RS66968B1 - Liotropni tečnokristalni nanosistemi sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima - Google Patents

Liotropni tečnokristalni nanosistemi sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima

Info

Publication number
RS66968B1
RS66968B1 RS20250652A RSP20250652A RS66968B1 RS 66968 B1 RS66968 B1 RS 66968B1 RS 20250652 A RS20250652 A RS 20250652A RS P20250652 A RSP20250652 A RS P20250652A RS 66968 B1 RS66968 B1 RS 66968B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
och2ch2
composition
composition according
lyotropic liquid
block copolymer
Prior art date
Application number
RS20250652A
Other languages
English (en)
Inventor
Constantinos Demetzos
Asterios Pispas
Maria Chountoulesi
Original Assignee
Uni Pharma Kleon Tsetis Pharmaceutical Laboratories S A
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GR20210100567A external-priority patent/GR1010363B/el
Priority claimed from GR20220100481A external-priority patent/GR1010501B/el
Priority claimed from GR20220100584A external-priority patent/GR1010458B/el
Application filed by Uni Pharma Kleon Tsetis Pharmaceutical Laboratories S A filed Critical Uni Pharma Kleon Tsetis Pharmaceutical Laboratories S A
Publication of RS66968B1 publication Critical patent/RS66968B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Synthetic bilayered vehicles, e.g. liposomes or liposomes with cholesterol as the only non-phosphatidyl surfactant
    • A61K9/1274—Non-vesicle bilayer structures, e.g. liquid crystals, tubules, cubic phases or cochleates; Sponge phases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Opis
[0001] Pronalazak se odnosi na kompozicije fizičko-hemijski stabilnih nanostrukturiranih koloidnih sistema u obliku liotropnih tečnih kristala, koji sadrže amfifilne lipide, soli masnih kiselina srednjeg lanca ili njihove derivate, kopolimere kao stabilizatore i bioaktivni makromolekul koji sadrži peptidne veze.
[0002] Oralna isporuka bioaktivnih makromolekula, uključujući peptide, proteine i enzime, u današnje vreme kontinuirano budi sve veće interesovanje istraživačke zajednice, istovremeno pokazujući značajan rast i sve veći tržišni udeo. Uprkos velikom napretku u ovoj oblasti, još uvek postoje važna nerešena pitanja koja treba prevazići u vezi sa stabilnošću farmaceutskih oblika ovih makromolekula i njihovom bioraspoloživošću, koja je u nekim slučajevima manja od 1%. Razvoj novih tehnologija, kao što su oblaganje gastrorezistentnim oblogama ili upotreba pojačivača permeacije ili hemijska modifikacija aktivnih supstanci, već je rešio većinu gore navedenih problema. Nedavno su opisane nove prilagođene nanočestice, koje su pogodne za inkapsulaciju farmaceutski aktivnih supstanci i njihovo oslobađanje u crevnom traktu i epitelu.
[0003] Liotropni tečni kristali predstavljaju intermedijarno stanje materije između čvrstog i tečnog i nastaju disperzijom i samoorganizovanjem amfifilnih molekula u vodi. Različiti strukturni delovi (hidrofilno-hidrofobni, polarno-nepolarni) amfifilnih molekula pokazuju različita svojstva i samoorganizuju se u supramolekularne strukture sa morfologijom koja u velikoj meri zavisi od njihove hemijske prirode, njihove koncentracije i rastvarača. Drugi faktori koji igraju važnu ulogu u morfologiji liotropnih tečnih kristala i direktno su povezani sa rastvaračem su temperatura, pH vrednost i jonska jačina.
[0004] Najvažnije zapažene mezofaze samoorganizovanih amfifilnih molekula uključuju monoili dvoslojne, micelarne, kubne, heksagonalne ili bikontinuirane kubne faze.
[0005] Naučnu zajednicu posebno privlače kubne i heksagonalne mezofaze koje nisu dvoslojne, jer mogu da formiraju nanočestične liotropne disperzije tečnih kristala, pogodne za upotrebu kao nanonosači za isporuku širokog spektra farmaceutskih aktivnih sastojaka. Ove mezofaze pružaju značajne prednosti, uključujući mogućnost kontrolisanog oslobađanja zbog ekstenzivne organizacije njihove unutrašnje morfologije (kratkodometno uređenje).
[0006] Gliceril monooleat (GMO) je amfifilni, polarni, nezasićeni monoglicerid koji se široko koristi kao emulgator, a takođe ga je Američka agencija za hranu i lekove (FDA) označila kao bezbednu i inertnu supstancu. Amfifilni karakter GMO je posledica prisustva hidrofilnog glicerolskog dela na glavi molekula i hidrofobnog ugljovodoničnog dela na repu molekula, što mu omogućava da se samoorganizuje u vodenim medijumima, formirajući karakteristične, termodinamički stabilne strukture tečnih kristala. Prisustvo odgovarajuće odabranih surfaktanata dodatno utiče na svojstva GMO u vodenim rastvorima, omogućavajući stabilizaciju različitih supramolekularnih struktura, kao što su kubne i heksagonalne, koje su idealne za zarobljavanje lekova. Međutim, ove strukture nisu fizičko-hemijski stabilne tokom dužeg perioda, zbog hidrolize estarske veze u GMO, koja kida hidrofobni ugljovodonični lanac sa hidrofilnog glicerola, kao i zbog oksidacije dvostruke veze ugljovodoničnog lanca.
