RS67518B1 - Farmaceutska kompozicija koja se koristi za redukciju lokalizovanog masnog tkiva i upotreba farmaceutske kompozicije - Google Patents

Farmaceutska kompozicija koja se koristi za redukciju lokalizovanog masnog tkiva i upotreba farmaceutske kompozicije

Info

Publication number
RS67518B1
RS67518B1 RS20251167A RSP20251167A RS67518B1 RS 67518 B1 RS67518 B1 RS 67518B1 RS 20251167 A RS20251167 A RS 20251167A RS P20251167 A RSP20251167 A RS P20251167A RS 67518 B1 RS67518 B1 RS 67518B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
pharmaceutical composition
curcumin
drug
group
nonionic surfactant
Prior art date
Application number
RS20251167A
Other languages
English (en)
Inventor
Yu-Fang Ling
Original Assignee
Caliway Biopharmaceuticals Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=58186932&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS67518(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from PCT/CN2015/088340 external-priority patent/WO2016029870A1/zh
Application filed by Caliway Biopharmaceuticals Co Ltd filed Critical Caliway Biopharmaceuticals Co Ltd
Publication of RS67518B1 publication Critical patent/RS67518B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/353—3,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/82—Theaceae (Tea family), e.g. camellia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
    • A61K36/9066—Curcuma, e.g. common turmeric, East Indian arrowroot or mango ginger
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/11—Encapsulated compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/34—Alcohols
    • A61K8/347—Phenols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/84—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds obtained by reactions otherwise than those involving only carbon-carbon unsaturated bonds
    • A61K8/86—Polyethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5015—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/06—Preparations for care of the skin for countering cellulitis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

