RU2762425C1 - Method for bioconversion of sunflower husk into feed product with high protein content - Google Patents

Method for bioconversion of sunflower husk into feed product with high protein content Download PDF

Info

Publication number
RU2762425C1
RU2762425C1 RU2021112214A RU2021112214A RU2762425C1 RU 2762425 C1 RU2762425 C1 RU 2762425C1 RU 2021112214 A RU2021112214 A RU 2021112214A RU 2021112214 A RU2021112214 A RU 2021112214A RU 2762425 C1 RU2762425 C1 RU 2762425C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
husk
sunflower
protein
units
bioconversion
Prior art date
Application number
RU2021112214A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Иван Андреевич Фоменко
Людмила Афанасьевна Иванова
Светлана Петровна Комбарова
Иван Дмитриевич Бельский
Иван Александрович Дегтярев
Айслу Альбертовна Мижева
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет пищевых производств"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет пищевых производств" filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный университет пищевых производств"
Priority to RU2021112214A priority Critical patent/RU2762425C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2762425C1 publication Critical patent/RU2762425C1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/30Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P60/00Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
    • Y02P60/80Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
    • Y02P60/87Re-use of by-products of food processing for fodder production

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: fodder production and biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to fodder production and biotechnology, in particular to a method for bioconversion of sunflower husk, waste of fat and oil production, into a feed product with a high protein content. The method is characterized in that it involves grinding, delignification and fermentolysis of sunflower husks, separation of liquid fermentolysate and cultivation of protein-producing yeast strains on it, followed by separation, plasmolysis and drying of protein-enriched biomass. In this case, the sunflower husk is crushed to a particle size of 80-100 microns, for delignification a 10-15% suspension is prepared from the husk, in which a 2-6% sodium hydroxide solution is used as a dispersion medium, the resulting suspension is kept at a temperature of 125 - 130°C for 30 - 60 minutes, and the enzymatic lysis of delignified husk is carried out with preparations of cellulolytic enzymes at the rate of 30 - 60 units of cellulase activity (ClS units) per 1 g of dry delignified husk for 18 - 24 hours, as protein-producing crops yeast strain Debaryomyces hansenii Y-3863 or Kluyveromyces marxianus Y-4570 is used.EFFECT: improvement of the method for bioconversion of sunflower husk, waste of fat and oil production, into a feed product with a high protein content.1 cl

Description

Изобретение относится к кормопроизводству и биотехнологии, а именно к биоконверсии подсолнечной лузги, являющейся отходом масложирового производства.The invention relates to fodder production and biotechnology, namely to bioconversion of sunflower husk, which is a waste of fat and oil production.

Подсолнечная лузга, как одревесневшая растительная ткань, содержит значительное количество пентозанов (18,4-28,0%), клетчатки (52,0-66,0%), лигнина (24,8-29,1%), целлюлозы (22,6-42,4%), фитомелана (1,4%), поэтому, после соответствующей предобработки с целью повышения биологической ценности, лузга может оказаться перспективным сырьем для получения новых ценных продуктов. В связи с этим предпринимаются попытки использования лузги после ее предобработки в качестве добавки в корм животным; в составе питательной среды для выращивания различных грибов; для выделения из лузги пигмента фитомелана, обладающего антиоксидантной активностью; а также использования лузги в качестве адсорбента для очистки вод от тяжелых металлов, нефтепродуктов и др. Однако все перечисленные разработки пока не рентабельны и промышленного применения не находят. В настоящее время основным способом рециклинга подсолнечной лузги остается ее переработка в топливные пеллеты.Sunflower husk, as a lignified plant tissue, contains a significant amount of pentosans (18.4-28.0%), fiber (52.0-66.0%), lignin (24.8-29.1%), cellulose (22 , 6-42.4%), phytomelan (1.4%), therefore, after appropriate preprocessing in order to increase the biological value, husk can be a promising raw material for obtaining new valuable products. In this regard, attempts are being made to use husk after its preprocessing as an additive to animal feed; as part of a nutrient medium for growing various mushrooms; for isolation of the phytomelan pigment, which has antioxidant activity, from the husk; as well as the use of husk as an adsorbent for water purification from heavy metals, oil products, etc. However, all of the above developments are not yet profitable and do not find industrial application. Currently, the main method for recycling sunflower husk is its processing into fuel pellets.

Известен способ получения корма из отходов масложировой промышленности (SU 592403, 1978) путем измельчения и обработки лузги подсолнечника перборатом (0,5-0,7%) и соляной кислотой (3,0-4,0%) при 115-118°С в течение 2 мин с последующей добавкой мочевины (1,0-1,5%) и дополнительной выдержкой при той же температуре в течение 1 мин. Предлагаемый способ снижает содержание клетчатки в подсолнечной лузге с 50 до 37%, повышая, таким образом, кормовую ценность получаемого продукта.A known method of obtaining feed from waste of the oil and fat industry (SU 592403, 1978) by grinding and processing sunflower husks with perborate (0.5-0.7%) and hydrochloric acid (3.0-4.0%) at 115-118 ° C within 2 minutes, followed by the addition of urea (1.0-1.5%) and additional exposure at the same temperature for 1 minute. The proposed method reduces the fiber content in sunflower husks from 50 to 37%, thus increasing the feed value of the resulting product.

