RU2201958C2 - Сухая стерильная малосывороточная питательная среда для культивирования клеток млекопитающих - Google Patents
Сухая стерильная малосывороточная питательная среда для культивирования клеток млекопитающих Download PDFInfo
- Publication number
- RU2201958C2 RU2201958C2 RU2001112706A RU2001112706A RU2201958C2 RU 2201958 C2 RU2201958 C2 RU 2201958C2 RU 2001112706 A RU2001112706 A RU 2001112706A RU 2001112706 A RU2001112706 A RU 2001112706A RU 2201958 C2 RU2201958 C2 RU 2201958C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sodium
- nutrient medium
- proteins
- serum
- chloride
- Prior art date
Links
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 title claims abstract description 32
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title abstract 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 claims abstract description 12
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 9
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 claims abstract description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 8
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 7
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims abstract description 4
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 30
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- -1 potassium phosphate monosubstituted, magnesium chloride Chemical class 0.000 claims description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-N sodium;hydron;carbonate Chemical compound [Na+].OC(O)=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 claims description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims 3
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims 2
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- RBFZWTMVVUVHLM-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[(4-hydroxyphenyl)-(4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)methyl]benzenesulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC(O)=CC=C1C(C=1C(=CC=CC=1)S([O-])(=O)=O)=C1C=CC(=O)C=C1 RBFZWTMVVUVHLM-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 19
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 15
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 11
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 abstract description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 3
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 abstract description 3
- 201000005264 laryngeal carcinoma Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 2
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 abstract 1
- DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogenphosphate dodecahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 abstract 1
- 229940050906 magnesium chloride hexahydrate Drugs 0.000 abstract 1
- DHRRIBDTHFBPNG-UHFFFAOYSA-L magnesium dichloride hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[Cl-].[Cl-] DHRRIBDTHFBPNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 abstract 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 abstract 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 description 2
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 101100133185 Caenorhabditis elegans nep-2 gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 description 1
- 101000993347 Gallus gallus Ciliary neurotrophic factor Proteins 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и касается питательной среды, используемой для культивирования монослойной культуры клеток карциномы гортани человека Нер-2 и суспензионной культуры клеток лимфомы Беркита Namalva. Сухая стерильная малосывороточная питательная среда на основе ферментативного гидролизата белков мышц для культивирования клеток млекопитающих представляет собой комплект из четырех флаконов, в первый из которых входит смесь гидролизата и L-глутамина, во второй - смесь неорганических солей (калий хлористый, калий фосфорнокислый однозамещеннный, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный, натрий хлористый, магний хлористый 6-водный, магний сернокислый 6-водный), глюкозы и фенолового красного (индикатор) водорастворимого, в третий - натрий углекислый кислый, в четвертый - ростовые протеины. Содержание в ферментативном гидролизате низкомолекулярных пептидов, обладающих ростовой активностью, а также введение в состав среды ростовых протеинов позволяет при использовании среды снизить концентрацию используемой сыворотки крови крупного рогатого скота до 2%. 1 з.п. ф-лы, 5 табл.
Description
Предлагаемое техническое решение относится к биотехнологии и касается состава малосывороточной питательной среды, используемой для культивирования монослойной культуры клеток карциномы гортани человека Нер-2 и суспензионной культуры клеток лимфомы Беркита Namalva, и может быть использовано при культивировании вирусов в производстве вакцин, а также при проведении различных научных исследований.
Для культивирования клеток животных и человека обычно используют питательные среды, содержащие 5-10% сыворотки крови животных. В настоящее время одним из основных требований к питательной среде, используемой при выращивании клеток in vitro, является уменьшение или по возможности полное исключение содержания в ней сыворотки крови животных, так как сыворотка крови животных, являясь дорогостоящим компонентом питательной среды, не стабильна по своему составу и, кроме этого, содержит различные гетерогенные факторы, например липолипиды, присутствие которых в питательных средах может вызвать нежелательные осложнения при изучении биохимических процессов культивирования клеток. В связи с этим целесообразно применение бессывороточных и малосывороточных питательных сред [1].
