RS87704A

RS87704A - Smeše i postupci za doziranje liposoma određenih veličina za lečenje ili prevenciju bolesti

Info

Publication number: RS87704A
Application number: YU87704A
Authority: RS
Inventors: Wendi Rodrigueza; Charles Bisgaier
Original assignee: Esperion Luv Development Inc.
Priority date: 2002-04-05
Filing date: 2003-04-04
Publication date: 2006-12-15
Also published as: WO2003086351A1; IL164370A0; NO20044751L; US20080213351A1; KR20050009988A; TNSN04190A1; US20040009216A1; BR0309030A; EP1501482A1; HRP20040915A2; CN1655764A; ZA200407947B; AP2004003157A0; JP2005527582A; MA27298A1; NZ535900A; MXPA04009692A; ECSP045409A; UA80121C2; AU2003230800A1

Abstract

Ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske smeše koje obuhvataju liposome i na postupke primene takvih liposoma da spreče, leče ili kontrolišu različite bolesti i/ili telesna stanja. Ove liposome mogu obuhvatiti same velike monolamelarne (monopločaste) vezikule (LUV) ili u kombinaciji sa multilamelarnim (višepločastim) vezikulama (MLV), malim monolamelarnim (monopločastim) vezikulama ili drugim terapeutskim sredstvima. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na liposome koje imaju određene prečnike davane pacijentima uz primenu specifičnih doza i/ili režima doziranja.

Description

SMEŠE I POSTUPCI ZA DOZIRANJE LIPOSOMA ODREĐENIH VELIČINA

ZA LEČENJE ILI PREVENCIJU BOLESTI

[0001]Ova prijava zahteva pravo SAD privremene prijave br. 60/370.409, koja je predata 5. aprila 2002. godine i koja je ovde inkorporirana referencom u svojoj potpunosti.

1. Oblast pronalaska

[0002]Ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske smeše koje obuhvataju liposome i na postupke za primenu takvih liposoma da se spreči, leči ili kontroliše veliki broj različitih bolesti i/ili telesnih stanja. Pomenute liposome mogu obuhvatati same velike monolamelarne (monopločaste) vezikule (LUV) ili u kombinaciji sa multilamelarnim (višepločastim) vezikulama (MLV), male monolamelarne (monopločaste) vezikule (SUV) ili druga terapeutska sredstva. Ovaj pronalazak se odnosi na liposome koje imaju određene prečnike i koje se daju pacijentima primenjujući specifične doze i/ili režime doziranj a.

2. Pozadina pronalaska

[0003]Ateroskleroza je vodeći uzrok smrti u Sjedinjenim američkim državama. Ateroskleroza je formiranje krvnih pločica u zidovima arterija koje mogu okludovati lumen (šupljinu) krvnog suda i sprečiti protok krvi kroz ovaj krvni sud. Ove krvne pločice takođe se mogu kidati i voditi do formiranja tromba čak i u krvnom sudu bez kritične stenoze i mogu voditi do okluzije krvnih sudova i opstrukcije protoka krvi. Morbidnost (bolesno stanje) i smrtnost se uopšte odigravaju preko krajnjeg oštećenja organa i disfunkcije organa koji rezultuju iz ishemije. Najčešći oblici ishemijskog finalnog oštećenja organa su infarkt miokarda i cerebrovaskularni akcidenti. Onesposobijenost ili smrt često rezultuju iz ovih vaskularnih događaja. Čak i ishemija koja je u vezi sa aterosklerozom i koja permanentno ne povređuje miokard ili vodi do minornih oštećenja miokarda je odgovorna za značajno bolesno stanje u obliku angine pektoris i kongestivnog otkazivanja (oštećenja) srca koje je prouzrokovano navalom krvi. Drugi organi, kao što su bubrezi, utroba (creva) i kičmena moždina takođe se mogu povrediti preko aterosklerotičnih okluzija. Dalje, u bolestima kao što su aneurizmi aorte, aterosklerotične arterije mogu uzrokovati kliničke simptome koji su nezavisni od krajnje disfunkcije organa. Arteriosklerotične lezije su krvne pločice koje se formiraju akumulacijom holesterola, estara holesterola i fosfolipida, proliferacijom ćelija glatkih mišića, dijapedezom monocita uključujući njihovu transformaciju u makrofage i penušave ćelije u intimi (unutrašnjem sloju) glavnih arterija. Lipid daje (doprinosi) glavni deo zapremine krvnih pločica (uopšte 30-65 % suve težine). Small,Arteriosclerosis8 (1988) 103-129. Ustvari, rizik razvoja arterioskleroze je direktno u vezi sa koncentracijom određenih oblika plazma holesterola.

[0004] Druge bolesti i stanja koji su u vezi sa abnormalno visokim nivoima lipida uključuju akutne koronarne sindrome, stabilnu anginu, nestabilnu anginu, zapaljenje (inflamaciju), vaskularno zapaljenje, dermalno zapaljenje, koronarnu bolest srca (CHD), ventrikularne (komorne) aritmije, perifernu vaskularnu bolest, perifernu okluzivnu bolest, naizmenično hramanje (koviljanje), prolazne ishemijske napade, restenozu, smanjenu potrebu za revaskularizacijom, poremećaje koagulacije, ishemiju, kardiovaskularnu ishemiju, ishemiju koja nije u vezi sa kardiovaskularnom bolešću kao što su ishemijska-reperfuziona povreda, trombocitopenija, pankreatitis, nealkoholni steatohepatitis (NASH), dijabetska neuropatija, retinopatija, bolna dijabetska neuropatija, hramanje (hromost), psorijaza, kritična ishemija uda, impotencija, hiperlipidemij a, hiperlipoproteinemij a, hipoalfalipoproteinemija, hipertrigliceridemija, bilo koje stenotično stanje koje vodi do ishemijske patologije, dijabetes, ihtioza, moždani udar, povredljive krvne pločice, ulceracija (razjedanje) donjeg uda (ekstremiteta), ozbiljna koronarna ishemija, limfomi, katarakte, disfunkcija endotela (epitela krvnih sudova), ksantelazme, vaskularna bolest, vaskularna bolest koja rezultuje od pušenja i dijabetesa, bolest karotidne (vratne) i koronarne arterije, kongestivno otkazivanje (oštećenje) srca koje je prouzrokovano navalom krvi, regresija i skvrčenje (smežuranje) ustanovljenih krvnih pločica, Alchajmerova bolest, kombinacije hirurških postupaka koji rezultuju u povredi endotela (epitela krvnih sudova), oštećenje endotela kao rezulat hirurških postupaka, bolesno stanje (morbidnost) koje je u vezi sa vaskularnom bolešću, ulceracije (razjedanja) u arterijskom lumenu (šupljini), restenoza kao rezultat balonske angioplastike i subindikacije gore datog.

[0005] Lipidi, uključujući holesterol, su uopšte nerastvorni u vodenoj plazmi. Plazma lipidi su nošeni pomoću rastvornih lipoproteinskih kompleksa. Ovi lipoproteinski kompleksi se sastoje od unutrašnjeg jezgra (supstance, jedra) načinjenog od nepolarnih lipida (holesteril-estara i triglicerida) i površinskog sloja amfipatskih proteina i polarnih lipida (fosfolipida i neesterifikovanog holesterola). Različiti proteini (apolipoproteini) su prisutni u površinskoj prevlaci načinjernoj od različitih lipoproteinskih kompleksa (lipoproteina). Ovi različiti lipoproteini vrše različite funkcije u metabolizmu lipida.

[0006] Poznato je pet klasa lipoproteina. Neki lipoproteini nose trigliceride i holesterol iz jetre u periferna tkiva dok drugi transportuju lipide u jetru. Holesterol se može metabolizovati u jetri do žučnih soli (soli žučnih kiselina) koje se izlučuju, čime se smanjuje ukupna količina telesnog holesterola. Dva lipoproteina, lipoproteini male gustine (LDL) i lipoproteini velike gustine (HDL), imaju visok stepen povezanosti sa razvojem ateroskleroze. Lipoprotein male gustine (LDL) ima visoku koncentraciju holesterola, daje lipide ćelijama perifernih tkiva i u vezi je sa visokim rizikom od ateroskleroze. Lipoprotein velike gustine (HDL) takođe ima relativno visoku koncentraciju holesterola, ali nosi lipide u jetru radi metabolizma u žučne soli i u vezi je sa smanjenjem rizika od razvitka ateroskleroze.

[0007]Metabolizam holesterola i homeostaza su rezultat kompleksne ravnoteže između slobodnog sterola u ćeliji i u plazmi. Phillips etal., Biochim. Biophys. Acta906

(1987) 223-276. Predaja (davanje) holesterola ćelijama se vrši preko receptorom posredovanog mehanizma sa lipoproteinima male gustine (LDL), selektivnog prihvatanja (apsorbovanja) preko hvatača receptora B-I i pomoću pasivne izmene sterola između plazma membrana i lipoproteina. Samo tkiva koja proizvode steroidne hormone i žučne kiseline mogu metabolizovati holesterol. U cilju sprečavanja akumulacije viška slobodnog sterola u preostalim perifernim tkivima postoji reversni transport holesterola iz plazma membrana u lipoproteine velike gustine (HDL) i deliće slične lipoproteinu. Lipoprotein velike gustine (HDL) transportuje višak holesterola u jetru gde se ovaj može eksportovati u žuč kao neesterifikovan holesterol, preraditi u žučne soli za izlučivanje, esterifikovati i skladištiti u jetri ili inkorporirati u lipoproteine vrlo niske gustine (VLDL) da ponovo uđe u rezervoar lipoproteina.

[0008]Pasivna izmena holesterola između ćelija i lipoproteina se vrši preko difuzije sterolnih molekula kroz vodeni prostor. Phillips etal., supra,i Schroeder etal., Exp. Biol. Med.196(1991) 235-252. Čisto ćelijsko isticanje se vrši ako je hemijski potencijal slobodnog holesterola niži u plazmi nego u ovim ćelijama tako da sterol napušta membranu prateći svoj gradijent aktivnosti. Pod ovim uslovima je pokazano da ćelije napunjene estrom holesterola, koje su morfološka karakteristika ranih aterosklerotičnih lezija, ne samo da gube holesterol, već potpomažu hidrolizu estra, što rezultuje u smanjenju intraćelijskih depozita ovog lipida. Small,Arteriosclerosis8 (1988) 103-129. Čak šta više, kao što je gore pomenuto, postoji epidemiološki dokaz da uslovi koji bi se mogli očekivati da pojačavaju reversni transport holesterola (niske koncentracije plazma holesterola ili povišene koncentracije HDL) su u uzajamnom odnosu sa sniženim rizikom od prevremene ateroskleroze i mogu povisiti regresiju krvnih pločica.

[0009]Karakteristično je da su krvne pločice asocirane sa ulceracijom (razjedanjem) intime (unutrašnjeg sloja) krvnog suda. Krvne pločice koje sadrže lipid rastu u ulceracijama (razjedanjima) izbacujući trošne mase u arterijski lumen (šupljinu). Krvne pločice takođe mogu povrediti i oslabiti medijum (sredinu) glatkog mišića krvnog suda. Kako napreduje formiranje krvne pločice, više centralnih regiona ovih pločica se štiti od cirkulacije. Ekstenzivno formiranje pločice takođe prouzrokuje koncentričnu ili ekscentričnu strikturu (suženje) ovog suda na mestu pločice.

[0010]Za sada je prevencija najefikasnije lečenje ateroskleroze. Postoji dokaz da se progresija (napredovanje) i akumulacija lipida u lezijama mogu zaustaviti kada se plazma LDL koncentracije održavaju do skoro normalnih vrednosti. Revnolds,Circulation 79

(1989) 1146-1148. Sadašnja preventivna kontrola aterosklerotične bolesti je fokusirana na primenu lekova u sprezi sa restrikcijama u ishrani tako da se regulišu nivoi plazma holesterola. Čak šta više, terapije pomoću antioksidanasa koje suzbijaju formiranje i prihvatanje (apsorbovanje) modifikovanih LDL delića od strane ćelija arterijskog zida su se takođe pokazale dobrobitnim (korisnim). Chisolm,Clin. Cardiol.14(1991) 25-30. Međutim, iako hipoholesterolemijski lekovi indukuju pogodne promene plazma holesterola koje izgleda da usporavaju progres (napredovanje) ateroskleroze, oni uopšte ne indukuju uslove koji pojačavaju (unapređuju) isticanje i uklanjanje holesterolskog ateroma. Jasno, u cilju da se postigne značajna regresija ateroma i smanji opstrukcija lumena (šupljine), ovi lipidi koji zauzimaju prostor moraju biti mobilisani. Sadašnji dokazi sugerišu da procesi koji stimulišu isticanje (izlivanje) holesterola vanhepatičkih ćelija i njegov transport u jetru radi izlučivanja, reversni transport holesterola (RCT), su značajni događaji u sprečavanju (prevenciji) ateroskleroze. Gwynne,Clin. Cardiol.14 (1991) 17-24.

[0011] Sadašnji terapeutski modaliteti arterioskleroze su uopšte podeljeni u hiruršku i medicinsku kontrolu. Hirurška terapija može iziskivati (povlačiti za sobom) vaskularne postupke sa presadom do bajpas (sporednog puta) oblasti okluzije (npr., bajpas presađivanje koronarne arterije), uklanjanje okludujućih krvnih pločica iz arterijskog zida (npr., karotidna endarterektomija) ili perkutano (potkožno) krakovanje (razbijanje) krvnih pločica (npr., balonska angioplastika). Hirurške terapije nose značajan rizik i samo leče izolovane lezije. Aterosklerotične krvne pločice koje su nizstrujno od tretirane (lečene) lezije mogu nastaviti da opstruišu (zaustavljaju) protok krvi. Hirurške terapije takođe ne ograničavaju napredovanje aterosklerioze i povezane su sa kasnijom komplikacijom od restenoze.

[0012] Medicinska terapija je upravljena da smanji druge faktore rizika koji su u vezi sa vaskularnom bolešću (npr., pušenje, dijabetes i hipertenzija) i snizi oblike serumskog holesterola koji su povezani sa razvojem ateroskleroze kao što je gore opisano. Iako medicinske terapije mogu da uspore napredovanje formiranja krvnih pločica, relativno je retka regresija krvnih pločica. Zbog toga, simptomatična ateroskleroza često zahteva kako hirurško tako i medicinsko lečenje (tretman).

