TH24888U - ชุดทดสอบการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์ส-โควี-ทู (SARS-CoV-2) ชนิดไอจีเอ็มและไอจีจีและกรรมวิธีการผลิต - Google Patents

Abstract

ชุดทดสอบการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู (SARSCoV2) ชนิดไอจีเอ็มและไอจีจีและกรรมวิธีการผลิตประกอบด้วยสารละลายบัฟเฟอร์สำเร็จรูป และตลับทดสอบซึ่งบรรจุแผ่นทดสอบอยู่ภายใน โดยแผ่นทดสอบประกอบด้วยกระดาษ ทดสอบ 5 ชนิด ซึ่งกระดาษชนิดไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนจะรองรับแอนติบอดีของหนู ที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ (anti human IgM) และแอนติบอดี ของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ (anti human IgG) ตรงตำแหน่ง เอ็ม” และ จี” ตามลำดับ และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก (FLAG) ตรงตำแหน่ง ซี” เขียนไว้บนตลับทดสอบ เมื่อประกอบรวมกับกระดาษส่วน อื่นๆ ทำเป็นแผ่นทดสอบสำเร็จรูปที่บรรจุในตลับทดสอบ นำไปใช้ประโยชน์ในการ ตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู เบื้องต้นอย่าง รวดเร็ว ไม่ต้องทำในห้อง ปฏิบัติการที่ใช้เครื่องมือเฉพาะ และนำไปสู่การช่วยควบคุมและป้องกันโรคที่มี ประสิทธิภาพยิ่งขึ้น

Claims (2)

1. 11/02/2565(OCR) 1. ชุดทดสอบการตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู ชนิดไอจีเอ็มและไอจีจี ประกอบด้วย 1.1 ตลับพลาสติกสำหรับบรรจุแผ่นทดสอบ มีขนาดกว้าง x ยาว 20 มิลลิเมตรคูณ 90 มิลลิเมตร ที่มีลักษณะคือชิ้นพลาสติกด้านล่างมีแป้นสำหรับวางแผ่นทดสอบอยู่ตรงกลาง ส่วนพลาสติกด้านบน ช่องเปิดปลายสุดลักษณะเป็นหลุมรูกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟเฟอร์ มีตัวอักษร บี” พิมพ์นูนกำกับ ถัดไปเป็นช่องเปิดสี่เหลี่ยมขนาดสำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ มีตัวอักษร เอส” พิมพ์นูนกำกับ และช่องเปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้าตามแนวสี่ยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบมีตัวอักษร เอ็ม” จี” และ ซี” พิมพ์กำกับ ถัดไปท้ายสุดเป็นช่องเปิดรูเล็กๆเรียงตัวเป็นสี่เหลี่ยมจำนวน 20 ช่อง ซึ่งภายในบรรจุกระดาษทดสอบ 5 ชนิด คือ กระดาษชนิดที่ 1 เป็นกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนมีขนาดกว้างคูณยาว4 มิลลิเมตรคูณ 25 มิลลิเมตร ปิดทับตรงส่วนกลางของแผ่นโพลีสไตรีน มีขนาดของรูพรุน 8 ไมโครเมตร ทำหน้าที่เป็นส่วนแสดงผล จะรองรับแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ (anti human IgM) และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ (anti human IgG) ตรงตำแหน่งเอ็ม” และ จี” ตามลำดับ และแอนติบอดีของหนูที่จำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก(FLAG) ตรงตำแหน่ง ซี” เขียนไว้บนตลับทดสอบ กระดาษชนิดที่ 2 เป็นกระดาษใยแก้ว มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 8มิลลิเมตร ทำหน้าที่เป็นแผ่นซับคอนจูเกตของรีคอมบิแนนท์นิวคลีโอแคปซิดโปรตีน(Nucleocapsid Protein NP) ของเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู ซึ่งมีการเชื่อมต่อกับโพลีเปปไตด์แฟลกปิดทับ เหลื่อมซ้อนบนกระดาษชนิดที่ 1 23 มิลลิเมตร กระดาษชนิดที่ 3 เป็นกระดาษใยแก้วละเอียด (microglassfiber) มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 10 มิลลิเมตร เป็นส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลายปิดทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษกระดาษชนิดที่ 