RU2394103C2 - Экспрессия плазминогена и микроплазминогена в ряске - Google Patents

Экспрессия плазминогена и микроплазминогена в ряске Download PDF

Info

Publication number
RU2394103C2
RU2394103C2 RU2006132394/13A RU2006132394A RU2394103C2 RU 2394103 C2 RU2394103 C2 RU 2394103C2 RU 2006132394/13 A RU2006132394/13 A RU 2006132394/13A RU 2006132394 A RU2006132394 A RU 2006132394A RU 2394103 C2 RU2394103 C2 RU 2394103C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
duckweed
plasminogen
plant
specified
nucleotide sequence
Prior art date
Application number
RU2006132394/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2006132394A (ru
Inventor
Дэйвид СПЕНСЕР (US)
Дэйвид СПЕНСЕР
Линн Ф. ДИКИ (US)
Линн Ф. ДИКИ
Джон Р. ГАСДАСКА (US)
Джон Р. ГАСДАСКА
Ксяовей ВАНГ (US)
Ксяовей ВАНГ
Кевин М. КОКС (US)
Кевин М. КОКС
Чарльз Дж. ПИЛ (US)
Чарльз Дж. ПИЛ
Original Assignee
Биолекс Терапьютикс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Биолекс Терапьютикс, Инк. filed Critical Биолекс Терапьютикс, Инк.
Publication of RU2006132394A publication Critical patent/RU2006132394A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2394103C2 publication Critical patent/RU2394103C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
    • C12N15/8257—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits for the production of primary gene products, e.g. pharmaceutical products, interferon
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
    • C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
    • C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12N9/6435—Plasmin (3.4.21.7), i.e. fibrinolysin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21007—Plasmin (3.4.21.7), i.e. fibrinolysin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретения относятся к области биотехнологии и предназначены для получения рекомбинантных плазминогена и микроплазминогена в системе экспрессии ряски. Способ получения высоких уровней стабильного плазминогена в ряске включает культивирование растения, клетки или клубенька ряски, трансформированного нуклеиновой кислотой, кодирующей плазминоген, и сбор экспрессированного плазминогена. Также предложены аналогичные способы получения микроплазминогена и фрагмента плазминогена. Также предложены стабильно трансформированные растения ряски, клетки растения ряски или клубеньки ряски, которые трансформированы экспрессионными кассетами для экспрессии плазминогена, микроплазминогена или фрагмента плазминогена. Изобретения обеспечивают получение высоких уровней плазминогена, микроплазминогена или фрагмента плазминогена, которые являются стабильными и могут быть активированы с получением полипептида, имеющего протеазную активность. 7 н. и 45 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл.

Description

Текст описания приведен в факсимильном виде.
Figure 00000001
Figure 00000002
Figure 00000003
Figure 00000004
Figure 00000005
Figure 00000006
Figure 00000007
Figure 00000008
Figure 00000009
Figure 00000010
Figure 00000011
Figure 00000012
Figure 00000013
Figure 00000014
Figure 00000015
Figure 00000016
Figure 00000017
Figure 00000018
Figure 00000019
Figure 00000020
Figure 00000021
Figure 00000022
Figure 00000023
Figure 00000024
Figure 00000025
Figure 00000026
Figure 00000027
Figure 00000028
Figure 00000029
Figure 00000030
Figure 00000031
Figure 00000032
Figure 00000033
Figure 00000034
Figure 00000035
Figure 00000036
Figure 00000037
Figure 00000038
Figure 00000039
Figure 00000040
Figure 00000041

Claims (52)

