SU687120A1 - Способ получени антивирусных препаратов из дрожжей - Google Patents
Способ получени антивирусных препаратов из дрожжейInfo
- Publication number
- SU687120A1 SU687120A1 SU782584504A SU2584504A SU687120A1 SU 687120 A1 SU687120 A1 SU 687120A1 SU 782584504 A SU782584504 A SU 782584504A SU 2584504 A SU2584504 A SU 2584504A SU 687120 A1 SU687120 A1 SU 687120A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- yeast
- virus
- water
- phenol
- extract
- Prior art date
Links
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 17
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 title description 7
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 6
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 claims description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims description 6
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 4
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 4
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 claims description 2
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 claims description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims 1
- 239000007003 mineral medium Substances 0.000 claims 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 claims 1
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 claims 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000208296 Datura Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 description 1
- 235000004431 Linum usitatissimum Nutrition 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BKAYIFDRRZZKNF-VIFPVBQESA-N N-acetylcarnosine Chemical compound CC(=O)NCCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 BKAYIFDRRZZKNF-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 102000035028 Nucleic proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИВИРУСПЫХ ПРЕПАРАТОВ
ИЗ ДРОЖЖЕЙ
1
Изобретение относитс к технологии получении физиологически активных веществ дл сельского хоз йства.
Известен способ получени антивирусных веществ, преимущественно из дрожжей Candida tropicalis3B и Candida агЬогеа KA/V1..1, выращиваемых на солодовом сусле I. Этот способ включает операции отделени дрожжевых клеток от культуральной жидкости, концентрировани культуральной жидкости в вакууме, центрифугировани , диализа и осаждени целевого продукта органическим растворителем, обработки рибонуклеазой, фенолом и органическим растворителе .м.
Недостатком известного способа вл етс низкий , мала активность получаемого продукта.
Целью изобретени вл етс повыщение активности и выхода антивирусных препаратов .
Это достигаетс применением расы К-41 Cajidida tropicalis в качестве продуцента антивирусных веществ, отличающейс от ранее использованных дрожжей более высокой продуктивностью и способностью усваивать углерод из пищевого сырь при повышенных температурных режимах культиви-ровани . Применение минеральной среды Ри дер с глюкозой и биотипом дл выращивани дрожжей способствует накоплению значительных количеств антивирусных веществ. Кроме того, концентрирование и очистка веществ с антивирусной активностью достигаютс диализом через полупроницаемую мембрану против высокомолекул рного гидрофильного вещества - полиэтиленгликол .
из технологической схемы приготовлени антивирусных препаратов исключаетс дорогосто ща рибонуклеазна обработка, а окончательное высушивание препарата производитс путем сублимации, что обеспечивает его хорошую растворимость в воде и высокую активность.
По предлагаемо.му способу можно выделить антивирусные препараты как из клеток дрожжей, так и из культуральной жидкости . При этом необходимо последовательное выполнение следующих операций.
Дрожжи Candida tropicalis К-41 выращивают в ферментерах на аэоиоованной
жидкой среде Ридер следующего состава (г/л): (NH4)2SO4 3, NaCl 0,3; MgSO4 0,4; КН2РО4 I; K2HPO/ 0,1; глюкоза 25; биотин 2 мкг/л.
Дрожжевые клетки от культуральной жидкости отдел ют центрифугированием (3000 об/мин в течение 15 мин), высушивают в сублимационной сушке при 30°С, давлении Ю н/м и используют отдельно дл получени различных препаратов.
Биомассу дрожжей гомогенизируют в сухом и влажном виде в присутствии абразива , растворимые вещества экстрагируют теплой (до 45°С) водой и концентрируют с помощью водного раствора высокомолекул рного по тиэтиленгликол (молекул рна масса 15000) через полупроницаемую (цел-, лофановую) мембрану. Растворенные в воде концентраты культуральной жидкости или дрожжевого, экстракта центрифугируют (5000 об/мин в течение 15мин) дл удалени нерастворимого остатка, добавл ют равный объем смеси водонасыщенного фенола к «-бутанола (10;1) и эмульгируют при ко.мнатной температуре в течение 30 мин. Водную фазу отдел ют центрифугирование.м (3000 об/мин в течение 30 мин), диализируют против проточной воды (48 час) дл удалени остатков феноал и н-бутанола и концентрируют до минимального объема (0,2-0,3 лJ с помощью полиэтиленгликол через полупроницаемую мембрану. Целевой продукт из концентрата осаждают органическим растворителем (80 %-ньш этанолом) при низкой (2°С) температуре. Осадок уплотн ют центрифугированием (5000 об/мин в течение 15 мин) и раствор ют в теплой (до 45°С) воде. Раствор центрифугируют (5000 об/мин в течение 15 мин) осадок отбрасывают, а сунернатант повторно обрабатывают фенолом и органическими растворител ми, как указано выще. Окончательное высушивание препарата из водного раствора осуществл ют в субли.мационной сушке (-30°С, 10 н/м).
