označen je kao „minimalna rezidualna bolest“. Ipak, uspavane tumorske ćelije imaju potencijal da formiraju metastaze ako postanu ćelije koje metastaziraju usled stimulacije rasta nakon dužeg stanja mirovanja.
[0169] Termin "minimalna rezidualna bolest" označava mali broj ćelija kancera koje ostaju u subjektu tokom ili posle tretmana kada je subjekt u remisiji (bez simptoma ili znakova bolesti). Postupci opisani ovde poželjno se primenjuju na oblike bolesti koje su ovde navedeni, uključujući odrasle i dečije oblike ovih bolesti.
[0170] Postupci lečenja mogu biti korisni za lečenje autoimunih bolesti, kao što su alopecija areata, antifosfolipid, autoimuni hepatitis, celijačna bolest, dijabetes tipa 1, Graves-ova bolest, Guillain-Barre-ov sindrom, Hashimot-ova bolest, hemolitička anemija, idiopatska trombocitopenijska purpura, inflamatorna bolest creva, inflamatorne miopatije, multipla skleroza, primarna bilijarna ciroza, psorijaza, reumatoidni artritis, skleroderma, Sjogren-ov sindrom, sistemski eritematozni lupus i vitiligo.
[0171] Postupak lečenja može biti koristan za lečenje autoimunih i inflamatornih poremećaja perifernog nervnog sistema kao što je amiotrofična lateralna skleroza (Lou Gehrig-ova bolest), zasnovana na različitim uzrocima kao što su metabolički poremećaji koji uključuju dijabetes, deficijencije B12 vitamina i folata, lekovi za hemoterapiju i lekovi koji se koriste za lečenje HIV-a, otrovi koji uzrokuju oštećenje perifernih nerava, kanceri koji razvijaju periferne neuropatije kao i paraneoplastične sindrome, zloupotreba alkohola, hronična bolest bubrega, povrede koje izazivaju kompresiju na nervima i druge lezije, infekcije kao što su Lajmska bolest, Guillain Barreov sindrom, bolest vezivnog tkiva, reumatoidni artritis, Sjogren-ov sindrom, sistemski lupus eritematozis, određena inflamatorna stanja kao što je sarkoidoza, celijačna bolest, nasledne bolesti kao što su Charcot Marie Tooth sindrom, Friedreich-ova ataksija i/ili idiopatske gde nije pronađen specifičan uzrok, ali su inflamatorni i/ili autoimuni mehanizmi uzrok nastanka.
[0172] Postupak lečenja može biti koristan za lečenje autoimunih i inflamatornih poremećaja sa očnim manifestacijama. Takve očne manifestacije uključuju, ali nisu ograničene na, okularni cikatricijalni pemfigoid, Mooren-ov čir rožnjače, različite oblike uveitisa, reumatoidni artritis, sistemski eritematozni lupus, poliarteritis nodoza, relapsirajući polihondritis, Wegener-ovu granulodermatizu, sklerodermu, Behcet-ovu bolest, Reiter-ovu bolest, inflamatornu bolest creva (ulcerozni kolitis i Chron-ovu bolest) i ankilozantni spondilitis, retinitis pigmentoza, makularnu degeneraciju, keratokonjunktivitis sika, skleritis, episkleritis, keratitis, perifernu ulceraciju rožnjače i manje česte entitete kao što je horoiditis, retinalni vaskulitis, episkleralne nodule, odvajanje mrežnjače i/ili makularni edem.
[0173] Postupak lečenja može biti koristan za lečenje akutnog odbacivanja alografta kod pacijenata sa transplantacijom. Postupak lečenja može biti koristan za lečenje ishemijskog moždanog udara. Postupak lečenja može biti koristan za lečenje inflamatornih bolesti uključujući artritis, psorijazu, astmu i kolitis.
[0174] Terapeutsko sredstvo može uključivati farmaceutski prihvatljivu mono-so ONC201, ili farmaceutski prihvatljivu ONC201 di-so. Kao što je ovde opisano, neki od analoga mogu biti trisoli. Terapeutsko sredstvo može uključivati ONC201 u obliku farmaceutski prihvatljive mono- ili di-soli izabrane iz grupe koja se sastoji od hidrohlorida, hidrobromida, hidrogensulfata, sulfata, fosfata, fumarata, sukcinata, oksalata i laktata, bisulfata, hidroksila, nitrata, citrata, bitartrata, karbonata, malata, maleata, fumarat sulfonata, metilsulfonata, formata, acetata i karboksilata. Terapeutsko sredstvo može uključiti ONC201 u obliku farmaceutski prihvatljive mono- ili di-soli izabrane od p-toluen-sulfonata, benzensulfonata, metansulfonata, oksalata, sukcinata, tartrata, citrata, fumarata i maleata. Terapeutsko sredstvo može uključiti ONC201 u obliku farmaceutski prihvatljive mono- ili di-soli koja ima protivjon izabran iz grupe koja se sastoji od amonijuma, natrijuma, kalijuma, kalcijuma, magnezijuma, cinka, litijuma i/ili sa protiv-jonima kao što su metilamino, dimetilamino, dietilamino, trietilamino protiv-joni i njihove kombinacije. Terapeutsko sredstvo može uključiti jedinjenje koje je ovde opisano u obliku halogenidne di-soli, kao što je dihidrohloridna so ili dihidrobomidna so.
[0175] Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati sredstvo protiv kancera. Drugo terapeutsko sredstvo može biti izabrano od acivicina, aklarubicina, akodazola, akronina, adozelesina, aldesleukina, alitretinoina, alopurinola, altretamina, ambomicina, ametantrona, amifostina, aminoglutetimida, amsakrina, anastrozola, antramicina, arsen trioksida, asparaginaze, asperlina, azacitidina, azetepa, azotomicina, batimastata, benzodepa, bevacizumaba, bikalutamida, bisantrena, bisnafid dimesilata, bizelesina, bleomicina, brekvinara, bropirimina, busulfana, kaktinomicina, kalusterona, kapecitabina, karacemida, karbetimera, karboplatina, karmustina, karubicina, karzelesina, cedefingola, celekoksiba, hlorambucila, cirolemicina, cisplatina, kladribina, krisnatol mezilata, ciklofosfamida, citarabina, dakarbazina, daktinomicina, daunorubicina, decitabina, deksormaplatina, dezaguanin mezilata, diazikvona, docetakela, doksorubicina, droloksifena, dromostanolona, duazomicina, edatreksata, eflomitina, elsamitrucina, enloplatina, enpromata, epipropidina, epirubicina, erbulozola, azorubicina, estramustina, etanidazola, etoposida, etoprina, fadrozola, fazarabina, fenretinida, floksuridina, fludarabina, fluorouracila, flurocitabina, foskvidona, fostriecina, fulvestranta, gemcitabina, hidroksiuree, idarubicina, ifosfamida, ilmofozina, interleukina II (IL-2, uključujući rekombinantni interleukin II ili rIL2), interferona α-2a, interferona α-2b, interferona α-n1, interferona α-n3, interferona β-Ia, interferona gama-Ib, iproplatina, irinotekana, lanreotida, letrozola, leuprolida, liarozola, lometreksola, lomustina, lozoksantrona, mazoprokola, majtanzina, mehloretamin hidrohlorida, megestrola, melengestrol acetata, melfalana, menogarila, merkaptopurina, metotreksata, metoprina, meturedepa, mitindomida, mitokarcina, mitokromina, mitogilina, mitomalcina, mitomicina, mitospera, mitotana, mitoksantrona, mikofenolne kiseline, nelarabina, nokodazola, nogalamicina, ormnaplatina, oksisurana, paklitaksela, pegaspargaze, peliomicina, pentamustina, peplomicina, perfosfamida, pipobromana, piposulfana, piroksantron hidrohlorida, plikamicina, plomestana, porfimera, porfiromicina, prednimustina, prokarbazina, puromicina, pirazofurina, riboprina, rogletimida, safingola, semustina, simtrazena, sparfosata, sparsomicina, spirogermanijuma, spiromustina, spiroplatina, streptonigrina, streptozocina, sulofenura, talisomicina, tamoksifena, tekogalana, tegafura, teloksantrona, temoporfina, teniposida, teroksirona, testolaktona, tiamiprina, tioguanina, tiotepa, tiazofurina, tirapazamina, topotekana, toremifena, trestolona, triciribina, trimetreksata, triptorelina, tubulozola, uracil iperita, uredepa, vapreotida, verteporfina, vinblastina, vinkristin sulfata, vindezina, vinepidina, vinglicinata, vinleurozina, vinorelbina, vinrosidina, vinzolidina, vorozola, zeniplatina, zinostatina, zoledronata, zorubicina i njihovih kombinacija.
[0176] Drugo terapeutsko sredstvo može biti izabrano od hormonskih analoga i antihormona, inhibitora aromataze, agonista i antagonista LHRH, inhibitora faktora rasta, antitela faktora rasta, antitela receptora faktora rasta, inhibitora tirozin kinaze; antimetabolita; antitumorskih antibiotika; derivata platine; alkilacionih sredstava; antimitotičkih sredstava; inhibitora tubulina; inhibitora PARP, inhibitora topoizomeraze, inhibitora serin/treonin kinaze, inhibitora tirozin kinaze, inhibitora interakcije protein protein, inhibitora MEK, inhibitora ERK, inhibitora IGF-1R, inhibitori ErbB receptora, analoga rapamicina, amifostina, anagrelida, klodronata, filgrastina, interferona, interferona α, leukovorina, rituksimaba, prokarbazina, levamisola, mesna, mitotana, pamidronata i porfimera, 2-hlorodezoksiadenozina, 2-fluorodezoksi-citidina, 2-metoksiestradiola, 2C4,3-aletina, 131-1-TM-601, 7-etil-10-hidroksikamptotecina, 16-aza-epotilona B, A 105972, A 204197, abiraterona, aldesleukina, alitretinoina, alovektina-7, altretamina, alvocidiba, amonafida, antrapirazola, AG-2037, AP-5280, apazikvona, apomina, aranoze, arglabina, arzoksifena, atamestana, atrasentana, auristatina PE, ABT-199 (venetoklaksa), ABT-263 (navitoklaksa), AVLB, AZ10992, ABX-EGF, AMG-479 (ganitumaba), ARRY 162, ARRY 438162, ARRY-300, ARRY-142886/AZD-6244 (selumetiniba), ARRY-704/AZD-8330, AR-12, AR-42, AS-703988, AXL-1717, AZD-8055, AZD-5363, AZD-6244, ARQ-736, ARQ 680, AS-703026 (primasertiba), avastina, AZD-2014, azacitidina, azaepotilona B, azonafida, BAY-43-9006, BAY 80-6946, BBR-3464, BBR-3576, bevacizumaba, BEZ-235, birikodar dicitrata, BCX-1777, BKM-120, bleocina, BLP-25, BMS-184476, BMS-247550, BMS-188797, BMS-275291, BMS-663513, BMS-754807, BNP-1350, BNP-7787, BIBW 2992 (afatiniba, tomtovoka), BIBF 1120 (vargatefa), BI 836845, BI 2536, BI 6727, BI 836845, BI 847325, BI 853520, BUB-022, bleomicinske kiseline, bleomicina A, bleomicina B, brivaniba, briostatina-1, bortezomiba, brostalicina, busulfana, BYL-719, CA-4 proleka, CA-4, CapCell, kalcitriola, kanertiniba, kanfosfamida, kapecitabina, karboksiftalatoplatina, CCl-779, CC-115, CC-223, CEP-701, CEP-751, CBT-1 cefiksima, ceflatonina, ceftriaksona, celecoksiba, celmoleukina, cemadotina, CH4987655/RO-4987655, hlorotrianisena, cilengitida, ciklosporina, CDA-II, CDC-394, CKD-602, CKI-27, klofarabina, kolhicina, kombretastatina A4, inhibitora COT, CHS-828, CH-5132799, CLL-Thera, CMT-3 kriptoficina 52, CTP-37, CTLA-4 monoklonskih antitela, CP-461, CV-247, cijanomorfolinodoksorubicina, citarabina, D 24851, decitabinae, deoksorubicina, deoksirubicina, deoksikoformicina, depsipeptida, dezoksiepotilona B, deksametazona, deksrazoksaneta, dietilstilbestrola, diflomotekana, didoksa, DMDC, dolastatina 10, doranidazola, DS-7423, E7010, E-6201, edatreksata, edotreotida, efaproksirala, eflomitina, inhibitora EGFR, EKB-569, EKB-509, enzastaurina, enzalutamida, elsamitrucina, epotilona B, epratuzumaba, ER-86526, erlotiniba, ET-18-0CH3, etinilcitidina, etinilestradiola, eksatekana, eksatekan mezilata, eksemestana, eksisulinda, fenretinida, figitumumaba, floksuridina, folne kiseline, FOLFOX, FOLFOX4, FOLFIRI, formestana, fotemustina, galarubicina, galijum maltolata, gefinitiba, gemtuzumaba, gimatekana, glufosfamida, GCS-100, GDC-0623, GDC-0941 (pictrelisiba), GDC-0980, GDC-0032, GDC-0068, GDC-0349, GDC-0879, G17DT imunogena, GMK, GPX-100, gp100-peptidnih vakcina, GSK-5126766, GSK-690693, GSK-1120212 (trametiniba), GSK-2118436 (dabrafeniba), GSK-2126458, GSK-2132231A, GSK-2334470, GSK-2110183, GSK-2141795, GW2016, granisetrona, herceptina, heksametilmelamina, histamina, homoharingtonina, hijaluronske kiseline, hidroksiuree, hidroksiprogesteron kaproata, ibandronata, ibritumomaba, idatreksata, idenestrola, IDN-5109, inhibitora IGF-1R, IMC-1C11, IMC-A12 (ciksutumumaba), imunola, indisulama, interferona α-2a, interferona α-2b, pegilovanog interferona α-2b, interleukina-2, INK-1117, INK-128, INSM-18, ionafarniba, ipilimumaba, iproplatina, irofulvena, izohomohalihondrina-B, izoflavona, izotretinoina, iksabepilona, JRX-2, JSF-154, J-107088, konjugovanih estrogena, kahalida F, ketokonazola, KW-2170, KW-2450, lobaplatina, leflunomida, lenograstima, leuprolida, leuporelina, leksidronama, LGD-1550, linezolida, lutecijum teksafirina, lometreksola, lozoksantrona, LU 223651, lurtotekana, LY-S6AKT1, LY-2780301, mafosfamida, marimastata, mehloroetamina, inhibitora MEK, MEK-162, metiltestosterona, metilprednizolonae, MEDI-573, MEN-10755, MDX-H210, MDX-447, MDX-1379, MGV, midostaurina, minodronske kiseline, mitomicina, mivobulina, MK-2206, MK-0646 (dalotuzumaba), MLN518, moteksafa u gadolinijumu, MS-209, MS-275, MX6, neridronata, neratiniba, neksavara, neovastata, nilotiniba, nimesulida, nitroglicerina, nolatrekseda, norelina, N-acetilcisteina, 06-benzilguanina, oblimersena, omeprazola, onkofaga, onkoVEXGM-CSF, ormiplatina, ortataksela, OX44 antitela, OSI-027, OSI-906 (linsitiniba), 4-1BB antitela, oksantrazola, estrogena, panitumumaba, patupilona, pegfilgrastima, PCK-3145, pegfilgrastima, PBI-1402, PBI-05204, PDO325901, PD-1 antitela, PEG-paklitaksela, albuminom-stabilizovanog paklitaksela, PEP-005, PF-05197281, PF-05212384, PF-04691502, PHT-427, P-04, PKC412, P54, PI-88, pelitiniba, pemetrekseda, pentriksa, perifosina, perililalkohola, pertuzumaba, inhibitora PI3K, inhibitora PI3K/mTOR, PG-TXL, PG2, PLX-4032/RO-5185426 (vemurafeniba), PLX-3603/RO-5212054, PT-100, PWT-33597, PX-866, pikoplatina, pivaloiloksimetilbutirata, piksantrona, fenoksodiola O, PKI166, plevitrekseda, plikamicina, poliprenske kiseline, porfiromicina, prednizona, prednizolona, kvinameda, kvinupristina, R115777, RAF-265, ramosetrona, ranpirnaze, RDEA-119BAY 869766, RDEA-436, analoga rebekamicin, inhibitora receptor tirozin kinaze (RTK), revimida, RG-7167, RG-7304, RG-7421, RG-7321, RG 7440, rizoksina, rhu-MAb, rinfabata, risedronata, rituksimaba, robatumumaba, rofekoksiba, RO-31-7453, RO-5126766, RO-5068760, RPR 109881A, rubidazona, rubitekana, R-flurbiprofena, RX-0201, S-9788, sabarubicina, SAHA, sargramostima, satraplatina, SB 408075, Se-015/Ve-015, SU5416, SU6668, SDX-101, semustina, seokalcitola, SM-11355, SN-38, SN-4071, SR-27897, SR-31747, SR-13668, SRL-172, sorafeniba, spiroplatina, skvalamina, suberanilohidroksamske kiseline, sutenta, T 900607, T 138067, TAK-733, TAS-103, tacedinalina, talaporfina, Tarceva, tarikvitara, tasisulama, taksotere, taksopreksina, tazarotena, tegafura, temozolamida, tesmilifena, testosterona, testosteron propionata, tesmilifena, tetraplatina, tetrodotoksina, tezacitabina, talidomida, teraluksa, terarubicina, timalfasina, timektacina, tiazofurina, tipifarniba, tirapazamina, tokladesina, tomudeksa, toremofina, trabektedina, TransMID-107, transretinske kiseline, traszutumaba, tremelimumaba, tretinoina, triacetiluridina, triapina, triciribina, trimetreksata, TLK-286TXD 258, tikerba/tiverba, urocidina, valrubicina, vatalaniba, vinkristina, vinflunina, virulizina, WX-UK1, WX-554, vectibiksa, kseloda, XELOX, XL-147, XL-228, XL-281, XL-518/R-7420/GDC-0973, XL-765, YM-511, YM-598, ZD-4190, ZD-6474, ZD-4054, ZD-0473, ZD-6126, ZD-9331, ZD1839, ZSTK-474, zoledronata, zosukvidara i njihovih kombinacija.
[0177] Drugo terapeutsko sredstvo se može izabrati od tamoksifena, toremifena, raloksifena, fulvestranta, megestrol acetata, flutamida, nilutamida, bicalutamida, aminoglutetimida, ciproteron acetata, finasterida, buserelin acetata, fludrokortizona, fluoksimesterona, medroksi-progesterona, oktreotida i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može biti izabrano od agonista LHRH i antagonista LHRH. Agonist LHRH može biti izabran od goserelin acetata, luprolide acetata, triptorelin pamoata i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može da uključuje antagonost LHRH koji je izabran od degareliksa, cetroreliksa, abareliksa, ozareliksa, degareliksa ili njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može da uključuje inhibitor faktora rasta kao što su inhibitori: faktora rasta poreklom od trombocita (PDGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), vaskularnog endotelijalnog faktora rasta (VEGF), epidermalnog faktora rasta (EGF), insulinusličnih faktora rasta (IGF), humanog epidermalnog faktora rasta (HER), faktora rasta hepatocita (HGF) i njihovih kombinacija. Humani epidermalni faktor rasta (HER) može biti izabran od HER2, HER3 i HER4.
