RU2854366C2 - БЕНЗО[b]СЕЛЕНОФЕНОВЫЙ STING РЕГУЛИРУЮЩИЙ АГЕНТ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к области фармацевтики и, в частности, относится к бензо[b]селенофеновому STING регулирующему агенту, представленному общей формулой (I), его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли, способам его получения и применению. В формуле (I) значения переменных следующие: R¹ представляет собой Н; R² выбран из Н, OR⁶; R³ выбран из Н, OR⁶; или R² и R³, вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5-членный гетероцикл, содержащий два члена, выбранных из О; R⁴ представляет собой Н; R⁵ представляет собой Н; R⁶ на одном и том же атоме являются идентичными или различными, R⁶ на разных атомах являются идентичными или различными, и каждый R⁶ независимо выбран из Н, C1-C6 алкила; X¹ представляет собой С(О); X² представляет собой (С(R⁷)₂)_(1-3); R⁷ на одном и том же атоме являются идентичными или различными, R⁷ на разных атомах являются идентичными или различными, и каждый R⁷ независимо выбран из Н, C₁-C₆ алкила, или С₃-С₆ циклоалкила; или два R⁷ на разных атомах углерода вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 3-6-членное кольцо; и X³ выбран из COOR⁶, C(O)N(R⁶)₂, C(O)NHOH, где R² и R³ не могут быть оба Н. Предложенное соединение активирует путь cGAS-STING и может применяться в качестве иммуномодулятора для эффективной активации собственных путей иммунорегуляции с целью уничтожения опухолевых клеток. 8 н. и 1 з.п. ф-лы, 3 табл., 28 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к области фармацевтики, в частности к производному бензо[b]селенофена, его фармацевтически приемлемой соли и медицинскому применению.

УРОВЕНЬ

Иммунотерапия рака лечит рак, задействуя собственную иммунную систему организма для атаки и удаления опухолевых клеток. Появление иммунотерапии дало превосходные терапевтические результаты и совершенно новые исследовательские идеи для лечения опухолей, и было названо журналом Science самым важным научным прорывом 2013 года (Science. 2015, 348, 56-61). Блокада контрольных точек иммунитета и Т-клеточная терапия химерными антигенными рецепторами являются мощными терапевтическими средствами для больных раком и получили широкое внимание (Drug Discov Today. 2020, 25, 230-237).

В последние годы путь cGAS-STING был признан важной потенциальной мишенью для иммунотерапии опухолей. Во-первых, путь cGAS-STING относится к рецепторам распознавания структур, которые являются важной частью регуляции врожденного иммунитета in vivo (Nature. 2016, 535, 65-74). Он играет роль в иммунном ответе, захватывая и распознавая аномальную цитоплазматическую ДНК, активируя нижестоящие сигнальные пути и регулируя экспрессию интерферона I типа. Этот сигнальный путь инициируется активацией циклической GMP-AMP-синтазы. cGAS представляет собой внутриклеточный ДНК-рецептор, который может индуцировать аллостерические белки cGAS путем связывания с цитоплазматической ДНК и катализировать синтез циклического гуанозинмонофосфата (2'-3' cGAMP) из колец АТР и GTP (Nat. Immunol. 2016, 17, 1142-1149). cGAMP в качестве вторичного мессенджера связывается со стимулятором рецепторов эндоплазматического ретикулума генов интерферона (STING) и активирует STING. Впоследствии рецепторный белок STING подвергается серии аллостеризма и замещения и в конечном итоге рекрутирует киназу TBK1 на голгиосоме, которая фосфорилирует нижестоящие цитокины IRF3 и NF-кВ (Curr. Opin. Cell Biol. 2019, 59, 1-7). Фосфорилированные цитокины могут проникать в ядро, чтобы регулировать экспрессию нижестоящих генов интерферона I типа и секрецию интерферона I типа, который, в свою очередь, регулирует иммунный ответ (Nature. 2019, 567, 394-398).

Путь cGAS-STING как важный путь регуляции иммунного ответа in vivo тесно связан со многими заболеваниями. В предыдущих исследованиях чрезмерная активация пути cGAS-STING рассматривалась как один из триггеров различных хронических воспалений и аутоиммунных заболеваний (Cell Mol. Immunol. 2019, 16, 236-241). Однако, с другой стороны, возбуждение этого пути рассматривается как важная мишень для иммунотерапии опухолей, основанной на сильной способности cGAS влиять на иммунный ответ (J. Hematol. Oncol. 2019, 12, 35). В пути cGAS-STING трансмембранный рецептор STING является наиболее важным узлом регуляции этого пути. Поэтому разработка нового поколения препаратов, способных возбуждать рецептор STING, играет важную роль в повышении эффективности существующей иммунотерапии опухолей. На доклинических моделях опухолей на мышах агонисты STING демонстрируют высокую противоопухолевую активность, которая может полностью ингибировать рост опухоли и полностью удалять опухоли (Nature. 2018, 564, 439-443; Science. 2020, 369, eaba6098; Science. 2020, 369, 993-999).

На сегодняшний день агонисты STING были разработаны рядом фармацевтических компаний, включая ADU-S100 от Novartis, МК-1454 от Merck и т.д., и многие из агонистов STING успешно прошли клинические испытания. Клиническая разработка агонистов STING в настоящее время находится на начальном этапе, и люди надеются разработать новое поколение эффективного и низкотоксичного регулятора STING, который демонстрирует превосходный эффект и функцию, а также хорошую фармакокинетическую абсорбционную активность.

СУЩНОСТЬ

Настоящее изобретение направлено на поиск противоопухолевого соединения-кандидата, имеющего новую структуру, высокую активность, небольшой побочный эффект и хорошие свойства метаболизма лекарственного средства. Эти соединения используются отдельно или в комбинации с другими противоопухолевыми препаратами, что позволяет повысить эффективность существующих противоопухолевых препаратов и снизить дозу и токсичность.

В настоящем изобретении раскрыто соединение общей формулы (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль,

где

R¹ выбран из Н, галогена, циано, нитро, OR⁶, N(R⁶)₂, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ галогеналкила, С₁-С₆ алкила, замещенного OR⁶, или С₁-С₆ алкила, замещенного N(R⁶)₂;

R² выбран из Н, галогена, циано, нитро, OR⁶, SR⁶, N(R⁶)₂, COOR⁶, C(O)N(R⁶)₂, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ алкила, замещенного OR⁶, C₁-C₆ алкила, замещенного N(R⁶)₂, С₂-С₆ алкенила, С₂-С₆ галогеналкенила, С₂-С₆ алкинила, С₂-С₆ галогеналкинил(енил) или С₃-С₆ циклоалкила;

R³ выбран из Н, галогена, циано, нитро, OR⁶, SR⁶, N(R⁶)₂, COOR⁶, C(O)N(R⁶)₂, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ алкила, замещенного OR⁶, C₁-C₆ алкила, замещенного N(R⁶)₂, С₂-С₆ алкенила, C₂-C₆ галогеналкенила, C₂-C₆ алкинил, C₂-C₆ галогеналкинил(енил) или C₃-C₆ циклоалкила;

или R² и R³, вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 5- или 6-членный гетероцикл, включающий один-два члена, выбранных из членов кольца О, S или N.

R⁴ выбран из Н, галогена, циано, нитро, OR⁶, N(R⁶)₂, C₁-C₆ алкила, C₁-C₆ галогеналкила, C₁-C₆ алкила, замещенного OR⁶, или С₁-С₆ алкила, замещенного N(R⁶)₂;

R⁵ выбран из Н, галогена, циано, С₁-С₆ алкила, C₁-C₆ галогеналкила и С₃-С₆ циклоалкила;

R⁶ на одном и том же атоме являются идентичными или различными, и каждый R⁶ независимо выбран из Н, С₁-С₆ алкила, С₁-С₆ галогеналкила, С₃-С₆ циклоалкила, С₃-С₈ гетероциклила или С₅-С₁₀ арила;

X¹ представляет собой С(О);

X² представляет собой (С(R⁷)₂)_(1-3);

R⁷ на одном и том же атоме являются идентичными или различными, R⁷ на разных атомах являются идентичными или различными, и каждый R⁷ независимо выбран из Н, галогена, CN, OR⁶, N(R⁶)₂, С₁-С₆ алкила, C₁-C₆ галогеналкила, С₁-С₆ алкила, замещенного OR⁶, или С₃-С₆ циклоалкила;

или два R⁷ на разных атомах углерода вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 3-6-членное кольцо;

или два R⁷ на одном атоме углерода вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 3-6-членное кольцо; и

X³ выбран из COOR⁶, C(O)N(R⁶)₂, C(O)NHOH, SO₂R⁶, S(O)NR⁶ или С (CF₃)₂OR⁶.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения

R¹ выбран из Н, F, C₁-C₃ алкила или С₁-С₃ галогеналкила, предпочтительно Н и F;

R² выбран из Н, галогена, С₁-С₃ алкила, C₁-C₃ галогеналкила, ОС₁-С₃ алкила, ОС₁-С₃ галогеналкила или -ОН, предпочтительно Н, F, Cl, СН₃, СН₂СН₃, ОСН₃, ОСН₂СН₃, ОСН(СН₃)₂ или OCHF₂;

R³ выбран из Н, галогена, С₁-С₃ алкила, С₁-С₃ галогеналкила, ОС₁-С₃ алкила, ОС₁-С₃ галогеналкила или -ОН, предпочтительно Н, -ОН, F, Cl, СН₃, СН₂СН₃, ОСН3, ОСН₂СН₃, ОСН (СН₃)₂ или OCHF₂;

R⁴ выбран из Н, F, С₁-С₃ алкила или С₁-С₃ галогеналкила, предпочтительно Н и F;

R⁵ выбран из Н, галогена, С₁-С₃ алкила или С₁-С₃ галогеналкила, предпочтительно Н.

