TH14925Y - ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะเจาะจงต่อเชื้อ Listeria monocytogenes และดีเอนเอตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์โดยสมบูรณ์ - Google Patents

ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะเจาะจงต่อเชื้อ Listeria monocytogenes และดีเอนเอตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์โดยสมบูรณ์

Info

Publication number
TH14925Y
TH14925Y TH1303001027U TH1303001027U TH14925Y TH 14925 Y TH14925 Y TH 14925Y TH 1303001027 U TH1303001027 U TH 1303001027U TH 1303001027 U TH1303001027 U TH 1303001027U TH 14925 Y TH14925 Y TH 14925Y
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
monocytogenes
dna
time pcr
real
pcr reaction
Prior art date
Application number
TH1303001027U
Other languages
English (en)
Other versions
TH14925U (th
TH14925A3 (th
TH14925C3 (th
Inventor
ลักษณะนิล นางสาวเพลินพิศ
Original Assignee
สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
Filing date
Publication date
Application filed by สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ filed Critical สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
Publication of TH14925Y publication Critical patent/TH14925Y/th
Publication of TH14925U publication Critical patent/TH14925U/th
Publication of TH14925A3 publication Critical patent/TH14925A3/th
Publication of TH14925C3 publication Critical patent/TH14925C3/th

Links

Abstract

------14/12/2561------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ ไพร์เมอร์ Lis092F และ Lis092R ถูกออกแบบและสร้างขึ้นให้มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียL. monocytogenes ที่ตำแหน่งยีน hly ที่สร้าง'โปรตีนฮีโมไลซิน หรือลิสเทียรีโอไลซินโอ และถูกออกแบบให้ทำการเพิ่มขยายจำนวนดีเอนเอเป้าหมายที่มีขนาดเล็กอย่างเหมาะสมเพียง 92 คู่เบส ดังนั้นจึงสามารถใช้ไพร์เมอร์ทั้งสองในปฏิกิริยาพีซีอาร์ที่ให้ผลบงชี้การปนเปื้อนของเชื้อ L. monocytogenes ได้อย่างจำเพาะถูกต้องแม่นยำและรวดเร็ว ไม่ว่าปฏิกิริยาพีซีอาร์หรือ เรียวไทม์พีซีอาร์ จะมีการใช้ดีเอนเอแม่พิมพ์ในปฏิกิริยาที่สกัดมาอย่างบริสุทธิ์หรือสกัดอย่างหยาบจากเซลล์อิสระหรือเซลล์ที่ถูกจับบนอนุภาคแม่เหล็กที่ติดแอนติบอดีก็ตาม โดยมีความไวสูง และมีความจำเพาะต่อ L. monocytogenes สายพันธุ์เดียว ชื้นดีเอนเอบริสุทธิ์ gfp253 ขนาด 253 คู่เบส ทำหน้าที่ตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาพีซีอารีโดยสมบูรณ์ ด้วยความจำเพาะของไพร์เมอร์ Lis092F และ Lis092R ต่อเชื้อ L. monocytogenes และชื้นดีเอนเอ gfp253ทำให้สามารถตรวจสอบหาเชื้อ L. monocytogenes ในอาหารได้อย่างถูกต้องแม่นยำและรวดเร็วภายใน28 ชั่วโมง ------------ ไพร์เมอร์ LisO92F และ LisO92R ถูกออกแบบและสร้างขึ้นให้มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรีย L. monocytogenes ที่ตำแหน่งยึน hly ที่สร้างโปรตีนฮีโมไลซิน หรือลิสเทียริโอไลซินโอ และถูกออกแบบให้ ทำการเพิ่มขยายจำนวนดีเอนเอเป้าหมายที่มีขนาดเล็กอย่างเหมาะสมเพียง 92 คู่เบส ดังนั้นจึงสามารถใช้ ไพร์เมอร์ทั้งสองในปฏิกิริยาพีซีอาร์ที่ให้ผลบ่งชี้การปนเปื้อนของเชื้อ L.monocytogenes ได้อย่างจำเพาะ ถูกต้องแม่นยำและรวดเร็ว ไม่ว่าปฏิกิริยาพีซีอาร์หรือ เรียวไทม์พีซีอาร์ จะมีการใช้ดีเอนเอแม่พิมพ์ใน ปฏิกิริยาที่สกัดมาอย่างบริสุทธิ์หรือสกัดอย่างหยาบจากเซลล์อิสระหรือเซลล์ที่ถูกจับบนอนุภาคแม่เหล็กที่ ติดแอนติบอดีก็ตาม โดยมีความไวสูง และมีความจำเพาะต่อ L.monocytogenes สายพันธุ์เดียว ชิ้นดี เอนเอบริสุทธิ์ gfp253 ขนาด 253 คู่เบส ทำหน้าที่ตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาพีซีอาร์โดยสมบูรณ์ ด้วย ความจะเพาะของไพร์เมอร์ LisO92F และ LisO92R ต่อเชื้อ L.monocytogenes และชิ้นดีเอนเอ gfp253 ทำให้สามารถตรวจสอบหาเชื้อ L.monocytogenes ในอาหารได้อย่างถูกต้องแม่นยำและรวดเร็วภายใน 28 ชั่วโมง