Известен также способ переработки лузги подсолнечника в кормовую добавку (SU 1012870, 1983), характеризующийся тем, что неизмельченную лузгу увлажняют водой или липидной добавкой, полученной из отстоя, образующегося при рафинировании подсолнечного масла. Полученную смесь нагревают до 70-90°С и формуют гранулы.There is also known a method of processing sunflower husk into a feed additive (SU 1012870, 1983), characterized in that the unmilled husk is moistened with water or a lipid additive obtained from the sludge formed during the refining of sunflower oil. The resulting mixture is heated to 70-90 ° C and granules are formed.

Имеется патент (RU 2061386, 1996), согласно которому для получения кормовой добавки для сельскохозяйственных животных целлюлозосодержащее сырье (древесные отходы, торф, подсолнечную лузгу и др.) смешивают с жидким птичьим пометом в соотношении 10-1:1. Далее проводят гидробаротермическую обработку смеси при 160-200°С и влажности 50-60% в течение 15-90 мин. Полученный продукт сушат и гранулируют.There is a patent (RU 2061386, 1996), according to which, to obtain a feed additive for farm animals, cellulose-containing raw materials (wood waste, peat, sunflower husk, etc.) are mixed with liquid poultry manure in a ratio of 10-1: 1. Next, the mixture is hydrobarothermic treatment at 160-200 ° C and humidity 50-60% for 15-90 minutes. The resulting product is dried and granulated.

Известен способ получения корма для животных на основе лузги подсолнечника (RU 2667784, 2018), характеризующийся тем, что лузгу измельчают с последующей ее химической деструкцией. Затем полученную массу смешивают со шротом подсолнечника и белково-витаминно-минеральной добавкой, после чего формуют вакуумированием с получением готовой продукции, питательная ценность которой составляет 0,24 кормовых единиц в 1 кг корма.A known method of producing animal feed based on sunflower husk (RU 2667784, 2018), characterized in that the husk is crushed with its subsequent chemical destruction. Then the resulting mass is mixed with sunflower meal and a protein-vitamin-mineral supplement, after which it is formed by vacuum treatment to obtain a finished product, the nutritional value of which is 0.24 feed units per 1 kg of feed.

Недостатком всех перечисленных выше способов является использование необогащенной белком подсолнечной лузги. Несмотря на различные методы предобработки лузги, в кормах остается достаточно высокое содержание трудногидролизуемой клетчатки, которая практически не усваивается у моногастричных животных. А питательная ценность кормов складывается в основном за счет других компонентов кормов с лучшей усваиваемостью.The disadvantage of all of the above methods is the use of non-protein-enriched sunflower husk. Despite the various methods of pretreatment of husk, a fairly high content of difficult-to-hydrolyzable fiber remains in feed, which is practically not assimilated in monogastric animals. And the nutritional value of feed is mainly due to other feed components with better digestibility.

Предложен способ получения корма из подсолнечной лузги (SU 1090322, 1984) путем гидролиза лузги серной кислотой 70-75% при модуле пропитки 1:(0,01-0,1) с последующей нейтрализацией гидролизата щелочными отходами масложировой промышленности (отработанные отбельные глины и соапстоки). Полученный таким способом корм содержит 22-34% легкоусвояемых углеводов. Недостатком способа является использование для гидролиза серной кислоты, а также низкое содержание белков при значительном количестве липидов, присутствие которых сокращает срок хранения корма.A method is proposed for obtaining feed from sunflower husk (SU 1090322, 1984) by hydrolysis of husk with sulfuric acid 70-75% at impregnation module 1: (0.01-0.1), followed by neutralization of the hydrolyzate with alkaline waste of the fat and oil industry (waste bleaching clay and soap stock ). The feed obtained in this way contains 22-34% of easily digestible carbohydrates. The disadvantage of this method is the use of sulfuric acid for hydrolysis, as well as a low protein content with a significant amount of lipids, the presence of which reduces the shelf life of the feed.

Также известен способ получения кормовой добавки для животных и птиц (RU 2053687, 1996), которая состоит (мас. %) из шрота (9,0-19,0), мясокостной муки (4,0-5,0) минеральных добавок (0,78-0,97) и измельченной до 40 мкм лузги (остальное). Примерно четверть состава этой кормовой добавки составляют шрот и мясокостная мука, которые сами по себе являются ценными высокопротеиновыми кормовыми добавками. Основным же недостатком предложенного способа является большой расход измельченной до 40 мкм лузги, так как процесс размола лузги до такого размера энергозатратен, длителен и требует использования специальных дорогостоящих мельниц (шаровые, планетарные или др.). Лузга в данном составе и состоянии имеет питательную ценность 0,37 кормовых единиц, сама же добавка может быть использована для замены в комбикормах 20% зернофуража.Also known is a method for producing a feed additive for animals and birds (RU 2053687, 1996), which consists (wt%) of meal (9.0-19.0), meat and bone meal (4.0-5.0), mineral additives ( 0.78-0.97) and husk crushed to 40 microns (the rest). About a quarter of the composition of this feed additive is made up of meal and meat and bone meal, which in themselves are valuable high-protein feed additives. The main disadvantage of the proposed method is the high consumption of husk crushed to 40 microns, since the process of grinding the husk to this size is energy-intensive, time-consuming and requires the use of special expensive mills (ball, planetary, etc.). Husk in this composition and condition has a nutritional value of 0.37 feed units, the additive itself can be used to replace 20% of grain forage in mixed feed.