[0007] Amfifilni polimeri predstavljaju drugu klasu molekula koji se široko koriste u nekoliko farmaceutskih oblika, ne samo kao stabilizatori emulzija već i kao regulatori viskoznosti. Amfifilni polimeri, kao i svi drugi amfifilni molekuli, samoorganizuju se u različite karakteristične strukture u zavisnosti od disperzionog medijuma. Posebnu kategoriju ove porodice čine amfifilni triblok kopolimeri, koji iako pokazuju veliku složenost, istovremeno se formiraju u različitim morfologijama, posebno korisnim u različitim primenama. Triblok kopolimer poli(etilen oksid)-b-poli(propilen oksid)-b-poli(etilen oksid) (PEO-b-PPO-b-PEO), takođe poznat kao poloksamer, prikazan je kao stabilizator kubnih GMO struktura u vodenim medijumima (M. Chountoulesi, et al. Cubic lyotropic liquid crystals as drug delivery carriers: Physicochemical and morphological studies. International Journal of Pharmaceutics 2018, 550, 57-70).
[0008] Masne kiseline srednjeg lanca, posebno one koje imaju između 6 i 12 atoma ugljenika u alifatičnom lipidnom lancu, i njihovi derivati se često koriste kao pojačivači permeacije kako bi se povećala bioraspoloživost određenih oralno primenjenih farmaceutskih supstanci. Natrijumova so dekanske kiseline (C10) i natrijumova so 8-((2-hidroksibenzoil)amino) oktanske kiseline (natrijum salkaprozat - SNAC) predstavljaju dva karakteristična kandidata ove porodice i brojne kliničke studije su objavljene u vezi sa njihovom bezbednošću i stabilnošću u ovom pravcu (Twarog, C.; et al. Intestinal Permeation Enhancers for Oral Delivery of Macromolecules: A Comparison between Salcaprozate Sodium (SNAC) and Sodium Caprate (C10). Pharmaceutics 2019, 11, 78).
[0009] Uticaj dekanske kiseline na samoorganizovanje GMO mezofaza u vodenim medijumima je već objavljen (N. Tran et al. Nanostructure and cytotoxicity of self-assembled monoolein-capric acid lyotropic liquid crystalline nanoparticles RSC Adv., 2015, 5, 26785-26795). Još jedan izveštaj se odnosi na kubne nanočestice GMO/poli(etilen oksid)-b-poli(propilen oksid)-b-poli(etilen oksida) kao potencijalni sistem za isporuku leka za aktivnu supstancu simvastatin koja je slabo rastvorljiva u vodi (J. Lai, et al. Glyceryl Monooleate/Poloxamer 407 Cubic Nanoparticles as Oral Drug Delivery Systems: I. In Vitro Evaluation and Enhanced Oral Bioavailability of the Poorly Water-Soluble Drug Simvastatin AAPS Pharm Sci Tech, 2009, 10, 960).
[0010] Insulin je peptidni hormon koji proizvode β-ćelije u pankreasu. On igra dominantnu ulogu u metabolizmu ugljenih hidrata, masti i proteina u ljudskom telu, a što je najvažnije, u regulaciji nivoa glukoze u krvi. Nedostatak insulina je uzrok dijabetes melitusa. Insulinske mikrosfere obložene jedinjenjem SNAC su razvijene da bi zaštitile lek od razgradnje enzimima, dok istovremeno ove mikrosfere pokazuju povećanu permeabilnost iz gastrointestinalnog trakta [R. Ql and Q. N. Ping, Gastrointestinal absorption enhancement of insulin by administration of enteric microspheres and SNAC to rats. J. Microencapsulation, 2004 (21) 37-45]. Još jedan izveštaj se odnosi na insulinske nanonosače „nanocubicles“ stabilizovane pomoću GMO i nejonskog kopolimera Pluronic F-127 (poloksamer 407) u smeši etanola i propilenglikola [H. Chung, et al. Self-assembled "nanocubicle" as a carrier for peroral insulin delivery. Diabetologia 2002 (45) 448-451]. U novijoj literaturi objavljeno je nekoliko formulacija nanonosača za isporuku insulina koje se odnose na nanočestice obložene hitozanom, nanočestice PLGA-insulina, nanočestice dekstraninsulina i nanočestice čvrstih lipida-insulina [Sharma et al. Nanoparticle based insulin delivery system: the next generation efficient therapy for Type 1 diabetes J Nanobiotechnol2015 (13), 74 (13 stranica)].
[0011] Dokument EP2331072 se odnosi na oralne kompozicije koje sadrže protein, pojačivač apsorpcije i inhibitor proteaze.
[0012] Predmetni pronalazak se odnosi na kompozicije fizičko-hemijski stabilnih koloidnih sistema u obliku liotropnih tečnih kristala koje sadrže glicerol monooleat, so C6-C12 masne kiseline ili njen derivat sa aromatičnim supstituentom, amfifilni blok kopolimer sa sledećom hemijskom formulom H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 2≤a≤150 i 15≤b≤70 i bioaktivni makromolekul sa peptidnim vezama.