2 24 มิลลิเมตร กระดาษชนิดที่ 4 เป็นกระดาษใยฝ้าย มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 22มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับนํ้า 31 มิลลิกรัมต่อหนึ่งตารางเซนติเมตร เป็นส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลาย ปิดทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษชนิดที่ 324 มิลลิเมตร โดยติดขอบปลายล่างสุดของแผ่นทดสอบ กระดาษชนิดที่ 5 เป็นกระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ มีขนาดกว้าง 4 มิลลิเมตรคูณยาว 22 มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับนํ้า 128 มิลลิกรัมต่อตารางเซนติเมตร ปิดทับที่ส่วนปลายบนสุดของแผ่นทดสอบและเหลื่อมทับส่วนของกระดาษชนิดที่ 1 23 มิลลิเมตร ทำหน้าที่ดูดซับตัวอย่างและสารละลายทั้งหมด 1.2 สารละลายทัพเฟอร์สำเร็จรูป ประกอบด้วยทิสเบส 0.3 เปอร์เซนด์เคซีน 0.5เปอร์เซนต์โซเดียมเอไซด์ 0.1 เปอร์เซ็นต์ บรรจุในขวดพลาสติก2. กรรมวิธีการผลิตชุดทดสอบตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู ชนิดไอจีเค็มและไอจีจีมี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งมีขั้นตอนดังต่อไปนี้ 2.1 การเตรียมแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ตำแหน่ง เอ็ม” เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ความเข้มข้น 0.8 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง จี” เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก ความเข้มข้น0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง ซี” 2.2 การพ่นแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) โดยลอกกระดาษกาวซึ่งอยู่ตรงส่วนกลางของแผ่นโพลีสไตรีน ที่มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร ออกหลังจากนั้นปิดทับด้วยแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ขนาดกว้าง 25 มิลลิเมตรคูณยาว300 มิลลิเมตร ในลักษณะเส้นตรงตามความยาวของแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนจากนั้นพ่นปริมาณสาร 1 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ ที่ตำแหน่ง เอ็ม” แอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ที่ตำแหน่ง จี” และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก ที่ตำแหน่ง ซี” ดังกล่าวที่พิมพ์ไว้บนตลับพลาสติก จากนั้นนำแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่พ่นแล้ว ไปอบแห้ง 2 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส แล้วเก็บที่อุณหภูมิห้องในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.3 การเตรียมโปรตีนนิวคลีโอแคปซิดคอนจูเกตและการเตรียมกระดาษใยแก้ว เตรียมนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม ในสารละลายบอเรตบัฟเฟอร์ 100ไมโครลิตร เตรียมโกลด์คอลลอยด์ (colloidal gold) มีค่าดูดกลืนแสง(OD) ที่ความยาวคลื่น525 นาโนเมตร เท่ากับ 1.0 จำนวนบวกหรือจำนวนลบ 0.1 โดยปรับความเป็นกรดด่าง (pH) ให้เท่ากับ 9.00 จำนวนบวกหรือจำนวนลบ 0.1 การคอนจูเกต นำนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน 100ไมโครลิตร เติมลงในโกลด์คอลลอยด์ ปริมาตร 1,000 ไมโครลิตร ผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 30 นาที หยุดปฏิกิริยาโดยการเติม 10 เปอร์เซ็นต์บีเอสเอ ให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 1 เปอร์เซ็นต์ ปั่นตกตะกอนที่ 12000g เวลา 30 นาที 4 องศาเซลเซียส