[0013]Pokazalo se paradoksalnim da intravenska infuzija fosfolipida i liposoma proizvodi regresiju aterosklerotičnih krvnih pločica iako se prolazno podižu nivoi lipida seruma. Williams etal., Perspect. Biol. Med.27 (1984) 417-431. Međutim, u nekim slučajevima, holesterol koji je u vezi sa razvojem i napredovanjem ateroskleroze može povećati naredno davanje liposoma.

[0014]Ranija proučavanja koja su ispitivala fosfolipidom indukovanu mobilizaciju holesterolain vivokoristila su multilameralne (višepločaste) vezikule liposoma ili vezikule liposoma koje su tretirane ultrazvukom. Veličina liposoma je ključna karakteristika u kinetici raščišćavanja i predstavlja jedan od nekoliko razloga zašto je očekivano da ultrazvukom tretirane vezikule predstavljaju dvoslojnu strukturu koja najbolje pogoduje da se pojača reversni transport holesterola. Tretiranje ultrazvukom smanjuje multilamelarne (višepločaste) vezikule (MLV) do vezikula "granične veličine". Ovi sistemi pokazuju minimalni prečnik krivine koji može prihvatiti dvoslojna konfiguracija bez razaranja. Na primer, minimalna veličina jajne fosfatidilholinske liposome koja se može generisati (proizvesti) tipično ima prečnik od oko 30 nm i često se klasifikuje kao mala monolamelarna (monopločasta) vezikula (SUV). Za dati sastav liposome, uopšte se uzima da što je manji prečnik delića (čestice) veći je poluživot cirkulacije (Gregoriadis and Senior,Life Sci.113(1986) 183-192). Kao posledica toga, očekivano je da bi mala monolamelarna vezikula (SUV) koja je sastavljena od fosfatidilholina duže cirkulisala nego veće liposome i otuda mobilisala više holesterola. Dalje, pakovani ograničeni (skučeni) sistemi (konstranti) koji su okušani od strane fosfolipida u maloj monolamelarnoj vezikuli (SUV), (zbog akutnog prečnika krivine) povećavaju nestabilnost koja može rezultovati u fuziji, Hope etal., Chem. Phys. Lipids40(1986) 89 -107, i povećavaju težnju da se asimilišu sa 1ipoproteinima.Videti,npr., Scherphof etal., Biochim. Biophys. Acta542(1978) 296-307 i Krupp etal., Biochim. Biophys. Acta72 (1976) 1251-1258. Otuda je bilo očekivano da bi mala monolamelarna (monopločasta) vezikula (SUV) proizvela veći broj delića tipa lipoproteina visoke gustine (HDL), čime bi pospešila isticanje sterola iz perifernih tkiva. Potpomažući ovo očekivanje, saopšteno je da liposome koje imaju prečnike od 50-80 nm optimizuju mobilizaciju sterola i regresiju krvnih pločica. Evropska patentna publikacija br. 0461559 A2 .

[0015]SAD Patent br. 5.746.223 (takozvani "223" patent), sa naslovom "Method of Forcing The Reverse Transport of Cholesterol From A Body Part While Avoiding Harmful Disruptions Of Hepatic Cholesterol Homeostasis" (Postupak forsiranja reversnog transporta holesterola iz nekog dela tela uz izbegavanje štetnih razaranja hepatične holesterolske homeostaze), SAD Patent br. 6.080.422 (takozvani "422" patent), sa naslovom "Methods of Angioplastv and Cardiac Catheterization" (Postupci angioplastike i kardijačne kateterizacije) i SAD Patent br. 6.139.871 (takozvani "871" patent), sa naslovom "Liposome Compositions And Methods For The Treatment of Artherosclerosis" (Smeše liposoma i postupci za lečenje arteroskleroze), od kojih je svaki ovde inkorporiran referencom u svojoj potpunosti, obelodanjuju (pored ostalog) primenu velikih monolamelarnih (monopločastih) vezikula (LUV) da se indukuje reversni transport holesterola iz perifernih tkiva, da se leči ateroskleroza i za primenu u angioplastičnim postupcima.

[0016]Specifičnije rečeno, patenti "223" i "422" obelodanjuju primenu velikih monolamelarnih (monopločastih) vezikula (LUV) sa prečnikom do 1000 nm (veće liposome mogu biti "manje efikasne"), sa zahtevima koji navode prečnike veće od oko 50, 80 ili 100 nm i ova specifikacija u jednom oličenju obelodanjuje prvenstven (pogodan) prečnik od 120 nm. Doze davane u patentima "223" i "422" nalaze se u opsegu od 10-1600 mg/kg po jednoj dozi. U specifičnijim oličenjima ova doza je manja od 600 mg/kg na dan a u drugim naročitim oličenjima ova doza je bolus (velika pilula) od 300 mg/kg data zečevima pri jedan, tri i pet dana.

[0017]Patent "871" obelodanjuje primenu velikih monolamelarnih (monopločastih) vezikula (LUV) koje imaju prečnik u opsegu od 100-150 nm sa prvenstvenim prečnikom od 125 nm. Patent "871" takođe obelodanjuje davanje velikih monolamelarnih (monopločastih) vezikula (LUV) u opsegu od oko 100-150 mg/kg, "obično" oko 200 do 750 mg/kg i "najobičnije" oko 280 do 420 mg/kg u višestrukim tretmanima, "uopšte nedeljno" u toku oko 4-16 nedelja, "obično" oko 10 nedelja. Patent "871" iznosi (tvrdi) da koncentracija velikih monolamelarnih (monopločastih) vezikula (LUV) u nosaču može varirati, ali uopšte će koncentracija biti oko 20-200 mg/ml, obično oko 50-150 mg/ml i najobičnije oko 100 mg/ml.

[0018]Nedavno su izvršene dve studije uz primenu ETC-588 (liposome koje su proizvedene iz 1-palmitoil-, 2-oleoil-fosfatidilholina, proizvoda koji su vlasništvo firme Esperion Therapeutics, Inc.). ETC-588 inhibira holesterol i druge izmenljive lipide iz vaskularnog i periferno<g>tkiva (postupak koji je poznat kao mobilizacija) što rezultuje u prolaznim povišenjima u serumskom holesterolu koji se vraća do pred-doznih nivoa nakon što ETC-588 predaje svoje punjenje holesterola jetri za preradu (procesuiranje) ili izlučivanje. U predkliničkim modelima, primenjujući veličinu liposome i smešu vrlo slične liposomi ETC-588, pokazani su mobilizacija i regresija eksperimentalno indukovane ateroskleroze. ETC-588 akutno povišava fluks holesterola unutar tela i pojačava mehanizme (modele) reversnog transporta lipida.

[0019]Prva studija je odredila bezbednost (sigurnost) i podnošljivost liposome ETC-588 u zdravim dobrovoljcima sa jednostrukim dozama od 20, 60, 150, 300 i 600 mg/kg liposoma ETC-588. Liposome ETC-588 (200 mg/ml) su intravenski ulivene pri brzini od 10 ml na minut uz primenu infuzione pumpe. Liposoma ETC-588 u plazmi je analizirana kao fosfolipid (PL). Ukupni i neesterifikovani holesterol (UC) i PL su analizirani pomoću standardnih, automatizovanih metoda. Subjekti su raspodeljeni u grupe za lečenje (tretiranje) prema nasumičnom rasporedu. Sigurnost (bezbednost) i podnošljivost, laboratorijski podaci, vitalni znaci i štetni događaji su sumirani na svakoj vremenskoj tački i za pred-doznu i posle-doznu promenu uz primenu opisne (deskriptivne) statistike. Farmakokinetičke i farmakodinamičke mere su sumirane uz primenu opisne (deskriptivne) statistike. Dobiveni rezultati su pokazali da iako se mobilizacija holesterola vršila preko širokog opsega doza efikasnost je varirala. Pored toga, tri od tri subjekta su imala povišene testove funkcije jetre pri 600 mg/kg a jedna osoba je imala ozbiljan štetni događaj koji je indiciran povišenom funkcijom enzima jetre. Ostali štetni događaji su uključivali glavobolju, vrtoglavicu, muku (mučninu) i zamor (umor).

[0020] Druga studija je odredila sigurnost i podnošljivost liposome ETC-588 u zdravim dobrovoljcima koji su primili ukupno 4 doze date u intervalima od 3 dana. Date doze su bile 100, 150, 200, 250 i 300 mg/kg. Liposome ETC-588 (200 mg/ml) su intravenski ulivene pri brzini od 10 ml na minut uz primenu infuzione pumpe. ETC-588 u plazmi je analizirana kao fosfolipid (PL). Ukupni i neesterifikovani holesterol (UC) i PL su analizirani pomoću standardnih, automatizovanih metoda. Subjekti su raspodeljeni u grupe za lečenje (tretiranje) prema nasumičnom rasporedu. Sigurnost (bezbednost) i podnošljivost, laboratorijski podaci, vitalni znaci i štetni događaji su sumirani na svakoj vremenskoj tački i za pred-doznu i posle-doznu promenu uz primenu opisne (deskriptivne) statistike. Farmakokinetičke i farmakodinamičke mere su sumirane uz primenu opisne (deskriptivne) statistike. Dobiveni rezultati su pokazali da se mobilizacija holesterola povećala na način zavisan od doze, iako je efikasnost varirala. Pored toga, doziranje u intervalima od 3 dana za ukupno 4 doze izgleda da je prouzrokovalo neželjenu akumulaciju ETC-588. Kao u prvoj studiji, drugi štetni događaji su uključivali glavobolju, vrtoglavicu, muku (mučninu) i zamor (umor). Dalje, ove studije doziranja su izvršene samo na zdravim pacijentima a ne i na pacijentima sa bolešću ili drugim neželjenim telesnim stanjima.

[0021]Otuda postoji potreba da se odrede sigurne, efikasne i netoksične doze i režimi doziranja kod bolesnih pacijenata koje sprečavaju ili smanjuju bilo koje neželjene sporedne efekte. Pored toga, postoji potreba da se odrede optimalniji režimi doziranja uz primenu liposoma optimalne veličine da se leče pacijenti koji pate od bolesti i /ili telesnih stanja obelodanjenih u ovom opisu ili od drugih bolesti ili stanja.

KRATAK PREGLED PRONALASKA

[0022]Ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske smeše i postupke davanja liposoma koji mogu obuhvatiti same velike monolamelarne (monopločaste) vezikule (LUV) ili u kombinaciji sa multilamelarnim (višepločastim) vezikulama (MLV), male monolamelarne (monopločaste) vezikule (SUV) i/ili druga terapeutska sredstva koji su primenjeni da spreče, leče ili kontrolišu veliki broj različitih bolesti i telesnih stanja koja uključuju, ali nisu ograničena samo na njih: arteriosklerozu uključujući aterosklerozu, flebosklerozu ili bilo koje vensko stanje u kojem se depoziti krvnih pločica koje sadrže holesterol ili drugi materijal formiraju unutar intime (unutrašnjeg sloja krvnih sudova) ili unutrašnjih medija vena, akutne koronarne sindrome, anginu uključujući stabilnu anginu i nestabilnu anginu, zapaljenje (inflamaciju) ili zapaljenske bolesti uključujući ali se ne ograničavajući samo na vaskularno zapaljenje i dermalno zapaljenje, kongestivno otkazivanje (oštećenje) srca koje je prouzrokovano navalom krvi, koronarnu bolest srca (CHD), hipertenziju, koronarne ventrikularne (komorne) aritmije, surraventrikularne (surrakomorne) aritmije, perifernu vaskularnu bolest, fatalni infarkt miokarda, nefatalni infarkt miokarda, ishemiju uključujući kardiovaskularnu ishemiju, hibernaciju miokarda, prolazne ishemijske napade, ishemiju koja nije u vezi sa kardiovaskularnom bolešću uključujući ishemijsko-reperfuzionu povredu kao što je povreda prouzrokovana operacijom (hirurgijom) kuka, operacijom (hirurgijom) kolena, transplantacijom organa ili PTCA, zatim koronarna reperfuzija, restenoza, peri-operativni (PCI) ishemijski događaji, smanjena potreba za revaskularizacijom, smanjena površina infarkta, poremećaji koagualcije, trombocitopenija, duboka venska tromboza, pankreatitis, nealkoholni steatohepatitis (NASH), dijabetska neuropatija, retinopatija, dijabetska neuropatija, psorijaza, kritična ishemija uda, hromost, impotencija, kancer prostate, hiperlipidemij a, hiperlipoproteinemij a, hipoalfalipoproteinemija, hipertrigliceridemija, bilo koje stenotično stanje koje vodi do ishemijske patologije, dijabetes uključujući tip I i tip II, ihtioza, moždani udar, povredljive krvne pločice, prskanje povredljivih krvnih pločica, Alchajmerova bolest, ulceracija (razjedanje) donjeg uda, ozbiljna koronarna ishemija, koji uključuju dalje limfome, katarakte, disfunkciju endotela (epitela krvnih sudova), ksantelazme, disfunkciju krajnjeg organa, vaskularnu bolest, vaskularnu bolest koja rezultuje od pušenja i dijabetesa, bolest karotidne (vratne) i koronarne arterije, regresiju i skvrčenje (smežuranje) ustanovljenih krvnih pločica, kombinacije hirurških postupaka koji rezultuju u povredi endotela (epitela krvnih sudova), oštećenje endotela (epitela krvnih sudova) kao rezultat hirurških postupaka, morbidnost (bolesno stanje) povezano sa vaskularnom bolešću, ulceracije (razjedanja) u arterijskom lumenu (šupljini), restenozu kao rezultat balonske angioplastike i subindikacije gore datog.

[0023]Smeše i postupci ovog pronalaska se mogu primeniti da povise HDL nivoe, povise niske HDL nivoe, snize LDL nivoe, snize visoke LDL nivoe, privremeno povise LDL nivoe, snize nivoe triglicerida, povise ili snize nivo drugih lipida, povećaju stabilnost krvne pločice ili smanje verovatnoću razaranja krvne pločice, povećaju ili smanje vazodilataciju, leče ili spreče zapaljenje, leče ili spreče zapaljenjske bolesti ili zapaljenjski odgovor, pojačaju ili stabilizuju intimu glatkog mišića i intimu (unutrašnji sloj) krvnog suda, stimulišu isticanje vanćelijskog holesterola za transport u jetru, modulišu imunološke odgovore, mobilišu holesterol iz aterosklerotičnih krvnih pločica i modifikuju bilo koju membranu, ćeliju, tkivo, organ i vanćelijski region i/ili strukturu u kojima bi bile pogodne kompozicione i/ili funkcionalne modifikacije. Smeše i postupci ovog pronalaska takođe obuhvataju mesne primene (aplikacije) i zarastanje rana.

