TH60764A - ลำดับนิวคลีโอไทด์ชนิดใหม่ที่มีรหัสสำหรับจีน glbo - Google Patents

Abstract

DC60 (24/08/44) การประดิษฐ์นี้ได้ให้พอลินิวคลีโอไทด์ที่แยกได้ที่มีลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ที่คัดเลือกจาก กลุ่มของ a) พอลินิวคลีโอไทด์ที่ฮอมอโลกัสในระดับอย่างน้อย 70% ต่อ พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีรหัส สำหรับพอลิเพพไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโนของ SEQ ID NO.2 b) พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีรหัสสำหรับพอลิเพพไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโนที่ฮอมอโลกัสในระดับ อย่างน้อย 70% ต่อลำดับกรดอะ มิโนของ SEQ ID NO.2 c) พอลินิวคลีโอไทด์ที่เป็นคู่สมต่อพอลินิวคลีโอไทด์ของ a) หรือ b) และ d) พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีเบสต่อเนื่องกันอย่างน้อย 15 ตัว ของลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ของ a), b) หรือ c) และกรรมวิธีสำหรับการผลิตโดยการหมักของกรด L-อะมิโน ร่วม กับการเสริมฤทธิ์ของจีน glbO ที่มี รหัสสำหรับโปรตีนที่ คล้ายฮีโมโกลบิน และการใช้งานของพอลินิวคลีโอไทด์ข้างต้นเป็น ไพร์มเมอร์ หรือไฮบริไดเซชันโพรบ การประดิษฐ์นี้ได้ให้พอลินิวคลีไอไทด์ที่แยกได้ที่มีลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ที่คัดเลือกจาก กลุ่มของ a) พอลินิวคลีโอไทด์ที่ฮอมอโลกัสในระดับอย่างน้อย 70% ต่อ พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีรหัส สำหรับพอลิเพพไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโนของ SEQ ID NO.2 b) พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีรหัสสำหรับพอลิเพพไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโนที่ฮอมอโลกัสในระดับ อย่างน้อย 70% ต่อลำดับกรดอะ มิโนของ SEQ ID NO.2 c) พอลินิวคลีโอไทด์ที่เป็นคู่สมต่อพอลินิวคลีโอไทด์ของ a) หรือ b) และ d) พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีเบสต่อเนื่องกันอย่างน้อย 15 ตัว ของลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ของ a),b) หรือ c) และกรรมวิธีสำหรับการผลิตโดยการหมักของกรด L-อะมิโน ร่วม กับการเสริมฤทธิ์ของจีน glbO ที่มี รหัสสำหรับโปรตีนที่ คล้ายฮีโมโกลบิน และการใช้งานของพอลินิวคลีโอไทด์ข้างต้นเป็น ไพร์มเมอร์ หรือไฮบริไดเซชันโพรบ

Claims (17)

1. พอลินิวคลีไอไทด์ที่แยกได้จากโครีนีฟอร์มแบคที่เรียที่ประกอบด้วยลำดับ พอลินิวคลีโอไทด์ที่คัดเลือกจากกลุ่มที่ ประกอบด้วย a) พอลินิวคลีโอไทด์ที่ฮอมอโลกัสในระดับอย่างน้อย 70% ต่อ พอลินิวคลีโอไทด์ที่ มีรหัสสำหรับพอลิเพพไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโนของ SEQ ID NO.2 b) พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีรหัสสำหรับพอลิเพพไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโนที่ ฮอมอโลกัสในระดับอย่างน้อย 70% ต่อลำดับกรดอะ มิโนของ SEQ ID NO.2 c) พอลินิวคลีโอไทด์ที่เป็นคู่สมต่อพอลินิวคลีโอไทด์ของ a) หรือ b) และ d) พอลินิวคลีโอไทด์ที่มีเบสต่อเนื่องกันอย่างน้อย 15 ตัว ของลำดับ พอลินิวคลีโอไทด์ของ a),b) หรือ c) โดยที่พอลิเพพไทด์ควรแสดงแอคติวิตีของโปรตีนที่คล้ายฮีโม โกลบิน

2. พอลินิวคลีไอไทด์ตามที่ขอถือสิทธิในข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่พอลินิวคลีโอไทด์นั้น ควรเป็นรีคอมบิแนนท์ดีเอนเอที่ สามารถถอดแบบได้ในโครีนีฟอร์มแบคทีเรีย

3. พอลินิวคลีไอไทด์ตามที่ขอถือสิทธิในข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่พอลินิวคลีโอไทด์ คือ อาร์เอนเอ

