TR201901846T4 - Aşı terapisi. - Google Patents

Abstract

Mevcut buluş, Down sendromlu (DS) genç ila orta yaşlı süjelerde amiloid ile alakalı patolojinin tedavi edilmesi, iyileştirilmesi ve engellenmesine yönelik vasıtalar sunar. Özellikle mevcut buluş, Down sendromlu genç ila orta yaşlı süjelerde amiloid ile alakalı patolojinin engelleyici tedavisinde kullanılmak üzere amiloid proteininden veya amiloid benzeri proteinden türetilmiş antijenik peptit fragmanlarını sunar.

Description

TARIFNAME ASI TERAPISI Mevcut bulus, Down sendromlu (DS) genç ila orta yasli süjelerde amiloid ile alakali patolojinin tedavi edilmesine yönelik vasitalar sunar. Ozellikle mevcut bulus, Down sendromlu (DS) genç ila orta yasli süjelerde Alzheimer hastaligi (AD) benzeri demansin tedavisinde kullanilinak üzere amiloid proteininden veya amiloid benzeri proteinden türetilmis anti jenik peptit fragmanlarini sunar. Genetik bozukluk Down sendromu (DS), en yaygin trizomidir ve 700- 1000 yeni dogandan birinde meydana gelir. Tahminler, 35 yas üstü Down sendromlu kisilerin %25°inin veya daha fazlasinin, Alzheimer benzeri demans belirtileri ve semptomlari gösterdigini isaret etmektedir (Stanton L.R ve Coetzee R.H , 2004). Yüzde, yasla birlikte artar. DSsde, 2 1 inci kromozomun tamami veya en azindan bir bölümü, üç kopya halinde bulunur (Antonarakis ve arkadaslari, 2004; Moncaster ve arkadaslari., 2010). Sonuçta amiloid öncü proteini (APP) geninin üç kopyasi, bir Amiloid-ß (Aß) fazlasi üretilmesine yol açar; temel anormal proteinlerden birinin, Alzheimer hastaligindan (AD) sorumlu oldugu iyi bilinir (Ballard ve arkadaslari., 2011). Bu yüzden Aß"nin, çogu DS"li kiside AD benzeri demansta olasi bir rolü oldugu ileri sürülür (Lee ve arkadaslari., 2005; Liu ve arkadaslari, 2005; Gilman ve arkadaslari., 2005). Down sendromlu kisilerde AD benzeri kusurlar, AB, Tau, DyrklA, Apo E Vb. gibi birkaç patolojik protein ile alakali olabilir. Aß artisi, daha einbriyonik evrede baslar, dogumda ilerler ve yasin büyümesiyle birlikte yigilmaya devam eder (Stoltzner ve arkadaslari., 2000). Ek olarak Aß42"li serebrospinal sivi (CSF) seviyeleri, yaslilarda (40 yas), daha genç olan DS°li kisilerde oldugundan daha düsüktü ve tau seviyeleri daha yüksekti (Tapiola ve arkadaslari., 2001). Aß°nin plaklar halinde birikmesi üzerine 12 yasinda birçok plakta Apo E saptanabilir ve yasla birlikte istikrarli sekilde çogalir (Leinere ve arkadaslari., 1996). Yasaminin dördüncü on yili sirasinda DS°li beyninde nörofibriler dolanmalar (NFTler) saptanir. Bu NFTlerin tau birikiininden kaynaklandigina inanilir. Hiperfosforilasyona, DyrklA adinda bir kinazin (ikili spesifitede tirozin fosforile edilmis ve regüle edilmis kinaz 1A) asiri ekspresyonunun neden olabilecegi gösterilmistir (Lemere ve arkadaslari., 1996;Liu ve arkadaslari., 2008). Bu yüzden DS"li kisiler, 40 yas itibariyle amiloid ile alakali patoloji gelistirebilirler ve çogu, 60 yas itibariyle algida azalma ve hafiza bozuklugu gibi Alzheimer"e benzer klinik seinptomlar gösterir (Stanton 2004). DS,li kisiler, temel olarak kendi çesitli saglik problemleri (örn., kalp kusurlari, enfeksiyonlar ve hipertiroidizm) konusunda tibbi bakim alirken nöropatolojik özellikler, yani mental engellilik ve hafiza eksikligi konusunda spesifik tedavi nadiren gündeme gelir. Halen sadece birkaç klinik deney devam etmekte olup bunlarin hepsinde amaç, mental yetileri arttirmak veya sinir hasarini azaltinaktir. DS tedavisine yönelik ilaçlar, AD,de de kullanilir ve hepsi, örn., bir kolinesteraz inhibitörü olan Rivastiginine veya Donepezil ve bir NMDA reseptör antagonisti olan Memantine, kolinerjik sistem veya glutamaterjik nörotransmisyon üzerinde etkilidir (Prasher, 1993; Prasher, 2004). Bununla birlikte DS"1i kisiler için etkinlik kaniti yoktur. Halen Aß hedeHeyici immünoterapi dahil olmak üzere birçok ainiloid modifiye edici tedavi, inceleme altindadir (Rafii, 2010). Son zamanlarda birkaç asi, AD"li fare modellerinde serebral Aß yükünü verimli sekilde azalttigi ve algida azalmayi gerilettigi gösterildikten sonra klinik fazlara ulasmistir (Weiner ve Frenkel, 2006). AD°nin aksine Aßiyi hedefleyen iinmünoterapiler, DS"ye hitap etmez. DS"li yetiskinlerde algi bozuklugunun tedavisine yönelik birkaç yaklasimdan, asetilkolinesteraz inhibitörleri (AChEPlar) veya NM DA reseptör antagonistleri kullanilan mevcut çalismalar, küçük bir etki göstermis veya hiç etki göstermeniistir (Fernandez ve arkadaslari, 2007, Hanney ve arkadaslari, 2012). Buiia karsilik amiloidin, DS°1i kisilerin algi tahribatinda rol oynadigi hipotezine anlamli destek vardir; Netzer ve is arkadaslari, APP klivajinin, bir y-sekretaz inhibitörü tarafindan degistirilmesinin, DS"1i bir fare modelinin hafizasi üzerinde faydali bir etkisinin oldugunu gösterdi (Netzer ve arkadaslari, 2010). Bu gözlemler, fare modelleri üzerindeki çalismalar üzerine çogalarak DS ve AD"yi karakterize eden nöronlarin yasla baglantili dejenerasyonunda, aniiloid birikinesinden sorumlu Abeta peptidinin ana proteini olan APP için artmis gen dozu gerektigini gösterir (Salehi ve arkadaslari 2006, 2009). Bu yüzden amiloidin hedeflenmesi, AD"nin ilerlemesinin engelleninesinde umut vaat eden bir terapötik strateji olabilir. Aß°ya karsi bir immünoterapi gelistirilmesi, bir molekülün, Aß"y1 (çözülebilir formda ve oligomerler halinde) yerinde hedeflemesi ve tecrit etmesi durumunda molekülün, beyinden Abeta çikisini arttirabilecegi ve DS"li kisilere klinik faydalar getirebilecegi hipotezine dayanir. Anti-AB asisiyla üretilen antikorlarin, fibriler AB tortularina baglanarak neticede 'on plaklari çözünürlestirmesi veya bunlarin büyümesini inhibe etmesi umulmaktadir. AB oligomerleri bugün DS°li kisilerin çogu algi fonksiyonunu bozan en toksik AB türü kabul edilmektedir (Teller ve arkadaslari, 1996). WO 2007/068411 A2, amiloid veya ainiloid benzeri proteinlerin neden oldugu veya bunlarla baglantili hastaliklarin ve bozukluklarin tedavisinde terapötik ve diagnostik kullanima yönelik yöntemleri ve kompozisyonlari açiklar. Ozellikle WO 2007/068411 A2, bir lipozoin içinde yeniden biçimlendirilmis AB peptidinin N terminal bölümünden 13 ile 15 arasinda bitisik amino asit tortusunun tek veya tekrarli bir dizisinden olusan bir AB anti jenik peptit fragmani içeren, ainiloid ile baglantili bir hastalik veya durumunda tedavisinde kullanim amaçli bir anti jenik yapiyi açiklar. WO 2010/ 106127 A2, bir lipozomun lipit ikili katmanina sokulinasini kolaylastiran bir lipofilik veya hidrofilik yarimla modifiye edilen bir amiloid proteini veya amiloid benzeri proteinden, örnegin amiloid beta, prion proteini, tau proteini, alfa-sinüklein, huntingtinden türetilmis bir anti jen içeren, T hücresinden bagimsiz bir immün yanitina ihtiyaci olan bir hastada bir hastaligin, durumun veya bozuklugun tedavi edilmesi üzerine bu tür T hücresinden bagimsiz bir yanitin indüklenmesine yönelik bir anti jenik kompozisyonu açiklar. Bu yüzden Down sendromlu (DS) süjelerde amiloid ile alakali patoloji ile iliskili klinik semptomlarin, örn., özellikle hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinin engelleninesini veya gelismesinin yavaslatilmasini amaçlayan bir engelleme terapisine ihtiyaç vardir. Ozellikle Down sendromlu (DS) süjelerde amiloid ile alakali patoloji ile iliskili klinik semptomlarin, Down sendromlu (DS) süjelerde ögrenme kabiliyetlerinin gelismesine ve/veya hafiza ve/veya algi kapasitelerinin gelismesine veya onarilmasina yol açacak tedavisine ihtiyaç vardir. Mevcut bulusun kapsaminda, bu ihtiyacin karsilanmasina yardimci olacak tedbirler ve vasitalar sunulur. Ozellikle mevcut bulus, Down sendromlu çocuklarda ve genç ila orta yasli süjelerde AD benzeri algi bozukluklarini engelleme terapisinde ve bunlarin tedavisinde kullanim için anti jenik peptitler sunar. Mevcut bulus, istemlerle ve asagidaki düzeneklerle tanimlanir: Birinci düzenekte mevcut bulus, Down sendromlu süjelerde hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisi ve/veya hafifletilmesi ve/veya engellenmesinde kullanim için amiloid beta proteininden türetilmis bir anti jenik peptit ile ilgilidir, burada anti jenik peptit, ABI-15 tortularindan olusur ve peptidin N ve/veya C terminaline baglanmis ve bir lipozoin içinde yeniden biçimlendirilmis bir palmitik asit tarafindan modifiye edilir ve adi geçen Down sendromlu sü jelerin beyninde henüz amiloid proteini ile iliskili plaklar gelismemistir. Spesifik bir düzenekte ABI-15 peptidi, peptidin N ve/veya C terminaline baglanmis dört palmitik asit tarafindan modifiye edilir. Bir baska spesifik düzenekte ABI-15 peptidi, peptidin N ve/veya C terininaline baglanmis iki palinitik asit tarafindan modifiye edilir. Diger çesitli düzeneklerde bulus, düzenek 'l -3'ten herhangi birine göre kullanimi için anti jenik peptit ile ilgilidir, burada adi geçen bozukluk veya anormallik, bir tanima hafizasi bozuklugu, bir baglamsal birlestirme hafizasi bozuklugu, bir birlestirerek ögrenme bozuklugu, bir gerçekleri ve olaylari bildirine hafizasi bozuklugu, eylemsel hafiza bozukluklari, bir dil yetisi disfonksiyonu, bir görsel inekansal bozukluk, yürütücü fonksiyonlarda bir azalma, kisilik degisiklikleri, duygusal degisiklikler, apraksi, 'Ögrenilmis motor görevleri yapma bozukluklari, piramidal ve ekstrapiramidal bulgular ve ayrica miyoklonus veya nöbetler veya bunlarin bir kombinasyonu ile ilgilidir. Yine diger düzeneklerde bulus, önceki herhangi bir düzenege göre kullanim için antijenik peptit ile ilgilidir; burada adi geçen Down sendromlu süje, (a) bir genç ila orta yasli bir süje; veya (b) bir orta yasli sü je; veya (o) bir genç yasta sü je; veya ((1) bir çocuk yasta sü je; veya (e) 65 yas alti bir süjedir. Diger çesitli düzeneklerde bulus, önceki düzeneklerden herhangi birine göre kullaniin için anti jenik peptit ile ilgilidir; burada adi geçen kullanim, a) hafizanin iyilesmesine ve/Veya onarilinasina yol açar; ve/Veya b) tedavi edilen süjede algi kapasitesinin korunmasinda bir artisa veya tam bir onariina yol açar; ve/Veya c) hafiza ve/Veya algi kapasitesinin artmasina veya onarilmasina yol açar; ve/Veya d) istenmeyen yan etkiler indüklemez. Spesifik bir düzenekte bulus, önceki düzeneklerden herhangi birine göre kullanim için olup, beyinde Aß ile iliskili plaklar gelismesinin engellenmesine yönelik antijenik peptit ile ilgilidir. Bir baska düzenekte bulus, Down sendroinlu süjelerde hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisinde ve/veya iyilestirilmesinde ve/veya engellenmesinde kullanim için farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/veya eksipiyan ile birlikte terapötik açidan etkin miktarda 'Önceki düzeneklerin herhangi birinde tanimlandigi gibi anti jenik peptidi içeren bir kompozisyon ile ilgilidir, burada adi geçen Down sendroinlu süjelerin beyninde henüz amiloid proteini ile iliskili plaklar gelismemistir. Çesitli spesifik düzeneklerde bulus, önceki düzenege göre kullanim için olup bir adjuvan içeren kompozisyon ile ilgilidir; 'ozellikle buradaki adjuvan, lipit A"dir; özellikle buradaki adjuvan, bir detoksifiye edilmis lipit A"dir, özellikle buradaki adjuvan, monofosforil veya difosforil lipit A, alum, kalsiyum fosfat, interlökin 1 ve/Veya polisakaridler ve proteinler içeren mikrokapsüllerdir. Bir baska spesifik düzenekte mevcut bulus, Down sendromlu bir süjede nörodejenerasyonun engellenmesine yönelik olup, önceki düzeneklerden herhangi birine göre kullanim için anti jenik peptit veya 'Önceki düzeneklerden herhangi birine göre kullanim için kompozisyon ile ilgilidir. Bir düzenekte mevcut bulus, Down sendromlu bir süjede amiloid beta proteinine karsi bir immün yaniti indüklenmesine yönelik olup, önceki düzeneklerden herhangi birine göre kullanim için anti jenik peptit veya önceki düzeneklerden herhangi birine göre kullanim için kompozisyon ile ilgilidir. Burada, beyninde henüz ainiloid proteini veya ainiloid benzeri protein ile iliskili plaklar, Özellikle Aß ile iliskili plaklar gelismemis Down sendromlu genç ila orta yasli süjelerde, 'ozellikle Dowii sendromlu genç sü jelerde hafiza Ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, 'özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, `Özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya 'Ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklarin ve anorinalliklerin tedavisi ve/Veya iyilestirilmesi Ve/Veya engellenmesinde kullanim için amiloid proteini veya amiloid benzeri proteinden türetilmis bir anti jenik peptit fragmani, 'Özellikle amiloid-beta proteininden t'ûretilmis bir anti jenik peptit fragmani veya adi geçen antijenik peptidi içeren bir kompozisyon açiklanir. Ayrica burada, Down sendromlu orta yasli süjelerde, özellikle beyninde henüz amiloid proteini veya amiloid benzeri protein ile iliskili, özellikle AB ile iliskili plaklar gelismemis Down sendromlu orta yasli süjelerde, hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, 'Özellikle beynin hipokampusunda ve/veya ön frontal korteksinde 've/veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklarin ve anorinalliklerin tedavisi Ve/Veya iyilestirilmesi ve/Veya engellenniesinde kullanim için ainiloid proteini veya amiloid benzeri proteinden türetilmis bir anti jenik peptit fragmani, 'Özellikle amiloid-beta proteininden türetilmis bir antijenik peptit fragmani veya adi geçen antijenik peptidi içeren bir kompozisyon da açiklanir. Ayrica burada, Down sendromlu genç süjelerde, özellikle beyninde henüz amiloid proteini veya amiloid benzeri protein ile iliskili, 'Özellikle AB ile iliskili plaklar gelismemis Down sendromlu genç süjelerde hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, 'Özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya 'Ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikari bozukluklarin ve anorinalliklerin tedavisi ve/Veya iyilestirilmesi ve/Veya eiigelleninesinde kullanim için amiloid proteini veya amiloid benzeri proteinden türetilmis, Özellikle amiloid-beta proteininden türetilmis bir anti jenik peptit fragmani veya adi geçen anti jenik peptidi içeren bir kompozisyon da açiklanir. Ayrica burada, Down sendromlu çocuklarda, özellikle beyninde henüz amiloid proteini veya amiloid benzeri protein ile iliskili, özellikle AB ile iliskili plaklar gelismemis Down sendromlu çocuklarda hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, 'ozellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya `on frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklarin ve anormalliklerin tedavisi ve/Veya iyilestirilmesi ve/Veya engellenmesinde kullanim için amiloid proteini veya amiloid benzeri proteinden türetilmis, 'ozellikle amiloid-beta proteininden türetilmis bir anti jenik peptit fragmani veya adi geçen anti jenik peptidi içeren bir kompozisyon da açiklanir. Ayrica burada, beyninde henüz amiloid proteini veya ainiloid benzeri protein ile iliskili, özellikle AB ile iliskili plaklar gelismemis Down sendromlu çocuklarda ve genç ila orta yasli sü jelerde, özellikle Down sendromlu genç süjelerde hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, 'Özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya `Ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklarin ve anormalliklerin engellenmesinde kullanim için amiloid proteini veya amiloid benzeri proteinden türetilmis, `ozellikle amiloid beta proteininden türetilmis bir antijenik peptit fragmani veya adi geçen anti jenik peptidi içeren bir kompozisyon da açiklanir. Ozellikle anti jenik peptit, Down sendromlu bir süjeye, 'ozellikle hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, 'Özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklar ve anormalliklerden muzdarip bir süjeye uygulanir, burada adi geçen süje, 60 yas alti, özellikle 55 yas alti, özellikle 50 yas alti, 'özellikle 45 yas alti, özellikle 40 yas alti, özellikle 35 yas alti, özellikle 30 yas alti, özellikle 25 yas alti, özellikle 20 yas alti, özellikle 15 yas alti, 'Özellikle 10 yas alti, özellikle 5 yas alti, özellikle 3 yas altidir; veya antijenik peptit, Down sendromlu bir süjeye, `Özellikle hafiza ve/veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, 'özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, 'Özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklar ve anormalliklerden muzdarip bir süjeye uygulanir, burada adi geçen süje, 35 yas alti, özellikle 30 yas alti, özellikle 25 yas alti, özellikle 20 yas alti, özellikle 1 5 yas altidir; veya antijenik peptit, Down sendromlu bir süjeye, özellikle hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, 'özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, 'Özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya `on frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklar ve anormalliklerden muzdarip bir süjeye uygulanir, burada adi geçen süje, 15 yas alti, özellikle 10 yas alti, 'Özellikle 5 yas alti, 'Özellikle 3 yas altidir; veya anti jenik peptit, Down sendromlu bir süjeye, özellikle hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, özellikle AD benzeri hafiza ve/veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, `Özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya ön frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklar ve anormalliklerden inuzdarip bir süjeye uygulanir, burada adi geçen sü je, 10 yas alti, 'özellikle 5 yas alti, özellikle 0 ile 10 arasi, 'Özellikle 1 ile 10 arasi, özellikle 2 ile 10 arasi, 'özellikle 3 ile 10 arasi, 'Özellikle 4 ile 10 arasi, özellikle 5 ile 10 arasidir. Burada açiklandigi gibi antijenik peptit ile tedavi, betinde, Özellikle beynin hipokainpusunda ve/Veya ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde AB ile iliskili plaklarin gelismesini engeller. Ayrica burada, beyninde hali hazirda AB ile iliskili plaklar gelismis Down sendroinlu çocuklarda ve genç ila orta yas arasi sü jelerde hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, 'Özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya `on frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklarin ve anormalliklerin tedavisi ve/veya iyilestirilmesi ve/veya engellenmesinde, amiloid proteini veya amiloid benzeri proteinden türetilmis antijenik peptit fragmaninin veya bulusa göre ve burada tarif edildigi gibi adi geçen anti jenik peptidi içeren bir kompozisyonun kullanilmasi da tasarlanir. Mevcut bulusta sunuldugu gibi antijeiiik peptit ile tedavi, beyinde, özellikle beynin hipokampusunda ve/veya ön frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde AB ile iliskili plak iniktarini azaltir Burada açiklandigi gibi anti jenik peptit veya kompozisyon ile tedavi edilecek tedavi grubu, Down sendromlu genç ila orta yas arasi süjeler, özellikle 65 yas alti, özellikle 60, 55 veya 50 yas alti sü jeler içerebilir. Bir düzenekte 0 ile 65 arasi, özellikle 5 ile 55 arasi, özellikle 10 ile 50 arasi, özellikle 15 ile 45 arasi, 'Özellikle 20 ile 40 arasi, özellikle 25 ile arasi yasta olan sü jeler, bulusa göre anti jenik peptit vey kompozisyon ile tedavi edilebilir Mevcut bulusun amaçlari çerçevesinde çocuklar, 18 yas alti olan süjelere, özellikle 0 ile 18 arasi, özellikle I ile 10 arasi, özellikle 2 ile 9 arasi, özellikle 3 ile 9 arasi, 'Özellikle 4 ile 9 