[0024] Ovaj pronalazak obuhvata režime doziranja u kojima se specifične doze liposoma, naročito liposoma koje su unutar naročitog opsega veličine, daju pri specifičnim vremenskim intervalima i specifičnim dozama da se postigne smanjenje holesterola i/ili lečenje bolesti uz smanjenje ili izbegavanje štetnih efekata ili neželjenih efekata. Na taj način, ovde su detaljno opisani postupci davanja liposoma, postupci smanjenja ukupnog i LDL holesterola davanjem liposoma, postupci podizanja nivoa ili povećanja efikasnosti HDL holesterola davanjem liposoma i postupci doziranja liposoma u pacijentima koji ih trebaju.

[0025]Delići vezikula (ili liposoma) optimizuju isticanje holesterola iz aterosklerotičnih krvnih pločica. Delići vezikula mogu biti vezani za neki apolipoprotein, tipično apolipoprotein Al ili AII i često sadrže najmanje jedan fosfolipid, kao što je fosfatidilholin ili fosfatidilglicerol. Ove smeše uopšte obuhvataju liposome i farmaceutski prihvatljiv nosač. U pogodnom oličenju ove liposome su pre davanja bez holesterola. Liposome koje se primenjuju unutar novih režima doziranja mogu imati prečnik bilo koje veličine. Pored toga, ove liposome mogu imati prosečni prečnik bilo koje veličine sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine.

[0026]U odvojenim i pogodnim oličenjima ove liposome imaju prosečni prečnik između 50 do 250 nanometara (nm) sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U odvojenim pogodnim oličenjima ove liposome imaju prosečni prečnik između 50 do 250 nm sa distribucijom od ± 50%, pogodno ± 40%. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 100 do 140 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 100 do 140 nm sa distribucijom od ± 50%, pogodno ± 40%. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 110 do 120 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 110 do 120 nm sa distribucijom od ± 50%, pogodno ± 40%. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 100 i 200 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U naročitim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik sa veličinom između: 100 i 110 nm, 110 i 120 nm, 120 i 130 nm, 130 i 140 nm, 140 i 150 nm, 150 i 160 nm, 160 i 170 nm, 170 i 180 nm, 180 i 190 nm ili između 190 i 200 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine, pogodno je distribucija veličine između ± 40 % i ± 50%. U naročitim oličenjima korišćene liposome su ETC-588 (vlasnički produkt Esperion Therapeutics, Inc.).

[0027]Takođe su dati postupci za lečenje gore identifi kovanih bolesti i telesnih stanja koji se mogu primeniti terapeutski ili profilaktički. Ovi postupci uopšte obuhvataju davanje smeša ovog pronalaska sisarima, prvenstveno humanim bićima, koji imaju bilo koju od gore pomenutih bolesti ili telesnih stanja. Često će ove smeše biti serijski davane u toku nekog perioda vremena. Ove smeše se mogu davati oralno ili parenteralno. Uopšte rečeno, ove smeše će se davati parenteralno, pogodno intravenski ili ovo davanje može biti intramuskularno, potkožno, intraperitonealno, intratekalno, intraarterijski, preko limfatika, infuzijom, intravaskularno i davanje može biti preko hronično obitavajućeg katetera ili preko akutno stavljenog katetera pomoću brizgalice (šprica) ili davanja potiskivanjem. U drugim oličenjima, davanje može biti podjezično, usneno, mukozalno, mesno (lokalno), rektalno, vaginalno, intraarterijski, transdermalno, infuzijom, pomoću brizgalice (šprica) ili davanje potiskivanjem. U naročitom oličenju, smeše ovog pronalaska se daju mesno (lokalno) da se spreči ili leči zapaljenje ili da se potpomogne zarastanje rana.

[0028]Postupci ovog pronalaska obuhvataju davanje liposoma u jednostrukoj ili podeljenim dozama između 20 mg/kg i 600 mg/kg, pogodno između 50 mg/kg i 600 mg/kg i pogodnije između 50 mg/kg i 300 mg/kg nekom pacijentu koji to treba. U odvojenom pogodnom oličenju liposome se daju u jednostrukoj ili podeljenim dozama između 100 mg/kg i 200 mg/kg, pogodno između 150 mg/kg i 200 mg/kg nekom pacijentu koji to treba. U naročitim oličenjima, delići vezikula se daju u jednostrukoj ili podeljenim dozama između 110 mg/kg i 120 mg/kg, 120 mg/kg i 130 mg/kg, 130 mg/kg i 140 mg/kg, 140 mg/kg i 150 mg/kg, 150 mg/kg i 160 mg/kg, 160 mg/kg i 170 mg/kg, 170 mg/kg i 180 mg/kg, 180 mg/kg i 190 mg/kg ili između 190 mg/kg i 200 mg/kg nekom pacijentu koji to treba.

[0029]U specifičnim oličenjima, delići vezikula se daju u jednostrukoj ili podeljenim dozama u jednom ili više intervala u opsegu od jedanput dnevno, jedanput svaka 2 dana, jedanput svaka 3 dana, jedanput svaka 4 dana, jedanput svakih 5 dana, jedanput svakih šest dana, jedanput nedeljno, jedanput svake 2 nedelje, jedanput svake 3 nedelje, jedanput mesečno, jedanput svaka dva meseca, jedanput svaka tri meseca, jedanput svaka četiri meseca, jedanput svakih pet meseci i jedanput svakih šest meseci, jedanput svakih sedam meseci, jedanput svakih osam meseci, jedanput svakih devet meseci, jedanput svakih deset meseci, jedanput svakih jedanaest meseci i jedanput godišnje ili se drugačije daju pri prethodno određenim vremenskim intervalima u toku prethodno određenog perioda lečenja (tretmana). U pogodnom oličenju vremenski interval između doza za vreme toka terapije je jedanput nedeljno. Pogodni periodi lečenja za neki tok terapije mogu obuhvatati 1 dan, 2 dana, 3 dana, 4 dana, 5 dana, 6 dana, jednu nedelju, dve nedelje, tri nedelje, četiri nedelje, pet nedelja, šest nedelja, sedam nedelja, osam nedelja, devet nedelja, deset nedelja, jedanaest nedelja, dvanaest nedelja, trinaest nedelja, četrnaest nedelja, četiri meseca, pet meseci, šest meseci, sedam meseci, osam meseci, devet meseci, deset meseci, jedanaest meseci, jednu godinu, dve godine, tri godine, četiri godine ili pet godina. U pogodnom oličenju, period lečenja za neki tok terapije nije duži od 14 nedelja. U drugim pogodnim oličenjima, liposome se daju u intervalima od 4-7 dana sa 1-4, 1-8 ili 1-14 doza datih za svaki tok terapije. Režimi doziranja takođe uključuju kontinualno infuziono lečenje koje može uključivati primenu početne doze (početnice) čemu sledi doza održavanja. Pacijenti koji su lečeni sa takvim smešama i prema takvim postupcima mogu biti bilo koje starosti i mogu biti bolesni od jedne ili više ovih bolesti ili telesnih stanja koji su gore nabrojani i/ili drugih bolesti i stanja.

KRATAK OPIS CRTEŽA

Crtež 1A pokazuje raspodelu veličine u šarži velikih monolamelarnih liposoma koja je proizvedena ekstruzijom.

Crtež 1B pokazuje raspodelu veličine u šarži velikih monolamelarnih liposoma sa veličinom od približno 200 nm koja je proizvedena homogenizacijom.

Crtež 1C pokazuje raspodelu veličine u šarži liposoma ETC-588 koja je proizvedena ekstruzijom.

Crtež 2 ilustruje nivoe liposome i neesterifikovanog holesterola nakon što su doze liposome davane svaka 4 dana.

Crtež 3 ilustruje nivoe liposome i neesterifikovanog holesterola nakon što su doze liposome davane svakih 7 dana .

KORISNE DEFINICIJE

[0030]Kao što se ovde upotrebljava, termin "lek" ima značenje da ukaže na sintetičko jedinjenje koje je pogodno za terapeutsku primenu bez pridruženih vezanih nosača, adjuvanasa, aktivatora ili ko-faktora. "Lek" ne uključuje prirodne ili endogenične apolipoproteine, lecitin-holesterol-aciltransferazu ili albumin. "Liposoma", "vezikula" i "vezikula liposome" će se razumeti da ukažu na strukture koje imaju membrane koje sadrže lipid i koje okružuju vodenu unutrašnjost. Ove strukture mogu imati jednu ili više od jedne lipidne membrane ukoliko nije drugačije ukazano, iako će uopšte ove liposome imati samo jednu membranu. Takve jednostruko slojevite (jednoslojne) liposome se ovde referišu kao "monolamelarne. Termin "LUV" se odnosi na velike monolamelarne vezikule, termin "SUV" se odnosi na male monolamelarne vezikule i termin "MLV" se odnosi na multilamelarne vezikule. Kao što se ovde upotrebljava, termin "lečenje ateroskleroze" obuhvata vršenje terapeutske intervencije koja rezultuje u smanjenju sadržaja holesterola od najmanje jedne aterosklerotične pločice ili kojam profilaktički inhibira ili sprečava formiranje ili ekspanziju aterosklerotične krvne pločice.

DETALJNI OPIS PRONALASKA

[0031]Ovaj pronalazak se delom zasniva na otkriću da specifične doze i režimi doziranja koji su primenjeni da daju liposome, naročito liposome specifične veličine igraju kritične uloge u optimizovanju uklanjanja holesterola iz perifernih tkiva i/ili metabolizmu holesterola uklonjenog iz aterosklerotičnih krvnih pločica pomoću rakvih liposoma. Ovi novi postupci ovog pronalaska obuhvataju lečenje ili sprečavanje (prevenciju) bolesti ili njihovih simptoma uz smanjenje ili izbegavanje štetnih efekata, npr., toksičnih sporednih efekata ili neželjenih efekata. Pored toga, nasuprot prethodnim opisima terapije sa liposomom, pronalazači ovog pronalaska su otkrili da se liposome mogu primeniti da spreče, leče ili kontrolišu veliki broj različitih bolesti i telesnih stanja pored ateroskleroze i drugih indikacija koje su prethodno opisane za terapiju pomoću liposoma.

[0032]U jednom oličenju, ovaj pronalazak obuhvata postupak doziranja liposoma nekom pacijentu koji to treba, pri čemu ovaj postupak obuhvata davanje liposoma sa prosečnim prečnikom od 100 nm i pogodno manjim od 250 nm, nekom pacijentu koji ima bolest koja se može lečiti smanjenjem holesterola u jednostrukoj ili podeljenim dozama davanim svakih 4 do 7 dana u količini od oko 100 mg/kg do oko 250 mg/kg, pogodno od oko 100 mg/kg do oko 200 mg/kg. Dole su detaljno diskutovani pacijenti koje treba lečiti, liposome koje se trebaju primeniti u ovom pronalasku i specifične doze i režimi doziranja.

1. Liposome

[0033]Pronalazači ovog pronalaska su otkrili da su liposome sa prosečnim prečnikom većim od 100 nm i pogodno u opsegu od 100 nm do 140 nm, pogodnije od 110 nm do 120 nm optimalne za uklanjanje holesterola iz ovog sistema. Uopšte rečeno, nadmoćno (superiorno) dejstvo liposoma većih od 100 nanometara u prečniku se može objasniti mikroanatomijom jetre. Kada cirkulišu (kruže) u jetri, velike liposome (kao što se ovde upotrebljavaju, liposome veće od 100 nm u prečniku) mogu se<p>retežno očistiti pomoću Kupferovih ćelija koje postrojavaju sinusoidne otvore. Ove Kupferove ćelije prenose holesterol do hepatocita za izlučivanje u žuč ili za ponovno korišćenje. Male liposome (kao što se ovde upotrebljavaju, liposome manje od 100 nm u prečniku) mogu direktno pristupiti hepatocitima bez ili sa ograničenim prethodnim procesuiranjem (obradom) sa Kupfferovim ćelijama. Zbog fiksirane (utvrđene) doze može biti uliveno više malih liposoma nego delića veće veličine, hepatociti mogu biti akutno eksponirani (izloženi) relativno visokoj koncentraciji malih liposoma i njihovom akumuliranom holesterolu. Pronalazači ovog pronalaska su otkrili da liposome sa prečnikom između 100 nm i 140 nm, pogodno 110 nm i 120 nm su optimalne jer se one pretežno čiste pomoaeu Kupfferovih ćelija i efikasnije su u mobilisanju holesterola nego liposome manje ili veće veličine.

[0034] Pored i odvojeno od distribucije veličine liposoma, ovi pronalazači su otkrili da su u bolesnim pacijentima određene doze i režimi doziranja sigurniji i efikasniji u lečenju bolesti. U takvim postupcima i smešama koje su upotrebljene unutar (u okviru) ovih postupaka, mogu se primeniti liposome bilo koje veličine ili liposome koje imaju prosečni prečnik sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. Zaista, pogodno je da se liposome optimalne veličine primenjuju u okviru ovih novih režima doziranja ili u okviru pogodnih doza.

[0035]U specifičnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik veći od 100 nm bez obzira na standardnu devijaciju (odstupanje) ili distribuciju veličine. U odvojenim pogodnim oličenjima ove liposome imaju prosečni prečnik između 50-250 nanometara (nm) sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U odvojenim pogodnim oličenjima ove liposome imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 40-50%. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 100-140 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 100-140 nm + 40-50%. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 110-120 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 110-120 nm ± 40-50%. U odvojenim pogodnim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik između 100 i 200 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine. U naročitim oličenjima, ove liposome imaju prosečni prečnik sa veličinom između: 100 i 110 nm, 110 i 120 nm, 120 i 130 nm, 130 i 140 nm, 140 i 150 nm, 150 i 160 nm, 160 i 170 nm, 170 i 180 nm, 180 i 190 nm ili između 190 i 200 nm sa bilo kojom standardnom devijacijom (odstupanjem) ili distribucijom veličine, pogodno je distribucija veličine između ± 40 % i + 50%. U pogodnom odvojenom oličenju korišćene liposome su ETC-588 (vlasnički produkt Esperion Therapeutics, Inc.) koje imaju prosečni prečnik između 100 nm i 140 nm ± 40-50% posle proizvodnje.