Пример 1. В качестве источника антивирусного препарата использована био.масса дрожжей Candida tropicalis К-41. Из 500 г су.хих дрожжей ио предлагаемому способу получено 11,0 г препарата, что составл ет 2,2 вес. % исходного материала. Препарат имеет вид а.морфного белого порощка, хорощо растворим в воде, в растворе термостабилен . Влажность лиофилизированного препарата 5,0%, препарат слабо гигроскопичен , может длительное врем хранитьс в сухом месте без изменени физических свойств и антивирусной активности.
Пример 2. В качестве источника антивирусного препарата использована культура льна жидкость, не содержаща дрожжевых клеток. Из 20 л культуральной жидкости (около 50 г сухих веществ) по предлагаемому способу получено 2,2 г препарата, т. е. около 4,4 вес. % исходного продукта. Выделенный препарат - белый аморфный порошок , хорошо растворим в воде, в растворе термостабилен, его влажность не превыщает 6%; может хранитьс длительное врем в сухом месте без потери порошковидной консистенции, растворимости и антивирусной активности.
Общий выход препаратов из биомассы и культуральной жидкости дрожжей достигает 3,3% сухого веса исходного материала.
В табл. 1 приведены сведени о хи.мическом составе препаратов, в табл. 2 и 3 - результаты испытани их активности в отнощении вируса табачной мозаики и Х-вируса картофел .
Препараты состо т преимущественно из полисахаридов (около 70%), примеси белков не превыщают I-3%, нуклеиновых кислот 0.21-0,26% (табл. 1). Седиметационным анализом установлена гомогенность пренарата , выделенного из дрожжевых клеток, молекул рна масса присутствующего в нем полисахарида маннана равна 14000. Препарат , полученный из культуральной жидкости дрожжей - полидисперсный.
Оба препарата обладают выраженной активностью в отношении вируса табачной мозаики и Х-вируса картофел ; 50%-ное снижение инфекционности вируса табачной мозаики наблюдаетс в 0,0001-0,001/о-ной концентрации препаратов (табл. 2). Препараты подавл ют накопление Х-вируса картофел в листь х дурмана, реагирующих системным заболеванием на заражение этим вирусом (табл. 3), и увеличивают выход безвирусных растений в культуре апикальных меристем. Хвмвческвй составакгёвирусных -препаратов, полученных нз К-41 (% сухого веса препарата)
Источввх Редудирукидие вещества. Белки Нуклеиновые обнаруженные в гнаро-кислоты
лизатах(РНК)
микромето- автроновым дом Хаге- методом дорка-Иенсева
Инактиваци вируса табачной мозаики препаратами, полученными из дрожжей Canc/tc/д iropicali К-41 Примечани
Таблица 1
Фосфор
ОбщийНуклеотвдный
Таблида2 е: Опытные половивкн листьев Sifa.mon.wmннокулировалн вирусом табачной мозаики в присутствии антивирусного препарата в соответствующей концентрации, контрольные - вирусом без антивирусного препарата. дрожжей Canctc/a troptcafts
Влв Еве автввнрусвых препаратов йа рвп(5одукнвю Х- вируса картлзфеп в листь х
Datura. Stra.m.on.t.um.