arasi, 'Özellikle 5 ile 18 arasi yasta olan sü jelere karsilik gelir. Mevcut bulusuii amaçlari çerçevesinde genç süjeler, 35 yas alti olan süjelere, 'Özellikle 0 ile 35 arasi, özellikle 1 ile 30 arasi, özellikle 5 ile arasi yasta olan süjelere karsilik gelir. Mevcut bulusun amaçlari çerçevesinde orta yasli si'ijeler, 36 ile 65 arasi, 'Özellikle 40 ile 60 arasi, 'Özellikle 45 ile 55 arasi yasta olan sü jelere karsilik gelir. Down sendromlu ve hafiza ve/veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, özellikle AD benzeri hafiza ve/veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, 'Özellikle beynin hipokampusunda ve/veya 'Ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklar ve anormalliklerden muzdarip bir çocuk veya genç ila orta yas arasi süjenin, burada tarif edildigi gibi antijenik peptit veya kompozisyon kullanilarak tedavi edilmesi, adi geçen bozukluklarin veya anormalliklerin iyilesmesine veya onarilmasina, 'Özellikle hafizanin iyilesmesine, özellikle tanima hafizasinin ve/veya baglamsal birlestirici hafizanin iyilesmesine veya onarilmasina yol açar. Ozellikle Down sendromlu ve algi bozukluklari veya anormalliklerinden, özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden muzdarip bir çocuk veya genç ila orta yas arasi süjenin burada tarif edildigi gibi anti jenik peptit veya kompozisyon kullanilarak tedavi edilmesi, tedavi edilen süjede algi hafiza kapasitenin korunmasinda bir artisa veya tamamen onarilmasina yol açar. Down sendromlu çocuk ve genç ila orta yas arasi süjelerde AD benzeri algi bozukluklari veya anormalliklerinin burada tarif edildigi gibi anti jenik peptit ile tedavisi, meninjioensefalit ve mikroheinoraj gibi istenmeyen yan etkiler olinaksizin burada açiklanan terapötik etkileri gösterir. Süje, Down sendromlu ve hafiza ve/Veya algi bozukluklari veya anormalliklerinden, 'Özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozuklari veya anormalliklerinden, özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya 'Ön frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklar ve anorinalliklerden muzdarip burada tanimlandigi gibi çocuk yasta bir sü je, özellikle genç yasta bir süje, 'ozellikle orta yasta bir süje olabilir. Burada tarif edildigi gibi anti jenik peptit veya kompozisyon ile tedavi, beyinde, 'Özellikle beyiiin hipokampusunda ve/Veya 'Ön frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde, Down sendromlu sujelerde, özellikle Down sendromlu genç ila orta yas arasi süjelerin beyninde, özellikle çocuk yasta sü jelerin beyninde, özellikle genç yasta sü jelerin beyninde, 'Özellikle orta yasta süjelerinde beyninde AB ile iliskili plaklar gelismesini engeller. Burada tarif edildigi gibi antijenik peptit, prion proteini, tau proteini, alfa-sinüklein, huntingtin ve amiloid-B veya yukaridaki peptitlerin biri veya daha fazlasinin bir kombinasyoiiunun olusturdugu gruptan seçilen bir amiloid proteini veya ainiloid benzeri proteinden türetilebilir. Adi geçen AB antijenik peptit fragmani, AB peptidinin N terminal bölümüne, 'Özellikle ABI-15 fragmanindan en az 5, `Özellikle en az 6, 'Özellikle en az 7, özellikle en az 8, özellikle en az 9, özellikle en az , özellikle en az 1 1, 'Özellikle en az 12, özellikle en az 13, özellikle en az 14, 'Özellikle de bütün amino asit tortularini içeren N terminal bölümüne karsilik gelebilir. AB antijenik peptit fragmani, Aß peptidinin, Aß1-16 fragmanindan, ABI-17 fragmanindan, Aß1-18 fragmanindan, Aß1-19 fragmanindan, ABI-20 fragmanindan, Aß1-22 fragmanindan, ABI-23 fragmanindan, Aß1-24 fragmamndan, ABI-25 fragmanmdan veya ABI-26 fragmanindan veya 3-15 Aß fragmanindan en az 5, 'Özellikle en az 6, 'Özellikle en az 7, özellikle en az 8, özellikle en az 9, özellikle en az , özellikle en az 11, özellikle en az 12, özellikle en az 13, Özellikle en az 14, özellikle en az 15, 'Özellikle de bütün amino asit tortularini içeren N terminal bölümüne karsilik gelebilir. Alternatif olarak Aß anti jenik peptit fragmani, AB peptidinin, Aß20- 40 veya Aß20-42 fragmanindan, Aß21-40 veya Aß21-42 fragmanindan, Aß22-40 veya Aß22-42 fragmanindan, Aß23-40 veya Aß23-42 fragmanmdan, Aß24-40 veya Aß24-42 fragmanindan, Aß25- 40 veya Aß25-42 fragmanmdan, Aß26-46 veya Aß27-42 fragmanindan veya Aß27-40 veya Aß27-42 fragmanindan veya Aß29- 40°tan en az 5, özellikle en az 6, özellikle en az 7, özellikle en az 8, özellikle en az 9, özellikle en az 10, özellikle en az 11, 'Özellikle en az 12, özellikle en az 13, özellikle en az 14, `özellikle en 2 15, özellikle de bütün ainino asit tortularini içeren C terminal bölümüne karsilik gelebilir. Alternatif olarak Aß anti jenik peptit fragmani, AB peptidinin, Aß15- , özellikle Aß20-35 fragmanindan en az 5, özellikle en az 6, özellikle en az 7, özellikle en az 8, 'Özellikle en az 9, 'Özellikle en az , özellikle en az 11, özellikle en az 12, özellikle en az 13, Özellikle en az 14, özellikle en az 15, 'Özellikle de bütün amino asit tortularin içeren orta bölümüne karsilik gelebilir. Ozellikle Aß antijenik peptit fragmani, Aß peptidinin merkez bölümüne, özellikle Aßl4-29 fragmanina karsilik gelebilir; veya Aß antijenik peptit fragmani, Aß peptidinin C terminal bölümüne, `Özellikle C terminali Aß22-35 fragmanina karsilik gelebilir. Alternatif olarak tam boyda ABI-39, Aß1-40 veya ABI-42 fragmani da kullanilabilir. Burada açiklanan AB antijenik peptit fragmani, bir veya daha fazla modifiye edilmis veya dogal olinayan amino asit tortusu ihtiva edebilir. Ayrica burada Aß peptidinin N terminal bölümünden 13 ile 15 arasinda bitisik amino asit tortusu içeren tek veya tekrarli bir diziden olusan fragmanlar olmayan Aß anti jenik peptit fragmanlarinin kullanilmasi da tasarlanabilir; burada adi geçen 13 ila 15 arasi amino asit tortusu içeren adi geçen bitisik dizi, Aß peptidinin 1-16 veya 1-17 arasi N terminali fragmanindan, özellikle Aß peptidinin, 1-15, 1-14 ve 1-13 arasi tortunuii olusturdugu, `Özellikle SEK.KIM.NO.:1"de verildigi gibi AßHs peptit anti jeni ve WO 2007/068411°de açiklanan SEK.KIM.NO.:3,te verildigi gibi Aßi_16(A14)°ün olusturdugu gruptan seçilen N terminal bölümünden elde edilir. Burada tarif edildigi gibi antijenik peptit, örnegin bir vesikül, bir partikülat gövdesi veya molekülü gibi bir tasiyici içinde yeniden biçimlendirilmis olarak ve özellikle de bir lipozom içinde yeniden biçimlendirilmis olarak sunulabilir. Ozellikle burada tarif edildigi gibi antijenik peptit, tasiyici veya lipozom üzerinde tek veya tekrarli bir dizi halinde sunulabilir. Tasiyici veya lipozom yüzeyi üzerindeki adi geçen yüksek düzeyde tekrarli dizi, her bir tasiyici molekül basina en az 10 tekrarli anti jenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 50 tekrarli antijeiiik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 100 tekrarli antijenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 200 tekrarli anti jenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 300 tekrarli anti jenik birim; özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 400 tekrarli anti jenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 500 tekrarli anti jenik birim içerebilir. Burada tarif edildigi gibi anti jenik kompozisyon, bir konformasyonel antijen, Özellikle burada tarif edildigi gibi bir AB antijeni içerebilir; burada %30°dan fazlasi, 'özellikle %40°tan fazlasi, 'ozellikle %50"den fazlasi, 'ozellikle %60'tan fazlasi, 'Özellikle %70sten fazlasi, `ozellikle %80°den fazlasi, 'ozellikle %90°dan fazlasi, özellikle %95,ten fazlasi ve %100 kadari, bir beta-levha konformasyonundadir. Ozellikle kompozisyon, Down sendromlu süjelerde hafiza bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisinde ve/Veya iyilestirilmesinde ve/Veya engellenmesinde kullanim için burada tarif edildigi gibi terapötik açidan etkin miktarda bir anti jenik peptit ile birlikte farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/Veya eksipiyan içerebilir. Alternatif olarak kompozisyon, Down sendromlu süjelerde algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisinde ve/Veya iyilestirilmesinde ve/Veya engellenmesinde kullaniin için burada tarif edildigi gibi terapötik açidan etkin miktarda bulusa ait antijenik peptit ile birlikte farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/Veya eksipiyan da içerebilir. Ozellikle adi geçen hafiza ve/veya algi bozukluklari, beynin hipokampusunda ve/Veya ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksiiide ortaya çikar. Burada tarif edildigi gibi terapötik olarak etkili miktarda antijenik peptit ile birlikte farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/veya eksipiyan içeren kompozisyon, tanima hafizasi bozukluklarinin ve/Veya baglamsal birlestirici hafiza bozukluklarinin ve/Veya birlestirerek ögrenme bozukluklarinin ve/Veya gerçekleri ve olaylari açiklayici hafiza bozukluklarinin ve/Veya eylemsel hafiza bozukluklarinin ve/Veya afazi gibi dil yetisi disfonksiyonunun ve/Veya ögeleri yanlis yerlestirme ve tanidik olmayan ve tanidik alanda yön bulma güçlügü gibi görsel mekansal bozukluklarin ve/veya apati, sartli refleks kaybi, sosyal izolasyon, zayif yargi, planlama güçlükleri ve/Veya zayif soyut akil yürütme gibi azalmis yürütme fonksiyonlarinin ve/Veya kisilik degisikliklerinin ve/Veya apati, ajitasyon ve psikoz ve/Veya apraksi gibi duygusal degisikliklerin ve/Veya ögrenilmis motor görevleri yapma bozukluklari ve/Veya piramidal ve ekstrapiramidal bulgular dahil olmak üzere diger nörolojik belirtilerin ve ayrica miyoklonus veya nöbetlerin tedavisinde ve/Veya iyilestirilmesinde ve/Veya engellenmesinde kullanilabilir. Ozellikle adi geçen bozukluk veya anormallik, tanima hafizasi ile ilgilidir. Down sendromlu süjelerde tanima hafizasinin güçlendirilmesinde veya onarilmasinda kullanim için adi geçen antijenik peptit, AB peptidinin N terminal bölümünden türetilir, özellikle adi geçen antijenik peptit, ABI-15, ABI-16, Aßl-l7, ABI-18, Aßl-l9, ABI-20, ABI-22 veya ABI-23 amino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen anti jenik peptit, amino asit tortulari ABI-15"ten olusur. Alternatif olarak Down sendromlu süjelerde tanima hafizasinm güçlendirilmesinde veya onarilinasinda kullanim için adi geçen antijenik peptit, Aß peptidinin N terminal bölümünden türetilebilir, özellikle adi geçen antijenik peptit, amino asit tortularimn tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen bozukluk veya anormallik, baglamsal birlestirici hafiza ile ilgilidir. Ozellikle Down sendromlu süjelerde baglamsal birlestirici hafizamn güçlendirilmesinde veya onarilmasinda kullaiiim içiii adi geçen antijenik peptit, Aß peptidinin N terminal bölümünden türetilebilir, özellikle adi geçen anti jenik peptit, Aßl-lS, Aßl-l6, ABI-17, ABI-18, ABI-19, ABI-20, ABI-22 veya ABI-23 amino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen antijenik peptit, amino asit tortulari ABI-15°ten olusur. Ozellikle adi geçen bozukluk veya anormallik, birlestirerek ögrenme ile ilgilidir. Down sendromlu süjelerde birlestirerek ögrenmenin arttirilmasinda veya onarilmasinda kullanim için adi geçen antijenik peptit, Aß peptidinin N terininal bölümünden türetilebilir, özellikle adi geçen antijenik peptit, ABI-15, ABI-16, ABI-17, ABI-18, ABI-19, ABI-20, ABI-22 veya Aßl-23 amino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen antijenik peptit, ainino asit tortulari ABI-15"ten olusur. Bir baska altematifte, Down sendromlu süjelerde birlestirerek ögrenmenin artirilmasinda veya onarilmasinda kullaniin için adi geçen antjenik peptit, AB peptidinin C terminal bölümünden türetilebilir, özellikle adi geçen aiitijenik peptit, Aß20-36, Aß20-40, Aß20-42, Aß21-36, Aß21-40, Aß21-42, Aß22-36, Aß22-40 veya Aß22-42 amino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen anti jenik peptit, amino asit tortulari Aß22-35"ten olusur. Arzu edilen konformasyonda antijenik peptidin olusturulmasi ve stabilizasyonu, aiitijenik peptidin, örnegin bir vesikül, bir partikülat gövdesi veya molekül veya aiitijenik peptit için uygun sekilde bir tasiyici/adjuvan görevi görebilen baska herhangi bir vasita gibi bir tasiyiciya kismen veya tamamen eklenmis veya buna dahil edilmis ve içerisinde yeniden biçiinlendirilinis olarak sunulmasiyla saglanabilir. Ozellikle, antijenik peptit, zayif etkilesimlerle, örnegin van der Waal's, hyidrofobik veya elektrostatik etkilesim veya adi geçen etkilesimlerden ikisinin veya daha fazlasinin bir kombinasyonuyla tasiyiciya eklenmis veya buna dahil edilmis veya içerisinde yeniden biçimlendirilmis olabilir, böylelikle peptit, tasiyici yüzeyi üzerinde, adi geçen anti jenik peptidi üç boyutlu hareket serbestligiyle sinirlamak ve böylece konformasyonel degisiklikleri engellemek veya ciddi sekilde kisitlamak suretiyle muhafaza ve stabilize edilen spesifik bir konformasyonla sunulur. Bir tasiyici/adjuvan olarak bir vesikül, bir partikül veya partikül gövdesinin, örnegin bir lipozomun kullanildigi durumda antijeiiik peptidin kompozisyonu, genel net yükü, peptidin eklendigi tasiyici/adjuvan yüzeyininkine özdes olacak sekilde seçilebilir. Ozdes sekilde yüklenmis tasiyici/adjuvan yüzeyi ile antijenik peptit ve özellikle özdes sekilde yüklenmis tasiyici yüzeyi ile anti jenik peptidi olusturan amino asit tortulari ve daha özellikle özdes sekilde yüklenmis tasiyici yüzeyi ile anti jenik peptit içerisinde yer alan özdes sekilde yüklenmis amino asit tortulari arasinda etkili olan elektrostatik itme kuvvetleri, antijenik peptidin, yüksek bir biyolojik aktiviteyi garanti eden tanimlanmis, yüksek düzeyde spesifik ve stabilize konforinasyona alinmasina yol açabilir. Sonuçta anti jenik peptit, hedef organizmanin immün sisteminin, biyolojik olarak aktif konformasyonda antijenik yapi içerisinde yer alan anti jenik deterininantlar ile serbestçe etkilesmesini saglamakla yüksek düzeyde biyolojik olarak aktif bir konformasyonda açiga çikarilir ve sunulur ki bu, kuvvetli ve konformasyona özel bir immün yanitina yol açarak, `Örnegin hedef organizmada yüksek bir antikor titerine neden olur. Immünojenik yanit, bir tasiyici olarak lipozom kullanmak suretiyle daha da arttirilabilir; bu lipozom, bulusa göre terapötik asi ile tedavi edilecek hedef hayvan veya insanda immün yanitini arttirmak veya uyarmak için bir adjuvan görevi görebilir. Istege göre lipozom, ek olarak, örnegin lipit A, alum, kalsiyum fosfat, interl'okin l ve/veya polisakaridlerin ve proteinlerin mikrokapsülleri ve özellikle bir detoksifiye edilmis lipit A, örn., monofosforil veya difosforil lipit A gibi baska bir adjuvan veya mevcut bulusun kapsami dahilinde uygun sekilde kullanilabilen örnegin alum, kalsiyum fosfat, interlökin 1 ve/veya polisakaridler ve proteinler, LPS, CpG ODN, Pam2CSK4, Pam3CSK4, dsRNA, ssRNA, muramil dipeptit, Quil Q, QS-21"in mikrokapsülleri gibi baska herhangi bir ad juvan da ihtiva edebilir. Burada tarif edilen kompozisyonlar içerisinde kullanilabilen lipozomlar arasinda bu konuda uzman bir kisi tarafindan bilinenler yer alir. Lipozomlarin yapiminda faydali standart lipitlerden herhangi biri kullanilabilir. Burada tarif edildigi gibi kompozisyonlari yapmak için standart iki katmanli ve çok katmanli lipozoinlar kullanilabilir. Bu konuda uzman bir kisi tarafindan bilinen lipozomlarin yapimina yönelik herhangi bir yöntem kullanilabilirken en çok tercih edilen lipozomlar, Alving ve arkadaslari, Infect. Immun. 60:2438-2444, l992"deki yönteme göre (Lauer ve arkadaslari., 1992) yapilir. Lipozom, burada tarif edilen terapötik asi ile tedavi edilecek hedef hayvan veya insanda immün yanitini arttirmak veya uyarmak için bir ad juvan görevi görmeden önce veya bununla ayni anda burada tarif edildigi gibi supramoleküler yapi içeren bir tasiyici olarak kullanilabilinesiyle ikili bir fonksiyona sahip olabilir. Istege göre lipozom ek olarak bir baska adjuvan veya bir immüno- modülatör veya her ikisini de, `Örnegin lipit A, alum, kalsiyum fosfat, interlökin l ve/Veya polisakaridlerin ve proteinlerin mikrokapsüllerini ve özellikle bir lipit A, daha özellikle detoksifiye edilmis bir lipit A, örn., monofosforil veya difosforil lipit A veya alum ihtiva edebilir. Lipozom, dimiristoil fosfatidil kolin (DMPC), dimiristoil fosfatidil etanolainin (DMPEA), dimiristoil fosfatidil gliserol (DMPG) ve kolesterolün olusturdugu gruptan seçilen bilesenlerden mütesekkil olabilir. Ayrica burada lipozomal membranda katyonik lipitler yerine, sunlarin olusturdugu gruptan seçilen anyonik lipitlerin kullanilmasi da tasarlanir: a. fosfatidil gliserol, fosfatidil serin, fosfatidil inositol, L-(x- fosfatidilinositol-4-fosfat veya fosfatidik asit kafa gruplari ile diasil-fosfolipitler; b. fosfatidil gliserol, fosfatidil serin veya fosfatidik asit kafa gruplari ile liso-fosfolipitler ve c. kardiolipin, diliso-kardiolipin, monoliso-kardiolipin. Bir yönde lipozomal membranda anyonik lipitler yerine, sunlarin olusturdugu gruptan seçilen katyonik lipitlerin kullanilmasi tasarlanir: a. 3-trimetilamonyum-propan ,3-diinetilamonyum-propan, 3- etilfosfokolin veya 3-fosfatidiletanolamin kafa gruplari ile diasil- fosfolipitler; ve b. D-eritro-sfingosin, dimetildioktadesilamonyum bromid, N-[l- (2,3-dimiristiloksi)propil]-N,N-dimetil-N-(2-hidroksietiDamonyum bromid, N,N,N-trimetil-2-bis[(1 -0kso-9-oktedeseni1)oksi]-(Z,Z)- 1 - propanaminyum metil sülfat veya 3ß-[N-(N',N'-dimetilaminoetan)- karbamoil]kolesterol hidroklorid. Ozellikle yukaridaki kafa gruplarina eklenen lipit zincirleri a. doymus veya doymamis olabilir, b. (CH2)n,den itibaren boyu degisken olabilir, buradaki n, 3 ile 24 arasindadir ve simetrik veya asimetrik olarak ikame edilmis olabilir. Burada tarif edildigi gibi anti jenik kompozisyon, bir lipozom preparasyonu ve bir adjuvan, özellikle lipit A, alum, kalsiyum fosfat, interlökin l ve/veya polisakaridlerin ve proteinlerin mikrokapsüllerini ve 'özellikle bir lipit A, daha 'Özellikle detoksifiye edilmis bir lipit A, örn., monofosforil veya difosforil lipit A veya alum içerebilir. Burada tarif edildigi gibi lipozoinlar içerisinde gömülü lipofili yariinlar ile birlestirilmis bir AB peptidi içeren, burada tarif edilen lipozoinal kompozisyon, burada açiklanan metodolojiye göre hazirlanabilir. Lipozoinlarin bir tasiyici/adjuvan olarak kullanildigi durumda burada tarif edildigi gibi anti jenik peptit ayrica lipozom tasiyiçinin/adjuvaninin ikili katmani içerisine sokulmasini kolaylastiran bir lipofilik veya hidrofobik yarima birlestirilerek de modifiye edilebilir. Adi geçen hidrofobik yarim, bir yagli asit, bir trigliserid, bir digliserid, bir steroid, bir sfingolipit, bir glikolipit veya bir fosfolipit olabilir. Ozellikle lipofilik veya hidrofobik yarim, karbon omurgasinda en az 1 karbon atomu, `Özellikle en az 2 karbon atomu, 'Özellikle en az 3 karbon atomu, `Özellikle en az 4 karbon atomu, `Özellikle en az 6 karbon atomu, `Özellikle en az 8 karbon atomu, Özellikle en az 12 karbon atomu, özellikle en az 16 karbon atomu olan bir alkil grubu veya bir yagli asit olabilir. lipofilik veya hidrofobik yarimlar, yagli asitler, trigliseridler ve fosfolipitler olabilir; buradaki yagli asit karbon omurgasinda en az 4 karbon atomu vardir, özellikle lipofilik yarimlar, karbon omurgasinda en azindan yaklasik olarak 14 karbon atomu ve yaklasik