TR201901445T4 - Il2rbeta/yaygın gamma zinciri antikorları. - Google Patents

Il2rbeta/yaygın gamma zinciri antikorları. Download PDF

Info

Publication number
TR201901445T4
TR201901445T4 TR2019/01445T TR201901445T TR201901445T4 TR 201901445 T4 TR201901445 T4 TR 201901445T4 TR 2019/01445 T TR2019/01445 T TR 2019/01445T TR 201901445 T TR201901445 T TR 201901445T TR 201901445 T4 TR201901445 T4 TR 201901445T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
antibody
cells
bispecific
binding fragment
chain variable
Prior art date
Application number
TR2019/01445T
Other languages
English (en)
Inventor
Wang Cheng-I
Brauer Peter
Ping YEO Siok
Ching Tan Hwee
Edward Connolly John
Original Assignee
Agency Science Tech & Res
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=56889037&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=TR201901445(T4) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Agency Science Tech & Res filed Critical Agency Science Tech & Res
Publication of TR201901445T4 publication Critical patent/TR201901445T4/tr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2013—IL-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—RNA viruses
    • C07K16/112—Retroviridae (F), e.g. leukemia viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C07K16/246—IL-2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0646—Natural killers cells [NK], NKT cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/524—CH2 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/64—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a combination of variable region and constant region components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Bu buluşta ani-CD122 ve/veya &#947#&c antikorları ve onların fragmanları açıklanmaktadır. Bu buluşta, ayrıca, bu antikorları ve fragmanları içeren bileşimler ve onların kullanım alanları ve onları kullanma yöntemleri de açıklanmaktadır.

