TH39471A - อะพอพโทซิสที่ควบคุมโดยตนเองของเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบ โดยการรักษาระดับจีน - Google Patents

Abstract

DC60 (19/01/43) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับไคเมอริคนิวคลีอิคแอซิด และต่อการชักนำให้มีผลรักษาของอะ พอพโทซิสในเซลล์เกี่ยวข้อง กับการอักเสบที่ได้รับการปลุกฤทธิ์ หรือเซลล์ที่อยู่ที่ บริเวณเกิดการอักเสบ โดยใส่ไคเมอริคนิวคลีอิคแอซิดเข้าไป ในเซลล์เหล่านั้น ไคเมอริคนิวคลีอิคแอซิดมีส่วนเสริมโปรโม เตอร์ TNFอัลฟา อย่างน้อยหนึ่งส่วนจับอยู่กับชุดที่ทำงานได้ ของโปรโมเตอร์ TNFอัลฟา และที่เชื่อมต่อกับ อย่างน้อยหนึ่งชุด ของจีนที่ชักนำอะพอพโทซิสได้ซึ่งเชื่อมต่อกับ 3'UTR อีก ที จีนที่ชักนำโดยอะพอพโท ซิสคือ แกรนไซม์ บี การประดิษฐ์ นี้ยังเกี่ยวข้องกับวิธีสร้างและใช้กรดนิวคลีอิคไคเมอริ คอะพอพโท ซิสที่ควบคุมได้โดยตนเอง และองค์ประกอบทาง เภสัชกรรมที่มีมันอยู่เพื่อรักษาโรคจากการอักเสบ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับไคเมอริคนิวคลีอิคแอซิด และต่อการชักนำให้มีผลรักษาของอะพอพโทซิสในเซลล์ เกี่ยวข้อง กับการอักเสบที่ได้รับการปลูกฤทธิ์ หรือเซลล์ที่อยู่ที่ บริเวณเกิดการอักเสบ โดยใส่ไคเมอริคนิวคลีอิคแอซิด เข้าไป ในเซลล์เหล่านั้น ไคเมอริคนิวคลีอิคแอซิด มีส่วนเสริมโปรโม เตอร์ (สูตร) อย่างน้อยหนึ่งส่วนจับอยู่กับชุดที่ทำงานได้ ของโปรโมเตอร์(สูตร และที่เชื่อมต่อกับอย่างน้อยหนึ่งชุด ของจีน ที่ชักนำอะพอพโทซิส ได้ซึ่งเชื่อมต่อกับ 3''UTR อีก ที จีนที่ชักนำโดยอะพอพโทซิส คือ แกรนไซม์ บี การประดิษฐ์ นี้ยังเกี่ยวข้องกับวิธีสร้าง และใช้กรดนิวคลีอิคไคเมอริ คอะพอพโทซิสที่ควบคุมได้โดยตนเอง และองค์ประกอบทาง เภสัชกรรม ที่มีมันอยู่ เพื่อรักษาโรคจากการอักเสบ

Claims (18)

1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิคไคเมอริค ที่ประกอบด้วย :บริเวณเสริมโปรโมเตอร์ (สูตร) อย่างน้อยหนึ่งบริเวณ ที่ เชื่อมต่อกับโปรโมเตอร์ (สูตร) บริเวณเสริมประกอบด้วยกรด นิวคลีอิค SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:11, SEQ ID NO:12 หรือการแทนที่แบบอนุรักษ์ หรือแอลเลลิคแวเรียนท์ของ มัน โปรโมเตอร์ (สูตร) ยังจับอยู่กับลำดับกรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสโปรตีนแกรนไซม์ บี หรือส่วนแทนที่แบบอนุรักษ์ หรือแอลลีลิคแวเรียนท์ของมัน ซึ่งจะจับเกาะกับลำดับกรดนิว คลีอิค 3''UTR อีกที