[0036]Ovaj pronalazak takođe ima u vidu primenu liposoma sa prosečnim prečnikom većim od 50 nm i pogodno većim od 100 nm i manjim od 250 nm, koje kada se daju podižu ili ne podižu koncentracije lipoproteina male gustine (LDL) u serumu. Ovaj pronalazak takođe ima u vidu primenu liposoma sa prosečnim prečnikom većim od 50 nm i pogodno većim od 100 nm i manjim od 250 nm, koje kada se daju snižavaju ili ne snižavaju koncentracije lipoproteina male gustine (LDL) u serumu. U nekim primerima ove liposome neće biti vezane za drugi molekul kao što je neki lek ili protein. U drugim primerima, liposome ovog pronalaska će biti vezane, kombinovane i/ili davane u kombinaciji sa : (1) proteinima i peptidima vezanim za liposome kao što su proteini vezani za lipid uključujući peptide, paraoksonazu, lipoprotein-lipazu, lecitin-holesterol-acil-transferazu, fosfolipid-transfer-protein, Apo A-I i mimetike (podražavaoce) ili varijante Apo A-I; (2) malim akceptorima uključujući lipoproteine velike gustine (HDL), sintetičke i/ili rekombinantne deliće HDL, sintetičke i/ili rekombinantne deliće HDL koji su proizvedeni sa apolipoproteinima ApoA-I ili ApoA-I mimeticima (podražavaocima); (3) kardiovaskularnim agensima uključujući male molekule, statine, aspirin, klopidogrel (clopidogrel) , beta-blokere, glicemične kontrolne i/ili anti-dijabetske agense, antihipertenzivne agense, heparin, nitrate, Ilb/IIIa inhibitore, ACE inhibitore, beta-bllokere, fibrate, blokere kalcijumovih kanala i/ili inhibitore (sekvestrante) žučnih kiselina; (4) i antidijabetskom (i/ili glicemičnom kontrolnom) farmakoterapijom uključujući ali se ne ograničavajući na insulin i oralne agense. Pored toga, velike liposome se mogu davati same ili u kombinaciji sa multilamelarnim vezikulama i/ili malim monolamelarnim vezikulama. Primeri proteina i peptida (kao što su lipid-vezujući proteini uključujući peptide, Apo A-I i mimetike (podražavaoce) ili varijante A-I) su opisani u SAD patentima br. 6.004.925, 6.046.166, 6.037.323, 6.287.590, 6.329.341 i 6.265.377 pri čemu su svi ovi ovde inkorporirani referencom u svojoj potpunosti. Primeri malih molekula koji umeravaju nivoe HDL, LDL ili holesterola su opisani u SAD patentnim prijavama br. 09/540.740, 09/540.739 i 09/540.738 pri čemu su sve ove prijave ovde inkorporirane referencom u svojoj potpunosti.

[0037]Osobe koje su verzirane u ovoj oblasti tehnike će proceniti da liposome u smešama ovog pronalaska mogu biti sintetizovane pomoću različitih postupaka, kao što su opisani, npr., u SAD patentima br. 4.186.183, 4.217.344, 4.261.975, 4.485.054, 4.774.085, 4.946.787, 5.726.157, 5.746.223, 5.843.474, 5.448.435, 5.853.402, 6.080.422, 6.312.719, 6.139.871, PCT publikaciji br. WO 91/17424, Deamer and Bangham,Biochim. Biophys. Acta443(1976) 629-634, Fralev etal., Proc. Natl. Acad. Sci. USA76

(1979) 3348-3352, Hope etal., Biochim. Biophys. Acta812

(1985) 55-65, Mayer etal., Biochim. Biophys. Acta858

(1986) 161-168 i Williams etal., Proc. Natl. Acad. Sci. USA85(1988) 242-246, pri čemu je svaka od ovih publikacija ovde inkorporirana referencom u svojoj potpunosti. Pogodni postupci uključuju, npr., delovanje ultrazvukom, ekstruziju, visok pritisak/homogenizaciju, mikrofluidizaciju, dijalizu deterdženata, kalcijumom indukovanu fuziju malih vezikula liposoma i postupke sa infuzijom etra što je sve vrlo dobro poznato u ovoj oblasti tehnike.

[0038]Uopšte rečeno, ove liposome se najpogodnije generišu (proizvode) pomoću postupaka sa delovanjem ultrazvukom i ekstruzijom. Ukratko, lipid se meša sa fiziološkim rastvorom soli i puferom. U jednom oličenju, hloroformski rastvor lipida se kovitla i rastvarač se ukloni pod stalnom strujom azota (N2) . Uzorak se osuši pod visokim vakuumom. Dobiven suv film lipida se rehidratiše u 150 mM NaCl i 2 mM [4-(2-hidroksietil)]-piperazin-etansulfonskoj kiselini (Hepes, pH 7,4) . Ovo uopšte proizvodi multilamelarne vezikule liposoma. Monolamelarne vezikule se proizvode delovanjem ultrazvukom ili ekstruzij om.

[0039] Delovanje ultrazvukom se uopšte vrši sa uređajem za generisanje ultrazvuka sa šiljkom, kao što je Bransonov uređaj za generisanje ultrazvuka sa šiljkom, u kupatilu sa ledom. Tipično, suspenzija se podvrgava dejstvu nekoliko ciklusa delovanja ultrazvukom. Ekstruzija se može vršiti pomoću ekstrudera sa membranom, kao što je Lipex Biomembrane Extruder. Definisana veličina pora u ekstruzionim filtrima može proizvesti monolamelarne liposomalne vezikule specifičnih veličina. Ove liposome se takođe mogu formirati ekstruzijom kroz asimetrični keramički filter, kao što je Ceraflow Microfilter, koji je komercijalno raspoloživ kod firme Norton Companv, Worcester Mass., SAD. Liposome ETC-588 (vlasnički proizvod firme Esperion Therapeutics, koje se sada procenjuju u kliničkim ispitivanjima) se proizvode ekstruzijom. Sadašnji postupak uključuje hidratisanje 1-palmitoil-2-oleoil-fosfatidilholina (POPC) sa fosfatom puferovanim rastvorom soli i potiskivanje dobivenog proizvoda kroz membranske filtre dok se ne postigne prosečni prečnik od oko 100 do 140 nm i pogodnije dok se ne postigne prosečni prečnik od oko 110 do 120 nm. Kroz ove filtre sa membranom mogu se izvršiti jedan ili više prolaza. U jednom oličenju je izvršeno 2-10 prolaza, pogodno 2-5 prolaza. Pored toga, membrane sa filtrom mogu biti iste ili različite veličine (tj., može postojati gradijent membrana). Rezultujući proizvod se zove ETC-588. Primeri dobivanja liposoma specifičnih veličina pomoću ekstruzije su opisani u SAD privremenoj patentnoj prijavi br. 60/326.032, koja je predata 28. septembra 2001. godine i koja je ovde inkorporirana referencom u svojoj potpunosti.

[0040]Drugi načini proizvodnje liposoma sa istim prosečnim prečnikom uključuju homogenizaciju ili mikrofluidizaciju, međutim, veća je distribucija delića.VidetiCrtež 1A nasuprot Crtežu 1B. Primenjujući sadašnju tehnologiju, biološki efekti delića proizvedenih homogenizacijom ili mikrofluidizacijom su različiti od bioloških efekata delića proizvedenih ekstruzijom. Kinetika raščišćavanja je neznatno brža i površine pod krivom vrednosti merenja za mobilizaciju holesterola su neznatno manje ukazujući da su ovi delići manje efikasni nego ekstrudirane liposome čak i kada se životinjama daje ekvivalentna doza na bazi mg fosfolipida/kg.

[0041]Veličina liposomalnih vezikula se može odrediti pomoću neke vrste (kvazi) rasturanja električne svetlosti (QUELS) kao što je opisano u referenci Bloomfield,Ann. Rev. Biophys. Bioeng.10(1981) 421-450, koja je ovde inkorporirana referencom u svojoj potpunosti. Prosečni prečnik liposoma se može smanjiti ultrazvučnim tretiranjem formiranih liposoma. Ciklusi ultrazvučnog tretiranja sa prekidima mogu se smenjivati sa određivanjem pomoću QUELS metode što vodi efikasnoj sintezi liposoma. Ove liposome se mogu sastojati od različitih lipida. Uopšte, ove liposome će se sastojati od najmanje jednog fosfolipida, tipično jajnog fosfatidilholina, jajnog fosfatidilglicerola, distearoilfosfatidilholina ili distearoilfosfatidil-glicerola. Mnoga oličenja ovog pronalaska će uključivati više od jednog fosfolipida.

[0042] Drugi fosfolipidi koji su pogodni za formiranje liposoma koje se mogu primeniti unutar smeša ili postupaka koji su ovde opisani uključuju, ali nisu ograničeni samo na njih: fosfatidilholin, fosfatidilglicerol, lecitin, beta, gama-dipalmitoil-alfa-lecitin, sfingomielin, fosfatidilserin, fosfatidičnu kiselinu, N-(2, 3-di(9-(Z)-oktadeceniloksi))-prop-l-il-N,N,N-trimetilamohij um-hlorid, fosfatidiletanolamin, lizolecitin, lizofosfatidil-etanolamin, fosfatidil-inozitol, cefalin, kardiolipin, cerebrozide, dicetil-fosfat, dioleoilfosfatidilholin, dipalmitoil-fosfatidil-holin, dipalmitoilfosfatidil-glicerol, dioleoil-fosfatidil-glicerol, palmitoil-oleoil-fosfatidil-holin, di-stearoil-fosfatidilholin, stearoil-palmitoil-fosfatidilholin, di-palmitoil-fosfatidiletanolamin, di-stearoil-fosfatidiletanolamin, di-mi ristoil-fosfatidil-serin, di-oleoil-fosfatidilholin, oleoil-palmitoil-fosfatidilholin, palmitoil-oleoil-fosfatidilholin, lipid koji je u tečno-kristalnoj fazi pri 37°C, njihove smeše i slično. U pogodnom oličenju, ove liposome se sastoje od palmitoil-oleoil-fosfatidilholina. U liposomama smeša ovog pronalaska takođe se mogu primeniti lipidi koji je ne sadrže fosfor. Ovi uključuju, npr., stearilamin, docecilamin, acetil-palmitat, amide masnih kiselina i slično. Dodatni lipidi koji su pogodni za primenu u liposomama ovog pronalaska su dobro poznati osobama koje su verzirane u ovoj oblasti tehnike i navedeni su u velikom broju različitih dobro poznatih izvora, npr.McCutcheon' s Detergents andEmulsifiersiMcCutcheon' s Functional Materials,Allured Publishing Co., Ridgewood, N.J., SAD, pri čemu su obe ove knjige ovde inkorporirane referencom u svojoj potpunosti.

[0043]Uopšte je poželjno da se ove liposome sastoje od lipida koji su tečno-kristalni pri 37°C, često pri 35°C i čak pri 32°C. Liposome u tečno-kristalnom stanju tipično holesterol prima efikasnije nego liposome u stanju gela. Kako pacijenti tipično imaju temperaturu srca od oko 37°C, liposome koje se sastoje od lipida koji su tečno-kristalni pri 37°C su uopšte u tečno-kristalnom stanju za vreme lečenja i, otuda, optimiziraju uklanjanje holesterola iz krvnih pločica.

[0044]Pogodno, liposome korišćene u okviru ovih postupaka i smeša su bez holesterola.

2. Farmaceutske smeše

[0045]Farmaceutske smeše ovog pronalaska mogu obuhvatiti farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač. U smešama ovog pronalaska mogu se koristiti mnogi farmaceutski prihvatljivi nosači. Uopšte rečeno, kao farmaceutski prihvatljiv nosač će se upotrebiti normalan rastvor soli NaCl. Drugi pogodni nosači uključuju, npr., vodu, puferovanu vodu, 0,4%-ni rastvor soli, 0,3%-ni rastvor glicina i slično, uključujući glikoproteine za pojačanu stabilnost, kao što su albumin, lipoprotein, globulin, itd. Ove smeše se mogu sterilisati uz primenu uobičajenih, dobro poznatih tehnika sterilizacije. Dobiveni vodeni rastvori mogu se pakovati za primenu ili filtrirati pod aseptičkim uslovima i liofilizirati, pri čemu se pre davanja liofiliziran preparat kombinuje sa sterilnim vodenim rastvorom. Ove smeše mogu sadržati farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance potrebne da aproksimiraju fiziološke uslove, kao što su sredstva za podešavanje pH i puferovanje, sredstva za podešavanje kreposti (toniciteta) i slično, na primer, natrijum-acetat, natrijum-laktat, natrijum-hlorid, natrijum-fosfat, kalijum-hlorid, kalcijum-hlorid, itd.

[0046]Koncentracija liposoma može varirati. U naročitim oličenjima koncentracija liposoma može biti u opsegu od oko 20 mg/ml do oko 1000 mg/ml, pogodno između 50-300 mg/ml, pogodnije između 50-200 mg/ml i još pogodnije između 100-200 mg/ml. U odvojenim pogodnim oličenjima koncentracija liposoma može biti u opsegu od oko 1-20 mg/ml, 20-30 mg/ml, 30-40 mg/ml, 40-50 mg/ml, 50-60 mg/ml, 60-70 mg/ml, 70-80 mg/ml, 80-90 mg/ml, 90-100 mg/ml, 100-110 mg/ml, 110-120 mg/ml, 120-130 mg/ml, 130-140 mg/ml, 140-150 mg/ml, 150-160 mg/ml, 160-170 mg/ml, 170-180 mg/ml, 180-190 mg/ml ili 190-200 mg/ml. U određenim pogodnim oličenjima, koncentracija će biti oko 50 mg/ml, 100 mg/ml, 150 mg/ml, 200 mg/ml, 250 mg/ml ili 300 mg/ml. Stručnjaci verzirani u ovoj oblasti tehnike mogu varirati ove koncentracije tako da optimizuju lečenje sa različitim liposomalnim komponentama ili kod posebnih pacijenata. Na primer, ova koncentracija se može povećati tako da se smanji punjenje fluida koji je u vezi sa lečenjem. Ovo može biti naročito poželjno kod pacijenata koji imaju sa aterosklerozom povezano kongestivno oštećenje srca koje je prouzrokovano navalom krvi ili ozbiljnu hipertenziju povezanu sa aterosklerozom. Alternativno tome, liposome koje se sastoje od iritirajućih lipida mogu se razblažiti da se snize koncentracije tako da se smanji zapaljenje na mestu davanj a.