Description

Tarifname Bu bulus açiklamasi, iiiterl'okin-Z reseptörü (IL-ZR) zincirleri B ve y için spesifisiteye sahip olan, orta afiniteli IL-2R ß-y eksprese eden hücreleri stimüle edebilen ve tercihen yüksek afiniteli IL-2R a-ß-y eksprese eden hücreleri stimüle edemeyen bir bispesifik aiitikorun nükleotid ve amino asit sekanslarini kapsar. Bu açiklama, anti-lL-ZRß (CD122) ve anti-yc (CD132) spesifisitelerine sahip bispesifik antikorlar (ya da bi-fonksiyonel proteinler) tarafindan ß-yc komponentlerinin heterodimerizasyonu yoluyla reseptör aktivasyonunun saglandigi bir IL-2R0L-bagimsiz IL- 2R agonisti tasarimini tarif etmektedir. Bu moleküllerin kullanimi, yüksek afiniteli d-ß-yCIL-ZR eksprese eden hücrelerin tercih edilen ve yüksek aktivasyonu olmadan, immün hücrelerin, 'Özellikle de T hücrelerinin aktivasyonu yoluyla istenen immün stim'ûlasyonunu saglayabilir. Bu moleküller, asi adjuvanlari olarak kullanisli olacaktir. insan inonoklonal antikoru için izole nükleotid ve amino-asit antikorun nükleotid ve amino asit sekanslari tarif edilmektedir. Yukarida bahsi geçen izole monoklonal antikorlardan türetilen ve hem bispesifik antikor yapisi tarif edilmektedir. Yukarida bahsi geçen izole inonoklonal antikorlarin sekanslarindan türetilen IL-2Rß ve IL-2Ryc baglanma doinainleri içeren bifonksiyonel protein tarif edilmektedir. tetikleyen bir antikor ya da bir bifonksiyonel protein tarif edilmektedir. Daha yüksek afiniteyle lL-2Rß/yjye baglanan ve lL-2 POL/ß/yjye (CD25) baglanmayan bir antikor ya da bir bifonksiyonel protein tarif edilmektedir. tetikleyen ve intraselüler sinyallemeyi tetiklemeden IL-ZRa/ß/yjye (CD25) antagonistik olarak baglanan bir antikor ya da bir bifonksiyonel protein tarif edilmektedir. Kanserlerin ya da enfeksiyöz hastaliklarin tedavisinde bu moleküllerin herhangi birisinin tek basina ya da anti-kanser ya da anti-enfeksiyöz ilaçlarla kombinasyon halinde kullanilmasi tarif edilmektedir. Antikorlar Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar tercihen CD122'ye (interl'okin 2 reseptör'u ß (IL-2Rß)) ve/veya yaygin y zincirine (yc) baglanir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor/fragman, insan CD122"sine ve/Veya insan yc"sine baglanir. Bu bulusuii bazi yapilarinda, antikor/fragman, insan-disi primat CDl22°sine ve/Veya insan-disi primat yc"sine baglanir. antikor ya da sentetik antikor fragmanini kapsar. Bu bulusa uygun antikorlar izole formda sunulabilir. Monoklonal antikor teknolojisiyle iliskili günümüz tekniklerine göre, birçok anti jene karsi antikorlar hazirlanabilir. Anti jen baglanma kismi, bir antikorun bir parçasi (örnegin, bir Fab fragmani) ya da bir sentetik antikor fraginani (Örnegin, bir tek Zincirli FV fraginani [SCFV]) olabilir. Seçilen antijenlere karsi uygun monoklonal antikorlar, örnegin "Monoclonal Antibodies: A manual of techniques", H Zola (CRC Press, 1988)" referansinda ve ""Monoclonal Hybridoma Antibodies: Techniques aiid Applications ", J G R Hurrell (CRC Press, 1982)" referansinda açiklananlar gibi bilinen tekniklerle hazirlanabilirler. Kimerik antikorlar, Neuberger ve arkadaslari (1988, 8th International Biotechnology Symposium Part 2, 792-799) tarafindan açiklanmaktadir. Monoklonal antikorlar (mAb"ler), bulus konusu yöntemlerde kullanislidir ve bir anti jen üzerinde tek bir epitopu spesifik hedef alan antikorlarin bir homojen popülasyonudur. Genegi degistirilmis antikorlar ve antikor fragmanlari gibi, antikorlariii antijen baglanma fragmanlari, örnegin Fab ve Fabz fragmanlari da kullanilabilir/sunulabilir. Antikorun degisken agir (VH) ve degisken hafif (VL) doniainleri, anti jen tanimada rol oynarlar; bu durum, ilk önce erken proteaz sindirim deneyleriiide fark edilmis bir gerçektir. Kemirgen antikorlarinin "hümanizasyonu" yoluyla da ilaveten teyit edilmistir. Elde edilen antikor, kemirgen kaynakli ana antikorun anti jenik spesifisitesiiii koruyacak sekilde, kemirgen kaynakli degisken domainler insan kaynakli sabit domainlere füzyonlanabilir (Morrison et al (1984) Proc. Natl. Acad. Sd. USA 81, 6851-6855). Bu aiitijenik spesifisite, degisken domaiiilerle saglanir ve sabit domainlerden bagimsizdir; bu durum, hepsi bir veya daha fazla degisken domain içeren antikor fragmanlarinin bakteriyel ekspresyonunu kapsayan deneylerden bilinmektedir. Bu moleküller arasinda Fab-benzeri moleküller (Better et al (1988) Science 240, Zincirli FV (ScFV) molekülleri - burada, VH ve VL partner domainleri, bir esnek oligopeptid araciligiyla baglanir (Bird et al (1988) Science ve izole V doinainleri içeren tek domainli antikorlar (dAb"ler) (Ward koruyan antikor fragmanlarinin sentezinde rol oynayan tekniklere bir referansinda bulunabilir. oligopeptid yoluyla kovalent baglandigi moleküller anlamina gelir. Fab, FV, ScFV ve dAb antikor fragmanlarinin hepsi E. coli°de eksprese edilebilir ve ondan salgilabilirler ve böylece, atif yapilan fragmanlarm büyük miktarlarda kolay üretilmesine olanak saglanir. Tam antikorlar ve F (ab')2 fragmanlari, "bivalent" niteliktedir. iki antijen kombinasyon yerine sahip olduklari anlamina gelmektedir. Bunun aksine, Fab, FV, ScFV ve dAb fragmanlari, yalnizca bir anti jen kombinasyon yerine sahip olarak monovalent nitelik sergilerler. Bu bulus, istemlerde açiklandigi gibi CD122°ye ve yc,ye baglanabilen bir antikor ya da anti jen baglanma fragmani sunar. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor/fragman, bir bispesifik antikor ya da bir bispesifik anti jen baglanma fragmanidir. Bu bulusuii bazi yapilarinda, bispesifik antikor ya da bispesifik anti jen baglanma fragmani izole edilebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bispesifik antikorlar ve bispesifik anti jeii baglanma fragmanlari, CD1227ye baglanabilen bir antikor/fragman, örnegin burada tarif edildigi gibi bir antikor/fragman içerir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bispesifik antikorlar ve bispesifik anti jen baglanma fragmanlari, ydye baglanabilen bir antikor/fragman, örnegin burada tarif edildigi gibi bir antikor/fragman içerir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bispesifik antikorlar/fragmanlar, CD122"ye baglanabilen bir antikor/fragman ve baska bir hedef proteine baglanabilen bir antikor/fragman içerir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bispesifik antikorlar/fragmanlar, yc›ye baglanabilen bir antikor/fragman ve baska bir hedef proteine baglanabilen bir antikor/fragman içerir. Baska bir hedef proteine baglanabilen aiitijen baglanma fragmani, CD122 ya da ve haricinde baska bir proteine baglanabilir. Bu bulus açiklamasinin bir özelliginde, yc"ye baglanan, fakat CD122°ye baglanmayan bir bispesifik antikor sunulmaktadir. Bu bulus açiklamasina uygun bir bispesifik antikor/fragmanin bir anti jen-baglanma fragmani, bir anti jene baglanabilen bir polipeptidin herhangi bir fragmani olabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bir anti jen baglanina fragmani, birlikte bir antikor ya da antijen baglanma fragmaninin antijen baglanina bölgesini olusturulan en az üç hafif zincir tamamlayicilik belirleme bölgesi (CDR'ler) (yani, LC-CDRl, LC-CDR2 ve LC-CDR3) ve üç agir zincir CDR"si (yani, HC-CDRI, HC-CDR2 ve HC-CDR3) içerir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bir antijen baglanma fragmani, bir antikorun ya da antijen baglanma fragmaninin hafif zincir degisken doinainini ve agir zincir degisken domainini içerebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bir anti jen baglanma fragmani, bir antikorun ya da antijen baglanma fragmaninin hafif zincir polipeptidi ve agir zincir polipeptidini içerebilir. Bu bulusa uygun bispesifik antikorlar ve fragmanlar, "Kontermann uygun herhangi bir formatta sunulabilir. Örnegin, bir bispesifik antikor ya da bispesifik antijen baglanma fragmani, bir bispesifik antikor konjugati (öniegin, bir IgGZ, F(ab')2 ya da COVX-Body), bir bispesifik IgG veya IgG-benzeri molekül (örnegin, bir IgG, scFv4-lg, da Tandemab yaygin LC), bir asimetrik bispesifik IgG veya IgG- benzeri molekül (örnegin, bir kih IgG, kih IgG yaygin LC, CrossMab, kih IgG-scFab, mAb-FV, sarj çifti ya da SEED bazli antikorlar), bir küçük bispesifik antikor molekülü (örnegin, bir Diabody (Db), dsDb, DART, scDb, tandAb, tandem scFV (taFV), tandein dAb/VHH, üçlü gövde, üçlü kafa, Fab-SCFV ya da F(ab')2-scFV2), bir bispesifik Pc ve CH3 füzyon proteini (örnegin, bir taFV-Fc, Di-diabody, scDb-CH3, scFV-Fc-SCFV, HCAb-VHH, scFV-kih-Fc ya da scFV-kih-CH3) ya da bir bispesifik füzyon proteini (öriiegin, bir scFVZ-albümin, scDb- albümin, taFV-toksin, DNL-Fab3, DNL-Fab4-IgG, DNL-Fab4-IgG- referansinda Sekil 2"ye bakiniz. Bu bulusun bazi yapilarinda, örnegin Sekil 25A"da, sagda gösterildigi gibi, her biri farkli bir antijen için spesifik baglanma gösteren iki scFV°nin bir baglayici yoluyla baglandigi bir scFv dimer formati tercih Bir baglayici, istenen herhangi bir uzunlukta, örnegin 2 ilâ 50 amino amino asit ya da 5 ilâ 10 amino asidin herhangi birisi uzunlukta bir amino asit sekansi olabilir. Sektörde bilgi ve beceri sahibi bir kisi, bu bulusa uygun bispesifik antikorlar ve bispesifik anti jen baglanma fragmanlari tasarlayabilir ve hazirlayabilir. Bispesifik antikorlar üretme yöntemleri, örnegin "Segal and Bast, 2001. Production of Bispecific Antibodies. Current Protocols in Immunology. l4:IV:2.l3:2.l3.l-2.l3.16" referansinda tarif edildigi gibi, örnegin indirgenebilir disülfur ya da indirgenemez tiyoeter baglariyla antikorlari veya antikor fragmanlarini kimyasal olarak çapraz baglamayi kapsar. Ornegin, disülfür-bagli bispesifik F(ab)2 heterodimerler olusturmak için örnegin Fab fragmanlarini mentese bölgesi SH- gruplari araciligiyla kimyasal olarak çapraz baglamak amaciyla N-süksinimidil-3-(-2-piridilditiyo)-pr0pionat (SPDP) kullanilabilir. Bispesifik antikorlar üretme amacina yönelik baska yöntemler, örnegin "D. M. and Bast, B. J. 2001. Production of Bispecific Antibodies. Current Protocols in Immunology. 14:1V:2.l3:2.13.l- 2.13.16" referansinda tarif edildigi gibi, antikor-üreten hibridomlariii örnegin polietilen glikolle füzyonlanarak bispesifik antikor salgilayabilen bir kuadroma hücresi 'üretilmesini kapsar. Bu bulusa uygun bispesifik antikorlar ve bispesifik anti jen baglanma fragmanlari, ayrica, örnegin "Antibody Engineering: Methods and Protocols, Second Edition (Humana Press, 2012), at Chapter 40: Production of Bispecific Antibodies: Diabodies and Taiidem scFV (Hornig and Farber-Schwarz)" ya da "French, How to make bispecific edildigi gibi, örnegin anti jen baglanma molekülleri için polipeptidleri kodlayan bir nükleik asit yapisindan ekSpresyon yoluyla rekombinan olarak da üretilebilir. Örnegin, iki antijen baglanma fragmani için hafif ve agir zincir degisken domainlerini (yani, CD122 ya da yc°yi baglayabilen anti jen baglanma fragmani için hafif ve agir Zincir degisken domainleri ve baska bir hedef proteine baglanabilen anti jen baglanma fragmani için hafif ve agir Zincir degisken domainleri) kodlayan ve aiitijen baglanma fragmanlari arasindaki uygun bir baglayici veya dimerizasyon domainini kodlayan sekanslari kapsayan bir DNA yapisi, moleküler klonlama tekiiikleriyle hazirlanabilir. Daha sonra, bu yapinin uygun bir konakçi hücre (örnegin, bir memeli konakçi hücresi) içinde (örnegin, in-Vitro) ekspresyonu yoluyla rekoinbinan bispesifik antikor üretilebilir ve eksprese edilen rekombinan bispesifik antikor, daha sonra, istege bagli olarak saflastirilabilir. Antikorlar, modifiye edilinemis ana antikora kiyasla antikorun anti jen için afinitesi gelistirilmis bir modifiye antikorun olusturuldugu afinite matürasyonu prosesiyle üretilebilir. Afinite-matürasyonlu antikorlar, sektörde iyi bilinen, örnegin, "Marks et al., Rio/Technology 10:779- 896 (1992)" referanslarinda tarif edilen prosedürlerle üretilebilir. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, CD122°ye ve/veya yc°ye spesifik baglanma gösterebilir. Bir hedef moleküle spesifik baglanan bir antikor tercihen baska hedeflere baglaninasina kiyasla hedefi daha büyük afiniteyle ve/Veya daha uzun süreli baglar. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu antikorlar, tip CD122°ye ve/Veya yc"ye daha yüksek afiniteyle baglanabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bir antikorun bir iliskisiz hedefe baglanma düzeyi, örnegin ELISA, SPR, Biyo-Tabaka Interferometrisi ya da bir radyoiinmünoeseyle (RIA) ölçüldügü gibi, antikorun hedefe baglanmasinin yaklasik %10"undan daha azdir. Alternatif olarak, baglanma spesifisitesi, bu bulus açiklamasina konu olan anti-CD122 ve/Veya yc antikorunun baska bir hedef moleküle yönelik KD degerinden en az 0,1 büyüklük kertesi (yani 0,] X 10"; burada, n siingesi büyüklük kertesini temsil eden bir tamsayidir) daha büyük bir KD degeriyle CD122"ye ve/veya yc'ye baglandigi baglanma afinitesi açisindan yansitilabilir. Bu, istege bagli olarak, en az 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, Bir antikorun hedefine baglanma afinitesi çogunlukla onun ayrisma sabiti (KD) açisindan tarif edilir. Baglanma afinitesi, sektörde bilinen yöntemlerle, örnegin ELISA, Yüzey Plazinon Rezonans (SPR, bakiniz Tabaka Interferometri (bakiniz örnegin Lad et al., (2015) J Biomol Screen 20(4): 498-507) yöntemiyle ya da antikorun ve anti jen molekülünün Fab versiyonuyla gerçeklestirilen bir radyo-etiketli anti jen baglanma eseyiyle (RIA) ölçülebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina uygun antikorun Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina uygun aiitikorun Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina uygun antikorun Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa uygun antikor, CD122 ve/Veya yo eksprese eden bir hücrenin hücre yüzeyi üzerinde eksprese edilen CD122°ye ve/Veya yc°ye baglanir. Bu baglanma, antikorla inkübe edilen PBMC°lere ya da CD122 ve/Veya ye eksprese eden yapilarla transfekte edilen hücrelere antikor baglanmasinin analizi ve ardindan, örnegin akis sitometrisiyle antikor baglanmasi analizi yoluyla analiz edilebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa uygun antikor, CD122 ve/veya ye içeren reseptörleriyle, örnegin IL-2 reseptörü ve/veya IL-15 reseptör'ûyle sinyal transdüksiyonu yoluyla aktive edilen bir veya daha fazla sinyal yolaginin bir agonistidir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, CD122 ve/veya yc içeren bir veya daha fazla immün reseptör kompleksiyle, örnegin IL-2 reseptörü ve/veya IL-15 reseptörûyle sinyallemeyi stim'ûle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, bir IL-2 reseptör'u agonistidir. Bu dogrultuda, bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, IL-2/lL-2 reseptöri'i-aracili sinyallemeyi ve iliskili fonksiyonlari aktive edebilir. Örnegin, bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, lL-2 reseptörû eksprese eden bir hücrenin hücre bölünmesini/proliferasyonunu/sürvisini arttirabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, bir IL-15 reseptör'û agonistidir. Bu dogrultuda, bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, IL-lS/IL-15 reseptör'û-aracili sinyallemeyi ve iliskili fonksiyonlari aktive edebilir. Örnegin, bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, lL-15 reseptörü eksprese eden bir hücrenin hücre bölünmesini/ proliferasyonunu/ sürvisini arttirabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa uygun bispesifik aiitikorlar, tercihen, CD25 de içeren reseptörlere kiyasla CD122 ve ve içeren ya da bunlardan olusan reseptörleri (örnegin daha yüksek afiniteyle ve/veya spesifisiteyle) baglayabilir. Bispesifik antikorlar, tercihen, CD122 ve yc içeren ya da bunlardan olusan reseptörleri (ya da reseptörleri eksprese eden hücreleri) stimüle edebilirler, fakat CD25 de içerenler için bu etkiyi göstermezler. Bu bulusun bazi yapilarinda, CD1227yi ve yc"yi baglayan bu bulusa uygun bispesifik antikorlar, tercihen, yaygin gamma zincirine sahip olan ve CD122 içermeyen reseptörlere, örnegin IL-2R ve IL-15R haricinde reseptörlere ligand baglanmasinda anlamli ve önemli inhibisyon göstermez. Örnegin, bu bulusa uygun bispesifik antikorlar, yc içeren, fakat CD122 içerineyen reseptörlere kiyasla hein CD122 hem de 70 içeren reseptörler için spesifik olabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa uygun antikor, asagidaki intraselüler sinyal yolaklarinm biri veya daha fazlasi yoluyla CD122:yc aracilik sinyallenieyi stimüle edebilir: STATS, Akt, ERK. STAT5, Akt, ERK intraselüler sinyal yolaklari yoluyla sinyalleme, sektörde bilgi ve beceri sahibi kisilerin iyi bildikleri yöntemlerle, örnegin sirasiyla CD122 ve/veya 'ye eksprese eden hücrelerin antikorla stimülasyonunun ardindan fosforile STATS, fosforile Akt ve istege bagli olarak fosforile ERK belirlenerek analiz edilebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu. bulusa uygun antikor, IL-2 haricinde Treg hücrelerinde intraselüler sinyallemenin daha az kuvvetli bir stimülatörüdür. Örnegin, antikorla tedavi, IL-2 ile tedaviye kiyasla daha az STAT5 fosforilasyonuna yol açabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, in-Vitro ve/veya in-Vivo ortamda immün hücrelerin proliferasyonunu stimüle edebilir. Proliferasyonun stimülasyonu, hücre popülasyonu genislemesini saglainak için etkin ve etkili olan ve proliferasyonu stimüle edilen hücre sayisinda veya hücre tipinde bir artisa yol açar. Örnegin, antikor, in-vitro ya da in- Vivo ortamda lökositlerin proliferasyonunu ve/veya genislemesini stimüle etme, tercihen tekabül eden miktarda IL-2"nin etkileriyle kiyaslandiginda toksisitede azalma gösterme konusunda kullanisli ve faydalidir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, IL-2 bagimsiz hücrelerin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, CD3+ T hücrelerinin (örnegin CD4+ T hücreleri, CD8+ T hücreleri) ve/Veya NK hücrelerinin proliferasyonunu stiinüle edebilir. Bir antikorun hücrelerin proliferasyonunu stiinüle edip edemedigi, in- Vitro ortamda sektörde iyi bilinen yöntemlerle, örnegin stiinülasyondan önce ve sonra belirli bir hücre tipinin sayisinin analiziyle ve/Veya timidin dahil etme, CFSE seyreltine (örnegin gibidir), AlamarBlue sinyal ve benzeri gibi baska bir eseyle analiz edilebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa uygun antikor, insan-disi primat (ömegin, sinoinolgus makak) CD122"sine ve/veya yc"sine baglanabilir. Antikor, insan ve insan-disi primat CD122°si ve/Veya yc"si için çapraz-reaktif olabilir. Bu dogrultuda, bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, insan-disi primat (örnegin sinomolgus makak) CD122asi ve/Veya yc"si eksprese eden hücrelerde IL-2/IL-2 reseptörü- ve/Veya IL-15/IL-15 reseptörü-aracili sinyallemeyi stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CD3+ T hücrelerinin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CD4+ T hücrelerinin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CD8+ T hücrelerinin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CD8+ T hücrelerinin CD4+ T hücrelerine oranini arttirabilir. Baska bir deyisle, bu bulusun bazi yapilarinda, CD8+ T hücreleri ve CD4+ T hücreleri içeren hücrelerin bir popülasyonunun (örnegin in-Vitro ya da in-vivo) stimülasyonundan sonra, CD8+ T hücrelerinin CD4+ T hücrelerine orani, stiinülasyondan öncesine kiyasla stimülasyondan sonra daha yüksek olabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CD4+FoxP3+ hücrelerinin (yani, Treg"LER) proliferasyonunun kuvvetli bir stimülatörü degildir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, Treg'lerin proliferasyonunu stimüle etmez. Bu bulusun bazi yapilarinda, bulus konusu antikor, Treg°lerin proliferasyonunu lL-2iye kiyasla daha düsük bir düzeye kadar stimüle eder. Baska bir deyisle, bu bulusun bazi yapilarinda, bulus konusu antikor, Treg°lerin proliferasyonunun IL-2°ye kiyasla daha az kuvvetli bir agonistidir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bulus açiklamasina konu olan antikor, Treg°lerin proliferasyonunu, belirli bir eseyde denk bir konsantrasyonda IL-2 ile tedavinin stimüle ettigi Treg proliferasyonu kati düzeyine kadar stiinüle eder. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor tercihen santral bellek CD8+ T hücresi ve naif CD8+ T hücresi popülasyonlarina kiyasla CD8+ T hücrelerinin efektör bellek alt- setininin proliferasyonunu stimüle eder. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina konu olan antikor, efektör bellek CD8+ T hücrelerinin prliferasyonunu, belirli bir eseyde denk bir konsantrasyonda IL-2°ye kiyasla daha büyük bir düzeye kadar stimüle eder. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, antijen- spesifik T hücrelerinin, örnegin anti jen-spesifik CD8+ T hücrelerinin ve/Veya antijen-spesifik CD4+ T hücrelerinin proliferasyonunu stiinüle edebilir. Stiinülasyon in-Vitro ya da in-Vivo ortamda gerçeklesebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, antijen-spesifik CD8+ sitotoksik T lenfositlerinin (CTL71er) proliferasyonunu stimüle edebilir. Hücrelerin antijen-Spesifik T hücrelerinin proliferasyonunu stimüle etine kabiliyetleri, örnegin burada Ornek 8 ve Örnek 1 l"de tarif edildigi gibi antikorun varliginda ilgili bir antijeni sunan hücrelerle inkübe edilen T hücrelerinin proliferasyonunun analizi yoluyla degerlendirilebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina konu olan antikor, antijen-spesifik T hücrelerinin proliferasyonunu, belirli bir eseyde kiyaslanabilir bir konsantrasyonda IL-23ye kiyasla daha büyük bir Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina konu olan antikor, anti jen-spesifik CD8+ T hücrelerinin proliferasyonunu, belirli bir eseyde kiyaslanabilir bir konsantrasyoiida lL-2"ye kiyasla daha büyük bir düzeye kadar stimüle edebilir. Bu bulusuii bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, antijen- spesifik CD8+ T hücrelerinin CD4+ T hücrelerine oranini arttirabilir. Bu, in-Vitro ya da in-vivo ortamda gerçeklesebilir. Baska bir deyisle, bu bulusun bazi yapilarinda, aiitijen-Spesifik CD8+ T hücreleri ve CD4+ T hücreleri içereii bir hücre popülasyonunun (örnegin in-Vitro) stimülasyonundan sonra, CD8+ T hücrelerinin CD4+ T hücrelerine orani, stimülasyondan öncesine kiyasla stimülasyondan sonra daha yüksektir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bulus açiklamasina konu olan antikor, antijen-spesifik CD8+ T hücrelerinin CD4+ T hücrelerine oranini, belirli bir eseyde kiyaslanabilir bir konsantrasyoiida IL-2°ye kiyasla daha büyük bir düzeye kadar arttirabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CD8+ PDl+ T hücrelerinin (örnegin antijen-Spesifik CD8+PD1 + T hücreleri) proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina konu olan antikor, CD8+ PDl+ T hücrelerinin proliferasyonunu, belirli bir eseyde kiyaslanabilir bir konsantrasyoiida IL-2"ye kiyasla daha büyük bir düzeye kadar stiniüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CD4+ T hücreleriniii bir orani olarak Treg°lerin oranini azaltabilir. Baska bir deyisle, bu bulusun bazi yapilarinda, bir CD4+ T hücreleri popülasyonunun antikorla tedavisinden sonra, CD4+ T hücrelerinin, yani Treg'lerin yüzdesi azalir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina konu olan antikor, CD4+ T hücrelerinin orani olarak Treg"lerin oranini, belirli bir eseyde kiyaslanabilir bir konsantrasyonda IL-2°ye kiyasla daha büyük bir düzeye kadar düsürebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikor, CTL sitotoksisitesini stimüle edebilir. Bir antikorun CTL sitotoksisitesini stimüle etme kabiliyeti, sektörde bilgi ve beceri kisilerin bildikleri yönteinlerle ölçülebilir. Bir T hücresinin belirli bir hedef hücreye yönelik sitotoksistesi, örnegin "Zaritskaya et al. Expert ReV Vaccines birisi kullanilarak arastirilabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, in-Vivo ortamda immün hücrelerin proliferasyonunu stiinüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, in-vivo ortamda CD3+ hücrelerinin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, in-vivo ortainda CD8+ T hücrelerinin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, in-vivo ortamda CD4+ T hücrelerinin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikor, in-Vivo ortamda NK hücrelerinin proliferasyonunu stimüle edebilir. Bu bulus açiklamasinin özelliklerinde ve yapilarinda, istenen özelliklere sahip hücrelerin stimülasyonu ya da genisletilmesi prosesleri in-vitro ya da in-Vivo ortamda gerçeklestirilebilir. In- Vitro stiinülasyon ya da genisletme, istenen özellikler açisindan zengilestirilmis bir hücre popülasyonu saglayabilir; bu hücre popülasyonu toplanabilir ve bir denege uygulamayi kapsayabilecek istenen amaç dogrultusunda kullanilabilir. In-Vivo stimülasyon ya da genisletme, örnegin bir hastaligin tedavisinde ya da önlenmesinde denek için faydali olan hücrelerin popülasyonunu zenginlestirebilir. In-Vivo stimülasyon ya da genisletme, bir adjuvan etkiye ya da etkinlige sahip olabilir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, bu bulusa konu olan antikor, bir CD122-baglay1ci antikor klonunun antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, klon P2C4"ün antikoru/fragmanini ya da bir P2C4 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_A4 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_A4 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_Bl klonunun antikoni/fragmanini ya da bir P2C4_Bl varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_B5 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_B5 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_Cl klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_Cl varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_C4 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_C4 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_C7 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_C7 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_D10 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_010 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_E6 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_E6 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_E7 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_E7 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_F8 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_F8 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_C1 DlO klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_C l D10 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_FW2 klonunun antikoru/fraginanini ya da bir P2C4_FW2 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2H7 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2H7 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2D12 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2D12 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, PlGll klonunun antikoru/fraginanini ya da bir PlGll varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_A9 klonunun antikoru/fraginanini ya da bir P2C4_A9 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_B6 klonunun antikoru/fragrnanini ya da bir P2C4_Bö varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_E9 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_E9 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_B8 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_B8 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_B12 klonunun antikoru/fraginanini ya da bir P2C4_B12 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_C12 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_C12 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_E2 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_E2 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_E3 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_E3 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_E8 klonunun antikoru/fraginanini ya da bir P2C4_E8 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_Fll klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_F11 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_G2 kloiiunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_G2 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_Gll klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_Gll varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_Hl klonunun antikoru/fraginanini ya da bir P2C4_Hl varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_H2 klonunun antikoru/fragmanini ya da bir P2C4_H2 varyantini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2C4_H3 kloiiunun antikoru/fraginanini ya da bir P2C4_H3 varyantini içerir. Onceki paragrafta CD122-baglayici antikor klonlarinin VL doinainlerinin ainino asit sekanslari, Kabat sistemine göre tanimlanan CDR"ler gibi, Sekil l"de gösterilmektedir. Onceki paragrafta CD122- baglayici antikor klonlarinin VH domainlerinin ainino asit sekanslari, Kabat sistemine göre tanimlanan CDR°ler gibi, Sekil 2°de gösterilmektedir. Antikor yapilarinin tam ainino asit sekanslari (baglayicilar dahil) Sekil 15"te gösterilinektedir ve kodlayici nükleotid sekanslari Sekil l7'de gösterilmektedir. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, P2C4, P2C4_A4, P2C4_B1, içerebilir. Bu bulus açiklamasina uygun bir antikorda, alti CDR sekansinin biri ya da ikisi ya da `üçü ya da dördü degisebilir. Bir varyant, alti CDR sekansinin birinde ya da ikisinde bir veya iki amino asit sübstitüsyonuna sahip olabilir. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, sirasiyla Sekil 1 ve 2"de gösterilen VL ve/Veya VH amino asit sekanslarinin birine veya daha fazlasina yüksek sekans özdesligi yüzdesine sahip bir amino asit sekansi içeren VL ve/Veya VH zincirleri içerebilir. Omegin, bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, Sekil 1°de gösterilen SEKANS KOD da l3°ten birisi ile teinsil edilen VL zinciri amino asit sekansina en az ya da %100 arasindan seçilen bir oranda sekans özdesligine sahip bir amino asit sekansi içeren bir VL zincirine sahip olan ve CD122°yi baglayan antikorlari kapsar. Bu bulus açiklainasina uygun antikorlar, temsil edilen VH zinciri ainino asit sekansina en az %70 oraninda, arasindan seçilen bir oranda sekans özdesligine sahip bir amino asit sekansi içeren bir VH zincirine sahip olan ve CD122°yi baglayan antikorlari kapsar. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, Sekil 17°de gösterilen 139, 140 ya da 141°den herhangi birisi ile temsil edilen nükleotid sekansinin kodladigi amino asit sekansina sahip bir antikoru ya da onun CD122-baglayici fragmanini kapsar. Bu bulus açiklamasina konu olan antikorlar, Sekil 17°de gösterilen SEKANS KOD NO.: 130, herhangi birisi ile temsil edilen nükleotid sekansinin kodladigi bir amino asit sekansinin VL ve/Veya VH domaini sekansini içeren bir antikoru kapsar. Bu bulusun bazi özelliklerinde, bu bulusa konu olan antikor, bir yc- baglayici antikor klonunun antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P1A3 klonunun ya da bir P1A3 varyantinin antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P1A3_B3 klonunun ya da bir P1A3_B3 varyantinin antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P1A3_E8 klonunun ya da bir P1A3_E8 varyantinin antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P1A3_E9 klonunun ya da bir P1A3_E9 varyantinin antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P1A3_B4 klonunun ya da bir P1A3_B4 varyantinin antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P1A3_FW2 klonunun ya da bir PlA3_FW2 varyantinin antikoru/fragmanini içerir. Bu bulusun bazi özelliklerinde, antikor, P2B9 klonunun ya da bir PZB9 varyantinin antikoru/fragmanmi içerir. Kabat sisteiniiie göre tanimlanan CDR°1er gibi, önceki paragrafta açiklanan yc-baglayici antikor klonlarinin VL domainlerinin amino asit sekanslari da Sekil 3"te gösterilmektedir. Kabat sistemine göre tanimlanan CDR"ler gibi, önceki paragrafta açiklanan yc-baglayici antikor klonlarinin VH doinainlerinin ainino asit sekanslari da Sekil 4°te gösterilinektedir. Antikor yapilarinin tam amino asit sekanslari (baglayicilar dahil) Sekil 16°da gösterilmektedir ve kodayici nükleotid sekanslari Sekil 18"de gösterilmektedir. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, PlA3, PlA3_B3 PlA3_B8, PlA3_E9, PlA3_B4, PlA3_FW2 ya da P2B9"un CDR°lerini içerebilir. Bu bulus açiklamasina uygun bir antikorda, alti CDR sekansinin biri ya da ikisi ya da 'üçü ya da dördü degisebilir. Bir varyant, alti CDR sekansinin biri veya ikisinde bir veya iki ainino asit sübstitüsyonuna sahip olabilir. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, sirayla Sekil 3 ve Sekil 4"te gösterilen VL ve/Veya VH amino asit sekanslarindan biri veya daha fazlasina yüksek oranda sekans özdesligine sahip bir amino asit sekansi içeren VL ve/Veya VH zincirlerine sahip olabilir. Örnegin, bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, Sekil 3°te gösterilen SEKANS KOD NO.: 67, 152, 71 ya da 75°ten birisi ile temsil edilen VL zinciri amino asit sekansina en az %70 oraninda, daha çok tercihen en az sekans özdesligine sahip bir amino asit sekansi içeren VL zincirine sahip olan ve yc"yi baglayan antikorlari kapsar. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, Sekil 4'te gösterilen SEKANS KOD NO.: 76, 153, 78, 82 ya da 84"ten birisi ile temsil edilen VH zinciri amino asit sekansina en az %70 oraninda, daha çok tercihen en az %75, %80, özdesligine sahip bir ainino asit sekansi içeren VH zincirine sahip olan ve yc°yi baglayan antikorlari kapsar. Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, Sekil 18°den gösterilen birisi ile temsil edilen nükleotid sekansinin kodladigi amino asit sekansina sahip bir antikoru ya da onun yc-baglayici fragmanini kapsar. Bu bulus açiklamasina konu olan antikorlar, Sekil 18°de herhangi birisi ile temsil edilen nükleotid sekansinin kodladigi bir amino asit sekansinin VL ve/Veya VH domaini sekansini içeren bir antikoru kapsar. Bu bulusa konu olan antikor, bir CD122-baglayici antikor klonunun, örnegin tarif edildigi gibi olan bir CD122-baglayici klonun antikoru/fragmanini kapsar ve ayrica, istemlerde tarif edildigi gibi, bir yc-baglayici klon, `Örnegin burada tarif edildigi gibi olan bir yc- baglayici klon içerir. Burada açiklanan hafif ve agir zincir CDRileri, birçok farkli çerçeve bölgesiyle baglantili olarak da özellikle kullanisli olabilir. Bu dogrultuda, LC-CDRl-3 ya da HC-CDR1-3°e sahip hafif ve/veya agir zincirler, bir alternatif çerçevwe bölgesine sahip olabilir. Uygun çerçeve bölgeleri sektörde iyi bilinmektedir ve örnegin "M. Lefranc & G. Le:franc (2001) "The Immunoglobulin FactsBook", Academic Press" referansinda tarif edildigi gibidir. Bu bulusa uygun antikorlar, belirlenebilir biçimde etiketlenebilir ya da en azindan, kendisi belirlenebilir niteliktedir. Örnegin, antikor, bir radyoaktif atomla ya da bir renklendirilmis molekül veya bir floresan molekül ya da baska herhangi bir sekilde kolaylikla belirlenebilir bir molekülle etiketlenebilirler. Uygun belirlenebilir moleküller arasinda floresan proteinler, lusiferaz, enzim sübstratlari ve radyo-etiketler vardir. Baglanma kismi, belirlenebilir bir etiketle dogrudan etiketlenebilecegi gibi, dolayli olarak da etiketlenebilir. Örnegin, baglanma kismi, kendisi etiketlenmis olan baska bir antikorla belirlenebilecek bir etiketsiz antikor olabilir. Alternatif olarak, ikinci antikor, kendisine bagli vaziyette biyotin içerebilir ve etiketli streptavidinin biyotine baglanmasi, birinci antikoru dolayli etiketlemek için kullanilir. Kimerik antiien reseptörleri Bu bulus, istemlerde tarif edildigi gibi CDl22"ye ve/Veya yc"ye baglanabilen bir kimerik antijen reseptör'û (CAR) sunar. Bu bulus açiklamasina uygun CAR°ler, bu bulus açiklamasina uygun bir veya daha fazla anti jen baglanma fraginani ya da polipeptid içerir. Kimerik anti jen reseptörler (CAR"ler), hem anti jen baglama hem de T hücresi aktive etme fonksiyonlari saglayan rekoinbinan reseptörlerdir. CAR yapisi ve mühendisligi, `Örnegin "Dotti et al., Immunol Rev (2014) 257( 1 )" referansinda incelenmektedir. Bu bulusa uygun antijen-baglanma fragmanlari, burada, bir kimerik antijen reseptörünün (CAR) antijen-baglanma domaini olarak sunulmaktadir. Bu bulusun bazi yapilarinda, CAR, burada tarif edilen bir antikor, anti jen baglanma fragmani ya da polipeptidin herhangi bir yapisina uygun bir VL domaini ve bir VH domaini içerir. Bu dogrultuda, bu bulusa uygun CAR tarafindan baglanan anti jen, CD122 ve/veya yc°dir. CAR"ler, T hücresi potansini, spesifisitesini ve emniyetiiii ilaveten arttirmak amaciyla kostimülat'or ligandlar, kimerik kostimülatör reseptörler ya da sitokinlerle kombine edilebilir (Sadelain et al., The basic principles of kimerik antijen reseptörü (CAR) design. Cancer 0548). Bu bulus, ayrica, istemlerde açiklandigi gibi, bu bulusa uygun bir CAR içeren bir hücre sunar. Bu bulusa uygun CAR, CD122 ve/veya yc eksprese eden hücreleri hedef alan T hücreleri olusturmak amaciyla kullanilabilir. CAR°lerin düzenlenerek T hücreleriiie dönüstürülnesi islemi, örnegin adoptif T hücresi tedavisi için T hücrelerinin genisletilmesi esnasinda meydana gelen gibi, traiisdüksiyon ve genisletme için in-vitro ortamda kültürleme esnasinda gerçeklestirilebilir. Transdüksiyonda çesitli farkli yöntemler kullanilabilir, fakat T hücrelerini klonlayarak genisletme ve persiste etmede sürekli CAR ekspresyonu saglamak için stabil gen trasnferi gerekir. Bir CAR normalde bir tekli kimerik protein içinde CD3- zeta zinciri ya da FcyRI proteiiiinin bir intraselüler doinainiyle bir anti jen baglanma domainini koinbine eder. Bir CAR°nin yapisal `Özellikleri, S jouke ve arkadaslari tarafindan tarif edilmektedir (The pharmacology of second-generation chimeric antigen receptors. Nature Reviews normalde bir transmembraii domain ve endodomaine bagli bir ekstraselüler antijen-baglanma domainine sahiptir. Bir opsiyonel mentese domaini ya da aralayici domain, baglanma kismi ile transmembran domain arasinda ayrilma saglayabilir ve bir esnek baglayici islevini görebilir. Bu bulus açiklamasina uygun olarak, CAR"in anti jen tanima domaini, burada tarif edildigi gibi CD122°ye ve/veya yc'ye baglaiiabilen bir antikor, antijen baglanma fragmani ya da polipeptiddir ya da bunlardan türetilir. CAR'nin mentese bölgesi ya da aralayici bölgesi, baglanma kisminin farkli yönlere yönelmesine olanak saglayan esnek domainler olabilir. Mentese bölgeleri ya da aralayici bölgeler, immünoglobulinin IgGl ya da the CH2CH3 bölgesinden türetilebilir. Transmembran domainler, hücre membranini kapsayan hidrofobik alfa sarmali olabilir. Endodomainle iliskilendirilen transmembran domain yaygin sekilde kullanilir. Endodomain, hücreye anti jen baglanmasi ve sinyal transdüksiyonu baslatilmasinin ardindan reseptör küme]enmesi/dimerizasyonundan sorumludur. Yaygin kullanilan bir transinembran domain, CD3-zeta transmembrani ve endodomaindir. CD28 4-1BB, OX40, ICOS gibi bir veya daha fazla ko-stimulatör protein reseptöründen intraselüler domain, istege bagli olarak, CAR°nin sitoplazmik kuyruguna dahil edilerek ilave ko-stimülatör sinyalleme saglayabilir ve bu, anti-tümör aktivite açisindan faydali olabilir. Bu bulusun bir yapisinda, bir CAR, bir antijen tanima domaini, bir transmembran domain ve bir sitoplazmik doniaiiie sahip bir ekstraselüler domain içerir. CAR°deki domainlerden birisiyle dogal olarak iliskilendirilen bir transmembran domain kullanilabilir ya da transmembran domain seçilebilir ya da amino asit sübstitüsyonuyla modifiye edilerek bu domainlerin ayni ya da farkli yüzey membran proteinlerinin transmembran domainlerine baglanmasi önlenebilir ve böylece, reseptör kompleksinin diger üyeleriyle etkilesimler asgari düzeye indirilebilir. Sitoplazmik domain, kendisi CD28 ve/veya 4-1BB sinyalleme domaini içerecek sekilde tasarlanabilir ya da istenen baska herhangi bir sitoplazmik domain(ler)le koriibieii edilebilir. Sitoplazmik domain, CD3-zeta sinyalleme domaini de içerecek sekilde tasarlanabilir. Örnegin, CAR sitoplazmik domaini, sadece bunlarla sinirli kalmaksizin, CD3-zeta, 4-1BB ve CD28 sinyalleme modüllerini ve bunlarin kombinasyonlarini kapsayabilir. Bu bulus açiklamasi, ayrica, bu bulus açiklamasina göre CD122°ye ve/Veya yc"ye baglanabilen bir anti jeii baglanma fragmanini bir CAR olarak içeren CAR T hücreleri sunar. Bulus açiklamasina konu olan CAR T hücreleri, bir istenen CAR"yi, örnegin anti-ILZRß/yc, CD8a mentese domaini ve transmembran domain ve insan 4-lBB ve CD3zeta sinyalleme doinainleri bulunan bir CAR"yi içeren bir lentiviral vektörü in-vitro ortamda hücreler içine sokmak suretiyle olusturulabilir. Bulus açiklamasina konu olan CAR T hücreleri in-Vivo ortamda replike olarak, sürekli tümör kontrolü saglayabilecek uzun süreli persistansa yol açabilir Bu bulusun bir yapisinda, bulus açiklamasi, kanser hastasi olan veya kanser riski altinda olan ya da bir enfeksiyöz hastaligi olan veya bir enfeksiyöz hastalik riski altinda olan bir hastanin lenfosit infuzyonu kullaiiarak tedavisi için CD122°ye ve/Veya ydye baglanabilen bir CAR eksprese eden genetik olarak modifiye edilmis bir T hücresi uygulamayla ilgilidir. Tercihen, otolog lenfosit infuzyonu tedavide kullanilir. Otolog PBMC"ler, tedaviye ihtiyaci olan bir hastadan toplanir ve T hücreleri, burada tarif edilen ve sektörde bilinen yöntemler kullanilarak aktive edilir ve genisletilir ve ardindan, hastaya geri infûze edilir. Belirleme yöntemleri Burada tarif edilen antikorlar ya da antijen baglanma fragmanlari, antikorun ya da antijen baglanma fragmaninin CDl22"ye ve/veya yc"ye baglanmasini kapsayan yönteinlerde kullanilabilir. Bu yöntemler, antikor ya da aiitijen baglanma fragmani ve CD'122 ve/veya yc°nin bagli kompleksinin belirlenmesini kapsayabilir. Bu baglamda, bu bulusun bir yapisinda, CD122 ve/veya ye içeren ya da içerdiginden süphelenilen bir nuinunenin burada tarif edildigi gibi olan bir antikorla ya da antijen baglaiiina fragmaniyla temas ettirilmesi ve antikor ya da antijen baglanma fragmani ve CD122 ve/veya yc"nin bir koinpleksinin olusumunun belirlenmesi basamaklarini içeren bir yöntem sunulur. Sandviç eseyleri, ömegiii ELISA gibi immünoeseyler de dahil uygun yöntem formatlari sektörde iyi bilinmektedir. Yöntem, antikor veya anti jen baglanma fragmaninin ya da CD122 ve/veya ycinin ya da her ikisinin örnegin floresan, luminesan ya da radyo-etiket gibi bir belirlenebilir etiketle etiketleninesi basainagini kapsayabilir. CD122 ve/veya ye ekspresyonu, örnegin biyopsiyle elde edilen bir doku numunesinin immünohistokimyasi (IHC) yoluyla ölçülebilir. Bu tür yöntemler, CD122 ve/veya yc7nin belirleninesini ve/veya miktarinin tayin edilmesini gerektiren bir hastaligin ya da durumun tani yöntemi için dayanak teskil edebilir. Bu yöntemler, bir hasta numunesinde in-vitro ortamda ya da bir hasta iiumunesi proseslendikten sonra gerçeklestirilebilir. Numune toplandiktan sonra, hastanin gerçeklestirilecek in-vitro tani yöntemi için fiilen buluniriasi sart degildir ve dolayisiyla, bu yöntem, insan ya da hayvan vücudunda gerçeklestirilmeyen bir yöntem olabilir. Bu yöntemler, bir hasta numunesinde mevcut CD122 ve/veya yc miktarinin tayin edilmesini kapsayabilir. Yöntem, ek olarak, taniya ulasan bir prosesin parçasi olarak, tayin edilen miktarin bir staiidart veya referans degerle karsilastirilmasi basamagini da kapsar. Tani veya prognozun dogrulugunu arttirmak ya da burada tarif edilen testler kullaiiilarak elde edilen bir sonucu teyit etmek amaciyla burada tarif edilenlerle baglantili olarak baska tani testleri de kullanilabilir. Bir hasta numunesinde nievcut CD122 ve/veya yc seviyesi, bir hastanin bir anti-CD122 ve/veya anti-vc antikoruyla tedaviye cevap verebilip veremediginin göstergesi olabilir. Bir numunede CD122 ve/veya -yc°nin yüksek seviyede mevcut olmasi, bir anti-CD'122 ve/veya anti-ye antikoruyla tedavi için bir hasta seçmek amaciyla kullanilabilir. Sonuçta, bu bulusa konu olan antikorlar, anti-CD122 ve/veya anti-ye antikoruyla tedavi için bir hasta seçmek amaciyla kullanilabilir. Bir numunede anti-CD122 ve/veya anti-ye antikorunun belirlenmesi, hastada bir enfeksiyöz hastalik, otoimmün bozukluk veya bir kanseröz durumun tanisi, bir enfeksiyöz hastalik, otoiinmün bozukluk veya bir kanseröz duruma yatkinligin tanisi amaciyla ya da bir enfeksiyöz hastalik, otoiminün bozukluk veya bir kanseröz duruinun prognozunu saglamak (prognostikat) amaciyla kullanilabilir. Tani ya da prognoz, bir mevcut (önceden tanisi konulmus) enfeksiyöz hastalik, otoimmün bozukluk ya da bir kanseröz durumla iliskili olabilir. Bir numune, herhangi bir dokudan ya da vücut sivisindan alinabilir. Numune, asagida açiklananlari içerebilir ya da onlardan elde edilebilir: bir miktar kan; fibriii pihtisi ve kan hücreleri çikartildiktan sonra elde edilen kanin akiskan kismini içerebilecek, kisini kanindan elde edilen bir miktar serum; bir doku nuinunesi veya biyopsi ya da bahsi geçen kisiden izole edilen hücreler. Bu bulusa uygun yöntemler tercihen in-vitro ortamda gerçeklestirilebilir. "In-vitro" terimi, kültür içinde hücrelerle yapilan deneyleri kapsayacak anlamda kullanilir; "in-vivo" terimi ise intakt multi-selüler