Другой способ утилизации подсолнечной лузги (RU 2120765, 1998), предназначенный для получения кормового продукта для жвачных животных, заключается в термообработке лузги при добавлении аммиака в количестве 1-2% от массы лузги при 65-75°С в течение 18-20 ч. Это позволяет получать кормовой продукт повышенной питательной ценности (0,41-0,55 кормовых единиц в 1 кг), но с низким содержанием белка (не более 20%).Another method for the disposal of sunflower husk (RU 2120765, 1998), designed to obtain a feed product for ruminants, consists in heat treatment of the husk with the addition of ammonia in an amount of 1-2% of the husk mass at 65-75 ° C for 18-20 hours. This allows you to get a feed product of increased nutritional value (0.41-0.55 feed units per 1 kg), but with a low protein content (no more than 20%).

Существует ряд способов получения различных белковых добавок из подсолнечного шрота (RU 2268613, 2006; RU 2340203, 2008). Большинство этих способов предусматривают экстракцию белка из подсолнечного шрота с последующим его неоднократным осаждением и сушкой. Себестоимость таких продуктов получается довольно высокой.There are a number of ways to obtain various protein supplements from sunflower meal (RU 2268613, 2006; RU 2340203, 2008). Most of these methods involve the extraction of protein from sunflower meal, followed by its repeated precipitation and drying. The cost of such products is quite high.

Известны также способы получения кормовых добавок для сельскохозяйственных животных на основе мицелиального гриба Trichoderma viride (RU 2499417, 2013; RU 2518305, 2014). В качестве субстрата для культивирования гриба используют подсолнечную лузгу, предварительно экструдированную при 110-130°С, смешанную с отрубями или свекловичным жомом и суслом. Основным недостатком приведенных способов является длительность процесса культивирования мицелиальных грибов (6-8 сут). Так как культивирование осуществляют поверхностным способом, данный способ культивирования требует наличия специально оборудованных производственных площадей.There are also known methods of producing feed additives for farm animals based on the filamentous fungus Trichoderma viride (RU 2499417, 2013; RU 2518305, 2014). As a substrate for the cultivation of the fungus, sunflower husks are used, pre-extruded at 110-130 ° C, mixed with bran or beet pulp and wort. The main disadvantage of these methods is the duration of the cultivation process of filamentous fungi (6-8 days). Since the cultivation is carried out on a surface method, this cultivation method requires specially equipped production areas.

Предложен способ утилизации подсолнечной лузги, отрубей и древесных опилок с получением углеводных гидролизатов и глюкозы в качестве полезного побочного продукта (RU 2645121, 2018). Способ отличается тем, что целлюлозасодержащие отходы измельчают на специально разработанном устройстве, способном обеспечить степень измельчения сырья до 15 мкм, с последующей обработкой размолотого сырья мультиэнзимным комплексом Роксазим G2. Показана возможность использования полученных углеводных гидролизатов в комплексе с источниками азота, фосфора, микроэлементами и витаминами в составе питательной среды для выращивания пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Однако полученная биомасса авторами никак не охарактеризована ни по питательной ценности ни по содержанию в ней белка.A method is proposed for the disposal of sunflower husk, bran and sawdust with the production of carbohydrate hydrolysates and glucose as a useful by-product (RU 2645121, 2018). The method differs in that cellulose-containing waste is crushed on a specially designed device capable of providing the degree of grinding of raw materials up to 15 microns, followed by processing of the crushed raw materials with a multi-enzyme complex Roxazim G2. The possibility of using the obtained carbohydrate hydrolysates in combination with sources of nitrogen, phosphorus, microelements and vitamins in the composition of a nutrient medium for growing baker's yeast Saccharomyces cerevisiae has been shown. However, the biomass obtained by the authors has not been characterized in any way either by its nutritional value or by its protein content.

Известно много способов переработки растительного сырья с повышенным содержанием целлюлозы и лигнина, такого как древесные опилки, солома, стебли лубяных растений, кукурузные початки и др. (RU 2144087, 2000; RU 2518305, 2014; RU 2539144, 2015; RU 2543661, 2015; RU 2545392, 2015; RU 2575616, 2016; RU 2601122, 2016; RU 2666769, 2018), включающих размол, химическое разрушение и ферментативный гидролиз лигноцеллюлозных материалов. Получаемые ферментолизаты, обогащенные смесью легкоперевариваемых моно- и олигосахаридов, используются в дальнейшем как питательные компоненты кормов или как компоненты питательных сред для выращивания различных культур, таких как Saccharomyces cerevisiae, Cellulosimicrobium funkei, Trichosporon mycotoxinivorans, Pichia stipitis или др., способных к биосинтезу белка или спиртовому брожению. Однако все перечисленные способы не лишены недостатков, основным из которых остается невысокое содержание белка в получаемых кормах/невысокий выход спирта. Так, при оптимальных условиях через сутки культивирования содержание сырого протеина в биомассе выращиваемых культур не превышает 32,4-40,0%.There are many methods of processing plant materials with a high content of cellulose and lignin, such as sawdust, straw, bast stems, corn cobs, etc. (RU 2144087, 2000; RU 2518305, 2014; RU 2539144, 2015; RU 2543661, 2015; RU 2545392, 2015; RU 2575616, 2016; RU 2601122, 2016; RU 2666769, 2018), including grinding, chemical destruction and enzymatic hydrolysis of lignocellulosic materials. The resulting fermentolysates, enriched with a mixture of easily digestible mono- and oligosaccharides, are used later as nutritional components of feed or as components of nutrient media for growing various crops, such as Saccharomyces cerevisiae, Cellulosimicrobium funkei, Trichosporon mycotoxinivorans, Pichia stipitis, or other biosynthetic cells. alcoholic fermentation. However, all of the above methods are not without drawbacks, the main of which is the low protein content in the resulting feed / low alcohol yield. So, under optimal conditions, after a day of cultivation, the content of crude protein in the biomass of cultivated crops does not exceed 32.4-40.0%.