[0013] Iznenađujuće je otkriveno da liotropne tečnokristalne nanočestice ovog pronalaska imaju nanokompartmentalizovanu unutrašnju strukturu, koja je, iako konzistentna, istovremeno veoma rastresita, što joj omogućava da bude veoma fleksibilna za inkapsuliranje različitih bioaktivnih makromolekula sa peptidnim vezama različitih struktura i različitih molekulskih težina, bez uticaja na njihove fizičko-hemijske karakteristike u celini.
[0014] Štaviše, iznenađujuće je otkriveno da samoorganizovane nanočestice ovog pronalaska, u obliku liotropnih tečnih kristala koje nose inkapsulirane bioaktivne makromolekule sa peptidnim vezama, formiraju koloidne nanosisteme koji su stabilni tokom vremena u pogledu veličine, raspodele veličina i ζ-potencijala, bez obzira na njihovu unutrašnju strukturnu organizaciju nakon inkapsulacije bioaktivnih makromolekula sa peptidnim vezama.
[0015] Pored toga, samoorganizovane nanočestice ovog pronalaska, u obliku liotropnih tečnih kristala, koje nose inkapsulirane bioaktivne makromolekule sa peptidnim vezama, ostaju fizičkohemijski stabilni koloidni nanosistemi tokom vremena, kako u simuliranoj želudačnoj tečnosti (pH = 1.6), tako i u simuliranoj crevnoj tečnosti (pH = 6.5).
[0016] Prema predmetnom pronalasku, samoorganizovane nanočestice sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze imaju prosečan prečnik u rasponu od 50 nm do 900 nm, poželjno između 100 nm i 500 nm, a još poželjnije između 100 nm i 300 nm.
[0017] Prema predmetnom pronalasku, koncentracija glicerol monooleata u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica varira od 10 mg/ml do 100 mg/ml, poželjno varira od 20 mg/ml do 80 mg/ml, a još poželjnije je 20 mg/ml.
[0018] Prema predmetnom pronalasku, so masne kiseline srednjeg lanca koja se koristi za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica, odabrana je među alkalnim solima masnih kiselina koje imaju od 6 do 12 atoma ugljenika u svom alifatičnom lancu ili njihovim derivatima sa aromatičnim supstituentom.
[0019] Prema predmetnom pronalasku, so C6-C12 masne kiseline koja se koristi za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica, izabrana je između alkalnih soli oktanske, dekanske ili dodekanske kiseline, a njen derivat je izabran među alkalnim solima 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline.
[0020] U poželjnom primeru izvođenja, so C6-C12 masne kiseline ili njen derivat sa aromatičnim supstituentom, koja se koristi za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ovog pronalaska, je natrijumova so oktanske kiseline.
[0021] U poželjnom primeru izvođenja, so C6-C12 masne kiseline ili njen derivat sa aromatičnim supstituentom, koja se koristi za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ovog pronalaska, je natrijumova so dekanske kiseline.
[0022] U poželjnom primeru izvođenja, so C6-C12 masne kiseline ili njen derivat sa aromatičnim supstituentom, koja se koristi za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ovog pronalaska, je natrijumova so dodekanske kiseline.
[0023] U poželjnom primeru izvođenja, so C6-C12 masne kiseline ili njen derivat sa aromatičnim supstituentom, koja se koristi za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ovog pronalaska, je natrijumova so 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline.
[0024] Prema predmetnom pronalasku, amfifilni blok kopolimer za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ima sledeću hemijsku formulu H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 2≤a≤150 i 15≤b≤70, poželjno je izabran među onima gde je 60≤a≤150 i 25≤b≤70, još poželjnije je izabran među onima gde je 95≤a≤105 i 55≤b≤70.
[0025] U poželjnom primeru izvođenja, amfifilni blok kopolimer za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ima hemijsku formulu H(OCH2CH2)80(OCH(CH3)CH2)27(OCH2CH2)80OH.
[0026] U poželjnom primeru izvođenja, amfifilni blok kopolimer za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ima hemijsku formulu H(OCH2CH2)64(OCH(CH3)CH2)37(OCH2CH2)64OH.
[0027] U poželjnom primeru izvođenja, amfifilni blok kopolimer za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ima hemijsku formulu H(OCH2CH2)141(OCH(CH3)CH2)44(OCH2CH2)141OH.
[0028] U poželjnom primeru izvođenja, amfifilni blok kopolimer za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ima hemijsku formulu H(OCH2CH2)101(OCH(CH3)CH2)56(OCH2CH2)101OH.
[0029] U poželjnom primeru izvođenja, amfifilni blok kopolimer za razvoj liotropnih tečnokristalnih nanočestica ima hemijsku formulu H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH.
[0030] Prema predmetnom pronalasku, težinski odnos u miligramima (mg) glicerol monooleata i soli C6-C12 masne kiseline ili njenog derivata sa aromatičnim supstituentom, i amfifilnog blok kopolimera, po mililitru (ml) u finalnoj kompoziciji, je 20:A:B, gde je 1≤ A ≤10 i 1≤ B ≤10, poželjno 2≤ A ≤4 i 3≤ B ≤7.
[0031] U poželjnom primeru izvođenja, težinski odnos u miligramima (mg) glicerol monooleata i soli C6-C12 masne kiseline ili njenog derivata sa aromatičnim supstituentom, i amfifilnog blok kopolimera, po mililitru (ml) u finalnoj kompoziciji, je 20:2:5.