[0178] Drugo terapeutsko sredstvo može uključiti inhibitor tirozin kinaze, kao što su cetuksimab, gefitinib, imatinib, lapatinib i trastuzumab, i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati inhibitor aromataze, kao što je anastrozol, letrozol, liarozol, vorozol, eksemestan, atamestan i njihove kombinacije.
[0179] Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati antimetabolit. Antimetabolit može da sadrži antifolat. Antifolat može biti izabran od metotreksata, raltitrekseda, analoga pirimidina i njihovih kombinacija. Antimetabolit može biti analog pirimidina, kao što je 5-fluorouracil, kapecitabin, gemcitabin i njihova kombinacija. Antimetabolit može biti analog purina ili analog adenozina, kao što su merkaptopurin, tioguanin, kladribin i pentostatin, citarabin, fludarabin i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati antitumorski antibiotik. Antitumorski antibiotik može biti izabran od antraciklina, doksorubicina, daunorubicina, epirubicina i idarubicina, mitomicina-C, bleomicina, daktinomicina, plikamicina, streptozocina i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može uključiti derivat platine, kao što je cisplatin, oksaliplatin, karboplatin i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključiti alkilaciono sredstvo, kao što je estramustin, mekloretamin, melfalan, hlorambucil, busulfan, dakarbazin, ciklofosfamid, ifosfamid, temozolomid, nitrozouree i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati nitrozoureu, kao što su karmustin, lomustin, tiotepa i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati antimitotičko sredstvo, kao što je ono koje je izabrano od alkaloida vinke i taksana. Taksan može biti izabran od paklitaksela, docetaksela i njihovih kombinacija. Alkaloidi vinke mogu biti izabrani od vinblastina, vindesina, vinorelbina, vinkristina i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može uključiti inhibitor topoizomeraze, kao što je epipodofilotoksin, na primer etopozid, etopofos, tenipozid, amsakrin, topotekan, irinotekan, mitoksantron i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati inhibitor serin/treonin kinaze, kao što su inhibitori PDK 1, inhibitori B-Raf, inhibitori mTOR, inhibitori mTORC1, inhibitori PI3K, dvostruki inhibitori mTOR/PI3K, inhibitori STK 33, inhibitori AKT, inhibitori PLK 1, inhibitori CDK, inhibitori aurora kinaze njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključiti inhibitor tirozin kinaze. Drugo terapeutsko sredstvo može uključivati inhibitor PTK2/FAK. Drugo terapeutsko sredstvo može uključiti inhibitor interakcije protein protein, kao što su IAP, Mcl-1, MDM2/MDMX i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može uključiti analog rapamicina, kao što je everolimus, temsirolimus, ridaforolimus, sirolimus i njihove kombinacije. Drugo terapeutsko sredstvo može biti izabrano od amifostina, anagrelida, klodronata, filgrastina, interferona, interferona α, leukovorina, rituksimaba, prokarbazina, levamisola, mesna, mitotana, pamidronata i porfimera, i njihovih kombinacija. Drugo terapeutsko sredstvo može biti izabrano od 2-hlorodezoksiadenozina, 2-fluorodezoksi-citidina, 2-metoksiestradiola, 2C4,3-aletina, 131-1-TM-601, 3CPA, 7-etil-10-hidroksikamptotecina, 16-aza-epotilona B, A 105972, A 204197, abiraterona, aldesleukina, alitretinoina, alovektina-7, altretamina, alvocidiba, amonafida, antrapirazola, AG-2037, AP-5280, apazikvona, apomina, aranoze, arglabina, arzoksifena, atamestana, atrasentana, auristatina PE, ABT-199 (venetoklaksa), ABT-263 (navitoklaksa), AVLB, AZ10992, ABX-EGF, AMG-479 (ganitumaba), ARRY 162, ARRY 438162, ARRY-300, ARRY-142886/AZD-6244 (selumetiniba), ARRY-704/AZD-8330, AR-12, AR-42, AS-703988, AXL-1717, AZD-8055, AZD-5363, AZD-6244, ARQ-736, ARQ 680, AS-703026 (primasertiba), avastina, AZD-2014, azacitidina, azapotilona B, azonafida, BAY-43-9006, BAY 80-6946, BBR-3464, BBR-3576, bevacizumaba, BEZ-235, birikodar dicitrata, BCX-1777, BKM-120, bleocina, BLP-25, BMS-184476, BMS-247550, BMS-188797, BMS-275291, BMS-663513, BMS-754807, BNP-1350, BNP-7787, BIBW 2992 (afatiniba, tomtovoka), BIBF 1120 (vargatefa), BI 836845, BI 2536, BI 6727, BI 836845, BI 847325, BI 853520, BUB-022, beomicinske kiseline, bleomicina A, bleomicina B, brivaniba, briostatina-1, bortezomiba, brostalicina, busulfana, BYL-719, CA-4 proleka, CA-4, CapCell, kalcitriola, kanertiniba, kanfosfamida, kapecitabina, karboksiftalatoplatina, CCl-779, CC-115, CC-223, CEP-701, CEP-751, CBT-1 cefiksima, ceflatonina, ceftriaksona, celekoksiba, celmoleukina, cemadotina, CH4987655/RO-4987655, hlorotrianisena, cilengitida, ciklosporina, CDA-II, CDC-394, CKD-602, CKI-27, klofarabina, kolhicina, kombretastatina A4, inhibitora COT, CHS-828, CH-5132799, CLL-Thera, CMT-3 kriptoficina 52, CTP-37, CTLA-4 monoklonskih antitela, CP-461, CV-247, cijanomorfolinodoksorubicina, citarabina, D 24851, decitabina, deoksorubicina, deoksirubicina, deoksikoformicina, depsipeptida, dezoksiepotilona B, deksametazona, deksrazoksaneta, dietilstilbestrola, diflomotekana, didoksa, DMDC, dolastatina 10, doranidazola, DS-7423, E7010, E-6201, edatreksata, edotreotida, efaproksirala, eflornitina, inhibitora EGFR, EKB-569, EKB-509, enzastaurina, enzalutamida, elsamitrucina, epotilona B, epratuzumaba, ER-86526, erlotiniba, ET-18-0CH3, etinilcitidina, etinilestradiola, eksatekana, eksatekan mezilata, eksemestana, eksisulinda, fenretinida, figitumumaba, floksuridina, folne kiseline, FOLFOX, FOLFOX4, FOLFIRI, formestana, fotemustina, galarubicina, galijum maltolata, gefinitiba, gemtuzumaba, gimatekana, glufosfamida, GCS-100, GDC-0623, GDC-0941 (pictrelisiba), GDC-0980, GDC-0032, GDC-0068, GDC-0349, GDC-0879, G17DT imunogena, GMK, GPX-100, gp100-peptidnih vakcina, GSK-5126766, GSK-690693, GSK-1120212 (trametiniba), GSK-2118436 (dabrafeniba), GSK-2126458, GSK-2132231A, GSK-2334470, GSK-2110183, GSK-2141795, GW2016, granisetrona, herceptina, heksametilmelamina, histamina, homoharingtonina, hijaluronske kiseline, hidroksiuree, hidroksiprogesteron kaproata, ibandronata, ibritumomaba, idatreksata, idenestrola, IDN-5109, inhibitora IGF-1R, IMC-1C11, IMC-A12 (ciksutumumaba), imunola, indisulama, interferona α-2a, interferona α-2b, pegilovanog interferona α-2b, interleukina-2, INK-1117, INK-128, INSM-18, ionafarniba, ipilimumaba, iproplatina, irofulvena, izohomohalihondrina-B, izoflavona, izotretinoina, iksabepilona, JRX-2, JSF-154, J-107088, konjugovanih estrogena, kahalida F, ketokonazola, KW-2170, KW-2450, lobaplatina, leflunomida, lenograstima, leuprolida, leuporelina, leksidronama, LGD-1550, linezolida, lutecijum teksafirina, lometreksola, lozoksantrona, LU 223651, lurtotekana, LY-S6AKT1, LY-2780301, mafosfamida, marimastata, mehloroetamina, inhibitora MEK, MEK-162, metiltestosterona, metilprednizolona, MEDI-573, MEN-10755, MDX-H210, MDX-447, MDX-1379, MGV, midostaurina, minodronske kiseline, mitomicina, mivobulina, MK-2206, MK-0646 (dalotuzumaba), MLN518, moteksafa u gadolinijumu, MS-209, MS-275, MX6, neridronata, neratiniba, neksavara, neovastata, nilotiniba, nimesulida, nitroglicerina, nolatrekseda, norelina, N-acetilcisteina, 06-benzilguanina, oblimersena, omeprazola, onkofaga, onkoVEXGM-CSF, ormiplatina, ortataksela, OX44 antitela, OSI-027, OSI-906 (linsitiniba), 4-1BB antitela, oksantrazola, estrogena, panitumumaba, patupilona, pegfilgrastima, PCK-3145, pegfilgrastima, PBI-1402, PBI-05204, PDO325901, PD-1 antitela, PEG-paklitaksela, albuminom-stabilizovanog paklitaksela, PEP-005, PF-05197281, PF-05212384, PF-04691502, PHT-427, P-04, PKC412, P54, PI-88, pelitiniba, pemetrekseda, pentriksa, perifosina, perililalkohola, pertuzumaba, inhibitora PI3K, inhibitora PI3K/mTOR, PG-TXL, PG2, PLX-4032/RO-5185426 (vemurafeniba), PLX-3603/RO-5212054, PT-100, PWT-33597, PX-866, pikoplatina, pivaloiloksimetilbutirata, piksantrona, fenoksodiola O, PKI166, plevitrekseda, plikamicina, poliprenske kiseline, porfiromicina, prednizona, prednizolona, kvinameda, kvinupristina, R115777, RAF-265, ramosetrona, ranpirnaze, RDEA-119/BAY 869766, RDEA-436, analoga rebekamicina, inhibitora receptor tirozin kinaze (RTK), revimida, RG-7167, RG-7304, RG-7421, RG-7321, RG 7440, rizoksina, rhu-MAb, rinfabata, risedronata, rituksimaba, robatumumaba, rofekoksiba, RO-31-7453, RO-5126766, RO-5068760, RPR 109881A, rubidazona, rubitekana, R-flurbiprofena, RX-0201, S-9788, sabarubicina, SAHA, sargramostima, satraplatina, SB 408075, Se-015/Ve-015, SU5416, SU6668, SDX-101, semustina, seokalcitola, SM-11355, SN-38, SN-4071, SR-27897, SR-31747, SR-13668, SRL-172, sorafeniba, spiroplatina, skvalamina, suberanilohidroksamiske kiseline, sutenta, T 900607, T 138067, TAK-733, TAS-103, tacedinalina, talaporfina, Tarceva, tarikvitara, tasisulam, taksotere, taksopreksin, tazarotena, tegafura, temozolamida, tesmilifena, testosterona, testosteron propionata, tesmilifena, tetraplatina, tetrodotoksina, tezacitabina, talidomida, teraluksa, terarubicina, timalfasina, timektacina, tiazofurina, tipifarniba, tirapazamina, tokladesina, tomudeksa, toremofina, trabektedina, TransMID-107, transretinske kiseline, traszutumaba, tremelimumaba, tretinoina, triacetiluridina, triapina, triciribina, trimetreksata, TLK-286TXD 258, tikerba/tiverba, urocidina, valrubicina, vatalaniba, vinkristina, vinflunina, virulizina, WX-UK1, WX-554, vectibiksa, kseloda, XELOX, XL-147, XL-228, XL-281, XL-518/R-7420/GDC-0973, XL-765, YM-511, YM-598, ZD-4190, ZD-6474, ZD-4054, ZD-0473, ZD-6126, ZD-9331, ZD1839, ZSTK-474, zoledronata, zosukvidar i njihovih kombinacija.
[0180] Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži steroid, uključujući deksametazon, prednizolon, metil prednizolon, prednizon, hidrokortizon, triamcinolon, betametazon i kortivazol. Drugo terapeutsko sredstvo može da sadrži antiemetik. Antiemetici uključuju, ali nisu ograničeni na, agoniste 5-HT3 receptora (kao što su dolasetron, granisetron, ondansetron, tropisetron, palonosetron i mirtazapin), agoniste dopamina (kao što su domperidon, olanzapin, droperidol, haloperidol, hlorpromazin, prohlorperazin, alizaprid, prohlorperazin i metoklopramid), antagoniste NK1 receptora (kao što su aprepitant i kazopitant), antihistaminike (kao što su ciklizin, difenhidramin, dimenhidrinat, doksilamin, meklizin, prometazin, hidroksizin), kanabinoide (kao što su kanabis, dronabilon, nabilon i sativeks), benzodiazepine (kao što je midazola i lorazepam), antiholinergike (kao što je hioscin), trimetobenzamid, đumbir, emetrol, propofol, pepermint, muscimol i ajvain.
[0181] Farmaceutske kompozicije se mogu primenjivati na subjekta bilo kojim pogodnim putem primene. Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta oralno, parenteralno, transdermalno ili transmukozno. Farmaceutska kompozicija se može primeniti na subjekta parenteralno. Farmaceutska kompozicija se može primeniti na subjekta parenteralnim putem primene izabranog iz grupe koja se sastoji od intravenske (IV), subkutane (SC) i intramuskularne (IM). Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta preko puta primene izabranog od rektalnog i transdermalnog. Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta u doznom obliku izabranom iz grupe koja se sastoji od sterilnih rastvora, suspenzija, supozitorija, tableta i kapsula. Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta u oralnom doznom obliku izabranom iz grupe koja se sastoji od tablete, kaplete, kapsule, pastile, sirupa, tečnosti, suspenzije i eliksira. Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta u oralnom doznom obliku izabranom iz grupe koja se sastoji od tableta, kapsula sa tvrdom ljuskom, mekih želatinoznih kapsula, perli, granula, agregata, praškova, gelova, čvrstih supstanci i polučvrstih supstanci.
[0182] Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta kao dozni oblik izabran iz grupe koja se sastoji od oblika sa produženim oslobađanjem, oblika sa kontrolisanim oslobađanjem, oblika sa odloženim oslobađanjem i oblika za oslobađanje sa odgovorom.
[0183] Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta jednom dnevno. Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta u skladu sa retkim režimom doziranja (npr., primenjen jednom nedeljno ili ređe), ili čestim režimom doziranja (npr. primenjen više od jednom nedeljno). Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta jednom nedeljno, jednom u četiri nedelje, dva puta nedeljno, jednom u dve nedelje ili jednom u tri nedelje. Farmaceutska kompozicija se može primenjivati na subjekta u ponovljenom ciklusu od jednom nedeljno, jednom svake dve nedelje, jednom svake tri nedelje, jednom svake četiri nedelje ili njihovim kombinacijama.
[0184] Postupak lečenja može da sadrži primenu na subjekta kome je potreban takav tretman: (i) prvog terapeutskog sredstva uključujući jedinjenje koje sadrži imipridon, kao što je ONC201, ili njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u kombinaciji sa (ii) drugim terapeutskim sredstvom, pri čemu su prvo terapeutsko sredstvo ili drugo terapeutsko sredstvo se primenjuju istovremeno ili uzastopno; i dalje sadrži analiziranje ekspresije gena za odgovor na stres endoplazmatičnog retikuluma (ER) u biološkom uzorku. Gen za odgovor na stres endoplazmatičnog retikuluma može biti izabran iz grupe koja uključuje, ali nije ograničena na, C/EBP-homologni protein (CHOP), aktivacioni transkripcioni faktor 3 (ATF3) i oba CHOP i ATF3. Gen za odgovor na stres endoplazmatičnog retikuluma može biti izabran iz grupe koja uključuje, ali nije ograničena na, ATF3, aktivacioni transkripcioni faktor 4 (ATF4) CHOP, IRE1, vezujući imunoglobulinski protein (BiP), eukariotski translacioni inicijacioni faktor 2A (eIF2a), vezujući protein 1 X-polja (XBP1). Biološki uzorak može biti tumor, mononuklearne ćelije periferne krvi ili biopsija kože. Biološki uzorak se može dobiti pre, tokom ili posle primene leka. Postupak lečenja može dalje da sadrži prilagođavanje doze prvog terapeutskog sredstva da bi se postigla indukcija od oko 50%, 75%, 100%, 125%, 150%, 175%, 200%, 225%, 250%, 275%, 300%, 325%, 350%, 375%, 400%, 425%, 450%, 475%, 500%, 525%, 550%, 575%, 600%, ili više od 600% jednog ili više gena za ER stres. Postupak lečenja može dalje da sadrži prilagođavanje doze prvog terapeutskog sredstva da bi se postigla indukcija od oko 50% do oko 100%, oko 100% do oko 150%, oko 150% do oko 200%, oko 200% do oko 250%, oko 250% do oko 300%, oko 300% do oko 350%, oko 350% do oko 400%, oko 400% do oko 450%, oko 450% do oko 500%, oko 500% do oko 550%, oko 550% do oko 600%, ili veća od 600% ER stres gena. Postupak lečenja može dalje da sadrži prilagođavanje doze prvog terapeutskog sredstva da bi se postigla indukcija od oko 50% do oko 100%, oko 100% do oko 200%, oko 200% do oko 300%, oko 300% do oko 400%, oko 400% do oko 500%, oko 500% do oko 600%, ili veća od 600% ER stres gena.
[0185] Postupak lečenja može da sadrži primenu na subjekta kome je potreban takav tretman: (i) prvog terapeutskog sredstva uključujući jedinjenje koje sadrži imipridon, kao što je ONC201, njegov analog, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u kombinaciji sa (ii) drugim terapeutskim sredstvo, pri čemu se prvo terapeutsko sredstvo i drugo terapeutsko sredstvo primenjuju istovremeno ili uzastopno; i dalje sadrži analiziranje ekspresije proteazomalne aktivnosti u biološkom uzorku. Proteazomalna aktivnost može biti slična himotrizinu, slična tripsinu i/ili aktivnost slična kaspazi. Biološki uzorak može biti tumor, mononuklearne ćelije periferne krvi ili ćelije kože. Biološki uzorak se može dobiti pre, tokom ili posle primene leka. Postupak lečenja može dalje da sadrži prilagođavanje doze da bi se postigla inhibicija od oko 20%, oko 25%, oko 30%, oko 35%, oko 40%, oko 45%, oko 50%, oko 55%, oko 60%, oko 65%, oko 70%, oko 75%, oko 80%, oko 85%, oko 90%, oko 95%, ili oko 100% proteozomalne aktivnosti. Postupak lečenja može dalje da sadrži prilagođavanje doze da bi se postigla inhibicija od najmanje 20%, najmanje 25%, najmanje 30%, najmanje 35%, najmanje 40%, najmanje 45%, najmanje 50%, najmanje 55%, najmanje 60%, najmanje 65%, najmanje 70%, najmanje 75%, najmanje 80%, najmanje 85%, najmanje 90% ili najmanje 95% proteazomalne aktivnosti. Postupak lečenja može dalje da sadrži prilagođavanje doze da bi se postigla inhibicija od oko 20% do oko 30%, oko 30% do oko 40%, oko 40% do oko 50%, oko 50% do oko 60%, oko 60% do oko 70%, oko 70% do oko 80%, oko 80% do oko 90% ili više od 90% proteazomalne aktivnosti.
