SU1686355A1 - Способ определени функционально-активных лейкоцитов - Google Patents
Способ определени функционально-активных лейкоцитов Download PDFInfo
- Publication number
- SU1686355A1 SU1686355A1 SU884495835A SU4495835A SU1686355A1 SU 1686355 A1 SU1686355 A1 SU 1686355A1 SU 884495835 A SU884495835 A SU 884495835A SU 4495835 A SU4495835 A SU 4495835A SU 1686355 A1 SU1686355 A1 SU 1686355A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- leukocytes
- luminol
- pyrogenal
- functionally active
- chemiluminescence
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 title claims description 20
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 abstract description 5
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 abstract description 4
- 230000002468 redox effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 abstract 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 208000004480 periapical periodontitis Diseases 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к клинической иммунологии и может быть использовано с целью диагностики нарушений иммунитета в стоматологии. Целью изобретени вл етс повышение чувствительности способа. Способ осуществл етс посредством определени окислительно-восстановительных свойств нейтрофилов хемилюминесцентным методом в смывах с полости рта, которые смешивают со средой 199 в соотношении 10 : 1 и выдерживают при +4°С до полного осаждени клеточной фракции, добавл ют люминол в конечной концентрации 10 3 М и пирогенал (25 МПД/мл). Таким образом повышают чувствительность способа, что позвол ет определ ть функциональную активность нейтрофилов в концентрации 10 клеток/мл 1 табл
Description
Изобретение относитс к области медицины , а именно к иммунологии.
Целью изобретени вл етс повышение чувствительности.
Способ осуществл ют следующим образом .
У больного делают ополаскивающий смыв 5 мл физраствора в течение 20-30 с и его сбрасывают. Через 2-3 мин повтор ют процедуру смыва с полости рта и всю смывную жидкость собирают в градуированную центрифужную пробирку. Жидкость изо рта сливают медленно, так, чтобы не образовалась пена. Слюну не собирают в пробирку. В полученный смыв (примерно 4-5 мл) добавл ют 0,5 мл 10-кратной среды 199 и оставл ют в холодильнике до полного оседани клеточной фракции. Надосадочную жидкость сливают, а клетки (лейкоциты) в осадке исследуют хеми- алюминисцентным методом, Люминол 10-3 М готов т следующим образом: навеску 10 мг сухого люминола фирмы Серва суспендируют в 1 мл физраствора и подогревают до 45-50°С. Нерастворившийс люминол отдел ют фильтрованием через миллипоровые фильтры с диаметром пор 0,2 мкм. Профильтрованный раствор хран т в холодильнике и используют в неразведенном виде. При измерении хемилюминесценции лейкоцитов в присутствии люминола записывают показани в mv с диспле прибора наибольшую цифру из трех, возникающих каждые 1-2 сек. Функциональную активность лейкоцитов полости рта изучают в присутствии стимул тора пи- рогенала. Дл этого в 3 кюветы (стимулированный тест) внос т по 50 мкл из осадка лейкоцитов и по 25 мкл раствора пирогена- ла (коммерческий раствор 25 МПД/мл) и в 3 другие кюветы добавл ют по 25 мкл физраствора (контроль). Кюветы встр хивают, добавл ют по 10 мкл люминола и оставл ют на 45 мин при 37°С. Через каждые 15 мин кюветы вынимают из термостата и измер ют хемилю- минесценцию на приборе ЛКБ-1250 (Финл нди ). Интенсивность хемилюминесценции определ ют как светосумму в mv трех измерений . Коэффициент активации лейкоцитов
сл
С
о
00
о
СО
сл сл
(К) полости рта в присутствии пирогенала рассчитывают по следующей формуле:
v а -Ь
а
где а - светосумма хемилюминисценции нейрофилов в присутствии пирогенала;
b - то же самое без такового.
Пример осуществлени способа.
Исследование функциональной активности лейкоцитов полости рта у больного Е-ва, 46 лет с диагнозом верхушечного периодонтита .
