SU885253A1 - Штамм @ фу-79,продуцент L-амилазы и протеазы - Google Patents
Штамм @ фу-79,продуцент L-амилазы и протеазы Download PDFInfo
- Publication number
- SU885253A1 SU885253A1 SU802956199A SU2956199A SU885253A1 SU 885253 A1 SU885253 A1 SU 885253A1 SU 802956199 A SU802956199 A SU 802956199A SU 2956199 A SU2956199 A SU 2956199A SU 885253 A1 SU885253 A1 SU 885253A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- strain
- amylase
- activity
- medium
- protease
- Prior art date
Links
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 title claims description 15
- 239000004365 Protease Substances 0.000 title claims description 14
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 title claims description 13
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 title claims 2
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 title claims 2
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 title claims 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 title 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 title 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 10
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims 6
- 230000003625 amylolytic effect Effects 0.000 claims 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims 4
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims 3
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 claims 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 3
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 claims 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims 1
- WGVWLKXZBUVUAM-UHFFFAOYSA-N Pentanochlor Chemical compound CCCC(C)C(=O)NC1=CC=C(C)C(Cl)=C1 WGVWLKXZBUVUAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims 1
- 229960004050 aminobenzoic acid Drugs 0.000 claims 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 claims 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 claims 1
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000013530 defoamer Substances 0.000 claims 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 claims 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 claims 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 1
- TVDSBUOJIPERQY-UHFFFAOYSA-N prop-2-yn-1-ol Chemical compound OCC#C TVDSBUOJIPERQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 claims 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 description 1
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 description 1
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 description 1
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
1
Изобретение о.тноситс к микробио югической промышленности и касаетс получени штаммов-продуцентов cL-амилазы и протеазы.
Препараты, -содержащие oL-амилазу и протеазу, широко используютс в народном хоз йстве: в животноводстве , пищевой, текстильной, бумажной промышленности.
Лучшим из известных в насто щее врем продуцентов oL-амилазы, исполь зуемым в производстве, вл етс штамм Вас.subtil is ВНИИ генетика-44 tl3.
Известно также, что некоторые штамзлы бацилл продуцируют нар ду с dL-амилазой щелочную и нейтральную протеазы С2.
Существенным недостатком известных штаммов-продуцентов й--амилазы и продуцентов протеазы, в том числе и штаммов, прин тых в качестве базовых образцов, вл етс их чувствительность к производственным фагам.
В тех случа х, когда фаговый фон на производстве повышаетс , не исключены операции, сопровождающиес лизисом культуры.
Цель изобретени - получение штамма-продуцента dL-амилазы к протеазы , обладающего широким спектром фагоустойчивости по отношению к специфическим фагам, встречающимс в производственных услови х, и не уступающего лучшим известным штаммам по основным производственным показател м: уровню ферментативной активности и скорости роста.
Новый штамм Вас. subtil is ФУ-79,
10 вл ющийс предметом предлагаемого изобретени , получен в результате селекции на фагоустойчизость к р ду выделенных образцов фагов среди потомства колоний, развившихс после
15 посева на газон фагочувствительного штамма Вас.subtil is 103, фаголизата из производственного ферменте)а, засе нного культурой штамма Bac.subtl1 Is У-43. .
20 Таким образом/ исходным дл}: получени предлагаемого продуцента oL-амилазы и протеазы штамма Вас. subtil is ФУ-79, вл етс штамм Вас.subtil is 103. На производстве штамм
Claims (2)
- 25 103 используетс , как продуцент амилолитических и протеолитических ферментов . Предлагаемый штамм BacMtus subtil is ФУ-79 в зависимости от условий культивировани может проду30 .цировать d,-амилазу или протеазу. Штамм Bacillus subtills ФУ-79продуцент cL-амилазы и протеазы храпитс в Центральном музее промышленных микроорганизмов Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов и имеет регистрационный № ЦМПМ В-1989. . Биологическа характеристика штам ма ФУ-79; Культурально-морфологические приз наки штамма Вас.subtil is ФУ-79. Морфологи . Клетки штамма представл ют собой грамположительные, спорообразующие палочки размером 1,7 3, 0)0, 4-0, 7 мк, .Размер спор; 1,0-1, XО,5-0,7 мк . М со-пептонный агар (МПА).