[0001] Opis
[0003] OBLAST PRONALASKA
[0005] Predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju za redukciju lokalizovanog masnog tkiva, konkretno, odnosi se na farmaceutsku kompoziciju koji sadrži micele koje sadrže lek i kurkumin inkapsuliran u micele i farmaceutska kompozicija je za redukciju lokalizovanog masnog tkiva.
[0007] OSNOV PRONALASKA
[0009] Poslednjih godina ljudi sve više menjaju svoje viđenje lepote i dižu svoje standarde kad su u pitanju individualno zdravlje i oblik tela. Kao rezultat toga, ljudi se ne bave samo smanjenjem težine, već se više fokusiraju na redukciju lokalizovanog masnog tkiva ili oblikovanje tela kako bi bili zdraviji i postigli bolji oblik tela. Osim toga, uobičajeni režimi mršavljenja, bilo da se radi o dijeti ili vežbanju, ne mogu da smanje masno tkivo na određenoj lokaciji. Trenutno, ako postoji želja da se smanji lokalizovano masno tkivo na specifičnim lokacijama (kao što su struk, stomak, noge, ruke, brada i lice, itd.), jedina dostupna tehnologija je liposukcija.
[0010] U ovom trenutku liposukcija je najrasprostranjenija tehnologija za redukciju lokalizovanog masnog tkiva. Međutim, postupak liposukcije uzrokuje ozbiljna oštećenja nerava, krvnih sudova i drugih tkiva. Liposukcija je takođe praćena rizikom od infekcija, teškog krvarenja, produžene anestezije i nepredvidivih stanja opasnih po život, kao što su masna embolija i alergijske reakcije na anesteziju. Pored toga, uobičajena je pojava značajnih modrica i oticanja, jak bol, a postoperativni oporavak može da traje čak i 3 do 6 meseci, dok mesto liposukcije može da postane neujednačeno. Tako da su statističke analize pokazale da, iako su mnogi ljudi razmatrali liposukciju u cilju smanjenja akumulacije lokalizovanog potkožnog masnog tkiva ili poboljšanja oblina tela, manje od 40 procenata je zapravo prošlo kroz liposukciju. To pokazuje da klijente koji žele da poboljšaju obline tela ili redukuju lokalizovano masno tkivo, od liposukcije odvraćaju problemi sa neželjenim efektima, bolom nakon liposukcije ili rizicima od liposukcije.
[0011] [0004] Iako neke nehirurške lokalizovane farmaceutske kompozicije ili oprema za redukciju masnog tkiva mogu delimično smanjiti neželjene efekte, oni obično nisu efikasni i u vezi su sa drugim neželjenim efektima, kao što su nekroza okolnih normalnih ćelija, upala okolnih tkiva i oštar bol.Pored toga, mesta na koja mogu da se primenjuju su ograničena. Zbog toga na tržištu postoji urgentna potreba za efikasnom lokalizovanom farmaceutskom kompozicijom koja redukuje masno tkivo, a ima manje neželjenih efekata, bolji sigurnosni profil i kraći period oporavka.
[0012] Budući da je potražnja kod klijenata i lekara veoma velika, hitno je potreban razvoj farmaceutske kompozicije za redukciju lokalizovanog masnog tkiva, koja prevazilazi granice aktuelnih tehnologija.
[0013] Inhibitori adipogeneze i agensi za tretman masnog tkiva poznati su iz US 2005/267 221 A1, WO 2009/158248 A2, WO 2010/062824 A2, CN 103285 401 Ai WO 2015/081319 A2.
[0015] KRATAK OPIS PRONALASKA
[0017] Predmetni pronalazak je definisan u nezavisnim patentnim zahtevima.Poželjni primeri izvođenja predmetnog pronalaska su predmet zavisnih patentnih zahteva. S obzirom na nedostatke u prethodnom stanju tehnike, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju za redukciju lokalizovanog masnog tkiva, koji sadrži micele koje sadrže lekove napravljene od surfaktanata, i kurkumin inkapsuliran u navedenim micelama koje sadrže lekove. Farmaceutska kompozicija za redukciju lokalizovanog masnog tkiva može da smanji masno tkivo na mestu primene, i ima prednosti visoke stabilnosti, visoke bioraspoloživosti u masnom tkivu, malobrojnih neželjenih efekata i produženog oslobađanja.
[0018] Predmetni pronalazak može da pospeši apoptozu lokalnih adipocita na mestima primene, čime se postiže cilj redukcije lokalizovanog masnog tkiva. Predmetni pronalazak drastično poboljšava neželjene reakcije i neželjene efekte prethodnih tehnika, kao što su nekroza okolnih ćelija i zapaljenske reakcije. Predmetni pronalazak je pogodan za direktnu injekciju, potkožnu implantaciju, intravensku injekciju, implantiranu infuziju, kremu, flaster i druge metode sistemske isporuke apsorpcije kože za primenu na mestima koja zahtevaju redukciju masnog tkiva bez potrebe ili pomoći bilo koje operacije ili opreme. Poželjno, primenjuje se lokalno na potkožni sloj masnog tkiva, putem potkožne injekcije. Poželjno, formulacija za ubrizgavanje predmetne farmaceutske kompozicije uključuje, ali nije ograničena na prah za injekcije, ili prah za rastvor za injekcije. Lokalizovano masno tkivo koje se ovde pominje uključuje, ali nije ograničeno na masno tkivo na struku, nogama, rukama, bradi i licu.
[0019] U predmetnom pronalasku, termin "ekstrakt kurkume" odnosi se na mešavinu sastojaka kurkumina ekstrahovana bilo kojim rastvaračem i bilo kojom metodom ekstrakcije, komercijalno dostupnim ekstraktom kurkume, bilo kojom mešavinom koja sadrži najmanje 75% (tež.%) kurkumina, bilo kojom mešavinom koja sadrži najmanje 75% (tež.%) kurkuminoida ili komercijalno dostupnim kurkuminom.
[0020] Pri čemu je kurkuminoid kolektivni izraz za kurkumin, demetoksikurkumin i bisdemetoksikurkumin.
[0021] U predmetnom pronalasku, termin "resveratrol" se odnosi na resveratrol izvađen iz prirodnih biljaka ili komercijalno dostupan resveratrol. Poželjno, čistoća resveratrola je 90% do 100% (tež.%).
[0022] U predmetnom pronalasku, termin "ekstrakt zelenog čaja" odnosi se na mešavinu sastojaka zelenog čaja ekstrahovana bilo kojim rastvaračem i bilo kojom metodom ekstrakcije, komercijalno dostupnim ekstraktom zelenog čaja, bilo kojom mešavinom koja sadrži najmanje 45% epigalokatehin galata (EGCG) ili komercijalno dostupnim epigalokatehin galatom (EGCG).
[0023] U predmetnom pronalasku, termin "micelle" se odnosi na mikrostrukturu formiranu od surfaktanata, pri čemu svaki od surfaktanata ima hidrofilni kraj i hidrofobni (lipofilni) kraj, a surfaktanti su raspoređeni na način da su hidrofilni krajevi okrenuti prema spolja, a hidrofobni (lipofilni) krajevi okrenuti prema unutra da formiraju mikrostrukturu. Poželjno, mikrostruktura je sferna struktura, sferoidna struktura ili druge mikrostrukturne strukture.
[0024] U predmetnom pronalasku, termin "micele koje sadrže lekove" odnosi se na micele koje sadrže kurkuminoid. Poželjno, micele koje sadrže lekove odnose se na micele koje sadrže kurkumin; to jest, micele koje sadrže lekove odnose se na micele koje inkapsuliraju ili sadrže kurkuminoid. Poželjno, micele koje sadrže lekove odnose se na micele koje inkapsuliraju ili sadrže kurkumin.
[0025] U predmetnom pronalasku, termin "micele koje sadrže lek" odnosi se na micele koje sadrže bilo koji lipofilni lek osim kurkuminoida. To jest, druge micele koje sadrže lipofilni lek odnose se na micele koje sadrže inkapsuliran ili sadrže drugi lipofilni lek.
[0026] Pri čemu se termin "drugi lipofilni lek (ili drugi lipofilni lek)" odnosi na najmanje jedan od kvercetina, sinefrina, puerarina, resveratrola i bilo kog lipofilnog leka osim kurkuminoida ili njihove kombinacije. Ili, drugi lipofilni lek se odnosi na bilo koji lipofilni lek
[0027] osim kurkumina.http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6 &cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMAU &url=http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow monthly.php%3Fid%3Dtdares t dares_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQQV w [0017] U predmetnom pronalasku, termin "hidrofilni lek" odnosi se na najmanje jedan ekstrakt zelenog čaja, epigalokatehin galat, epikatehin galat, epikatehin galat, galokatehin galat, galokatehin, katehin galat, katehin, epigalokatehin galat (EGCG), kofein, karnitin, L-karnitin, sinefrin, hlorogenska kiselina i drugi hidrofilni lekovi, ili njihova kombinacija.
[0028] U predmetnom pronalasku, termin "stanje bez padavina", kako se ovde koristi, odnosi se na stanje u kojem se ne mogu posmatrati padavine golim okom, to jest, bez potrebe uz pomoć veštačkih instrumenata.
[0029] U predmetnom pronalasku, termin "lokalizovano potkožno masno tkivo" odnosi se na potkožno masno tkivo na mestu na koje se primenjuje farmaceutska kompozicija, formulacija za potkožnu injekciju ili formulacija za potkožnu injekciju u sloj masnog tkiva prema predmetnom pronalasku.
[0030] U predmetnom pronalasku, termin "farmaceutski prihvatljivo rešenje" je najmanje jedan od vode za injekcije, vodeni rastvor za injekcije, i normalan fiziološki rastvor, ili njihova kombinacija.
[0031] U predmetnom pronalasku, termin "lokalni anestetik" je najmanje jedan od amida, estera para-aminobenzojeve kiseline, amino etera i drugih lokalnih anestetika ili njihove kombinacije. Poželjno je da su amidi najmanje jedan od dibukaina, lidokaina, mepivakaina HCl, bupivacina HCl, pirokaina HCl, prilokaina HCl, digamakaina i oksetazaina ili njihove kombinacije. Poželjno, esteri para-aminobenzojeve kiseline su najmanje jedan od butakaina, dimetokaina i tutokaina, ili njihove kombinacije. Poželjno, amino etri su najmanje jedan od kinizokaina i pramocaina, ili njihova kombinacija.
[0032] U predmetnom pronalasku, termin "antioksidant" je najmanje jedan od beta-karotena, luteina, likopena, bilirubina, vitamina A, vitamina C (askorbinska kiselina), vitamina E, mokraćne kiseline, azotnog oksida, nitroksida, piruvata, katalaze, superoksid dismutaze, glutation peroksidaze, N-acetil cisteina, naringenina i drugih antioksidansa ili njihove kombinacije.
[0033] U predmetnom pronalasku, farmaceutska kompozicija ostaje u stanju bez taloga najmanje 24 sata kada je podvrgnut ubrzanom testu stabilnosti na 25°C±2°C, relativnoj vlažnosti 60% ± 5%, i u odsustvu direktne svetlost.
[0034] Ili, farmaceutska kompozicija ostaje u stanju bez taloga najmanje 6 meseci kada je podvrgnuta ubrzanom testu stabilnosti na 25°C±2°C, relativnoj vlažnosti 60% ± 5%, i u odsustvu direktne svetlost.
[0035] Predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja će se primenjivati na lokalnom mestu kod subjekta, a koja sadrži:
[0037] micele koje sadrže lekove; kurkuminoid; i farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant koji je polioksietilen ricinusovo ulje; pri čemu je odnos težine kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1: 8 - 1: 500; pri čemu je hidrofilno-lipofilna vrednost ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta veća od 10, i
[0038] pri čemu su micele koje sadrže lek mikrostrukture formirane od strane nejonskog surfaktanta i inkapsuliraju kurkuminoid.
[0040] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor, a navedene micele koje sadrže lek su ravnomerno raspoređene u navedenom farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru.
[0041] Poželjno, polioksietilen ricinusovo ulje je najmanje jedan od Kolliphor ELP (takođe poznat kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje, ili Cremophor ELP), cremophor RH 40 (takođe poznat kao polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili etoksilovano hidrogenizovano ricinusovo ulje), i druga polioksietilen ricinusova ulja, ili njihova kombinacija.
[0042] Poželjno, odnos težine kurkuminoida na polioksietilen ricinusovo ulje je 1: 20 ~ 1: 150.
[0043] Poželjno, koncentracija kurkuminoida u farmaceutskoj kompoziciji je 0.3 ~ 120 mg/g.
[0044] Poželjno, koncentracija kurkuminoida u farmaceutskoj kompoziciji je 2 ~ 91 mg/g.
[0045] Poželjno, prečnik micela koje sadrže lek je 3 ~ 50 nm.
[0046] Poželjno, prečnik micela koje sadrže lek je 5 ~ 20 nm.
[0047] Poželjno, kurkuminoid je kurkumin.
[0048] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži druge micele koje sadrže lipofilne lekove, a druge micele koje sadrže lipofilne lekove ravnomerno su raspoređene u farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru; druga micela koja sadrži lipofilni lek je druga mikrostruktura koju formira drugo polioksietilen ricinusovo ulje, a drugi lipofilni lek je inkapsuliran u pomenutim micelama koje sadrže drugi lek.
[0049] Poželjno, hidrofilno-lipofilna vrednost ravnoteže (HLB vrednost) drugog polioksietilen ricinusovog ulja je veća od 10.
[0050] Poželjno, drugo polioksietilen ricinusovo ulje je najmanje jedno od Kolliphor ELP (takođe poznat kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje, ili Cremophor ELP), cremophor RH 40, i druga polioksietilen ricinusova ulja, ili njihova kombinacija.
[0051] Poželjno, drugi lipofilni lek je najmanje jedno od kvercetina, sinefrina, puerarina, resveratrola i bilo kog drugog lipofilnog leka osim kurkuminoida, ili njihova kombinacija.http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6& cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMAU&u rl=http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow monthly.php%3Fid%3Dtdares tdar es_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQQVw [0038] Poželjno, odnos težine kurkuminoida prema drugom lipofilnom leku je 30: 1 ~ 1: 10.
[0052] Poželjno, odnos težine kurkuminoida prema drugom lipofilnom leku je 20: 1 ~ 1: 8.
[0053] Poželjno, farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor dalje sadrži hidrofilni lek.
[0054] U predmetnom pronalasku, termin "hidrofilni lek" odnosi se na najmanje jedan ekstrakt zelenog čaja, epigalokatehin galat, epikatehin galat, epikatehin galat, galokatehin galat, galokatehin, katehin galat, katehin, epigalokatehin galat (EGCG), kofein, karnitin, L-karnitin, sinefrin, hlorogenska kiselina i drugi hidrofilni lekovi, ili njihova kombinacija.
[0055] Poželjno, odnos težine kurkuminoida prema drugom lipofilnom leku je 30: 1 ~ 1: 10.
[0056] Poželjno, koncentracija epigalokatehin galata (EGCG) u farmaceutskoj kompoziciji je 0.1 ~ 15 mg/mL.
[0057] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži kosolvent za povećanje rastvorljivosti lekova.
[0058] Poželjno, kosolvent je najmanje jedan od polietilen glikola, propilen glikola, etanola i drugih korastvarača ili njihove kombinacije.
[0059] Poželjno, polietilen glikol je najmanje jedan od PEG 200, PEG 400, PEG 600, i drugih polietilen glikolo, ili njihova kombinacija.
[0060] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži sredstvo za suspenziju kako bi se smanjila brzina sedimentacije lekova ili micela.
[0061] Poželjno, sredstvo za suspenziju je najmanje jedan od natrijum alginata, glicerola, karboksimetilceluloze natrijuma, manitola i drugih sredstava za suspenziju ili njihove kombinacije.
[0062] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži kosolvent za povećanje rastvorljivosti lekova.
[0063] Poželjno, pomoćna supstanca u fazi ulja je najmanje jedna od nezasićenih masnih kiselina, glicerola, triglicerida i drugih pomoćnih materija u fazi ulja, ili njihove kombinacije.
[0064] Poželjno, nezasićene masne kiseline su najmanje jedna od oleinske kiseline, ricinusovo ulje, susamovo ulje, ulje pamuka, sojino ulje, ulje šafranike, kukuruzno ulje i druge nezasićene masne kiseline ili njihova kombinacija.
[0065] Poželjno, trigliceridi su najmanje jedan od triglicerida srednjeg lanca, i drugih triglicerida, ili njihova kombinacija.
[0066] Poželjno, farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor dalje sadrži hidrofilni lek.
[0067] Poželjno, farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor dalje sadrži antioksidans.
[0068] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje upotrebu farmaceutske kompozicije u skladu sa patentnim zahtevima 4 i 5.
[0069] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži druge micele koje sadrže lipofilne lekove, a druge micele koje sadrže lipofilne lekove ravnomerno su raspoređene u farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru; druga micela koja sadrži lipofilni lek je druga mikrostruktura koju formira drugo polioksietilen ricinusovo ulje, a drugi lipofilni lek je inkapsuliran u pomenutim micelama koje sadrže drugi lek.
[0070] Poželjno, drugi nejonski surfaktant je najmanje jedan od polioksietilen (20) sorbitan monooleat (polisorbat 80 ili Tween 80), solutol HS 15 (polioksil 15 hidroksistearat), polioksietilen ricinusovo ulje i druge nejonske površinski aktivne supstance, ili njihova kombinacija.
[0071] Poželjno, polioksietilen ricinusovo ulje je najmanje jedno od: Kolliphor ELP (takođe poznat kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP), polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje (Cremophor RH 40) i drugih polioksietilen ricinusovih ulja, ili njihova kombinacija.
[0072] Poželjno, farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor dalje sadrži hidrofilni lek.
[0073] Dalje je otkrivena upotreba farmaceutske kompozicije u pripremi leka ili formulacije zapotkožne injekcije za redukcijulokalizovanog potkožnog masnog tkiva; pri čemu farmaceutska kompozicijasadrži:
[0075] micele koje sadrže lek; i
[0076] kurkuminoid inkapsuliran u navedenim micelama koje sadrže lek;
[0078] pri čemu je micela koja sadrži lek mikrostruktura formirana od farmaceutski prihvatljivog nejonskog surfaktanta, a hidrofilno-lipofilna vrednost ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta je veća od 10.
[0079] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor, a navedene micele koje sadrže lek su ravnomerno raspoređene u navedenom farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru.
[0080] [0062] Poželjno, nejonski surfaktant je najmanje jedan od polioksietilen (20) sorbitan monooleata (polisorbat 80 ili Tween 80), solutola HS 15 (polioksil 15 hidroksistearat), polioksietilen ricinusovo ulje i druge nejonske površinski aktivne supstance, ili njihova kombinacija.
[0081] Poželjno, polioksietilen ricinusovo ulje je najmanje jedno od Kolliphor ELP (takođe poznat kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje, ili Cremophor ELP), polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje (Cremophor RH 40) i druga polioksietilen ricinusova ulja, ili njihova kombinacija.
[0082] Poželjno, odnos težine kurkuminoida i nejonskog surfaktanta je 1: 8 do 1: 500.
[0083] Poželjno, koncentracija kurkuminoida u farmaceutskoj kompoziciji je 0.3 ~ 120 mg/g.
[0084] Poželjno, prečnik micela koje sadrže lek je 3 ~ 50 nm.
[0085] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži druge micele koje sadrže lipofilne lekove, a druge micele koje sadrže lipofilne lekove ravnomerno su raspoređene u farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru; druga micela koja sadrži lipofilni lek je druga mikrostruktura koju formira drugo polioksietilen ricinusovo ulje, a drugi lipofilni lek je inkapsuliran u pomenutim micelama koje sadrže drugi lek.
[0086] Poželjno, vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) drugog nejonskog surfaktanta je veća od 10.
[0087] Poželjno, drugi nejonski surfaktant je najmanje jedno od, polioksietilen (20) sorbitan monooleata (polisorbata 80 ili Tween 80), solutola HS 15 (polioksil 15 hidroksistearata), polioksietilen ricinusovih ulja i drugih nejonskih površinski aktivnih supstanci, ili njihova kombinacija.
[0088] Poželjno, drugi nejonski surfaktant je najmanje jedno od Koliphor ELP (takođe poznat kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP), polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje (Cremophor RH 40) i druga polioksietilen ricinusova ulja, ili njihova kombinacija.
[0089] Poželjno, drugi lipofilni lek je najmanje jedno od kvercetina, sinefrina, puerarina, resveratrola i bilo kog drugog lipofilnog leka osim kurkuminoida, ili njihova kombinacija.http://www.google.com.tw/url? sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6& cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMAU&u rI=http%3 A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow_monthly.php%3Fid%3Dtdares_tdar es_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQQVw [0072] Poželjno, težinski odnos kurkuminoida i drugog lipofilnog leka je 30:1 ~ 1:10.
[0090] Poželjno, težinski odnos kurkuminoida i lipofilnog leka je 20:1 ~ 1:8.
[0091] Poželjno, farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor dodatno sadrži hidrofilni lek.
[0092] Poželjno, hidrofilni lek je najmanje jedno od ekstrakta zelenog čaja, epigalokatehin galata, epikatehina, epikatehin galata, epigalokatehina, galokatehin galata, galokatehina, katehin galata, katehina, epigalokatehin galata (EGCG), kofeina, karnitina, L-karnitina, sinefrina, hlorogenske kiseline i drugih hidrofilnih lekova, ili njihove kombinacije.
[0093] Poželjno, težinski odnos kurkuminoida i hidrofilnog leka je od 30:1 do 1:10.
[0094] Poželjno, težinski odnos kurkuminoida i hidrofilnog leka je od 20:1 do 1:8
[0095] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju, formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, rastvor za implantiranu infuziju, formulacija u kremi, formulacija u flasteru ili drugi sistemi za isporuku koji se apsorbuju kroz kožu.
[0096] Poželjno, lek se primenjuje na mestu primene kako bi se redukovalo potkožno masno tkivo na mestu primene.
[0097] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se ubrizgava na lokalnom mestu je 0.02 ~ 20 mg/cm<2>.∘
[0098] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se ubrizgava na lokalnom mestu je 0.04 ~ 16 mg/cm<2>.
[0099] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se ubrizgava na lokalnom mestu je 0.01 ~ 40 mg/kg.
[0100] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se ubrizgava na lokalnom mestu je 0.1 ~ 20 mg/kg.
[0101] Poželjno, učestalost doziranja leka koji se primenjuje na mestu primene je 1~12 puta svakog drugog dana do svakih 30 dana.
[0102] Poželjno, učestalost doziranja leka koji se primenjuje na mestu primene je 1~6 puta svakog drugog dana do svakih 30 dana.
[0103] Poželjno, kurkuminoid je kurkumin.
[0104] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži najmanje jedno od korastvarača, sredstva za suspendovanje i ekscipijensa uljane faze, ili njihovu kombinaciju.
[0105] Poželjno, mikrostruktura je zajednički formirana od strane nejonskog surfaktanta i najmanje jednog od ekscipijensa uljane faze i korastvarača.
[0106] [0089] Dalje je otkrivena upotreba farmaceutske kompozicije u pripremi leka ili formulacije za potkožnu injekciju za redukciju težine; pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži: micele koje sadrže lek; i
[0107] kurkuminoid inkapsuliran u navedenim micelama koje sadrže lek;
[0109] pri čemu je micela koja sadrži lek mikrostruktura koju formira farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant, a vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta je veća od 10.
[0110] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor, a navedene micele koje sadrže lek su ravnomerno raspoređene u navedenom farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru.
[0111] Poželjno, kurkuminoid je kurkumin.
[0112] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži druge micele koje sadrže lipofilne lekove, a druge micele koje sadrže lipofilne lekove ravnomerno su raspoređene u farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru; pri čemu je druga lipofilna micela koja sadrži lek druga mikrostruktura koju formira drugi nejonski surfaktant, drugi lipofilni lek je inkapsuliran u navedenim micelama koje sadrže drugi lipofilni lek, a drugi lipofilni lek je najmanje jedan kvercetina, sinefrina, puerarina, resveratrola i bilo kog drugog lipofilnog leka osim kurkuminoida ili njihove kombinacije.http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6& cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMAU&u rl=http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow monthly.php%3Fid%3Dtdares tdar es_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQQVw [0093] Poželjno, farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor dodatno sadrži hidrofilni lek, a hidrofilni lek je najmanje jedno od ekstrakta zelenog čaja, epigalokatehin galata, epikatehina, epikatehin galata, epigalokatehina, galokatehin galata, galokatehina, katehin galata, katehina, epigalokatehin galata (EGCG), kofeina, karnitina, L-karnitina, sinefrina, hlorogenske kiseline i drugih hidrofilnih lekova, ili njihove kombinacije.
[0113] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se ubrizgava na lokalnom mestu je 0.2 ~ 16 mg/cm<2>.
[0114] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se ubrizgava na lokalnom mestu je 0.4 ~ 8 mg/cm<2>.
[0115] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju, formulacija za intravensku injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se primenjuje je 0.4 ~ 40 mg/kg.
[0116] Poželjno, formulacija leka je formulacija za potkožnu injekciju, formulacija za intravensku injekciju ili formulacija za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, a primenjena doza leka koja se ubrizgava je 0.8 ~ 20 mg/kg.
[0117] Poželjno, učestalost doziranja leka koji se primenjuje na mestu primene je 3~60 puta svakog drugog dana do svakih 20 dana.
[0118] Poželjno , učestalost doziranja leka koji se primenjuje na mestu primene je 6~42 puta svakog drugog dana do svakih 14 dana.
[0119] Poželjno, farmaceutska kompozicija dalje sadrži najmanje jedno od korastvarača, sredstva za suspendovanje i ekscipijensa uljane faze ili njihovu kombinaciju.
[0120] Poželjno, mikrostrukturu koformiraju nejonski surfaktant i najmanje jedno od ekscipijensa u uljnoj fazi i korastvarača.
[0121] Dalje je otkriven postupak za redukciju potkožnog masnog tkiva na lokalnom mestu kod subjekta, koji obuhvata korak primene farmaceutske kompozicije na lokalnom mestu kod subjekta, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži:
[0123] micele koje sadrže lek; i
[0124] kurkuminoid inkapsuliran u navedenim micelama koje sadrže lek;
[0126] pri čemu je micela koja sadrži lek mikrostruktura koju formira farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant, a vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta je veća od 10.
[0127] Poželjno, korak se sastoji od lokalne primene farmaceutske kompozicije kod subjekta pomoću formulacije za potkožnu injekciju, formulacije za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, rastvora za implantiranu infuziju, formulacije u obliku kreme, formulacije u obliku flastera ili drugih sistema za isporuku koji se apsorbuju kroz kožu.
[0128] Poželjno, primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.02 ~ 20 mg/cm<2>.
[0129] Poželjno, primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.01 ~ 40 mg/kg.
[0130] Poželjno, učestalost doziranja farmaceutske kompozicije koja se primenjuje na lokalnom mestu kod subjekta je 1~12 puta svakog drugog danado svakih 30 dana.
[0131] Dalje je opisan postupak za smanjenje telesne težine subjekta, koji obuhvata korak primene farmaceutske kompozicije subjektu, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži:
[0132] micele koje sadrže lek; i
[0133] kurkuminoid inkapsuliran u navedenim micelama koje sadrže lek;
[0135] pri čemu je micela koja sadrži lek mikrostruktura koju formira farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant, a vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta je veća od 10.
[0136] Poželjno, farmaceutska kompozicija se primenjuje na lokalnom mestu kod subjekta pomoću formulacije za potkožnu injekciju, formulacije za intravensku injekciju ili formulacije za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva.
[0137] Poželjno, primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.2 ~ 16 mg/cm<2>.
[0138] Poželjno, primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.4 ~ 40 mg/kg.
[0139] Poželjno, učestalost doziranja farmaceutske kompozicije koji se primenjuje na lokalno mesto kod subjekta je 3~60 puta svakog drugog dana do svakih 20 dana.
[0140] Poželjno, korak je da se farmaceutska kompozicija primeni na lokalno mesto kod subjekta pomoću formulacije za potkožnu injekciju, formulacije za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, formulacije za intravensku injekciju, rastvora za implantiranu infuziju, kreme, flastera ili drugih sistema za isporuku koji se apsorbuju preko kože.
[0142] KRATAK OPIS CRTEŽA
[0144]
[0146] Slika 1A: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte ekstrakta kurkume na količinu potkožnog masnog tkiva kod pacova putem oralne primene
[0147] Slika 1B: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte ekstrakta kurkume na ukupno povećanje telesne težine pacova putem oralne primene
[0148] Slika 2A: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacija za potkožnu injekciju sa kurkuminom, pripremljenih sa različitim ekscipijensima, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0149] Slika 2B: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacija za potkožnu injekciju sa kurkuminom, pripremljenih sa različitim ekscipijensima, na ukupno povećanje telesne težine pacova
[0150] Slika 3: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte micela na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0151] Slika 4: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte micela na ukupnu telesnu težinu pacova
[0152] Slika 5: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacije za potkožnu injekciju sa resveratrolom, bez ekscipijensa, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0153] Slika 6: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacija sa kompleksom kurkumin-resveratrol za potkožnu injekciju, pripremljenih sa različitim ekscipijensima, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0154] Slika 7: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte jednostavnih formulacija za potkožnu injekciju, sa kurkuminom, resveratrolom i formulacije sa kompleksom kurkuminresveratrol, pripremljenih sa različitim ekscipijensima, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0155] Slika 8A: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0156] Slika 8B: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol na ukupnu telesnu težinu pacova Slika 9: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte primenjene doze farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0157] Slika 10: Efekti farmaceutskih kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek na apoptozu zrelih adipocita
[0158] Slika 11: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacije za potkožnu injekciju, sa ekstraktom zelenog čaja, bez ekscipijensa, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0159] Slika 12A: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0160] Slika 12B: Grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja na ukupnu telesnu težinu pacova
[0161] Slika 13: Efekti farmaceutskih kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi hidrofilni lek na apoptozu zrelih adipocita
[0163] DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0165] Eksperiment 1: Efekti oralno primenjenog ekstrakta kurkume na količinu potkožnog masnog tkiva i telesnu težinu pacova