[0032] U poželjnom primeru izvođenja, težinski odnos u miligramima (mg) glicerol monooleata i soli C6-C12 masne kiseline ili njenog derivata sa aromatičnim supstituentom, i amfifilnog blok kopolimera, po mililitru (ml) u finalnoj kompoziciji, je 20:4:5.
[0033] U poželjnom primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 u težinskom odnosu 20:2:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0034] U poželjnijem primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH u težinskom odnosu 20:2:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0035] U poželjnom primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 u težinskom odnosu 20:4:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0036] U poželjnijem primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH u težinskom odnosu 20:4:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0037] U poželjnom primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 u težinskom odnosu 20:2:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0038] U poželjnijem primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH u težinskom odnosu 20:2:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0039] U poželjnom primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 u težinskom odnosu 20:4:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0040] U poželjnijem primeru izvođenja, liotropne tečnokristalne nanočestice u kompoziciji prema ovom pronalasku sastoje se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline i kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH u težinskom odnosu 20:4:5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0041] Prema predmetnom pronalasku, bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je izabran između enzima, proteina i hormona.
[0042] U poželjnom primeru izvođenja, bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je enzim lizozim.
[0043] U poželjnom primeru izvođenja, bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je protein goveđeg seruma albumina (BSA).
[0044] U poželjnom primeru izvođenja, bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je insulinski hormon.
[0045] U poželjnom primeru izvođenja, bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je hormon kalcitonin.
[0046] U poželjnom primeru izvođenja, bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je oktapeptid oktreotid.
[0047] U poželjnom primeru izvođenja, bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je analog glukagonu-sličnog peptida 1 (GLP-1), poželjno liraglutid, semaglutid ili dulaglutid.
[0048] Prema predmetnom pronalasku, koncentracija bioaktivnog makromolekula koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je između 0.01 mg/ml i 10.0 mg/ml u finalnoj kompoziciji, poželjno između 0.1 mg/ml i 5.0 mg/ml u finalnoj kompoziciji.
[0049] U poželjnom primeru izvođenja, koncentracija bioaktivnog makromolekula koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je 0.5 mg/ml.
[0050] U poželjnom primeru izvođenja, koncentracija bioaktivnog makromolekula koji ima peptidne veze u kompoziciji liotropnih tečnokristalnih nanočestica je 1.0 mg/ml.
[0051] Prema predmetnom pronalasku, težinski odnos glicerol monooleata i soli C6-C12 masne kiseline ili njenog derivata sa aromatičnim supstituentom, amfifilnog blok kopolimera, bioaktivnog makromolekula koji ima peptidne veze, u finalnoj kompoziciji, je 20:A:B:C, gde je 1 ≤ A ≤ 10, 1 ≤ B ≤ 10 i 0.01 ≤ C ≤ 10, poželjno gde je 2 ≤ A ≤ 4, 3 ≤ B ≤ 7 i 0.1 ≤ C ≤ 5, još poželjnije je 20:2:5:0.5 ili 20:2:5:1 ili 20:4:5:0.5 ili 20:4:5:1.
[0052] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i insulina, u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0053] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i insulina, u težinskom odnosu od 20:4:5:1.0 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0054] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i insulina, u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0055] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i insulina, u težinskom odnosu od 20:4:5:1.0 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0056] Utvrđeno je da kompozicija prema ovom pronalasku koja se sastoji od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH i insulina u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije, pokazuje neočekivano visoko zarobljavanje insulina u težinskom procentu većem od 99% i značajno poboljšanu fizičko-hemijsku stabilnost u simuliranim uslovima želudačne i crevne sredine.
[0057] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i goveđeg serumskog albumina, u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0058] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i goveđeg serumskog albumina, u težinskom odnosu od 20:2:5:1.0 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0059] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i goveđeg serumskog albumina, u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0060] Utvrđeno je da kompozicija prema ovom pronalasku koja se sastoji od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH i goveđeg serumskog albumina u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije, pokazuje značajno poboljšanu fizičkohemijsku stabilnost u simuliranim uslovima želudačne i crevne sredine.
[0061] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i goveđeg serumskog albumina, u težinskom odnosu od 20:2:5:1.0 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0062] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i lizozima, u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0063] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i lizozima, u težinskom odnosu od 20:2:5:1.0 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0064] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i lizozima, u težinskom odnosu od 20:2:5:0.5 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0065] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i lizozima, u težinskom odnosu od 20:2:5:1.0 po ml rastvora finalne kompozicije.
