SU1130800A1 - Способ определени тиамина в кормах - Google Patents

Abstract

-СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ -ТИАМИНА В КОРМАХ, включающий экстракцию тиамина из пробы корма, перевод его в тиохром окислительной смесью и флуорометрирование , отличающийс  тем, что, с целью повьшени  точности и сокращени  времени определени , экстракцию тиамина из пробы корма осуществл ют раствором хлорида кали  при соотношении от 1: 10 до 1:15, а флуорометрирование провод т с использованием хинина гидрохлорида или хинина суль фата .

Description

со эо 1 1 Изобретение относитс  к технике количественного определени  содержани  тиамина (витамина В), широко примен емой при контроле качества продукции в комбикормовой промыпшенности . Тиамин  вл етс  одним из биологически активных веществ премиксов, используемых дл  обогащени  комбикормов и белкововитаминных добавок. В премиксы его ввод т в количествах 200-300 г/т. В организме животных он входит в состав ферментов и играет -роль в водном, углеводном, белковом и фосфорном обмене, имеет боль шое значение дл  роста, развити  и продуктивности. Поэтому важным моментом при контроле качества продукции  вл етс  количественное определе кие содержани  тиамина, дл  чего необходим точный, экспрессный и простой способ его анализа. Известны способы определени  содержани  тиамина, основанные на выделении экстракции и гидролизе фосфатных его соединений с помощью энзиматической или химической (кислотной обработки, превращени  в щелочной среде придобавлении окислител  (кали  железосинеродистого) в тиохром и измерении интенсивности флуоресценции flj. Наиболее близким к предлагаемому  вл етс  способ определени  тиамина в комбикормах, включающий экстракцию тиамина раствором серной кислоты при кип чении на вод ной бане, затем тиамин перевод т в тиохром окислительной смесью и флуорометриру:ют 2. . Недостатками известных способов  вл етс  их продолжительность (отЗ ч и более), невысока  точность анализа , обусловленна  разрушением тиамина в процессе гидролиза и неустойчивостью рабочего стандартного раствора (годен к применению в течение 2 ч). Цель изобретени  - повьшение точности и сокращени  времени определени  тиамина. Поставленна  цель достигаетс  тем что согласно способу определени  . тиамина в кормах, включающему экс- тракцию тиамина из пробы корма, перевод его в тиохром окислительной смесью и флУорометрирование, зкстрак уию тиамина из пробы корма осуществ2 л ют раствором хлорида кали  при соотношении от I:10 до 1:15, а флуорометрирование провод т с использованием хинина гидрохлорида или хинина сульфата. В результате экспериментальных исследований установлено, что введенный тиамин в течение 10 мин экстрагируетс  из навески пробы премикса 5%-ным раствором хлорида кали  в соотношении от 1:1 О до 1:15. Растворы солей хинина (хинина гидрохлорнда хинина сульфата) флуоресцируют в области 320-390 нм, характерной дл  поглощени  тиамина, переведенного в тиохром; причем интенсивность флуоресценции 1 мкг/мл соли хинина соответствует I мкг/мл тиамина, переведенного в тиохром. В св зи с этим количественное содержание тиамина определ етс  по интенсивности флуоресценции стандартного раствора соли хинина с концентрацией 1 мкг/мл, не требующего обработка окислительной смесью. Растворы солей хинина  вл ютс  неограниченно стойкимиj особенно при хранении в посуде из темного стекла. Способ осуществл ют следующим образом. Пример . Берут навеску премикса массой 5 г, помещают в мернзж) колбу вместимостью 100 мл, приливают 50 мл 5%-нЬго раствора хлорида кали  и встр хивают на качалке 10 мин. Затем довод т объем в . колбе до метки раствором хлорида кат ЛИЯ, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр, отбрасьгоа  первые 10 мл фильтрата. 