Ивфекциоввость ввруса в экстрактах
Концентраци из листьев Bltuf-a Stramoaiunt препарата, % культивируемых
ва растворе ингибитора
Р ОД
42
ОД
Р 0,5 Примечани :
Claims (2)
- Формула изобретениСпособ получени антивирусных препаратов из дрожжей, включающий культивирование дрожжей, отделение от культуральной жидкости дрожжевых клеток и раздельную обработку их путем концентрировани культуральной жидкости в вакууме, а дрожжевых клеток путем гомогенизации, экстракции, концентрировани экстракта, диализа, осаждени целевого продукта, обработки его фенолом и органическими растворител ми , отличающийс тем, что, с целью повышени активности и выхода антивирусного препарата, в качестве исходнойТабпнааЗСнижение инфекпионности,%на воде87,5187культуры дрожжей используют расу К-41 Candida tropicalis, культивирование которой провод т на минеральной среде Ридер с глюкозой и биотином, а концентрирование дрожжевого экстракта провод т полиэтиленгликолем через полупроницаемую мембрану и после обработки фенолом и органическим растворителем целевой продукт из дрожжевого экстракта высушивают сублимацией .Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР № 302368, кл. С 12 К 5/00, 1971. 1. Опытные половинки листьев содержат в течение 2 дней на растворе ингибитора у контрольные - на воде, а затем инокупируют X-вирусом картофел , титр вируса определ ют на 7-в день опыта путем подсчета местных некрозов, образовавшихс в результате ннокул ции экстрактами листьев гомфрены.
- 2. Р- уровень значимости разности инфекдионности вируса в опыте и контроле, %.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU782584504A SU687120A1 (ru) | 1978-03-01 | 1978-03-01 | Способ получени антивирусных препаратов из дрожжей |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU782584504A SU687120A1 (ru) | 1978-03-01 | 1978-03-01 | Способ получени антивирусных препаратов из дрожжей |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU687120A1 true SU687120A1 (ru) | 1979-09-25 |
Family
ID=20751034
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU782584504A SU687120A1 (ru) | 1978-03-01 | 1978-03-01 | Способ получени антивирусных препаратов из дрожжей |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU687120A1 (ru) |
-
1978
- 1978-03-01 SU SU782584504A patent/SU687120A1/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN115772550B (zh) | 一种具有抗氧化活性和保肝功效的草菇多肽的制备方法 | |
| CN113308378B (zh) | 高产麦角硫因的灵芝菌株及其应用 | |
| US4163780A (en) | Ks-2-a | |
| US4793996A (en) | Method of making soybean extract inhibitor | |
| CA1088443A (en) | Method of producing polysaccharides | |
| US4242326A (en) | Anti-tumor substance and process for preparing the same | |
| EP3901163B1 (en) | Botulinum toxin producing method | |
| CN114921457B (zh) | 一种提取dsRNA的方法 | |
| CN104887615B (zh) | 一种制备发菜细胞内类菌胞素氨基酸粗品的方法 | |
| SU687120A1 (ru) | Способ получени антивирусных препаратов из дрожжей | |
| CN110272504A (zh) | 硒化扁藻胞外多糖的制备方法和硒化扁藻胞外多糖 | |
| Smith et al. | The chemical basis of the virulence of Bacillus anthracis. VI: an extracellular immunising aggressin isolated from exudates of infected guinea-pigs | |
| CN114344187B (zh) | 大叶蛋白菊多肽组合物及其制备方法与应用 | |
| JPS58318B2 (ja) | 制癌性物質の製造方法 | |
| RU2051969C1 (ru) | Способ получения бактериальных липополисахаридов | |
| CN110731977B (zh) | 一种柞树皮提取物的制备方法和应用 | |
| JPH04300898A (ja) | 新規糖タンパク複合体およびその製造方法 | |
| US5711948A (en) | Plant-derived, biologically active polysaccharides and method of preparing same | |
| SU1081171A1 (ru) | Способ выделени дезоксирибонуклеиновой кислоты | |
| RU2175552C1 (ru) | Способ получения антикоагулянта из сапропеля | |
| SU302368A1 (ru) | Способ получения комплекса физиологически активных веществ из дрожжей | |
| KR830002898B1 (ko) | 항종양성물질의 제조방법 | |
| KR810000551B1 (ko) | 다당류의 제조방법 | |
| RU2412995C1 (ru) | Способ получения ингибитора коллагеназы с противоопухолевым действием из гепатопанкреаса камчатского краба | |
| RU2634408C1 (ru) | Способ получения активной фармацевтической субстанции рекомбинантного бисметионилгистона Н1.3 |