SA516371023B1 - مسبار حمض نووي له رمز حامل للتألق مفرد مرتبط بسيتوسين داخلي للاستخدام في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة - Google Patents

مسبار حمض نووي له رمز حامل للتألق مفرد مرتبط بسيتوسين داخلي للاستخدام في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة Download PDF

Info

Publication number
SA516371023B1
SA516371023B1 SA516371023A SA516371023A SA516371023B1 SA 516371023 B1 SA516371023 B1 SA 516371023B1 SA 516371023 A SA516371023 A SA 516371023A SA 516371023 A SA516371023 A SA 516371023A SA 516371023 B1 SA516371023 B1 SA 516371023B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
plural
eee
aaa
hee
probe
Prior art date
Application number
SA516371023A
Other languages
English (en)
Inventor
آن جيلييز اليزابيث
جافيد ساجد
إيونا سوارا مونيكا
Original Assignee
ماست جروب ليمتد
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ماست جروب ليمتد filed Critical ماست جروب ليمتد
Publication of SA516371023B1 publication Critical patent/SA516371023B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
    • C12Q1/6825—Nucleic acid detection involving sensors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/689—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for bacteria
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2531/00—Reactions of nucleic acids characterised by
    • C12Q2531/10—Reactions of nucleic acids characterised by the purpose being amplify/increase the copy number of target nucleic acid
    • C12Q2531/101—Linear amplification, i.e. non exponential
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2531/00—Reactions of nucleic acids characterised by
    • C12Q2531/10—Reactions of nucleic acids characterised by the purpose being amplify/increase the copy number of target nucleic acid
    • C12Q2531/119—Strand displacement amplification [SDA]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2533/00—Reactions characterised by the enzymatic reaction principle used
    • C12Q2533/10—Reactions characterised by the enzymatic reaction principle used the purpose being to increase the length of an oligonucleotide strand
    • C12Q2533/101—Primer extension
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2563/00—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties
    • C12Q2563/107—Nucleic acid detection characterized by the use of physical, structural and functional properties fluorescence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2565/00—Nucleic acid analysis characterised by mode or means of detection
    • C12Q2565/10—Detection mode being characterised by the assay principle
    • C12Q2565/107—Alteration in the property of hybridised versus free label oligonucleotides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/16—Primer sets for multiplex assays

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

يوفر الاختراع الحالي مسابير جديدة للاستخدام في طرق للكشف بواسطة تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة loop-mediated isothermal amplification (LAMP). ويحتوي المسبار على رمز حامل للتأللق fluorophore مفرد يرتبط برواسب سيتوسين cytosine داخلي للمسبار. وتكون المسابير مفيدة بشكل خاص للكشف عن الاصابة بالكلاميديا chlamydia والسيلان gonorrhea في المريض. شكل 1.

