Claims (25)
แก้ไข 05/03/2562 หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับของนิวคลีโอไทด์ซึ่งแปลรหัส HPV 45 L1 โปรตีนที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO:2 ลำดับกรดนิวคลีที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO: 1 ---------------------------------------------------------------------------------------------------- ------21/03/2561------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกที่แปลรหัส HPV 45 L1 โปรตีนซึ่งประกอบด้วย SEQ ID NO:2 ที่ซึ่ง โมเลกุลกรดนิวคลีอิกประกอบด้วยลำดับกรดนิวคลีอิกที่แปลรหัส SEQ ID N0:2 ซึ่งถูกทำให้ เหมาะสมเชิงโคดอนสำหรับการแสดงออกในระดับที่สูงในเชลล์ยีสต์ 2. เวคเตอร์ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกของข้อถือสิทธิที่ 1 3. เซลล์เจ้าบ้านที่เปีนยีสต์ซํ่งประกอบด้วยเวคเตอร์ของข้อถือสิทธิที่ 2 4. เชลล์เจ้าบ้านของข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่งเซลล์เจ้าบ้านถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย แซคคาโรไมซิส เซอรวิซิอ (Saccharomyces cerevisiae), ฮานซินูลา โพลีมอร์ฟา (Hansenula polymorpha), พิเชย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอโรไมชิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis) และชโซแซคคาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 5. เซลล์เจ้าบ้านของข้อถือสิทธิที่ 4 ที่ซํ่งเซลล์เจ้าบ้าน คือ แซคคาโรไมซิส เซอริวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae) 6. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกของข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งลำดับของนิวคลีโอไทต์ประกอบด้วยลำดับ ของนิวคลีโอไทต์ที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQIDNO: 1 7. เวคเตอร์ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกของข้อถือสิทธิที่ 6 8. เซลล์เจ้าบ้านที่เป็นยีสต์ซึ่งประกอบด้วยเวคเตอร์ของข้อถือสิทธิที่ 7 9. อนุภาคที่เหมือนพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์(HPV) 45 (VLPs) ซึ่งประกอบด้วยรีคอม- บิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน ของ HPV45 ที่ซึ่งรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนถูกผลิตยีสต์ และที่ซํ่งรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน ประกอบด้วยลำดับของกรดอะมิโนดังที่กำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO:2 10. อนุภาคที่เหมือนพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์ (HPV) 45 (VLPs) ซึ่งประกอบด้วยรีคอม- บิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน ของ HPV45 ที่ซึ่งรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีนประกอบด้วยลำดับของกรดอะมิโนดังที่กำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO:2 11.วัคซีนซึ่งประกอบด้วย HPV VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 10 12. องค์ประกอบทางเภสัชกรรมซึ่งประกอบด้วย HPV VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 10 13. วัคซีนซึ่งประกอบด้วย VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 9 14. องค์ประกอบทางเภสัชกรรมซึ่งประกอบด้วย VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 9 15. วิธีการของการผลิต อนุภาคที่เหมือน HPV 45 ไวรัส (VLP) ซึ่งประกอบด้วย (a) การเปลี่ยนรูปเซลล์ยีสต์ด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกที่แปลรหัส HPV 45 L1 โปรตีน หรือ HPV45 L1+L2 โปรตีน, ที่ซึ่ง HPV45 L1 โปรตีนประกอบด้วยลำดับของกรดอะมิโนดังที่กำหนดไว้ หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า ก่อนใน SEQ ID N0:2 และที่ซื่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิกถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนสำหรับการ แสดงออกในระดับที่สูงในเซลล์ยีสต์ (b) การเพาะเลี้ยงเซลล์ยีสต์ที่ถูกเปลี่ยนรูปภายใต้สภาวะที่ยอมให้มีการแสดงออกของโมเลกุล กรดนิวคลีอิกที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนเพื่อผลิตรคอมบิแนนท์พาพิลโลมาไวรัสโปรตีน และ (c) การแยกรคอมบิแนนท์พาพิลโลมาไวรัสโปรตีนเพื่อผลิต HPV 45 VLP 16. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 15 ที่ซํ่งเซลล์ยีสต์ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยแซคคาโรไม- ซส เซอรวซอ (Saccharomyces cerevisiae), ฮานซนูลา โพลมอรฟ่า (Hansenulapolymorpha), พเชย พาสตอรส (Pichiapastoris), คลายเวอโรไมซิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis) และชิโซแซคคาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 17. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 16 ที่ซื่งเซลล์ยีสต์คือ แชคคาโรไมซิส เซอรวิซิอี (1Saccharomyces cerevisiae) 18. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 15 ที่ซํ่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิกประกอบด้วยลำดับของนิวคลีโอ- ไทต์ที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO: 1 19. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 18 ที่ชํ่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิกประกอบด้วยส่วนสำคัญของลำดับ ของนิวคลีโอไทต์ที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQIDNO: 1 ------------Revised 05/03/2019 Page 1 of 1 Claim 1. A nucleic acid molecule comprising the nucleotide sequence encoding the HPV 45 L1 protein predefined in SEQ ID NO:2. A nucleic acid sequence predefined in SEQ ID NO:1 ---------------------------------------------------------------------------------------------------- ------21/03/2018------(OCR) Page 1 of 2 Claim 1. A nucleic acid molecule encoding the HPV 45 L1 protein comprising SEQ ID NO:2, where the nucleic acid molecule contains the nucleotide sequence encoding SEQ ID NO:2, which has been codon-optimized for high expression in yeast cells. 