organizmalarla yapilan deneyleri ve/veya tedaviyi Terap'ötik uygulamalar Bu bulus açiklamasian uygun antikorlar, anti jen baglanma fragmanlari ve polipeptidlerve bu ajanlari içeren bilesimler, tibbi tedavi yöntemlerinde kullanilmak üzere sunulabilir. Bir hastaligi ya da rahatsizligi buluiian ve tedaviye ihtiyaci olan deneklere tedavi saglanabilir. Tibbi tedavi yöntemleri, bir insan denekte bir maligniteyi iyilestirme, tedavi etme ya da önleme amacina yönelik bir yöntemle kanserin tedavi edilmesini kapsayabilir; burada, yöntemin basamaklari, kanser hücrelerinin yok edilmesinde immün sistemi destekler ya da güçlendirir. Bu yöntemler, kanser hücrelerini tahrip etmek için bir aktif iininün cevap baslatan (ya da bir pasif immün cevap saglayan), bu bulus açiklamasina uygun hücreler, antikorlar, proteinler ya da nükleik asitlerin uygulanmasini kapsayabilir. Tedavi yöntemleri, istege bagli olarak, biyolojik adjuvanlarin (örnegin, interlökinler, sitokinler, Bacillus Comette-Guerin, monofosforil lipid A ve benzeri) kemoterapi, radyasyon ya da ameliyat gibi geleneksel kanser tedavileriyle kombinasyon halinde ve birlikte uygulanmalarini kapsayabilir. Tedavi yöntemleri, bu bulus açiklamasina uygun bir bilesimin, kanser hücresi çogalmasini önlemek ya da ortadan kaldirmak için iinmün sistemi aktive ederek islev gören bir asi olarak uygulanmasini kapsayabilir. Tibbi tedavi yöntemleri, otolog ve/veya heterolog hücreler ya da immortalize hücre hatlari kullanilanlar da dahil in-vivo, ex-vivo ve adoptif immünoterapileri de kapsayabilir. Hatsalik ya da durum, bir enfeksiyöz hastalik, bir otoimmün bozukluk (örnegin, Crohn hastaligi, Multipl Skleroz), bir kanser, bir inflamatuar hastalik (ömegin artrit), eksik IL-2-aracilik sinyalleme ve/veya IL-15- aracili sinyalleme, eksik T hücresi proliferasyonu ya da T hücresi disfonksiyonuyla iliskilendirilen bir hastalik/bozukluktan birisi olabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, tedavi, artan IL-2-aracili sinyalleinenin ve/veya IL-15 -aracili sinyallemenin terap'otik oldugu bir hastalik ya da bozuklugun tedavisidir. Bu bulusun bazi yapilarinda, tedavi, bir eksik T hücresi cevai, örnegin bir eksik CD8+ T hücresi cevabiyla iliskilendirilen bir hastalik ya da bozuklugun tedavisidir. Tedavi, asagida açiklananlarin biri veya daha fazlasiyla bir hastaligi/bozuklugu önlemeyi ya da tedavi etineyi hedefleyebilir: CD3+ T hücrelerinin sayisini arttirma, CD4+ T hücrelerinin sayisini arttirma, CD8+ T hücrelerinin sayisini arttirma, CD8+ efektör T hücrelerinin (örnegin CTL°ler) sayisini arttirma, NK hücrelerinin sayisini arttirma, CD8+ T hücrelerinin CD4+ T hücrelerine oranini arttirma ya da Treg"lerin oranini düsürme. T-hücresi disfonksiyonel bozuklugu, bir enfeksiyon olarak ya da bir enfeksiyona karsi etkin ve etkili bir iinmün cevap ortaya çikaramama olarak tezahür edebilir. Enfeksiyon, kronik, persistan, latent ya da yavas olabilir ve bakteriyel, viral, fungal enfeksiyon ya da parazit enfeksiyonunun sonucu olabilir. Sonuçta, tedavi, bir bakteriyel, viral ya da fungal enfeksiyonu olan hastalara sunulabilir. Bakteriyel enfeksiyonlara örnek olarak Helicobacter pylori efeksiyonu gösterilebilir. Viral enfeksiyonlara 'Örnek olarak EBV, HIV, hepatit B ya da hepatit C enfeksiyonu gösterilebilir. T-hücresi disfonksiyon bozuklugu, tümör immün kaçisi gibi bir kanserle iliskilendirilebilir. Birçok insan tümörü, T hücrelerinin tanidigi ve bir immün cevabi indükleyebilen tümör-iliskili anti jenler ekSprese eder. Herhangi bir T-hücresi disfonksiyon bozuklugu göstergesi olmayan, fakat bu bulus açiklamasina uygun bir antikor, antijen baglanma fragmani ya da polipeptid kullanmanin etkin ve etkili bir immün cevabi tesvik ettigi kanserler de tedavi edilebilir. Tedavi, eksik/azalmis IL-2-aracili sinyalleme ve/veya IL-lS-aracili sinyallemeyle iliskilendirilen bir hastaligin/bozuklugun 'önlenmesini hedefleyebilir. Sonuçta, antikorlar, antijen baglanma fragmanlari ve polipeptidler, farmas'otik bilesimleri ya da ilaçlari formüle etmek amaciyla kullanilabilir ve denekler, bir hastalik durumunun gelismesine karsi profilaktik olarak tedavi edilebilir. Bu durum, hastalik durumu baslamadan önce gerçeklesebilir ve/veya bunlar, hastalik veya bozukluk için büyük risk altinda oldugu düsünülen deneklere verilebilir. Tedavi, örnegin T-hücresi asisi gibi bir asiyla ko-terapiyi kapsayabilir; bu ko-terapi, eszamanli, ayri ya da sirali terapi olabilir ya da asi ve antikor, anti jen baglanma fragmani ya da polipeptidin bir tekli bilesim içinde kombine uygulamasini kapsayabilir. Bu baglamda, antikor, anti jen baglanma fragmani ya da polipeptid, asiya bir adjuvan olarak sunulabilir. Bir antikor, anti jen baglanma fragmani ya da polipeptidin uygulamasi tercihen "terapötik açidan etkin ve etkili miktarda" yapilir; bu iniktar, kisiye fayda saglainak için yeterli bir miktardir. Uygulanan fiili miktar ve uygulama hizi ve süresi, tedavi edilen hastaligin niteligine ve siddetine bagli olacaktir. Tedavinin reçetelendirilme sekli, örnegin dozaj ve benzerine iliskin kararlar, genel pratisyen hekimlerin ve diger tip doktorlarinin sorumlulugundadir ve norinalde tedavi edilecek bozukluk, münferit hastanin durumu, uygulama yeri, uygulama yöntemi ve uygulayicilarin bildikleri baska faktörler dikkate alinarak karar verilir. Yukarida bahsi geçen teknikler ve protokollerin örnekleri Lippincott, Williams & Wilkins" referansinda bulunabilir. Bu bulus açiklamasina konu olan CAR,ler ve bu CAR"leri içeren hücreler (yani, CAR-T hücreleri), örnegin Crohn hastaligi, Multipl Skleroz gibi otoimmün bozukluklari tedavi etmek için kullanilir. Bu tedavilerde, CAR-T hücreleri, CD122 ve/veya ye eksprese eden otoinnnün saldorgan hücreleri (ömegin otoreaktif T hücreleri) öldürmek için etkin ve etkilidir. Farmasötik açidan kullanisli bilesimlerin ve ilaçlarin formüle edilmesi Bu bulus açiklamasina uygun antikorlar, anti jen baglanma fragmanlari ve polipeptidler, CARiler ve hücreler, klinik kullaniin için farinasötik bilesimler ya da ilaçlar olarak formüle edilebilirler ve farmasötik açidan kabul edilebilir bir tasiyici, seyreltici, yardimci madde ya da adjuvan içerebilirler. Bu bulus açiklamasina uygun olarak, farmasötik açidan kullanisli bilesiinler üretmek için yöntemler de sunulur; bu üretim yöntemleri asagida açiklananlar arasindan seçilen bir veya daha fazla basamagi kapsayabilir: burada tarif edildigi gibi olan bir antikor, antijen baglanma fraginani, polipeptid, CAR ya da hücrenin izole edilmesi ve/Veya burada tarif eidldigi gibi olan bir izole antikor, antijen baglanma fragniani ya da polipeptidin farmasötik açidan kabul edilebilir bir tasiyici, adjuvan, yardimci madde ya da seyrelticiyle karistirilmasi. Örnegin, bu bulus açiklamasinin bir ilave özelligi, bir tibbi tedavi yönteminde kullanmak için bir ilaç ya da farmasötik bilesim formüle etme ya da üretme amacina yönelik bir yöntemle ilgilidir; bu yöntem, burada tarif edildigi gibi olan bir antikor, antijen baglanma fragmaiii, polipeptid, CAR ya da hücrenin farmasötik açidan kabul edilebilir bir tasiyici, adjuvan, yardimci madde ya da seyrelticiyle karistirilmasi suretiyle farmasötik bilesim ya da ilacin formüle edilmesini kapsar. Enfeksiyon Bir enfeksiyon, herhangi bir enfeksiyon ya da enfeksiyöz hastalik, örnegin bakteriyel, Viral, fungal ya da parazitik enfeksiyon olabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, kronik/persistan enfeksiyonlarin tedavi edilmesi özellikle istenebilir; örnegin, burada, bu enfeksiyonlar, T hücresi disfonksiyonuyla ya da T hücresi tükenmesiyle iliskilendirilir. T hücresi tükenmesinin birçok kronik enfeksiyon esnasinda (viral, bakteriyel ve parazitik dahil) ve yani sira, kanserde ortaya çikan bir T hücresi disfonksiyonu oldugu iyi bilinmektedir (Wherry Nature Tedavi edilebilecek bakteriyel enfeksiyonlara 'Örnek olarak Bacillus spp., Bordetella pertussis, Clostridiuin spp., Corynebacterium spp., Vibrio chloerae, Staphylococcus Spp., Streptococcus Spp. Escherichia, Klebsiella, Proteus, Yersinia, Erwina, Salmonella, Listeria sp, Helicobacter pylori, mikobakteriler (örnegin, Mycobacterium tuberculosis) ve Pseudomonas aeruginosa enfeksiyonlari gösterilebilir. Örnegin, bakteriyel enfeksiyon sepsis ya da tüberküloz olabilir. Tedavi edilebilecek viral enfeksiyonlara örnek olarak Epstein-Barr Virüsü, influenza virüsü, kizamik virüsü, hepatit B virüsü, (HBV), hepatit C Virüsü (HCV), insan immün-yetmezlik Virüsü (HIV), lenfositik koryomenenjit virüsü (LCMV), Herpes simplex virüs ve insan papilloma Virüsü enfeksiyonlari gösterilebilir. Tedavi edilebilecek fungal enfeksiyonlara örnek olarak Alternaria sp, Aspergillus sp, Candida sp ve Histoplasma sp enfeksiyonlari gösterilebilir. Fungal enfeksiyon, fungal sepsis ya da histoplazmoz olabilir. Tedavi edilebilecek parazitik enfeksiyonlara örnek olarak Plasmodium Species (örnegin Plasinodium falciparum, Plasmodium yoeli, Plasmodium ovale, Plasmodium Vivax ya da Plasmodium chabaudi chabaudi) enfeksiyonlari gösterilebilir. Parazitik enfeksiyon, Sitma, laysmanyaz ve toksoplazmoz gibi bir hastalik olabilir. Kanser Bir kanser, istenmeyen herhangi bir hücre proliferasyonu (ya da istenineyen hücre proliferasyonuyla tezahür eden herhangi bir hastalik), neoplaziii veya tümör olabilecegi gibi, istenmeyen herhangi bir hücre proliferasyonu, neoplazin veya tümör riskiiide artis ya da bunlara yatkinlik da olabilir. Kanser benign ya da malign olabilir ve primer ya da sekonder (inetastatik) olabilir. Bir iieoplazin ya da tüinör, hücrelerin anorinal çogalmasi ya da proliferasyonu olabilir ve herhangi bir dokuda konumlanabilir. Dokulara örnek olarak adrenal bez, adrenal medulla, anüs, apandis, mesane, kan, kemik, kemik iligi, beyin, meme, çekum, santral sinir sistemi (beyin dahil ya da hariç), serebellum, serviks, koloii, duodenum, eiidometriyum, epitel hücreleri (örnegin, böbrek epiteli), safra kesesi, özofagus, glial hücreler, kalp, ileuni, jejunum, böbrek, gözyasi bezi, larinks, karaciger, akciger, lenf nodu, lenfoblast, lenfoblast, inaksilla, mediastinuin, mezenter, miyometriyum, nazofarenks, omentum, agiz boslugu, yuinurtalik, paiikreas, parotis bezi, periferal sinir sistemi, peritoneum, plevra, prostat, tükürük bezi, sigmoid koloii, cilt, ince bagirsak, yumusak dokular, dalak, mide, testis, timus, tiroid bezi, dil, tonsil, trake, uterus, vulva, beyaz kan hücreleri gösterilebilir. Tedavi edilecek tümörler, sinir sisteiiii tümörleri ya da siiiir sistemi- disi tümörler olabilir. Sinir sistemi tümörleri, santral ya da periferal sinir sisteminde ortaya çikabilir; örnek olarak glioma, medulloblastoni, menenjiyom, nörofibrom, epeiidiinonia, Schwannoma, nörofibrosarkom, astrositom ve oligodendroglioma gösterilebilir. Sinir sistemi-disi kanserler/tümörler, sinir-harici baska herhangi bir dokuda ortaya çikabilir; örnekler arasinda melanom, mezotelyoma, lenfoma, miyelom, lösemi, Non-Hodgkin lenfoma (NHL), Hodgkin lenfomasi, kronik miyeloid lösemi (CML), akut miyeloid lösemi (AML), miyelodisplastik sendrom (MDS), kütanöz T-hücreli lenfoma (CTCL), kronik lenfositik lösemi (CLL), hepatoma, epidermoid karsinom, prostat karsinomu, meme kanseri, akciger kanseri, kolon kanseri, yumurtalik kanseri, pankreas kanseri, timik karsinom, NSCLC, heinatolojik kanser ve sarkom sayilabilir. Ozellikle, melanom, böbrek kanseri (örnegin, renal karsinom) ya da mesane kanseri tedavisi planlanmaktadir. Bu bulusun bazi yapilarinda, kanser, bir EBV ya da HPV pozitif kanserdir. Adoptif hücre transferi tedavisi Adoptif hücre transferi tedavisi, genellikle, tipik olarak beyaz kan hücrelerinin ayrildigi bir kan numunesi alinarak bir denekten beyaz kan hücrelerinin çikartildigi, in-Vitro ya da ex-Vivo ortamda genisletildigi ve ayni denege ya da farkli bir denege geri döndürüldügü bir prosese atif yapmaktadir. Tedavi normalde denekte gereken hücre popülasyonunun bir aktif formunun miktarinin/konsantrasyonunun arttirilmasini hedefler. Bu bulusa konu olan antikorlar/fragmanlar, CD122 ve/veya yc eksprese eden hücrelerin sayisini yükseltme ve/veya aktivitesini arttirma yolu saglar. Bu bulusun bazi yapilarinda, hücreler, T hücreleri ve/Veya NK hücreleridir. Bu dogrultuda, bu bulusun bir özelliginde, bir hücre popülasyonunu genisletme aamcina yönelik bir yöntem sunulur; burada, hücreler, in- Vitro ya da eX-vivo ortamda bu bulusa uygun bir antikor, antijen baglanma fragmani ya da bilesimle temas ettirilir. Burada ayrica bir denkete bir hücre popülasyonunu genisletme amacina yönelik olan ve bu bulus açiklamasina uygun bir aiitikoru/fragmani, bir antikor, antijen baglanma fragmani, polipeptid ya da bilesimi bir denege uygulama basamagini kapsayan bir yöntem de açiklanmaktadir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulusa konu olan antikorlar/fragmanlar, CD122 ve/Veya yc eksprese eden hücrelere bir sürVi sinyali gönderebilirler. Bu bulusun bazi yapilarinda, antikorlar/fragmanlar, bir hücrenin ya da hücre popülasyonunun (örnegin T hücreleri (örnegin CD8+ T hücreleri (örnegin CTLsler), CD4+ T hücreleri) ve/Veya NK cells) `Örnegin in-Vitro, in-vivo ya da eX-vivo ortamda sürvisini arttirmak/desteklemek için kullanisli ve faydalidir. Bu dogrultuda, burada, bir hücrenin ya da bir hücre popülasyonunun sürvisini arttirma/destekleme amacina yönelik olan ve hücrelerin in- Vitro, in-Vivo ya da ex-Vivo ortamda bu bulus açiklamasina uygun bir antikor, anti jen baglanma fragmani, polipeptid ya da bilesimle temas ettirildigi bir yöntem açiklanmaktadir. Bu bulusta, ayrica, bir denekte bir hücrenin ya da bir hücre popülasyonunun sürvisini arttirma/destekleme amacina yönelik olan ve bu bulus açiklamasina uygun bir antikorun/fragmaniii, bir antikor, antijen baglanma fragmani, polipeptid ya da bilesimin denege uygulanmasi basamagini kapsayan bir yöntem de açiklanmaktadir. Yöntemler, istege bagli olarak, asagida açiklanan basamaklarin birini ya da daha fazlasini içerebilir: bir deiiekten bi kan numunesi alma; hücreleri (Örnegin, PBMCüer, T hücreleri, NK hücreleri ve benzerlerinden biri) kan numunesinden izole etme; hücreleri in-vitro ya da ex-vivo hücre kültürü içinde kültürleme (burada, bunlar, antikor, antijen baglanma fragmani ya da polipeptidle temas ettirilebilirler), genisletilmis hücr popülasyonunu toplama; hücreleri bir adjuvaii, seyreltici ya da tasiyiciyla karistirma; genisletilmis hücreleri bir denege uygulama. Bu dogrultuda, bu bulus açiklamasi, bir denegin, örnegin bir T-hücresi disfonksiyonel bozukluguna sahip bir denegin tedavisine yönelik bir yöntem sunmaktadir; bu yöntem, tedaviye ihtiyaci olan bir demekten bir kan numunesi elde etme, kan numunesinden elde edilen T hücrelerini bu bulus açiklamasina uygun bir antikor, anti jen baglanma fragmani, polipeptid ya da bilesiinin varliginda kültürleyerek T hücresi popülasyonunu genisletme, genisletilen T hücrelerini toplama ve genisletilen T hücrelerini tedaviye ihtiyaci olan bir denege uygulama basainaklarini kapsar. T hücreleri, tedaviye ihtiyaci olan bir denekten elde edilebilir ve izole edilebilir ve/veya saflastirilabilir. Bunlar bir CD4+ ve/veya CD8+T- hücre popülasyonu olabilir. Bunlar bir CD122+ ve/veya yc+ popülasyonu olabilir. Kültürleme esnasinda, T hücreleri, T hücrelerinin istenen hücre sayisina ulasilana kadar çogaltilmasina olanak saglamak için uygun kosullar altinda ve süre boyunca antikor, anti jen baglanma fragmani, polipeptid ya da bilesimle temas ettirilebilir. Uygun bir zaman periyodundan sonra, T hücreleri hasat edilebilir; istege bagli olarak konsantre edilebilir ve uygun bir tasiyici, adjuvan ya da seyrelticiyle karistirilabilir ve denegin vücuduna geri döndürülebilir. Bir denek, bu tedavi döiigülerine birine veya daha fazla defa tâbi tutulabilir. T hücresi genisletme yöntemleri sektörde iyi bilinmektedir ve örnekleri asagida atif yapilan referanslarda tarif edilmektedir: Kwan Journal of Iinmunological Methods Vol. 275, Issues 1-2, 1 April 12 Jan 2012. Eszamanli ya da Sirali Uygulama Bilesimler tek baslarina uygulanabilecekleri gibi, tedavi edilecek duruma bagli olarak baska tedavilerle kombinasyon halinde eszamanli ya da sirayla da uygulanabilirler. Bu spesifikasyonda, bu bulus açiklamasina konu olan bir antikor, antijen baglanma fragmani, polipeptid, CAR, hücre veya bilesim ve bir anti-enfektif ajan ya da kemoterapötik ajan (terapötik ajan) eszamanli ya da sirayla uygulanabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina konu olan bir antikor, antijen baglanma fragmani ya da polipeptidle tedaviye kemoterapi eslik edebilir. Eszamanli uygulaina, antikor, 'Örnegin hem anti jen baglanma fraginaiii ya da polipeptid hem de terap'otik ajan içeren bir famiasötik bilesim (kombine preparat) olarak her iki a janin birlikte uygulaninasina ya da birbirlerinden hemen soiira ve istege bagli olarak, ayni uygulama yoluyla, örnegin ayni artere, vene ya da baska kan damarina uygulanmasina atif yapar. Sirali uygulama, diger ajanin ayri uygulanmasi yoluyla belirli bir zaman araligi verildikten sonra antikor, antijen baglanma fragmani veya polipeptid ya da terapötik ajandan birinin uygulaninasina atif yapar. Bu bulusun bazi yapilarinda, iki ajan ayni yolla uygulanmasina ragmen, bu sart degildir. Zainan araligi, herhangi bir zaman araligi olabilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, bu bulus açiklamasina konu olan antikor, antijen baglanma fragmani, polipeptid ya da bilesim, adoptif hücre transferiyle tedaviye tâbi tutulan bir hastaya uygulanabilir. Uygulama, in-Vivo ortamda hastada adoptif transfer edilen hücrelerin proliferasyonunu stimi'ile etmeyi hedefleyebilir. Anti-enfektif aianlar Enfeksiyon tedavisinde, bu bulus açiklamasina konu olan bir antikor, antijeii baglanma fragmani ya da polipeptid, yukarida tarif edildigi gibi, bir anti-enfektif ajanla kombinasyon halinde uygulanabilir. Anti- enfektif ajaii, enfeksiyondan sorumlu mikroorganizmaya ya da virüse karsi etkinlige sahip oldugu bilinen bir ajan olabilir. Uygun anti-enfektif ajanlar arasinda antibiyotikler (örnegin, penisilinler, sefalosporiiiler, rifamisinler, lipiarniisinler, kinolonlar, sülfonamidler, makrolidler, linkosamidler, tetrasiklinler, siklik lipOpeptidler, glisilsiklinler, oksazolidinonlar ve lipiarmisinler), antiviral ajanlar (örnegin, ters transkriptaz inhibitörleri, integraz inhibitörleri, transkripsiyon faktörü inhibitörleri, antisens ve siRNA ajanlari ve proteaz inhibitörleri), anti-fungal ajanlar (örnegin, polienler, imidiazoller, triazoller, tiyazoller, allilaminler ve ekinokandiiiler) ve anti-parazitik ajanlar (örnegin, antiiiematod ajanlari, antisestod ajanlari, aiititrematod ajanlari, antiamibik ajanlar ve antiprotozoal ajanlar) sayilabilir. Kemoterapi ve radyoterapi sirasiyla bir kanserin bir ilaçla ya da iyonize edici radyasyonla (örnegin X-isinlari ya da y-isinlari kullanarak radyoterapi) tedavisine atif yapmaktadir. Ilaç, bir kimyasal madde, örnegin küçük moleküllü farmasötik, antibiyotik, DNA interkalatörü, protein inhibitörü (örnegin, kinaz inhibitörü) ya da bir biyolojik ajan, örnegin antikor, antikor fragmani, nükleik asit ya da peptid aptanieri, nükleik asit (örnegin DNA, RNA), peptid, polipeptid ya da protein olabilir. Ilaç, bir farmasötik bilesim ya da ilaç olarak formüle edilebilir. Formülasyon, farniasötik açidan kabul edilebilir bir veya daha fazla seyreltici, yardimci madde ya da tasiyiciyla birlikte bir veya daha fazla ilaç (örnegin bir veya daha fazla etkin madde) içerebilir. Bir tedavi, birden fazla ilacin uygulaninasini kapsayabilir. Bir ilaç tek basina uygulanabilecegi gibi, tedavi edilecek duruma bagli olarak baska tedavilerle kombinasyon halinde eszamanli ya da sirayla da uygulanabilirler. Örnegin, kemoterapi, biri veya daha fazlasi kanseri tedavi etme amacina yönelik olabilecek iki ilacin uygulanmasini kapsayan bir ko-terapi olabilir. Kemoterapi, bir veya daha fazla uygulama yoluyla, örnegin parenteral, intravenöz enjeksiyon, oral, subkutan, intradernial ya da intratuinoral yolla uygulanabilir. Kemoterapi, bir tedavi rejimine göre uygulanabilir. Teadvi rejimi, bir doktor ya da baska tibbi uygulayici tarafindan hazirlanabilecek olan ve tedaviye ihtiyaci olan hastaya uygun hale getirilebilecek olan bir ya da programi olabilir. Tedavi rejinii asagida açiklananlarin birinin veya daha fazlasinin göstergesi olabilir: hastaya uygulanacak kemoterapi tipi; her bir ilacin ve radyasyonun dozu; uygulamalar arasindaki zaman araligi; her bir tedavinin uzunlugu; eger varsa, tedaviye ara verilen zamanlarin sayisi ve niteligi. Bir ko-terapi için, her bir ilacin nasil uygulanacagini gösteren bir tekli tedavi rejimi sunulabilir. Kemoterapötik ilaçlar ve biyolojikler asagida sayilanlar arasindan seçilebilir: cisplatin, karboplatin, niekloretamin, siklofosfamid, klorambusil, ifosfamid gibi alkilleme ajanlari; azatiyopurin ya da merkaptopurin gibi purin ya da pirimidin anti-inetabolitleri; alkaloidler ve terpenoidler, örnegin Vinka alkaloidleri (örnegin Vinkristin, Vinblastin, Vinorelbin, Vindesin), podofillotoksin, etoposid, teniposid, taksanlar, örnegin paklitaksel (TaxolTM), dosetaksel; t0p0izomeraz inhibitörleri, örnegin tip I t0p0izonieraz inhibitörleri kamptotesinler irinotekan ve topotekan ya da tip II topoizomeraz inhibitörleri anisakrin, etoposid, etoposid fosfat, teniposid; antitümör antibiyotikleri (örnegin antrasiklin antibiyotikleri), örnegin daktinomisin, doksorubisin (Adrianiycin'lM), epirubisin, bleomisin, rapamisin; antikor bazli ajanlar, örnegin anti-PD-l antikorlari, anti- PD-Ll antikorlari, anti-TIM-3 antikorlari, anti-CTLA-4, anti-4-1BB, anti-GITR, anti-CD27, anti-BLTA, anti-OX43, anti-VEGF, anti- TNFOL, anti-IL-Z, antiGpIIb/IIIa, anti-CD-52, anti-CDZO, anti-RSV, anti-HERZ/neu(erbB2), anti-TNF reseptörü, anti-EGFR antikorlari, monoklonal antikorlar ya da antikor fragmanlari, örnegin setuksimab, panitumumab, infliksimab, basiliksimab, bevasizumab (Avastin®), absiksimab, daklizuniab, genituzumab, alemtuzuniab, rituksiniab (Mabthera®), palivizumab, trastuzumab, etanersept, adalimumab, nimotuzumab; EGFR iiiihibitörleri, örnegin erlotinib, setuksiniab ve gefitinib; anti-anjiyogenik ajanlar, örnegin bevasizumab (Avastin®); kanser asilari, örnegin Sipuleucel-T (Provenge®). Bu bulusun bir yapisinda, kemoterapötik ajan, bir anti-PD-l antikoru, anti-PD-Ll antikoru, anti-TIM-3 antikoru, anti-LAG-3, anti-CTLA-4, anti-4] BB, anti-GITR, anti-CD27, anti-BLTA, anti-OX43, anti- VEGF, anti-TNFOL, anti-ILZ, anti-GpIIb/Illa, anti-CD-SZ, anti-CD20, anti-RSV, anti-HERZ/neu(erbB2), anti-TNF reseptörü, anti-EGFR ya da baska antikordur. Bu