Через 48 ч роста при на МПА культура образует беловатые; выпуклые, морщинистые колонии диаметром 2,5-4 мм. М со-пептонный бульон (МПБ). При выращивании в МПБ через 24 ч при 37°С без встр хивани на поверхности образуетс морщиниста пленка. Рост без помутнени среды. При встр хивании на качалке среда мутнеет. При сто нии образуетс пленка. Агаризованна среда Хоттингера. При выращивании в течение 24 ч при культура образует желтовато-се рые круглые, выпуклые, морщинистые колонии с лопастным краем диаметром 3,5-4,5 мм. На синтетической среде с минеральным азотом (среда Спецайзена). Культура растет в виде мелких,круглых колоний диаметром 1-2 мм сероват белого цвета,. На ломтиках картофел культура образует морщинистую, складчатую пленку серовато-белого цвета. Со временем пленка ослизн етс . Желатину разжижает. Крахмал гидролизует .Молоко пептонизирует. Отношение к источникам углерода. Глюкозу, лактозу, фруктозу,сахарозу усваивает. Хранение штамма производ т в лиофильно высушенном состо нии в стекл нных ампулах. Предлагаемый штамм Вас.subtil is ФУ-79-продуцент oL-амилазы и протеазы отличаетс широким спектром фагоустойчивости . Штамм ФУ-79 стабильно сохран ет признаки фагоустойчивости, что было многократно проверено в р де пересевов . В процессе роста он не отщепл ет фагочувствительных клонов и не вытесн етс фагочувствительным штаммом (например, У-43) в смешанно культуре. Помимо устойчивости к про изводственным фагам штамм Ваг, .subtil is ФУ-79 характеризуетс тем,что достигает высокого уровн активности d-амилазы за более короткий срок ферментации (240 ед/мл за 44 ч), в то врем как .штамм Вас.subtil is В-44, прин тый в качестве базового образца (304 ед/Ш1 за 62 ч), а также более высокой активностью проте- азы по сравнению со штаммом Вас.subtil is-50. Дл проверки ферментативной активности предлагаемого штамма ФУ-79 провод т опыты по глубинному культивированию его в качалочных колбах объемом 750 мл, содержащими 50 мп питательной среды. Дл биосинтеза ci-амилазы штамм выращивают на среде следующего состава, %: крахмал осахаренный 10} СаСОо, 0,03t лактоза 0,3;K,lS04. 0,3; MgS04 0,015; NaCl 0,03; CuSOrj 0,00039; (NN4), HP04 О , 84; кукурузный экстракт 1,2, БВК 0,24; вода водопроводна (рН до стерилизации 7) 2. Число оборотов качалки 180 об/мин. Выращивание осуществл ют при в течение 46 ч. .Амилолитическую активность в культуральной жидкости определ ют по методу БЕРа. Дл биосинтеза используют среду состава, %: крахмал осахаренный 8; СаСОз 0,05; MgS04 0,05; КС 1 0,15; ,01; (NH4)o.HP04 1,2 куку- . рузный экстракт 0,8; БВК 0,4 (рН до стерилизации 7) 4. Число оборотов качалки 220 об/мин. Выращивание осуществл ют при в течение 44 ч. Протеолитическую активность определ ют модифицированным методом Ансона (ГОСТ 20264.2-74}. Параллельно в этих же услови х выращивают штаммы Вас.subti1iS-103 и У-43. Амилолитическа (АС) и протеолитическа (ПС) активности- штаммов Вас. subtil is ФУ-79,103 и У-43 приведены в таблице. Из таблицы видно, что амилолитическа активность предлагаемого штам ма ФУ-79 превышает активность штаммов ).03 и У-43 на 66,6 и 11,2%, а протеолитическа активнбсть на 118,5 и 52,7% соответственно. Использование штамма Вас. subtil is ФУ-79 дл получени i-амилазы и протеазы в производственных услови х. Пример 1, Посевной материал получ&ют выращиванием штамма Вас.sub tiiis ФУ-79 в колбах в виде пленки в жидкой питательной среде состава,%: крахмал 10; аммоний лимоннокислый 2-х замещенный 3 КН ,2 0,03; MgS04-7H/j O 0,15; CaSO 0,14; FeS04 0,002; MnSO. 0,000125; CuS04 0,00075; r. -аминобензойна кислота 0,001-, вода 86,2; рН 6,0-6,3. Температура . Полученным посевным материалом , составл ющим 0,01% объема среды в ферментере, засевают аппарат .объемом 20 м с 10 м ферментацйон1ной среды следующего состава, %: крахмал осахаренный 22,5 (10% вносит с сразу, остальное в виде подпитки) СаСО-ьО,03; NaCl 0,03; ОЗ; MgS04-0,015; С , 00039 ; БВК 0,24) (НН4)/г.НР040,84; кукурузный экстракт 1,2-пропинол (пеногаситель) 0,05, Ферментацию ведут при З7с с аэрацией в течение 44 ч. Культуральную жидкость с амилолитической активнос тью 240 ед/мл (колориметрический метод ГОСТ 20264.4-74) высушивают н распылительной сушилке. Выход готового продукта равен 72%. Пример 2. Штамм-продуцент и среда дл приготовлени посевного материала те же, что и в примере 1. Культивиоование провод т в ферментере объемом 20 м2 с 10 м ферментационной , .среды, %: крахмал осахаренный 13; СаСОз 0,05; КС 1 0,15;СаС.1( 0,01; MgS04.0,05; ( NH i)i НР04 1, 2 кукурузный экстракт 0,8; пеногаситель Пропинол 0,05; рН 6,6. Процесс ферментации идет при . с аэрацией в течение 38 ч. Культуральную жидкость, имеющую активность протеззы, равную 30 ед/мп, определенную по модифицированному методу .Ансона (ГОСТ 20265,2-74),высушивают на распылительной сушилке,. Выход су-кого продукта 60%, Таким образом, предлагаемый штамм Вас , subti1iS ФУ-78 может быть использован как продуцент oi.-амилазы от исходного штамма Вас.subtIlls 103 и других известных штаммов -продуцентов oL-амилазы и продуцентов протеазы широким спектром устойчивости к : фагам, распространенным на Вышеволоцком заводе, р ду фагов, выделенных на других ферментных заводах, р ду лабораторных штаммов фагов, специфичных дл Вас.subtil is. Использование фагоустойчивости штамма ФУ-79 позволит обеспечить более стабильное производство ферментных препаратов. Кроме того, по сравнению с другими продуцентами, штамм Bac.subtiHs ФУ-79 Обладает более высокими уровн ми активности i-амилазы и протеазы. Формула изобретени Штамм Bacillus subtMIs ФУ-79-прОдуцент ci-амилазы и протеазы. Штгичм хранитс в Центральном музее промышленных микроорганизмов Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов и имеет регистрационный номзр ЦМПМ В-1989. Источники информации/ прин тые во внимание при экспертизе 1,Авторское свидетельство СССР по за вке 2711504/13, кл. С 12 D 13/10, 1979.