Claims (1)

1. ------14/12/2561------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ1. ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะเจาะจงต่อเชื้อ L. monocytogenes ที่มีลักษณะเฉพาะคือ เพิ่มขยายดีเอนเอเฉพาะในส่วนของยีน hly ที่มีขนาด 92 คู่เบสของ L. monocytogenes ในปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์ ที่มีค่าอุณหภูมิที่แยกดีเอนเอสายคู่ออกเป็นสายเดี่ยว 50% ที่ 78.5-79.5?ซ ที่ซึ่งมีลำดับเบสดังนี้ Lis092F 5’- ATCATCGACGGTAACCTCGG -3’ Lis092R 5’- GTATAGGCAATGGGAACTCC-3’2. ไพร์เมอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง ไพร์เมอร์ดังกส่าวสามารถจับกับดีเอนเอตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาริโดยสมบูรณ์ให้ผลผลิตขนาด 253 คู่เบส ที่มีค่าอุณหภูมิที่แยกดีเอนเอสายคู่ออกเป็นสายเดี่ยว 50% ที่ 82.5-83.5?ซ3. ไพร์เมอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 2 ที่ซึ่ง ชิ้นดีเอนเอตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์โดยสมบูรณ์ของระบบดังกล่าวสามารถใช้ยีนยันการเกิดปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์โดยสมบูรณ์โดยการเพิ่มจำนวนด้วยไพร์เมอร์ชุดเดียวกับไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะเจาะจงต่อเชื้อ L. monocytogenes4. ไพริเมอริ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ถึง 3 ข้อใดข้อหนึ่ง ที่ซึ่ง ปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์ มีขั้นตอนดังนี้ นำดีเอนเอของตัวอย่างที่ต้องการตรวจจำนวน 10 ไมโครลิตร ผสมกับไพร์เมอร์ที่กล่าวในข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ความเข้มข้น 4 นาโนโมล และชื้นดีเอนเอที่กล่าวในข้อถือสิทธิที่ 2 ปริมาณ 0.01 เฟมโตกรัม จำนวน 1ไมโครลิตร เติมสารละลายผสมฟลูออเรสเซนต์สีเขียวจำนวน 10ไมโครลิตร ลงในหลอดทดลองปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์ นำหลอดทดลองใส่เครื่องเรียวไทม์พีซีอาริ ตั้งการทำงานของเครื่องไว้ดังนี้ดีเนเจอเรชั่น 94?ซ เป็นเวลา 10 นาที แล้วตั้งให้เครื่องทำงาน 40 รอบโดยแต่ละรอบตั้งเครื่องไว้ที่ 94?ซ เป็นเวลา 30 วินาที ที่ 60?ซ เป็นเวลา 30 วินาที ที่ 72?ซ เป็นเวลา 5 วินาที และรอบสุดท้ายที่ 72?ซ เป็นเวลา 5 นาที ------------ 1.ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะเจาะจงต่อเชื้อ L.monocytogenes ที่มีลักษณะเฉพาะคือ เพิ่มขยายดีเอนเอ เฉพาะในส่วนของยีน hly ที่มีขนาด 92 คู่เบสของ L.monocytogenes ในปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์ มีค่าอุณหภูมิที่แยกดีเอนเอสายคู่ออกเป็นสายเดี่ยว 50% ที่ประมาณ 78.5-79.5 ซ ที่ซึ่งมีลำดับเบสดังนี้ LisO92F 5'-ATCATCGACGGTAACCTCGG-3' LisO92R 5'-GTATAGGCAATGGGAACTCC-3'
TH1303001027U 2013-09-05 ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะเจาะจงต่อเชื้อ Listeria monocytogenes และดีเอนเอตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์โดยสมบูรณ์ TH14925C3 (th)