bulusun bazi yapilarinda, kemoterapötik ajan, bir immün kontrol noktasi inhibitörû ya da kostiin'ûlasyon molekülüdür. Ilave kemoterapötik ilaçlar asagida sayilanlar arasindan seçilebilir: 13- cis-Retinoik Asit, 2-K10r0de0ksiadenozin, S-Azasitidin 5-F10r0urasil, 6-Merkapt0purin, 6-Tiy0guanin, Abraksan, Accutane®, Aktinoinisin- D Adriamycin®, Adruci1®, Afinit0r®, Agrylin®, Ala-Cort®, Aldeslökin, Alemtuzumab, ALIMTA, Alitretinoin, A1kaban-AQ®, Alkeran®, All-transretinoik Asit, Alfa Interferon, Altretamin, Ainetopterin, Arnifostin, Aininoglutetirnid, Anagrelid, Anandr0n®, Anastrozol, Arabinosilsitozin, Aranesp®, Aredia®, Ariinidex®, Aromasin®, Arranon®, Arsenik Trioksit, Asparaginaz, ATRA Avastin®, Azasitidin, BCG, BCNU, Bendamustin, Bevasizumab, Beksaroten, BEXXAR®, Bikalutainid, BiCNU, Blenoxane®, Bleomisin, Bortezomib, Busülfan, Busulfex®, Kalsiyum Lökovorin, Cainpath®, Camptosar®, Camptotekin-l 1, Kapesitabin, Carac"`M, Karboplatin, Karinustin, Casodex®, CC-5013, CCI-779, CCNU, CDDP, CeeNU, Cerubidine®, Setuksimab, Klorambusil, Cisplatin, Sitrovorum Faktörü, Kladribin, Kortizon, C0sn1egen®, CPT-ll, Siklofosfamid, Cytadren®, Sitarabin Cytosar-U®, Cytoxan®, Dakogen, Daktinomisin, Darbepoetin Alfa, Dasatinib, Daunomisin, Daunorubisin, Daunorubisin Hidroklor'ûr, Daunorubisin Lipozoinal, DaunoXome®, Dekadron, Desitabin, Delta-C0rtef®, Deltasone®, Denilökin, Diftitoks, DepoCytTM, Deksametazon, Deksametazon Asetat, Deksametazon Sodyum Fosfat, Deksason, Deksrazoksan, DHAD, DIC, Diodeks, Dosetaksel, D0xil®, Doksorubisin, Doksorubisin Lipozomal, DroxiaTM, DTIC, DTIC-Dome®, Duralone®, EligardTM, EllenceTM, EloxatinTM, Elspar®, Emcyl®, Epirubisin, Epoetin Alfa, Erbituks, Erlotinib, Erwinia L-asparaginaz, Estramustin, Ethyol Etopophos®, Etopozit, Etopozit Fosfat, Eulexin®, Everolimus, Evista®, Eksemestan, Faslodex®, Femara®, Filgrastim, Floksuridin, Fludara®, Fludarabin, Fluoroplex®, Florourasil, Floksimesteron, Flutamid, Folinik Asit, FUDR®, Fulvestrant, Gefitinib, Gemsitabin, Gemtuzumab ozogamisin, GleevecTM, Gliadel® Wafer, Goserelin, Granülosit - Koloni Stimüle Edici Faktör, Gran'ûlosit Makrofaj Koloni Stimüle Edici Faktör, Herceptin®, Heksadrol, Hexalen®, Heksametilmelamin, HMM, Hycamtin®, Hydrea®, Hydrocort Acetate®, Hidrokortizon, Hidrokortizon Sodyum Fosfat, Hidrokortizon Sodyum Süksinat, Hidrokorton Fosfat, Hidroksiüre, Ibritumomab, Ibritumomab Tiuksetan, Idamycin®, Idambisin, Ifex®, IFN-alfa, Ifosfamid, IL-l 1, Interferon Alfa-2b (PEG Konjugat), Interlökin - 2, Interlökin-ll, Intron A® (interferon alfa-Zb), lressa®, Irinotekan, Izotretinoin, Iksabepilon, IxempraTM, Kidrolaz, Lanacort®, Lapatinib, L- asparaginaz, LCR, Lenalidomid, Letrozol, Lökovorin, Leukeran, LeukineTM, Leuprolid, Leurokristin, LeustatinTM, Lipozomal Ara-C, Liquid Pred®, Lomustin, L-PAM, L-Sarkolizin, Lupron®, Lupron Depot®, Matulane®, Maksideks, Mekloretamin, Mekloretamin Hidroklorür, Medralone®, Medrol®, Megace®, Megcstrol, Megestrol Asetat, Melfalan, Merkaptopurin, Mesna, MesnexTM, Metotreksat, Metotreksat Sodyum, Metilprednisolon, Meticorten®, Mitomisin, Mitomisin-C, Mitoksantron, M-Prednisol®, MTC, MTX, Mustargen®, Mustin, Mutamycin®, Myleran®, Mylocel'1`M, Mylotarg®, Navelbine®, Nelarabin, Neosar®, NeulastaTM, Neumega®, Neupogen®, Nexavar®, Nilandron®, Nilutamid, Nipent®, Nitrojen Mustard, Novaldex®, Novantrone®, Oktreotid, Oktreotid asetat, Oncospar®, Oncovin®, Ontak®, OnxalTM, Oprevelkin, Orapred®, Orasone®, Oksaliplatin, Paklitaksel, Paklitaksel Protein-bagli, Pamidronat, Panitumumab, Panretin®, Paraplatin®, Pediapred®, PEG Interferon, PegaSpargaz, Pegfilgrastim, PEG-INTRONTM, PEG-L-asparaginaz, PEMETREXED, Pentostatin, Fenilalanin Mustard, Platin01®, Platinol-AQ®, Prednisolon, Prednison, Prelone®, Prokarbazin, PROCRIT®, Proleukin®, Karmustin Implant] Purineth01® ile Prolifeprospan 20, Raloksifen, Revlimid®, Rheumatrex®, Rituxan®, Rituksimab, R0fer0n-A® (Interferon Alfa-221), Rubex®, Rubidomisin hidroklorür, Sandostatin® Sandostatin LAR®, Sargramostim, Solu- Cortef®, Solu-Medrol®, Sorafenib, SPRYCELTM, STI-571, Streptozosin, SU11248, Sunitinib, Sutent®, Tamoksifen, Tarceva®, Targretin®, TaX01®, Taxotere®, Teinodar®, Temozolomid, Temsirolimus, Tenipozit, TESPA, Talidomid, Thalomid®, TheraCys®, Tiyoguanin, Tiyoguanin Tabloid®, Tiyofosfoamid, Thioplex®, Tiyotepa, TICE®, Toposar®, Topotekan, Toremifen, T0risel®, Tositumomab, Trastuzumab, Treanda®, Tretinoin, TrexallTM, Trisenox®, TSPA, TYKERB®, VCR, VectibiXTM, Velban®, Velcade®, VePesid®, Vesanoid®, ViadurTM, Vidaza®, Vinblastin, Vinblastin Sülfat, Vincasar Pfs®, Vinkristin, Vinorelbin, Vinorelbin tartrat, VLB, VM-26, Vorinostat, VP-16, Vu1n0n®, Xeloda®, Zanosar®, ZevalinTM, Zinecard®, Zoladex®, Zoledronic asit, Zolinza, Z0meta®. Uygulama yollari Bu bulus açiklamasinin özelliklerine uygun antikorlar, antijen baglanma fragmanlari, polipeptidler ve baska terapötik ajanlar, ilaçlar ve farinasötik bilesimler, sadece buiilarla sinirli kalmaksizin, parenteral, intravenöz, intra-arterial, intramüsküler, subkutan, intradermal, intratumoral ve oral da dahil birçok yolla uygulama için formüle edilebilir. Antikorlar, antijen baglanma fragmanlari, polipeptidler ve baska terapötik ajanlar, sivi ya da kati forinda formüle edilebilir. Sivi formülasyonlar, insan ya da hayvan vücudunun bir seçili bölgesine enjeksiyonla uygulama için forinüle edilebilir. DOZaj reiimi Bu bulus açiklamasina konu olan antikor, anti jen baglanma fragmani, polipeptid, CAR, hücre ya da bilesimin çoklu dozlari sunulabilir. Dozlarin biri veya daha fazlasina ya da her birine, baska bir terapötik ajanin eszamanli ya da sirali uygulainasi eslik edebilir. 4, 5 veya 6 ay arasindan seçilebilecek önceden tayin edilen bir zaman araligiyla ayrilabilir. Ornegin, dozlar, 7, 14, 21 ya da 28 günde (arti ya da eksi 3, 2 ya da 1 gün) bir verilebilir. Bu bulusa konu olan antikor, bir terapötik ajan olarak IL-2"ye kiyasla istenen farmakokinetik özelliklere sahiptir. Bu bulusa konu olan antikor/fragmanin bir avantaji, in-vivo ortamda, örnegin kanda ya da serumda lL-2°ye kiyasla gelismis yari-ömre sahip olmasidir; bu, antikor/fragman uygulamasinin daha az siklikla yapilabilecegi ve/Veya daha düsük bir miktarda a janiii uygulanabilecegi anlamina gelir. Kitler Bu bulusta parçalardan olusan bir kit de açiklanmaktadir. Bu bulusun bazi yapilarinda, kit, 'Önceden tayin edilen miktarda antikor, fragman, polipeptid, CAR, hücre ya da bilesime sahip en az bir kap içerebilir. Kit, antikor, fragman, polipeptid, CAR ya da hücreyi bir ilaç ya da farmasötik bilesim formunda sunabilir ve belirli bir hastaligi ya da durumu tedavi etmek amaciyla bir hastaya uygulama yapilmasina iliskin taliinatlarla birlikte sunulabilir. Aiitikor, fragman, polipeptid, CAR, hücre ya da bilesim, bir tümöre ya da kana enjeksiyon veya infüzyon için uygun olacak sekilde formüle edilebilir. Bu bulusun bazi yapilarinda, kit, ek olarak, önceden tayin edilen miktarda baska bir terapötik ajana (örnegin anti-enfektif ajan ya da kemoterapi ajani) sahip en az bir kap da içerebilir. Bulusun böyle yapilarinda, kit, ayrica, iki ilaç veya farnias'otik bilesim spesifik hastalik ya da durum için bir kombine tedavi saglayacak, bu sebeple eszamanli ya da ayri ayri uygulanabilecek sekilde bir ikinci ilaç ya da farmasötik bilesim de içerebilir. Terapötik ajan, ayrica, bir tümöre veya kana enjeksiyon ya da infüzyon için uygun olacak sekilde de formüle edilebilir. Denekler Tedavi edilecek denek herhangi bir hayvan ya da insan olabilir. Denek tercihen memeli, daha çok tercihen insandir. Denek, bir indan-disi memeli olabilir, fakat daha çok tercihen insandir. Denek erkek ya da kadin olabilir. Denek bir hasta olabilir. Bir denek, tedavi gerektiren bir hastalik veya durum tanisi konulinus olan ya da böyle bir hastaliga veya duruma sahip oldugundan süphelenilen bir denek olabilir. Protein Ekspresvonu Hücrelerde bu bulus açiklamasina uygun antikor, fragman, polipeptid ya da CAR üretmek için uygun moleküler biyoloji teknikleri, örnegin York: Cold Spring Harbor Press, 1989" referansinda tarif edilenler gibi sektörde iyi bilinen teknilerdir. Polipeptid, bir nükleotid sekansindan eksprese edilebilir. Nükleotid sekansi, bir hücre içinde bulunan bir vektör içine konulabilir ya da hücrenin genomuna dahil edilebilir. Bu dokümanda kullanildigi anlamiyla bir "vektör", eksojen genetik malzemeyi bir hücre içine aktarmak için bir vehikül olarak kullanilan bir oligonükleotid molekülüdür (DNA ya da RNA). Vektör, hücre içinde genetik malzemenin ekspresyonu için bir ekspresyon vektörü olabilir. Bu vektörler, eksprese edilecek gen sekansini kodlayan nükleotid sekansina operabl bagli bir proinotor sekansi kapsayabilir. Bir vektör, ayrica, bir terminasyon kodonunu ve ekSpresyon arttiricilari da kapsayabilir. Bu bulus açiklamasina uygun bir vektörden polipeptidleri eksprese etmek için, sektörde bilinen uygun vektörler, promotorlar, arttiricilar ve terminasyon kodonlari kullanilabilir. Uygun vektörler arasinda plazmidler, ikili vektörler, Viral vektörler ve artifisyel kromozomlar (örnegin, inaya yapay kromozomlari) vardir. Bu patent spesifikasyonunda, "operabl bagli" terimi, nükleotid sekansinin ekspresyonu regülatör sekansin etkisi veya kontrolü altina olacak (bu yolla, bir ekSpresyon kaseti olusturulacak) sekilde, bir seçili nükleotid sekansinin ve regülatör iiükleotid sekansinin (örnegin, promotor ve/Veya arttirici) kovalent baglandigi durumu kapsayabilir. Sonuçta, bir regülatör sekans, seçilen nükleotid sekansinin transkripsiyoriunu etkileyebiliyorsa, 0 regülatör sekans, bir seçili nükleotid sekansina operabl baglidir. Uygun olmasi halinde, elde edilen transkript, daha sonra, bir istenen proteine ya da polipeptide transle edilebilir. Polipeptidlerin ekSpresyonu için uygun herhangi bir hücre, bu bulus açiklamasina uygun peptidler üretmek için kullanilabilir. Hücre, bir prokaryot ya da ökaryot olabilir. Uygun prokaryotik hücreler arasinda E.coli vardir. Okaryotik hücrelere örnek olarak bir inaya hücresi, bir bitki hücresi, böcek hücresi ya da bir memeli hücresi gösterilebilir. Bazi durumlarda, hücre, bir prokaryotik hücre degildir, çünkü bazi prokaryotik hücreler, ökaryotlarla ayni post-translasyonel modifikasyonlara olanak saglamaz. Ek olarak, ökaryotlarda çok yüksek ekspresyon seviyeleri mevcuttur ve proteinler, uygun taglar kullanilarak ökaryotlardan daha kolay saflastirilabilir. Proteinin vasata salgisini arttiran spesifik plazmidler de kullanilabilir. Ilgili bir polipeptidi üretme yöntemleri, polipeptid eksprese etmek için modifiye edilen bir hücrenin kültürlenmesini ya da fermentasyonunu kapsayabilir. Kültürleme ya da fermentasyon islemleri, uygun bir besin, hava/oksijen ve/Veya büyüme faktörleri kaynagi saglanan bir biyoreaktörde gerçeklestirilebilir. Salgilanan proteinler, kültür vasati / fermentasyon brothu hücrelerden ayrilarak, protein içerigi ekstrakte edilerek ve salgilanan polipeptidi izole etmek için münferit proteinler ayrilarak t0planabilir. Kültürleme, fermentasyon ve ayirma teknikleri, sektörde bilgi ve beceri sahibi kisilerce iyi bilinmektedir. Biyoreaktörler, hücrelerin kültürlenebilecegi bir veya daha fazla kap içerir. Biyoreaktörde kültürleine islemi, reaktanlarin reaktöre kesintisiz akisi ve kültürlenmis hücrelerin reaktörden kesintisiz akisiyla kesintisiz biçimde gerçeklesebilir. Alternatif olarak, kültürleme islemi kesintili de gerçeklesebilir. Biyoreaktör, kültürlenen hücreler için optimum kosullar saglanacak sekilde, pH, oksijen, kabin içine akis ve kaptan disari akis hizlari ve kap içinde çalkalaina gibi çevresel kosullari izler ve kontrol eder. Ilgili polipeptidi eksprese eden hücrelerin kültürleninesinden sonra, o polipeptid tercihen izole edilir. Sektörde bilinen hücre kültüründen polipeptidleri/proteinleri ayirmak için uygun herhangi bir yöntem kullanilabilir. Ilgili bir polipeptidi/proteini bir kültürden izole etmek amaciyla, ilk önce, kültürlenen hücreleri ilgili polipeptidi/proteini içeren vasattan ayirmak gerekebilir. Ilgili polipeptid/protein hücrelerden salgilanirsa, hücreler, salgilanan polipeptidi/proteini içeren kültür vasatindan santrifüjlenerek ayrilabilir. Hücre içinde ilgili polipeptid/protein toplanirsa, santrifüjlemeden önce örnegin sonifikasyon, hizli dondurma-çözdürme ya da ozmotik liziz kullanilarak hücrelerin harap edilmesi gerekecektir. Santritüjleme islemi, kültürlenmis hücreler ya da kültürlenmis hücrelerin hücre debrisi ve kültür vasati ve ilgili polipeptid/proteini içeren bir süpematan içerigine sahip bir pelet üretecektir. Daha sonra, ilgili polipeptidi/proteini baska protein ve protein-disi koinponentler içerebilecek süperiiatandan ya da kültür vasatiiidan izole etmek istenebilir. Polipeptid/protein komponeiitlerini bir süpematan ya da kültür vasatindan ayirmak için kullanilan bir yaygin yaklasim çökeltmedir. Farkli çözünürlüge sahip polipeptidler/proteinler, amonyum sülfat gibi çökelen ajamn farkli konsantrasyonlarinda çökelir. Örnegin, çökelen ajan konsantrasyonlarinin düsük oldugu durumlarda, suda çözünebilir proteinler ekstrakte edilir. Sonuçta, artan konsantrasyonlarda çökelen ajan ilave edilerek, farkli çözünürlüge sahip proteinler ayirt edilebilir. Daha sonra, ayrilan proteinlerden amonyum sülfati çikartmak için diyaliz kullanilabilir. Örnegin iyon degisim kromatografisi ve boyut kromatografisi gibi farkli polipeptidleri/proteinleri ayirt etmek için kullanilan baska yöntemler sektörde iyi bilinmektedir. Bunlar, çökeltme yöntemine bir alternatif olarak kullanilabilir ya da çökeltmeyi takiben gerçeklestirilebilir. Ilgili polipeptid/protein kültürden izole edildikten sonra, proteini konsantre etmek gerekebilir. Ultrafiltrasyon ya da liyofilizasyon gibi ilgili bir proteini konsantre etmek için birçok yöntem sektörde bilinmektedir. Sekans Ozdesligi Ainino asit ya da nükleotid sekans özdesligi yüzdesini tayin etme amaçlarina yönelik hizlama, sektörde bilgi ve beceri sahibi bir kisinin bildigi çesitli farkli yollarla, örnegin ClustalW 1.82, T-coffee ya da Megalign (DNASTAR) yazilimi gibi herkesin kullanimina açik bilgisayar yaziliini kullanilarak saglanabilir. Bu gibi yaziliin kullanildiginda, örnegin bosluk cezasi ve uzatma cezasi için varsayilan parametreler tercihen kullanilir. ClustalW 1.82 varsayilan parametreleri sunlardir: Protein Bosluk Açikligi Cezasi = 10.0, Protein Bosluk Uzaman Cezasi : 0.2, Protein matrisi : Gonnet, Protein/DNA ENDGAP : -l , Protein/DNA GAPDIST : 4. Bulus açiklamasinda, böyle bir kombinasyonun açikça kabul edilemez oldugu ya da açikça önlendigi durumlar hariç, tarif edilen özelliklerin ve tercih edilen özelliklerin kombinasyonu tasarlanmaktadir. Burada kullanilan bölüm basliklari yalnizca organizasyon amaçlidir ve tarif edilen konuyu sinirlandirdigi yorumu yapilamaz. Bu bulusun özellikleri ve yapilari, örnegin ekte sunulan sekillere atif yapilarak detayli tarif edilecektir. Bulusun ilave özellikleri ve yapilari, sektörde bilgi ve beceri sahibi kisilerce açikça anlasilacaktir. Asagida verilen isteinler de dahil bu patent spesifikasyonu boyunca, baglam aksini gerektirmedikçe, "içermek" sözcügü ve onun "içerir" ve tainsayilar veya basamaklar grubunun dahil edilmesine isaret ettigi, fakat herhangi bir baska tamsayi veya basamak ya da tamsayilar veya basamaklar grubunun hariç tutulmasina isaret etmedigi anlasilacaktir. Bu patent spesifikasyonunda ve ekli istenilerde kullanildigi gibi, "bir", çogul göndergeleri de kapsadigi not edilmelidir. Araliklar, bu dokümanda, "yaklasik" belirli bir degerden itibaren ve/Veya "yaklasik" belirli baska bir degere kadar seklinde ifade edilebilir. Böyle bir aralik verildiginde, bulusun baska bir yapisi, belirli bir degerden ve/Veya belirli baska degere anlamini kapsar. Benzer sekilde, degerler yaklasik degerler olarak ifade edildiginde, "yaklasik" öncülüni'in kullanilmasiyla, belirli degerin bulusun baska bir yapisini olusturdugu anlasilacaktir. Sekillerin Kisa Tanimi Bulusun prensiplerini gösteren yapilar ve deneyler, ekte sunulan sekillere atif yapilarak açiklanacaktir; burada: Sekil 1. Anti-lL-ZRB antikor klonlari için hafif Zincir degisken domain sekanslari. CDR"lerin alti çizilmistir ve bunlar ayri olarak gösterilmektedir. Sekil 2. Anti-lL-ZRB antikor klonlari için agir Zincir degisken domain sekanslari. CDR°lerin alti çizilmistir ve bunlar ayri olarak gösterilmektedir. Sekil 3. Anti-ye antikor klonlari için hafif zincir degisken domain sekanslari. CDR"lerin alti çizilmistir ve bunlar ayri olarak gösterilmektedir. Sekil 4. Anti-yc antikor klonlari için agir zincir degisken domain sekanslari. CDRalerin alti çizilmistir ve bunlar ayri olarak gösterilmektedir. Sekil 5.Anti-IL-2Rß antikor klonlari için hafif zincir CDR sekanslarini gösteren Tablo. Sekil 6. Anti-IL-ZRB antikor klonlari için agir zincir CDR sekanslarini gösteren tablo. Sekil 7. Anti-ye antikor klonlari için hafif zincir CDR sekanslarini gösteren tablo. Sekil 8. Anti-yc antikor klonlari için agir zincir CDR sekanslarini gösteren tablo. Sekil 9. P2C4-kaynakli anti-IL-ZRß antikor klonlari için hafif zincir CDR sekanslarini gösteren tablo. Sekil 10. P2C4-kaynakli anti-IL-2Rß antikor klonlari için agir zincir CDR sekanslarini gösteren tablo. Sekil 11. P1A3-kaynakli anti-yc antikor klonlari için hafif zincir CDR sekanslarini gösteren tablo. Sekil 12. P1A3-kaynakli anti-vc antikor klonlari için agir zincir CDR sekanslarmi gösteren tablo. Sekil 13. Anti-IL-ZRß antikor klonu P2C4 için CH2 ve CH3 domaini sekanslari. Sekil 14. Anti-vc antikor klonu PlA3 için CH2 ve CH3 domaini sekanslari. Sekil 15. Anti-IL-ZRß antikor klonlari için amino asit sekanslari. VH domainleri alti çizili olarak gösterilmektedir. (GGGS)3 baglayicilar (ve onlarin varyantlari) koyu karakterlerle gösterilmektedir.VL domainleri alti çift çizgili olarak gösterilmektedir. Kisa baglayicilar italik ve koyu karakterlerle gösterilmektedir. Menteseler italik olarak gösterilmektedir. CH2 domainleri noktali alt çizgili olarak gösterilmektedir. CH3 domainleri kesikli alt çizgili olarak gösterilmektedir. Sekil 16. Anti-yo antikor klonlari için amino asit sekanslari. VH domainleri alti çizili olarak gösterilmektedir. (GGGS)3 baglayicilar (ve onlarin varyantlari) koyu karakterlerle gösterilmektedir. VL domainleri alti çift çizgili olarak gösterilmektedir. Kisa baglayicilar italik ve koyu karakterlerle gösterilmektedir. Menteseler italik olarak gösterilmektedir. CH2 domainleri noktali alt çizgili olarak gösterilmektedir. CH3 domainleri kesikli alt çizgili olarak gösterilmektedir. Sekil 17. Anti-IL-ZRB antikor klonlari için nükleotid sekanslari. Sekil 18. Anti-ye antikor klonlari için nükleotid sekanslari. Sekil 19. BISpesifik anti-IL-ZRß/yc antikorunun sematik temsili. Sekil 20. Yüzey plazmon rezonans analiziyle tayin edildigi gibi, bispesifik anti-IL-ZRß/yc aiitikorunun (A) insan IL-2Rß"sina ve (B) insan yc°sine baglanmasini gösteren sensorgramlar. Sekil 21. Akis sitometrisiyle tayin edildigi gibi, bispesifik anti- (ve eksprese etmeyen kontrol hücrelerine) ve (B) PBMC"lere baglanmasini gösteren histogramlar. Sekil 22. Akis sitometrisiyle tayin edildigi gibi, NK92 hücrelerinin IL-2 ya da bispesifik anti-IL-2Rß/yc antikoruyla in- Vitro ortamda tedavisi yoluyla STATS, Akt ve ERK aracili sinyallemenin indüksiyonunu gösteren histogramlar. Sekil 23. Akis sitometrisiyle tayin edildigi gibi, farkli immün hücre alt-setleri için IL-2 ya da bispesifik anti-IL-ZRB/yc antikoruyla in-vitro ortamda tedaviye cevap olarak STATS fosforilasyonu yüzdesini gösteren grafik. Sekil 24. Yaliiizca IL-2Rß ya da yc için spesifisite gösteren bispesifik anti-IL-ZRß/yc antikoruyla ya da kontrol antikorlariyla tedaviye cevap olarak IL-2 bagimli NK92 hücrelerinin proliferasyonunu gösteren grafik. Sekil 25. Anti-IL-ZRß/yc antikoru tarafindan baglanmada baglayici uzunlugunun analiz sonuçlarini gösteren grafikler ve semalar. (A) Antikor ve scFV formatlarmm ve baglayicilarin sematik temsili (baglayicilar italik olarak gösterilmektedir). (B) Farkli uzunlukta baglayicilar içeren bispesifik anti-IL-2Rß/yc antikoruyla tedaviye cevap olarak NK92 hücrelerinin proliferasyonunu gösteren grafik. (C) Farkli uzunlukta baglayicilar içeren, bis-scFv formatinda bispesifik anti-IL- 2Rß/yc ile tedaviye cevap olarak NK92 hücrelerinin proliferasyonunu gösteren grafik. Sekil 26. Akis sitometrisiyle tayin edildigi gibi, in-vitro ortamda lL-2 ya da bispesifik anti-lL-ZRß/yc antikoruyla tedavi yoluyla sinomolgus inakak splenositlerinde STATS sinyallemesinin indüksiyonunu gösteren histogramlar. Sekil 27. Rekombiiian insan IL-2°sinin ya da belirtilen miktarda bispesifik anti-IL-2Rß/yc antikorunun (Mega2) varliginda 1 hafta süreyle PBMC°lerin kültürlenniesinin ardindaii T hücresi sayilari ve oranlarini gösteren grafikler. (A) CD3+ hücreleri, (B) CD4+ hücreleri, (C) CD8+ hücreleri ve (D) CD8+ hücrelerinin C D4+ hücrelerine orani. Sekil 28. Rekombinan insan IL-2°sinin ya da belirtilen miktarda bispesifik anti-IL-ZRß/yc antikorunun (Mega2) varliginda 1 hafta süreyle PBMC"lerin kültürlenmesinin ardindan Treg"lerin yüzdesini gösteren grafik. Sekil 29. Rekoinbinan insan lL-2°sinin ya da belirtilen miktarda bispesifik anti-lL-ZRB/yc antikorunun (MegaZ) varliginda 1 hafta süreyle PBMC°lerin kültürlenmesinin ardindan CD8+ hücrelerinin bir yüzdesi olarak CD8+ T hücresi alt-setlerini gösteren grafik. Her bir alt-set için soldan saga veri noktalari söyledir: IL-2 200 ng/ml, MegaZ 3 ug/ml, Mega2 1 ug/ml, MegaZ 0,3 ug/ml, MegaZ 0,3 ug/ml ve CD3/28. Sekil 30. EBV-LCL°lerin ve rekombinan insan IL-2isinin ya da belirtilen miktarda bispesifik anti-IL-ZRß/yc antikorunun (Mega2) varliginda bir EBV-seropozitif donörden PBMC°lerin kültürlenmesinin ardindan T hücresi sayilari ve oranlarini gösteren grafikler. (A) CD3+ hücreleri, (B) CD4+ hücreleri, (C) CD8+ hücreleri ve (D) CD8+ hücrelerinin CD4+ hücrelerine Sekil 31. EBV-LCL"lerin ve rekombinan insan IL-2°sinin ya da belirtilen miktarda bispesifik anti-lL-ZRß/yc antikorunun (Mega2) varliginda bir EBV-seropozitif donörden PBMC'lerin kültürlenmesinin ardindan T hücresi alt-setlerini gösteren grafikler. (A) CD8+ hücrelerinin bir yüzdesi olarak CD8+ T hücresi alt-setleri. Her bir alt-set için soldan saga veri noktalari söyledir: IL-2 200 ng/ml, MegaZ 3 ug/ml, Mega2 lu g/ml, hücrelerinin bir yüzdesi olarak CD8+PD1+ hücreleri ve (C) CD4+ hücrelerinin bir yüzdesi olarak Treg"ler. Sekil 32. EBV-LCL"lerin ve rekombinan insan lL-27sinin ya da belirtilen miktarda bispesifik anti-IL-ZRß/yc antikorunun (Mega2) varliginda bir EBV-seropozitif