TH11509A3 - "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิลและปลาทับทิม" - Google Patents
"กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิลและปลาทับทิม"Info
- Publication number
- TH11509A3 TH11509A3 TH1403001054U TH1403001054U TH11509A3 TH 11509 A3 TH11509 A3 TH 11509A3 TH 1403001054 U TH1403001054 U TH 1403001054U TH 1403001054 U TH1403001054 U TH 1403001054U TH 11509 A3 TH11509 A3 TH 11509A3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- tilapia
- reaction
- bacteria
- shewanella spp
- sequence
- Prior art date
Links
Abstract
DC60 (20/10/58) การประดิษฐ์นี้เป็นการพัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิล และปลาทับทิม ด้วยเทคนิคแลมป์เปลี่ยนสีของแคลซีนที่ผสมลงในสารละลายปฏิกิริยาแลมป์ก่อนเริ่มทำ ปฏิกิริยา โดยมีกรรมวิธีในการทำปฏิกิริยาขั้นตอนเดียว จากการอ่านผลทดสอบด้วยตาเปล่าหลังเสร็จสิ้น ปฏิกิริยา กรรมวิธีนี้สามารถตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลาด้วยการออกแบบไพร์เมอร์ที่ มีความจำเพาะต่อลำดับเบสบนยีน 16S ไรโบโซมอลของเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. และ องค์ประกอบและสภาวะที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยา เป็นวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรียในสัตว์น้ำเศรษฐกิจ ที่มีความจำเพาะ รวดเร็ว ไม่ต้องใช้เครื่องมือที่ยุ่งยากซับซ้อน ง่ายต่อผู้ใช้ และไม่ต้องใช้เวลาการตรวจนาน เหมือนเทคนิคดั้งเดิม การประดิษฐ์นี้เป็นการพัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิล และปลาทับทิม ด้วยเทคนิคแลมป์เปลี่ยนสีของแคลเซีนที่ผสมลงในสารละลายปฏิกิริยาแลมป์ก่อนเริ่มทำ ปฏิกิริยา โดยมีกรรมวิธีในการทำปฏิกิริยาขั้นตอนเดียว จากการอ่านผลทดสอบด้วยตาเปล่าหลังเสร็จสิ้น ปฏิกิริยา กรามวิธีนี้สามารถตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลาด้วยการออกแบบไพร์เมอร์ที่ มีความจำเพาะต่อลำดับเบนบนยีน 165 ไรโบโซมอลของเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. และ องค์ประกอบและสภาวะที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยา เป็นวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรียในสัตว์น้ำเศรษฐกิจ ที่มีความจำเพาะ รวดเร็ว ไม่ต้องใช้เครื่องมือที่ยุ่งยากซับซ้อน ง่ายต่อผู้ใช้ และไม่ต้องใช้เวลาการตรวจนาน เหมือนเทคนิคดั้งเดิม
Claims (1)
1. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella sp p. ในปลานิลและปลาทับทิม มีขั้นตอนดังนี้ 1.1 เตรียมสารละลายดีเอ็นเอที่ต้องการตรวจ โดยนำเนื้อเยื่อจากส่วนอวัยวะของปลาที่ต้องการ ทดสอบประมาณ 50 มิลลิกรัม บดด้วยน้ำยาสกัด ปริมาตร 200 ไมโครลิตร จนเป็นเนื้อ เดียวกัน นำไปต้มที่ 95 องศาเซลเซียส นาน 5 นาที นำไปแช่ในนำแข็งอีก 5 นาทีจะได้ สารละลายดีเอ็นเออยู่ในส่วนใส 1.2 ทำปฏิกิริยาแลมป์ -แคลซีนภายใต้สภาวะที่เหมาะสมที่สุด คือ 63 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 30 นาที ที่ซึ่งปฏิกิริยาแลมป์ -แคลซีน ประกอบด้วย ก. สารละลายดีเอ็นเอที่สกัดได้จากปานิลและปลาทับทิม ปริมาตร 2 ไมโครลิตร ข. เอาท์เทอร์โพร์เมอร she-F3 ลำดับเบส 5\'-TTTGCTTGATAGAAGAAAGAGT-3\' และ She-B3 ลำดับเบส 5\'-GCTGAGAAGGAAGGATTGG-3\'อย่างละ 0.2 ไมโครไมล่าร์ ค.อินเนอร์ไพร์เมอร์ She-FIP ลำดับเบส5\'-ATCCAGAACCACCGACCTCATTTTTCTGT AGCTTAACTGGTTAGC-3\'แ ละ She-BiP ลำดับเบส5\'-ATCAATAAGATGGGTCTGT AGCTCATTTTGTCAGAGTGGACTTGAACC-3\'อย่างละ 2 ไมโครล่าร์ ง. ลูปไพร์เมอร์ She -LF ลำดับเบศ 5-\'CCTCATAAAGAGTAGG-3\' และ She-Lb ลำดับเบส 5\'- AGAGCGCACCCCTGATAAGGG-3\' อย่างละ 2 ไมโครไมล่าร์ จ. บัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 1 เท่า ฉ. สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟส 4 มิลลิโมล่าร์ ช.