Наиболее близким по технической сущности к заявленному способу является патент «Способ получения кормовых дрожжей» (SU 507632, 1976), в котором предусмотрено дополнительное введение целлюлолитических ферментов в питательную среду, содержащую делигнифицированное целлюлозосодержащее растительное сырье (подсолнечную лузгу) и минеральные соли. После этого питательную среду засевают культурой Candida guilliermondii и ведут ферментолиз лузги одновременно с процессом выращивания на ней дрожжей при 37°С в течение 40-48 ч. Однако в биомассе выросшей культуры дрожжей белка накапливается не более 20%.The closest in technical essence to the claimed method is the patent "Method for producing feed yeast" (SU 507632, 1976), which provides for the additional introduction of cellulolytic enzymes into a nutrient medium containing delignified cellulose-containing plant material (sunflower husk) and mineral salts. After that, the nutrient medium is inoculated with a culture of Candida guilliermondii and fermentolysis of the husk is carried out simultaneously with the process of growing yeast on it at 37 ° C for 40-48 hours. However, no more than 20% of the protein accumulates in the biomass of the grown yeast culture.

Недостатком наиболее близкого аналога является низкая питательная ценность полученного продукта, и, в первую очередь, низкое содержание в корме белка.The disadvantage of the closest analogue is the low nutritional value of the resulting product, and, first of all, the low protein content in the feed.

Таким образом, анализируя различные способы получения кормов и кормовых добавок на основе переработки отходов перерабатывающей промышленности, можно сделать вывод либо о повышенной себестоимости предлагаемых кормов либо о недостаточной их питательной ценности, и, в первую очередь, о низком содержании в таких кормах белка.Thus, analyzing various methods of obtaining feed and feed additives based on processing waste from the processing industry, it can be concluded either about the increased cost of the proposed feed or about their insufficient nutritional value, and, first of all, about the low content of protein in such feeds.

Разработанный способ биоконверсии подсолнечной лузги, являющейся отходом масложирового производства, в кормовой продукт с высоким содержанием белка включает стадии измельчения, делигнификации и ферментативный гидролиз (ферментолиз) подсолнечной лузги, отделение жидкого ферментолизата и использование его для культивирования продуцентов белка с последующим сепарированием, плазмолизом и сушкой обогащенной белком биомассы. В результате скрининга продуктивных по белку культур дрожжей на минимальных питательных средах с подсолнечной лузгой отобраны два лучших продуцента, относящиеся к родам Debaryomyces и Kluyveromyces. Инновационность заявленного способа заключается в специально подобранных штаммах, комбинации стадий и условий их проведения, необходимых для биоконверсии подсолнечной лузги в кормовой продукт с высоким до 65% содержанием сырого протеина, из которого истинный белок составляет не менее 80%. Готовый кормовой продукт с высоким содержанием белка может использоваться как самостоятельно, так и в качестве кормовой добавки.The developed method of bioconversion of sunflower husk, which is a waste of fat and oil production, into a feed product with a high protein content includes the stages of grinding, delignification and enzymatic hydrolysis (enzymatic hydrolysis) of sunflower husk, separation of liquid fermentolysate and its use for the cultivation of protein producers with subsequent separation, plasmolysis and enrichment. biomass protein. As a result of screening protein-producing yeast cultures on minimal nutrient media with sunflower husk, two best producers were selected, belonging to the genera Debaryomyces and Kluyveromyces. The innovation of the claimed method lies in specially selected strains, a combination of stages and conditions for their implementation, necessary for the bioconversion of sunflower husk into a feed product with a high content of crude protein up to 65%, of which the true protein is at least 80%. The finished feed product with a high protein content can be used both independently and as a feed additive.

В заявленном способе впервые реализована комбинация методов предобработки отхода масложировых производств, подсолнечной лузги, и отработаны условия ее биоконверсии в кормовой продукт с высоким содержанием белка.In the claimed method, for the first time, a combination of methods for pretreatment of waste from fat and oil industries, sunflower husk is implemented, and the conditions for its bioconversion into a feed product with a high protein content have been worked out.

Задачей изобретения является создание ресурсосберегающей технологии биоконверсии подсолнечной лузги в качественные недорогие корма с высоким содержанием белка. Именно на решение данной проблемы направлено данное изобретение.The objective of the invention is to create a resource-saving technology for bioconversion of sunflower husk into high-quality, inexpensive feed with a high protein content. It is to solve this problem that the present invention is directed.

Технический результат заявляемого изобретения заключается в увеличении содержания белка до 65% в биомассе дрожжей, культивируемых на ферментолизате подсолнечной лузги.The technical result of the claimed invention is to increase the protein content up to 65% in the biomass of yeast cultivated on sunflower husk fermentolysate.