[0186] Ovde su takođe obezbeđeni postupci lečenja koji sadrži primenu na subjekta kome je potreban takav tretman kombinacije prvog terapeutskog sredstva uključujući imipridon, kao što je ONC201, njegov analog ili njegova farmaceutski prihvatljiva so (npr. di-so ili tri-so) i drugog terapeutskog agensa, pri čemu postupak sadrži:
(i) primenu na subjekta prvog terapeutskog sredstva;
(ii) čekanje dok ne prođe unapred određeno vreme čekanja nakon vremena primene prvog terapeutskog sredstva na subjekta; i/ili dok se neželjeni događaji ne reše ili ne rešavaju; i (iii) primenu drugog terapeutskog sredstva na subjekta, pri čemu je unapred određeno vreme čekanja izabrano tako da se dobije odloženi terapeutski efekat prvog terapeutskog sredstva bez povećanog rizika od mogućih kombinovanih toksičnih efekata prvog i drugog terapeutskog sredstva. Unapred određeno vreme čekanja može se odrediti na osnovu brzine klirensa jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita. Unapred određeno vreme čekanja može se odrediti kvantitativnom procenom funkcije bubrega i parametara bubrega. Unapred određeno vreme čekanja može se odrediti analizom za određivanje bubrežne funkcije, pri čemu je analiza izabrana iz grupe koja se sastoji od nivoa u serumu jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita; brzine klirensa jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita; 24-časovnog urinarnog klirensa jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita.
[0187] Unapred određeno vreme čekanja može u suštini biti jednako vremenu potrebnom za sistemski klirens jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita iz tela subjekta. Unapred određeno vreme čekanja može u suštini biti jednako vremenu potrebnom za bubrežni klirens jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita iz tela subjekta. Unapred određeno vreme čekanja može u suštini biti jednako vremenu potrebnom za hepatički klirens jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita iz tela subjekta. Unapred određeno vreme čekanja može u suštini biti jednako vremenu potrebnom za potpuni klirens jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita iz tela subjekta. Unapred određeno vreme čekanja može biti oko 4 sata ili 1 dan. Vreme čekanja može biti dok prođe Cmaxjedinjenja prvog terapeutskog sredstva. Vreme čekanja može biti nakon što se većina neželjenih događaja reši ili povuče. Unapred određeno vreme čekanja može biti oko 2 dana, oko 3 dana, oko 4 dana, oko 5 dana, oko 6 dana ili oko 7 dana. Unapred određeno vreme čekanja može biti u rasponu od oko 1-7 dana, oko 1-6 dana, oko 1-5 dana, oko 1-4 dana, oko 1-3 dana ili oko 1 do 2 dana. Vreme čekanja može biti do 3 nedelje. Prethodni se smatraju „terapijskim vremenskim periodima“.
[0188] Kada je redosled primene obrnut, vreme za primenu prvog terapeutskog sredstva može biti pošto prođe Cmaxdrugog terapeutskog sredstva (tj. prvog primenjenog leka). Primena prvog terapeutskog sredstva može biti pošto se većina ili suštinski sav prvi primenjeni lek eliminiše iz tela ili toksični efekti za prvi primenjeni lek nestanu ili povlače.
[0189] Postupak lečenja može dalje da sadrži praćenje nivoa jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita kod subjekta upotrebom farmakokinetičkog profilisanja. Praćenje nivoa jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita kod subjekta upotrebom farmakokinetičkog profilisanja može uključivati konstruisanje farmakokinetičkog profila jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita za subjekta upotrebom koncentracija jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita u najmanje dva uzorka dobijenih od subjekta u vrermenskim tačkama pogodnim za konstrukciju farmakokinetičkog profila. Kada se prate nivoi jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita u subjektu upotrebom farmakokinetičkog profilisanja, uzorci se mogu sakupiti od subjekta na mestu zbrinjavanja ili na mestu upotrebe uzorkovanjem ili samouzorkovanjem na uređajima za pružanje nege ili na mestima upotrebe ili na matricama pogodnim za skladištenje uzoraka pre kvantitativnog određivanja u laboratoriji. Svaki od uređaja za pružanje pomoći ili uređaja na mestu upotrebe može biti u stanju da kvantitativno odredi jedinjenje prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita. Kada se prate nivoi jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita u subjektu, jedan ili više uzoraka se može sakupiti od subjekta na mestu zbrinjavanja ili na mestu upotrebe pomoću uređaja za biopsiju za analizu na mestu pružanja nege ili uređaja na mestu upotrebe ili za skladištenje pre analize u laboratoriji. Biopsija se može uzeti nakon vremenskog intervala od 3-8 sati posle primene prvog terapeutskog sredstva na subjekta, 3-24 sata posle primene prvog terapeutskog sredstva na subjekta, 8-24 sata posle primene njegovog prvog terapeutskog sredstva na subjekta, 2 dana nakon primene prvog terapeutskog sredstva na subjekta, 3 dana posle primene prvog terapeutskog srdstva na subjekta, ili 43 dana posle primene prvog terapeutskog sredstva na subjekta. Biopsija se može uzeti nakon vremenskog intervala od 1-7 dana posle primene prvog terapeutskog sredstva.
[0190] Farmakokinetički profil može uključivati farmakokinetičke parametre pogodne za vođenje doziranja prvog terapeutskog sredstva za subjekta koji se leči. Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle primene na subjekta može biti u opsegu od oko 1000 ng/dL do 1500 ng/dL tokom terapeutskog vremenskog perioda. Cmaxmože biti manja od 1500 ng/dL i veća od 85 ng/dL tokom terapeutskog vremenskog perioda. Cmaxprvog terapeutika posle njegove primene na subjekta može biti u opsegu od oko 1000 ng/mL do 1500 ng/mL tokom terapeutskog vremenskog perioda. Cmaxmože biti manji od 1500 ng/mL i veći od 85 ng/mL tokom terapeutskog vremenskog perioda.
[0191] Maksimalna koncentracija prvog terapeutskog sredstva u krvi (puna krv, plazma ili serum) („Cmax") subjekta posle njegove primene na subjekta može biti Cmaxod oko 1000, 1010, 1020, 1030, 1040, 1050, 1060, 1070, 1080, 1090, 1100, 1110, 1120, 1130, 1140, 1150, 1160, 1170, 1180, 1190, 1200, 1210, 1220, 1230, 1240, 1250, 1260, 1270, 1280, 1290, 1300, 1310, 1320, 1330, 1340, 1350, 1360, 1370, 1380, 1390, 1400, 1410, 1420, 1430, 1440, 1450, 1460, 1470, 1480, ili 1490 ng/dL do oko 1500 ng/dL; od oko 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/dL do oko 150 ng/dL; ili od oko 10, 10.5, 11, 11.5, 120, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/dL do oko 15 ng/dL.
[0192] Maksimalna koncentracija prvog terapeutskog sredstva u krvi (puna krv, plazma ili serum) („Cmax") subjekta posle njegove primene može biti Cmaxod oko 1000, 1010, 1020, 1030, 1040, 1050, 1060, 1070, 1080, 1090, 1100, 1110, 1120, 1130, 1140, 1150, 1160, 1170, 1180, 1190, 1200, 1210, 1220, 1230, 1240, 1250, 1260, 1270, 1280, 1290, 1300, 1310, 1320, 1330, 1340, 1350, 1360, 1370, 1380, 1390, 1400, 1410, 1420, 1430, 1440, 1450, 1460, 1470, 1480, ili 1490 ng/mL do oko 1500 ng/mL; od oko 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/mL do oko 150 ng/mL; ili od oko 10, 10.5, 11, 11.5, 120, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/mL do oko 15 ng/mL.
[0193] Maksimalna koncentracija prvog terapeutskog sredstva u krvi (puna krv, plazma ili serum) („Cmax") subjekta posle njegove primene može biti izabrana od oko 1000, 1010, 1020, 1030, 1040, 1050, 1060, 1070, 1080, 1090, 1100, 1110, 1120, 1130, 1140, 1150, 1160, 1170, 1180, 1190, 1200, 1210, 1220, 1230, 1240, 1250, 1260, 1270, 1280, 1290, 1300, 1310, 1320, 1330, 1340, 1350, 1360, 1370, 1380, 1390, 1400, 1410, 1420, 1430, 1440, 1450, 1460, 1470, 1480, ili 1490 ng/dL. Cmaxprvog terapeutskog sredstva u krvi (puna krv, plazma ili serum) („Cmax") subjekta posle njegove primene može biti izabrana od oko 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/dL.
Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 10, 10.5, 11, 11.5, 120, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/dL.
[0194] Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 1000, 1000, 1010, 1020, 1030, 1040, 1050, 1060, 1070, 1080, 1090, 1100, 1110, 1120, 1130, 1140, 1150, 1160, 1170, 1180, 1190, 1200, 1210, 1220, 1230, 1240, 1250, 1260, 1270, 1280, 1290, 1300, 1310, 1320, 1330, 1340, 1350, 1360, 1370, 1380, 1390, 1400, 1410, 1420, 1430, 1440, 1450, 1460, 1470, 1480, ili 1490 ng/mL. Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/mL. Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 10, 10.5, 11, 11.5, 120, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/mL.
[0195] Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 85, 95, 105, 115, 125, 135, 145, 155, 165, 175, 185, 195, 205, 215, 225, 235, 245, 255, 265, 275, 285, 295, 305, 315, 325, 335, 345, 355, 365, 375, 385, 395, 405, 415, 425, 435, 445, 455, 465, 475, 485, 495, 505, 515, 525, 535, 545, 555, 565, 575, 585, 595, 605, 615, 625, 635, 645, 655, 665, 675, 685, 695, 705, 715, 725, 735, 745, 755, 765, 775, 785, 795, 805, 815, 825, 835, 845, 855, 865, 875, 885, 895, 905, 915, 925, 935, 945, 955, 965, 975, 985, 995, 1005, 1015, 1025, 1035, 1045, 1055, 1065, 1075, 1085, 1095, 1105, 1115, 1125, 1135, 1145, 1155, 1165, 1175, 1185, 1195, 1205, 1215, 1225, 1235, 1245, 1255, 1265, 1275, 1285, 1295, 1305, 1315, 1325, 1335, 1345, 1355, 1365, 1375, 1385, 1395, 1405, 1415, 1425, 1435, 1445, 1455, 1465, 1475, 1485, 1495, ili 1500 ng/dL. Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/dL. Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/dL.
[0196] Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 85, 95, 105, 115, 125, 135, 145, 155, 165, 175, 185, 195, 205, 215, 225, 235, 245, 255, 265, 275, 285, 295, 305, 315, 325, 335, 345, 355, 365, 375, 385, 395, 405, 415, 425, 435, 445, 455, 465, 475, 485, 495, 505, 515, 525, 535, 545, 555, 565, 575, 585, 595, 605, 615, 625, 635, 645, 655, 665, 675, 685, 695, 705, 715, 725, 735, 745, 755, 765, 775, 785, 795, 805, 815, 825, 835, 845, 855, 865, 875, 885, 895, 905, 915, 925, 935, 945, 955, 965, 975, 985, 995, 1005, 1015, 1025, 1035, 1045, 1055, 1065, 1075, 1085, 1095, 1105, 1115, 1125, 1135, 1145, 1155, 1165, 1175, 1185, 1195, 1205, 1215, 1225, 1235, 1245, 1255, 1265, 1275, 1285, 1295, 1305, 1315, 1325, 1335, 1345, 1355, 1365, 1375, 1385, 1395, 1405, 1415, 1425, 1435, 1445, 1455, 1465, 1475, 1485, 1495, ili 1500 ng/mL. Cmaxprvog terapeutika posle njegove primene može biti izabrana od 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/mL. Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti izabrana od oko 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/mL.
[0197] Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle primene na subjekta može biti u opsegu od oko 85 ng/dL do 1500 ng/dL; od oko 8.5 ng/dL do 150 ng/dL; ili od oko 0.85 ng/dL do 15 ng/dL. Cmaxprvog terapeutskog sredstva u krvi subjekta (puna krv, plazma ili serum) posle njegove primene može biti izabrana od oko 85, 95, 105, 115, 125, 135, 145, 155, 165, 175, 185, 195, 205, 215, 225, 235, 245, 255, 265, 275, 285, 295, 305, 315, 325, 335, 345, 355, 365, 375, 385, 395, 405, 415, 425, 435, 445, 455, 465, 475, 485, 495, 505, 515, 525, 535, 545, 555, 565, 575, 585, 595, 605, 615, 625, 635, 645, 655, 665, 675, 685, 695, 705, 715, 725, 735, 745, 755, 765, 775, 785, 795, 805, 815, 825, 835, 845, 855, 865, 875, 885, 895, 905, 915, 925, 935, 945, 955, 965, 975, 985, 995, 1005, 1015, 1025, 1035, 1045, 1055, 1065, 1075, 1085, 1095, 1105, 1115, 1125, 1135, 1145, 1155, 1165, 1175, 1185, 1195, 1205, 1215, 1225, 1235, 1245, 1255, 1265, 1275, 1285, 1295, 1305, 1315, 1325, 1335, 1345, 1355, 1365, 1375, 1385, 1395, 1405, 1415, 1425, 1435, 1445, 1455, 1465, 1475, 1485, ili 1495 ng/dL do oko 1500 ng/dL; od oko 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/dL do oko 150 ng/dL; ili od oko 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/dL do oko 15 ng/dL.
[0198] Cmaxprvog terapeutskog sredstva posle njegove primene može biti u opsegu od oko 85 ng/mL do 1500 ng/mL; od oko 8.5 ng/mL do 150 ng/mL; ili od oko 0.85 ng/mL do 15 ng/mL. Cmaxprvog terapeutika posle njegove primene može biti izabrana od oko 85, 95, 105, 115, 125, 135, 145, 155, 165, 175, 185, 195, 205, 215, 225, 235, 245, 255, 265, 275, 285, 295, 305, 315, 325, 335, 345, 355, 365, 375, 385, 395, 405, 415, 425, 435, 445, 455, 465, 475, 485, 495, 505, 515, 525, 535, 545, 555, 565, 575, 585, 595, 605, 615, 625, 635, 645, 655, 665, 675, 685, 695, 705, 715, 725, 735, 745, 755, 765, 775, 785, 795, 805, 815, 825, 835, 845, 855, 865, 875, 885, 895, 905, 915, 925, 935, 945, 955, 965, 975, 985, 995, 1005, 1015, 1025, 1035, 1045, 1055, 1065, 1075, 1085, 1095, 1105, 1115, 1125, 1135, 1145, 1155, 1165, 1175, 1185, 1195, 1205, 1215, 1225, 1235, 1245, 1255, 1265, 1275, 1285, 1295, 1305, 1315, 1325, 1335, 1345, 1355, 1365, 1375, 1385, 1395, 1405, 1415, 1425, 1435, 1445, 1455, 1465, 1475, 1485, ili 1495 ng/mL do oko 1500 ng/mL; od oko 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, ili 149 ng/mL do oko 150 ng/mL; ili od oko 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 6.5, 7, 7.5, 8, 8.5, 9, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 12.5, 13, 13.5, 14, ili 14.5 ng/mL do oko 15 ng/mL.
[0199] Ukupna izloženost leku tokom vremena, merena kao površina ispod krive („AUC“) grafikona koncentracije leka u krvi (puna krv, plazma ili serum) subjekta nakon primene leka u odnosu na vreme posle primene leka može da biti u opsegu od oko 150 ng h/mL do oko 8000 ng h/mL; od oko 15 ng h/mL do oko 800 ng h/mL; ili od oko 1.5 ng h/mL do oko 80 ng h/mL. AUC može biti manja od 8000 ng h/mL i veća ili jednka 150 ng h/mL. AUC može biti manja od 800 ng h/mL i veća ili jednaka 15 ng h/mL. AUC može biti manja od 80 ng h/mL i veća ili jednaka 1.5 ng h/mL.
[0200] Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 100 ng h/mL do oko 8000 ng h/mL; od oko 10 ng h/mL do oko 800 ng h/mL; ili od oko 1 ng h/mL do oko 80 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 150, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200, 1400, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3600, 3800, 4000, 4200, 4400, 4600, 4800, 5000, 5200, 5400, 5600, 5800, 6000, 6200, 6400, 6600, 6800, 7000, 7200, 7400, 7600, ili 7800 ng h/mL do oko 8000 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 15, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320, 340, 360, 380, 400, 420, 440, 460, 480, 500, 520, 540, 560, 580, 600, 620, 640, 660, 680, 700, 720, 740, 760, ili 780 ng h/mL do oko 800 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 1.5, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, ili 78 ng h/mL do oko 80 ng h/mL.
[0201] Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 100 ng h/mL do oko 8000 ng h/mL, od oko 10 ng h/mL do oko 800 ng h/mL; ili od oko 1 ng h/mL do oko 80 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 150 ng h/mL do oko 7800, 7600, 7400, 7200, 7000, 6800, 6600, 6400, 6200, 6000, 5800, 5600, 5400, 5200, 5000, 4800, 4600, 4400, 4200, 4000, 3800, 3600, 3400, 3200, 3000, 2800, 2600, 2400, 2200, 2000, 1800, 1600, 1400, 1200, 1000, 800, 600, 400, ili 200 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 15 ng h/mL do oko 780, 760, 740, 720, 700, 680, 660, 640, 620, 600, 580, 560, 540, 520, 500, 480, 460, 440, 420, 400, 380, 360, 340, 320, 300, 280, 260, 240, 220, 200, 180, 160, 140, 120, 100, 80, 60, 40, ili 20 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 1.5 ng h/mL do oko 78, 76, 74, 72, 70, 68, 66, 64, 62, 60, 58, 56, 54, 52, 50, 48, 46, 44, 42, 40, 38, 36, 34, 32, 30, 28, 26, 24, 22, 20, 18, 16, 14, 12, 10, 8, 6, 4, ili 2 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC od oko 100 ng h/mL do oko 200 ng h/mL; od oko 10 ng h/mL do oko 20 ng h/mL; ili od oko 1 ng h/mL do oko 2 ng h/mL.
