RU2139346C1 - Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии - Google Patents

Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии Download PDF

Info

Publication number
RU2139346C1
RU2139346C1 RU99103608A RU99103608A RU2139346C1 RU 2139346 C1 RU2139346 C1 RU 2139346C1 RU 99103608 A RU99103608 A RU 99103608A RU 99103608 A RU99103608 A RU 99103608A RU 2139346 C1 RU2139346 C1 RU 2139346C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
strain
oxalate
plantarum
treatment
hyperoxaluria
Prior art date
Application number
RU99103608A
Other languages
English (en)
Inventor
Б.А. Шендеров
Ю.Б. Степанчук
Original Assignee
Шендеров Борис Аркадьевич
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Шендеров Борис Аркадьевич filed Critical Шендеров Борис Аркадьевич
Priority to RU99103608A priority Critical patent/RU2139346C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2139346C1 publication Critical patent/RU2139346C1/ru

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к микробиологии, и касается штамма лактобацилл, обладающего способностью деградировать оксалат. Штамм лактобацилл Lactobacillus plantarum 421-2 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека. Штамм депонирован в Музее микроорганизмов - представителей нормальной микрофлоры человека Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского под 151. Штамм обладает выраженной способностью активно снижать уровень оксалата в среде к 72 ч культивирования от исходного уровня на 69% против 46% для штамма L. plantarum CS. 4 табл.