Технический результат изобретения достигается тем, что способ переработки подсолнечной лузги, отхода масложирового производства, в кормовой продукт с высоким содержанием белка, согласно изобретению предусматривает последовательные стадии измельчения, делигнификации и ферментолиза подсолнечной лузги, отделения жидкого ферментолизата и культивирования его продуктивных по белку культур дрожжей с последующим сепарированием, плазмолизом и сушкой обогащенной белком биомассы, при этом для делигнификации из лузги готовят 10-15% суспензию, в которой в качестве дисперсионной среды используют 2-6% раствор гидроксида натрия, полученную суспензию выдерживают при температуре 125-130°С в течение 30-60 мин, а ферментолиз делигнифицированной лузги проводят целлюлолитическим ферментом из расчета 30-60 единиц целлюлазной активности (ед. ЦлС) на 1 г сухой делигнифицированной лузги в течение 18-24 ч, в качестве продуктивных по белку культур дрожжей используют культуры Debaryomyces hansenii или Kluyveromyces marxianus.The technical result of the invention is achieved by the fact that the method of processing sunflower husks, waste of fat and oil production, into a feed product with a high protein content, according to the invention, provides for successive stages of grinding, delignification and enzymolysis of sunflower husks, separation of liquid fermentolysate and cultivation of its protein-producing yeast cultures, followed by separation, plasmolysis and drying of protein-enriched biomass, while for delignification a 10-15% suspension is prepared from husk, in which a 2-6% sodium hydroxide solution is used as a dispersion medium, the resulting suspension is kept at a temperature of 125-130 ° C for 30 -60 min, and the enzymatic lysis of delignified husk is carried out with a cellulolytic enzyme at the rate of 30-60 units of cellulase activity (units of CLS) per 1 g of dry delignified husk for 18-24 hours, Debaryomyces hansenii or Kluyveromyce cultures are used as protein-producing yeast cultures s marxianus.

При этом, подсолнечную лузгу могут измельчать до размера частиц не более 100 мкм.At the same time, sunflower husks can be crushed to a particle size of no more than 100 microns.

Дополнительно в полученный фильтрат вносят минеральные соли: NH4H2PO4, KH2PO4, MgSO4.Additionally, mineral salts are added to the resulting filtrate: NH 4 H 2 PO 4 , KH 2 PO 4 , MgSO 4 .

Подсолнечную лузгу подсушивают до влажности не более 8%, подвергают измельчению до размера частиц не более 100 мкм и для делигнификации из лузги готовят 10-15% суспензию, в которой в качестве дисперсионной среды используют 2-6% раствор гидроксида натрия, полученную суспензию выдерживают при температуре 125-130°С в течение 30-60 мин. После выдержки суспензию охлаждают, доводят рН до 4,5-5,5 и фильтруют. Полученный фильтрат может служить источником фитомеланов, а твердый осадок суспендируют до изначального объема и подвергают ферментативному гидролизу. Ферментативный гидролиз делигнифицированной лузги проводят целлюлолитическим ферментом из расчета 30-60 единиц целлюлазной активности (ед. ЦлС) на 1 г сухой делигнифицированной лузги в течение 18-24 ч. Полученный фильтрат ферментативного гидролиза, содержащий сухих веществ 6-8%, из которых редуцирующие вещества составляют 40-55%, используют для промышленного культивирования дрожжей. В качестве продуктивных по белку культур дрожжей используют культуры Debaryomyces hansenii или Kluyveromyces marxianus.Sunflower husks are dried to a moisture content of no more than 8%, subjected to grinding to a particle size of no more than 100 microns and for delignification a 10-15% suspension is prepared from the husk, in which a 2-6% sodium hydroxide solution is used as a dispersion medium, the resulting suspension is kept at temperature 125-130 ° С for 30-60 minutes. After holding, the suspension is cooled, the pH is adjusted to 4.5-5.5 and filtered. The resulting filtrate can serve as a source of phytomelans, and the solid precipitate is suspended to its original volume and subjected to enzymatic hydrolysis. Enzymatic hydrolysis of delignified husk is carried out with a cellulolytic enzyme at the rate of 30-60 units of cellulase activity (units of CLS) per 1 g of dry delignified husk for 18-24 hours.The resulting filtrate of enzymatic hydrolysis, containing dry matter 6-8%, of which reducing substances make up 40-55%, used for industrial cultivation of yeast. Debaryomyces hansenii or Kluyveromyces marxianus cultures are used as protein-producing yeast cultures.

Ферментолиз проводят препаратами целлюлолитических ферментов, такими как ЦеллоЛюкс-F (ООО ПО «Сиббиофарм»), Целлюкласт 1,5 Л (АО «Новозаймс А/С»), Ровабио (ООО «Адиссео Евразия») или другими аналогичного действия из расчета 30-60 единиц целлюлазной активности (ед. ЦлС) на 1 г сухой делигнифицированной лузги при оптимальных условиях действия (рН 4,5-5,5; 45-55°С) в течение 18-24 ч. Полученный фильтрат ферментолизата, содержащий сухих веществ 6-8%, из которых редуцирующие вещества составляют 40-55%, используют для промышленного культивирования дрожжей.Fermentolysis is carried out with cellulolytic enzyme preparations such as CelloLux-F (OOO PO Sibbiopharm), Celluklast 1.5 L (JSC Novozymes A / S), Rovabio (OOO Adisseo Eurasia) or others of a similar action at the rate of 30- 60 units of cellulase activity (CLS units) per 1 g of dry delignified husk under optimal operating conditions (pH 4.5-5.5; 45-55 ° C) for 18-24 hours. The resulting fermentolysate filtrate containing dry substances 6 -8%, of which reducing substances make up 40-55%, is used for industrial cultivation of yeast.

Для обогащения фильтрата в него можно вносить минеральные соли: NH4H2PO4; KH2PO4; MgSO4.To enrich the filtrate, mineral salts can be added to it: NH 4 H 2 PO 4 ; KH 2 PO 4 ; MgSO 4 .

В качестве посевного материла (5-10% к объему) используют 20-часовые культуры дрожжей Debaryomyces hansenii или Kluyveromyces marxianus, выращенные на жидкой глюкозо-пептонной среде.As inoculum (5-10% by volume), 20-hour cultures of the yeast Debaryomyces hansenii or Kluyveromyces marxianus, grown in liquid glucose-peptone medium, are used.