[0047]Liposome opciono mogu biti vezane za veliki broj različitih proteina i polipeptida tako da se poveća brzina transfera holesterola ili kapacitet ovih liposoma za nošenje holesterola. Naročito je korisno vezivanje apolipoproteina za liposome. Kao što se ovde upotrebljava, "vezan za liposome" ili "vezivanje za liposome" ukazuje da je predmetno jedinjenje kovalentno ili nekovalentno vezano za površinu ove liposome ili se sadrži, u potpunosti ili delimično, u unutrašnjosti ove liposome. ApolipoproteinAz,apolipoprotein An i apolipoprotein E će uopšte biti najkorisniji apolipoproteini koji se vezuju za liposome. Ovi apolipoproteini pospešuju (poboljšavaju) transfer holesterola i holesteril-estara u jetru radi metabolizma. Lecitin-holesterol-aciltransferaza je takođe korisna za metaboliziranje slobodnog holesterola do holesteril-estara. Liposome u farmaceutskim smešama ovog pronalaska mogu biti vezane za molekule apolipoproteinahi,apolipoproteina An, apolipoproteina E i lecitin-holesterol-aciltransf eraze, jednostruko ili u nekoj kombinaciji i molarnom odnosu. Dodatni proteini ili drugi neproteinski molekuli takođe mogu biti korisni da se vežu za liposome tako da se poboljša stabilnost ili poluživot liposome i slično. Ovi uključuju, npr., holesterol, polietilen-glikol-vezan fosfolipid i gangliozide, sterole, alkilsulfate, amonijum-bromid, albumin i slično.

[0048] U specifičnim oličenjima, farmaceutske smeše za primenu prema ovom pronalasku mogu se formulisati na uobičajen način uz primenu jednog ili više fiziološki prihvatljivih nosača koji obuhvataju ekscipijente i pomoćna sredstva koji olakšavaju preradu (procesuiranje) aktivnih jeedinjenja u preparate koji se mogu farmaceutski primeniti (koristitit). U specifičnim oličenjima, takve formulacije uključuju stabilizatore i/ili antioksidanse. Pogodna (odgovarajuća) formulacija zavisi od odabranog puta davanja. Liposome ovog pronalaska mogu biti u liofioliziranim oblicima, tečnim oblicima, zamrznutim oblicima ili praškastim oblicima. U naročitim oličenjima liposome ovog pronalaska su u praškastom obliku, pogodno u liofiliziranom obliku, pogodnije u zamrznutom obliku i najpogodnije u tečnom obli ku.

[0049] Za naročita oličenja, liposome ovog pronalaska mogu biti formulisane u vodenim rastvorima za injekcije, pogodno u fiziološki kompatibilnim puferima kao što su Hanksov rastvor, Ringerov rastvor ili fiziološki rastvor soli. Za transmukozalno davanje, u formulaciji se upotrebljavaju penetranti (probijači) koji su odgovarajući za barijeru kroz koju treba prodreti. Takvi penetranti su uopšte poznati u ovoj oblasti tehnike. U specifičnim oličenjima, mesne ili transdermalne formulacije uključuju stabilizatore i/ili antioksidanse.

[0050] U drugim oličenjima, ova jedinjenja se lako mogu formulisati za oralno davanje kombinovanjem liposoma sa farmaceutski prihvatljivim nosačima koji su dobro poznati u ovoj oblasti tehnike. Takvi nosači omogućuju jedinjenjima ovog pronalaska da budu formulisana kao

tablete, pilule, dražeje, kapsule, kapsule gotove

(spremne) za guranje koje su načinjene od želatina, zatim meke ili zatvorene (zatopljene) kapsule koje su načinjene od želatina i plastifikatora, zatim kao tečnosti, gelovi, sirupi, muljevi (mutljazi), suspenzije i slično, za

oralno unošenje u stomak od strane pacijenta kojeg treba lečiti. Pored toga, mogu se dodati stabilizatori. Sve

formulacije za oralno davanje trebale bi biti u doziranjima koja su pogodna za takvo davanje.

[0051] U naročitim oličenjima koja su u vezi sa usnenim davanjem, smeše mogu uzeti oblik kapi, tableta ili pastila formulisanih na uobičajen način. Liposome se mogu formulisati za parenteralno davanje injekcijom, npr., pomoću bolusne injekcije ili kontinualnom infuzijom kao što je gore opisano. U nekim oličenjima ova jedinjenja se mogu davati kontinualnom infuzijom intravenski, intramuskularno ili potkožno. Formulacije za injekciju mogu biti prisutne u jediničnom obliku doziranja, npr., u ampulama ili višedoznim kontejnerima, sa dodatim prezervativom (sredstvom za konzerviranje). Ove smeše mogu uzeti takve oblike kao što su suspenzije, rastvori ili emulzije u uljnim ili vodenim prenosnicima i mogu sadržati sredstva za formulisanje kao što su sredstva za suspendovanje, stabilizovanje i/ili dispergovanje.

[0052] Pored toga, suspenzije liposoma se mogu napraviti kao odgovarajuće uljne injekcione suspenzije. Vodene injekcione suspenzije mogu sadržati supstance koje povišavaju viskoznost suspenzije, kao što su natrijum-karboksimetil-celuloza, glicerol, sorbitol ili dekstran. Opciono, ova suspenzija takođe može sadržati pogodne stabilizatore ili sredstva koja povišavaju rastvorijivost liposoma tako da se omogući dobivanje visoko koncentrovanih rastvora.

[0053] Alternativno tome, aktivni sastojak može biti u praškastom ili liofiliziranom obliku za konstituisanje (sastavljanje) ili rekonstituisanje (ponovno sastavljanje) sa pogodnim prenosnikom, npr., sterilnom vodom bez pirogena, pre primene. Ova jedinjenja takođe se mogu formulisati u rektalne smeše kao što su supozitorije ili retencioni klistiri, npr., koji sadrže uobičajene osnove supozitorije kao što su buter od kakaoa ili drugi gliceridi.

[0054] Pored gore opisanih formulacija, liposome se takođe mogu formulisati kao depo-preparat (preparat-skladište). Takve dugotrajno delujuće formulacije se mogu davati implantacijom (na primer, potkožno ili intramuskularno) ili intramuskularnom injekcijom. Tako, na primer, ova jedinjenja mogu biti formulisana sa pogodnim polimernim ili hidrofobnim materijalima ili jonoizmenjivačkim smolama ili kao slabo rastvorni derivati.

[0055]Ove farmaceutske smeše takođe mogu obuhvatati pogodne čvrste nosače ili ekscipijente ili nosače ili ekscipijente u gelnoj fazi. Primeri takvih nosača ili ekscipijenata uključuju, ali nisu ograničeni samo na njih, kalcij um-karbonat, kalcijum-fosfat, razne šećere, škrobove, derivate celuloze, želatin i polimere kao što su polietilenglikoli.

3. Postupci za preventivu, lečenje ili kontrolu određenih

bolesti i drugih telesnih stanja sa liposomama

[0056]Takođe su dati postupci za preventivu, lečenje ili kontrolu velikog broja različitih bolesti i telesnih stanja uključujući, ali se ne ograničavajući samo na njih: arteriosklerozu uključujući aterosklerozu, flebosklerozu ili bilo koje vensko stanje u kojem se depoziti krvnih pločica koje sadrže holesterol ili drugi materijal formiraju unutar intime (unutrašnjeg sloja krvnog suda) ili unutrašnjih medija vena, akutne koronarne sindrome, anginu uključujući stabilnu anginu i nestabilnu anginu, zapaljenje ili zapaljenske bolesti uključujući ali se ne ograničavajući na vaskularno zapaljenje i dermalno zapaljenje, kongestivno oštećenje srca koje je prouzrokovano navalom krvi, koronarnu bolest srca (CHD), hipertenziju, koronarne ventrikularne aritmije, surraventrikularne aritmije, perifernu vaskularnu bolest, fatalni infarkt miokarda, nefatalni infarkt miokarda, ishemiju uključujući kardiovaskularnu ishemiju, hibernaciju miokarda, prolazne ishemijske napade, ishemiju koja nije u vezi sa kardiovaskularnom bolešću uključujući ishemijsko-reperfuzionu povredu kao što je povreda prouzrokovana operacijom kuka, operacijom kolena, transplantacijom organa ili potkožnom transluminalnom koronarnom angioplastičnom operacijom (PTCA), zatim koronarnu reperfuziju, restenozu, peri-operativne (PCI) ishemijske događaje, smanjenu potrebu za revaskularizacijom, smanjenu površinu infarkta, poremećaje koagulacije, trombocitopeniju, dubokovensku trombozu, pankreatitis, nealkoholni steatohepatitis (NASH), dijabetsku neuropatiju, retinopatiju, bolnu dijabetsku neuropatiju, psorijazu, kritičnu ishemiju uda, hromost, impotenciju, rak (kancer) prostate, hiperlipidemiju, hiperlipoproteinemiju, hipoalfalipoproteinemiju, hipertrigliceridemiju, bilo koje stenotičko stanje koje vodi do ishemijske patologije, dijabetes uključujući oba tipa: tip I i tip II, ihtiozu, moždani udar, povredljive krvne pločice, prskanje povredljivih krvnih pločica, Alchajmerovu bolest, ulceraciju (razjedanje) donjeg uda, ozbiljnu koronarnu ishemiju, limfome, katarakte, disfunkciju endotela (epitela krvnih sudova), ksantelazme, disfunkciju krajnjeg organa, vaskularnu bolest, vaskularnu bolest koja rezultuje od pušenja i dijabetesa, bolest karotidne i koronarne arterije, regresiju i skvrčenje (smežuranje) ustanovljenih krvnih pločica, kombinacije hirurških postupaka koji rezultuju u povredi endotela (epitela krvnog suda), oštećenje endotela kao rezultat hirurških postupaka, morbidnost (bolesno stanje) povezano sa vaskularnom bolešću, ulceracije (razjedanja) u arterijskom lumenu (šupljini), restenozu kao rezultat balonske angioplastične operacije i subindikacije prethodnog.

[0057] Smeše i postupci ovog pronalaska se mogu primeniti da se povise nivoi HDL, povise niski nivoi HDL, snize LDL nivoi, snize visoki LDL nivoi, privremeno povise LDL nivoi, snize nivoi triglicerida, povisi ili snizi nivo drugih lipida, poveća stabilnost krvnih pločica ili smanji verovatnoća prskanja krvnih pločica, poveća ili smanji vazodilatacija, leči ili spreči zapaljenje, leče ili spreče zapaljenjske bolesti ili zapaljenjski odgovor, pojača ili stabilizuje intima (unutrašnji sadržaj krvnog suda) glatkih mišića i krvnih sudova, stimuliše isticanje (efluks) vanćelijskog holesterola za transport u jetru, modulišu (umere) imunološki odgovori, mobiliše holesterol iz aterosklerotičnih krvnih pločica i modifikuje bilo koja membrana, ćelija, tkivo, organ i vanćelijski region i/ili struktura u kojoj bi bile pogodne kompozicione i/ili funkcionalne modifikacije. Smeše i postupci ovog pronalaska takođe obuhvataju mesne aplikacije (primene) i zarastanje rana.

[0058] Ovi postupci uopšte obuhvataju davanje smeše liposoma nekom sisaru, pogodno humanom biću koje ima bolest ili stanje, pri čemu smeša liposoma obuhvata liposome koje imaju prosečni prečnik veći od 100 nm, pogodno između 100 nm i 250 nm, pogodno između 100 nm i 140 nm i pogodnije između 110 nm i 120 nm. U naročitim oličenjima, ove liposome date subjektima imaju prosečni prečnik sa veličinom između 100 i 110 nm, 110 i 120 nm, 120 i 130 nm, 130 i 140 nm, 140 i 150 nm, 150 i 160 nm, 160 i 170 nm, 170 i 180 nm, 180 i 190 nm i između 190 i 200 nm. U pogodnijem oličenju, korišćene liposome su ETC-588 (vlasnički produkt Esperion Therapeutics, Inc.) koje imaju prosečni prečnik između 100 nm i 140 nm, pogodno između 110 i 120 nm posle proizvodnje.

[0059]Postupci ovog pronalaska su naročito korisni za lečenje aterosklerotičnih lezija kao i drugih gore identifikovanih bolesti i telesnih stanja povezanih sa poremećajima lipida. U naročitom oličenju, postupci ovog pronalaska mogu profilaktički inhibirati ili sprečiti formiranje ili ekspanziju aterosklerotičnih krvnih pločica, sniziti sadržaj holesterola aterosklerotičnih krvnih pločica i/ili smanjiti zapreminu aterosklerotičnih krvnih pločica i otuda stepen bilo koje opstrukcije vaskularnog lumena (šupljine). Smanjenje zapremine krvne pločice će uopšte biti najmanje 5-30%, često isto toliko kao 50% i u nekim slučajevima 75% ili više. Sadržaj holesterola će uopšte biti smanjen najmanje 10-30%, često 30-50% i u nekim slučajevima isto toliko kao 75%-85% ili više. Holesterol se može mobilisati iz krvnih pločica bilo direktnim isticanjem (efluksom) u liposome ili u lipoproteine koji zatim prenose holesterol u liposome. Kako se holesterol prenosi do liposoma iz lipoproteina, ovi lipoproteini mogu primiti više holesterola iz krvnih pločica. Uopšte, kada se holesterol prima iz lipoproteina, holesterol se prenosi iz HDL (lipoproteina velike gustine).