[0066] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i oktreotida, u težinskom odnosu od 20:A:B:0.5, gde je 1 ≤ A ≤ 10 i 1 ≤ B ≤ 10, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0067] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i oktreotida, u težinskom odnosu od 20:A:B:0.5, gde je 1 ≤ A ≤ 10 i 1 ≤ B ≤ 10, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0068] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i analoga GLP-1, u težinskom odnosu od 20:A:B:C, gde je 1 ≤ A ≤ 10, 1 ≤ B ≤ 10 i 0.01 ≤ C ≤ 10, poželjno gde je 2 ≤ A ≤ 4, 3 ≤ B ≤ 7 i 0.5 ≤ C ≤ 6, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0069] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i analoga GLP-1, u težinskom odnosu od 20:A:B:C, gde je 1 ≤ A ≤ 10, 1 ≤ B ≤ 10 i 0.01 ≤ C ≤ 10, poželjno gde je 2 ≤ A ≤ 4, 3 ≤ B ≤ 7 i 0.5 ≤ C ≤ 6, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0070] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i liraglutida, u težinskom odnosu od 20:A:B:6, gde je 1 ≤ A ≤ 10 i 1 ≤ B ≤ 10, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0071] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i liraglutida, u težinskom odnosu od 20:A:B:6, gde je 1 ≤ A ≤ 10 i 1 ≤ B ≤ 10, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0072] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i semaglutida, u težinskom odnosu od 20:A:B:1, gde je 1 ≤ A ≤ 10 i 1 ≤ B ≤ 10, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0073] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i semaglutida, u težinskom odnosu od 20:A:B:1, gde je 1 ≤ A ≤ 10 i 1 ≤ B ≤ 10, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0074] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i dulaglutida, u težinskom odnosu od 20:A:B:C, gde je 1 ≤ A ≤ 10, 1 ≤ B ≤ 10 i 0.5 ≤ C ≤ 5, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0075] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija prema ovom pronalasku sastoji se od glicerol monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, blok kopolimera H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70 i dulaglutida, u težinskom odnosu od 20:A:B:C, gde je 1 ≤ A ≤ 10, 1 ≤ B ≤ 10 i 0.5 ≤ C ≤ 5, po ml rastvora finalne kompozicije.
[0076] Prema predmetnom pronalasku, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, formulisana je sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensima kako bi bila pogodna za oralnu, intranazalnu, supkutanu, intraperitonealnu, intravensku ili topikalnu primenu.
[0077] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, formulisana je sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensima kako bi bila pogodna za oralnu primenu.
[0078] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, za oralnu primenu, može da bude dodatno obložena polimerima koji reaguju na pH vrednost i omogućavaju produženo oslobađanje u željenom okruženju.
[0079] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, za oralnu primenu, može da bude obložena sintetičkim akrilnim i metakrilnim polimerima pogodnim za oslobađanje zavisno od pH vrednosti.
[0080] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, za oralnu primenu, obložena je kopolimerom metakrilne kiseline i etil akrilata (1:1) za ciljano oslobađanje u dvanaestopalačnom crevu pri pH vrednostima iznad 5.5.
[0081] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, za oralnu primenu, obložena je kopolimerom metakrilne kiseline i metil metakrilata (1:1) za ciljano oslobađanje u medijumu tankog creva pri pH vrednostima iznad 6.0.
[0082] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, za oralnu primenu, obložena je kopolimerom metakrilne kiseline i metil metakrilata (1:2) za ciljano oslobađanje u tankom crevu pri pH vrednostima iznad 7.0.
[0083] U poželjnom primeru izvođenja, kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima koji imaju peptidne veze, za oralnu primenu, obložena je kopolimerom etil akrilata-metil metakrilata-trimetilaminoetil metakrilat hlorida visoke propustljivosti (1:2:0.2) za produženo oslobađanje.
[0084] Zarobljavanje bioaktivnih makromolekula u liotropnim tečnokristalnim nanosistemima koje je procenjeno korišćenjem proteinskog testa BCA za kolorimetrijsku detekciju i kvantifikaciju ukupnih proteina, pokazalo je efikasnost zarobljavanja veću od 85% za sve proučavane nanosisteme.
[0085] Predmetni pronalazak je dalje opisan sledećim indikativnim, neograničavajućim primerima i slikama 1 i 2, gde:
Slika 1 prikazuje snimke kriogene transmisione elektronske mikroskopije (krio-TEM) (a) praznog nanonosača i (b) i (c) liotropnih tečnokristalnih nanosistema sa zarobljenim insulinom iz primera 1 i
Slika 2 prikazuje snimke krio-TEM liotropnih tečnokristalnih nanosistema sa inkapsuliranim goveđim serumskim albuminom iz primera 2.
[0086] Primer 1. Kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica koje se sastoje od gliceril monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH i insulina, u težinskom odnosu 20:2:5:0.5 po ml finalne kompozicije.
[0087] Rastvor glicerol monooleata koncentracije 20 mg/ml u prečišćenoj vodi je pripremljen uz blago zagrevanje (50 °C). U rastvor gliceril monoleata dodat je vodeni rastvor natrijume soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, zatim vodeni rastvor kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH, a zatim i vodeni rastvor insulina, tako da težinski odnos komponenti u finalnoj kompoziciji bude 20:2:5:0.5 mg po ml. Smeša je zagrevana na 50 °C tokom 5 minuta, zatim je podvrgnuta sonikaciji u sonikatoru za kupatilo, dok se nije formirala mlečna disperzija, nakon čega su usledila dva ciklusa sonikacije od 1 minuta (amplituda 70, ciklus 0,7), prekidana periodom mirovanja od 1 minuta, korišćenjem sonikatora sa sondom. Dobijena disperzija je ostavljena da se temperira 30 minuta. Finalna disperzija je neprozirno bela i čuva se na sobnoj temperaturi.
[0088] Prosečan hidrodinamički prečnik (Dh) koji predstavlja veličinu čestica i raspodela veličine čestica (indeks polidisperznosti - PDI) nanočestica u kompoziciji iz primera 1 određeni su tehnikom dinamičkog rasejanja svetlosti (DLS). ζ-potencijal nanočestica određen je tehnikom elektroforetskog rasejanja svetlosti (ELS). Fizičko-hemijske i morfološke karakteristike nanočestica neposredno nakon njihove pripreme sumirane su u tabeli 1.