X¹ представляет собой С(О);

X² представляет собой CH₂CHR⁷;

Х3 выбран из COOR⁶, C(O)N(R⁶)₂, C(O)NHOH, SO₂R⁶, S(O)NR⁶ или C(CF₃)₂OR⁶, предпочтительно, COOH, COOCH₃, СООСН₂СН₃ и C(O)NHOH;

Каждый R⁶ независимо выбран из Н, С₁-С₃ алкила, С₁-С₃ галогеналкила, С₃-С₆ циклоалкила, С₃-С₈ гетероциклила или С₅-С₁₀ арила;

Каждый R⁷ независимо выбран из Н, F, С₁-С₄ алкила, С₁-С₄ галогеналкила, С₃-С₆ циклоалкила или С₁-С₄ алкила, замещенного ОС₁-С₃, предпочтительно Н, СН₃, СН₂СН₃, СН₂СН₂СН₃, СН(СН₃)₂, СН₂ОСН₃ или циклопропила.

Во втором предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения

R¹ выбран из Н, F, C₁-C₃ алкила или C₁-C₃ галогеналкила, предпочтительно Н и F;

R² выбран из Н, галогена, C₁-C₃ алкила, C₁-C₃ галогеналкила, ОС₁-С₃ алкила, ОС₁-С₃ галогеналкила или -ОН, предпочтительно F, Cl, СН₃, СН₂СН₃, ОСН₃, ОСН₂СН₃, ОСН(СН₃)₂ или OCHF₂;

R³ выбран из Н, галогена, C₁-C₃ алкила, C₁-C₃ галогеналкила, ОС₁-С₃ алкила, ОС₁-С₃ галогеналкила или -ОН, предпочтительно F, Cl, CH₃, CH₂CH₃, ОСН₃, ОСН₂СН₃, ОСН(СН₃)₂ или OCHF₂;

R⁴ выбран из Н, F, С₁-С₃ алкила или С₂-С₃ галогеналкила, предпочтительно Н и F;

R⁵ выбран из Н, галогена, C₁-C₃ алкила или C₁-C₃ галогеналкила, предпочтительно Н.

X¹ представляет собой С(О);

X² представляет собой CHR⁷CHR⁷;

Х³ выбран из COOR⁶, C(O)N(R⁶)₂, C(O)NHOH, SO₂R⁶, S(О)NR⁶ или C(CF₃)₂OR⁶; предпочтительно, COOH, COOCH₃, СООСН₂СН₃ и C(O)NHOH;

Каждый R⁶ независимо выбран из Н, С₁-С₃ алкила, С₁-С₃ галогеналкила, С₃-С₆ циклоалкила, С₃-С₈ гетероциклила или С₅-С₁₀ арила;

Каждый R⁷ независимо выбран из Н, F, С₁-С₄ алкила, С₁-С₄ галогеналкила, С₃-С₆ циклоалкила или С₁-С₄ алкила, замещенного ОС₁-С₃, или два R⁷, вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 3-6-членное кольцо.

В некоторых конкретных случаях, R¹, R⁴ и R⁵ все являются атомами водорода.

В некоторых конкретных случаях, в настоящем изобретении также представлено соединение, представленное в формуле 1-1:

где X² представляет собой CHR⁷CHR⁷;

R⁷ являются идентичными или различными, и каждый R⁷ независимо выбран из Н, галогена, CN, С₁-С6 алкила, С₁-С₆ галогеналкила, C₁-C₆ алкила, замещенного OR⁶, и С₃-С₆ циклоалкила; или два R⁷ на разных атомах углерода, вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 3-6-членное кольцо; и R⁶ независимо выбран из Н, С₁-С₃ алкила, С₁-С₃ галогеналкила, С₃-С₆ циклоалкила, С₃-С₈ гетероциклила или С₅-С₁₀ арила.

Фармацевтически приемлемая соль соединения общей формулы (I) по настоящему изобретению относится к соли, полученной из соединения общей формулы (I) и фармацевтически приемлемого нетоксичного основания, включая неорганическое основание или органическое основание. Соль, полученная из неорганического основания, включает соль алюминия, соль аммония, соль кальция, соль лития, соль магния, соль калия, соль натрия, соль цинка и тому подобное. Особенно предпочтительными являются соль аммония, соль кальция, соль магния, соль калия и соль натрия. Соль, полученная из фармацевтически приемлемого органического нетоксичного основания, включающего первичный амин, вторичный амин и третичный амин. Замещенные амины включают природные замещенные амины, циклические амины и основные анионообменные смолы, например, бетаин, кофеин, холин, N-этилпиперидин, N, N'-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диметиламиноэтанол, аргинин, этаноламин, этилендиамин, N-этилморфолин, глюкозамин, метилглюкозамин, 2-диэтиламиноэтанол, глюкозамин, гистидин, аминоэтанол, гидроксокобаламин, лизин, морфолин, пиперазин, пиперидин, пиперидин, полиаминные смолы, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин, изопропиламин, трометамол и тому подобное.

В настоящем изобретении также предложено конкретное соединение, представленное в любой из структурных формул, или его фармацевтически приемлемая соль.

Другой целью настоящего изобретения является обеспечение способа получения соединения, представленного общей формулой (I).

Когда соединение представляет собой соединение, представленного общей формулой (Ia), соединение общей формулы (IV) получают из соединения общей формулы (II) и соединения общей формулы (III) в щелочной среде посредством реакции замещения, соединение общей формулы (VI) получают из соединения общей формулы (IV) и соединения общей формулы (V) посредством реакции замещения, соединение общей формулы (VII) получают из соединения общей формулы (VI) в щелочной среде посредством реакции внутримолекулярной конденсации, соединение общей формулы (VIII) получают из соединения общей формулы (VII) посредством реакции гидролиза, соединение общей формулы (X) получают из соединения общей формулы (VIII) и соединения общей формулы (IX) посредством реакции конденсации, соединение общей формулы (XII) получают из соединения общей формулы (X) и соединения общей формулы (XI) посредством реакции нуклеофильного замещения, и соединение общей формулы (Ia) получают из соединения общей формулы (XII) посредством реакции гидролитического декарбоксилирования, где путь синтеза соединения общей формулы (Ia) является следующим:

где R², R³ и R⁷ имеют значения, как описано ранее, R⁸ может представлять собой СН₃, СН₂СН₃ и С(СН₃)₃, R⁹ может представлять собой СН₃ и СН₂СН₃, и X может представлять собой Cl, Br и I.

В некоторых более конкретных случаях, каждый из R² и R³ независимо выбран из F, Н, СН₃, СН₂СН₃, ОСН₃, ОСН₂СН₃ и ОСН(СН₃)₂, R³ может представлять собой СН₃, СН₂СН₃ и С(СН₃)₃, R⁷ может представлять собой Н, СН₃, СН₂СН₃, СН₂СН₂СН₃, СН(СН₃)₂, СН₂ОСН₃ и циклопропил, R⁵ может представлять собой СН₃ и СН₂СН₃, и X может представлять собой Cl, Br и I.