[0060]Ovi postupci mogu biti korisni da leče

aterosklerozu kao i druge bolesti i telesna stanja u različitim životinjama i u razlićčitim krvnim sudovima. Tipično, životinja će biti ljudsko biće, iako se nehumani primati, psi, mačke, glodari, konji, krave i slično mogu lečiti pomoću postupaka ovog pronalaska. Ateroskleroza bilo kojeg krvnog suda, kao što su aorta, karotidne arterije (obična, interna i eksterna), koronarne arterije, mezenterične arterije, renalne arterije, karličnjačne arterije, potkolene arterije i slično, može se lečiti pomoću postupaka ovog pronalaska. Slično tome, fleboskleroza ili bilo koje vensko stanje u kojem depoziti krvnih pločica koje sadrže holesterol ili drugi materijal se formiraju unutar intime (unutrašnjeg sloja krvnog suda) ili unutrašnjih medija vena, može se lečiti pomoću postupaka ovog pronalaska. Humani pacijenti koje treba lečiti uključuju malu decu (do 7 godina), stariju decu, tinejdžere, odrasle i starije koji nisu ranije ^ lečeni ili one koji su ranije lečeni u vezi sa poremećajima koji potiču od holesterola. Postupci ovog pronalaska takođe uključuju lečenje pacijenata pre, za vreme ili posle hirurške operacije (intervencije) i onih sa specifičnim bolestima ili telesnim stanjima koja su ovde obelodanjena i/ili drugim bolestima ili telesnim stanjima koja ovde nisu obelodanjena. U naročitim oličenjima ovi postupci uključuju davanje formulacija liposoma koje su ovde opisane pacijentima koji pate od arterioskleroze uključujući aterosklerozu, flebosklerozu ili bilo koje vensko stanje u kojem depoziti krvnih pločica koje sadrže holesterol ili drugi materijal se formiraju unutar intime (unutrašnjeg sloja krvnog suda)

ili unutrašnjih medija vena, zatim akutne koronarne sindrome, anginu uključujući stabilnu anginu i nestabilnu anginu, zapaljenje ili zapaljenjske bolestzi uključujući

ali ne ograničavajući se na vaskularno zapaljenje i dermalno zapaljenje, kongestivno otkazivanje (oštećenja) srca koje je prouzrokovano navalom krvi, koronarnu bolest srca (CHD), hipertenziju, koronarne ventrikularne aritmije, surraventrikularne aritmije, perifernu vaskularnu bolest, fatalni infarkt miokarda, nefatalni infarkt miokarda, ishemiju uključujući kardiovaskularnu ishemiju, hibernaciju miokarda, prolazne ishemijske napade, ishemiju koja nije u vezi sa kardiovaskularnom bolešću uključujući ishemijsko-reperfuzionu povredu kao što je povreda kao posledica hirurgije kuka, hirurgije kolena, transplantacije organa ili PTCA, zatim koronarnu reperfuziju, restennosu, peri-operativne (PCI) ishemijske događaje, smanjenu potrebu za revaskularizacijom, smanjenu površinu infarkta, poremećaje koagulacije, trombocitopeniju, duboko vensku trombozu, pankreatitis, nealkoholni steatohepatitis (NASH), dijabetsku neuropatiju, retinopatiju, bolnu dijabetsku neuropatiju, psorijazu, kritičnu ishemiju uda, hromost, impotenciju, kancer prostate, hiperlipidemiju, hiperlipoproteinemiju, hipoalfalipoproteinemiju, hipertrigliceridemiju, bilo koje stenotičko stanje koje vodi do ishemijske patologije, dijabetes uključujući tip I i tip II, ihtiozu, moždani udar, povredijive krvne pločice, prskanje povredljivih krvnih pločica, Alchajmerovu bolest, ulceraciju (razjedanje) donjeg uda (ekstremiteta), ozbiljnu koronarnu ishemiju, limfome, katarakte, disfunkciju endotela (epitela krvnih sudova) , ksantelazme, disfunkciju krajnjih organa, vaskularnu bolest, vaskularnu bolest koja rezultuje od pušenja i dijabetesa, bolest karotidne (vratne) i koronarne arterije, regresiju i skvrčenje (smežuranje) ustanovljenih krvnih pločica, kombinacije hirurških postupaka koji rezultuju u povredi endotela (epitela krvnih sudova), oštećenje endotela (epitela krvnih sudova) kao rezultat hirurških postupaka, bolesno stanje koje je u vezi sa vaskularnom bolešću, ulceracije (razjedanje) u arterijskom lumenu (šupljini), restenozu kao rezultat balonske angioplastike i subindikacije gore datog.

[0061] Formulacije liposoma date ovim pronalaskom takođe se mogu davati pacijentima da se povise nivoi HDL, povise niski nivoi HDL, snize LDL nivoi, snize visoki LDL nivoi, privremeno povise LDL nivoi, snize nivoi triglicerida, povisi ili snizi nivo drugih lipida, poveća stabilnost krvnih pločica ili smanji verovatnoća prskanja krvnih pločica, poveća ili smanji vazodilatacija, leči ili spreči zapaljenje, leče ili spreče zapaljenjske bolesti ili zapaljenjski odgovor, pojača ili stabilizuje intima (unutrašnji sadržaj krvnog suda) glatkih mišića i krvnih sudova, stimuliše isticanje (efluks) vanćelijskog holesterola za transport u jetru, modulišu (umere) imunološki odgovori, mobiliše holesterol iz aterosklerotičnih krvnih pločica i modifikuje bilo koja membrana, ćelija, tkivo, organ i vanćelijski region i/ili struktura u kojoj bi bile pogodne kompozicione i/ili funkcionalne modifikacije. Smeše i postupci ovog pronalaska takođe obuhvataju mesne aplikacije (primene) i zarastanje rana.

[0062] Postupci ovog pronalaska takođe su korisni za profilaktična lečenja, naročito da spreče ponovni pad (vraćanje) ili komplikacije u pacijentima koji se oporavljaju od invazionih vaskularnih postupaka. Vaskularni regioni koji imaju povređen endotel (epitel krvnog suda) su sa povišenim rizikom od razvijanja aterosklerotičnih krvnih pločica. Otuda se invazioni vaskularni postupci, kao što su koronarna angioplastična operacija, vaskularno presađivanje primenom bajpasa i drugi postupci koji povređuju vaskularni sloj endotela, mogu praktikovati u sprezi sa postupcima ovog pronalaska. Kako invazioni postupak povređuje endotel, ove liposome deluju da uklone holesterol iz povređenog regiona i inhibiraju ili spreče ekspanziju formiranja krvnih pločica za vreme zarašćivanja endotela.

[0063] Pomoću postupaka ovog pronalaska takođe se mogu lečiti hiperlipidemije. Korisno lečenje je davanje liposoma, samih ili vezanih za apolipoprotein Al i apolipoprotein AII, apolipoprotein E, individuama koje imaju hipoalfalipoproteinemiju iz genetskih ili sekundarnih uzroka, familijarno kombinovanu hiperlipidemiju i familijarnu hiperholesterolemiju.

[0064] Liposome koje se daju u postupcima ovog pronalaska će se sastojati od lipida kao što je gore opisano. Ovi lipidi će uopšte biti u tečno-kristalnom stanju pri 37°C. Ovi lipidi će takođe uopšte uključivati jedan ili više fosfolipida, u nekim slučajevima fosfatidilholin ili fosfatidilglicerol, iako se liposome mogu sastojati od mnogo drugih lipida, čiji su primeri gore opisani.

[0065] Liposome se mogu davati na više načina. Na primer, ove smeše se mogu davati oralno ili parenteralno. Uopšte rečeno, smeše će se davati parenteralno, pogodno intravenski ili davanje može biti intramuskularno, potkožno (subkutano), intraperitonealno, intraarterijski, intratekalno, preko limfatika, intravaskularno. Davanje se može postići preko hronične stalne sonde (katetera) ili akutno stavljenog katetera (sonde) preko venske infuzije sa pumpom, preko venske infuzije sa špricom (brizgalicom) za injekcije, ili preko venske infuzije sa davanjem pomoću šprica (brizgalice) sa potiskivanjem. U drugim oličenjima, davanje može biti podjezično (sublingvalno), usneno, mukozalno, mesno (lokalno), rektalno, vaginalno ili transdermalno. U naročitom oličenju, smeše ovog pronalaska se daju mesno (lokalno) da se spreči ili leči zapaljenje ili da se pomogne u zarastanju rana. U pogodnim oličenjima, liposome će se davati intravenski. Često će se liposome davati u veliku centralnu venu, kao što je gornja šuplja vena (kava) ili donja šuplja vena (kava), da se omogući da se visoko koncentrovani rastvori daju u veliku zapreminu i protočne sudove. Liposome se mogu davati intraarterijski pre, za vreme ili nakon vaskularnih postupaka da predaju visoku koncentraciju direktno u napadnut oboleo sud. Liposome se takođe mogu davati direktno u sudove na mesni (lokalni) način od strane hirurga za vreme otvorenih postupaka.U nekim slučajevima, liposome se mogu davari oralno ili transdermalno. Liposome se takođe mogu inkorporirati u vaskularnim stentovima za duže trajanja otpuštanja nakon postavljanja. Ovo je naročito efikasno za angiplastično tretiranje (lečenje) restenoze lezija u koronarnim arterij ama.

[0066] U naročitim oličenjima, formulacije liposoma ovog pronalaska mogu se davati intravenski, pogodno pomoću infuzione pumpe, pri brzini od oko: 1-2 ml/min, 2-3 ml/min, 3-4 ml/min, 4-5 ml/min, 5-6 ml/min, 6-7 ml/min, 7-8 ml/min, 8-9 ml/min, 9-10 ml/min, 10-11 ml/min, 11-12 ml/min, 12-13 ml/min, 13-14 ml/min, 14-15 ml/min, 15-16 ml/min, 16-17 ml/min, 17-18 ml/min, 18-19 ml/min, 19-20 ml/min, 20-30 ml/min, 30-40 ml/min, 40-50 ml/min, 50-60 ml/min, 60-70 ml/min, 70-80 ml/min, 80-90 ml/min ili 90-100 ml/min; ili pri nekoj drugoj prethodno određenoj brzini davanja. U jednom naročito pogodnom oličenju, formulacije liposoma ovog pronalaska se daju intravenski pomoću infuzione pumpe, pomoću pumpe sa brizgalicom (špricom za injekcije); intravenskim klistirom kap po kap i/ili brzim klistirom pri brzini od oko 10 ml/min. U drugom oličenju, formulacije liposoma ovog pronalaska se mogu davati preko aparata (mašine) za dijalizu ili aferi zu.

[0067]Udrugim specifičnim oličenjima, koncentracija liposoma za intravensku infuziju ili drugi oblik davanja može biti oko 1-10 mg/ml, 10-20 mg/ml, 20-30 mg/ml, 30-40 mg/ml, 40-50 mg/ml, 50-60 mg/ml, 60-70 mg/ml, 70-80 mg/ml, 80-90 mg/ml, 90-100 mg/ml, 100-110 mg/ml, 110-120 mg/ml, 120-130 mg/ml, 130-140 mg/ml, 140-150 mg/ml, 150-160 mg/ml, 160-170 mg/ml, 170-180 mg/ml, 180-190 mg/ml, 190-200 mg/ml, 200-210 mg/ml, 210-220 mg/ml, 220-230 mg/ml, 230-240 mg/ml, 240-250 mg/ml, 250-260 mg/ml, 260-270 mg/ml, 270-280 mg/ml, 280-290 mg/ml, 290-300 mg/ml, 300-310 mg/ml, 310-320 mg/ml, 320-330 mg/ml, 330-340 mg/ml, 340-350 mg/ml, 350-360 mg/ml, 360-370 mg/ml, 370-380 mg/ml, 380-390 mg/ml ili 390-400 mg/ml, ili druga prethodno određena koncentracija. U pogodnom oličenju, koncentracija liposoma za intravensku infuziju je oko 200 mg/ml.

[0068]Postupci ovog pronalaska uključuju davanje formulacija liposoma ovog pronalaska terapeutski ili profilaktički životinjama koje imaju bilo koju od gore pomenutih bolesti ili telesnih stanja ili bilo koju drugu bolest ili telesno stanje. Doza liposoma može varirati u zavisnosti od kliničkog stanja i veličine subjekta ili pacijenta koji prima tretman. U specifičnim oličenjima, ovaj pronalazak obuhvata doze od oko 20 mg/kg do oko 300 mg/kg, od oko 50 mg/kg do oko 200 mg/kg, i/ili doze koje tolerišu bolesni pacijenti a koje su efikasne za lečenje uz izbegavanje ili smanjenje štetnih efekata.

[0069]U naročitim oličenjima liposome ovog pronalaska se daju pacijentima u jednostrukoj ili podeljenim dozama između 50 mg/kg i 300 mg/kg. U odvojenim pogodnim oličenjima liposome ovog pronalaska se daju pacijentima u jednostrukoj ili podeljenim dozama između 100 mg/kg i 200 mg/kg i pogodnije između 150 mg/kg i 200 mg/kg. U drugim specifičnijim oličenjima, delići vezikula se daju daju pacijentima u jednostrukoj ili podeljenim dozama od ili između 110 mg/kg i 120 mg/kg, 120 mg/kg i 130 mg/kg, 130 mg/kg i 140 mg/kg, 140 mg/kg i 150 mg/kg, 150 mg/kg i 160 mg/kg, 160 mg/kg i 170 mg/kg, 170 mg/kg i 180 mg/kg, 180 mg/kg i 190 mg/kg ili između 190 mg/kg i 200 mg/kg. U drugim oličenjima, liposome se daju pacijentima u fiksiranim doznim količinama od ili između 0-1 g, 1-2 g, 2-3 g, 3-4 g, 4-5 g, 5-6 g, 6-7 g, 7-8 g, 8-9 g, 9-10 g, 10-11 g, 11-12 g, 12-13 g, 13-14 g, 14-15 g, 15-16 g, 16-17 g, 17-18 g, 18-19 g ili 19-20 g.

[0070]U specifičnim oličenjima, ove dozne količine (ili druge dozne količine liposoma) se daju u jednostrukoj ili podeljenim dozama u jednom ili više intervala u opsegu od oko: jedanput dnevno, jedanput svaka 2 dana, jedanput svaka 3 dana, jedanput svaka 4 dana, jedanput svakih 5 dana, jedanput svakih 6 dana, jedanput svakih 7 dana, jedanput svakih 8 dana, jedanput svakih 9 dana, jedanput svakih 10 dana, jedanput svakih 11 dana, jedanput svakih 12 dana, jedanput svakih 13 dana, jedanput svakih 14 dana, jedanput svake 2-3 nedelje, jedanput svake 3-4 nedelje, jedanput svakih 4-5 nedelja, jedanput svakih 5-6 nedelja, jedanput svakih 6-7 nedelja, jedanput svakih 7-8 nedelja, jedanput svaka 2-3 meseca, jedanput svaka 3-4 meseca, jedanput svakih 4-5 meseci, jedanput svakih 5-6 meseci, jedanput svakih 6-7 meseci, jedanput svakih 7-8 meseci, jedanput svakih 8-9 meseci, jedanput svakih 9-10 meseci, jedanput svakih 10-11 meseci, jedanput svakih 11-12 meseci, jedanput svake 1-2 godine, jedanput svake 2-3 godine, jedanput svake 3-4 godine, jedanput svakih 4-5 godina, ili se drugačije daju u prethodno određenim vremenskim intervalima za vreme prethodno određenog vremenskog perioda lečenja. U naročito pogodnom oličenju vremenski interval između doznih količina za vreme toka terapije je oko jedanput nedeljno.