[0202] Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC izabrana od oko 100, 150, 200, 400, 600, 800, 1000, 1200, 1400, 1600, 1800, 2000, 2200, 2400, 2600, 2800, 3000, 3200, 3400, 3600, 3800, 4000, 4200, 4400, 46000, 4800, 5000, 5200, 5400, 5600, 5800, 6000, 6200, 6400, 6600, 6800, 7000, 7200, 7400, 7600, 7800, i 8000 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC izabrana od 10, 15, 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320, 340, 360, 380, 400, 420, 440, 4600, 480, 500, 520, 540, 560, 580, 600, 620, 640, 660, 680, 700, 720, 740, 760, 780, i 800 ng h/mL. Ukupna izloženost leku tokom vremena može biti AUC izabrana od 1, 15, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 460, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, i 80 ng h/mL.
[0203] Ovde su obezbeđeni postupci za lečenje ili upotreba kompozicije za lečenje bolesnog stanja, koji sadrže primenu na subjekta kome je potrebno takvo lečenje kombinacije prvog terapeutskog sredstva i drugog terapeutskog sredstva, pri čemu postupak sadrži:
(i) primenu na subjekta prvog terapeutskog sredstva uključujući imipridon, kao što je ONC201, njegovog analoga ili njegove farmaceutski prihvatljive soli;
(ii) praćenje nivoa jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita kod subjekta upotrebom farmakokinetičkog profilisanja; i
(iii) primenu drugog terapeutskog sredstva uslovljenu nivoom prvog terapeutskog sredstva kod subjekta. Korak praćenja može uključiti konstruisanje farmakokinetičkog profila jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita za subjekta upotrebom koncentracija jedinjenja prvog terapeutskog sredstva ili njegovog metabolita u više uzoraka dobijenih od subjekta u vremenskim tačkama pogodnim za konstruisanje farmakokinetičkog profila. Najmanje dva uzorka mogu da se sakupe na mestu zbrinjavanja ili na mestu upotrebe uzorkovanjem ili samouzorkovanjem na uređajima na mestu zbrinjavanja ili na uređajima na mestu upotrebe ili na matricama pogodnim za skladištenje uzoraka pre kvantitativnog određivanja jedinjenja ili njegovog metabolita laboratorijski. Svaki uređaj za pružanje pomoći ili uređaj na mestu upotrebe može biti u stanju da kvantitativno odredi jedinjenje ili njegov metabolit. Farmakokinetički profil može uključiti farmakokinetičke parametre pogodne za vođenje doziranja jedinjenja ili njegove soli za subjekta. Uzorci mogu uključivati od 2-12 uzoraka. Uzorci se mogu sakupljati u vremenskom periodu do 8 sati, do 24 sata, do 48 sati ili do 72 sata. Farmakokinetički parametri mogu uključivati najmanje jedan parametar izabran iz grupe koja se sastoji od AUC, AUCinf, Tmax, Cmax, vremena iznad praga, koncentracije u stabilnom stanju, brzine apsorpcije, brzine klirensa, brzine distribucije, terminalnog T-1/2 ili parametara izvedenih iz nekompartmentalne farmakokinetičke (PK) ili PK analize, uključujući kompartmentalnu PK analizu zasnovanu na fiziološkom modelu. Postupak tretmana može dalje da obuhvata generisanje izveštaja koji uključuje farmakokinetički profil subjekta. Izveštaj može da sadrži preporuku u vezi sa doziranjem na osnovu farmakokinetičkog profila subjekta. Smanjenje doze ONC20 1, njegovog analoga ili njegove farmaceutski prihvatljive soli može biti naznačeno za smanjenje rizika od toksičnosti na osnovu jednog ili više farmakokinetičkih parametara. Smanjenje doze jedinjenja ili njegove soli može biti naznačeno na osnovu vremena iznad praga, pri čemu je prag koncentracija leka iznad koje se javlja toksičnost, ili jedan ili više AUC, AUCinf, srednje vreme zadržavanja (MRT), eksponencijalne vrednosti koje definišu farmakokinetički profil, zapreminu distribucije u stabilnom stanju (Vss), zapreminu distribucije tokom terminalne faze (Vz) ili kombinaciju grupe farmakokinetičkih promenljivih da bi se adekvatno opisao farmakokinetički profil. Prilagođavanje doze jedinjenja ili njegove soli može biti naznačeno da poveća efikasnost na osnovu jednog ili više farmakokinetičkih parametara. Povećanje doze jedinjenja ili njegove soli može biti naznačeno na osnovu jednog ili više od AUC, AUCinf, MRT, eksponencijalne vrednosti koje definišu farmakokinetički profil, zapremine distribucije stabilnog stanja (Vss), zapremine distribucije tokom terminalne faze (Vz) ili kombinacije grupe farmakokinetičkih promenljivih za adekvatan opis farmakokinetičkog profila. Doza jedinjenja ili njegove soli može se podesiti na unutar 5% do 25% od željene ciljne vrednosti. Svaki od uzoraka može se primeniti na uređaj na mestu zbrinjavanja ili na uređaj na mestu upotrebe za određivanje koncentracije jedinjenja ili njegovog metabolita, pri čemu uređaj na mestu zbrinjavanja ili uređaj na mestu upotrebe sadrži traku sa bočnim protokom koja ima konstrukciju i sastav tako da primena jednog ili više uzoraka na traku bočnog protoka dovodi do toga da se deo leka u uzorku vezuje za komponentu trake sa bočnim protokom tako da se proizvodi detektabilni signal proprcionalan koncentraciji leka u primenjenom uzorku. Uzorci se mogu primeniti na matrice pogodne za skladištenje uzoraka pre kvantitativnog određivanja u laboratoriji. Uzorci se mogu čuvati kao osušene mrlje krvi. Koncentracije leka se mogu meriti pomoću ELISA, LC MS MS, LC UV ili LCMS. Farmakokinetički parametri mogu uključivati najmanje jedan od stabilne koncentracije, apsorpcije i terminalnog T1/2. Najmanje jedan od uzoraka može biti puna krv.
IX. MULTIMODALNI TERAPIJSKI POSTUPCI
[0204] Ovde su obezbeđeni multimodalni terapeutski postupci u kojima je primena imipridona, kao što je ONC201, njegovog analoga ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na subjekta kome je potreban takav tretman, dopunjeno primenom drugih terapeutskih modaliteta. Multimodalni terapeutski postupak može da sadrži primenu na subjekta farmaceutske kompozicije koja sadrži imipridon, kao što je ONC201, njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u kombinaciji sa terapijom zračenjem ili pošto se utvrdi da zračenje nije bilo efikasno. Multimodalni terapeutski postupak može da sadrži primenu na subjekta farmaceutske kompozicije koja sadrži imipridon, kao što je ONC201, njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so zajedno sa terapijom zračenjem, pri čemu farmaceutska kompozicija koja sadrži imipridon, kao što ONC201, njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i terapija zračenjem se primenjuju istovremeno ili uzastopno bilo kojim redosledom. Multimodalni terapeutski postupak može da sadrži primenu na subjekta farmaceutske kompozicije koja sadrži imipridon, kao što je ONC201, njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa terapijom zračenjem u uzastopnom rasporedu. Multimodalni terapeutski postupak može da sadrži primenu na subjekta kome je potreban takav tretman farmaceutske kompozicije koja sadrži imipridon, kao što je ONC201, njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, istovremeno sa terapijom zračenjem. Multimodalni terapeutski postupak se može koristiti za lečenje kancera. Multimodalni terapeutski postupak može uključiti primenu na subjekta sa kancerom kome je potreban takav tretman farmaceutske kompozicije koja sadrži imipridon, kao što je ONC201, njegov analog, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so i zračenje ćelija kancera snopom zračenja. Multimodalni terapeutski postupak može da koristi tehniku konformne radioterapije (CRT) za isporuku histograma zapremine doze (DVH) koji je propisan subjektu sa kancerom. Multimodalni terapeutski postupak može koristiti tehniku terapije zračenjem sa modulacijom intenziteta (IMRT) za isporuku zračenja ćelijama kancera. Multimodalni terapeutski postupak može da koristi tehnike koje kompenzuju kretanje tumora kod subjekta tokom lečenja (npr. gde se doze zračenja moraju primeniti na torakalni tumor koji se pomera dok pacijent diše). Na primer, multimodalni terapeutski postupak može da koristi tehnike skeniranja četvorodimenzionalnom kompjuterizovanom tomografijom (4D CT) da bi se podesilo polje zračenja da bi se kompenzovalo kretanje tumora tokom ciklusa disanja.
[0205] Bilo koja pogodna vrsta zračenja, uključujući gama zračenje koje se daje frakcionisano, IMRT (terapiju zračenjem sa modulacijom intenziteta), gama nož, protonsku terapiju i brahiterapiju može se koristiti sa multimodalnim terapijskim postupkom. Terapija zračenjem i primena imipridona, kao što je ONC201, njegovog analoga, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, mogu se koristiti za lečenje tumora mozga kao što je glioblastom ili bolest koja je metastazirala u mozak od kancera pluća. Multimodalni terapeutski postupak se može koristiti za lečenje kancera pluća, kancera pankreasa, kancera rektuma, kancera dojke, sarkoma, kancera prostate, ginekoloških maligniteta i limfoma. Gama nož se često koristi za lečenje metastaza u mozgu. Multimodalni terapeutski postupak može uključivati upotrebu protonske terapije za lečenje kancera, uključujući tumore mozga, kancer prostate i bilo koji tumor koji se nalazi u blizini vitalnih organa gde je veoma važno minimizirati toksičnost za obližnje normalno tkivo.
[0206] Multimodalni terapeutski postupak može uključivati primenu na subjekta sa kancerom kome je potreban takav tretman farmaceutske kompozicije koja sadrži imipridon, kao što je ONC201, njegov analog, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u kombinaciji sa adoptivnom ćelijskom terapijom (npr., CAR-T (JCAR 14, 15, 16, 17, KTE-C19 ili CTL019); drugom T ćelijom (AFM13); ili NK (CDNO-109 ili NK-92)) bilo istovremeno ili u kombinaciji.
[0207] Multimodalni terapeutski postupak može eliminisati minimalnu rezidualnu bolest bez dodavanja toksičnosti koja je rezultat tretmana imipridonom, kao što je ONC201, njegovim analogom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. Multimodalni terapeutski postupak može poboljšati prognozu i/ili smanjiti neželjene nuspojave povezane sa bolesnim stanjem ili stanjem kod subjekta koji je podvrgnut lečenju.
X. DODATNI DERIVATI IMIPRIDONA, ANALOZI I SOLI
[0208] Ovde su data jedinjenja koja su analozi jedinjenja formule (10) i postupci njihovog dobijanja. Stručnjaci će razumeti da opšti principi i koncepti opisani prethodno u vezi sa ONC201 i jedinjenjima formule (10) i njihovim solima, uključujući principe i koncepte koji se odnose na postupke i farmaceutske kompozicije, primenjuju se sa jednakom snagom na sledeće analoge i njihove soli.
[0209] Analozi mogu imati strukturu jedinjenja (25):
pri čemu Y je NR4ili O, i pri čemu R1, R2, R3, i R4nezavisno predstavljaju H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, karboksil, haloalkil, alkenil, cikloalkenil, alkinil, aril, aralkil, hidroksialkil, alkoksi, ariloksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkiltio, alkanoil, merkapto, alkiltio, ariltio, alkilsulfinil, arilsulfinil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heteroaril, acil i heterociklične radikale. R1, R2, R3, i R4mogu biti izborno supstituisani. Neki ili svi vodonici u R1, R2, R3, i R4mogu biti supstituisani deuterijumom. R1, R2, R3, i R4mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-4benzil-piperazin i C1-4alkiltienil, pri čemu C1-
4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, i C1-4benzilpiperazin su izborno supstituisani sa C1-4alkil, hidroksil ili halo. R1, R2, R3, i R4mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph.
[0210] Analozi mogu imati strukturu jedinjenja (26):
pri čemu R1i R2nezavisno predstavljaju H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, karboksil, haloalkil, alkenil, cikloalkenil, alkinil, aril, aralkil, hidroksialkil, alkoksi, ariloksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkltio, alkanoil, merkapto, alkiltio, ariltio, alkilsulfinil, arilsulfinil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heteroaril, acil i heterociklične radikale. R1i R2mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-
4benzilpiperazin i C1-4alkiltienil, pri čemu C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, i C1-4benzilpiperazin su izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. R2može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph.
[0211] R1može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen uključujući F, Cl, Br ili I; poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl. R2može biti benzil supstituisan sa jednim ili više sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, - CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1, gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen.
[0212] R1može biti H. R1može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo.
[0213] R2može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovani C1-
4alkil, ili halo. Arilalkil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heterocikloalkilalkil grupa, kao što je morfolinoalkil ili piperazinilalkil grupa. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heteroarilalkil grupa, kao što je izoksazolidinilmetil ili piridilmetil grupa. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3.
[0214] Analozi mogu imati strukturu jedinjenja (27):
pri čemu R1je H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, karboksil, haloalkil, alkenil, cikloalkenil, alkinil, aril, aralkil, hidroksialkil, alkoksi, ariloksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio, alkanoil, merkapto, alkiltio, ariltio alkilsulfinil, arilsulfinil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heteroaril, acil i heterociklični radikali. R1mogu biti izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-4benzil-piperazin i C1-4alkiltienil, pri čemu C1-4alkil, C1-
4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, i C1-4benzil-piperazin su izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-
4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzilpiperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph.
[0215] R1može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen uključujući F, Cl, Br ili I; poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl. R1može biti H ili supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo.
[0216] Analozi mogu imati strukturu jedinjenja (28):
pri čemu je R1i R2nezavisno predstavljaju H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, karboksil, haloalkil, alkenil, cikloalkenil, alkinil, aril, aralkil, hidroksialkil, alkoksi, ariloksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio, alkanoil, merkapto, alkiltio, ariltio, alkilsulfinil, arilsulfinil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heteroaril, acil i heterociklične radikale. R1i R2mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-
4benzil-piperazin i C1-4alkiltienil, pri čemu C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, i C1-4benzilpiperazin su izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh, CH2CH2(4-N-benzilpiperazin), i (CH2)3CO-4F-Ph. R2može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. Kada je R1jednako CH2Ph, R2ne mora biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2,4-di F-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph).
[0217] R1može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen uključujući F, Cl, Br ili I; poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl. R2može biti benzil supstituisan sa jednim ili više sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, - CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1, gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen.
[0218] R1može biti H. R1može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo.
[0219] R2može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-
4alkil, ili halo. Arilalkil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heterocikloalkilalkil grupa, kao što je morfolinoalkil ili piperazinilalkil grupa. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heteroarilalkil grupa, kao što je izoksazolidinilmetil ili piridilmetil grupa. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3.
[0220] Analozi mogu imati strukturu jedinjenja (29):
pri čemu R1i R2nezavisno predstavljaju H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, karboksil, haloalkil, alkenil, cikloalkenil, alkinil, aril, aralkil, hidroksialkil, alkoksi, ariloksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio, alkanoil, merkapto, alkiltio, ariltio, alkilsulfinil, arilsulfinil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heteroaril, acil i heterociklične radikale. R1i R2mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-
4benzilpiperazin i C1-4alkiltienil, pri čemu C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, i C1-4benzilpiperazin su izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. R2može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. Kada je R1jesnako CH2Ph, R2ne mora biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2,4-di F-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph).
[0221] R1može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen uključujući se odnosi na F, Cl, Br ili I; poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl. R2može biti benzil supstituisan sa jednim ili više sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, - CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1, gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen.
[0222] R1može biti H. R1može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo.
[0223] R2može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-
4alkil, ili halo. Arilalkil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heterocikloalkilalkil grupa, kao što je morfolinoalkil ili piperazinilalkil grupa. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heteroarilalkil grupa, kao što je izoksazolidinilmetil ili piridilmetil grupa. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3.
[0224] Analozi mogu imati strukturu jedinjenja (30):
pri čemu R1i R2nezavisno predstavljaju H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, karboksil, haloalkil, alkenil, cikloalkenil, alkinil, aril, aralkil, hidroksialkil, alkoksi, ariloksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio, alkanoil, merkapto, alkiltio, ariltio, alkilsulfinil, arilsulfinil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heteroaril, acil i heterociklične radikale. R1i R2mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-
4benzilpiperazin i C1-4alkiltienil, pri čemu C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, i C1-4benzilpiperazin su izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. R2može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. Kada R1može biti CH2Ph, R2ne mora biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2,4-di F-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph).
[0225] R1može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen uključujući se odnosi na F, Cl, Br ili I, poželjno, F, Cl ili Br, poželjnije, F ili Cl. R2može biti benzil supstituisan sa jednim ili više sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, - CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1, gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen.
[0226] R1može biti H. R1može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo.
[0227] R2može biti supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-
4alkil, ili halo. Arilalkil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heterocikloalkilalkil grupa, kao što je morfolinoalkil ili piperazinilalkil grupa. R2može biti supstituisani ili nesupstituisani heteroarilalkil, kao što je izoksazolidinilmetil ili piridilmetil grupa. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovani C1-4alkil, ili halo. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3.
[0228] Analozi mogu imati strukturu jedinjenja (31):
pri čemu R1i R2nezavisno predstavljaju H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, karboksil, haloalkil, alkenil, cikloalkenil, alkinil, aril, aralkil, hidroksialkil, alkoksi, ariloksi, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio, alkanoil, merkapto, alkiltio, ariltio, alkilsulfinil, arilsulfinil, alkilsulfonil, arilsulfonil, heteroaril, acil i heterociklični radikali. R1i R2mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-
4benzilpiperazin i C1-4alkiltienil, pri čemu C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, i C1-4benzilpiperazin su izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. R2može biti izabran iz grupe koja se sastoji od H, CH3, CH2Ph, CH2-((2-Cl)-Ph), CH2-(2-tienil), CH2CH2Ph, CH2CH2(4-N-benzil-piperazin), CH2-(2,4-di F-Ph), CH2-((2-CH3)-Ph), CH2CHOHPh i (CH2)3CO-4F-Ph. Kada R1može biti CH2Ph, R2ne mora biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2-CH3-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2,4-di F-Ph). R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(4-CF3-Ph).
[0229] R1može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen uključujući F, Cl, Br ili I; poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl. R2može biti benzil supstituisan sa jednim ili više sledećih supstituenata sam ili u kombinaciji na orto, meta i/ili para pozicijama benzil prstena: -CH3, -NO2, -OCH3, -CXH2, -CX2H, - CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, ili -OCstrX2p+1, gde je p ceo broj od 2 do 20 i gde je X halogen.