olarak 24 kadar karbon atomu olan yagli asitlere sahiptir, daha özellikle hidrofobik yarimlarin karbon oinurgasinda, en az 14 karbon atomu vardir. Hidrofobik yarimlarin `Örnekleri arasinda, bunlarla sinirli olmaksizin, palmitik asit, stearik asit, miristik asit, laurik asit, oleik asit, linoleik asit, linolenik asit ve kolesterol veya DSPE yer alir. Ozellikle hidrofobik yarim, palmitik asittir. Ozellikle burada tarif edildigi gibi anti jenik kompozisyon, iki palmitik asit yariini, özellikle dört palinitik asit yarimi içeren bir peptit anti jeni içerir. Palmitoilasyoii, lipozoin ikili katmaninda bir peptit ankraji saglarken, Cmo yagli asit yariininin boyuiiun nispeten kisalrms olmasindan dolayi peptidin, lipozoin yüzeyi üzerinde açiga çikmis sekilde veya buraya çok yakin olarak sunulmasina yol açar. Böylelikle aiitijeni isleyen hücreler, peptit ile birlikte bütün lipozoinu almak zorunda kalir. Mevcut bulusa ait anti jenik yapilar, pegilasyon vasitasiyla (polietilen glikol (PEG) veya modifiye edilinis polietilen glikol kullanilarak) modifiye edilmis veya burada 'onceden tarif edildigi gibi diger yöntemler vasitasiyla, örn., palinitik asitle modifiye edilmis peptitler, poli-amino asitler (örn. poli-glisin, polihistidin), poli-sakaridler (om. poligalakturonik asit, polilaktik asit, poliglikolid, çitin, çitosan), sentetik poliinerler (poliamidler, poliüretanlar, polyesterler) veya kopoliinerler (örn. poli(metakrilik asit) ve N-(2-hidroksi)pr0pil metakrilamid) ve benzerini içerebilir. Anti jenik yapinin preparasyonunda PEG kullanilmasi durumunda serbest PEG terminali, fosfatidiletanolaminin bir molekülüne kovalent sekilde eklenebilir (buradaki yagli asit: miristik, palmitik, stearik, oleik, vb. veya bunlarin kombinasyonu olabilir). Bu supramoleküler yapi, fosfolipitler ve kolesterolden (degisken molar oranlarda fosfatidiletanol amin, fosfatidil gliserol, kolesterol) olusan lipozomlar içinde yeniden biçimlendirilebilir. Diger fosfolipitler de kullanilabilir. Lipit A, her bir pmol fosfolipit basina yaklasik olarak 40 ug,lik bir konsantrasyonda kullanilabilir. Ozellikle burada tarif edilen antijenik yapi, burada daha 'önce tarif edildigi gibi, her bir terminale en az bir ve 'özellikle de her bir terininale 1 veya 2 olmak 'uzere pegile edilinis lisine kovalent sekilde ekleninis bir anti jenik peptit sekansi içerebilir. PEG°nin (polietilenglikol) boyu, n : 8 ila 11 : 150.000 veya üzeri, `ozellikle n = 10 ila n = 80.000, daha özellikle n = 10 ila n = 10.000 arasinda degisebilir. Bulusun spesifik bir düzeneginde PEG zincirinin boyu, n = 45'ten fazla degildir, özellikle n = 5 ile n = 40 arasinda, daha 'Özellikle n : 10 ile n : 30 arasindadir ve çok daha özellikle 11 : "dur. Ozellikle Aß peptit antijeni, peptit molekül'unün N ve/Veya C terininaline baglanmis iki palinitik asitle modifiye edilir. Ayrica burada EP basvurusu 2632434'te tarif edildigi gibi farkli konsantrasyonlarda `Önceden olusturulmus lipozomlarin dis katinanina farkli peptit (öm., anti jen) tiplerinin ve/Veya adjuvan tiplerinin ekleme sonrasi da tasarlanir. Bu ekleme sonrasi yöntemi, lipozomlarin çözelti halinde 'Önceden sekillendirilinesini ve anti jenik peptitlerin, hidrofobik yariinlarla modifiye edilmesini, böylelikle modifiye edilmis antijenik peptitdin, bir misel formunda elde edilmesini içerir. Yöntem ayrica misel parçalanmasini indüklemek ve ardindan `Önceden sekillendirilmis lipozoin içerisine entegre etmek suretiyle misellerden antijenik peptiter salinmasini da içerir. Bu entegrasyon prosesi, modifiye edilmis anti jenin ve/Veya adjuvanin, lipozoinlarin (fosfo)lipit ikili katmani ile hidrofobik etkilesimleriyle yürütülür. Ozellikle modifiye edilmis antijenik peptidin ve/Veya adjuvanin, lipozomlarin dis katmanin içerisinde çözünürlestirilmesi, herhangi bir kimyasal reaksiyonun veya ilave molekül modifikasyonunun yardimi olmaksizin, çözünürlestirilmis antijenik peptidi veya adjuvani (baslangiçta misel formunda olan), surfektanin kritik misel konsantrasyonunun altinda seyreltmek suretiyle gerçeklestirilir. Daha soiira serbest formda antijenik peptit veya adjuvan, hidrofobik alanlarinin, fosfolipitlerin asil yarimi içerisinde çözünürlesmesinden dolayi lipozomlarin dis katmanina entegre edilir. Böylelikle yöntem, bir "bos lipozomlar" stokunun, ilgili ihtiyaçlara göre yüklemeye hazir olmasini saglar. Ozellikle bulusa ait bir anti jenik peptit içeren ve burada tarif edildigi gibi bir lipozom içerisinde yeniden biçiinlendirilinis hidrofobik yarimlarla modifiye edilmis lipozom bazli bir anti jenik yapi hazirlamaya yönelik bu sokma sonrasi yöntemi, i) lipozomlarin çözelti halinde hazirlanmasi; ii)peptit molekülünün N ve/veya C terminaline en az bir hidrofobik yariin ilave etmek suretiyle modifiye edilmis bir anti jenik peptit hazirlanmasi; iii) modifiye edilmis anti jenik peptidin, bir surfektan varliginda çözünürlestirilmesi; iV) çözünürlestirilinis peptidin ve istege göre bir adjuvanin, surfektanin kritik misel konsantrasyonunun (CMC) altinda seyreltilmesi ve v) önceden sekillendirilmis lipozom preparasyonuna seyreltilmis, çözünürlestirilmis anti jenik peptit ve istege göre adjuvan ilave etmek suretiyle önceden sekillendirilmis lipozomlara, adi geçen antijenik peptidin ve istege göre adi geçen adjuvanin yüklenmesi ve lipozomlarin dis katmanina ilave edilmis peptidin ve istege göre ilave edilen ad juvanin, özellikle herhangi bir kiinyasal reaksiyonun yardiini veya ilave molekül modifikasyonu olmaksizin çözünürlestirilmesi adimlarini içerir. Burada kullanildigi gibi, CMC olarak da bilinen "kritik misel konsantrasyonu" terimi, üzerinde inisellerin spontan sekilde olusturuldugu surfektan konsantrasyonu olarak tanimlanir. Surfektanlarin (veya herhangi bir yüzey aktif inateryalinin) bir sistem içerisine dahil edilmesi üzerinde surfektanlar, arayüze bölme baslatarak, a) ara yüzün enerjisini düsürmek (x alani yüzey gerilimi olarak hesaplanir) ve b) surfektanin hidrofobik kisimlarini suyla temastan çikarmak suretiyle sistemlerin serbest enerjisini düsürecektir. Müteakiben surfektanlarin yüzey kapsamasi arttiginda ve yüzey serbest enerjisi (yüzey gerilimi) azaldiginda ve surfektanlar, miseller halinde toplanmaya basladiginda yine surfektanin hidrofobik kisimlarinin suyla temas alaninin küçülmesiyle sistemin serbest enerjisi azalir. CMC"ye ulasilmasi üzerine baska herhangi bir surfektan ilavesi, sadece misel sayisini arttiracaktir. (IUPAC. Compendium of Chemical Terminology, 2nci baski. Blackwell Scientific Publications, Oxford (1997)). Avantajli sekilde bu yöntem, lipozom üzerinde, lipozoin ikili katmaninin dis katmanina bakan essiz bir moleküler sunum ile yüksek verimlerde peptit ve/Veya adjuvan dahil olmasina yol açar. Ozellikle yeiiiden biçimlendirilmis antijeiiik peptidin en az %75, %76, %77, %78, %79, %80, %81, %82, %83, %84, %85, %86, %87, %89, %90, %91, %92, %93, %94, %95, %96, %97, %98, %993u ve %100 kadari, lipozoin yüzeyi üzerinde, hidrofobik yarimlariyla lipit ikili katinanina sokulmus olarak mevcut olur. Yöntem ayrica polidispersite endeksinin 0.4 ile 0.6 arasinda, `Özellikle 0.45 ila 0.55 arasinda, 'Özellikle 0.5 olinasiyla homojen bir büyüklük dagilimi gösteren lipozom preparasyonlarina da neden olur. Ayrica yöntem ve yapilar, peptit ve/Veya ad juvanin immün sistem için yüksek biyo-saglanabilirlikte olmasini ve sonuçta gelismis bir iininün yaniti saglar. Adjuvan degradasyonu, örn., MPLA degradasyonu minimum düzeydedir veya hiç yoktur ve bu sayede artmis bir küme tekrarlanabilirligi saglanir. Yukaridaki yöntemle hazirlanan yapilar, stabildir, steril filtreleme yapilabilir ve yan immün yanitlari indüklemez. Buna göre burada ayrica bir lipozom içerisinde burada tarif edildigi gibi yeniden biçimlendirilmis olarak kullanim için burada tarif edilen bir antijenik peptidi içeren bir antijenik yapi da açiklanir; burada yeniden biçimlendirilmis antijenik peptidin en az %75, %76, %77, %78, %79, %80, %81, %82, %83, %84, %85, %86, %87, %89, %90, %91, %92, %93, %94, %95, %96, %97, %98, %99°u ve %100 kadari, lipozom yüzeyi üzerinde, hidrofobik yarimlariyla lipit ikili katinanina sokulmus olarak mevcuttur. Ozellikle adi geçen anti jenik yapiyi içeren bir lipozomal preparasyon tarif edilir ki bu preparasyon, polidispersite endeksinin 0.4 ile 0.6 arasinda, özellikle 0.45 ila 0.55 arasinda, 'Özellikle 0.5 olmasiyla homojen bir büyüklük dagilimi gösterir. Anti jenik peptit, tasiyici molekül yüzeyi üzerinde, yüksek düzeyde tekrarli bir dizi, Özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 10 tekrarli antijenik birim, 'Özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 50 tekrarli anti jenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 100 tekrarli anti jenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 200 tekrarli antijenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 300 tekrarli antijenik birim; 'Özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 400 tekrarli antijenik birim, özellikle her bir tasiyici molekül basina en az 500 tekrarli antijenik birim içeren bir tekrarli dizi halinde mevcut olabilir. Ayrica bir antikor, Down sendromlu çocuk ve genç ila orta yasta süjelerde hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle AD benzeri hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle beynin hipokampusunda ve/Veya 'on frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin, özellikle taniina hafizasi bozukluklarinin ve/Veya baglamsal birlestirici hafiza bozukluklarinin ve/Veya birlestirerek ögrenme bozukluklarinin ve/Veya gerçekleri ve olaylari açiklayici hafiza bozukluklarinin ve/Veya eyleinsel hafiza bozukluklarinin ve/veya afazi gibi dil yetisi disfonksiyonunun ve/Veya ögeleri yanlis yerlestirme ve tanidik olmayan ve tanidik alanda yön bulma güçlügü gibi görsel mekansal bozukluklarin ve/Veya apati, sartli refleks kaybi, sosyal izolasyon, zayif yargi, planlama güçlükleri ve/Veya zayif soyut akil yürütme gibi azalmis yürütme fonksiyonlarinin ve/veya kisilik degisikliklerinin ve/veya apati, ajitasyon ve psikoz ve/Veya apraksi gibi duygusal degisikliklerin ve/Veya ögrenilmis motor görevleri yapma bozukluklarinin ve/Veya pirainidal ve ekstrapirainidal bulgular dahil olmak üzere diger nörolojik belirtilerin ve ayrica iniyoklonus veya nöbetlerin tedavisine ve/veya iyilestirilmesine ve/veya engellenmesine yönelik burada tarif edilen yöntemlerde kullanilabilir. Bu antikor, bir poliklonal antikor, bir insancillastirilmis antikor, bir tamamen insan antikoru, bir diabody, bir devegil antikoru veya yukaridaki antikorlardan herhangi birinin fonksiyonel bir fragmaiii olabilir ki bu fragman, hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisi anlaminda, adi geçen fraginaniii türetildigi antikorla önemli ölçüde ayni biyolojik aktiviteye sahiptir. Ayrica bir antikor, Down sendromlu çocuklarda hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle AD benzeri hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle beynin hipokampusunda ve/veya ön frontal korteksinde ve/veya entoriiial korteksinde ortaya çikan hafiza ve/veya algi bozukluklarinin, Özellikle tanima hafizasi bozukluklarinin ve/veya baglamsal birlestirici hafiza bozukluklarinin ve/veya birlestirerek ögrenme bozukluklarinin ve/veya gerçekleri ve olaylari açiklayici hafiza bozukluklarinin ve/veya eylemsel hafiza bozukluklarinin ve/veya afazi gibi dil yetisi disfonksiyonunun ve/veya ögeleri yanlis yerlestirme ve tanidik olmayan ve tanidik alanda yön bulma güçlügü gibi görsel mekansal bozukluklariii ve/veya apati, sartli refleks kaybi, sosyal izolasyon, zayif yargi, planlama güçlükleri ve/veya zayif soyut akil yürütme gibi azalmis yürütme fonksiyonlarinin ve/veya kisilik degisikliklerinin ve/veya apati, ajitasyon ve psikoz ve/veya apraksi gibi duygusal degisikliklerin ve/veya ögrenilmis motor görevleri yapma bozukluklarinin ve/veya piramidal ve ekstrapiramidal bulgular dahil olmak üzere diger nörolojik belirtilerin ve ayrica iniyoklonus veya nöbetlerin tedavisine ve/veya iyilestirilinesine ve/veya engellenmesine yönelik burada tarif edilen yöntemlerde de kullanilabilir ki bu antikor, burada açiklanan antijenik yapilardan herhangi birine yanit olarak üretilmistir. Bu antikor, bir poliklonal antikor, bir insancillastirilinis antikor, bir tamainen insan antikoru, bir diabody, bir devegil antikoru veya yukaridaki antikorlardan herhangi birinin fonksiyonel bir fragmani olabilir ki bu fragman, hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisi anlaminda, adi geçen fragmanin türetildigi antikorla önemli ölçüde ayni biyolojik aktiviteye sahiptir. Alternatif olarak bir antikor, Down sendromlu çocuk süjelerde hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle AD benzeri hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle beynin hipokampusunda ve/veya ön frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde ortaya çikan hafiza ve/veya algi bozukluklarinin, özellikle tanima hafizasi bozukluklarinin ve/veya baglamsal birlestirici hafiza bozukluklarinin ve/veya birlestirerek ögrenme bozukluklarinin ve/veya gerçekleri ve olaylari açiklayici hafiza bozukluklarinin ve/veya eyleinsel hafiza bozukluklarinin ve/veya afazi gibi dil yetisi disfonksiyonunun ve/veya ögeleri yanlis yerlestirme ve tanidik olmayan ve tanidik alanda yön bulma güçlügü gibi görsel mekansal bozukluklarin ve/veya apati, sartli refleks kaybi, sosyal izolasyon, zayif yargi, planlama güçlükleri ve/veya zayif soyut akil yürütme gibi azalmis yürütme fonksiyonlarinin ve/veya kisilik degisikliklerinin ve/veya apati, ajitasyon ve psikoz ve/veya apraksi gibi duygusal degisikliklerin ve/veya ögrenilmis motor görevleri yapma bozukluklarinin ve/veya piramidal ve ekstrapirainidal bulgular dahil olmak üzere diger nörolojik belirtilerin ve ayrica miyoklonus veya nöbetlerin tedavisine ve/veya iyilestirilinesine ve/veya engelleninesine yönelik burada tarif edilen yöntemlerde kullanilabilir ki bu antikor, burada açiklanan antijenik yapilardan herhangi birine yanit olarak üretilmistir. Bu antikor, bir poliklonal antikor, bir insancillastirilmis antikor, bir tamamen insan antikoru, bir diabody, bir devegil antikoru veya yukaridaki antikorlardan herhangi birinin fonksiyonel bir fraginani olabilir ki bu fragman, hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisi anlaminda, adi geçen fragmanin türetildigi antikorla önemli 'ölçüde ayni biyolojik aktiviteye sahiptir. Ozellikle amiloid proteini veya ainiloid benzeri proteinden türetilen antijenik peptit fragmani, beynin hipokampusunda ve/veya ön frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde ortaya çikan hafiza ve/veya algi bozukluklarinin tedavisine ve/veya iyilestirilmesine ve/veya engelleninesine yönelik burada açiklandigi gibi bir yöntemde kullanilabilir. Ayrica burada Down sendromlu bir süjede hafiza bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisine ve/veya iyilestirilmesine ve/veya engelleninesine yönelik olup, adi geçen sü jeye, burada tarif edildigi gibi bir antijenik peptit veya bir kompozisyonunun uygulanmasini kapsayan bir yöntem de açiklanir. Ayrica Down sendromlu bir süjede algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisine ve/veya iyilestirilmesine ve/veya engelleninesine yönelik olup, adi geçen süjeye, burada tarif edildigi gibi bir anti jeiiik peptit veya bir kompozisyonunun uygulanmasini kapsayan bir yöntein de açiklanir. Ozellikle adi geçen bozukluk veya anormallik, tanima hafizasi ile ilgilidir. Ozellikle Down sendromlu süjelerde tanima hafizasinin güçlendirilmesine veya onarilinasina yönelik bir yöntemde kullaniin amaçli adi geçen antijenik peptit, AB peptidinin N terminal bölümünden türetilir, özellikle adi geçen antijenik peptit, Aßl-15, ABI-16, ABI-17, ABI-18, ABI-19, ABI-20, ABI-22 veya ABI-23 amino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen antijenik peptit, amino asit tortulari ABI-15 'ten olusur. Down sendromlu sü jelerde tanima hafizasinin güçlendirilmesine veya onarilmasina yönelik bir yöntemde kullanim için adi geçen anti jenik peptit, AB peptidinin N terminal bölümünden türetilebilir, özellikle adi geçen aiitijenik peptit, ainino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen bozukluk veya anormallik, baglamsal birlestirici hafiza ile ilgilidir. Alternatif olarak Down sendromlu süjelerde baglamsal birlestirme hafizasiiiin güçlendirilmesiiie veya onarilmasina yönelik bir yöntemde kullaiiim için adi geçen antijenik peptit, Aß peptidinin N terminal bölümünden türetilebilir, özellikle adi geçen anti jenik peptit, ABI-15, ABI-16, Aßl-l7, ABI-18, ABI-19, ABI-20, Aßl-22 veya ABI-23 amino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen antijenik peptit, amino asit tortulari ABI-15 ,ten olusur. Ozellikle adi geçen bozukluk veya anormallik, birlestirerek ögrenme ile ilgilidir. Down sendromlu sü jelerde birlestirerek ögrenmenin güçlendirilmesine veya onarilmasina yönelik bir yöntemde kullanim için adi geçen antijenik peptit, Aß peptidinin N terminal bölümünden türetilebilir, özellikle adi geçen anti jenik peptit, ABI-15, ABI-16, Aßl-l7, ABI-18, ABI-19, ABI-20, Aßl-22 veya Aß1-23 amino asit tortularinin tamamindan veya bir bölümünden olusur. Burada ayrica bir immünoterapi ajani olan bir aktif ajan da açiklanmaktadir. Immünoterapi ajanlarinin sinirlayiei olmayan örnekleri arasinda enflamatuar ajanlar, biyolojik faktörler, immün regüle edici proteinler, insan ve insancillastirilmis antikorlar ve immünoterapi ilaçlari, örn., AZT ve diger türevlendirilmis veya modifiye edilmis nükleotitler yer alir. Mevcut bulusta ajanlar olarak küçük moleküller de kullanilabilir. Ozellikle adi geçen antijenik peptit, amino asit tortulari ABI-15°ten olusur. Burada ayrica Down sendromlu süjelerde birlestirerek ögrenmenin güçlendirilmesine veya onarilinasina yönelik bir yöntemde kullaniin için olup, Aß peptidinin C terminal bölümünden türetilen bir aiitijenik peptit de tarif edilir, özellikle adi geçen antijenik peptit, Aß20-36, Aß20-40, Aß20-42, Aß21-36, Aß21-40, Aß21-42, Aß22-36, Aß22-40 veya Aß22-42 amiiio asit tortulariniii tamamindan veya bir bölümünden olusur. Ozellikle adi geçen anti jenik peptit, amino asit tortulari Aß22-35"ten olusur. Down sendromlu süjelerde birlestirerek ögrenmenin güçlendirilmesi ve/Veya onarilmasinda özellikle faydali antijeiiik peptitler, örnegin Aß22-35 amino asit tortularindan olusan antijeiiik peptit, tanima hafizasi ve/Veya baglanisal birlestirme hafizasi üzerinde olumlu bir etkisi olan bir veya daha fazla biyolojik açidan aktif bilesik ile birlestirilebilir. Ozellikle Dowii sendromlu adi geçen süje, genç ila orta yas arasi bir sü jedir. Alternatif olarak adi geçen sü je, genç yasta bir sü jedir veya adi geçen sü je, çocuk yasta bir sü jedir. Ozellikle adi geçen süjeler, 60 yas alti, özellikle 55 yas alti, özellikle 50 yas alti, özellikle 45 yas alti, özellikle 40 yas alti, özellikle 35 yas alti, özellikle 30 yas alti, özellikle 25 yas alti, özellikle 20 yas alti, özellikle 15 yas alti, özellikle 10 yas alti, özellikle 5 yas alti, özellikle 3 yas altidir. Burada kullanildigi gibi "antikor" veya "antikorlar" terimleri, bu konuda kabul edilen bir terimdir ve bilinen antijenlere baglanan