Description

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к микробиологии, и касается штамма лактобацилл, обладающего способностью деградировать оксалат. Штамм может быть использован для приготовления препаратов и продуктов питания, в том числе кисломолочных, предназначенных для профилактики и лечения гипероксалурии.
По имеющимся данным у 52,7% мужчин и 18,8% женщин, проживающих в индустриально развитых странах, наблюдается повышенное содержание щавелевой кислоты в моче, а у 5-15% людей при достижении 70-летнего возраста хотя бы раз отмечается приступ мочекаменной болезни. При этом большая часть камней (70-80%), обнаруживаемых в мочевыводящей системе, представляет собой комплекс щавелевой кислоты и кальция - оксалато-кальциевые камни. Число людей с повышенным содержанием оксалата в их моче постоянно возрастает, что дало основание рассматривать мочекаменную болезнь как одну из наиболее распространенных "болезней цивилизации".
Доказано также, что уровень оксалурии в значительной степени определяется состоянием нормальной микрофлоры толстого кишечника, в частности присутствием в ней в достаточном количестве микроорганизмов, способных разрушать или связывать щавелевую кислоту и кальций, а затем удалять их из организма с фекалиями. В этой связи одним из перспективных направлений профилактики возникновения оксалатовых камней почек и мочеточников и лечения мочекаменной болезни является блокирование абсорбции щавелевой кислоты из кишечника.
Известен штамм бактерий Bacillus sp., способный к полному разрушению оксалата при концентрации его в среде до 40 г/л и росту при температуре до 41oC (1). В условиях аэрации при температуре 28oC штамм разлагает 42,6 г/л оксалата за 40-42 часа. Этот штамм выделен из огородной почвы, предназначен для очистки сточных вод от оксалата и абсолютно непригоден для применения людям.
Известен штамм лактобацилл, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для получения препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения мочекаменной болезни - Lactobacillus plantarum CS (2).
Этот штамм выделен из содержимого кишечника взрослого здорового человека и безопасен для человека. Однако для успешного развития микроэкологического направления профилактики и лечения мочекаменной болезни необходимо расширять, подобно ротации антибиотиков в химиотерапии, арсенал оксалатдеградирующих штаммов, пригодных для приготовления на их основе фармацевтических препаратов продуктов функционального питания.
Цель изобретения - штамм лактобацилл, обладающий способностью активно деградировать оксалат.
Штамм лактобацилл Lactobacillus plantarum 421-2 выделен из содержимого кишечника здорового взрослого человека. Штамм депонирован в Музее микроорганизмов - представителей нормальной микрофлоры человека Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н.Габричевского под N 151.
Культурально-морфологические признаки штамма.
Короткие неподвижные палочки, единичные или расположенные в виде цепочки из 2-5 клеток. Грамположительные, равномерно окрашиваемые. Величина клеток 5-10 мкм. Спор и капсул не образует. Микроаэрофил.
На твердой среде MRS через 48 часов роста образует плоские, сероватые, непрозрачные, выпуклые, округлые, с ровными краями колонии размером 1,5-2 мм, маслянистой консистенции, пигмент отсутствует. В мазке расположены беспорядочными скоплениями и отдельными цепочками. Зернистость и другие включения отсутствуют.
Температурный оптимум роста - 38-40oC, оптимум pH 6.6-6.9.
Биохимические свойства.
Оксидазная проба отрицательная. Каталаза отрицательная. На мясопептонном агаре, средах Эндо, Плоскирева, Сабуро не растет.
Способен активно развиваться на жидких питательных средах, предназначенных для культивирования лактобацилл, и накапливать к 18-20 часам культивирования производственную биомассу.
Ферментирует амигдалин, D-арабинозу, L-арабинозу, арбитин, галактозу, гентобиозу, глюкозу, глюконат, дульцитол, лактозу, мальтозу, маннит, маннозу, А-метил-D-гликозид, мелецитозу, мелибиозу, рибозу, салицин, сахарозу, сорбит, сорбозу, трегалозу, фруктозу, целобиозу, эскулин. Не ферментирует гликоген, инулин, ксилит, ксилозу, рамнозу, раффинозу, эритритол, D-туранозу. Желатину не разжижает. По результатам развернутого биохимического анализа на системе API-CHL штамм идентифицирован как L.plantarum.
Сравнительная биохимическая характеристика штаммов L. plantarum CS (прототип) и L.plantarum 421-2 приведена в таблице 1.
Из таблицы видно, что сравниваемые штаммы можно различить по биохимическим свойствам.
Штамм L.plantarum 421-2 обладает высокой антагонистической активностью в отношении шигелл, протея, кишечной палочки, золотистого стафилококка.
Отношение штамма L.plantarum 421-2 к антибиотикам.