[0230] R1može biti H ili supstituisana ili nesupstituisana arilalkil grupa, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo.
[0231] R2može biti supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, kao što je benzil ili feniletil grupa. Arilalkil može biti supstituisan sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. Arilalkil može biti supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heterocikloalkilalkil grupa, kao što je morfolinoalkil ili piperazinilalkil grupa. R2može biti supstituisana ili nesupstituisana heteroarilalkil grupa, kao što je izoksazolidinilmetil ili piridilmetil grupa. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. Heterocikloalkilalkil ili heteroarilalkil mogu biti supstituisani sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo, -CH3, -CF3, i -OCH3.
[0232] Ovde su data jedinjenja formule (100):
(100), pri čemu R1i R2su nezavisno izabrani od H, alkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, heterocikloalkil, heterocikloalkilalkil, aril, heteroaril, arilalkil, heteroarilalkil, alkoksialkil, alkoksikarbonil, aralkoksi, aralkiltio i acil radikala. R1može biti CH2Ph i R2može biti CH2-(2-CH3-Ph), koji je ONC201 linearni izomer (tj. TIC-10)
TIC-10, kome nedostaje aktivnost protiv kancera (Jacob et al., Angew. Chem. Int. Ed., (2014) 53:6628; Wagner et al., Oncotarget (2015) 5(24): 12728). Ali kao što je prikazano u primerima, TIC-10 je agonist CXCR7. Agonisti CXCR7 se mogu koristiti za regeneraciju jetre i prevenciju ili lečenje fibroze jetre (Nature (2014) 505:97).
[0233] R1i R2mogu biti nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od sledećih: H, C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-4benzil-piperazin, C1-4alkiltienil, C1-4alkilpiridinil, C1-
4alkilizoksazolidinil, C1-4alkilmorfolinil, C1-4alkiltiazolil i C1-4alkilpirazinil gde su C1-4alkil, C1-4alkilfenil, C1-4alkilfenilketon, C1-4benzil-piperazin, C1-4alkiltienil, C1-4alkilpiridinil, C1-4alkilizoksazolidinil, C1-4alkilmorfolinil, C1-4alkiltiazolil i C1-4alkilpirazinil izborno supstituisani sa C1-4alkil, C1-4alkoksil, hidroksil, perhalogenovanim C1-4alkil, ili halo. R1i/ili R2može biti supstituisani ili nesupstituisani, arilalkil ili heteroarilalkil. Heteroarilalkil može biti izabran od sledećih: C1-4alkilpirolil, C1-4alkilfuril, C1-4alkilpiridil, C1-4alkil-1,2,4-tiadiazolil, C1-4alkilpirimidil, C1-4alkiltienil, C1-4alkilizotiazolil, C1-4alkilimidazolil, C1-4alkiltetrazolil, C1-4alkilpirazinil, C1-4alkilpirimidil, C1-4alkilkinolil, C1-4alkilizohinolil, C1-4alkiltiofenil, C1-4alkilbenzotienil, C1-4alkilizobenzofuril, C1-4alkilpirazolil, C1-4alkilindolil, C1-4alkilpurinil, C1-4alkilkarbazolil, C1-4alkilbenzimidazolil i C1-4alkilizoksazolil.
[0234] R1i/ili R2može biti benzil izborno supstituisan sa jednim ili više od sledećih supstituenata na benzil prstenu: X, -CH3, -NO2, -OCH3, -CN, -CXSH2, -CX2H, C2-C4alkil, -CX3, -CH2(CX3), -CH(CX3)2, -C(CX3)3, -CstrX2p+1, -OCX3, -OCstrH2p+1, -OCstrX2p+1, OR<m>, SR<m>, NR<m>R<n>, NR<m>C(O)R<n>, SOR<m>, SO2R<m>, C(O)R<m>i C(O)OR<m>; R<m>i R<n>su nezavisno izabrani od H ili C1-C4alkil; i gde je p ceo broj od 2 do 20 i X je halogen, uključujući F, Cl, Br ili I; poželjno, F, Cl ili Br; poželjnije, F ili Cl.
XI. PRIMERI
[0235] Podrazumeva se da su opis i primeri u nastavku namenjeni samo u svrhu ilustracije i da ne ograničavaju obim ovog otkrića. Primeri u nastavku imaju za cilj da ilustruju otkrivene primere izvođenja i ne treba ih tumačiti kao njihova ograničenja. Dodatna jedinjenja, osim onih opisanih u nastavku, mogu biti pripremljena sledećim reakcionim šemama ili odgovarajućim varijacijama ili modifikacijama.
Primer 1. Sinteza 2-hlorobenzilamino-2-imidazolin hidrojodida
[0236] U mešani rastvor 2-metiltio-2-imidazolin hidrojodida (244 mg, 1.00 mMol) u suvom dioksanu (2.0 mL) dodat je 2-hlorobenzilamin (141 mg, 1.0 mmol). Reakciona smeša je mešana 90 min na 70°C pod argonom. Rastvor je ohlađen do sobne temperature, filtriran na sinterovanom levku, ispran hladnim dioksanom (2 mL) i osušen pod vakuumom. Belo čvrsto jedinjenje 4•HI (R2=2-hlorobenzil) se dobija (242 mg, 72%) i koristi bez daljeg prečišćavanja.
Primer 2. Sinteza 2-hlorobenzilamino-2-imidazolina
[0237] U mešani rastvor 2-hlorobenzilamino-2-imidazolin hidrojodida (242 mg, 0.72 mMol) u vodi (3 mL), dodat je 1.0 N natrijum hidroksida (2 mL) na 7°C. Reakciona smeša je mešana 30 min na 7°C pod argonom. Nakon toga je dodat metilen hlorid (5 mL) i smeša je mešana još 5 min. Reakciona smeša je ekstrahovana sa metilen hloridom (2×2.5 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i isparavan. Slobodna baza (150 mg, 100%) dobijena je kao viskozna tečnost i korišćena je za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja. MS (ESI) 210 (M+H).
Primer 3. Sinteza metil-1-benzil 4-okso-3-piperidin karboksilata (Jedinjenje (6)).
[0238] U mešani metil-1-benzil 4-okso-3-piperidin karboksilat hidrohlorid (5.7 g, 20 mMol) u etil acetatu (50 mL), dodat je trietilamin (6 mL) na 7°C. Reakciona smeša je mešana 30 min na 7°C u atmosferi argona. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (2×50 mL) i isprana vodom (50 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i isparavan. Ostatak slobodne baze (5, Ri=benzil) dobijen kao viskozno ulje korišćen je u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja MS(ESI) 248(M+H)
Referentni primer 4. Sinteza ONC202 (Jedinjenje (14))
[0239] Rastvoru 2-hlorobenzilamino-2-imidazolina (150 mg, 0.72 mMol), metil 1-benzil 4-okso-3-piperidin karboksilata (5, Ri=benzil) (195 mg, 0.79 mmol) u 1-butanolu (2 mL) dodat je PPTS (10 mg) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 č. Nakon toga reakciona smeša je refluksovana na 125°C do 130°C tokom 2 h. Rastvarači su uklonjeni pod vakuumom, ekstrahovani etil acetatom (10 mL) i isprani zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (2×10 mL) i vodom (10 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i isparavan. Sirova slobodna baza je prečišćena pomoću RP HPLC (10%-40% acetonitril/voda) da bi se dobila ONC902 TFA so kao bela čvrsta supstanca (228 mg, 50% prinos) MS(ESI) 407 (M+H).
[0240] Isti postupak je korišćen počevši od različitih benzilamina za pripremu različitih analoga, npr. ONC203, 204, 205, 206, 912, 210, 211, 212, 213, 214, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225 i 226.
Referentni primer 5. Sinteza ONC207 (Jedinjenje (19))
[0241] U suspenziju od 60% natrijum hidrida (3.5 g, 88 mMol) u suvom toluenu (50 mL), dodat je u kapima dimetil karbonat (4.32 g, 48.0 mMol) tokom 0.5 h na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle dodavanja nekoliko kapi metanola, 1-terc-butoksikarbonil-4-piperidon (4.8 g, 24 mMol) rastvoren u suvom toluenu (20 mL) je dodat u kapima u reakcionu smešu uz mešanje na 80°C tokom 1 h. Reakciona smeša je mešana 3 h na istoj temperaturi, a zatim ohlađena na 0°C (ledeno kupatilo) i podešena na pH 6-6.5 sa sirćetnom kiselinom. Dobijena hladna smeša je razblažena vodom (10 mL) i podešena na pH 8 sa 5% rastvorom natrijum hidroksida. Toluenski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan toluenom (20 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Jedinjenje je osušeno u vakuumu da bi se dobio metil-1-terc-butoksikarbonil-4-okso-3-piperidin karboksilat (5.0 g, 80%). Dobijeno jedinjenje je preneto u sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.
[0242] 2-metilbenzilamino-2-imidazolin (190 mg, 1 mMol), metil 1-terc-butoksikarbonil-4-okso-3-piperidin karboksilat (315 mg, 1.1 mMol) u 1-butanolu (2 mL) dodat je PPTS (10.0 mg) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Nakon toga reakciona smeša je refluksovana na 125°C do 130°C tokom 2 h. Rastvarači su uklonjeni pod vakuumom, ekstrahovani etil acetatom (10 mL),
isprani zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (2×10 mL) i vodom (10 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i isparavan. Sirova slobodna baza je otcepljena sa 10% trifluorosirćetnom kiselinom u dihlorometanu, prečišćena pomoću RP HPLC (10%-40% acetonitril/voda) da bi se dobila ONC907 (262 mg, 50%) TFA so u obliku bele čvrste supstance MS(ESI) 297 (M+H).
Referentni primer 6. Sinteza ONC209 (Jedinjenje (21))
[0243] Smeša ONC907 (100 mg, 0.2 mmol), feniletil bromida (55.0 mg, 0.28 mmol) i kalijum karbonata (150 mg, 1.0 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 mL) je zagrevana na 70°C tokom 12h. Rastvarači su uklonjeni pod vakuumom, ekstrahovani etil acetatom (10 mL) i isprani vodom (5 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i isparen. Sirova slobodna baza je prečišćena pomoću RP HPLC (10%-40% acetonitril/voda) da bi se dobila ONC209 (62 mg, 50%) TFA so kao bela čvrsta supstanca MS(ESI) 401 (M+H).
[0244] Isti postupak je korišćen počevši od različitih halogenida da bi se dobili ONC215 i 214. Jedinjenja 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235 i 236 su pripremljena korišćenjem analognog postupka iz Primera 1 i 5 počevši od različitih benzilamina. Zatim sledi tretiranje intermedijarnog jedinjenja gde je R1je H sa različitim halogenidima kao prethodno.
[0245] Jedinjenje ONC216 je pripremljeno od ONC215 tretmanom sa TFA.
[0246] Jedinjenje (72) je dobijeno reakcijom prekursora NH jedinjenja pripremljenog analogno Primeru 5 i tretiranjem stiren oksidom.
Referentni primer 7. Sinteza ONC208 (Jedinjenje (20))
[0247] Rastvoru 2-metilbenzilamino-2-imidazolina (190.0 mg, 1.0 mmol), metil 1-metil 4-okso-3-piperidin karboksilata (185.0 mg, 1.0 mMol) u 1-butanolu (2.0 mL) dodat je PPTS (10.0 mg) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Nakon toga reakciona smeša je refluksovana na 125°C do 130°C tokom 2 h. Rastvarači su uklonjeni pod vakuumom, ekstrahovani etil acetatom (10 mL), isprani zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (2×10 mL) i vodom (10 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i isparavan. Sirova slobodna baza je prečišćena pomoću HPLC 10%-40% acetonitrila i vode da bi se dobila ONC908 (270.0 mg, 50%) TFA so kao bela čvrsta supstanca MS(ESI) 311 (M+H).
Primer 8. Sinteza ONC201 (Jedinjenje (1))
[0248] U mešani 800 mL zasićenog NaHCOs u posudi sa okruglim dnom od 2 L, jedinjenje (3) (239.7 g, 0.845 mol, 1.6 ekviv.) je dodato u porcijama. Dodat n-butanol (500 mL) u rezultujuću smešu, koja je mešana 30 min i zatim prebačena u levak za odvajanje. Organska faza, koja sadrži jedinjenje (4), je odvojena i prebačena u posudu sa okruglim dnom od 2 L sa tri grla opremljenu mehaničkim mešanjem, N2ulazom, termoelementom, kondenzatorom i Dean-Stark aparaturom. Sadržaju posude dodati su jedinjenje (5) (100 g, 0.528 mol, 1 ekv.) i piridinijum p-toluensulfonat (PPTS) (6.63 gm 0.026 mol, 5 mol%). Dobijena smeša je zagrevana do refluksa tokom 6 sati. Voda u reakcionoj smeši je odvojena u Dean-Stark aparaturu po potrebi. Temperatura refluksa se povećala sa 93°C na 118°C. Napredak reakcije je praćen pomoću HPLC. Kada je površina pika jedinjenja (1) na HPLC ostala konstantna sa vremenom reakcije, reakcija je zaustavljena.
Primer 9. Sinteza di-soli ONC201 (jedinjenje (1)•2HCl)
[0249] Bez izolacije jedinjenja (1), reakciona smeša iz Primera 8 je isprana vodom (500 mL) i razblažena metil terc-butil etrom (MTBE) (800 mL). Organska faza je isprana vodom (500 mL × 2) i prebačena u posudu sa okruglim dnom od 3 L sa tri grla opremljenu mehaničkim mešanjem, N2ulazom, termoelementom, kondenzatorom i Dean-Stark aparaturu. Uz mešanje reakcione smeše, 1 N HCl u rastvoru dioksana-MTBE je dodat u kapima (4 N HCl u dioksanu: 300 mL, 1.2 mol, 2.27 ekviv.; MTBE: 1200 mL) sve dok prestanka taloženja čvrste supstance iz reakcione smeše nakon dodavanja HCl. Reakciona smeša je zagrevana do refluksa na 60-65°C tokom 2 sata. Voda je odvojena u Dean-Stark aparaturu po potrebi. Nakon hlađenja do sobne temperature, čvrsti talog je filtriran kroz levak od sinterovanog stakla i ispran sa n-butanol-MTBE (1:2, 600 mL) i MTBE (600 mL) respektivno. Čvrsta supstanca je osušena u vakuumskoj peći na 65°C preko noći (16 sati) da bi se dobilo 200 g žute čvrste supstance.
[0250] U posudu sa okruglim dnom od 2 L sa tri grla opremljenu mehaničkim mešanjem, N2ulazom, termoelementom i kondenzatorom, dodata je prethodna čvrsta supstanca (200 g), a zatim etanol (1000 mL). Smeša je zagrevana do refluksa na 78°C tokom 2 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, čvrsta supstanca je filtrirana kroz levak od sinterovanog stakla i isprana etanolom (200 mL × 3). Vlažna čvrsta supstanca je sušena u vakuum peći na 85°C tokom 3 dana dok preostali rastvarač nije zadovoljio specifikaciju. Dobijeno je 120 g jedinjenja (2) kao bela čvrsta supstanca sa prinosom od 49%, sa HPLC čistoćom 99.7%.
Primer 10. Aktivnost imipridona
[0251] Izvestan broj imipridona je pripremljen na osnovu prethodnih sinteza. Za svako jedinjenje, merena je vijabilnost humanih ćelija kancera 72 sata nakon tretmana ovim jedinjenjem. Promena potencije (u odnosu na ONC201) je određena i prikazana u tabeli 3.
TABELA 3: RELATIVNA POTENCIJA ANALOGA ONC201
Referentno jedinjenje: ONC212
[0252]
[0253] IC50ONC201 i ONC212 (5nM - 5µM, 72h) posle tretmana nekoliko ćelijskih linija akutne mijeloidne leukemije (AML) (n=3) su određene i prikazane u tabeli 11.
TABELA 11
[0254] Izmerena je vijabilnost ćelija MV411 AML tretiranih sa ONC212 i citarabinom (5nM -5µM, 24h) (n=3) (Slika 29A). Dodatno, merena je ćelijska vijabilnost MOLM14, MV411 AML ćelija, MRC5 fibroblasta pluća i Hs27a ćelija kostne srži tretiranih sa ONC212 (5nM - 5µM, 72h) (n=3) (Slika 29B). Merena je ćelijska vijabilnost MOLM14 i MV411 AML ćelija tretiranih sa ONC212 (250 nM) tokom 4, 8, 24, 48, 72 i 96 h. ONC212 medijum je zamenjen svežim medijumom u ovim vremenskim tačkama i vijabilnost ćelija je određena na 96 h za sve uzorke. (n=2) (Slika 29C).
[0255] Pored toga, jedna doza jedinjenja (52) (ONC212) oralnom ili intraperitonealnom primenom kod miševa koji su nosili ksenotransplantat humanog kancera debelog creva, rezultovala je značajnim smanjenjem zapremine tumora u poređenju sa kontrolnim kohortama koje su tretirane vehikulumom (Slika 24). Jedinjenje (52) ima širok terapeutski prozor, jer se dobro toleriše u dozama od najmanje do 225 mg/kg kod miševa.
[0256] Dodatno, ONC212 je pokazao efikasnost u modelu ksenotransplantata AML otpornog na ONC201 (Slika 30). MV411 AML ćelije (5×10<6>) su subkutano implantirane u bokove atimičnog golog miša. ONC212 i ONC201 su primenjivani oralno (PO) kako je naznačeno. Zapremina tumora (A i B) i telesna težina (C) (n=10) merene su naznačenih dana. * predstavlja p < 0.05 u odnosu na vehikulum.
[0257] Procenjena je efikasnost ONC212 u AML in vitro i bila je do 400 puta snažnija u poređenju sa ONC201 (Tabela 11). ONC212 je takođe bio efikasan u AML ćelijama otpornim na citarabin standardne nege (Slika 29A). Uprkos snažnom poboljšanju efikasnosti, ONC212 održava širok terapeutski prozor in vitro i nije toksičan za normalne ćelije u efikasnim koncentracijama (slika 29B). Izlaganje ONC212 od 8 sati na 250 nM bilo je dovoljno da izazove snažno smanjenje ćelijske vijabilnosti MOLM14 i MV411 AML ćelija (slika 29C). Za efikasnost je bilo potrebno najmanje 24-48 sati izlaganja ONC201.
[0258] Efikasnost ONC212 je određena u modelu ksenotransplantata leukemije sa MV411 AML ćelijama otpornim na citarabin standardne nege (Slika 30). ONC21250 mg/kg značajno je smanjio rast tumora ksenografta leukemije uz oralnu nedeljnu primenu, dok ONC201 nije bio efikasan u ovom modelu pri sličnim dozama (Slika 30A). Interesantno je da dvonedeljno doziranje ONC212 sa 25 mg/kg i nedeljno/dvonedeljno doziranje sa 5 mg/kg nije bilo efikasno (slika 30B). Nijedan od ovih režima primene ONC212 nije bio povezan sa gubitkom telesne težine (Slika 30C) ili nepoželjnim zapažanjima.