moleküllere veya moleküllerin aktif fragmanlarina, özellikle immünoglobulin moleküllerine ve immünoglobulin moleküllerinin immünolojik açidan aktif bölümlerine, yani bir antijeni immünospesifik olarak baglayan bir baglama sahasi ihtiva eden moleküllere karsilik geldigi anlasilir. Bulusa göre iminünoglobulin, herhangi bir tipte (IgG, IgM, IgD, IgE, IgA ve IgY) veya siniftan (IgGl, 1gG2, IgG3, IgG4, IgA] ve IgA2) veya alt siniftan iminünoglobulin molekülü olabilir. "Antikorlar"in, mevcut bulusun kapsami dahilinde monoklonal antikorlari, poliklonal, kimerik, tek Zincirli, bispesifik, simjanize edilmis, insan ve insancillastirilmis antikorlari ve ayrica bunlarin aktif fragmanlarini kapsamasi amaçlanir. Anti jenlere baglanan moleküllerin aktif fragmanlarinm `ornekleri arasinda Fab ve F(ab')2 fragmanlari, örnegin bir Fab iinmünoglobulin ekspresyon kütüphanesi ürünleri ve yukarida adi geçen antikorlar ve fragmanlardan herhangi birinin epitop baglayici fragmanlari yer alir. Bu aktif fragmanlar, burada tarif edildigi gibi bir antikordan, birçok teknikle türetilebilir. Örnegin saflastirilmis monoklonal antikorlar, bir enzim, örn., pepsin ile klivaj edilebilir ve HPLC jel filtrelemeye tabi tutulabilir. Sonra Fab fragmanlarini ihtiva eden uygun fraksiyon toplanabilir ve membran filtreleme ve benzeri yoluyla konsantre edilebilir. Antikorlarin aktif fragmanlarinin izole edilmesine yönelik genel tekniklerin daha ileri tarifi için bakiniz örnegin, KhaW, B. A. ve arkadaslari J . Nucl. Med. 23:1011-1019 (1982); Rousseaux ve arkadaslari Methods Enzymology, 121:663-69, Academic Press, 1986. Bir "insancillastirilmis antikor", CDRlerinin insan disi bir donör immünoglobulininden türetilmesi, molekülün geriye kalan immünoglobulin türevli bölümlerinin, bir (veya daha fazla) insan immünoglobulininden türetilinesiyle degistirilmis bir antikor tipine karsilik gelir. Ek olarak baglanma afinitesinin korunmasi için çerçeve destek tortulari da degistirilebilir. "Insancillastirilinis antikorlar" elde etme yöntemleri, bu konuda uzman kisilerce iyi bilinir. (bakiniz örn., Queen ve arkadaslari, Proc. Natl Acad Sci ABD, 86:10029-10032 (1989), Hodgson ve arkadaslari, Bio/Technoloy, 9:421 (1991)). Bir "insancillastirilmis antikor" ayrica örnegin tavsanlar gibi büyük hayvanlarda afinite olgunlastirmasi yapilmis insan benzeri poliklonal antikorlar üretilmesini saglayan yeni bir genetik mühendisligi yaklasimiyla da elde edilebilir. "Monoklonal antikor" terimi de, bu konuda iyi bilinir ve laboratuvarda tek bir klondan yigin halinde üretilen ve sadece bir anti jeni taniyan bir antikora karsilik gelir. Monoklonal antikorlar tipik olarak normalde kisa ömürlü, antikor üreten bir B hücresinin, bir kanser hücresi gibi hizli büyüyen bir hücreye (bazen bir "ölümsüz" hücre olarak da anilir) füzyonla birlestirilmesi suretiyle yapilir. Sonuçta elde edilen hibrid hücre veya hibridoma, hizli bir sekilde çogalarak büyük miktarlarda antikor üreten bir klon yaratir. "Hafiza ve/Veya algi bozukluklari ve anormallikleri" terimi temel olarak Down sendromlu (DS) sü jelerde ainiloid ile alakali patoloji ile iliskili klinik semptomlara ve özellikle de beynin hipokampusunda, ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklara ve anormalliklere karsilik gelir. Bu tür hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin örnekleri, öm. ve bunlarla sinirli olmaksizin, taniina hafizasi bozukluklari ve/Veya baglamsal birlestirici hafiza bozukluklari ve/veya birlestirerek ögrenme bozukluklari ve/Veya gerçekleri ve olaylari açiklayici hafiza bozukluklari ve/Veya eylemsel hafiza bozukluklari ve/Veya afazi gibi dil yetisi disfonksiyonu ve/Veya ögeleri yanlis yerlestirme ve tanidik olmayan ve tanidik alanda yön bulma güçlügü gibi görsel mekansal bozukluklar ve/veya apati, sartli refleks kaybi, sosyal izolasyon, zayif yargi, planlama güçlükleri Ve/Veya zayif soyut akil yürütme gibi azalmis yürütme fonksiyonlari ve/Veya kisilik degisiklikleri ve/veya apati, ajitasyon ve psikoz ve/Veya apraksi gibi duygusal degisiklikler ve/veya ögrenilinis motor görevlerini yapma bozukluklari ve/Veya pirainidal ve ekstrapiramidal bulgular dahil olmak üzere diger nörolojik belirtiler ve ayrica miyoklonus veya nöbetlerdir. "Hafiza bozuklugu" terimi ayrica DS"nin kardinal özelligine karsilik gelir ve siklikla en erken kendini gösteren budur. Birincil sikayet olmadiginda bile prezantasyon sirasinda DSli çogu hastada hafiza eksiklikleri ortaya çikarilabilir. DS"de hafiza bozuklugunun sablonu oldukça ayirt edicidir. Entorinal korteks ve hipokainpus gibi medya] temporal yapilara bagli olan gerçekleri ve olaylari açiklama hafizasi, DS'de belirgin sekilde etkilenirken islemsel hafizayi destekleyen alt kortikal sistemler, hastalik sürecinde epeyce sonlara kadar nispeten korunur. Eyleinsel hafiza, genç DSli hastalarda, siklikla bir sekilde daha sonra bozulan kelime ve kavramlar gibi gerçekler hafizasina (anlainsal hafiza) kiyasla belirgin sekilde daha fazla bozulur. Eylemsel hafizada hemen geri çagirma (örn., bir telefon numarasinin mental tekrari), yakin geçinis olaylari hafizasi (bilinçten çikmis materyalin geri çagrilmasi gerekmesi üzerine sahneye çikan) ve daha uzak olayla hafizasi arasinda bir ayrim vardir. Medya] temporal lobda hipokampus, entorinal korteksin hizmet ettigi yakin geçmis olaylari hafizasi, genç DSli hastalarda belirgin sekilde bozulur. Buna karsilik anlik hafiza (ön frontal kortekslerde Sifrelenen), baslarda korunur çünkü bunlar, hipokampus islevleri olinadan geri çagrilabilen, uzun zaman periyotlari (yillar) boyunca takviye edilen hafizalardir. Islemsel hafiza bozukluklari sadece orta yastaki Ds hastalarinda görülüri Dil yetisi, yürütme fonksiyonu ve diger algi alanlarinda disfonksiyon, hastalik süreci boyunca çesitli oranlarda gelisir. Klinik DS prezantasyonunun heterojenligi belki de beyin patolojisinin degisken topografik bir yük dagilimini yansitir. Dil yetisi disfonksiyonu, yani afazi, DS'nin yaygin bir semptomudur ve dil yetisi disfonksiyonunun ilk belirtileri genellikle kelime bulma güçlükleri, lafi dolandirma ve spontan konusmada kelimelerin azalmis olmasi ve çeliskiye sürükleyen adlandirma testlerinde anoiniyi kapsar. Bu, parafazik hatalari, konusma içeriginin fakirlesmesini ve idrakin bozulmasini kapsayacak sekilde ilerleyebilir. Bununla birlikte hastalar genellikle hastalik epeyce ilerleyene kadar ifadeleri motamot sekilde tekrarlayabilir. DS°de dil yetisi güçlükleri siklikla Wernicke ve Broca tipi afazi seklinde tarif edilmistir. Bir dakikalik süre içinde kelime listeleri üretmeleri istendiginde DS"li hastalar, bir kategori akicilik testinde (örn., hayvanlarin listeleri), bir harf akicilik testinde (öm., F ile baslayan keliinelerin listeleri) oldugundan anlainli sekilde daha kötü performans gösterir. Bu, anlamsal hafizadaki spesifik kusuru yansitir. Görsel mekansal yetilerde kayip, DS"nin, prezantasyonda bazen oldukça belirgin olabilen bir baska erken yönleridir. Görsel mekansal bozukluklar, ögeleri yanlis yerlestirme ve önce tanidik olmayan sonra da tanidik alanda yön bulma güçlügü olarak kendilerini gösterir. Görsel agnosi (nesneleri taniyamama) ve prosopagnosi (yüzleri taniyainaina), daha sonraki yönlerdir. Yürütme fonksiyonuiida bozukluk da, DS›li hastalarda görülür. Bu semptomlar, zayif kavrama ve azalmis soyut akil yürütme kabiliyetini kapsar. Hastalik ilerledikçe tipik olarak kisilik degisiklikleri (örn., apati, sosyal çözülme ve sartli refleks kaybi), zayif yargi ve planlama ve görevleri tamamlayamama ortaya çikar. Deinans yerlesiininin teshisini güçlestirebilen ilave depresyon da bu sekilde mevcut olabilir. Kusurlari kavramanin azalmasi (anosognosi), DS°nin bir baska karakteristik yönüdür. Bu, kusurlarini reddeden veya göz ardi eden ve dikkat çekildiklerinde bunlarla ilgili açiklamalar yapaii hastalarda sira disi degildir. Dogru bir hikaye elde etmek için bir es gibi hikayesinde birlik oldugu bir kisi ile konusulmasi önemlidir. Gerçekten de algi bozuklugu sikayetini tibbi müdahaleye tasiyan kisi siklikla aile üyesidir. Kavrama kaybi, zaman içerisinde genel hastalik siddeti ile birlikte artar ve davranis bozukluklari ile iliskili olabilir; kavrayisi nispeten korunanlar, daha büyük olasilikla depresif iken kavrayisi daha bozuk olanlar, muhtemelen ajitedir, sartli refleksleri kaybolmustur ve psikotik `Özellikler sergilerler. Ajitasyon, agresyon, dalginlik ve psikoz (halüsinasyonlar, hezeyanlar, misidantifikasyon sendromlari) dahil olmak 'uzere davranis bozukluklarinin ortaya çikmasi, hasta ve aile üyeleri için anlamli sikintilara yol açabilir ve tipik olarak DS,nin daha sonraki evrelerinde görülür. DS"li daha genç hastalarin muayenesi, algi muayenesi disinda genellikle normal nörolojik bir muayenedir. DS"li hastalarda piramidal ve ekstrapiramidal motor belirtileri, miyoklonus ve nöbetler meydana gelirken bunlar tipik olarak geç evre bulgularidir. Benzer sekilde frontal salim belirtileri (yakalama, burun refleksleri, gegenhalten) ve inkontinans da, DS,nin erkenden çok geç özellikleridir. Bir terapötik asi olabilen, burada tarif edilen immünojenik kompozisyon, burada daha önce tarif edildigi gibi terapötik veya profilaktik açidan etkin miktarda antijenik yapi içerir ve bir sivi çözelti halinde veya bir enjeksiyonluk süspansiyon halinde veya asagida tarif edildigi gibi, örnegin mevcut kompozisyonun kullanilmasini mümkün kilacak bir kit baglaminda enjeksiyondan önce çözünürlestirmeye uygun bir kati formunda hazirlanabilir. Bir "terapötik açidan veya profilaktik açidan etkin miktar", antikor, peptit, bilesik veya farmas'otik kompozisyonun, bir insana veya hayvana uygulandiginda, adi geçen insan veya hayvanda terapötik veya profilaktik bir etkiye yol açan miktarina karsilik gelir. Etkin miktar, bu konuda uzman bir kisi tarafindan rutin prosedürler izlenerek kolayca belirlenir. Burada tarif edilen immünojenik koinpozisyon, bir insana veya hayvana, özellikle AD benzeri algi bozukluklari veya anormalliklerinden, özellikle beynin hipokampusunda ve/veya 'Ön frontal korteksinde ve/veya entorinal korteksinde ortaya çikan bozukluklar veya anormalliklerden muzdarip Down sendromlu bir insana veya hayvana, adi geçen insan veya hayvanda bir immün yaniti indükleyerek hastalikla iliskili adi geçen AD benzeri semptomlari iyilestirmek veya hastaliktan etkilenmemis saglikli kisilerde bulunan bir durumu onarmak için uygulanabilir. Neredeyse bütün Down Sendromlu kisiler eninde sonunda yasaminin bir noktasinda AD benzeri algi bozukluklarindan muzdarip olacagindan adi geçen asinin, Down Sendromlu kisilere, AD benzeri bozukluklar kendini göstermeden önce uygulanmasi da faydali olacaktir. Adi geçen asi o zaman bir engelleyici tedavi görevi görür. Burada tarif edilen immünojenik kompozisyon, bir insana veya hayvana, standart uygulama yollariyla uygulanabilir. Genel olarak kompozisyon, topikal, oral, rektal, nazal veya parenteral (örnegin intravenöz, subkûtan veya intramüsküler) yollarla uygulanabilir. Ek olarak kompozisyon, biyo-bozunabilir polimerler gibi sürekli salim matrislerine de dahil edilebilir; polimerler, vermenin arzu edildigi yer civarina, örnegin bir tümör sahasina implant edilir. Yöntem, tek bir doz uygulanmasini, Önceden belirlenmis zaman araliklarinda tekrarli dozlar uygulanmasini ve önceden belirlenmis bir zaman periyodu boyunca sürekli uygulamayi kapsar. Burada tarif edilen anti jenik yapi, 'Özellikle adi geçen anti jenik yapiyi terap'otik açidan etkin bir miktarda içeren bir immünojenik kompozisyon, 1 ile 10 hafta arasindaki zaman araliklarinda, özellikle 1 ile 6 hafta arasindaki zaman araliklarinda, daha 'Özellikle 1 ile 4 hafta arasindaki zaman araliklarinda ve çok daha özellikle 2 ile 3 hafta arasindaki zaman araliklarinda, tekrarli dozlar halinde, 'Özellikle 1 ila doz halinde, daha özellikle 2 ila 10 doz halinde, daha özellikle 3 ila 7 doz halinde ve çok daha 'Özellikle 4 ila 6 doz halinde uygulanir. Immün yaniti, boosttan uygun bir süre sonra, özellikle boosttan 3 ila gün sonra, daha `Özellikle boosttan 4 ila 8 gün sonra ve daha özellikle boosttan 5 ila 6 gün sonra serum örnekleri alinak ve anti jenik yapinin immünojenikligini, bilinen metodolojiyi, özellikle yaygin sekilde kullanilan immünodeneylerden birini, 'Örnegin bir ELISA deneyi kullanarak belirlemek suretiyle izlenir. Ozellikle burada tarif edilen antijenik peptit kompozisyonu, parenteral, 'Özellikle intra-peritonel, intravenöz, subki'itan ve intra- müsküler enjeksiyon yoluyla uygulanir. Kompozisyonun dozaji, tedavi edilmekte olan duruma, kullanilan özel kompozisyona ve hastanin kilosu, bedeni ve durumu gibi diger klinik faktörlere, Vücut yüzey alanina, uygulanacak özel bilesige veya kompozisyona, birlikte uygulanmakta olan diger ilaçlara ve uygulama yoluna bagli olacaktir. Burada tarif edilen immünojenik kompozisyon, biyolojik açidan aktif diger maddeler ve Down sendromu ile iliskili semptomlarin tedavisine yönelik prosedürler ile kombinasyon halinde uygulanabilir. Biyolojik açidan aktif diger maddeler, bir karisim seklinde hali hazirda burada tarif edildigi gibi immünojenik kompozisyonu içeren ayni koinpozisyonun bir bölümü olabilir; burada immünojenik kompozisyon ve biyolojik açidan aktif diger maddeler, kendi aralarinda veya ayni farmasötik olarak kabul edilebilir solvent ve/Veya tasiyici ile karistirilir veya bir parçali kit sekliiide ayri ayri veya birlikte sunulabilen ayri ayri kompozisyonlarin bir bölümü olarak ayri bir sekilde tedarik edilebilir. Burada tarif edilen immünojenik kompozisyon, biyolojik açidan aktif diger madde veya maddeler ile es zamanli olarak, aralikli olarak veya sirayla uygulanabilir. Örnegin burada tarif edilen immünojenik kompozisyon, birinci bir ilave biyolojik açidan aktif madde ile ayni anda veya adi geçen kompozisyon uygulandiktan sonra veya uygulanmadan 'önce sirayla uygulanabilir. Birden fazla ilave biyolojik açidan aktif maddenin, burada tarif edilen immünojenik kompozisyonlardan en az biri ile birlikte uygulandigi bir uygulama semasinin seçilmesi durumunda kompozisyonlar veya maddeler, kismen ayni anda, kismen sirayla olinak 'üzere çesitli kombinasyonlarda uygulanabilir. Ayrica burada, burada tarif edildigi gibi bir immünojenik kompozisyonun ve istege göre bir veya daha fazla baska biyolojik açidan aktif maddenin terapötik veya profilaktik açidan etkin miktarda bu tür karisiinlari ve ayrica burada tarif edildigi gibi bu tür bir koinpozisyonun veya bunun karisimlarinin, Down sendromlu çocuklarda veya genç ila orta yas arasi sü jelerde amiloid ile alakali patolojinin etkilerinin engellenmesi ve/veya terapötik tedavisi ve/veya iyilestirilmesi, özellikle hafiza bozukluklarinin veya anormalliklerinin, özellikle beynin hipokampusunda ve/veya ön frontal korteksinde ve/Veya entorinal korteksiiide ortaya çikaii bozukluklarin ve anormalliklerin iyilestirilmesi veya onarilmasi, özellikle tanima hafizasi bozukluklarinin ve/veya baglanisal birlestirici hafiza bozukluklarinin ve/veya birlestirerek ögrenme bozukluklarinin ve/veya gerçekleri ve olaylari açiklayici hafiza bozukluklarinin ve/veya eylemsel hafiza bozukluklarinin ve/veya afazi gibi dil yetisi disfonksiyonunun ve/veya ögeleri yanlis yerlestirme ve tanidik olmayan ve tanidik alanda yön bulma güçlügü gibi görsel mekansal bozukluklarin ve/veya apati, sartli refleks kaybi, sosyal izolasyon, zayif yargi, planlama güçlükleri ve/veya zayif soyut akil yürütme gibi azalmis yürütme fonksiyonlarinin ve/veya kisilik degisikliklerinin ve/veya apati, ajitasyon ve psikoz ve/veya apraksi gibi duygusal degisikliklerin ve/veya ögrenilinis motor görevleri yapma bozukluklarinin ve/veya piramidal ve ekstrapiramidal bulgular dahil olmak üzere diger nörolojik belirtilerin ve ayrica miyoklonus veya nöbetlerin iyilestirilmesi veya oiiarilmasi için kullanilmasina yönelik yöntemler de açiklanir. Burada tarif edilen karisimlar, burada tarif edildigi gibi bir immünojenik kompozisyona ek olarak, biyolojik açidan aktif bir madde, örnegin Down sendromlu çocuklarda veya genç ila orta yas arasi süjelerde AD benzeri semptomlarin ilaçla tedavisinde kullanilan bilinen bilesikleri de içerebilir. Biyolojik açidan aktif madde veya bilesik, biyolojik etkisini, burada tarif edilen immünolojik kompozisyonla ayni veya buna benzer bir mekanizmayla veya alakasiz bir etki mekanizmasiyla veya birçok alakali Ve/Veya alakasiz etki mekanizinasiyla gösterir. Genellikle biyolojik açidan aktif diger bilesik, burada açiklandigi gibi bir anti jenik peptide karsi yükselen ve buna baglanan antikorlari veya nörolojik bozukluklarin ilaçla tedavisinde kullanilan bilesikleri, örn., nötron-transmisyon güçlendiriciler, psikoterapötik ilaçlar, asetikolin esteraz inhibitörleri, kalsiyum kanal blokerleri, biyojenik aminler, benzodiazepin trankilizerler, asetilkolin sentezi, depolamasi veya salimi arttiricilar, asetilkolin postsinaptik reseptörü agonistleri, nionoamin oksidaz-A veya -B inhibitörleri, N-metil-D-aspartat glutamat reseptörü antagonistleri, steroidal olinayan anti-enflamatuar ilaçlar, antioksidanlar ve serotonerjik reseptör antagonistlerini kapsayabilir. Ozellikle burada tarif edildigi gibi karisim, oksidatif strese karsi bilesikler, anti-apoptotik bilesikler, inetal selatörleri, DNA onarimi inhibitörleri, örn., pirenzepin ve metabolitler, 3-amino-1- propansülfonik asit (3APS), 1,3-propandisülfonat (1,3PDS), sekretaz aktiflestiriciler, B- ve y-sekretaz inhibitörleri, [3- ve y-sekretaz modülatörleri, tau proteinleri, nörotransmiter, ß-levha kiricilar, anti- enflamatuar moleküller veya kolinesteraz inhibitörleri (ChEIlar), öm., takrin, rivastigmin, donepezil ve/Veya galantamin ve diger ilaçlar ve besin takviyelerinin olusturdugu gruptan seçilen en az bir baska biyolojik açidan aktif bilesik ile birlikte bulusa göre terapötik bir asi ve istege göre farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/Veya seyreltici ve/Veya bir eksipiyan içerebilir. Burada tarif edildigi gibi karisimlar ayrica niasin veya mementin ile birlikte burada tarif edildigi gibi bir immünojenik koiiipozisyon ve istege göre farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/Veya seyreltici ve/Veya bir eksipiyan da içerebilir. Karisimlar, halüsinasyonlar, hezeyanlar, düsüiice bozukluklari (belirgin dikissiz konusma, raydan çikma, tegetsellik ile kendini gösteren) ve tuhaf veya düzensiz davranis ve ayrica anhedoni, düzlestirilmis etki, apati ve sosyal geri çekilme dahil olmak üzere pozitif ve negatif psikotik semptomlarin tedavisine yönelik örnegin klozapin, ziprasidon, risperidon, aripiprazol veya olanzapin gibi "atipik antipsikotikler" ile birlikte bulusa göre bir immünojenik kompozisyon ve/Veya bir terapötik asiyi ve istege göre farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/Veya bir seyreltici ve/Veya bir eksipiyan içerebilir. Karisimlarda burada tarif edilen iminünojenik kompozisyon ile kombinasyon halinde uygun sekilde kullanilabilen diger bilesikler, örnegin WO 2004/058258"de (bakiniz özellikle sayfa 16 ve 17), terapötik ilaç hedefleri (sayfa 36-39), alkansülfoiiik asitler ve alkanolsülfürik asit (sayfa 39-51), kolinesteraz inhibitörleri (sayfa 51- 56), NMDA reseptör antagonistleri (sayfa 56-58), östrojenler (sayfa 58-59), steroidal olmayan anti-enflamatuar ilaçlar (sayfa 60-61), antioksidanlar (sayfa 61-62), peroksizom proliferatörlerinin aktiflestirdigi reseptörlerin (PPAR) agonistleri (sayfa 63-67), kolesterol düsürücü ajanlar (sayfa 68-75); amiloid inhibitörleri (sayfa 75-77), amiloid olusumu inhibitörleri (sayfa 77-78), inetal selatörleri (sayfa 78-79), anti-psikotikler ve anti-depresanlar (sayfa 80-82), besin takviyeleri (sayfa 83-89) ve biyolojik açidan aktif maddelerin beyinde saglanabilirligini arttiran bilesikler (bakiniz sayfa 89-93) ve 'on ilaçlar (sayfa 93 ve 94) dahil olmak üzere tarif edilir ve özellikle yukarida belirtilen sayfalarda adi geçen bilesikler. Ayrica burada bir T hücre epitopu ihtiva etmeyen bir AB peptidi içeren ve bu yüzden asiri aktiflesmis bir komplement sisteminin neden oldugu nörolojik komplikasyonlar gibi potansiyel yan etkilerden muaf bir antijenik yapi da açiklanir. Bu, bir AB peptit antijeni, 'ozellikle palmitoile edilmis bir AB peptit antijeni, daha 'ozellikle palmitoile edilmis Aß]_i5 peptit antijeni, ve özellikle palmitoile edilmis AßHS peptit antijeni AßH5 ile kombinasyon halinde bir komplement inhibitörünün uygulanmasiyla saglanabilir. Komplement inhibitörü, çözülebilir insan komplement Reseptörü 1, anti-insan koinplement proteini C5, örnegin insancillastirilinis bir anti C5 monoklonal antikoru veya insancillastirilmis bir monoklonal antikorun tek Zincirli bir fragmani, Cl-esteraz inhibitörü-N ve Dogal insan Cl inhibitörünün olusturdugu gruptan seçilen bir bilesik olabilir. Modifiye edilmis ainiloid peptit antijeni, örnegin amiloid beta 1-15 peptit antijeni, (Nicolau ve arkadaslari, 2002)"de bildirilen yöntem izlenerek sentezlenebilir. Nicolau ve arkadaslarinda bildirilen yaklasim, ilk önce anti jenik peptidin sentezlenmesi, sonra bunun, bir lipofilik veya hidrofobik yariinin resin üstüne graftlanmasiyla tekrar modifiye edilmesi suretiyle önceden sekillendirilmis peptidin terminal amino asit tortularina kadar modifiye edilebilir. Ozellikle korumali bir amino asit, özellikle Fmoc korumali bir amino asit, bilinen birlestirme kimyasi kullanilarak bir resine takilir. Koruma grubu çikarilir ve ikinci bir korumali ainino asit tortusu birlestirilir. Sonra bilinen koruma kimyasi, özellikle Fmoc/tBu kimyasi kullanilarak standart otomatik peptit sentezini ve standart yan zincir koruma gruplarini kullanmak suretiyle AB anti jenik peptidi, özellikle Aß1-15 anti jenik peptidi, amiloid proteini AßMZ'nin 1 ila 15 arasi amino asitleri üzerine birlestirilerek sentezlenir, böylelikle verilen bir sekansa sahip peptit fragmani üretilir. Son bir adimda büyüyen peptit fragmanina iki adet korumali amino asit daha birlestirilir. Sonra ilk iki ve son iki amino asidin yari zincirleri üzerindeki Mtt gruplari seçici sekilde klivaj edilebilir ve palmitik aside birlestirilebilir. Resin yikandiktan sonra koruma grubu çikarilir ve ayni aynda resin klivaj edildikten sonra standart inetodolo ji kullanilarak yan zincir korumalari giderilir. Sonra nihai ürün yüksek saflikta elde edilebilir ve bunun kimligi, örnegin elektrosprey kütle spektrometrisi gibi bu konuda bilinen yöntemlerle dogrulanabilir. Modifiye edilmis amiloid Aß antijenik peptidi, özellikle modifiye edilmis AßHs antijenik peptidi, lipozomlardan, özellikle dimiristoil fosfatidil kolin (DMPC), dimiristoil fosfatidil etanolamin (DMPEA), dimiristoil fosfatidil gliserol (DMPG) ve kolesterolden yapilma, istege göre monofosforil lipit A ihtiva eden lipozoinlardan olusan bir yapi içerisinde yeniden biçimlendirilebilir. Ayrica burada lipozomal meinbranda katyonik lipitler yerine, sunlarin olusturdugu gruptan seçilen anyonik lipitlerin kullanilmasi da tasarlanir: a. fosfatidil gliserol, fosfatidil serin, fosfatidil inositol, L-a- fosfatidilinositol-4-fosfat veya fosfatidik asit kafa gruplari ile diasil-fosfolipitler; b. fosfatidil gliserol, fosfatidil serin veya fosfatidik asit kafa gruplari ile liso-fosfolipitler ve e. kardiolipin, diliso-kardiolipin, monoliso-kardiolipin. Bir yönde lipozomal meinbranda anyonik lipitler yerine, sunlarin olusturdugu gruptan seçilen katyonik lipitlerin kullanilmasi tasarlanir: a. 3-trimetilamonyum-propan ,3-dimetilamonyum-pr0pan, 3- etilfosfokolin veya 3-fosfatidiletanolamin kafa gruplari ile diasil- fosfolipitler; b. D-eritro-sfingosin, dimetildioktadesilainonyum bromid, N-[l- (2,3-dimiristiloksi)propil]-N,N-dimetil-N-(2-hidroksietiDamonyum bromid, N,N,N-trimeti1-2-bis[(1-0kso-9-oktedeseni1)oksi]-(Z,Z)-1- propanaminyum metil sülfat veya 3ß-[N-(N',N'-dimetilamin0etan)- karbamoil]kolesterol hidroklorid. Ozellikle yukaridaki kafa gruplarina eklenen lipit zincirleri a. doymus veya doymamis olabilir, b. (CH2)n'den itibaren boyu degisken olabilir, buradaki n, 3 ile 24 arasindadir ve simetrik veya asimetrik olarak ikame edilmis olabilir. Lipit A"li lipozomlar, anti-amiloid asisinin hazirlanmasinda adjuvan olarak kullanilabilir. Dimiristoilfosfatidil-kolin, -gliserol ve kolesterol, 'Özellikle 0.9: 1 .0:0.7"lik bir molar oranda karistirilir. Sonra kuvvetli bir immünoinodülatör, örnegin monofosforil lipit A, uygun bir konsantrasyonda, özellikle her bir mmol fosfolipit basina 30 ile 50 mg arasindaki, daha özellikle her bir mmol basina 40 mg"1ik bir konsantrasyonda ilave edilir. Sonra modifiye edilinis antijenik Aß peptidi, 1:30 ile 1200 arasindaki bir peptit-fosfolipit molar oraninda, özellikle 1:50 ile 1:120 arasindaki, daha özellikle 1:100°lük bir molar oraninda ilave edilir. Solventler, örnegin buharlastirma yoluyla giderilir ve sonuçta elde edilen film, steril tampon çözeltisi, örnegin PBS ile hidratlanir. Lipozomlar ayrica örnegin (Wagner ve arkadaslari., 2002)"de tarif edildigi gibi çapraz akisli enjeksiyon teknigiyle de hazirlanabilir. Lipit çözeltilerinin bir sulu tampon sistemine enjekte edilmesi sirasinda lipitler, "çökeltiler', olusturma egilimi gösterir, ardindan kendiliginden vesiküller halinde düzenlenir. Elde edilen vesikülün büyüklügü, lipit konsantrasyonu, karistirma hizi, enjeksiyon hizi ve lipitlerin seçimi gibi faktörlere baglidir. Preparasyon sistemi, bir çapraz akisli enjeksiyon modülü, polar faz (öm., bir PBS tampon çözeltisi) kaplari, bir etanol/lipit çözeltisi kabi ve bir basinç aletinden ve özellikle de bir nitro jen basinci aletinden olusabilir. Sulu veya polar çözelti, çapraz akisli enjeksiyon modülünden geçerek pompalanirken etanol/lipit çözeltisi, degisken basinçlar uygulanarak polar faz içerisine enjekte edilir. Lipozoin anti jenik yapilarinin çesitli üretim yöntemleri, W02007/06841 1 "de tarif edilir. Buna göre burada tarif edilen yöntemde kullanim için lipozomal kompozisyon, palmitoile edilmis bir AB 1-15, özellikle tetrapalmitoile edilmis bir AB l-15 ile birlikte bir ad juvan olarak monofosforil lipit A (MPLA) içerecek sekilde hazirlanabilir. Dört ila on, özellikle bes ila alti doz lipozoiiial kompozisyon, asi yapilacak bir sü jeye subk'ûtan yoldan ve haftada bir veya iki haftada bir uygulanabilir. Plazma problari elde edilebilir ve periyodik olarak IgG titerleri bakimindan analiz edilebilir. Bulusa ait lipozomal kompozisyonun, Down sendromlu çocuklarda ve genç ila orta yas arasi süjelerde bir immünojen olarak etkinligi ve adi geçen sü jelerde hafiza kusurlarinin tedavisi için terapötik potansiyeli, Down sendroinlu ilgili bir hayvan modelinde gösterilebilir. Ozellikle DS için bir hayvan modeli olarak yaygin sekilde kabul gören Ts65Dn fareleri kullanildi. Ts65Dn fareleri, murin APP genini barindiran murin kroinozomu l6'nin üç mislini sergiler (Davisson ve arkadaslari., 1993;Netzer ve arkadaslari, 2010). Bu transgenik fareler, 1,5 kat artmis murin Aß"si gösterir (Hunter ve arkadaslari, 2004) ve birkaç hafiza görevinde davranis kusurlari sergiler (Belichenko ve arkadaslari, 2009). Mevcut bulusta, bulusa ait lipozomal kompozisyonun, yükselmis antikor titerleriiii indükledigi ve adi geçen antikorlarin, son immünizasyondan 40 gün sonra bile yüksek kaldigi ortaya konulabilir. Bu yüzden burada tarif edildigi gibi lipozomal kompozisyon, kuvvetli bir immün yaniti indükleyebilir ve Down sendromlu tedavi edilmis süjelerde Aß°nin kendi toleransini kirabilir. Bulusa ait ve burada tarif edildigi gibi lipozomal kompozisyonun ayrica Down sendromlu genç ila orta yas arasi farelerde IgG titerlerini, Down sendromlu olinayan bir kontrol grubu süjelerindeki kadar yüksek indükleyebildigi de gösterildi. Burada tarif edildigi gibi lipozomal kompozisyon, kontrol grubuna kiyasla lgG2a izotipinden artmis titerlerde antikorlar indüklerken lgG'l ve IgGZb izotipinden antikor titerleri, tedavi ve kontrol grubunda denktir. lgM sinifindan antikorlarin titerleri, kontrol grubuna kiyasla tedavi grubunda daha düsüktür. Down sendromlu farelerin immün sisteininin degistirilmesi, bu IgM seviyesinin biraz daha düsmesine neden olabilir. Böylece lipozomal kompozisyon, DS"li kisilerde tarif edilen Aß°ya karsi bozulmus adaptif immün yanitinin üstesinden gelebilir (Monsonego ve arkadaslari., 2001). Bulusa ait ve burada tarif edildigi gibi lipozomal kompozisyon ayrica güvenlidir ve istenmeyen yan etkiler indüklemez. Ozellikle lipozomal kompozisyon ile tedavi, beyinde hücre aktivasyonuna, örn., ne astrositlerde ne de inikrogliada aktivasyona yol açmaz. Bulusa ait ve burada tarif edildigi gibi lipozomal kompozisyonun, hayvan modelinde daha yüksek bir ayriin oranina neden oldugunun gösterilmesiyle tedavinin, tedavi gören hayvanlarin hafizasinda anlainli bir gelismeye yol açtigi isaret edildi. Burada tarif edildigi gibi lipozomal koinpozisyonun ayrica alistirma, ipucu ve baglamsal seanslardan olusan bir bir testte, hayvan modelinde, kontrol hayvanlarinda gözlenene denk seviyelere ulasan gelismis donmaya neden oldugu da gösterildi. Bu, immünizasyonun verimli oldugunu ve hayvan modellerinde hafiza kapasitesini gelistirdigini isaret eder. Burada tarif edildigi gibi lipozomal kompozisyon bu yüzden Down sendromundan muzdarip çocuklari ve genç ila orta yas arasi süjeleri, özellikle beyninde henüz AB ile iliskili plaklar gelismemis Down sendromlu çocuklari ve genç ila orta yas arasi süjeleri, hafiza kusurlariiidan kurtarabilir. Down sendromundan muzdarip hastalar, hafiza bozuklugu ve anormal aktiviteler gibi algi anormallikleri sergiler. Burada tarif edildigi gibi lipozomal koinpozisyon ayrica Down sendromundan muzdarip çocuklari ve genç ila orta yas arasi sü jeleri, özellikle beyninde hali hazirda AB ile iliskili plaklar gelismis olan Down sendromlu çocuklari ve genç ila orta yas arasi süjeleri, hafiza kusurlarindan kurtarabilir. Bir düzenekte lipozomal kompozisyon ile tedavi, Down sendromlu bir çocuk veya genç ila orta yas arasi bir sü jede hafiza kusurunu, 'ozellikle tanima hafizasi bozukluklarini ve/veya baglamsal birlestirici hafiza bozukluklarini ve/veya birlestirerek `Ögrenme bozukluklarini ve/veya gerçekleri ve olaylari açiklayici hafiza bozukluklarini ve/veya eyleinsel hafiza bozukluklarini ve/veya afazi gibi dil yetisi disfonksiyonunu ve/veya ögeleri yanlis yerlestirme ve tanidik olmayan ve tanidik alanda yön bulma güçlügü gibi görsel mekansal bozukluklari ve/veya apati, sartli refleks kaybi, sosyal izolasyon, zayif yargi, planlama güçlükleri ve/veya zayif soyut akil yürütme gibi azalmis yürütme fonksiyonlarini ve/veya kisilik degisikliklerini ve/Veya apati, ajitasyon ve psikoz ve/Veya apraksi gibi duygusal degisiklikleri ve/veya ögrenilmis motor görevleri yapma bozukluklari ve/veya piramidal ve ekstrapiramidal bulgular dahil olmak üzere diger nörolojik belirtileri ve ayrica iniyokloiius veya nöbetleri iyilestirebilir veya onarabilir. ÇIZIMLERIN KISA TARIFI M, tetra-palmitoile edilmis fare Aßl -15 anti jen ve ad juvan olarak MPLA ile lipozom bazli bir asi olan ACI-DS-Ol asisinin seinatik bir prezantasyonunu gösterir. Insan ile fare ABI-153 arasindaki üç amino asit farkinin alti çizilidir. m ACI-DS-Ol asisi ile immünize edilmis Ts65Dn farelerinde anti-fare Aß antikoru seviyelerini gösterir. A ve B) Anti-fare-Aß40 veya 42 IgG titerleri, ACI-DS-Ol ile immünize edilmis farelerin plazmasinda saptandi. Ikinci immünizasyonu takiben indüklenmis titerler gözlendi ve bunlar, 6nc1 en jeksiyondan 40 gün sonra bile bos lipozom ile immünize edilmis farelere kiyasla yüksek kaldi. 2N ile T565Dn farelerinin ölçülen titerleri arasinda hiçbir fark yoktu. C ila F) IgG izotipleri, 4ünc'1`1 immünizasyonu takiben saptandi. G) IgM titerleri, Ts65Dn farelerinde çok az daha düsüktü. H) ACI-DS-Ol ile immünize edilmis bütün farelerde ayni seviyede anti-MPLA IgG titerleri saptandi. Grafikler, ortalama ± SD°yi teinsil eder. (n=20 2N- ACI-DS-Ol, n:15 TsöSDn-ACI-DS-Ol, n: 18 2N-B0s ve n: 11 Ts65Dn-Bos. Grafikler, ortalama± SD"yi temsil eder). ,SM immünizasyonun hafiza performansi üzerindeki etkinligini gösterir. 2N ile Ts65Dn fareleri arasinda spontan lokomotor aktivitesi bakimindan farklilik, irnmünizasyonu takiben benzer kaldi. B) ACI- DS-Ol ile immünize edilmis fareler, yeni nesne taniinada, Bos asi ile tedavi edilmis gruba kiyasla anlamli sekilde gelismis bir tanima endeksi (R1) gösterdi. C) Korku kosullamasinda immünize edilmis fareler, baglainsal seans sirasinda daha yüksek seviyede donma için sinir çizgisinde anlam gösterdi. Grafikler, ortalama± SD"yi teinsil eder. (n: 20 2N-ACI-DS-01, n= 13 Ts65Dn ACI-DS-Ol, n= 18 2N- Bos ve 11: ll Ts65Dn-B0s). M ACI-DS-Ol asisi ile tedavi edilmis farelerde Aß40 seviyesini gösterir. A) Korteksteki Aß40 seviyesi, 2N farelerine kiyasla Ts65Dn,de çok az daha yüksekti. ACI-DS-Ol asisi, korteks ve hipokampustaki Aß42 ve Aß40 seviyelerini düsürme egilimi gösterdi. Beyincikteki Aß42 ve Aß40 seviyeleri, ACI-DS-Ol ile tedaviyi takiben istatistiksel açidan anlamli bir azalma gösterdi. Grafikler, ortalama ± SD°yi temsil eder. (n:10 2N-ACI-DS-Ol, nîlO TS65DH- ACI-DS-Ol, n= 8 2N-Bos ve n= 5 Ts65Dn-Bos). B ve C) Korteks veya beyincikteki Aß-40/42 orani ile RI arasindaki iliski. D) ACI-DS- 01 ile tedavi edilmis Ts65Dn farelerinin plazmasinda anti-Aß IgG titerleri seviyesinin Aß40 seviyesi ile iliskisi zayiftir. E) Anti-AB IgG seviyesi ile RI arasinda anlamli iliski. (n=l9 2N ACI-DS-Ol, n=l3 Ts65Dn ACI-DS-Ol, 11: 18 2N-Bos ve n: 11 TsÖSDn-Bos). Seki# enflamatuar reaksiyon çalismalarini gösterir. A) Vücut ve beyin agirligi. B) Tedavi edilmis 2N ve T865Dn farelerinde GFAP immünoreaktivitesinin (sol) ve CD45"in (sag) konfokal görüntüleri. Oklar, tek tek CD45 pozitif mikroglial hücreleri isaret eder. GFAP immünoreaktivitesinin optik yogunlugu nicelendirildi ve gruplar arasinda hiçbir farklilik ortaya çikmadi. Her bir gruptan n=4. ,SM ACI-DS-OZ ile iinmünize edilmis farelerin seruinlari ile immüno-boyanmis insan DS°1i beyin örneklerinin kesitlerini gösterir. Pozitif alan, ACI-DS-02 türevli antikorun, DS"1i kisilerin beynindeki amiloid plaklarina baglandigini isaret eder. Boyama, 6E10, ticari yollarla elde edilebilen bir anti-amiloid beta antikoru ve ACI-24 türevli antikor ile elde edilen boyamaya benzerdi. ACI-24 asisi, ACI- 24"te kullanilan antijen, bir insan Aß 1-15 sekansi iken ACI-DS-Ol asisinin antijen olarak fare AB 1-15 sekansi ihtiva etmesi farkiyla (bu iki anti jendeki üç amino asit farkli için bakiniz Sekil 1) ACI-DS-Ol "e karsilik gelir. Bir kesitin PBS ile immünize edilmis farelerin serumlari ile inkübe edildigi durumda hiçbir boyama gözlenmedi. Seki# korku kosullama testinde ACI-DS-02 asisi ile immünize edilmis T565Dn farelerinde ögrenmeyi gösterir. ACI-DS-OZ ile immünize edilmis TS65Dn fareleri, edinme seansi sirasinda, özellikle üçüncü kosullu uyariyi (CS) takiben PBS ile iirimünize edilmis TS65Dn farelerine kiyasla daha fazla donma gösterdi. Grafikler, ortalama ± SD°yi temsil eder. (n=7 Ts65Dn-ACI-DS-02, n=7 2N-PBS ve n= 4 TsöSDn-PBS. Grafikler, ortalama ± SD°yi temsil eder). ;M ACI-DS-O3 ile immünize edilmis farelerin serumlari ile immüno-boyanmis insan DS°li beyin örneklerinin kesitlerini gösterir. Pozitif alan, ACI-DS-03 türevli antikorun, DS"li kisilerin beynindeki amiloid plaklarina baglandigini isaret eder. Boyama, 6E10, ticari yollarla elde edilebilen bir anti-amiloid beta antikoru ve ACI-24 türevli antikor ile elde edilen boyamaya benzerdi. ACI-24 asisi, ACI- 24"te kullanilan antijen, bir insan Aß 1-15 sekansi iken ACI-DS-Ol asisinin anti jen olarak fare AB 1-15 sekansi ihtiva etmesi farkiyla (bu iki anti jendeki üç amino asit farkli için bakiniz Sekil 1) ACI-DS-Ol ,e karsilik gelir. Kesitin PBS ile immünize edilmis farelerin serumlari ile inkübe edildigi durumda hiçbir boyama gözlenmedi. ;M ACI-DS-Ol asisi ile immünize edilmis Ts65Dn farelerinin morfolojik analizini gösterir. A) Medya] septumdaki ChAT+ hücrelerin sayisi ve B) optik yogunluk, bütün gruplarda benzerdi. C) ChAT+ hücre gövdesi alani, ACI-DS-Ol ile iminünize edilmis Ts65Dn farelerinde, Bos asi ile tedavi edilmis Ts65Dn"ye kiyasla artti. (11: 4 2N-Bos, 11: 4 TsöSDn-Bos, n= 4 2N-ACI-DS-Ol ve 11: 4 TsöSDn-ACI-DS-Ol. Grafikler, 0rtalama± SD7yi temsil eder). ÖRNEKLER Ornek 1 Genel Metodoloji 1.1 Hayvanlar: Bir DS"li fare modeli olarak bilinen T365Dn fareleri (Davisson ve arkadaslari, 1993) kullanildi (n :30) ve yaslari, kontrol 2N ile eslestirildi (11:40). Baslangiç tarihinde, kullanilan fareler, 5 aylikti. Çalismanin (immünizasyon ve davranis testleri) sonunda fareler, 9 aylikti. Bu yüzden itlafta toplanan tüm örnekler, 9 aylik farelerdendir. T565Dn yeni doganlarmda temel olarak kongenital kalp malformasyonlarindan dolayi letalite yüksekti (%6 civarinda)(Randall 2006, Moore 2006). Bununla birlikte fareler, 18 ila 24 ay kadar hayatta kalabilir. Bizim çalismamizda %15'lik bir ölüm orani gözlendi. Hayatta kalan farelerin büyüklügü, normal kardes yavrulara kiyasla -%20 daha küçüktür. Dogunida ölerek en ciddi sekilde etkilenen fareler, analiz edilecek kadar hayatta kalinadigindan trizomik genlerin bazi fenotipler (yani kalp kusuru) üzerindeki etkisinin göz ardi edilmesine neden olur. Bununla birlikte bizim meselemizde hayatta kalan fareler, amiloid ve AD benzeri patolojileri analiz etmek için yeterli bir DSsli modeli temsil eder. Bu çalismalar için kullanilan DS°li fare modelinde fareler, 4 aylikken artmis seviyelerde amiloid gösterir (Hunter 2004). 9 aylikken amiloid beta seviyesi, APP geninden üç kopya olmasi bakimindan tahmin edildigi üzere normal seviyenin 3 katina ulasir. DS'li kisilere benzer sekilde yaslanma, T565Dn beyinlerinde ainiloid birikmesi bakimindan önemli bir faktördür. Amiloidin yasla alakali olarak birikmesine ragmen T865Dn fareleri, plaklar gelistirmez. Bununla birlikte bunlar, AD"de ve Down sendromlu kisilerde görülen nöronal popülasyon de jenerasyonunu sebatla replike eder (Salehi ve arkadaslari, 2009) Birlikte alindiginda kullanilan fare modelindeki DS 'ozellikleri, patolojik proteinlerin ve fenotipik yönlerin, yani amiloid yükü ve algi bozuklugunun varligini içerir. Bu yüzden Ts65Dn fareleri, DS"nin patojenik süreçlerini dogru sekilde özetleyebilir. Bu fareler, 6 aylikken insanlara denk bir seviyede amiloid biriktirmeye basladigindan model farenin yasi, genç ila orta yas araligindaki bir yasta insan DS hastalarina denktir. ACI-DS-Ol asisi ile immünizasyon çalismasinda kullanilan fareler, B6EiC3Sn-Ts(1716)65Dn disilerinin (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) BöEiC3Sn Fl/J A/a erkekleri (Jackson Laboratory) ile nielezlenmesiyle 10 jenerasyondan fazladir muhafaza edilen Ts65Dn fare kolonisi idi. Bu üreine semasi kullanildi çünkü trizomik fareler, soy içi üreme durumunda çok zayif sekilde ürerler veya hiç üremezler; B6C3 arka plani, en basarilisi olmustur. 