Description

مسبار حمض نووي له رمز حامل للتألق مفرد مرتبط بسيتوسين داخلي للاستخدام في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة ‎Nucleic Acid Probe with Single Fluorophore Label Bound to Internal Cytosine for‏ ‎Use In Loop Mediated Isothermal Amplification‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بمسبار ‎IST probe‏ حمض نووي ‎«Nucleic acid‏ طريقة تستخدم المسبار المذكور وطاقم من أجزاء. بشكل مفضل يكون المسبار الخاص بالاختراع مفيداً في طريقة لكشف الأحماض النووية ‎nucleic acids‏ المشتقة من ‎Chlamydia trachomatis‏ و أو ‎(Sag Neisseria gonorrhoeae 5‏ الاستخدام في تشخيص إصابات ‎Chlamydia‏ و/ أو ‎.Gonorrhoea‏ ‏يكون تضخيم ‎amplification‏ الحمض النووي أحد أكثر الأدوات قيمة في مجال علوم الحياة؛ بما في ذلك مجالات موجهة للتطبيق مثل دواء سريري؛ حيث به يتم الاستفادة من تشخيص أمراض معدة ‎infectious diseases‏ ¢ اضطرابات وراثية ‎genetic disorders‏ وسمات وراثية ‎genetic traits 0‏ بشكل خاص. بالإضافة إلى كشف بأساس تفاعل البلوليمراز المتسلسل ‎PCR ) Polymerase chain reaction‏ ( المستخدم على نطاق واسع ) ‎Saiki R.K.,‏ ‎Scharf,S., Faloona,F., Mullis,K.B., Horn,G.T., Erlich,H.A. and Arnheim,N.‏ ‎Science, 230, 1350-1354‏ (1985))؛ تم اختراع طرق تضخيم متعددة. تشتمل الأمثلة على تضخيم بأساس متوالية حمض نووي ‎nucleic acid sequence-based amplification‏ ‎(NASBA) 5‏ تكرار متوالية ذاتية الاستمرار ‎(3SR) sequence replication‏ وتضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن ‎.(LAMP) loop-mediated isothermal amplification dis‏ يستخدم ‎PCR‏ التمسخ بالحرارة لمنتجات مزدوجة الجديلة لتعزيز الدورة التالية من تخليق الحمض النووي. تقوم ‎Ahh NASBA 3 3SR‏ تسمخ الحرارة باستخدام مجموعة من تفاعلات الاستتساخ والاستنساخ العكسي لتضخيم المتوالية المستهدفة ‎.amplify the target sequence‏
تتعلق براءة الاختراع الأوروبية رقم 0515194 بمسبار والذي يكون تكميلي ولرصد متوالية ‎E.coli‏ ‏مستهدفة. يحتوي المسبار على ‎C‏ مع فلوروفور ‎fluorophore‏ عند موقع 17 من 30 ‎NT‏ ‏وتتغير فلورية المسبار ‎fluorescence of the probe‏ عندما يقوم المسبار بتهجين المتوالية المستهدفة ‎.hybridises to the target sequence‏ وثقة ‎IKEDA 5 ET AL‏ تحت عنوان ‎pain’‏ مضاعف ثيازول يحمل علامة برتقالية اللون للتوسع الوظيفي لمسبار حساس للتهجين " ( ‎Doubly thiazole orange-labeled cytidine‏ ‎«(expansion of a hybridization—sensitive probe for functional‏ ‎LETTERS, PERGAMON, GB, vol. 50, no. 51 TETRAHEDRON‏ بتاريخ 23 ديسمبر 2009 تتعلق بعدد من المسبارات ‎probes‏ مع 13 نيوكليوتيد ‎nucleotides 0‏ ؛ فيها سيتوسين ‎cytosine‏ عند الموقع 7 يحمل علامة مع اثنين من جزيئات تيازول ‎thiazole‏ بصبغة برتقالية. أظهرت المسبارات فلورية قوية ‎strong fluorescence‏ عند التهجين ‎hybridisation‏ مع الهدف وإطفاء في الحالة فردية الشرائط ‎single stranded‏ تتعلق براءة الاختراع الأوروبية رقم 2635560 بعدد من المجسات مع فلوروفور فردي ‎single‏ ‎fluorophore‏ مرتبط بسيتوسين ‎cytosine‏ عند طرف أو موقع 3 من طرف-3” لرصد طفرة 5 1/600 في ‎BRAF‏ (انظر المتوالية 10 رقم 10). وتم ذكر أن المتوالية المستهدفة قد يتم تضخيمها بمواد بادئة ‎primers‏ ‏تتعلق براءة ‎f‏ لاختراع ا لأوروبية رقم 2574680 يعدد من المسبارات مع فلوروفور فردي مرتبط بسيتوسين عند طرف أو مرتبطة ب ‎Laie TAMRA‏ بسيتوسين في الموقع 2 من طرف-5" للمسبار (انظر المتوالية 10 رقم:ة 22). ويتم استخدام المسبارات لرصد ‎SNP‏ في 01/630/8. وتم 0 ذكر أن المتوالية المستهدفة من الممكن أن يتم تضخيمها بمواد بادئة. تتعلق براءة الاختراع الأوروبية رقم 2218780 بطريقة لتحديد بنية ‎djing Neisseria‏ ‎All Chlamydia‏ تستخدم تضخيم ‎LAMP‏ ومسبارات إطفاء ‎.quenching probes‏ الوسط الذي يتم فيه توفير هذه المسبارات يشتمل على 2.1 ملليمتر من كل من النيوكليوتيدات
‎(KCI » nucleotides‏ ( 1011406504 و | ‎MgSO4‏ _بتركيزات تبلغ 12 أو 15 ملليمتر» ‎Tris—HCI‏ بتركيز 30 ملليمتر. يمكن لتلك الطرق تضخيم الأحماض النووية المستهدفة إلى مقدار مشابه؛ وكلها بحد كشف أقل من 10 نسخ ‎Play‏ ساعة وما إلى ذلك. وتتطلب إما معدة دقيقة للتضخيم وطريقة دقيقة لكشف المنتجات المضخمة بسبب ضعف تخصيص اختيار متوالية مستهدفة. بالرغم من التبسيط ومقدار
التضخيم الذي يمكن الحصول عليه؛ تمنع الحاجة لوحدة تدوير حرارية عالية الدقة في ‎PCR‏ تلك الطريقة القوية من الاستخدام على نطاق واسع؛ مثل في العيادات الخاصة كأداة تشخيص روتينية. وعلى النقيض» تكون تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة ‎loop-mediated isothermal‏ ‎(LAMP) amplification‏ عبارة عن طريقة يمكن أن تضخم نسخ قليلة من ‎DNA‏ لأكثر من
0 100 في أقل من ساعة تحت ظروف ثابت درجة الحرارة وبتخصيص أكبر. كما هو الحال مع تقنيات بأساس مسبار جزيئي ‎molecular-probe‏ أخرى معرفة ‎«del‏ يمكن استخدام تجارب تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن ‎(LAMP) dala‏ لكشف وجود كائنات مجهرية 5 خاصة في عينة. مع ذلك؛ تعتمد طرق الكشف على الكشف البصري المباشرء العكارة وعن طريق صبغة إقحام ‎intercalating dye‏ غير مخصصة. يكون القياس
5 البصري المباشر هو قياس نقطة نهاية ولا يستطيع توفير تحليل بالزمن الفعلي. وتوفر العكارة وصبغات الإقحام غير المخصصة تحليل زمن فعلي للتضخيم الذي يحدث ومع ذلك يكون غير مخصص أي يتم كشف كل التضخيمات سواء كان تضخيم إيجابي حقيقي أو تضخيم زائف بسبب فقد ‎(sald)‏ التخصيص العرضي. الوصف العام للاختراع
0 وققاً لسمة أولى من الاختراع الحالي يتم تقديم مسبار لتضخيم حمض نووي ثابت درجة الحرارة يشتمل على متوالية مسبار أوليجونيكلوتيد ‎oligonucleotide probe‏ مكملة لمنطقة متوالية حمض نووي مستهدف؛ حيث يكون بمتوالية مسبار الأوليجونيكلوتيد المذكورة جزءِ ربط ‎dala‏ تألق واحد فقط وحيث يرتبط ‎Jal gia‏ بقاعدة سيتوسين داخلية وحيث لا يكون بمتوالية مسبار الأوليجونيكلوتيد المذكورة فاصل طرف 3'.
في نموذج مفضل تكون متوالية مسبار أوليجونيوكليوتيد عبارة عن متوالية ‎DNA‏ وتكون متوالية الحمض النووي المستهدف عبارة عن متوالية ‎DNA‏ ‏بشكل مفضل؛ يزيد التألق للإشارة إلى وجود الحمض النووي المستهدف فى عينة. شرح مختصر للرسومات الشكل 1: عبارة عن رسم تخطيطي لمسبار ‎DNA‏ من الاختراع. يتكون المسبار من أوليجونيوكليوتيد مع سيتوسين داخلي مترافق مع حامل تألق محدد. يمكن أن يكون المسبار مكمل للمنطقة الداخلية للأمبليكون ‎amplicon‏ المجنح بواسطة بوادئ ‎Bip s Fip‏ ويمكن أن تكون عبارة عن بادئ ‎LoOpF‏ و0008 معدّل مرمز داخلياً باستخدام حامل تألق. الأشكال 2 إلى 2و: مخططات تضخيم مولدة باستخدام بوادئ ‎PBI‏ 01. 0 الأشكال 3 و3ب : عبارة عن تحليلات لمنحنى انصهار منتجات ‎LAMP‏ مولدة باستخدام بوادئ ‎CT 1‏ في وجود مسبار 081 ‎CT‏ داخلي مترافق مع ‎FAM‏ ‏الأشكال 4 وب : عبارة عن تحليلات لمنحنى انصهار منتج ‎LAMP‏ مولد باستخدام بوادئ ‎GC‏ ‏7خاداو في وجود مسبار حلقة ‎GC gINAT‏ مترافق مع ‎JOE‏ ‏الأشكال 15 و5ب عبارة عن تحليلات لمنحنى انصهار منتج ‎LAMP‏ مولد باستخدام بوادئ ‎GC‏ ‏5 0087 في وجود مسبار حلقة 07/87 ‎GC‏ مترافق مع ‎ALEXAS46‏ ‏الأشكال 16 إلى 6د : نتائج اختبار لتأكيد تخصيص منتج ‎DNA‏ باستخدام مسبار من الاختراع في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة. الشكل 7 :مخططات التضخيم مولدة باستخدام بوادئ 1 ‎CT‏ في محلول منظم ‎V6.21‏ يحتوي على 13/ ومحلول منظم 6.210 بدون صبغة 13/ لكن في وجود مسبار طرف 081 ‎CT‏ ‏0 (مكمل لمنطقة الحلقة) باستخدام مترافق © داخلي مع ‎FAM‏ وفاصل :3 ‎(3°ddC)‏ ‏الأشكال 18 و8ب: مخططات التضخيم المولدة في محلول منظم ‎V6.21p‏ يحتوي على ‎ROX‏ ‏وجود بوادئ 1 ‎CT PB‏ ومسبار طرف 1 ‎CT PB‏ مع سيتوسين داخلى مترافق مع ‎.FAM‏
الأشكال 9 إلى 9ج: مخططات التضخيم مولدة باستخدام بوادئ ‎CT PBI‏ في محلول منظم 6.0 بدون 1/13 في وجود مسبار ‎CT PBL‏ داخلي باستخدام مترافق © داخلي مع ‎FAM‏ ‏وصبغة مرجعية ‎.(ROX) reference dye‏ الأشكال 10 إلى 1210 ‎mag‏ التحقق من صحة تخصيص مسبار ‎.CT PB1I-FAM‏ الأشكال 11 و 11ب : تعرض التحقق من صحة مسبار ‎CT PBI-FAM‏ مقابل تجرية ‎APTIMA CT‏ الأشكال 112 و12ب : تعرض مخططات التضخيم المولدة في ‎CT/GC‏ متعدد باستخدام مسبارات ‎.CT PB1-FAM + GC PorA7-Alexa546‏ الوصف التفصيلي: 0 يتم تثبيت قاعدة السيتوسين بشكل مفضل مركزياً إلى حدٍ كبير على امتداد طول الأوليجونيوكليوتيد ‎Oligonucleotide‏ توجد فائدة خاصة ترتبط بترميز المسبار ‎probe‏ داخلياً عند قاعدة سيتوسين 6. يمكن تأكيد تخصيص منتج الحمض النووي المضخم في تفاعل ثابت درجة الحرارة باستخدام تحليل منحنى انصهار. مع ذلك بسبب عدد كبير من متغيرات المنتج المولدة في ذلك التفاعل ودقة منخفضة لتحليل منحنى الانصهار؛ باستخدام صبغات إقحام ‎Jie‏ 13/؛ يكون من 5 الصعب جداً التمييز بين منتجات الحمض النووي المخصصة وغير المخصصة المولدة تحت ظروف ثابتة درجة الحرارة. لا تتوافق المسبارات المستخدمة بشكل ‎Jie ails‏ مسبار ‎TagMan®‏ ‏مع تقنية ‎LAMP‏ بسبب نشاط إزاحة الجديلة لبوليميراز ‎polymerase‏ 851. يكون المسبار الخاص بالاختراع مطولاً ويصبح مضمناً في منتج الحمض النووي أثناء التضخيم ثابت درجة الحرارة؛ حيث تسمح بتنفيذ تحليل ‎inte‏ انصهار على المنتج المولد. في المسبار الخاص 0 بالاختراع؛ يترافق حامل التألق ‎as fluorophore‏ سيتوسين داخلي ‎internal cytosine‏ مكمل لجوانين ‎guanine‏ في الجديلة المضادة ‎antisense‏ لاتجاه النسخ. يؤثر الجوانين على ‎Aa‏ ‏إثارة الكثير من حاملات التألق مما يؤدي إلى تكوين توقيعات منحنى انصهار فريدة ويسمح بالتمييز بين منتجات مخصصة وغير مخصصة مولدة تحت ظروف ثابتة درجة الحرارة.
لا يحتوي الأوليجونيوكليوتيد على ‎dNTP‏ عند طرفه ”3 مما يتيح تضمين الأوليجونيوكليوتيد المرمز في الأمبليكون ‎amplicon‏ بالتالي؛ لا يتم "إعاقة" الطرف 3' للمسبار. يمكن أن يشتمل ‎Jala‏ التألق ‎fluorophore‏ على أي واحد أو أكثر منتقى مما يلى: ‎FAM‏ ‎ATTO y ALEXA (ROX (TAMRA (HEX (TET («JOE‏ يمكن أن يشتمل المسبار على المتوالية التالية: ‎Xn C* Xm 3’‏ ”5 (هوية متوالية رقم 1( حيث ‎X 3> am 1> an‏ هى قاعدة نيوكليوتيد ‎nucleotide base‏ ¢ و * هى ‎ela‏ ‏تألق . بشكل ‎«Jasna‏ يتم اختيار قاعدة النيوكليوتيد من ‎CTA‏ و . بشكل مفضل؛ ‎N‏ تكون أكبر من 1 إلى 20 وأقل؛ بشكل مفضل أكثر أكبر من 1 إلى 10 وأقل. بشكل ‎(Jamie‏ 17 تكون 0 أكبر من 3 إلى 20 وأقل؛ بشكل مفضل أكثر أكبر من 3 إلى 10 وأقل. من المتوقع الكشف عن كل التوليفات بأطوال المسبار المغطاة بواسطة العدد المتاح من النيوكليوتيدات حيث ‎N‏ و77 يمكن أن تأتى بالنطاقات السابقة. بشكل مفضل؛ يمكن أن يشتمل المسبار على متوالية منتقاة من أي من المتواليات التالية: هوية متوالية رقم 3: ‎(A312 CT PB1-FAM) TAAGATAAC[C-FAM]CCGCACGTG‏ 5 هونة متوالية رقم 5: ‎GC ) GCGAACATA [C-ALEXA546] CAGCTATGATCAA‏ ‎(PorA7-joe loopF‏ أو هوية متوالية رقم 6: ‎GC gInA7-) ATGTTCA [C-JOE] CATGGCGGAG‏ ‎.(ALEXA546 loopB‏ يتم زيادة التألق بشكل مفضل عند تضمين الأوليجونيوكليوتيد فيي متوالية الحمض النووي 0 المستهدف مما يؤدي إلى تغيير فى تصميم معقد الأمبليكون - المسبار ‎amplicon-probe‏ ‎complex‏ مما يؤدي إلى تبديل حالة إثارة حامل التألق ‎fluorophore‏
لا يتم تثبيت السيتوسين المرتبط بجزءِ ربط حامل التألق عند وعلى مقربة من الطرف 5“ و37. بشكل مفضل أكثر لا يتم تثبيته في القواعد الثلاثة الأولى من أي من الطرف 5“ و37. بشكل مفضل يتم تثبيت السيتوسين المرتبط بحامل التألق عند القاعدة الوسطى ‎middle base‏ بالمسبار. وفقاً لسمة أخرى من الاختراع الحالي؛ يتم تقديم تضخيم حمض نووي ثابت درجة الحرارة مسبار كما
هو موصوف هنا أعلاه . وفقاً لسمة أخرى من الاختراع الحالي؛ يتم تقديم مسبار تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة كما هو موصوف أعلاه . تستخدم الطرق والتركيبات الخاصة بتحديد حمض نووي مستهدف على الأقل في خليط من
0 الأحماض النووية بصفة عامة مسبارء كاشف تهجين ‎hybridizing reagent‏ ؛ وواحد أو أكثر من إنزيمات تشكل رابطة فوسفات ترتبط بأي من التراي فوسفات النيوكليوتيدية ‎nucleotide‏
5 المطلوية لتشكيل سلسلة حمض نووي ‎.nucleic acid chain‏
تشتمل تلك الطرق على تضخيم؛ ‎Jie‏ تضمين استخدام معزز بالترافق مع بوليميراز ‎polymerase‏ ‎«(RNA‏ موقع تقييد حيث يتم فقط شق جديلة واحدة ويعد ذلك إزاحتها بواسطة الإثارة باستخدام
5 بوليميراز الحمض النووي» وكاشف تهجين دائري» حيث يتم إنتاج تكرارات متسلسلة. يمكن أن يأخذ كشف الحمض النووي المضخم صور كثيرة لكن بشكل مفضل بواسطة حامل تألق. وفقاً لسمة أخرى من الاختراع الحالي؛ يتم تقديم طريقة لكشف حمض نووي مستهدف في عينة تشتمل على: أ. تضخيم حمض نووي مستهدف في العينة لتوفير حمض نووي مضخم؛
‎co 0‏ التحقق من الحمض النووي المضخم باستخدام مسبار كما هو موصوف هنا أعلاه؛ و ج. كشف وجود حمض نووي مستهدف ‎target nucleic acids‏ واحد ومجموعة متعددة.
يمكن أن يكون الحمض النووي المستهدف عبارة عن الحمض النووي من كائن دقيق؛ فطريات؛ خميرة؛ فيروس» إنسان» حيوان» نبات. .الخ. يكون الحمض النووي المستهدف ل ‎LAMP‏ معروف بأنه يتيح تخليق بوادئ ‎JS LAMP‏ ملاثم مسبارات مخصصة. بالتالى يمكن تحيد وجود وغياب الكائنات المجهرية المذكورة؛ الفطريات ‘ الخميرة ‘ الفيروس ‘ الإنسان؛ الحيوان والنبات فى عينة. بشكل مفضل يكون الحمض النووي المستهدف من ‎Chlamydia trachomatis‏ ‎Neisseria gonorrhoeae ,‏ بشكل مفضل؛ يزيد التألق للإشارة إلى وجود الحمض النووي المستهدف فى عينة. تكون العملية ثابتة درجة الحرارة وتسمح بالتضخيم فى مرحلة واحدة ومراحل متعاقبة فى وعاء واحد؛ حيث تكون كل الكواشف متوافقة. 0 في سمة إضافية؛ يقدم الاختراع الحالي طريقة لتشخيص ‎Chlamydia‏ و/ أو ‎Gonorrhea‏ ‎Cua ye‏ يشتمل على توفير عينة المشتقة من المريض؛ إضافة واحد أو أكثر من مسبارات الاختراع الحالي إلى العينة؛ و ‎CRIS‏ وجود حمض نووي مشتق من ‎/s Chlamydia trachomatis‏ أى ‎Neisseria‏ ‎gonorrhoeae 5‏ حيث تشير زبادة فى تألق المسبار إلى وجود ‎Chlamydia dial‏ ‎s trachomatis‏ | أو ‎Neisseria gonorrhoeae‏ يمكن معالجة العينة بواسطة طرق روتينية لتمكين المسبار من الارتباط بأي نيوكليوتيد مستهدف موجود في العينة. يمكن أن تشتمل تلك المعالجة على الطرد المركزي وحل العينة لتحرير أي 0 في أحد النماذج؛ يتم استخدام نوع منفرد من مسبار مخصص لحمض نووي من أي من ‎Chlamydia trachomatis‏ و ‎Neisseria gonorrhoeae‏ في الطريقة بحيث يتم كشف إما ‎Chlamydia trachomatis‏ فقط 4 ‎Neisseria gonorrhoeae‏ فقط فى العينة.
— 0 1 — في نموذج مفضل؛ يتم إضافة مسبارين مختلفين على الأقل إلى العينة حيث يتم ترميز مسبار أول باستخدام رمز تألق أول ويكون مخصص للتحقق من حمض نووي ‎Chlamydia trachomatis‏ ‎alg‏ ترميز مسبار ثاني باستخدام رمز تألق مختلف عن المسبار الأول ويكون مخصص للتحقق من حمض نووي ‎Neisseria gonorrhoeae‏ في ذلك النموذج؛ يكون من الممكن في نفس الوقت كشف إصابة ‎Chlamydia‏ و ‎Gonorrhea‏ فى عينة واحدة مشتقة من مربض. في إحدى سمات طريقة الاختراع؛ يمكن أن تكون العينة من المريض عبارة عن ‎die‏ دم؛ عينة بول ‎due‏ مصل وعينة لعاب. وفقاً لسمة أخرى من الاختراع الحالي يتم تقديم طاقم يشتمل على مسبار كما هو موصوف هنا ‎code‏ محلول منظم لتفاعل ‎LAMP‏ يحتوي على إنزيم بوليميراز» ‎ANTPS‏ وبوادئ ‎LAMP‏ 0 للهدف. في أحد النماذج يمكن تضمين عينة مقارنة موجبة وسالبة في الطاقم. يمكن أن توجد الكواشف في صورة كواشف رطبة وفى صورة مجففة بالتجميد . يشتمل المحلول المنظم المستخدم في الطريقة والطاقم من الاختراع على ‎dNTPs‏ بتركيز من 1- 0 مللي مولار؛ واحد أو أكثر من الأملاح بتركيز من 20-2 مللي مولار؛ تريس ‎Tris‏ رقم 5 هيدروجيني 8.8 بتركيز من 10- 100 ‎Me‏ مولار؛ تيرهالوز ‎Trehalose‏ بتركيز من 100-10 ‎Vee Al‏ ¢ بوليميراز ‎BST polymerase‏ بكمية من 1 وحدة-12 وحدة و901-960.01 1 2 برويان دايول ‎propanediol‏ 2, . الاختصارات ‎Chlamydia trachomatis - CT‏
Neisseria gonorrhoeae - GC 20
Glutamine synthetase ‏جلوتامين سينقيتاز‎ — GInA7
AT porin protein ‏بروتين بورين‎ - PorA7
— 1 1 — ‎LAMP‏ - تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة ‎loop mediated isothermal‏ ‎amplification‏ ‎PCR‏ — تفاعل سلسلة بوليميراز ‎polymerase chain reaction‏ سوف يتم الآن وصف الاختراع الحالي» على سبيل المثال فقط» بالإشارة إلى الأمثلة التالية والأشكال. تفاعل ‎LAMP‏ ‏تم تنفيذ كشف بأساس 11/13 ‎CT‏ المستهدف 5 ‎GT DNA‏ بواسطة ‎LAMP‏ باستخدام محلول منظم لتفاعل 1/6.21 ‎LAMP‏ المطور بواسطة مقدم الطلب. تم تنفيذ كشف بأساس مسبار ل ‎DNA‏ المستهدف في ‎VO.21p‏ (بدون 13/). كانت تركيزات بادئ 10لا كما يليى: ‎CT PBI‏ 0 - 0.8 ميكرو مولار بادئ ‎(FIP 8 BIP‏ 0.2 ميكرو مولار 83 8 3 و0.4 ميكرو مولار بوادئ ‎GC gInAT 3 GC 0187 dala‏ - 2 ميكرو مولار بادئ ‎(FIP 8 BIP‏ 0.25 ميكرو مولار 83 8 ‎F3‏ و0.5 ميكرو مولار بوادئ حلقة. تم استخدام كل المسبارات بتركيز نهائي 5 ميكرو مولار . تم إجراء تفاعلات ‎LAMP‏ لمدة 60 دقيقة عند درجة حرارة ثابتة 63 درجة مئوية باستخدام ماكينة ‎PCR‏ فى الزمن الفعلي 8817500. تم الحصول على قراءات إشارة التألق 5 فى قناة الال 57/016+8©0/7؛ ‎Cy3 5 Joe‏ حسب الملائمة. متواليات المسبار ‎Probe sequences‏ هوية متوالية رقم 2: ‎GTGCACGC[C-FAM]CCAATAGAAT‏ ‏هوية متوالية رقم 3: ‎CT PB1-FAM) TAAGATAAC[C-FAMJCCGCACGTG‏ داخلي) هوية متوالية رقم 4: ‎CT PB1-FAM) TCGAGCAA[C-FAM]CGCTGTGAC[AAC]‏ 0 طفي) هوية متوالية رقم 5: ‎GC ( GCGAACATA [C-ALEXA546] CAGCTATGATCAA‏ ‎(PorA7-joe loopF‏
GC gInA7-) ATGTTCA [C-JOE] CATGGCGGAG :6 ‏هوية متوالية رقم‎ ‏أو‎ (ALEXA546 loopB .[C-FAM] CCA GGG TAT CTA ATC CTG TTT 6 :7 ‏هوية متوالية رقم‎ ‏المتواليات المستهدفة‎ ‏المستهدفة في الأمثلة هي‎ DNA ‏تكون متواليات‎ 5 pSotonG1 ‏بلازميد‎ Chlamydia trachomatis G/SotonG1 ‏هوية متوالية رقم 8: متوالية‎ (GenBank: HE603235.1) ‏كاملة‎ ‎1 titgcaactc ttggtggtag actttgcaac tcttggtggt agactttgca actcttggtg 61 gtagacttgg tcataatgga cttitgttaa aaaatttctt aaaatcttag agctccgatt 121 ttgaatagct ttggttaaga aaatgggctc gatggctttc cataaaagta gattgttctt 0 181 aacttttggg gacgcgtcgg aaatttggtt atctacttta tctcatctaa ctagaaaaaa 241] ttatgcgtct gggattaact ttcttgtttc tttagagatt ctggatttat cggaaacctt 301 gataaaggct atttctcttg accacagcga atctttgttt aaaatcaagt ctctagatgt 361 ttttaatgga aaagtcgttt cagaggcctc taaacaggct agagcggcat gctacatatc 5 42] tttcacaaag tttttgtata gattgaccaa gggatatatt aaacccgcta ttccattgaa 481 agattttgga aacactacat tttttaaaat ccgagacaaa atcaaaacag aatcgatttc 541 taagcaggaa tggacagttt tttttgaagc gctccggata gtgaattata gagactattt 601 aatcggtaaa ttgattgtac aagggatccg taagttagac gaaattttgt ctttgcgcac 0
— 1 3 —
661 agacgatcta ttttttgcat ccaatcagat ttcctttcgc attaaaaaaa gacagaataa
721 agaaaccaaa attctaatca catttcctat cagcttaatg gaagagttgc aaaaatacac
781 ttgtgggaga aatgggagag tatttgtttc taaaataggg attcctgtaa caacaagtca 5
841 ggttgcgcat aattttaggc ttgcagagtt ccatagtgct atgaaaataa aaattactcc
901 cagagtactt cgtgcaagcg ctttgattca tttaaagcaa ataggattaa aagatgagga
961 aatcatgcgt atttcctgtc tctcatcgag acaaagtgtg tgttcttatt gttctgggga 1021 agaggtaagt cctctagtac aaacacccac aatattgtga tataattaaa 10 attatattca
1081 tattctgttg ccagaaaaaa cacctttagg ctatattaga gccatcttct ttgaagcgtt
1141 gtctictcga gaggatttat cgtacgcaaa tatcatcttt gcggttgegt gtcccgtgac
1201 cttcattatg tcggagtctg agcaccctag gcgtttgtac tccgtcacag cggttgctcg 1261 aagcacgtgc ggggttatct taaaagggat tgcagcttgt agtcctgett 5 gagagaacgt
1321 gcgggcgatt tgccttaacc ccaccatttt tccggagega gttacgaaga caaaacctct
1381 tcgttgaccg atgtactctt gtagaaagtg cataaacttc tgaggataag ttataataat 1441 cctcttttct gtctgacggt tecttaagetg ggagaaagaa atggtagcett gttggaaaca 0
— 1 4 —
1501 aatctgacta atctccaagc ttaagacttc agaggagcgt ttacctcctt ggagcattgt
1561 ctgggcgatc aaccaatccc gggcegttgat tttttttage tcttttagga aggatgctgt
1621 ttgcaaactg ttcatcgcat ccgtttttac tatttccctg gttttaaaaa atgttcgact
1681 attttcttgt ttagaaggtt gcgctatage gactattcct tgagtcatce tgtttaggaa 5
1741 tcttgttaag gaaatatagc ttgctgctcg aacttgttta gtaccttcgg tccaagaagt
1801 cttggcagag gaaacttttt taatcgcatc taggattaga ttatgattta aaagggaaaa
1861 ctcttgcaga ttcatatcca aagacaatag accaatcttt tctaaagaca aaaaagatcc 0
1921 tcgatatgat ctacaagtat gtttgttgag tgatgcggtc caatgcataa taacticgaa
1981 taaggagaag cttttcatgc gtttccaata ggattcttgg cgaattttta aaacttcctg
2041 ataagacttt tcgctatatt ctaacgacat ticttgctgc aaagataaaa tccctttace
2101 catgaaatcc ctcgtgatat aacctatccg caaaatgtcc tgattagtga aataatcagg 15
2161 ttgttaacag gatagcacgc tcggtatttt tttatataaa catgaaaact cgttccgaaa
2221 tagaaaatcg catgcaagat atcgagtatg cgttgttagg taaagctctg atatttgaag
2281 actctactga gtatattctg aggcagcttg ctaattatga gtttaagtgt tcccatcata 2341 aaaacatatt catagtattt aaatacttaa aagacaatgg attacctata 20 actgtagact
— 1 5 — 2401 cggcttggga agagcttttg cggcgtcgta tcaaagatat ggacaaatcg tatctcgggt 2461 taatgttgca tgatgcttta tcaaatgaca agcttagatc cgtttctcat acggttttcc 2521 tcgatgattt gagcegtgtgt agcgctgaag aaaatttgag caatttcatt ttccgetegt 2581 ttaatgagta caatgaaaat ccattgcgta gatctccgtt tctattgett gagecgtataa 5 2641 agggaaggct tgatagtgct atagcaaaga ctttttctat tcgcagegct agaggccggt 27701 ctatttatga tatattctca cagtcagaaa ttggagtgct ggctcgtata aaaaaaagac 2761 gagcagcgtt ctctgagaat caaaattctt tctttgatgg cttcccaaca 0 ggatacaagg 2821 atattgatga taaaggagtt atcttagcta aaggtaattt cgtgattata gcagctaggce 2881 catctatagg gaaaacagct ttagctatag acatggcgat aaatcttgcg gttactcaac 2941 agcgtagagt tggtttccta tctctagaaa tgagcgcagg tcaaattgtt 5 gagcggattg 3001 ttgctaattt aacaggaata tctggtgaaa aattacaaag aggggatctc tctaaagaag 3061 aattattccg agtggaagaa gctggagaaa cagttagaga atcacatttt tatatctgca 20
— 1 6 — 3121 gtgatagtca gtataagctt aatttaatcg cgaatcagat ccggttgctg agaaaagaag 3181 atcgagtaga cgtaatattt atcgattact tgcagttgat caactcatcg gttggagaaa 3241 atcgtcaaaa tgaaatagca gatatatcta gaaccttaag aggtttagcc 5 tcagagctaa 3301 acattcctat agtttgttta tcccaactat ctagaaaagt tgaggataga gcaaataaag 3361 ttcccatgcet ttcagatttg cgagacageg gtcaaataga gcaagacgca gatgtgattt 10 3421 tgtttatcaa taggaaggaa tcgtcttcta attgtgagat aactgttggg aaaaatagac 3481 atggatcggt tttctcttcg gtattacatt tcgatccaaa aattagtaaa ttctccgcta 3541 ttaaaaaagt atggtaaatt atagtaactg ccacttcatc aaaagtccta tccaccttga 5 3601 aaatcagaag tttggaagaa gacctggtca atctattaag atatctccca aattggctca 3661 aaatgggatg gtagaagtta taggtcttga ttttctttca tctcattacc atgcattagc 3721 agctatccaa agattactga ccgcaacgaa ttacaagggg aacacaaaag gggttgtttt 20 3781 atccagagaa tcaaatagtt ttcaatttga aggatggata ccaagaatcc gttttacaaa
— 1 7 — 3841 aactgaattc ttagaggctt atggagttaa gcggtataaa acatccagaa ataagtatga 3901 gtttagtgga aaagaagctg aaactgcttt agaagccttg taccatttag gacatcaacc 3961 gtttttaata gtggcaacta gaactcgatg gactaatgga acacaaatag 5 tagaccgtta 4021 ccaaactctt tctccgatca ttaggattta cgaaggatgg gaaggtttaa ctgacgaaga 4081 aaatatagat atagacttaa caccttttaa ttcaccatct acacggaaac ataaaggatt 10 4141 cgttgtagag ccatgtccta tcttggtaga tcaaatagaa tcctactttg taatcaagec 4201 tgcaaatgta taccaagaaa taaaaatgcg tttcccaaac gcatcaaagt atgcttacac 4261 atttatcgac tgggtgatta cagcagctgc gaaaaagaga cgaaaattaa ctaaggataa 5 432] ttcttggcca gaaaacttgt tattaaacgt taacgttaaa agtcttgcat atattttaag 4381 gatgaatcgg tacatctgta caaggaactg gaaaaaaatc gagttagcta tcgataaatg 4441 tatagaaatc gccattcagce ttggctggtt atctagaaga aaacgcattg aatttctgga 20 4501 ttcttctaaa ctctctaaaa aagaaattct atatctaaat aaagagcgct ttgaagaaat
— 1 8 — 4561 aactaagaaa tctaaagaac aaatggaaca agaatctatt aattaatagc aggcttgaaa 4621 ctaaaaacct aatttattta aagctcaaaa taaaaaagag ttttaaaatg ggaaattctg 4681 gtttttattt gtataacact gaaaactgcg tctttgctga taatatcaaa gttgggcaaa 5 4741 tgacagagcc gctcaaggac cagcaaataa tccttgggac aaaatcaaca cctgtcgcag 4801 ccaaaatgac agcttctgat ggaatatctt taacagtctc caataattca tcaaccaatg 4861 cttctattac aattggtttg gatgcggaaa aagcttacca gcttattcta gaaaagttgg 10 4921 gaaatcaaat tcttgatgga attgctgata ctattgttga tagtacagtc caagatattt 4981 tagacaaaat cacaacagac ccttctctag gtttgttgaa agcttttaac aactttccaa 5041 tcactaataa aattcaatgc aacgggttat tcactcccag taacattgaa actttattag 5101 gaggaactga aataggaaaa ttcacagtca cacccaaaag ctctgggage 5 atgttcttag 5161 tctcagcaga tattattgca tcaagaatgg aaggcggcegt tgttctagcet ttggtacgag 5221 aaggtgattc taagccctgc gegattagtt atggatactc atcaggegtt cctaatttat 5281 gtagtctaag aaccagcatt actaatacag gattgactcc aacaacgtat 20 tcattacgtg
— 1 9 — 5341 taggcggttt agaaagcggt gtggtatggg ttaatgccct ttctaatgge aatgatattt 5401 taggaataac aaatacttct aatgtatctt ttttggaagt aatacctcaa acaaacgctt 5461 aaacaatttt tattggattt ttcttatagg ttttatattt agagaaaaca gttcgaatta 5521 cggggtttgt tatgcaaaat aaaagaaaag tgagggacga ttttattaaa attgttaaag 5 5581 atgtgaaaaa agatttcccc gaattagacc taaaaatacg agtaaacaag gaaaaagtaa 5641 ctttcttaaa ttctcectta gaactctacc ataaaagtgt ctcactaatt ctaggactge 5701 ttcaacaaat agaaaactct ttaggattat tcccagactc tcctgtictt gaaaaattag 5761 aggataacag tttaaagcta aaaaaggctt tgattatgct tatcttgtct 0 agaaaagaca 5821 tgttttccaa ggctgaatag acaacttact ctaacgttgg agttgatttg cacaccttag 5881 ‏عاو‎ ttttaaggga ggaactggaa aaacaacact ttctctaaac gtgggatgca 5941 acttggccca atttttaggg aaaaaagtgt tacttgctga cctagacccg caatccaatt 15 6001 tatcttctgg attgggggct agtgtcagaa ataaccaaaa aggcttgcac gacatagtat 6061 acaaatcaaa cgatttaaaa tcaatcattt gcgaaacaaa aaaagatagt gtggacctaa 6121 ttcctgcatc atttttatcc gaacagttta gagaattgga tattcataga ggacctagta 0 6181 acaacttaaa gttatttctg aatgagtact gcgctccttt ttatgacatc tgcataatag
— 2 0 — 6241 acactccacc tagcctagga gggttaacga aagaagcttt tgttgcagga gacaaattaa 6301 ttgcttgttt aactccagaa cctttttcta ttctagggtt acaaaagata cgtgaattct 6361 taagttcggt cggaaaacct gaagaagaac acattcttgg aatagctttg tctttttggg ~~ 5 6421 atgatcgtaa ctcgactaac caaatgtata tagacattat cgagtctatt tacaaaaaca 6481 agcttttttc aacaaaaatt cgtcgagata tttctctcag ccgttctctt cttaaagaag 6541 attctgtagc taatgtctat ccaaattcta gggccgcaga agatattctg aagttaacgc 10 6601 atgaaatagc aaatattttg catatcgaat atgaacgaga ttactctcag aggacaacgt 6661 gaacaaacta aaaaaagaag cggatgtctt ttttaaaaaa aatcaaactg ccgcttctct 6721 agattttaag aagacacttc cttccattga actattctca gcaactttga attctgagga 5 6781 aagtcagagt ttggatcgat tatttttatc agagtcccaa aactattcgg atgaagaatt 6841 ttatcaagaa gacatcctag cggtaaaact gcttactggt cagataaaat ccatacagaa 6901 gcaacacgta cttctittag gagaaaaaat ctataatgct agaaaaatcc tgagtaagga 20 6961 tcacttctcc tcaacaactt tttcatcttg gatagagtta gtttttagaa ctaagtcttc
— 2 1 — 7021 tgcttacaat gctcttgcat attacgagct ttttataaac ctccccaacc aaactctaca 7081 aaaagagttt caatcgatcc cctataaatc cgcatatatt ttggccgcta gaaaaggcga 7141 tttaaaaacc aaggtcgatg tgatagggaa agtatgtgga atgtcgaact catcggcgat 5 7201 aagggtgttg gatcaatttc ttccttcatc tagaaacaaa gacgttagag aaacgataga 7261 taagtctgat ttagagaaga atcgccaatt atctgatttc ttaatagaga tacttcgcat 7321 catatgttcc ggagtttctt tgtcctccta taacgaaaat cttctacaac agctttttga 7381 actttttaag caaaagagct gatcctccgt cagctcatat atatatttat tatatatata 0 7441 tttatttagg gatttgattt tacgagagag a ‏جزئي للفئة 1 خارج بروتين‎ Neisseria gonorrhoeae porA ‏هوية متوالية رقم 9: جين‎ (GenBank: HE681886.1) GC3 ‏الغشاء» عزل‎ 1 gceggeggeg gegegaccceg ttggggcaat agggaatcect ttgtcggett ggcaggcgaa 5 61 ttcggcacgce tgcgecgeecgg cecgegttgeg aatcagtttg acgatgeccag ccaagccatt 121 gatecttggg acagcaacaa tgatgtggct tcgcaattgg gtattttcaa acgccacgac 181 gatatgccgg tttccgtacg ctacgactce ccggactttt ccggtttcag 0 cggcagcgtc