1. Способ получения высоких уровней стабильного плазминогена в ряске, где указанный плазминоген может быть активирован для получения полипептида, обладающего активностью сериновой протеазы, предусматривающий стадии:
(a) культивирования растения ряски, или клетки растения, или клубенька ряски, где указанное растение ряски, или клетка растения, или клубенек ряски стабильно трансформировано молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую плазминоген; и
(b) сбора указанного плазминогена из указанного растения ряски, или клетки растения, или клубенька ряски.
2. Способ по п.1, где указанная нуклеотидная последовательность, кодирующая плазминоген, функционально связана с кодирующей последовательностью для сигнального пептида.
3. Способ по п.1, где указанная нуклеотидная последовательность, кодирующая плазминоген, имеет по меньшей мере один признак, выбранный из группы, состоящей из:
(a) предпочтительных для ряски кодонов в кодирующей последовательности для указанного плазминогена;
(b) функционально связанной нуклеотидной последовательности, содержащей интрон растения, которая встроена против хода транскрипции от кодирующей последовательности; и
(с) функционально связанной нуклеотидной последовательности, содержащей лидерную последовательность, которая увеличивает трансляцию указанной нуклеотидной последовательности, кодирующей плазминоген.
4. Способ по п.3, где нуклеотидная последовательность, кодирующая плазминоген, содержит 70-100% предпочтительных для ряски кодонов.
5. Способ по п.3, где указанный интрон растения происходит из гена алкогольдегидрогеназы 1 кукурузы.
6. Способ по п.5, где указанный интрон растения состоит, по существу, из последовательности, представленной в SEQ ID NO:1.
7. Способ по п.3, где указанная лидерная последовательность происходит из гена малой субъединицы рибулозобисфосфаткарбоксилазы 5В Lemna gibba.
8. Способ по п.7, где указанная лидерная последовательность состоит, по существу, из нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:2.
9. Способ по п.3, где указанная нуклеотидная последовательность, кодирующая плазминоген, является нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:3.
10. Способ по п.1, где указанный плазминоген является плазминогеном человека.
11. Способ по п.10, где указанный плазминоген имеет по меньшей мере 95%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:4.
12. Способ по п.1, где по меньшей мере 2% растворимого белка в растении ряски или в клетке растения ряски являются плазминогеном.
13. Способ по п.12, где по меньшей мере 3% растворимого белка в растении ряски или в клетке растения ряски являются плазминогеном.
14. Способ по п.13, где по меньшей мере 4% растворимого белка в растении ряски или в клетке растения ряски являются плазминогеном.
15. Способ получения высоких уровней стабильного микроплазминогена в ряске, где указанный микроплазминоген может быть активирован для получения полипептида, обладающего активностью сериновой протеазы, предусматривающий стадии:
(a) культивирования в среде для культивирования ряски культуры растений ряски, культуры клеток растений или клубеньков ряски, где указанная культура растения ряски, или культура клеток растений, или клубеньков ряски стабильно трансформирована молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую микроплазминоген, и функционально связанную кодирующую последовательность для сигнального пептида; и
(b) сбора указанного микроплазминогена из культуральной среды ряски.
16. Способ по п.15, где указанный микроплазминоген секретируется в культуральную среду ряски.
17. Способ по п.16, где указанная культуральная среда ряски содержит по меньшей мере 1 мг/л микроплазминогена, как определено количественным Вестерн-блоттингом.
18. Способ по п.16, где указанная культуральная среда ряски содержит по меньшей мере 2 мг/л микроплазминогена, как определено количественным Вестерн-блоттингом.
19. Способ по п.16, где указанная культуральная среда ряски содержит по меньшей мере 5 мг/л микроплазминогена, как определено количественным Вестерн-блоттингом.
20. Способ по п.19, где указанная культуральная среда ряски содержит по меньшей мере 10 мг/л микроплазминогена, как определено количественным Вестерн-блоттингом.
21. Способ по п.15, где указанная нуклеотидная последовательность, кодирующая микроплазминоген, и функционально связанная кодирующая последовательность для сигнального пептида имеет по меньшей мере один признак, выбранный из группы, состоящей из:
(a) предпочтительных для ряски кодонов в кодирующей последовательности для указанного микроплазминогена;
(b) предпочтительных для ряски кодонов в кодирующей последовательности для указанного сигнального пептида;
(c) функционально связанной нуклеотидной последовательности, содержащей интрон растения, которая встроена против хода транскрипции от кодирующей последовательности; и
(d) функционально связанной нуклеотидной последовательности, содержащей лидерную последовательность, которая увеличивает трансляцию указанной нуклеотидной последовательности, кодирующей микроплазминоген.
22. Способ по п.21, где нуклеотидная последовательность, кодирующая микроплазминоген, содержит 70-100% предпочтительных для ряски кодонов.
23. Способ по п.22, где нуклеотидная последовательность, кодирующая сигнальный пептид, содержит 70-100% предпочтительных для ряски кодонов.
24. Способ по п.21, где указанный интрон растения происходит из гена алкогольдегидрогеназы 1 кукурузы.
25. Способ по п.24, где указанный интрон растения состоит, по существу, из последовательности, представленной в SEQ ID NO:1.
26. Способ по п.21, где указанная лидерная последовательность происходит из гена малой субъединицы рибулозобисфосфаткарбоксилазы 5В Lemna gibba.
27. Способ по п.26, где указанная лидерная последовательность состоит, по существу, из нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID NO:2.
28. Способ по п.21, где указанная нуклеотидная последовательность, кодирующая микроплазминоген, является нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:5.
29. Способ по п.15, где указанный микроплазминоген является микроплазминогеном человека.
30. Способ по п.29, где указанный микроплазминоген имеет по меньшей мере 95%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:6.
31. Способ по п.15, где указанный сигнальный пептид является полипептидом альфа-амилазы риса.
32. Способ по п.31, где кодирующая последовательность для сигнального пептида содержит нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO:7.
33. Способ по п.15, где указанная последовательность сигнального пептида имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:8.
34. Способ по п.1, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски происходит из рода, выбранного из группы, состоящей из рода Spirodela, рода Wolffia, рода Wolfiella, рода Landoltia и рода Lemna.
35. Способ по п.15, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски принадлежит к роду, выбранному из группы, состоящей из рода Spirodela, рода Wolffia, рода Wolfiella, рода Landoltia и рода Lemna.
36. Способ получения высоких уровней фрагмента стабильного плазминогена в ряске, где указанный фрагмент плазминогена, будучи активированным, сохраняет активность сериновой протеазы, предусматривающий стадии:
(а) культивирования в среде для культивирования ряски растения ряски, или клетки растения, или клубенька ряски, где указанное растение ряски, или клетка растения, или клубенек ряски стабильно трансформировано молекулой нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент плазминогена; и
(b) сбора указанного фрагмента плазминогена из по меньшей мере одного источника, выбранного из указанного растения ряски, указанной клетки растения ряски, указанного клубенька ряски или указанной культуральной среды ряски.
37. Способ по п.36, где указанная нуклеотидная последовательность, кодирующая фрагмент плазминогена, функционально связана с кодирующей последовательностью для сигнального пептида.
38. Способ по п.36, где указанная нуклеотидная последовательность, кодирующая фрагмент плазминогена, имеет по меньшей мере один признак, выбранный из группы, состоящей из:
(a) предпочтительных для ряски кодонов в кодирующей последовательности для указанного фрагмента плазминогена;
(b) функционально связанной нуклеотидной последовательности, содержащей интрон растения, которая встроена против хода транскрипции от кодирующей последовательности; и
(c) функционально связанной нуклеотидной последовательности, содержащей лидерную последовательность, которая увеличивает трансляцию указанной нуклеотидной последовательности, кодирующей фрагмент плазминогена.
39. Способ по п.38, где нуклеотидная последовательность, кодирующая фрагмент плазминогена, содержит 70-100% предпочтительных для ряски кодонов.