[0071]Pogodni periodi lečenja za neki tok terapije mogu obuhvatati od vremena kada je data prva doza do oko: 1 dan, 2 dana, 3 dana, 4 dana, 5 dana, 6 dana, 7 dana, 1-2 nedelje, 2-3 nedelje, 3-4 nedelje, 4-5 nedelja, 5-6 nedelja, 6-7 nedelja, 7-8 nedelja, 2-3 meseca, 3-4 meseca, 4-5 meseci, 5-6 meseci, 6-7 meseci, 7-8 meseci, 8-9 meseci, 9-10 meseci, 10-11 meseci, 11-12 meseci, 1-2 godine, 2-3 godine, 3-4 godine i 4-5 godina.

[0072]U određenim oličenjima, tok terapije može biti cikličan ili sa prekidima pri čemu se jedinjenja i formulacije ovog pronalaska daju subjektima za konačan (ograničen) period vremena ili dok štetni događaji ili sporedni efekti opravdavaju smanjenje u dozi ili prestanak lečenja za naročiti period vremena (period odmora). Smanjenje u dozi, prestanak lečenja ili dužinu perioda odmora mogu se odrediti diskrecijom (sposobnošću odlučivanja) lekara. Posle takvog perioda odmora, ili pošto su opali takvi štetni događaji ili sporedni efekti ili pri diskreciji (sposobnosti odlučivanja) lekara lečenje se može nastaviti ako je potrebno.

[0073]Podnošljivost, sigurnost i efikasnost [uključujući ali se ne ograničavajući na nivoe holesterola, enzime jetre, nivoe krvi specifičnih determinanti (faktora odlučivanja) ili markera (obeleživača) i fizioloških faktora] se mogu kontrolisati pre, za vreme ili nakon toka terapije i/ili za vreme različitih perioda za vreme toka terapije sa prekidima ili cikličnog toka terapije. U pogodnim oličenjima, fiziološki faktori, vaskularne promene, stabilnost krvnih pločica, zidovi krvnog suda i drugi markeri se kontrolišu pomoću tehnika slikanja uključujući ali se ne ograničavajući na (npr., slikanje magnetnom rezonancom (MRI), intravaskularnim ultrazvukom i tehnikama protoka krvi). Krvni markeri se mogu kontrolisati pomoću krvnih testova koji su poznati u ovoj oblasti tehnike. Za vreme ili posle kompletiranja takvog kontrolisa, režim lečenja se odgovarajuće može modifikovati [uključujući menjanje doznih količina, veličine ili distribucije liposoma, brzina davanja, koncentracije liposoma, broja doza, vremena između intervala ili dužine perioda lečenja (tretmana)].

[0074] Pored toga, liposome ovog pronalaska se daju pacijentima u kombinaciji sa drugim lekovima, terapeutskim sredstvima ili terapijama za regulisanje lipida. Na primer, liposome ovog pronalaska se mogu davati istovremeno sa inhibitorima HMG-CoA reduktaze, fibratima, inhibitorima (sekvestrantima) žučnih kiselina, nikotinskom kiselinom i drugim anti-hiperlipidemijskim agensima, antidijabetskim agensima i/ili glicemičnim kontrolnim agensima, anti-zapaljenjskim agensima, antihipertenzivnim agensima, antikoagulacionim agensima, mimeticima (podražavaocima) Apo-AI i HDL mišićima podizačima firme Esperion Therapeutics Inc., drugim kardiovaskularnim agensima koji su poznati u ovoj oblasti tehnike i njihovim kombinacijama.

[0075] U jednom naročitom oličenju se liposome ovog pronalaska daju pacijentima koji pate od dijabetesa istovremeno sa drugim antidijabetskim i/ili glicemičnim kontrolnim agensima. U drugim naročitim oličenjima, liposome se daju da spreče, leče ili kontrolišu pacijenta koji pati od zapaljenja, zapaljenjske bolesti ili da spreče ili smanje zapaljenjski odgovor. U drugim specifičnim oličenjima, liposome ovog pronalaska se mesno (lokalno) apliciraju na kožu da leče kožno, potkožno ili lokalizovano zapaljenje ili da pomognu u zarastanju rane. U drugom specifičnom oličenju, liposome ovog pronalaska se daju pacijentu da spreče, kontrolišu ili leče pacijenta bolesnog od Alchajmerove bolesti. U drugom specifičnom oličenju, liposome ovog pronalaska se daju pacijentu da spreče, kontrolišu ili leče pacijenta koji pati od ateroskleroze, fleboskleroze ili bilo kojeg stanja u kojem se formiraju depoziti krvnih pločica koje sadrže holesterol ili drugi materijal unutar intime (unutrašnjeg sloja krvnog suda) ili unutrašnjih medija krvnih sudova. U drugom specifičnom oličenju, liposome ovog pronalaska se daju pacijentu da spreče, kontrolišu ili leče pacijenta koji pati od ishemije uključujući nekardiovaskularnu ishemiju. U drugom specifičnom oličenju, liposome ovog pronalaska se primenjuju da prethodno tretiraju (leče) pacijente pre izborne hirurgije (koja se bira) koja može indukovati ishemijsku reperfuzionu povredu, kao što su hirurgija kuka, hirurgija kolena, transplantacija organa, PTCA.

[0076]U pogodnom oličenju, period lečenja za neki tok terapije nije duži od 14 nedelja. U drugim naročito pogodnim oličenjima, liposome se daju u količini od 5-200 mg/kg pri intervalima od 4-7 dana sa 1-4, 1-8 ili 1-14 ukupnih doza datih za vreme svakog toka terapije. U drugom naročitom oličenju, liposome se daju u količini od 5-200 mg/kg jedanput nedeljno u toku oko 4 do 16 nedelja pogodno u toku oko 10 nedelja (sa ukupno 10 tretmana).

[0077] U jednom specifičnom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od ateroskleroze ili u kombinaciji sa drugim antisklerotičnim agensima, u doznoj količini od 100 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 10 doza.

[0078] U drugom specifičnom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od ateroskleroze ili u kombinaciji sa drugim antisklerotičnim agensima, u doznoj količini od 150 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 12 doza.

[0079] U drugom specifičnom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od ateroskleroze ili u kombinaciji sa drugim antisklerotičnim agensima, u doznoj količini od 200 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 14 doza.

[0080]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od anginskog kongestivnog otkazivanja (oštećenja) srca koje je prouzrokovano navalom krvi, koronarne bolesti srca, hipertenzije ili aritmija ili u kombinaciji sa drugim kardiovaskularnim agensima, u doznoj količini od 100 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 10 doza.

[0081]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od anginskog kongestivnog otkazivanja (oštećenja) srca koje je prouzrokovano navalom krvi, koronarne bolesti srca, hipertenzije ili aritmija ili u kombinaciji sa drugim kardiovaskularnim agensima, u doznoj količini od 150 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 12 doza.

[0082]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od anginskog kongestivnog otkazivanja (oštećenja) srca koje je prouzrokovano navalom krvi, koronarne bolesti srca, hipertenzije ili aritmija ili u kombinaciji sa drugim kardiovaskularnim agensima, u doznoj količini od 200 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 14 doza.

[0083]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od zapaljenja ili u kombinaciji sa drugim anti-zapaljenskim agensima, u doznoj količini od 100 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 10 doza.

[0084]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm + 50% daju same pacijentu koji pati od zapaljenja ili u kombinaciji sa drugim anti-zapaljenskim agensima, u doznoj količini od 150 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 12 doza.

[0085]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od zapaljenja ili u kombinaciji sa drugim anti-zapaljenskim agensima, u doznoj količini od 200 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 14 doza.

[0086]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od ishemije ili u kombinaciji sa drugim anti-ishemijskim agensima, u doznoj količini od 100 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 10 doza.

[0087] U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od ishemije ili u kombinaciji sa drugim anti-ishemijskim agensima, u doznoj količini od 150 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 12 doza.

[0088] U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od ishemije ili u kombinaciji sa drugim anti-ishemijskim agensima, u doznoj količini od 200 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 14 doza.

[0089] U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od hiperlipidemij e, hiperlipoproteinemij e, hipoalfalipoproteinemije, hipertrigliceridemije ili u kombinaciji sa drugim anti-hiperlipidemijskim, anti-hiperlipoproteinemijskim, anti-hipoalfalipoproteinemijskim ili anti-hipertrigliceridemijskim agensima, u doznoj količini od 100 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 10 doza.

[0090]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od hiperlipidemij e, hiperlipoproteinemi j e, hipoalfalipoproteinemije, hipertrigliceridemije ili u kombinaciji sa drugim anti-hiperlipidemijskim, anti-hiperlipoproteinemijskim, anti-hipoalfalipoproteinemijskim ili anti-hipertrigliceridemijskim agensima, u doznoj količini od 150 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 12 doza.

[0091]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od hiperlipidemij e, hiperlipoproteinemij e, hipoalfalipoproteinemije, hipertrigliceridemije ili u kombinaciji sa drugim anti-hiperlipidemijskim, anti-hiperlipoproteinemijskim, anti-hipoalfalipoproteinemijskim ili anti-hipertrigliceridemijskim agensima, u doznoj količini od 200 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 14 doza.

[0092]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od kardiovaskularne bolesti i dijabetesa ili u kombinaciji sa drugim anti-dijabetskim i/ili glicemičnim kontrolnim agensima i/ili kardiovaskularnim agensima, u doznoj količini od 100 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 10 doza.

[0093]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm ± 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od kardiovaskularne bolesti i dijabetesa ili u kombinaciji sa drugim anti-dijabetskim i/ili glicemičnim kontrolnim agensima i/ili kardiovaskularnim agensima, u doznoj količini od 150 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 12 doza.

[0094]U drugom oličenju se liposome u koncentraciji od 50-200 mg/ml koje imaju prosečni prečnik između 50-250 nm ± 50%, pogodno između 100-140 nm + 50%, pogodnije između 110-120 nm ± 50% daju same pacijentu koji pati od kardiovaskularne bolesti i dijabetesa ili u kombinaciji sa drugim anti-dijabetskim i/ili glicemičnim kontrolnim agensima i/ili kardiovaskularnim agensima, u doznoj količini od 200 mg/kg i pri brzini od 10 ml/minut ili brže svakih 7 dana sa ukupno 14 doza.

[0095]Dozni režimi takođe uključuju davanja bolusom ili kontinualno infuziono lečenje koje može uključivati primenu početne doze (početnice) koju sledi doza održavanja. U pogodnim oličenjima, doza će biti konstantna za vreme toka lečenja. U drugim pogodnim oličenjima, doza će varirati. U naročitim oličenjima, formulacije liposoma će se devati samo jedanput a u drugom pogodnom oličenju će se davati u obliku višestrukih doza a u drugim pogodnim oličenjima će se davati u obliku nekonsekutivnih višestrukih doza. Dužina trajanja, raspored tretmana (lečenja) i dozni režimi mogu varirati pomoću postupaka koji su dobro poznati onima koji su verzirani u ovoj oblasti tehnike. Serumska merenja ukupnog slobodnog holesterola, ukupnog esterifikovanog holesterola, HDL holesterola, LDL holesterola i VLDL holesterola mogu se primeniti da se odrede i modifikuju količine doziranja i rasporedi za vreme režima lečenja. Kako se holesterol mobiliše iz krvnih pločica, raste ukupni serumski holesterol. Poželjno je da ukupni serumski holesterol i HDL holesterol rastu za vreme terapije a da esterifikovan holesterol pada (ili da se na njega utiče minimalno) za vreme terapije. Doza liposoma za različite životinje će uopšte biti približna doziranju određenom prema težini ljudskog bića (humanog bića). Pacijenti lečeni sa takvim smešama i prema takvim postupcima mogu biti bilo koje starosti i mogu ih mučiti jedna ili više bolesti ili telesnih stanja koji su gore nabrojani i/ili druge bolesti i stanja.

PRIMERI

[0096]Sledeći primeri su dati kao ilustracija a nikako kao ograničenja.

Primer 1

Višestruke doze liposoma ETC-588 u pacijentima sa aterosklerozom

[0097]Izvršeno je proučavanje (studija) sa višestrukim dozama koje je procenilo efekte višestrukih doza liposoma ETC-588 (ETC-588 studija) u humanim pacijentima sa aterokslerozom. Liposome ETC-588 (200 mg/ml) su ulivene intravenski uz primenu infuzione pumpe. ETC-588 u plazmi je analizirana kao fosfolipid (PL). Proučavane su sledeće dozne grupe: placebo (7 ili 14 doza), 50 mg/kg (14 doza), 100 mg/kg (7 doza) ili 200 mg/kg (7 doza). Doze su date u intervalima od 4 dana (g4d) ili 7 dana (q7d). U studiji je uzelo učešća 42 pacijenta (muških pacijenata: 36, ženskih pacijenata: 6) starosti između 44 i 76 godina (prosečna starost je bila 63+7 godina). Prosečna težina pacijenata je bila 87,7 ± 17,0 kg sa opsegom od 52,4 kg do 147,7 kg. Nivoi prosečne osnovne linije HDL holesterola ovih pacijenata su bili 36+4 mg/dL a nivoi prosečne osnovne linije ukupnog holesterola ovih pacijenata su bili 182 ± 36 mg/dL. Pored toga sledeći procenat pacijenata je imao kardiovaskularnu istoriju: bolest koronarne arterije: 98%, bolest periferne arterije: 2%, presađivanje koronarne arterije bajpasom: 57%, stabilna angina: 29% i nestabilna angina: 19%.