— 2 2 — 241 caattcgttc cggctcaaaa cagcaagtcc gectatacge cggcteattg gactactgtg 301 tataacacta acggtactac tactactttc gttccggctg ttgtcggcaa gcccggateg 361 gatgtgtatt atgccggtct gaattacaaa aatggcggtt ttgccgggaa ctatgcecttt 421 aaatatgcga gacacgccaa tgtcggacgt aatgcttttg agttgttctt gctcggcagt 5
481 gggagtgatg aagccaaagg taccgatccc ttgaaaaacc atcaggtaca ccgcctgacg 541 ggcggctatg gggaaggegg cttgaatctc gecttggegg ctcagttgga tttgtctgaa
601 aatgccgaca aaaccaaaaa cagtacgacc gaaattgccg ccactgettc 0 ctaccgcttc 661 ggtaatacag tcccgcgcat cagctatgcc catggtttcg actttgtcga acgcagtcag 721 aaacgcgaac ataccagcta tga glutamine ‏جلوتامين سينقيتاز‎ Neisseria gonorrhoeae ‏هوية متوالية رقم 10: جين‎ 5 ‏جزئية‎ cds ‏ألليل»‎ ginA-14 ((gInA) synthetase (GenBank: AF520262.1)
1 cccgctttgt cgatttgcge ttcaccgata ccaaaggcaa gcagcaccac tttaccgtgc
61 ctgcgcgcat cgtgttggaa gaccccgaag agtggtttga aaacggaccg 20 gcgtttgacg
— 2 3 — 121 gctcgtccat cggeggcetgg aaaggcattg aggcettccga tatgcagctg cgtcccgatg 181 cgtccacagce cttcgtcgat cctttttatg atgatgttac cgtcgtcatt acctgcgacg 241] tcatcgaccc tgccgacggt cagggttacg accgcgacce gcgctccate gcacgccgeg 5 301 ccgaagccta tttgaaatct tccggtatcg gcgacaccgce ctatttcgge cccgaacccg 361 aattcttegt cttcgacggce gtagaatttg aaaccgacat gcacaaaacc cgttacgaaa 421 tcacgtccga aagcggcegceg tgggcaagceg gectgcatat ggacggtcaa 10 aacaccggcc 48] 3600600092 cgtcaaaggce ggctacgecge ccgtcgegec gattgactge ggtcaagatt 541 tgcgctccge catggtgaac attttggaag gactcggcat cgaagtcgaa gtccaccaca 15 601 gcgaagtcgg taccggcagce caaatggaaa tcggcacccg tttcgccact ttggtcaaac 661 gcgccgacca aacccaagat atgaaatacg tcatccaaaa cgttgcccac aatttcggca 721 aaaccgccac ctttatgccc aaaccgatta tgggcgacaa cggcageggt 20 atgcacgtcc
— 2 4 — 7181 accaatccat ttggaaagac ggtcaaaacc tgttcgcagg cgacggctat gccggtttgt 841 ccgataccgc gctctactac atcggcggca tcatcaaaca cgccaaagcec ctgaacgcga 901 ttaccaatcc gtccaccaac tcctacaaac gectcgtgee geactttgaa 5 gcaccgacca 961 aattggccta ttccgccaaa aaccgttceg cttccatceg tatcccgtet gtgaacagca 1021 gcaaggcgcg ccgcatcgaa gegcegtttcc ccgacccgac cgccaacccg tatttggcat 10 1081 ttgccgecect getgatggee ggtttggacg geattcaaaa caaaatccat ccgggcegacc 1141 ctgccgataa aaacctgtac gacctgccge cggaagaaga cgcgctcgtc ccgaccgtct
1201 gcgcttcttt ggaagaagca cttgccgece tcaaggtcga ccacgaattc 15 ctgctgcgceg 1261 gcggcgtgtt cagcaaagac tggatcgaca gctacatcge ctttaaagag gaagatgtcc 1321 gccgceateeg tatggegecg caccegetgg aatttg
تكون متواليات البادئ المستخدمة فى تفاعل ‎LAMP‏ كما يلى: ‎CT‏ بلازميد
GCAGCTTGTAGTCCTGCTTGAGTCTTCGTAACTCGCTCC | FIP ‏“ججح‎ ‎TCGAGCAACCGCTGTGACCCTTCATTATGTCGGAGTCTG ‎—— ‎GC PorA7
FIPATGGGCATAGCTGATGCGCGAATTGCCGCCACT
‏صصص سس‎
TCGACTTTGTCGAACGCAGTCAAATCGACACCGGC ew (21 ‏(هوية متوالية رقم‎ GCGAACATACCAGCTATGATCAA | LoopF ‏ب سس‎
GC gInA7
— 6 2 — 0 (هوية متوالية رقم 24( ‎CTTCGATGCCGAGTCCTTCCGATTGACTGCGGTCAAGAT‏ ‏(هوية متوالية رقم 25( (26 ‏(هوية متوالية رقم‎ CAAATGGAAATCGGCACCC (27 ‏(هوية متوالية رقم‎ ATGTTCACCATGGCGGAG ‏المحلول المنظم‎
V6 ٠ 2 1 = ‏لاختراع وتم تميزه‎ f ‏مقدم الطلب نظام محلول منظم للاستخدام مع المسبارات من‎ sh ‏(أو 76.210 بدون وجود صبغة 13/) في الأمثلة التالية. تكون تركيزات مكونات المحلول‎ ‏المنظم بعد إعادة تكوين المحلول المنظم:‎ ‎V6.21 5‏ 0-4 1 مللي مولار ‎«dNTP’s‏ 0 1 مللي مولار ملح؛ 30 مللي مولار تريس ‎Tris‏ رقم هيدروجيني ‎Al 30 8‏ مولار تيرهالوز ‎U8-1 « Trehalose‏ بوليميراز ‎(BST polymerase‏ صبغة %0.05 برويان دايول ‎.propanediol‏ ‎V6.21p‏ ‏10 10-4 مللي مولار ‎«dNTP’s‏ 10 مللي مولار ملح؛ 30 مللي مولار تريس رقم هيدروجيني 8.8« مللي مولار تيرهالوزء ‎US-1‏ بوليميراز ‎«BST‏ و960.05 برويان دايول. ‎PCR‏ ‏تم تنفيذ كشف ‎CT/GC‏ في عينة سريرية بواسطة ‎PCR‏ بالزمن الفعلي باستخدام ‎APTIMA‏ ‏06 متعدد (680- مسبار) وفقاً لتعليمات المصنّع. 5 استشراد كهربى لجل أجاروز ‎Agarose Gel Electrophoresis‏
تم تنفيذ استشراد كهربي للحمض النووي في 961 جل أجاروز من محلول منظم ‎IXTAE‏ عند 0 فولط. تم تنشيط منتجات ‎LAMP DNA‏ باستخدام ‎GelRed‏ (إنقيتروجين ‎(Invitrogen‏ ‏باستخدام ناقل ‎transilluminator ss‏ تم تطوير محلول منظم 1 2 . ‎V6 . 2 1 Ps V6‏ بواسطة مقدم الطلب ‎٠‏ تم الحصول على ‎{gals‏
‎LAMP 5‏ من ‎.Eurofins‏ تم شراء أوليجونيوكليوتيدات مرمزة بحامل تألق ‎Fluorophore—‏ ‎labelled oligonucleotides‏ من ‎DNA technologies‏ 11169:8160. تم شراء محلول منظم تريس ‎Tris buffer‏ « جل أجاروز ‎agarose gel‏ وماء بدرجة ‎PCR‏ من 519018. تم الحصول على معايير ‎GC DNA, CT‏ من ‎ATCC‏ ‏الأمثلة
‏0 المثال 1 تعرض الأشكال 12 إلى 2و مخططات تضخيم مولدة باستخدام بوادئ ‎CT PBI‏ (الشكل 2 والشكل ‎GC gInAT7 (a2‏ (الشكل 2ب والشكل 2ه) و0087 ‎GC‏ (الشكل 2ج والشكل 2و) في محلول منظم 1/6.21 يحتوي على ‎VI3‏ (الأشكال 2 2ب و2ج) ومحلول منظم ‎V6.21p‏ ‏بدون صبغة 7/13 (الأشكال 2د؛ 2ه و2و). تكون المتواليات المستهدفة موضحة في هويات
‏5 متوالية أرقام 8 إلى 10 باستخدام مسبار ‎CT PBI‏ داخلي مترافق مع ‎FAM‏ مسبار حلقة ‎GC‏ ‎gINAT‏ مترافق مع ‎Joe‏ ومسبار ‎GC 00:87 dala‏ مترافق مع ‎Alexa546‏ على التوالي. تم تنفيذ كل التفاعلات لمدة 60 دقيقة عند درجة حرارة ثابتة 63 درجة مئوية باستخدام ماكينة 7500 اقم المثال 2
‏0 تكون الأشكال 3 و3ب عبارة عن تحليلات لمنحتنى انصهار ‎melt curve analyses‏ منتجات ‎LAMP‏ مولدة باستخدام بوادئ ‎CT PBI primers‏ في وجود مسبار ‎CT PBI‏ داخلي مترافق مع ‎FAM‏ تم استخدام 100 بيكوجرام لكل تفاعل من معيار ‎ATTC CT DNA‏ على هيئة عينة مقارنة موجبة. ‎A‏ - مخطط مراسل مطبع؛ 8 - مخطط مراسل مشتق. تم توليد مخططات منحنى الانصهار بناءً على القراءات في قناة ‎FAM‏ باستخدام ماكينة 7500ا8م.
— 2 8 —
المثال 3 تكون الأشكال 14 وب عبارة عن تحليلات لمنحنى انصهار منتج ‎LAMP‏ مولد باستخدام بوادئ ‎GC gINAT‏ في وجود مسبار حلقة ‎GC gINAT‏ مترافق مع ‎JOE‏ تم استخدام 100 بيكوجرام لكل تفاعل من معيار ‎ATTC GC DNA‏ على هيئة عينة مقارنة موجبة. يعرض الشكل 4
مخطط مراسل مطبع ويعرض الشكل 4ب مخطط مراسل مشتق. تم توليد مخططات منحنى الانصهار بناءً على القراءات في قناة ‎JOE‏ باستخدام ماكينة 817500م. المتال 4 تكون الأشكال 05515 عبارة عن تحليلات لمنحنى انصهار منتج ‎LAMP‏ مولد باستخدام بوادئ ‎GC 07‏ في وجود مسبار ‎GC POrA7 dala‏ مترافق مع 708546 81. تم استخدام 100
0 بيكوجرام لكل تفاعل من معيار ‎ATTC GC DNA‏ على هيئة عينة مقارنة موجبة. يعرض الشكل مخطط مراسل مطبع؛ يعرض الشكل 4ب مخطط مراسل مشتق. تم توليد مخططات منحنى الانصهار بناءً على القراءات في قناة ‎Cy3‏ باستخدام ماكينة 817500م. المتال 5 :
5 الاختراع في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة. يشير زمن التضخيم السابق للإيجابيات الزائفة (أكبر من 30 دقيقة) بعد تركيز ‎DNA‏ المستهدف الأدنى القابل للكشف فى تفاعل ‎LAMP‏ ‎(100fg GC DNA)‏ إلى أن التضخيم غير المخصص يمكن أن يكون نتيجة لتكوين دايمير ‎teal‏ ,الا يسمح تحليل منحنى ‎f‏ لانصهار القياسي بالتمبيز بين المنتج المخصص وغير المخصص في تفاعل ‎LAMP‏ هذاء ولكن يمكن التعرف على المنتج غير المخصص باستخدام المسبار
0 الخاص بالاختراع. تم تضخيم ‎GC DNA‏ باستخدام بوادئ ‎GC POrAT‏ والتوضيح للرؤية باستخدام صبغة 3 ‎V1‏ ومسبار ‎GC PorA7-ALEXAS546‏ حسب الملائمة. المثال 6 : يعرض الشكل 7 مخططات التضخيم مولدة باستخدام بوادئ ‎CT 081 primers‏ في محلول منظم 6.21 يحتوي على ‎VI3‏ ومحلول منظم ‎V6.21p‏ بدون صبغة 13/ لكن في وجود مسبار طرف 081 ‎CT‏ (مكمل لمنطقة الحلقة ‎(complementary to loop region‏
— 9 2 — باستخدام مترافق © داخلي وفاصل ‎(3°ddC) 3” terminator‏ بالرغم من تأكيد التضخيم الناجح ل ‎DNA‏ المستهدف عن طريق إثارة صبغة 1/13 في تفاعل التحكم؛ لا يولد مسبار ‎CT PBL‏ مع فاصل 37 إشارة موجبة ‎positive signal‏ . المثال 7
تعرض الأشكال 8518( مخططات التضخيم المولدة في محلول منظم ‎V6.21p‏ يحتوي على ‎ROX‏ في وجود بوادئ ‎CT PBI‏ ومسبار طرف ‎CT PBI‏ مع سيتوسين داخلي ‎internal‏ ‏6 مترافق مع ‎FAM‏ (الشكل 18(« ويوادئ ‎dale‏ ومسبار 0لا:3 مع سيتوسين طرفي ‎terminal cytosine‏ 37 مترافق مع ‎FAM‏ (الشكل 8ب). يمثل الخط الأول إشارات مولدة بواسطة ‎(ROX‏ ويقابل الخط الثاني ‎slay)‏ المولدة في قناة ‎FAM‏ يؤدي ربط المسبار مع ©
0 مرمزة داخلياً ب ‎DNA‏ المستهدف إلى إثارة ‎.FAM‏ لا يستبدل ربط المسبار مع طرف 37 المرمز ب © بالهدف حالة إثارة ‎FAM‏ ‏المتال 8 توضح الأشكال 9ا إلى 9ج مخططات التضخيم مولدة باستخدام بوادئ ‎CT PBI‏ في محلول منظم ‎V6.21p‏ بدون 13/ في وجود مسبار 081 ‎CT‏ داخلي باستخدام مترافق © داخلي مع
‎FAM 5‏ وصبغة مرجعية ‎(ROX) reference dye‏ يعرض الشكل 19 بيانات ‎ald‏ قراءات من ‎FAM sls‏ في الخط الأول ومن القناة ‎ROX‏ في خط ثاني. يعرض الشكل 9ب مخططات تضخيم (مولدة في قناة ‎(FAM‏ معادلة مع ‎ROX‏ يعرض الشكل 9ج مخططات منحنى انصهار مراسل
‏بن ايه ‎٠‏ ‏المثال 9
‏0 توضح الأشكال 10 إلى 10ج التحقق من صحة تخصيص ‎PB1-FAM lus‏ 01. يعرض الشكل 110 مخططات تضخيم مولدة باستخدام مسبار ‎CT PBI-FAM‏ في وجود ‎CT DNA‏ ويوادئ ‎LCT‏ للمقارنة؛ تم تنفيذ مجموعتين من التفاعلات حيث تم تضخيم جينات غير مخصصة؛ ‎GC PorA7 5 GC 7‏ باستخدام بوادئ ‎LAMP‏ المقابلة في وجود مسبار ‎CT PB1-‏ ‎.FAM‏ في محلول منظم 76.210 تم توليد مخططات التضخيم في وجود مسبار 081 ‎CT‏ في
— 0 3 — قناة ‎FAM‏ فقط ‎Lovie‏ توجد ‎CT DNA‏ في التفاعل ولم يتم توليد أي إشارة عند تضخيم الجينات غير المخصصة ‎PorA7 5 GC gInA7)‏ 66). لم يتم توليد أي إشارة ‎Lad‏ عند استخدام مسبار غير مخصص في تفاعل حيث يتم تضخيم ‎CT DNA‏ باستخدام بوادئ ‎(CT primers‏ يعرض الشكل 10ج بيانات تم الحصول عليها في تجرية مناظرة ولكن تم تنفيذها في محلول منظم 76.1 يحتوي على صبغة إقحام ‎V31‏ يعرض الشكل 10 ‎z‏ منتجات ‎DNA‏ مولدة في التجرية
الموصوفة في الشكل 110. المتال 10 تعرض الأشكال 111 و11ب التحقق من صحة مسبار ‎CT PB1-FAM‏ مقابل تجرية ‎APTIMA‏ ‏1. تم اختبار خمسون ‎die‏ سريرية أكدت أنها موجبة ‎(29=n)‏ (الشكل 111( وسالبة ‎(21=n)‏
‎Jal) 0‏ 11ب) ل ‎CT‏ في محلول منظم 76.210 باستخدام مسبار ‎PBI-FAM‏ 01. من 50 ‎die‏ كانت 24 ‎due‏ مختبرة سالبة (الشكل 111( و26 ‎die‏ مختبرة موجبة (الشكل 11ب) ل ‎CT‏ ‏باستخدام مسبار ‎.CT PBI-FAM‏ يوجد 90686 اتفاق بين اختبارات ‎Aptima‏ و-18 ‎CT‏ ‎FAM‏ ‏المثال 11
‏15 تعرض الأشكال 112 و12ب مخططات التضخيم المولدة في ‎CT/GC‏ متعدد باستخدام مسبارات ‎PB1-FAM + GC PorA7-Alexa546‏ 01. تم تضخيم ‎GC DNA CT‏ في تفاعلات منفصلة ومترافقة فى محلول منظم ‎V6 . 21 P‏ فى وجود مسبارات ‎CT PB 1 -FAM‏ و ‎GC‏ ‏0087-6 . تم تسجيل القراءات في قنوات ‎Cy3‏ (الشكل 112( ‎FAM‏ (الشكل 2ب). أوضحت التجرية أنه يمكن تضخيم وكشف أهداف ‎DNA‏ في تفاعل متزامن مع مسبارات
‏0 اال 3 ‎Alexa546‏ مرمزة ولا يوجد أي تفاعلية عرضية بين 581 ‎CT‏ وبوادئ 0187 ‎GC‏ ‏والمسبارات. ‏المثال 12 الجدول 1 يعرض مقارنة بين ‎CT/GC 5 CT/GC Aptima «GC 5 CT 11/13 LAMP‏ متعدد ‎PB1-FAM + GC PorA7-Alexa546)‏ 01). تم اختبار ‎DNA‏ المستخرجة من 136 عينة
— 1 3 — سريرية باستخدام ‎CT PBI aie CT/GC Aptima‏ وبوادئ 0087 ‎GC‏ فى محلول منظم 1 يحتوي على ‎VI3‏ وفي تفاعل متعدد في محلول منظم ‎V6.21p‏ في وجود ‎CT PBI‏ ويوادئ ‎GC PorA7‏ ومسبارات ‎PorA7-Alexa546 3 CT PB1-FAM‏ 60. فى تجرية مقارنة تم اختبار العينات أيضاً في تفاعل بسيط باستخدام مسبار ‎GC gINAT=joe‏ يعرض الجدول درجات الاتفاق بين الاختبارات. جدول 1 ّْ“ ‎LAMP %92‏ ا مقابل ‎PB1-FAM‏ 1 فى المتعدد ‎CT porA7-Alexa546 Jal AMP %95‏ المتعدد ‎CT‏ فى متعدد مقابل ‎CT Aptima‏ ‎GC‏ فى متعدد مقابل ‎GC Aptima‏ قائمة المتواليات ‎SEQUENCE LISTING‏ ‎Mast Group Limited‏ >110< ‎Nucleic Acid Probe 10‏ >120< ‎KER/P442807WO‏ >130< ‎PCT/GB2014/053238‏ >140<
>141< 2014-10-30 <150> GB1319180.4 <151> 2013-10-30 <160> 26 <170> 5 <210> 1 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> 10 <221> Modified Base <222> 9 <223> Designed DNA probe with a labelled cytosine at position 9 <400> 1 gtgcacgccc caatagaat 19 5 <210> 2 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence
<220> <221> Modified Base <222> 9 <223> Designed DNA probe with a labelled cytosine at position 9 <400> 2 5 taagataacc ccgcacgtg <210> 3 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence 10 <220> <221> Modified Base <222> 9 <223> Designed DNA probe with a labelled cytosine at position 9 <400> 3 15 tcgagcaacc gctgtgac <210> 4 <211> 23 <212> DNA
<213> Artificial Sequence <220> <221> Modified Base <222> 10 <223> Designed DNA probe with a labelled cytosine at position 10 5 <400> 4 gcgaacatac cagctatgat caa <210> 5 <211> 18 <212> DNA 10 <213> Artificial Sequence <220> <221> Modified Base <222> 8 <223> Designed DNA probe with a labelled cytosine at position 8 15 <400> 5 atgttcacca tggcggag <210> 6 <211> 23
<212> DNA <213> Artificial Sequence <221> <221> Modified Base <222> 23 5
<223> Designed DNA probe with a labelled cytosine at position 23 <400> 6 ccagggtatc taatcctgtt tgc <210> 17
<211> 7471 10 <212> DNA <213> Chlamydia trachomatis <400> 7 tttgcaactc ttggtggtag actttgcaac tcttggtggt agactttgca actcttggtg 60 gtagacttgg tcataatgga cttttgttaa aaaatttctt aaaatcttag agctccgatt 120 5 ttgaatagct ttggttaaga aaatgggctc gatggctttc cataaaagta gattgttctt 180 aacttttggg gacgcgtcgg aaatttggtt atctacttta tctcatctaa ctagaaaaaa 240 ttatgcgtct gggattaact ttcttgtttc tttagagatt ctggatttat cggaaacctt 300 gataaaggct atttctcttg accacagcga atctitgttt aaaatcaagt ctctagatgt 360 ttttaatgga aaagtcgttt cagaggcctc taaacaggct agagcggcat gctacatatc 420 tttcacaaag tttttgtata gattgaccaa gggatatatt aaacccgcta ttccattgaa 480 agattttgga aacactacat tttttaaaat ccgagacaaa atcaaaacag aatcgatttc 540 taagcaggaa tggacagttt tttttgaagc gctccggata gtgaattata gagactattt 600 aatcggtaaa ttgattgtac aagggatccg taagttagac gaaattttgt ctttgcgcac 660 5 agacgatcta ttttttgcat ccaatcagat ttcctttcgc attaaaaaaa gacagaataa 720 agaaaccaaa attctaatca catttcctat cagcttaatg gaagagttgc aaaaatacac 780 ttgtgggaga aatgggagag tatttgtttc taaaataggg attcctgtaa caacaagtca 840 ggttgcgcat aattttaggc ttgcagagtt ccatagtgct atgaaaataa aaattactcc 900 cagagtactt cgtgcaagcg ctttgattca tttaaagcaa ataggattaa aagatgagga 960 10 aatcatgcgt atttcctgtc tctcatcgag acaaagtgtg tgttcttatt gttctgggga 1020 agaggtaagt cctctagtac aaacacccac aatattgtga tataattaaa attatattca 1080 tattctgttg ccagaaaaaa cacctttagg ctatattaga gccatcttct ttgaagegtt 1140 gtcttctcga gaggatttat cgtacgcaaa tatcatcttt gcggttgegt gtccecgtgac 1200 cttcattatg tcggagtctg agcaccctag gegtttgtac tccgtcacag cggttgeteg 1260 5 aagcacgtgc ggggttatct taaaagggat tgcagcttgt agtcctgcett gagagaacgt 1320 gcgggcgatt tgccttaacc ccaccatttt tccggagega gttacgaaga caaaacctct 1380 tcgttgaccg atgtactctt gtagaaagtg cataaacttc tgaggataag ttataataat 1440 cctcttttct gtctgacggt tcttaagetg ggagaaagaa atggtagctt gttggaaaca 1500 aatctgacta atctccaagc ttaagacttc agaggagcgt ttacctcctt ggagceattgt 1560 ctgggcgatc aaccaatccc gggcgttgat tttttttage tctittagga aggatgetgt 1620 ttgcaaactg ttcatcgcat ccgtttttac tatttccctg gttttaaaaa atgttcgact 1680 attttcttgt ttagaaggtt gcgctatagc gactattcct tgagtcatcc tgtttaggaa 1740 tcttgttaag gaaatatagc ttgctgctcg aacttgttta gtaccttcgg tccaagaagt 1800 5 cttggcagag gaaacttttt taatcgcatc taggattaga ttatgattta aaagggaaaa 1860 ctcttgcaga ttcatatcca aagacaatag accaatcttt tctaaagaca aaaaagatcc 1920 tcgatatgat ctacaagtat gtttgttgag tgatgcggtc caatgcataa taacttcgaa 1980 taaggagaag cttttcatgc gtttccaata ggattcttgg cgaattttta aaacttcctg 2040 ataagacttt tcgctatatt ctaacgacat ttcttgctgc aaagataaaa tccctttacc 2100 0 catgaaatcc ctcgtgatat aacctatccg caaaatgtcc tgattagtga aataatcagg 2160 ttgttaacag gatagcacgc tcggtatttt tttatataaa catgaaaact cgttccgaaa 2220 tagaaaatcg catgcaagat atcgagtatg cgttgttagg taaagctctg atatttgaag 2280 actctactga gtatattctg aggcagcttg ctaattatga gtttaagtgt tcccatcata 2340 aaaacatatt catagtattt aaatacttaa aagacaatgg attacctata actgtagact 2400 15 cggcttggga agagcttttg cggcgtcgta tcaaagatat ggacaaatcg tatctcgggt 2460 taatgttgca tgatgcttta tcaaatgaca agcttagatc cgtttctcat acggttttcc 2520 tcgatgattt gagcgtgtgt agcgctgaag aaaatttgag caatttcatt ttccgctegt 2580 ttaatgagta caatgaaaat ccattgcgta gatctccgtt tctattgctt gagcgtataa 2640 agggaaggct tgatagtgct atagcaaaga ctttttctat tcgcagcgcet agaggecggt 2700 ctatttatga tatattctca cagtcagaaa ttggagtgct ggctcgtata aaaaaaagac 2760 gagcagcgtt ctctgagaat caaaattctt tctttgatgg cttcccaaca ggatacaagg 2820 atattgatga taaaggagtt atcttagcta aaggtaattt cgtgattata gcagctagge 2880 catctatagg gaaaacagct ttagctatag acatggcgat aaatcttgcg gttactcaac 2940 5 agcgtagagt tggtttccta tctctagaaa tgagcgcagg tcaaattgtt gagcggattg 2300 ttgctaattt aacaggaata tctggtgaaa aattacaaag aggggatctc tctaaagaag 2360 aattattccg agtggaagaa gctggagaaa cagttagaga atcacatttt tatatctgca 2420 gtgatagtca gtataagctt aatttaatcg cgaatcagat ccggttgctg agaaaagaag 2480 atcgagtaga cgtaatattt atcgattact tgcagttgat caactcatcg gttggagaaa 2540 10 atcgtcaaaa tgaaatagca gatatatcta gaaccttaag aggtttagcc tcagagctaa 2600 acattcctat agtttgttta tcccaactat ctagaaaagt tgaggataga gcaaataaag 2660 ttcccatgct ttcagatttg cgagacagcg gtcaaataga gcaagacgca gatgtgattt 2720 tgtttatcaa taggaaggaa tcgtcticta attgtgagat aactgtiggg aaaaatagac 2780 atggatcggt tttctcttcg gtattacatt tcgatccaaa aattagtaaa ttctccgeta 2840 5 ttaaaaaagt atggtaaatt atagtaactg ccacttcatc aaaagtccta tccaccttga 2900 aaatcagaag tttggaagaa gacctggtca atctattaag atatctccca aattggctca 2960 aaatgggatg gtagaagtta taggtcttga ttttctttca tctcattacc atgcattagc 3020 agctatccaa agattactga ccgcaacgaa ttacaagggg aacacaaaag gggttgtttt 3080 atccagagaa tcaaatagtt ttcaatttga aggatggata ccaagaatcc gttttacaaa 3140 aactgaattc ttagaggctt atggagttaa gcggtataaa acatccagaa ataagtatga 3200 gtttagtgga aaagaagctg aaactgcttt agaagccttg taccatttag gacatcaacc 3260 gtttttaata gtggcaacta gaactcgatg gactaatgga acacaaatag tagaccgtta 3320 ccaaactctt tctccgatca ttaggattta cgaaggatgg gaaggtitaa ctgacgaaga 3380 5 aaatatagat atagacttaa caccttttaa ttcaccatct acacggaaac ataaaggatt 3440 cgttgtagag ccatgtccta tcttggtaga tcaaatagaa tcctactttg taatcaagcc 3500 tgcaaatgta taccaagaaa taaaaatgcg tttcccaaac gcatcaaagt atgcttacac 3560 atttatcgac tgggtgatta cagcagctgc gaaaaagaga cgaaaattaa ctaaggataa 3620 10 ttcttggcca gaaaacttgt tattaaacgt taacgttaaa agtcttgcat atattttaag 3680 gatgaatcgg tacatctgta caaggaactg gaaaaaaatc gagttagcta tcgataaatg 4740 tatagaaatc gccattcagce ttggctggtt atctagaaga aaacgcattg aatttctgga 4800 ttcttctaaa ctctctaaaa aagaaattct atatctaaat aaagagcgct ttgaagaaat 4860 aactaagaaa tctaaagaac aaatggaaca agaatctatt aattaatagc aggcttgaaa 15
4920 ctaaaaacct aatttattta aagctcaaaa taaaaaagag ttttaaaatg ggaaattctg 4980 gtttttattt gtataacact gaaaactgcg tctttgctga taatatcaaa gttgggcaaa 5040 tgacagagcc gctcaaggac cagcaaataa tccttgggac aaaatcaaca cctgtcgcag 5100 0 ccaaaatgac agcttctgat ggaatatctt taacagtctc caataattca tcaaccaatg 5160 ctictattac aattggtttg gatgcggaaa aagcttacca gcttattcta gaaaagttgg 5220 gaaatcaaat tcttgatgga attgctgata ctattgttga tagtacagtc caagatattt 5280 tagacaaaat cacaacagac ccttctctag gtttgttgaa agcttttaac aactttccaa 5340 tcactaataa aattcaatgc aacgggttat tcactcccag taacattgaa actttattag 5400 5 gaggaactga aataggaaaa ttcacagtca cacccaaaag ctctgggagc atgttcttag 5460 tctcagcaga tattattgca tcaagaatgg aaggcggcgt tgttctaget ttggtacgag 5520 aaggtgattc taagccctge gcgattagtt atggatactc atcaggcegtt cctaatttat 5580 gtagtctaag aaccagcatt actaatacag gattgactcc aacaacgtat tcattacgtg 5640 10 taggcggttt agaaagcggt gtggtatggg ttaatgccct tictaatggc aatgatattt 5700 taggaataac aaatacttct aatgtatctt ttttggaagt aatacctcaa acaaacgctt 5760 aaacaatttt tattggattt ttcttatagg ttttatattt agagaaaaca gttcgaatta 5820 cggggttigt tatgcaaaat aaaagaaaag tgagggacga ttttattaaa attgttaaag 5880 atgtgaaaaa agatttcccc gaattagacc taaaaatacg agtaaacaag gaaaaagtaa 15 5940 ctttcttaaa ttctccctta gaactctacc ataaaagtgt ctcactaatt ctaggactge 6000 ttcaacaaat agaaaacitct ttaggattat tcccagactc tcctgttctt gaaaaattag 6060 aggataacag tttaaagcta aaaaaggctt tgattatgct tatcttgtct agaaaagaca 6120 tgttttccaa ggctgaatag acaacttact ctaacgttgg agttgatttg cacaccttag 6180 ttttttgctc ttttaaggga ggaactggaa aaacaacact tictctaaac gtgggatgca 6240 acttggccca atttttaggg aaaaaagtgt tacttgctga cctagacccg caatccaatt 6300 tatctictgg attgggggct agtgtcagaa ataaccaaaa aggcttgcac gacatagtat 6360 acaaatcaaa cgatttaaaa tcaatcattt gcgaaacaaa aaaagatagt gtggacctaa 6420 5 ttcctgcatc atttttatcc gaacagttta gagaattgga tattcataga ggacctagta 6480 acaacttaaa gttatttctg aatgagtact gcgctccttt ttatgacatc tgcataatag 6540 acactccacc tagcctagga gggttaacga aagaagcttt tgttgcagga gacaaattaa 6600 ttgcttgttt aactccagaa cctttttcta ttctagggtt acaaaagata cgtgaattct 6660 taagttcggt cggaaaacct gaagaagaac acattcttgg aatagctitg tctttttggg 6720 10 atgatcgtaa ctcgactaac caaatgtata tagacattat cgagtctatt tacaaaaaca 6780 agcttttttc aacaaaaatt cgtcgagata tttctctcag ccgttctctt cttaaagaag 6840 attctgtagc taatgtctat ccaaattcta gggccgcaga agatattctg aagttaacge 6900 atgaaatagc aaatattttg catatcgaat atgaacgaga ttactctcag aggacaacgt 6960 gaacaaacta aaaaaagaag cggatgtctt ttttaaaaaa aatcaaactg ccgcttctct 7020 15 agattttaag aagacacttc cttccattga actattctca gcaactttga attctgagga 7080 aagtcagagt ttggatcgat tatttttatc agagtcccaa aactattcgg atgaagaatt 7140 ttatcaagaa gacatcctag cggtaaaact gcttactggt cagataaaat ccatacagaa 7200 gcaacacgta cticttttag gagaaaaaat ctataatgct agaaaaatcc tgagtaagga 7260 tcactictcc tcaacaactt tttcatcttg gatagagtta gtttttagaa ctaagtctic 7320 tgcttacaat gctcttgcat attacgagct ttttataaac ctccccaacc aaactctaca 7380 aaaagagttt caatcgatcc cctataaatc cgcatatatt tiggccgcta gaaaaggecga 7440 tttaaaaacc aaggtcgatg tgatagggaa agtatgtgga atgtcgaact catcggcgat 7500 aagggtgttg gatcaatttc ttccticatc tagaaacaaa gacgttagag aaacgataga 7560 5 taagtctgat ttagagaaga atcgccaatt atctgatttc ttaatagaga tacttcgcat 7620 catatgttcc ggagtttctt tgtcctccta taacgaaaat cttctacaac agctttttga 7680 actttttaag caaaagagct gatcctccgt cagctcatat atatatttat tatatatata 7740 1771 tttatttagg gatttgattt tacgagagag a
<210> 8 10 <211> 743 <212> DNA <213> Neisseria gonorrhoeae <400> 8 gcecggeggeg gegegacceg ttggggcaat agggaatect ttgtcggett ggcaggegaa 60 15 ttcggcacgc tgcgegeegg cecgegttgeg aatcagtttg acgatgccag ccaagecatt 120 gatccttggg acagcaacaa tgatgtggct tcgcaattgg gtattttcaa acgccacgac 180 gatatgccgg tttccgtacg ctacgactcc ccggactttt ccggtttcag cggcagegte 240 caattcgttc cggctcaaaa cagcaagtcc gectatacge cggcetcattg gactactgtg 300 tataacacta acggtactac tactactttc gttccggctg ttgtcggcaa 060938160 360 gatgtgtatt atgccggtct gaattacaaa aatggcggtt ttgccgggaa ctatgecttt 420 aaatatgcga gacacgccaa tgtcggacgt aatgcttitg agttgttctt gctcggcagt 480 gggagtgatg aagccaaagg taccgatccc ttgaaaaacc atcaggtaca ccgcctgacg 540 5 ggcggctatg gggaaggcegg cttgaatctc gecttggegg ctcagttgga tttgtctgaa 600 aatgccgaca aaaccaaaaa cagtacgacc gaaattgccg ccactgcttc ctaccgcettc 660 ggtaatacag tcccgcgcat cagcetatgce catggtticg actttgtcga acgcagtcag 720 743 aaacgcgaac ataccagcta tga
<210> 9 10 <211> 1356 <212> DNA <213> Neisseria gonorrhoeae <400> 10 cccgctttgt cgatttgecgce ttcaccgata ccaaaggcaa gcagcaccac tttacegtge 60 15 ctgcgcgcat cgtgttggaa gaccccgaag agtggtttga aaacggaccg gcegtttgacg 120 gctcgtccat cggeggcetgg aaaggcattg aggcettccga tatgcagcetg cgtcecgatg 180 cgtccacagc cttcgtcgat cctttttatg atgatgttac cgtcgtcatt acctgcgacg 240 tcatcgaccc tgccgacggt cagggttacg accgcgaccc 060-1608316 gcacgecgeg 300 ccgaagccta tttgaaatct tccggtatcg gcgacaccgce ctatttcgge cccgaacceg 360 aattcttcgt cttcgacggc gtagaatttg aaaccgacat gcacaaaacc cgttacgaaa 420 tcacgtccga aagcggcegceg tgggcaagceg gectgcatat ggacggtcaa aacaccggcec 480 accgccccgce cgtcaaaggce ggctacgegce ccgtecgegece gattgactge ggtcaagatt 540 5 tgcgctcecge catggtgaac attttggaag gactcggcat cgaagtcgaa gtccaccaca 600 gcgaagtcgg taccggcagce caaatggaaa tcggcacccg tttcgecact ttggtcaaac 660 gcgccgacca aacccaagat atgaaatacg tcatccaaaa cgttgcccac aatttcggeca 720 aaaccgccac ctttatgccc aaaccgatta tgggcgacaa cggcageggt atgcacgtcc 780 accaatccat ttggaaagac ggtcaaaacc tgttcgcagg cgacggctat gccggtttgt 840 10 ccgataccgc gctctactac atcggcggca tcatcaaaca cgccaaagcec ctgaacgega 900 ttaccaatcc gtccaccaac tcctacaaac gcectecgtgee gecactttgaa gcaccgacca 960 aattggccta ttccgccaaa aaccgttccg cttccatccg tatccegtet gtgaacageca 1020 gcaaggcgcg ccgcatcgaa gcgcegtttcc ccgacccgac cgccaacccg tatttggcat 1080 15 ttgccgcecct getgatggee ggtttggacg gecattcaaaa caaaatccat ccgggegace 1140 ctgccgataa aaacctgtac gacctgccge cggaagaaga cgcgctegtc ccgaccgtcet 1200 gcgcttcttt ggaagaagca cttgccgecc tcaaggtcga ccacgaattc ctgetgegeg 1260 gcggcegtgtt cagcaaagac tggatcgaca gctacatcgce ctttaaagag gaagatgtcc 1320 20
1356 gccgcatccg tatggcgecg cacccgetgg aatttg <210> 10 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence 5
<400> 10 tctacaagag tacatcggtc a 21 <210> 11 <211> 18
<212> DNA 10 <213> Artificial Sequence <400> 11 tgaagcgttg tcttctcg 18 <210> 12
<211> 39 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 12 gcagcttgta gtcctgcttg agtcttcgta actcgctcc 39
<210> 13 <211> 39 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 13 5 tcgagcaacc gctgtgaccc ttcattatgt cggagtctg 33 <210> 14 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence 10 <400> 14 cgggcgattt gccttaac 14 <210> 15 <211> 18 <212> DNA 15 <213> Artificial Sequence <400> 15 tacaaacgcc tagggtgc 18 <210> 16
<211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 16 accaaaaaca gtacgaccga 20 5 <210> 17 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 17 10 aagtgcgctt ggaaaaatcg 20 <210> 18 <211> 39 <212> DNA <213> Artificial Sequence 15 <400> 18 atgggcata gctgatgcgc gaattgccge cactgcettc 39 <210> 19 <211> 40
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 19 tcgactttgt cgaacgcagt caaatcgaca ccggcgatga 40 <210> 20 5
<211> 23
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 20 gcgaacatac cagctatgat caa 23 0
<210> 21
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence <400> 21 15 tcatatcttg ggtttggtcg 20
<210> 22
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 22 ctgcatatgg acggtcaaa 19
<210> 23 <211> 37 5
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 23 cgaagtccac cacagcgaat ttgaccaaag tggcgaa 37 <210> 24 10
<211> 39
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 24 cttcgatgcc gagtccttce gattgactge ggtcaagat 39 5
<210> 25
<211> 19
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<400> 5 caaatggaaa tcggcaccc 25 <210> 26
<211> 18
<212> DNA 5
<213> Artificial Sequence <400> 26 atgttcacca tggcggag 18