Известны питательные среды на основе ферментативных гидролизатов растительного и животного происхождения, содержащие в своем составе низкомолекулярные пептиды, обладающие ростстимулирующими свойствами [2, 3, 4].
Однако данные питательные среды предполагают использование до 10% сыворотки крови КРС, что снижает ее стабильность.
Наиболее близкой к заявляемой питательной среде - прототипом -является сухая стерильная питательная среда на основе ферментативного гидролизата, состав которой описан в способе получения жидких стерильных питательных сред на основе ферментативных гидролизатов, представляющая собой комплект из трех флаконов: в первый из которых входит гидролизат, во второй - смесь неорганических солей, глюкоза и феноловый красный, в третий - бикарбонат натрия. Данная среда используется для культивирования клеток млекопитающих при добавлении в нее 5-10% сыворотки крови КРС [5, прототип].
Недостатком такой среды является введение в ее состав непосредственно перед использованием до 10% сыворотки крови КРС и 300 мг/л L-глутамина, который не содержится в ферментативных гидролизатах, который является необходимым компонентом питательной среды.
Целью предлагаемого изобретения является повышение эффективности и стабильности сухой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата белков мышц, а также снижение количества гетерогенных факторов, присутствующих в среде.
Поставленная цель достигается путем введения в состав сухой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата белков мышц ростовых протеинов, выделенных из сыворотки крови крупного рогатого скота, и L-глутамина.
Сухая стерильная малосывороточная питательная среда на основе ферментативного гидролизата белков мышц представляет собой комплект из четырех частей: в первую входит смесь гидролизата и L-глутамина, во вторую - смесь неорганических солей, глюкозы и фенолового красного, в третью - натрий углекислый кислый, в четвертую - ростовые протеины.
L-глутамин является важным компонентом питательной среды [6].
В 1 л приготовленной жидкой стерильной питательной среды, приготовленной из комплекта сухой стерильной малосывороточной питательной среды, содержатся следующие компоненты (табл.1).
Новым по сравнению с прототипом является:
- уменьшение количества сыворотки крови крупного рогатого скота;
- введение ростовых протеинов, выделенных из сыворотки крови крупного рогатого скота;
- введение в питательную среду L-глутамина.
- уменьшение количества сыворотки крови крупного рогатого скота;
- введение ростовых протеинов, выделенных из сыворотки крови крупного рогатого скота;
- введение в питательную среду L-глутамина.
Данный состав среды ранее не встречался в публикуемой литературе, следовательно, данное изобретение соответствует критериям "новизна" и "изобретательский уровень".
Предлагаемое авторами техническое решение поясняется следующими примерами
Пример 1. Приготовление смеси, содержащей неорганические соли, глюкозу и феноловый красный.
Пример 1. Приготовление смеси, содержащей неорганические соли, глюкозу и феноловый красный.
Для приготовления смеси используют неорганические соли квалификации "хч". Используемые неорганические соли высушивают при температуре, указанной в табл.2.
В барабанную мельницу загружают компоненты смеси в количестве, указанном в табл.3, в следующей последовательности: натрий хлористый, калий хлористый, калий фосфорнокислый однозамещенный, магний хлористый, магний сернокислый, натрий фосфорнокислый двузамещенный, глюкоза и феноловый красный и измельчают в течение 3 ч.
Измельченную смесь, содержащую высушенные неорганические соли, глюкозу и феноловый красный, фасуют по (4,41±0,22) г.
Ферментативный гидролизат белков мышц фасуют по (0,50±0,03) г, L-глутамин фасуют по (0,12±0,06) г в ту же емкость, что и ферментативный гидролизат белков мышц.
Натрий углекислый кислый фасуют в емкости по (0,15±0,08) г.
Ростовые протеины, выделенные из сыворотки крови крупного скота, фасуют по (1,2±0,6) г.
Исходя из загруженного количества (500 комплектов), после фасовки получают 480 комплектов, которые стерилизуют ускоренными электронами дозой 24-26 кГр на установке ИЛУ-6 со следующими параметрами пучка электронов:
Энергия пучка 2,15-2,2 МэВ
Ток пучка импульсный 0,22 А
Частота следования импульсов 6 Гц
Длительность импульсов 500 мкс
Доза облучения 24-26 кГр
Потери при облучении (бой флаконов) составляют 0,4%.