Tabela 1. Prosečan hidrodinamički prečnik (Dh), indeks polidisperznosti (PDI) i ζ-potencijal kompozicija iz primera 1
[0089] Koloidne suspenzije nanočestica ovog pronalaska pokazuju izuzetnu fizičko-hemijsku stabilnost tokom vremena, kako u pogledu veličine čestica, tako i u pogledu raspodele veličina.
[0090] Morfologija kompozicija iz primera 1 je proučavana i kvalitativno ocenjena kriogenom transmisionom elektronskom mikroskopijom (krio-TEM). Kada je u pitanju prazan nanosistem, koji ne sadrži inkapsulirani insulin (slika 1a), zapažena je ponavljajuća karakteristična jedinstvena tečnokristalna morfologija dvokompartmentne nanostrukture, kod koje je unutrašnja, nepravilna, perforirana porozna struktura zatvorena u spoljašnjoj vezikuli, koja predstavlja mehur. Celokupna morfologija teži morfologiji sličnoj krofni, što ukazuje na moduliranu tečnokristalnu mezofazu, koja se prvi put javlja u stanju tehnike. Jedinstvena morfologija takođe podseća na ćeliju sa jedrom u unutrašnjosti, zatvorenim poroznom nuklearnom membranom/omotačem. Prazne nanostrukture iz primera 1 imaju veličine od 160-900 nm i debljinu membrane od 3-4 nm. Prisustvo dispergovanih, zbijenih vezikularnih struktura uzrokuje dalju stabilizaciju tečnokristalnih nanočestica formiranjem sloja „obloge“ materijala, koji pokriva uređene nanočestice, pomažući da se one održe dispergovanim u vodenom rastvoru. Spoljašnja vezikula u obliku mehura pokazuje zaštitnu ulogu nad unutrašnjim nepravilnim nanokompartmentalizovanim jezgrom.
[0091] Inkorporacija insulina (slika 1b i 1c) dovela je do višeg stepena unutrašnje organizacije. Liotropne tečnokristalne nanočestice sa zarobljenim insulinom pokazale su zatvorene nanočestice sa pravilno uređenom unutrašnjom strukturom, zajedno sa tečnokristalnim nanočesticama sa nižim stepenom unutrašnje organizacije (slika 1b). Ove manje periodične, nepravilne strukture nalik na strukture slične „sunđeru“ (L3 mezofaza) sastoje se od spoljašnjeg sloja izgrađenog od lamela koje se ukrštaju i prividno gustog unutrašnjeg jezgra sa visoko neuređenom unutrašnjošću i bez dugometnog uređenja i periodičnosti. Nanostrukture iz primera 1 sa zarobljenim insulinom su veličine od 40-220 nm, štaviše, koegzistiraju sa preovlađujućom populacijom malih, sfernih vezikula bez unutrašnje strukture, veličina 15-330 nm. Liotropne tečnokristalne nanostrukture sa zarobljenim insulinom takođe koegzistiraju sa perforiranim poroznim strukturama mnogih unutrašnjih slojeva koji se ukrštaju i prividno gustim unutrašnjim jezgrom sa visoko neuređenom unutrašnjošću (slika 1c). Njihove ukupne veličine su u opsegu od 130-550 nm, sa debljinom membrane od 3-4 nm.
[0092] Primer 2. Kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica koje se sastoje od gliceril monooleata, natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH i goveđeg serumskog albumina, u težinskom odnosu 20:2:5:0.5 po ml finalne kompozicije.
[0093] Rastvor glicerol monooleata koncentracije 20 mg/ml u prečišćenoj vodi je pripremljen uz blago zagrevanje (50 °C). U rastvor gliceril monooleata dodati su vodeni rastvor natrijume soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, zatim vodeni rastvor kopolimera H(OCH2CH2)98(OCH(CH3)CH2)67(OCH2CH2)98OH, a zatim i vodeni rastvor goveđeg serumskog albumina, kako bi se pripremila dva nova nanosistema u kojima je težinski odnos komponenti u finalnoj kompoziciji 20:2:5:0.5 mg po ml, odnosno 20:2:5:1.0. Smeša je zagrejana na 50 °C tokom 5 minuta, zatim je podvrgnuta sonikaciji u sonikatoru za kupatilo, dok se nije formirala mlečna disperzija, nakon čega su usledila dva ciklusa sonikacije od 1 minuta (amplituda 70, ciklus 0,7), prekinuta periodom odmora od 1 minuta, korišćenjem sonikatora sa sondom. Dobijene disperzije su ostavljene da se temperiraju 30 minuta. Finalne disperzije su neprozirno bele boje i čuvaju se na sobnoj temperaturi.
[0094] Prosečan hidrodinamički prečnik (Dh) koji predstavlja veličinu čestica i raspodela veličine čestica (indeks polidisperznosti - PDI) nanočestica u kompoziciji iz primera 2 određeni su tehnikom dinamičkog rasejanja svetlosti (DLS). ζ-potencijal nanočestica određen je tehnikom elektroforetskog rasejanja svetlosti (ELS). Fizičko-hemijske i morfološke karakteristike nanočestica neposredno nakon njihove pripreme sumirane su u tabeli 2.