Claims (1)

  1. عناصر الحماية 1- طريقة لكشف متوالية حمض نووي ‎acid‏ 01101616 مستهدف في عينة تشتمل على: تضخيم حمض نووي ‎Nucleic acid‏ مستهدف في العينة عن طريق تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن ‎tdloop dala‏ التحقق من الحمض النووي ‎nucleic acid‏ المضخم باستخدام مسبار ‎probe‏ يشتمل ‎(le‏ ‏5 متوالية مسبار أوليجونيكلوتيد ‎oligonucleotide probe‏ مكملة لمنطقة متوالية حمض نووي ‎Nucleic acid‏ مستهدف» حيث يكون لمتوالية مسبار ‎probe‏ الأوليجونيكلوتيد ‎oligonucleotide probe‏ المذكورة رمز حامل تألق واحد فقط وحيث يرتبط الرمز بقاعدة سيتوسين ‎cytosine base‏ داخلية وحيث لا يكون بمتوالية مسبار ‎probe‏ الأوليجونيكلوتيد ‎probe oligonucleotide‏ المذكورة فاصل طرف 43 ‎Cua‏ يتم تثبيت قاعدة السيتوسين مركزياً 0 إلى حدٍ كبير على امتداد طول الأوليجونيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ باستثناء للمواضع 3-1 عند الطرف 3 والموضع 1 عند الطرف 5؛ و كشف وجود الحمض النووي ‎nucleic acid‏ المستهدف؛ حيث تشير الزيادات في تألق المسبار ‎probe‏ إلى وجود الحمض النووي ‎nucleic‏ ‏0 المستهدف في العينة. 2- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث تكون متوالية مسبار أوليجونيكلوتيد ‎oligonucleotide probe‏ هي متوالية ‎DNA‏ وتكون متوالية الحمض النووي 8610 ‎nucleic‏ ‏المستهدف عبارة عن متوالية ‎DNA‏ ‏3- الطريقة وفقاً لأي من عناصر الحماية ‎cdl)‏ حيث يشتمل حامل التألق على أي واحد أو أكثر منتقى مما ‎.ATTO 3 ALEXA (ROX (TAMRA (HEX (TET «JOE (FAM : _L‏ 4- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية 3 حيث يكون حامل التألق هو ‎Alexa546 5 Joe (FAM‏ 5- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث تشتمل متوالية مسبار أوليجونيكلوتيد ‎oligonucleotide probe | 5‏ على المتوالية التالية:
    ‎Xn C * Xm 3'‏ '5 (هوية متوالية رقم 1( حيث ‎an‏ > 1؛ 3>07؛ 6ل هي قاعدة نيوكليوتيد ‎nucleotide base‏ ؛ 5 * هي حامل ‎Gl‏ ‏و ‏يتم اختيار قاعدة النيوكليرتيد ‎(nucleotide base‏ ل ‎«Gy CT‏ ©« تكون أكبر من 1 إلى 20 ؛ بشكل مفضل أكثر من 1 إلى 10 و
    © تكون أكبر من 3 إلى 20 وأقل؛ بشكل مفضل أكبر من 3 إلى 10. 6- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث تشتمل متوالية مسبار أوليجونيكلوتيد ‎oligonucleotide probe‏ على واحدة أو أكثر من المتواليات التالية:
    ‎Lp 0‏ متوالية رقم 3: ‎TAAGATAAC[C-FAM]CCGCACGTG‏ ‏هوية متوالية رقم 5: ‎GCGAACATA [C-ALEXA546] CAGCTATGATCAA‏ أو هوية متوالية رقم 6: ‎[C-JOE] CATGGCGGAG‏ خذن ‎١‏ اق اط
    ‏5 7- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث يكون الحمض النووي ‎nucleic acid‏ المستهدف من كائن دقيق ‎micro—organism‏ « فطريات ‎fungi‏ ؛ خميرة ‎yeast‏ أو فيروس ‎VITUS‏ ‏8- الطريقة وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث يكون الحمض النووي ‎acid‏ 00001666 المستهدف من ‎Chlamydia trachomatis‏ و ‎gonorrhoeae‏ 556118ا6ا١.‏
    ‏20 ‏9- طريقة في المختبر لتشخيص عدوى ‎Chlamydia‏ و/ أو ‎Gonorrhea‏ في مريض؛ تشتمل على توفير عينة مشتقة من المريض؛ تنفيذ طريقة ‎ly‏ لأي من عناصر الحماية 8-1؛ و
    — 3 5 — كشف وجود حمض نووي ‎nucleic acid‏ مشتق من ‎Chlamydia trachomatis‏ و أو ‎Cus «Neisseria gonorrhoeae‏ تشير زيادة فى تألق المسبار ‎probe‏ إلى وجود عدوى ‎Chlamydia trachomatis‏ و أى ‎Neisseria gonorrhoeae‏ 10- الطريقة ‎Bd‏ لعنصر الحماية 9( حيث يتم إضافة نوع منفرد من مسبار ‎Probe‏ مخصص لحمض نووي 8610 ‎(Nucleic‏ أي من ‎Chlamydia trachomatis‏ و ‎Neisseria‏ ‏0006 إلى العينة. حيث يتم ترميز مسبار ‎probe‏ أول باستخد ام رمز تألق أول ويكون ‎aad‏ للتحقق من حمض نووي ‎Chlamydia trachomatis nucleic acid‏ ويتم ترميز مسبار ثاني باستخدام رمز تألق مختلف عن المسبار الأول ويبكون مخصص للتحقق من حمض نووي ‎nucleic acid‏
    ‎.Neisseria gonorrhoeae‏ 5 12- الطريقة وفقًا لأي من عناصر الحماية السابقة؛ حيث يتم تزويد المسبارات ‎probes‏ في نظام محلول منظم يشتمل على ‎dNTPs‏ بتركيز من 10-1 ‎Ve (Ale‏ واحد أو أكثر من الأملاح بتركيز كل ملح من 20-2 مللي مولار ؛» تريس ‎Tris‏ رقم هيدروجيني 8 بتركيز من 10- 100 ‎Ale‏ مولار» تيرهالوز ‎Trehalose‏ بتركيز من 100-10 ‎Ae‏ مولار» بوليميراز ‎polymerase‏ ‎BST‏ بكمية من 1 وحدة-12 وحدة و901-960.01 1؛ 2 برويان دايول ‎propanediol‏ 1,2. 3- الطريقة وفقًا لعنصر الحماية 12؛ حيث يتم اختيار واحد أو أكثر من الأملاح من المجموعة ‎All‏ تشتمل على ‎.MgS0O4 4 (NH4)2804 (KCI‏ 4- مسبار ‎probe‏ لتضخيم حمض نووي ‎nucleic acid‏ ثابت درجة ‎shall‏ يشتمل على 5 متوالية مسبار أوليجونيكلوتيد ©0005 ‎oligonucleotide‏ مكملة لمنطقة متوالية حمض نووي ‎NUCleic acid‏ مستهدف»؛ حيث يكون لمتوالية مسبار ‎probe‏ الأوليجونيكلوتيد المذكورة رمز
    حامل تألق واحد فقط وحيث يرتبط الرمز بقاعدة سيتوسين ‎cytosine base‏ داخلية وحيث لا يكون بمتوالية مسبار الأوليجونيكلوتيد المذكورة فاصل طرف 3" حيث يتم تثبيت قاعدة السيتوسين مركزياً إلى حدٍ كبير على امتداد طول الأوليجونيوكليوتيد ‎oligonucleotide‏ باستثناء للمواضع 3-1 عند الطرف 3 والموضع 1 عند الطرف 5"؛ و حيث يشتمل المسبار ‎probe‏ على واحدة أو أكثر من المتواليات التالية: هوية متوالية رقم 3: ‎TAAGATAAC[C-FAM]CCGCACGTG‏ ‏هوية متوالية رقم 5: ‎GCGAACATA [C-ALEXA546] CAGCTATGATCAA‏ أو هوية متوالية رقم 6: ‎[C-JOE] CATGGCGGAG‏ خذن ‎١‏ اق اط
    5- طاقم للكشف عن حمض نووي ‎acid‏ 00001616 مستهدف طبقًا لطريقة وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث يشتمل على مسبار ‎probe‏ طبقًا لعنصر الحماية 14؛ محلول منظم كاشف تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة ‎ANTPS cai) loop‏ وواحد أو ‎ST‏ من بوادئ تضخيم ثابتة درجة الحرارة ناتجة عن حلقة.
    6- الطاقم وفقاً لعنصر الحماية 15( يشتمل أيضاً على عينة مقارنة موجبة وسالبة. 7- الطاقم وفقاً لعنصر الحماية 16 حيث يشتمل محلول منظم الكاشف على ‎ANTPs‏ بتركيز من 10-1 ‎(A‏ مولار؛ واحد أو أكثر من الأملاح بتركيز من 20-2 ‎Ae‏ مولار؛ تريس ‎Tris‏ رقم 0 هيدروجيني 8.8 بتركيز من 10- 100 ‎Me‏ مولار؛ تيرهالوز ‎Trehalose‏ بتركيز من 100-10 ‎Al‏ مولار؛ بوليميراز ‎BST polymerase‏ بكمية من 1 وحدة-12 وحدة و901-960.01 1 2 برويان دايول ‎propanediol‏ 1,2. 8- الطاقم وفقاً لعنصر الحماية 17؛ حيث يتم اختيار واحد أو أكثر من الأملاح من المجموعة 5 التي تشتمل على ‎MgS04 5 (NH4)2804 KCI‏
    _ 5 5 _ 4 1 | - = MAST DNA ‏صورة تخطيطة لمسبار‎ ¥ J oF Ale 8 i 6 0 cllellc] 1 3 1 5 G ‏م‎ le T Is WC X LHS { ‏ايا ل‎ : ِ N a 1 A ْ | il J Z Aq J p : 3 NF TNE STGCACTGCGAATCTG ‏فى‎
    شكل ‎fy‏ ‏> مه ‎ERR‏ ‏مخطط متعدد المكونات ‎I rey‏ م ل ياي ا م ع ع و ل عدف يدأ ‎LE I i ae‏ 5 لح ا ل ‎I BE i‏ ا ‎RR RS BE‏ ا ‎SE ER SR‏ ا ‎SINAN |‏ يم ‎EN‏ جاه راع لاع الوق لماشو عم موا ف لمج كم بايا 1 3 : ا ‎a AAA a ae RRA oo. 0 . 0 n a N‏ هاجت لاح ءاه تع ‎ea‏ يه ‎UA a‏ لاي الهم خا وح عام ع هاعرت لحل وام ‎I‏ 1 : ; | } ‎H 8 1 BS N : : 3‏ 3 : : ع ‎H‏ 1 1 مجع جع م ع د مج 121 م ‎A I ENN‏ ل ‎I EE‏ 3 حضتت 1 ا الات د الام لج اكات ماي رات احج د حت ا ل ‎FERRER BR‏ لماه جه ا عا عع اما ا 5 ‎TI ESERIES or‏ ل ‎Ri nd RO bt‏ ا و سي رح مدت سد تجو وميد و ا ل ل ا يوج لجع مل ا ين جعت زو يبي م ع عجاوم لمعه ميا حك مجه لويم ملا ده و موه مل م مح ل لمات امح يي ‎SORT FE: HI‏ ااا ا حر مات وي كا ‎Faves‏ ا ا ا د ل 5 ‎i I Ny Mh‏ بيو ‎RR RE RE i‏ ‎BENSON ANIC MRE‏ لجعي بد ويح وحم با هده ‎ag oT I A TU‏ لواحت تت مومه لد جد مسجو حر لشي نتسج ل 0 0 ‎I I ey‏ ا ‎oN SITU SURI | 0: ; : 8 i N E } Th 8 Tr ey‏ 4 ‎aise nd anne dine ene slides ented‏ ا ‎sed‏ ا ا ل ا 0 = ‎RSE RN ER I RN PR I RIN DE PS SRI SR SR 1‏ عد لمات لجخا ‎ES SA‏ ل لح ل جا تا اح 0 ا ا جاجح ماب عله ااه امم لابح ام ‎ma‏ ا تا ‎ARTE SRT nT‏ + ال ‎ne H RN‏ ‎ENN‏ ل ا ‎I‏ ا ا ‎EE TE‏ ل ل ‎ERE‏ ا ‎LR‏ ‏اسمن ‎i 3 SEER 3 BS es es ns Se‏ = \ ا الست ‎EE SER pT‏ ل ‎I‏ ا ‎Uo CN ER‏ ل مدع ‎Et RE HE RoE‏ ا الا ا ل ال ا لا ل ا 2 ا ا 4 ال ا ل ,3 م ا الا ا ‎SAR WEI RET or es SS ; EINE‏ ا يي وجا لجان لمر ‎A re‏ جر اح ‎ee‏ ار ودع الم ل و ل ‎SE LE‏ ‎Am‏ 9 الل تي ا لست ا ‎a ie ee SE‏ ل ا ‎FC a a a sr ie I iy‏ ‎A are ANTI TRIE TR Sn TI ne he‏ ‎i HE esa fe Ceres aed‏ 0 ا مه وا الم لد ا ا ار دا ا 8 8 ‎i NE‏ 0 1 : > تا 8 8 ‎Li‏ ا ل ا : : ‎nmin‏ ل ل ‎daw‏ )0 ل ‎LE { 1 wf EN ee nf era ean ae‏ 3 ‎EER Rang‏ الموج لو ‎EH SEE ER Et a tt HE HE Bh ft EE HEE RE HH‏ ل ‎RS ER En‏ ا ل ‎ER‏ ا ل ا ‎TT ER‏ ال لح ا ‎EEE Na SERENE‏ الل لايع ححا رح ‎J‏ ماي حت تير م حك ع جه يع لامي جد ا ا ا ححا وطح ده ‎FS‏ ‎ENERGIES.‏ 1 : : : الام احلا لا لعل ايا حا ع كاوه حا امه ‎FE SC‏ ‎i : : + ; see a Ea ed i AEE ee Se eG i en‏ 1 ‎N be 1‏ ال ال الو ل ري ‎SU SONU‏ ال ل ا ا ‎ESO‏ ل ل ا ا ‎Fy PE‏ { ا ‎bE EH ET in EH TT SR‏ + ‎CH SER )‏ ل ‎{HE SE HHL SHI SHE SER GE RH HH HE HEE EE ERE NS SES‏ ‎a Tq ST om SS sat pana on NITRA‏ الت تت تت ‎LT Ty‏ لت ات تتا لات ات جد ‎JE Fit sf Fl A EG so‏ ‎SO : FN SO ; 1‏ 8 § ‎rea reese) ©‏ وتاي اتا و اا لاا اا اه : 4 0 99 .د £8 | ‎Ya Lr Y, ¥5 Ya Yo‏ >
    Hy ‏شكل ؟ ب‎ Law hx 5 1 > 1 i +
    ١ ‏ا ادع لحي‎ _ __ dais ‏ا ا - مخطط‎ ‏اا الس‎ ١ ‏اذ ج١١ ا لا لز ااا ذا اا »م‎ ni غ<أاامر7اا٠ك*>-85(٠1دددد.دلل ‏ع بللا‎ id Heroes Sr Es FER I I, BL LL BH UE RL RT I RL ‏ا‎ ‎= SERS EEI AS EI ITE I ‏حت ل‎ TN TI I yy ‏ع‎ ate H = : Eg wi ee a I ‏ل‎ ‎A ON ‏اس‎ od pi ‏ا م يي 5 ا اماس ال‎ wh REARS pbs +i SII : SEIT vib esti eT pps ssamets : x Rete gu RTI ELIE a a ‏تاي‎ a ‏ال ا‎ iii ‏شين‎ ‏ا الا‎ I ‏ان لاسي ااا ا ااا ل لا له ل ا‎ kL] PTY] CE Ney TNE RR ‏ا‎ ean ce een - ‏محقم الم ا مم‎ fares ‏ادن عت ا اال ا‎ RTA od supe A SHEL a Fe FE Rema OO I NR Ny pd a I ‏ل د ا ال ال ل‎ TIN ‏الل‎ ‎4 + ‏ييه معاي مشاه ا المح ا مي‎ x BR LAN fie ‏ا و ب وجا حم لاوا‎ SINS ‏الوص ا تا‎ ‏ججح و‎ Tm ee te i mi nee aes a a ‏ع‎ a Ye ey gp ne ‏اا ااا ااا ايان ات ااا د‎ & Ye + ‏ا‎ Yo Ys Ye ‏د‎ io On ‏ده‎ +
    ;
    دورة
    شكل ؟ + ‎v‏ ا ‎ade‏ ‏مشطط متعدد المكونات Lr Te Too PPE Tare TE VUE 0 ‏ل‎ I mI ‏يي ل لس‎ nad bE II I SEI nm nnn nnn i Jowswnae $b nn : : : ; ; IE. ‎Eos |‏ عي عا لت و10 ‎I Ted‏ كت ‎I EIT a TTT eee‏ كج كع مج ‎ET‏ اا كوه تاه ممما جيه تومه م ‎ETT‏ ا مات لح 3 ‎Yo‏ ‎Yi ‏ا تج‎ ed LR ‏ل‎ nL RL ad a a a avin ‏: ال ‎I‏ تح م جع متا ل ل م ل ا د م ل ‎pm RE ET‏ ‏اح لا ححا ا رمم ممه مد مه ‎EO OTN‏ دي الا ‎SIE nnn‏ ‎0 ‏ل‎ i - : 0 : ‏ب‎ Pee Fee rd ERE ‏دا‎ TRI IRRNY ‏د يق ‎ve‏ متي جعت ات ‎nr‏ أو لدج م ومو كد ‎ni nT ts rs‏ ا تمه جه فر ااه ‎TT SERN‏ اام ع متت ‎FREER Lo LRTI TTI PRESS ENR RRR AEH FH ERE‏ ا ‎18 EES FEET i i SU mina end sid nnn PESOS Poni ‏ل‎ JERE + ‏ات ل حا سس د مع ‎een‏ ل سمس ص مج بج الجر : ‎ras‏ ليا الما الحا ‎£ I Ce ‏ا الا ل ا ةل ا‎ <3 PE tt RA ee cid TIT i RECNORIAE] i BESSA SEU SOR ‏اك : ا‎
    —. 1 : Sn : I SP kd Hadise nnd ie Banaras anna sa fe FA SONU SN Jn ; 1 fo ‎tram FEE I I ne re ‏لقي م جر م‎ Rs ‏لع مع‎ a an ean eed + ‎pu od ‏ل ا‎ ASA ‏ا‎ BREE RERHES 3 phair ime k H ‏ا ا تت ار ان 1 ‎teen‏ ‎be coeds ‏قت ا يا‎ sande nme de strana, SST FO ‎! FERGAL Ee pL gs HES 5 0 ‏ل‎ 0 CHEER 8 ‏ا‎ 1 ] ‎™ 8 Bani et RRS HE 8 BR Sef eRGA ENR ‏ال‎ ‎f de an :‏ م ال ل 2 ال وا ‎Ta‏ مت مر لجعي ا ‏ا ا ا ا ا ‎ve ‏ا ال اا ا‎ En ‎rr ‏ا ومسو ره‎ erd ‏:+ الح ‎REO‏ ا ارك مت مم ويم ‎eh‏ كات و ‎LLL‏ لاح اام اط الح اع م اط و و و احج تع مم ا شت ل ل الج ‎Pr EE HE HER SE BE SR ‎\ RR I Ch RE EE RAR AN ‏ل ا‎ A A AE AR A SAAR RR ‏اتات سامت لما لمات لضا ااا اما نا لاا اما لاجر ااا اا لمات ااا اناا افا ااام اناالا ار الفا لات ما خا تحت ‎a Noa Ye X « ¥a ro. ro £ a te 8. ‏هه‎ 4 ‎88d ay ‏شكل‎ ‏مشخطط متعدد المكوتاتث‎ ‏لب ب ا ات ب لا#ت6”7©©#7اااااجي”“””5“©7-”م“ا#واااو(لا بد« ##ؤاًرا>وزرواوااؤا اغ‎ ‏ل‎ A ND Sy Ss A ra, Vaio ‏ان‎ a i. ‏ا ل سي ب‎ oe ‏سسسب مي يي 34 يبه‎ ‏ا ا‎ 3 TS ‏م و‎ A ‏ا‎ ‏ىيئ‎ 7“ Via Pi RE i EAN = PE ‏اا‎ of fr ‏الس ال ل‎ Tee ‏م‎ pe ‏ال ل ل‎ ‏حا لاا‎ OE at FD HE SRR OPERONS y Fee H Dass “fa 1 1 : Kal an & 1 1 : 8 : 1 0 VEE ‏بف ميضلا د ا‎ Ep Pavan > ar mmm EE FERRIC AS EERE ‏ل‎ (A VUECERICERR ‏ا حي‎ EAI REEEES ARTE IN I nn Ed fed IN UR wf TL Tn NS IRENA Nm F NY SPUR FERRO [TERE INNER I eT ERE ed Veer Ee ‏تاد ات 6ق لكت تا ات‎ 3 TEE 2 THEI 5 ‏ل و ا ل‎ ny ERE] i rey ww 2: ; : : Ea] : i i 2 : : 0 i : 3 = : i at : i 8 ks : : Fo # ES i B : : ; 9 i : ee) i : : i i : B > 4 ‏ا ا ا‎ a a TE { i : : = a ‏ا ل ل ل ل ا‎ TL ١ ١ or mame ‏مول تو يي المت يي‎ 5 HE oman commana Cems 4 ‏لضت ؤي تمصي إٍْ‎ fe freee ‏جا توي تي‎ Ce ee et es ma ‏عه وا تا‎ Cee 4 a LIE eo ‏و‎ $0 Xs vo fs io J ‏ةج‎ % w ‏دورة‎
    ‎PRE * +‏ مخطط متعدد المكونات ‎aay‏ ل ل ل ال ا ل ل ‎TT‏ ل ل ل ل ‎EID I CHL TGR I THE LR I HH EHH RD TH‏ ل ‎iT HEE‏ ‎UO PON SO #‏ ا ‎se a Ls Sn Sa a bm +d sn sa a Ft nd an ss sn SA es‏ 011 ‎H 5 : : B 1‏ : 8 : : 1 مح مع : 01 ‎TR er RE nd‏ اتات ا تت ا ل ‎J Eh‏ اواك ال ا ا ا ال سس ا ل ل ل ل ا ا ل ا ل ا ل اا ا ا ا اا سر ال ل ل اه ‎go ; : : : : a‏ ا ‎ee eT Rp ATTIRE 4‏ لل ‎ee lat‏ الس ‎ever $n Timea Foon EE ne bah cd a he Ha Fae Bl i‏ 3 ‎etn i ning‏ ل ‎fi al ET‏ = ‎ee I nnn‏ ا سس ا ل ‎TI I TT‏ اا ا اس ‎gg‏ ا اس لل ل لا ا ا ا ال ا د 1 23 ‎i‏ : 2 مر : ل : : ‎ELAR : R‏ ‎FORTE‏ ل ‎Yana Ee ET eT‏ و ا اول يا لا ‎I‏ ارت ايا وا ا عا تت ريد ره م وام لوا ‎rT‏ مدي الم اا ‎i‏ ل 1 ‎١‏ اااااب1 ‎Ee En‏ ل ‎HW I‏ ‎y 51 1 : : : 2 8 : : : p H‏ ا أت ات اتنا ا ل ل" ل7اابا“ -كقففا]أ7ةاير_[ .لي 4|. . فففإتإلياٍ5رد5درب,>عاتس. ظ7س[[إ[ل[[أر/5/ك5تت_لل77ا+٠ب2-إ:إلإالإإن//0ن6/0٠+/مهلد>لا/7ظ-ككه-ككالاللاضصياى77.7.‏ آسسإأ.ت.22ى خ|©إل0إٌالإاررزثظ( ‎LEA‏ ‎ny‏ يت ل ل و ل عوج ل تالجمو تي ل مج الت ل و ل تبي التي تي ل تيت ‎SY‏ ‏ل ا ا ل ا ا ‎I‏ ل ل ا ا ا أ ا تت الت ل ا ا ل ا ال ل ا ل ل ل ا ل ل ل ف مي ااا لس لا سن اس ‎nnn‏ الل انم الحم الت ايد الت ان الا ال ا ‎I‏ ل ا لأ بي جات كا أت حي ات الممة ما ممم وما لع حا مده امح جه لمم وكا #معيت رو فقت ‎i TT LT‏ ‎HIER HIES SERINE UE SIE.‏ المي لمق المعو اتيج لفكي ‎BEES Ht ERE‏ لتقي المي ةم يق : ‎Ens emt i mh FF St 8S dS ES SS FS £3 AE 2 rn‏ .* ‎Pomme sri pes tr tre ete an et et ee pe hen ssn ars‏ ‎FRALEY PERS pea PRET Et H‏ ل ‎EER iii mn il nn wi‏ 0 و 1 حم 1 1 ال ‎Fi win mn BEES wh Beh‏ ‎LL RL IE Sn‏ ا ‎A h : : : H : : 1 i‏ ‎Be i ii de i ib‏ ‎rs £ ie Oa oT Ma‏ ا الج > ب \ ‎A‏ 8 ‎w‏ ‏دورة
    — 1 6- ‎Js oh‏ ¥ 3 مخطط متعدد المكونات
    ‎III II TI TTI‏ ا ا مح د حوب جو د حت جوج ا لمحت ‎eT‏ >>””9تت ‏ ل ا ا ا ات الي ‎Verran servers type sre vy‏ سين يايد لفيا يق لاي يي لماي صمي ليا يا أييية لجيية المجييةً يي لي جاه يع ليده تا ‎I HE‏
    ‎end‏ لي بويع ات وص اا ار ا
    ‎& A ‏تمطحت‎ RR : I : 2 1 AT = ‏ب‎ 8 2 EHR: DU i = nl : See py nme i TU 3 STII I pa o ti i: es eT ge? Si 8 i nim 1 ‏حدم ل ا ليا سس : د‎ Wl NL, EI SE SO PEA & REE SON «a al ‏ا‎ WR IAT ‏ا اا هر‎ See ‏ص امكل ص‎ ١ ‏ب ا ايا اراح ادا حر ادو احاح ا عم ع م ا اج 0 ير ا سام رحد‎ oN Line a tine ‏وا اا اح :م‎ er ‏سا ا ا اح‎ ord
    ‎nn 1 ٍ 7 UE 3 fa : | mE : Bl [EE ii mR i ERE ; EEE i 4 NE 7 1 : HE Hn i EER i HEH on 3 ny SE 0
    ‏8 اساي السحاة لي ل ا .0 مس ا ا ا 1 ا ا اا ا ‎Yane } TE Toe od ree oo Na FIORE‏ ‎Yoo mE‏
    ‎an wn 0 mann - na -‏ ود لح ب وح وو ‎ie EE‏ وح و :1 ب وي جا ‎BREE a Eh‏ و الح 8 ‎A‏ ‏ال ا ا ا لا لل ل ال ا ل ل
    ‎+ eae i CR a Tm Cae ie PE PE pee Cian Naan i Chea " EP Cees Cr RTA ed ""س. ‏ف‎ Tee eee oY س"س"-س...غ..‎ 1
    ‎fo! + ج ‏و‎ Xo + ro $a £o 2 PE jr ‏دورة‎ i Y 4 4 1 ‏ال‎ ind ‏متحصى الإنصهار‎ oF ‏سو السو اشوا لجسل لجسو سوا الج ها‎ EE EEE ‏جوت جحي لجو لجو لحي لوت لل سارحو دا لح ل ا اا لا‎ a ‏ا وجو وجيت‎ ‏:ا‎ : : N N 1 H H 1 + ‏اا الح‎ : 8 8 HS 1: *: 3 3 H 3 3 pi : RN N 8 ‏ا ا ا‎ for 1d HEI EES cai Se pt H ‏؟‎ 0 I voor HE TUNE SR ANTE VUE FUR NUL TOT: TONE TUR ‏ل‎ ot ox ‏ال 55 رذ ل لبا‎ JUNE TOU JU ‏لت‎ OL TO ‏لأا حا‎ NRRURE RRR: SUCHE ‏للضي ل لات ادل سمية‎ CUE ‏اا ا لاي لح‎ : : i RST OUR SNR SUE SOUR JOUR SUR SU: NRE SUT SUN FY ‏ال ال ل + ل ا اي‎ SH ‏او حت كي دان لد الخلا ا للا قاد الما ا ام لقا لدان يا الاين لان اا‎ Vora TTT TARE 00 ‏الالح‎ : 8 : FH Be EIA Try HOS SS SU SE SO ‏ا‎ Se Cl ‏الات‎ vc = SU SURE TES ١ ‏د د ند د‎ SRE A A SO SUN NE SS SU ‏ل ا ل‎ eed ‏ا‎ ddd de dnidecididesdad i didn di dl Asie 6 ‏ااال اا اام انا الما الا الأ الكت اللا‎ JULI 5. 0: CU IRS JOU JUL SR 3 i 0 be 3 0 3 i 1 ‏د ا ا اد اا سس لا ار نات الا ال ا لاا اه ذا‎ ١ ‏ا ا ل ل ل ال ا ا‎ SE 22 I SE SE BO EB EE ‏اتير ة:‎ SEE SSR ‏المي ححص‎ SRE SE SUN 80 1040 0340 7 SE SE SAS * IRA H i LY SERN NL : HERS 3 a ‏اتيب‎ N : ‏الحا سج كت اك ا ان‎ 8 i 3 N N 3 3 F v bs 3 FEY 3 3 LI ‏نا احم امي امد امد ام لزيا ا ا ا اللا الح ا لد اد ادا اد يدت ا انا اما ا حي لا‎ a ‏اي دم لم‎ RE 3 > oe ase 1 0 : H AN RT IR ah SN P= 8 0 ‏اد لمر ا‎ : + Fob ‏لس‎ NL ae 1 : § H H ‏الحم ا قي‎ Nod ating pi FE RE SE Ei 1 ‏ا ا ا امم ا ل لس ا‎ secs SEE ‏لا ال ا ا ا ا‎ I ‏ا حال ال الى حي راط 1 لحان‎ ‏لكا اي ال و ا لا سا وح‎ ee ‏ا لا اا لاا حا ااا تي ا ا ا ل نا‎ ‏ا‎ H 3 3 dd Rr H 3 3 R x H H ‏اتح ا الي ا ال لمجا‎ 0 HF WNW 6 WEY - TAT TY 3 be : : ‏ب‎ : 1: H : ‏ا‎ Ty : : 8 R 3 H WEN bd ‏لات باب ا‎ ATT Ld ‏ماما خخخ | :10 :| تنخ‎ TE TE 8 1: ‏ا‎ FAN ‏زا شل اي ا ل ا ا ا ا ل ا ل ال‎ SO ‏ال‎ ‎Fp A INGE So HEE ‏ادر‎ LA SE SH BE ‏ا ادا ال‎ AMON SIE SIRE SHOR EOE CS SEE SPOR FANON SOON SRE fF SOOO AO H N 9 ny H H La N : H is 8 : ‏اسان ا : : با‎ : : 3 3 FE Sc SS PTR AUP. 0 OSE SE IN SE SE SU SO SE SUE SE SPE SE [| oc Co SS ‏؛:‎ :. 0:07 REN ORR PUR best rt ree I ET ١ 1 1 TOT ‏الك‎ : TET TE TOO tos a ‏ل‎ SUE OE: POO 014:0: CS SUV TOV ti JOU HR WORE rr cet JUVE UE STUUR FURRY SOAR WOU: UY UPR SURV SURE TO: ‏لاا‎ ‎FEY 3 3 H TIES Your Pata 3 : 8 8 3 Y + N 2 + ‏ام ل م اي ل لا 0 ا لح‎ 8 N : H FIC] [ESRC H : : H 1 1 : 1 i ¥ 3 : 3 : 1 J [3 R 8 : PR 1 ‏الس ال ل ا الا‎ 07: FE 1 vod ‏تخ :0 ا‎ FE CHEE i vo TAR ‏ااا ل ااا ا سا‎ edie de ‏ااام لا الا ا ا أل‎ Lh ‏اا الا‎ hn ‏الدااء السلا‎ ‏ا ا‎ RIE ogi i EE ‏ا ال الا اد لاا ل مل لتحا ا لا الا للا الا ل لا ل ا‎ a ‏اا ا ا‎ St + SU SE 2 He 5 FE ‏جاعم جم ل عه مجع مع م عع عع‎ HE 0 ‏ا ا ااا‎ a ‏ححا تدج‎ 1 ‏ااي م ا‎ ts or a 1 : : * i H H v ‏إل‎ 3 MN x i HB N . x N N 3 yop ‏لامي‎ SN i ‏أ الس‎ HE SE St 8 0: ‏ة؛‎ CO ‏!؛: ؛: : :0 :1 :0 :0 ل‎ 0: 40 01 1 * LI SP SE SR ie cot SE SR H i REE Loads Tod ‏ال‎ Lad 10 od 0 RE ‏؟؛ :0 ؟‎ 1 PON] ‏م ات ا الح ا ال اا ا ا لم ل ا ل ل ا لد ا ل ا ا ل ا ل ا‎ IE S| SN ‏اح‎ ‏:ا‎ SE SE 0 HE SS 1 1 ‏ل 1 ل 1 0ق‎ EE EE EE EN ‏؛ لمحف‎ : 1 4 HIE H H HN N H : : 8 : : H N 1 H H H R H UR HN HN : FT SC 3 REE] 1 ‏ل ل ل ل ل ل‎ SEI ‏ل‎ SORE ‏الت ل‎ SURFS ‏الح ا ل يت ل يي لج ل ل‎ WE SE FRE SE ‏اا‎ A A ‏لزأ‎ A DL A A CSA SA SI Sh ER SS ‏اجاج حرس لاف زرا‎ IR ‏د اا‎ : : : 1 0 : i : H 2 3 3 H R : : : ‏ل اللي ا‎ 1 FS SS 1 01 01 ‏ل‎ 1] SA SE CS EE ‏ل ل :لح :040ل‎ 1 SE Ty Ty 8 1 ‏المت ممعت ممم مف امم لف لمم لم ل‎ 3 3 4 1 : 1 1 : 3 N 3 ‏اا‎ 3 : : 8 RRR } ‏لحا ل ا‎ dest + 1 ‏ا ع ل ل ل ل ل ا ل ل اي ااا ال متا لما لاما لحا العامة للم الام اماما ال الما لقا حا‎ FR JE 1:1 1 HAE 1 ‏:ل ل‎ A A SEE SE SE SS ‏ل املا (: 0 نل ل‎ 1 1 1 1 1 EE N H : H 3 H i i 8 : : : N 3 H : 3 N HS H 1 H i PERE ¥ H H : ‏لايخ‎ ‎0 ‏حت ات تت ا لت الى امتح لت تحت يكاحت الت ل‎ aia ‏الت‎ 3 Q 1 4 08 By 2 H EO . N 8 5 ‏د‎ + ‏تح تيمل لت ال د ا الت حا اسح تت التي لح الم ات لدت ا الحا ل ال لال د ا ل للدي د ا الح ال ل ا ل ادا اع‎ = HE 0: 0: 7 FEE EE TE FR Sr SE 1 SEEN OM HIRE EE EE TE TE LE ١ 1 ‏ا‎ TE 8 7# FORE + J SE J SSE CS 1 J ‏ا ا ا أ لأا الا اسل ما‎ JETER SUE CER. WE ‏ا ل الا ا ا‎ IE 1 ٍِ a + 5 8 0 1 ‏م حت لدي حدق لحم للحي الا‎ SE ‏اس ال ا ا لا وق ا ساق اد در الح د لد لح لح دن لحا اا‎ a ‏ادحا ل‎ H volo ES SE 0: 0 TE SE SY ‏لج ا‎ SS Hr JA Sh ١ SN 8 SEAL CON ‏ا أ‎ JANN VOUS JUNE UU UU ‏أ أ‎ JOUR UU OU SOO JOE OO NSE TES SE SF SE SS SUN BN SE SN 3 J KU ERR SUTURE FRU: PRUE JOUURN. UUUL JUVE RUTURE SURE CPRUR Tey 3 1 1 : Sed fod ‏ل‎ HIRT} 0 ‏اي م‎ i} 0 ‏ال : يه ا الا‎ SN wh FR EE I ‏م‎ rE RE : H Pri ¥ : AT [ES SS ‏0د 1 01 ا‎ 1 SNE SNE SU SE SN ‏ل(‎ SS SS [SEE ‏ا‎ [ 0: SRE SES SS HEE HEE H i 1 : RS HN i ‏:ا + لج :د‎ ١34 0: 4 CRE: : FN HS SA ‏لمع تا مامه تحط جع ميد مهاج مطح عه تع ع معدا‎ ONE NHR, LAPIS. NAR. Po a x Lr Sorbent a ‏ا‎ . oS - 2 N 8 0: 1 ‏انا اق انا اا ا ااا اناد أن اا لكا لاا لا أن الا كا دان دا ا ال ل ل ا‎ Tt ‏لا‎ ‎: 3 8 1 HN 1 : : 1 : 8 : 8 : 1 : R N 8 : 8 HERS 0 N N : 2
    :. : H N 3 1 : : 1 3 3 1: 8 : : 3 by H Pedy fi ¥ N 3 H N 3 1 ‏ع‎ : : N 3 0 H : N i H H N + H : H HN H HN H ENG 0 HN N H N 5 Pood 1 ib good obo H 1013 ER IE HE ‏؟:‎ ‏الم‎ ‎FI al Sh el tl Sa A A ‏تم دإ ' تيبا ا‎ SRE I Sl ‏:ا‎ TS TE ١ SA ١ ‏01ج :0ط‎ 1 10192 SN SU SE SNE FEO SE SEF 0 SE ‏ل‎ : SU SN : 1 7 HEE ‏؟:‎ 0007 H 0 1 : RENE FE i SOE HEN FE Td ERE: : FN CS PY SUSE AER SG AUER: SR: SEA VS SN ‏ادحل‎ FSS SN STR NUT UN UU SAS SUR SUA SUE HUE UE SOU: 0 UNA NU SUE CO: SR: SUE JUS SO Poy : Fas 4 : } ‏لاا‎ A JA ai ‏اسح لاا الا الا لما ااا لا مات الات عا المح ال‎ ES SS SA ST 1 ‏ل‎ 01 5 HE SS ‏ل‎ 1 5 (7 SES SS 10# ‏ل‎ J SU ‏ل‎ 0: 101 5 10 01 8 : H 3 1 H : h N H 3 H 3 3 B N i H 8 N EAR J N 3 1 3 ty 1 oa TT OTT HER ‏ا‎ IR Tod 1 ‏تت ال لت الت ا لت ل تت لمتحت الت ل تت الت ال ل ل ب‎ UTR FRU ‏ال حت لت‎ SORE. OPP + 0 ‏ب‎ > 3 1 : 4 ‏ع ل ا ا ده ا اديت لي ا اد ادح ل ل اا اا أن كا كا اا ان ااا ااا ا ان دا أ ا ال ال ا‎ NE : : H HN H H : N : H H H 3 3 1 : : 3 ER 0 RS : H 1 0 ‏؛:‎ : : N 3 H N i H 2 3 3 : : N 3 3 N HI) pi N H 3 0: : : : 8 H H H i : H 1 HN 1 3 H H 3 HN : ‏م ال ات‎ 0 FE H H N 3 i ‏الم متك ؟‎ 1 : : H H 8 3 } 1 0 H : ‏ا‎ FEES 1 yoo H : N ] 1 SRE CUR ON. NR: FN SR NE Po: SRN RX OR ES. SN JE ‏ححا‎ SO St 5 SJ i ba 1 : N 3 1 ‏ا ا‎ 8 ¥ 3 ; + 3 + + + ¥ : 5 8 3 3 a ‏جد‎ FE ‏الا‎ A ‏نا قا‎ Saat att ‏ان‎ ah Sas Sa A da ‏اا‎ ms H 3 : : 3 H H H i i H H N 1 : : H 1 HN H : 8 + 0 83 N N : : + v N H H 3 H } H i HN : : H 3 3 B HN i H 3 : 8“ + : : : : N 3 HI poo ad FRE SE SE ‏؟ة: :0ج اط 0 1 ل‎ SUE SEO SOI SU SURE FUSE SUNN SU LR 1 ‏ا ا ا‎ 0 M H 9 H x 8 2 v 3: 0 x 3 IN ‏ا‎ 0 3 > 5: es 3} v H 1 ks 3 1 1 ‏ا‎ ‎HEE FE N HE i yond FE i vod vo Yor ROE BS 0 FON HE 0: ‏؟‎ 0 HEE SE SE 01 10 10 7 SE J SE BE CE : SS SE SE SES : ‏:ا + ©#::؛ *؛*“؛؛:‎ SUES SE SE 8 1 ‏ل ا الا ااا الا‎ ER IL yh 1 FER Tossa 3 mney 1 ‏د تا ل لي رين ل الت قا أي مدني نانج للد لاا لا للا ل ا ته‎ HERES SS ١ EE EE EE 0 00 ‏ا‎ SE TEE SN 7 vo HI HE HE SE [STE 0: 1 NE SS SE SS SH EE 0: 1 0 1 HE 1 ‏م‎ oor 7 ١ ١ 1: 0 : 7 SSE SE SE J SU : 0:0 1 100 ‏ا ا ا ا ا ا ا ل‎ ‏اا ا ا ا لاا اد اا الا اا لجنا ا اجا اااي رن اننال كا لان ااا ااا اناا لان لاا اناا ا ناا ااا ا لان ان لاد الا راد ا ا‎ HEE SES DUE SE 1007+ [EU SE SE SUA SNE SUSE SE SE SE SUE SES SUP SES: HAR A SA SA SR PE 1 ‏ا ا ل ل‎ SUNOCO NUE ANE Lie c SUNRE SUTURE SNR SUNOS TANF JOU WL A FE SUE SUR SUIS SR. SOUR: JRO SU SUG. APU ARP PUN SI. IO. SE ‏جه يه جه‎ SPN. Je : ‏ا ا‎ : 1 : : x 3 1 ‏الا الح مايا جما كا ال‎ IA ‏لاا الم احا امك لضا لاا الما ل ال ل ا الا‎ AR ‏لما ناكام اما‎ ERI SORE ‏الما اللا لا‎ FE : H 1 3 N 2 hb B v i HB 2 N 3 1 : 8 N N H 3 ‏الك‎ 8 : 3 R T H 3 : + HT 0 8 ‏المع له : أ‎ fd 1 i HEARS Sono HT SEITE : so IE 1 1 ‏عم مع ممعم لمعم لمعم جم ممع ميف‎ ee ‏انه ع ع أ عع هع عه ع ل عه أ عع ع المع عع مقع عع مع مع تا امم مع مم و عع ممم مع م ع مع لله ع مع ل معو عه و مم مهعم ةمع ممع م ممع‎ 0 : ‏م اعم متيال ا ا‎ ‏ل ما ات‎ Wo LI ASL fags qo ¥ ® * ‏كيو + و‎ » "oy 3 ait ¥ Foal ‏الحراره‎ de ga 03 - po