เก็บส่วนตะกอนมาละลายด้วยสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ มีค่าดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตรเท่ากับ 19 จำนวนบวกหรือจำนวนลบ 1 การเตรียมกระดาษใยแก้ว ซึ่งมีขนาดกว้างคูณยาว 100 มิลลิเมตร คูณ 300มิลลิเมตร โดยแช่ในสารละลายบอเรตบัฟเฟอร์ จากนั้นนำไปอบแห้งที่อุณหภูมิ 37องศาเซลเซียส เวลา 3 ชั่วโมง 2.4 การพ่นโปรตีนคอนจูเกตลงบนกระดาษใยแก้วที่เตรียมไว้ ด้วย เครื่องพ่นสารที่ปริมาณ 10 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยพ่นให้แต่ละเส้นยาว 300 มิลลิเมตร นำไปอบแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นใช้ใบมีดกรีดตัดตามแนวของคอนจูเกตในแต่ละแถว ให้มีขนาด 8 มิลลิเมตร คูณ 300 มิลลิเมตร แล้วเก็บที่อุณหภูมิห้อง ในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.5 การประกอบส่วนต่างๆ ของชุดทดสอบ นำกระดาษที่ใช้ในการผลิตชุดทดสอบทั้งหมดที่เตรียมไว้ข้างต้นปิดทับกันดังนี้แผ่นโพลีสไตรีนมีกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่เคลือบด้วยแอนติบอดีชนิดต่างๆแปะอยู่กึ่งกลาง ปลายด้านหนึ่งของกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ถูกซ้อนทับด้วยกระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ ส่วนปลายอีกด้านหนึ่งซ้อนทับด้วยกระดาษใยแก้วที่เคลือบด้วยนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ตามด้วยกระดาษใยแก้วละเอียด และติดขอบปลายล่างสุดด้วยกระดาษใยฝ้าย กระดาษแต่ละชนิดซ้อนทับกัน 23 มิลลิเมตร แผ่นโพลีสไตรีน 1 แผ่น มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร ตัดแผ่นทดสอบตามแนวกว้างเป็นชิ้นเล็ก ๆ ด้วยเครื่องตัดให้มีความกว้าง 4มิลลิเมตร จะได้แผ่นทดสอบที่มีขนาดสำหรับประกอบเป็นชุดทดสอบกว้าง 4 มิลลิเมตรคูณยาว 80 มิลลิเมตร จากนั้นนำแผ่นทดสอบที่ตัดแล้ว บรรจุในตลับทดสอบในตำแหน่งที่กำหนด โดยตลับพลาสติกชิ้นล่าง สำหรับวางแผ่นทดสอบและชิ้นพลาสติกบนซึ่งมีรูเปิดตำแหน่งต่างๆ คือปลายสุดลักษณะรูเปิดเป็นหลุมกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟเฟอร์ ถัดไปเป็นรูเปิดสี่เหลี่ยม สำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ และช่องเปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้าตามแนวยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบ มีตัวอักษร เอ็ม”จี” และ ซี” พิมพ์กำกับ เก็บรักษาในซองอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 1. ส่วนประกอบของชุดทดสอบตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู ชนิด ไอจีเอ็มและไอจีจี ประกอบด้วย 1.1 ตลับพลาสติก สำหรับบรรจุแผ่นทดสอบ มีขนาดกว้าง x ยาว ประมาณ 20 มิลลิเมตรคูณ 90 มิลลิเมตร ที่มีลักษณะคือชิ้นพลาสติกด้านล่างมีแป้นสำหรับวางแผ่น ทดสอบอยู่ตรงกลาง ส่วนพลาสติกด้านบน ช่องเปิดปลายสุดลักษณะเป็นหลุมรูกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟเฟอร์ มีตัวอักษร บี” พิมพ์นูนกำกับ ถัดไปเป็นช่องเปิด สี่เหลี่ยมขนาด สำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ มีตัวอักษร เอส” พิมพ์นูนกำกับ และช่อง เปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้าตามแนวยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบ มีตัวอักษร เอ็ม” จี” และ ซี” พิมพ์กำกับ ถัดไปท้ายสุดเป็นช่องเปิดรูเล็กๆเรียงตัว เป็นสี่เหลี่ยมจำนวน 20 ช่อง ซึ่งภายในบรรจุกระดาษทดสอบ 5 ชนิด คือ กระดาษชนิดที่ 1 เป็นกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนมีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 