1-2 мл фильтрата перенос т в мерную колбу на 50 мл и довод т до метки раствором хлорида кали . Берут 40 мл разбавленного фильтрата и 40 мл изобутилового спирта в делительнзпо воронку и тщательно перемешивают в течение 2 мин. После расслоени  нижний водный слой сливают в цилиндр, довод т до первоначального обьема ( до 40 мл) раствором хлорида кали , перемешивают и и(ользуют дл  анали- за. В две делительные воронки внос т по 8 мл испытуемого раствора, приливают 6 мл окислительной смеси, перемешивают , добавл ют 20 мл изобутилового спирта и встр хивают 2 мин. После расслоени  нюкний слой (водный ) отбрасывают, а верхний (спиртоBbifiJ фильтруют через бумажный фильтр с безводным сульфатом натри  во флуорометрическую кювету и флуоромбтрируют , настроив предварительно при бор по стандартному раствору хинит на, 20 мл которого помещают в кювету Дл  гашени  флуоресценции к испытуемым растворам добавл ют по 12 капли (0,05 мл) концентрирован-: ной сол ной КИСЛОТЫ:, перемешивают содержимое и измер ют остаточную флуоресценцию. Стандартньй раствор хинина готов т следующим образом. Навеску кристаллического хинина гидрОхлорида массой 10 мг раствор ю в мерной колбе вместимостью 100 мл в 0,1 н. растворе серной кислоты. Затем берут 1 мл этого раствора и развод т 0,1 н. раствором серной кислоты в мерной колбе вместимостью 100 мл (концентраци  хинина гидрохлорида 1 мкг/мл). Раствор стойкий Содержание тиамина (Х) в граммах на тонну премикса рассчитывают по формуле, -A4кv. Ta-VrV -w-iOb ГПК А - йоказани  флуорометра дл  испытуемого раствора до гашени ; AJ - показани  флуорометра дл  испытуемого раствора после гашени ; - объем раствора, в котором находитс  навеска, мл; V, - объем раствора, вз того на окисление, мл; V2 - объем разбавленного фильт рата мл; объем фильтрата, вз тый на анализ , мл , количество хинина в 1 мл стандартного раствори,мкг m - масса навески премикса, г; 72 - посто нна  величина флуоресценции стандартного раствора сЬлей хинина; 10 - величины дл  пересчета содержани  тиамина в г/т. П р и м е р 2. Берут навеску премикса массой 5 г, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, приливают 75 мл 5%-ного раствора хлорида кахш  и далее провод т анализ по П.1 примера осуществлени  способа. Стандартный раствор хинина готов т следующим образом. Навеску кристаллического хинина сульфата массой 10 мг раствор ют в мерной колбе вместимостью 100 мл в 0,1 н. растворе серной кислоты. Затем берут 1 мл этого раствора и развод т 0,1 н.раствором серной кислоты в мерной колбе вместимостью 100 мл (концентраци  хинина сульфата 1 мкг/ми. Раствор стойкий. Полученные результаты испытани  предлагаемого и известного способов приведены в таблице (введено тиамина в премиксы 200 г/т). I Анализ таблицы показывает, что содержание тиамина в премиксах, определ емое предлагаемым способом при соотношении массы навески пробы и экстрагента от 1:10 до 1:15, составл ет 199,,3 - 201,,8 г/т, а при соотногаении 1:8 - 180,,8 г/т; при определении известным способом186 ,5--4,8 г/т с. отклонением в меньшую сторону до 7,0 - 29,0 г/т по отношению к введенному количеству. Использование предлагаемого способа определени  тиамина в кормах позвол ет повысить точность и сократить длительность анализа. Годовой экономический эффект по отрасли от внедрени  способа составит 44640 руб.

Claims (1)

1. -‘СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТИАМИНА В КОРМАХ, включающий экстракцию тиамина из пробы корма, перевод его в тиохром окислительной смесью и флуорометрирование, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени определения, экстракцию тиамина из пробы корма осуществляют раствором хлорида калия при соотношении от 1: 10 до 1:15, а флуорометрирование проводят с использованием хинина гидрохлорида или хинина суль фата .