D. hansenii относят к факультативным психрофилам, его оптимальная температура роста составляет (25-27)°С, тогда как K. marxianus является мезофилом с оптимумом роста при (38-40)°С. Культивирование проводят в аэробных условиях в ферментерах при поддержании следующих условий: рН-статирование 4,5-5,5 (в качестве титранта используют раствор аммиака 10%); расход воздуха - 1 об/об питательной среды в мин; скорость вращения мешалки - от 300 до 600 об/мин. Собранную на стационарной фазе роста (18-24 ч) культуральную жидкость подвергают 2-х ступенчатому сепарированию, дрожжевую биомассу - плазмолизу и сушке.D. hansenii is referred to as facultative psychrophiles, its optimum growth temperature is (25-27) ° C, while K. marxianus is a mesophil with an optimum growth at (38-40) ° C. The cultivation is carried out under aerobic conditions in fermenters while maintaining the following conditions: pH-statisation of 4.5-5.5 (10% ammonia solution is used as a titrant); air consumption - 1 rev / rev of the nutrient medium per min; stirrer rotation speed - from 300 to 600 rpm. The culture liquid collected at the stationary growth phase (18-24 h) is subjected to a 2-stage separation, the yeast biomass is subjected to plasmolysis and drying.

В ходе культивирования дрожжами потребляется сухих веществ 55-65%, съем биомассы составляет 25-35 г сухих дрожжей с 1 дм3 питательной среды. В биомассе дрожжей накапливается до 65% сырого протеина в пересчете на абсолютно сухой вес (АСВ).During cultivation, dry matter is consumed by the yeast 55-65%, the removal of biomass is 25-35 g of dry yeast from 1 dm 3 of the nutrient medium. Yeast biomass accumulates up to 65% of crude protein in terms of absolute dry weight (ACB).

Пример 1Example 1

Подсолнечную лузгу с влажностью 6% измельчают на роторно-ударной мельнице, в результате чего 95% полученных частиц имеют размер менее 70 мкм. Готовят суспензию лузги при гидромодуле 1:8,5, использовав в качестве дисперсионной среды раствор гидроксида натрия 6%, выдерживают при 121°С в течение 1 ч. Суспензию нейтрализуют, в качестве ферментного препарата используют ЦеллоЛюкс-F (ООО ПО «Сиббиофарм») с активностью 2000 ед. ЦлС/г. Для ферментолиза используют ферментный препарат из расчета 3% по отношению к массе лузги (60 ед. ЦлС/гАСВ). Ферментолиз ведут при рН 5,0; 50°С; при постоянном перемешивании в течение 20 ч. Ферментолизат содержит сухих веществ 8%, из которых редуцирующие вещества составляют 53%. К фильтрату ферментолизата добавляют дрожжевой экстракт и минеральные соли, полученную ферментационную среду засевают посевным материалом Debaryomyces hansenii Y-3863 (коллекция Национального биоресурсного центра всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов НИЦ «Курчатовский институт»). Культивирование ведут в лабораторном ферментере с полным объемом 0,5 дм3, объем заполнения средой - 0,3 дм3. Отработаны следующие условия культивирования: расход воздуха 0,3 дм3/мин; скорость мешалки - 600 об/мин, термостатирование (25-27)°С; рН-статирование 5,0 (в качестве раствора для подержания рН используют раствор аммиака 10%), продолжительность культивирования - 18 ч. Полученную биомассу отделяют от культуральной жидкости центрифугированием при 5000 об/мин в течение 20 мин, биомассу промывают водопроводной водой при гидромодуле 1:5 и повторно центрифугируют. Сушку биомассы осуществляют в вакуум-сушильном шкафу при 45-50°С. В результате получают сухих дрожжей 37 г/дм3 с содержанием сырого протеина 68%, истинного белка - 55%.Sunflower husks with a moisture content of 6% are ground in a rotary impact mill, as a result of which 95% of the resulting particles have a size of less than 70 microns. A husk suspension is prepared at a hydromodule of 1: 8.5, using a 6% sodium hydroxide solution as a dispersion medium, kept at 121 ° C for 1 hour. The suspension is neutralized, CelloLux-F is used as an enzyme preparation (OOO PO Sibbiopharm) with an activity of 2000 units. CLS / g. For enzymolysis, an enzyme preparation is used at the rate of 3% in relation to the husk mass (60 units of CLS / gASV). Fermentolysis is carried out at pH 5.0; 50 ° C; with constant stirring for 20 hours. The fermentolysate contains dry matter of 8%, of which reducing substances are 53%. Yeast extract and mineral salts are added to the fermentolysate filtrate, the resulting fermentation medium is inoculated with the inoculum Debaryomyces hansenii Y-3863 (collection of the National Bioresource Center, All-Russian collection of industrial microorganisms, NRC "Kurchatov Institute"). The cultivation is carried out in a laboratory fermenter with a total volume of 0.5 dm 3 , the volume of filling with the medium is 0.3 dm 3 . The following cultivation conditions have been worked out: air consumption 0.3 dm 3 / min; stirrer speed - 600 rpm, temperature control (25-27) ° С; pH-statisation 5.0 (10% ammonia solution is used as a solution to maintain pH), cultivation time - 18 hours.The resulting biomass is separated from the culture liquid by centrifugation at 5000 rpm for 20 minutes, the biomass is washed with tap water at hydromodule 1 : 5 and re-centrifuged. Drying of biomass is carried out in a vacuum drying oven at 45-50 ° C. As a result, dry yeast is obtained 37 g / dm 3 with a crude protein content of 68%, a true protein content of 55%.