    ‎i‏ 1 1: ا شكل ‎w=‏ ‎Eom‏ اللي ; سحي ‎aly‏ ‎TT‏ اا ‎TH‏ اك اما ااه لقا ‎AN‏ اللا اانا ‎AO‏ اا ااا ‎MAO SONS‏ ناا ‎CEN‏ اا ‎SA‏ لقان ‎oS‏ ‏تح ا ‎TORN AC AON‏ حت الح حت حم اح ل ‎a‏ ام لم عدج جما لج جيرا لم اج مج جم اليه م مدي اح ل ا + ‎SERRE VR SEER RS Tanne 3 H‏ لحت حت مس حم مدا الا يت الاح ا الست 8 :1 : ‎SUVA Sv ROE‏ التي انه دي ما لت ‎S 3 NEE E : SU SU‏ الود مد 4 + : 1 0 : 8 : 1 لجنيا لت ‎SRNR‏ لت ‎SRR‏ تت التي ل ل ل + 3 ‎PERRY pS‏ ا ا ‎SNR SIE SE SENSE SUE:‏ صصص ص0 0 ‎SE‏ مما م لاما الحا اي ل ا ا ا ل ا ‎SN‏ د د مس ‎SUN: SHRENE EHO LA SENN‏ ال ‎SIR‏ ل ا اق ‎TY 3 toma a H 1: H‏ 3 3 : ال ا ان م د م + ‎IR SOU OE St RRS Famer Set |‏ أي ‎JOURS ROR UE SHUTOUT TOO‏ ييه ‎[DUI SOI JOURS‏ مح ‎[RSE FOU‏ الت ا ‎FONE JT GES SO A et Se‏ : ل يي ةا ال الي ا أ ا اجا ‎Nea‏ ا ا ا + ‎SUNN: SAND NUN.
    ANN ENN EN A JEM EN ee RE EO EE FA | PU‏ لات تا لا ل اا ‎Joa PA Ni‏ 2 : ا ولا افق امت لعا يا وق ل لك ب لاقو لاق ا لاه جد ا 8 : 0 8 7 : :1 3 ‎SO SR FR‏ نز المي 0 ‎JOUER SR ay‏ تجا سج أ ال ‎JUAN J J FEAR‏ ل ل ات ا ا ات ا ‎MAE‏ ال ‎AURAL‏ ل ‎SO‏ بكر نح اننا افا ‎IE BE‏ ا ل للمسحيلات ‎SRE ANE SE‏ د جاجد ‎FERRE SHAS SUNNY‏ ل اليا ات للست الا لتحا ا لا الا ‎bell : 1 8 + by :‏ العامة اليه وات مج الح 8 3 ‎aad i‏ ا سا حا الات ‎TN Re FIC SC SUE SUE RE‏ شي الا ا ان تساي ا ااا 4 ا خااة ارجا ‎SA I AE‏ مم الحا ‎ARE‏ مامد ‎EL‏ لين يا ‎oe i EE‏ ع ناك ‎wy £ A EE er‏ ‎SERN.‏ الصا اد ا ااا ‎a.‏ لل ا ال وي حي ان ار ع جح ل م ا ا اا ا ااا اا ةا لاا اع ‎Sh‏ ا ا حك ا ل لاا ا ا ا اا ‎SCE SO NE SE NE EON SC SO‏ لا ا ‎A ed‏ ل ا ‎VEN: IE TR TE‏ ات لشت ات ‎UN A: erp Mics INE EUR NOUR SUES‏ ات ‎JOU‏ أ أ شح ل ييا ‎EEUU‏ ‏و ٍ :2 0 : ‎Ry‏ 1 8 8 1 3 ام ‎Bt ANSE AEE NE‏ لد اك لمج ا ا ‎RE 3 : 3 3 8 : 7 i‏ ‎ed‏ ل ل ل ‎TT TT pled‏ ات هت ا أ ا اواج عي اا اد تجا تا لمان اد لما اخ را جا ا ا ا ا ا ‎NUE EPS NEUE SOUR UE TRUE NEUE SOE: SOOO EOE SEO NO Sav:‏ ل :لو و ل ا ا ل ا ام كا جحي لها ‎EE BI‏ ل الا ااا ا ‎SE A SOE‏ ل ‎LL TR TEE‏ ‎ee we‏ اا ااا مدا ااا ااانا الم دا اا ا ل لا ا ا ا اا ا ا ا ا الاو م جا جا اا الجا ا لدم الي اد لاا ا ‎FEO SONNE SOUR‏ ل ‎EE TE I ST: |‏ لاا يم م ‎RS A ee‏ تا ‎SC A by EE RT‏ لحا ‎SEC TUE SG A WEAR SAR UN EE‏ ‎JURA SS A TU‏ ا ‎CHR‏ لاا لاا : لا العا ادا امام ‎Foose‏ ‏الا ا ا ‎OREN JUVE FANE NE HONE RN NC ME MC MN A SO: St FER J I A a‏ ‎it]‏ الما ا ا ا اتا ا كد ا الاي م اا اا ‎ql‏ تت أ ؤت لس امسا ‎ne‏ + اللي دحك سج رح ا ل الح د ل ل الح حت الح الك ل 1 § + ¥ 8 8 : 0 ‎AR‏ ‏الود ا ا ل ل ‎EA SE SO‏ السماة ‎OO‏ م سلا ‎fg 6 CHAE NE J OE CE UO‏ لبان اسه التو مدا امم اجا ممما مما نه عام لماجا لج ا 0 ا احج حي 5 0 ‎bY 8 1 : H‏ 1 3 + ال تك الت ل لت ات الت ل 5 3 + 0 + + ‎B M‏ : 3 2“ ا جح ادا م ا امه امي اما نه ا دا حا اا اا الما ‎SINE‏ ممما ‎ANE‏ لا ‎NS a‏ ليه لفقا ‎EAU NE‏ ا ا : اما ل م اده دح ةد العامة اا د ل ااا ‎SE‏ ام ‎MG‏ لاا ‎SERENE SNA AE‏ 1 ‎a: |‏ نح ممع لج ححا ا ‎FEN‏ الات تاس اس ا سا سا ا ا سمال ام م لاا م اس م الجا ‎I‏ ا اا اما مم ذا امام مضا اا الت تسل ‎HUA UE SEE EM SH‏ ا لاسا ‎RENEE‏ الما ام ‎EA ANE‏ . ‎as US SME SNM.
    SAS MAIS FR rr ME.
    LD GUMS SN |‏ ال ‎WAH VUE MSS SAS J‏ ل ل ل ‎١‏ ل ا ‎EO SOS JU SON.
    ANNI‏ دمج ل لج مد مد لج اح ل لاي ل ل الح ا ا ‎RANE‏ سحا توا اتات + الججيات جإجق ميض مجر بجا ميض جامد اديج لمجي مجه ميضة » مالساي لأست ‎FO MO: ERAN‏ تل اس سا اسل وت اس سا ‎i‏ : : ل امم جا ‎Saad‏ احج 0 3 ‎ar iy‏ ‎sided‏ جما الما كمي لج امم ‎EERE‏ الال ا اتا اللاتااة للا ‎a‏ متا الل الما ‎i‏ لحا لمح ا ‎HN Ne 0 1 : + AT H ed 8 :‏ أ = ‎rsp]‏ ال أ ل جاح جات الا أت ال اا الالجتي اي + 5 ‎EY‏ = ‎S|‏ تدا اميم مما لجا السام ممما الم ممه باق الما تا ا ل و لمي اجا الم الما ل الم اجا المي لمجي مااي المي تاي ااا اا ا ا ا 5 : ‎aa‏ مور لي اجاج الاح ا 1 تحت مت ‎LR Ce LL‏ لح ات أ حي ‎ed‏ احا ل ما ل ‎A‏ انا لحا ‎CA SO St BE a‏ ال ‎OE CA‏ ا ‎URE SC CO OU SON‏ ¥ ‎ER CO J JN CUS J EET UU FS NS SO‏ اا ‎IE A‏ ‎EE a I A Lo a‏ لاح ‎LIN JEEP ANS SNE EA AN SEE AIS HUHNE EAM SURE JER IE SHIEK SA‏ ال مج مي د ال ام ما ادن اما لد حدما الت را ال اا ل المج لجح مح ‎SR‏ ات ال ‎CHASM EAE ON SUM:‏ لتحا تنه ‎Fo pry ORE SME POPE SOP APE MPM DA NG AMR SEIN ES SUAS OHA SO HE SS SN SOE SO:‏ ‎adi deen‏ لاا عا اع الاج افا او اص ا الم ها جد ‎Ta‏ ‎x N 1 hy : MN H B N By 0 A‏ ال ‎IY B i 8 hl v Hl M 0 N EE a ES‏ ان اااي ‎ES:‏ ل ‎SONORAN ON: SOM: DONE VON‏ أت ‎NONE‏ جا ا ‎ENON EAR SEINE SMR SORE ION‏ ا ‎IE I SONNE CON NE yy TR TI TRE‏ ‎SANE ONE SUNS SU SS SU NU A UR COE SH SOS OU SO‏ اا ‎JON SUES OTE‏ الل ‎SONU UNS NON: SOU UNE JODO: DUNE‏ اا & * ‎SOD ING SON NN‏ م ا ‎TT To Ca ot‏ . ‎JOON‏ هم ع اج ممع لسعم و عا م دحج ‎a‏ ا لح ا اا ات حا ا ا ا ل ا ل ‎H‏ + ست لح ‎b 1 3 ES‏ 3 : 8 + الي م ا ‎TE‏ ‏ا ‎TT TE TTT‏ اله لدج هع جه وك ‎a‏ ‎TE‏ ا ‎OE‏ اا ام ‎TOU‏ ار ا د ا ‎yl ENTE‏ ‎NT SIN EN‏ ات ‎SIS‏ اا ‎SU‏ ااا انها كا ا اا ات ا ل ل ل ‎OSH VE Ml‏ أ أ ا ل ا ‎FONDUE JU SE ODE‏ الا اح حا ‎MTHS JL: SURE SOE SLO FNS HO:‏ حي لإا ‎SOUS UE JES JO CORAL SU FENNEL SOUR NA) PE‏ ل ل ا ‎J DOE TOU EUS DUNE‏ لابوا م ا لات اه جا ال وا جو ال عا اد اا ااا ل ا الات سا ا ‎des doe‏ سا ا 3 ‎HONE OOS ON OO |‏ اا م ‎UU FARE ENS FOU‏ لاش لا ا ‎WA A te‏ أ ‎PE‏ ا ‎SENTRA EN FAR‏ 3 ههه ‎TE‏ مقط ممه هقد م ع ‎{meant EE‏ لنت و حا ‎SHR‏ ةس سا ‎NUN‏ لات أ ل الج جا 1 ‎SUCHE OU AS SHR |‏ اا ‎TTT FAUST‏ سحلت ااا اتا ا ‎SHIN‏ اا اا ‎NE SEO SAE MO SU OL EEN I i br bt a rh Tee reed‏ ا أ اا لاا جم جما اموا ‎AE‏ جا جا اما قا انفضا ‎١ EAN EAE‏ له تت ا ‎a‏ حا حم ل لم ل ل ا ا ا ‎Fry‏ ‏ا اا ل ا ما ا دا ا ا اجا اا ا ا ا اما ام ‎CR‏ محل م لسسع سم ‎R a‏ احاح ل ‎A SIE‏ ا ا ساك تا ا ا ات ا ‎p BE FR HOE SA HE St aT‏ ال اا ةي ‎I‏ ات ‎NS‏ ا ا ا ل ل ل ا ا ل ا ل ا اح ا ‎ST SIN A SN S|‏ ا ‎ey EARL SERRA: NRE SEAN UR EAR SEE SE FRR‏ * ‎AL CONN‏ تا ا ام لمجي لمي ا ‎tba‏ لب الاج ‎sid‏ لماجي اجا الجر جد ا ماد ات الب لوي جين د ا ا : و الت ‎EE‏ لا ل لا ل ل ‎Lid i 8 By TE‏ : لفغ ‎EE‏ لل ‎EE‏ اديت تت أت ةي تت شت أت يقي باليية لكشتت ‎HOU UNE‏ اليا بيد ‎OU‏ أ عت ‎Er‏ ادا اا لا ‎SEE SNE‏ لكا ااا ‎PONS SPI‏ لاا ا ا ‎JUNIE MOVE JIE |‏ تأت مشي ‎UO SHUN HURTS‏ ةلم ‎COE SEIN SEL UG JUPE SU SOO SUN SP‏ ل ‎JES STN DOS SCI EA ARE‏ ا و ‎A‏ أ ا ‎SAR‏ ل ا ا ات ا ا قا ‎SRE 1 A‏ ا اك أ ا ا ‎AA‏ الا ‎SI |‏ ات لا اا ات م لت ل ةط ا يج تي قت ا 1 ٍ ال ل ل 1 ‎Cy TY‏ ا اللا ا اا ااا الا ااا ا ا اا لمسمعة شم هعم اسع عع صم خا مح تت عع اع أ جع لعف ةف ا ماحد الع عله تمن لمحي ل 1 ص صصص ‎SEES EEN JUL SUE SI SERN‏ لل لمعه ممع الع ااه عام مجع 8 ‎L's Nay x Aad 45‏ و ات ‎LIS 83,‏ دي امار 0 ‎Spa‏ 0 5
    ا ‎RB‏ الحرار تا لم
    0 شكز 13 ‎i *. «*‏ » = ا 0 3 ‎SU SS SAS ER‏ لاا ابا ‎SS SA SS FOR SE‏ ا تي ص ‎EU SU SU SU‏ : لح ا حت حم ا ل ا ل ا ل ل ل ‎i § SE EE I‏ ا 1 ‎EACH SUE SUNG SUE JUNE SMR‏ 33 ال ا ‎PET‏ ل ل ‎CRE‏ أل اح ل تتا ااال لاحي تل تق ةق ا ا يا امد ‎Fane Fondling avidin Freda‏ ام الا ا ‎MAE 0 DADE‏ امم ما ‎SEN‏ لايل مل ااا ‎JOS‏ الا الفا ال ‎JANE 000 JOE‏ لول ‎FORD‏ اماي ‎ODES‏ الالالال لاا ‎SORA FONE OO‏ ااا لاصيا ‎DORON S00 SAE‏ ا اا ‎a So‏ اا ‎TT a‏ ما ا ‎dd BE Stl‏ ‎SU: JO. 3 3 EOE Faved FN‏ ل ‎derivado eed CAEN‏ تتح م احاح ات د لت ال ا ا اح لت اح ‎SSS‏ مح ‎SEU SCI SUE SSS‏ المح ‎SE SESS‏ اح الح لح ل ل ل ل ل ال ا ا 3 ‎٠ 0 a fey 3 Avedon‏ ااا ‎EUS ES JERE IS WES J EEN EN SEO YS WOU JN SOON JNA OUR SEI SONNE FI JUS SE SHAR SE SUE 1 FAR‏ 4 » ‎SN‏ ا لان لمت اجو ال لي الست لمات لدي أ مت لتم اميد دا لايد ما ل حي لاا لا ا ا ا ا الما ا أ ا ان ا ا لا ‎A 5 Ted § 3 : 3 A 0‏ ا ‎rae.‏ حا اا لاا ا ال م ايت الح ا ل ا ال ل ‎CE ds‏ ا ا ها ل الل لا لا الا ‎SN‏ ا لا لما ده ااا ا ل ا ل ا ل ا الا ‎Et)‏ كه لاقل اا 1 : ااا ‎Nt‏ ااا اا 6 وا ‎CAO AONE‏ ممااة ‎ON‏ ا ام جا ‎OEE 610 AMO NE 0146 1146 JON HE‏ 4446 ااا ااا مما ل ا ا 1006 4 ‎AGE‏ ا ‎E‏ ‎a NS 3 : : by‏ 3 ; > 3 المي اج ‎SONNE‏ ل للكت ا ال الما الات ‎NURS‏ ا ‎SENT‏ ل ل ل اد ‎TT‏ حت ل ال لا ل ما الاي ا ما ال ل ا ل ل ل ل ون ا لح ا ا ات ل 2 ا :الي لاي ‎rive‏ : ‎BO ¢‏ الج ا لت ‎Toi‏ ال اك فدات لاق ‎TNO SIR JON: OR SIN‏ ا ات ل ايل اا ‎SUNN JUNE‏ لأف اا ل ا ا الها ا ا ا ال اذ مت أ اط ا ل ا ا ا ا ل اق م ا تيت ا لج ‎FE‏ ا اي الس حت ا 0 ‎ER sednndeadaadunieadiantaodasdbe fn diagesdiagan dundee de ataetoedieadaadasdaeaiin deed diigo‏ ‎I SOUR SUUUE NAR: OUND: WE DONOR SRN SESE SUE SUES: SO: SOUR JUNE: JUNE FIO UE JO fieeatesa danni) EE: BONNE:‏ ل ل ل ل سن تح ا ل ا الحا لق ل الام ‎$d‏ حت ‎E EE‏ 0 ‎dead fii dated ates diedeie din ei bib dogo desided fitted dade‏ لمجي الججو لفح مجرها لمجم لججيةا لوجر جحي مجر حورا 4 ‎E SRE HUN SURE WO 0 SAMAN MUE JUAN SUSUR SUR SUD NUR RUE JU HA SUA HUAN SUA JUNC SNR TURN JUNE WAU MAR A‏ ب الال اي لاحت دده جح ا جاح 2 ‎fi JOE RUN NEUE SOUTER DUE EON.
    JURA EIVUUL JUIN RUN Sree shee EPUTE- UTE SUES PR eee‏ ‎a ae‏ الك الات ا الح حاف لجالا جات لق الج لاف ا الاج الما جا اماي جد اما م ‎x - weed t‏ 8 أ وا ايها هايا لانن لقي قل لج لماجي له ااي الما حي اانا كه لقا الها ادن اا انا ات اق تان جل ‎ET‏ ا 1 ا ل ا ل ا ‎i‏ ال ا 3 ل ا ل ل ا ا ا ا ات الت لد م ل عا اح لك ل لجا اه أو ان الك اها لت اكه اك دا د د ل نا ‎die‏ ل ل ا مل ل ل ل ا ا اي ا يق ا ل ا ل ا ل د ا او جاه ا لت م ا اي اح ا ل ان ان ني ما اي : را ا الا د من اد ا ا أ ا ‎BE‏ ات ا ال ¥ 5 ‎FOR SOC.
    SRE Ds JERE FE SO‏ 1 ‎RTE SNL SOE‏ ا أ ‎CODE RCI DRTC‏ اع ا ‎SORA‏ ةا د ‎AMG A SUE SOON EARLE SU I ee ae‏ ة ‎FCO ODIO SUR HOLE DONE TOURS‏ ‎SEN NS See‏ مح ممما ا ممم ‎SUSE:‏ لما ‎ls Seoa‏ لحا لمات الفا ال ‎RR a See:‏ اليل مف ‎AE HR 0146 EI 16666 ENON OE‏ و ا 4 4144 اح ‎SOMEONE Mh sco‏ اجا لمجي مي ‎FOOL‏ بل الال امد الا ‎IOON POR‏ لمجي ‎SUPE JOO‏ مي جني اراي م مه لاز مرت ‎ONE‏ اجيم اجيم ااا ا حت محا ‎SE‏ ل ا ا ا ينج ‎ee‏ أ م أ اما م ا ات لم لا ا عتما المت مت ان اتاد أ ا قا و ا لتحم ‎a‏ ل يع ا ‎NE Tn RES‏ = ‎ENE SUE SONNE SCI SOP: SI FONE SU SE NE SUE EE SURE J SO‏ ا ‎LE Roca COMPARE.‏ جل ا م ل ب ‎saree ot St ARE Rs or SVR FOU dep SPL ETE JOULE UOC SOROS SOUOU SUUUE IDOE ENN DUDUEUUTN SOOO UNO: JOUVE IO SUNN i‏ لاي ‎FE SOO UE UE TE SOU FUR‏ ‎TON SE‏ لحن لحا الما ال اا الا ام ا ‎TT‏ ا ا ين عجوم جوتت ا فقا لا ‎Sh‏ ا ا ‎LEO EH Ho‏ ل ‎j= NE‏ ‎En co CC CHING SNR CHE nis SU LUPE > : 4 § 1 py 1 3‏ مس ا ‎er JE SC SORE: CTS SNPS SOUR SEAN SUR SUN: SE UR: SPRUE SN.
    SERIE EI‏ ‎REIS SOY FEEL EE TE CE a‏ عي ممم ممم لجح ااا متت لاا ا ججح جا د ل ل جد جد ل ‎So‏ موري : 8 * اج تت ‎oat‏ مف حت 0 ا مني امح أده رح ا ‎a‏ ججح الح جد لحت تاد لا الي لوا جد معد لمحي د لدي ا ل ا اج الى ال جحت جا ممح وا ا ا م ل ا 3 0 ححا ٍٍ 7 ‎JS he SS HE NR ER SE Si ES A Sh Et SS RE HEE ER EE ET‏ ل ‎BUC AAS JE AA‏ 4 اي + ‎SPREE PREP CER.
    POPE & N 3 + 8 A EA 1 8 + ٍ ROA‏ العامة ‎SOPRA SEEPS‏ م ‎SEIT CRANE SPURL‏ ل ‎SE SERIE‏ الي ا ته ل تنك نا الم ليها سي كما اج امات لامي لاا :ارما الحا يلتمم لج مما الما اانا لاا الفا لا فض لامر مف امي الفا ااا فم مي ااا 0 لبج الما ا الما اد امم ‎fain dien bash dif‏ لمجي م لاما لامي ‎bat ta‏ احا لاا ‎ashes‏ فيل اماج جد اجاج الام الجا ادي اا ماج ‎NN rsdn‏ و ‎NR Ro‏ لم ل المت الم ‎EE EE‏ لل ا : ‎SR SUR SN‏ افد لمجي جو أو بجوي موود وميد جوت جور 0و0 0 ل ‎din diosa enn finn fonns nna finan ginnd‏ م م ا ا ا ا ا ا ا ‎a + nnd 3 a‏ يي ‎a‏ + + دي + 8 ‎fevesianansd‏ 3 1 : 3 تالأ ال لني شا لا لت اط لات ات تتا ا الج يه أن ا د ا ال ا جا ل لح ا م م حت ا ل لت اي ال ا ‎go NR EAE WE A ET‏ ادا لمجا وج ممججة الملا ججوجة اجيم أمهن لجججة بو لمجم لوجر مجم ‎SEE or‏ اجو فض جد لمجو ‎EN Ct‏ لمي امود اججور ‎x.
    Yo bei I‏ ‎defen feted dered‏ ملالا لبا لاقو لاا ‎ee der‏ لمارا الما الا الفا اما ماما الا كا ااا امد لاما الما مض ‎bain‏ برض ال : ‎hk‏ ‎sid‏ سي لا اام اي تحط حا سق ا تال م ست ات حت لق ا سق سك سس اا تل ا شق اق اتات ا ا حك نا ‎NEA I‏ ال ‎A TE NON‏ 200 فال ‎NANA‏ مقا 000 0 لا لقي اا ‎EAA HOON‏ 40000 لقان ‎E000 000 MEE N00 AUN‏ قا ا ييه المي 1 الاق ا 8 ا ‎FOE ESE SI‏ تح ري ‎SOAP: UU: SURE APSA‏ يه ‎TA‏ ل ‎FL FREER FESR‏ ‎adi‏ لم ييا جو الجدية لجا اليد د المي مه مي ماح ماج جد ‎Ey‏ المي الجيجي لحدة لح ‎A‏ بلجي لحت ‎SE eh‏ حا م حت 8 + \ ‎MAE MON SAE CARR SANE BRIE IRAN SANE JEN IA SAE SA TIA AR NE AA NN‏ لبق الات ‎SAE JAA SAAN SENN AAR TANG JOON‏ دمحت ‎JNA TRAN‏ ا ‎rhe‏ الحا ال ‎BS Sa‏ حك ‎a‏ لال لحت الي سق ححا تق حت ل اال حل لاحت مجح كحت الحا حا اق ا جه لقا و ‎ERE Ah PAI‏ ‎JUNE SIE SAE CHOON SEN: SUIS SHUR TEE00 JHE TDON.
    SS COU: EN DURE SECIS SER JOSE DU SNE JOUR EO: Je 1 KONE MY‏ ا ‎I‏ لان اام ما م لح لمكا لد ما يحاض مات اا ا ا ‎order‏ الا ماد ‎S00 FAA SAME‏ ا 8 ‎fed Sed‏ لحك اح ل اق اق ا الا ات لحت ات لتاق الا اق ا ال لات قله لل اق ال اق ل قا ٍ ‎oh DEA ON AE‏ ‎SEL NAA NAY 2 = ad + 3 + A : bs‏ متت م ميت مت لم متت اا ‎SECU NAL‏ امس لمي ‎JNA UL‏ ال ا اخ اا اما لعا ‎Re‏ ما لمات ‎EE‏ ا ا الجا ا ‎IO‏ عجان لضا ‎dons ESRI‏ لات اا لا اا + ‎ela + i Fond‏ ‎Ss JRRREE Se‏ لتحي المي ماحد لحي حا الما ةلاحا لممحا امح ‎isda‏ فج الالالال الال لاتاا للاضد لفل لاطا لاط لفط الضف الح اوية لاس اميه مد لدج ادا ذا * اما ‎DANE SANE MOE RAIN‏ اللي لج ‎MAND‏ الما لاا ‎hO-SO NR DOA‏ لاا الاين لحف ‎ONDE‏ اقيم ‎SA‏ الما مادا ‎APN SAO NAAN‏ ااه لد ‎SOD‏ الي ال لح الم ‎ALM Ra‏ ل ا ل ل ل ا ل حا ل حت عا ا ني م م ا م ل ان ل م ا ا ل ا ان اا ل أ ااي لت ام لت ار الت م لأا اوم لاي دا ا ع :ني ا ل مات تراه اس ااا تار اا اد اا ا رد ا ا . ال ل ‎RCI WEAR 5 VA EI CH WO FOAMS‏ ل ‎SUN FAT JE‏ ل ل ‎die ede fe ede edie dd dee ded‏ ل ‎FO five bested‏ الا يج ‎ASSOR‏ ممم مضه فاه ‎pe rrr‏ 0 :1 اموي مم01 :ميف ممت 10404 7 0 ‎o pt‏ ‎Ass ١‏ ¥ م5 يداد قو« ا حاو 1 ‎J A, ¥ ae‏ تا ا ب ا درجة الحرارة ‎J‏ ‎a) A eH‏ {
    شكل اب تحت ال ‎EE‏ متحنى الإنصهار { اك ل - ‎i‏ ‏ا ا م ‎A WEVA SA SW:‏ لما ‎BE A NG‏ ‎BS FUT CA NE YTS A: SSE FETS J SR So + i i I SO I NO I TE SS SOU SO‏ ‎J 1‏ ل ‎ST TS‏ ل ل 3 3 + ‎ET Sa are EES FOREACH WREST BERS: SRS ESOT 0) GEE‏ ‎CS BE RE: JST THON NUDE NRE HS SRO RE EEE 1 ١‏ حا 6 ‎SU SOE SS SO‏ مد ل ‎BE‏ ‎HEE FUSER SRR SURE SOUS SOU SO SOE J‏ الج حت د ا لي كاد ل ا ا ا ‎fe‏ ا ا ‎ESL SR WE + T +‏ ددا : ‎H‏ 3 ل ‎SR H pets i‏ ااا 3 3 : ا : 0 ا ا ا د د عا م ات لاا ‎fod‏ ا اا ل خا عم ‎TE‏ اد ‎Tat‏ ذا ل ان ‎LEI‏ ‎a‏ ااا ‎EEE‏ م يرن اساسا ‎ETRE‏ ل ‎Ms SXF be ¥ EE a EE VY OV 1 1 1‏ اانا كا ‎SA‏ لاا ‎HIS NO EE‏ ‎FSS SUL CHU I‏ و ‎La LN FE Popo‏ ا ‎SHE AEE AE 1 HERI‏ سات ساسا ‎AE eer EEN ME SET a 1 i CURR SPER FEU WAU SUPE JEAN SOE 1‏ ‎Th SA SS St: H‏ اع ةا ل ‎SE‏ ااا حا ل م اا لأا ا ا ا ان ا نا ا ا ل اا ‎voor i] Poor‏ ل ا ل ا ا ا 7# ‎LARA RAE MR SME, SPR I 0! ١‏ ‎HE tod fined‏ لاا ‎EE a HE] ] i STE SR OY‏ لس ات سس ساسا ا ال اا لا ‎ad IEEE i‏ ل ا 0 1 = ‎TU TER:‏ ال ند اا ان ا ا ِ ‎١‏ ‏ال اا أ ا ا ا ا لاا مال 8 ل ا ا ان = ‎gt‏ ار اا ا ا ا ا ات ‎I‏ ةن لا اج ات ا اه عه ا ا ده ‎A Rasen Ca‏ م د ‎TN 1 HEE EE‏ مم كات ‎pet HI (I OU ae Gt‏ ‎SSE‏ 2 سسا ساس ساسا ‎i PRM al‏ ا ال ‎A a Ta MA SE‏ ‎H H : : H 8 BEEN A‏ نينت ‎H Rf HN N H RS‏ + + للا ات الح ‎SOS‏ ادا ‎i‏ ناا اس لالسلا سا ساس زا 1 1 1 1 04 171 اا ا ل ا ا ‎BE EA‏ يا لك ‎EK‏ ال ال أنه ل فدات لاي ان لان الاق لان 1 الا الا ل مسقت الس ا لمق اا +00 ؛ : ‎I‏ دجم ة ‎I‏ الا ل ‎SUS TJ‏ ا ل ] ; ‎dod‏ ‎A A‏ ما 1 7 1 ل | ا ‎a EERE EL Added TTR‏ ا ‎St A RE 1‏ سا لاست سا اا ا ‎PCE‏ ل ‎HE a Rs‏ املد + ‎Ben EE TE‏ كاه ‎tae ih wi‏ رضنا ‎AE Ss‏ + ؛: : 171نة ‎[EE‏ ا ات ل ا ال ‎J‏ ا ‎Fd‏ لال لل الا يل اليتس ا ا دا الا ل ا 01 الأ ‎RTC FU JUL OOOO SOO EO‏ ا اللا ااي ‎on A‏ [المرعوة ا ] ‎ATRY‏ اث ‎١0+ A CR‏ ؛ :0 1 ‎HR BO FE OR‏ لمعه ‎SAN‏ سال 5 ‎ON SER SE SS‏ ا 7 ؟: 1 ا 1 ل ‎HEE‏ 1 لامح لا أ اا ا عي ا 1 ‎[EE EE SE‏ سيسق ا ‎eo‏ اا ار اا ا ات سا مط ا م ‎tl SH EU ON 1 WE‏ ذا ارا ران ا نات ا ان ان 0 ‎ae‏ لح ا ‎i‏ ب لمم ‎MAAS Ha + Ca Oa‏ لا ‎Soil‏ كين ‎X 3 babi‏ 0 الال لو ‎Sem b FE 0 1 ES‏ ‎ra A VRE gi‏ مما ‎HI RS‏ 1 الل الا ااا ااال الام ‎STEEN SR EE J ah 1 TE Fr = BE ١1 8: a es So - oS EEE 0 HEN SE SI‏ ‎ERS J SEA Yd TT TN SLI SO EN I‏ ال الست لت اال اا 1 1 1 ‎TE‏ مخ ‎EE RS A J 2 Fi ob i £4 deh, 3 Sh fa SEE PVT‏ اتات ‎EE‏ + ل : 1 لحك عط 408 ‎AR EN SO SO TO‏ اها ‎Arr‏ ‎RTT‏ ال لاا احا لد لا ا ‎NE i a Ee [EE RN Ad‏ — ‎LOONIE 15. NOL CONN SS JO BR BA Cur Sa Fd HE Po Ss CC VO SO TTT js‏ ‎a ToT SE SN SE‏ ا ‎ed a‏ اا ‎a‏ أن ان نا ‎SS‏ ما ا 5 ال ‎Sat a Sa i 0 NE SC‏ قا ‎Ey‏ انان ان ‎EM‏ الكل لخي 2 ‎WOT VY di dn‏ ال ‎Ba prs SC‏ ا ‎i EE‏ ب اس ا 3 ال ‎i NYE i Wel 08 Cas SCE SURE Se BU RI‏ الم وق ا ‎EE + Po 3 JE Er a‏ 21 التق اا ا ان لاا نا لما اا كد ‎Se‏ ااانا ا الا الم ‎cs‏ يا عا لاضن لا اال الج اا الل ‎TT 4‏ اكات د هااا ‎VTE‏ ار اك لحت ا ااا ‎Ld a a EI 17‏ نح | ا لك ساك ‎Adee i ae BE‏ $8 ‎an Pd SEER TN SR SH SN.
    SY Ss at RE oor H tor bd 8"‏ الات لا ااا ا ‎Se‏ اا لع ‎x H LS ERI‏ : ااا ال ‎1a EI‏ أ 3 حي الال اها ااانا ‎CURRIER ATE TTT SI ER‏ لي مان ‎Se‏ ا ‎ASH‏ انق اا لان أ لاا 00 ؟ : 3 2 ‎HEE‏ يا ‎SE‏ ‏ا ‎EEE IE‏ 1 اا ا الح ‎a‏ الج اا 1 الجا لا للد ا د ا ا ل ‎qi 2 EN‏ لكر ا :اما د اا ا ل ا ‎i ES FURR SOU SUEY SOUR SUT SUT BO | HE RE‏ اج ازا اغا انرا لان ‎Ch‏ اا ا اا ‎Foy‏ اتا اج 143 ‎i‏ ل ا ا اسع الح الل + 3 + 34 ؟: ؟ ‎dc Mike TR voy FE i Ey I I XN TITTY‏ مرو ‎Loo a porte‏ ‎HERS Pod id i Fa Vd‏ ا حي دان ‎(EE‏ ‏ا ‎Sa‏ ل ‎PLR‏ سا زا ااا ‎FE Stag ee [LE‏ ® ‎HI‏ جا ا أ له اس م ا ‎SR HE EE‏ ا ا ا ا !ا ‎odd CR A ETT CN OE 0‏ 8 1 1 مخ ‎Ea SS CS SC‏ ممه مد امعد لمم 1 ‎١-08‏ ل ‎i HITE‏ 77 ااا ااا ‎Me CEOS‏ ال ا لا ‎H i Ha a ne & ITTY‏ اس ل ‎PE‏ لا ااا اااي ‎EL‏ ا ال ‎Lo‏ لمي : ال 8 الجد ع ا ا 1 ال ‎H 3 H N‏ 3 3 3 ا ‎Rt, BRE ih Gh‏ ال ل ‎bd I‏ الحا ‎FE ERE EE‏ بج ‎FATTY JERSE SUR JOUR: DUCES SI SI‏ ‎FEIN‏ وات سا الت اس 1 ل الي ل ا أ ا ا ل 8 ‎oF‏ ل ان ‎Sh SE‏ ا ين ا لا ا ات اا اسك اا اا ما اا للا ‎ES hair‏ اا ‎ORI a a So SR SE EE EA WY‏ لمتكا اتج ل : ليسا سس ا ا ا مسق ‎SERRE‏ ‎boron‏ ارا ل ع لد ا متا | ‎ERO EU SONS CHOLINE.
    WO ETT CO OS A TR‏ ¥ اا ل ‎CERES pnd FITTER HIRE RE HI SOUL JOUVE TR SOUS TO: SU 1 FINE SE HE‏ ‎Sas J HEE + SONNE AER: ENE SUD WON: FUECH: JOE OJ SO SU Ses !‏ ا ‎Ranch‏ ار 1177 ‎bf i 5 ACE‏ لح ‎B *‏ لاس ‎boyd Eh Ta ar SOU tt H 3 HN 0 : 1 hy Arm m mmm mmm‏ ‎i ;‏ سا سس ف 1 1 ‎RL Pod‏ 1 د ا ا مل 2 ¥ - ‎EE Nd ER Sa SEE EEE SE‏ ‎EN x‏ لاس للح ا ‎FI PR‏ با ~ 3 ‎it E‏ سسا ‎SE:‏ اا لل ل 8 ا : ٍ لات تلب ‎LAE I‏ ‎a 2 ALN ¥ Sex‏ ‎LA 0‏ 4 ل ‎bh)‏ 1 1 ّ" درجه الحراره )2 { ‎iy A‏
    & ‎Ys‏ ‏دج 2 “نحي ‎S39‏ تسهار 2 مير ‎i‏ الما لماه الما ما ‎٠:‏ ذا ممم ممه مح مم ممم ذا ‎NA FEE }‏ ا له ل ل ل ا لت ل ل م ‎MA‏ لم ‎AMAT‏ ل ل الما ‎Et SE EERE SE SE ER‏ اا ححا م دا حا سق ا ا ‎SE i‏ ال ا لا ل ا 1 1 :0 :0 ‎FAR TE ١‏ لاا اا ا اا ا ‎SE‏ ا ا عا ا ا ا إل باو اا ‎HE LEE ets SOOM SMS CEE OSC OOD JON SEED.‏ ا ال ا ا ‎Se EO‏ ل تأ ا ا ‎IE DO J‏ . الحا ‎SRNR‏ :+ 0410 : 1 :ل ‎A‏ :1 خ2م: ‎EE‏ : :1 ل ا ال ‎CORN‏ اه ا ا ال ل ا ‎rtd INE WH Fanaa Bt KC WARS J SAI A A CAN 4 ed‏ 1 ا ا ‎FIO NN‏ ‎SO ْ + NE: RE i ) 3 UE‏ الح الح لحا المح الات ‎SERRE AREER SEE‏ اما الح ل ‎H N 2 3 H YN‏ ال ا الحؤ ‎Meth A A SA‏ إن ‎a‏ ا ا ل ‎EA‏ الي اط ا ا اس حي ل ل تا ل لك ا ااا أ حت ا 0 ‎FENG FU SU JU‏ اذا ‎HEE i or, Sh SO I SA Sat‏ الا ‎tH St a J MS‏ اا انث ‎Se te‏ اللا اذا ‎a‏ ¥ ا أ ‎A‏ ا : الت ا ا ل ‎LA‏ ‏الت ل حا م ااا ‎desde tied‏ ا ااا ال ا . ¥ ‎RRL Fondant SS Ti TTY‏ لمي ‎SU‏ مضي اميه ممه الام اما لمم مام لضت مات ا ‎UE 0 . du‏ ا ل ‎TE TTT TT‏ سح ‎INE 4 A EE TS A‏ ‎Hy‏ و ا ا الات ا ا ان و دن الح لح الحا ا ‎NRT COUR TOUVE SUE UU SOUT IR WE TUE ST‏ 1 الت ل ل د ا ا ا ل ل ل الا ا لاا الا انما اناا فيا لاد ا لاا الا اا لا الا ا ٍ ال د اد ا الت الات حت لت لا ل ل ل ال لا ااا ‎Yn td‏ سس سيسات اساسا ساس ‎TT HERE JONSON FOOTE DOVE 00 J‏ اج عي د عن لت ع ‎ridden‏ ‏م ا ل ا اد ا ل ل ‎HEE EE : EE 1 ١00‏ ل اا ‎I‏ أ ا اا ا اا ا اداح ‎EL‏ ‏لاقت لاي أل لل ةا ااي ا 7 ا ا نان ألا نا ال ااا انا اا ااال الا الت ‎A‏ اساي ‎NRE J‏ ل ‎Ld HEE rr EE SE I: EE TP I APPL ISR‏ الا ل ا ‎id‏ 1 الات اا ادا اران ا ل ا أ ا اد ا الا ا ا ل ا ل ‎SANE NO‏ ل حت حت ات لح ات ل ل لز ‎IE EIS 7‏ ا ا ا ا ان ا ا ا ا اتا لحنت ليطت لت أ ‎H ddd dd :‏ ؟؛ ؟: ؟: : 1 0 ‎HES SE‏ : الا 4 ل جم م م ‎SO‏ الس تا ااا ‎EN ES‏ ‎nnd by 8 : 8 IF Tf RI H id RB i ERNE TNE SNE SU SO SNR: UN SOURS. SO SOR SO‏ ته ل عم م كل عه اك ا ‎ddl fbi‏ ا ‎Porn rR Lobelia‏ اد ارا ‎SE AE‏ ا ان ا ااا هن سا ‎SOU DR DUNS SUE SOU SOR SUSU SUUUU SURE SOUS 00 CHL SUE | NOS‏ لات ةساس لأسا ا ا ا ‎ME‏ اا ‎FERN‏ أ ا ا كا اانا ا ااا ا ااا نا ا ا اا ا ا اران ا ا اانا ااا ل #تتك ةل الأ ام ل ‎A SA: SE SP‏ ااا أ اا ا ا ل ا اا لاا اا ةل قا ااا : ال ا ا ل ا ا ا ل 0 7 ا 1 1 ا ‎A‏ اع اا ‎A‏ اا ا اا اما ا ات ا ا ا ا لام ا الا ‎i UUUU CUE JUN S00. DURE SURV UI SPUN: UU O00 SOE.‏ 3 ‎LS JO n= bi td‏ الخ ال ‎a a‏ ‎ENR SOUR OUR AO SOUR SUE JUNIE UR & SOUR FORT eo SLI 8 J ESO a a a ra SO Fe‏ : ل ا 0 : 1 ‎A SCT SE FX H FR‏ جا يا لاا ا ا ا ا ا ال ‎fared‏ ‎RRR‏ ما ‎SN i ddd dyad Ld EF RI‏ 3177777 ‎HI 0 I‏ ا > ‎YT‏ ا ‎EE SE‏ ا ا ‎a i‏ . ‎NU ae 0‏ ااا ‎FERRE EAN ESR OUR SHU UU, 15.0 UE UU UE SURG SU SUE SO. J‏ الحأ لاا ل اا ل ا أي لان ا لانن اا ند أن الزن ان ان اا الا ا بنك ‎Hd ¥ RIE‏ م ال اج ات لا ل اا ان انا انما دان ‎EE‏ ا 0 ا لا ل ل ل 3 لاا ‎NA‏ ا ‎DAA: RIL‏ ا ااا ‎CSUR 5 OE NUE VN JU: SRE JUN GO SUN A AEA SU SURE CHU‏ ‎SE HE‏ ا ‎Sat Sl a‏ ا د ا ا ‎At at EE VN se‏ ل السو لات ا« 0 = الل ‎Sa RN EAA‏ ا ‎Sa‏ > ترا ا ا انان ا ‎Sa‏ د أن ان ‎LH :* NEE AE ENE Prk STR‏ اد ل لحاس د ا ل ل 7-1 111111101 1101016 ل اانا ‎I FR SS‏ ¥ . امسو ل ا اد ‎Pas‏ لات ل م ‎SORE‏ ل ل ا له لد ا ل أ لا ‎I fio4 FE CRE NR SOT SUE NUNES OE SEU |‏ اا ‎of HIE NE AE‏ ‎A LO { i‏ 3 ا كا ا ا د اا ا اا اا : 3 8 ‎EAR RRA IR ARCA A) RRA REN 3 H Wold‏ اللا الم ل ا ا ال ا ااا اد ل جا لا د تان ا ا اا أ الا ا ل يا ا أ ا ‎WORE‏ اه ا لأ لاا اس د لاسا اا ا ا ‎TT‏ اا ا لس ا ا ان ‎FIN‏ خلا لهات ‎I‏ الك ا د ا ا ‎SRA‏ اع عد كن نت ست لات ا ال ل 8 ‎AY FN‏ را ال ان السو ‎abode! | beg fe CENCE‏ اا ل ا لمي سن ااي ل ا ا ال ل ‎RAR i‏ : ا ‎SER NE SN AR‏ ا الل ‎Rh‏ ل مي ا 1 ‎TE EO: d‏ ا ‎PO‏ ان ا ال ل ا الي ‎Dodo AER TENE A‏ ل ا ‎WE‏ ا 5 و٠‏ ‎Ladd RE fend La i‏ ىا ‎NC Pd FA Sd‏ ا ‎EE A‏ ‎Hrd‏ اد اد ا ‎REE‏ الح لل ات لتاقي لد د لدت د ال ا ل ل ف 0 0 :0 لاد 0 ‎١‏ ‎SEA WL‏ ا ‎FI SE IG‏ اليد ‎FO 3 DIT SR EO SUV Sc SO CG 1 A a‏ ‎etd‏ امدق خجية ححا سق تل حا مط جد لل ختددة لط ا ‎Sh A FONE SOE EIR SO NE SR SSE‏ اا ‎A‏ ان ‎A‏ ا اا ‎ree‏ 1 0 اا ‎i Sofi dodo be des tb f nd fede fendi]‏ 1 1 ال ااا ‎HS Se A EE WR AL NCI TURE SARA WRENS ROP UR St AUR A MES A th‏ 17 111 ‎fpf NEN NE ARR‏ م ‎i ١ {EAN freddie ede‏ ساح ا ‎RT‏ ‏7 :ا ا اننا انا ا اق ا ا ا ومن ل ل و د تيت يت ال ل ل ل ا ل ‎feedlot‏