[0167] Oralna tečnost sa ekstraktom kurkume je pripremljena na sledeći način: Odgovarajuća količina sterilne vode za injekcije je dodata u odgovarajuću količinu ekstrakta kurkume i dobro promešana da bi se dobila oralna tečnost sa ekstraktom kurkume.
[0168] Za eksperiment su korišćeni mužjaci pacova Sprague-Dawley stari sedam nedelja. Najpre je 12 pacova hranjeno hranom koja je bogata mastima (Research Diets, Inc.; kat. br. D12492) kako bi se indukovalo nakupljanje potkožnog masnog tkiva, dok svaki pacov nije težio 330±10 g, a pacovi su nasumično raspoređeni u dve grupe, koje su bile kontrolna grupa sa hranom bogatom mastima i grupa koja je oralno primala ekstrakt kurkume, sa 6 pacova u svakoj grupi tako da nije bilo statističke razlike u telesnoj težini između grupa. Telesna težina svakog pacova je zabeležena i definisana kao „telesna težina pre eksperimenta“ svakog pacova. Zatim su lekovi primenjeni na sledeći način:
[0169] Grupa koja je oralno primenjivala ekstrakt kurkume: pacovi su svakodnevno hranjeni hranom bogatom mastima i dobijali su tečni ekstrakt kurkume putem oralne gavaže, a primenjena doza ekstrakta kurkume bila je 100 mg/kg/dan, i pacovi su hranjeni 20 uzastopnih dana. Koncentracija kurkumina u tečnom ekstraktu kurkume za oralnu primenu je 95% (tež.%).
[0170] Kontrola hranjena visokim sadržajem masti: pacovi su svakodnevno dobijali hranu sa visokim sadržajem masti, ali nisu hranjeni ekstraktom kurkume.
[0171] Promene telesne težine zabeležene su svakodnevno tokom perioda eksperimenta, a potrošnja vode i hrane zabeležena je nedeljno. Pacovi su postili 20. dana i eutanazirani 21. dana.
[0172] [0119] Telesna težina svakog pacova je zabeležena i definisana kao „telesna težina nakon eksperimenta“ za svakog pacova. "Ukupan porast telesne težine" svakog pacova dobijen je oduzimanjem njegove "telesne težine pre eksperimenta" od "telesne težine nakon eksperimenta". Na kraju su bilateralno donji ingvinalni potkožni masni jastučići secirani i izmereni i izračunata je količina ingvinalnog masnog tkiva za svaku grupu. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SD i statistički analizirani. Statistički rezultati su prikazani kao simboli ili slova, gde različiti simboli ili slova označavaju statistički značajnu razliku (p<0.05), a identični simboli ili slova označavaju odsustvo statističke značajnosti (p>0.05).
[0173] Molimo pogledajte sliku 1A i sliku 1B. Slika 1A je stubičasti grafikon koji prikazuje efekat ekstrakta kurkume na količinu potkožnog masnog tkiva kod pacova putem oralne primene. Pri čemu je pomenuta ingvinalna potkožna mast ukupna količina bilateralnog ingvinalnog potkožnog mastnog tkiva. Slika 1B je stubičasti grafikon koji prikazuje efekte ekstrakta kurkume na ukupno povećanje telesne težine kod pacova putem oralne primene.
[0174] Kao što je prikazano na slici 1A, ingvinalno potkožno masno tkivo kod pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima je 6.4±1.5 g, a ingvinalno potkožno masno tkivo kod pacova u grupi koja je oralno primala ekstrakt kurkume je 6.1±0.8 g, i ne postoji statistička značajnost između grupa (p > 0.05). Ovo je pokazalo da oralna primena ekstrakta kurkume ne može da redukuje lokalizovano masno tkivo
[0175] Kao što je prikazano na slici 1B, ukupno povećanje telesne težine pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima je 135±12 g, a ukupno povećanje telesne težine pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima je 142±10 g, i nije bilo statističke značajnosti između grupa (p> 0.05). Ovo je pokazalo da oralna primena ekstrakta kurkume ne može da redukuje telesnu težinu.
[0176] Prethodno navedeni eksperimenti su pokazali da oralno primenjeni ekstrakt kurkume ne može da redukuje lokalizovano masno tkivo niti može da smanji telesnu težinu. Kako bi rešio ovaj problem, pronalazač je sproveo dalja istraživanja kako bi razvio farmaceutska kompozicija koji sadrži kurkumin i formulaciju za potkožnu injekciju.
[0178] Eksperiment 2: Efekti formulacije sa kurkuminom za potkožnu injekciju na količinu potkožnog masnog tkiva i telesnu težinu pacova
[0180] Fiziološki rastvor sa kurkuminom, PEG rastvor sa kurkuminom i ELP rastvor sa kurkuminom pripremljeni su na sledeći način:
[0182] Priprema fiziološkog rastvora sa kurkuminom:
[0183] 450 mg kurkumina je pomešano sa odgovarajućom količinom fiziološkog rastvora za injekcije do ukupne zapremine od 90 ml. Rastvor je dobro promešan da bi se kurkumin potpuno rastvorio i dobio fiziološki rastvor sa kurkuminom, a koncentracija kurkumina u navedenom fiziološkom rastvoru sa kurkuminom je bila 5 mg/ml.
[0184] Priprema PEG rastvora sa kurkuminom.
[0185] 15 g polietilen glikola 400 (PEG 400) i 15 g glicerola pomešano je sa odgovarajućom količinom normalnog fiziološkog rastvora za injekcije do ukupne zapremine od 100 ml. Rastvor je dobro promešan da bi se PEG 400 i glicerol potpuno rastvorili i dobila smeša PEG i glicerola. 450 mg kurkumina pomešano je sa odgovarajućom količinom smeše PEG i glicerola do ukupne zapremine od 90 ml. Rastvor je dobro promešan da bi se kurkumin potpuno rastvorio i dobio PEG rastvor sa kurkuminom. Koncentracija kurkumina u navedenom PEG rastvoru kurkumina bila je 5 mg/ml.
[0186] Priprema ELP rastvora sa kurkuminom:
[0187] 450 mg kurkumina je pomešano sa 80~140 ml dihlorometana i mešano brzinom od 150~500 o/min na sobnoj temperaturi dok se kurkumin nije potpuno rastvorio. 18 g Kolliphor ELP (takođe poznatog kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP, skraćeno ELP) je dodato u rastvor i dobro mešano brzinom od 100~300 o/min kako bi dihlorometan ispario. Kada je dihlorometan potpuno ispario, polako je dodat fiziološki rastvor za injekcije do ukupne zapremine od 90 ml i rastvor je dobro promešan da bi se dobio ELP rastvor sa kurkuminom. U navedenom ELP rastvoru sa kurkuminom, koncentracija kurkumina je bila 5 mg/ml, koncentracija ELP je bila približno 20% (tež.%), a težinski odnos kurkumina i ELP je bio 1:40.
[0189] Za eksperiment su korišćeni mužjaci pacova Sprague-Dawley stari šest nedelja. Najpre je 20 pacova hranjeno hranom bogatom mastima (Research Diets, Inc.; kat. br. D12492) kako bi se izazvalo nakupljanje potkožnog masnog tkiva. Hranjenje je nastavljeno dok svaki pacov nije težio 330±10 g, a pacovi su nasumično raspoređeni u četiri grupe, koje su bile kontrolna grupa, grupa sa normalnim fiziološkim rastvorom, PEG grupa i ELP grupa, sa 5 pacova u svakoj grupi, tako da nije bilo statističke razlike u telesnoj težini između grupa. Telesna težina svakog pacova je zabeležena i definisana kao „telesna težina pre eksperimenta“ svakog pacova. Zatim su lekovi primenjeni na sledeći način:
[0190] Normalni fiziološki rastvor sa kurkuminom, PEG rastvor sa kurkuminom i ELP rastvor sa kurkuminom ubrizgani su u ingvinalne potkožne masne jastučiće pacova u grupi sa normalnim fiziološkim rastvorom, PEG grupi i ELP grupi, respektivno. Zapremina svake injekcije bila je 4 mL po kilogramu telesne težine (4 mL/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 20 mg kurkumina po kilogramu telesne težine (20 mg/kg; 4 mL/kg x 5 mg/ml = 20 mg/kg). Pacovima u kontrolnoj grupi ubrizgana je ista zapremina normalnog fiziološkog rastvora na isti način kao što je prethodno u tekstu opisano.
[0191] [0127] Mesta ubrizgavanja pomenuta prethodno u tekstu bila su donji ingvinalni masni jastučići pacova. Bilateralne injekcije su davane ravnomerno jednom dnevno 1, 2, 3 i 4. dana eksperimenta. Pacovi su hranjeni hranom bogatom mastima tokom celog trajanja eksperimenta. Njihove promene težine su beležene svakodnevno, a unos hrane i vode je beležen nedeljno. Eksperiment je trajao 14 dana i pacovi su eutanazirani pomoću CO<2>15. dana.
[0192] Telesna težina svakog pacova je zabeležena i definisana kao „telesna težina nakon eksperimenta“ za svakog pacova. „Ukupno povećanje telesne težine“ svakog pacova dobijeno je oduzimanjem njegove „telesne težine pre eksperimenta“ od njegove „telesne težine nakon eksperimenta“. „Relativno povećanje telesne težine“ dobijeno je deljenjem ukupnog povećanja telesne težine svake grupe sa ukupnim povećanjem telesne težine kontrolne grupe.
[0193] Bilateralni donji ingvinalni potkožni masni jastučići pacova su disecirani i mereni, a težine bilateralnih donjih ingvinalnih potkožnih masnih jastučića su sabrane da bi se izračunala količina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva. Količina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva svake grupe je podeljena sa količinom donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kontrolne grupe da bi se dobila „relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva“.
[0194] Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± standardna devijacija i analizirani jednofaktorskom ANOVA analizom. Statistički rezultati su prikazani kao simboli ili slova. Različiti simboli ili slova ukazuju na statistički značajnu razliku (p<0.05), a identični simboli ili slova ukazuju na odsustvo statistički značajne razlike (p>0.05).
[0195] Molimo pogledajte sliku 2A i sliku 2B. Slika 2A je grafikon koji prikazuje efekte formulacija za potkožnu injekciju sa kurkuminom, koje su pripremljene sa različitim pomoćnim supstancama, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova. Slika 2B je grafikon koji prikazuje efekte formulacija za potkožnu injekciju sa kurkuminom, koje su pripremljene sa različitim pomoćnim supstancama, na ukupno povećanje telesne težine kod pacova.
[0196] Kao što je prikazano na slici 2A, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u kontrolnoj grupi bila je 100±27.6%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa normalnim fiziološkim rastvorom bila je 99.8±8.0%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u PEG grupi bila je 93.6±5.8%, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u ELP grupi bila je 62.8±20.5%. Nije bilo značajne razlike u relativnoj težini donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva između normalnog fiziološkog rastvora i kontrolne grupe, što sugeriše da direktna injekcija kurkumina u sloj potkožnog masnog tkiva na mestu primene ne može da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo).
[0197] Nije bilo značajne razlike u relativnoj težini donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva između PEG grupe i kontrolne grupe; relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva ELP grupe bila je značajno različita (p<0.05) od one kod kontrolne grupe, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u ELP grupi je smanjena za 37.2%.
[0198] Kao što je prikazano na slici 2B, relativno povećanje telesne težine pacova u kontrolnoj grupi bilo je 100.0±30.8%, relativno povećanje telesne težine pacova u grupi sa normalnim fiziološkim rastvorom bilo je 110.0±18.7%, relativno povećanje telesne težine pacova u PEG grupi bilo je 112.5±20.7%, a relativno povećanje telesne težine pacova u ELP grupi bilo je 87.1±33.1%. Nije bilo statističke značajnosti između četiri grupe (p>0.05), ali je telesna težina pacova u ELP grupi bila 12.9% manja od telesne težine pacova u kontrolnoj grupi, što ukazuje na trend gubitka telesne težine kod pacova u ELP grupi.
[0199] Gore navedeni eksperimenti su pokazali da direktna injekcija kurkumina u potkožni sloj masnog tkiva na mestu primene ne može da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo), niti može da smanji telesnu težinu. Direktna injekcija kompozicije sa kurkuminom koja sadrži ekscipijens PEG (uobičajeno korišćeno sredstvo za suspendovanje) u potkožni sloj masnog tkiva na mestu primene, ne može da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo), niti može da smanji telesnu težinu; međutim, injekcija kompozicije sa kurkuminom koja sadrži nejonski surfaktant ELP, u potkožni sloj masnog tkiva na mestu primene, ne samo da može da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo), već može i da dovede do trenda gubitka telesne težine. Stoga je potrebno dalje istražiti da li smeša sa kurkuminom mora da sadrži nejonske surfaktante kako bi se redukovalo masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo) i smanjila telesna težina
[0200] Dalja analiza pokazala je da nije bilo micela u prethodno navedenom kurkumin PEG rastvoru, ali je bilo micela u kurkumin ELP rastvorui kurkumin je bio inkapsuliran u micelama koje su formirane od ELP. Stoga, neophodno je dalje istražiti efekat micela na redukciju lokalizovanog masnog tkiva i smanjenje telesne težine.
[0202] Eksperiment 3: Efekti jednostavne formulacije za potkožnu injekciju sa kurkuminom na količinu potkožnog masnog tkiva i telesnu težinu pacova
[0204] Delimična micelarna formulacija kurkumina, delimična micelarna formulacija kurkumina HS-15, micelarna formulacija kurkumina ELP i micelarna formulacija kurkumina HS-15 su pripremljene na sledeći način:
[0205] Priprema delimične micelarne formulacije kurkumina ELP: 20 g Kolliphor ELP (takođe poznatog kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP, skraćeno ELP) pomešano je sa odgovarajućom količinom normalnog fiziološkog rastvora za injekcije do ukupne težine od 100 g. Rastvor je dobro promešan kako bi se ELP potpuno rastvorio i dobio 20% rastvor ELP. 400 mg kurkumina pomešano je sa odgovarajućom količinom 20% rastvora ELP do ukupne težine od 80 g. Rastvor je dobro promešan da bi se kurkumin potpuno rastvorio i dobila delimična micelarna formulacija kurkumina ELP. Koncentracija kurkumina u navedenoj delimično micelarnoj formulaciji kurkumina ELP bila je približno 5 mg/ml, koncentracija ELP bila je približno 20%, a težinski odnos kurkumina i ELP bio je približno 1:40.
[0206] Priprema parcijalne micelarne formulacije kurkumina HS-15: 20 g Kolliphor HS-15 (HS-15) je pomešano sa odgovarajućom količinom normalnog fiziološkog rastvora za injekcije do ukupne težine od 100 g. Rastvor je dobro promešan da bi se HS-15 potpuno rastvorio i dobio 20% rastvor HS-15. 400 mg kurkumina pomešano je sa odgovarajućom količinom 20% rastvora HS-15 do ukupne težine od 80 g. Rastvor je dobro promešan da bi se kurkumin potpuno rastvorio i dobio delimičnu micelarnu formulaciju kurkumina HS-15. Koncentracija kurkumina u navedenoj delimično micelarnoj formulaciji kurkumina HS-15 bila je približno 5 mg/ml, koncentracija ELP bila je približno 20% (tež.%), a težinski odnos kurkumina i HS-15 bio je približno 1:40.
[0207] Priprema micelarne formulacije kurkumina ELP: isto kao i priprema ELP rastvora kurkumina u eksperimentu 2.
[0208] Priprema micelarne formulacije kurkumina HS-15: 500 mg kurkumina je pomešano sa 80~140 ml dihlorometana i mešano brzinom od 150~500 o/min na sobnoj temperaturi dok se kurkumin potpuno nije rastvorio. Dodato je 20 g Kolliphor HS-15 (HS-15) i mešano brzinom od 100~300 o/min da bi se ispario dihlorometanom. Nakon što je dihlorometanom potpuno ispario, polako je dodat fiziološki rastvor za injekcije do ukupne zapremine od 100 g. Rastvor je dobro promešan da bi se formirale micele koje sadrže lek i dobila micelarna formulacija kurkumina HS-15. Koncentracija kurkumina u navedenoj micelarnoj formulaciji kurkumina HS-15 bila je približno 5 mg/ml, koncentracija HS-15 bila je približno 20%, a težinski odnos kurkumina i HS-15 bio je približno 1:40.
[0209] Delimična micelarna formulacija kurkumina ELP, delimična micelarna formulacija kurkumina HS-15, micelarna formulacija kurkumina ELP i micelarna formulacija kurkumina HS-15 analizirane su analizatorom veličine čestica kako bi se utvrdilo da li su micele prisutne, i izmereni su prečnici micela.
[0210] Rezultati su pokazali da su i parcijalna micelarna formulacija kurkumina ELP i parcijalna micelarna formulacija kurkumina HS-15 imale precipitate leka (precipitate kurkumina) i manji broj micela koje sadrže lek. Nasuprot tome, micelarna formulacija kurkumina ELP i micelarna formulacija kurkumina HS-15 bile su bistre bez ikakvog raslojavanja i imale su veći broj micela koje sadrže lek.
[0211] Pored toga, prečnici čestica micela u delimično micelarnoj formulaciji kurkumina ELP, delimično micelarnoj formulaciji kurkumina HS-15, micelarnoj formulaciji kurkumina ELP i micelarnoj formulaciji kurkumina HS-15 bili su 13.16±0.18 nm, 13.18±1.45 nm, 12.43±0.40 nm i 11.46±0.41 nm, respektivno, a vrednosti PDI bile su 0.22±0.03, 0.18±0.05, 0.28±0.05 i 0.18±0.04, respektivno.
[0212] Rezultati su pokazali da, iako su i delimična micelarna formulacija kurkumina ELP i delimična micelarna formulacija kurkumina HS-15 imale precipitate leka (precipitate kurkumina), njihovi supernatanti su i dalje sadržali micele (prečnika < 250 nm i PDI vrednosti < 0.4). Dakle, delimična micelarna formulacija kurkumina ELP, delimična micelarna formulacija kurkumina HS-15, micelarna formulacija kurkumina ELP i micelarna formulacija kurkumina HS-15 su sve farmaceutske kompozicije prema predmetnom pronalasku.
[0213] Za eksperiment su korišćeni mužjaci pacova Sprague-Dawley stari šest nedelja. Najpre je 20 pacova hranjeno hranom bogatom mastima (Research Diets, Inc.; kat. br. D12492) kako bi se izazvalo nakupljanje potkožnog masnog tkiva. Hranjenje je nastavljeno dok svaki pacov nije težio 330±10 g, a pacovi su nasumično raspoređeni u 5 grupa, koje su bile kontrolna grupa, ELP parcijalna micelarna grupa, HS-15 parcijalna micelarna grupa, ELP micelarna grupa i HS-15 micelarna grupa, sa 4 pacova u svakoj grupi tako da nije bilo statističke razlike u telesnoj težini između grupa. Telesna težina svakog pacova je zabeležena i definisana kao „telesna težina pre eksperimenta“ svakog pacova. Zatim su lekovi primenjeni na sledeći način:
[0214] [0145] Delimična micelarna formulacija kurkumina ELP, delimična micelarna formulacija kurkumina HS-15, micelarna formulacija kurkumina ELP i micelarna formulacija kurkumina HS-15 su svaka pripremljena i dobro izmešana (da bi se ravnomerno suspendovali talozi u delimičnim micelarnim formulacijama), i ubrizgane su u donji ingvinalni potkožni masni sloj pacova u grupi sa delimičnom micelarnom ELP, grupi sa delimičnom micelarnom HS-15, micelarnoj grupi ELP i micelarnoj grupi HS-15, respektivno. Zapremina svake injekcije bila je 4 ml po kilogramu telesne težine (4 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 20 mg kurkumina po kilogramu telesne težine (20 mg/kg; 4 ml/kg x 5 mg/ml = 20 mg/kg). Pacovima u kontrolnoj grupi ubrizgana je ista zapremina normalnog fiziološkog rastvora na isti način opisan gore.
[0215] Gore pomenuta mesta ubrizgavanja bila su donji ingvinalni masni jastučići pacova. Bilateralne injekcije su davane ravnomerno jednom dnevno 1, 2, 3, 4, 5. i 6. dana eksperimenta. Pacovi su hranjeni hranom bogatom mastima tokom celog trajanja eksperimenta. Njihove promene težine su beležene svakodnevno, a unos hrane i vode je beležen nedeljno. Eksperiment je trajao 14 dana, a pacovi su eutanazirani pomoću CO<2>15. dana.
[0216] Telesna težina svakog pacova je zabeležena i definisana kao „telesna težina nakon eksperimenta“ za svakog pacova. „Ukupno povećanje telesne težine“ svakog pacova dobijeno je oduzimanjem njegove „telesne težine pre eksperimenta“ od njegove „telesne težine nakon eksperimenta“. „Relativno povećanje telesne težine“ dobijeno je deljenjem ukupnog povećanja telesne težine svake grupe sa ukupnim povećanjem telesne težine kontrolne grupe.
[0217] Bilateralni donji ingvinalni potkožni masni jastučići pacova su disecirani i mereni, a težine bilateralnih donjih ingvinalnih potkožnih masnih jastučića su sabrane da bi se izračunala količina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva. Količina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva svake grupe podeljena je sa količinom donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kontrolne grupe da bi se dobila "relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva".
[0218] Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SD i analizirani jednofaktorskom ANOVA analizom. Statistički rezultati su prikazani kao simboli ili slova. Različiti simboli ili slova označavaju statistički značajnu razliku (p<0.05), a identični simboli ili slova označavaju odsustvo statističke značajnosti (p>0.05).
[0219] Na osnovu metoda pripreme formulacije i rezultata gore navedene analize veličine čestica, koncentracija ELP i koncentracija kurkumina u parcijalnoj micelarnoj formulaciji kurkumina ELP bili su identični onima u micelarnoj formulaciji kurkumina ELP, samo se broj micela koje sadrže lek razlikovao. Dakle, u poređenju sa kontrolnom grupom, ako parcijalna micelarna formulacija kurkumina ELP ne može značajno da redukuje lokalizovano masno tkivo na mestu primene, ali micelarna formulacija kurkumina ELP može značajno da redukuje lokalizovano masno tkivo na mestu primene, to ukazuje da je formiranje micela koje sadrže lek kritični faktor za sposobnost kompozicija sa kurkuminom da značajno smanje lokalizovano masno tkivo na mestu primene.
[0220] [0151] Slično tome, koncentracija HS-15 i koncentracija kurkumina u parcijalnoj micelarnoj formulaciji kurkumina HS-15 bile su identične onima u micelarnoj formulaciji kurkumina HS-15, samo se broj micela koje sadrže lek razlikovao. Dakle, u poređenju sa kontrolnom grupom, ako parcijalna micelarna formulacija kurkumina HS-15 ne može značajno da redukuje lokalizovano masno tkivo na mestu primene, ali micelarna formulacija kurkumina HS-15 može značajno da redukuje lokalizovano masno tkivo na mestu primene, to ukazuje da je formiranje micela koje sadrže lek kritični faktor za sposobnost kompozicija sa kurkuminom da značajno smanje lokalizovano masno tkivo na mestu primene.
[0221] S druge strane, koncentracija ELP i koncentracija kurkumina u parcijalnoj micelarnoj formulaciji kurkumina ELP bile su identične onima u micelarnoj formulaciji kurkumina ELP, razlikovao se samo broj micela koje sadrže lek. Dakle, u poređenju sa kontrolnom grupom, ako parcijalna micelarna formulacija kurkumina ELP ne može značajno da smanji telesnu težinu, ali micelarna formulacija kurkumina ELP može značajno da smanji telesnu težinu, to ukazuje da je formiranje micela koje sadrže lek kritični faktor za sposobnost kompozicija kurkumina da značajno smanje telesnu težinu.
[0222] Molimo pogledajte sliku 3. Slika 3 je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekat micela na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova. Na slici 3, y-osa je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva (%), a x-osa s leva na desno je kontrolna grupa, HS-15 parcijalna micelarna grupa, HS-15 micelarna grupa, ELP parcijalna micelarna grupa i ELP micelarna grupa, respektivno.
[0223] Kao što je prikazano na slici 3, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u kontrolnoj grupi bila je 100.0±26.4%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u parcijalnoj micelarnoj HS-15 grupi bila je 74.7±10.1%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u micelarnoj HS-15 grupi bila je 67.6±8.6%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u parcijalnoj micelarnoj ELP grupi bila je 71.8±22.9%, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u micelarnoj ELP grupi bila je 65.0±7.2%.
[0224] U poređenju sa pacovima u kontrolnoj grupi, pacovi u HS-15 parcijalnoj micelarnoj grupi i ELP parcijalnoj micelarnoj grupi pokazali su trend smanjenja relativne težine donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva, ali razlika nije dostigla statističku značajnost. Relativne težine donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u HS-15 micelarnoj grupi i ELP micelarnoj grupi značajno su se smanjile (p<0.05) za 32.4% i 35%, respektivno.
[0225] [0156] Gore navedeni podaci su pokazali da, iako je koncentracija nejonske surfaktanta i koncentracija kurkumina u parcijalnim micelarnim formacijama bile identične onima u micelarnim formacijama, i da delimične micelarne formacije sadrže izvestan broj micela, parcijalne micelarne formacije mogu samo da promovišu trend redukcije lokalizovanog masnog tkiva, ali ne mogu značajno da redukuju lokalizovano masno tkivo. Nasuprot tome, micelarne formacije sa brojnim micelama mogu značajno da redukuju lokalizovano masno tkivo.
[0226] Ovo je pokazalo da je formiranje micela koje sadrže lek kritični faktor za sposobnost kompozicija kurkumina da značajno redukuju lokalizovano masno tkivo na mestu primene. To jest, kompozicije kurkumina koje sadrže malo micela koje sadrže lek mogu da indukuju trend smanjenja lokalizovanog masnog tkiva, a kompozicije kurkumina sa brojnim micelama koje sadrže lek mogu značajno da redukuju lokalizovano masno tkivo.
[0227] Molimo pogledajte sliku 4. Slika 4 je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte micela na ukupno povećanje telesne težine pacova. Na slici 4, y-osa predstavlja relativno povećanje težine (%), a x-osa s leva na desno predstavlja kontrolnu grupu, HS-15 parcijalnu micelarnu grupu, HS-15 micelarnu grupu, ELP parcijalnu micelarnu grupu i ELP micelarnu grupu, respektivno.
[0228] Slika 4 pokazuje da je relativno povećanje težine pacova u kontrolnoj grupi 100.0±20.6%, relativno povećanje težine pacova u HS-15 parcijalnoj micelarnoj grupi je 100.0±17.3%, relativno povećanje težine pacova u HS-15 micelarnoj grupi je 96.4±18.5%, relativno povećanje težine pacova u ELP parcijalnoj micelarnoj grupi je 73.8±11.2%, a relativno povećanje težine pacova u ELP micelarnoj grupi je 54.8±14.3%.
[0229] U poređenju sa pacovima u kontrolnoj grupi, pacovi u ELP parcijalnoj micelarnoj grupi pokazali su trend smanjenja relativnog porasta težine, ali razlika nije dostigla statističku značajnost (p>0.05). Relativni porast telesne težine pacova u ELP micelarnoj grupi smanjen je za 45.2% i značajno se razlikovao od kontrolne grupe (p<0.05).
[0230] Prethodno navedeni podaci su pokazali da, iako su koncentracija nejonskog surfaktanta i koncentracija kurkumina u parcijalnim micelarnim formacijama bile identične onima u micelarnim formacijama, i da parcijalne micelarne formacije sadrže izvestan broj micela, parcijalne micelarne formacije mogu samo da indukuju trend smanjenja telesne težine, ali ne i da značajno smanje telesnu težinu. Nasuprot tome, micelarne formacije sa brojnim micelama mogu značajno da smanje telesnu težinu.
[0231] Ovo je pokazalo da je formiranje micela koje sadrže lek kritični faktor za sposobnost kompozicija kurkumina da značajno smanje telesnu težinu. To jest, kompozicije kurkumina sa malo micela koje sadrže lek mogu da promovišu trend gubitka telesne težine, a kompozicije kurkumina sa brojnim micelama koje sadrže lek mogu značajno da smanje telesnu težinu.
[0232] [0163] Iako micelarna formulacija HS-15 nije značajno smanjila telesnu težinu u ovom eksperimentu, na osnovu iskustava pronalazača, micelarna formulacija HS-15 takođe može značajno da smanji telesnu težinu ako se poveća učestalost doziranja ili primenjena doza. Stoga, nejonski surfaktant HS-15 takođe treba da bude uključen u obim ovog pronalaska.
[0233] Eksperiment 4: Priprema farmaceutskih kompozicija prema predmetnom pronalasku
[0234] Prethodno navedeni eksperimenti su pokazali da je upotreba nejonskih surfaktanata za formiranje micela kritičan faktor za sposobnost kompozicija kurkumina da značajno redukuju lokalizovano masno tkivo. Dakle, ovaj pronalazak obezbeđuje jednostavnu farmaceutsku kompoziciju sa kurkuminom za redukciju lokalizovanog masnog tkiva, a njegova karakteristika je da jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom sadrži micele koje sadrže lek.
[0235] Priprema jednostavne farmaceutske kompozicije sa kurkuminom je sledeća:
[0237] (a) Mešanje prve težine kurkumina sa rastvaračem i mešanje brzinom od 150~500 o/min na sobnoj temperaturi dok se kurkumin potpuno ne rastvori;
[0238] (b) Dodavanje druge količine farmaceutski prihvatljivog surfaktanta i temeljno mešanje na 100~300 o/min da bi ispario rastvarač. Pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) surfaktanta veća od 10; i
[0239] (c) Kada rastvarač potpuno ispari, polako se dodaje trećina težine farmaceutski prihvatljivog vodenog rastvora da bi se dobile micele koje sadrže lek; i
[0240] (d) Filtriranje kroz filter od 0.2 um i čuvanje filtriranog rastvora koji sadrži micele koje sadrže lek u mraku i frižideru;
[0242] Pri čemu, u koraku (c), micela koja sadrži lek je mikrostruktura koju formira surfaktant, a kurkumin je inkapsuliran u navedenoj micelle koja sadrži lek; treća težina je veća ili jednaka 0 g.
[0243] Poželjno, operativni postupak u koraku (c) je: Kada rastvarač ispari u potpunosti, polako dodavanje treće težine farmaceutski prihvatljivog vodenog rastvora, i dobro mešanje da bi se formirale micele koje sadrže lek.
[0244] Poželjno, u koraku (a), tačka ključanja rastvarača je niža od tačke ključanja čiste vode.
[0245] Poželjno, u koraku (a), rastvarač je hidrofilni rastvarač. ∘
[0246] Poželjno, hidrofilni rastvarač je najmanje jedno od metanola, etanola, acetona i drugih hidrofilnih rastvarača, ili njihova kombinacija.
[0247] Poželjno, rastvarač u koraku (a) je hidrofilni rastvarač.
[0248] Poželjno, lipofilni (hidrofobni) rastvarač je najmanje jedno od etra, benzena, hloroforma, etil acetata, dihlorometana, heksana i drugih lipofilnih (hidrofobnih) rastvarača, ili njihova kombinacija.
[0249] Poželjno, u koraku (b) surfaktant je nejonski surfaktant.
[0250] Poželjno, nejonski surfaktant je najmanje jedno od polioksietilen (20) sorbitan monooleata (polisorbat 80 ili Tween 80), solutol HS 15 (polioksil 15 hidroksistearat), polioksietilen ricinusovih ulja i drugih nejonskih surfaktanata, ili njihova kombinacija.
[0251] Poželjno, polioksietilen ricinusovo ulje je najmanje jedno od: Kolliphor ELP (takođe poznato kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP), polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje (Cremophor RH 40) i druga polioksietilen ricinusova ulja, ili njihova kombinacija.
[0252] Poželjno, u koracima (a) i (b), težinski odnos kurkumina u prvoj težini i surfaktanta u drugoj težini je 1:5 do 1:500.
[0253] Poželjno, u koracima (a) i (b), težinski odnos kurkumina u prvoj težini i surfaktanta u drugoj težini je 1:20 do 1:150.
[0254] Poželjno, u koracima (a) i (c), težinski odnos kurkumina u prvoj težini i farmaceutski prihvatljivog vodenog rastvora u trećoj težini je 1:400 do 3:50.
[0255] Poželjno, u koraku (c), farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor je voda za injekcije, vodeni rastvor za injekcije ili normalan fiziološki rastvor.
[0256] Poželjno, u koraku (c) farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor sadrži lokalni anestetik.
[0257] Poželjno, u koraku (c) farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor sadrži antioksidans.
[0258] Eksperiment 5: Određivanje kvaliteta farmaceutskih kompozicija
[0260] Eksperiment 5-1: Analiza kompozicije
[0262] Farmaceutska kompozicija se ostavlja da stoji najmanje 20 minuta. Ako u kompoziciji nema raslojavanja, ona se dalje analizira pomoću analizatora čestica.
