SU643532A1 - Питательна среда дл культивировани термофильного актиномицета - Google Patents

Description

(54) ПетАТЕЛЬНАЯ СРЕДА Д.1Я КУЛЬТИВ{{РОВАНИЯ ТЕРМОФИЛЬНОГО

Claims (3)

1. АКТИНОМИЦЕТА . : Хлористь кальций0,05 : Po.cT ire:ibiioo (рапсовое) масло 0,2 Сухие дрож ш0,3 Од -юнорл- эльий  уксусна  кз €лота0,5 Среда имеет рН 6,5-7,0. Процесс кул т1шированн  ведут при 45°С. Мешалка Еращаетс  со скорост.гЗО 320 об/мин. Воздух пощюйд  из рас-гета i масть его на 2 част  пнтэтельгюй среды в мкк. Спуст  16 час с момеггга начала кулыивиро|ваии  содержимое ферментера подвергают сепа рацкн . I Протеазиа  актнипость остатка (максималь На ) 6,ii па 1 п. Его кснцентрзфуют, осаж.1тают п йсдворгают вакуук5ной сунтке. : П р и м е р 2. ЗакО сервпрС ааншлй мутант IMST 9515 п BUMS спор 1итамма теркюфгетыюго ак1ино ,1йцета перенос т в качестве прнвгшонюй куль туры с косого агара jsa среда, в состав которой вход т. й9с.%; Сухие дро5кжй0,3 Пегтгон -0,5 Cjcioc оПезжлрениое молоко0,5. Среда имеет sjH 7,0. Процесс су.пьп-1ЕИ5;ова5 и  ведут 20 час, после чегО сгюрь смьпзают 0.01%-ным т вин - 80 раствором . Затем полученной ку.Лг) засевают .пгтаlaiLuiiys ) среду, каход цугос  в круглой колбе объемом 500 мл, и ocyuiecTSJiiHor в течегтие б час ripii 50°С шкуоа1 ю на круглом качающемс  столе. : По; ученную культуру в котпгчестве 5% ИС ; попьзуюг как посевной м щунал, которым засе: вают 4 срме«1-теры объемом 30 л. Поааедние содержат пмтзтельньгй раствор с.ве.а тпп5ето (;ост.5ва. Aiifiiaiii ку1суруззи,П aKCTpaicr Крах ма  Хлорид натри  Хлорид калыш  Растнтелыгое уэапсопое) Сухне дролокн I н; ук:сусна  кпспогв Среда ачеет рН 6,8-7р. Во вркглп культкБированн  подцерж «ваю1 те.чшературу, равную , Мешалка вращаетс  со скоростью 320об/ю1Н. Возедх подвод т из расчета часть его иа 2 части, питательного раствора в . Спуст  20 час с начала культивировани  кутьгурзльщто Жидкость сепарируют. Выделенное вещество имеет акт1шно«ль гфотеазь 6,U монь на 1 мл. Фермент Р403{шо йсг О ьэовать в виде конентрата культуры или осадить этанолом или ртзпнческпми сол ми и исло/и.зовать в виде V/; .)го прегмрата. П р и м е р 3. Закоисеро рова1И{ую культуру утант iMETPSlS термофн-гьиого акти омнцета с осого агара пересевают ма среду, содержащую и ю5Й кукурузный экстракт н крахмал. Спуст  0час выранушани  при 5б°С споры культуры iVbmaioT до 1% раствором твип-80. I/b-HoA полуеиной суспсизней засевают на среду, вес.%. Пептон0,5 Обезж. молоко0,5 Сухне ,3 Хлористьгй кальций0,05. Культуру нлкубируют на крутлом враащющемс  столе ири скорости вращйпн  160 об/Мин. Температура, кульпшнроваин  , продолжз телыюсть процесса 3 час. Затем напученную культуру пересевают по 0,5 мл в круглые колбы объемом 5Ш м  с гштательной средой, имеющей состав, приведенный в примере 1. Культивирование ве.цут 16 час при на круглом колеблющемс  столе, после чего Ш1цегаги удал ют путвм сепарации. В полученном веществе содержитс  0, моль тирозина. П р и м е р 4. Культивируют Tlurmoactinomyces vulgaris МЕТ 9515 iena на питательной среде, содержащей вес,%: Ж дюй кукурузный экстракт0,5 (5 г/л) Крахмал0,5 (5 г/л) Дронс :Т(О,Г (I г/л) Уксусна  кислота0,05 (0,5 т/л) Рапсовое масло -0,1 (1,0 г/л) , (.1 г/л) САСЬ0,01 (0,1 г/л) КультийН ова11ие осуш.ествл ют аналошшю ijpiiMepaM к
2. 2. В полученном кульгуралыю л растворе активность прогеазы составл ет 0.7/ моль на I мл, П р ${ м е р 5. При нспользоЕзгшк гаггателыюй среды, состо щей нэ %: жндк:ого кукурузного экстракта 3, крахмала э, дрожжей 3, уксусной кислоты 3, растительного .мзста 3, NaCi
3. 3... CACJj 2 si при культиви{юва1ши, привед81шорл в примерах 1   2. nonyiiaioT культур-зльньй раствор с акгиБНОсПзЮ протеазы 1,3 Д1 моль на мл. Процентн :.га вьгход термо стабильной протеазы при культнвированш на предложенной питате .гьиой среде в сравнении с известными питательными qзeдaf.tк з Еаздг1 ельно выше. При K TibTiiBiipoBa«}ffl Thermoactinomyces vutgsns на известньи питательных средах получ-аетс  3 ,1 5отеолит1 ческн а сиганых компонента , i3 «.дат-эрьк только один  взшегс  термостабатьным . Колнчес-гво этого одашго KOivfiioneirra не установлено. 564353 Примен емый в приведенных примерах штамм был депонирован 13 ма  1971 г. Центоаль- , ным институтом Ernatirungr Potsdam АИ ГДР, ему был дан номер 217 des aLd Junei of Cofctections 6i Vicroorgfanisms. Штамм 5 .был обозначен тiiermoact-inomsces vuegotris 94-2, В инсттуте он имеет номер ЗМЕТ-9515, Формула изобретени ю Питательна  q)eдa дл  культивирозанк  термофильного актиномицетз, содержаща  ксючанки углерода, органического азота, зшористый кальций, хлористый натрий и воду, отлнчак - tS ща с  тем, что, с целью повышею1  выхода целевого продукта, в питательную среау допош1ктельно ввод т жидкий кукурузный экстракт, растительное масло и уксусную кислоту, а в качестве источника углерода используют крахмал, а в качестве источника оргшшческого азота дрожжевой прюдукт при следующем соотношен5 и компонентов , в %: Жидкий кукурузный экстракт0,5-3,0 Крахмал0,5-5,0 Дрожжевой продукт0,1-3,0 Растительное масло0,05-3,0 Хлористый нат}Н1Й0,1 -3,0 Хлористый кальций0,05-2,0 Уксусна  Ю1слота0,1-1,0 ВодаОсталыюе. Источники информаш1Н, притштые во вкимашге при экспертизе 1. Патент СССР hP 350266, кл.С 12 О 13/10, 1972. 2,Jqurnat of BacteHoeogs 19, 149-155.