2N"yi T565Dn farelerinden ayirt etmek için kuyruk `örneklerinden genomik DNA özümlendi. T865Dn"de üç kopya halinde mevcut olan Mxl geni ekspresyonunu ölçmek için bir kantitatif polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) protokolü (Jackson Laboratory tarafindan tedarik edilen) kullanildi. Erkek fareler, bütün çalismalarda kullanildi. Bunlar, çalismanin basinda 4+/- 0.3 aylik idi. 1.2 Asi preparasvonu - Lipozom bazli bir antiienik yapinin preparasyonu Asi Antijenik peptit Aß sekansi Asi içerisinde ATR- kodu sekansia IR ile ölçülen antijenik peptit konformasyonu (%) ACI- H-Lys(Pal)- Fare ABI-15'" %73 beta levha DS-Ol Lys(Pa1)-Asp-Ala- (SEK.KIMrNO: 2) %19 rastgele sarmal Glu-Phe-Gly-His- %0 alfa helis veya ASp-Ser-Gly-Phe- ilmikler %8 beta Glu-Val-Arg-His- dönüsleri Gln-Lys(Pal)- Lys(Pal)-OH ACI- H-Lys(Pal)-Glu- Insan %67 beta levha DS-02 Asp-Val-Gly-Ser- (SEK.KIM.NO: 4) %21 rastgele sarmal Asn-Lys-Gly-Ala- ve fare %0 alfa helis veya Ile-Ile-Gly-Leu- (SEK.KIM.NO: 5) ilmikler %12 beta Met-Lys(Pal)-OH Aß22-3 5 ,i dönüsleri ACI- H-Lys(Pal)- Insan %57 beta levha DS-O3 Lys(Pa1)-His-Gln- (SEK.KIM.NO: 6) %19 rastgele sarmal Lys-Leu-Val-Phe- Phe-Ala-Glu-Asp- Val-Gly-Ser-Asn- Lys-Gly-Lys(Pal)- ve fare (SEK.KIM.NO: 7) Aß14-29"u %12 alfa helis veya ilmikler %11 beta dönüsleri Lys(Pal)-OH Peptit sekanslari, üç harfli kodlarla sunulur; Pal, palmitoile edilmis tortuyu temsil eder; bInsan ile fare ABI-15 sekansi arasindaki üç ainino asit farkinin alti çizilidir ve Sekil 1'de gösterilir. Lipozom antijenik yapisi, W02007/0684l l°de tarif edilen yönteme göre üretilir. Palmitoile edilmis peptitler, PolyPeptide Laboratories (Strasbourg, Fransa) tarafindan hazirlandi. Ozetle lipozoinal asilar, diiniristoilfosfatidilkolin (DMPC), dimiristoilfosfatidil-gliserol (DMPG), kolesterol ve monofosforil Lipit A"nin (MPLA) (tamaini Avanti Polar Lipids, AL, ABD), ayri ayri 9:1:7:0.05"lik molar oranlarda etanol içinde 60°C"de çözünürlestirilmesiyle hazirlandi. Lipit/etanol çözeltisi, PBS pH 7.4 içerisinde seyreltilerek çok katmanli vesiküller olusmasi saglandi. Sonuçta elde edilen preparasyon daha sonra dakikada 200 ml°lik bir akis oraninda ultrafiltreleme (Vivaflow 200-100000 MWCO Polietersülfon) yoluyla konsantre edildi ve reaksiyon hacmi, bir ultrafiltreleme adimi ile küçültüldü. Konsantre edilmis çözelti ayrica PBS pH 7.4 ile 10 kat bir hacim degis tokusu yapilan bir Vivadlow 200 aygiti içerisinde diyalizlere de tabi tutuldu. Daha sonra çok lamelli lipozomlar, hoinojenizasyona (15000-20000 Psi°de 7 döngü), ardindan gözenek büyüklügü 0.2 um ve çapi 47 mm olan polikarbonat filtrelerden (Whatman) geçirilerek sirali 3 ekstrüzyon döngüsüne tabi tutuldu. Hem homojenizasyon hem de ekstrüzyon adimlari, bir EmulsiFlex-CS (Avestin, Kanada) içerisinde gerçeklestirildi. Sonuçta elde edilen anti jensiz tek lamelli lipozomlar, PBS pH 7.4 içinde seyreltildi ve peptit ilavesinden önce 60°C'ye kadar isitildi. Pamitoile edilmis peptit, PBS pH 11.4 içinde %50 (B- OG) ile çözündürüldü. ACI-DS-Ol, ACI-DS-OZ ve ACI-DS-03 asilarinin preparasyonunda ilgili antijenik peptitler, ayri ayri 1.33, 0.67 ve 1.06 mg/niL olarak kullanildi. Sonuçta elde edilen çözeltinin deterjan konsantrasyonu, %073 (a/h) " lik kritik misel konsantrasyonunun (CMC) üzerindeydi. Bu peptit çözeltisi daha sonra lipozom çözeltileri içerisine 60°C°de enjekte edildi ve 30 dakika süreyle karistirilarak sonuçta nihai ß-OG konsantrasyonu, kritik misel koiisantrasyonunun çok altinda olan bir çözelti elde edildi. Deterjan misel kirina isleiniyle palmitoile edilmis antijenin, daha önceden sekillendirilmis lipozomlarin yüzeyi `uzerine dahil olmasi indüklenir. Bu antijenli lipozomal çözelti daha sonra ultrafiltreleme yoluyla konsantre edildi ve diafiltreleme yoluyla PBS pH 7.4 ile 10x hacim degis tokusuna tabi tutuldu (her ikisi de, dakikada 200 mlslik bir akis ile 100.000 MWCO°luk bir Polietersülfon içinde). Sonuçta elde edilen lipozomlar daha sonra 0.2 um polikarbonat siringa filtrelerinden geçirilerek iki kez steril filtre edildi ve 5°C"de depolandi. Asi içerisindeki peptit-lipit molar orani, 1:100 idi. 1.3 ACI-DS-Ol asisi ile imm'i'inizasvon Bütün fareler, 200ul ACI-DS-Ol (doz basina 51.2 ug Fall-15, tetrapalmitoile edilmis Aß peptidi l-15) veya bos lipozom asisi ile subkütan (so.) immünizasyonlar aldi. 1, 14, 28, 42, 56, 70 ve 110uncu günlerde toplam alti enjeksiyoii yapildi. Ayiii günlerde, -1inci g'un ilk asi enjeksiyonundan hemen önce (kan almadan önce), 56nci gün (4'ûncü en jeksiyondan 14 gün sonra) ve itlaf günü, yaiii 110uncu gün (6nci enjeksiyondan 40 gün sonra) kuyruklardan kan alimlari yapildi. Fareler, çalismaiiin sonunda 9 aylikken itlaf edildi ve beyinler toplandi. 1.4 ACI-DS-Ol immünizasvonundan sonra fare Aß"ve 'özel antikorlarinin nicelenmesi Aßl-42"ye `Özel IgG yanitlari, ELISA yoluyla belirlendi. Kisacasi plakalar, 10 ug/mL fare Aß1-42,si (Bachein H5966, parti: 1013710, 1028321 veya 1033165) veya fare ABI-40'i (Bachein H5638, parti: 1013645) ile 4°C"de bir gece süreyle kaplandi. PES-%005 Tween 20 ile yikandiktan ve %1 BSA ile bloke edildikten sonra plakalara, seri plazina seyreltmeleri ilave edildi ve 37°C"de iki saat süreyle inkübe edildi. Antikor anti-AB 4G8 (Covance SlG-39220, parti: 08EC00905, 1 mg/mL seyreltilmis 4000) ve ayni ACI-DS-Ol kümesini içeren üç enjeksiyon ile immünize edilmis bir C57BL/6JOlaHsd"nin (Harlan) serumu, pozitif kontrol olarak kullanildi. Yikandiktan sonra plakalar, alkalin fosfataza (AP) konjuge edilinis anti-fare IgG antikoru (Jackson Immunoresearch West Grove, PA, ABD, Kat. N°115-055-164 Parti 87821, 1/4000 oraninda seyreltilmis flakon) ile 37°C"de iki saat süreyle inkübe edildi. Son yikainadan sonra plakalar, 2 saat süreyle AP substratli bir yari (pNNP) ile inkübe edildi ve bir ELISA plaka okuyucu kullanilarak 405 nm°de okundu. Sonuçlar, optik yogunluk (O.D) olarak ifade edilir. 1.5 ACI-DS-Ol immünizasvonu sonrasi davranis testleri Bütün fareler, 8 aylik civarinda baslayan ayni davranis testleri dizisine maruz birakildi. Her bir fare, testlerden önceki 7 gün zarfinda ve testler arasindaki 3 gün süreyle günde iki kez 10 dakika süreyle elleçlendi. Testler, belirtilen günlerde (son immünizasyona göre) ve su sirayla yapildi: lokomotor aktivitesi (11inci gün baslayarak), 24 saat gecikmeli olarak yeni nesne tanima görevi (18inci gün baslayarak), T- labirenti (25inci gün baslayarak) ve baglamsal korku kosullaina testi (34üncü gün baslayarak). Bütün davranis testleri, gündüz döngüsü sirasinda sabah 7:00 ile aksam 7:00 arasinda oldu ve oda sicakliginda (22°C) yapildi. Test günleri fareler, ortama alismalari için 2 saat süreyle ayni deney odasinda gün isigi fazinda kendi kafeslerinde tutuldular. Her bir test sirasinda bir anksiyete göstergesi olarak diski peletlerinin ve idrar damlalarinin sayisi da ölçüldü. Onceki deneydeii gelen kokuyla ilgili ipuçlarini minimum düzeye indirmek için her bir aparat, her bir hayvan kullanimindan sonra %10 etanol ile iyice teinizlendi. Elleçleme ve tüm davranis testleri, karartilinis sekilde yapildigindan fareleri elleçleyen arastirmaciyla genotipi ve tedaviyi göstermedi. 1.5.1 ACI-DS-Ol immünizasvonundan sonra spontan lokomotor aktivite testi Spontan lokomotor aktivite, Pleksiglas aktivite bölmeleri (model MED-OFA-MS; Med Associates) (27.9 X 27.9 x 20 cm) ve aktivite izleme yazilimi (Activity Monitor, versiyon 4.3.6) kullanilarak izlendi. Belichenko ve arkadaslari, (Belichenko ve arkadaslari., 2009; Belichenko ve arkadaslari, 2007)"de tarif edildigi gibi fareler, parlak ortam isigi kosullari altinda bölmenin merkezine yerlestirildi ve aktivite, 10 dakika süreyle üç ayri deneyde izlendi. Toplam mesafe, hiz, toplam aktivite süresi, toplam aktivite sayisi ve dikey aktivite bakiinindan ortalamalar belirlendi. 1.5.2 ACI-DS-01 immünizasvonundan sonra yeni nesne tanima görevi Biz, BeVins and Besheer protokolünü (Bevins and Besheer, 2006;O'Doherty ve arkadaslari, 2005) kullandik: 24 saatlik bir gecikmeyle ögrenme ve hafiza üzerinde çalismak için tek ortamli iki örnek nesneyi tanima hafizasini inceleme amaçli tek denemede eslesmeyen Örnegi ögrenme görevi. Testlerden önce fareler, karartilmis ortam isigi kosullari altinda birbirini takip eden 2 gün bir siyah Pleksiglas bölme (31 X 24 x 20 cm) içerisinde 10 dakika süreyle ortaina alistirildi. Nesne tanima görevi sirasinda 8 aylik farelerin aktivitesi, bir Video kamera ile kaydedildi. Ilk olarak daha önceden tarif edildigi gibi (Bevins ve Besheer, 2006;O'D0herty ve arkadaslari., 2005) bölme içerisine iki özdes nesne konuldu. Bir fare, örnek nesnelerin karsisindaki duvarin orta noktasina konuldu. Nesneleri 10 dakika kesfettikten sonra fare, 24 saat süreyle koloniye geri konuldu. Nesne tanima testi yapmak için bölme içerisine bir tanidik nesne ve bir yeiii nesne konuldu ve fare tekrar 3 dakika süreyle nesneleri kesfetmesi için bölme içerisine konuldu. Nesne tanima, tek bir denemede ölçüldü. Veriler, dogrudan Video kayit gözlemleri kullanilarak belirlendi. Sonuçlar söyleydi: 1) hem yeni hem de tanidik örnek nesnelerin ortalama toplam kesif süresi ve 2) ayirt etme orani (yeni nesne etkilesimi/her iki nesne ile toplam etkilesim). 1.5.3 ACI-DS-Ol immünizasvonundan sonra T labirent testleri 8 aylik fareler kullanildi. Biz,hipokampal fonksiyonu degerlendirmek için modifiye edilmis bir Deacon and RaWlins protokolünü (Deacon ve Rawlins, 2006) ve bir T labireiitiiide bir sürekli degistirme görevini kullandik. Labirent, baslangiç kolunun basinda ilave bir kaydirma kapi ile tarif edildigi gibi opak akrilik camdan (Pleksiglas) yapildi (Deacon ve RaWlins, 2006). Test sirasinda bir fare, arkasi, kapali kaydirma kapiya dönük olmak üzere baslangiç kolunun basina konuldu. Bütün kapilar açildiktan soiira fare, baslangiç kolundan asagi dogru kosarak sag yada s01 hedef kolonu seçti. Farenin dört bacaginin tamami bir hedef kola girdikten sonra baska bir hedef kol için kaydirma kapi 5 saniye süreyle kapatildi ve sonra tekrar bütün kaydirma kapilar açilarak farelerin baslangiç koluna geri döninesine izin verildi. T labirent aktivitesi, fareler 10 degistirmeyi bitirene kadar izlendi. Bu prosedür, toplam 30 deneme olniak üzere birbirini takip eden 3 gün tekrarlandi. Spontan dönüsün skoru, sol-sag ve sag-sol degistirinelerinin sayisi olarak tanimlandi, seans sirasindaki toplam olasi degistirme sayisinin bir yüzdesi olarak ifade edildi. Sonuçlarin hem degistirme skorlari hem de harcanan zaman bakimiiidan ortalamasi alindi. 1.5.4 ACI-DS-Ol immünizasvonundan sonra baglamsal korku kosullama testi Baglamsal ve ipuçlu korku kosullamasi, korkuya bagli ögrenme ve geri getirmeyi degerlendirmek için yapildi. Test, Coulboum Instruments (Whitehall, PA, ABD)"den bölmeler kullanilarak yapildi. Ilk gün hayvanlar, taban çizgisi kaydi için 3 dakika süreyle bir bölme (Baglam A) içerisine konulduktan soiira bes adet ton sokuyla eslestirine yapildi. Her bir kosullu/kosulsuz uyaran eslestirniesinde tonu (70 dB, 2 kHz, 20 sn.) takiben sok (0.5 mA, 2sn.) verildi. Ikinci gün ipucu testleri için yeni bir bölme (Baglam B; yeni oda, yeni koku ortami, yeni zemin dokusu, mavi plastik duvar eklentileri, ekstra mavi isik kaynagi ve görsel ipuçlari) kullanildi. 3 dakikalik ton öncesi bir süreyi takiben 3 dakikalik bir test Süresi zarfinda hayvanlara soklar olmaksizin üç ton sunuldu. Deneyin son günü fareler, herhangi bir kosullu yada kosulsuz uyaran olmaksizin 5 dakika süreyle Baglam A içerisine konuldu (Saxe ve arkadaslari, 2006). Donma, FreezeFrame yazilimi (Actimetrics, Evanston, IL) ile ölçülen sekilde minimum 0.75 saniye süreyle tam hareket kaybi olarak tanimlandi. Her bir periyotta donma yüzdesi bildirildi. 1.6 ACI-DS-01 immünizasvonundan sonra vücut ve beyin agirliklari 'Ölçümü Bütün davranis testlerinden sonra farelere, sodyum pentobarbital (200 mg/kg i.p.) (Abbott Laboratories) ile derin anestezi yapildi, bunlar tartildi ve 1 dakika süreyle %09 sodyum klorid (10 ml) ve sonra 10 dakika süreyle 0.1 M PBS, pH 7.4 (100 m1) içinde %4 parafolinaldehid transkardiyal yoldan perfûze edildi. Perfüzyon sonrasinda beyin hemen çikarildi. Beyin agirligi (burun soganlari, korteks, hipokampus, beyincik, beyin sapi ve C1-C27den geçen servikal omurilik dahil) kaydedildi. Beyin daha sonra baska bir kullanima kadar sabitleyiciye konuldu. 1.7 ACI-DS-Ol immünizasvonundan sonra enflamatuar reaksiyon bakimindan immünofl'öresan Beyin kesitleri, %03 Triton X-100 içeren 0.1M PBS içinde %5 yagsiz süt ile `Önceden inkübe edildi. Kesitler daha sonra 4°C°de bir gece süreyle tavsan anti-inek glial fibriler asidik protein (GFAP) antikoru (DAKO, Glostrup, Danimarka) ile, 1:500 oranindaki bir seyreltmede veya poliklonal siçan anti-CD45 (Pharmingen) ile, 125000 oranindaki bir seyreltmede inkübe edildi. Asagidaki inkübasyonlar (her biri 1 saat ve oda sicakliginda), biyotinile edilmis bir esek anti-tavsan sekonder antikoru (1:200; Jackson lmmunoResearch Labs, West Grove, PA, ABD) ile ve floresin izotiyosiyanata (FITC) konjuge edilmis streptavidin (1:500; Jackson ImmunoResearch Labs) ile yapildi. Yukarida tarif edilen inki'ibasyonlar arasinda PBS ile bir durulama (3 kez, her biri 20 dakika) yapildi. Kesitler, mikroskop cam Slaytlari üzerine monte edildi ve 0.1M fosfat tamponu, pH 7.4 içinde %90 gliserol kullanilarak lamellendi. Antikor boyama spesifitesini kontrol etmek için seçilen kesitler, primer antikorlarin dahil olmadigi ayni protokole tabi tutuldu. Kontrol kesitlerinde immünoflöresan gözlenmedi. Dilimler, bir Nikon Eclipse E800 flöresan mikroskobuna takili bir Radiance 2000 (Bio-Rad, Hertfordshire, Ingiltere) konfokal mikroskobunda incelendi ve tarandi. Lazer, FlTC için eksitasyon dalga boylari 488 nm"de Ot) olan bir argon/kripton karisik gaz lazeri idi. Görüntüleri toplamak için optimal kosullari olusturinada LaserSharp yazilimi (Bio-Rad) kullanildi. GFAP-immünoreaktivite (IR) veya CD45-IR"1iin konfokal görüntülenmesi için optimal kosullar söyleydi: lens, bir 20x objektif (Nikon; Plan Apo 20x/0.75) idi; lazer gücü, %10 veya %20 idi; kazanç, 34.7 idi; kayma, 0.0 idi; zoom faktörü, 3 idi; tarama hizi, saniyede 500 satir idi; her bir optik kesit, üç kez tarandi ve sonra paraziti azaltmak için Kalman filtrelemesi kullanildi; görüntü ebadi, 512x512 piksel idi ve piksel ebadi, 0.48x0.48 um idi. Q ACI-DS-Ol imm'ûnizasyonu sonrasi istatistiksel analiz Veriler, ortalama ± standart sapma (SD) veya standart ortalama hatasi (SEM) olarak gösterilir. Istatistiksel analiz, iki kuyruklu bagimiz örneklem t testi ile yapildi. p<0.05,1ik bir olasilik, anlamli sayildi. Ornek 2 ACI-DS-Ol ile imm'i'inizasyon, anti-fare Aß antikorlari 'üretti Lipozomal asi ACI-DS-Ol, SupraAntigenTM metodolojisine (WO 2005/081872, W02007/068411) göre, tetrapalmitoile edilmis fare Aß 1-15 peptidi (Palml-15), monofosforil lipit A (MPLA) ile birlikte lipozoinlar içerisine gömülmüs H-Lys(Pal)-Lys(Pa1)-Asp-Ala-Glu- Phe-Gly-His-ASp-Ser-Gly-Phe-Glu-Val-Arg-His-Gln-Lys(Pal)- Lys(Pal)-OH ile hazirlandi (Sekil 1). Alti doz ACI-DS-Ol, T565Dn erkek farelerine ve yaslari eslesen kontrol farelerine (2N) subkütan yoldan ve iki haftada bir uygulandi. 4ünci'i dozdan sonra toplanan plazmanin analizi, hem T365Dn hem de 2N gruplarindan immünize edilmis farelerde fare Aß40 veya Aß42°sine karsi kuvvetli IgG titerleri gösterdi (Sekil 2A ve 2B). Asinin ind'ukledigi antikorlar, son immünizasyondan 40 gün sonra bile hala yüksekti. Antijensiz bos lipozom ile immünize edilmis farelerde hiç titer saptanmadi (Sekil 2A ve 2B). Böylece ACI-DS-Ol, DS°li fare modelinde Aß"nin kendinden toleransini kirabildi. lgG°nin alt siniflari, ACI-DS-Ol ile immünize edilmis farelerin plazmasinda 4ünc'û immünizasyonu takiben analiz edildi. Aß40 ile yapilan ELlSA, T365Dn grubunun lgG2a titerlerinin 2N grubundan daha yüksek oldugunu gösterirken (Sekil 2D) iki grup arasinda IgGl ve IgGZb titerleri bakimindan hiçbir farklilik yoktu (Sekil 2C ve 213) (Tek yollu ANOVA, Tukey posthoc; P = 0.05). IgG3 titerleri, Ts65Dn grubunda daha düsüktü (Sekil 2F) (Tek yollu ANOVA, Tukey posthoc; P<0.001). IgM titerleri, 2N farelerine kiyasla T565Dn farelerin hafifçe, ancak anlainli sekilde daha düsükt'ü (SekilZG). (Tek yollu ANOVA, Tukey posthoc; P = 0.05). Aß42 ile yapilan ELISA7da benzer sonuçlar elde edildi (veriler gösterilmemistir). TsöSDn farelerinde yukarida belirtilen birkaç titerin düsük seviyelerde olmasinin, T365Dn°nin immün yaniti kapasitesinden kaynaklanmasi pek olasi degildir çünkü anti-MPLA IgG seviyesi, bütün farelerde denkti (SekilZH). Ornek 3 ACI-DS-Ol ile immünizasyon T565Dn farelerinin hafiza kusurunu onardi T865Dn fareleri, hafiza bozuklugu ve anormal aktiviteler gibi DS algi anormalliklerinin birçok özelligini sergiler. ACI-DS-Ol asisinin etkinligini arastirmak için son immünizasyondan iki hafta sonra bir dizi davranis testi yapildi. Fareler, testleri su sirayla performe etti; açik alan, nesne tanima, T labirenti ve korku kosullama. Açik alan testinin analizi, T565Dn farelerinin 2N farelerine kiyasla anlamli sekilde daha yüksek bir spontan lokomotor aktivitesi sergiledigini gösterdi (veriler gösterilmeinistir). ACI-DS-Ol ile immünizasyonu takiben T565Dn fareleri, ACI-DS-Ol ile tedavi edilmis ZN farelerinden anlamli sekilde daha aktif olmaya devain etti (Sekil 3A, tek kuyruklu bagimsiz örneklem t testi; p = 0.0004). T labirentinde ZN ve T565Dn fareleri, ne tedavi öncesinde ne de tedavi sonrasi degistirme oranin yada degistirme süresi bakimindan anlamli bir farklilik göstermedi (veriler gösterilmemistir). Mekansal hafiza kapasitesi, nesne tanimada (ORT) ölçüldü. Ts65Dn fareleri, zayif bir ayirt etme orani sergiler ve bu yüzden yeni nesneyi taiiiinasi zayiftir. ACI-DS-Ol ile tedavi edilen T565Dn fareleri, daha yüksek bir ayirt etme orani gösterdi ki bu, tedavinin, hafizada anlamli bir gelismeye yol açtiginm isaretidir (Sekil BB, tek kuyruklu bagimsiz örneklem t testi; p = 0.03. tek yollu ANOVA, genotip, P = 0.12, asi, P :0002. Etkilesim P = 0.54). Ilginç sekilde 2N grubunda da ayiii sonuçlar gözlendi. Korku kosullama testi, egitim, ipucu ve baglamsal seanslardaii olusur. Egitim veya ipucu seansi sirasinda bütün gruplarda ayni seviyede donma gözlendi (Sekil 3C). Baglamsal seans sirasinda, bos asi (sadece lipozom, anti jen yok) ile tedavi edilmis T865Dn fareleri, kontrol 2N farelerinden daha düsük bir donma yüzdesi gösterdi. Buna karsilik immünizasyon sonrasi Ts65Dn fareleri, artmis bir donma sergiledi ve 2N farelerine denk bir seviyeye ulasti (tek kuyruklu bagimsiz örneklem t testi; P : 004. (tek yollu ANOVA, genotip, P : 0.01, asi, P : 0.16. Etkilesim P : 0.33). Bu, immünizasyonun verimligi oldugunu ve T565Dn farelerinin hafiza kapasitesini gelistirdigini isaret eder. Ozetler bu sonuçlar, ACI-DS-Ol tedavisinin, Ts65Dn farelerinin hafiza kusurunu onarabilecegini isaret eder. Ornek 4 ACI-DS-Ol asisinin algi noksanligini gelistirme mekanizmasi ACI-DS-Ol'in indükledigi antikorlarin Aß seviyesi üzerindeki etkisi ile ilgili soruyu cevaplamak için hipokainpus, korteks ve beyiiicigin protein özütleri kullanilarak ELISA yapildi. Bu bölgelerin hiçbiri, ACI-DS-Ol ile tedaviyi takiben ne Aß40 ne de Aß42 için AB seviyeleri üzerinde aiilamli bir fark göstemiedi (Sekil 4A). Korteks ve beyincikteki Aß-40/42 oraninin, daha yüksek bir tanima endeksi (RI) ile aiilainli sekilde iliskili oldugunu belirtmekte fayda vardir (Sekil 4B ve 4C. Korteks; Pearson r korelasyonu = -0.3248, P = 0. 