donörden PBMC"lerin kültürlenmcsinin ardindan CTL sitotoksisitesini gösteren grafik. Sekil 33. P1A3 ailesi klonlarinin termostabilitesini gösteren çubuklu grafikler. Isil islemden önce ve sonra P1A3 ve mutasyonlu klonlar (A) B4 ve E9°un ve (B) B3 ve E8"in yc"ye baglaninasi. Iki tekrar gerçeklestirilen testlerde elde edilen Ortalama ± SD gösterilmektedir. Sekil 34. P2C4 ailesi klonlarinin termostabilitesini gösteren çubuklu grafikler. Isil islemden önce ve sonra P2C4 ve E3, E7, E8, E9, G2, G] 1, Hl, H2 ve H3aün ve (B) A4, BIZ, Cl, DlO, E6, F8, Fll ve C1D10"un IL2-Rß°ya baglanmasi. Iki tekrar gerçeklestirilen testlerde elde edilen Ortalama ± SD gösterilmektedir. Sekil 35. (A) P2C4_FW2 tek Zincirli antikorunun IL-2Rß'ya ve (B) P1A3_FW2 tek zinciri antikorunun yc°ye baglanmasini gösteren grafikler. Sekil 36. NSGAGTAAA (SEKANS KOD NO.: 157) ya da GGGGSAAA (SEKANS KOD NO.: 158) kisa baglayicilarina sahip antikorlar için bispesifik antikor klonu P2C4/P1A3"ün (A) Sekil 37. Bispesifik tasarlanmis antikor klonlarinin (A) IL- 2Rß"ya ve (B) yc°ye baglanmasini gösteren grafikler. Sekil 38. Akis sitometrisiyle ölçüldügü gibi, anti jen-spesifik CD8+T hücrelerinin bispesifik anti-lL-ZRß/yc antikor maruziyetine in-Vitro cevabini gösteren grafikler. (A) CD8+ T hücrelerinin bispesifik anti-IL-2Rß/yc antikoru-bagimli genislemesi. (B) Otolog LCL es-kültürleme basamagindan sonra, IL-2°ye kiyasla antikor inaruziyetini takiben CD8:CD4+ T hücresi orani. *p degeri <0,05. Sekil 39. (A) Bir antijen-spesifik ya da (B) spesifik olmayan ortamda, akis sitoinetrisiyle ölçüldügü gibi, Treg hücrelerinin bISpesifik anti-IL-2Rß/yc antikoru maruziyetine in- Vitro cevabiiii gösteren grafikler. *p degeri <0,05. Sekil 40.Anti-lL-2Rß/yc antikoru uygulamasindan önce ve sonra insan-disi primatlarin plazinasinda (A) IFNy, (B) IL-15, (C) lL-lß, (D) lL-6 ve (E) TNFa"nin Luininex analizi yoluyla ölçüldügü gibi sitokinlerin seviyesini gösteren çubuklu grafikler. Sekil 41. Akis sitometrisiyle ölçüldügü gibi, T hücresi alt- setlerinin bispesifik anti-IL-2Rß/yc antikoru enjeksiyonununa in-Vivo cevabini gösteren çubuklu grafikler. (A) T0plam lökosit popülasyonunun bir orani olarak T hücreleri, (B) Toplam CD8+ T hücresi popülasyoiiunun bir orani olarak Ki-67+ pozitif C D8+ hücreleri. (C) Toplain CD4+ T hücresi popülasyonuiiuii bir orani olarak Ki-67+ pozitif CD4+ hücreleri. Bispesifik antikor bagimli genisleme, toplam lökosit popülasyonuna kiyasla T hücrelerinde artisla gösterilir. Sekil 42. Akis sitometrisiyle ölçüldügü gibi, NK hücrelerinin bispesifik anti-IL-ZRB/yc antikoru enjeksiyonuiia in- Vivo cevabini gösteren çubuklu grafikler. (A) Doz-öncesi toplam lökosit popülasyonunun bir orani olarak NK hücreleri, (B) Toplam NK hücresi popülasyonunun bir orani olarak Ki- 67+ pozitif NK hücreleri. Ornekler Asagidaki Orneklerde, bulus sahipleri, anti-IL-ZRß ve anti-ye antikorlarinin izolasyonunu, bispesifik anti-IL-ZRß/yc antikorlarinin insasi, mühendisligi ve in-vitro ve in-Vivo fonksiyonel karakterizasyoiiuiiu tarif etmektedir. Örnek 1: Anti-insan IL-ZRB ve anti-insan vc antikorlarinin izolasyonu Anti-IL-ZRß ve anti-yo antikorlari, in-Vitro seleksiyon yoluyla bir insan antikoru faj gösterim kütüphanesinden izole edildi. Spesifik Fab antikorlari, ilk önce, antijenler olarak rekombinan IL-2Rß ve ve proteinleri kullanilarak ELISA yöntemiyle tanimlandi. Örnek 2: Orta afiniteli IL-ZRß-rchi hedef alan bir bispesifik antikorun insasi ELISA"da (Ornek 1) bir kuvvetli baglanma gösteren klonlar seçildi ve Sekil l9'da sematik olarak gösterildigi gibi, bir IgGl omurgasi FC bölgesine bagli bir tek zincirli degisken fragman (scFV) bazinda bir insa etmek için kullanildi. homodimerizasyonu ve olusumunu önler. PC reseptörüne baglanmayi ortadan kaldirmak için antikorun Fc kisminda bir LALA mutasyonu (yabani tip agir zincir sabit domaini 2°de lösin artiklari 234 ve 235"in alaninle sübstitüsyonu) yapilir. scFv domaini ile Fc domaini arasindaki baglayicinin büyüklügü, yapinin fonksiyonu üzerinde herhangi bir etki yapmaz (Bakiniz Ornek 6.2 ve Sekil 25). Bispesifik scFv (bis-scFv) formati: PlA3 ve P2C4 scFv, bir baglayiciyla baglanan iki adet tek Zincirli degisken domainden olusan bir bispesifik antikor olusturmak için bir baglayiciyla baglandi (Sekil 25A, sag). Farkli baglayici boyutlari test edildi (Sekil 25C) ve aktivite, NK92 hücresi çogalmasi ölçülerek test bis-scFv, IL-2 yoklugunda NK92 hücrelerinin proliferasyonunu sürdürmek açisindan etkin ve etkiliydi. Iki tek Zincirli fragman arasindaki baglayici büyüklügü, bispesifik bilesik aktivitesini etkileinedi (Sekil 25C). Ornek 3: IL-2R zincirlerine baglanmanin analizi Bispesifik antikorun IL-2Rß"ya ya da yc°ye baglanmasi, akis sitometrisiyle analiz edildi. Antikorlar, IL-2Rß,yi ya da yciyi kodlayan yapilarla daha önce transfekte edilmis olan HEK-293.615 hücreleriyle inkübe edildi. Hücrelere baglanma, bir floresan-konjuge sekonder antikor kullanilarak belirlendi. Bir izotip IgGl, bir negatif kontrol olarak kullanildi. IL-ZRß ya da ve için ve iliskisiz bir hedef için spesifisiteye sahip bispesifik yapilar da test edildi. Anti-IL-ZRß/yc antikorunun hedefini eksprese eden hücrelere baglandigi gösterildi (Sekil ZlA). Örnek 4: IL-2R zincirleri için afinite analizi Anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikorunun reseptör zincirlerine birlesmesi/onlardan ayrilmasi, bir çip üzerine immobilize edilmis rekombinan IL-2Rß ya da yc zincirleri kullanilarak ve yüzey üzerinde çesitli farkli koiisantrasyonlarda antikor akitilarak Yüzey Plazmon Rezonans yöntemiyle ölçüldü. Antikor, çok hizli baglanma ve çok yavas ayrilmayla birlikte, IL-2Rß ya da yc zincirleri için çok yüksek afinite gösterdi (Sekil 20). Afinite, bispesifik anti-lL-ZRß/yc antikoru P2C4/P1A3 ve Tablo l"de gösterilen diger bispesifik antikorlar için ölçüldü. Bispesifik Ab KD (M) anti-IL-ZRß klonu anti-ye klonu IL-2Rß için ve için Ornek 5: PBMC alt-setlerine baglanma Bispesifik IgG anti-IL-2Rß/yc antikoru, jhangi hücre alt-setine baglandigini kontrol etmek için saglikli donörlerden izole edilen PBMC"lerde test edildi. PBMC°lere antikor ya da izotip IgG kontrolü ilave edildi ve akis sitometrisi eseylerinde bir floresan-konjuge sekonder anti-insan IgG antikoruyla belirlendi. Anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikoru, CD4+ ya da CD8+ T hücreleri için yüksek baglanma göstermedi. Bununla birlikte, antikor, CD56+ NK hücreleri, CD19+ B hücreleri ve CDl4+/CD16+ monositlerine etkin ve etkili biçimde baglandi (Sekil 21 B). Ornek 6: Anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikorunun aktivitesi/IL-Z agonistik etkileri 6.1 Sinyalleme yolagi fosforilasyonu sinyallemeyi tetikledigi bilinmektedir. Anti-IL-2Rß/yc bispesifik antikoru, bu yolaklar yoluyla sinyallemeyi indükleme kabiliyeti açisindan test edildi. lL-Z (100 U/ml, yani ~O,5 nMl) ya da anti-lL-ZRß/yc antikoruyla (10 tig/ml, yani ~95 nMZ) 30 dakika süreyle stimüle edildi ve STAT5, Akt ve ERK fosforilasyonu, akis sitometrisi eseylerinde floresan antikorlar kullanilarak belirlendi. Anti-lL-ZRß/yc antikoru, lL-2°ye kiyasla daha hafif bir biçimde olmasina ragmen, STAT5 ve Akt fosforilasyonunu indükledi (Sekil 22). Bu eseyde, IL-2Rß/yc antikoru, ERK fosforilasyonunu tetiklemez ll-2 terapötik kullanimina iliskin en büyük engellerden birisi, yüksek afiniteli heterotrimerik reseptör CD25 eksprese eden hücrelerin, örnegin regülatör T hücreleri (Tregîer), aktive edilmis T hücreleri, aktive edilmis B hücreleri, bazi miyeloid prekürsör hücreler ve epitel hücrelerinin tercihli stimülasyonudur. lL-2"nin ya da anti-IL-2Rß/yc antikorunun varliginda STAT5 fosforilasyonu, saglikli donörlerden elde edilen Treg"ler, CD8+ T hücreleri ve NK hücrelerinde akis sitometrisiyle ölçüldü. Küçük miktarlarda IL-2, NK ya da T hücrelerini aktive etmek için yeterliydi, fakat düsük IL-2 seviyelerinde bile Treg°ler tercihen ve kuvvetli biçimde aktive edildi. NK ya da CD8+ T hücrelerinde STAT5 sinyalleme yolaginin %20°den düsük oranda aktivasyonunu saglayan konsantrasyonlarda, Treg°ler zaten %100 oraninda aktivasyon gösterdi (Sekil 23). Bunun aksine, bispesifik antikor, Treg°lerin daha düsük oranda tercihli aktivasyonuyla farkli bir aktivasyon profili gösterdi. NK ve CD8+ T hücrelerinin %20 oraninda aktivasyonuna yol açan konsantrasyonlarda, Treg'ler, %39 ile %49 arasinda STAT5 fosforilasyonu gösterdi. NK ve CD8+ T hücrelerinin %50 oraninda aktivasyonuna yol açan konsantrasyonlarda, Treg popülasyonu hâlâ tamamen aktive edilmemisti; STATS fosforilasyonu %73 - %78 arasindaydi (Sekil 23). 6.2 IL-2-bagimli hücrelerin proliferasyonu NK92 hücrelerinin canliligi ve çogalmasi, lL-2 yoklugunda Alamar mavi boyayla ölçüldü. Anti-IL-ZRß/yc antikoru, IL-2 yoklugunda NK92 hücrelerinin proliferasyonunu koruyabildi ve sürdürebildi; lL-2 reseptörünün yalnizca bir zincirine baglanan antikor yapilari ise herhangi bir etki göstermedi (Sekil 24). Baglayici uzunlugunun antikor fonksiyonelligi üzerinde bir etkisi olup olmadigini degerlendirmek amaciyla, farkli baglayici boyutlarina sahip antikorlar kullanilarak ayni esey gerçeklestirildi. NK92 hücrelerinin çogalmasi, baglayici büyüklügünden etkilenmedi (Sekil 25B). Sekil ZSB"de gösterilen veriler, en kisa ve en uzun baglayicilar (5 ile 23 amino-asit arasinda) kullanilarak elde edildi. Farkli uzunlukta baglayicilar, Sekil 25A"da sematik olarak temsil edildigi gibi, bispesifik antikor formatinda ya da bispesifik scFv formatinda analiz edildi. Kisaca açiklamak gerekirse, P1A3 ve P2C4 scFv, farkli büyüklükte baglayicilarla baglandi ve NK92 hücresi çogalmasi ölçülerek aktivite test edildi. Elde edilen sonuçlar Sekil 258 ve 25C"de gösterilmektedir. bis-scFv, lL-2°nin yoklugunda NK92 hücrelerinin proliferasyonunu korumak ve sürdürinek açisindan etkin ve etkilidir ve iki scFv fragmani arasindaki baglayicinin büyüklügü aktiviteyi etkilememektedir. 6.3 Sinomolgus maymunu hücreleriyle çapraz-reaktivite Anti-IL-ZRß/yc antikoru, Insan-Disi Primat hücrelerinde de test edildi. Kisaca açiklamak gerekirse, Sinomolgus Splenositleri, insan IL-2°sinin ya da bispesifik antikorun varliginda inkübe edildi ve STAT5 fosforilasyonu ölçüldü. Antikorun Sinomolgus lL-2R'siyle çapraz- reaktif oldugu ve STAT5 fosforilasyonunu insan IL-2"si kadar etkin ve etkili biçimde tetikledigi tespit edildi (Sekil 26). 6.4 Sonuç Tüm bunlar dikkate alindiginda, bu veriler, anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikorunun IL-2,ye karsi bir miktar agonist etkisine sahip oldugunu ve bu etkilerin CD25-eksprese eden hücrere yönelik olmasinin çok tercih edilmedigini göstermektedir. Ornek 7: Imm'i'in cevabin modülasyonu: Bir spesifik olmayan stim'ûlasvon ortaminda T hücresi genislemesinin kontrolü Periferal kan mononükleer hücreleri (PBMC°ler), bir gönüllü donörden izole edildi ve rekombinan insan IL-2"si (200 iig/ml), anti- bir pozitif kontrol olarak anti-CD3/CD28 boncuklariniii varliginda 1 hafta süreyle kültürlendi. 1 hafta sonra, hücre genislemesi, mutlak hücre sayisi ölçülerek degerlendirildi; hücre alt-seti oranlari FACS yoluyla ölçüldü. Kiyaslanabilir konsantrasyonlarda (IL-2 200ng/ml Z lZnM; Bispesifik anti-lL-ZRß/yc antikoru 3ug/ml Z 20nM), antikor, T hücresi proliferasyonunu IL-2"ye kiyasla daha düsük bir düzeye kadar tetikler (Sekil 27A ilâ 27C). Bispesifik antikor, T hücresi proliferasyonu üzerinde doza-bagimli bir etki gösterir (Sekil 27A ilâ 27D). Bir spesifik olmayan stimülasyon ortaminda, CD8:CD4 hücre orani, hücrelerin lL-2 ile kültürlendigi duruma kiyasla anti-IL-2Rß/yc antikorunun varliginda anlamli ve öneinli düzeyde farkli degildi (Sekil 27D). 7.2 Regülatör T hücrelerinin stimülasyonu Regülatör T hücreleri (Treg'ler), yüksek afiniteli IL-2 reseptörü alt- zinciri lL-2R0i eksprese ederler. Bir spesifik olmayan stiinülasyon ortaminda, IL-2, CD3+CD4+ T hücreleri arasiiidan tercihen regülatör T hücrelerini stiinüle eder; bu Treg genislemesi, bispesifik anti-IL- ZRB/yc antikoru tarafindan tetiklenmedi (Sekil 28). 7.3 Bellek hücrelerine kiyasla efektör hücrelerin stimülasyonu Bellek CD8+ lenfositleriyle ilgili olarak, bispesifik anti-lL-ZRB/yc antikoru, IL-2°yle stimülasyona cevap olarak genislemeye kiyasla, efektör bellek CD8+ T hücresi alt-setinin daha büyük ölçüde genislemesini tetiklerken, santral bellek ve naif CD8+ T hücresi alt- setlerinin daha az genislemesini tetikler (Sekil 29). Ornek 8: Immün cevabin modülasyonu: bir spesifik stimülasvon ortaminda T hücresi genislemesinin kontrolü Bir Epstein-Barr Virüsü (EBV) seropozitif gönüllü donörden alinan PBMC"ler, EBV ile enfekte edilerek lenfoblastoid hücre hatlari (LCL"ler) olusturuldu. LCL"ler siniflandirildi ve müteakip proliferasyonu inhibe etmek amaciyla y-isinina tâbi tutuldu. Isin uygulanan LCL"ler, lL-2, anti-IL-2Rß/yc bispesifik antikoru ya da anti-CD3/CD28 boncuklarinin (pozitif kontrol) varliginda 1 x 105 hücre/ml yogunlukta 2 X 106 otologous PBMC/ml ile 2 hafta süreyle es-kültürlendi. Hücreler, daha sonra, farkli hücre alt-setlerinin proliferasyonu ve oranlari açisindan analiz edildi. Bir sitotoksik `Öldürme eseyi, granzim B ve kapsaz 8 için bir floresan peptid sübstrati kullanilarak gerçeklestirildi. Genisletilen T-hücreleri, 2:] oraninda canli LCL°lerle bir saat süreyle es-inkübe edildi. Peptid- floresan pozitif hücrelerin akis sitometrisiyle analizi yoluyla öldürme düzeyi ölçüldü; bu, hücrelerin CTL-indüklü programli hücre ölümüne maruz kaldigini gösterdi. 8. 1 T hücrelerinin genislemesi Bispesifik antikor, düsük konsantrasyonlarda bile T hücrelerinin genislemesini tetikler. Anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikoru-aracili T hücresi genislemesi, lL-2°yle stimülasyonun ardindan gözlemlenen genisleme düzeyinden biraz daha büyüktür (Sekil 30A). Antikor CD4+ T hücrelerinin sayisini anlainli ve Önemli düzeyde etkilemezken (Sekil 3GB), CD8+ T hücrelerinin sayisinda IL-2"ye kiyasla daha büyük bir düzeye kadar artis gösterir (Sekil 30C) ve dolayisiyla, CD8:CD4 hücre oranini arttirir (Sekil 3OD). 8.2 T hücresi alt-setleri üzerinde etkiler En yüksek konsantrasyonda (1 tig/ml), anti-IL-ZRß/yc antikoru, IL-2 ile stiinülasyonla karsilastirildiginda, CD8+ bellek hücrelerine kiyasla efektör CD8+ T hücrelerinin genislemesini tercih eder (Sekil 31A). PD-l+ alt-setinde bir artisi tetiklerken (Sekil 31B), Treg°lerin oranini düsürür (Sekil 3lC). 8.3 Sitotoksik T lenfosit-aracili 'öldürme Anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikoru, CTL sitotoksisitesi gösterebilir. Kiyaslanabilir molaritede (IL-2 için 12 nM°ye (200 ng/ml) kiyasla antikor için 7 nM (1 pg/mL)), antikor-aracili sitotoksisite, IL-2 tarafindan tetiklenen sitotoksisiteden daha düsüktür (Sekil 32). 8.4 Sonuç Tüm bunlar dikkate alindiginda, bu veriler, bispesifik anti-IL-2Rß/yc antikorunun IL-2"ninkine kiyasla farkli bir etki mekanizmasini tetikledigini göstermektedir. Antikor tercihen efektör CD8+ T hücrelerinde genisleme gösterir. Antikor, Sitotoksik T hücrelerinin stimülasyonuna olanak saglar, fakat tercihen IL-2 gibi Treg°leri stimüle etmez. Ornek 9: Stabiliteyi gelistirmek amaciyla sekans mühendisligi Bispesifik antikorlar insa ederken karsilasilan en büyük zorluiklardan bir tanesi, heterojenik yapinin stabilitesidir. Monospesifik IgG"lerden farkli olarak, bu bISpesifik anti-IL-2Rß/yc antikoru, iki farkli hafif/agir zincir çiftinin bir yapay düzenegidir. Yapilarin genel stabilitesini gelistirinek amaciyla, orijinal antikor klonlari P2C4 ve P1A3, termostabiliteleri arttirilacak sekilde tasarlandi. 9.1 Termostabik klonlar Rastgele mutageneze tâbi tutulmus klonlarin kütüphaneleri, ana klonlar P2C4 ve P1A3°ten olusturuldu ve mutantlar, iki çevrimli panning ve ardindan ELlSA proseslerinde ilgili hedeflere baglanmalari açisindan tarandi. Baglayicilar, daha sonra, 55°C sicakliga kadar isitma islemine tâbi tutuldu. Isitma isleminden sonra hâlâ baglanan mutantlar sekanslandi ve özgün klonlar tanimlandi. Klonlarin termostabilitesi, 45°C ile 65°C sicaklikta 4 saat süreyle isitma isleminden sonra, ELISA prosesinde ilgili hedeflerine, yani yc"ye (Sekil 33A ve 33B) ya da IL-2Rß°ya (Sekil 34A ve 34B) baglanmalari açisindan degerlendirildi. Mutasyonlu klonlar, ana klonlara kiyasla daha yüksek termal stabilite gösterdiler. 9.1 Yüksek düzeyde stabil çerçevenin yerlestirilmesi Antikorun stabilitesini daha da arttirmak amaciyla, klonlar, yüksek düzeyde stabil olduklari bilinen antikorlarin çerçevelerine yerlestirildiler. P2C4 ve P1A3, yüksek stabiliteye sahip olduklari bilinen antikorlarin çerçevelerine yerlestirildi. Yeni klonlarin lL-2Rß"ya ve yc"ye baglanina kabiliyetini korudugundan emin olinak için ELISA deneyleri gerçeklestirildi. Hem P2C4_FW2 hem de P1A3_FW2, sirasiyla lL-2Rß°ya ve yc"ye doza-bagimli bir baglanma profili gösterdi (Sekil 35A ve 35B). Ornek 10: Yeni bispesifik yapilarin IL-2Rß/yc°ve baglanmasi .1 Degisken ve sabit domainler arasinda kisa baglayici BISpesifik antikor yapilari, scFv ile sabit domain arasinda asagidaki kisa baglayicilardan birisini kapsayacak sekilde hazirlandi (antikor formati: VH domaini - baglayici - VL domaini - kisa baglayici - mentese - CH2 domaini (+ LALA) - CH3 domaini (+ topuz/delik + cys)): NSGAGTAAA (SEKANS KOD NO.: 157) ya da GGGGSAAA (SEKANS KOD NO.: 158). NSGAGTAAA (SEKANS KOD NO.: 157) ya da GGGGSAAA (SEKANS KOD NO.: 158) kisa baglayicilarina sahip bispesifik yapilar olusturuldu ve IL-2Rß°ya ve yc"ye baglanma açisindan ELISA prosedürüyle test edildi. Bispesifik antikorlarin kisa baglayicinin kimliginden bagimsiz olarak benzer afiniteyle ona baglandigi tespit edildi (Sekil 36A ve 36B). Bispesifik antikorlar, yeni sekanslarla insa edildi ve ELISA yönteiniyle IL-2Rß ya da IL-2Ryc"de baglanma degerlendirildi. Yapilarin ana bispesifik antikorlara kiyasla benzer ya da daha iyi afiniteyle IL-2R"ye baglandiklari tespit edildi (Sekil 37A ve 37B). Ornek 11: T hücresi genislemesi ve polarizasvonu üzerinde etkiler T hücreleri kullanilarak yapilan eseyler, anti-IL-2Rß/yc bispesifik antikorunun in-vitro ortamda T hücresi genislemesi üzerindeki etkisini ve anti jen spesifik ve spesifik olmayan kalitatif polarizasyon ve alt-set spesifisitesi üzerindeki etkisini ölçmek amaciyla gerçeklestirildi. EBV-pozitif kisilerden alinan periferal kan, hem EBV-transforme lenfoblastoid B-hücresi hatlari (LCL°ler) hein de EBV-spesifik CTL hatlari olusturmak için kullanildi. Kisaca açiklamak gerekirse, LCL°ler olusturmak için, PBMC"ler, siklosporin ve EBV varliginda 1 hafta süreyle ve tazelenmis vasat içinde ilave 2 hafta süreyle siklosporinle, fakat EBV olmadan kültürlendi. Kültürleme isleminden sonra, hücreler, bir G-Rex kolona aktarildi ve çogalma izlendi. CTL°ler olusturmak için, LCL°ler, CTL°1er için bir antijen kaynagi olarak islev görmesi için isina tâbi tutuldu. PBMC7ler, 40:l efektör:stimülatör (ES) oraninda LCLilerle es-kültürlendi. Hücreler, IL-2, anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikoru ya da CD3/28 boncuklari ilave edilerek stimüle edildi. 7 gün sonra, hücreler, bir vasat degisikligine ve ilave stiinülasyonlara tâbi tutuldu. 10. günde, hücreler, akis sitometrisiyle lenfosit genislemesi ve fenotip açisindan analiz edildi. Bispesifik antikor ilavesinin IL-2 ile stiinülasyona cevap olarak genislemeye kiyasla antijen-spesifik CD8+ T hücresi genislemesinde anlamli ve önemli bir artisa yol açtigi tespit edildi (Sekil 38A). Ek olarak, in-vitro kültürler, aiitikor stimülasyonundan sonra artan CD8 :CD4 oranlari gösterdi (Sekil 38B). Daha sonra, bispesifik antikorun regülatör T hücreleri (Treg°ler) genislemesi üzerindeki etkisi ölçüldü ve anti jen spesifik (otolog LCL es-kültürü) ve spesifik olmayan (anti-CD3/CD28 mikro-boncugu) ortamlarinda IL-2 ile stimülasyona cevap olarak Treg'lerin genislemesiyle karsilastirildi. Bispesifik aiitikor ilavesi, hem spesifik olmayan (Sekil 39A) hem de antijen-spesifik stimülasyon ortamlarinda (Sekil 39B) IL-2°ye cevap olarak Treg genislemesiyle kiyaslandiginda Treg,lerin genislemesindc anlamli ve önemli azalmaya yol açti. Ornek 12: Insan-Disi Primatlarda In-vivo Veriler Anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikorunun intravenöz (iv) enjeksiyonun etkilerini, onun T hücreleri ve NK hücrelerinin proliferasyonunu yönlendirme kabiliyetini ve onun "sitokin firtinasi" yoluyla potansiyel toksisitesini ölçmek için Sinomolgus makaklarinda bir doz arttirma deneyi yapildi. Uç makak maymununa, femoral arterden intravenöz yoldan bir tek doz anti-IL-ZRB/yc antikoru uygulandi; makak A"ya 1 mg/kg verildi; makak B"ye 5 mg/kg verildi ve makak Üye 10 mg/kg verildi. Antikor en jeksiyonundan önce ve en jeksiyondan sonra 1. saatte, 24. saatte, 72. saatte ve 120. saatte kan toplandi. Vital bulgulari belirleme ve fizik muayeneler çalisma boyunca ve daha sonra, 3 hafta boyunca yapildi. PBMC"ler tüm zaman noktalarinda izole edildi; lökosit alt-setleri, immün boyama ve akis sitometrisi yoluyla analiz edildi ve hücre genislemesi, Ki-67 ekspresyonunun analizi yoluyla degerlendirildi. Plazma sitokin seviyeleri, tüm zaman noktalarinda Luminex® yoluyla ölçüldü. Veteriner fiziksel muayenesinde genel görünümde, mukoza] membranlarda, kardiyovasküler, respiratuar, integumanter, alimenter, muskuloskeletal, sinir, ürogenital, isitsel ya da oküler sisteinlerde herhangi bir anormallik saptanmadi. Hayvanlar, atesli hastalik ya da depresyon için herhangi bir klinik bulgu göstermedi. Bir hayvan (makak B), çalisma süresi boyunca geri aldigindan hafif bir kilo kaybi gösterdi. Hayvanlar, yaygin olarak IL-2 uygulamasiyla iliskilendirilen toksisite için herhangi bir açik belirti göstermedi (PMID: 1418698 ve 8454416). Bu gözlemlerle tutarli olarak, sitokin analizi, enjeksiyondan sonra inflamatuar aracilarda yalnizca hafif düzeyde artis gösterdi (Sekiller 40A ilâ 4OE). Akis sitometrik analiz, CD4+ ve CD8+ T hücresi popülasyonlarin belirgin bir proliferasyon gösterdi (Sekiller 41A ilâ 41C). Antikor tedavisine cevap olarak NK hücresi proliferasyonu da gözlemlendi (Sekiller 42A ve 42B). Bu genislemenin tek doz antikordan sonra gözlemlendigi, IL-2 için ise kesintisiz infûzyon ya da yinelenen dozlar gerektigi n01: edilmelidir; bu, anti-IL-ZRß/yc bispesifik antikorunun IL-Z'ye kiyasla daha uzun bir yari-ömre sahip olduguna isaret etmektedir. TARIFNAME IÇERISINDE ATIF YAPILAN REFERANSLAR Basvuru sahibi tarafindan atif yapilan referanslara iliskin bu liste, yalnizca okuyucunun yardimi içindir ve Avrupa Patent Belgesinin bir kismini olusturmaz. Her ne kadar referanslarin derlenmesine büyük ve EPO bu baglamda hiçbir sorumluluk kabul etmemektedir. TR TR TR TR TR TR TR TR