Tabela 2. Prosečan hidrodinamički prečnik (Dh), indeks polidisperznosti (PDI) i ζ-potencijal kompozicija iz primera 2
[0095] Koloidne suspenzije nanočestica ovog pronalaska pokazuju izuzetnu fizičko-hemijsku stabilnost tokom vremena, kako u pogledu veličine čestica, tako i u pogledu raspodele veličina.
[0096] Morfologija kompozicija iz primera 2 je proučavana i kvalitativno ocenjena kriogenom transmisionom elektronskom mikroskopijom (krio-TEM). U prisustvu goveđeg serumskog albumina (slika 2), nisu primećene značajne promene u morfološkom ponašanju, u poređenju sa odgovarajućim praznim nanosistemom (slika 1a). Ukratko, ponovo je otkrivena karakteristična dvokompartmentna nanostruktura, sa unutrašnjom, nepravilnom, perforiranom poroznom strukturom zatvorenom u spoljašnjoj vezikuli (slika 2a). Vezikule koje sadrže nepravilne strukture u unutrašnjosti, imaju veličine od 200-800 nm i debljinu membrane od 3-4 nm, dok populacija praznih vezikula ima veličine od 10-600 nm i debljinu membrane od 3-4 nm (slika 2b).

Claims (9)

Patentni zahtevi
1. Kompozicija u obliku liotropnih tečnokristalnih nanočestica koja sadrži glicerol monooleat, so C6-C12 masne kiseline ili njen derivat sa aromatičnim supstituentom, amfifilni blok kopolimer sa hemijskom formulom H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 2 ≤ a ≤ 150 i 15 ≤ b ≤ 70, i bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze.
2. Kompozicija prema zahtevu 1, gde je so C6-C12 masne kiseline izabrana od alkalnih soli oktanske, dekanske ili dodekanske kiseline, a njen derivat je izabran od alkalnih soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, poželjno natrijumove soli oktanske kiseline i 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline, još poželjnije natrijumove soli 8-((2-hidroksibenzoil)amino)oktanske kiseline.
3. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 i 2, gde je amfifilni blok kopolimer sa hemijskom formulom H(OCH2CH2)a(OCH(CH3)CH2)b(OCH2CH2)aOH, gde je 2≤a≤150 i 15≤b≤70, poželjno izabran među onima gde je 60≤a≤150 i 25≤b≤70, još poželjnije izabran među onima gde je 95 ≤ a ≤ 105 i 55 ≤ b ≤ 70.
4. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 3, gde je bioaktivni makromolekul koji ima peptidne veze izabran između enzima, proteina i hormona, poželjno između lizozima, goveđeg serumskog albumina, insulina, kalcitonina, oktreotida, liraglutida, semaglutida i dulaglutida.
5. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 4, gde je koncentracija glicerol monooleata u kompoziciji od 10 mg/ml do 100 mg/ml, poželjno od 20 mg/ml do 80 mg/ml, još poželjnije je 20 mg/ml.
6. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 5, gde je težinski odnos glicerol monooleata i soli C6-C12 masne kiseline ili njenog derivata sa aromatičnim supstituentom, i amfifilnog blok kopolimera, u finalnoj kompoziciji, 20:A:B, gde je 1 ≤ A ≤ 10 i 1 ≤ B ≤ 10, poželjno 2 ≤ A ≤ 4 i 3 ≤ B ≤ 7, još poželjnije je 20:2:5 ili 20:4:5.
7. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 6, gde je koncentracija bioaktivnog makromolekula koji ima peptidne veze između 0.01 mg/ml i 10.0 mg/ml u finalnoj kompoziciji, poželjno između 0.1 mg/ml i 5.0 mg/ml u finalnoj kompoziciji.
8. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 7, gde je težinski odnos glicerol monooleata i soli C6-C12 masne kiseline ili njenog derivata sa aromatičnim supstituentom, amfifilnog blok kopolimera, i bioaktivnog makromolekula koji ima peptidne veze, u finalnoj kompoziciji, 20:A:B:C, gde je 1 ≤ A ≤ 10, 1 ≤ B ≤ 10 i 0.01 ≤ C ≤ 10, poželjno gde je 2 ≤ A ≤ 4, 3 ≤ B ≤ 7 i 0.1 ≤ C ≤ 5, još poželjnije je 20:2:5:0.5 ili 20:2:5:1 ili 20:4:5:0.5 ili 20:4:5:1.
9. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 8, koja je formulisana sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensima za oralnu, intranazalnu, supkutanu, intraperitonealnu, intravensku ili topikalnu primenu, poželjno za oralnu primenu.