У больного делают ополаскивающий смыв 5 мл физраствора в течение 20-30 с и его сбрасывают . Через 2-3 мин повтор ют процедуру смыва с полости рта и всю смывную жидкость собирают в градуированную центрифужную пробирку. Жидкость изо рта сливают медленно , так, чтобы не образовывалась пена. Слюну не собирают в пробирку. В полученный смыв 5 мл добавл ют 0,5 мл 10-кратной среды 199 и оставл ют в холодильнике до полного соединени клеточной фракции. Надосадочную жидкость сливают, а клетки (лейкоциты) в осадке исследуют хемилюминесцентным методом. Люминол 103М готов т следующим образом: навеску 10 мг сухого люмино- ла фирмы Серва суспендируют в 1 мл физраствора и подогревают до 45 -50°С. Нерастворившийс люминол отдел ютфильтро ванием через миллипоровые фильтры с диаметром пор 0,2 мкм. Профильтрованный раствор хран т в холодильнике и используют в неразведенном виде. При измерении хеми- люминесценции (ХЛ) лейкоцитов в присутствии люминола записывают показатели в mv с диспле прибора наибольшую цифру из трех, возникающих каждые 1-2 с. Функциональную активность лейкоцитов полости рта изучают в присутствии стимул тора пирогенала. Дл этого вЗ кюветы (стимулированный тест) внос т по 50 мкл из осадка лейкоцитов и по 25 мкл раствора пирогенала (коммерческий раствор 25 МПД/мл) и в 3 другие кюветы добавл ют по 25 мкл физраствора (контроль). Кюветы встр хивают, добавл ют по 10 мкл люминола и оставл ют на 45 мин при 37°С. Через каждые 15 мин кюветы вынимают из термостата и измер ют ХЛ на приборе ЛКВ-
1250 (Финл нди ). Интенсивность ХЛ определ ют как светосумму в mv трех измерений. Коэффициент активации лейкоцитов (К) полости рта в присутствии пирогенала рассчиты5 вают по следующей формуле;К (а-Ь):а, где а - светосумма ХЛ нейтрофилов в присутствии пирогенала; b - то же самое, без такового. В норме коэффициент активации составл ет 0,20 - 0,30. При наличии заболевани способ10 ность нейтрофилов к стимул ции низка (К 0,2). Количество лейкоцитов в пробе составило 10 /мл. Результаты отражены в таблице. Из таблицы видно, что предлагаемый способ позвол ет вы вить восстановление
15 функциональной активности лейкоцитов полости рта после лечени (до лечени эта активность была снижена, К равен 0,06 и 0,24 соответственно). По известному способу не удалось вы вить какие-либо функциональные
20 изменени в лейкоцитах как до, так и после лечени . Объ сн етс это тем, что в пробе находилось количество лейкоцитов менее 106/мл,
Таким образом, повышение чувствитель25 ности способа делает возможным определение окислительно-восстановительных свойств лейкоцитов в концентрации 10 /мл. В известном способе дл такого определени необходима концентраци клеток не 30 менее 106/мл.
Claims (1)
- Формула изобретени Способ определени функционально-активных лейкоцитов путем вы влени окисли35 тельно-восстановигёльной способности их хемилюминесцентньгм методом, отличающийс тем, что, с целью повышени чувствительности, интенсивность хемилюми- несценции лейкоцитов измер ют в смыве с40 полости рта, который смешивают с 10-кратной средой 199, выдерживают при4°Сдо полного осаждени клеточной фракции, добавл ют к ней люминол в концентрации 10 J М, в опытную пробу до введени люминола45 дополнительно ввод т пирогенал в конечной концентрации 25 МПД/мл и по разнице хеми- люминесценции до и после введени пирогенала определ ют показатель функционально активных лейкоцитов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884495835A SU1686355A1 (ru) | 1988-10-18 | 1988-10-18 | Способ определени функционально-активных лейкоцитов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884495835A SU1686355A1 (ru) | 1988-10-18 | 1988-10-18 | Способ определени функционально-активных лейкоцитов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1686355A1 true SU1686355A1 (ru) | 1991-10-23 |
Family
ID=21404907
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU884495835A SU1686355A1 (ru) | 1988-10-18 | 1988-10-18 | Способ определени функционально-активных лейкоцитов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1686355A1 (ru) |
-
1988
- 1988-10-18 SU SU884495835A patent/SU1686355A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Зенков Н.К. и Куликов В.Ю., Лабораторное дело, 1985, № 1. с. 43-44. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1218001A (en) | Serum fibrinogen viscosity in clinical medicine | |
| Whitaker et al. | Edathamil calcium disodium (Versenate) diagnostic test for lead poisoning | |
| Lian et al. | Diagnosis of von Willebrand's disease: A comparative study of diagnostic tests on nine families with von Willebrand's disease and its differential diagnosis from hemophilia and thrombocytopathy | |
| SU1686355A1 (ru) | Способ определени функционально-активных лейкоцитов | |
| RU2525437C1 (ru) | Способ определения окислительной модификации белков в пуле веществ средней молекулярной массы в сыворотке крови, плазме, эритроцитах и в моче | |
| Boyd | Physiology and pathology of the cerebrospinal fluid | |
| Wood | Chemical and microscopical diagnosis | |
| Čvorišćec et al. | Tamm-Horsfall protein in Balkan endemic nephropathy | |
| SU1569705A1 (ru) | Способ определени сенсибилизации к аллергенам | |
| RU2058031C1 (ru) | Способ определения активации свертывания плазмы крови фрагментами клеточных мембран | |
| SU1448280A1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики гормонрезистентного и гормончувствительного гломерулонефрита у детей | |
| Bogar et al. | Leukocyte flotation during gravity sedimentation of the whole blood | |
| Mäkinen et al. | Migration inhibition factor and the blood clotting system: effects of defibrination, heparin and thrombin | |
| SU1679383A1 (ru) | Способ диагностики гастрита | |
| Wylie | Sedimentation Rate of Red Blood Corpuscles in Acute and Chronic Infections | |
| Maunsell et al. | The Synovial Membrane: Some Observations in Normal and Arthritic Human Joints | |
| SU1462194A1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики звенной болезни двенадцатиперстной кишки и хронического холецистита | |
| RU2040794C1 (ru) | Способ диагностики позднего токсикоза беременных | |
| RU2024870C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики вариантов течения атопической бронхиальной астмы у детей | |
| SU1748067A1 (ru) | Способ определени спонтанной агрегации тромбощитов | |
| Wood | Chemical and Microscopical Diagnosis | |
| SU938942A1 (ru) | Способ диагностики дизентерии | |
| Lovric et al. | Rapid screening methods for bleeding disorders. A three year survey | |
| SU1642395A1 (ru) | Способ диагностики тимомегалии у детей | |
| SU1018015A1 (ru) | Способ определени токсичности сыворотки крови |