    ‎a.‏ ساس اس ‎OEE‏ ا مسد ال ا ل ا ‎Ny‏ لاد ا ل اا ول تي لح لدت اديه لدي ددا ا د ‎RAN‏ ‎A i EY HE NR a ET NE A :‏ وم أل ا د ا اد اد ا ا أ ا ا ‎ETE AE AE TU SW RE‏ جح كة ‎i‏ ‏رات ‎A‏ الا اا اا ا ا ‎AE‏ ل ل لح أت د ا أ أ د ا ‎ERLE HR EE‏ ‎LY EE Se Shi‏ 1 ا ا ل ال ا ا ِ ‎SOU JUNE |‏ ا ال ‎WTO 6 6... Logs Si i i ae‏ ان ‎HNL fiend‏ ‎Se SS SS SUNN Jo et TEST UE SVT TE ives A : rte 2 SnD IY.‏ سمي ‎I HE A HS‏ ‎Ree.‏ ينيبي ‎EE SERCO ee sca‏ الحا محا ‎EG SCH SERRE SIRE SILL:‏ جا اماد تي الت ا ‎ANEURIN I brn‏ ‎wb bbl Shh bbl Sb‏ مجم ‎ped BU‏ ‎oo ei) 3 BAR‏ ا الا لاح ‎boot‏ ‎A Ae Rays Ao.‏ ‎LY] Waa ox os oh ,‏ = ‎EN‏ يد ‎Ve‏ ‏درجه الحرارد زم {
    > gd ‏مك‎ A £3 ‏الإنصها‎ nl 3} pms PP SP TT ‏اال‎ CS SE A A EA SAE A TTT AY ‏ل‎ 70 Won We ‏ل‎ Rene MON NE AAR A A RAS Al A AAA Si RE SOT SOME ‏الا ا ا‎ MTL SEAN 00 ‏ا مما‎ BE OU SE EO SN SOE SOU: DUN OS OOS SUL SPO SOON SEU SU O SUUON SOU OL ORO SUTURE PN OUEST JPR DOOR ‏ل‎ ON TT vf 7 ‏لا اط ل ةلم‎ Te de en en eh dh dn ‏ا‎ ed edd ‏ا‎ US ‏ا الالال الا ا ل ل‎ SEN SE ‏ااا ار 07 6 تر قا اا‎ SUE ‏ا ان ان ااا‎ SUE SN SNE SO ‏لجرو و ا اد انا ااي اا ام ادي تا مدر د لوت م ا ا ل ل‎ LY 4 ER a ‏ا‎ ‏رااان مان اا اما لعاف ل ا‎ A ‏اا‎ ARAL ‏لا ااا ا لات ا ااا ا ا ا اا‎ SE ‏لا اا الجا اح اا لا اا ار‎ ‏ا ل ا اش لا اا ةلق ا ا‎ ‏ل ا ع م ا الات لا ل ا ل ا‎ 4 ‏ل‎ APOIO MRSS OE Cove ‏ال ا ا‎ OPE SONNE ON ‏ا ا‎ SON WON ‏د ل‎ che SUE SOUR JUNOT IN CR ‏ا‎ ‎BE EE Ht ‏جب جتنت لماحل ل ل‎ ES TU DOL DOR A ONE AOE AN ER AAAS SA: feed ‏ا ادحا اميد سم ل ا‎ ry nieve ‏ل ا ل ا‎ veel eo Deane ie fever ‏ال‎ ‎4 ‏ل ل‎ : | 7 4 . : 4 : : 5 TR ‏ادي جما أ‎ 1 : : 8 : 8 : 0 : 1 : 8 . : 0 x TR nl ere ‏مع وم د قف‎ al per rl na a RR RBA vn 3 SRE EEE EEE HOR RRR ARIE RP RL EE ‏ل‎ NN RN MT I IY IY AN AY ET TT ‏ال‎ ‏ا ا ا ست ال ل‎ A SH SO Sie SA SA SC SA SE ‏ال‎ ‎PR SRE RR 6 Ln : LIS 8 1 : ET : RE : FREE : : 8 RE Lol 0: 1 — To J A SS A Sr SAS A SS = » WX 3 pete eed dnd ‏اا اا امن اا ليله ا اما ا ا ا‎ fede fet den deed fede eds dedi i ddd 3 EE SEG JOU OR SOOO ME AUTO SO SOC SA A ONE SO SUMO ‏ها‎ Ne SO JOU SE SU SOE SO S Nar | R : : 8 : 8 : 1 : 8 5 + 8 : 3 : : ُ 8 : : : 8 8 : : 1 2 8 8 : : : i ‏ا ل‎ des Bede esd ‏ورا احور الور الا ارا‎ ode dec bee ‏لويد اي‎ dnd eda fend ‏ساد الحا ل لل‎ TS ‏وو ااا‎ 111111 SPUET SUE JOR AEE SOB HE ¥ ‏ال ا ا ص‎ ‏لمجا اا لح اما اميت ا م ا اذم اخ احا ارم برضا تمر امه امي اا بم كوم لضا ونم ماه لقنا كا ما ام ا كا وت الم ل ل ا را‎ ‏ا‎ 0 FUUUS APPAR URNS TUNE URN PORN AUNT SOUCID- UN: SUNUE NES UE SOUS POU: SPU SUPE SOON: SOO: J SO J J OU SO SO NSM UO SONU: MER SR SUI SE ‏ات ااا‎ UO SS a defied ddd ddd ddd ddd ddd dc ddd dade 1 ‏الا أ ا ا ا ات أ ا ا ا‎ A EE 4 TE OU J SU SO SOU: SU SOU SO: OU SUN SUES SUN SOUS SU D0 EEE SOUS SPs SUS UU SOY: AUR SUES SE: TUS: SE SONA UN SUES J: Co LL a a ‏ع‎ a TE ‏عي عي‎ Cy yy ns EE TE ETT eb ES RRR) OU nbn IEA: : LT NS SE : eerie arn H ‏ا‎ ‏ال ا ا ل ا ل ل‎ 3 eR I rl SE ae ae ‏ا اا ا ا اح ام ا انا اي ا امم ا ا م ا ا د ا ا ل‎ St ‏ليد ااي اه‎ ‏ا‎ ‏ا ا ا ل ل‎ SITE ATE ‏ال ا ا ا‎ a a ‏اج يا و م واس يا ل وإ ماع وج‎ ‏اماه اك اد لني رارض نا اك التي انان زان 0 اغا ااا كان اننا كا ات ا ا‎ - a A a » VE ‏ع م قال اكلا‎ Aa foe Bon 2 { a} oad ‏درجة‎
    *- ‎is i 7‏ - ِ ‎fl i a ae‏ = § المج اا ‎ANNE‏ الا ‎NC‏ ااا لاا لاا ا 4 ‎pw = FS NS TG SE SRR LE CIEE‏ 0 ا ا لاا اجا اح ‎EEE RR A‏ اك ا ا أ الا تأ ا ا ‎FE A‏ ‎ot‏ 1 سا د : ‎TTT I‏ ا ا ا د ال ال 0 ال ‎EA OE‏ سكا ‎a EE NE‏ د ‎pS‏ ‎i‏ -—— اتا ات ‎Pit b‏ ا ات لاا ل احا ا 85 ‎SE vd‏ تاس ‎Tendon did den IH Bat‏ الت ‎I SER RR EE a‏ ‎Bs x SET‏ و ‎bY 1] Josip 3 Nasa NY RR Se‏ ال ‎BS . a‏ لخت جع ججح نج 3 § ا ‎١‏ ْ ا ل ارا ا لملا ١لا‏ ااا اد جا ا ان ااا اا ااا ل اا د و ا و ‎EE‏ ود ‎LF SI‏ ا ل ‎UE‏ ا تا اي ‎ne.
    EEE ERE Re a LAE TE SE SE J‏ ‎BE NET SHER bade NE‏ اما لا اا امسا سا سر ا ‎ef‏ ‎Ww ¥ ISR ROS J 3‏ ل ال ا 8 7 ¥ ‎REE SUEN SA J 2 5 ¥ x. seeded 5) 0) bOI SO SU‏ 3 ل سا اتا ا ا دا ‎Se‏ لد ب ‎a ERIE TARE‏ سا سسا اساسا جا ا 1 "0 ما ‎ENE‏ جني ‎SEN: SON‏ ل 3 ةا ااا ا ا 3 ‎pod WR a‏ ال ا ‎i‏ اليد جد جد حا ا الي لم جين ‎rope‏ ال ا لاد ال ‎NYA FN NA :‏ يا د ا 1 ‎Friis‏ 3 الو د ل لح اح جا ل ل ا ل ‎SI‏ ‎BI : a ERE‏ ال ا الا ل ا ا ‎FRR RE.‏ مق ا ‎ia sis d ine fd EE‏ الا ‎FI EE‏ اسل ااا ‎i‏ ا ‎FI So‏ : ‎i EI I ——‏ ل ا اا ‎H‏ لمر اد با م } ‎NI‏ ا ‎AR a SE J JS‏ الاي لط ا اد ل ا اد مقا ‎I‏ يمرا ااا ذا 25 ‎REE ER 3‏ اد ‎JT‏ مد ‎FE‏ كا ‎ME‏ ا ‎I FE‏ لاا اا ‎CREE‏ ا قاد جد ند هنذا مج ذا ‎IR‏ د ا ا 1 ‎VE 0 0 EERE TEE EEE‏ ا ‎I = EVR 0 SEE‏ ‎J Ped CE SE ES‏ ا ‎DNS SURE UE.‏ يه ةا اه اس ا ا 1 الج ل ‎a i, Fidei‏ الا لم د الا كات ل ا ‎a RE i JUTE TR NESS‏ ل ‎bl AE‏ 3 له كيج ددج ااا ‎N‏ 0 0 لحي اتح 4 ‎by‏ 5 ان اا : 5 ‎CIR i‏ إٍْ إْ 55 ‎tte 3 H Ra N N PR J ay % 3 aaa +‏ ا :8 3 ‎i von‏ 1 ا ‎N‏ ‎FETE }‏ 3 متكت لاة للفلا ماه ما ميف" الت ل ل ل ا كات الي ‎RE US ER AE J: { + BR‏ مد جا ع لح لح الا > ‎i‏ ‏قت 0 لأسا ‎VOT RN SH EE I‏ ا ‎FE SEE TE ENE TE 5 Hidde‏ ال 1 الما 8 — ا 1 ا ‎Freddie EA ES RT Yond BFE SE‏ 3 ا د / ا د ‎J‏ ا ات اا ا الم د من عا ا ا ستل أ اا ‎AEE VIET 55 0‏ لمم ‎AR‏ لمي اما لض ال ‎SR‏ ام لد ال ا 4 مجه ددع حجدة ‎a‏ دا ااا الج ل ات ‎SUNN ME Ee FRE NE AN SO FE SJ SSH Dt 8 I an‏ كا ‎FE‏ ‎EYE: SR: SE SRE SE SR dR dd RIES‏ ل لل ‎Sa SA‏ ا دا العامة لات ‎RE EE J‏ خالا ‎A AE‏ فقا فا ‎Cha Sa Se)‏ ااا اا ل ا ‎ETT ss iy‏ تدا ‎Sr Sh FEE‏ 1 ا ‎ha BR a N a ae Ak I I A ENE NAN SH SE Sk N i‏ أي ملا ‎A‏ الا ‎ied RIE‏ د ارا ا ا ا ا المي لا لق اا ل ا ال وو ء م ‎Sas‏ ‎EN‏ ا لاسا الا ‎SE‏ الك لذفقة الففة عفد لما ‎١‏ لكا كنا ا الا ‎TES‏ ٍ ‎sa 5 : EA ENE BI.
    TE LO‏ ‎Wo Ei‏ 48-4 ل ا متك حا ا ‎IT Fd‏ الكت الاك ‎SRN I HA CINE JHE SER SE CES | Ty I I SRC EIT 3 (EEE:‏ مج أ ا ا ...ل ا ا اا ل اميا ب ‎BE‏ ا ا 2 حمق ‎Oe bY‏ الات ‎FAR‏ اللخ حك 7 اا 0 3 ‎J‏ ا 1 0 ‎EEE a‏ ‎fooedel A FE SO‏ جم ‎i SR UA “profes‏ ا ا 5 ‎Eo‏ ‏جل ‎EOE 0.3 J: SN J‏ 8 الال أده ‎J‏ ا العلا ل ا ال 1 امع ا ‎OE #3 RIEL U0‏ ا د ا ا ‎EE‏ ا -_ ا ريا لكام ا ا ا ا ا ا ‎CE‏ ا ا ا ‎a‏ ‎RE I A‏ 3 ايلات ‎TE FIC SUR SK i‏ ااا ا ا ‎ESE‏ الت د ا ا الا ‎oii Ws‏ ا ا الات ام ‎Fie ren ified bP SS SP J OP Job‏ ‎R BS 1 HS NS ¥ EE HERE 1 RAR RN esd a‏ اه اا 3 3 ف 1 3 ال ‎x VERN SAN ¥ 3 RE‏ 3 ل ‎N JOE RR A‏ 6 . ‎To EE Te CS EU TEE TO Vi ER NN I‏ الما ‎EOE FE OA A‏ امس ‎a‏ ; ارا اجا حم ‎SOU TUE JUS SV: ENS SUE A 1 3 J D2 3 FUE be‏ اجات اا ‎J a‏ ار اد ار ا ‎dh‏ ددج : ا ا ا ا ا ‎SRR La EE aE AR LOTR JOU SUR JOU.‏ كت ‎id a HI deed dnd By Ts‏ مس ‎Ea ER‏ == ‎Cendaaan‏ 3 :7 راخدا يك ا اا ادل ا 0 ‎x TENURE Retains ¥ dt EE 37 be IV TEUR.
    FERRER ON‏ 5 لاد اجا “سسا سال ‎FA REE 3‏ لاسا ا ‎FEE IE‏ اج ‎IE J ae‏ اد ا ا ْ 3 اما الا لأا ا ل ل ا ل 3 ‎chide : Fen‏ 0 ال اح اج 2 الل للحي 58 5 8 4 ‎Se‏ ااا 8 ‎SRR 2 8 2 A a £3 5 be‏ الال ‎N‏ 8“ ا اك لاف ااا ‎a‏ الوا ا كه ل ا ‎FO RE ae a‏ ا ل ل و ا ل ا ل 8 8 ااا ا ل ا ا ا ال ا ا ‎BE‏ اح للاخ خا تا نا ع ا ل ل ا ‎rte‏ ااا ‎fone‏ #ك ‎IRI IL £3 TE‏ م ‎OR‏ تم ‎MOE‏ امد امد ‎Ee ENE SOO AONE‏ م ال ‎HE HE.‏ ا 1 اعد م ا ‎TER Een SE‏ ‎ated IE weeded d 3 I FE Lhe‏ الخ اا ‎SE SE Se‏ . ا كا اح ا 1 ا ا ل ا ات سحت ات ‎RERRERES EAE A‏ الح لس لح ‎y‏ الا خا 0 ‎So SER SERRE ERE 3 by ApS 5 0 a IRN.‏ 3 3 3 ا 1 اب 3 حكن ‎be‏ 8 ك0 ل ا 3 الكت الح حي 3 1 ب 1 0 ا /, ْ مح ‎NL RE.‏ السلا ‎FINN UO‏ أ ا ل ‎HI NOR J‏ ا ا ْ ا 1 ‎Te NEES‏ 83 8 الح كلاح اح 8 ل ل ‎ERE EE 5 Tans‏ انان ‎ks‏ ‎A meas‏ حتت —— ‎I‏ د ‎Fondant SRRER SE SH A TA II‏ الا كا ا ‎SE‏ ‏اح الخ ا ال ا 8 ‎$end‏ مش اا 3 ‎AN SN Aa ET‏ 1 3 ددا د لح ا ‎Yd.‏ ‏اح ل 4 3 ‎x A] 0) 4 a RES SE Sr a a Sl‏ 3 ااا لضا ‎Ses i i‏ ار ‎TO‏ ‎BS ee 3 3 T 8 ki 3 i 1 —‏ امود جح ا 8 6 ‎x RRR.‏ ‎TE SE Se‏ ال ‎ae lw AE ried de fod A BA‏ ا ‎i.‏ ال اع ‎rede‏ ‎ANd‏ ا ل ا لابه ‎A‏ لم لا جما سج م ا ا 8 2 ٍ ا ع :1 ‎A‏ لماي 4 رت ا الات اكه أ ا ال ل و م الم ‎Far‏ لمج ا ا ‎TUE EN‏ تيم مط = مون د #خ حا دق اج ‎TE 0 1 3 x‏ ا امد ‎١ inn i EERE es SS de oo a I Ey‏ ‎im 585 |‏ مج ‎Rend oR ae ES TEER AAR Re Fa‏ ‎hee‏ ا تك أ تا الا خعاك ‎a‏ ال لق الفا لقلا قط ‎i‏ ‏بت الحم ‎a‏ ادح دح دادج لجح جات د ال ل ‎BE HO SO‏ - د ¥ ‎ridden ded BE SHEL SIRRAR SAAS‏ ا لمي حا ا ا اد م ‎=F‏ ا 7ت ااا لاا أ اا ا ‎HUE‏ ا ‎ac ARR 3 3 :‏ ‎PN 8 ile‏ ةا يا حب ‎J‏ ‏0 : = لا ‎BEE FANE A J‏ ‎a 3 5 5 5 0 > 0 by A) ¥ 1 0‏ 0 جلا ٍ >" ‎١ ٍ‏ ٍّ : د 1 2 جا ‎$A‏ 1.8 رجه الحزارة )2 {
    - bes Sod
    * bd a " — My ETT ” 2 ‏اناالا 0 لد م‎ 4 g RIAN ARAN MEIN A Pode BRNO ‏مض‎ AE JON SONI ANNE HH HI TER EIT ITTY SEER SS Jr ‏اه حت د حا‎ Sa URN SURI ‏اا اا‎ 0 8 meres CE MAE ‏اا ااا‎ Sa EE I I I . ARRAN TNE A ERY 1 3 LIE WARE SHER (ERI } 1 x R US A BRAMALL a A ‏لجسا‎ uv ‏الج ا لا ل 1د ؟‎ 8 N H 3 shpat 3 3 epee ‏للحي لت مح اضف نح‎ N 0 0 i SR JH J OPEN 0 1 N FERENCE UAL Sat p : ‏ات ال كط‎ ‏لح ا‎ T——— ‏الا ل‎ HE 1 ‏ا اح ل ل لاا :0 ا ا ااا‎ pended ‏ال‎ ‏ا ا ا الج ا ا ا د ا ا الا ا ا‎ AIA ‏ا ا ا م‎ ha Sad i ‏ا‎ I ‏اا كا اللا ا‎ AE SEE a TO, ‏ا ا ل اا‎ aha H ‏الجا اا نا ا اا‎ CHS TE NE : LR SE FE IE £3 Ba at HE: SE SOV Th | : 0 ‏ال‎ HE BS J.
    FEE TOUR US TO SO bobo sds HEE 0: ‏اا 3 £0 اد حا ا ا‎ J FU ‏ال ا‎ + ‏أ ل ا ا ل ا لجا عا اا كد وا لد ا اا ا ا ال اا ا الجا لحان لح اد‎ ‏ل م‎ LEE ‏ل‎ id ‏ا ل ا ل ل مات سسا ا‎ 0 ‏ا اد ع أن اا ا اا ةا‎ SE SH.
    LR Ran ST: 1 ‏اماد لماه اد‎ MN ‏ايا‎ a 1 ‏ا‎ ‏الت سد ا ا ا سمل‎ HUE ‏اا للا حدما الاح كاد ا ا اا ام‎ ae 0+ ‏اسل‎ ‎1 ‏ل لح 3 : متحي جح ل الات ا لد ا اا ل سيا ع ةعس حدم‎ a ‏جد‎ FI 3 5 ‏ال ا مستا اا ال ا لح ا 1 اميق م ل ع وا ا‎ H deeded TT FO TO foal ‏با لجالج‎ IEEE AN ‏ترا‎ COE BE ‏اا لد د‎ A RIOR WOU SIR Joe HIE ks ‏الجا لا اد العا‎ Pood ANE ‏الاممية جم ممم لمح‎ RES UR Nt NA ‏ةب لحب لال‎ HE ‏ال‎ RA I: ‏ألا‎ A PS Vedi bedi SACHA HE 0 TRR UUR ANE i A at dann: R ‏اا ال ا‎ SE TUE SU YE J 0 8 ‏ال‎ 1: ‏ااا لما‎ EE Eh a HE ETRE TITTY TRE IAIN ‏ال‎ SE ST A UY 3 ‏ا الملا اي ليجع‎ ١0 0: ‏ل‎ EERE ‏الجا حر‎ § ORNATE ‏ا ات ا حا‎ Sr ‏تي ما‎ TTY ST EE SS LE SLE J Ra a Loaded ay CENT TTT RS a ‏ل ا ا ا‎ ‏ا اا ا ا ا ل انا حت لد م لج د د اا ا‎ od ‏الا ا‎ a ‏سا تاس‎ TE TE HEE ‏ااا‎ He pete I ‏ا امد ل ا‎ 300 ‏ال اي اط ها ا وا الا د ادا سس ايم ةس م ل‎ did ‏ا الجا ااا ا اا لاا ا‎ HER TA REI Sh J ‏لان‎ a Sa ‏ل‎ 13 ‏ا‎ din * 0 3 hi BS AD STL Ste i van RO SURE SUAS.
    A A 3 i ‏جح اه‎ a Sh wn 0 I LEE hh ‏اللا اا ا ال ا ا و اايار أ لا ا‎ SAE FANN SEE ‏الا لاا‎ CEE A YX non, fob ES St ‏لات كان‎ 7 HES prada SHORTT EL Ee aa ‏ل‎ J SUL IP ‏لديا‎ RR FY a ‏دن لا‎ SSCA LANL ET ‏ا ير ان ااا ا ا‎ 1 LI hada RI SCAU SN SS.
    HEY 1 ‏مسا‎ Poor a ‏الح‎ SR] 3 3 ‏م مق‎ EE ‏لاه عر كوي اد ا ا الا ال لاا ا ا ا اليد حر ا ل‎ 0 ‏ا‎ : 3 he ‏ال‎ N i 3 0 ‏لجر حر حي ان مايا6‎ N 3 FL NE NRL PR 3 1 a EAI TY ‏ل ل‎ Sr ‏الج د‎ odd BE EE Fail Fo FETT ‏اتاد الا‎ 0 0 ‏الج ع ا ا اا ا اا ا ال‎ HR Sadan HERE a SL NE Mia 3 EAE ‏ل‎ SUR J | FRE CI EOE NL FRE £. 20 ١0 0: ‏اااي ا ا‎ : yoy Fidget bey TRY TL SE NE SN SY in ‏ا ا سا نت ااا ا الس ا‎ bl geste ITELAIE WUE FURR TE OE SEL J EEL AR Re A ‏اك ا‎ EI EAE SERN TUR SLA REA ‏ل حم م ا‎ iat ‏الال اا ا د ا ل ان‎ ING ‏ا‎ ‏ل سا ات لال اا جديا ا د ا ا‎ FEE ‏ا ا م‎ ‏ا ا‎ SPUCE FOUR SR COR EES SUCRE FFE SNE REE UE ETT FRR vs i a a SSE NE ‏امكل اا‎ Fh ‏ااا ااا‎ Sh ‏الم ا ا ل ا اا 0 ا لاا‎ J i Pde 1 ‏ا اجو‎ Ra ‏د‎ v » H a ‏ا ل‎ 5. H 2 ‏سات اا‎ H 1 H % Ree . a x 3 RON + ‏ا احير‎ aa ‏ا اا ات الاي‎ EEE a AEA SHUR SU Vad Bn LOTR 2 8 = : ‏اتات ااام ل بحا شط‎ I ‏ال ا ال‎ VE ‏الا ان ا ا ]ال‎ 8 i Slew 1 ‏ا ا ا ااا الس‎ ¥ FE ‏اد ا‎ HEE | PS RS SN CN HEE: ‏ا ل‎ BH + ‏لل سج‎ 1 R N N by ‏الوا ل ل‎ : 4 N N 122 ‏الل ا‎ 0 0 BN : ‏ل 8 الايد مح حا‎ ‏اجا ا لا‎ FI + 1 IEE ‏ادس دي ديت‎ AEN 1 ‏ا‎ FR A ‏احلا ا ل‎ RRS A CSE 3 IR 107 TTT SOIC SOUPS NS: SUN JU ‏ا ا الا ا ل‎ : 3 [I ‏لا الات اا ا + اا ال ا‎ ¥ HR ‏لاني الح ليد‎ Fo YoY ‏ا ااا اي لاا لق‎ Read RI RS A IE A Ledeen dnd FY TU ‏الح ل ل ل‎ TRESS Er ‏نايا ا الل اج ا ا‎ FIERY EF ELI AR HE JC DNR SO SE A ‏لم‎ RE SI ‏ل‎ SER ‏اتات اا‎ ‏اللخ‎ 1 KAR SUES R N t 3 pda dda H N 1 ‏ا‎ x \ VR H + ‏جا‎ FES ‏ل اا ل ال‎ Poy ‏ال ا‎ A Pew Poy ‏ا‎ Es pet == i ‏جات حا ا‎ do li SRE RR.
    CUETY TYNE LERNER SI AY : ‏ات ات لوال اللا ل‎ J ‏:د د‎ a! ‏ل حم ااه لا اا يي ددح اا لاد‎ 8 YY ‏رار ااا ا ساسا اا ب بده بتي‎ Ch ‏اميا ااا‎ TR IN iar ‏جم‎ Ae Se ESR SU fan gians AEE EE + wey ‏المج لح اج م ل‎ ET.
    EE ‏حي د‎ ti Ee 0 ‏ا‎ ‎SOR J ‏ل ا‎ = FEE TS J FES ‏ا‎ SE.
    FES 4 ama + ¥ H SE p ‏الال الح از‎ on [IR ICAI 0 : 8 LN.
    ST oR we ‏الو اا اا ااا ل ال‎ yd Los Tal I [REIT 4 We > 5 Abts ‏با‎ 1 £3 3 + a 1 . 2, = 1 ‏ال ل م ا‎ ala) ‏لاجد م ا‎ SE BI : SR ARR SN GUI TE ‏ا ا ا‎ ER EE ‏المححدال‎ Poy ‏د الام الات اا الل اوج‎ SS 1 1: ‏ا !ا ا ل ل‎ 5 Voy Ed ‏الام ات حت ا لاا‎ 3d ‏د ا ا‎ EE EE ‏مضا التي‎ YT ‏دا لاحت‎ i ‏سد ل ا‎ : bos ‏جم لس اا ٍْ ليرا جد د ا ا‎ 0 * Rat a a ‏ايد‎ N fi JRL ESAS SNR 2327-7 Ion ‏ا او ا‎ FINES TT HI eo JE EA RE YENS SERLE SO 3 ‏ل ال ل‎ ATE : ‏لد ا ا‎ FE] EU EPG CU: SU 3 : 1 ‏اق ا ااا‎ Hd SR PLY FE.
    NO J.
    AN aS ‏ال‎ Ha: ¥ LITE TERRA, JOU + + 3 ‏و‎ Andras FE 3 IE SE ‏عا ا ل‎ A Soa ade fe TUTE SER: COUR JOU PY YY NE 0 ‏يا جاه‎ Aa CTY ‏اق ا اا ل ا ال ا ا اط‎ TTT EE HEE EE NR Vo Tobe ded bobo RB Rede SNE IN SE EE SEE AE Rt Ra SE NE.
    Fd bE nc EI ‏الم لدم وج مد‎ NER ‏ل ا ا الا‎ a 0 RSS ‏اا‎ TTT Yoon ‏ال أ لاي‎ 1 [2 ‏ا مده حت ل ال ادا ات لا ا سات اليا اي ل ل ا‎ EIN TEATS LINN pen TUTTI TITTY EE REE ‏لاد‎ LINE TE A ‏م‎ A ‏الما يد‎ CHRIS SE: NEE NS if Ret ‏ا م ا شك داضم‎ IO ‏ا‎ ‎iB ‏المي لد اع اح ا ا ا ا ل ال الح لت ا ا ااا‎ Loa Nit Sas ‏دن‎ ‎2 AE SUE ORR a ‏اللا الت ااا ا الك لح‎ od EE ‏السلا أ ا‎ FRI 1 5 ) a ‏ل : 8 0 افو لمعا اما‎ SLAMS ‏لات‎ N N 3 B ‏ا‎ a Soh H 1 1 ‏لل‎ ‏ا‎ IY ‏اد ا اح‎ ER ‏لت يي‎ WS: PE ‏اا أ ا‎ ERE ‏ال" م‎ ‏ل باشلل أ سا1 لاا ات اا اا ا ا ال ا لخ + ا‎ dria LEP SY TET nd A CARE JR SN SE SOE J FEE ‏حت‎ Ba Lod ‏الما ا اد‎ RR 0 * ‏كا‎ A ‏المح لممحا‎ bY v 3, Fenn] bh N Ri 8 Neves + : ar Savy 0 n ‏الات ا‎ ol SE ONE 1 NE ‏ال ل لع‎ i ‏د ل ا ل‎ Da 1 H yo ‏مت اا‎ iy Pilon {retin 10000 ‏الست ا ساسا ا جحل ااال‎ 5 ‏ا ا الا ل ا‎ HE ‏اماما‎ COS FINE JO.
    FI ‏مامه الس ساسالا ا الا مت اليل ني 8 الداع ات دا ا‎ i & RR ‏لمات ا ايا اال‎ bold ‏ع ا 1 لمم ما اس سا‎ ‏ا#مة م سم ل اما 7 ا ا اي ا ا‎ 0 + ‏امم مم م م ال‎ +. i bd Fedforadianganniloninieany B 3 AN ‏فب‎ ‏سس سيا‎ ea ‏الم‎ a 7 0 + Yo ‏م‎ ‎®t & = ¥ 1 4 ‏ل‎ 5 0 had ‏درجة‎ ‏ب ا‎
    كا ‎te‏ اس 1ج ‎Cen 4‏ اي مخطط متعدد المكونات جا اح ااه م اق عجوي م جا وماد جياه حي عام اوه حم عا اه اد عاج ماري اود ا اع و المعو لاع دض ا او اع توم عد عا اه دا امح جا جد ايت اح حلت د حتت ل ‎se SEIS Td‏ ب ‎nu > > SS ٍ ' an‏ ‎EE REE X‏ ل ‎CLE ITE Le om‏ ‎Ia pI Sp Tn 2 ly‏ ‎SE‏ :7 11 لت ات ‎ad BT eS‏ ل ف :0 :ا ل اط لات ا بج با وك جا ا كيت ير را تتام ا اا ا تتا ابا ااي بواج ‎ae‏ 3 يماي مراع أ ‎A‏ اج ا ا ما ع اما ياه الأ ةي اتج ‎i‏ ل ا مادا مع ام ا جات ا عاد او وي ‎I SE Mn nt a ne‏ ل ‎nn any LUE EIT IIE I IE Ih‏ اللا اي يا لي ا م بخ توك ‎i ah HERRON rd LILLIE SUENIIL ILL TL Ui i TIUTIIT LT TINIID LIITIIUIINIIITIILIIIIIIIINIIID LULL I TI Tr gn ir nny‏ م ‎ane‏ ‎PE‏ امج هاج مج ماح ا مح وح جا و جات ا ات لامج مجه جام اج شا م مج عا مج ماج ‎A A‏ جوج دا ‎Sra RE WF‏ جا ‎y PR‏ ‎EN EE LE RE IE En TET EN LTE DN RT na Th nL AR hn dn al nnn nnn any‏ ا ‎ren‏ ‎ay SIT TIATA NEES SETI I TE TA TIA TA LT HE TI Th A TITTY Le Te I TR N‏ ‎rn eT pb sere vr red‏ ال ل ‎LN - Sef Tenn MIN OF‏ ‎i NE I EE HK IN NE EE EEN‏ ف ‎Sa‏ اا ل ا : ‎en Nn ey re ae yn de vr va A ey Ey a NE YE a YS YY rm dw YE hE YE EY Yeh ov ae yy ed‏ ‎[AR LT a a Tn an‏ ‎By‏ ل 1 ات اتوت ل تراط لت 0102013 013 3 ‎UIT IT MIT un un‏ لاطت د ‎De EN bd‏ ‎en A sh A ne Tn a es rl i Ee de sn SY‏ ‎eR mR eA RY‏ لا د ‎pe‏ يج ا تا دا لاو مت اده لجع اس ‎en‏ ا وا تا ا تا ال لد ل لي ا ا ل تا ‎Soh.‏ ‎RR ER SUCRE J‏ يع ب وين وي يا ‎SME‏ اماي ليه لويم ا ااي ل يم او وي رام و و واي اوم وام يع اويل اماي لوي لويم وا إل بيع رم يه يم ليع يا وري ويم اميتي يي وي وام اي مايه اي ا ا ح ‎AAR SAAN SSAC‏ امك اميا مكاي ‎A AAAS CMA AANA AAAS Eh‏ لكا ‎SAA‏ لزيا ليت وتم اميا عكر قاو اوكا امي لاوم ‎AA HENRI‏ عياف اع او اال ليا 3 ‎0d dered Mn y veins avian ay sera van iad‏ ات ‎t EY TY INE NYY DI EN IN ENN EN BANANA Ua ay Tun‏ ‎EA A TT A Rn nT Tar I tar tar tna sin ia sn thn a andar nr rar aay‏ ل لل ‎AI‏ ‎LIT SR‏ ا ‎RIE TH URNS IIE Un Sh‏ ا اوت انم الت للق كا تاي اا ا : ‎Ls‏ ‎ay‏ جاه وا الع جاع ‎i a I eh nr Tr heh ph‏ لاع ‎shin dn in sh ld se el In eT I er‏ ام وا ‎La RIE In‏ ‎TB I SE‏ ا ‎PT BE‏ ا ا ا ا ‎LT TL DTD‏ ا يط لاطو ا ا 4 1 ‎RES HEME EE on N RR RR Th‏ ‎To N SN‏ ا ‎N N N RENN i‏ الات لم اام ‎Ee ve YL he A YR YY Lr YY SY MY Sw VE NE YE A VATA YA SE A NS‏ تمر ‎SEAR RR I I LT SD RR ESL Re BR TE Te Ll BL SL BL SL I Te bi DY‏ دا ان لأسا لد الا ‎nT Ln‏ الل ال ل ل ‎PREY‏ ‎ay TS Ea YE a YE NN AAR rE EY A AN Sd fh Tuan ty vad‏ ا وت ‎a‏ جا يم ‎Ta A Ia‏ ا و ‎ut SEY rE rn TE yr‏ ‎A a CA Sl A Le RA rE Le A RR Rr A TR RAL TAT A Lr ane DR he hy Sr Ley‏ اط ‎been k EI EE EE TT ET ET TE‏ ‎En hp i a a nan nin an iy‏ ‎LE RE NE DR I Nn En TT DE nT SD ID ET EA a ry‏ لي ا قا ‎NI‏ ‎owned EIDE EE I Dh hn‏ ‎he a a aE‏ ‎re en‏ ل ‎coven ey FEE ET nn‏ ‎N‏ 9 1 ; ‎to ¥ Ys Ye Yo ty £0 al CET‏ .3 &
    - x wg ‏شك‎ ‏لا‎ - Yo, ‏مخطط متعدد المكونات‎ ‏ا ا ا ل و ووو و‎ AT ‏ا ا 3 ا لال ا و ا ل : : ا م اللي ام ف لت ل‎ Sn ‏ا ا‎ RR 3 ‏ا‎ ‎8 ET ‏ا اام اق جو‎ FOTOS ‏مجر راع اي‎ pe 1 : 8 nn RR wr ‏مشا‎ ne 3 ed ne Sr ee Sr 20 8 ar nbn : : : : 3 LS RRA AA Sy SAREAREE SL RR SE REA SLR RE La ‏م ا امس ا‎ i ‏لا لس ا ا‎ ESE ee TTY INET] oe : 8 : RE nas ‏لاي ياي‎ AN ‏ااا لوي‎ oN ENE: SP SN IR A Pee Os ‏يا لا‎ i nen EI ohn en ; : ne : ‏ا‎ ‎RSE ‏الس ا لح‎ wre RTE ‏جا ل ا ل ا ا‎ hae : i IRE FOE ER RE EE ‏ل‎ ER I Ee ‏حت لح لت‎ ER ERR SLE 3 2 ‏ل ا ا يلح‎ A Lenn ev ELAR eT BEERS REE IRE SE ‏ب ا ا ال ا ا لات ات ال‎ 0 TU TTT Nd ١ pay wl Se WF a ‏الو اس ل‎ HR Cae RE DIARRA SN i : ‏الحم ا ا : 8 8 ال اي : 8 اللاي ا الت كي .ااا‎ FREE BE be ‏محا‎ pega SEE EE EEE EE rs yr See TT eT rvs nde a we Er ‏الح و‎ de nn ‏“ل‎ Sea TIT i = Rudi oe ‏ارين‎ ey an ERE Ep CREE ‏اه‎ ‏ل الت ا ا ا‎ LL TS I TT eet Ne TG NRE 8 8 FON EG ER I SE ‏د‎ a ‏ل ا ل ا ل مل لا مستا ب ال تا د ع ال‎ EY CORTON TRE : ‏اتات ا ل لا‎ RRS TN ‏لج لل ا ال‎ 8 Ne RENO JRE SALES REN CHEERY a ‏ا ال ل 7 اال اا أ الام نات الما ل ا‎ 4 Fr cE EE RT Ee i £38 : 1 SERN ‏اا‎ er i ity Wenn ‏ا ا ا‎ 3 SERENE IR Dn PLE ER a fn Lan SN ‏ل الا مه لجا‎ AL FTE Er I EE RR RE BS EE ESR ‏ا ا ل‎ PADI ER Tn LL Ln 1 eT RE hn ‏ا‎ ‏ا ا ل ل‎ i EE NG ‏الا ا اتاب‎ TNR ‏ال‎ ‎N FR Syd : Sonn Eg CE RET AA Ne ‏ااا‎ a i ree visor TT ‏ل‎ ire bse sh ses seb peer Rov ‏ا الس اام : : اا الك اك‎ ‏ااا‎ TRAE rl re ‏لع‎ rr rg SR rae ‏ا ا‎ ey ne ‏اا ل‎ SN : H ESN HR ERS i 5 : 2 ‏ا ا تا ا ع‎ nr ‏ا‎ ia 0 SEY ‏اع عب‎ wand ‏ل ا ا ال م‎ NL nnn ‏ادر للج لاي و‎ nn ‏ا‎ Rg Rae TE en a ‏ل‎ ay SOREN IT i Rg CNR BEE oN LER BR ‏م و ا را قا ا و‎ ‏ا‎ : ET I Yu : : a CI I I LE SE ‏ا‎ HCI AIRE CG ‏ب ; ا ا ا‎ : yd : JRE MA HE SHAE ‏معت‎ eR ‏عا مج‎ EER ESRB EL ISLES ER S01 SAREE SELEY ‏ع وج موا‎ asia eas : : ; 3 RE RE ER RSE EER SRL ER oN rn ENF nea SATIRE TAR OYE TRI TA sn ey thang ‏ب‎ CET 3 ES ARE RE HE EEE SHEE EH TREES TE LR nm nen To FA LAE LID ‏ات‎ ‎J SN A ‏اس‎ Ee EE fe ‏ا ا‎ ‏صصص ب‎ 0 ; 5 3 ‏صن و ف‎ a Ye ro £o £2 Vos a9 EE x = 8 ‏مخطط متعدد المكونات‎ اموي جحت مدا ااا وار لاوما جا اماما ايا ااا اماه ااا حم لاما لاما لاما مقا ااا ااا ااا مالالا لاا لاا ا ‎H‏ : : 1 : : : 1 بن مرك ‎aL : : : 1‏ : : 1 ‎AB, ent : " : ol : So TN Tr 0 HE i ToT 1‏ ‎EN : : Pood‏ 0 : 1 ‎Bees enon Resin so ei te gE SN ee eh‏ ‎fe \ AN E : H‏ : ل لو توي وال ‎Fe : 3 H‏ ال : ‎H‏ ‏لل ‎I Sn Bs ee‏ ا ‎Ca $reg‏ 1 1 : الل ارك ا الم 1 ‎oven‏ و نهر ‎TOA SV BN 1 1 :‏ ا الا 1 : ا رح سس د د ا ل ‎H‏ 1 اي ‎a TS Re‏ : ~ م الى ام 1 ا وا 1 : اا ا جا نالا ا : ]ا نيء فل ‎SS naman, iad H‏ ل : 1 ‎H‏ امج : ‎Sod “a‏ : 1 اا لص ا جد ا لا ا ييا ا ري ‎LEENA‏ يت الأ ميل اليه م ‎JOY JPR‏ ان قل ا ةا يي لقم ‎FE‏ ‎ae SRNR fame 4 1‏ : م ا م : 1 ‎KE eq‏ 1 : امم : : ا 3 : ‎AEA‏ 2 ا ل ‎ee i eh‏ 11111111 1 لد : ب ‎i : Soda d‏ ‎E vd : Nn H‏ - ‎H‏ الاح : : م م : 0 ‎bebe nb‏ كاعر ‎E wd 8 : : : < 1‏ 1 ‎Ho wl Ce “i i RIS a Don‏ لا ‎Cee B fo‏ < . 3 ‎Cen ee . IE EN . 0 1‏ : ا ا حت يا ا يع يات اتيم ‎i se‏ ‎$d : : 1‏ 0 : ‎j ; ;‏ : 8 0 ; اا ‎i ; 0 $F : ; : ; :‏ ا د لت اننا ناد ال ا ا نار لاا ات ال ل ا ال ل د ‎i H‏ 1 ‎f : : : 1‏ £0 3 8 1 ‎i H‏ : : 8 : : لجار مط ا 3 . ‎IB sd on‏ . 3 مي ‎Soo‏ 3 1 ب ‎bos‏ ‎H fod : : ;‏ : 1 ‎H‏ : : : : ب 2 0 : 3 ‎a) + - B N . 8 :‏ ‎qe en} : i id : : : H‏ 6 20,£ ‎H 0 0 H : : : H‏ 1 : : 0 0 1 ‎on}‏ . ام ا ب اا ب : : : ‎edd‏ 8 ٍ لس ا : : : : + ا : 1 ‎FI SE} : : : i‏ : 1 ب ‎SPY‏ ص ايبيل تيبي التتويي ‎TERA RRR‏ ‎H‏ : : 0 ا : ‎oh : : : : H‏ 7 ا : 1 1 : : : 1 م : 1 ‎NI 0 1 : : 1‏ : ‎INI‏ ل ' ' _إ ا م ‎Ise‏ ا ا مات لت ست سه لماه ما ل جا ححا لح الح ل ا ‎I I mm TITY 1‏ ب > 1 1 1 3 با 1 1 ‎i‏ ال ‎AA‏ تن م ص ل ‎Lf ffm A AAA A‏ ص ب 1 سس و ل و ليا اا الا ا ‎Se SEE EER SII‏ ل ‎ama |‏ المي ا ! ‎F 3 : : : H‏ 8 : 1 ‎EEE EET P EHEC EERE EEE EHC EEE SO |‏ تك ‎UU UU.‏ ب" : 1 ‎ou‏ ب : بح : : > : ا اكع ‎NM EEN‏ هرا 2% اعم ‎Y Fen‏ ‎H‏ : : : : 5 9 8 1 1 : ا 1 لام ‎mn‏ امتح دح مح مح يي مه جو د و حو وه ت يوي كه جع هه هه جع هه عه عه هه عه ل خخ عه جع ده عه 44 ‎evar‏ كح ييه ل جك تج 0% اتات لاما اي ‎٠‏ ‏| امتح دحج : 8 5 1 ‎dL is 1‏ تكبا ل جا ا ‎ns A‏ عي ‎Upmov‏ ‎١ 1 : : : : : 1‏ ‎H‏ : : : : : 1 ‎A 1 : : : 2 : 1‏ ‎TIT TR‏ لير اليك الماح بلي حي التي ل ار اليه ‎LGR TL‏ ل ا ‎H‏ : : : : 1 ‎H‏ : 1 : 1 1 : : : 1 ‎H‏ 2 :0 : 3 1 1