[0259] ONC21225 mg/kg predstavlja NOAEL u studijama jednokratne doze kod miševa i pacova bez GLP, što je takođe efikasna doza u studijama ksenotransplantata na mišu. ONC212 je približno 10 puta toksičniji u poređenju sa ONC201 (NOAEL 225 mg/kg u studiji sa jednom dozom koja nije GLP na pacovima).
Referentno jedinjenje: ONC206
[0260]
[0261] ONC206 je pokazao efikasnost u modelu ksenotransplantata Ewing-ovog sarkoma (slika 31). MHH-ES-1 ćelije Ewing-ovog sarkoma (5×10<6>) su subkutano implantirane u bokove atimičnih golih miševa. ONC206 (PO) i metotreksat (IV) su primenjivani 1. i 13. dana kako je naznačeno. Zapremina tumora (slika 31A) i telesna težina (slika 31B) (n=4) merene su u naznačenim danima.
[0262] Pored toga, IC50ONC201 i ONC206 (5nM - 5µM, 72h) posle tretmana nekoliko ćelijskih linija (n=3) su određene i prikazane u tabeli 11.
[0263] ONC206 je pokazao do 20 puta poboljšanje u poređenju sa ONC201 u in vitro potenciji bez in vitro toksičnosti za normalne ćelije u terapeutskim dozama (tabela 12). Sa ONC206, zabeležena je samo 2 puta povećana toksičnost (NOAEL 125 mg/kg) u odnosu na ONC201 (NOAEL 225 mg/kg) u studiji jednokratne doze koja nije GLP kod pacova. In vivo efikasnost u modelu Ewing-ovog sarkoma bez toksičnosti (slika 31). Efikasnost ONC206 bila je uporediva sa hemoterapijom metotreksatom, ali je hemoterapija bila povezana sa gubitkom telesne težine.
Referentno jedinjenje: ONC213
[0264]
[0265] In vitro profilisanje GPCR aktivnosti upotrebom heterolognog reporterskog testa za regrutovanje arestina, što je obeležje aktivacije GPCR, pokazalo je da ONC213 selektivno ciljno deluje na DRD2/3 i GPR132/91 (Slika 32). Dvostruko ciljno delovanje DRD2/3 i GPR132/91 predstavlja novu strategiju za efikasnost protiv kancera bez toksičnosti. ONC213 je inhibitor DRD2/3 i agonist GPR132/91. Potencija DRD2/3 ONC213 je veća od ONC201, ali manja od ONC206. Potencija GPR132 ONC213 je manja od ONC212. Konkretno, ONC213 je demonstrirao in vitro anti-kancer potenciju protiv HCT116/RPMI8226 ćelijama kancera sličnu ONC212, ali in vitro toksičnost za normalne ćelije je smanjena u poređenju sa ONC212 (Slika 33). Bezbednosni profil ONC213 potvrđen je u MTD studiji kod miševa sa NOAEL 75 mg/kg tri puta više od ONC212 (25 mg/kg). Agonistička aktivnost GPR91 ONC213 pruža priliku za imunološke, imunoonkološke i hematopoetske primene (Nature Immunology 9:1261 (2008); J Leukoc Biol.85(5):837 (maj 2009)).
Referentno jedinjenje: ONC237
[0266]
[0267] In vitro profilisanje GPCR aktivnosti upotrebom heterolognog reporterskog testa za regrutovanje arestina, što je obeležje aktivacije GPCR, pokazalo je da ONC237 selektivno ciljno deluje na DRD5 i GPR132 (Slika 34). ONC237 je agonist GPR132 i antagonist DRD5 i ima smanjenu efikasnost protiv kancera (IC5031.2 µM) u poređenju sa ONC201. Ovi podaci pokazuju da kombinovanje aktivnosti agonista GPR132 sa antagonističkom aktivnošću DRD5 (D1-sličan dopaminu receptor) dovodi do slabih efekata protiv kancera u poređenju sa ONC213 koji kombinuje aktivnost agonista GPR132 i antagonista DRD2/3.
Referentno jedinjenje: ONC236
[0269] In vitro profilisanje GPCR aktivnosti upotrebom heterolognog reporterskog testa za regrutovanje arestina, što je obeležje aktivacije GPCR, pokazalo je da je ONC236 visoko selektivan agonist GPR132 (Slika 35). ONC236 ima efikasnost protiv kancera (IC5088nM) uporedivu sa ONC212 (10nM) bolju od ONC206/ONC201, kompletnost odgovora je bolja od ONC201, ali ne i ONC212 u ćelijama HCT116.
Referentno jedinjenje: ONC234
[0270]
[0271] In vitro profilisanje GPCR aktivnosti upotrebom heterolognog reporterskog testa za regrutovanje arestina, što je obeležje aktivacije GPCR, pokazalo je da je ONC234 širokog spektra i moćan mali molekul za ciljano dejstvo na GPCR (Slike 36 i 38). ONC234 pogađa nekoliko GPCR uključujući aktivnost kao antagonističku aktivnost za adrenergičke, histaminske, serotoninske, CHRM, CCR, DRD2/5 receptore, kao i aktivnost agonista CXCR7. ONC236 ima efikasnost protiv kancera (IC50234nM) slično ONC206, kompletnost odgovora istu kao ONC212, i bolju od ONC201 u ćelijama HCT116.
Referentno jedinjenje: KNC201 LINEARNI IZOMER (TIC-10)
[0272]
[0273] In vitro profilisanje GPCR aktivnosti korišćenjem heterolognog reporterskog testa za regrutovanje arestina, što je obeležje aktivacije GPCR, pokazalo je da je ONC201 linearni izomer (TIC-10) agonist CXCR7 (Slika 37). CXCR7 agonisti se mogu koristiti za regeneraciju jetre i prevenciju/lečenje fibroze, kao što je fibroza jetre (Nature 505:97 (2014)). Fibroza je formiranje viška vlaknastog vezivnog tkiva u organu ili tkivu, uključujući i kod zarastanja rana. Primeri fibroze uključuju plućnu fibrozu, uključujući cističnu fibrozu i idiopatsku plućnu fibrozu; povredu pluća izazvanu zračenjem nakon lečenja kancera; fibrozu jetre (ciroza); fibrozu srca, uključujući atrijalnu fibrozu, endomiokardijalnu fibrozu i stari infarkt miokarda; glijalni ožiljak; artrofibrozu; Crohn-ovu bolest; Dupuytren-ovu kontrakturu; keloide; medijastinalnu fibrozu; mijelofibrozu; Peyronie-jevu bolest; nefrogenu sistemsku fibrozu; progresivnu masivnu fibrozu; retroperitonealnu fibrozu; sklerodermu/sistemsku sklerozu; i adhezivni kapsulitis.
Primer 11. GPCR antagonizam ONC201
[0274] ONC201 je procenjen u funkcionalnim testom aktivnosti β-arestin G protein kuplovanog receptora (GPCR) na celoj ćeliji koji direktno meri aktivnost dopaminskog receptora otkrivanjem interakcije β-arestina sa aktiviranim GPCR koji služi kao reporter. Za svaki dopaminski receptor (DRD1, DRD2S, DRD2L, DRD3, DRD4 i DRD5), ćelijske linije koje prekomerno eksprimiraju reporterske konstrukte su proširene iz zamrznutih stokova. Ćelije su zasejane u ukupnoj zapremini od 20 µL u mikroploče sa belim zidovima sa 384 bunarčića i inkubirane na 37°C pre testiranja, sa antagonistom praćenim izazivanjem sa agonistom u EC80koncentraciji. Izvršeno je srednje razblaživanje zaliha uzoraka da bi se dobio 5× uzorak u puferu za ispitivanje. 3.5 µL 5× uzorka je dodato ćelijama i inkubirano na 37°C ili sobnoj temperaturi 30 minuta. Koncentracija vehikuluma je bila 1%.5 µL 6× EC80agonista u puferu za ispitivanje je dodato ćelijama i inkubirano na 37°C ili sobnoj temperaturi 90 ili 180 minuta pre očitavanja testa. % antagonizma je izračunat upotrebom sledeće formule %: Antagonizam =100% × (1 - (srednja RLU test uzorka - srednja RLU kontrole vehikuluma) / (srednja RLU EC80kontrola – srednja RLU kontrole vehikuluma).
Primer 12: Selektivni antagonizam DRD2 od strane ONC201.
[0275] ONC201 je prvi u klasi mali molekul otkriven u fenotipskom skriningu p53-nezavisnih induktora tumor selektivnih proapoptotičkih puteva. Oralni ONC201 se procenjuje kao novo terapeutsko sredstvo u pet kliničkih ispitivanja rane faze za izabrane uznapredovale kancere na osnovu izražene efikasnosti kod agresivnih i refraktornih tumora i odlične bezbednosti.
[0276] U ovom primeru je prikazano predviđanje i validacija selektivnih direktnih molekularnih interakcija između ONC201 i specifičnih članova porodice dopaminskih receptora. Eksperimentalno profilisanje GPCR je pokazalo da ONC201 selektivno antagonizuje podfamiliju dopaminskih receptora sličnih D2, ali ne i D1. Reporterski testovi u sistemu heterologne ekspresije otkrili su da ONC201 selektivno antagonizuje i kratke i dugačke izoforme DRD2 i DRD3, sa slabijom snagom za DRD4 i bez antagonizma DRD1 ili DRD5. Povećano lučenje prolaktina je klinički znak antagonizma DRD2 od strane nekoliko psihijatrijskih lekova koji snažno ciljno deluju na ovaj receptor. ELISA merenja u perifernoj krvi pacijenata lečenih sa ONC201 u prvom ispitivanju na ljudima sa uznapredovalim solidnim tumorima utvrdila su da je 10/11 procenjivanih pacijenata ispoljilo indukciju prolaktina (srednja vrednost od 2 puta).
[0277] Koristeći TCGA bazu podataka, otkriveno je da je podfamilija dopaminskih receptora slična D2, posebno DRD2, preovlađujuća i selektivno prekomerno eksprimirana u nekoliko maligniteta. Pretklinički izveštaji pokazuju da inhibicija DRD2 daje antitumorsku efikasnost, bez ubijanja normalnih ćelija, putem indukcije ATF4/CHOP i inhibicije Akt i ERK prenosa signala, što su sve atributi ONC201.
Postupci
[0278] ONC201 dihidrohlorid je dobijen od Oncoceutics. Testovi inhibicije kinaze za kinom su izvedeni kako je opisano (videti Anastassiadis et al., Nat Biotech 29:1039 (2011)). Regrutovanje GPCR arestina i testovi reportera modulacije cAMP-a su izvedeni kako je opisano (videti McGuinness et al., Journal of Biomolecular Screening 14:49 (2009.)). PathHunterTM (DiscoveRx) β-arestinske ćelije koje eksprimiraju jedan od nekoliko GPCR ciljnih mesta su postavljene na testne ploče sa 384 bunarčića sa čvrstim dnom (Corning 3570) sa 5000 ćelija po bunarčiću u zapremini od 20 µL u odgovarajućem ćelijskom reagensu za ploču. Ćelije su inkubirane na 37 ° C, 5% CO2za 18-24 h. Uzorci su pripremljeni u puferu koji sadrži 0.05% BSA bez masnih kiselina (Sigma). Za testove agonističkog režima, uzorci (5 µL) su dodati u prethodno obložene ćelije i inkubirani 90 minuta na 37°C, 5% CO2. Za testove antagonističkog režima, uzorci (5 µL) su dodati u prethodno obložene ćelije i inkubirani 30 minuta na 37°C, 5% CO2praćeno dodavanjem EC80agonista (5 µL) tokom 90 minuta na 37°C, 5% CO2. Za Schild-ovu analizu, uzorci (5 µL) su dodati u prethodno obložene ćelije i inkubirani 30 minuta na 37°C, 5% CO2praćeno dodavanjem serijski razblaženog agonista (5 µL) tokom 90 minuta na 37°C, 5% CO2. Paralelno su testirani kontrolni bunarčići koji definišu maksimalni i minimalni odgovor za svaki način ispitivanja. Regrutovanje arestina je mereno dodavanjem 15 µL PathHunter Detection reagensa i inkubirano 1-2 h na sobnoj temperaturi i očitano na Perkin Elmer Envision Plate Reader. Za testove agonista i antagonista, podaci su normalizovani za procenat efikasnosti korišćenjem odgovarajućih kontrola i prilagođeni sigmoidnom doza-odgovor (promenljivi nagib), Y=dno (vrh-dno)/(1+10^((LogEC)50-X)*nagib)), gde je X log koncentracija jedinjenja. Za Schild-ovu analizu, podaci su normalizovani za procenat efikasnosti korišćenjem odgovarajućih kontrola i ugrađeni u Gaddum/Schild EC50pomeranje pomoću globalnog fitovanja, gde je Y=dno (vrhdno)/(1+10^((LogEC-X)*nagib)), Antag=1+(B/(10^(-1*pA2)))^SchildSlope i LogEC=Log(EC)50*Antag). EC50/ IC50analiza je obavljena u CBIS paketu za analizu podataka (Cheminnovation), a Schild-ova analiza u GraphPad Prism 6.0.5.
Rezultati
[0279] ONC201 je mali molekul u kliničkim ispitivanjima faze II za odabrane uznapredovale kancere. Otkriven je u fenotipskom skriningu p53-nezavisnih induktora pro-apoptotičkog TRAIL puta. Iako je karakterizovan doprinos regulacije ATF4/CHOP izazvane ONC201 i inaktivacije Akt/ERK signalizacije (Allen et al., Science translational medicine 5, 171ra117-171ra117 (2013.)) njegovoj antikancer aktivnosti, ciljno mesto njegovog molekularnog vezivanja je ostao neuhvatljiv.
[0280] In vitro profilisanje GPCR aktivnosti korišćenjem heterolognog reporterskog testa za regrutovanje arestina, što je obeležje aktivacije GPCR, pokazalo je da ONC201 selektivno antagonizuje D2-slične (DRD2/3/4), ali ne i D1-slične (DRD1/5), podporodicu receptora dopamina (Referentne slike 5A). Antagonizam alfa receptora adrenoceptora ili drugih GPCR nije primećen u procenjenim uslovima. U porodici DRD2, ONC201 je antagonizovao i kratke i dugačke izoforme DRD2 i DRD3, sa slabijom potencijom za DRD4. Dalja karakterizaciju antagonizma regrutovanja arestina u DRD2L posredovanog ONC201 procenjena je Gaddum/Schild EC50Shift analizom, koja je odredila konstantu disocijacije od 2.9 µM za ONC201 koja je ekvivalentna njegovoj efikasnoj dozi u mnogim humanim ćelijama kancera (Slika 4C). Dobijeni su potvrdni rezultati za cAMP modulaciju kao odgovor na ONC201, što je još jedna mera aktivacije DRD2L (slika 4D). Sposobnost dopamina da preokrene antagonizam zavisan od doze do 100 µM ONC201 sugeriše direktan, kompetitivni antagonizam DRD2L (Slike 5B i 5C). U skladu sa specifičnošću ONC201 koju je predvideo BANDIT, nisu identifikovane značajne interakcije između ONC201 i jedarnih hormonskih receptora, kinoma ili drugih ciljnih mesta lekova za terapije kancera koje je odobrila FDA (Slike 5D i 5E). Zanimljivo je da je biološki neaktivan konstitutivni izomer ONC201 (Wagner et al., Oncotarget 5:12728 (2014)) nije inhibirao DRD2L, što sugeriše da bi antagonizam ovog receptora mogao biti povezan sa njegovom biološkom aktivnošću (Slika 5F). Ukratko, ove studije utvrđuju da ONC201 selektivno antagonizuje podfamiliju dopaminskih receptora sličnih D2, što se čini obećavajućim terapeutskim ciljnim mestom u onkologiji, a ONC201 je prvo jedinjenje koje koristi ovu paradigmu lečenja u nekoliko tekućih kliničkih studija faze II.
Primer 13: Mapiranje epitopa DRD2 shotgun mutagenezom.
[0281] Shotgun mutageneza koristi tehnologiju ćelijske ekspresije visoke propusnosti za ekspresiju i analizu velikih biblioteka mutiranih ciljnih proteina unutar eukariotskih ćelija. Svaki ostatak u proteinu je pojedinačno mutiran u alanin, ili drugi naznačeni ostatak, da bi se ispitale promene u funkciji. Proteini se eksprimiraju unutar standardnih ćelijskih linija sisara, pa se čak i teški proteini koji zahtevaju eukariotsku translacionu ili posttranslacionu obradu mogu mapirati.
[0282] Prvo su procenjeni i identifikovani uslovi za skrining antagonista DRD2 ONC201 sa DRD2 divljeg tipa upotrebom skrining testa shotgun mutageneze. Zatim je pripremljena biblioteka DRD2 Ala-scan i ostaci kritični za vezivanje ONC201 su mapirani u rezoluciji jedne aminokiseline korišćenjem tehnologije shotgun mutageneze.
DRD2 biblioteka shotgun mutageneze:
[0283]
Roditeljski plazmid: DRD2
Veličina biblioteke: 442 mutantna klona (kompletan protein)
Strategija mutacije: skeniranje alanin mutageneze
Tip ćelije: HEK-293T
Skrining test: Kalcijum fluks
Oznaka epitopa: C-terminal V5/HIS6
[0284] Roditeljski konstrukt: DNK koja kodira humani DRD2 pune dužine (pristupni broj: NP_000786.1; MDPLNLSWYD DDLERQNWSR PFNGSDGKAD RPHYNYYATL LTLLIAVIVF GNVLVCMAVS REKALQTTTN YLIVSLAVAD LLVATLVMPW VVYLEVVGEW KFSRIHCDIF VTLDVMMCTA SILNLCAISI DRYTAVAMPM LYNTRYSSKR RVTVMISIVW VLSFTISCPL LFGLNNADQN ECIIANPAFV VYSSIVSFYV PFIVTLLVYI KIYIVLRRRR KRVNTKRSSR AFRAHLRAPL KGNCTHPEDM KLCTVIMKSN GSFPVNRRRV EAARRAQELE MEMLSSTSPP ERTRYSPIPP SHHQLTLPDP SHHGLHSTPD SPAKPEKNGH AKDHPKIAKI FEIQTMPNGK TRTSLKTMSR RKLSQQKEKK ATQMLAIVLG VFIICWLPFF ITHILNIHCD CNIPPVLYSA FTWLGYVNSA VNPIIYTTFN IEFRKAFLKI LHC (SEQ ID NO: 1) je subkloniran u sisarski vektor sa visokom ekspresijom. Verifikovana je sekvenca ove roditeljska konstrukcija i zatim validirana u odnosu na ekspresiju u ćeliji sisara detekcijom fluksa kalcijuma kao odgovor na dopamin. Prinosi DNK iz plazmidnih preparata su validirani za procesiranje velike propusnosti.