Чувствителен к амоксициллину, ампицилину, доксициллину, карбенициллину, левомицетину, линкомицину, оксациллину, олеандомицину, пенициллину, рифампицину, эритромицину.
Устойчив к ванкомицину, канамицину, карбенициллину, налидиксовой кислоте, неомицину, полимиксину, ристомицину, стрептомицину и тетрациклину.
В таблице 2 представлены сравнительные данные о чувствительности к антибиотикам штаммов L.plantarum CS и L.plantarum 421-2.
Представленные в табл.2 сведения свидетельствуют об одинаковой чувствительности сравниваемых штаммов лактобацилл к антибиотикам за исключением чувствительности к линкомицину.
Продолжительность свертывания молока штаммом L.plantarum 421-2 при не менее 2% закваски составляет 10-12 часов. Результаты сравнительного изучения времени сквашивания молока штаммами L. plantarum CS и L.plantarum 421-2 представлены в таблице 3.
Таким образом, как следует из таблицы 3, предлагаемый штамм лактобацилл быстрее сквашивает молоко, независимо от вносимой дозы закваски.
Безвредность.
Штамм L.plantarum 421-2 оказался безвредным при проверке на белых мышах путем введения бактерий per os в концентрации 1010-12КОЕ/мл на протяжении 2 недель, так же как и при глазной аппликации и нанесении на кожу.
Пример 1. Определение способности штамма L.plantarum 421-2 снижать содержание оксалата в среде.
Штамм L.plantarum 421-2 выращивают на жидкой среде MRS-2 при 38oC в течение 18 часов, затем культуру рассевают петлей на чашки Петри с плотной средой MRS-2 и культивируют в тех же условиях. Затем выросшие бактерии вносят ее в полисинтетическую среду API следующего состава (г/л):
Полипептон - 10
Дрожжевой экстракт - 5
Твин-80 - 1
K2HPO4 - 2
Ацетат натри - 5
Цитрат аммония - 2
MnSO4 • 4H2O - 0,05
MgSO4 • 7H2O - 0,2
Бромкрезол красный - 0,17
Оксалат натрия - 20
Дистиллированная вода - до 1000
pH - 6,9
Посевной материал вносят в приготовленную среду в количестве 10% от общего объема с конечной концентрацией бактерий в этой среде 107 КОЕ/мл.
В качестве контроля используют ту же питательную среду без внесения посевного материала.
Инкубирование ведут при 38oC в анаэробных условиях в течение 72 часов.
Затем пробы центрифугируют в течение 15 мин при 12000 об/мин для подготовки к определению содержания оксалата в культуральной среде методом газовой хроматографии. К 1 мл надосадочной жидкости добавляют 0,4 мл. 50% H2SO4, 2 мл CH3OH и 100 мл 1% раствора фумаровой кислоты. Пробы во флаконе с плотно закрытой пробкой инкубируют при 60oC в течение 30 минут, затем добавляют 1 мл H2O и 0,5 мл. хлороформа, тщательно встряхивают и центрифугируют. Для дальнейшего исследования берут слой хлороформа. Количественное определение оксалата в среде проводят методом газожидкостной хроматографии на хроматографе 104: Pye Unicam (Англия) с плазменно-ионизационным детектором Shimadzu Data Processor Chromatopac C-R3A, стеклянной колонке длиной 2 м и внутренним диаметром 2 мм. Колонка заполнена SP 1200/1% H3PO4 на Chromosorb-WAW.
Температура детектора 260oC, температура испарителя 250oC. Скорость подачи газа-носителя - азота - 30 мл/мин.
Результаты определения способности штаммов L.plantarum 421-2 и L.plantarumCS снижать уровень оксалата представлены в табл. 4.
Инкубацию вели в анаэробных условиях, определение оксалата - методом газовой хроматографии.
Как следует из таблицы 4, штамм L.plantarum 421-2 значительно активнее по сравнению со штаммом-прототипом разрушает оксалат. Так, штамм L.plantarum 421-2 снижает уровень оксалата в среде к 72 часам культивирования на 69% от исходного уровня против 46% для штамма L.plantarum CS. В то же время содержание оксалата натрия в контрольном растворе сохранялось в течение всего периода инкубации без изменений.
Способность снижать уровень оксалата штамм L.plantarum 421-2 стабильно сохраняет при длительном пассировании на питательных средах для культивирования лактобацилл.
Таким образом, штамм Lactobacillus plantarum 421-2 обладает выраженной способностью активно снижать уровень оксалата, хорошо расти на питательных средах разного состава для культивирования лактобацилл и к 18 часам культивирования накапливать производственную биомассу. С учетом этого, а также твердо установленного факта безопасности штамма он может быть использован для приготовления фармакопейных препаратов и продуктов питания лечебно-профилактического назначения, предназначенных для коррекции специфических метаболических нарушений в организме человека.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
1. Авторское свидетельство СССР N 1331889 "Штамм бактерий Bacillus sp., используемый для очистки сточных вод от оксалата". Заявлено 05.11.85 г. МПК С 12 N 1/20.
2. Патент РФ N 2061040 "Штамм бактерий Lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии. Приоритет 23.05.94г. МПК C 12 N 1/20.