В способе получения соединения (IV) из соединения (II), диметилдиселенид (III) служит в качестве реагента, DTT, меркаптоэтанол, карбонат калия и DBU могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и тетрагидрофуран и DMF могут служить в качестве растворителей;

в способе получения соединения (VI) из соединения (IV), этил 2-бромацетат (V) служит в качестве реагента, и DMF может служить в качестве реагента, используемого в реакции;

в способе получения соединения (VII) из соединения (VI), карбонат калия, карбонат натрия и гидроксид натрия могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и DMF и ацетонитрил могут служить в качестве растворителей;

в способе получения соединения (VIII) из соединения (VII), карбонат калия, гидроксид натрия и гидроксид лития могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и вода, метанол и тетрагидрофуран могут служить в качестве реакционных растворителей;

в способе получения соединения (X) из соединения (VIII), монометил малонат калия (IX) служит в качестве реагента, CDI и MgCl₂ могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и тетрагидрофуран и DMF могут служить в качестве реакционных растворителей;

в способе получения соединения (XII) из соединения (X), эфир галоидзамещенной кислоты (XI) служит в качестве реагента, карбонат калия, этоксид натрия и гидрид натрия могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и тетрагидрофуран и DMF могут служить в качестве реакционных растворителей;

в способе получения соединения общей формулы (1а) из соединения (XII), карбонат калия, гидроксид натрия и гидроксид лития могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и хлористоводородная кислота, уксусная кислота, вода и тетрагидрофуран могут служить в качестве реакционных растворителей.

Когда соединение представляет собой соединение, представленное общей формулой (Ib), соединение общей формулы (XIII) получают из соединения общей формулы (VIII) посредством реакции декарбоксилирования, и соединение общей формулы (Ib) получают из соединения общей формулы (XIII) и соединения общей формулы (XIV) посредством ацилирования по Фриделю-Крафтсу, где путь синтеза соединения общей формулы (XIV) является следующим:

R² и R³ имеют значения, как описано ранее, n представляет собой 1, 2, 3 или 4; ив некоторых более конкретных случаях каждый из R² и R³ независимо выбран из F, Cl, СН₃, СН₂СН₃, ОСН₃, ОСН₂СН₃ и ОСН(СН₃)₂, n представляет собой 1, 2, 3 или 4;

в способе получения соединения XIII из соединения (VIII) медный порошок служит в качестве реагента, используемого в реакции, и хинолин служит в качестве реакционного растворителя;

в способе получения соединения общей формулы (Ib) из соединения XIII, янтарный ангидрид (XIV) служит в качестве реагента, трихлорид алюминия, хлорид цинка и тетрахлорид титана служит в качестве реагентов, используемых в реакции, и дихлорметан служит в качестве реакционного растворителя.

В настоящем изобретении предложена лекарственная композиция, включающая активный компонент в эффективной дозе лекарственного средства и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество; и активный компонент включает соединение общей формулы (I) и одну или несколько его фармацевтически приемлемых солей. В лекарственной композиции вспомогательное вещество включает фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель и/или эксципиент.

Лекарственная композиция может быть получена в виде различных типов стандартных лекарственных форм для введения, таких как таблетки, пилюли, порошки, жидкости, суспензии, эмульсии, гранулы, пеллеты, капсулы и инъекционные лекарственные формы (растворы или суспензии) в зависимости от терапевтической цели, предпочтительно, таблетки, капсулы, жидкости, суспензии и инъекционные лекарственные формы (растворы или суспензии).

Соединение по настоящему изобретению можно вводить в клинической практике путем перорального введения, инъекции и другими способами.

В настоящем изобретении также предложено применение соединения, представленного формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтически приемлемой лекарственной композиции для получения лекарственных средств, которые активируют путь cGAS-STING.

В настоящем изобретении также предложено применение соединения, представленного формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтически приемлемой лекарственной композиции для получения лекарственного средства, причем лекарственное средство применяется для лечения заболеваний, связанных с активностью пути STING.

В настоящем изобретении также предложено применение соединения, представленного формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтически приемлемой лекарственной композиции для получения лекарственных средств, которые лечат аутоиммунные заболевания, инфекционные заболевания, рак и предраковые синдромы. Рак включает меланому, рак толстой кишки, рак молочной железы, рак легкого и плоскоклеточный рак.

В настоящем изобретении также предложено применение соединения, представленного формулой или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтически приемлемой лекарственной композиции для получения иммунного адъюванта.

Если не указано иное, следующие термины, используемые в описании и формуле изобретения, имеют значения, указанные ниже.

Термин «алкил» относится к одновалентной насыщенной алифатической алкильной группе с прямой или разветвленной цепью, которая имеет определенное количество атомов углерода. Алкил может быть замещенным или незамещенным. Когда алкил замещен, предпочтительно имеется один или несколько заместителей, более предпочтительно от одного до трех заместителей и наиболее предпочтительно один или два заместителя.

Термин «алкенил» относится к группе с прямой цепью, разветвленной цепью или к циклической группе, и основная цепь содержит неароматичную алкильную группу с указанным числом атомов углерода и по меньшей мере одной двойной связью углерод-углерод. Алкенил включает винил, пропенил, бутенил, 2-метилбутенил, циклогексенил и т.п. Прямая цепь, разветвленная цепь или циклическая часть алкенила может содержать двойную связь, и эта часть может быть замещена, если указана замещенная алкенильная группа.

Термин «алкинил» относится к группе с прямой цепью, разветвленной цепью или к циклической группе, и основная цепь содержит неароматичную алкильную группу с указанным числом атомов углерода и по меньшей мере одной тройной связью углерод-углерод. Алкинил включает ацетенил, пропаргил, бутинил, 3-метилбутинил и т.п. Прямая цепь, разветвленная цепь или циклическая часть алкинила может содержать тройную связь, и эта часть может быть замещена, если указана замещенная алкинильная группа.

Термин «галоген» представляет собой F, Cl, Br или I, предпочтительно F, Cl и Br.

Термин «галогеналкил» относится к алкилу, как определено выше, в котором один или несколько атомов водорода замещены галогеном.

Термин «галогеналкенил» относится к алкенилу, как определено выше, в котором один или несколько атомов водорода замещены галогеном.

Термин «галогеналкинил» относится к алкинилу, как определено выше, в котором один или несколько атомов водорода замещены галогеном.

Термин «циклоалкил» представляет собой группу из одного кольца или конденсированного кольца (указанное «конденсированное» кольцо означает, что каждое кольцо в системе имеет общую пару соседних атомов углерода с другими кольцами в системе), где все члены представляют собой углерод, где один или более колец не имеют полностью связанной n-электронной системы, и примерами циклоалкила являются (не ограничиваясь ими) циклопропан, циклобутан, циклопентан, циклопентен, циклогексан, адамантан, циклогексадиен, циклогептан и циклогептатриен. Циклоалкил может быть замещенным или незамещенным.

Термин «конденсированное кольцо» относится к циклической группе, образованной заместителями у разных атомов в алкане с прямой или разветвленной цепью, или к циклической группе, образованной заместителями у разных атомов в другом кольце.

Термин «гетероциклил» представляет собой насыщенную циклическую группу, содержащую от трех до восьми атомов кольца, в которой один или два атома кольца представляют собой гетероатомы, выбранные из N, О или S(O)_m (где m представляет собой целое число в диапазоне от 0 до 2), а остальные атомы кольца представляют собой С, в котором один или два атома С могут быть необязательно замещены карбонилом.

Термин «арил» представляет собой полностью углеродную моноциклическую или конденсированную полициклическую группу, содержащую от пяти до десяти атомов углерода и имеющую полностью сопряженную п-электронную систему. Неограничивающие примеры арила включают фенил, нафтил и антрил. Арил может быть замещенным или незамещенным.

Настоящее изобретение включает все возможные изомеры и соли рацемов, энантиомеры, диастереоизомеры, таутомеры и их смеси, сольваты и сольватированные соли.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Для более подробного описания настоящего изобретения ниже приводится ряд вариантов его осуществления. Эти варианты осуществления являются полностью иллюстративными, используются только для конкретного описания настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничение настоящего изобретения.

Исходные вещества и оборудование, используемые в вариантах осуществления настоящего изобретения, представляют собой известные продукты и получены путем приобретения коммерчески доступных продуктов.