[0263] Pomoću analizatora veličine čestica se utvrđuje da li farmaceutska kompozicija sadrži micele . Ako je prečnik čestica farmaceutske kompozicije, nakon analize analizatorom čestica, manji od 250 nm, a PDI vrednost je manja od 0.4, rastvor farmaceutske kompozicije se smatra bistrom i transparentnom kada se posmatra golim okom, a svetlosni snop se može videti kada se rastvor farmaceutske kompozicije osvetli laserom, onda to ukazuje da farmaceutska kompozicija sadrži micele.
[0264] Ako su micele prisutne u farmaceutskoj kompoziciji, pripremljeni farmaceutska kompozicija je farmaceutska kompozicija za redukciju lokalizovanog masnog tkiva u predmetnom pronalasku.
[0265] Poželjno, ako farmaceutska kompozicija nema stratifikaciju i ne sadrži taloge nakon što odstoji, pripremljena farmaceutska kompozicija je poželjnija farmaceutska kompozicija prema predmetnom pronalasku.
[0267] Eksperiment 5-2: Određivanje stabilnosti farmaceutskih kompozicija analizom distribucije prečnika čestica
[0269] Upotreba analizatora veličine čestica (kupljen od kompanije Malvern) za određivanje distribucije prečnika čestica i indeksa polidisperznosti (PDI). Ako je PDI manji od 0.4, to pokazuje da je stabilnost farmaceutske kompozicije dobra, odnosno da micele u farmaceutskoj kompoziciji mogu da postoje stabilno.
[0271] Eksperiment 5-3: Određivanje stabilnosti farmaceutskih kompozicija ubrzanim testom stabilnosti
[0273] Uslovi skladištenja farmaceutske kompozicije prema predmetnom pronalasku su 2~8°C. Da bi se testirala stabilnost farmaceutskih kompozicija, pronalazač je stavio farmaceutske kompozicije u okruženje relativno visoke temperature i relativno visoke vlažnosti (temperatura 25°C±2°C, relativna vlažnost 60%±5%) radi ubrzanog testa stabilnosti, posmatrao koliko dugo micele u farmaceutskoj kompoziciji mogu stabilno da postoje u uslovima relativno visoke temperature, kako bi se izračunao rok trajanja farmaceutske kompozicije na 2~8°C na osnovu jednačine ubrzanog testa stabilnosti, kao što je detaljno opisano u nastavku teksta.
[0274] Ako farmaceutska kompozicija ima rok trajanja od n meseci na temperaturi od 25°C, onda je rok trajanja farmaceutske kompozicije na temperaturi od 5°C 2<((25-5)/10)>puta n meseci. To jest, rok trajanja farmaceutske kompozicije na temperaturi od 5°C je 2<2>puta od n meseci, to jest, 4 puta.
[0275] Na primer, ako je rok trajanja farmaceutske kompozicije 6 meseci na temperaturi od 25°C, onda je rok trajanja farmaceutske kompozicije na temperaturi od 5°C 24 meseca (6 meseci x 4 = 24 meseca).
[0276] Poželjno, farmaceutska kompozicija ostaje u stanju bez taloženja najmanje 24 sata kada se podvrgne ubrzanom testu stabilnosti na temperaturi od 25°C±2°C, pri relativnoj vlažnosti od 60%±5% i u odsustvu direktne svetlosti.
[0277] Poželjno, farmaceutska kompozicija ostanje u stanju bez taloženja najmanje 6 meseci kada se podvrgne ubrzanom testu stabilnosti na temperaturi od 25°C±2°C, pri relativnoj vlažnosti od 60%±5% i u odsustvu direktne svetlosti.
[0278] Poželjno, farmaceutska kompozicija se održava u stanju bez taloženja najmanje 24 meseca na temperaturi od 2~8°C.
[0280] Eksperiment 6: Maksimalno punjenje lekom micela koje sadrže lek, a koje su formirane od različitih nejonskih surfaktanta
[0282] Pošto maksimalno punjenje lekom micela koje sadrže lek direktno utiče na ubrizganu zapreminu, ono ima ogroman uticaj na zapreminu leka, neželjene efekte i opterećenje koje mora da toleriše lokalizovani potkožni sloj masnog tkiva (npr. potkožni sloj masnog tkiva na licu) u jednoj primeni. Stoga, ovaj eksperiment istražuje maksimalno punjenje lekom micela koje sadrže lek, a koje formiraju različiti nejonski surfaktanti, kako bi se utvrdilo koji je nejonski surfaktant najbolji ekscipijens za pripremu farmaceutskih kompozicija prema predmetnom pronalasku.
[0283] Za ovaj eksperiment izabrana su četiri nejonska surfaktanata. Četiri nejonska surfaktanta su Kolliphor ELP (poznat i kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP, skraćeno ELP), Kolliphor HS-15 (HS-15), polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje (Cremophor RH 40, skraćeno RH 40) i polioksietilen (20) sorbitan monooleate (polisorbat 80, poznat i kao Tween 80).
[0284] Eksperiment je podeljen u 4 grupe, koje su bile ELP grupa, HS-15 grupa, RH40 grupa i Tween 80 grupa.
[0285] Eksperimentalna procedura:
[0287] (a') 2.0 g (primer prve težine) kurkumina je pomešano sa 300~500 ml dihlorometana i mešano na 150~500 o/min na sobnoj temperaturi dok se kurkumin nije potpuno rastvorio. (b') 18.0 g (primer druge težine) jednog od prethodno pomenutih nejonskih surfaktanata dodato je u rastvor i mešano na 100~300 o/min kako bi dihlorometan ispario; i
[0288] (c') Komozicija od ukupno 20 g je dobijena nakon što je rastvarač potpuno ispario; odmereno je 2 g kompozicije i dodato je 8 g (primer treće težine) normalnog fiziološkog rastvora za injekcije i dobro promešano kako bi se dobila kompozicija koju treba testirati. Koncentracija kurkumina u kompoziciji koju treba testirati bila je 20 mg/g, a koncentracija nejonskog surfaktanta bila je 18%.
[0289] Kompozicije koje se testiraju iz ELP grupe, HS-15 grupe, RH40 grupe i Tween 80 grupe su ostavljene da stoje najmanje 20 minuta kako bi se posmatralo da li dolazi do stratifikacije. Ako dođe do stratifikacije, to ukazuje da je koncentracija kurkumina previsoka i da će dovecti do pucanja micela u kompoziciji koja se testira. To jest, nejonski surfaktant ne može da se koristi za pripremu farmaceutskih kompozicija prema predmetnom pronalasku koje sadrže čak 20 mg/g kurkumina.
[0290] Eksperimentalni rezultati pokazali su da su kompozicije koje se testiraju u grupi HS-15 i RH40 grupi imale stratifikaciju, a samo kompozicije koje se testiraju iz ELP grupe i Tween 80 grupe nisu imale stratifikaciju. Stoga je maksimalno punjenje lekom micela koje sadrže lek, formiranih od strane HS-15 i RH40, manje od 20 mg/g. Micele koje sadrže lek, formirane od ELP i Tween 80, mogu da se koriste za pripremu farmaceutskih kompozicija sa 20 mg/g kurkumina.
[0291] Budući da je Tween 80 toksičan, različite nacionalne farmakopeje ograničavaju koncentraciju Tween 80 u injekcijama na manje od 0.4%, kako bi se izbegli neželjeni efekti ili toksičnost. Stoga, maksimalno punjenje lekom u micelama koje sadrže lek, a koje formira Tween 80, treba da bude 0.44 mg/g. (Izračunavanje: 20 mg/g × (0.4% /18%) = 0.44 mg/g.)
[0292] Da bi se odredilo maksimalno punjenje ELP lekom, pronalazač je dalje izveo eksperiment 6 i utvrdio da je maksimalno punjenje ELP lekom veće ili jednako 111 mg/g. (Kada je odnos kurkumina i ELP 1: 8, pripremljena farmaceutska kompozicija sadrži 111 mg/g kurkumina.)
[0293] Gore navedeni rezultati su pokazali da je ELP najbolja pomoćna supstanca za pripremu farmaceutskih kompozicija prema predmetnom pronalasku. Koncentracija kurkumina može da dostigne 111 mg/g u farmaceutskim kompozicijama pripremljenim sa ELP, dok je koncentracija kurkumina je manja od 20 mg/g u farmaceutskim kompozicijama pripremljenim sa drugim ne-jonskim surfaktantima (pogledajte tabelu 1).
[0294] Da bi se utvrdilo koji od nejonskih surfaktanata između HS-15 i RH40 ima minimalno opterećenje lekom, pronalazač je dalje koristio te nejonske surfaktante za pripremu farmaceutskih kompozicija prema predmetnom pronalasku sa 10 mg/g kurkumina. Rezultati su pokazali da ELP, HS-15, RH40 i Tween 80 mogu da se koriste za pripremu farmaceutskih kompozicija prema predmetnom pronalasku sa 10 mg/g kurkumina, i navedene farmaceutske kompozicije ovog pronalaska sa 10 mg/g kurkumina su jasne bez stratifikacije, a izmereni prečnici čestica su 15.95±0.24 nm, 88.23±116.06 nm, 21.63±9.34 nm, 11.37±0.13 nm, respektivno, a PDI vrednosti su 0.32±0.02, 0.48±0.27, 0.26±0.09, 0.33±0.04, respektivno.
[0295] Pri čemu, kada je HS-15 korišćen za pripremu farmaceutske kompozicijeprema predmetnom pronalasku sa 10 mg/g kurkumina, PDI vrednost pripremljene farmaceutskekompozicije bila je veća od 0.4, a nije zadovoljila definiciju prisustva micela u farmaceutskojkompoziciji prema predmetnom pronalasku (izmereni prečnik čestica je manji od 250 nm, PDI vrednost je manja od 0.4, rastvor farmaceutske kompozicije se smatra bistrim i transparentnim kada se posmatra golim okom, a svetlosni snop se može posmatrati kada je rastvor farmaceutske kompozicije obasjan laserom.) Stoga, među nejonskim surfaktantima odabranim za ovaj eksperiment, HS-15 ima minimalno punjenje leka.
[0297] Tabela 1. Maksimalno punjenje leka u micelama koje sadrže lek, a formirane su od različitih nejonskih surfaktanta
[0298] Grupa Maksimalno punjenje leka u Maksimalna tolerisana doza micelarnog micelama (mg/g) punjenja leka
[0299] ELP grupa ≥111 ≥111
[0300] HS-15 < 10 < 10
[0301] grupa
[0302] RH40 <20; ≥10 <20; ≥10
[0303] Tween 80 ≥20 0.44
[0305] Eksperiment 6: Priprema farmaceutskih kompozicija sa Kolliphor ELP (ELP)
[0307] Da bi se odredio odgovarajući odnos između kurkumina i Kolliphor ELP (ELP) i maksimalno punjenje leka prilikom pripreme farmaceutskih kompozicija u predmetnom pronalasku sa ELP, u ovom eksperimentu su korišćeni različiti odnosi između kurkumina i Kolliphor ELP (takođe poznatog kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP, skraćeno ELP) za pripremu serije farmaceutskih kompozicija prema predmetnom pronalasku, i izvršena je analiza njihove stabilnosti.
[0308] U ovom eksperimentu bilo je 9 grupa, to jest, prva do devete grupe. Priprema farmaceutske kompozicije u svakoj grupi bila je otprilike ista kao i eksperimentalni postupak u eksperimentu 5. Jedine razlike bile su težina kurkumina (prva težina u koraku (a')), težina ELP (druga težina u koraku (b')) i težina normalnog fiziološkog rastvora za injekcije (treća težina u koraku (c')). U ovom eksperimentu, smernice za dodavanje cele težine kurkumina (prva težina), težine ELP (druga težina) i težine normalnog fiziološkog rastvora za injekcije (treća težina) prikazane su u Tabeli 2.
[0309] U ovom eksperimentu, odnosi kurkumina i ELP (težinski odnos) u prvoj i devetoj grupi bili su 1:4, 1:5, 1:8, 1:10, 1:20. 1:40, 1:100, 1:150, 1:500, respektivno, a konačne koncentracije kurkumina u farmaceutskim kompozicijama pripremljenim u prvoj do devetoj grupi bile su 200 mg/g, 167 mg/g, 111 mg/g, 91 mg/g, 47.62 mg/g, 7.5 mg/g, 3 mg/g, 2 mg/g i 0.5 mg/g, respektivno. To jest, metod pripreme farmaceutske kompozicije u prvoj do devetoj grupi, odnosi težine kurkumina u koraku (a') prema ELP u koraku (b') (odnosi prve težine prema drugoj težini) bili su 1:4, 1:5, 1:8, 1:10, 1:20. 1:40, 1:100, 1:150, 1:500, respektivno, i da su nakon dodavanja treće težine normalnog fiziološkog rastvora za injekcije u koraku (c'), konačne koncentracije kurkumina u pripremljenim farmaceutskim kompozicijama bile 200 mg/g, 167 mg/g, 111 mg/g, 91 mg/g, 47.62 mg/g, 7.5 mg/g, 3 mg/g, 2 mg/g i 0.5 mg/g, respektivno. Pri čemu, kada je finalna koncentracija leka predstavljena kao mg/g, to je označavalo broj miligrama kurkumina po gramu farmaceutske kompozicije.
[0310] Analizator veličine čestica je korišćen da bi se utvrdilo da li su micele prisutne u farmaceutskim kompozicijama i meren je prečnik čestica micela.
[0311] Da bi se procenila stabilnost farmaceutskih kompozicija, distribucija prečnika čestica i indeks polidisperznosti (PDI) mereni su analizatorom veličine čestica. Sadržaj kurkumina u micelama analiziran je tečnom hromatografijom visokih performansi (HPLC; npr. HPLC-UV) i definisan je kao "početni sadržaj leka".
[0312] Tabela 2. Primer tabele za pripremu farmaceutskih kompozicija sa ELP Grupa Odnos kurkumina i ELP Finalna koncentracija kurkumina u farmaceutskoj (težinski odnos) kompoziciji (mg/g)
[0313] 1 1:4 200
[0314] 2 1:5 167
[0316] 3 1:8 111
[0317] 4 1:10 91
[0318] 5 1:20 47.62
[0319] 6 1:40 7.5
[0320] 7 1:100 3
[0321] 8 1:150 2
[0322] 9 1:500 0.5
[0323] Farmaceutske kompozicije su podvrgnuti ubrzanom testu stabilnosti kako bi se utvrdilo da li je došlo do stratifikacije kada su farmaceutske kompozicije skladištene na visokoj temperaturi (25±2°C) tokom 3 meseca. Sadržaj leka u micelama je određen tečnom hromatografijom visokih performansi (HPLC; npr. HPLC-UV) i definisan je kao „sadržaj leka nakon testa ubrzane stabilnosti“. „Procenat sadržaja leka“ je izračunat deljenjem „sadržaja leka nakon ubrzanog testa stabilnosti“ sa „početnim sadržajem leka". Ako je procenat sadržaja leka veći ili jednak 95%, to ukazuje da je stabilnost farmaceutske kompozicije odlična.
[0324] Molimo pogledajte tabelu 3. Tabela 3 je rezultat analize stabilnosti farmaceutskih kompozicija. Tabela 3 pokazuje prisustvo micela u farmaceutskim kompozicijama od druge do devete. Dakle, sve farmaceutske kompozicije pripremljene sa odnosima kurkumina i ELP od 1:5 do 1:500 su farmaceutske kompozicije za redukciju lokalizovanog masnog tkiva u predmetnom pronalasku.
[0325] Što se tiče stabilnosti, kada su odnosi kurkumina i ELP bili 1:4 i 1:5, PDI je bio veći od 0.4. Kada su odnosi kurkumina i ELP bili 1:8 do 1:500, PDI je bio manji od 0.4. Dakle, da bi se pripremila farmaceutska kompozicija za redukciju lokalizovanog masnog tkiva u predmetnom pronalasku sa boljom stabilnošću, odnos kurkumina i ELP treba da je manji od jedne petine (1/5). To jest, da bi se pripremila farmaceutska kompozicija za redukciju lokalizovanog masnog tkiva u predmetnom pronalasku sa boljom stabilnošću, na osnovu 1 težinske jedinice definisane kao težina kurkumina, težina ELP treba da je veća od 5 težinskih jedinica. Poželjno, na osnovu 1 težinske jedinice definisane kao težina kurkumina, težina ELP je 8~500 težinskih jedinica. Poželjno, na osnovu 1 težinske jedinice definisane kao težina kurkumina, težina ELP je 20~150 težinskih jedinica.
[0326] Na osnovu podataka u tabeli 3, kada su farmaceutske kompozicije u grupama od pete do osme, čuvane na 25°C tokom 3 meseca, procenat sadržaja kurkumina u svakom uzorku bio je veći od 95% i nije pokazao značajan trend smanjenja u poređenju sa početnim sadržajem leka. Ovaj rezultat ukazuje da farmaceutske kompozicije imaju odličnu stabilnost i, na osnovu jednačine ubrzanog testa stabilnosti, farmaceutske kompozicije se mogu čuvati na 2~8°C u frižideru najmanje 24 meseca.
[0328] Tabela 3. Analiza stabilnosti farmaceutskih kompozicija
[0329] Grupa Odnos kurkumina Prečnik čestice PDI Izgled Sadržaj leka nakon i ELP (težinski micele (nm) nakon ubrzanog testa odnos) ubrzanog stabilnosti testa
[0330] stabilnosti
[0332] 1 1:4 772.5 ± 198.92 0.79 ± 0.36
[0333] 2 1:5 153.97 ± 40.17 0.41 ± 0.13
[0334] 3 1:8 13.17 ± 0.21 0.2 ± 0.02
[0335] 4 1:10 12.47 ± 0.23 0.17 ± 0.01
[0336] 5 1:20 12.57 ± 0.12 0.137 ± 0.03 Bistro bez 103.82 ± 2.07 raslojavanja
[0337] 6 1:40 11.59 ± 0.27 0.174 ± 0.0 Bistro bez 100.78 ± 0.51 raslojavanja
[0338] 7 1:100 12.26 ± 0.12 0.096 ± 0.07 Bistro bez 100.62 ± 0.21 raslojavanja
[0339] 8 1:150 12.93 ± 0.29 0.197 ± 0.02 Bistro bez 102.45 ± 0.05 raslojavanja
[0340] 9 1:500 12.66 ± 0.14 0.16 ± 0.01
[0342] U prethodnoj tabeli, prazne ćelije ukazuju na to da sadržaj nije analiziran.
[0344] Eksperiment 7: Efekti formulacije za potkožnu injekciju sa kompleksom kurkumin-resveratrol na potkožno masno tkivo pacova
[0346] Eksperiment 7-1: Efekti jednostavne formulacije za potkožnu injekciju sa resveratrolom na potkožno masno tkivo pacova
[0348] Priprema formulacije za potkožnu injekciju sa resveratrolom: Resveratrol je pomešan sa odgovarajućom količinom normalnog fiziološkog rastvora za injekcije kako bi se dobila formulacija za potkožnu injekciju sa resveratrolom.
[0349] [0215] Pacovi su raspoređeni u kontrolnu grupu ishrane sa visokim sadržajem masti i grupu resveratrola sa 6 pacova po grupi. Pacovi su hranjeni na isti način kao što je opisano u eksperimentu 2. Formulacije za potkožnu injekciju sa resveratrolom ubrizgana je u donji ingvinalni potkožni sloj maslog tkiva pacova u grupi resveratrola, a svaka ubrizgana doza bila je 8 mg resveratrola po kilogramu telesne težine (8 mg/kg). Pacovima u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima, ubrizgana je ista zapremina normalnog fiziološkog rastvora na isti način kao što je prethodno u tekstu opisano.
[0350] Gore pomenuta mesta ubrizgavanja bila su donji ingvinalni masni jastučići pacova. Bilateralne injekcije su davane ravnomerno jednom dnevno 1, 3. i 5. dana eksperimenta. Pacovi su dobijali hranu sa visokim sadržajem masti tokom čitavog trajanja eksperimenta. Njihove promene težine su beležene svakodnevno, a unos hrane i vode je beležen jednom nedeljno. Eksperiment je trajao 20 dana, a pacovi su eutanazirani 21. dana pomoću CO<2>.
[0351] Molimo pogledajte sliku 5. Slika 5 je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacije za potkožnu injekciju sa resveratrolom, bez ekscipijensa, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova∘
[0352] Rezultati sa slike 5 pokazali su da je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u kontrolnoj grupi koja je dobijala hranu sa visokim sadržajem masti bila 100.00±21.51%, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa resveratrolom bila je 111.59±11.288%. Nije bilo značajne razlike u relativnoj težini donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva između pacova u grupi sa resveratrolom i pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima, što ukazuje da lipofilni sastav biljnog ekstrakta i resveratrola bez ekscipijensa ne može da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo). Stoga je pronalazač verovao da direktno mešanje resveratrola i kurkumina i ubrizgavanje u potkožno masno tkivo možda neće moći da smanji lokalizovano masno tkivo, pa je pronalazač dalje istraživao da li ekscipijensi mogu da poboljšaju efikasnost lokalne lipolize koju vrši kompleks leka (resveratrol kurkumin).
[0353] Eksperiment 7-2: Efekat formule kompleksa kurkumin-resveratrol sa ekscipijensom na potkožno masno tkivo pacova
[0354] rastvor sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži formulaciju A i rastvor sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP pripremljeni su na sledeći način:
[0356] Priprema rastvora kompleksa kurkumin-resveratrol koji sadrži formulaciju A: 0.05 g resveratrola, 0.2 g kurkumina i 2 g manitola je samleveno i dobro izmešani da bi se dobila praškasta formulacija. 0.05 g karboksimetilceluloze (CMC) je pomešano sa 40 ml sterilne vode i zagrejano na 60°C~70°C da bi se rastvorila karboksimetilceluloza (CMC), a zatim je dodato 0.055 g polisorbata 80 (Tween80) i dobro izmešano dok se nije potpuno rastvorilo. Dodata je voda do ukupne zapremine od 50 ml da bi se dobila tečna formulacija. Tečna formulacija je dodata u praškastu formulaciju i dobro izmešana da bi se dobio rastvor sa kompleksom kurkuminresveratrol koji sadrži formulaciju A. Navedena formulacija A je bio Tween 80 sa manitolom. Navedeni rastvor sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži formulaciju A nije sadržao micele, koncentracija kurkumina je bila 4 mg/ml, a koncentracija resveratrola je bila 1 mg/ml.
[0357] Priprema rastvora kompleksa kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP: 0.2 g resveratrola, 0.8 g kurkumina i 150 ~ 200 ml dihlorometana pomešano je zajedno i mešano brzinom od 150 ~ 500 o/min na sobnoj temperaturi dok se kurkumin potpuno nije rastvorio. Dodato je 40 g Kolliphor ELP (takođe poznatog kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP, skraćeno ELP) i mešano brzinom od 100 ~ 300 o/min da bi dihlorometan ispario. Kada je dihlorometan potpuno ispario, polako je dodat fiziološki rastvor za injekcije do ukupne zapremine od 200 ml. Rastvor je dobro promešan da bi se dobio rastvor sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP. Navedeni rastvor sa kompleksom kurkuminresveratrol koji sadrži ELP sastojao se od micela, koncentracija Kolliphor ELP (ELP) bila je približno 20%, a težinski odnos kurkumina, resveratrola i ELP bio je 4:1:200.
[0359] Pacovi su nasumično raspoređeni u 4 grupe, koje su bile kontrolna grupa sa ishranom bogatom mastima, grupa sa niskom dozom formule kompleksa i formulacijom A, grupa sa visokom dozom formule kompleksa i formulacijom A i grupa sa niskom dozom formule kompleksa i ELP. Pacovi su hranjeni na isti način kao što je opisano u eksperimentu 2.
[0360] [0222] rastvor sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži formulaciju A ubrizgan je u ingvinalni sloj potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa niskom dozom kompleksne formule sa formulacijom A, a svaka zapremina injekcije bila je 0.2 ml rastvora kompleksa kurkuminresveratrol koji sadrži formulaciju A, po kilogramu telesne težine (0.2 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 1 mg formule kompleksa kurkumin-resveratrol po kilogramu telesne težine (1 mg/kg); rastvor sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži formulaciju A ubrizgan je u ingvinalni sloj potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa visokom dozom kompleksne formule sa formulacijom A, a svaka zapremina injekcije bila je 1 ml rastvora kompleksa kurkumin-resveratrol koji sadrži formulaciju A, po kilogramu telesne težine, tako da je svaka ubrizgana doza bila 5 mg formule kompleksa kurkumin-resveratrol, po kilogramu telesne težine (5 mg/kg); rastvor sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP ubrizgan je u sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa niskom dozom kompleksne formule sa ELP, a svaka zapremina injekcije bila je 0.2 ml rastvora kompleksa kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP po kilogramu telesne težine (0.2 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 1 mg formule kompleksa kurkumin-resveratrol, po kilogramu telesne težine (1 mg/kg). Pacovima u kontrolnoj grupi koja je dobijala hranu sa visokim sadržajem masti ubrizgana je ista zapremina normalnog fiziološkog rastvora za injekcije na isti način kao što je prethodno u tekstu opisano.
[0361] Prethodno pomenuta mesta ubrizgavanja bila su donji ingvinalni masni jastučići pacova. Bilateralne injekcije su davane ravnomerno jednom dnevno 1, 3. i 5. dana eksperimenta. Pacovi su dobijali hranu bogatu mastima tokom celog trajanja eksperimenta. Eksperiment je trajao 20 dana, a pacovi su eutanazirani 21. dana pomoću CO<2>.
[0362] Molimo pogledajte sliku 6. Slika 6 je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacija za potkožne injekcije sa kompleksom kurkumin-resveratrol, pripremljenih sa različitim ekscipijensima, na lokalizovanu potkožno masno tkivo pacova.
[0363] Rezultati na slici 6 pokazali su da je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u kontrolnoj grupi koja je dobijala hranu bogatu mastima bila 100.0±13%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u grupi sa niskom dozom kompleksne formule sa formulacijom A bila je 134.9±39%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u grupi sa visokom dozom kompleksne formule sa formulacijom A bila je 134.9±14%, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u grupi sa niskom dozom kompleksne formule sa ELP bila je 71.1±14%. U poređenju sa kontrolnom grupom sa ishranom bogatom mastima, ni grupa sa niskom dozom kompleksne formule sa formulacijom A ni grupa sa visokom dozom kompleksne formule sa formulacijom A ne mogu da redukuju masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo) (p>0.05).
[0364] Relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa niskom dozom kompleksne formule sa ELP značajno se razlikovala od one kod pacova u kontrolnoj grupi (p<0.05), a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa niskom dozom kompleksne formule sa ELP, smanjena je za 28.9%. Na osnovu prethodno opisane pripreme, kompleksni rastvor kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP i koji se primenjuje kod ove grupe, sadrži micele koje sadrže lek (inkapsulirani kurkumin) i micele koje sadrže drugi lipofilni lek (inkapsulirani resveratrol). Dakle, slično kao za jednostavnu farmaceutsku kompoziciju sa kurkuminom, formiranje micela je kritičan faktor za sposobnost rastvora sa kompleksom kurkumin-resveratrol, koji sadrži ELP, da značajno smanji lokalizovano masno tkivo.
[0365] Eksperiment 7-3: Poređenje farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol i jednostavne farmaceutske kompozicije
[0367] Jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, jednostavna farmaceutska kompozicija sa resveratrolom i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkuminresveratrol prema predmetnom pronalasku pripremljeni su na sledeći način: Priprema jednostavne farmaceutske kompozicije sa kurkuminom: isto kao i priprema rastvora sa kurkuminom ELP, opisana u eksperimentu 2. Pri čemu je koncentracija kurkumina bila 5 mg/ml.
[0368] Priprema jednostavne farmaceutske kompozicije sa resveratrolom: približno isto kao i priprema rastvora sa kurkuminom ELP opisana u eksperimentu 2, samo što je kurkumin zamenjen resveratrolom. Koncentracija resveratrola u pripremljenoj jednostavnoj farmaceutskoj kompoziciji sa resveratrolom je bila 5 mg/ml.
[0369] Priprema farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol: isto kao i priprema rastvora sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP, opisana u eksperimentu 7-2. Pri čemu je ukupna koncentracija kurkumina i resveratrola bila 5 mg/ml, a odnos kurkumina i resveratrola je bio 4:1.
[0370] Pacovi su raspoređeni u kontrolnu grupu sa ishranom bogatom mastima, grupu sa kurkuminom, grupu sa resveratrolom i grupu sa kompleksom kurkumin-resveratrol, sa po 5 pacova u svakoj grupi. Pacovi su hranjeni na isti način kao što je opisano u eksperimentu 2.
[0371] Jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, jednostavna farmaceutska kompozicija sa resveratrolom i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkuminresveratrol ubrizgani su u donji ingvinalni sloj potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kurkuminom, grupi sa resveratrolom i grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol, respektivno. Zapremina svake injekcije bila je 2 ml po kilogramu telesne težine (2 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 10 mg leka po kilogramu telesne težine (10 mg/kg). To jest, pacovima u grupi sa kurkuminom dato je 10 mg kurkumina po kilogramu telesne težine; pacovima u grupi sa resveratrolom dato je 10 mg resveratrola po kilogramu telesne težine; pacovima u grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol dato je 8 mg kurkumina i 2 mg resveratrola po kilogramu telesne težine. Pacovima u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima ubrizgana je ista zapremina normalnog fiziološkog rastvora za injekcije na isti način kao što je prethodno opisano.
[0372] [0232] Prethodno pomenuta mesta ubrizgavanja bila su donji ingvinalni masni jastučići pacova. Bilateralne injekcije su davane ravnomerno jednom dnevno 1, 2, 3. i 4. dana eksperimenta. Pacovi su dobijali hranu sa visokim sadržajem masti tokom celog trajanja eksperimenta. Eksperiment je trajao 14 dana i pacovi su eutanazirani 15. dana pomoću CO<2>.
[0373] Pošto je svakoj grupi svaki put dato 10 mg/kg leka, efikasnost lokalne lipolize u grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol trebalo bi da je između efikasnosti grupe sa kompleksom kurkuminom i grupe sa resveratrolom. Ako je efikasnost lokalne lipolize u grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol bolja od efikasnosti u grupi sa kurkuminom i grupi sa resveratrolom, to ukazuje da kurkumin i resveratrol u farmaceutskoj kompoziciji kompleksa kurkumin-resveratrol pokazuju sinergiju u efikasnosti lokalne lipolize.
[0374] Molimo pogledajte sliku 7. Slika 7 je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte jednostavnih formulacija za potkožnu injekciju, sa kurkuminom, resveratrolom i formulacije sa kompleksom kurkumin-resveratrol, pripremljenih sa različitim ekscipijensima, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova.
[0375] Rezultati na slici 7 pokazali su da je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima bila 100.0±14.6%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u grupi sa kurkuminom bila je 93.5±6.5%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u grupi sa resveratrolom bila je 91.6±27.8% i relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva kod pacova u grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol bila je 80.0±5.8%. U poređenju sa kontrolnom grupom sa ishranom bogatom mastima, grupa sa kurkuminom ili resveratrolom ne može značajno da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo) (p>0.05).
[0376] Relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol značajno se razlikovala od one kod pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima (p<0.05), i relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol smanjena je za 20%.
[0377] Poređenje efikasnosti lokalne lipolize u grupi sa kurkuminom, grupi sa resveratrolom i grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol, pokazalo je da kurkumin i resveratrol u grupi sa kompleksom kurkumin-resveratrol pokazuju sinergiju u efikasnosti lokalne lipolize.
[0379] Eksperiment 7-4: Efekti učestalosti doziranja na potkožno masno tkivo i telesnu težinu pacova
[0380] [0238] U ovom eksperimentu, pacovima u svakoj grupi je data jednaka količina ukupne ubrizgane doze farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol, ali sa različitom učestalošću doziranja kako bi se procenio efekat učestalosti doziranja na potkožno masno tkivo i telesnu težinu pacova. U ovom eksperimentu, drugim pacovima je dat glavni sastojak formulacije za lokalnu lipolizu koja se injecira,a koja je dostupna na tržištu, kako bi se istovremeno uporedili efekti ubrizgavanja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol prema predmetnom pronalasku i formulacije za lokalnu lipolizu, dostupne na tržištu, na potkožno masno tkivo i telesnu težinu pacova.
[0381] Rastvor natrijum deoksiholata i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkuminresveratrol pripremljeni su na sledeći način:
[0382] Priprema rastvora natrijum deoksiholata: Odgovarajuća količina natrijum deoksiholata pomešana je sa sterilnom vodom za injekcije da bi se postigla koncentracija natrijum deoksiholata od 2.575 mg/ml. Rastvor je dobro promešan da bi se dobio rastvor natrijum deoksiholata. Pri tome je natrijum deoksiholat (kupljen od firme Sigma-Aldrich, kat. br. D6750) glavni sastojak formulacije za lokalnu lipolizu u obliku injekcija ATX-101 (robno ime: Kybella) koja se nalazi na tržištu.
[0383] Priprema farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol: isto kao i priprema rastvora sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP, opisana u eksperimentu 7-2. Pri čemu je ukupna koncentracija kurkumina i resveratrola bila 5 mg/mL, a odnos kurkumina i resveratrola bio je 4 : 1.
[0384] Pacovi su nasumično raspoređeni u 4 grupe, koje su bile kontrolna grupa za ishranu sa visokim sadržajem masti, grupa natrijum deoksiholata, grupa kurkumin-resveratrol sa visokom dozom (skraćeno kao grupa sa visokom dozom u ovom eksperimentu) i grupa sa niskom frekvencijom doziranja kurkumin-resveratrol (skraćeno kao grupa sa niskim doziranjem u ovom eksperimentu). Pacovi su hranjeni na isti način kao što je opisano u eksperimentu 2.