Publications (4)

Publication Number Publication Date
TH14925Y true TH14925Y (th) 2019-02-08
TH14925U TH14925U (th) 2019-02-08
TH14925A3 TH14925A3 (th) 2019-02-08
TH14925C3 TH14925C3 (th) 2019-02-08

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2012149188A3 (en) Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples
BR112014025262A8 (pt) “métodos para quantificar um produto específico em uma reação de amplificação de extensão e corte, para detectar uma pluralidade de produtos de reação distintos produzidos ao longo de uma única reação, para monitorar em tempo real uma reação de amplificação de extensão e corte, para monitorar em tempo real uma molécula-alvo de ácido nucleico em uma reação de amplificação de extensão e corte, para monitorar em tempo real uma molécula-alvo de ácido nucleico em uma amostra de teste, e para amplificar um polinucleotídeo, kit, e, oligonucleotídeo isolado
NZ598166A (en) Methods, primers, probes and kits useful for the detection of braf mutations
EP3543362A3 (en) Pcr primer set for bacterial dna amplification, kit for detecting and/or identifying bacterial species, and method for detecting and/or identifying bacterial species
WO2009057829A3 (en) Nucleic acid primer set for detection of drug-resistant strain of hepatitis b virus, assay kit, and method of detecting drug-resistant strain of hepatitis b virus
WO2017160779A3 (en) Methods and kits to identify klebsiella strains
WO2016014240A3 (en) Compositions and methods for the detection and analysis of mycobacterium tuberculosis
WO2011148269A3 (en) Differentiation of species within the mycobacterium tuberculosis complex
MY209857A (en) Compositions and methods for detecting plasmodium species nucleic acid
CN102010913A (zh) 一种甄别李斯特菌的实时荧光pcr检测试剂盒及检测方法
EP3342876A3 (en) Methods for detecting gastrointestinal pathogen nucleic acid
WO2015127201A8 (en) Hiv-2 nucleic acids and methods of detection
CA3156337A1 (en) METHOD FOR DETECTING TARGET NUCLEIC ACID, METHOD FOR DETECTING NUCLEIC ACID BINDING MOLECULE, AND METHOD FOR ASSESSING NUC LEIC ACID BINDING CAPACITY
WO2014101276A3 (zh) 确定核酸样本的两个预定位点是否具有已知突变的方法、试剂盒以及引物
WO2012135620A3 (en) Molecular gram stain
CN102851381A (zh) 快速检测单增李斯特菌的lamp试剂盒
RU2550257C2 (ru) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ТИПИЧНЫХ И АТИПИЧНЫХ ШТАММОВ Yersinia pestis СРЕДНЕВЕКОВОГО БИОВАРА МЕТОДОМ ПЦР С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ УЧЕТОМ РЕЗУЛЬТАТОВ
TH14925U (th) ไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะเจาะจงต่อเชื้อ Listeria monocytogenes และดีเอนเอตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาเรียวไทม์พีซีอาร์โดยสมบูรณ์
CN101921844B (zh) 松材线虫快速检测方法及试剂盒
CN104593495A (zh) 检测食品中沙门氏菌的有扩增内标的pcr方法及试剂盒
WO2017120216A3 (en) Methods and compositions for detecting candida species
CN105200122A (zh) 小麦条锈菌的定量检测试剂盒及其应用
WO2007134208A3 (en) Compositions and methods to detect enterococci nucleic acid
CN104195250B (zh) 用于检测大肠杆菌及其i类整合子的组合物
CN104830857B (zh) 转基因玉米mon88017品系特异定量pcr精准检测的引物和探针及方法