40. Способ по п.38, где указанный интрон растения происходит из гена алкогольдегидрогеназы 1 кукурузы.
41. Способ по п.36, где указанный фрагмент плазминогена содержит по меньшей мере 80 смежных аминокислот аминокислотной последовательности зрелого плазминогена.
42. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски для получения высоких уровней стабильного плазминогена, где указанный плазминоген может быть активирован для получения полипептида, обладающего активностью сериновой протеазы, и где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски трансформировано молекулой нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность, кодирующую плазминоген.
43. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски по п.42, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски происходит из рода, выбранного из группы, состоящей из рода Spirodela, рода Wolffia, рода Wolfiella, рода Landoltia и рода Lemna.
44. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски по п.43, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски является членом вида, выбранного из группы, состоящей из Lemna minor, Lemna miniscula, Lemna aequinoctialis, и Lemna gibba.
45. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски для получения высоких уровней стабильного микроплазминогена, где указанный микроплазминоген может быть активирован для получения полипептида, обладающего активностью сериновой протеазы, и где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски трансформировано молекулой нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность, кодирующую микроплазминоген, и функционально связанную кодирующую последовательность для сигнального пептида, который направляет секрецию микроплазминогена из указанного растения ряски, клетки растения ряски или клубенька ряски.
46. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски по п.45, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски происходит из рода, выбранного из группы, состоящей из рода Spirodela, рода Wolffia, рода Wolfiella, рода Landoltia и рода Lemna.
47. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски по п.46, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски является членом вида, выбранного из группы, состоящей из Lemna minor, Lemna miniscula, Lemna aequinoctialis и Lemna gibba.
48. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски для получения высоких уровней фрагмента стабильного плазминогена, который, будучи активированным, сохраняет активность сериновой протеазы, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски трансформировано молекулой нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность, кодирующую фрагмент плазминогена.
49. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски по п.48, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски происходит из рода, выбранного из группы, состоящей из рода Spirodela, рода Wolffia, рода Wolfiella, рода Landoltia и рода Lemna.
50. Стабильно трансформированное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски по п.49, где указанное растение ряски, клетка растения ряски или клубенек ряски является членом вида, выбранного из группы, состоящей из Lemna minor, Lemna miniscula, Lemna aequinoctialis и Lemna gibba.
51. Стабильно трансформированное растение ряски для получения высоких уровней стабильного плазминогена или микроплазминогена, где указанный плазминоген или микроплазминоген может быть активирован для получения полипептида, обладающего активностью сериновой протеазы, где указанная ряска содержит ДНК-конструкцию, содержащую следующие функционально связанные элементы: лидерную последовательность, промоторную последовательность, нуклеотидную последовательность, кодирующую плазминоген или микроплазминоген, и последовательность терминации транскрипции, где указанная лидерная последовательность, указанная промоторная последовательность и указанная последовательность терминации - все функционируют в ряске.
52. Растение по п.51, где указанная лидерная последовательность является последовательностью, представленной в SEQ ID NO:2, а последовательность, кодирующая плазминоген, представлена в SEQ ID NO:3.
RU2006132394/13A 2004-02-11 2005-02-11 Экспрессия плазминогена и микроплазминогена в ряске RU2394103C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US54348704P 2004-02-11 2004-02-11
US60/543,487 2004-02-11