[0098] Ukupni i neesterifikovan holesterol (UC) i PL su analizirani pomoću standardnih, automatizovanih metoda. Subjekti su raspodeljeni u grupe za lečenje prema nasumičnom rasporedu. Sigurnost i podnošljivost, laboratorijski podaci, vitalni znaci i štetni događaji su sumirani na svakoj vremenskoj tački i za pred-doznu do posle-dozne promene uz primenu opisne statistike. Farmakokinetička i farmakodinamička merenja su sumirana uz primenu opisne statistike. Od 42 pacijenta koji su učestvovali u ovoj studiji 36 pacijenata je stvarno primilo lek iako se 2 pacijenta povuklo pre kompletiranja svih doza iz razloga različitih od štetnih događaja ili sporednih efekata. Broj pacijenata koji su saopštili bilo koji štetni događaj (AE) je bio ukupno 26 (72%) i broj pacijenata koji su saopštili ozbiljan štetni događaj

(SAE) je bio ukupno 5 (14%). Broj pacijenata koji su bili uključeni u analizu sigurnosti je bio 36 dok je 33 pacijenta bilo uključeno u farmakokinetičke i farmakodinamičke analize (sa nekompletnim farmakokinetičkim podacima za 3 pacijenta). Takođe su ispitani efekti ETC-588 na funkciju endotela (vaskularnu strukturu), zapaljenjski markeri i slikanje pomoću magnetne rezonancije (MRI).

[0099] Dobiveni rezultati su predstavljeni na crtežima 2 i 3. Dobiveni rezultati pokazuju da se mobilizacija holesterola vršila sa svim dozama ETC-588 sa različitim efikasnostima. Sledeći štetni događaji i ozbiljni štetni događaji su saopšteni za svaku grupu:

[0100]Dole su sumirani najčešći štetni događaji u pacijentima sa najmanje jednim javljanjem (dešavanjem) štetnog događaja. Ozbiljni štetni događaji (kontrakcija grlića mokraćne bešike, bol u grudima, hiperglikemija ili pogoršanje dajebetesa) su smatrani (uzeti) od strane lekara koji leči da nisu relevantni u odnosu na davanje ETC-588:

[0101]Ukupno uzevši, rezultati iz studije ETC-588-003 sugerišu da liposome ETC-588 mobilišu holesterol na način zavisan od doze i da su doze od 200 mg/kg ili manje uopšte bezbedne (sigurne) i dobro podnete (tolerisane). Dalje, kao što je gore pokazano, izgleda da su intervali doziranja od sedam dana optimalni u odnosu na intervale doziranja od četiri dana za liposome ETC-588 jer je sedmodnevno doziranje omogućilo optimalno raščišćavanje fosfolipida i neesterifikovanog holesterola u serumu. Pored toga, sedmodnevni intervali doziranja mogu biti optimalni u odnosu na intervale doziranja od četiri dana jer se mogu smanjiti ili sprečiti štetni događaji i ozbiljni štetni događaji.

[0102]Na primer, kao što je pokazano na gornjim tabelama, kada je dato 200 mg/kg u intervalima od 7 dana procenat bilo kojeg štetnog događaja je bio 40% a bilo kojeg ozbiljnog štetnog događaja je bio 20%. Nasuprot tome, kada je dato 200 mg/kg u intervalima od 4 dana procenat bilo kojeg štetnog događaja je bio 85,7% a bilo kojeg ozbiljnog štetnog događaja je bio 28,6%. Slično tome, kada je dato 100 mg/kg u intervalima od 7 dana procenat "bilo kojeg ozbiljnog štetnog događaja" je bio 0%. Nasuprot tome, kada je dato 100 mg/kg u intervalima od 4 dana procenat "bilo kojeg ozbiljnog štetnog događaja" je bio 25%. Isto tako, kada je dato 50 mg/kg u intervalima od 7 dana procenat "bilo kojeg ozbiljnog štetnog događaja" je bio 0%. Međutim, kada je dato 50 mg/kg u intervalima od 4 dana procenat "bilo kojeg ozbiljnog štetnog događaja" je bio 25%.

Claims

1. Postupak za prevenciju, lečenje ili kontrolu bolesti ili telesnog stanja koji obuhvata davanje liposoma u količini između 50 mg/kg i 300 mg/kg u jednostrukoj ili podeljenim dozama, pri čemu pomenute liposome obuhvataju fosfolipide i vodeni sloj i pri čemu pomenute liposome imaju prosečni prečnik između oko 50 nm i 2 50 nm.

2. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u dozi između 50 mg/kg i 300 mg/kg u intervalu od 4-10 dana.

3. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što liposome imaju prosečni prečnik između oko 50 i 150 nm.

4. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što liposome imaju prosečni prečnik između oko 50 i 200 nm.

5. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što liposome imaju prosečni prečnik između oko 100 i 200 nm.

6. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što liposome imaju prosečni prečnik između oko 100 i 250 nm.

7. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što liposome imaju prosečni prečnik između oko 150 i 200 nm.

8. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što liposome imaju prosečni prečnik između oko 150 i 250 nm.

9. Postupak iz zahteva 5, naznačen time, što se liposome daju u kombinaciji sa drugim fosfolipidnim vezikulama odabranim iz grupe koja se sastoji od multilameralnih (višepločastih) vezikula, velikih monolamelarnih vezikula, malih monolamelarnih vezikula i njihovih smeša.

10. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što ne prouzrokuje znatno povišenje ili sniženje nivoa lipoproteina male gustine (LDL) tretiranog subjekta.

11. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što prouzrokuje znatno povišenje ili sniženje nivoa lipoproteina male gustine (LDL) tretiranog subjekta.

12. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što je fosfolipid odabran iz grupe koja se sastoji od jajnog fosfatidilholina, jajnog fosfatidilglicerola, distearoilfosfatidil-holina ili distearoilfosfatidil-glicerola, fosfatidilholina, fosfatidilglicerola, lecitina, beta, glikolipida, gama-dipalmitoil-alfa-lecitina, sfingomielina, fosfatidilserina, fosfatidične kiseline, N-(2,3-di(9-(Z)-oktadeceniloksi))-prop-l-il-N,N,N-trimetilamonij um-hlorida, fosfatidiletanolamina, lizolecitina, lizofosfatidiletanolamina, fosfatidilinozitola, cefalina, kardiolipina, cerebrozida, dicetilfosfata, dioleoilfosfatidilholina, dipalmitoil-fosfatidilholina, dipalmitoilfosfatidilglicerola, dioleoilfosfatidilglicerola, palmitoil-oleoil-fosfatidilholina, di-stearoil-fosfatidilholina, stearoil-palmitoil-fosfatidilholina, di-palmitoil-fosfatidiletanolamina, di-stearoil-fosfatidiletanolamina, di-mi ristoil-fosfatidilseri na, di-oleoil-fosfatidilholina, oleoil-palmitoil-fosfatidilholina, lipida koji je u tečno-kristalnoj fazi pri 37°C i njihovih smeša.

13. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što je fosfolipid ustvari palmitoil-oleoil-fosfatidilholin.

14. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što je bolest ili telesno stanje odabrano iz grupe koja se sastoji od ateroskleroze, fleboskleroze ili bilo kojeg venskog stanja u kojem se depoziti krvnih pločica koje sadrže holesterol ili drugi materijal formiraju unutar intime (unutrašnjeg sloja krvnog suda) ili unutrašnjih medija vena, zatim akutnih koronarnih sindroma, angine uključujući stabilnu anginu, nestabilnu anginu, zapaljenja, vaskularnog zapaljenja, dermalnog zapaljenja, kongestivnog otkazivanja (oštećenja) srca koje je prouzrokovano navalom krvi, koronarne bolesti srca (CHD), ventrikularnih (komornih) aritmija, periferne vaskularne bolesti, infarkta miokarda, napada fatalnog infarkta miokarda, nefatalnog infarkta miokarda, ishemije, kardiovaskularne ishemije, prolaznih ishemijskih napada, ishemije koja nije u vezi sa kardiovaskularnom bolešću, ishemijsko-reperfuzione povrede, smanjene potrebe za revaskularizacijom, poremećaja koagulacije, trombocitopenije, duboke venske tromboze, zatim od pankreatitisa, nealkoholnog steatohepatitisa, dijabetske neuropatije, retinopatije, bolne dijabetske neuropatije, hramanja (hromosti), psorijaze, kritične ishemije uda, impotencije, hiperlipidemije, hiperlipoproteinemije, hipoalfalipoproteinemije, hipertrigliceridemije, bilo kojeg stenotičkog stanja koje vodi do ishemijske patologije, dijabetesa uključujući tip I i tip II, ihtioze, moždanog udara, povredljivih krvnih pločica, Alchajmerove bolesti, ulceracije (razjedanja) donjeg uda (ekstremiteta), ozbiljne koronarne ishemije, limfoma, katarakte, disfunkcije endotela (epitela krvnih sudova), ksantelazmi, disfunkcije krajnjih organa, vaskularne bolesti, vaskularne bolesti koja rezultuje od pušenja i dijabetesa, bolesti karotidne (vratne) i koronarne arterije, regresije i skvrčenja (smežuranja) ustanovljenih krvnih pločica, nestabilnih krvnih pločica, intime (unutrašnjeg sloja) krvnih sudova koja je slaba, nestabilne intime (unutrašnjeg sloja) krvnih sudova, povrede endotela (epitela krvnih sudova), oštećenja endotela (epitela krvnih sudova) kao rezultata hirurških postupaka, bolesnog stanja koje je u vezi sa vaskularnom bolešću, ulceracija (razjedanja) u arterijskom lumenu (šupljini), restenoze kao rezultata balonske angiplastike i subindikacija gore datog.

15. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što pomenuto lečenje (tretman) pojačava intimu (unutrašnji sloj) zida krvnog suda, stimuliše isticanje (efluks) vanćelijskog holesterola za transport u jetru, moduliše imunološke odgovore, mobiliše holesterol iz aterosklerotičnih krvnih pločica, potpomaže u zarastanju rana, modifikuje bilo koju telesnu membranu, ćeliju, tkivo, organ, vanćelijski region ili strukturu.

16. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u kombinaciji sa ili su adjunktivno (pridruženo) vezane za jedinjenja odabrana iz grupe koja se sastoji od peptida, paraoksonaze, lipoprotein-lipaze, Apo A-I i mimetika (podražavalaca), varijanti A-I i njihovih kombinacija.

17. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u kombinaciji sa malim molekulima ili lekovima koji deluju na nivoe holesterola.

18. Postupak iz zahteva 17, naznačen time, što je mali molekul statin, rekonstituisan HDL (lipoprotein visoke gustine) delić, mali HDL (lipoprotein visoke gustine) delić ili sintetički mimetički (podražavajući) HDL lipoproteinski delić.

19. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u kombinaciji sa jednim ili više kardiovaskularnih agenasa, antidijabetskih agenasa ili drugih terapeutskih supstanci.

20. Postupak iz zahteva 19, naznačen time, što je kardiovaskularni agens odabran iz grupe koja se sastoji od malih molekula, statina, aspirina, beta-blokera uključujući klopidodrel (clopidodrel), kalcijumovih blokera, heparina koji uključuje heparin male molekulske težine, agenasa koji snižavaju glukozu, nitrata, Ilb/IIIa inhibitora, ACE inhibitora,fibrata i sekvestranata (inhibitora) žučnih kiselina.

21. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u dozi od oko 50 mg/kg oko svakih 7 dana.

22. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u dozi od oko 100 mg/kg oko svakih 7 dana.

23. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u dozi od oko 150 mg/kg oko svakih 7 dana.

24. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u dozi od oko 200 mg/kg oko svakih 7 dana.

25. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u dozi od oko 250 mg/kg oko svakih 7 dana.

26. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju u dozi od oko 300 mg/kg oko svakih 7 dana.

27. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju jedanput.

28. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju dva puta u intervalima od 4-7 dana.

29. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju tri puta u intervalima od 4-7 dana.

30. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju četiri puta u intervalima od 4-7 dana.

31. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju pet puta u intervalima od 4-7 dana.

32. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju šest puta u intervalima od 4-7 dana.

33. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju sedam puta u intervalima od 4-7 dana.

34. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju osam puta u intervalima od 4-7 dana.

35. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju devet puta u intervalima od 4-7 dana.

36. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju deset puta u intervalima od 4-7 dana.

37. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju jedanaest puta u intervalima od 4-7 dana.

38. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju dvanaest puta u intervalima od 4-7 dana.

39. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju trinaest puta u intervalima od 4-7 dana.

40. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju četrnaest puta u intervalima od 4-7 dana.

41. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u nedeljnim intervalima.

42. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u dvonedeljnim intervalima.

43. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u mesečnim intervalima.

44. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 2 meseca.

45. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 3 meseca.

46. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 4 meseca.

47. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 5 meseci.

48. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 6 meseci.

49. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 7 meseci.

50. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 8 meseci.

51. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 9 meseci.

52. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 10 meseci.

53. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 11 meseci.

54. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 3 godine.

55. Postupak iz zahteva 1, naznačen time, što se liposome daju 2-14 puta u intervalima od 4 godine.

56. Postupak smanjenja holesterola u perifernom tkivu uz smanjenje ili izbegavanje štetnih efekata povezanih sa liposomskom terapijom, naznačen time, što obuhvata davanje pacijentu koji to treba doze od između 100 mg/kg do 200 mg/kg liposoma koje imaju prosečnu veličinu delića između 50 nm i 250 nm.

57. Postupak za prevenciju ili lečenje bolesti ili poremećaja povezanih sa abnormalnim nivoima holesterola, naznačen time, što obuhvata davanje pacijentu koji to treba doza od 100 mg/kg do 200 mg/kg liposoma, pri čemu je pomenuto davanje izvršeno u jednostrukoj ili višestrukim dozama svakih 7 ili više dana.

58. Postupak iz zahteva 56, naznačen time, što se davanje vrši jedanput svakih 7 dana.

59. Postupak iz zahteva 56, naznačen time, što se davanje vrši 6 do 14 puta.

60. Postupak smanjenja holesterola u bolesnom ljudskom biću, naznačen time, što obuhvata davanje pomenutom ljudskom biću liposoma u dozi od 100 mg/kg do 200 mg/kg svaka četiri ili više dana, pri čemu pomenute liposoma imaju prosečni prečnik od između 50 nm i 250 nm.

61. Postupak iz zahteva 59, naznačen time, što dalje obuhvata davanje pomenutih liposoma u kombinaciji sa jednim ili više kardiovaskularnih agenasa, antidijabetskih i/ili glicemičnih kontrolnih agenasa i/ili drugih terapeutskih agenasa.