0.03. beyincik; Pearson r korelasyonu = -0.4127, P = 0.009). Bu sonuçlar, Aß-40/42"nin algi noksanligindan sorumlu olabilecegini isaret eder. Baska bir analiz, plazma içerisinde Aß42 saptanamadigini gösterdi. Buna karsilik plaziiia içerisindeki Aß40 seviyesinin artmis olmasi, ACI-DS-Ol ile tedavi edilmis T365Dn farelerinin grubunda ölçülen daha yüksek anti-AB IgG degerleri ile iliskili gibi görünüyordu (Sekil 4D; Pearson r korelasyonu = 0.51, P :0.09). Ayrica RI, anti-AB IgG titerleri ile de iliskiliydi (Sekil 4E; Pearsoii r korelasyoiiu : 0.3154, P :0007). Bu sonuçlar, ACl-DS-01°in indükledigi antikorlarin, Aß°yi beyinden plazmaya kadar temizleyebilecegiiii ve bunun da hafizada iyilesmeye yol açabilecegini isaret eder. Ornek 5 Down Sendromlu Fare Modellerinde nöronlarin morfolojisi Bazal 'Ön beyindeki (BFCN) kolinerjik nöron büyüklügü, sayisi ve optik yogunlugu analiz edildi. BFCN seviyesinden iki kesit, ChAT antikoru (Millipore, Kat no. AB144P, parti 110. 2010060) ile boyandi. Medya] septum (MS) alani, kantitatif degerlendirme için konfokal mikroskop üzeriiide tarandi. Su parainetreler hesaplandi l) MS"de ChAT+ hücrelerin yogunlugu; 2) ChAT+ tek tek nöronlarin alaiii ve 3) tek tek nöronlardaki ChAT°in optik yogunlugunun ortalamasi. Medya] septuindaki kolinerjik nöronlar görüntülendi ve nöron adedini saymak, optik boyama yogunlugunu açiga çikarmak ve hücre Vücut alaniiiin taslagiiii yapmak için ImageJ yazilimi kullanildi. Sonuçlar: Medyal septuindaki ChAT+ hücrelerin sayisi ve optik yogunluk, bos asi ile tedavi edilmis 2N ve T365Dn farelerinde benzerdi (Sekil 9A ve 9B). Medya] septumdaki ChAT+ hücrelerin sayisi, ACI-DS-Ol ile tedavi edilmis 2N ve Ts65Dn farelerinde benzerdi (Sekil 9A) (2N-Bos : her 100 mikromluk kesit basina 27.5 ± 7.2; Ts65Dn-Bos = 23.9 ± 7.0; 2N- ACI-DS-Ol = 36.6 ± 4.6; Ts65Dn-ACI-DS-Ol = 20.9 ± 6.6). Medya] septumda tek tek ChAT+ hücrelerdeki Optik boyama yogunlugu da, ACI-DS-Ol ile tedavi edilmis 2N ve Ts65Dn farelerinde benzerdi (Sekil 98) (2N-Bos = 79.9 ± 3.5 keyfi birim; Ts65Dn-Bos = 74.7 ± 2.6; 2N-ACI-DS-Ol = 71.9 ± 2.6; Ts65Dn-ACI-DS-01 = 75.8 ± 4.5). Medya] septumda ChAT+ hücre gövdesinin alani, Ts65Dn"de, 2N farelerinde oldugundan daha küçüktü (Sekil 9C). ACI-DS-Ol ile tedavi edilmis Ts65Dn farelerinin medya] septuinundaki ChAT+hücre gövdesi alani, bos araçla tedavi edilmis Ts65Dn"ye kiyas anlainli sekilde artmisti (Ts65Dn- Bos = 179 ± 6 mikromz; Ts65Dn-ACI-DS- 01 = 201 ± 8, p = 0.031). ACI-DS-Ol ile tedavi edilmis 2N ve Ts65Dn farelerinin hücre gövdesi alani benzerdi (2N-ACI-DS-01 : 208 ± 8 mikromz; Ts65Dn-ACl-DS-Ol : 201 ± 8, p : 0.55) (Sekil 9C). Bu, ACI-DS-Ol tedavisi üzerine inedyal septuinda ChAT+hücreler halinde hücre gövdesi alani geri kazanimini isaret eder. Bu sonuçlar esit ölçüde ACI-DS-Ol asisinin güvenli oldugunun bir göstergesidir çünkü ChAT+ hücrelerin sayisi, asi ile immünizasyon sonrasinda degismedi. Bu morfolojik çalismalar, ACI-DS-Ol immünizasyonu sonrasinda nöronlarda daha az atrofi oldugunu gösterdi ki bu, bu asinin, nörodejenerasyonun engellenmesinde kullanilabileceginin isaretidir. Ornek 6 Lipozomal asi ACI-DS-01"in güvenligi ACI-DS-Ol ile immünizasyonun, güvenlik sorunlari indükleyebilip iiidükleyemeyecegini belirlemek için farelerde Vücut agirligi, geiiel gözlem ve enflamasyon markerleri kaydedildi. Tedaviden önce T565Dn farelerinin Vücut agirligi 2N farelerinden anlamli sekilde daha düsüktü (ANOVA, Tukey posthoc, p : 0.001). Immünizasyon, Vücut agirligini aiilainli sekilde degistirmedi (Sekil 5A). Beyin agirliklari, dört fare grubunun tamaminda benzerdi (Sekil 5A). Immüno- histokimya sonuçlari, glial fibriler asidik protein (GFAP) pozitif astroglial hücrelerin veya CD45 pozitif mikroglia] hücrelerin sayisinda hiçbir farklilik göstermedi. Elde edilen sonuçlar, korteks ve hipokampusta benzerdi (Sekil 5). Bu sonuçlar, ACI-DS-Ol asilamasinin, bir enflamatuar tepki indüklemedigini isaret etmektedir. ACI-DS-01°in indükledigi antikorlarin spesifikligini dogrulamak için bir çapraz reaksiyon çalismasi yapildi. 2N ve T565Dn°nin beyin kesitleri, ACI-DS-Ol ile tedavi edilmis 2N farelerinin anti-serumu ile boyandi. Ozetle bu bulgular, ACI-DS-01°in güvenli bir asi oldugunu isaret eder. Ornek 7: ACI-DS-OZ ve ACI-DS-03 asilari ile deneyler için genel metodoloji 7.1 ACI-DS-OZ ve ACI-DS-03 asisi ile imm'i'inizasvon Çalismanin basinda 4±0.3 aylik olan erkek Ts65Dn fareleri (Jax laboratory B6EiC3Sn.BLiA-Ts(l7l6)65Dn/DnJ), 200u1 ACI-DS-OZ (doz basina 18.6 ug dipaliiiitoile edilmis AB peptidi 22-39) (n: 6 Ts65Dn fareleri) veya PBS (n= 4 T365Dn fareleri) ile subkütan (se.) immünizasyonlar aldi. 1, 14, 28 ve 42nci günlerde toplam dört enjeksiyon yapildi. Her bir immünizasyondan bir hafta sonra; 7, 21, ve 49uncu günlerde kuyruklardan kan alimlari yapildi. Ayni prosedür, ACI-DS-03 asisi (doz basina 38.6 ug Pal 14-29, tetrapalmitoile edilmis Aß peptidi 14-29) (n= 7 Ts65Dn fareleri) veya PBS (n= 4 TsöSDri fareleri) ile immünizasyon için de gerçeklestirildi. Kontrol yavru kardes fareler (n = 7 2N fareleri), benzer en jeksiyonlari, ancak PBS ile birlikte aldi. 7.2 Fare Aß9ve `Özel antikorlarinin nicelenmesi ABI-42°ye `Özel IgG yanitlari, ELISA yoluyla belirlendi. Kisacasi plakalar, 10 ug/mL insan Aß1-42"si (Baehem H1368, parti: 1000255) ile 4°C"de bir gece süreyle kaplandi. PES-%005 Tween 20 ile yikandiktan ve %1 BSA ile bloke edildikten sonra plakalara, seri plazma seyreltmeleri ilave edildi ve 37°Csde iki saat süreyle inkübe edildi. Antikor anti-Aß 6E10 (6E10 Covance SIG-39320°den, parti: 09GC01254 flakon a, 1000x seyreltilmis 1 mg/ml), pozitif kontrol olarak kullanildi. Yikandiktan sonra plakalar, alkalin fosfataza (AP) konjuge edilmis anti-fare IgG antikoru (Jackson Immunoresearch West Grove, PA, ABD, Kat. N0115-055-164 Parti 87821, 1/4000 oraninda seyreltilmis flakon) ile 37°C°de iki saat süreyle inkübe edildi. Son yikamadan sonra plakalar, 2 saat süreyle AP substratli bir yari (pNNP) ile inkübe edildi ve bir ELISA plaka okuyucu kullanilarak 405 nm'de okundu. Sonuçlar, optik yogunluk (0D) olarak ifade edilir. 7.3 Davranis testleri Bütün fareler, 6±O,3 aylik civarinda baslayan ayni davranis testleri dizisine maruz birakildi. Bütün davranis testleri, gündüz döngüsü sirasinda sabah 7:00 ile aksain 7:00 arasinda oldu ve oda sicakliginda (22°C) yapildi. 7.3.1 Mekansal nesne tanima görevi Testlerden önce fareler, bir gri polipropilen bölme (Çapi 40 cm, yüksekligi 32.4 cm) içerisinde 10 dakika süreyle herhangi bir nesne olmaksizin karartilmis ortam isigi kosullari altinda ortama alistirildi. Ertesi gün ve ögrenme seansi sirasinda labirentin bir tarafinda iki özdes nesne (Lego küpü veya cam siyah sise) sunuldu (10 dakika). Ogrenmeden 3 saat sonra özdes nesnelerden birinin, labirentin karsi tarafina götürüldügü ve 10 dakika süreyle sunuldugu bellek testi yapildi. Bütün seanslar, Video izleme yaziliini Ethovision XT 8.0 ile kaydedildi. Olçülen parametreler, hem yeni hem de tanidik örnek nesnelerin ortalama toplam kesif süresini ve ayirt etme oranini (yeni nesne etkilesimi/her iki nesne ile toplam etkilesim) kapsiyordu. 7.3.2 Su Labirenti hafiza görevi Uzun süreli hafizayi analiz etmek için su labirenti yapildi. Bir ortaina alistirma testi olarak fareler ilk gün gözle görülebilir bir ipucu platformuna (çapi 11 cm, yüksekligi: 165 cm, yüksekligi: 37 cm) sahip bir su labirentine (çapi: 165 cm; yüksekligi: 64 cm) tabi tutuldu. Bu test, denemeler arasi 30 dakika olmak üzere her biri 120 saniyelik deneme içeriyordu. Son 6nci deneme, gözle görülebilir ipucu platformu olmadan yapildi. Ertesi gün fareler, gizli bir platform ile 4 günlük egitime tabi tutuldu. Her bir gün fareler, her biri 120 saniyelik ve denemeler arasi 30 dakika olmak üzere 6 deneme perforine etti. Bir denemenin basinda bir fare, su içerisine, 4 baslangiç noktasindan (Kuzey-Dogu, Güney-Dogu, Güney-Bati ve Kuzey-Bati) birine tankin kenarina bakacak sekilde konulur. Baslangiç noktalari, denemeden denemeye degistirilirken kaçis platformu, deney boyunca sabittir (Bati dörtgeni). Fareniii platformu 120 saniye içerisinde bulmasi durumunda platform üzerinde 15 saniye süreyle kalmasina izin verilir. Eger platformu 120 saniye içerisinde bulamazsa deneme durdurulur ve fare nazikçe platforina dogru kilavuzlanir ve orada '15 saniye süreyle birakilir. Olçülen parametreler, labirentin farkli bölümlerinde harcanan kaçis gecikme süresini (s), labirentin her bir dörtgenine giris sayisini, labirentin her bir dörtgenine kat edilen mesafeyi (cm), hedef alana mesafeyi (cm), her bir dörtgendeki süre %,sini, prob denemesi sirasinda uzatilmis hedef platform halkasindaki süre %"sini, prob denemesi sirasinda uzatilinis hedef platform halkasindan geçis sayisini ve hizi (cm/s) kapsiyordu. 7.3.3 &glamsal korku kosullama testi Baglamsal ve ipuçlu. korku kosullamasi, korkuya bagli ögrenme ve geri getirmeyi degerlendirmek için yapildi. Test, Med Associates Instrumentsîan bölmeler kullanilarak yapildi. Ilk gün fareler, taban çizgisi kayitlari için 2 dakika süreyle bir bölme içerisine konuldu (Baglam A) ardindan dört adet ton soklu eslestirme (kosullu uyaranlar, CS) yapildi. Her bir kosullu/kosulsuz uyari eslestiimesinde sok 30 saniyelik ton uyarisi (5000 Hz, 80 dB), 2 saniyelik ayak soku (0.7 mA) ile birlikte soiilandirildi. Ikinci gün fareler, herhangi bir kosullu yada kosulsuz uyari olmaksizin 5 dakika süreyle baglam A içerisine konuldu. Deneyin son günü ipucu testleri için yeni bir bölme (Baglam B; yeni oda, yeni koku ortaini, yeni zemin dokusu, mavi plastik duvar eklentileri, ekstra mavi isik kaynagi ve görsel ipuçlari) kullanildi. 2 dakikalik ton öncesi bir süreyi takiben 8 dakikalik bir test süresi zarfinda hayvanlara soklar olinaksizin üç ton sunuldu. Donma, minimum 0.75 saniye süreyle tam hareket kaybi olarak tanimlandi. Her bir periyottaki donma yüzdesi bildirildi. 7.4 Insan DS"li beyin örneklerindeki amiloid plaklarinin ACI-DS- 02 ve ACI-DS-03 asilarinin indükledigi anti-Aß antikorlari ile immüno-boyanmasi DS°li kisilerin beyin kesitleri, ACI-DS-02 asisi ile iinmünize edilmis farelerden elde edilen serumlardaki asi türevli anti-AB antikorlari ile boyandi. ACI-DS-OZ asisi ile iininünize edilmis bes c57BL/6 faresinin serumlarini içeren bir havuz, immüno-boyama prosedürü için 1/1007lük bir seyreltmede kullanildi. Kisacasi 59 yasinda DS"li bir kisinin 10um°lik kriyo-kesitleri, 20 dakika süreyle %4 paraformaldehid (Sigma-Aldrich, 252549) içinde inkübe edildi. Her bir 15 dakika olinak üzere %70 formik asit (Merck, 1002641000) ve %10 Triton X-100 (Sigma, 234729) içinde inkübe edildikten sonra kesitler, 2 saat süreyle PBST (PBS arti %05 Triton X-IOO) içerisinde %10 Normal keçi Serumu (NGS, Invitrogen, 6210072) içinde bloke edildi. %10 NGS içeren PBST içinde primer antikor (immünize edilmis farelerin serumlari) ile inkübasyon, bir gece süreyle yapildi. Ertesi gün ve PBSA içinde durulandiktan sonra kesitler, Alexa Fluor 488›e konjuge edilmis AffiniPure Keçi Anti-Fare IgG"si (Jackson ImmunoResearch, 115-545-146) ile inkübe edildi. Kesitler, ProLong Gold (lnvitrogen, P36931) içine monte edildi. Pozitif kontrol olarak primer antikor anti-Aß 61-310 kullanildi (Covance, SlG-39320, Aß°nin N terminal ucuna karsi 1:10000°lik bir seyreltmede kullanilan anti- Aß). PBS ile immünize edilmis c57BL/6 farelerinin serumlari, negatif kontrol olarak kullanildi. ACI-24 ile immünize edilmis 057BL/6 farelerinin serumlari, bir kontrol olarak kullanildi. ACI-24 asisi, ACI- 24"te kullanilan antijen, bir insan AB 1-15 sekansi iken ACI-DS-Ol asisinin anti jen olarak fare AB 1-15 sekansi ihtiva etmesi farkiyla (bu iki anti jendeki üç ainino asit farkli için bakiniz Sekil 1) ACI-DS-Ol 'e karsilik gelir. 7.5 Istatistiksel analiz Veriler, ortalama ± standart sapma (SD) veya standart ortalama hatasi (SEM) olarak gösterilir. Istatistiksel analiz, iki kuyruklu bagimiz örneklem t testi veya ANOVA ile prisin pad grafigi versiyon 5 kullanilarak yapildi. p<0.05"lik bir olasilik, anlamli sayildi. Ornek 8 ACI-DS-02 ile imm'ûnizasyon, anti-insan Aß antikorlari 'üretti Dört doz ACI-DS-OZ, T365Dn erkek farelerine ve yasi eslestirilmis kontrol 2N farelerine subkütan yoldan ve iki hafta bir uygulandi. Her bir dozdan 7 gün sonra toplanan plazmanin analizi, hem Ts65Dn hem de 2N gruplarindan immünize edilmis farelerde insan Aß42"sine karsi IgG titerleri gösterdi (veriler gösterilmemistir). ACI-DS-OZ ile immünize edilmis T365Dn farelerinin IgG titerleri, 21 ve 35inci günde PBS ile immünize edilmis olanlardan anlamli sekilde farkliydi (tek yollu ANOVA, Tukey posthoc, ayri ayri P = 0.01 ve 0.05). Böylece ACI-DS-OZ, DS,li fare modelinde Aß'nin kendinden toleransini kirabildi. IgM titerleri, ACI-DS-OZ asisi ile iinmünize edilmis farelerin plazmasinda analiz edildi. Aß42 ile yapilan ELISA, immünize edilmis Ts65Dn grubunun, 7nci gün, 35inci gün ve 49uncu günde PBS ile immünize edilmis gruptan daha yüksek IgM titerlerine sahip oldugunu gösterdi (tek yollu ANOVA, Tukey posthoc, ayri ayri P<0.0l, P < 0.05 ve P<0.0l, veriler gösterilmemistir.) Ornek 8 ACI-DS-02 türevli anti-insan Aß antikorlari DS amiloid plaklarini tanir Immüno-boyama deneyi, ACI-DS-02 türevli antikorlarin, DS°li kisilerin beyin ömeklerindeki amiloid plaklarina baglandigini gösterdi (Sekil 6). Boyama, 61510, ticari yollarla elde edilebilen bir anti- amiloid beta antikoru ve ACI-24 türevli antikor ile elde edilen boyamaya benzerdi. ACI-24 asisi, ACI-24"te kullanilan antijen, bir insan AB 1-15 sekansi iken ACI-DS-Ol asisinin anti jen olarak fare Aß 1-15 sekansi ihtiva etinesi farkiyla (bu iki anti jendeki üç amino asit farkli için bakiniz Sekil 1) ACI-DS-Ol 'e karsilik gelir. Bir kesitin PBS ile immünize edilmis farelerin serumlari ile inkübe edildigi durumda hiçbir boyama gözlenmedi. Bu sonuç, ACI-DS-02 asisi ile immünizasyonun, DSali kisilerin beynindeki amiloid plaklarini taniyan antikorlar indükledigini isaret eder. Örnek 9 ACI-DS-OZ korku kosullama testinde birlestirerek ögrenmeyi gelistirdi Kosullaina testi sirasinda ACI-DS-OZ asisi ile immünize edilmis Ts65Dn fareleri, her bir kosullu uyariyi aldiktan sonra daha yüksek seviyelerde donma egilimi gösterdi (Sekil 7A). Gelisinis donma, sadece üçüncü kosullu uyarida (CS3) PBS ile iinmünize edilmis Ts65Dn grubundan anlamli sekilde farkliydi (iki yollu ANOVA, süre, P<0.0001, asi trendi (P = 0.09), Bonferroni posttestleri, CS3"te P = 0.05 gösterdi). Ogrenme seansina sinaptik plastisiteye bagli mekanizmanin aracilik ettigi bilinir (Johansen 2011). Bununla birlikte Önceden edinilmis korku hafizasina (baglam, ipucu ve sönümleme seanslari), farkli bir nöronal mekanizmanin aracilik ettigi bilinir. Bu sonuç, ACI-DS-OZ immünizasyonunun, korku kosullamasinin, ögrenmenin meydana geldigi edinme/egitim fazmi gelistirdigini isaret eder. Ornek 10 ACI-DS-03 ile imm'i'inizasyon, anti-insan Aß antikorlari 'üretti Dört doz ACI-DS-03, T365Dn erkek farelerine ve yasi eslestirilmis kontrol 2N farelerine subkütan yoldan ve iki hafta bir uygulandi. Her bir dozdan 7 gün sonra toplanan plazmanin analizi, hem T565Dn hem de 2N gruplarindan immünize edilmis farelerde insan Aß42,sine karsi IgG titerleri gösterdi (veriler gösterilmemistir). ACI-DS-O3 ile immünize edilmis TsöSDn farelerinin IgG titerleri, 21inci günde PBS ile immünize edilmis olanlardan anlamli sekilde farkliydi (tek yollu ANOVA, Tukey posthoc, P : 0.05). Böylece ACI-DS-03, DS°1i fare modelinde Aß"nin kendinden toleransini kirabildi. IgM titerleri, ACI-DS-03 asisi ile immünize edilmis farelerin plazmasinda analiz edildi. Aß42 ile yapilan ELISA, immünize edilmis Ts65Dn grubunun, 7nci ve 49uncu günde PBS ile immünize edilmis gruptan daha yüksek IgM titerlerine sahip oldugunu gösterdi (tek yollu ANOVA, Tukey posthoc, ayri ayri P < 0.001 ve P<0.01, veriler gösterilmemistir.) Ornek ll ACI-DS-03 türevli anti-insan Aß antikorlar] DS amiloid plaklarini tanir Iinmüno-boyaina deneyi, ACI-DS-O3 türevli antikorlarin, DSili kisilerin beynindeki ainiloid plaklarina baglandigini gösterdi (Sekil 8). Boyama, 6E10, ticari yollarla elde edilebilen bir anti-amiloid beta antikoru ve ACI-24 türevli antikor ile elde edilen boyamaya benzerdi. ACI-24 asisi, ACI-24,te kullanilan antijen, bir insan Aß 1-15 sekansi iken ACI-DS-Ol asisinin antijen olarak fare Aß 1-15 sekansi ihtiva etmesi farkiyla (bu iki antijendeki üç ainino asit farkli için bakiniz Sekil 1) ACI-DS-Ol "e karsilik gelir. Kesitin PBS ile iinmünize edilmis farelerin serumlari ile inkübe edildigi durumda hiçbir boyama gözleninedi. Bu sonuç, ACI-DS-03 asisi ile iminünizasyonun, DSsli kisilerin beynindeki ainiloid plaklarini taniyan antikorlar indükledigini isaret eder. Ornek 12 Ateni'ie edilmis Toplam Reflektans Kizilötesi spektroskopisi Lipozomal örnekler, ZnSe kristali üzerinde kurutulmus 15 141"an bir DZO hidratlanniis ince film halinde analiz edildi. Spektrumlar, bir sivi nitro jenle sogutulmus civa-kadmiyum-telurid detektörü ile donatilmis ve bir BioATR-II aygitina baglanmis bir BRUKER TENSOR 27 FTIR spektrometresi ile elde edildi. Her bir spektrum için arka plan olarak temiz ATR kristali kullanilarak 2 cin-l'lik bir çözünürlük ile 2000 tarama toplandi, bunlarin ortalamasi alindi ve FT islemine sokuldu. Ust ve alt frekans katlama sinirlari, 4000 cm-l ve 900 cm-l idi. Ornek bölmesi, kurutulinus hava ile sürekli olarak temizlendi ve bütün ölçümler, 25°C,de yapildi. Sonra edinilen spektrumlar, ainid l bölgesinde kesildi, taban çizgisi düzeltmesi yapildi ve etiketlendi. Genis amid l baiidindaki üst üste binen bilesenleri ortaya çikarmak için daraltma teknikleri [ikinci türev ve fourier kendinden dekonvülsiyon (FSD)] uygulandi. Majör sekonder konformasyonun nitelik degerlendirmesi, saptaiian ana bantlardan, D20,da su frekans araliklari kullanilarak yapildi: b-levha 1613-1637 cni'l, rastgele sarmal 1637-1646 cm`l, a-helis/ilmikler 1646-1662 cm'l, b-dönüsleri 1662- 1682 cm"1, anti-paralel b-levha 1682-1698 cm". Nicelik analizi, 2nci türevde ve FSD spektrumlarinda tek tek bilesenler için baslangiç degerleri olarak tanimlanan bantlar kullanilarak OPUS yaziliminda karsilik gelen uygulama ile egri oturtma yoluyla yapildi. Bilesen piklerinin, karisik Gaussian-Loretzian biçiminde oldugu varsayildi. Tekrar prosesi, frekanslarin sabitlenmesi ve pik genisliklerinin, yogunluklarinin ve biçimlerinin degisken olmasina izin verilmesiyle yapildi ve sonra ikinci tekrar prosesi için frekanslarin da degisken olmasina izin verildi. Sekonder yapi tahminleri, farkli bilesenlerin esit molar absorptivitelerde oldugu varsayilarak her bir sekonder yapi bandi için toplam amid I bölgesinin alan %"sinin hesaplanmasiyla yapildi. TR TR TR TR TR TR TR TR