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2006132394A RU2006132394A (ru) 2008-03-20
RU2394103C2 true RU2394103C2 (ru) 2010-07-10

Family

ID=34860429

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2006132394/13A RU2394103C2 (ru) 2004-02-11 2005-02-11 Экспрессия плазминогена и микроплазминогена в ряске

Country Status (12)

Country Link
US (2) US7659445B2 (ru)
EP (1) EP1713921A2 (ru)
JP (1) JP2007521834A (ru)
KR (1) KR20070004706A (ru)
CN (1) CN1938427A (ru)
AU (1) AU2005212431B2 (ru)
BR (1) BRPI0507613A (ru)
CA (1) CA2555609A1 (ru)
IL (1) IL177435A0 (ru)
NZ (1) NZ549537A (ru)
RU (1) RU2394103C2 (ru)
WO (1) WO2005078109A2 (ru)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7622573B2 (en) * 2006-01-17 2009-11-24 Biolex, Inc. Expression control elements from the lemnaceae family
KR100791090B1 (ko) 2007-01-05 2008-01-04 대한민국 플라스미노겐 액티베이터 유전자를 포함하는 식물 형질전환용 벡터 및 상기 벡터에 의해 형질전환된 식물
KR100887367B1 (ko) 2007-07-12 2009-03-06 대한민국(관리부서:농촌진흥청) 플라스미노겐 액티베이터 유전자를 포함하는 벡터, 상기벡터에 의해 형질전환된 모상근 및 이를 이용한플라스미노겐 액티베이터의 제조방법
EP2435562A1 (en) 2009-05-26 2012-04-04 Biolex Therapeutics, Inc. Compositions and methods for production of aglycosylated plasminogen
WO2011005502A2 (en) 2009-06-23 2011-01-13 Biolex Therapeutics, Inc. Methods and compositions for the cryopreservation of duckweed
WO2011004011A1 (en) * 2009-07-10 2011-01-13 Thrombogenics Nv Variants of plasminogen and plasmin
JP6085568B2 (ja) 2011-01-05 2017-02-22 スロンボジェニックス・ナムローゼ・フェンノートシャップＴｈｒｏｍｂｏＧｅｎｉｃｓ ＮＶ プラスミノーゲンおよびプラスミンの変異体
US9644196B2 (en) 2011-08-12 2017-05-09 Thrombogenics Nv Plasminogen and plasmin variants
CN110066783B (zh) * 2019-05-16 2021-07-13 重庆派金生物科技有限公司 一种无自切形式的微纤溶酶制备方法
AU2020314044A1 (en) 2019-07-12 2022-03-03 Monash University Methods for making recombinant protein
KR102251640B1 (ko) * 2019-11-27 2021-05-17 서울대학교산학협력단 지방세포 분화 촉진용 펩타이드 및 이를 포함하는 지방세포 분화 촉진용 조성물

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5648254A (en) * 1988-01-15 1997-07-15 Zymogenetics, Inc. Co-expression in eukaryotic cells

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6040498A (en) * 1998-08-11 2000-03-21 North Caroline State University Genetically engineered duckweed
US7161064B2 (en) * 1997-08-12 2007-01-09 North Carolina State University Method for producing stably transformed duckweed using microprojectile bombardment
US8022270B2 (en) * 2000-07-31 2011-09-20 Biolex Therapeutics, Inc. Expression of biologically active polypeptides in duckweed
EP1305437B1 (en) 2000-07-31 2010-09-01 Biolex Therapeutics, Inc. Expression of biologically active polypeptides in duckweed
JP4047170B2 (ja) 2000-12-21 2008-02-13 トロム−イクス・ナムローゼ・フエンノートシャップ 酵母発現ベクターおよび酵母細胞における発現による組換えタンパク質の製造方法
BRPI0206546B1 (pt) 2001-01-19 2015-07-21 Phyton Holdings Llc Método para a produção secretória de glicoproteína que tem cadeia de açúcar do tipo humana, usando célula vegetal
AU2002236234B2 (en) 2001-03-06 2007-12-20 Phyton Holdings, LLC. Plant cell having animal-type sugar chain adding function
JP2003235561A (ja) * 2002-02-21 2003-08-26 Kazuhito Fujiyama 植物型糖鎖を持つ糖タンパク質を動物型糖鎖を持つ糖タンパク質に変換する方法
KR20060107908A (ko) * 2003-07-01 2006-10-16 바이오렉스 인코포레이티드 개구리밥의 엽록체 형질전환 방법
CN102660564B (zh) 2004-04-22 2013-05-08 泰勒克里斯生物治疗学公司 重组修饰的纤溶酶