Энергия пучка 2,15-2,2 МэВ
Ток пучка импульсный 0,22 А
Частота следования импульсов 6 Гц
Длительность импульсов 500 мкс
Доза облучения 24-26 кГр
Потери при облучении (бой флаконов) составляют 0,4%.
В результате получается 478 комплектов сухой стерильной малосывороточной питательной среды.
Пример 2. Непосредственно перед использованием в асептических условиях в бутылку со стерильной очищенной водой последовательно переносят содержимое стерильного комплекта сухой стерильной малосывороточной питательной среды на основе ферментативного гидролизата белков мышц. Вначале вносят содержимое флакона смеси, содержащей смесь неорганических солей, глюкозы и фенолового красного, после растворения которого вносят содержимое флакона с ферментативным гидролизатом и L-глутамином, закрывают резиновой пробкой и растворяют в течение 5 мин при перемешивании. Натрий углекислый кислый вносят в раствор после растворения гидролизата. Натрий углекислый растворяют в течение 15 мин при перемешивании. В последнюю очередь вносят ростовые протеины. Таким образом, из комплекта приготавливают 400 мл жидкой стерильной питательной среды.
В культуральный флакон вносят 100 мл питательной среды и 2% стерильной сыворотки крови КРС, затем вносят посевную дозу клеток Нер-2 100 тыс.кл/мл. Культуру инкубируют 3-4 сут. при температуре (36±1)oС. Для снятия клеток со стекла используют раствор 0,02%-ной массовой доли версена и раствор 0,25%-ной массовой доли трипсина в соотношении 1:1. В качестве контроля используют питательную среду с концентрацией сыворотки крови КРС 5%. В таблице 2 приведены результаты оценки ростовых свойств питательной среды.
Клетки Нер-2, выращенные как на опытной, так и на контрольной среде прикрепляются к субстрату и образуют островки размножившихся клеток на первые сутки после посева и через 3-4 суток культивирования сливаются в монослой без признаков дегенерации. Подсчет клеток производят в камере Горяева после 5-го пассажа. Индексы пролиферации клеточной культуры Нер-2, полученные на питательной среде с пониженным содержанием сыворотки крови КРС (2%), сравнимы с индексами пролиферации, полученными на контрольной питательной среде с 5% сыворотки крови КРС.
Пример 3. Приготовление питательной среды аналогично примеру 1.
Ростстимулирующую активность малосывороточной питательной среды на основе ферментативного гидролизата белков мышц оценивают на паспортизованной клеточной культуре лимфомы Беркита (Namalva). Культивирование проводят в течение 5 последовательных пассажей с 3-4 дневным циклом при посевной дозе в каждом пассаже 200 тыс.кл./мл. После 5-го пассажа осуществляют подсчет среднего значения индекса пролиферации и количество жизнеспособных клеток. Результаты оценки ростовых свойств питательной среды приведены в таблице 5.
Приведенные данные свидетельствуют о том, что питательная среда, представленная в новом составе и используемая для выращивания как монослойной клеточной культуры (Нер-2), так и суспензионной культуры (Namalva), позволяет снизить концентрацию используемой сыворотки крови до 2% без снижения индексов пролиферации клеточных культур.
Источники информации
1. Нариманов А.А. Бессывороточная среда для культивирования лимфоидных клеток человека и миеломных клеток мышей. //Биотехнология, 1991, 1, с.49-51.
1. Нариманов А.А. Бессывороточная среда для культивирования лимфоидных клеток человека и миеломных клеток мышей. //Биотехнология, 1991, 1, с.49-51.
2. Н.Н. Гизитдинов, К.С. Куликова, В.И. Вовк. Результаты изучения вируса ящура, выращенного в культуре клеток с использованием среды, приготовленной из белкового гидролизата сои. //Вестник сельхоз. наук, 1970, 7, с.14.