Пример 2Example 2

Технологический процесс ведут аналогично примеру 1, но в качестве дрожжевой культуры используют Kluyveromyces marxianus Y-4570 (коллекция Национального биоресурсного центра всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов НИЦ «Курчатовский институт»), культивирование проводят при (38-40)°С. Выход сухих дрожжей составляет 32 г/дм3, содержание сырого протеина - 65%, истинного белка - 52%.The technological process is carried out similarly to example 1, but Kluyveromyces marxianus Y-4570 is used as a yeast culture (collection of the National Bioresource Center, All-Russian collection of industrial microorganisms NRC "Kurchatov Institute"), cultivation is carried out at (38-40) ° C. The yield of dry yeast is 32 g / dm 3 , the crude protein content is 65%, the true protein content is 52%.

Пример 3Example 3

Технологический процесс ведут аналогично примеру 1, но изменяют условия предобработки и ферментативного гидролиза подсолнечной лузги. Готовят суспензию лузги при гидромодуле 1:8,5, используя в качестве дисперсионной среды раствор гидроксида натрия 2%, выдерживают при 121°С в течение 1 ч. Суспензию нейтрализуют, в качестве ферментного препарата используют Ровабио (ООО «Адиссео Евразия») с активностью 2000 ед. ЦлС/г. Для ферментолиза используют ферментный препарат из расчета 3% по отношению к массе лузги (60 ед. ЦлС/гАСВ). Ферментолиз ведут при рН 5,0; 50°С; при постоянном перемешивании в течение 20 ч. Ферментолизат содержит сухих веществ 6%, из которых редуцирующие вещества составляют 48%. При культивировании Kluyveromyces marxianus Y-4570 получают сухих дрожжей 27 г/дм3, содержание сырого протеина - 63%, истинного белка - 54%.The technological process is carried out analogously to example 1, but the conditions for pretreatment and enzymatic hydrolysis of sunflower husk are changed. A husk suspension is prepared at a hydromodule of 1: 8.5, using a 2% sodium hydroxide solution as a dispersion medium, kept at 121 ° C for 1 hour. The suspension is neutralized, Rovabio (LLC Adisseo Eurasia) with activity 2000 units CLS / g. For enzymolysis, an enzyme preparation is used at the rate of 3% in relation to the husk mass (60 units of CLS / gASV). Fermentolysis is carried out at pH 5.0; 50 ° C; with constant stirring for 20 hours. The fermentolysate contains 6% dry matter, of which reducing substances are 48%. During the cultivation of Kluyveromyces marxianus Y-4570 dry yeast is obtained 27 g / dm 3 , the content of crude protein - 63%, true protein - 54%.

Пример 4Example 4

Технологический процесс ведут аналогично примеру 1, но используют ферментный препарат Целлюкласт 1,5 Л (АО «Новозаймс А/С»). Для ферментолиза используют ферментный препарат из расчета 5% по отношению к массе лузги (50 ед. ЦлС/гАСВ). Ферментолизат содержит сухих веществ 6,5%, из которых редуцирующие вещества составляют 40%. При культивировании Kluyveromyces marxianus Y-4570 получают сухих дрожжей 25 г/дм3, содержание сырого протеина составляет 65%, истинного белка - 57%.The technological process is carried out analogously to example 1, but using the enzyme preparation Celluclast 1.5 L (JSC Novozymes A / S). For fermentolysis, an enzyme preparation is used at the rate of 5% in relation to the husk mass (50 units of CLS / gASV). Fermentolysate contains dry matter 6.5%, of which reducing substances are 40%. During the cultivation of Kluyveromyces marxianus Y-4570 dry yeast is obtained 25 g / dm 3 , the content of crude protein is 65%, true protein - 57%.

Таким образом, предлагаемое изобретение позволяет увеличить содержание белка в кормовых дрожжах, полученных на ферментолизате подсолнечной лузги, до 57%, что по сравнению с аналогами в 1,5-2 раза больше, чем в аналогичных изобретениях. Тем самым достигается заявленный технический результат накопления в дрожжевой биомассе до 65% сырого протеина и до 57% истинного белка.Thus, the proposed invention makes it possible to increase the protein content in fodder yeast obtained on the fermentolysate of sunflower husk, up to 57%, which is 1.5-2 times more than in analogous inventions compared to analogues. Thus, the claimed technical result of the accumulation in yeast biomass of up to 65% of crude protein and up to 57% of true protein is achieved.

Claims (1)