Claims (6)

ISTEMLER
1. Istege bagli olarak izole edilmis formda olan ve CD1227ye ve yaygin y zincirine (ye) baglanabilen bir bispesifik antikor ya da 5 bispesifik antijen baglanma fragmani olup, burada bispesifik antikor ya da bispesifik antijen baglanma fragmani bir lL-2 reseptörü agonistidir ve asagida açiklananlari içerir: (a) asagida açiklananlari içeren, CD122°ye baglanan bir (1) asagidaki CDR°leri içeren bir hafif zincir degisken bölgesi: LC-CDRl: TGTSSDIGHYDF VS (SEKANS KOD NO.: 2) LC-CDRZ: DINNRPS (SEKANS KOD NO.: 3) LC-CDR3: SAYTSSDTLV (SEKANS KOD NO.: 4) ve (ii) asagidaki CDR”leri içeren bir agir zincir degisken bölgesi: HC-CDRl: NYYMH (SEKANS KOD NO.: 36) HC-CDR2: AIMPSRGGTSYPQKFQG (SEKANS KOD NO.: 37) HC-CDR3: GEYYYDSSGYYY (SEKANS KOD NO.: 38) ve 20 (b) yaygin y zincirine baglanan bir antijen-baglanma fragmani.
Istem 1°e uygun bispesifik antikor ya da bispesifik antijen baglanma fragmani olup, burada CD122”ye baglanan antijen- baglanma fragmani bir hafif zincir degisken bölge sekansi ve bir agir zincir degisken bölge sekansi içerir; burada: hafif zincir degisken bölge sekansi, SEKANS KOD NO.: 1 ile temsil edilen hafif zincir degisken bölge sekansina en az %70 oraninda sekans özdesligine sahiptir ve agir zincir degisken bölge sekansi, SEKANS KOD NO.: 35 ile temsil edilen agir zincir degisken bölge sekansina en az %70 oraninda sekans özdesligine sahiptir.
Istem l'e ya da istem 2°ye uygun bispesifik antikor ya da bispesifik antijen baglanina fraginani olup, burada yaygin y zincirine baglanan anti jen-baglanma fragmani, bir hafif zincir degisken bölge sekansi ve bir agir zincir degisken bölge sekansi içerir; burada, hafif zincir degisken bölge sekansi, SEKANS KOD NO.: 67 ile teinsil edilen hafif zincir degisken bölge sekansina en az %70 oraninda sekans özdesligine sahiptir.
Istem l ilâ istem 3,ün herhangi birisine uygun bispesifik antikor ya da bispesifik anti jen baglanma fragmani olup, burada yaygin y zincirine baglanan anti jen-baglannia fragmani asagida açiklananlari içerir: (i) asagidaki CDR°leri içeren bir hafif zincir degisken bölgesi: LC-CDRl: RSSQSLLHSNGYNYLD (SEKANS KOD NO.: 68) LC-CDRZ: LGSNRDS (SEKANS KOD NO.: 69) LC-CDR3: MQGTHWPWT (SEKANS KOD NO.: 70) ve (ii) asagidaki CDR°leri içeren bir agir zincir degisken bölgesi: HC-CDRl: GYYWS (SEKANS KOD NO.: 48) HC-CDRZ: EINHSGSTNYNPSLKS (SEKANS KOD NO.: 49) HC-CDR3: SPGGYSGGYFQH (SEKANS KOD NO.: 77)
5. Istem l ilâ istem 4”`ûn herhangi birisine uygun bispesifik antikor ya da bispesifik anti jen baglanma fragmani olup, burada yaygin y zincirine baglanan anti jen-baglanma fragmani bir hafif zincir degisken bölge sekansi ve bir agir zincir degisken bölge sekansi 10 içerir; burada: hafif zincir degisken bölge sekansi, SEKANS KOD NO.: 67 ile temsil edilen hafif zincir degisken bölge sekansina en az %70 oraninda sekans özdesligine sahiptir ve 15 agir zincir degisken bölge sekansi, SEKANS KOD NO.: 76 ile temsil edilen agir zincir degisken bölge sekansina en az %70 oraninda sekans özdesligine sahiptir.
6. Istem 1 ilâ istem 5°in herhangi birisine uygun bispesifik antikor 20 ya da bispesifik anti jen baglanina fragmani olup, bir ilaç kisini ya da bir belirlenebilir kisima kon juge edilir. Istem 1 ilâ istem 5°in herhangi birisine uygun bir bispesifik anti jen baglanina fragmani içeren bir kimerik anti jen reseptörü Istem 7°ye uygun bir kimerik anti jen reseptörü (CAR) içeren bir Istem l ilâ istem 6”nin herhangi birisine uygun bispesifik antikor ya da bispesifik anti jen baglanma fragmani, istem 7”ye uygun kimerik anti jen reseptörü (CAR) ya da istem 8°e uygun hücre ve farmasötik açidan kabul edilebilir en az bir tasiyici içeren bir bilesim. Istem l ilâ istein 6”nin herhangi birisine uygun bispesifik antikoru ya da bISpesifik antijen baglanma fragmanini ya da istein 7°ye uygun kimerik anti jen reseptörünü (CAR) kodlayan bir izole nükleik asit. Tedavide ya da bir tibbi tedavi yönteminde kullanmak için istein 1 ilâ istein 6”nin herhangi birisine uygun bir bispesifik antikor ya da bISpesifik anti jen baglanma fragmani, istem 7”ye uygun bir kimerik anti jen reseptörü (CAR), istein 8°e uygun bir hücre ya da istein 9°a uygun bir bilesim. Kanserin ya da bir enfeksiyöz hastaligin tedavisinde kullanmak için istem 1 ilâ istem 6°nin herhangi birisine uygun bir bispesifik antikor ya da bispesifik antijen baglanma fragmani, istein 7°ye uygun bir kimerik anti jen reseptörü (CAR), istem 8”e uygun bir hücre ya da istem 9”a uygun bir bilesim. da içerdiginden süphelenilen bir numunenin, istem l ilâ istem 6”n1n herhangi birisine uygun bir bispesifik antikor ya da bispesifik antijen baglanma fragmani, istem 7,ye uygun bir kimerik anti jen reseptörü (CAR), istem 8,e uygun bir hücre ya da istem 9°a uygun bir bilesimle temas ettirilmesi ve antikor veya anti jen baglanma fragmani, CAR ya da hücrenin CD122 ve/Veya yc ile bir koinpleksinin olusumunun belirlenmesi basamaklarini içeren bir yöntem. T hücreleri ve/Veya NK hücreleri popülasyonunun genisletilmesi amacina yönelik bir yöntem olup, burada T hücreleri ve/Veya NK hücreleri, in-Vitro ya da eX-Vivo ortamda istem l ilâ istem 6”n1n herhangi birisine uygun bir bispesifik antikor ya da bispesifik anti jen baglanma fragmani, istem 7”ye uygun bir kimerik anti jen reseptörü (CAR), istem 8,e uygun bir hücre ya da istein 9,a uygun bir bilesimle temas ettirilir.
TR2019/01445T 2015-08-06 2016-08-05 Il2rbeta/yaygın gamma zinciri antikorları. TR201901445T4 (tr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SG10201506227V 2015-08-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201901445T4 true TR201901445T4 (tr) 2019-02-21