สารละลายเบต้าอีน 0.4 โมล่าร์ ซ. สารละลาย dNTPs 1.4 ,มิลลิโมล่าร์ ฌ. เอ็นไซม์ Bst ดีเอ็นเอ โพลีเมอเรส 8 หน่วย ญ. สาระละลายแคลซีน 25 ไมโครโมล่าร์ ฏ. สารละลายแมกกานีสคลอไรด์ 0.5 มิลลิโมล่าร์ และ ฐ. น้ำกลั่น ปริมาตร 9.75 ไมโครลิตร 1.3 อ่านผลการทดสอบด้วยตาเปล่าหลังเสร็จปฏิกิริยา โดยตัวอย่างที่มีการติดเชื้อแบคทีเรีย Shewanella sp p. สารละลายปฏิกิริยาจะเปลี่ยนจากสีส้ม ( ผลทดสอบลบ) เป็นสีเขียว สะท้อนแสง ( ผลทดสอบบวก )
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH11509C3 TH11509C3 (th) | 2016-05-19 |
| TH11509A3 true TH11509A3 (th) | 2016-05-19 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhang et al. | Bioanalytical methods for hypochlorous acid detection: Recent advances and challenges | |
| EP3971299A3 (en) | Colorectal cancer detection kit or device, and detection method | |
| MX2022001187A (es) | Método para determinar la secuencia de un ácido nucleico usando luminiscencia resuelta por tiempo. | |
| MX2017003790A (es) | Detección de secuencias diana por percepción de nanoporos de sondas sintéticas. | |
| MX380165B (es) | Dispositivo integrado de fuente-pixel activo para el analisis rapido de especimenes biologicos y quimicos. | |
| EP4656740A3 (en) | Breast cancer detection kit or device, and detection method | |
| PH12017501967A1 (en) | Maize plant dbn9936 and method for use in detecting nucleic acid sequence thereof | |
| ATE488604T1 (de) | System zum nachweis von polynukleotiden | |
| EP4365602A3 (en) | Stomach cancer biomarker and detection method | |
| FR3030048B1 (fr) | Procede et dispositif de determination du temps de coagulation d’un echantillon sanguin, et cuvette de reaction | |
| CN105154530B (zh) | 一种检测食品中致病菌的八重pcr扩增试剂盒及其扩增引物 | |
| MX2018015213A (es) | Secuencia de acido nucleico para detectar la existencia del evento de soya transgenica dbn9004 en una muestra biologica, equipo que contiene la misma y metodo de deteccion para la misma. | |
| EP3415912A4 (en) | ANALYT DETECTION PROCEDURE AND REAGENT SET TO DETECT ANALYTES | |
| WO2015077382A3 (en) | Combined cytology and molecular testing for early detection of esophageal adenocarcinoma | |
| SG10201907690TA (en) | Device and method for detecting target molecules | |
| HK1212392A1 (en) | Genetic markers for mastitis resistance | |
| NZ732886A (en) | Amplification and detection of nucleic acids in a biological sample | |
| EP3878979A3 (en) | Molecular detection of enterovirus and parechovirus | |
| WO2015200833A3 (en) | COMPOSITIONS AND METHODS FOR DETECTING HUMAN PEGIVIRUS 2 (HPgV-2) | |
| GB2556001A (en) | Diagnostic kits | |
| TH11509C3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| RU2012127484A (ru) | Набор олигодезоксирибонуклеотидных праймеров и флуоресцентно-меченого зонда для идентификации днк аденовируса серотипов 3,4,7,14,21 методом гибридизационно-флуоресцентной полимеразной цепной реакции | |
| CN104450952B (zh) | 柱状黄杆菌快速检测引物及检测方法 | |
| TH11510A3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| WO2016011086A3 (en) | Method and kit for protozoa characterization |