Способ биоконверсии подсолнечной лузги, отхода масложирового производства, в кормовой продукт с высоким содержанием белка, характеризующийся тем, что предусматривает измельчение, делигнификацию и ферментолиз подсолнечной лузги, отделение жидкого ферментолизата и культивирование на нем продуктивных по белку штаммов дрожжей с последующим сепарированием, плазмолиз и сушку обогащенной белком биомассы, при этом подсолнечную лузгу измельчают до размера частиц 80 - 100 мкм, для делигнификации из лузги готовят 10-15%-ную суспензию, в которой в качестве дисперсионной среды используют 2-6%-ный раствор гидроксида натрия, полученную суспензию выдерживают при температуре 125 - 130°С в течение 30 - 60 мин, а ферментолиз делигнифицированной лузги проводят препаратами целлюлолитических ферментов из расчета 30 - 60 единиц целлюлазной активности (ед. ЦлС) на 1 г сухой делигнифицированной лузги в течение 18 - 24 ч, в качестве продуктивных по белку культур дрожжей используют штамм Debaryomyces hansenii Y-3863 или Kluyveromyces marxianus Y-4570.A method of bioconversion of sunflower husk, waste of fat and oil production, into a feed product with a high protein content, characterized by the fact that it provides for grinding, delignification and enzymolysis of sunflower husk, separation of liquid fermentolysate and cultivation of protein-producing yeast strains on it, followed by separation, enriched plasmolysis and drying protein of biomass, while the sunflower husk is crushed to a particle size of 80-100 microns, for delignification a 10-15% suspension is prepared from the husk, in which a 2-6% sodium hydroxide solution is used as a dispersion medium, the resulting suspension is kept at temperature of 125 - 130 ° С for 30 - 60 minutes, and the enzymatic lysis of delignified husk is carried out with preparations of cellulolytic enzymes at the rate of 30 - 60 units of cellulase activity (units of CLS) per 1 g of dry delignified husk for 18 - 24 hours, as productive for the protein of yeast cultures, the strain Debaryomyces hansenii Y- 3863 or Kluyveromyces marxianus Y-4570.
RU2021112214A 2021-04-28 2021-04-28 Method for bioconversion of sunflower husk into feed product with high protein content RU2762425C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021112214A RU2762425C1 (en) 2021-04-28 2021-04-28 Method for bioconversion of sunflower husk into feed product with high protein content

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021112214A RU2762425C1 (en) 2021-04-28 2021-04-28 Method for bioconversion of sunflower husk into feed product with high protein content

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2762425C1 true RU2762425C1 (en) 2021-12-21

Family

ID=80039038

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021112214A RU2762425C1 (en) 2021-04-28 2021-04-28 Method for bioconversion of sunflower husk into feed product with high protein content

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2762425C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115211490A (en) * 2022-06-16 2022-10-21 武汉新华扬生物股份有限公司 Kluyveromyces marxianus culture and preparation method and application thereof

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU507632A1 (en) * 1974-03-28 1976-03-25 Воронежский технологический институт The method of obtaining fodder yeast
FR2390112A1 (en) * 1977-05-11 1978-12-08 Heesen Nv Simon ANIMAL FOOD PROCESSING APPARATUS
RU2140449C1 (en) * 1998-02-24 1999-10-27 Колесов Александр Иванович Method of biologically converting vegetable material
RU2163076C1 (en) * 1999-12-27 2001-02-20 ОАО "Научно-исследовательский институт комплексных проблем машиностроения для животноводства и кормопроизводства" Method and apparatus for biological conversion of plant wastes

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU507632A1 (en) * 1974-03-28 1976-03-25 Воронежский технологический институт The method of obtaining fodder yeast
FR2390112A1 (en) * 1977-05-11 1978-12-08 Heesen Nv Simon ANIMAL FOOD PROCESSING APPARATUS
RU2140449C1 (en) * 1998-02-24 1999-10-27 Колесов Александр Иванович Method of biologically converting vegetable material
RU2163076C1 (en) * 1999-12-27 2001-02-20 ОАО "Научно-исследовательский институт комплексных проблем машиностроения для животноводства и кормопроизводства" Method and apparatus for biological conversion of plant wastes

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115211490A (en) * 2022-06-16 2022-10-21 武汉新华扬生物股份有限公司 Kluyveromyces marxianus culture and preparation method and application thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Nasseri et al. Single cell protein: production and process
US20030044951A1 (en) Bio-reaction process and product
CN110384177B (en) A method for preparing yeast culture based on liquor lees and its application in animal feed
WO2000004180A1 (en) Bio-reaction process and product
CN104844468B (en) A kind of environment-protective process processing Threonine Fermentation mother liquor
RU2613493C2 (en) Method of production of protein-vitamin additive of starch-containing grain raw material
EP3308652B1 (en) Method for concentrating protein in grain powder
CN111345395A (en) Production method of fiber-containing ruminant fermented feed
CAHYANI Effects of supplementation with phosphorus, calcium and manganese during oil palm frond fermentation by Phanerochaete chrysosporium on ligninase enzyme activity
CN100535104C (en) Method for preparing feedstuff yeast from maize peel hydrolysis solution
CN1072450C (en) Method for producing livestock and poultry feed by utilizing molasses alcohol waste liquor and bagasse or plant straws in sugar mill
Ahmed et al. Production of microbial biomass protein by sequential culture fermentation of Arachniotus sp. and Candida utilis
Abdel-Azeem et al. Bioconversion of lignocellulosic residues into single-cell protein (SCP) by Chaetomium
RU2762425C1 (en) Method for bioconversion of sunflower husk into feed product with high protein content
CN102860413A (en) Nutritive feed and preparation method thereof
Berikashvili et al. Integrated Process for Mycoprotein and Enzyme Production during Solid-State Fermentation of Lignocellulosic Materials Using Medicinal Mushrooms
CN114532444A (en) Fibrous thallus protein feed and preparation method thereof
CN114703237A (en) Fermentation and utilization method of straw based on acid-base composite treatment and full utilization of substrate
CN101054558A (en) Method for preparing feedstuff yeast from maize peel hydrolysis sugar solution after extracting xylose
Kahil et al. Economic co-production of cellulase and αamylase by fungi grown on agro-industrial wastes using solid-state fermentation conditions
CN119791194A (en) A kind of bamboo powder fermented feed rich in amino acids and preparation method thereof
RU2704281C1 (en) Method for producing fodder microbiological protein
CN118020864A (en) Protein feed capable of replacing fish meal and preparation method thereof
RU2391859C2 (en) Method of protein-vitamin fodder production
RU2701643C1 (en) Method of producing bioethanol from cellulose-containing material