[0385] Lekovi su primenjivani na sledeći način:
[0386] Grupa sa natrijum deoksiholatom: Rastvor natrijum deoksiholata je ubrizgan u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova iz grupe sa natrijum deoksiholatom. Zapremina svake injekcije bila je 4 ml po kilogramu telesne težine (4 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 10.3 mg (10.3 mg/kg; izračunavanje: 2.575 mg/ml x 4 ml/kg = 10.3 mg/kg). Pacovi su injecirani jednom dnevno 1, 3. i 5. dana eksperimenta, sa ukupno 3 injekcije, tako da je ukupna doza bila 30.9 mg/kg (10.3 mg/kg x 3 = 30.9 mg/kg).
[0387] [0243] Grupa sa visokom učestalošću doziranja: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol je ubrizgana u donji ingvinalni sloj potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja. Zapremina svake injekcije je bila 4 ml po kilogramu telesne težine (4 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 20 mg (20 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml x 4 ml/kg = 20 mg/kg). Pacovi su injecirani jednom dnevno 1, 3, 5, 7, 9. i 11. dana eksperimenta, sa ukupno 6 injekcija, tako da je ukupna doza bila 120 mg/kg (20 mg/kg x 6 = 120 mg/kg).
[0388] Grupa sa niskom učestalošću doziranja: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol je ubrizgana u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa niskom učestalošću doziranja. Zapremina svake injekcije bila je 8 ml po kilogramu telesne težine (8 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 40 mg (40 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml x 8 ml/kg = 40 mg/kg). Pacovima je lek ubrizgan jednom dnevno 1, 3. i 5. dana eksperimenta, sa ukupno 3 injekcije, tako da je ukupna doza bila 120 mg/kg (40 mg/kg x 3 = 120 mg/kg).
[0389] Kontrolna grupa sa ishranom sa visokim sadržajem masti: pacovima je ubrizgana voda za injekcije na isti način kao što je prethodno u tekstu opisano.
[0390] Pacovi su dobijali hranu bogatu mastima tokom celog trajanja eksperimenta. Eksperiment je trajao 20 dana, a pacovi su eutanazirani 21. dana pomoću CO<2>.
[0391] Molimo pogledajte slike 8A i 8B. Slika 8A je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova. Slika 8B je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol na ukupnu telesnu težinu pacova.
[0392] Rezultati na slici 8A pokazali su da je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja bila 100.0±22.6%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa natrijum deoksiholatom bila je 88.8±16.7%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja bila je 62.3±5.1%, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa niskom učestalošću doziranja bila je 65.4±11.3%.
[0393] U poređenju sa kontrolnom grupom koja je dobijala hranu bogatu mastima, i grupa sa visokom i grupa sa niskom učestalošću doziranja mogu značajno da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo) (p<0.05). Dakle, ako je koncentracija farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol dovoljna, niskom učestalošću doziranja može se postići efekat lokalne lipolize.
[0394] [0250] U poređenju sa grupom sa niskom učestalošću doziranja, efekat lipolize kod grupe sa visokom učestalošću doziranja je bolji. Iako nije bilo značajne razlike između grupe sa visokom i niskom učestalošću doziranja, grupa sa visokom učestalošću doziranja može da postigne bolji trend lokalnog efekta lipolize.
[0395] Rezultati na slici 8B pokazali su da je relativno povećanje težine kod pacova kontrolne grupe sa ishranom bogatom mastima bilo 100.0±11.6%, relativno povećanje težine pacova u grupi sa natrijum deoksiholatom bilo je 100.2±12.6%, relativno povećanje težine pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja bilo je 63.5±5.5%, a relativno povećanje težine pacova u grupi sa niskom učestalošću doziranja bilo je 78.7±11.5%. U poređenju sa relativnim povećanjem težine pacova u kontrolnoj grupi koja je dobijala hranu bogatu mastima, relativno povećanje težine pacova i u grupi sa niskom i u grupi sa visokom učestalošću doziranja je značajno smanjeno (p<0.05), a relativno povećanje težine je smanjeno za 21.3% i 36.5%, respektivno, što pokazuje da je efekat gubitka težine bio veoma značajan.
[0396] Stoga, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol prema predmetnom pronalasku može značajno smanjiti telesnu težinu, a efikasnost gubitka težine pri visokoj učestalosti doziranja je značajno bolja nego pri niskoj učestalosti doziranja (p<0.05).
[0397] Naosnovu iskustava pronalazača, kada je učestalost doziranja od 3~6 puta pogodna za pacove, učestalost doziranja pogodna za čoveka iznosi 1~12 puta. Poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 1~6 puta.
[0398] Poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 1~12 puta svaki drugi dan do svakih 30 dana. Poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 1~6 puta svaki drugi dan do svakih 30 dana. Ili, poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 3~60 puta svaki drugi dan do svakih 20 dana; poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 6~42 puta svaki drugi dan do svakih 14 dana.
[0399] Eksperiment 7-5: Efekti primenjene doze na potkožno masno tkivo pacova
[0401] U ovom eksperimentu, kod pacova su primenjene različite doze farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol kako bi se procenili efekti primenjene doze na potkožno masno tkivo pacova. Pored toga, u ovom eksperimentu, kod drugih pacova je primenjen glavni sastojak druge injekcione formulacije za lokalnu lipolizu, koja se trenutno klinički ispituje kako bi se istovremeno uporedili efekti farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol prema predmetnom pronalasku i druge injekcione formulacije za lokalnu lipolizu koja se trenutno klinički ispituje, na potkožno masno tkivo pacova.
[0402] ELP rastvor, LIPO-202 rastvor i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkuminresveratrol pripremljeni su na sledeći način:
[0403] ELP rastvor: 18 g Kolliphor ELP (takođe poznat kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP, skraćeno ELP) pomešano je sa odgovarajućom količinom normalnog fiziološkog rastvora za injekcije do ukupne zapremine od 90 ml. Rastvor je dobro promešan da bi se dobio ELP rastvor. Pri tome je koncentracija ELP bila približno 20%.
[0404] Priprema LIPO-202 rastvora:
[0405] LIPO-202 je formulacija za lokalnu lipolizu koja se trenutno klinički ispituje, a njen glavni sastojak je salmeterol ksinafonat.
[0407] (i) 1 mg salmeterol ksinafonata (kupljenog od firme Sigma-Aldrich) je pomešan sa odgovarajućom količinom metanola do ukupne zapremine od 1 mL da bi se dobio osnovni rastvor od 1 mg/mL.
[0408] (ii) Osnovni rastvor je serijski razblažen 10 puta sterilnom vodom kako bi se pripremio rastvor salmeterol ksinafonata finalne koncentracije od 0.01 µg/ml, što je rastvor LIPO-202 koji se koristi u ovom eksperimentu.
[0410] Priprema farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol: isto kao i priprema rastvora sa kompleksom kurkumin-resveratrol koji sadrži ELP, opisana u eksperimentu 7-2. Pri čemu je ukupna koncentracija kurkumina i resveratrola bila 5 mg/ml, a odnos kurkumina i resveratrola bio je 4:1 i koncentracija ELP bila je 20%.
[0411] Pacovi su nasumično raspoređeni u 7 grupa, koje su bile kontrolna grupa sa ishranom bogatom mastima, kontrolna grupa, grupa sa LIPO-202, grupa sa kompleksnom formulom od 1 mg/ml, grupa sa kompleksnom formulom od 5 mg/ml, grupa sa kompleksnom formulom od 10 mg/ml i grupa sa kompleksnom formulom od 20 mg/ml. Pacovi su hranjeni na isti način kao što je opisano u eksperimentu 2.
[0412] Lekovi su primenjivani na sledeći način:
[0413] Kontrolna grupa: ELP rastvor je ubrizgan u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u kontrolnoj grupi. Zapremina svake injekcije bila je 4 ml po kilogramu telesne težine (4 ml/kg).
[0414] LIPO-202 grupa: Rastvor LIPO-202 je ubrizgan u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u LIPO-202 grupi. Zapremina svake injekcije bila je 4 mL po kilogramu telesne težine (4 mL/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 0.04 µg/kg (0.04 µg/kg; izračunavanje: 0.01 µg/mL × 4 mL/kg = 0.04 µg/kg).
[0415] [0262] Grupa sa kompleksnom formulom od 1 mg/ml: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol je ubrizgana u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 1 mg/ml. Zapremina svake injekcije bila je 0.2 ml po kilogramu telesne težine (0.2 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 1 mg/kg (1 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml × 0.2 ml/kg = 1 mg/kg).
[0416] Grupa sa kompleksnom formulom od 5 mg/ml: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol je ubrizgana u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 5 mg/ml. Zapremina svake injekcije bila je 1 ml po kilogramu telesne težine (1 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 5 mg/kg (5 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml × 1 ml/kg = 5 mg/kg).
[0417] Grupa sa kompleksnom formulom od 10 mg/ml: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol je ubrizgana u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 10 mg/ml. Zapremina svake injekcije bila je 2 ml po kilogramu telesne težine (2 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 10 mg/kg (10 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml × 2 ml/kg = 10 mg/kg).
[0418] Grupa sa kompleksnom formulom od 20 mg/ml: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol je ubrizgana u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 20 mg/ml. Zapremina svake injekcije bila je 4 ml po kilogramu telesne težine (4 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 20 mg/kg (20 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml × 4 ml/kg = 20 mg/kg).
[0419] Kontrolna grupa koja je dobijala hranu sa visokim sadržajem masti: pacovima je ubrizgana voda za injekcije na isti način kao što je prethodno u tekstu opisano.
[0420] Pacovima je lek ubrizgan jednom dnevno 1, 2, 3. i 4. dana eksperimenta. Pacovi su dobijali hranu sa visokim sadržajem masti tokom celog trajanja eksperimenta. Eksperiment je trajao 14 dana i pacovi su eutanazirani 15. dana pomoću CO<2>.
[0421] Molimopogledajte sliku 9. Slika 9 je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte primenjene doze farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol na lokalizovanu potkožno masno tkivo pacova.
[0422] [0269] Rezultati na slici 9 pokazali su da je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima bila 100±15.2%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u kontrolnoj grupi bila je 99.2±22.0%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u LIPO-202 grupi bila je 97.8±12.8%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 1 mg/ml bila je 90.1±12.2%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 5 mg/ml bila je 80.9±13.9%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 10 mg/ml bila je 73.9±9.5%, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa kompleksnom formulom od 20 mg/ml bila je 64.1±12.0%.
[0423] Stoga je farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol postigla značajan efekat na lokalnu lipolizu pri dozi od 5 mg/kg, a efekti su bili značajniji što su doze bile više. Iako doza farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-resveratrol od 1 mg/kg nije postigla značajan efekat na lokalnu lipolizu, ona je indukovala trend. Na osnovu iskustava pronalazača, ako se poveća učestalost doziranja, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol takođe može da postigne značajan efekat na lokalnu lipolizu pri dozi od 1 mg/kg.
[0424] Na osnovu iskustava pronalazača, kada primenjena doza pogodna za pacove iznosi 1 mg/kg ~ 20 mg/kg, primenjena doza pogodna za čoveka je 0.01 ~ 40 mg/kg. Poželjno, primenjena doza pogodna za čoveka iznosi 0.1 ~ 20 mg/kg.
[0425] Poželjno, primenjena doza pogodna za čoveka je 0.02 ~ 20 mg/cm<2>. Poželjno, primenjena doza pogodna za čoveka je 0.04 ~ 16 mg/cm<2>. Poželjno, primenjena doza pogodna za čoveka je 0.2 ~ 12 mg/cm<2>. Poželjno, primenjena doza za čoveka je 0.4 ~ 8 mg/cm<2>.
[0426] Poželjno, primenjena doza za čoveka je 0.01 ~ 40 mg/kg telesne težine. Poželjno, primenjena doza za čoveka je 0.4 ~ 40 mg/kg telesne težine. Poželjno, primenjena doza za čoveka je 0.8 ~ 20 mg/kg telesne težine.
[0428] Eksperiment 8: Efekti kompleksnih farmaceutskih kompozicija sa kurkuminom na lipolizu
[0429] U ovom eksperimentu korišćeni su kurkumin i lipofilni lekovi koji nisu resveratrol, za pripremu kompleksnih farmaceutskih kompozicija radi procene efikasnosti lipolize različitih lipofilnih kompleksnih farmaceutskih kompozicija na zrelim adipocitima.
[0430] U ovom eksperimentu su za upotrebu odabrani puerarin, kvercetin i sinefrin, za pripremu različitih lipofilnih kompleksnih farmaceutskih kompozicija.http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&c d=6&ca-d=ria&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o LAhXGppQKHSUjBq4QFghHM AU&url=http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow monthly.php%3Fid%3Dtdar es_tdares_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQ OVw
[0431] Eksperiment 8-1 Test citotoksičnosti
[0433] [0276] Određivanje da li 50 ppm kurkumina, puerarina, kvercetina ili sinefrina pokazuje toksičnost za druge ćelije koje nisu adipociti, pomoću MTT testa. Samo ako se lek smatra netoksičnim, nastaviće se sa testom lipolize. http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6&ca d=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJH5o_LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMA U&url=http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow monthly.php%3Fid%3D tdares_tdares_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTA NJYfRvQQVw
[0434] Eksperimentalni rezultati su pokazali da 50 ppm kurkumina, puerarina, kvercetina i sinefrina nije citotoksično za druge somatske ćelije pacova osim za adipocite, tako da ova doza neće uticati generalno na somatske ćelije.http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6&ca d=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMAU&url =http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow_monthly.php%3Fid%3Dtdares_tdare s_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQQVw
[0435] Eksperiment 8-2 Efikasnost lipolize kod zrelih adipocita
[0437] Medijum za ćelijsku kulturu za DMSO kontrolnu grupu, medijum za ćelijsku kulturu sa kurkuminom, medijum za ćelijsku kulturu sa puerarinom, medijum za ćelijsku kulturu sa kvercetinom, medijum za ćelijsku kulturu sa sinefrinom, medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-puerarin, medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkuminkvercetin i medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-sinefrin su pripremljeni na sledeći način:http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6&cad=rja& uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o_LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMAU&u rl=http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow_monthly.php%3Fid%3Dtdares_tdar es edit 20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQQVw [0279] Medijum za ćelijsku kulturu DMSO kontrolne grupe: DMSO je pomešan sa odgovarajućom količinom sterilne vode da bi se dobio 0.5% DMSO rastvor. 0.5% DMSO rastvor je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu (naziv proizvoda: Dulbecco's Modified Eagle Medium, kupljen od kompanije Gibco) za pripremu medijuma za ćelijsku kulturu DMSO kontrolne grupe, pri čemu je odnos zapremine 0.5% DMSO rastvora i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1: 1000.
[0438] [0280] Medijum za ćelijsku kulturu sa kurkuminom: kurkumin je pomešan sa odgovarajućom količinom 0.5% DMSO rastvora kako bi se dobio rastvor sa kurkuminom. Rastvor sa kurkuminom je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu (naziv proizvoda: Dulbecco's Modified Eagle Medium, kupljen od kompanije Gibco) da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kurkuminom koja sadrži 50 ppm kurkumina, pri čemu je odnos zapremine između rastvora kurkumina i podloge za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0439] Medijum za ćelijsku kulturu sa puerarinom: puerarin (kupljen od firme Sigma-Aldrich) je pomešan sa odgovarajućom količinom 0.5% DMSO rastvora da bi se dobio rastvor puerarina. Rastvor puerarina je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa puerarinom koja sadrži 50 ppm puerarina, pri čemu je odnos zapremine rastvora puerarina i medijuma za ćelijsku kulturu 1:1000.
[0440] Medijum za ćelijsku kulturu sa kvercetinom: kvercetin (kupljen od firme Sigma-Aldrich) je pomešan sa odgovarajućom količinom 0.5% DMSO rastvora da bi se dobio rastvor kvercetina. Rastvor kvercetina je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kvercetinom koji sadrži 50 ppm kvercetina, pri čemu je odnos zapremine rastvora kvercetina i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0441] Medijum za ćelijsku kulturu sa sinefrinom: sinefrin (kupljen od firme Sigma-Aldrich) je pomešan sa odgovarajućom količinom 0.5% DMSO rastvora da bi se dobio rastvor sinefrina. Rastvor sinefrina je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa sinefrinom koji sadrži 50 ppm sinefrina, pri čemu je odnos zapremina rastvora sinefrina i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0442] Medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-puerarin: kurkumin i puerarin su pomešani sa odgovarajućom količinom 0.5% DMSO rastvora da bi se dobio rastvor sa kompleksom kurkumin-puerarin. Pritom je težinski odnos između kurkumina i puerarina bio 2:3. rastvor sa kompleksom kurkumin-puerarin je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-puerarin koji sadrži 50 ppm leka kompleksa kurkumin-puerarin, pri čemu je koncentracija kurkumina bila 20 ppm, koncentracija puerarina je bila 30 ppm, a odnos zapremina rastvora sa kompleksom kurkumin-puerarin i medijuma za ćelijsku kulturu bio je 1:1000.
[0443] Medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-kvercetin: kurkumin i kvercetin su pomešani sa odgovarajućom količinom 0.5% DMSO rastvora da bi se dobio rastvor sa kompleksom kurkumin-kvercetin. Pri tome je težinski odnos između kurkumina i kvercetina bio 2:3. rastvor sa kompleksom kurkumin-kvercetin je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkuminkvercetin koji sadrži 50 ppm kompleksnog leka kurkumin-kvercetin, pri čemu je koncentracija kurkumina bila 20 ppm, koncentracija kvercetina 30 ppm, a odnos zapremina rastvora sa kompleksom kurkumin-kvercetin i medijuma za ćelijsku kulturu je bio 1:1000.
[0444] Medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-sinefrin: kurkumin i sinefrin su pomešani sa odgovarajućom količinom 0.5% DMSO rastvora da bi se dobio rastvor sa kompleksom kurkumin-sinefrin. Pri tome je težinski odnos kurkumina i sinefrina bio 2:3. Rastvor sa kompleksom kurkumin-sinefrin je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-sinefrin koji sadrži 50 ppm kompleksnog leka kurkumin-sinefrin, pri čemu je koncentracija kurkumina bila 20 ppm, koncentracija sinefrina 30 ppm, a odnos zapremina rastvora sa kompleksom kurkuminsinefrin i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0446] Eksperimentalni postupak za određivanje efikasnosti lipolize kod zrelih adipocita
[0447] Prekursori adipocita, 3T3-L1 ćelije (kupljene od Instituta za istraživanje i razvoj prehrambene industrije, Tajvan; skraćeno BCRC) su zasejane u ploče sa 12-bunara, tako da je svaki bunar sadržao 1x10<5>ćelija. Posle dva dana gajenja, ćelije su gajene još dva dana u indukcionom medijumu za diferencijaciju ćelija (DMI medijum, koji sadrži 0.5 μM IBMX (kupljeno od Sigma-Aldrich), 0.1 μM deksametazona (kupljeno od Sigma-Aldrich) i 5 μg/ml insulina (kupljeno od firme Humulin R.)) Zatim su ćelije gajene u medijumu koji sadrži 5 μg/ml insulina. Kada se morfologija ćelija promenila iz vretenastog oblika u sfernu i kada su se brojne kapljice lipida akumulirale u ćelijama, to je pokazalo da su se ćelije diferencirale u zrele adipocite.
[0448] Zreli adipociti su raspoređeni u 8 grupa, koje su bile DMSO kontrolna grupa, grupa sa kurkuminom, grupa sa puerarinom, grupa sa kvercetinom, grupa sa sinefrinom, grupa sa kompleksom kurkumin-puerarin, grupa sa kompleksom kurkumin-kvercetin i grupa sa kompleksom kurkumin-sinefrin.
[0449] [0289] Zreli adipociti u kontrolnoj grupi sa DMSO, grupi sa kurkuminom, grupi sa puerarinom, grupi sa kvercetinom, grupi sa sinefrinom, grupi sa kompleksom kurkuminpuerarin, grupi sa kompleksom kurkumin-kvercetin i grupi sa kompleksom kurkumin-sinefrin su, respektivno, gajeni sa DMSO kontrolnom medijumom za ćelijsku kulturu, medijumom za ćelijsku kulturu sa kurkuminom, medijumom za ćelijsku kulturu sa puerarinom, medijumom za ćelijsku kulturu sa kvercetinom, medijumom za ćelijsku kulturu sa sinefrinom, medijumom za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-puerarin, medijumom za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-kvercetin i medijumom za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkuminsinefrin, tokom 24 sata.http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=i&q=&esrc=s&source=web&cd=6&ca d=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o_LAKXGppQKHSUjBq4QFgchHMAU&url =http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow monthly.php%3Fid%3Dtdares tdare s_edit_20080513182435&usg=AFQjCNGCOGfdKrv1GN16vWTANJYfRvQQVw [0290] Protein aneksin V (kupljen od firme eBioscience) i propidijum jodid (PI; kupljen od firme eBioscience) su mešani sa ćelijama u svakoj grupi tokom određenog vremenskog perioda, a zatim je procenat ćelija koje su obeležene sa proteinom aneksin V i sa PI u svakoj grupi analiziran protočnom citometrijom kako bi se procenio procenat zrelih adipocita koji podležu apoptozi. Pri čemu, kada je zreli adipocit obeležen i sa proteinom aneksin V i sa PI, to ukazuje na to da je ćelija podlegla apoptozi; kada zreliji adipociti podležu apoptozi, to ukazuje da je efikasnost lipolize primenjenog leka bolja, a takođe ukazuje da je lipoliza posredovana apoptozom, ali ne i nekrozom.
[0450] Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SD i analizirani jednofaktorskom ANOVA analizom. Statistički rezultati su prikazani kao simboli ili slova. Različiti simboli ili slova označavaju statistički značajnu razliku (p<0.05), a identični simboli ili slova označavaju odsustvo statistički značajne razlike (p>0.05).
[0451] Pošto je ukupna doza primenjenog leka u svakoj grupi bila 50 ppm, efikasnost apoptoze u grupi sa kompleksom kurkumin-puerarin trebalo bi da je između efikasnosti grupe sa kurkuminom i grupe sa puerarinom. Ako je efikasnost apoptoze u grupi sa kompleksom kurkumin-puerarin bolja od one u grupi sa kurkuminom i grupi sa puerarinom, to ukazuje da kurkumin i puerarin u grupi sa kompleksom kurkumin-puerarin pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize. Slično tome, efikasnost apoptoze u grupi sa kompleksom kurkuminkvercetin trebalo bi da je između efikasnosti grupe sa kurkuminom i grupe sa kvercetinom. Ako je efikasnost apoptoze u grupi sa kompleksom kurkumin-kvercetin bolja od one u grupi sa kurkuminom i grupi sa kvercetinom, to ukazuje da kurkumin i kvercetin u grupi sa kompleksom kurkumin-kvercetin pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize. Efikasnost apoptoze grupe sa kompleksom kurkumin-sinefrin trebalo bi da je između efikasnosti grupe sa kurkuminom i grupe sinefrinom. Ako je efikasnost apoptoze u grupi sa kompleksom kurkumin-sinefrin bolja od efikasnosti grupe sa kurkuminom i grupe sa sinefrinom, to ukazuje da kurkumin i sinefrin u grupi sa kompleksom kurkumin-sinefrin pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize.
[0452] Molimo pogledajte sliku 10. Slika 10 je grafikon sa stubićima koji pokazuje efekte farmaceutskih kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek na apoptozu zrelih adipocita
[0453] [0294] Rezultati na slici 10 pokazali su da je procenat apoptotskih ćelija kontrolne grupe sa DMSO bio 0.8±0.2%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kurkuminom bio je 78.4±5.4%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa puerarinom bio je 2.0±1.6%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kvercetinom bio je 1.8±0.6%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa sinefrinom bio je 0.9±0.2%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kompleksom kurkumin-puerarin bio je 80.0±5.9%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kompleksom kurkumin-kvercetin bio je 80.4±7.0% i procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kompleksom kurkumin-sinefrin bio je 80.8±4.8%.
[0454] Poređenje efikasnosti apoptoze u grupi sa kurkuminom, u grupi sa puerarinom i u grupi sa kompleksom kurkumin-puerarin, pokazalo je da kurkumin i puerarin u farmaceutskoj kompoziciji sa kompleksom kurkumin-puerarin pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize.
[0455] Poređenje efikasnosti apoptoze u grupi sa kurkuminom, u grupi sa kvercetinom i u grupi sa kompleksom kurkumin-kvercetin pokazalo je da kurkumin i kvercetin u farmaceutskoj kompoziciji sa kompleksom kurkumin-kvercetin pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize.
[0456] Poređenje efikasnosti apoptoze u grupi sa kurkuminom, u grupi sa sinefrinom i u grupi sa kompleksom kurkumin-sinefrin pokazalo je da kurkumin i sinefrin u farmaceutskoj kompoziciji sa kompleksom kurkumin-kvercetin pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize.
[0457] Stoga, kompleksne farmaceutske kompozicije formirane sa kurkuminom i različitim lipofilnim lekovima mogu postići efekat lipolize, i postoji sinergija između kurkumina i različitih lipofilnih lekova u efikasnosti lipolize. Stoga, ovaj pronalazak koristi kurkumin i različite lipofilne lekove za pripremu micela koje sadrže lek i micela koje sadrže drugi lipofilni lek, a dodatno priprema farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek, koje su farmaceutske kompozicije sposobne da se koriste za lokalizovanu lipolizu i smanjenje telesne težine.
[0458] Predmetni pronalazak obezbeđuje prvi postupak pripreme za pripremu farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek, a farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek sadrži micele koje sadrže lek i micele koje sadrže drugi lipofilni lek; prvi postupak pripreme za pripremu farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek je sledeći:
[0460] (A) Koraci za pripremu micelarnog podsklopa koji sadrži lek, za pripremu micelarnog podsklopa koji sadrži lek;
[0461] (B) Koraci za pripremu micelarnog podsklopa koji sadrži drugi lipofilni lek, za pripremu micelarnog podsklopa koji sadrži drugi lipofilni lek; i
[0462] (C) Mešanje micelarnog podsklopa koji sadrži lek sa micelarnim podsklopom koji sadrži drugi lipofilni lek, da bi se pripremila farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek;
[0464] Pri čemu, korak (A) za pripremu micelarnog podsklopa koji sadrži lek obuhvata sledeće korake (a2) ~ (d2)
[0466] (a2) Mešanje kurkumina sa prvim rastvaračem i mešanje brzinom od 150 ~ 500 o/min na sobnoj temperaturi dok se kurkumin potpuno ne rastvori;
[0467] (b2) Dodavanje prvog farmaceutski prihvatljivog surfaktanta i temeljno mešanje na 100 ~ 300 o/min da bi ispario prvi rastvarač, pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) prvog surfaktanta veća od 10;
[0468] (c2) Nakon što prvi rastvarač potpuno ispari, dobijaju se micele koje sadrže lek; i (d2) Filtriranje kroz filter od 0.2 um, pri čemu filtrirani rastvor predstavlja micelarni podsklop koji sadrži lek, a sastoji se od micela koje sadrže lek;
[0470] Osim toga, korak (B) za pripremu micelarnog podsklopa koji sadrži drugi lipofilni lek obuhvata sledeće korake (a3) ~ (d3):
[0472] (a3) Mešanje drugog lipofilnog leka sa drugim rastvaračem i mešanje brzinom od 200 ~ 500 o/min na sobnoj temperaturi dok se drugi lipofilni lek potpuno ne rastvori;
[0473] (b3) Dodavanje drugog farmaceutski prihvatljivog surfaktanta i temeljno mešanje na 100 ~ 300 o/min kako bi ispario drugi rastvarač, pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) drugog surfaktanta veća od 10;
[0474] (c3) Nakon što drugi rastvarač potpuno ispari, dobijaju se micele koje sadrže drugi lipofilni lek; i
[0475] (d3) Filtriranje kroz filter od 0.2 um, i filtrirani rastvor je micelarni podsklop koji sadrži drugi lipofilni lek i sastoji se od micela koje sadrže drugi lipofilni lek.
[0477] Pri čemu je, u koraku (c2) micela koja sadrži lek mikrostruktura koju formira surfaktant, a kurkumin je inkapsuliran u navedenoj miceli koja sadrži lek. U koraku (c3), micela koja sadrži drugi lipofilni lek je mikrostruktura koju formira drugi surfaktant, a drugi lipofilni lek je inkapsuliran u navedenoj miceli koja sadrži drugi lipofilni lek.
[0478] Poželjno, operativna procedura u koraku (c2) je: Nakon što prvi rastvarač potpuno ispari, polako se dodaje farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor i dobro se meša da bi se formirale micele koje sadrže lek.
[0479] Poželjno, operativna procedura u koraku (c3) je sledeća: Nakon što drugi rastvarač potpuno ispari, polako se dodaje farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor i dobro se meša da bi se formirale micele koje sadrže drugi lipofilni lek.
[0480] Poželjno, drugi lipofilni lek je najmanje jedno od kvercetina, sinefrina, puerarina, resveratrola i bilo kog lipofilnog leka osim kurkumina, ili njihova kombinacija.http://www.google.com.tw/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=6& cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwjTvJHR5o LAhXGppQKHSUjBq4QFghHMAU&u rl=http%3A%2F%2Fwww.tdais.gov.tw%2Fshow monthly.php%3Fid%3Dtdares tdar es_edit_20080513182435&usg=AFQjCNG-COGfdKrv1GN16vWTANjYfRvQQVw [0306] Poželjno, u koraku (a2) i/ili koraku (a3) tačka(e) ključanja prvog rastvarača i/ili drugog rastvarača je(su) niža od tačke ključanja čiste vode.
[0481] Poželjno, u koraku (a2) i/ili koraku (a3) prvi rastvarač i/ili drugi rastvarač je hidrofilni rastvarač.
[0482] Poželjno, hidrofilni rastvarač je najmanje jedno od metanola, etanola, acetona i drugih hidrofilnih rastvarača, ili njihova kombinacija.
[0483] Poželjno, u koraku (a2) i/ili koraku (a3) prvi rastvarač i/ili drugi rastvarač je lipofilni rastvarač.
[0484] Poželjno, lipofilni (hidrofobni) rastvarač je najmanje jedno od etra, benzena, hloroforma, dihlorometarana, heksana i drugih lipofilnih (hidrofobnih) rastvarača, ili njihova kombinacija.
[0485] Poželjno, u koraku (b2) i/ili (b3) prvi surfaktant i/ili drugi surfaktant je nejonski surfaktant.