[0285] Postavljanje testa: DRD2-specifičan test fluksa kalcijuma je uspešno optimizovan za DRD2 eksprimiran u humanim ćelijama. Ispitivanje doze-odgovora agonista je korišćeno da se identifikuje odgovarajuća koncentracija dopamina za upotrebu u optimizaciji inhibicije DRD2-specifičnog fluksa kalcijuma od strane antagonista ONC201. Naknadni testovi inhibicije dozaodgovor identifikovali su koncentraciju ONC201 koja inhibira DRD2 odgovor dopamina za >95%.
Optimizacija analize fluksa kalcijuma:
[0286] Test aktivnosti receptora. Aktivnost DRD2 je procenjena upotrebom objavljenog GPCR testa (Greene, T.A. et al., (2011) PLoS One 6, e20123). Ukratko, ćelije HEK-293T su transfektovane ekspresionim konstruktima za divlji tip DRD2 ili negativnu kontrolu GPCR, u formatu od 384 bunarčića. Posle 22 sata, eksperimenti sa fluksom kalcijuma su izvedeni u opsegu koncentracija dopamina (300 pM - 100 nM), upotrebom Flextation II-384 fluorescentnog čitača (Molecular Devices). Skupovi podataka su analizirani i predstavljeni kao procenat u odnosu na osnovni signal upotrebom Prism 5.0 softvera (GraphPad Softvare, Inc).
[0287] Za ćelije koje eksprimiraju DRD2, ali ne i kontrolni GPCR, dodavanje dopamina je rezultovalo povećanjem ćelijskog fluksa kalcijuma, mereno kao povećana fluorescencija. Grafikon doznog odgovora visine vrha fluorescencije u odnosu na koncentraciju dopamina pokazao je jak fluks kalcijuma izazvanog dopaminom (EC50= 0.45 nM) u ćelijama koje eksprimiraju DRD2, ali ne i kontrolni GPCR. Ovo sugeriše da bi se test fluksa kalcijuma mogao koristiti za testiranje inhibicije ONC201.
Optimizacija testa inhibicije DRD2 fluksa kalcijuma
[0288] Nakon identifikacije EC50za dopamin u testu fluksa kalcijuma, ONC201 inhibicija fluksa kalcijuma specifičnog za DRD2 je ispitivana na nekoliko koncentracija dopamina. Upotrebom 1 nM dopamina (> 2 puta više od EC dopamina50) sa opsegom koncentracija ONC201 (1 nM do 100 µM), ONC201 inhibicija fluksa DRD2 kalcijuma izazvanog dopaminom je primećena pri najvišim testiranim koncentracijama (Slika 9A), sa potpunom inhibicijom od 100 µM ONC201 (IC50= 21.5 uM). Inhibicija fluksa kalcijuma sa 100 µM ONC201 nije bila rezultat široke inhibicije GPCR ili nespecifičnog efekta na ćelije pošto ONC201 nije imao uticaja na aktivnost fluksa kalcijuma ćelija koje eksprimiraju kontrolni GPCR (Slika 9B).
[0289] Analiza brojnih repliciranih vrednosti dobijenih za inhibiciju fluksa DRD2 kalcijuma sa 100 µM ONC201 pokazala je robustan test, sa Z' vrednošću od 0.61. Z' vrednost je merenje kvaliteta testa, izračunato iz srednjih vrednosti i standardnih devijacija dobijenih za ponovljena određivanja fluksa kalcijuma dobijenih sa ili bez ONC201.
Poređenje inhibitora DRD2.
[0290] ONC201 inhibicija DRD2 je poređena sa onom od strane antagonista DRD2 spiperona i domperidona (Slika 10), za koje je opisano da inhibiraju DRD2 u koncentracijama nižim od 100 µM potrebnih za inhibiciju ONC201. Ovi antagonisti su testirani u koncentracijama između 100 pM i 1 µM, i oba su pokazala potpunu inhibiciju fluksa kalcijuma izazvanog dopaminom, pri čemu je spiperon imao IC50= 19 nM, i domperidon i IC50= 47 nM. Ove vrednosti su bile u skladu sa prethodnim karakterizacijama i pokazuju da relativno visok IC50dobijen za ONC201 (21.5 µM) nije rezultat upotrebe testa fluksa kalcijuma za merenje aktivnosti DRD2.
[0291] Određeni su optimalni uslovi skrininga za ONC201 inhibiciju fluksa kalcijuma specifičnog za DRD2 kao odgovor na dopamin. Ovi uslovi daju snažan odgovor na dopamin, ovaj odgovor je smanjen za >95% dodavanjem ONC201 na 100 µM, a test je pokazao nisku varijabilnost između replika. Ovi podaci ukazuju da su izabrani uslovi pogodni za uspešan skrining visoke propusnosti. Dalji skrining biblioteke DRD2 mutacija bio je pri koncentraciji dopamina od 1 nM i koncentraciji ONC201 od 100 µM.
Skrining biblioteke DRD2 alanin skeniranja za odgovor na dopamin.
[0292] Biblioteka DRD2 skeniranja alanin mutacija (i sa alaninima promenjenim u serine) obuhvatala je 442 klona, koji su pokrivali ostatke 2 - 443 DRD2 proteina, 100% ciljnih grupa. Biblioteka DRD2 mutacija je prvo pregledana testom fluksa kalcijuma sa dopaminom (1 nM) u odsustvu ONC201 da bi se identifikovali ostaci čija mutacija je smanjila dopaminom indukovani tok kalcijuma. Identifikovali smo 28 aminokiselinskih grupa koji su bili kritični za DRD2 fluks izazvan dopaminom (Slika 11).
[0293] Ostaci identifikovani analizom su navedeni u tabeli 4 i prikazani na slici 11. Smatralo se da su klonovi deficitarni za fluks kalcijuma ako su pokazali vrednosti fluksa manje od 2 standardne devijacije ispod prosečne vrednosti fluksa kalcijuma (AV - 2SD) za celu biblioteku.
TABELA 4: DRD2 OSTACI KRITIČNI ZA FLUKS KALCIJUMA INDUKOVAN
DOPAMINOM
Skrining biblioteke DRD2 alanin skeniranja za ONC 201 inhibiciju prenosa signala indukovane dopaminom identifikovanih grupa potrebnih za inhibiciju ONC201.
[0294] Da bi se identifikovali ostaci važni za inhibiciju DRD2 od strane ONC201, biblioteka mutacija DRD2 alanin skeniranjem je testirana testom fluksa kalcijuma na sposobnost da reaguje na dopamin u prisustvu inhibirajuće koncentracije ONC201, koristeći dopamin na 1 nM i ONC201 na 100 µM. Identifikovano je osam grupa kritičnih za inhibitornu aktivnost ONC201 (Slika 12). Svi ostaci identifikovani ovim pregledom pokazali su visok fluks kalcijuma samo sa dopaminom (Tabela 5). Smatralo se da su klonovi kritični za inhibiciju od strane ONC201 na 100 µM ako su pokazali vrednosti fluksa veću od 2 standardne devijacije iznad prosečne vrednosti fluksa kalcijuma (AV 2SD) za celu biblioteku. U tabeli 5 su takođe prikazane vrednosti fluksa kalcijuma za ove kritične klonove dobijene iz sličnih eksperimenata izvedenih sa 250 µM ONC201 ili bez ONC201 (dopamin 1 nM), i pored toga % očuvanja kritičnih grupa preko 5 DRD receptora, sa ostacima pronađenim u svakom receptoru.
TABELA 5: DRD2 OSTACI KRITIČNI ZA ONC201 INHIBICIJU FLUKSA
KALCIJUMA INDUKOVANOG DOPAMINOM
[0295] Pošto je prosečna inhibicija od 100 µM ONC201 u biblioteci bila približno 75%, takođe smo sproveli ispitivanje na 250 µM ONC201 da bismo utvrdili da li će kritični ostaci biti isti na višim nivoima inhibicije. Pod ovim uslovima dopaminom indukovani fluks kalcijuma bio je inhibiran za približno 93%, a prethodno identifikovani ostaci V91, E95, i 1397 takođe su bili kritični za inhibiciju na 250 µM ONC201 (Tabela 5), koristeći iste kriterijume vrednosti fluksa veće od 2 standardne devijacije iznad prosečne vrednosti fluksa kalcijuma (AV 2SD) za biblioteku.
Zaključci:
[0296] U inicijalnim skrinovima biblioteke mutacija DRD2 alanin skeniranjem pomoću testa fluksa kalcijuma izazvanog dopaminom, 28 mutacija je u velikoj meri smanjilo fluks kalcijuma, identifikujući ostatke kritične za funkciju DRD2. Kao što je pronađeno u sličnoj analizi GPCR CXCR4, kritični ostaci su raspoređeni po proteinu, u predviđenom džepu za vezivanje dopamina, transmembranskim regionima i u delu DRD2 koji je izložen citoplazmi. Ovih 28 grupa su kritični za vezivanje dopamina, transdukciju signala kroz transmembranske domene ili spajanje G proteina. Detaljna analiza koja je uporediva sa onom urađenom za CXCR4, kao i strukturna analiza strukture DRD3-etikloprida (Chien et al., 2010), može se koristiti za dodeljivanje specifične funkcije svakom kritičnom ostatku DRD2.
[0297] Da bi se identifikovali ostaci važni za inhibiciju DRD2 od strane ONC201, biblioteka mutacija DRD2 alanina skeniranja je podvrgnuta je skriningu testom fluksa kalcijuma sa dopaminom i 100 µM ONC201. Ovi pregledi su identifikovali 8 grupa kao kritične za ONC201 inhibiciju DRD2-zavisnog fluksa kalcijuma izazvanog dopaminom - L81, V91, E95, T165, A177, I192, V196, i 1397. Ostaci V91, E95, i 1397 takođe su identifikovani kao kritični za otpornost na inhibiciju DRD2 sa 250 µM ONC201, što sugeriše da su oni ključni ostaci koji deluju na ONC201. Ovi ostaci definišu relativno veliko mesto vezivanja liganda, što nije neočekivano zbog veće veličine ONC201 u poređenju sa dopaminom i etiklopridom. Lokacije ovih grupa su generalno u skladu sa ulogom u posredovanju ONC201 inhibicije DRD2-zavisnog fluksa kalcijuma izazvanog dopaminom. Ostaci kritični za inhibiciju GPCR receptora ukusa probenecidom su prethodno identifikovani (Greene et al., 2011), pri čemu je lokacija grupa u skladu sa nekonkurentnim mehanizmom inhibicije. Nasuprot tome, ostaci identifikovani ovde za DRD2 su u skladu sa kompetitivnom inhibicijom od strane ONC201 na mestu vezivanja dopamina. Kada se modeluje na strukturi homolognog receptora DRD3, većina identifikovanih grupa okružuje džep za vezivanje koji sadrži kokristalizovani antagonist etikloprid, pri čemu je 5 od 8 identifikovanih grupa konzervativno za DRD2 i DRD3. Čini se da su dva ostatka udaljenija od pretpostavljenog mesta vezivanja (A177 i L81) i mogu uticati na vezivanje ONC201 na alosteričniji način. Dodatni ostaci koji doprinose inhibiciji ONC201 mogu se identifikovati korišćenjem DRD2 agonista sa strukturama koje se razlikuju od dopamina.
Primer 14: Određivanje konstanti stope asocijacije i disocijacije neobeleženog ONC201 dihidrohlorida na humanom D2S receptoru.
[0298] U ovom primeru su određene kon/koff stope neobeleženog ONC201 dihidrohlorida na D2S receptoru. Procena kon/koff stope je izvršena kompetitivnim vezivanjem liganda prema metodi opisanoj u: M.R. Dowling & S.J. Charlton (2006) Brit. J. Pharmacol.148:927-937 i H.J. Motulsky & L.C. Mahan (1984) Mol. Pharmacol. 25:1-9. Pozivajući se na ovu metodu, kon/koff stope neobeleženih test jedinjenja su izračunate iz njegove Ki vrednosti (konkurentno vezivanje) i njegovog efekta na kinetiku vezivanja radioliganda (kinetika konkurencije).
[0299] Prvo su određene IC50i Ki vrednosti ONC201 dihidrohlorida i izbor adekvatnih koncentracija jedinjenja za eksperiment kinetike konkurencije. Zatim, određene su konstante stopa kon i koff radioliganda ([<3>H]metilspiperon). Konačno, određene su konstante stopa kon i koff neobeleženog ONC201 dihidrohlorida. ONC201 dihidrohlorid je testiran na 8 koncentracija u duplikatu (n = 2) u testu konkurentnog vezivanja, a određene su IC50i Ki vrednosti.
[0300] Referentno jedinjenje, (+) Butaklamol, i test jedinjenje, ONC201-2HCL, uspešno su se takmičili za [<3>H]metilspiperon, sa IC50vrednosti od 2.5 nM i 21 µM, respektivno. Prethodno je jedinjenje ONC201-2HCL dalo sličnu IC50vrednost od 16 µM. Za test konkurentnog vezivanja, izabrano je sledećih 6 koncentracija ONC201-2HCL: 5 / 10 / 20 / 40 / 60 / 80 µM.
[0301] Određena je kinetika vezivanja [<3>H]metilspiperona na D2S receptoru. Za ovo, [<3>H]metilspiperon (u jednoj koncentraciji od 0.3 nM) je inkubiran sa membranama D2S receptora tokom 12 različitih vremena inkubacije da bi se izmerila stopa vezivanja. Nespecifično vezivanje je mereno sa butaklamolom (10 µM) za svako vreme inkubacije. Disocijacija je započeta dodavanjem viška butaklamola (10 µM) nakon 60 minuta inkubacije [<3>H]metilspiperona (0.3 nM) sa membranama D2S receptora, a smanjenje signala je mereno nakon 12 različitih vremena inkubacije. Eksperiment je izveden u triplikatu (n = 3) sa vremenom inkubacije podešenim na 0 / 30 / 60 / 80 / 120 / 180/ 240 / 300 / 360 / 420 / 480 minuta i 24 sata za asocijaciju i 2 / 5 / 8 / 15 / 10 / 0 / 060 / 120 / 180 minuta za kinetiku disocijacije.
[0302] [<3>H]metilspiperon je pokazao konvrednost od 2.3 × 10<8>M<-1>min<-1>i koff vrednost 0.009506 min<-1>(i stoga t1/2 vrednost od 73 minuta) na D2S receptoru. Kdizračunat iz rezultata eksperimenta asocijacije/disocijacije (0.04 nM) je u istom opsegu u poređenju sa Kdprimećenom u eksperimentu zasićenja (0.15 nM), čime je validiran eksperiment.
[0303] Testiran je efekat neobeleženog ONC201-2HCl pri šest koncentracija na kinetiku asocijacije [<3>H]metilspiperona (0.3 nM). Nespecifično vezivanje je mereno sa butaklamolom (10 uM). Korišćeno je istih 12 vremena inkubacije kao prethodno: 2 / 5 / 8 / 10 / 15 / 20 / 25 / 30 / 40 / 60 / 120 / 180 minuta. Merenje u odsustvu jedinjenja je izvedeno kao negativna kontrola.
[0304] ONC201-2HCl je pokazao kon vrednost od 4.1 × 10<5>M<-1>min<-1>i koff vrednost od 1.32 min<-1>(i stoga t1/2 vrednost od 0.53 minuta) na D2S receptoru. Kiizračunat na osnovu rezultata eksperimenta asocijacije/disocijacije (3.2 µM) je u istom opsegu u poređenju sa Kiprimećenoj u eksperimentu zasićenja (7 µM), čime je validiran eksperiment. U zaključku, ONC201-2HCl pokazuje mnogo sporiju asocijaciju i mnogo bržu disocijaciju u poređenju sa [<3>H]metilspiperonom.
Referentni primer 15: Baktericidna aktivnost od imipridona.
Materijali i postupci
[0305] Test materijal: ONC201 dihidrohlorid; Kontrola: mikrokristalna celuloza.
[0306] Postupak: Harmonizovano EP/USP mikrobno ispitivanje nesterilnih proizvoda (Trenutni USP <61>/<62>).
Rezultati
[0307]
TABELA 6: VERIFIKACIJA KONTROLE IZOLACIJE INOKULUMA I TEST
BROJANJA MIKROBA
TABELA 7: VALIDACIJA ZA ODREĐENE MIKROORGANIZME
[0308] ONC201 dihidrohlorid kada je testiran u razblaženju 1:300 sa TSB Mod, nije ispunio zahteve USP <61>/<62>
[0309] Test podobnosti mikrobne granice. Uočena je inhibicija za Staphilococcus aureus za USP<61>/<62>. Stoga se može pretpostaviti da se neuspeh u izolovanju inokulisanog mikroorganizma može pripisati baktericidnoj aktivnosti ONC201 dihidrohlorida i stoga nije verovatno da će biti kontaminiran inhibiranom vrstom mikroorganizma.
[0310] Zatim je određena minimalna inhibitorna koncentracija (MIC) za šest imipridona protiv Staphilococcus aureus divljeg tipa i otpornog na meticilin.
Materijali i postupci
Jedinjenja
[0311] ONC201 i ONC206 su prethodno rastvoreni na 40 mM u DMSO. ONC212, ONC207 i ONC213 su rastvoreni na 20 mg/mL u DMSO, a ONC201 linearni izomer (TIC-10) je rastvoren na 10 mg/mL u DMSO. Meticilin i/ili vankomicin su procenjeni paralelno kao antibiotici pozitivne kontrole i kupljeni su od Sigma-Aldrich i rastvoreni u dejonizovanoj H2O u koncentraciji od 10 mg/mL.
Bakterije
[0312] Bakterijski sojevi korišćeni u ovim testovima su dobijeni iz American Type Culture Collections (ATCC). Svi bakterijski sojevi su razmnoženi prema preporuci ATCC. Svaki soj je čuvan kao zamrznut glicerol stok na -80°C i petlja od 10 µL smrznutog stoka je korišćena za inokulaciju svake kulture za ove testove. Sojevi sa njihovom klasifikacijom i svojstvima su navedeni u tabeli 8 u nastavku.
TABELA 8: SOJEVI STAPHYLOCOCCUS AUREUS I KARAKTERISTIKE
Određivanje minimalne inhibitorne koncentracije (MIC).