RS20250652A 2021-08-23 2022-07-29 Liotropni tečnokristalni nanosistemi sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima RS66968B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GR20210100567A GR1010363B (el) 2021-08-23 2021-08-23 Νανοσωματιδια λυοτροπικων λιπιδικων υγρων κρυσταλλων για χρηση ως συστηματα μεταφορας δραστικων φαρμακευτικων ουσιων
GR20220100481A GR1010501B (el) 2022-06-08 2022-06-08 Νανοσυστηματα βιοδραστικων μακρομοριων σε μορφη νανοδομημενων λυοτροπικων υγρων κρυσταλλων
GR20220100584A GR1010458B (el) 2022-07-21 2022-07-21 Νανοσυστηματα βιοδραστικων μακρομοριων με πεπτιδικους δεσμους σε μορφη νανοδομημενων λυοτροπικων υγρων κρυσταλλων
PCT/GR2022/000040 WO2023026067A1 (en) 2021-08-23 2022-07-29 Lyotropic liquid crystalline nanosystems with encapsulated bioactive macromolecules
EP22765189.0A EP4392020B1 (en) 2021-08-23 2022-07-29 Lyotropic liquid crystalline nanosystems with encapsulated bioactive macromolecules

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66968B1 true RS66968B1 (sr) 2025-07-31

Family

ID=83193410

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20250652A RS66968B1 (sr) 2021-08-23 2022-07-29 Liotropni tečnokristalni nanosistemi sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima

Country Status (16)

Country Link
EP (1) EP4392020B1 (sr)
JP (1) JP2024534784A (sr)
KR (1) KR20240063870A (sr)
AU (1) AU2022334840A1 (sr)
CA (1) CA3226264A1 (sr)
ES (1) ES3034635T3 (sr)
HR (1) HRP20250784T1 (sr)
HU (1) HUE071985T2 (sr)
IL (1) IL310347A (sr)
JO (1) JOP20240038A1 (sr)
MX (1) MX2024002306A (sr)
PL (1) PL4392020T3 (sr)
RS (1) RS66968B1 (sr)
SM (1) SMT202500260T1 (sr)
WO (1) WO2023026067A1 (sr)
ZA (1) ZA202401363B (sr)

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL1682091T3 (pl) * 2003-11-07 2017-09-29 Camurus Ab Kompozycje lipidów i kationowych peptydów
JP5740689B2 (ja) 2008-08-18 2015-06-24 エンテラ バイオ エルティーディー． タンパク質の経口投与用の方法および組成物

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20250784T1 (hr) 2025-09-26
ZA202401363B (en) 2025-04-30
CA3226264A1 (en) 2023-03-02
AU2022334840A1 (en) 2024-02-08
MX2024002306A (es) 2024-03-07
JOP20240038A1 (ar) 2024-02-22
ES3034635T3 (en) 2025-08-20
IL310347A (en) 2024-03-01
PL4392020T3 (pl) 2025-10-13
KR20240063870A (ko) 2024-05-10
SMT202500260T1 (it) 2025-09-12
EP4392020B1 (en) 2025-06-04
EP4392020C0 (en) 2025-06-04
EP4392020A1 (en) 2024-07-03
WO2023026067A1 (en) 2023-03-02
HUE071985T2 (hu) 2025-10-28
JP2024534784A (ja) 2024-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP3604381B2 (ja) 微粒子の調製
JP3487860B2 (ja) 逆ミセル（ｌ２）構造または正常ミセル（ｌ１）構造を形成する制御放出組成物
Khoee et al. Niosomes: A novel approach in modern drug delivery systems
Shalaby et al. Bioadhesive chitosan-coated cationic nanoliposomes with improved insulin encapsulation and prolonged oral hypoglycemic effect in diabetic mice
Mohanraj et al. Silica nanoparticle coated liposomes: a new type of hybrid nanocapsule for proteins
CN103751789B (zh) 包含具有低水溶解度的活性物质的组合物
JP2007517023A (ja) 水溶性薬物を含有する経口投与用ナノ粒子組成物及びその製造方法
Lin et al. Preparation and in vitro characterization of HSA-mPEG nanoparticles
US20230364014A1 (en) Self-assembled gels for controlled delivery of biologics and methods of making thereof
Boushra et al. Development of bi-polymer lipid hybrid nanocarrier (BLN) to improve the entrapment and stability of insulin for efficient oral delivery
El Sayyad et al. Fabrication and characterization of sildenafil citrate loaded transfersomes as a carrier for transdermal drug delivery
WO2011036234A1 (fr) Nanocapsules lipidiques, procede de preparation et utilisation comme medicament
KR20050081092A (ko) 생체적합성 친수성 고분자를 포함하는 콜로이드계 조성물,제형 및 이들의 제조 방법
Zheng et al. Carboxymethyl chitosan coated medium-chain fatty acid nanoliposomes: Structure, composition, stability and in vitro release investigation
RS66968B1 (sr) Liotropni tečnokristalni nanosistemi sa inkapsuliranim bioaktivnim makromolekulima
OA21631A (en) Lyotropic liquid crystalline nanosystems with encapsulated bioactive macromolecules.
CN117835969A (zh) 具有经封装的生物活性大分子的溶致液晶纳米系统
EA050595B1 (ru) Лиотропные жидкокристаллические наносистемы, содержащие капсулированные биологически активные макромолекулы
JP2011246464A (ja) ジクロフェナクナトリウムを封入した後眼部到達用ポリマーコーティングリポソーム
EP3337472A1 (en) Compositions for topical application comprising benzoyl peroxide and adapalene
WO2020058892A1 (en) Deformable liposomes containing micelles
GR1010501B (el) Νανοσυστηματα βιοδραστικων μακρομοριων σε μορφη νανοδομημενων λυοτροπικων υγρων κρυσταλλων
Jeong et al. Formulation issues around lipid-based oral and parenteral delivery systems
Jin et al. Effects of phospholipid and polyethylene glycol monostearate (100) on the in vitro and in vivo physico-chemical characterization of poly (n-butyl cyanoacrylate) nanoparticles
Kharia et al. Controlled release drug delivery system with stomach specific mucoadhesive nanoparticles