2. โมเลกุลกรดนิวคลีอิค ไคเมอริคตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดย ที่มีบริเวณเสริมโปรโมเตอร์ (สูตร) สองถึงห้าส่วนอยู่ และ โดยที่บริเวณเสริมใด ๆ ประกอบด้วย SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:12 หรือส่วนร่วมของมัน

3. โมเลกุลกรดนิวคลีอิค ไคเมอริคตามข้อถือสิทธิที่ 2 โดย ที่มีบริเวณเสริมโปรโมเตอร์ (สูตร) ประกอบด้วยกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, หรือส่วนแทนที่แบบ อนุรักษ์ หรือแอลเลลิคแวเรียนท์ของมัน

4. โมเลกุลกรดนิวคลีอิค ไคเมอริคตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดย บริเวณเสริมโปรโมเตอร์ (สูตร) ประกอบด้วยกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14 และส่วนแทนที่แบบอนุรักษ์ หรือ แอลเลลิคแวเรียนท์ของมัน

5. โมเลกุลกรดนิวคลีอิคไคเมอริคตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดย ที่ 3''UTR นั้นไลเกททางด้านขวามือ ของลำดับกรดนิวคลีอิคแก รนไซม์ บี

6. สารผสมทางเภสัชกรรมที่ประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิค ไคเมอริคตามข้อถือสิทธิที่ 1

7. การใช้สารผสมตามข้อถือสิทธิที่ 6 สำหรับการเตรียมยา สำหรับรักษาความผิดปกติของการอักเสบ

8. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 7 โดยที่ความผิดปกติของการ อักเสบ เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยรูมาตอยด์อาร์ไธรทิส มัล ติเพอลสเครอโรซิส กลุ่มอาการ Guillian-Barre โรค Crohn''s ลำไส้อักเสบ และแผลในลำไส้ ซอเรียซิส โรคระหว่างกราฟกับ เจ้าบ้าน ลูปุสอีริธรีมาโตซุส เบาหวานที่ขึ้นกับอินซูลิน โซเลียติคอาร์ไธรทิส ซาร์คอยโดซิสอาการปวดอักเสบจากการแพ้ แองไคโลซิงสปอนไดลิติส กลุ่มอาการ Reiter''s และซิสเตมิคส เคลอโรซิส

9. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่ความผิดปตกของการ อักเสบคือ รูมาตอยด์อาร์ไธรทิส