[0313] Osetljivost bakterijskih organizama na testirana jedinjenja je procenjena određivanjem MIC svakog jedinjenja korišćenjem analize razblaženja mikro buljona prema postupcima koje preporučuje Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI. Svi sojevi mikroba su dobijeni iz American Tipe Culture Collections (ATCC) i kultivisani u skladu sa preporukama dobavljača. Procena osetljivosti svakog organizma na testirana jedinjenja uključivala je antibiotik(e) kao pozitivne kontrole. Za svaki organizam, pripremljen je standardizovani inokulum direktnom suspenzijom sveže posejanih kolonija u odgovarajućoj podlozi kao što je navedeno u tabeli 8 do optičke gustine 625 nm (OD625) od 0.1 (ekvivalentno McFarland standardu od 0.5). Suspendovani inokulum je razblažen do koncentracije od približno 1×10<6>jedinica koje formiraju kolonije po mililitru (CFU/mL) i 100 µL stavljene u triplikatu bunarčića ploče sa 96 bunarčića koja sadrži 100 µL test jedinjenja serijski razblaženog 2 puta u odgovarajućem buljonu. Sto mikrolitara (100 µL) inokuluma je takođe dodato u triplikate bunarčića koji sadrže 100 µL dvostrukih serijskih razblaženja antibiotika pozitivne kontrole i u bunarčiće koji sadrže samo 100 µL medijuma. Ova šema razblaživanja dala je konačne koncentracije za svaki mikrobni organizam procenjene na 5×10<5>CFU/mL. Koncentracije test jedinjenja kretale su se od visokog testa od 100 do niskog testa od 0.2 µM korišćenjem dvostruke šeme razblaživanja. Ploče su inkubirane 24 ili 48 sati (Staphylococcus aureus 700699) na 37°C i mikrobiološki rast pri svakoj koncentraciji jedinjenja je određen merenjem optičke gustine na 625 nm na čitaču ploča Molecular Devices SpectraMax Plus-384 i vizuelnim bodovanjem ploča /- za rast bakterija. MIC za svako jedinjenje je određen kao najniže razblaživanje jedinjenja koje je u potpunosti inhibiralo rast mikroba.
Rezultati
[0314] Šest (6) imipridona je procenjeno u odnosu na njihovu sposobnost da inhibiraju rast tri soja Staphylococcus aureus. ONC201, ONC207 i ONC201 linearni izomer (TIC-10) bili su neaktivni protiv sva tri soja do koncentracije od 100 µg/mL. Protiv divljeg tipa Staphylococcus aureus (ATCC 29213) MIC za ONC206, ONC212 i ONC213 bio je 6.25 µg/mL, 3.13 µg/mL i 25 µg/mL, respektivno. Protiv Staphylococcus aureus (ATCC 33591) MIC za ONC206, ONC212 i ONC213 bio je 12.5 µg/mL, 3.13 µg/mL i 3.13 µg/mL, respektivno. Aktivnost je bila slična protiv MDR Staphylococcus aureus (ATCC 700699) sa sva tri jedinjenja koja imaju MIC od 12.5 µg/mL. Vankomicin, pozitivno kontrolno jedinjenje, bio je aktivan u očekivanoj koncentraciji i utvrđeno je da je meticilin neaktivan do koncentracije od 100 µg/mL protiv dva soja bakterija rezistentnih na meticilin. Podaci su prikazani u tabeli 9.
S
R
A S
L Y
STA
JA
S
3 A Z A N
ID
IP
I
6 A ZIC
JE N
IVA Đ E
D
9: A L E B TA
Diskusija
[0315] Šest (6) imipridona je procenjeno u odnosu na aktivnost protiv 3 soja Staphylococcus aureus. ONC201, ONC207 i TIC-10 su bili neaktivni protiv sva tri soja. ONC206, ONC212 i ONC213 su imali različitu aktivnost u rasponu od 3.13 µg/mL do 25 µg/mL protiv sva tri bakterijska soja. U odnosu na vankomicin, aktivnost ova tri imipridona bila je ekvivalentna ili 2 do 8 puta manja prema soju 29213. Sva tri ova imipridona su imala 10 do 30 puta manju aktivnost u poređenju sa vankomicinom protiv soja 33591, a aktivnost za sva tri jedinjenja bila je 2 puta veća ood vankomicina protiv soja 700699.
[0316] Ovi eksperimenti su ponavljeni sa dodatnim impiridonima i za dodatne bakterije, uključujući i Gram-pozitivne i Gram-negativne bakterije, kao što su one u Tabeli 10.
TABELA 10
Primer 16: Studija slučaja lečenja ONC201 kod subjekta sa rekurentnim glioblastomom
[0317] Ovaj primer pruža studiju slučaja 22-godišnje žene sa rekurentnim glioblastomom (nemetilovani MGMT, H3.3 K27M mutant) tretirane sa 625 mg ONC201 jednom u tri nedelje.
1
Slika 28 (A) Veličina tumora u odnosu na početnu referentnu vrednost (%) ukupnog opterećenja tumorom kod subjekta. Jedan ciklus je 3 nedelje. (B) Kontrastna magnetna rezonanca na početku, 21, 27 i 36 nedelja nakon početka primene ONC201 jedne od 2 maligne lezije kod subjekta sa 625 mg ONC201 q3w.
[0318] Ovaj pronalazak nije ograničen na prikazane i opisane primere izvođenja, već je namenjen da pokrije modifikacije u okviru ovog pronalaska kako je definisano patentnim zahtevima. Karakteristike otkrivenih primera izvođenja mogu se kombinovati. Osim ako ovde nije posebno navedeno, termini „a“, „an“ i „the“ nisu ograničeni na jedan element, već ih treba čitati tako da znače „najmanje jedan“.
[0319] Podrazumeva se da su slike i opisi možda bili pojednostavljeni da bi se fokusirali na elemente koji su relevantni za jasno razumevanje, uz uklanjanje, radi jasnoće, drugih elemenata za koje stručnjaci sa uobičajenim iskustvom u tehnici mogu takođe proceniti da sadrže deo pronalaska. Međutim, pošto su takvi elementi dobro poznati u tehnici, i zato što ne olakšavaju nužno bolje razumevanje pronalaska, opis takvih elemenata ovde nije dat.
1

Claims (8)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (1)
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju kancera centralnog nervnog sistema kod subjekta, što kancer centralnog nervnog sistema ima mutaciju histona H3.
  2. 2. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, što mutacija histona H3 je H3.3 K27M.
  3. 3. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, što je kancer gliom.
  4. 4. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, što je kancer tumor mozga.
  5. 5. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, što je kancer meningiom, ependimom, neuroblastom ili difuzni intrinzički gliom ponsa.
  6. 6. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, što kancer ima epigenetički utišani nemetilovani gen O(6)-metilguanin-DNK metiltransferaze (MGMT).
  7. 7. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-6, što je subjekat čovek.
  8. 8. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-7, što je farmaceutski prihvatljiva so di-hidrohloridna so.
RS20250172A 2016-01-29 2017-01-30 Modulacija g protein-spregnutog receptora (gpcr) pomoću imipridona RS66519B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/US2016/015817 WO2016123571A1 (en) 2015-01-30 2016-01-29 7-benzyl-4-(2-methylbenzyl)-2,4,6,7,8,9-hexahydroimidazo [1,2-a]pyrido[3,4-e]pyrimidin-5(1h)-one, analogs and salts thereof and their use in therapy
US201662308325P 2016-03-15 2016-03-15
US201662425403P 2016-11-22 2016-11-22
PCT/US2017/015608 WO2017132661A2 (en) 2016-01-29 2017-01-30 G protein-coupled receptor (gpcr) modulation by imipridones
EP17745078.0A EP3408298B1 (en) 2016-01-29 2017-01-30 G protein-coupled receptor (gpcr) modulation by imipridones

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66519B1 true RS66519B1 (sr) 2025-03-31

Family

ID=59398848

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20250172A RS66519B1 (sr) 2016-01-29 2017-01-30 Modulacija g protein-spregnutog receptora (gpcr) pomoću imipridona

Country Status (25)

Country Link
US (2) US11116771B2 (sr)
EP (2) EP4524567A3 (sr)
JP (3) JP7030701B2 (sr)
KR (2) KR20250065717A (sr)
CN (2) CN109311980B (sr)
AU (2) AU2017211423B2 (sr)
BR (1) BR112018015590A2 (sr)
CA (2) CA3294566A1 (sr)
DK (1) DK3408298T3 (sr)
ES (1) ES3012491T3 (sr)
FI (1) FI3408298T3 (sr)
HR (1) HRP20250207T1 (sr)
HU (1) HUE070208T2 (sr)
IL (3) IL316540A (sr)
LT (1) LT3408298T (sr)
MA (1) MA43879B1 (sr)
MX (2) MX2018009227A (sr)
NZ (1) NZ745425A (sr)
PL (1) PL3408298T3 (sr)
PT (1) PT3408298T (sr)
RS (1) RS66519B1 (sr)
SG (2) SG10202108306UA (sr)
SI (1) SI3408298T1 (sr)
SM (1) SMT202500086T1 (sr)
WO (1) WO2017132661A2 (sr)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL3408298T3 (pl) * 2016-01-29 2025-03-31 Oncoceutics, Inc. Modulacja przez imiprydony receptora sprzężonego z białkiem g (gpcr)
US10172862B2 (en) * 2017-01-30 2019-01-08 Oncoceutics, Inc. Imipridones for gliomas
US20210125683A1 (en) * 2017-09-15 2021-04-29 The Regents Of The University Of California Detecting somatic single nucleotide variants from cell-free nucleic acid with application to minimal residual disease monitoring
US11674963B2 (en) 2017-09-27 2023-06-13 The Regents Of The University Of California GPCRs in cancer-associated fibroblasts
CA3089864A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of treating fibrotic pathologies
AU2019251449A1 (en) * 2018-04-09 2020-11-12 Orgenesis Inc. Bioxomes particles, redoxomes, method and composition
CN109157656B (zh) * 2018-10-15 2021-08-27 重庆医科大学附属永川医院 一种双靶标肿瘤疫苗及其制备方法和应用
US20220143024A1 (en) * 2019-02-22 2022-05-12 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of using imipridones
CA3148598A1 (en) 2019-07-30 2021-02-04 Mayo Foundation For Medical Education And Research Compounds and methods for treating fibrotic pathologies
KR102403686B1 (ko) 2020-05-15 2022-05-31 뉴로핏 주식회사 뇌자극 위치 제공장치 및 방법
MX2023001576A (es) 2020-08-06 2023-05-09 Eoetvoes Lorand Tudomanyegyetem Síntesis de nuevos derivados de imipridona y su evaluación de su actividad anticáncerigena.
CN112402439A (zh) * 2020-11-18 2021-02-26 西安组织工程与再生医学研究所 miR-325核酸类似物在制备改善肝胶原沉积相关产品中的应用
US11648248B1 (en) 2022-01-12 2023-05-16 King Abdulaziz University Potent antimicrobial compounds with a pyridazine nucleus
WO2024031030A2 (en) * 2022-08-03 2024-02-08 Shi Xiandong Quantitative method of determining a mental status based on drd1 and/or drd5, and its application thereof
CN115531378B (zh) * 2022-10-19 2023-10-13 中国医学科学院医药生物技术研究所 Pht427作为ndm-1与kpc-2双重抑制剂的应用
WO2024157207A1 (en) * 2023-01-25 2024-08-02 Gpcr Therapeutics, Inc. Gpcr inhibitors and uses thereof
WO2024218275A1 (en) * 2023-04-20 2024-10-24 Institut Gustave Roussy Liquid and solid compositions of imipridone derivatives
CN116731136B (zh) * 2023-08-04 2023-12-05 齐鲁工业大学(山东省科学院) H3k23a组蛋白点突变在提高酿酒酵母乙酸耐受性及木糖发酵性能中的应用

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2150062A1 (de) 1971-10-07 1973-04-12 Boehringer Sohn Ingelheim Imidazo- eckige klammer auf 1,2-a eckige klammer zu -pyrido- eckige klammer auf 4,3-d eckige klammer zu -pyrimidine, deren saeureadditionssalze und verfahren zu deren herstellung
US4867973A (en) * 1984-08-31 1989-09-19 Cytogen Corporation Antibody-therapeutic agent conjugates
US4783450A (en) 1987-04-13 1988-11-08 Warner-Lambert Company Use of commercial lecithin as skin penetration enhancer
WO2004014909A1 (en) 2002-08-13 2004-02-19 Warner-Lambert Company Llc Fused tetrahydropyridine derivatives as matrix metalloproteinase inhibitors
WO2004082570A2 (en) * 2003-03-17 2004-09-30 Bayer Healthcare Ag Diagnostics and therapeutics for diseases associated with dopamine receptor d2 (drd2)
EP1644536A4 (en) * 2003-07-08 2008-07-23 Univ California GENETIC MARKERS FOR RESPONSE TO ATYPIC ANTIPSYCHOTICS AND ANTIDEPRESSIVA AND METHOD FOR USE THEREOF
US8088895B2 (en) * 2006-10-18 2012-01-03 Chemocentryx, Inc. Antibodies that bind CXCR7 epitopes
AU2008302345A1 (en) 2007-09-19 2009-03-26 Oncofluor, Inc. Method for imaging and treating organs and tissues
US20130331381A1 (en) 2011-02-28 2013-12-12 Mcmaster University Treatment of Cancer WIth Dopamine Receptor Antagonists
FI4335511T3 (fi) 2011-04-29 2026-01-29 Penn State Res Found Pienimolekyylinen normaalien ja kasvainsolujen trail-geenin indusointi syöpähoitona
WO2014160130A1 (en) 2013-03-13 2014-10-02 Oncoceutics, Inc. Combination therapy with 7-benzyl-10-(2-methylbenzyl)-2,6,7,8,9,10-hexahydroimidazo[1,2-a]pyrido[4,3-d]pyrimidin-5(3h)-one
US9688679B2 (en) 2013-03-13 2017-06-27 Oncoceutics, Inc. 7-benzyl-4-(methylbenzyl)-2,4,6,7,8,9-hexahydroimidazo[1,2-A]pyrido[3,4-E]pyrimidin-5 (1H)-one, salts thereof and methods of using the same in combination therapy
US9376437B2 (en) * 2013-03-13 2016-06-28 Oncoceutics, Inc 7-benzyl-4-(2-methylbenzyl)-2,4,6,7,8,9-hexahydroimidazo[1,2-a]pyrido[3,4-e]pyrimidin-5(1H)-one, salts thereof and methods of using the same in combination therapy
WO2015073072A1 (en) * 2013-11-15 2015-05-21 Oncoceutics, Inc. 7-benzyl-4-(2-methylbenzyl)-2,4,6,7,8,9-hexahydroimidazo[1,2-a]pyrido[3,4-e]pyrimidin-5(1h)-one
IL311202A (en) * 2013-11-15 2024-05-01 Oncoceutics Inc 7-Benzyl-4-(2-methylbenzyl)-2, 4, 6, 7, 8, 9-hexahydroimidazo [1,2-A] pyrido[3,4-E] pyrimidine-5(1H)one, its salts and methods Use
LT3662910T (lt) * 2014-03-31 2024-12-27 The Scripps Research Institute Trail geno indukcijai skirtas farmakoforas
WO2016123571A1 (en) * 2015-01-30 2016-08-04 Oncoceutics Inc. 7-benzyl-4-(2-methylbenzyl)-2,4,6,7,8,9-hexahydroimidazo [1,2-a]pyrido[3,4-e]pyrimidin-5(1h)-one, analogs and salts thereof and their use in therapy
CN104860948B (zh) 2015-05-15 2017-09-26 南京盖特医药技术有限公司 咪唑并嘧啶酮类化合物及其制备方法和应用
PL3408298T3 (pl) * 2016-01-29 2025-03-31 Oncoceutics, Inc. Modulacja przez imiprydony receptora sprzężonego z białkiem g (gpcr)
US10172862B2 (en) 2017-01-30 2019-01-08 Oncoceutics, Inc. Imipridones for gliomas

Also Published As

Publication number Publication date
EP3408298A2 (en) 2018-12-05
SG10202108306UA (en) 2021-08-30
JP2019511460A (ja) 2019-04-25
AU2022200583A1 (en) 2022-02-24
CN109311980B (zh) 2023-01-17
CN109311980A (zh) 2019-02-05
CN115844895B (zh) 2025-10-17
WO2017132661A2 (en) 2017-08-03
EP4524567A3 (en) 2025-07-23
MA43879A (fr) 2018-12-05
ES3012491T3 (en) 2025-04-09
AU2017211423A1 (en) 2018-09-06
DK3408298T3 (en) 2025-03-03
IL316540A (en) 2024-12-01
CN115844895A (zh) 2023-03-28
AU2017211423B2 (en) 2021-10-28
EP4524567A2 (en) 2025-03-19
BR112018015590A2 (pt) 2019-10-01
JP7825984B2 (ja) 2026-03-09
JP2022046528A (ja) 2022-03-23
IL260815B (en) 2021-10-31
PT3408298T (pt) 2025-03-20
MA43879B1 (fr) 2025-02-28
MX2018009227A (es) 2018-11-09
FI3408298T3 (fi) 2025-02-24
HRP20250207T1 (hr) 2025-04-11
IL286923B1 (en) 2024-12-01
EP3408298B1 (en) 2024-11-20
PL3408298T3 (pl) 2025-03-31
HUE070208T2 (hu) 2025-05-28
SI3408298T1 (sl) 2025-05-30
KR20250065717A (ko) 2025-05-13
MX2023004443A (es) 2023-05-08
AU2022200583B2 (en) 2024-05-02
JP7030701B2 (ja) 2022-03-07
LT3408298T (lt) 2025-03-10
KR20180125460A (ko) 2018-11-23
IL286923A (en) 2021-10-31
SG11201806401YA (en) 2018-08-30
JP2026016502A (ja) 2026-02-03
US20190307751A1 (en) 2019-10-10
CA3294566A1 (en) 2026-03-02
EP3408298A4 (en) 2019-09-04
SMT202500086T1 (it) 2025-03-12
NZ784773A (en) 2025-05-02
WO2017132661A3 (en) 2017-08-31
NZ745425A (en) 2023-03-31
IL286923B2 (en) 2025-04-01
US11116771B2 (en) 2021-09-14
US20220072001A1 (en) 2022-03-10
CA3013044A1 (en) 2017-08-03
KR102801670B1 (ko) 2025-04-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7825984B2 (ja) イミプリドンによるｇタンパク質共役受容体（ｇｐｃｒ）の調節
US12102639B2 (en) Imipridones for gliomas
AU2023320122A1 (en) Pharmaceutical compositions and uses thereof for the treatment of glioma
HK40090611A (zh) 依米立酮化合物在制备用於治疗中枢神经系统癌症的药物中的用途
EA043367B1 (ru) Модуляция рецептора, сопряженного с g-белком (gpcr), при помощи имипридонов
BR122026000349A2 (pt) Uso de um composto, composição farmacêutica e regime de dosagem
MD3408298T2 (ro) Modulare a receptorului cuplat cu proteina G (GPCR) prin imipridone
HK40003825B (en) G protein-coupled receptor (gpcr) modulation by imipridones