Family

ID=56889037

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2019/01445T TR201901445T4 (tr) 2015-08-06 2016-08-05 Il2rbeta/yaygın gamma zinciri antikorları.

Country Status (16)

Country Link
US (5) US10472421B2 (tr)
EP (2) EP3428193B1 (tr)
JP (1) JP6908591B2 (tr)
KR (1) KR102753399B1 (tr)
CN (2) CN115925939A (tr)
AU (1) AU2016301970A1 (tr)
CA (1) CA2994906A1 (tr)
CY (1) CY1121197T1 (tr)
DK (1) DK3328894T3 (tr)
ES (2) ES2841799T3 (tr)
HU (1) HUE043421T2 (tr)
PL (1) PL3328894T3 (tr)
PT (1) PT3328894T (tr)
TR (1) TR201901445T4 (tr)
TW (1) TW201713699A (tr)
WO (1) WO2017021540A1 (tr)

Families Citing this family (77)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2834548C (en) 2011-04-28 2021-06-01 The Broad Institute, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
PT3328894T (pt) 2015-08-06 2019-02-13 Agency Science Tech & Res Anticorpos de cadeia comum gama/il2rbeta
EP4099015A1 (en) 2016-06-10 2022-12-07 Gadeta B.V. Novel method for identifying deltat-cell (or gammat-cell) receptor chains or parts thereof that mediate an anti-tumour or an anti-infective response
EP3624823A1 (en) 2017-05-18 2020-03-25 UMC Utrecht Holding B.V. Compositions and methods for cell targeting therapies
EP3707162A1 (en) * 2017-11-10 2020-09-16 Agency for Science, Technology and Research Il2rbeta/common gamma chain antibodies
US20210017248A1 (en) * 2018-03-16 2021-01-21 The Regents Of The University Of California Cellular signaling domain engineering in chimeric antigen receptor-modified regulatory t cells
CA3100349A1 (en) * 2018-05-17 2019-11-21 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Receptor inhibition by phosphatase recruitment
BR112021002250A2 (pt) 2018-08-06 2021-07-20 Medikine, Inc. compostos de ligação ao receptor de il-2
CN112996805A (zh) 2018-08-30 2021-06-18 Hcw生物科技公司 多链嵌合多肽和其用途
CN120365435A (zh) 2018-08-30 2025-07-25 免疫生物公司 单链嵌合多肽和多链嵌合多肽以及其用途
EP3843788A1 (en) 2018-08-30 2021-07-07 HCW Biologics, Inc. Single-chain chimeric polypeptides and uses thereof
TWI897855B (zh) * 2018-10-26 2025-09-21 美商免疫遺傳股份有限公司 Ｅ ｐ Ｃ Ａ Ｍ 抗體、可活化抗體及免疫偶聯物以及其用途
TW202039557A (zh) 2018-11-09 2020-11-01 新加坡商優其洛伊生物私人有限公司 介白素2受體β(IL2Rβ)/共同γ鏈抗體
TW202031683A (zh) 2018-11-09 2020-09-01 新加坡商優其洛伊生物私人有限公司 介白素2受體β(IL2Rβ)/共同γ鏈抗體
WO2020160242A1 (en) * 2019-02-01 2020-08-06 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti-il2 receptor gamma antigen-binding proteins
JP7713393B2 (ja) 2019-06-21 2025-07-25 イミュニティーバイオ インコーポレイテッド 多鎖キメラポリペプチドおよびその使用
IL292803A (en) 2019-11-05 2022-07-01 Medikine Inc Dual il-2 receptor and il-7 receptor binding compounds, compositions comprising same and uses thereof
JP7427286B2 (ja) 2019-11-05 2024-02-05 メディカイン、インコーポレイテッド ＩＬ－２ＲβγＣ結合化合物
EP4065605A4 (en) 2019-11-26 2023-07-12 Ramot at Tel-Aviv University Ltd. Antibodies to carbohydrate antigens
AU2020414355A1 (en) * 2019-12-24 2022-08-11 Neoleukin Therapeutics, Inc. Combination therapy using an IL-2 receptor agonist and an immune checkpoint inhibitor
CA3166816A1 (en) * 2020-02-03 2021-08-12 William J. Dower Il-7r.alpha..gamma.c binding compounds
MX2022009302A (es) 2020-02-03 2022-11-16 Medikine Inc Compuestos de unión a il-7r¿.
KR20220140535A (ko) 2020-02-11 2022-10-18 에이치씨더블유 바이올로직스, 인크. 크로마토그래피 수지 및 이의 용도
EP4103599A1 (en) 2020-02-11 2022-12-21 HCW Biologics, Inc. Methods of activating regulatory t cells
US12115191B2 (en) 2020-02-11 2024-10-15 Immunitybio, Inc. Methods of treating age-related and inflammatory diseases
IL308185B2 (en) 2020-02-16 2026-03-01 Aulos Bioscience Inc Engineered antibodies against IL-2
EP4143231A1 (en) 2020-04-29 2023-03-08 HCW Biologics, Inc. Anti-cd26 proteins and uses thereof
BR102020009679A2 (pt) * 2020-05-14 2021-11-23 Fundação Universidade Federal Do Abc - Ufabc Anticorpos recombinantes humanos para inibição da calicreína tecidual humana 7 (klk7) e uso em doenças relacionadas ao processo de descamação da pele
EP4157460A1 (en) 2020-06-01 2023-04-05 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
WO2021247003A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
US12024545B2 (en) 2020-06-01 2024-07-02 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
US12291572B2 (en) 2020-08-05 2025-05-06 Synthekine, Inc. IL12 receptor synthetic cytokines and methods of use
US12540188B2 (en) 2020-08-05 2026-02-03 Synthekine, Inc. IL10Rα/IL2Rγ synthetic cytokines
EP4192877A4 (en) * 2020-08-05 2024-10-16 Synthekine, Inc. SYNTHETIC IL2RB/IL2RG CYTOKINES
MX2023001415A (es) 2020-08-05 2023-04-24 Synthekine Inc Composiciones y métodos relacionados con la unión al receptor de il27.
WO2022031890A1 (en) 2020-08-05 2022-02-10 Synthekine, Inc. Ifngr2 binding molecules and methods of use
US12012457B1 (en) 2020-08-05 2024-06-18 Synthekine, Inc. IL23R binding molecules and methods of use
EP4192489A4 (en) 2020-08-05 2024-12-11 Synthekine, Inc. IL2RB-BINDING MOLECULES AND METHODS OF USE
US12122839B2 (en) 2020-08-05 2024-10-22 Synthekine, Inc. IFNGR binding synthetic cytokines and methods of use
WO2022031885A2 (en) 2020-08-05 2022-02-10 Synthekine, Inc. Il10ra binding molecules and methods of use
KR102773428B1 (ko) 2020-08-05 2025-02-28 신테카인, 인크. Il10 수용체 결합 분자 및 사용 방법
US11859001B2 (en) 2020-08-05 2024-01-02 Synthekine, Inc. IL12RB1-Binding molecules and methods of use
BR112023001723A2 (pt) 2020-08-05 2023-05-02 Synthekine Inc Moléculas de ligação à gp130 e métodos de uso
US12286482B2 (en) 2020-08-05 2025-04-29 Synthekine, Inc. IL10RB binding molecules and encoding nucleic acids
WO2022031884A2 (en) 2020-08-05 2022-02-10 Synthekine, Inc. Il2rg binding molecules and methods of use
EP4192490A4 (en) 2020-08-05 2025-01-01 Synthekine, Inc. IL27RA-BINDING MOLECULES AND METHODS OF USE
US20250333520A1 (en) * 2021-01-11 2025-10-30 Synthekine, Inc. Compositions and methods related to il2 receptor binding
WO2022150791A2 (en) * 2021-01-11 2022-07-14 Synthekine, Inc. Compositions and methods related to il2 receptor binding
EP4288455A1 (en) 2021-02-03 2023-12-13 Mozart Therapeutics, Inc. Binding agents and methods of using the same
US12162945B2 (en) 2021-03-05 2024-12-10 Immunome, Inc. EPHA2 antibodies
EP4308608A4 (en) * 2021-03-16 2025-05-07 JN Biosciences LLC BIFUNCTIONAL MOLECULES FOR THE TREATMENT OF IMMUNE DISEASES
TW202304994A (zh) * 2021-04-02 2023-02-01 美商泰尼歐生物公司 促效性抗ｉｌ－２ｒ抗體及使用方法
CA3229748A1 (en) 2021-08-26 2023-03-02 Akifumi Kato Bispecific antibody that binds to cd116 and cd131
AU2022348588A1 (en) 2021-09-17 2024-04-04 Parker Institute For Cancer Immunotherapy Switch receptors using il-9 signaling domains
WO2023076876A1 (en) 2021-10-26 2023-05-04 Mozart Therapeutics, Inc. Modulation of immune responses to viral vectors
JP2024541048A (ja) * 2021-11-02 2024-11-06 シャンハイ エピムアブ バイオセラピューティクス カンパニー リミテッド 抗ｃｄ１２２抗体、抗ｃｄ１３２抗体、及び関連する二重特異性結合性タンパク質
AU2023208426A1 (en) 2022-01-24 2024-07-25 Novimmune Sa Composition and methods for the selective activation of cytokine signaling pathways
KR20240141206A (ko) * 2022-02-04 2024-09-25 더 보드 어브 트러스티스 어브 더 리랜드 스탠포드 주니어 유니버시티 대용 사이토카인 폴리펩티드
WO2023168363A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 HCW Biologics, Inc. Method of treating pancreatic cancer
US11999771B2 (en) 2022-04-07 2024-06-04 Medikine, Inc. IL-7Rαγc ligand immunoglobulin fusion proteins
EP4507711A1 (en) 2022-04-13 2025-02-19 ImmunityBio, Inc. Multi-chain chimeric polypeptide for use in the treatment of treating neuroinflammatory disorder
WO2024040194A1 (en) 2022-08-17 2024-02-22 Capstan Therapeutics, Inc. Conditioning for in vivo immune cell engineering
EP4593881A2 (en) * 2022-09-30 2025-08-06 Forte Subsidiary, Inc. Anti-cd122 antibodies and uses thereof
WO2024086754A2 (en) * 2022-10-19 2024-04-25 Tentarix Biotherapeutics, Inc. Multi variable domain therapeutic immunoglobulin
CN120813605A (zh) 2023-01-06 2025-10-17 泰温治疗私人有限公司 抗原结合分子
EP4646274A1 (en) * 2023-01-06 2025-11-12 Twain Therapeutics Pte. Ltd. Antigen-binding molecules
AU2024224039A1 (en) * 2023-02-22 2025-06-26 Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd. Anti-il2ra antibodies and uses thereof
AU2024279278A1 (en) 2023-05-31 2025-12-18 Capstan Therapeutics, Inc. Lipid nanoparticle formulations and compositions
WO2025076113A1 (en) 2023-10-05 2025-04-10 Capstan Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids with conserved spacing and lipid nanoparticles
US20250127728A1 (en) 2023-10-05 2025-04-24 Capstan Therapeutics, Inc. Constrained Ionizable Cationic Lipids and Lipid Nanoparticles
US20250302763A1 (en) 2024-02-22 2025-10-02 Capstan Therapeutics, Inc. Immune engineering amplification
WO2025217454A2 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Capstan Therapeutics, Inc. Ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles
WO2025217452A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Capstan Therapeutics, Inc. Constrained ionizable cationic lipids and lipid nanoparticles
WO2026033139A1 (en) 2024-08-09 2026-02-12 Twain Therapeutics Pte. Ltd. Antigen-binding molecules
WO2026033134A1 (en) 2024-08-09 2026-02-12 Twain Therapeutics Pte. Ltd. Antigen-binding molecules
WO2026043906A1 (en) 2024-08-19 2026-02-26 HCW Biologics, Inc. Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof
US20260049118A1 (en) 2024-08-19 2026-02-19 HCW Biologics, Inc. Single-chain chimeric polypeptides and uses thereof

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6297028B1 (en) 1995-01-09 2001-10-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh IL-2R-associated polypeptide and DNA molecules coding therefor
AU2937597A (en) * 1996-05-10 1997-12-05 Biogen, Inc. Common gamma chain blocking agents
DZ2788A1 (fr) * 1998-05-15 2003-12-01 Bayer Ag Agonistes et antagonistes selectifs à IL-2.
US20070098685A1 (en) 2005-01-19 2007-05-03 Brand Stephen J Methods and kits to treat chronic inflammatory immune diseases by administering a proteasome inhibitor and an interleukin 2 receptor agonist
AU2007271398B2 (en) 2006-07-06 2013-06-20 Merck Patent Gmbh Compositions and methods for enhancing the efficacy of IL-2 mediated immune responses
CA2672229A1 (en) * 2006-12-14 2008-06-19 Actogenix N.V. Delivery of binding molecules to induce immunomodulation
EP2560994B1 (en) * 2010-04-08 2016-10-12 JN Biosciences LLC Antibodies to cd122
US20150132322A1 (en) * 2012-05-07 2015-05-14 Immune Pharmaceuticals Ltd. Method of generating human monoclonal antibodies
US20140044675A1 (en) * 2012-08-10 2014-02-13 Roche Glycart Ag Interleukin-2 fusion proteins and uses thereof
US9682143B2 (en) * 2012-08-14 2017-06-20 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for inducing immune response to disease
CN104379169A (zh) * 2012-08-14 2015-02-25 Ibc药品公司 用于治疗疾病的t-细胞重定向双特异性抗体
US20150093399A1 (en) * 2013-08-28 2015-04-02 Bioasis Technologies, Inc. Cns-targeted conjugates having modified fc regions and methods of use thereof
PT3328894T (pt) 2015-08-06 2019-02-13 Agency Science Tech & Res Anticorpos de cadeia comum gama/il2rbeta

Also Published As

Publication number Publication date
ES2841799T3 (es) 2021-07-09
CN107922496A (zh) 2018-04-17
CA2994906A1 (en) 2017-02-09
EP3328894B1 (en) 2018-11-14
DK3328894T3 (en) 2019-02-04
PL3328894T3 (pl) 2019-05-31
US10472421B2 (en) 2019-11-12
US10167338B2 (en) 2019-01-01
US10246512B2 (en) 2019-04-02
US20180208663A1 (en) 2018-07-26
CN115925939A (zh) 2023-04-07
US20180237528A1 (en) 2018-08-23
EP3428193B1 (en) 2020-09-30
WO2017021540A1 (en) 2017-02-09
CN107922496B (zh) 2022-11-01
US20160367664A1 (en) 2016-12-22
JP6908591B2 (ja) 2021-07-28
EP3428193A1 (en) 2019-01-16
US10696747B2 (en) 2020-06-30
US20180362655A1 (en) 2018-12-20
KR102753399B1 (ko) 2025-01-10
AU2016301970A1 (en) 2018-03-22
HUE043421T2 (hu) 2019-08-28
EP3328894A1 (en) 2018-06-06
US10472423B2 (en) 2019-11-12
PT3328894T (pt) 2019-02-13
US20180194853A1 (en) 2018-07-12
ES2710618T3 (es) 2019-04-26
CY1121197T1 (el) 2020-05-29
KR20180037239A (ko) 2018-04-11
TW201713699A (zh) 2017-04-16
JP2018527912A (ja) 2018-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10696747B2 (en) IL2R common gamma chain antibodies
US11142574B2 (en) Anti-TIM-3 antibodies
US11739157B2 (en) IL2Rbeta/common gamma chain antibodies
US10280224B2 (en) Anti-PD-1 antibodies
WO2020094834A1 (en) Il2rbeta/common gamma chain antibodies
AU2015340055A1 (en) Anti-TIM-3 antibodies
WO2020094836A1 (en) Il2rbeta/common gamma chain antibodies
HK40084551A (en) Il2rbeta/common gamma chain antibodies
HK1250996B (en) Il2rbeta/common gamma chain antibodies
HK1250996A1 (en) Il2rbeta/common gamma chain antibodies