    ‎SU.‏ © Ye Ta ha ie 2 Ta
    ِِ شكلم مخطط متعدد المكونات ا ا لأ ا ات ااه اواج ا 1# اا ا ا ا ا ات تا ا جح ا زا و ايع وال كل ب اي ب" 2 ا : ‎Vena wan end i.‏ ‎Bh‏ : اا 0 . . . ‎Yo @ a eyes nd‏ ال سس ا ‎SUEUR SR REPRO Ce RUT‏ : : . : . نا ار ‎SR‏ ‎Fauve § :‏ ‎RAF : : - :‏ ضيح ‎Kyr wirgrmi a . . ER ITT Ce Cn Ce . I‏ ‎Woe apm ex § . . :‏ 3 ب : ب ب . ‎FPN SP‏ ‎cd‏ 3 . : ب : نا عي فيك : : : : : : بر لوه ‎I NS :‏ ; , , ‎Soe ne en od . . : . : . :‏ ‎Cl rer on‏ ‎AA AA AA A AAAS A AAA AAS AAA AAS ARA RASA‏ لل ل : 8 ‎el.‏ ‏ليع ع ع ع ع ع ا ا ا ل ‎١‏ : بجر م حك ماك الح ل رات ‎NNN‏ امه لجرو ا ا ا دود تا يت اا لا تا ل ‎ens‏ ا : : 0 0 كان ‎Tew‏ ‏ااا ‎J‏ ‏دي ‎Ya Ya ou £ x‏ 0
    ص اج * 1 عن مخطط متعدد المكونات
    " ‏لويد‎ Im, Teme ‏وا جك‎ 111111011110110 1 1 ‏دقاو ار‎ ِ : 1 : : : H . : : i VS ares do wii 8 ee ld tt ttt ttt eS Nitti tev teste nyse sed ‏ينفكا‎ LI PO ‏بس‎ HA i.
    Ra ee = J at Le od : : : i Va ®nege cs ‏لكان اا ل ا‎ SERCH FR FE Cries BS RRC EIN i ea 4 ‏ل ات ااا ا لات‎ iim ‏م حت ممعي ات‎ ee EERIE NC ‏ل ليو‎ ‏مس ل تا : دن مد يي : 2 1 تحني‎ 1 JEAN JOUR EPRI ONO 3 de JET ik UU RR PUT end ; : : : { : ky SL 8 aay ‏وص‎ ee ‏ل‎ RST A est ROTTEN. : : ‏الما الا ا‎ : 8 : 5 i ‏[المال تردعية‎ SR JR en Ra ‏روج‎ Eye ‏ا ريت وك كا‎ ed : 3 H : : i : : : i Aaa one Sn bie st En De a es Ee be nt ed : : 1 i 0 1 : i ELE TSE BLE SRE TU RR REO 1 ‏ااا‎ 111114444111111 1 ‏ل‎ 0 2 ‏م ممم م‎ 2 tt ‏ل‎ iin ‏ل سسا‎ ‏وا الور سوم بح ااا ااا 111 لاا رن اا لأا الا ال اا‎ : 1 H : : i : AAA AAA A AAAS A AAA AAA rs AAA A AANA ‏الم ا لس بج سس مس مي لاسا مد ال اا ا ل‎ = J EE SES —— SAC JOUVE Cy 1 ‏ا ا ِ : 0 . : . : . . نعلي انق‎ i R N 5 v 0: 0: 1 + - iit ll A A ‏اا‎ el Alli iilli i és i a ‏ا عا‎ SIM A Va haga BE EE EE SSS ea SETTER : : H : : i ‏ا ا ا اا اه الوك قي‎ ee ‏الا اا ااا و ام را تال ع ا ا ممم و اص‎ 8 : : : H : N : H Fyne ‏وا‎ tn pd Es se DL ‏الل‎ Sn te HT 1 : : B i 1 : 8 i ET ETA FI send 1 : : H ‏ايلو عيمج‎ ee : IRI 0 ‏ا‎ TT . hae ee ee ee ee ed H : i : : i WBA ‏ا ااا يا ال لا لاعتو ع‎ i ee i be ‏ا‎ ‎: : : ¢ : 1 i » EEE EE ‏كا ونوا‎ Fide Tn en ‏اتيم ولام‎ Er 3 re ce re RENCE [RANA wd 1 : : 1 H : : i a 8 ‏ا‎ H Tafa pyr on ET ‏املع لع لفت‎
    ب م و ‎LI ¥ x‏ «
    — 5 7- شكل 15 مشطط متعدد المكونات . : ا ‎RT‏ ا ‎EE : ez in en ْ: ee be‏ . اجا تايا جيه كم ‎es‏ لاا ال اعم ‎Vi vem‏ ——-——- ا ‎TFN Pe PE I: = oh EE PPP PES SPIN in Ie‏ 1 ا لما ‎AP SP‏ ال ا اي اط ايا معاي ‎te le SPSS Wo‏ اق هه ا ‎Bown wan fee Ei‏ ‎Pm ls 3 :‏ يت الي ‎Ria syie sd‏ ‎i od‏ ص ‎He ee ee a‏ ا الل ال ‎RO‏ ا ادا يلار 0 : : : ا 0 : حم م ءا وام ليع ام و يح عي ‎Te‏ ا لما جا كط حي صلل« لل ل + ‎FUE‏ الع لماك م يي كيم قي وح ميم م افيه باقلا ‎Tox‏ با مج يو ب و *
    شكل حب َِ مخطط متعدد المكونات ‎CE RE ee i a Di a a‏ & ُو ا ا ل ا ‎Re SE EE‏ ا ا ا ا : ‎Bt‏ َ ب 1 1 ‎Bs i‏ الي ‎HE‏ 0 :1 ‎SSE RO 2 eT TIT‏ ‎EE A Mc‏ اا ‎IF i i‏ ‎sre Mp of EERE ES CE ET REE STEELERS SE St EH He EE EE‏ ‎ER A : nnn 1 : : A ue : : 0 © 3‏ ا 0 : 1 زر ع ‎TE‏ لا ا ‎SE EE I‏ ‎BD FA i : Lo |‏ ااا ‎EI‏ : 1 ‎gd : : : : : : : : i‏ بيه ; ‎Ha‏
    ‏.ات لل ٠(طصصلتا#دلللاظلا.5)/0ي4ي40يل7+٠اا2‏ ا0.ف+ل0>ف7+7++اضا2./ٍ ٍرر,]1اا3.ٍي+ألاطج|]اره”أأل+73الأ|أر7رااا١خجل-كل7لر/امغ‏ ةى0و#لظللاراجل_لاااهه507آ[ ‎Sr coveted‏ يام ‎YE‏ + ا اد ل 2 ا بلا لأس اج ‎TE‏ ا ل د مك وت م ا مام من ا مسد قا لح اش ‎UAE LR H‏ اب ‎NN TE IT TE‏ :881 ‎LY 8s : ّ B k 1 : 3‏ 3 ‎ch ٠ od‏ جا ا ‎A‏ عم لت الأ سي لا أ ‎Fe RE Cie‏ با الاق ‎id EE SRE‏ ‎RAE : AE 8 : : : 8 :‏ ‎wild 8 WS : : : : i‏ ‎A RC ED I TE I CE‏ # جوع ل ل ل ا ل ا ‎Wout‏ ‏يي ‏حخمبتتكككلاوأكأرؤقااوو وا ا ااا ااا 5 وأا ‎Ta‏ ا + ‎ia Ye Ya ; a $s gs‏ و
    . 3 ‏ب ب‎ 8 ‏مت § ل ا‎ 0 gaa y ‏اب نحت‎ 3 AR FOS SY Ed FES 10: 1 1 0: 0 8 Pod : ‏تددم ل ا‎ ‏لاسا ا + 1 3 5 01 1 ؟‎ RTT ior H ESET SE SU fed a ‏الا ل م 20:0 ؟‎ a ‏ا ا مسا اس اا ا اللا ااا‎ ‏؟‎ 4: : 0 Fri REN EN RN ‏م‎ NE 0 Ra 2:7 0: 7 TFTA ‏ا‎ IRN dnd ‏؟ 21 ل‎ 5 FEE SU hE of frond oid 0: 1 5 ‏ل ا‎ SRY FEE i tod ‏ل ل‎ ‏ا‎ A forded 1 ‏؟ و الل امسا‎ 01 3d 1 ‏الحا لح اا‎ FA Frond J ond Jeordindinidende 1 0: ‏انا‎ ES RY CARTE AE TE CE sed PER ON 1 ‏د © ات اتات امام‎ Ng SEN SA vo > ١ ‏اس لأ ااا‎ NERA © FEL 8 ‏ا ا ات ا ا‎ HRT SE ERATE HI LIE ois dr kd HERE IEIE SIE SE OF Lodi BA a [AE I I SRR TE TEI TUR 0 Nod * ‏اي‎ Ped NEE HE ‏ل‎ FERN FEE 1 4 od EI ‏سا‎ RN ‏اس ا‎ ‏ال 1 تم ايه ا د ا وت‎ Ed ‏لاا شي ا‎ HRA Se ES AE ‏و‎ AIRINGS PASI 1: SE SU ‏لا ا"‎ :0 + FE EE : ERIN TE ‏ا 7 7 م‎ NEE Coa 0 0 ‏الك ا‎ MN 3 HN x 8 Ra EE A = GEA ES LEER em ‏ار ا لا ااا ا‎ 0 0007 i 1 ‏ا ل الاي ااا اا‎ pr LN TR stdin di bay : 0 ‏ساد‎ | or RE AS 2 od 8 Fs 1 EX ‏ال‎ REI peed EH ©“ ‏؟:‎ + ed : JT SA ‏مال اللي ل 1م الخ ااي‎ ot FEE SR RA ‏ا اح ااا ااا‎ ARAN ‏ل‎ EAN SHY ‏0ن‎ | : (RET x TETTTTR ‏وري كم ال اخ ل اكلام 5 : اتلك‎ ANY OORT ‏ا‎ EL: Sasa iRY EEN 1 1 ad AIA RS BOR BI FA ER EA ‏ل‎ 1: £8 siding fii SURE 0 RE RE 8 88 ‏ا ا ال الا اا ا الشحا ا الل‎ : SRY TRG ‏مضا ا‎ 0 1 8 01 0 Ldn ‏ديا اليد ا‎ 7 1 ٍِْ ‏ا ا ماقا الت رقت‎ PROOF 1 8 ‏ا ات ا واي‎ i HE Nido TO x : ‏لجالج ا تح 8 : + الل‎ ae ١ TIE + 072 ‏ينا‎ alld ‏متت‎ ‏لوج << اي ا‎ Tar iy : +: ‏ل الح الححت تح ل‎ ran 3 N 3 Sd nd 1&8 PAUUUE IR ARR SEA 5 SE NE 8 LE ENCE. ‏دجوو ووو ل‎ 8 : Si 2 TY B POA NS : IE a) 5 ‏؟‎ NE ‏ا او م 3% اسلا‎ WEA AVN ‏ا الا ا‎ REE 1: ‏سا ا سلا لان الات اا * :0 : , 8 + الم ؟ ا 7 1 ؛‎ ‏ا وبا دين د د + :10 0 © ة : : ليج حي ماي ا د ل‎ SH 18 ‏ال ل م 1 1 ؟ ا ال ا تسا‎ SRA CUNT Ti TEI TRY ERE aE SE Sefredidfididiodani 2 CTR 018 3 4 YR BEET OI SN Soduddifidond ERS JE 7 EN ‏ال ا ا ا‎ Hy Frade i SIR ‏اال‎ UR TUR ¥ SRE 0007 PARE OY) N ‏لس ا لحلل‎ 1 ‏ا‎ : SR ER ‏الت 7 4 ؟ ل ؟ : ا كا‎ 3d IR ‏تنلات نيه‎ 5 3 : a 8 + by : : ‏احج درك ا‎ 3 3 N 3 t { : 1 a : ‏ل ا لاا‎ JE I 1 1 10: ‏الاي حالسل ل‎ 03 1 AAR 0 ; ‏ا“ ا ا ل ا اساسا‎ : 0: SEE SE ‏الا م‎ Rh fdas RRR AE ‏؟‎ ١ 0: 1 0: FRA ‏سمش‎ AI IEE CE 4 Eh ‏لا‎ ‎b IE waldo a 8 ‏الا ا سح لمح لحم حا جح‎ : i Pod RR ¥ | WE WHS I PE EEE ¥ Paoli a ‏ال‎ REY PR * Foor oR oY 3 ‏الاي‎ aadtind HERE 005 ERE J ‏ا لم لم تت ا : 3 ؟‎ FEI ‏وا‎ SR BE A A a a FO 0 ‏ال ل‎ ٍ ET A in k PEERY TEE ‏؟‎ 0: 1 05 $01 at pe Pe Fr Fe iN SETTERS ARIX ASE : 1 ‏م‎ SR ‏ا ل ات الحا‎ EY CTT ‏أ‎ 1 LOLS ‏ل‎ LE EER A EL SL ed TT RENE 1 30 A CH SAE J JO § vod PR SEE PLR ‏ايح‎ BER ‏ا ل ا اا 3 ا تي‎ TTT IE I FINRA 8 Fada EE ‏سس 0 أ 7% جد‎ ‏ا ا ا ا‎ A FANE SI To FEE TE SPREE To + Sete AE Fo Ser Sad FEE 4 Pod 8 EN 5 ‏#حجية‎ 33 NER wr 8 3 SERIE SNe] ‏؟‎ ١ + HI ‏ات اا اا‎ NE ‏ا ل ا + 1 1 : 1 للا‎ i 3 a Sry yb ‏الاي الح ل ان‎ FE RH IIE dif Eig ‏ال‎ TERE WET 3 0: 5 SE BR i EIEN RES es ‏لا‎ NLL FRASIER 8 ‏؟ + :0 :0 ؟ لحن كتحت لحن أ‎ 1 IER: VCORE SE SE J RFE WH CE THRE JE SI IRE NE TE ROU UR UE OU JOU SO CR NE PETTY IESE NE ESR TS A {SIR 1 1 1 ‏الا اا‎ al ‏ا‎ ‏امسا‎ HERE IE 1 4 ‏م‎ A ‏ادك دما حا احا‎ PREY HE SE RR CoE ‏؟‎ 0! SE ‏ا‎ LE ERP SPRL BERS Rane ‏ا | 2 ل‎ i 1 ‏ض‎ ‎ERI SS SE SE ‏ا ل‎ REE HERE 8 ‏الس 8 8 لاا اتا‎ 8 0 ‏ا ان ا د اا اد اا ا‎ RE BY 1S [RRR SRE E ‏ا ا لسلا‎ FERRER >) ‏؟‎ SE 4 ‏لضام‎ 1-08 pei Re EE SE SEE EE : 10: ‏ل ا ؟ ؟: ؟ ا حت ل + 0 ؟‎ FR ‏لا ل اا لل لا‎ : SERS TTT EE BEA A ob 381 1 8 ‏م :0 ؟: اماك ل ااال‎ jE Lod ‏اا الات ا ا‎ Toad 1 1 A 07 ES FE ‏تست‎ Pedi oY : 1 a Frit 1 0: SR ‏رم : لبد سا ال ل‎ 1 EEE 0 ‏ل :ا‎ HEE 01 Sli YOY 3 ‏ار‎ a i Novae Ed | a HE 1 101 01 0 ‏الل :1 ضح : 1 1 لاا اد ا ل ا‎ od oy og ‏لاا ل : :0 : :0 ؟ الس ل ا‎ ْ: * ‏؟:‎ IE SE ‏ال ل ل ل‎ FREI 1 : 7: ‏الحا اي ا لد ل‎ : = Pepe HEE ‏ا‎ 104 I 3 ‏مق لا ا‎ FALL 8 7 8 ‏؟ ؟ جحي د ا لاد‎ : + 1 TE RENTON Bond Eo Ci 0 ‏الس 3 ا ا :0 0:1 1 | :1 اح‎ TTT INN -ّ ‏ساسا ض‎ RENNER ‏ا‎ HE ‏جد ا ل‎ XE 111 1 A AIR SIE SUSU Se FREE ‏ا‎ dindad ‏ااا‎ ‎dd EC ‏سا‎ FE SE 074 5 VoL SE ‏ال ات‎ FREE + 877 : Poot A NEN: SE OE ‏؟‎ 101 1 5 HEE: ‏ااا ا ل ا لا‎ ‏يات مض‎ ENE. ‏الحا ع لححد‎ : : SE : : ‏الح ا‎ ‏ام لت‎ Sh Rar i HE ER TE Pas TTI REAR! 1 ‏ل ل د ل اس سا‎ pe I ‏الل‎ IR Sk. ‏ا‎ ‎FE NEE 1 ‏المج يت ال لح ل‎ EE ‏ححا ا ا : 0 + : ؟‎ fad 5 ‏اس سا‎ ETT EEE HEE 7 ‏ا‎ TET : + 7 ‏ا ا ا ينما‎ FETE NE 0 ‏؟‎ feof dedi PARE FE 0 ‏؛ ؟ ؟ مدا ا ا‎ 1 tor fod TON Ne I EE 5" 1 ‏الس‎ FT SE SE SE ‏ا‎ Ty EH ‏ل مب‎ 07 iad ‏ا لد‎ A PEE 11 HE ‏اا اا سا ا‎ 7 : 0 + RY BS - N 3 SRELEL TEENY 3 4 < B tl ‏سالك لزاع 4 3 ¥ : ب‎ 8 > H 8 : YH ١ 1 1 SE ‏ا ا ا‎ TEI. ‏لد ا‎ EE bE : 0: + ‏ا و سلس اه‎ SE JER ‏ال‎ 5 TE EE 4 :: 0 4 ‏اج الا ا ا ا‎ EEE ‏الما الا‎ [IR 1 1 0: HER SR ‏جد ل ا‎ Tv EE ‏ا : لي !ا د الا ا‎ 000085 SIE. EEE ‏م‎ Tory yg ‏ا‎ 1 (I: TORE sas deed yor ‏مسا ا اساسا‎ TERY HE TI 004 4 ‏الايد د للا ا‎ HEE TT : : ١ ‏ا‎ 8 3 : H 8 by +: : 5 : 0: ‏اك بطي جد ها‎ oy I by BN 5 5 by .“ 3 TTT REE Tenvdannd Bow omitted SE BE I RE SE FIER SE TE SE ‏؟] ؛:‎ TE SUUE SUC SU FE 1 : ‏وا‎ EEE Foodie N 0 Ba ‏اه‎ N 3 MN 3 EH y 3 3 MN x N ‏بلا ا ججح ا‎ Hl Mi 5 x RRS I t N i ender : : EY * oR od 0: BE 74 01 ‏جح ل ا‎ ae ‏؟‎ SI ‏ل 3 :18 + ؛‎ A ‏؟: ؟: 0 الا ا سا ا‎ 0! Ed ‏تا‎ TET iodo ‏؟‎ 7+ 1 yd RUE CHE ST OY ‏؟‎ 0: 0: + voy od Poon RE RIE I PIR EE 3 ا م 00 ‎FEES * ١‏ لح ا ‎NL SC‏ ؟ ؟ ‎ore 3 FE‏ اليل ‎es‏ اد ةا ‎Sa elaine 3‏ ا ‎SE TSR‏ 3 008 الا لح اا ا ا م :7 04 0 ؟ ‎PEE‏ ا ‎A‏ لاا الفا ‎Lod FARA A‏ 6 :85+ 00:1: لس ‎ht a‏ اس ‎EC‏ 0 ل ‎EEN‏ ‎RE‏ لم ‎FI SON A A‏ ف 1 ‎FIRE TE SE SE SU FITC SCO SS FEES TE ELE‏ ‎TTT i Po EEE: A DIS A SIA A FI SE SE‏ : اساسا ل 101 1 ؟ ‎Afi‏ ا ‎PEE SE SU HEE] Pod‏ لست ‎feted BB‏ ‎SERIE Li Loli‏ 2 0 الاق اق الا ا 07 ؟ ‎[ORE I‏ الست ‎Svosrooaforad‏ ~ : ا الج د د : 8 ‎HE 1 EX‏ لاا ةا ‎FREE FERRE RAEI‏ + 80 لمجي ‎DTT COE 1 © 8074 Rod RES A Se SA A‏ - ااا ‎A Pio oid‏ دل مسال ااا ‎HER LE EE‏ سا ‎SI‏ ساسا 08 > ا ا ‎SURV: VERE NS SES J: FE SAS yo By finda‏ ض م" ‎TTT‏ الخ ‎HI DEI SOE J RNS‏ ف 04 ‎ST‏ : المي ل ا ا ا ع ا ‎pada voF or FE © 1 H 8 LET SR GER‏ ؟ ‎PE‏ + :؟: ‎i‏ + ؟ ؟ ‎EA a) HE SE‏ دج ‎TTT IEE‏ سإسلساسا سيم ‎RAEI 0 0: + HE SS "‏ ال ل 01 01 ؟: !0 ‎FEE SE‏ ات ساسا ا ات ا ‎POLE 181 : NE‏ امنا ا أ ااام + 0:1 1 1 ‎TT CRUE SE I‏ ض 0 ا الس م ا جد د ا 8 1010 1 ؟ 034 1 1 وج سا ‎EE‏ ل لت لاد ايت لحا ‎A LER‏ لكا اميا اليا اا حي حي ‎HEE 01 4 FR‏ ‎HEE 5008‏ ا ‎EE‏ ا ا ا ‎SEE 01 LR‏ امي يي ‎re REE‏ ب" ا 1 1 ‎BRD‏ 8 8 الح ااا 0 م ل 1 ةساس سات ‎EERIE EE 8 HER RIE‏ امد ل ا ا ‎FEES + + REE‏ الاح لال ‎SE‏ لاا الا ‎BE‏ ‏= سا الماك 1-8 لف ‎od‏ 01003 ؟ الل ا ا ‎o3 1d‏ :ا ‎ERI‏ ني بي ‎FR FIR 0:‏ الت ةا ا ؛: ؟ ؟ : ‎FIRE‏ الح ا :0 00؟: ؟ ‎FE‏ ¥ ‎Ra 0 8 3 pt 5 : i i‏ د لمحت ‎Ky HN x . a il v x‏ الحا لجح ‎HN N v 2 NANA‏ 0 "ع ا | 8 ‎EIR SE 0 7 [I EL RENE J NS.‏ لحي مح اج 0 ب ‎od 133% : 1 01 4 SINR SN SE‏ ال ‎J‏ :1 1 ؟ ‎NEE A‏ دي د ا اد ا ا ا ا ‎FINES + SEES‏ الح م ل ل ساسا سيسات سسا ‎Sa [EEE :‏ ا اج ‎dtd EE EEE Toi Pod oad‏ م ‎HEE‏ لس سات لاسا ‎SE SE 1 HE‏ اط لاا ا ات انس م ‎Eh SE POE A I NEE‏ ا 7 ‎[EEE‏ 0 ساك يساس سا ست ام ‎REE 1 + NER‏ ا ا ا ؛] 1 ؛ ؟ : ‎SH REE‏ جد اع ا ‎wd boil a‏ 5 03 :0 :0 ل ا ا ‎oes‏ لاا اتا 007 ؟ ‎Poa EE FE CR‏ 01 11 11 ايا ا لع ع ع ل ل ل 7 ؛ 1:1 1 ؟ ‎J REE‏ سلساس ماما ل امم اماه ماد امج ‎FATTY‏ لذ لاا ا 7 0 :00 ؟: ‎FEE SE 5 0 SRG: J i a de‏ امد دا ند تمي عم ل الات ات § ‎ERIE TIE SE RE HE‏ : ايض مي ‎NE Seeded rt‏ 07 ل 1 ض | ‎fsa A‏ ا ا ‎ita‏ ممص حي ‎oor bY 0:0: NE b SSE PR SE Fesriresetosd 0 - : : ; |‏ ض ‎es To‏ سسا ا السام سأ ‎HI‏ ‏= + مما الف ‎Joo od 3 Da Se SEL SE‏ ‎ERIN |‏ الست ا ا ‎Ri‏ ‎A 3 FI »‏ لمن لامي اا الال لما ‎Wl as‏ ‎oo 0 : ,!‏ 3 1 سس مستا
    :. سم ‎A =‏ = | اد ؟ ‎by & gw‏ 2 ‎Tatu Fe {=C}‏ :
    LRP i «EG ‏السمكونات‎ pela Judas BE ‏ع جعت مج‎ a ‏مج جح جح ع‎ RE ‏ع‎ i Ete bE SEALER ‏ال ع ب بن‎ ٍ FO EEN on a ‏و ا‎ Te EL REEL i R 1: 1: 1: ‏وال ا‎ 1 we ‏م ا ا‎ a ra ab amar en, 1: ‏ب"‎ ‎: 8 : Lo : i a id : 1 5 ‏ا‎ : . 1 i SAR 8 9 ‏ا‎ . RE . . ‏م ب‎ 7 8 FN 6 ‏ا ا‎ : © : 6 1: © 2 © © © : ert good ; : iE : : : rnd FE : : ‏ارد ا‎ en HO ‏سس م‎ : 3 : : . i : : : FT en Te TN I ‏ا‎ ol . EE 0 . A . : H fF, Ne ‏ا 5 ل‎ : FE Codd Fa Ne ‏ب" الح ب 3 امنا‎ he 0 : : :
    8 . EE 3 dogg ‏اا اهل لان‎ Cae . 3 ‏ب اااي ذا الا لا اك‎ Lo . . od 8 ‏الل ا 1 ا‎ 1 : : ‏ال‎ EE, 3 ‏الست الم‎ TENGE RE LAN ) ; ~~ H i FE ‏الخ‎ - | ee ‏تمر ال الحا با ا سن تحجن لل ا الا‎ 8 ved ened! : wd ‏الاح .ان‎ Ey BEEN ‏الب دا‎ TRY ‏ال ا ا ا ري ا اا‎ : hol 0 HIRES SORE NE ‏اح أ‎ LE NT YR TR LN ‏الل‎ 1 1 1 1" 1 1 1 : iy Cd EN ‏الا ال‎ ee RIN ON ‏ال الا‎ : : ‏سان الس ل ل ل نجلا‎ Cor MEER Nc PR Sc SPS vt ‏ضري نات ل‎ BY AR A SS SS ‏يي يا‎ od ETI SO SIRI ‏ا ا ا‎ EIR ‏ال الي‎ SH REE SAN I ‏يا ات‎ RY AIR FA 06 LT ‏ا‎ FAI SE SER FLERE SE ETN SNE WEF SE SEE ‏اس ا ل ا‎ SCE EI H Sof ‏الامة كر اا‎ fF SNE won BRE hai Hi Lees 7 ١ : : Af INT ‏ا‎ Xo i ‏الا‎ JU UU J 4 Woon i WE PERS i RH FEE SA NS 5 Ry EEE A NEE 8 ‏ا ام اع‎ gi H SERENE eT Xd 8 “0 ‏ا 8 اي + + 8خ‎ i ih ji : SNE 7 oe? EY 3 : ‏اا‎ San ‏ماي‎ 5 3 : pre ad ‏ا 3 ان‎ TERE Fo ‏و لت ييه مي المي ييا الي‎ 8 Ee ey i LE Foe 2 1 : ‏ا‎ EE SIE : : LRT EA : SIRE . . . : ‏ل : ب اا‎ : Ha : : ‏تي ب ن م يي اليا الييية ا ال ليطي لمي ليم . . . 0 : م ل 0 الي ليا لي اللي ال اع‎ i: H vi iE > $i : H pe : ‏و‎ : v Tu § : 3 H : : ‏ب 17 : لدت يج‎ I PRN I I i 1 Pais I [ae N 1 Ih : Ia 17 hd I ol i Ia I i IR 8 17 ‏م‎ + I 11 ‏ل‎ be Sa sd HEE a a A A A ‏ل ا‎ A ‏ا ااا ا الا الال ا ل ا ال ا الا‎ ASS SR AAS AS SA AA SS AR SSAA ANA hy LI ‏رام‎ LES Yo La ‏وم‎ $a Tw Roy > 4
    ‎Jad‏ + أي = ا 3 تعلط متعيد المتونات ّ تتح تت عا لح متت حيتي ا وال ‎0H‏ واي ‎Ee‏ ‎CET ppv Rear Tae SE eA a as at a panna sa nas‏ ‎mim‏ ا 0 ‎FURST SE hn nny‏ ‎Po mn SN RR Aes SEER: TIES I ry‏ ‎i TI I I Cre TTR‏ ا لاا أ ارا ‎١١‏ ناا لان 1 ا وا اي ا وا لم اق ‎Yan as AE‏ ‎ROR A ad ei : i‏ لم ل ا لت ‎Es od‏ ل حب ا ا ‎at SSE‏ ا الا ا ص ‎PE pT‏ ‎Vo SAS A ES BEE A ET ed‏ 7 ا ع ‎EE‏ : : : : ا ‎FN OEE Rr‏ تكو ‎i‏ : ا ‎horns te‏ وه و الإو جد لو سا لس أ أ ‎Si Sears as pt aE cnt‏ ‎a i SS fm‏ ‎hades TT‏ 0 ‎NIUE megs SE i I nanny‏ ‎TTI fi ot NE‏ ا ‎TT‏ حو عم يع دم و جاجع معط عام ‎an‏ دي مو جرع ‎NNR ea‏ ‎I ne a re he pe RRR SLE ae‏ ا ‎EE EE a‏ ا ‎TIES 0 REE IIES REESE SELES Cs he EEE‏ ا ا ‎FT‏ ‎FIN TH A RY‏ ا ‎Sd PAL iE TT‏ الريك : الا ات ‎RT‏ ل ا 1 ‎ol ESS : hin Pe fe‏ م 1 ‎TT AEE‏ : ا ل ال تا ‎eee‏ ا اج اع ‎Poa‏ = ‎dt of‏ ل ‎ae‏ اق الل جا الاو ارت ات الا 0 ‎gE Ri EE er eT Te a TEE Te en TR‏ لير تي ‎oe FEAR‏ ا ا ال رت ‎RE oS LE ER cE‏ ‎ALTE NRT CA TT eT eee ed‏ ا ا وب ال م ل ‎a I‏ ل ا ‎PRN AF ASR TS‏ ‎RRR TN 3‏ الو ‎A‏ ااا : 7 : ‎a‏ ال ا ال ‎Co SRR‏ الا لاي ع ل ل ا ‎Ee‏ الل ليه تا وا حر ل ا ‎OEE Cl per ESL af en INET Rr pt TUE i wis‏ ا و ‎i a‏ ال ل ال هن ل نا لالد ا ل ال ل ا ‎iN IN A‏ ‎nn Ee EAN RT ONE EE Ne EEN SET a‏ لاد ‎BSAA‏ ‎NR TH RP SI‏ لتك ‎SUN‏ ل ‎BofA fax SHEET HD SN SOR JS NS rE‏ ‎TNs NCE:‏ ا ‎ees EG EE Foy EE‏ ا الا تت را ‎bora fide Ra‏ ; ا ‎HEE Hh) SS RE ee a CE‏ ‎Em NE SE ERE Re‏ ‎a REE RR EE 0‏ ل اا لي ل لا يي ا ل وا ا له يه ‎ol : Sen Li‏ ‎aun . eh LE on oo FN:‏ عي ‎rr‏ الوا مط ‎١ 3 ETI Sy ny TE‏ ‎re rn pe 8 :‏ مت ا ل ‎EEC ARE ACER EER LER SRD:‏ ‎SE EE‏ ل ل ل لت ل ل ا ‎EERE‏ ل ب ل م د ل ‎Vo : : EE RN Hi RE RE CE hr nn nal‏ ‎EE J SE SONU i RN Cm I‏ : : 0 ‎NO A : Cn II‏ ا ‎a : H‏ امعد ‎Ce PEL I TS Ets rire Ln Ee a‏ 1 ‎SME BRIS SRE RRO: nis‏ ال ‎Von RR SEER en TH‏ ‎ERE CT EE i ET i ToT I‏ ا ا ‎ki i ct LE TL LR‏ : { : فز ‎PR LX] x 1 ‘‏ 2 ‎Yo io 1‏ 2 ا ‎i EN 52 Na‏ £4 رين ‎٠‏
    — 8 0 — & ‏أ‎ Jed CT prabe, £T2 probe, es CT probe, CTprobe, GCzinA? GC porA7 unspecific probe, CT primers, CT primers, primers primers CT primers, CT DNA no DNA 865 , 8 ‏اله‎ i CT DNA ...____ Lo - ‏ااا‎ ‎Lo a
    Lo . ee = - a no ‏ا‎ A No ‏ا‎ ‏الا ال‎ yy ‏شكل‎
    CEA sake HbR ‏قي‎ i pene ee re ne ‏ص لم ال ل ل ل ا ل ل ل ب‎ eT TE EE FEO Es [ES Tod ar B ps ‏ا‎ Cd Pood an ci ‏يلي‎ Cee EN Ce Ho ‏ب‎ Ses ras ‏ب ع ف مم ترق‎ Cs ed i EE ~ a RN 2 N N N PR. ‏مسحت‎ nn ‏المج تي‎ ‏الا إْ‎ ْ: : CEE. eed he ei ‏ا‎ Rey ‏اتا لشن‎ EN ‏لد حت‎ [EES BE Da fra - Laue ‏جين لي ا‎ ESR AEEE EERE ‏الا‎ PEE I SS A THES RA EEO H FEO Sedona ‏ل‎ ces pr Tn PETES EPA PSA FS SHIRE SS Sh Sd ‏ال‎ 4 FEES REE] i AES Lorine mY LT - Co ‏ب‎ CLT CEL SA CL CT PU ‏ا‎ Sa ‏ا ار اا المت‎ I TT I I HEN SEEN . . . ‏ا ب‎ . CL ‏ا ا م ب" ا‎ . cn i ASAE : : : : : : 8 ‏ا‎ Bo ‏ليت ةيا ليمي مج وميه ال اه ا‎ OO ‏م ا اا ااي ليت اليا‎ 2 ‏ا اال‎ nn ne mn nn Ee a Wn Tn nn 3 ‏الماك ال‎ TE ‏اا ا ا الأ لاا ال اا‎ 1 ‏ا‎ 1 ‏بس 0 يي تيه يي ا تيا الاق كل اق ا‎ Cred ET TIE rr RB Cre eer eel a ‏ب‎ ‎H [ERE : : : : : : i ‏ا ل الا‎ hea be dr od i i Ap Bae on : FA 3 ae se EEN : i Se re RE : : mL Be ERE ‏مي ل لس ل‎ : 1 i 4 ‏ب" ب‎ . i Co - Ld 0 ‏شم ب‎ Co 0 Cn ‏ب‎ ee ee 0 od ppb ren HB Eh Cn ee en see gree ‏لا‎ 8 ١ ‏ملسلل لل لس سلسسسلللاللللللللللللللللللسل لسسال لل لللتلللصسلفلللفلس‎ ‏ب‎ ta A Ya ‏و‎ a fx is Fx ao Tr
    08
    شكل ‎١‏ أب
    مخطط متعيد النكونات : | جا ا ا ا ا ا ا ا ا ا ا : ا اا | ‎LS‏ ‏ا ‎a 8 EE‏ ا ا : تب : ا اا سي ‎CERN‏ : ‎B © 5 SPE Fa [EERE © © B © ie :‏ ; ‎ES : es moses‏ : : ل ا 5 : ‎i‏ ‎HE ER RN SST :‏ ل ا ا ا 8 ‎SETAE ow‏ : ‎ET i‏ 6 ا ا ‎EE RE‏ ا الي جح ل ا ان 1 ‎LR‏ ‏: ا ‎SEINE SPR‏ إٍْ ‎Sf SRE a 0 . 0 0 2 . 5 :‏ 1 : ل 1 ‎r CAEL ee 0 3 : ; LL‏ 38[ ‎CARNE ot 8 :‏ : : : 1 : : : ب ‎Sa RE‏ : ‎SR :‏ ; ‎aera i A 8 :‏ ‎wd‏ - و مي ل ا ا وق ا ‎Xo SRN == iE Sima CER‏ 3 & ‎LLB . :‏ ; 0 : 1 : ا لال ا 3 ار ا ‎SHON HURON‏ ا ‎BS OEE RRS‏ لق ‎EERE‏ ‎١ 5 BEE BE EE‏ ل ‎Reed BS : :‏ ‎PPP ol een)‏ : 1 ل 0 : ‎wea ¥ ERT i‏ ‎nl A‏ 0 : ا تن 0 ‎HEE‏ ‎sparen id . [EE : EE TPR STOPRPTINPS : FE : :‏ ‎a I. 4g #9 Ya [ae va fu HE Tv KR) Te‏
    — 8 3 — ٠١ ‏شكل؟‎ ‏مخطط متعدد المكونات‎ A غظ]ظئططا9مب7ا]©اوووواا<ة٠م٠7ا]7©ل©©؟7©ا77ا٠ا|٠7ا77©7#7ااوهااهاإ#لال7و”©7#داا77ؤف©#<ل”ات”ل©©‎ ]<م٠اهاا5##إ#للاواا#إالا#7ةا7ابلةمط]©©]ا777م7©7ولليلاببببل‎ ‏ا‎ Ne oe oe CC ‏مام فق م مات م‎ oa ic ti ‏ممم يا تا مي ميم ا‎ SE ‏ا ا لي كا‎ HE Mi rN 0 ‏ات بت‎ BOE ‏زمه ومس ويس‎ A Ee ‏لزنت‎ = Po LE : ‏ساد ءاس تعس‎ ar RR a X on ny 2 RVs 0 ‏ا اكات‎ EEL ERASER FS en Foams ‏ا اا ص ص‎ ‏ااا تتا ا ا‎ ‏ا‎ ed EE " ‏يي‎ i ode ‏إْ‎ . ni ra : : ‏إٍْ‎ : : : 1 3 ‏حك ل اله أ لس ل‎ Sb 2 ‏المح‎ + SEPT PC ‏لاا‎ ‎5 ١ ; HE BAEC ; ‏الك‎ dl Ee a ‏ادي بسي يحت ميض‎ i Cee 7 ‏ب‎ 3 5 bo : EERE EE = ‏ري‎ "0 : 3 SE - - . Tx oS ‏ا‎ SB ‏ماه - به‎ : A foo ‏ا لص‎ eg $e A TPE ; REAM IX ‏لاي يها 787 لح‎ PRE A 2 LG te? AONE SERN SE 37 + ‏الموج ووم‎ 0 ‏ا‎ od ‏ل سي‎ - UA I SO WN A RA ‏لل ا‎ CCIE CEC ST CES SE Poles i ‏إٍْ : إٍْ‎ : : ْ: .. ‏تمصلل للللللللللللللللللللللللللللللس الا‎ a ‏تر و‎ Yon Xo ‏وج‎ Lf) ‏تج ع‎ Aa 20 Te
    شكل ؟ أب مخطط ‎Sas‏ المكونات اي نح ا د + بوه ا ‎ERR ee‏ ل ااه ات ' ‏سي اليا ا ال‎ RR Rann [ENE een : 8 ‏ا‎ 3 : : : : : : : i eg 8 a EE EE I ‏الم‎ Cs A a ‏الا‎ { eee ‏ب ا ا انب‎ a Oren OR Es OS A Se OCs) 3 : ‏اليا ا الى ل‎ : : : : : : sg) Fier TT fo 8 : een Tra 2 FE 2 - ‏اي مي 5 ات‎ 2 2 2 A or Re i Caen win ni 5 ‏مي مو و ا‎ of Fo 0 0# ‏ل‎ 2 2 Ee FE i : {iad : : : : : إٍْ : ٍِ ‎١‏ : : : اله ا
    SE. => 0 ‏ب‎ : | gr : ' WS : : : : : cond [ie : : 2 LE ya fa ¥o re vo ES 2 ‏دخ‎ Bo +6
    لاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا ‎Sued Authority for intallentual Property‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § 8 ‎Ss o‏ + < م ‎SNE‏ اج > عي كي الج ‎TE I UN BE Ca‏ ‎a‏ ةا ‎ww‏ جيثة > ‎Ld Ed H Ed - 2 Ld‏ وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. ‎Ad‏ ‏صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ v=‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA516371023A 2013-10-30 2016-04-27 مسبار حمض نووي له رمز حامل للتألق مفرد مرتبط بسيتوسين داخلي للاستخدام في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة SA516371023B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1319180.4A GB201319180D0 (en) 2013-10-30 2013-10-30 Nucleic acid probe
PCT/GB2014/053238 WO2015063498A2 (en) 2013-10-30 2014-10-30 Nucleic acid probe