2. A vector comprising the nucleic acid molecule of claim 1. 3. A yeast host cell comprising the vector of claim 2. 4. The host cell of claim 3, where the host cell is selected from a group consisting of Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lactis, and Schizosaccharomyces pombe. 5. The host cell of claim 4, where the host cell is Saccharomyces cerevisiae. 6. The nucleic acid molecule of claim 1, where the nucleotide sequence consists of the following sequences: 1. The nucleotide vector predetermined in SEQIDNO: 1. 7. The vector comprising the nucleic acid molecule of claim 6. 8. The yeast host cell comprising the vector of claim 7. 9. Human papillomavirus (HPV) 45-like particles (VLPs) comprising the recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 protein of HPV45 in which the recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 protein is produced in yeast. 10. Human papillomavirus (HPV) 45-like particles (VLPs) containing the recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 protein of HPV45, where the recombinant L1 protein contains the amino acid sequence as previously specified in SEQ ID NO:2. 11. Vaccines containing HPV VLPs of claim 10. 12. Pharmaceutical components containing HPV VLPs of claim 10. 13. Vaccines containing VLPs of claim 9. 14. Pharmaceutical components containing VLPs of claim 9. 15. Method of manufacturing. HPV 45-like virus particles (VLPs) consisting of (a) the transformation of yeast cells with nucleic acid molecules encoding HPV 45 L1 protein or HPV45 L1+L2 protein, where the HPV45 L1 protein contains the amino acid sequence as specified on page 2 of the two preceding pages in SEQ ID No:2 and where the nucleic acid molecule is codon-modified for high expression in yeast cells; and (b) the culture of the transformed yeast cells under conditions allowing the expression of the nucleic acid molecules. (a) codon-modified nucleic acids for the production of combined papilloma virus proteins, and (c) isolation of combined papilloma virus proteins for the production of HPV 45 VLP. 16. Method of claim 15 in which yeast cells are selected from a group consisting of Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichiapastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lactis, and Schizosaccharomyces pombe. 17. Method of claim 16 in which yeast cells are Saccharomyces cerevisiae. (1Saccharomyces cerevisiae) 18. The method of claim 15 in which the nucleic acid molecule contains the sequence of nucleotides predetermined in SEQ ID NO: 1. 19. The method of claim 18 in which the nucleic acid molecule contains the essential part of the sequence of nucleotides predetermined in SEQ ID NO: 1. ------------
1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกซึ่งประกอบรวมด้วยสายลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่แปลงรหัส HPV45 L1 โปรตีน ดังที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO: 2, ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิกได้ถูกทำให้เหมาะสมเชิง โคดอนสำหรับการแสดงออกในระดับที่สูง ในเซลล์ยีสต์1. A nucleic acid molecule comprising a sequence of nucleotides encoding the HPV45 L1 protein, as described in SEQ ID NO: 2, whose nucleic acid sequence has been codon-modified for high expression levels in yeast cells.
2. เวคเตอร์ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกตามข้อถือสิทธิ 12. A vector composed of nucleic acid molecules as per claim 1.
3. เซลล์เจ้าบ้านซึ่งประกอบรวมด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ 33. A host cell comprising vectors as per claim 3.
4. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 3, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านจะถูกเลือกสรรจากกลุ่มซึ่งประกอบ ด้วย : แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae), ฮานซินูลา โพลีมอร์ฟา (Handenula polymorpha), พิเซีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอโรไมซิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lectis), และชิโซแซค- คาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe)4. Host cells according to claim 3, where host cells are selected from the following groups: Seccharomyces cerevisiae, Handenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lectis, and Schizosaccharomyces pombe.
5. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 4, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านคือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae)5. The host cell according to claim 4, where the host cell is Seccharomyces cerevisiae.
6. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกตามข้อถือสิทธิ 1, โดยที่สายลำดับนิวคลีโอไทด์จะประกอบรวมด้วย สายลำดับของนิวคลีโอไทด์ดังที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:16. A nucleic acid molecule according to claim 1, whereby the nucleotide sequence comprises the nucleotide sequences as described in SEQ ID NO:1.
7. เวคเตอร์ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกตามข้อถือสิทธิ 67. A vector comprising nucleic acid molecules as per claim 6.
8. เซลล์เจ้าบ้านซึ่งประกอบรวมด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ 78. A host cell comprising vectors as per claim 7.