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5648254A (en) * 1988-01-15 1997-07-15 Zymogenetics, Inc. Co-expression in eukaryotic cells

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WO /2003/066842 A2, 14.08.2003. *

Also Published As

Publication number Publication date
EP1713921A2 (en) 2006-10-25
NZ549537A (en) 2009-09-25
IL177435A0 (en) 2006-12-10
JP2007521834A (ja) 2007-08-09
RU2006132394A (ru) 2008-03-20
US20100186126A1 (en) 2010-07-22
CA2555609A1 (en) 2005-08-25
US7659445B2 (en) 2010-02-09
BRPI0507613A (pt) 2007-07-03
WO2005078109A3 (en) 2005-11-10
US8017836B2 (en) 2011-09-13
CN1938427A (zh) 2007-03-28
AU2005212431B2 (en) 2010-07-15
US20050262592A1 (en) 2005-11-24
WO2005078109A2 (en) 2005-08-25
AU2005212431A1 (en) 2005-08-25
KR20070004706A (ko) 2007-01-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2394103C2 (ru) Экспрессия плазминогена и микроплазминогена в ряске
RU96124069A (ru) ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ДНК, КОДИРУЮЩИЕ ЭНЗИМЫ, СПОСОБНЫЕ УСКОРЯТЬ СИНТЕЗЫ ЛИНЕЙНЫХ α-1,4-ГЛЮКАНОВ В РАСТЕНИЯХ, ГРИБАХ И МИКРООРГАНИЗМАХ
CN113564180B (zh) 一种橡胶树磺肽素基因HbPSK5及其编码小肽和应用
CN109628466A (zh) 一种紫花苜蓿抗旱耐盐基因MsCKX及其应用
CN106868022B (zh) 促进水稻有效穗数提高的氮运输基因OsNPF2.4b及其应用
Liu et al. Scratching stimuli of mycelia influence fruiting body production and ROS-scavenging gene expression of Cordyceps militaris
CN116732088B (zh) 一种PpyBZR2基因在促进梨休眠芽萌发中的应用
CN119286913B (zh) 水稻OsCLE48基因在提高植物耐盐碱性上的应用
CN108558992B (zh) 调控金针菇子实体发育的转录因子pdd1及其编码基因与应用
CN103525825B (zh) 一种植物耐锰毒害重要基因ShMDH1的克隆及其应用
CN105111295A (zh) 抗根腐病和纹枯病的转wmyb-r基因小麦的培育方法及其相关生物材料
CN106282189B (zh) 一种在水稻茎和幼穗特异表达的启动子的应用
CN118028356B (zh) TaSPL6基因在负调控小麦产量和氮利用效率中的应用
CN109371036B (zh) 一种紫花苜蓿耐盐基因MsPIP2；2及其应用
CN114736908A (zh) 调节植物镉含量以及镉耐受性的基因及其应用
CN102146139A (zh) 一种合成海藻糖的融合蛋白及其在培育矮化草坪草中的应用
CN118207226A (zh) 调控甘蔗适应低钾胁迫的ShCIPK23基因及其应用
CN113735951B (zh) Cle肽抗蒸腾剂的应用
CN114196679A (zh) 铜离子转运蛋白基因OsCOPT7在水稻选育中的应用
CN115976049A (zh) 一种花生耐盐基因AhLRR-RLK265及其应用
CN114525299A (zh) GmMYB14蛋白及其相关生物材料在调控植物株型和产量中的应用
CN119876193B (zh) 一种黄秋葵AeC4H基因的克隆引物、方法及其应用
CN106947777B (zh) 氮运输基因OsNPF7.4在水稻选育中的应用
CN120796304B (zh) MsGDSL1基因在调控植物叶片大小和产量中的应用
CN119331886B (zh) 一种大豆细胞色素b5基因及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20140324

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20150212