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA516371023B1 true SA516371023B1 (ar) 2021-01-12

Family

ID=49767396

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA516371023A SA516371023B1 (ar) 2013-10-30 2016-04-27 مسبار حمض نووي له رمز حامل للتألق مفرد مرتبط بسيتوسين داخلي للاستخدام في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة

Country Status (22)

Country Link
US (2) US20160273029A1 (ar)
EP (1) EP3063292B1 (ar)
JP (2) JP2016534722A (ar)
CN (2) CN121380380A (ar)
AU (2) AU2014343439A1 (ar)
CA (1) CA2926317C (ar)
CY (1) CY1124064T1 (ar)
DK (1) DK3063292T3 (ar)
ES (1) ES2773313T3 (ar)
GB (2) GB201319180D0 (ar)
HR (1) HRP20200264T1 (ar)
HU (1) HUE048579T2 (ar)
LT (1) LT3063292T (ar)
PL (1) PL3063292T3 (ar)
PT (1) PT3063292T (ar)
RS (1) RS59988B1 (ar)
RU (1) RU2668154C2 (ar)
SA (1) SA516371023B1 (ar)
SI (1) SI3063292T1 (ar)
SM (1) SMT202000176T1 (ar)
WO (1) WO2015063498A2 (ar)
ZA (1) ZA201602247B (ar)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201402591D0 (en) * 2014-02-14 2014-04-02 Memo Therapeutics Ag Method for recovering two or more genes, or gene products, encoding an immunoreceptor
KR101875662B1 (ko) * 2015-12-01 2018-08-02 에스디 바이오센서 주식회사 등온 핵산 증폭을 위한 리포터 염료, 퀀처가 포함되는 등온 기반 이중 기능성 올리고뉴클레오타이드 및 이를 이용한 핵산 증폭과 측정 방법
CA3008949A1 (en) * 2015-12-18 2017-06-22 Selfdiagnostics Deutschland Gmbh Method for the detection of a sexually transmitted infectious pathogen
CN110177887B (zh) * 2016-11-10 2024-10-29 达丽斯生物医学公司 用于扩增和检测沙眼衣原体的多核苷酸
CN110225919A (zh) * 2016-11-10 2019-09-10 达丽斯生物医学公司 用于扩增和检测淋病奈瑟氏菌的多核苷酸
CN107022645A (zh) * 2017-06-14 2017-08-08 苏州承美生物科技有限公司 检测泌尿生殖道病原体淋球菌的分子信标探针及试剂盒
US10450616B1 (en) 2018-05-09 2019-10-22 Talis Biomedical Corporation Polynucleotides for the amplification and detection of Chlamydia trachomatis
KR102705173B1 (ko) * 2018-11-30 2024-09-12 삼성디스플레이 주식회사 표시패널 및 이를 포함하는 전자장치
US10954572B2 (en) * 2019-07-25 2021-03-23 Talis Biomedical Corporation Polynucleotides for the amplification and detection of Neisseria gonorrhoeae
US11891662B2 (en) 2019-12-02 2024-02-06 Talis Biomedical Corporation Polynucleotides for amplification and detection of human beta actin
US11047007B1 (en) 2020-03-23 2021-06-29 Talis Biomedical Corporation Polynucleotides for amplification and detection of SARS-CoV-2
PL435634A1 (pl) * 2020-10-09 2022-04-11 Genomtec Spółka Akcyjna Zestaw starterów, skład reagentów oraz metoda wykrywania bakterii atypowych
PL437280A1 (pl) * 2021-03-12 2022-09-19 Genomtec Spółka Akcyjna Zestaw starterów do powielania, sposób wykrywania infekcji bakteryjnej przenoszonej drogą płciową oraz zestaw do wykrywania infekcji
CN114182031A (zh) * 2021-12-22 2022-03-15 江苏猎阵生物科技有限公司 一种核酸探针及其应用
GB2620948A (en) * 2022-07-26 2024-01-31 Mast Group Ltd Method and kit

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69232161T2 (de) * 1991-05-22 2002-05-16 Dade Behring Marburg Gmbh Bestimmungsmethoden unter Verwendung von induzierter Lumineszenz
WO2000079009A2 (en) 1999-06-22 2000-12-28 Invitrogen Corporation Improved primers and methods for the detection and discrimination of nucleic acids
US7998673B2 (en) 2000-03-29 2011-08-16 Lgc Limited Hybridisation beacon and method of rapid sequence detection and discrimination
CA2383939C (en) * 2000-06-27 2009-12-01 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Novel nucleic acid probes, method for determining nucleic acids by using the probes, and method for analyzing data obtained by the method
WO2002014555A2 (en) * 2000-08-11 2002-02-21 University Of Utah Research Foundation Single-labeled oligonucleotide probes
GB0103424D0 (en) 2001-02-12 2001-03-28 Chiron Spa Gonococcus proteins
US6960436B2 (en) 2002-02-06 2005-11-01 Epigenomics Ag Quantitative methylation detection in DNA samples
JP2004261017A (ja) 2003-02-27 2004-09-24 Arkray Inc クラミジア・トラコマティスの検出方法およびそのためのキット
US20080032413A1 (en) 2004-04-12 2008-02-07 Byeang-Hyean Kim Oligonucleotide For Detecting Target Dna Or Rna
GB0514889D0 (en) 2005-07-20 2005-08-24 Lgc Ltd Oligonucleotides
JP2007275006A (ja) 2006-04-10 2007-10-25 Hitachi High-Technologies Corp 核酸検出用プローブ作製法
JP5313157B2 (ja) * 2007-10-19 2013-10-09 栄研化学株式会社 核酸増幅法、それに用いる試薬及び試薬キット
WO2009108693A2 (en) * 2008-02-25 2009-09-03 The Government Of The United States Of America , As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services, Composition and methods for rapid detection of hiv by loop- mediated isothermal amplification (lamp)
JP5588970B2 (ja) * 2008-05-27 2014-09-10 ダコ・デンマーク・エー／エス ハイブリダイゼーション組成物及び方法
CN102076849A (zh) * 2008-12-16 2011-05-25 爱科来株式会社 核酸扩增的对照的检测方法及其用途
US20110020813A1 (en) * 2009-05-29 2011-01-27 Phthisis Diagnostics Llc Advanced pathogen detection and screening
JP5859274B2 (ja) * 2010-10-29 2016-02-10 アークレイ株式会社 Ｅｇｆｒ遺伝子の多型検出用プローブ、増幅用プライマーおよびその用途
JP2013074888A (ja) * 2011-09-15 2013-04-25 Arkray Inc ＩＬ２８Ｂ（ｒｓ８０９９９１７）とＩＴＰＡ（ｒｓ１１２７３５４）の変異を検出する方法
JP2013081450A (ja) * 2011-09-27 2013-05-09 Arkray Inc 多型検出用プローブ、多型検出方法、薬効判定方法及び多型検出用試薬キット
US10876160B2 (en) * 2011-10-31 2020-12-29 Eiken Kagaku Kabushiki Kaisha Method for detecting target nucleic acid
US9121051B2 (en) * 2011-10-31 2015-09-01 Arkray, Inc. Method of determining the abundance of a target nucleotide sequence of a gene of interest
JP6153758B2 (ja) * 2012-04-20 2017-06-28 アークレイ株式会社 多型検出用プローブ、多型検出方法、薬効判定方法及び多型検出用キット
CN102703433B (zh) * 2012-06-12 2014-10-08 中国水产科学研究院黄海水产研究所 基于多孔材料的核酸等温扩增试剂的保存方法及试剂
US9909164B2 (en) * 2012-07-25 2018-03-06 Sony Corporation Method for preparing sample for nucleic acid amplification reaction and preparation device of sample for nucleic acid amplification reaction
JP2014093996A (ja) * 2012-11-12 2014-05-22 Sony Corp 核酸等温増幅方法

Also Published As

Publication number Publication date
CA2926317A1 (en) 2015-05-07
RS59988B1 (sr) 2020-03-31
ZA201602247B (en) 2022-05-25
HUE048579T2 (hu) 2020-07-28
WO2015063498A2 (en) 2015-05-07
AU2020294316B2 (en) 2023-02-02
JP2019216722A (ja) 2019-12-26
SMT202000176T1 (it) 2020-05-08
HRP20200264T1 (hr) 2020-05-29
ES2773313T3 (es) 2020-07-10
CN121380380A (zh) 2026-01-23
PT3063292T (pt) 2020-02-14
RU2016112354A (ru) 2017-12-01
EP3063292B1 (en) 2019-11-20
DK3063292T3 (da) 2020-02-24
SI3063292T1 (sl) 2020-03-31
JP2016534722A (ja) 2016-11-10
RU2668154C2 (ru) 2018-09-26
US20190127785A1 (en) 2019-05-02
GB201319180D0 (en) 2013-12-11
JP6983201B2 (ja) 2021-12-17
EP3063292A2 (en) 2016-09-07
NZ719238A (en) 2022-03-25
WO2015063498A3 (en) 2015-07-16
US20160273029A1 (en) 2016-09-22
PL3063292T3 (pl) 2020-06-29
LT3063292T (lt) 2020-02-25
GB2524603A (en) 2015-09-30
AU2020294316A1 (en) 2021-04-15
CA2926317C (en) 2023-05-23
US11111523B2 (en) 2021-09-07
GB201419367D0 (en) 2014-12-17
AU2014343439A1 (en) 2016-04-21
CY1124064T1 (el) 2022-03-24
CN105899674A (zh) 2016-08-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA516371023B1 (ar) مسبار حمض نووي له رمز حامل للتألق مفرد مرتبط بسيتوسين داخلي للاستخدام في تضخيم ثابت درجة الحرارة ناتج عن حلقة
Passerini et al. The presence of extra chromosomes leads to genomic instability
Van Maele et al. Cellular co-factors of HIV-1 integration
Lee et al. Somatic APP gene recombination in Alzheimer’s disease and normal neurons
Jiang et al. The methyltransferase SETDB1 regulates a large neuron-specific topological chromatin domain
Wolf et al. Spotting the enemy within: Targeted silencing of foreign DNA in mammalian genomes by the Krüppel-associated box zinc finger protein family
Yarham et al. Mitochondrial tRNA mutations and disease
Bischerour et al. Six domesticated PiggyBac transposases together carry out programmed DNA elimination in Paramecium
Zhou et al. DDX5 facilitates HIV-1 replication as a cellular co-factor of Rev
Parry et al. PRIM1 deficiency causes a distinctive primordial dwarfism syndrome
Cammack et al. A viral toolkit for recording transcription factor–DNA interactions in live mouse tissues
Nock et al. Regulator of actin-based motility (RoaM) downregulates actin tail formation by Rickettsia rickettsii and is negatively selected in mammalian cell culture
Lampi et al. Targeted editing of the PSIP1 gene encoding LEDGF/p75 protects cells against HIV infection
Schwope et al. Mutations in Pdd1 reveal distinct requirements for its chromodomain and chromoshadow domain in directing histone methylation and heterochromatin elimination
Ozaki et al. Novel divisome-associated protein spatially coupling the Z-ring with the chromosomal replication terminus in Caulobacter crescentus
Rollenhagen et al. Candida albicans END3 mediates endocytosis and has subsequent roles in cell wall integrity, morphological switching, and tissue invasion
MX2022006616A (es) Gen cca para la resistencia a los virus.
Trautmann et al. Ribosome heterogeneity results in leader sequence-mediated regulation of protein synthesis in Francisella tularensis
JP2024019511A (ja) がんにおける融合遺伝子
Real et al. Genetic diversity and regulatory features of human-specific NOTCH2NL duplications
Nguyen et al. CMF22 is a broadly conserved axonemal protein and is required for propulsive motility in Trypanosoma brucei
Kouhpayeh et al. Development of α4 integrin DNA aptamer as a potential therapeutic tool for multiple sclerosis
Veley et al. Improving disease resistance in plants by editing the epigenome
Kesner et al. A unified model for the surveillance of translation in diverse noncoding sequences
Kumar et al. A twinfilin‐like protein coordinates karyokinesis by influencing mitotic spindle elongation and DNA replication in Leishmania