3. Авторское свидетельство СССР 1025722 "Питательная среда для выращивания культур клеток", БИ 24, 1983.
4. Телишевская Л.Я., Максимюк Н.Н. Богаутдинов З.Ф. Значение пептидов в составе питательных сред для суспензионного культивирования. //Цитология, 1994, т.36, c.538.
5. Патент РФ 2161649 "Способ получения жидкой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата", С 12 N 5/00, опубл. БИ 1, 2001.
6. Автореферат диссертации на соискание звания к.б.н. Богрянцевой М.П. "Технология изготовления и свойства стерильной питательной среды на основе гидролизатов". - М., 2000, с.9.
Claims (1)
1. Сухая стерильная малосывороточная питательная среда для культивирования клеток млекопитающих, содержащая ферментативный гидролизат белков мышц для культур клеток, натрий хлористый, магний сернокислый 6-водный, натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный, натрий углекислый кислый, глюкозу, феноловый красный водорастворимый и L-глутамин, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит калий хлористый, калий фосфорнокислый однозамещенный, магний хлористый 6-водный и ростовые протеины из сыворотки крови, а L-глутамин в сухом виде при следующем содержании компонентов, г из расчета на 400 мл среды:
Калий хлористый - 0,16
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,024
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный - 1,156
Натрий хлористый - 3,2
Магний хлористый 6-водный - 0,04
Магний сернокислый 6-водный - 0,04
Ферментативный гидролизат белков мышц для культур клеток - 0,5
Натрий углекислый кислый (бикарбонат натрия) - 0,15
Глюкоза - 0,4
Феноловый красный (индикатор) водорастворимый - 0,008
L-глутамин - 0,12
Ростовые протеины, выделенные из сыворотки крови крупного рогатого скота - 1,2
2. Сухая стерильная питательная среда по п.1, отличающаяся тем, что ингредиенты разделены на четыре части, первая из которых содержит ферментативный гидролизат белков мышц и L-глутамин, вторая - неорганические соли, глюкозу и феноловый красный, третья - натрий углекислый кислый и четвертая - ростовые протеины из сыворотки крови, при этом количественное соотношение ингредиентов каждой части соответствует количественному соотношению ингредиентов среды.
Калий хлористый - 0,16
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,024
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный - 1,156
Натрий хлористый - 3,2
Магний хлористый 6-водный - 0,04
Магний сернокислый 6-водный - 0,04
Ферментативный гидролизат белков мышц для культур клеток - 0,5
Натрий углекислый кислый (бикарбонат натрия) - 0,15
Глюкоза - 0,4
Феноловый красный (индикатор) водорастворимый - 0,008
L-глутамин - 0,12
Ростовые протеины, выделенные из сыворотки крови крупного рогатого скота - 1,2
2. Сухая стерильная питательная среда по п.1, отличающаяся тем, что ингредиенты разделены на четыре части, первая из которых содержит ферментативный гидролизат белков мышц и L-глутамин, вторая - неорганические соли, глюкозу и феноловый красный, третья - натрий углекислый кислый и четвертая - ростовые протеины из сыворотки крови, при этом количественное соотношение ингредиентов каждой части соответствует количественному соотношению ингредиентов среды.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001112706A RU2201958C2 (ru) | 2001-05-08 | 2001-05-08 | Сухая стерильная малосывороточная питательная среда для культивирования клеток млекопитающих |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2001112706A RU2201958C2 (ru) | 2001-05-08 | 2001-05-08 | Сухая стерильная малосывороточная питательная среда для культивирования клеток млекопитающих |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2001112706A RU2001112706A (ru) | 2003-04-10 |
| RU2201958C2 true RU2201958C2 (ru) | 2003-04-10 |
Family
ID=20249469