Claims (14)

ISTEMLER

1. Down sendromlu süjelerde hafiza ve/veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisi ve/Veya iyilestirilmesi ve/Veya engellenmesinde kullaniin için amiloid beta proteininden türetilmis bir antijenik peptit, burada anti jenik peptit, ABI-15 tortularindan olusur ve peptidin N ve/Veya C terminaline baglanmis ve bir lipozoin içinde yeniden biçimlendirilmis bir palinitik asit tarafindan modifiye edilir ve adi geçen Down sendromlu süjelerin beyninde henüz amiloid proteini ile iliskili plaklar gelismemistir.

2. Istem l”e ait antijenik peptit olup burada ABI-15 peptidi, peptidin N ve/Veya C terminaline baglanmis dört palmitik asit tarafindan modifiye edilir.

3. Istem l”e ait antijenik peptit olup burada ABI-15 peptidi, peptidin N ve/veya C terininaline baglanmis iki palinitik asit tarafindan modifiye edilir.

4. Istem l-3°ten herhangi birine göre kullanim için anti jenik peptit olup burada adi geçen bozukluk veya anormallik, bir tanima hafizasi bozuklugu, bir baglamsal birlestirici hafiza bozuklugu, bir birlestirerek ögrenme bozuklugu, bir gerçekleri ve olaylari bildirme hafizasi bozuklugu, eylemsel hafiza bozukluklari, bir dil yetisi disfonksiyonu, bir görsel mekansal bozukluk, yürütücü fonksiyonlarda bir azalma, kisilik degisiklikleri, duygusal degisiklikler, apraksi, ögrenilmis motor görevleri yapma bozukluklari, piramidal ve ekstrapiramidal bulgular ve ayrica miyoklonus veya nöbetler veya bunlarin bir kombinasyonu ile ilgilidir.

5. Istem 1 ila 47ten herhangi birine göre kullanim için anti jenik peptit olup, burada Down sendromlu adi geçen süje, (a) bir genç ila orta yasli bir sü je; veya ((1) bir çocuk yasta sü je; veya (e) 65 yas alti bir sü jedir.

6. Istem 1 ila 5”ten herhangi birine göre kullanim için anti jenik peptit olup, burada adi geçen kullanim, a) hafizanin iyilesmesine ve/Veya onarilmasina yol açar; ve/Veya b) tedavi edilen süjede algi kapasitesinin korunmasinda bir artisa veya tam bir onarima yol açar; ve/Veya c) hafiza ve/veya algi kapasitesinin artmasina veya onarilmasina yol açar; ve/Veya d) istenmeyen yan etkiler indüklemez.

7. Beyinde Aß ile iliskili plaklar gelismesinin engellenmesine yönelik, istein 1 ila 6°dan herhangi birine göre kullaniin için anti jenik peptit.

8. Down sendromlu süjelerde hafiza ve/Veya algi bozukluklarinin veya anormalliklerinin tedavisinde ve/Veya iyilestirilmesinde ve/Veya engellenmesinde kullanim için farmas'otik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/Veya eksipiyan ile birlikte terap'otik olarak etkili miktarda istem 1 ila 7,den herhangi birinde tanimlandigi gibi anti jenik peptidi içeren bir kompozisyon olup burada adi geçen Down sendroinlu süjelerin beyninde henüz amiloid proteini ile iliskili plaklar gelismemistir.

9. Istem 8°e göre kullaniin için kompozisyon, bir adjuvan içerir.

10. Istem 9°a göre kullanim için kompozisyon olup burada adjuvan, lipit A°dir.

11. Istem lO'a göre kullanim için kompozisyon olup burada adjuvan, detoksifiye edilmis bir lipit A”d1r.

12. Istem 9”a göre kullaniin için kompozisyon olup, burada adjuvan, monofosforil veya difosforil lipit A, alum, kalsiyum fosfat, interl'okin 1 ve/Veya polisakaridler ve proteinler içeren mikrokapsûllerdir.

13. Down sendromlu bir sü jede nörodejenerasyonun engelleninesine yönelik, Istem 1 ila 7°den herhangi birine göre kullanim için antijenik peptit veya istem 8 ila 12”den herhangi birine göre kullanim için kompozisyon.

14. Down sendromlu bir süjede amiloid beta proteinine karsi bir immün yaniti indükleninesine yönelik, istem 1 ila 7,den herhangi birine göre kullanim için antijenik peptit veya istem 8 ila 12°den herhangi birine göre kullanim için kompozisyon.