Claims (1)

  1. Штамм бактерий Lactobacillus plantarum, депонируемый в ГКНМ N 151, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии.
RU99103608A 1999-03-02 1999-03-02 Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии RU2139346C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU99103608A RU2139346C1 (ru) 1999-03-02 1999-03-02 Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU99103608A RU2139346C1 (ru) 1999-03-02 1999-03-02 Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2139346C1 true RU2139346C1 (ru) 1999-10-10

Family

ID=20216287

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU99103608A RU2139346C1 (ru) 1999-03-02 1999-03-02 Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2139346C1 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000072855A3 (en) * 1999-05-28 2001-06-28 Mendes Srl Dietary or pharmaceutical composition for use for the prevention or treatment of hyperoxaluria
US9283252B2 (en) 2008-09-30 2016-03-15 Meiji Co., Ltd. Lactic acid bacterium having high oxalic acid decomposition ability

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1331889A1 (ru) * 1985-11-05 1987-08-23 Институт Микробиологии Ан Бсср Штамм бактерий BacILLUS Sp.,используемый дл очистки сточных вод от оксалата
RU2061040C1 (ru) * 1994-05-23 1996-05-27 Акционерное общество "Русский йогурт" Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для получения препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1331889A1 (ru) * 1985-11-05 1987-08-23 Институт Микробиологии Ан Бсср Штамм бактерий BacILLUS Sp.,используемый дл очистки сточных вод от оксалата
RU2061040C1 (ru) * 1994-05-23 1996-05-27 Акционерное общество "Русский йогурт" Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для получения препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Степанчук Ю.Б., Шендеров Б.А. Роль микрофлоры кишечника в метаболизме оксалатов. Микробиология, эпидемиология и иммунология, 1992, N 5, с.58-61. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. - М.: Грантъ, 1998, т.2, с.248-261. Allison M.J. et al. Oxalatobacter fomigenes gen. nov.sp. nov: oxalate - degrading anaerobes that inhabit the gastrointestinal tract. Arch. Microbiol.1985. v.141. *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000072855A3 (en) * 1999-05-28 2001-06-28 Mendes Srl Dietary or pharmaceutical composition for use for the prevention or treatment of hyperoxaluria
US6562336B2 (en) 1999-05-28 2003-05-13 Vsl Pharma Limited Dietary or pharmaceutical composition for use for the prevention or treatment of hyperoxaluria
USRE39585E1 (en) * 1999-05-28 2007-04-24 Vsl Pharmaceuticals, Inc. Dietary or pharmaceutical composition for use for the prevention or treatment of hyperoxaluria
US9283252B2 (en) 2008-09-30 2016-03-15 Meiji Co., Ltd. Lactic acid bacterium having high oxalic acid decomposition ability

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1005353B1 (en) Pharmaceutical preparation comprising lactobacillus casei rhamnosus
RU2078815C1 (ru) Штамм бактерий bifidobacterium breve, используемый для получения бактерийных лечебно-профилактических бифидосодержащих препаратов
EP4545628A1 (en) Breast milk-derived limosilactobacillus fermentum msjk0025 capable of improving intestinal flora condition and use thereof
RU2439145C2 (ru) Штамм микроорганизма bacillus smithii tbmi12 mscl p737 и применение его в качестве пищевой или кормовой добавки, или компонента пробиотической композиции и пробиотическая композиция
CN113088463B (zh) 一种具有益生特性的嗜酸乳杆菌及其应用
RU2048517C1 (ru) Штамм бактерий bifidobacterium longum, используемый для приготовления бактериальных препаратов и кисломолочных продуктов
AU2017271491A1 (en) Composition and methods for microbiota therapy
Brachkova et al. Preservation of viability and antibacterial activity of Lactobacillus spp. in calcium alginate beads
Xu et al. Probiotic activity of ropy Lactiplantibacillus plantarum NA isolated from Chinese northeast sauerkraut and comparative evaluation of its live and heat-killed cells on antioxidant activity and RAW 264.7 macrophage stimulation
KR100443254B1 (ko) 내산성, 내담즙성 및 항생제 내성을 갖는 락토바실러스플란타룸
RU2148640C1 (ru) Штамм бактерий bifidobacterium adolescentis 2 ф1 для приготовления бактерийных препаратов, нормализующих микрофлору при нарушениях микробиоценоза влагалища
CN107325995B (zh) 一种唾液链球菌菌株及其应用
RU2139346C1 (ru) Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для приготовления препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии
RU2264454C2 (ru) Биопрепарат "ирилис" на основе бактерий рода bacillus для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиоза различной этиологии и штаммы бактерий bacillus subtilis и bacillus licheniformis, используемые для изготовления биопрепарата
RU2061040C1 (ru) Штамм бактерий lactobacillus plantarum, обладающий способностью снижать уровень оксалата и используемый для получения препаратов и продуктов питания для профилактики и лечения гипероксалурии
JP4509250B2 (ja) Helicobacterpylori除菌性医薬品
KR100457002B1 (ko) 유해세균의 성장을 억제하는 신규 미생물 및 이를유효성분으로 하는 미생물 첨가제
KR20110009638A (ko) 신규한 락토바실러스속 유산균 복합 균주를 포함하는 사료첨가제
RU2393214C1 (ru) Иммунобиологическое противоаллергическое средство (варианты), штамм lactobacillus acidophilus nkjc, штамм lactobacillus acidophilus jch, штамм lactobacillus acidophilus kaa
RU2210592C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bifidobacterium longum 58B ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, РЕГУЛИРУЮЩИХ МИКРОФЛОРУ КИШЕЧНИКА У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА
CN111743158A (zh) 一种具有增强免疫功能的益生菌片剂及其制备方法
KR100533677B1 (ko) 락토바실러스 플란타룸을 유효성분으로 함유하는 어류양식용 사료 첨가제
JPH08283166A (ja) 感染防御剤
RU2215027C2 (ru) Штамм бактерий lactobacillus rhamnosus 12l для приготовления биологически активных добавок, регулирующих микрофлору кишечника у детей раннего возраста
CN117757702B (zh) 一株瑞士乳杆菌及其在控制血糖中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20180303