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2001112706A RU2201958C2 (ru) | 2001-05-08 | 2001-05-08 | Сухая стерильная малосывороточная питательная среда для культивирования клеток млекопитающих |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2201958C2 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2558253C1 (ru) * | 2014-02-10 | 2015-07-27 | Федеральное Казенное Предприятие " Щелковский Биокомбинат" | Питательная среда для суспензионного культивирования клеток млекопитающих |
| RU2588666C1 (ru) * | 2015-03-23 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" | Компонент питательной среды для культивирования клеток млекопитающих |
| RU2612355C2 (ru) * | 2005-05-31 | 2017-03-07 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Питательная среда для суспензионного культивирования клеток млекопитающих |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2112799C1 (ru) * | 1996-02-16 | 1998-06-10 | Костина Галина Александровна | Способ получения ростовых протеинов из сывороток крови различных видов животных |
| RU2161649C2 (ru) * | 1999-03-15 | 2001-01-10 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Способ получения жидкой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата |
-
2001
- 2001-05-08 RU RU2001112706A patent/RU2201958C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2112799C1 (ru) * | 1996-02-16 | 1998-06-10 | Костина Галина Александровна | Способ получения ростовых протеинов из сывороток крови различных видов животных |
| RU2161649C2 (ru) * | 1999-03-15 | 2001-01-10 | Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" | Способ получения жидкой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2612355C2 (ru) * | 2005-05-31 | 2017-03-07 | Федеральное Казенное Предприятие "Щелковский Биокомбинат" | Питательная среда для суспензионного культивирования клеток млекопитающих |
| RU2558253C1 (ru) * | 2014-02-10 | 2015-07-27 | Федеральное Казенное Предприятие " Щелковский Биокомбинат" | Питательная среда для суспензионного культивирования клеток млекопитающих |
| RU2588666C1 (ru) * | 2015-03-23 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" | Компонент питательной среды для культивирования клеток млекопитающих |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR860000897B1 (ko) | 인체 에리트로포이에틴의 제조방법 | |
| KR20140113693A (ko) | 세포 배양 배지 및 방법 | |
| Rappaport | Monolayer Cultures of Trypsinized Monkey Kidney Cells in Synthetic Medium. Application to Poliovirus Synthesis. | |
| Mohamed et al. | A serum-free, chemically-defined medium for function and growth of primary neonatal rat heart cell cultures | |
| CN105462884A (zh) | 鸭支原体培养基及鸭支原体的分离纯化方法 | |
| CN104745479B (zh) | 一种培养雨生红球藻的方法 | |
| Ghosh et al. | Proliferation of mammalian cells with Chlorococcum littorale algal compounds without serum support | |
| CN104250655A (zh) | Bmp-2/vegf165双基因修饰的骨髓间充质干细胞及其制备方法 | |
| RU2201958C2 (ru) | Сухая стерильная малосывороточная питательная среда для культивирования клеток млекопитающих | |
| CN105838675A (zh) | 一种造血干细胞无血清培养基 | |
| CN117431220A (zh) | 一种无血清培养人二倍体细胞制备狂犬病毒抗原的方法和应用 | |
| Fries | Nonanal as a growth factor for wood-rotting fungi | |
| CN110804584A (zh) | 一种优化脐带间充质干细胞培养液 | |
| Kwon et al. | Suspension culture of hematopoietic stem cells in stirred bioreactors | |
| CN104818252B (zh) | 一种3d细胞培养材料及其应用 | |
| RU2161649C2 (ru) | Способ получения жидкой стерильной питательной среды на основе ферментативного гидролизата | |
| CN109576308A (zh) | 一种提高人类干细胞来源肝样细胞解毒功能的方法及其应用 | |
| CA2562760C (en) | A new method of expanding cord blood cells | |
| CN109609449B (zh) | 一种牙周膜干细胞增殖培养基及其增殖培养方法 | |
| CN106754678A (zh) | 一种适用于牙髓干细胞体外培养的培养基及其制备方法 | |
| CN106474154A (zh) | 一种肺干细胞培养基、注射液及其制备方法 | |
| CN112662623A (zh) | 无血清干细胞培养基及其应用 | |
| Maresca et al. | Sulfhydryl groups and the differentiation of murine erythroleukemia cells | |
| RU2053294C1 (ru) | Способ культивирования бифидобактерий | |
| RU2036233C1 (ru) | Питательная среда для выращивания первичных и перевиваемых клеток |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20120320 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150509 |