10. กรรมวิธีสำหรับสร้างโมเลกุลกรดนิวคลีอิคไคเมอริคที่ ประกอบด้วยอย่างน้อยส่วนเสริมโปรโมเตอร์ (สูตร) หนึ่งส่วน จับอยู่กับชุดที่ทำงาน ได้ต่ำสุดของโปรโมเตอร์ (สูตร) ที่ เชื่อมต่อกับอย่างน้อยหนึ่งชุดของโมเลกุลกรดนิวคลีอิคที่ ชักนำอะพอพโทซิส ได้ซึ่งเชื่อมต่อกับลำดับกรด นิวคลีอิค (สูตร) อีกที โดยที่การแสดงลักษณะของกรดนิวคลีอิคที่ชันำ โดยอะพอพโทซิสนั้นขับโดยโปรโมเตอร์ (สูตร) ประกอบด้วยขั้น ตอนดังต่อไปนี้ : (a) การเพิ่มโมเลกุลกรดนิวคลีอิคที่ประกอบด้วย โปรโมเตอร์ (สูตร) โดยปฏิกิริยาพอลิเมอเลสเซน โดยใช้ไพร์มเมอร์ที่ครอบ คลุมส่วนสร้างที่มีการตัดของโปรโมเตอร์(สูตร) (b) โคลนกรดนิวคลีอิคที่ได้รับการเพิ่มจำนวน โดย PCR ที่ ได้ในขั้นตอน (a) ทางด้านซ้ายมือ ของลำดับกรดนิวคลีอิค ตัว รายงานเพื่อสร้างส่วนสร้างขึ้น (c) ทดสอบส่วนสร้างที่ได้ในขั้นตอน (b) เพื่อดูการแสดง ลักษณะที่เป็นแบบคอนสติจูทีฟ หรือชักนำได้ในเซลล์ไลน์ที่ สร้าง (สูตร) อย่างน้อยหนึ่งอัน (d) เลือกโปรโมเตอร์ (สูตร) ที่รับผิดชอบต่อการแสดงลักษณะ ที่ชักนำได้ของส่วนรายงานในเซลล์ไลน์ (e) บริเวณโปรโมเตอร์ (สูตร) ที่เพิ่มปริมาณ โดย PCR ที่ เสริมการแสดงลักษณะของส่วนรายงาน เพื่อให้ได้ส่วนเริม และไลเกทอย่างน้อยหนึ่งชุดของส่วนเสริมทางด้านซ้ายมือของ โปรโมเตอร์ (f) สอดใส่อย่างน้อยหนึ่งชุดของโมเลกุลกรดนิวคลีอิคที่ชัก นำอะพอพโทซิสทางด้ายซ้ายมือของโปรโมเตอร์ (สูตร) โดยการแทน ที่ส่วนรายงานด้วยส่วนสร้างที่มีการตคของกรดนิวคลีอิคที่ ชักนำโดยอะพอพโทซิส และ (g) การเพิ่มปริมาณของ (สูตร) ที่เพิ่มปริมาณโดย PCR และ การไลเกททางด้านขวามือของโมเลกุล กรดนิวคลีอิคที่ชักนำ โด ยอะพอพโทซิส เพื่อให้ได้โมเลกุลกรดนิวคลีอิคไคเมอริค

11. กรรมวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่มีการสอดใส่หน่วย เสริมสองชุด หรือมากกว่าทางด้านซ้ายมือของโปรโมเตอร์

12. กรรมวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ลำดับกรดนิวคลีอิ ครายงานเป็นลูซิเฟอเรส

13. กรรมวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ส่วนเสริมประกอบ ด้วยลำดับที่คัดเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:11, และ SEQ ID NO:12

14. กรรมวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 โดยที่กรดนิวคลีอิคที่ ชักนำ โดยอะพอพโทซิส คือแกรนไซม์ บี หรือส่วนแทนที่แบบ อนุรักษ์หรือแอลเลลิคแวเรียนท์ของมัน

15. กรรมวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 ที่สร้างโมเลกุลกรดนิว คลีอิคไคเมอริคที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:14 และส่วนแทนที่แบบอนุรักษ์ หรือแอลเล ลิคแวเรียนท์ของมัน

16. กรรมวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่เซลล์ไลน์สำหรับ การทดสอบส่วนสร้างนั้นคัดเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย T-ลิมโฟบลาสท์ตอยด์ มัยอีโลโมโนไซติค โมโนไซติค ไฟโบรบ ลาสท์ ซินโนวิโอไซท์ ของคนที่เพาะเลี้ยง และ เซลล์ปฐมภูมิ ที่อยู่ใน RA

17. กรรมวิธีสำหรับคัดแยกจีน โคมีแนนท์ลบที่ประกอบด้วย : การทรานสเฟคกลุ่มเซลล์ที่ไม่สร้าง (สูตร) ด้วยลำดับที่ ประกอบด้วย โมเลกุลนิวคลีอิคไคเมอริคตามข้อถือสิทธิที่ 1 ; กระตุ้นการแสดงลักษณะของลำดับที่สอดใส่ ; และเลือกเซลล์รอด ตายที่มีจีนโตมิแนนท์ลบ

18. กรรมวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 17 โดยที่ลำดับประกอบด้วย โมเลกุลกรดนิวคลีอิคไคเมอริคตามข้อถือสิทธิที่ 2 (ข้อถือสิทธิ 18 ข้อ, 3 หน้า, 13 รูป)