Стадия 1: Получение 4,5-диметокси-2-(метилселено) бензальдегида (IV-1)

3,14 г DTT (20.4 ммоль), 2,56 г диметилдиселана (III, 13,6 ммоль) и 50 мл DMF добавляли в одногорловую колбу 250 мл и перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре под защитой азота. 5,0 г 2-Бром-4,5-диметоксибензальдегида (II-1) (20,4 ммоль) и 7,76 г DBU (51 ммоль) добавляли в реакционную колбу и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре под защитой азота. Реакцию контролировали с помощью TLC и останавливали после того, как реагент II-1 полностью прореагировал. Реакционную жидкость выливали в 200 мл воды со льдом и выпадало твердое вещество. Проводили фильтрование с отсасыванием, фильтрпрессную лепешку промывали водой и сушили с получением светло-желтого твердого вещества 4,4 6 г с выходом 84%. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=10,19 (с, 1Н), 7,35 (с, 1Н), 7,00 (с, 1Н), 3,99 (с, 3Н), 3,94 (с, 3Н), 2,32 (с, 3Н) ppm. HRMS (ESI⁺): C₁₀H₁₃O₃Se (М+Н)⁺, 261,0024; найдено, 261,0021.

Стадия 2: получение 2-((2-формил-4,5-диметоксифенил)селено) этилацетата (VI-1)

4,0 г соединения IV-1 (15,4 ммоль) и 8,5 мл этилбромацетата (77 ммоль) добавляли в одногорловую колбу 100 мл, и перемешивали при 170°С в течение 4 ч. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реагент IV-1 полностью прореагировал, реакцию останавливали. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, добавляли 30 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали, используя 50 мл этилацетата. Органические слои объединяли, промывали 50 мл воды, промывали 30 мл насыщенного раствора соли, сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и фильтрат выпаривали при пониженном давлении для удаления растворителя с получением коричневого маслянистого вещества, которое непосредственно переносили на следующую стадию реакции без дополнительной очистки. HRMS (ESI⁺): C₁₃H₁₇O₅Se (М+Н)⁺, 333,0236; найдено, 333,0233.

Стадия 3: получение 5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-этилформиата (VII-1)

Соединение VI-1, полученное на предыдущей стадии, добавляли в одногорловую колбу 100 мл, добавляли 7,6 г карбоната калия (55 ммоль) и 25 мл ацетонитрила. Кипячение с обратным холодильником проводили в течение 6 ч. После того как с помощью TLC было обнаружено, что исхоодные вещества полностью прореагировали, нагревание прекращали. Реакционную жидкость подвергали фильтрованию с отсасыванием, выпаривали при пониженном давлении для удаления растворителя, добавляли 50 мл воды и дважды экстрагировали с использованием 40 мл этилацетата. Органические слои объединяли, промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием силикагеля с получением 3,2 г землисто-желтого твердого вещества с общим выходом 46% в две стадии. ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=8,17 (с, 1Н), 7,31 (с, 1Н), 7,28 (с, 1Н), 4,40 (кв, J=7,1 Гц. 2Н), 3,97 (с, 3Н), 3,94 (с, 3Н), 1,41 (т, J=7,1 Гц. 3Н) ppm. HRMS (ESI⁺): рассчитано для C₁₃H₁₄O₄Se (М+Н)⁺ 315,0130; найдено, 315,0124.

Стадия 4: получение 5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-муравьиной кислоты (VIII-1)

3,2 г соединения VII-1, 35 мл тетрагидрофурана и 35 мл метанола добавляли в реакционную колбу 250 мл. Всего 15 мл 2 н водного раствора гидроксида натрия добавляли в реакционную колбу при комнатной температуре и смесь подвергали перемешиванию при 60°С в течение 3 ч. После того как с помощью TLC было установлено, что реакция завершилась, реакционную жидкость концентрировали, рН доводили до 3-4 с помощью 1 н хлористоводородной кислоты, и выпадало твердое вещество. После фильтрования с отсасыванием, фильтрпрессную лепешку промывали водой и сушили с получением светло-желтого твердого вещества 2,9 г с выходом 98%. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=8,28 (с, 1Н), 7,34 (с, 1Н), 7,31 (с, 1Н), 3,98 (с, 3Н), 3,95 (с, 3Н) ppm. HRMS (ESI^-): C₁₁H₉O₄Se (M - H)^-, 284,9672; найдено, 284,9674.

Получение 3-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-3-оксо-пропионовой кислоты этилового эфира (Х-1)

2,9 г соединения VIII-1 (10,1 ммоль), 5,1 г CDI (31,6 ммоль) и 50 мл безводного тетрагидрофуран добавляли в реакционную колбу 100 мл и перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. 5,4 г этил калия малоната (31,6 ммоль) и 3,0 г хлорида магния (31,6 ммоль) добавляли в вышеуказанную реакционную жидкость и продолжали перемешивание в течение 4 ч при комнатной температуре. После того как с помощью TLC было установлено, что реакция завершилась, к реакционной жидкости добавляли 50 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали с использованием 40 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием силикагеля с получением желтого твердого вещества 3,0 г с выходом 84%. ¹H ЯМР (300 МГц, CDC1₃): δ=8,09 (с, 1Н), 7,33 (с, 1Н), 7,30 (с, 1Н), 4,26 (кв, J=7,1 Гц, 2Н), 3,98 (с, 5Н), 3,94 (с, 3Н), 1,30 (т, J=7,1 Гц, 3Н) ppm. HRMS (ESI⁺): C₁₅H₁₇O₅Se (M+H)⁺, 357,0236; найдено, 357,0231.

Стадия 1: получение 2-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-формил) диэтилсукцината (XII-1)

0,17 г соединения Х-1 (0,5 ммоль), 0,14 г карбоната калия (1 ммоль) и 5 мл DMF добавляли в реакционную колбу 100 мл и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. 0,13 г этил 2-бромацетата (0,75 ммоль) и 8 мг йодида калия (0,05 ммоль) добавляли в вышеуказанную реакционную жидкость и продолжали перемешивание в течение 4 ч при комнатной температуре. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реакция завершена, к реакционной жидкости добавляли 20 мл воды и дважды экстрагировали с использованием 20 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали для получения желтого маслянистого вещества, которое непосредственно переносили на следующую стадию реакции без дополнительной очистки. HRMS (ESI⁺): C₁₉H₂₃O₇Se (М+Н)⁺, 443,0604; найдено, 443,0600.

Стадия 2: получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-4-оксобутановой кислоты (I-1)

Соединение XII-1, полученное на предыдущей стадии, 2 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и 2 мл уксусной кислоты добавляли в реакционную колбу 100 мл, и смесь подвергали перемешиванию при 100°С в течение 3 ч. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реагент XII-1 полностью прореагировал, реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, добавляли 20 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали с использованием 20 мл этилацетата, соответственно. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием, и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием силикагеля с получением белого твердого вещества 45 мг с общим выходом 26% в две стадии. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=8,42 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,24 (уш.с, 2Н), 2,57 (уш.с, 2Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,99, 174,14, 150,77, 148,81, 145,06, 137,15, 135,46, 134,61, 109,36, 108,37, 56,24, 56,01, 32,98, 28,49 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₄H₁₃O₅Se (M - H)^-, 340,9934; найдено, 340,9933.

Вариант осуществления 4

Получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (1-2)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 3, соединение I-2 получали с использованием этил 2-бромпропионата вместо этил 2-бромацетата тем же способом синтеза. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,19 (с, 1Н), 8,43 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,51 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,43-3,37 (м, 1Н), 3,11-3,03 (м, 1Н), 2,92-2,85 (м, 1Н), 1,19 (д, J=7,1 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=192,78, 181,10, 150,67, 148,70, 145,30, 138,00, 135,02, 133,08, 108,21, 107,02, 56,17, 56,03, 41,25, 35,18, 17,10 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₅H₁₅O₅Se (M - H)^-, 355,0090; найдено, 355,0091.

Стадия 1: получение (3R)-2-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-формоксил)-3-диэтилметилсукцината (XII-2)

0,17 г соединения Х-1 (0,5 ммоль), 0,14 г карбоната калия (1 ммоль) и 5 мл DMF добавляли в реакционную колбу 100 мл и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. В указанную выше реакционную жидкость добавляли 0,14 г этил (S)-2-хлорпропионата (1 ммоль) и перемешивали в течение ночи при 55°С. Реакцию контролировали с помощью TLC. К реакционной жидкости добавляли 20 мл воды и дважды экстрагировали с использованием 20 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием, и концентрировали для получения желтого маслянистого вещества, которое непосредственно переносили на следующую стадию реакции без дополнительной очистки. HRMS (ESI⁺): C₂₀H₂₅O₇Se (М+Н)⁺, 457,0760; найдено, 457,0758.

