Claims (17)
1. Способ обнаружения ферментативной активности протеинтирозинфосфатазы в биологическом материале, в котором1. A method for detecting the enzymatic activity of protein tyrosine phosphatase in biological material, in which
а) готовят биологический материал или препарат из биологического материала;a) prepare biological material or a preparation from biological material;
b) готовят 6,8-дифтор-4-метилумбеллиферилфосфат (DiFMUP);b) 6.8-difluoro-4-methylumbelliferyl phosphate (DiFMUP) is prepared;
с) биологический материал или препарат из биологического материала из а) вводят в контакт с DiFMUP из b) в водном растворе;c) biological material or a preparation of biological material from a) is contacted with DiFMUP from b) in an aqueous solution;
d) образующийся 6,8-дифтор-4-метилумбеллиферил обнаруживают флуориметрически.d) the resulting 6,8-difluoro-4-methylumbelliferyl is detected fluorimetrically.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве препарата из биологического материала готовят по меньшей мере одну протеинтирозинфосфатазу, выбираемую из группы, состоящей из LAR, CD 45, YOP, PTP-альфа, РТР 1В, ТС-РТР, CDC 25, PTEN, SHP 1,2.2. The method according to claim 1, characterized in that at least one protein tyrosine phosphatase selected from the group consisting of LAR, CD 45, YOP, PTP-alpha, PTP 1B, TC-PTP, CDC is prepared from a biological material 25, PTEN, SHP 1.2.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что концентрация DiFMUP после введения в контакт составляет 10-250 мкмоль.3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that the concentration of DiFMUP after contact is 10-250 μmol.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что концентрация DiFMUP составляет 50-100 мкмоль.4. The method according to claim 3, characterized in that the concentration of DiFMUP is 50-100 μmol.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что значение рН водного раствора в с) составляет от 5,0 до 8,0.5. The method according to claim 1, characterized in that the pH value of the aqueous solution in c) is from 5.0 to 8.0.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что значение рН составляет от 6,0 до 7,5.6. The method according to claim 5, characterized in that the pH value is from 6.0 to 7.5.
7. Способ по п. 5 или 6, отличающийся тем, что значение рН составляет 7,0.7. The method according to p. 5 or 6, characterized in that the pH value is 7.0.
8. Способ идентификации соединения, модифицирующего активность протеинтирозинфосфатазы, в котором8. A method for identifying a compound modifying the activity of protein tyrosine phosphatase, in which
а) готовят химическое соединение;a) preparing a chemical compound;
b) готовят биологический материал или препарат из биологического материала;b) preparing a biological material or preparation from a biological material;
с) готовят 6,8-дифтор-4-метилумбеллиферилфосфат (DiFMUP);c) 6.8-difluoro-4-methylumbelliferyl phosphate (DiFMUP) is prepared;
d) химическое соединение из а), а также биологический материал или препарат из биологического материала из b) и DiFMUP из с) вводят в контакт друг с другом в водном растворе;d) the chemical compound from a) as well as the biological material or preparation from the biological material from b) and DiFMUP from c) are brought into contact with each other in an aqueous solution;
е) флуориметрически определяют количество образующегося 6,8-дифтор-4-метилумбеллиферила;e) fluorimetrically determine the amount of 6,8-difluoro-4-methylumbelliferyl formed;
f) количество образующегося 6,8-дифтор-4-метилумбеллиферила из е) сравнивают с количеством образующегося 6,8-дифтор-4-метилумбеллиферила в контрольной смеси.f) the amount of 6.8-difluoro-4-methylumbelliferyl formed from e) is compared with the amount of 6.8-difluoro-4-methylumbelliferyl formed in the control mixture.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что активность протеинтирозинфосфатазы стимулируют, ингибируют или сохраняют.9. The method according to claim 8, characterized in that the activity of protein tyrosine phosphatase stimulate, inhibit or maintain.
10. Способ по п.8 или 9, отличающийся тем, что протеинтирозинфосфатазу выбирают из группы, состоящей из LAR, CD 45, YOP, PTP-альфа, РТР 1В, ТС-РТР, CDC 25, PTEN, SHP 1,2.10. The method according to claim 8 or 9, characterized in that the protein tyrosine phosphatase is selected from the group consisting of LAR, CD 45, YOP, PTP-alpha, PTP 1B, TC-PTP, CDC 25, PTEN, SHP 1,2.
11. Соединение, идентифицируемое способом по п.п.8-10.11. The compound identified by the method according to claims 8-10.
12. Соединение по п.11, причем масса соединения составляет от 0,1 до 50 кДа.12. The compound according to claim 11, wherein the mass of the compound is from 0.1 to 50 kDa.
13. Соединение по п.11 или 12, причем масса соединения составляет от 0,1 до 5 кДа.13. The compound according to claim 11 or 12, and the mass of the compound is from 0.1 to 5 kDa.
14. Соединение по п. 13, причем масса соединения составляет от 0,1 до 3 кДа.14. The compound according to claim 13, wherein the mass of the compound is from 0.1 to 3 kDa.
15. Соединение по п.11, причем соединением является протеин, аминокислота, полисахарид, сахар, полинуклеотид, нуклеотид, природное соединение или ароматический углеводород.15. The compound according to claim 11, wherein the compound is a protein, amino acid, polysaccharide, sugar, polynucleotide, nucleotide, natural compound or aromatic hydrocarbon.
16. Лекарственное средство, содержащее по меньшей мере одно соединение по п.п.11-15, вспомогательные для получения готовой формы лекарственного средства вещества и/или полимерные добавки.16. A medicinal product containing at least one compound according to claims 11-15, auxiliary substances and / or polymer additives for preparing the finished drug form.
17. Применение соединения по одному или нескольким пп.11-14 для получения лекарственного средства для лечения диабета.17. The use of a compound according to one or more of claims 11-14 for the manufacture of a medicament for the treatment of diabetes.