- 2.Klay L.,Moser P.W. Biochetn, Biophys.Res.Commun.v.34, p.600-604,. 1969.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU802956199A SU885253A1 (ru) | 1980-07-15 | 1980-07-15 | Штамм @ фу-79,продуцент L-амилазы и протеазы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU802956199A SU885253A1 (ru) | 1980-07-15 | 1980-07-15 | Штамм @ фу-79,продуцент L-амилазы и протеазы |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU885253A1 true SU885253A1 (ru) | 1981-11-30 |
Family
ID=20908181
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU802956199A SU885253A1 (ru) | 1980-07-15 | 1980-07-15 | Штамм @ фу-79,продуцент L-амилазы и протеазы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU885253A1 (ru) |
-
1980
- 1980-07-15 SU SU802956199A patent/SU885253A1/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Shieh et al. | Milk-clotting enzymes produced by culture of Bacillus subtilis natto | |
| US4323651A (en) | Thermostable lactase derived from bacillus | |
| US4518697A (en) | Acid stable protease from mutants of genus Aspergillus | |
| IL30998A (en) | Process for the production of proteolytic enzyme preparations | |
| US3649455A (en) | Production of lipase | |
| Ogbadu et al. | Fermentation of African locust bean (Parkia biglobosa) seeds: involvement of different species of Bacillus | |
| CA1137898A (en) | Preparation of a milk coagulating enzyme | |
| El-Shafei et al. | Production, purification and characterization of Bacillus lipase | |
| Hashimoto et al. | Thermostable acid protease produced by Penicillium duponti K1014, a true thermophilic fungus newly isolated from compost | |
| Pissuwan et al. | Production of keratinase by Bacillus sp. FK 28 isolated in Thailand | |
| SU885253A1 (ru) | Штамм @ фу-79,продуцент L-амилазы и протеазы | |
| RU2157843C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ BACILLUS CEREUS B 3б ГКМ ВИЗР № 98 ДЛЯ ОКИСЛЕНИЯ УГЛЕВОДОРОДОВ НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ | |
| Bhatiya et al. | Optimization of environmental and nutritional factors for alkaline protease production. | |
| Dahot | Cultivation of Penicillium expansum on rice husk powder for protease production | |
| KR100265540B1 (ko) | 신규한 바실러스 서브틸리스 에스와이8-24(케이에프씨씨-11027)와 대두박을 이용한 대량생산 방법 | |
| US3740318A (en) | Composition of matter and process | |
| RU2112035C1 (ru) | Способ получения протеолитических ферментов из бактерий рода bacillus | |
| Fitri et al. | Isolation and characterization of thermophilic actinobacteria as proteolytic enzyme producer from Ie Seuum Hot Spring, Aceh Besar, Indonesia | |
| SU721484A1 (ru) | Штамм вниигенетика-42-продуцент- -амилазы | |
| KR100258740B1 (ko) | 세탁 세제용 단백질 분해 효소의 생산 균주 및 그 효소의 제조방법 | |
| RU2303066C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis-продуцент щелочной протеазы | |
| SU771159A1 (ru) | Штамм 203-продуцент нейтральной протеиназы | |
| SU1068479A1 (ru) | Штамм @ @ 81- @ -продуцент нейтральной протеазы | |
| SU1084297A1 (ru) | Штамм @ @ -82 продуцент @ -амилазы и питательна среда дл культивировани штамма @ @ -82 (варианты) | |
| KR0162725B1 (ko) | 스트렙토키나제 및 스트렙토도르나제의 동시 제조방법 |