Стадия 2: получение R-4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (I-3)

Соединение XII-2, полученное на предыдущей стадии, 2 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и 2 мл уксусной кислоты добавляли в реакционную колбу 100 мл и смесь подвергали перемешиванию при 100°С в течение 3 ч. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реагент XII-2 полностью прореагировал, реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, добавляли 20 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали с использованием 20 мл этилацетата, соответственно. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием, и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали хиральным методом с получением светло-желтого твердого вещества 15 мг с 95% э.и. и общим выходом 9% в две стадии. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,20 (с, 1Н), 8,42 (с, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,51 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,43-3,37 (м, 1Н), 3,08-3,01 (м, 1Н), 2,91-2,84 (м, 1Н), 1,18 (д, J=7,1 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=191,59, 180,78, 151,88, 147,46, 145,55, 138,37, 134,62, 132,20, 108,17, 107,76, 56,19, 55,96, 41,19, 34,84 17,06 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₅H₁₅O₅Se (M - H)^-, 355,0090; найдено, 355,0088.

Вариант осуществления 6

Получение S-4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (I-4)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 5, соединение I-4 19 мг получали из исходного вещества соединения Х-1 с использованием этил (R)-2-хлорпропионата вместо этил (S)-2-хлорпропионата тем же способом синтеза с 95% э.и. и общим выходом 11% в две стадии. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,12 (с, 1Н), 8,42 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,51 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,43-3,37 (м, 1Н), 3,09-3,02 (м, 1Н), 2,91-2,85 (м, 1Н), 1,19 (т, J=6,9 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=192,30, 181,22, 150,92, 147,69, 145,17, 137,61, 135,08, 133,27, 109,03, 107,21, 56,25, 56,08, 42,67, 34,44, 17,25 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₅H₁₅O₅Se (M - H)^-, 355,0090; найдено, 355,0089.

Вариант осуществления 7

Получение 4-(5-метоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (I-5)

В соответствии со способом получения вариантов осуществления 1-3, целевое соединение I-5 получали из исходного вещества 2-бром-5-метоксибензальдегида вместо 2-бром-4,5-диметоксибензальдегида, с помощью реагента этил 2-бромпропионата вместо этил 2-бромацетата, и тем же способом синтеза. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,22 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 8,00 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 7,56 (д, J=2,6 Гц, 1Н), 7,13 (дд, J₁=8,8 Гц, J₂=2,6 Гц, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 3,48-3,39 (м, 1Н), 3,15-3,08 (м, 1Н), 2,96-2,84 (м, 1Н), 1,20 (д, J=7,2 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=194,52, 175,23, 150,69, 146,38, 144,21, 138,17, 135,45, 133,80, 109,24, 107,26, 56,07, 42,31, 37,16, 17,47 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₄H₁₃O₄Se (M - H)^-, 324,9985; найдено, 324,9981.

Вариант осуществления 8

Получение 4-(6-метоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (I-6)

В соответствии со способом получения вариантов осуществления 1-3, целевое соединение I-6 получали из исходного вещества 2-бром-4-метоксибензальдегида вместо 2-бром-4,5-диметоксибензальдегида, с помощью реагента этил 2-бромпропионата вместо этил 2-бромацетата, и тем же способом синтеза. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,19 (с, 1Н), 8,50 (с, 1Н), 7,92 (д, J=8,8 Гц, 1Н), 7,72 (с, 1Н), 7,09 (дд, J₁=8,8 Гц, J₂=2,3 Гц, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,45-3,33 (м, 1Н), 3,12-3,05 (м, 1Н), 2, 92-2, 85 (м, 1Н), 1,19 (д, d=7,2 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,37, 173,79, 150,51, 146,26, 143,35, 138,01, 135,14, 133,06, 110,20, 106,93, 56,15, 41,29, 35,05, 17,20 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₄H₁₃O₄Se (М-Н)^-, 324,9985; найдено, 324,9984.

Вариант осуществления 9

Получение 4-(5-гидроксил-6-метоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (1-7)

В соответствии со способом получения вариантов осуществления 1-3, целевое соединение 1-7 получали из исходного вещества 2-бром-5-гидроксил-4-метоксибензальдегида вместо 2-бром-4,5-диметоксибензальдегида, с помощью реагента этил 2-бромпропионата вместо этил 2-бромацетата, и тем же способом синтеза. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,17 (с, 1Н), 9,34 (с, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 7,63 (с, 1Н), 7,35 (с, 1Н), 3,86 (с, 3Н), 3,42-3,36 (м, 1Н), 3,10-3,02 (м, 1Н), 2,93-2,81 (м, 1Н), 1,18 (д, J=7,2 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=194,42, 174,41, 150,85, 149,87, 147,25, 136,47, 135,91, 133,23, 107,67, 107,05, 56,20, 42,29, 35,83, 18,93 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₄H₁₃O₅Se (М-Н)^-, 340,9934; найдено, 340,9932.

Вариант осуществления 10

Получение 2-метил-4-оксо-4-(селенофен[2',3':4,5]бензо[1,2-d][1,3]диоксо-6-ил)бутановой кислоты (I-8)

В соответствии со способом получения вариантов осуществления 1-3, целевое соединение I-8 получали из исходного вещества 6-бромбензо[1,2-d][1,3]диоксол-5-формальдегида вместо 2-бром-4,5-диметоксибензальдегида, с помощью реагента этил 2-бромпропионата вместо этил 2-бромацетата, и тем же способом синтеза. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,21 (с, 1Н), 8,43 (с, 1Н), 7,67 (с, 1Н), 7,49 (с, 1Н), 6,14 (с, 2Н), 3,43-3,36 (м, 1Н), 3,10-3,03 (м, 1Н), 2,94-2,82 (м, 1Н), 1,19 (д, J=7, 1 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,66, 178,84, 150,75, 146,34, 144,29, 139,23, 135,11, 132,97, 109,24, 107,14, 100,42, 42,81, 34,38, 16,81 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₄H₁₁O₅Se (M-H)^-, 338,9777; найдено, 338,9775.

Вариант осуществления 11

Получение 4-(5-этокси-6-метоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (I-9)

В соответствии со способом получения вариантов осуществления 1-3, целевое соединение I-9 получали из исходного вещества 2-бром-5-этокси-4-метоксибензальдегида вместо 2-бром-4,5-диметоксибензальдегида, с помощью реагента этил 2-бромпропионата вместо этил 2-бромацетата, и тем же способом синтеза. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,20 (с, 1Н), 8,41 (с, 1Н), 7,69 (с, 1H), 7,50 (с, 1H), 4,09 (кв, J=6,9 Гц, 2H), 3,85 (с, 3Н), 3,43-3,37 (м, 1Н), 3,10-3,03 (м, 1Н), 2,92-2,85 (м, 1Н), 1,40 (т, J=6,9 Гц, 3Н), 1,19 (д, J=7,2 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,43, 176,68, 150,50, 147,53, 144,77, 136,75, 135,07, 134,41, 109,84, 108,01, 63,82, 55,79, 40,88, 34,85, 17,10, 14,69 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₆H₁₇O₅Se (M - H)^-, 369,0247; найдено, 369,0244.

Вариант осуществления 12

Получение 4-(5-изопропокси-6-метоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутановой кислоты (I-10)

В соответствии со способом получения вариантов осуществления 1-3, целевое соединение I-10 получали из исходного вещества 2-бром-5-изопропокси-4-метоксибензальдегида вместо 2-бром-4,5-диметоксибензальдегида, с помощью реагента этил 2-бромпропионата вместо этил 2-бромацетата и тем же способом синтеза. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,17 (с, 1Н), 8,41 (с, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 4,61-4,53 (м, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,42-3,34 (м, 1Н), 3,10-3,02 (м, 1Н), 2,92-2,85 (м, 1Н), 1,31 (д, J=6,0 Гц, 6Н), 1,19 (д, J=7,2 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,87, 177,07, 151,93, 146,60, 145,18, 137,40, 135,58, 134,86, 113,04, 108,82, 71,01, 56,26, 41,32, 35,29, 22,22, 17,51 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₇H₁₉O₅Se (M - H)^-, 383,0403; найдено, 383,0401.

Получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-этилбутирата (I-11)

36 мг соединения I-2 (0,1 ммоль) растворяли в 10 мл этанола и в реакционную жидкость по каплям добавляли 24 мг тионилхлорида (0,2 ммоль) на бане со льдом. Реакционную жидкость нагревали до кипения с обратным холодильником и продолжали реакцию в течение 4 ч. После того как с помощью TLC было установлено, что реакция завершилась, реакционную жидкость выпаривали при пониженном давлении для удаления растворителя, добавляли 10 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали с использованием 10 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием, и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием силикагеля с получением целевого соединения I-11 34 мг с выходом 89%. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=8,43 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,51 (с, 1Н), 4,08 (кв, J=7,1 Гц, 2Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,44-3,38 (м, 1Н), 3,19-3,11 (м, 1Н), 2,99-2,88 (м, 1Н), 1,20-1,13 (м, 6Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=192,97, 176,42, 151,13, 146,92, 145,19, 137,61, 135,09, 133,78, 109,95, 107,10, 62,32, 56,12, 55,81, 42,76, 35,28, 17,27, 16,84 ppm. HRMS (ESI⁺): C₁₇H₂₁O₅Se (M+H)⁺, 385,0549; найдено, 385,0548.

Получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-N-гидроксил-2-метил-4-оксо-бутирамида (I-12)

177 мг соединения I-2 (0,5 ммоль) растворяли в 10 мл безводного тетрагидрофурана, добавляли 160 мг CDI (1 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. В реакционную жидкость добавляли 69 мг гидрохлорида гидроксиламина (1 ммоль) и продолжали перемешивать в течение ночи при комнатной температуре. После того как с помощью TLC было установлено, что реакция завершилась, к реакционной жидкости добавляли 10 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали с использованием 15 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной TLC с получением целевого соединения I-12 68 мг с выходом 37%. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=10,38 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,42 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,52 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,46-3,38 (м, 1Н), 3,15-3,06 (м, 1Н), 2,97-2,88 (м, 1Н), 1,19 (д, J=7,2 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,16, 175,48, 150,63, 149,07, 145,72, 137,40, 136,67, 132,81, 107,77, 107,38, 56,15, 56,01, 43,79, 36,94, 19,22 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₅H₁₈NO₅Se (M - H)^-, 370,0199; найдено, 370,0196.

Получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-метил-4-оксо-бутирамида (I-13)

36 мг соединения I-2 (0,1 ммоль) и 15 мг N-метилморфолина (0,15 ммоль) растворяли в 10 мл тетрагидрофурана, и в реакционную жидкость по каплям добавляли 21 мг изобутилхлорформиата (0,15 ммоль) на бане со льдом. После завершения добавления по каплям реакционную жидкость нагревали до комнатной температуры и перемешивали для реакции в течение 1 часа. Реакционную жидкость снова помещали в баню со льдом и по каплям добавляли 0,1 мл водного раствора аммиака. Реакционная жидкость реагировала в течение 4 ч при комнатной температуре. После того как с помощью TLC было установлено, что реакция завершилась, к реакционной жидкости добавляли 10 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали с использованием 15 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью хроматографии на колонке с силикагелем с получением целевого соединения I-13 27 мг с выходом 76%. ¹H ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=8,40 (с, 1Н), 7,68 (с, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,41 (с, 1Н), 6,78 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,39-3,31 (м, 1Н), 2,95-2,82 (м, 2Н), 1,12 (д, J=6,8 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,87, 176,78, 150,33, 148,36, 145,24, 136,76, 135,09, 134,24, 108,28, 107,95, 55,81, 55,59, 41,11, 35,46, 18,20 ppm. HRMS (ESI⁺): C₁₅H₁₈NO₄Se (M+H)⁺, 356,0369; найдено, 356,0366.

Вариант осуществления 16

Получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-этил-4-оксо-бутановой кислоты (I-14)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 3, соединение I-14 получали из исходного вещества соединения Х-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что этил-2-бромацетат был заменен этил-2-бромбутиратом. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,19 (с, 1Н), 8,45 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,51 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,43-3,37 (м, 1Н), 3,11-3,04 (м, 1Н), 2,82-2,73 (м, 1Н), 1,66-1,56 (м, 2Н), 0,95 (т, J=7, 4 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=192,94, 180,36, 150,71, 148,75, 145,37, 138,04, 135,06, 133,04, 108,27, 107,07, 56,19, 56,05, 41,79, 39,20, 24,95, 11,50 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₆H₁₇O₅Se (M - H)^-, 369,0247; найдено, 369,0246.

Вариант осуществления 17

Получение R-4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-этил-4-оксо-бутановой кислоты (I-15)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 5, целевое соединение I-15 с 95% э.и. получали из исходного вещества соединения Х-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что этил (S)-2-хлорпропионат был заменен этил (S)-2-хлорбутиратом в качестве реагента. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,20 (с, 1Н), 8,43 (с, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,52 (с, 1Н), 3,4 (с, 3Н), 3,83 (с, 3Н), 3,42-3,36 (м, 1Н), 3,10-3,04 (м, 1Н), 2,83-2,74 (м, 1Н), 1,67-1,56 (м, 2Н), 0,97 (т, J=7, 5 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=193,34, 180,67, 151,50, 149,27, 144,99, 138,72, 135,18, 132,03, 108,60, 107,63, 57,23, 56,11, 41,59, 38,81, 25,39, 11,05 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₆H₁₇O₅Se (M - H)^-, 369,0247; найдено, 369,0244.

Вариант осуществления 18

Получение S-4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-этил-4-оксо-бутановой кислоты (I-16)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 5, целевое соединение I-16 с 95% э.и. получали из исходного вещества соединения Х-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что этил (S)-2-хлорпропионат был заменен этил (R)-2-хлорбутиратом в качестве реагента. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,19 (с, 1Н), 8,44 (с, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,52 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,83 (с, 3Н), 3,43-3,35 (м, 1Н), 3,13-3,02 (м, 1Н), 2,83-2,75 (м, 1Н), 1,66-1,55 (м, 2Н), 0,95 (т, d=7,4 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=192,24, 181,62, 151,74, 148,57, 144,55, 137,85, 136,49, 133,13, 109,40, 107,23, 56,17, 55,99, 42,28, 39,79, 25,01, 11,84 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₆H₁₇O₅Se (M - H)^-, 369,0247; найдено, 369,0246.

Вариант осуществления 19

Получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-изопропил-4-оксо-бутановой кислоты (I-17)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 3, соединение I-17 с 95% э.и. получали из исходного вещества соединения Х-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что этил 2-бромацетат был заменен этил 2-бромпропионатом в качестве реагента. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=8,13 (с, 1Н), 7,32 (с, 1Н), 7,29 (с, 1Н), 3,97 (с, 3Н), 3,94 (с, 3Н), 3,52-3,43 (м, 1Н), 3,06-3,00 (м, 2Н), 2,17-2,11 (м, 1Н), 1,05 (дд, J₁=6,8 Гц, J₂=2,6 Гц, 6Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=192,98, 180,89, 150,86, 149,61, 145,85, 138,32, 134,69, 132,20, 108,11, 106,90, 56,25, 56,07, 48,72, 40,68, 25,81, 22,57 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₇H₁₉O₅Se (M - H)^-, 383,0403; найдено, 383,0401.

Вариант осуществления 20

Получение 2-циклопропила-4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-4-оксо-бутановой кислоты (I-18)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 3, соединение I-18 получали из исходного вещества соединения Х-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что этил 2-бромацетат был заменен этил 2-бром-2-циклопропилацетатом. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=8,28 (с, 1Н), 7,35 (с, 1Н), 7,31 (с, 1Н), 3,98 (с, 3Н), 3,96 (с, 3Н), 3,50-3,41 (м, 1Н), 3,10-3,02 (м, 2Н), 1,12-1,04 (м, 1Н), 0,57-0,49 (м, 2Н), 0,21-0,14 (м, 2Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=194,07, 176,11, 149,78, 147,75 146,69, 138,73, 135,03, 133,12, 107,38, 107,55, 56,10, 55,74, 47,71, 40,95, 5,10 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₇H₁₇O₅Se (M - H)^-, 381,0247; найдено, 381,0245.

Вариант осуществления 21

Получение 4-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-(метоксиметил)-4-оксо-бутановой кислоты (I-19)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 3, соединение I-19 получали из исходного вещества соединения Х-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что этил 2-бромацетат был заменен метил 2-бром-3-метоксипропионатом. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,34 (с, 1Н), 8,44 (с, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,60-3,56 (м, 2Н), 3,46-3,37 (м, 1Н), 3,25 (с, 3Н), 3,14-3,07 (м, 2Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=192,87, 179,61, 150,43, 149,39, 144,87, 138,76, 134,66, 134,09, 108,16, 107,55, 80,16, 60,98, 56,30, 56,08, 39,62, 39,04 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₆H₁₇O₆Se (M - H)^-, 385,0196; найдено, 385,0195.