9. อนุภาคที่คล้ายไวรัส (VLPs) ที่ประกอบรวมด้วย รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนของ HPV45,โดยที่รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนจะถูกผลิตในยีสต์9. Viral-like particles (VLPs) composed of recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 proteins of HPV45, where the recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 proteins are produced in yeast.
10. VLPs ตามข้อถือสิทธิ 9, โดยที่ รีคอมบิแนท์ L1 โปรตีน และ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน จะถูกแปลงรหัสจากโมเลกุลกรดนิวคลีอิก HPV45 L1 ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน10. VLPs pursuant to claim 9, where recombinant L1 protein and recombinant L1+L2 protein are transcribed from codon-modified HPV45 L1 nucleic acid molecules.
11. VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10, โดยที่โมเลกุลกรดนิวคลีอิกที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนจะ ประกอบอย่างเป็นส่วนสำคัญด้วยสายลำดับของนิวคลีโอไทด์ดังที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:111. VLPs pursuant to claim 10, whereby the codon-modified nucleic acid molecule is essentially composed of a sequence of nucleotides as described in SEQ ID NO:1.
12. วิธีการสำหรับการผลิต VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10, ซึ่งประกอบรวมด้วย : (a) การปลูกถ่ายยีสต์ด้วยโมเลกุล DNA ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน ซึ่งให้การ แปลรหัส HPV45 L1โปรตีน หรือ HPV45 L1+L2 โปรตีน: (b) การเพาะเลี้ยงยีสต์ที่ถูกปลูกถ่าย ภายใต้สภาวะที่ยอมให้มีการแสดงออกของ โมเลกุล DNA ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน เพื่อผลิตรีคอมบิแนนท์พาพิลโลมาไวรัสโปรตีน ; และ (c) การแยกรีคอมบิแนนท์ พาพิลโลมาไวรัส โปรตีนเพื่อผลิต VLPs ตามข้อถือสิทธิ 1012. Methods for the production of VLPs under claim 10, which include: (a) transplantation of yeast with codonized DNA molecules providing translation of HPV45 L1 protein or HPV45 L1+L2 protein; (b) cultivation of the transplanted yeast under conditions allowing expression of codonized DNA molecules to produce recombinant papillomavirus proteins; and (c) isolation of recombinant papillomavirus proteins to produce VLPs under claim 10.
13. วัคซีน ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 1013. Vaccines, including VLPs as per claim 10.
14. สารผสมเชิงเภสัชกรรม ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 1014. Pharmaceutical mixtures comprising VLPs as per claim 10.
15. วิธีการของการป้องกันการติดเชื้อ HPV ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 13 แก่สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม15. Methods of preventing HPV infection, which include vaccination under claim 13 in mammals.
16. วิธีการสำหรับการชักนำการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในสัตว์ ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้ VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10 แก่สัตว์16. Methods for inducing an immune response in animals, which include administering VLPs as per claim 10 to animals.
17. อนุภาคที่คล้ายไวรัสตามข้อถือสิทธิ 10 โดยที่ ยีสต์จะถูกเลือกสรรจากกลุ่มซึ่งประกอบ ด้วย แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae), ฮานซินูลา โพลีมอร์ฟา (Handenula polymorpha), พิเซีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอโรไมซิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lectis),ชิโซแซค- คาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe)17. Virus-like particles according to claim 10, where yeast is selected from the group consisting of Seccharomyces cerevisiae, Handenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lectis, and Schizosaccharomyces pombe.
18. อนุภาคที่คล้ายไวรัสตามข้อถือสิทธิ 17, โดยที่ยีสต์ คือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae)18. A viral-like particle according to claim 17, where the yeast is Seccharomyces cerevisiae.
19. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 13, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย VLPs ของอย่างน้อยหนึ่งชนิดของ HPV เพิ่มเติม19. Vaccines under claim 13, which include, further comprising, VLPs of at least one additional type of HPV.
20. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 19, โดยที่อย่างน้อยหนึ่งชนิดของ HPV เพิ่มเติม จะถูกเลือกสรร จากกลุ่มซึ่งประกอบด้วย :HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35, HPV39, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV58, HPV59, และ HPV6820. Vaccines under Claim 19, where at least one additional HPV variant shall be selected from the group comprising: HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35, HPV39, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV58, HPV59, and HPV68.
21. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 20, โดยที่อย่างน้อยหนึ่งชนิดของ HPV เพิ่มเติม ประกอบด้วย HPV1621. Vaccines under claim 20, where at least one additional HPV species includes HPV16.
22. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 21, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV18 VLPs22. Vaccines under claim 21, which include the following HPV18 VLPs.
23. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 22, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV6 VLPs และ HPV11 VLPs23. Vaccines under claim 22, which include HPV6 VLPs and HPV11 VLPs.
24. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 23, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV31 VLPs24. Vaccines under claim 23, which include the following HPV31 VLPs.
25. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 22, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV31 VLPs25. Vaccines under claim 22, which include the following HPV31 VLPs.