4. ดีเอนเอทีสามารถถอดแบบได้ตามข้อถือสิทธิที่ 2 ที่มี (i) ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่แสดงใน SEQ ID NO. 1 หรือ (ii) ลำดับอย่างน้อยหนึ่งลำดับที่เข้ากันได้กับลำดับ (i) ภายในช่วงดีเจเนอเรซี ของรหัสพันธุกรรม หรือ (iii) ลำดับอย่างน้อยหนึ่งลำดับที่ไฮบริไดซ์ได้กับลำดับที่ เป็นคู่สมกับลำดับ i) หรือ ii) และอาจเลือก (iv) การกลายพันธุ์แบบนิวทรัลเซนส์ที่ทำงานได้ใน (i)

5. ลำดับพอลินิวคลีไอไทด์ตามที่ขอถือสิทธิที่ 2 ที่รหัส สำหรับพอลิเพพไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโนอย่างที่แสดงใน SEQ ID NO.2

6. เวกเตอร์ที่มีลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ตามข้อถือสิทธิที่ 1

7. โครีนีฟอร์แบคทีเรียที่มีเวกเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 6

8. กระบวนการสำหรับการผลิตโดยการหมักของกรด L-อะมิโน โดยดำ เนินการขั้น ตอนต่อไปนี้ a) หนักโครีนีฟอร์แบคทีเรียที่สร้าง L-ไลซีน โดยที่อย่าง น้อยที่มีรหัสสำหรับ โปรตีนที่คล้ายฮีโมไกลบินได้รับการ เสริมฤทธิ์ โดยเฉพาะการแสดง ลักษณะเกิน b) การสะสมของกรด L-อะมิโน ในอาหารเลี้ยงเชื้อ หรือในเซลล์ ของแบคทีเรีย และ c) แยกกรด L-อะมิโน

9. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่ใช้แบคทีเรียที่จีน อื่นในวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีว ภาพของกรดอะมิโนที่ต้องการได้รับการเสริมฤิทธิ์เพิ่ม

10. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่ใช้แบคทีเรียที่วิถีเมตาบอลิคที่ลดการสร้าง กรดอะมิโนที่ต้องการนั้น ได้รับการกดเป็นบางส่วนในแบคทีเรีย

11. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่สายพันธุ์ที่ได้ รับการทรานสฟอร์มโดย พลาสมิคเวกเตอร์ได้รับการใช้ และพลา สมิดเวกเตอร์มีลำดับนิวคลีโอไทด์ของจีนที่มีรหัสสำหรับ โปรตีนที่คล้ายฮีโมโกลบิน

12. กระบวนการตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 8 ถึง 11 โดยที่ใช้โครีนีฟอร์ม แบคทีเรียที่สร้าง L-ไลซีน

13. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 9 โดยที่จีนหนึ่งตัวหรือมาก กว่าจากกลุ่มที่ประกอบ รวมด้วย จีน dapA ที่มีรหัสสำหรับไดไฮโดรพิโคลิเนท จีน pyc ที่มีรหัสสำหรับไพรูเวทคาร์บอกซิเลส จีน tpi ที่มีรหัสสำหรับไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส จีน gap ที่มีรหัสสำหรับกลีเซอรัลดีไฮด์ 3-ฟอสเฟตดีไฮโดร จีเนส จีน pgk ที่มีรหัสสำหรับ 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส จีน lysE ที่มีรหัสสำหรับการขนส่งไลซีน ได้รับการเพิ่มฤทธิ์พร้อมกัน โดยเฉพาะแสดงลักษณะเกินกว่า ปกติหรือเพิ่มปริมาณ

14. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ L-ไลซีน ได้รับ การสร้างโดยการหมัก แบคทีเรียที่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าคัด เลือกจากกลุ่ม จีน pck ที่มีรหัสสำหรับฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนส จีน จีน pgi ที่มีรหัสสำหรับกลูโคส 6-ฟอสเฟตไอโซเมอเลส จีน poxB ที่มีรหัสสำหรับไพรูเวทออกซิเดส ที่ได้รับการหน่วงให้อ่อนกำลังในเวลาเดียวกัน

15. กระบวนการตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิ ก่อนหน้าโดยที่ใช้จุลินทรีย์ ของสกุล Corynebacterium glutamicum

16. การใช้ลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 เป็น ไพร์มเมอร์สำหรับการสร้าง ดีเอนเอของจีนที่มีรหัสสำหรับผลิต ภัณฑ์จีนของ glbO โดยปฏิกิริยาพอลิเมอเลสเชน

17. การใช้ลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 เป็น โพรบสำหรับไฮบริไดเซชัน