[0486] Poželjno, nejonski surfaktant je najmanje jedno od polioksietilen (20) sorbitan monooleata (polisorbat 80 ili Tween 80), solutola HS 15 (polioksil 15 hidroksistearata), polioksietilen ricinusovih ulja i drugih nejonskih surfaktanta, ili njihova kombinacija.
[0487] Poželjno, polioksietilen ricinusovo ulje je najmanje jedno od: Kolliphor ELP (takođe poznato kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP), polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje (Cremophor RH 40) i druga polioksietilen ricinusova ulja, ili njihova kombinacija.
[0488] Poželjno, težinski odnos kurkumina i drugog lipofilnog leka je 30:1 ~ 1:10.
[0489] Poželjno, u koracima (a2) i (b2) težinski odnos kurkumina i prvog surfaktanta je od 1:4 do 1:500.
[0490] Poželjno, u koracima (a3) i (b3) težinski odnos drugog lipofilnog leka i drugog surfaktanta je od 1:4 do 1:500.
[0491] Poželjno, u koraku (c2) i/ili (c3) farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor je voda za injekcije, vodeni rastvor za injekcije ili fiziološki rastvor.
[0492] Poželjno, u koraku (c2) i/ili (c3) farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor sadrži lokalni anestetik.
[0493] Poželjno, lokalni anestetik je najmanje jedno od amida, estara para-aminobenzoeve kiseline i amino etara, ili njihova kombinacija.
[0494] Poželjno, amidi su najmanje jedno od dibukaina, lidokaina, mepivakaina HCl, bupivacina HCl, pirokaina HCl, prilokaina HCl, digamakaina i oksetazaina, ili njihova kombinacija.
[0495] Poželjno , estri para-aminobenzoeve kiseline su najmanje jedno od butakaina, dimetokaina i tutokaina ili njihova kombinacija.
[0496] Poželjno, amino etri su najmanje jedno od hinisokaina i pramokaina, ili njihova kombinacija.
[0497] Poželjno, u koraku (c2) i/ili (c3) farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor sadrži antioksidans.
[0498] Poželjno, antioksidans je najmanje jedno od beta-karotena, luteina, likopena, bilirubina, vitamina A, vitamina C (askorbinske kiseline), vitamina E, mokraćne kiseline, azotnog oksida, nitroksida, piruvata, katalaze, superoksid dismutaze, glutation peroksidaze, N-acetil cisteina i naringenina, ili njihove kombinacije.
[0499] Predmetni pronalazak obezbeđuje drugu pripremu farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek i drugi postupak pripreme farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek je sažetiji od prvog postupka pripreme farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek; procedura u drugom postupku pripreme farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek je sledeća:
[0501] (a4) Mešanje kurkumina, drugog lipofilnog leka i rastvarača i mešanje na 200~500 o/min dok se kurkumin potpuno ne rastvori;
[0502] (b4) Dodavanje farmaceutski prihvatljivog surfaktanta i temeljno mešanje na 100 ~ 300 o/min kako bi ispario rastvarač, pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) surfaktanta veća od 10;
[0503] (c4) Kada rastvarač potpuno ispari, polako se dodaje farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor i temeljno se meša kako bi se formirale micele koje sadrže lek i micele koje sadrže drugi lipofilni lek; i
[0504] (d4) Filtriranje kroz filter od 0.2 um i čuvanje filtriranog rastvora koji sadrži micele koje sadrže lek i micele koje sadrže drugi lipofilni lek u mraku i frižideru;
[0506] Vrste i rasponi rastvarača, surfaktanata, farmaceutski prihvatljivih vodenih rastvora i drugih lipofilnih lekova koji se koriste u drugoj pripremi farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek su isti kao oni koji se koriste u prvoj pripremi farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek. Pored toga, rasponi relativnih odnosa sastojaka koji se koriste u drugoj pripremi farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek su isti kao i oni u prvoj pripremi farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek.
[0507] Poželjno, farmaceutska kompozicija sadrži lokalni anestetik i/ili antioksidans.
[0508] Poželjno, vrste i rasponi lokalnih anestetika i antioksidanasa u drugoj pripremi farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek su isti kao i oni koji su korišćeni u prvoj pripremi farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek.
[0510] Eksperiment 9: Efekti formulacije za potkožnu injekciju kompleksa kurkumin-ekstrakt zelenog čaja na potkožno masno tkivo pacova
[0512] Eksperiment 9-1: Efekti jednostavne formulacije za potkožnu injekciju sa ekstraktom zelenog čaja na potkožno masno tkivo pacova
[0514] Priprema formulacije za potkožnu injekciju ekstrakta zelenog čaja:
[0515] Ekstrakt zelenog čaja je pomešan sa odgovarajućom količinom normalnog fiziološkog rastvora za injekcije da bi se dobila formulacija za potkožnu injekciju sa ekstraktom zelenog čaja.
[0516] Pacovi su raspoređeni u kontrolnu grupu sa ishranom bogatom mastima i grupu sa ekstraktom zelenog čaja, sa po 6 pacova u svakoj grupi. Pacovi su hranjeni na isti način kao što je opisano u eksperimentu 2. Formulacija sa ekstraktom zelenog čaja za potkožnu injekciju ubrizgana je u potkožni sloj donjeg ingvinalnog masnog tkiva pacova u grupi sa ekstraktom zelenog čaja. Svaka ubrizgana doza bila je 8 mg ekstrakta zelenog čaja po kilogramu telesne težine (8 mg/kg). Pacovima u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima ubrizgana je ista zapremina vode za injekcije na isti način kao što je prethodno u tekstu opisano.
[0517] [0331] Prethodno pomenuta mesta ubrizgavanja bila su donji ingvinalni masni jastučići pacova. Bilateralne injekcije su primenjene sa ravnomerno jednom dnevno 1, 3. i 5. dana eksperimenta. Pacovi su dobijali hranu bogatu mastima tokom celog trajanja eksperimenta. Njihove promene težine beležene su svakodnevno, a potrošnja hrane i vode je beležena jednom nedeljno. Eksperiment je trajao 20 dana i pacovi su eutanazirani 21. dana pomoću CO<2>.
[0518] Molimo pogledajte sliku 11. Slika 11 je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte formulacije za potkožnu injekciju, sa ekstraktom zelenog čaja, bez ekscipijensa, na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova
[0519] Rezultati na slici 11 pokazali su da je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima bila 100.00±21.51%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa ekstraktom zelenog čaja bila je 99.50±13.14%. Nije bilo značajne razlike između relativne težine donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa ekstraktom zelenog čaja i one kod pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima, što ukazuje da kompozicija hidrofilni biljni ekstrakt-ekstrakt zelenog čaja bez ekscipijensa, ne može da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo).
[0521] Eksperiment 9-2: Uticaj učestalosti doziranja na potkožno masno tkivo i telesnu težinu pacova
[0522] U ovom eksperimentu, pacovima u svakoj grupi je data jednaka količina ukupne ubrizgane doze farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-zeleni čaj, ali sa različitom učestalošću doziranja kako bi se procenili efekti učestalosti doziranja na potkožno masno tkivo i telesnu težinu pacova. U ovom eksperimentu, drugim pacovima je dat glavni sastojak injecione formulacije za lokalnu lipolizu, koja je dostupna na tržištu, kako bi se istovremeno uporedili efekti farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-zeleni čaj prema predmetnom pronalasku i injekcione formulacije za lokalnu lipolizu koja je dostupna na tržištu, na potkožno masno tkivo i telesnu težinu pacova.
[0523] Rastvor sa natrijum deoksiholatom i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja pripremljeni su na sledeći način:
[0524] Priprema rastvora sa natrijum deoksiholatom: isto kao i priprema rastvora sa natrijum deoksiholatom u eksperimentu 7-4.
[0525] [0336] Priprema farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja: 0.8 g kurkumina je pomešano sa 150~200 ml dihlorometana i mešano na 150~500 o/min da bi se kurkumin potpuno rastvorio. Dodato je 40 g Kolliphor ELP (takođe poznatog kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP, skraćeno ELP) i mešano na 100~300 o/min kako bi dihlorometan ispario. Nakon što je dihlorometanom potpuno ispario, polako je dodat fiziološki rastvor za injekcije do ukupne zapremine od 200 ml. Pri čemu je fiziološki rastvor za injekcije sadržao 0.2 g ekstrakta zelenog čaja. Rastvor je dobro promešan da bi se dobio rastvor kompleksa kurkumin-ekstrakt zelenog čaja koji sadrži ELP. Navedeni rastvor kompleksa kurkumin-ekstrakt zelenog čaja koji sadrži ELP sastojao se od micela koje sadrže lek, ukupna koncentracija kurkumina i zelenog čaja bila je 5 mg/ml, a težinski odnos kurkumina i ekstrakta zelenog čaja bio je 4:1
[0526] Pacovi su nasumično raspoređeni u 4 grupe, koje su bile kontrolna grupa sa ishranom bogatom mastima, grupa sa natrijum deoksiholatom, grupa sa visokom učestalošću doziranja kurkumina i ekstrakta zelenog čaja (skraćeno grupa sa visokom učestalošću doziranja u ovom eksperimentu) i grupa sa niskom učestalošću doziranja kurkumina i ekstrakta zelenog čaja (skraćeno grupa sa niskom učestalošću doziranja). Pacovi su hranjeni na isti način kao što je opisano u eksperimentu 2.
[0527] Lekovi su primenjivani na sledeći način:
[0528] Grupa sa natrijum deoksiholatom: Rastvor sa natrijum deoksiholatom je ubrizgan u donji sloj ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa natrijum deoksiholatom. Zapremina svake injekcije bila je 4 ml po kilogramu telesne težine (4 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 10.3 mg/kg (10.3 mg/kg; izračunavanje: 2.575 mg/ml x 4 ml/kg = 10.3 mg/kg). Pacovima je lek ubrizgan jednom dnevno 1, 3. i 5. dana eksperimenta, sa ukupno 3 injekcije, tako da je ukupna doza bila 30.9 mg/kg (10.3 mg/kg x 3 = 30.9 mg/kg).
[0529] Grupa sa visokom učestalošću doziranja: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja je ubrizgana u donji ingvinalni sloj potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja. Zapremina svake injekcije bila je 4 ml po kilogramu telesne težine (4 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 20 mg/kg (20 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml x 4 ml/kg = 20 mg/kg). Pacovi su injecirani jednom dnevno 1, 3, 5, 7, 9. i 11. dana eksperimenta, sa ukupno 6 injekcija, tako da je ukupna doza bila 120 mg/kg (20 mg/kg x 6 = 120 mg/kg).
[0530] Grupa sa visokom učestalošću doziranja: Farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja je ubrizgana u donji ingvinalni sloj potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja. Zapremina svake injekcije bila je 8 ml po kilogramu telesne težine (8 ml/kg), tako da je svaka ubrizgana doza bila 40 mg/kg (40 mg/kg; izračunavanje: 5 mg/ml x 8 ml/kg = 40 mg/kg). Pacovima je lek ubrizgan jednom dnevno 1, 3. i 5. dana eksperimenta, sa ukupno 3 injekcije, tako da je ukupna doza bila 120 mg/kg (40 mg/kg x 3 = 120 mg/kg).
[0531] Kontrolna grupa sa ishranom bogatom mastima: pacovima je ubrizgana voda za injekcije na isti način kao što je prethodno u tekstu opisano.
[0532] Pacovi su dobijali hranu bogatu mastima tokom celog trajanja eksperimenta. Eksperiment je trajao 20 dana i pacovi su eutanazirani 21. dana pomoću CO<2>
[0533] Molimo pogledajte slike 12A i 12B. Slika 12A je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja na količinu lokalizovanog potkožnog masnog tkiva kod pacova. Slika 12B je grafikon sa stubićima koji prikazuje efekte učestalosti doziranja farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja na ukupnu telesnu težinu pacova.
[0534] Rezultati na slici 12A pokazali su da je relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima bila 100.0±22.6%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa natrijum deoksiholatom bila je 88.8±16.7%, relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja bila je 57.6±7.4%, a relativna težina donjeg ingvinalnog potkožnog masnog tkiva pacova u grupi sa niskom učestalošću doziranja bila je 60.7±4.0%.
[0535] U poređenju sa kontrolnom grupom sa ishranom bogatom mastima, i grupa sa visokom učestalošću doziranja i grupa sa niskom učestalošću doziranja mogu značajno da redukuje masno tkivo na mestu primene (lokalizovano masno tkivo) (p<0.05). Dakle, ako je koncentracija farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja dovoljna, niskom učestalošću doziranja može se postići efekat lokalne lipolize.
[0536] U poređenju sa grupom sa niskom učestalošću doziranja, efekat lipolize kod grupe sa visokom učestalošću doziranja je bolji. Iako nije bilo značajne razlike između visoke učestalosti doziranja i niske učestalosti doziranja, visoka učestalost doziranja može da postigne bolji trend efekta lokalne lipolize.
[0537] Rezultati na slici 12B pokazali su da je relativno povećanje težine pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima bilo 100.0±11.6%, relativno povećanje težine pacova u grupi sa natrijum deoksiholatom bilo je 100.2±12.6%, relativno povećanje težine pacova u grupi sa visokom učestalošću doziranja bilo je 58.7±9.0% i relativno povećanje težine pacova u grupi sa niskom učestalošću doziranja bilo je 74.9±9.0%. U poređenju sa relativnim povećanjem težine pacova u kontrolnoj grupi sa ishranom bogatom mastima, relativno povećanje težine pacova i u grupi sa niskom i u grupi sa visokom učestalošću doziranja je značajno smanjeno (p<0.05), a relativno povećanje težine je smanjeno za 25.1% i 41.3%, respektivno, što pokazuje da je efekat gubitka težine bio veoma značajan.
[0538] Dakle, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja prema predmetnom pronalasku može značajno da smanji telesnu težinu, a efikasnost gubitka težine pri visokoj učestalosti doziranja je značajno bolja nego pri niskoj učestalosti doziranja (p<0.05).
[0539] Na osnovu iskustava pronalazača, kada je učestalost doziranja pogodna za pacove 3~6 puta, učestalost doziranja pogodna za čoveka je 1~12 puta. Poželjno, učestalost doziranja za čoveka iznosi 1~6 puta.
[0540] Poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 1~12 puta svakog drugog dana do svakih 30 dana. Poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 1~6 puta svakog drugog dana do svakih 30 dana. Ili, poželjno, učestalost doziranja za čoveka je 3~60 puta svakog drugog dana do svakih 20 dana; poželjno je učestalost doziranja za čoveka 6~42 puta svakog drugog dana do svakih 14 dana.
[0542] Eksperiment 10: Efekti kompleksnih farmaceutskih kompozicija sa kurkuminom na lipolizu
[0543] U ovom eksperimentu korišćeni su kurkumin i hidrofilni lekovi koji nisu ekstrakt zelenog čaja, za pripremu kompleksnih farmaceutskih kompozicija radi procene efikasnosti lipolize različitih hidrofilnih kompleksnih farmaceutskih kompozicija na zrelim adipocitima.
[0544] U ovom eksperimentu koriste se kofein i L-karnitin za pripremu farmaceutskih kompozicija sa različitim hidrofilnim kompleksima.
[0546] Eksperiment 10-1: Test citotoksičnosti
[0548] Pomoću MTT testa se utvrđuje da li je 50 ppm kofeina i L-karnitina toksično za ćelije koje nisu adipociti. Test lipolize se nastavlja samo ako se utvrdi da je lek netoksičan.
[0549] Eksperimentalni rezultati su pokazali da 50 ppm kofeina i L-karnitina nije citotoksično za somatske ćelije pacova, osim adipocita, tako da ova doza neće uticati na opšte somatske ćelije.
[0551] Eksperiment 10-2: Efikasnost lipolize kod zrelih adipocita
[0553] Medijum za ćelijsku kulturu kontrolne grupe sa sterilnom vodom, medijum za ćelijsku kulturu sa kurkuminom, medijum za ćelijsku kulturu sa kofeinom, medijum za ćelijsku kulturu sa L-karnitinom, medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-kofein i medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-L-karnitin, pripremljeni su na sledeći način:
[0554] Medijum za ćelijsku kulturu kontrolne grupe sa sterilnom vodom: Sterilna voda je pomešana sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio sterilni medijum za ćelijsku kulturu kontrolne grupe sa sterilnom vodom. Pri tome je odnos zapremina sterilne vode i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0555] Medijum za ćelijsku kulturu sa kurkuminom: isto kao i priprema medijuma za ćelijsku kulturu sa kurkuminom u eksperimentu 8-2.
[0556] Medijum za ćelijsku kulturu sa kofeinom: Kofein (kupljen od firme Sigma-Aldrich) je pomešan sa odgovarajućom količinom sterilne vode da bi se dobio rastvor kofeina. Rastvor kofeina je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kofeinom koji sadrži 50 ppm kofeina. Pri tome je odnos zapremina medijuma za ćelijsku kulturu sa kofeinom i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0557] Medijum za ćelijsku kulturu sa L-karnitinom: L-karnitin (kupljen od firme Sigma-Aldrich) je pomešan sa odgovarajućom količinom sterilne vode da bi se dobio rastvor L-karnitina. Rastvor L-karnitina je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kofeinom koja sadrži 50 ppm L-kamitina. Pri tome je odnos zapremina medijuma za ćelijsku kulturu sa L-karnitinom i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0558] Medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-kofein: Kurkumin i kofein su pomešani sa odgovarajućom količinom sterilne vode da bi se pripremio rastvor kompleksa kurkumin-kofein. Pri tome je težinski odnos kurkumina i kofeina bio 2:3. Rastvor kompleksa kurkumin-kofein je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu kompleksa kurkumin-kofein koja sadrži 50 ppm kompleksnog leka kurkumin-kofein. Pri čemu je koncentracija kurkumina bila 20 ppm, koncentracija kofeina 30 ppm, a odnos zapremine rastvora sa kompleksom kurkumin-kofein i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0559] Medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-L-karnitin: Kurkumin i L-karnitin su pomešani sa odgovarajućom količinom sterilne vode da bi se pripremio rastvor kompleksa kurkumin-L-karnitin. Pri tome je težinski odnos kurkumina i L-karnitina bio 2:3. Rastvor kompleksa kurkumin-L-karnitin je pomešan sa medijumom za ćelijsku kulturu da bi se pripremio medijum za ćelijsku kulturu sa kompleksom kurkumin-L-karnitin koja sadrži 50 ppm kompleksnog leka kurkumin-L-karnitin. Pri čemu je koncentracija kurkumina bila 20 ppm, koncentracija L-karnitina 30 ppm, a odnos zapremina rastvora sa kompleksom kurkumin-L-karnitin i medijuma za ćelijsku kulturu bio 1:1000.
[0560] Priprema zrelih adipocita bila je ista kao i u eksperimentu 8-2.
[0561] Adipociti su raspoređeni u 6 grupa, koje su bile grupa sa sterilnom vodom, grupa sa kurkuminom, grupa sa kofeinom, grupa sa L-karnitinom, grupa sa kompleksom kurkuminkofein i grupa sa kompleksom kurkumin-L-karnitin.
[0562] Zreli adipociti u grupi sa sterilnom vodom, grupi sa kurkuminom, grupi sa kofeinom, grupi sa L-karnitinom, grupi sa kompleksom kurkumin-kofein i grupi sa kompleksom kurkumin-L-karnitin gajeni su sa kontrolnom podlogom za kulturu ćelija sa sterilnom vodom, podlogom za kulturu ćelija sa kurkuminom, podlogom za kulturu ćelija sa kofeinom, podlogom za kulturu ćelija sa L-karnitinom, podlogom za kulturu ćelija sa kompleksom kurkumin-kofein i podlogom za kulturu ćelija sa kompleksom kurkumin-L-karnitin, respektivno, tokom 24 sata.
[0563] Protein aneksin V (kupljen od firme eBioscience) i propidijum jodid (PI; kupljen od firme eBioscience) su mešani sa ćelijama u svakoj grupi tokom određenog vremenskog perioda, a zatim je procenat ćelija koje su obeležene sa proteinom aneksin V i sa PI u svakoj grupi analiziran protočnom citometrijom kako bi se procenio procenat zrelih adipocita koji podležu apoptozi. Pri čemu, kada je zreli adipocit obeležen i sa proteinom aneksin V i sa PI, to ukazuje na to da je ćelija podlegla apoptozi; kada zreliji adipociti podležu apoptozi, to ukazuje da je efikasnost lipolize primenjenog leka bolja, a takođe ukazuje da je lipoliza posredovana apoptozom, ali ne i nekrozom.
[0564] Pošto je ukupna doza primenjenog leka bila 50 ppm, i 40% je bio kurkumin, a 60% kofein, efikasnost lipolize u grupi sa kompleksom kurkumin-kofein trebalo bi da je bliska proseku za grupu sa kurkuminom i grupu sa kofeinom. Ako je efikasnost lipolize u grupi sa kompleksom kurkumin-kofein značajno bolja od proseka grupe sa kurkuminom i grupe sa kofeinom, to ukazuje da kurkumin i kofein u farmaceutskoj kompoziciji sa kompleksom kurkumin-kofein pokazuju sinergiju. Slično, pošto je ukupna doza primenjenog leka bila 50 ppm, i 40% je bio kurkumin, a 60% L-karnitin, efikasnost lipolize u grupi sa kompleksom kurkumin-L-karnitin trebalo bi da je blizu proseka grupe sa kurkuminom i grupe sa kofeinom. Ako je efikasnost lipolize u grupi sa kompleksom kurkumin-L-karnitin značajno bolja od proseka grupe sa kurkuminom i grupe sa L-karnitinom, to ukazuje da kurkumin i L-karnitin u farmaceutskoj kompoziciji sa kompleksom kurkumin-L-karnitin pokazuju sinergiju.
[0565] Molimo pogledajte sliku 13. Slika 13 je grafikon sa stubićima koji pokazuje efekte farmaceutskih kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi hidrofilni lek na apoptozu zrelih adipocita
[0566] [0366] Rezultati na slici 13 pokazali su da je procenat apoptotskih ćelija u kontrolnoj grupi sa sterilnom vodom bio 0.8±0.4%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kurkuminom bio je 78.4±5.4%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kofeinom bio je 2.0±1.7%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa L-karnitinom bio je 1.7±0.5%, procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kompleksom kurkumin-kofein bio je 69.3±4.5% i procenat apoptotskih ćelija u grupi sa kompleksom kurkumin-L-karnitin bio je 74.1±10.2%.
[0567] Poređenje efikasnosti apoptoze u grupi sa kurkuminom, u grupi sa kofeinom i u grupi sa kompleksom kurkumin-kofein pokazalo je da kurkumin i kofein u farmaceutskoj kompoziciji sa kompleksom kurkumin-kofein pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize.
[0568] Poređenje efikasnosti apoptoze u grupi sa kurkuminom, u grupi sa L-karnitinom i u grupi sa kompleksom kurkumin-L-karnitin pokazalo je da kurkumin i L-karnitin u farmaceutskoj kompoziciji sa kompleksom kurkumin-L-karnitin pokazuju sinergiju u efikasnosti lipolize.
[0569] Dakle, kompleksne farmaceutske kompozicije formirane sa kurkuminom i različitim hidrofilnim lekovima mogu da postignu efekat lipolize i postoji sinergija između kurkumina i različitih hidrofilnih lekova u efektima lipolize. Stoga se u predmetnom pronalasku koriste kurkumin i različiti hidrofilni lekovi za pripremu micela koje sadrže lek i micela koje sadrže drugi lipofilni lek, i dodatno se pripremaju farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi hidrofilni lek, koje predstavljaju farmaceutske kompozicije sposobne da se koriste za lokalizovanu lipolizu i smanjenje telesne težine.
[0570] Predmetni pronalazak obezbeđuje pripremu za farmaceutsku kompoziciju sa kompleksom kurkumin-drugi hidrofilni lek, i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi hidrofilni lek sadrži micele koje sadrže lek i hidrofilni lek; procedura za pripremu farmaceutske kompozicije sa kompleksom kurkumin-drugi hidrofilni lek je sledeća:
[0572] (a5) Mešanje kurkumina sa rastvaračem i mešanje brzinom od 150~500 o/min na sobnoj temperaturi dok se kurkumin potpuno ne rastvori;
[0573] (b5) Dodavanje farmaceutski prihvatljivog surfaktanta i temeljno mešanje na 100 ~ 300 o/min kako bi ispario rastvarač, pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) surfaktanta veća od 10;
[0574] (c5) Kada rastvarač potpuno ispari, polako se dodaje prvi farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor i temeljno se meša na 100~300 o/min da bi se formirale micele koje sadrže lek; i (d5) Filtriranje kroz filter od 0.2 um i čuvanje filtriranog rastvora koji sadrži micele koje sadrže lek u mraku i frižideru;
[0576] Pri tome, prvi farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor sadrži hidrofilni lek.
[0577] Poželjno, prva farmaceutska kompozicija sadrži lokalni anestetik.
[0578] Poželjno, lokalni anestetik je najmanje jedno od amida, estara para-aminobenzoeve kiseline i amino etara, ili njihova kombinacija
[0579] Poželjno, amidi su najmanje jedno od dibukaina, lidokaina, mepivakaina HCl, bupivacina HCl, pirokaina HCl, prilokaina HCl, digamakaina i oksetazaina ili njihova kombinacija.
[0580] Poželjno, estri para-aminobenzoeve kiseline su najmanje jedno od butakaina, dimetokaina i tutokaina ili njihova kombinacija.
[0581] Poželjno, amino etri su najmanje jedno od hinizokaina i pramokaina ili njihova kombinacija.
[0582] Poželjno, prvi farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor sadrži antioksidans.
[0583] Poželjno, antioksidans je najmanje jedno od beta-karotena, luteina, likopena, bilirubina, vitamina A, vitamina C (askorbinske kiseline), vitamina E, mokraćne kiseline, azotnog oksida, nitroksida, piruvata, katalaze, superoksid dismutaze, glutation peroksidaze, N-acetil cisteina i naringenina, ili njihove kombinacije.
[0584] Poželjno, u koraku (a5), tačka ključanja rastvarača je niža od tačke ključanja čiste vode.
[0585] Poželjno, u koraku (a5), rastvarač je hidrofilni rastvarač. ∘
[0586] Poželjno, hidrofilni rastvarač je najmanje jedno od metanola, etanola, acetona i drugih hidrofilnih rastvarača, ili njihova kombinacija.
[0587] Poželjno, rastvarač u koraku (a5) je lipofilni (hidrofobni) rastvarač.
[0588] Poželjno, lipofilni (hidrofobni) rastvarač je najmanje jedno od etra, benzena, hloroforma, dihlorometarana, heksana i drugih lipofilnih (hidrofobnih) rastvarača, ili njihova kombinacija.
[0589] Poželjno, u koraku (b5) surfaktant je nejonski surfaktant.
[0590] Poželjno, nejonski surfaktant je najmanje jedno od polioksietilen (20) sorbitan monooleata (polisorbat 80 ili Tween 80), solutola HS 15 (polioksil 15 hidroksistearat), polioksietilen ricinusovih ulja i drugih nejonskih surfaktanta, ili njihova kombinacija.
[0591] Poželjno, polioksietilen ricinusovo ulje je najmanje jedno od Kolliphor ELP (takođe poznat kao polioksil 35 ricinusovo ulje, polioksil 35 hidrogenizovano ricinusovo ulje ili Cremophor ELP), polioksil 40 hidrogenizovano ricinusovo ulje (Cremophor RH 40) i drugih polioksietilen ricinusovih ulja, ili njihova kombinacija.
[0592] Poželjno, između koraka (c5) i (d5), dalje su uključeni koraci: (c51) Dodavanje drugog farmaceutski prihvatljivog vodenog rastvora i temeljno mešanje da se drugi farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor potpuno rastvori.
[0593] Poželjno, hidrofilni lek se rastvara u prvom farmaceutski prihvatljivom vodenom rastvoru, micela koja sadrži lek je mikrostruktura koju formira surfaktant, a kurkumin je inkapsuliran u navedenoj miceli koja sadrži lek.
[0594] Poželjno, hidrofilni lek u prvom farmaceutski prihvatljivom vodeni rastvoru je najmanje jedno od ekstrakta zelenog čaja, epigalokatehin galata, epikatehina, epikatehin galata, epigalokatehina, galokatehin galata, galokatehina, katehin galata, katehina, epigalokatehin galata (EGCG), kofeina, karnitina, L-karnitina, sinefrina, hlorogenske kiseline i drugih hidrofilnih lekova, ili njihova kombinacija.
[0595] Poželjno, u koracima (a5) i (c5), težinski odnos kurkumina i hidrofilnog leka je od 30:1 do 1:10.
[0596] Poželjno, u koracima (a5)~(c5), na osnovu 1 težinske jedinice definisane kao ukupna težina kurkumina i hidrofilnog leka, težina surfaktanta je 0.24~70 težinskih jedinica; ili, težinski odnos ukupne težine kurkumina i hidrofilnog leka i surfaktanta iznosi 4:1 do 1:70.
[0597] Poželjno, u koracima (a5), (c5) i (c51), na bazi jedne težinske jedinice definisane kao ukupna težina kurkumina i hidrofilnog leka, ukupna težina prvog farmaceutski prihvatljivog vodenog rastvora i drugog farmaceutski prihvatljivog vodenog rastvora je 16~400 težinskih jedinica.
[0598] Poželjno, u koracima (c5) i (c51), prvi farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor i drugi farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor su voda za injekcije, vodeni rastvor za injekcije ili normalni fiziološki rastvor.
[0599] [0393] Kao što je pokazano primerima prema predmetnom pronalasku, jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-hidrofilni lek, koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom, i druge farmaceutske kompozicije koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom, mogu da redukuju lokalizovano masno tkivo i mogu da smanje telesnu težinu. Dakle, jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkuminekstrakt zelenog čaja, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-hidrofilni lek, koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom, i druge farmaceutske kompozicije koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom, mogu da se koriste za pripremu potkožnih imlantiranih sredstava, potkožnih implantata, rastvora za implantiranu infuziju, kreme ili flastera, koji se mogu primenjivati na mestima koja zahtevaju redukciju potkožnog masnog tkiva putem primene potkožne implantacije, implantirane infuzije, krema ili flastera. Ili, farmaceutske kompozicije mogu da se koriste za pripremu potkožnih implantiranih uređaja, potkožnih implantata, rastvora za implantiranu infuziju, krema ili flastera, koji mogu da se primene kod subjekta putem primene potkožne implantacije, intravenske injekcije, implantirane infuzije, kreme ili flastera, radi smanjenja telesne težine subjekta.
[0600] Poželjno, jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-hidrofilni lek koja je obezbeđena predmetnim pronalaskom, kao i druge farmaceutske kompozicije koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom, mogu da redukuju masno tkivo na mestu primene ili telesnu težinu injekcijom u potkožno masno tkivo. Dakle, jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-hidrofilni lek i druge farmaceutske kompozicije koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom mogu da se koriste za pripremu formulacije za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva ili formulacije za potkožnu injekciju, za redukciju lokalizovanog potkožnog masnog tkiva.
[0601] [0395] Poželjno, jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-hidrofilni lek, koja je obezbeđena predmetnim pronalaskom, kao i druge farmaceutske kompozicije koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom, mogu da smanje telesnu težinu formulacijom za injekciju u sloj potkožnog masnog tkiva ili intravenskom injekcijom. Dakle, jednostavna farmaceutska kompozicija sa kurkuminom, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-resveratrol, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-ekstrakt zelenog čaja, farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-drugi lipofilni lek i farmaceutska kompozicija sa kompleksom kurkumin-hidrofilni lek, koja je obezbeđena predmetnim pronalaskom, kao i druge farmaceutske kompozicije koje su obezbeđene predmetnim pronalaskom, mogu da se koriste za pripremu formulacije za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, formulacije za intravensku injekciju i formulacije za potkožnu injekciju, za smanjenje telesne težine.