Вариант осуществления 22

Получение 2-(2-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-2-оксо-этил)гексановой кислоты (I-20)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 3, соединение I-20 получали из исходного вещества соединения Х-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что этил 2-бромацетат был заменен этил 2-бромгексаноатом. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=8,10 (с, 1Н), 7,32 (с, 1Н), 7,28 (с, 1Н), 3,97 (с, 3Н), 3,94 (с, 3Н), 3,49-3,39 (м, 1Н), 3,13-3,07 (м, 2Н), 1,80-1,57 (м, 2Н), 1,37-1,32 (м, 4Н), 0,93 (т, J=6,7 Гц, 3Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,85, 179,54, 150,62, 147,88, 145,47, 138,62, 136,00, 132,97, 108,83, 107,06, 56,24, 56,05, 43,93, 42,73, 35,03, 30,10, 24,75, 14,48 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₈H₂₁O₅Se (M - H)^-, 397,0560; найдено, 397,0558.

Стадия 1: получение 2-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-формил) диэтилглутарата (XII-3)

0,17 г соединения Х-1 (0,5 ммоль), 0,14 г карбонат калия (1 ммоль) и 5 мл DMF добавляли в реакционную колбу 100 мл и перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре. 0,14 г этил 3-бромпропионата (0,75 ммоль) и 8 мг йодида калия (0,05 ммоль) добавляли в вышеуказанную реакционную жидкость и смесь подвергали перемешиванию при 55°С в течение 8 ч. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реакция завершена, в реакционную жидкость добавляли 20 мл воды и дважды экстрагировали с использованием 20 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали для получения желтого маслянистого вещества, которое непосредственно переносили на следующую стадию реакции без дополнительной очистки. HRMS (ESI⁺): C₂₀H₂₅O₇Se (М+Н)⁺, 457,0760; найдено, 457,0757

Стадия 2: получение 5-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-ил)-5-оксо-пентановой кислоты (I-21)

Соединение XII-3, полученное на предыдущей стадии, 2 мл концентрированной хлористоводородной кислоты и 2 мл уксусной кислоты добавляли в реакционную колбу 100 мл и смесь перемешивали для реакции при 100°С в течение 3 ч. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реагент XII-3 полностью прореагировал, реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, добавляли 20 мл воды для разбавления и дважды экстрагировали с использованием 20 мл этилацетата, соответственно. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием силикагеля с получением белого твердого вещества 65 мг с общим выходом 37% в две стадии. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,01 (с, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,51 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,82 (с, 3Н), 3,07 (т, J=7,4 Гц, 2Н), 2,34 (т, J=7,5 Гц, 2Н), 1,88 (т, J=7,1 Гц, 2Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, DMSO-d₆): δ=193,29, 178,96, 150,56, 148,61, 146,46, 137,80, 136,19, 134,02, 109,54, 108,49, 56,25, 55,98, 42,97, 31,17, 18,41 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₅H₁₅O₅Se (M-H)^-, 355,0090; найдено, 355,0088.

Получение 5,6-диметоксибензо[b]селенофенмуравьиной кислоты (XIII-1)

0,86 г соединения VIII-1 (3 ммоль), 0,96 г медного порошка 200 меш (15 ммоль) и 12 мл хинолина добавляли в реакционную колбу 100 мл и нагревали с обратным холодильником в течение 4 ч. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реакция завершена, проводили фильтрование с отсасыванием, к фильтрату добавляли 20 мл 6 н хлористоводородной кислоты, перемешивали в течение 10 мин при комнатной температуре и дважды экстрагировали с использованием 30 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием силикагеля с получением соединения, т.е. белого твердого вещества 0,59 г с выходом 81%. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=7,54 (с, 1Н), 7,52 (д, J=5,3 Гц, 1H), 7,37 (с, 1H), 7,29 (д, J=5,3 Гц, 1H), 3,81 (с, 3Н), 3,80 (с, 3Н) ppm.

Получение 2-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-формил))циклопропан-1-муравьиной кислоты (I-22)

0,24 г соединения XIII-1 (1 ммоль), 0,28 г 3-оксабицикло[3.1.0]гексан-2,4-диона (2,5 ммоль) и 5 мл дихлорметана добавляли в реакционную колбу 100 мл, и перемешивали при 0°С в течение 1 ч. 0,2 г трихлорида алюминия (1,5 ммоль) добавляли в реакционную жидкость и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После того, как с помощью TLC устанавливали, что реакция завершена, к реакционной жидкости добавляли 10 мл 1 н хлористоводородной кислоты и дважды экстрагировали с использованием 20 мл этилацетата. После объединения органические слои промывали водой, промывали насыщенным раствором соли и сушили безводным сульфатом натрия, подвергали фильтрованию с отсасыванием и концентрировали с получением неочищенного продукта. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии с использованием силикагеля с получением соединения I-22, т.е. светло-желтого твердого вещества 102 г, выход составлял 29%. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,24 (с, 1Н), 8,45 (с, 1Н), 7,69 (с, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,83 (с, 3Н), 3,07 (кв, J=8,4 Гц, 1Н), 2,30 (кв, J=8,0 Гц, 1Н), 2,17-2,01 (м, 1Н), 1,56-1,50 (м, 1Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=194,01, 176,93, 150,61, 147,58, 145,89, 138,82, 135,66, 131,91, 108,20, 107,44, 56,30, 56,11, 27,92, 19,82, 11,53 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₅H₁₃O₅Se (М-Н)^-, 352,9934; найдено, 352,9931.

Вариант осуществления 26

Получение 2-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-формил)циклобутан-1-муравьиной кислоты (I-23)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 25, целевое соединение I-23, т.е. светло-желтое твердое вещество 58 мг, получали из исходного вещества соединения XIII-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что 3-оксабицикло[3.1.0]гексан-2,4-дион заменяли ангидридом циклобутан-1,4-дикарбоновой кислоты в качестве реагента, выход составлял 32%. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ=7,92 (с, 1Н), 7,31 (с, 1Н), 4,32-4,24 (м, 1Н), 3,96 (с, 3Н), 3,93 (с, 3Н), 3,58-3,50 (м, 1Н), 2,54-2,44 (м, 2Н), 2,41-2,26 (м, 2Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=193,91, 177,88, 150,59, 148,67, 144,65, 138,01, 135,06, 132,57, 108,26, 107,07, 56,19, 56,04, 44,40, 40,79, 23,13, 22,27 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₆H₁₅O₅Se (M - H)^-, 367,0090; найдено, 367,0089.

Вариант осуществления 27

Получение 2-(5,6-диметоксибензо[b]селенофен-2-формил)циклогексан-1-муравьиной кислоты (I-24)

В соответствии со способом получения варианта осуществления 25, целевое соединение I-24, т.е. светло-желтое твердое вещество 37 мг, получали из исходного вещества соединения XIII-1 тем же способом синтеза, за исключением того, что 3-оксабицикло[3.1.0]гексан-2,4-дион заменяли 1,2-циклогександикарбоновым ангидридом в качестве реагента, выход составлял 19%. ¹Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d₆): δ=12,20 (с, 1Н), 8,44 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,83 (с, 3Н), 2,66-2,60 (м, 1Н), 2,58-2,53 (м, 1Н), 1,85-1,56 (м, 4Н), 1,49-1,30 (м, 4Н) ppm. ¹³С ЯМР (75 МГц, CDCl₃): δ=193,76, 176,12, 150,56, 148,95, 145,01, 137,94, 135,13, 132,29, 109,16, 107,13, 56,24, 56,06, 48,22, 42,50, 26,26, 26,07, 25,87, 23,71 ppm. HRMS (ESI^-): C₁₈H₁₉O₅Se (M - H)^-, 395,0403; найдено, 395,0400.

Вариант осуществления 28. Анализ люциферазы на основе ТНР1-Lucia и RAW-Lucia

Клетки THP1-dual™ (Invivogen: thpd-nfis) или клетки RAW-Lucia™ (Invivogen: rawl-isg) разводили культуральной средой, отсасывали 180 мкл клеточной суспензии и инокулировали в 96-луночный планшет так, чтобы каждая лунка содержала 1х10⁵ клеток. 20 мкл тестируемого соединения добавляли в 96-луночный планшет (конечная концентрация указанного соединения составляла 10 мкл, а конечный объем каждой лунки составлял 200 мкл) и культивировали при 37°С в течение 24 часов. 10 мкл супернатанта отсасывали в новый 96-луночный белый планшет и добавляли 50 мкл реагента QUANT-Luc. После полного и равномерного перемешивания сразу же использовали микропланшет-ридер для определения. В анализе было установлено три повторных лунки. Результат теста представляли как кратность возбуждения и рассчитывали по формуле (тест-лунка - холостая лунка)/(лунка с отрицательным контролем -холостая лунка). Результат теста представлен в следующей таблице, с 2',3'-cGAMP в качестве положительного контроля, где *** представляет собой кратность возбуждения 20 или более, ** представляет собой кратность возбуждения от 10 до 20 и * представляет собой кратность возбуждения от 1 до 10.

