TH41437A - วิธีสำหรับผลิต 1,3-โปรเพรไดออลโดยสิ่งมีชีวิตรีคอมบิแนนท์ - Google Patents

Abstract

DC60 (24/06/42) ได้ให้สิ่งมีชีวิตรีคอมบิแนนท์ที่ประกอบด้วยที่ประมวลรหัสกลีเชอรอล-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กลีเชอรอล-3-ฟอสฟาเทส กลีเซอรอลดีไฮดราเทส และ 1,3-โปรเพนไดออลออกซิโดรีดัก เทสแอ คติวิตี ที่มีประโยชน์ในการผลิต 1,3-โปรเพนไดออลจากสับสเตรท คาร์บอนต่าง ๆ ได้ให้สิ่งมีชีวิตรีคอมบิแนนท์ที่ประกอบด้วยที่ประมวบรหัสกลีเชอรอล-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสกลีเชอรอล-3-ฟอสฟาเทส กลีเช อรอลดีไฮดราเทส และ 1,3-โปรเพนไดออลออกซิโดรีดัก เทสแอ คติวิตีที่มีประโยชน์ในการผลิต 1,3-โปรเพนไดออลจากสับสเตรท คาร์บอนต่าง ๆ

Claims (14)

1. วิธีสำรหับผลิต 1,3-โปรพนไดออลจากสิ่งมีชีวิตรีคอมบิแนนท์ที่ประกอบด้วย (i) การทรานสฟอร์มเซล์เจ้าบ้านที่เหมาะสมด้วยทรานสฟอร์เม ชันแคสเสทที่ประกอบด้ยอย่างหนึ่งตัวของ (a) จีนที่ประมวลรหัส กลีเชอรอล-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสแอ คติวิดี (b) จีนที่ประมวลรหัส กลีเชอรอล-3-ฟอสเฟตฟอสฟาเทสแอ คติวิตี้ (c) จีนที่ประมวลรหัสดีไฮดราเทสแอคติวิตี (d) จีนที่ประมวลรหัส 1,3-โปรเพนไดออลออกชิโดรีดักเทสแอ คติวิตี โดยมีข้อแม้ว่าหากทรานฟอร็มเมชันแคสเสทประกอบด้วย จีนที่น้อยกว่าจีน (a) - (d) แล้วเจ้าบ้านที่เหมาะสมจะ ประกอบด้วยจีนภายในที่เข้าบ้านที่ได้รับการทรานสฟอร์มที่ ได้ประกอบด้วยอย่างน้องหนึ่งตัวของแต่ละจีนของจีน (a) - (d) (ii) การเลี้ยงเซลล์เจ้าบ้านที่ได้รับการทรานสฟอร์มโดยมี แหล่งคาร์บอนอย่างน้อยหนึ่งตัวที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบ ด้วยโมโนแซคคาไรด์ โอลิโกแซคคาไรด์ พอลิแซคาไรด์ หรือ สับสเตรทคาร์บอนเดี่ยวที่สร้าง 1.3 - โปรเพนไดออล และ (iii) การเก็บ 1,3-โปรเพนไดออล

2. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 โดยที่ทรานสฟอร์เมชันเดสเสท ประกอบด้วยจีนทั้งหมดของ (a) - (d)

3. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 ที่เซลล์เจ้าบ้านทีเหมาะสม เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย แบทีเรียและราสายใย

4. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 3 ที่เซลล์เจ้าบ้านทีเหมาะสม เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย Citrobacter, Enterobacter, Clostridium, Klebsiella, Aerobacter, Lactobacillus, Aspergillus, Saccharomyces, Schizosaccharomyces, Zygosaccharomyces, Pichia, Kluyveromyces, Candida , Hansenula, Debaryomyces, Mucor, Torulopisis, Methylobacter, Escherichia, Salmonella, Bacillus, Streptomyces, และ Pseudomonas

5. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 4 ที่เซลล์เจ้าบ้านที่เหมาะสม นั้นเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย E.coli หรือ Saccharomyces spp

6. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 โดยที่สิงมีชีวิตเจ้าบ้านที่ ได้รับการทรานสฟอร์มคือ Saccharomyces spp ที่ทรานฟอร์ม ด้วยทรนสฟอร์เมชันเดสเสทที่ประกอบด้วยจีน dha1,dha2,dha3, และ dhaT โดยที่จีนนั้นแทรกตัวเข้าอย่างคงตัวเข้าไปในจีโนม ของ Saccharomyces cerevisiae

7. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 โดยที่สิ่งมีชีวิตเจ้าบ้าน ที่ได้รับการทรานสฟอร์มคือ Klebsiella spp. ที่ทรานฟอร์ม ด้วยทรานฟอร์เมชันแคสเสที่ประกอบด้วยจีน GPD1 และ GPD2

8. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 ที่แหล่งคาร์บอนคือกลูโคส

9. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 ที่จีนที่ประมวบรหัสเอนไซม์ กลีเซอรอล-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสนั้ปนะกอบด้ยจีนที่สมนัยกับ ลำดับกรดอะมิโนที่ให้ไว้ใน SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, และ SEQ ID NO:13, ลำดับกรดอะมิโนนั้นครอบคลุมถึงการแทนที่ กรดอะมิโน การตัดออก หรือ การสอดใส่เช้า ที่ไม่แปรเปลี่ยน สมบัติการทำงานของเอนไซม์กลีเซอรอล-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรีจีเนส

10. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 ที่จีนประมวบรหัสเอนไซม์กลี เซอรอล-3-ฟอสฟาเทสสมนัยกับลำดับกรดอะมิโนที่ให้ใน SEQ ID NO:33 และใน SEQ ID NO:F17 ลำดับกรดอะมิโนนั้นครอบคลุมถึง การแทนที่กรดอะมิโน การตัดออก หรือ การสอดใส่เข้า ที่ไม่ แปรเปลี่ยนสมบัติการทำงานของเอนไซม์กลีเขอลรอล-3-ฟอสฟาเทส

11. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่1 ที่จีนประมวลรหัสเอนไซม์กลี เซอรอล-3-ฟอสฟาเทสสมนัยกับลำดับกรดอะมิโนที่ให้ใน SEQ ID NO:18 และโดยที่ลำดับกรดอะมิโนนั้นครอบคลุมถึงการแทนที่ กรดอะมิโน การตัดออก หรือ การสอดใส่เข่า ที่ไม่แปรเปลี่ยน สมบัติการทำงานของเอนไซม์กลีเชอรอลไตเนส

12. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 ที่จีนที่ประมวลรหัสเอมไซม์ ดีไฮดราเทสที่ประกอบด้วย dha1,dha2,dha3 และ dhaT ที่สมนัย ตามลำดับกับลำดับกรดอะมิโนที่ให้ใน SEQ ID NO: 34, SEQ ID NO: 35, และ SEQ ID NO: 36, ลำดับกรดอะมิโนนั้นครอบคลุมถึง การแทนที่กรดอะมิโน การตจัดออก หรือ การสอดใส่เข้าที่ไม่ แปรเปลี่ยนยสมบัติการทำงานของเอนไซม์ดีไฮดราเทส

13. วิธีตามข้อถือสิทธิ์ที่ 1 ที่จีนที่ประมวลรหัสเอนไซม์ 1,3-โปรเพนไดออลออกซิโดรรีดักเทสที่สมนัยกับลำดับกรดอะมิโน ที่ให้ใน SEQ ID NO: 37 ลำดับกรดอะมิโนนั้นครอบคลุมถึงการ แทนที่กรดอะมิโน การตัดออก หรือ การสอดใส่เข้า ที่ไม่แปร เปลี่ยนสมบัติการทำงานของเอนไซม์ 1,3-โปรเพนไดออลออกซิโดรี ทักเทส

14. เซลล์เจ้าบ้านที่ได้รับการทรานสฟอร์มที่ประกอบด้วย (a) กลุ่มของจีนที่ประกอบด้วย (1) จีนที่ประมวบรหัสเอนไซม์กลีเขอรอล-3-ฟอสเฟตไฮโดรจีเนส ที่นสมนัยกับลำดับกรดอะมิโนที่ให้ไว้ใน SEQ ID NO: 11 (2) จีนที่ประมวลรหัสเอนไซม์กลีเขอรอล-3-ฟอสเฟตฟอสฟาเทส ที่สมนัยกับลำดับกรดอะมิโนที่ให้ไว้ใน SEQ ID NO: 17 (3) จีนที่ประมวลรหัสเอนไซม์กลีเขอรอล-3-ฟอสเฟตไฮโดรจีเนส ที่นสมนัยกับลำดับกรดอะมิโนที่ให้ไว้ใน SEQ ID NO: 34 (4) จีนที่ประมวลรหัสหน่วยย่อย B ของเอนไซม์กลีเชอรอลดี ไฮดราเสทที่สมนัยกับสำคัญกรดอะมิโนที่ให้ไว้ใน SEQ ID NO: 35 (5) จีนที่ประมวลรหัสหน่วยย่อย T ของเอนไซม์กลีเชอรอลดี ไฮดราเสทที่สมนัยกับสำคัญกรดอะมิโนที่ให้ไว้ใน SEQ ID NO: 36 (6) จีนที่ประมวลรหัสเอนไซม์ 1,3-อกขิโดรีดักเทสที่สมนัย กับลำดับกรดอะมิโนที่ให้ไว้ใน SEQ ID NO : 37 ลำดับกรดอะมิ โนตามลำดับของ (a) (1) - (6) ทึ่คลอบคลุมกรดอะมิโนที่มีการ แทนที่การตัดออก การเติมเข้าของกรดอะมิโนที่ไม่ดได้เปลี่ยน การทำงานของเอนไซม์ของจีน (1) - (6) และ (b) เซลล์เจ้าบ้านที่ทรนสฟอร์มด้วยกลุ่มของจีนของ (a) โดย เซลล์เจ้าบ้านที่ทรานสฟอร์มสร้าง 1, 3-โปรเพนไดออลใน สับสเตรทอย่างน้อยหนึ่งชนิดที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยโ มโนแชคคาไรด์ โอลิโกแซคาไรด์ และพอลิแซคาไรด์หรือจาก สับสเตรทชนิดคาร์บอนเดี่ยว (ข้อถือสิทธิ 14 ข้อ, 3 หน้า, 0 รูป)