Claims (18)

1. Patentni zahtevi
1. Farmaceutska kompozicija za primenu na lokalno mesto kod subjekta, koja sadrži:
micele koje sadrže lek;
kurkuminoid; i
farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant koji je polioksietilen ricinusovo ulje; pri čemu je težinski odnos kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1:8 - 1:500; pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta veća od 10, i
pri čemu su micele koje sadrže lek mikrostrukture formirane od strane nejonskog surfaktanta i sadrže inkapsuliran kurkuminoid.
2. Farmaceutska kompozicija za upotrebu u postupku redukcije potkožnog masnog tkiva na lokalnom mestu kod subjekta, pri čemu postupak obuhvata korak primene farmaceutske kompozicije na lokalno mesto kod subjekta, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži:
micele koje sadrže lek;
kurkuminoid; i
farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant;
pri čemu je težinski odnos kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1:8 - 1:500; pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta veća od 10, i
pri čemu su micele koje sadrže lek mikrostrukture formirane od strane nejonskog surfaktanta i sadrže inkapsuliran kurkuminoid.
3. Farmaceutska kompozicija za upotrebu u postupku smanjenja telesne težine subjekta, pri čemu postupak obuhvata korak primene farmaceutske kompozicije kod subjekta, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži:
micele koje sadrže lek;
kurkuminoid; i
farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant;
pri čemu je težinski odnos kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1:8 - 1:500; pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta veća od 10, i
pri čemu su micele koje sadrže lek mikrostrukture formirane od strane nejonskog surfaktanta i sadrže inkapsuliran kurkuminoid.
4. Upotreba farmaceutske kompozicije za neterapeutsku redukciju potkožnog masnog tkiva na lokalnom mestu kod subjekta, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži:
micele koje sadrže lek;
kurkuminoid; i
farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant;
pri čemu je težinski odnos kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1:8 - 1:500; pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta veća od 10, i
pri čemu su micele koje sadrže lek mikrostrukture formirane od strane nejonskog surfaktanta i sadrže inkapsuliran kurkuminoid.
5. Upotreba farmaceutske kompozicije za neterapeutsku redukciju telesne težine subjekta, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži:
micele koje sadrže lek;
kurkuminoid; i
farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant;
pri čemu je težinski odnos kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1:8 - 1:500; pri čemu je vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) nejonskog surfaktanta veća od 10, i
pri čemu su micele koje sadrže lek mikrostrukture formirane od strane nejonskog surfaktanta i sadrže inkapsuliran kurkuminoid.
6. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2 ili 3 ili upotreba prema patentnom zahtevu 4 ili 5, naznačena time što je nejonski surfaktant najmanje jedno od polioksietilen (20) sorbitan monooleata, polioksil 15 hidroksistearata, polioksietilen ricinusovog ulja i drugih nejonskih surfaktanta ili njihovih kombinacija.
7. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 6 ili upotreba prema patentnom zahtevu 6, naznačena time što je polioksietilen ricinusovo ulje izabrano iz grupe koja se sastoji od polioksil 35 ricinusovog ulja, polioksil 40 hidrogenizovanog ricinusovog ulja i drugih polioksietilen ricinusovih ulja ili njihovih kombinacija.
8. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2 ili 3 ili upotreba prema patentnom zahtevu 4 ili 5, naznačena time što je težinski odnos kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1:8 do 1:150, opciono, gde je težinski odnos kurkuminoida i nejonskog surfaktanta 1:20 do 1:150.
9. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2 ili 3 ili upotreba prema patentnom zahtevu 4 ili 5, naznačena time što je koncentracija kurkuminoida u farmaceutskoj kompoziciji 0.3 ~ 120 mg/g, opciono gde je koncentracija kurkuminoida u farmaceutskoj kompoziciji 2 ~ 91mg/g.
10. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2 ili 3 ili upotreba prema patentnom zahtevu 4 ili 5, naznačena time što je prečnik micela koje sadrže lek 3 ~ 50 nm, opciono gde je prečnik micela koje sadrže lek 5 ~ 20 nm.
11. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2 ili 3 ili upotreba prema patentnom zahtevu 4 ili 5, naznačena time što farmaceutska kompozicija dodatno sadrži farmaceutski prihvatljiv vodeni rastvor.
12. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1 ili 11, farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2, 3 ili 11, ili upotreba prema patentnom zahtevu 4, 5 ili 11, naznačena time što farmaceutska kompozicija dodatno sadrži micelu koja sadrži drugi lipofilni lek; pri čemu, micela koja sadrži drugi lipofilni lek je druga mikrostruktura formirana od strane drugog nejonskog surfaktanta, i drugi lipofilni lek je inkapsuliran u navedenim micelama koje sadrže drugi lipofilni lek, pri čemu, opciono:
a) vrednost hidrofilno-lipofilne ravnoteže (HLB vrednost) drugog nejonskog surfaktanta je veća od 10, ili
b) drugi nejonski surfaktant je najmanje jedno od polioksietilen (20) sorbitan monooleata,
polioksil 15 hidroksistearata, polioksietilen ricinusovo ulje i drugi nejonski surfaktanti, ili njihova kombinacija, dalje, opciono, gde je drugi nejonski surfaktant najmanje jedno od polioksil 35 ricinusovog ulja, polioksil 40 hidrogenizovanog ricinusovog ulja i drugih polioksietilen ricinusovih ulja, ili njihova kombinacija, ili
c) drugi lipofilni lek je najmanje jedno od kvercetina, sinefrina, puerarina, resveratrola i bilo kog lipofilnog leka osim kurkuminoida, ili njihova kombinacija, ili
d) težinski odnos kurkuminoida i drugog lipofilnog leka je 30:1 ~ 1:10.
13. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1 ili 11, farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2, 3 ili 11, ili upotreba prema patentnom zahtevu 4, 5 ili 11, naznačena time što farmaceutska kompozicija dodatno sadrži hidrofilni lek, pri čemu, opciono:
a) hidrofilni lek je najmanje jedno od ekstrakta zelenog čaja, epigalokatehin galata, epikatehina, epikatehingalata, epigalokatehina, galokatehingalata, galokatehina, katehingalata, katehina, epigalokatehin galata (EGCG), kofeina, karnitina, L-karnitina, sinefrina, hlorogenske kiseline i drugih hidrofilnih lekova, ili njihova kombinacija; ili b) težinski odnos kurkuminoida i hidrofilnog leka je 30:1 do 1:10.
14. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2 ili 3, ili upotreba prema patentnom zahtevu 4 ili 5, naznačena time što farmaceutska kompozicija dalje sadrži najmanje jedno od ko-rastvarača, sredstva za suspendovanje i ekscipijensa uljane faze, ili njihovu kombinaciju, dalje, opciono, gde je mikrostruktura formirana zajednički, od strane nejonskog surfaktanta i najmanje jednog od ekscipijensa uljane faze i korastvarača.
15.Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 2 ili upotreba prema patentnom zahtevu 4, naznačena time što:
a) korak je da se farmaceutska kompozicija primeni na lokalno mesto kod subjekta pomoću formulacije za potkožnu injekciju, formulacije za injekciju u potkožni sloj
masnog tkiva, rastvora za implantiranu infuziju, formulacije u vidu kreme, formulacije u vidu flastera ili drugih sistema za isporuku koji se apsorbuju kroz kožu, ili b) primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.02 ~ 20 mg/cm2, ili
c) primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.01 ~ 40 mg/kg, ili
d) učestalost doziranja farmaceutske kompozicije koja se primenjuje na lokalno mesto kod subjekta je 1~12 puta svakog drugog dana do svakih 30 dana.
16. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 3 ili upotreba prema patentnom zahtevu 5, naznačena time što:
a) korak je da se farmaceutska kompozicija primeni na lokalno mesto kod subjekta pomoću formulacije za potkožnu injekciju, formulacije za intravensku injekciju ili formulacije za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, pri čemu, opciono,
i) primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.2 ~ 16 mg/cm2, ili
ii) primenjena doza farmaceutske kompozicije koja se ubrizgava u lokalno mesto kod subjekta je 0.4 ~ 40 mg/kg, ili
iii) učestalost doziranja farmaceutske kompozicije koja se primenjuje na lokalno mesto kod subjekta je 3~60 puta svakog drugog dana do svakih 20 dana,
ili
c) korak je da se farmaceutska kompozicija primeni na lokalno mesto kod subjekta pomoću formulacije za potkožnu injekciju, formulacije za injekciju u potkožni sloj masnog tkiva, formulacije za intravensku injekciju, rastvora za implantiranu infuziju, kreme, flastera ili drugih sistema za isporuku koji se apsorbuju kroz kožu.
17. Farmaceutska kompozicija prema jednom od patentnih zahteva 1 i 8 do 13, naznačena time što je farmaceutski prihvatljiv nejonski surfaktant polioksietilen ricinusovo ulje.
18. Farmaceutska kompozicija prema patentnim zahtevima 1-5, 8, 9, 12, 13 ili 17, naznačena time što je kurkuminoid kurkumin.
RS20251167A 2015-08-28 2016-08-26 Farmaceutska kompozicija koja se koristi za redukciju lokalizovanog masnog tkiva i upotreba farmaceutske kompozicije RS67518B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2015/088340 WO2016029870A1 (zh) 2014-08-28 2015-08-28 用于减少局部脂肪与减少体重的组合物及其医药品与应用
US201562257846P 2015-11-20 2015-11-20
US201662299702P 2016-02-25 2016-02-25
PCT/IB2016/055102 WO2017037594A2 (zh) 2015-08-28 2016-08-26 用于减少局部脂肪的医药组成物及其用途
EP16840922.5A EP3381451B1 (en) 2015-08-28 2016-08-26 Pharmaceutical composition used for reducing localised fat and use of pharmaceutical composition

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS67518B1 true RS67518B1 (sr) 2025-12-31

Family

ID=58186932

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20251167A RS67518B1 (sr) 2015-08-28 2016-08-26 Farmaceutska kompozicija koja se koristi za redukciju lokalizovanog masnog tkiva i upotreba farmaceutske kompozicije

Country Status (26)

Country Link
US (4) US20180243211A1 (sr)
EP (3) EP4647070A3 (sr)
JP (5) JP7063804B2 (sr)
KR (4) KR20180037058A (sr)
CN (4) CN115778928B (sr)
AU (5) AU2016314546C1 (sr)
BR (2) BR112018003877A2 (sr)
CA (2) CA2995158C (sr)
CO (1) CO2018003424A2 (sr)
DK (1) DK3381451T3 (sr)
ES (1) ES3041835T3 (sr)
FI (1) FI3381451T3 (sr)
HR (1) HRP20251142T1 (sr)
HU (1) HUE072802T2 (sr)
IL (1) IL257784B2 (sr)
LT (1) LT3381451T (sr)
MX (3) MX387266B (sr)
PL (1) PL3381451T3 (sr)
PT (1) PT3381451T (sr)
RS (1) RS67518B1 (sr)
RU (1) RU2753507C2 (sr)
SG (1) SG11201801111RA (sr)
SI (1) SI3381451T1 (sr)
SM (1) SMT202500365T1 (sr)
TW (3) TWI630922B (sr)
WO (2) WO2017037594A2 (sr)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10537548B2 (en) 2014-08-28 2020-01-21 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Composition and medical product for reducing body weight and body fat, and use of said product
US11318110B2 (en) 2015-08-28 2022-05-03 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
CA2995158C (en) * 2015-08-28 2021-05-11 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. A pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
KR20190040305A (ko) 2016-08-26 2019-04-17 칼리웨이 바이오파마슈티칼스 코., 엘티디. 체중 감소를 위한 피하 주사제 및 그의 용도
CN109983013A (zh) 2016-11-18 2019-07-05 帕西拉制药有限公司 美洛昔康锌复合物微粒多囊脂质体制剂及其制备方法
CA3055451C (en) * 2017-03-28 2021-10-12 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Composition and medical product for reducing body weight and body fat, and use of said product
CA3127506A1 (en) 2019-02-11 2020-08-20 Joseph Halstead Therapeutically administrable high dose non-aqueous curcuminoid solutions
WO2020194344A1 (en) 2019-03-24 2020-10-01 Patel Naishadhkumar Ramubhai Formulation to enhance the bioavailibity and stability of curcuminoids and/or its derivatives thereof
CN110934827B (zh) * 2019-11-08 2021-03-19 江西中医药大学 一种口服葛根素混合胶束制剂、制备方法及应用
CN113730650B (zh) * 2021-10-13 2022-11-01 哈尔滨泽润医疗机构管理有限公司 一种碳水溶酶组合物及其制备方法和应用
KR102691705B1 (ko) * 2021-10-25 2024-08-06 주식회사 지엘케이인터내셔날 지방 분해용 조성물
CN119255715A (zh) * 2022-03-28 2025-01-03 路易斯安娜州立大学监测委员会，农业和机械学院 用于提高胰岛素敏感性的协同作用
US12111372B2 (en) 2022-04-25 2024-10-08 GE Precision Healthcare LLC Wireless coil adaptor for a magnetic resonance imaging system
WO2023221945A1 (en) * 2022-05-16 2023-11-23 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Compositions and methods for alleviating conditions caused by abnormal subcutaneous deposit of adipose tissue or fat
CN120225184A (zh) * 2022-11-22 2025-06-27 康霈生技股份有限公司 用于治疗和/或预防水肿性纤维硬化性脂膜病的方法
WO2025231431A1 (en) * 2024-05-03 2025-11-06 Amalfi Bio, Inc. Methods for reducing fatty infiltration

Family Cites Families (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6048736A (en) * 1998-04-29 2000-04-11 Kosak; Kenneth M. Cyclodextrin polymers for carrying and releasing drugs
EP1582204B1 (en) * 1999-03-03 2013-09-25 Eli Lilly & Company Echinocandin pharmaceutical formulations containing micelle-forming surfactants
ATE346059T1 (de) * 1999-08-16 2006-12-15 Dsm Ip Assets Bv Verfahren zu herstellung von epigallocatechin gallate
US6475530B1 (en) 2000-05-31 2002-11-05 Eric H. Kuhrts Methods and compositions for producing weight loss
US6383482B1 (en) * 2000-08-24 2002-05-07 Vitacost.Com, Inc. Weight loss composition containing green tea, hydroxycitric acid, 5-hydroxytryptophan, glucomannan, picolinate and lactobacillus
US20040071799A1 (en) 2001-02-12 2004-04-15 Xiurong Xu Herbal compositions and methods for effecting weight loss in humans
JP4179494B2 (ja) 2001-10-23 2008-11-12 株式会社カネカ ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体リガンド剤
US20040146539A1 (en) 2003-01-24 2004-07-29 Gupta Shyam K. Topical Nutraceutical Compositions with Selective Body Slimming and Tone Firming Antiaging Benefits
DE602004022806D1 (de) * 2003-06-04 2009-10-08 Nestec Sa Getränk zur gewichtskontrolle
CN100539988C (zh) * 2003-06-27 2009-09-16 株式会社太平洋 含有生理活性成分的自聚集聚合物纳米颗粒和含有该纳米颗粒的外用搽剂
CN101247793B (zh) 2003-12-29 2013-04-10 哈佛大学校长及研究员协会 治疗或预防肥胖和胰岛素抗性病症的组合物
US20050232974A1 (en) 2004-04-19 2005-10-20 Gore Makarand P System and a method for pharmaceutical dosage preparation using jettable microemulsions
WO2005113069A2 (en) * 2004-05-14 2005-12-01 Research Development Foundation Use of circumin and analogues as inhibitors of acc2
CN100486567C (zh) * 2004-08-12 2009-05-13 山东绿叶天然药物研究开发有限公司 姜黄素乳剂及其制备方法
US20060188590A1 (en) 2005-01-05 2006-08-24 Mitsunori Ono Compositions for treating diabetes or obesity
AU2006210114B2 (en) * 2005-02-04 2011-11-17 Peter Heger Use of an active ingredient combination that contains hydroxystilbene for preventing and/or treating diseases
ITFI20050031A1 (it) 2005-02-21 2006-08-22 Stefan Coccoloni Una composizione farmaceutica atta a prevenire l'invecchiamento e l'insorgere di malattie vascolari,neoplastiche,cutanee e dell'apparato pilifero
ES2384641T3 (es) 2005-07-14 2012-07-10 Lithera, Inc. Formulación lipolítica que potencia la liberación mantenida para el tratamiento localizado del tejido adiposo
JP2007063137A (ja) * 2005-08-29 2007-03-15 Daicho Kikaku:Kk 抗肥満薬
WO2007041276A2 (en) 2005-09-29 2007-04-12 New Chapter, Inc. Methods for modulating apoptosis, cellgrowth, and protein expression with herbal compositions
JP2007131603A (ja) 2005-11-14 2007-05-31 Kaneka Corp Ｌ−カルニチン合成系酵素遺伝子の転写促進用組成物
CN100367951C (zh) * 2005-12-16 2008-02-13 石药集团恩必普药业有限公司 丁苯酞静脉乳剂及其应用
WO2007103435A2 (en) * 2006-03-06 2007-09-13 The Regents Of The University Of California Bioavailable curcuminoid formulations for treating alzheimer's disease and other age-related disorders
WO2007112996A2 (en) 2006-03-31 2007-10-11 Dsm Ip Assets B.V. Novel use of compounds and combinations of compunds for improving the physical appearance
US7977319B1 (en) 2006-04-03 2011-07-12 Scott David Levine Ultra-high fiber supplement and method of reducing weight, cardiovascular risks and ingested toxins
WO2007113008A2 (en) * 2006-04-04 2007-10-11 Dsm Ip Assets B.V. Opaque container comprising food or pharmaceutical products or herbal(s)
CN101095665A (zh) * 2006-06-27 2008-01-02 中国科学院上海生命科学研究院 Sirt1在预防、控制或治疗肥胖中的用途
US7923026B2 (en) * 2006-10-20 2011-04-12 Solvay Pharmaceuticals B.V. Embedded micellar nanoparticles
JP2008133272A (ja) * 2006-10-31 2008-06-12 Ito En Ltd Ｃｐｔ活性亢進剤及び飲食物
KR101069502B1 (ko) * 2006-10-31 2011-09-30 (주)아모레퍼시픽 비만 및 당뇨병 개선용 경구용 조성물
CN101310718A (zh) * 2007-05-23 2008-11-26 中国科学院上海生命科学研究院 减肥降血脂的含儿茶素的组合物及其用途
CN102357226B (zh) 2007-08-07 2013-07-10 北京北大维信生物科技有限公司 中草药姜黄的醇提取物在制备具有脂肪酶活性抑制作用的药物中的应用
WO2009066303A2 (en) 2007-11-22 2009-05-28 Ganga Raju Gokaraju New synergistic phytochemical composition for the treatment of obesity
US20110009496A1 (en) * 2008-01-08 2011-01-13 Sirtris Pharmaceuticas, Inc. Resveratrol formulations
MX339476B (es) 2008-04-18 2016-05-27 Reata Pharmaceuticals Inc Compuestos que incluyen un nucleo farmaceutico antiinflamatorio y sus metodos de uso.
EP2429481A4 (en) * 2008-06-25 2014-08-13 Elc Man Llc METHOD AND COMPOSITIONS FOR IMPROVING THE APPEARANCE OF SKIN AND BODY
AU2009307753A1 (en) 2008-10-22 2010-04-29 Metaproteomics, Llc Novel mitochondrial uncoupling methods and compositions for enhancing adipocyte thermogenesis
US8496974B2 (en) * 2008-11-25 2013-07-30 Oy Granula Ab Ltd Method for preparing a composition comprising a compound mixture and a carrier agent
AU2009319870A1 (en) 2008-11-26 2011-07-14 Lipoprotein Technologies, Inc. Enhanced bioactive formulations of resveratrol
WO2010106191A1 (en) * 2009-03-20 2010-09-23 Bioxtract S.A. Pharmaceutical composition presenting anti-inflammatory properties
CN101874763A (zh) * 2009-04-29 2010-11-03 上海家化联合股份有限公司 一种白藜芦醇柔性脂质体及其制备方法
KR20100124519A (ko) * 2009-05-19 2010-11-29 (주)아모레퍼시픽 녹차 추출물을 함유하는 조성물
CN101632655B (zh) 2009-08-04 2011-12-07 南京大渊美容保健有限公司 延缓衰老的白藜芦醇和生物类黄酮营养组合物
JP5594819B2 (ja) 2009-12-22 2014-09-24 キリンホールディングス株式会社 脂質代謝改善用組成物
JP5717768B2 (ja) * 2010-03-10 2015-05-13 アッヴィ・バハマズ・リミテッド 固体組成物
US8835509B2 (en) * 2010-05-31 2014-09-16 Arbro Pharmaceuticals Ltd. Self emulsifying drug delivery system for a curcuminoid based composition
RU2590977C2 (ru) 2010-07-02 2016-07-10 Хеликс Байомедикс, Инк. Производные n-ациламинокислот для лечения таких патологий кожи, как целлюлит
US20130245118A1 (en) * 2010-07-02 2013-09-19 Eric H. Kuhrts Stable fatty acid-containing formulations
KR101640258B1 (ko) * 2010-07-05 2016-07-15 주식회사 엘지생활건강 적포도 추출물, 녹차 추출물, 대두 추출물 및 ｌ－카르니틴을 유효성분으로 함유하는 항비만 조성물
EP2593093A1 (en) 2010-07-16 2013-05-22 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Use of a cationic amphiphilic drug for the preparation of a formulation for the reduction of subcutaneous adipose tissue
US20120088829A1 (en) * 2010-09-29 2012-04-12 MyCell Holdings Limited Formulations of Ubiquinol and Resveratrol Esters
CN102106816A (zh) * 2010-12-16 2011-06-29 天津迈迪瑞康生物医药科技有限公司 一种白藜芦醇纳米制剂及其制备方法
US8815310B2 (en) 2011-01-10 2014-08-26 Morteza Naghavi Compositions for boosting metabolism, assisting weight loss, and promoting cardiovascular health
CN102512404B (zh) 2011-11-18 2014-05-07 上海交通大学 一种姜黄素类化合物肺靶向制剂及其制备方法与应用
US9745279B2 (en) 2011-12-27 2017-08-29 Tokiwa Phytochemical Co., Ltd. Sirtuin activator
US20140348926A1 (en) * 2012-01-19 2014-11-27 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Ltd. Formulation and method for increasing oral bioavailability of drugs
US8496979B1 (en) 2012-02-02 2013-07-30 Reliv International, Inc. Caffeine-free dietary supplements for increasing energy and methods of administering the same
US20130224318A1 (en) 2012-02-29 2013-08-29 Avon Products, Inc. Use of CPT-1 Modulators and Compositions Thereof
US8652518B2 (en) 2012-04-15 2014-02-18 Jahahreeh Finley Compositions and methods for the prevention and treatment of diseases or conditions associated with oxidative stress, inflammation, and metabolic dysregulation
US9731015B2 (en) 2012-08-04 2017-08-15 Eric Hauser Kuhrts Water-soluble lipophilic natural compound formulations
WO2014028607A1 (en) * 2012-08-14 2014-02-20 Abbott Laboratories Low glycemic index nutritional compositions for preserving muscle mass and improving body composition in diabetics
US9211298B2 (en) 2012-11-16 2015-12-15 Song Gao Compositions containing enriched natural crocin and/or crocetin, and their therapeutic or nutraceutical uses
DE202012012130U1 (de) * 2012-12-19 2014-03-21 Aquanova Ag Curcuminsolubilisat
WO2014138426A2 (en) * 2013-03-07 2014-09-12 Topokine Therapeutics, Inc. Methods and compositions for reducing body fat and adipocytes
CN103285401A (zh) * 2013-05-27 2013-09-11 沈阳药科大学 一种能提高难溶性药物溶解性和生物利用度的组合物
US9458086B1 (en) * 2013-07-03 2016-10-04 University Of South Florida (A Florida Non-Profit Corporation) Compositions and methods for adipocyte modulation
WO2015072602A1 (ko) 2013-11-15 2015-05-21 (주)다미화학 난용성 물질의 수용액 가용화 조성물 및 이를 이용한 난용성 물질의 수용액 가용방법
CA2931255A1 (en) * 2013-11-27 2015-06-04 Research Foundation Of The City University Of New York Activity enhancing curcumin compositions and methods of use
TW201540294A (zh) * 2014-04-25 2015-11-01 康立為生醫科技股份有限公司 用於抑制脂肪細胞、降低體脂肪、減少體重或促進脂肪代謝之植物萃取組成物及其醫藥組合物與用途
CN103989659B (zh) * 2014-05-26 2016-09-07 重庆医科大学 姜黄素纳米结构脂质载体及其制备方法
EP3187189B1 (en) 2014-08-28 2020-11-18 Caliway Biopharmaceuticals Co. Ltd. Composition for use in treating obesity and use of said composition for reducing body weight and fat
DK3187178T3 (da) * 2014-08-28 2022-08-22 Caliway Biopharmaceuticals Co Ltd Sammensætning og lægemidler til reducering af lokaliseret fedt og kropsvægt og anvendelse heraf
US10226503B2 (en) 2014-08-28 2019-03-12 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Plant extract composition for reducing topical fat and promoting weight loss as well as applications thereof
CA2995158C (en) 2015-08-28 2021-05-11 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. A pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
US11318110B2 (en) 2015-08-28 2022-05-03 Caliway Biopharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
KR20190040305A (ko) 2016-08-26 2019-04-17 칼리웨이 바이오파마슈티칼스 코., 엘티디. 체중 감소를 위한 피하 주사제 및 그의 용도

Also Published As

Publication number Publication date
EP4647070A2 (en) 2025-11-12
HRP20251142T1 (hr) 2025-11-21
MX384073B (es) 2025-03-11
AU2019280037B2 (en) 2021-02-18
WO2017037594A2 (zh) 2017-03-09
WO2017037593A3 (zh) 2018-08-23
MX2021010359A (es) 2021-10-01
KR20180039167A (ko) 2018-04-17
CN115778928A (zh) 2023-03-14
BR112018003892A2 (pt) 2018-09-25
EP4647070A3 (en) 2026-01-21
SI3381451T1 (sl) 2025-12-31
SG11201801111RA (en) 2018-03-28
RU2019108198A (ru) 2020-09-21
JP2020143091A (ja) 2020-09-10
JP2018533545A (ja) 2018-11-15
AU2021202349A1 (en) 2021-05-13
IL257784A (en) 2018-06-28
CO2018003424A2 (es) 2018-07-10
EP3381451A4 (en) 2019-10-09
US20220362173A1 (en) 2022-11-17
CA2995158A1 (en) 2017-03-09
EP3381451A2 (en) 2018-10-03
CN115778928B (zh) 2025-07-25
PL3381451T3 (pl) 2025-11-12
AU2021202349B2 (en) 2022-12-08
AU2016314546C1 (en) 2021-07-22
SMT202500365T1 (it) 2025-11-10
AU2016314545C1 (en) 2021-09-23
AU2016314546A1 (en) 2018-03-01
WO2017037594A3 (zh) 2018-08-23
KR20200049882A (ko) 2020-05-08
TWI604859B (zh) 2017-11-11
JP2018531220A (ja) 2018-10-25
CN108697668B (zh) 2022-11-04
TW201806584A (zh) 2018-03-01
CA2995158C (en) 2021-05-11
KR20180037058A (ko) 2018-04-10
MX387266B (es) 2025-03-18
TW201707685A (zh) 2017-03-01
KR102240221B1 (ko) 2021-04-14
CA2995155A1 (en) 2017-03-09
AU2016314545A1 (en) 2017-11-16
WO2017037593A2 (zh) 2017-03-09
BR112018003877A2 (pt) 2018-09-25
JP2020128404A (ja) 2020-08-27
TW201707686A (zh) 2017-03-01
HUE072802T2 (hu) 2025-12-28
US11433034B2 (en) 2022-09-06
CN109069655A (zh) 2018-12-21
KR102107917B1 (ko) 2020-05-08
AU2016314546B2 (en) 2019-09-12
DK3381451T3 (da) 2025-10-06
PT3381451T (pt) 2025-10-01
TWI630922B (zh) 2018-08-01
KR102356390B1 (ko) 2022-02-08
JP2019528297A (ja) 2019-10-10
CN119157850A (zh) 2024-12-20
MX2018002462A (es) 2018-06-19
AU2019246808A1 (en) 2019-10-31
JP7095903B2 (ja) 2022-07-05
KR20200032768A (ko) 2020-03-26
CN108697668A (zh) 2018-10-23
CN109069655B (zh) 2024-09-27
LT3381451T (lt) 2025-10-10
RU2019108198A3 (sr) 2020-09-21
US12357588B2 (en) 2025-07-15
EP3381451B1 (en) 2025-08-20
US20200163906A1 (en) 2020-05-28
IL257784B1 (en) 2023-07-01
AU2016314545B2 (en) 2019-07-11
US20180250243A1 (en) 2018-09-06
EP3381473A4 (en) 2019-10-09
FI3381451T3 (fi) 2025-10-10
TWI667044B (zh) 2019-08-01
RU2753507C2 (ru) 2021-08-17
ES3041835T3 (en) 2025-11-14
MX2018002461A (es) 2018-06-07
JP7063804B2 (ja) 2022-05-09
JP7063803B2 (ja) 2022-05-09
CA2995155C (en) 2021-05-11
US20180243211A1 (en) 2018-08-30
JP7054540B2 (ja) 2022-04-14
US10610496B2 (en) 2020-04-07
AU2019246808B2 (en) 2021-01-28
IL257784B2 (en) 2023-11-01
AU2019280037A1 (en) 2020-01-16
EP3381473A2 (en) 2018-10-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12357588B2 (en) Pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
JP2018531220A6 (ja) 局所脂肪減少に用いられる医薬組成物及びその用途
US11318110B2 (en) Pharmaceutical composition for reducing local fat and uses thereof
US20230190674A1 (en) Methods for Reduction of Body Weight with Subcutaneous Formulations