25 มิลลิเมตร ปิดทับตรงส่วนกลางของแผ่นโพลีสไตรน มีขนาดของ รูพรุน 8 ไมโครเมตร ทำหน้าที่เป็นส่วนแสดงผล จะรองรับแอนติบอดีของหนูที่จับ จำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเค็มของมนุษย์ (anti human IgM) และแอนติบอดีของ หนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์(anti human IgG) ตรงตำแหน่ง เอ็ม” และ จี” ตามลำดับ และแอนติบอดีของหนูที่จำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก (FLAG) ตรงตำแหน่ง ซี” เขียนไว้บนตลับทดสอบ กระดาษชนิดที่ 2 เป็นกระดาษใยแก้ว มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 8 มิลลิเมตร ทำหน้าที่เป็นแผ่นซับคอนจูเกตของรีคอมบิแนนท์นิวคลีโอแคปซิดโปรตีน (Nucleocapsid Protein NP) ของเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู ซึ่งมีการเชื่อมต่อกับโพลีเปป ไตด์แฟลก ปิดทับ เหลื่อมซ้อนบนกระดาษชนิดที่ 1 ประมาณ 23 มิลลิเมตร กระดาษชนิดที่ 3 เป็นกระดาษใยแก้วละเอียด (microglassfiber) มีขนาดกว้าง คูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 10 มิลลิเมตร เป็นส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลาย ปิด ทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษกระดาษชนิดที่ 2 ประมาณ 24 มิลลิเมตร กระดาษชนิดที่ 4 เป็นกระดาษใยฝ้าย มีขนาดกว้างคูณยาว 4 มิลลิเมตรคูณ 22 มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับน้ำ 31 มิลลิกรัมต่อหนึ่งตารางเซนติเมตร เป็น ส่วนที่ซับตัวอย่างและรองรับสารละลาย ปิดทับเหลื่อมซ้อนกับกระดาษชนิดที่ 3 ประมาณ 24 มิลลิเมตร โดยติดขอบปลายล่างสุดของแผ่นทดสอบ กระดาษชนิดที่ 5 เป็นกระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ มีขนาดกว้าง 4 มิลลิเมตร คูณยาว 22 มิลลิเมตร มีความสามารถในการดูดซับน้ำ 128 มิลลิกรัมต่อตารางเซนติ เมตร ปิดทับที่ส่วนปลายบนสุดของแผ่นทดสอบและเหลื่อมทับส่วนของกระดาษชนิด ที่ 1 ประมาณ 23 มิลลิเมตร ทำหน้าที่ดูดซับตัวอย่างและสารละลายทั้งหมด 1.2 สารละลายบัพเฟอร์สำเร็จรูป ประกอบด้วยทิสเบส 0.3 เปอร์เซนด์ เคซีน 0.5 เปอร์เซนต์ โซเดียมเอไซด์ 0.1 เปอร์เซ็นต์ บรรจุในขวดพลาสติก

2. กรรมวิธีการผลิตชุดทดสอบตรวจหาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสซาร์สโควีทู ชนิด ไอจีเค็มและไอจีจีมี ขั้นตอนดังต่อไปนี้ 2.1 การเตรียมแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ตำแหน่ง เอ็ม” เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ ความเข้มข้น 0.8 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง จี” เตรียมแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะกับโพลีเปปไตด์แฟลก ความเข้มข้น 0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ในสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ที่ตำแหน่ง ซี” 2.2 การพ่นแอนติบอดี ที่เป็นตัวจับ (capture) โดยลอกกระดาษกาวซึ่งอยู่ตรงส่วน กลางของแผ่นโพลีสไตรีน ที่มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร ออก หลังจากนั้นปิดทับด้วยแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ขนาดกว้าง 25 มิลลิเมตรคูณยาว 300 มิลลิเมตร ในลักษณะเส้นตรงตามความยาวของแผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน จากนั้นพ่นปริมาณสาร 1 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะ กับแอนติบอดีชนิดไอจีเอ็มของมนุษย์ที่ตำแหน่ง เอ็ม” แอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะ กับแอนติบอดีชนิดไอจีจีของมนุษย์ ที่ตำแหน่ง จี” และแอนติบอดีของหนูที่จับจำเพาะ กับโพลีเปปไตด์แฟลก ที่ตำแหน่ง ซี” ดังกล่าวที่พิมพ์ไว้บนตลับพลาสติก จากนั้นนำ แผ่นไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่พ่นแล้ว ไปอบแห้ง 2 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซล เซียส แล้วเก็บที่อุณหภูมิห้องในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.3 การเตรียมโปรตีนนิวคลีโอแคปซิดคอนจูเกตและการเตรียมกระดาษใยแก้ว เตรียมนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม ในสารละลาย บอเรตบัฟเฟอร์ 100 ไมโครลิตร เตรียมโกลด์คอลลอยด์ (colloidal gold) มีค่าดูดกลืนแสง(OD) ที่ความยาวคลื่น 525 นาโนเมตรเท่ากับ 1.0 (สัญลักษณ์) 0.1โดยปรับความเป็นกรดด่าง (pH) ให้เท่ากับ9.00 (สัญลักษณ์) 0.1 การคอนจูเกต นำนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน 100 ไมโครลิตร เติมลงในโกลด์ คอลลอยด์ ปริมาตร 1,000 ไมโครลิตร ผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 30 นาที หยุดปฏิกิริยา โดยการเติม 10 เปอร์เซ็นต์ บีเอสเอ ให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 1 เปอร์เซ็นต์ ปั่นตก ตะกอนที่ 12000g เวลา 30 นาที 4 องศาเซลเซียส เก็บส่วนตะกอนมาละลายด้วยสาร ละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ มีค่าดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 540 นาโนเมตรเท่ากับ 19 (สัญลักษณ์) 1 การเตรียมกระดาษใยแก้ว ซึ่งมีขนาดกว้างคูณยาว 100 มิลลิเมตรคูณ 300 มิลลิเมตร โดยแช่ในสารละลายบอเรตบัฟเฟอร์ จากนั้นนำไปอบแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เวลา 3 ชั่วโมง 2.4 การพ่นโปรตีนคอนจูเกตลงบนกระดาษใยแล้วที่เตรียมไว้ ด้วย เครื่องพ่นสาร ที่ปริมาณ 10 ไมโครลิตรต่อเซนติเมตร โดยพ่นให้แต่ละเส้นยาว 300 มิลลิเมตร นำไป อบแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นใช้ใบมีดกรีดตัดตามแนว ของคอนจูเกตในแต่ละแถว ให้มีขนาด 8 มิลลิเมตร คูณ 300 มิลลิเมตร แล้วเก็บที่ อุณหภูมิห้อง ในถุงอลูมิเนียมฟอยล์ ใส่สารดูดความชื้นและปิดสนิท 2.5 การประกอบส่วนต่างๆ ของชุดทดสอบ นำกระดาษที่ใช้ในการผลิตชุดทดสอบทั้งหมดที่เตรียมไว้ข้างต้นปิดทับกันดังนี้ แผ่นโพลีสไตรนมีกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรนที่เคลือบด้วยแอนติบอดีชนิดต่างๆ แปะอยู่กึ่งกลาง ปลายด้านหนึ่งของกระดาษไนโตรเซลลูโลสเมมเบรน ถูกซ้อนทับด้วย กระดาษที่ทำจากวัสดุดูดซับ ส่วนปลายอีกด้านหนึ่งซ้อนทับด้วยกระดาษใยแก้วที่ เคลือบด้วยนิวคลีโอแคปซิดโปรตีน ตามด้วยกระดาษใยแก้วละเอียด และติดขอบปลาย ล่างสุดด้วยกระดาษใยฝ้าย กระดาษแต่ละชนิดซ้อนทับกัน 23 มิลลิเมตร แผ่นโพลี สไตรีน 1 แผ่น มีขนาดกว้าง 80 มิลลิเมตร คูณยาว 300 มิลลิเมตร ตัดแผ่นทดสอบตามแนวกว้างเป็นชิ้นเล็กๆ ด้วยเครื่องตัดให้มีความกว้าง 4 มิลลิเมตร จะได้แผ่นทดสอบที่มีขนาดสำหรับประกอบเป็นชุดทดสอบกว้าง 4 มิลลิเมตร คูณยาว 80 มิลลิเมตร จากนั้นนำแผ่นทดสอบที่ตัดแล้ว บรรจุในตลับทดสอบในตำแหน่ง ที่กำหนด โดยตลับพลาสติกชิ้นล่าง สำหรับวางแผ่นทดสอบและชิ้นพลาสติกบนซึ่งมีรู เปิดตำแหน่งต่างๆ คือปลายสุดลักษณะรูเปิดเป็นหลุมกลม สำหรับหยดสารละลายบัฟ เฟอร์ ถัดไปเป็นรูเปิดสี่เหลี่ยม สำหรับใส่ตัวอย่างทดสอบ และช่องเปิดสี่เหลี่ยมผืนผ้า ตามแนวยาวของแผ่นเมมเบรน เป็นหน้าต่างที่แสดงผลการทดสอบ มีตัวอักษร เอ็ม” จี”และซี” พิมพ์กำกับ เก็บรักษาในซองอลูมิเนียมฟอยล์ใส่สารดูดความชื้นและ ปิดสนิท