SU121908A1 - Способ получени клинического декстрана - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к способам получени  клинического декстрана путем микробиологического синтеза.

Предлагаемый /способ позвол ет повысить выход указанного препарата .

Отличительна  особенность способа заключаетс  в том, что к среде, содержащей первичный декстран, добавл етс  жива  культура активного штамма Zenconostoc mesenteroides, выращенна  на питательной среде, содержащей необходимые дл  развити  культуры органические кислоты и низшие спирты и не содержащей инициаторов синтеза декстрана (особенно Сахаров мальтозного и изомальтозного р да).

Способ позвол ет, перепривива  указанную живую культуру на синтетическую среду с сахарозой и добавлением иницирующих агентов или без них, обеспечивать синтез декстрана желаемого молекул рного веса.

Пример 1. Беретс  агарна  питательна  среда, поросша  Zenconostoc mesenteroides (5% сахарозы; 0,5% Na2HPO4 12Н2О; 0,1% КС1, 0,1% пептона; 1% автолизата дрожжей; дистиллированной воды до 100; рН 7). Бактериальные-клетки отмываютс  физиологическим раствором поваренной соли и отгон ютс  на центрифуге. Затем производитс  декантаци , и клетки обрабатываютс  вновь физиологическим раствором поваренной соли- Эта процедура отмывки повтор етс  до тех пор. пока в клеточной взвеси не остаетс  О;саждаемый декстран. Как правило, достаточны две промывки.

Затем клеточна  взвесь прививаетс  питательному прививочному раствору следующего состава: 1% лимонной кислоты, 0,5% Na2HPO4 12Н2О, 0,1% КС1, 0,1% пептона, 1.0% автолизата дрожжей. рН 7 дистиллированной воды до 100.

№ 121908- 2 -

После того, как достигнута максимальна  мутность, этот прививочный раствор добавл етс  в соотношении 1 : 10 к синтетическому раствору следующего состава: 10% сахарозы, 2% первичного декстрана (молекул рный вес 20.000). q,5% Na2HPO4 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дигстиллированной воды до 100.

Когда значение рН снизитс  до 3,9, синтез можно считать законченным . Дальнейша  обработка декстрана производитс  по известным методам .

Пример 2- Беретс  небольшое количество слизи, содержаш,еес  в культуре Zenconostoc mesenteroides, и наноситс  на питательную среду , налитую на дно вертикальной колбы.

Состав питательной среды: 3% агара, 0,5% фруктозы, 0,5% Na2HPO.f 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, дистиллированной воды до 100.

После интенсивного развити  колоний добавл етс  питательный (прививочный) раствор следуюш,его . Состава: 0,5% пропанола, 0,5% Na2HPO4 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дистиллированной воды до 100.

Когда достигнуто максимальное замутнение, этот раствор добавл етс  в соотношении 1 : 100 к синтетическому раствору (см. пример 1).

Когда значение рН снизитс  до 3,9, |Синтез завершен.

Дальнейша  обработка декстрана производитс  по известным методам .

Пример 3. Управл емый синтез декстрана.

Прививочные растворы изготовл ютс  в соответствии с примерами 1 и 2- Названные углеродные источники (лимонна  кислота, фруктоза, пропанол) могут быть заменены другими подход ш,ими соединени ми, как, например, эталон, уксусна  кислота, винна  кислота и молочна  кислота. Прививочные растворы доба1вл ютс  в соотношении 1 : 10.

1)Синтез декстрана желаемого мол. веса 40000. Синтетический раствор: 20% сахарозы, 2,5% первичного декстрана

(мол. вес 10000) q,5% NaaHPDi 12Н2О, 0,1% KCl, 0,1% пептона, 1,0% автолизата дрожжей, рН 7, дистилированной воды до 100Выход равен в среднем 80% расчетных теоретических показателей (мол. вес 40000).

2)Синтез декстрана с расчетом на мол. вес 75 000 (клинический декстран ).

Си нтетический раствор: 10% сахарозы, 2Vo первичного декстрана (остальные примеси как в первом случае).

Выход равен в среднем 90% расчетных теоретических показателей (мол. вес 75000).

3)Синтез декстрана с расчетом на мол. вес 150000. Синтетический раствор: 10% сахарозы, 1% первичного декстрана,

(мол. вес 20000) (остальные примеси, как во втором случае).

Выход равен в среднем 85% расчетных теоретических показателей (мол. вес 150000).

4)Синтез декстрана желаемого мол. веса 300000Синтетический раствор: 10% сахарозы, 1,3% первичного декстрана

(мол. вес 75000) (остальные примеси, как во втором случае).

Выход равен в среднем 75% расчетных теоретических показателей (мол. вес 300000).

5)Синтез декстрана ведетс  с расчетом на оптимальный молекул рный вес (технический декзтран).