Как видно из таблицы 1, соединения по настоящему изобретению обладают хорошей возбуждающей активностью на пути cGAS-STING.

Вариант осуществления 29 Анализ индукции интерферона В на основе клеток ТНР1

Секретируемый цитокин IFNβ определяли методом ELISA. Клетки ТНР1 инокулировали в 96-луночный планшет (среда RPMI 1640 не содержала сыворотки), так что количество клеток в каждой лунке колебалось от 5х10⁵ до 7х10⁵. Исходный раствор DMSO 10 мМ получали из тестируемого соединения, разбавляли культуральной средой до целевой концентрации для добавления в 96-луночный планшет, содержащий клетки (конечная концентрация указанного соединения составляла 20 мкМ, а конечный объем каждой лунки составлял 200 мкл) и культивировали при 37°С в 5% CO₂ в течение 3,5 ч. Клетки собирали при 4°С и центрифугировали при 1000 об/мин в течение 20 минут, и супернатат собирали для определения методом ELISA. В анализе было установлено три повторных лунки. Результат был представлен в следующей таблице, с 2',3'-cGAMP в качестве положительного контроля, где результат теста был представлен как процент активности по отношению к 2',3'-cGAMP в концентрации 20 мкМ.

Как видно из таблицы 2, часть соединений по настоящему изобретению обладают хорошей активностью в отношении индукции ТНР1 к секреции IFNβ.

Вариант осуществления 30 Оценка свойств ADMET части соединений по настоящему изобретению

Свойства ADMET части предпочтительных соединений оценивали в этом варианте осуществления и включали растворимость в воде, LogP, стабильность микросом печени крысы в течение 2 часов, стабильность плазмы человека в течение 24 часов, активность ингибирования роста клеток ТНР1 и прогнозирование проникновения через мембрану. Результат теста показан в следующей таблице с MSA2 (Science. 2020, 369, eaba6098) в качестве эталонного соединения.

Таблица 3. Свойства ADMET части соединений по настоящему изобретению

Как можно видеть из таблицы 3, репрезентативные соединения по настоящему изобретению обладают хорошими свойствами ADMET.

Claims (44)

1. Соединение, представленное общей формулой (I), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль:

где

R¹ представляет собой Н;

R² выбран из Н, OR⁶;

R³ выбран из Н, OR⁶;

или R² и R³, вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 5-членный гетероцикл, содержащий два члена, выбранных из О;

R⁴ представляет собой Н;

R⁵ представляет собой Н;

R⁶ на одном и том же атоме являются идентичными или различными, R⁶ на разных атомах являются идентичными или различными, и каждый R⁶ независимо выбран из Н, C₁-C₆ алкила;

X¹ представляет собой С(О);

X² представляет собой (С(R⁷)₂)_(1-3);

R⁷ на одном и том же атоме являются идентичными или различными, R⁷ на разных атомах являются идентичными или различными, и каждый R⁷ независимо выбран из Н, C₁-C₆ алкила, или С₃-С₆ циклоалкила;

или два R⁷ на разных атомах углерода вместе с атомами, к которым они присоединены, могут образовывать 3-6-членное кольцо;

и

X³ выбран из COOR⁶, C(O)N(R⁶)₂, C(O)NHOH, где R² и R³ не могут быть оба Н.

2. Соединение, представленное общей формулой (I-1), его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль:

где X² представляет собой CHR⁷CHR⁷;

R⁷ являются идентичными или различными, и каждый R⁷ независимо выбран из Н, C₁-C₆ алкила, или С₃-С₆ циклоалкила; или два R⁷ на разных атомах углерода, вместе с атомами, к которым они присоединены, образуют 3-6-членное кольцо.

3. Соединение, выбранное из следующих общих формул, их стереоизомеры или фармацевтически приемлемые соли:

4. Способ получения соединения по п. 1, в котором

когда соединение представляет собой соединение, представленное общей формулой (Ia), соединение общей формулы (IV) получают из соединения общей формулы (II) и соединения общей формулы (III) в щелочной среде посредством реакции замещения, соединение общей формулы (VI) получают из соединения общей формулы (IV) и соединения общей формулы (V) посредством реакции замещения, соединение общей формулы (VII) получают из соединения общей формулы (VI) в щелочной среде посредством реакции внутримолекулярной конденсации, соединение общей формулы (VIII) получают из соединения общей формулы (VII) посредством реакции гидролиза, соединение общей формулы (X) получают из соединения общей формулы (VIII) и соединения общей формулы (IX) посредством реакции конденсации, соединение общей формулы (XII) получают из соединения общей формулы (X) и соединения общей формулы (XI) посредством реакции нуклеофильного замещения, и соединение общей формулы (Ia) получают из соединения общей формулы (XII) посредством реакции гидролитического декарбоксилирования, где путь синтеза соединения общей формулы (Ia) является следующим:

где R², R³ и R⁷ имеют значения, указанные в п. 1, R⁸ выбран из СН₃, СН₂СН₃ и С(СН₃)₃, R⁹ выбран из СН₃ и СН₂СН₃, и X выбран из Cl, Br и I;

в способе получения соединения (IV) из соединения (II), диметилдиселенид (III) служит в качестве реагента, DTT, меркаптоэтанол, карбонат калия и DBU могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и тетрагидрофуран и DMF могут служить в качестве растворителей;

в способе получения соединения (VI) из соединения (IV), этил 2-бромацетат (V) служит в качестве реагента, и DMF может служить в качестве реагента, используемого в реакции;

в способе получения соединения (VII) из соединения (VI), карбонат калия, карбонат натрия и гидроксид натрия могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и DMF и ацетонитрил могут служить в качестве растворителей;

в способе получения соединения (VIII) из соединения (VII), карбонат калия, гидроксид натрия и гидроксид лития могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и вода, метанол и тетрагидрофуран могут служить в качестве реакционных растворителей;

в способе получения соединения (X) из соединения (VIII), монометил малонат калия (IX) служит в качестве реагента, CDI и MgCl₂ могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и тетрагидрофуран и DMF могут служить в качестве реакционных растворителей;

в способе получения соединения (XII) из соединения (X), эфир галоидзамещенной кислоты (XI) служит в качестве реагента, карбонат калия, этоксид натрия и гидрид натрия могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и тетрагидрофуран и DMF могут служить в качестве реакционных растворителей;

в способе получения соединения общей формулы (Ia) из соединения (XII), карбонат калия, гидроксид натрия и гидроксид лития могут служить в качестве реагентов, используемых в реакции, и хлористоводородная кислота, уксусная кислота, вода и тетрагидрофуран могут служить в качестве реакционных растворителей.

5. Способ получения соединения по п. 1, в котором

когда соединение представляет собой соединение общей формулы (Ib), соединение общей формулы (XIII) получают из соединения общей формулы (VIII) посредством реакции декарбоксилирования, и соединение общей формулы (Ib) получают из соединения общей формулы (XIII) и соединения общей формулы (XIV) посредством ацилирования по Фриделю-Крафтсу, где путь синтеза соединения общей формулы (XIV) является следующим:

где R² и R³ имеют значения, указанные в п. 1, n представляет собой 1, 2, 3 или 4;

в способе получения соединения XIII из соединения (VIII) медный порошок служит в качестве реагента, используемого в реакции, и хинолин служит в качестве реакционного растворителя;

в способе получения соединения общей формулы (Ib) из соединения XIII, янтарный ангидрид (XIV) служит в качестве реагента, трихлорид алюминия, хлорид цинка и тетрахлорид титана служит в качестве реагентов, используемых в реакции, и дихлорметан служит в качестве реакционного растворителя.

6. Средство для получения лекарственного средства, которое активирует путь cGAS-STING, содержащее активный компонент в эффективной дозе и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество; и активный компонент включает соединение по любому из пп. 1-3, его стереоизомер или одну или несколько фармацевтически приемлемых солей.

7. Применение соединения по любому из пп. 1-3, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли или средства по п. 6 для получения лекарственного средства, которое активирует путь cGAS-STING.

8. Применение соединения по любому из пп. 1-3, его стереоизомера или его фармацевтически приемлемой соли или средства по п. 6 для получения лекарственного средства, где лекарственное средство используют для лечения заболеваний, связанных с активностью пути STING.

9. Применение соединения по п. 8, где заболевания, связанные с активностью пути STING, представляют собой одно или несколько заболеваний, связанных с аутоиммунными заболеваниями, инфекционными заболеваниями, раком и предраковыми синдромами.