TARIFNAME PEPTITLER VE KULLANIMLARI Bulusun Sahasi Mevcut bulus bir peptit, peptit içeren bilesimler ve bunlarin bir ilaç olarak kullanimlari ile ilgilidir. Peptit veya bilesimin uygulandigi bir substrat da saglanir. Bulusun Alt Yapisi Antimikrobiyal peptitler, dogustan gelen immün sistemin anahtar efektör molekülleri ve tüm ökaryotik organizmalarin mikrobiyal enfeksiyonlarina karsi birinci savunma hattinin ayrilmaz bilesenleridir. Bir dizi prokaryotik organizma, diger mikroorganizmalarin yol açtigi sorunlar ile mücadele etmeye yönelik araçlar olarak antimikrobiyal peptitleri de kullanir. Birçok antimikrobiyal peptidin karakterize edici Özelligi, mikrobiyal zarin negatif yüklü fosfolipidleri ile etkilesimi kolaylastiran katyonik Özellikleridir, bu da membran geçirgenligini takiben mikrobiyal lizis ve ölüme yol açar. Örnegin, antimikrobiyal peptit moleküllerinin, lipit çift katmaninda gerilime bagli kanallari toplayabildigi ve mikroorganizmanin hem iç hem de dis zarini geçirgenlestirilmesiyle sonuçlandigi gösterilmistir (Lehrer, R. 1., J. Clin. Investigation, 84:553 (1989)). Bu moleküllerin amfifilik yapisi, hidrofobik rezidünün, lipid ikili katmanina elektrostatik çekim yoluyla insersiyonunu kolaylastirabilirken, polar rezidüler, zarin içine ve üstüne yönelmektedir. ilaçlara dirençli mikroorganizmalar, özellikle bakteriler, enfeksiyon oranlari artmaya devam ettikçe ve etkili kontrol yöntemleri gittikçe daha sinirli hale geldikçe, giderek daha problemli hale gelmektedir. Antibiyotiklerin indiskriminat reçetelenmesi ve hastalarin tedavi rejimlerine uymamasi ile birlikte, antibiyotiklerin etkilerini yenmek için araçlar gelistirmis veya edinmis olan mikroorganizmalar için son 50 yil boyunca antibiyotiklerin prolifik kullanimi seçilmistir. Ilaçlara dirençli organizmalarin bulasmasi ve kontrolü saglik hizmetleri alanindaki en önemli problemlerden biri haline gelmektedir. Staphylococcus spp., Enterococcus spp., Listeria spp., Closrri'di'um spp., Cvrynebacteriumspp., Nacardia spp., Bacillus spp. Streptococcus spp. dahil olmak üzere tüm Gram pozitif cinsler ve metisilin (meticilin) gibi antibiyotiklere karsi çesitli direnç seviyeleri gelistirmis veya elde etmis olanlar dahil, Gram negatif cins Escheric/ti'a spp., Pseudomonas spp., Klebsi'ella spp. ve Acetinobacter spp. gibi özel ilgi alanlaridir. Ilgili diger Gram pozitif patojenler Enterobacteriaceae (genisletilmis spektrumlu ß-laktamaz (GSBL) veya karbapenemaz üretenler). S. epidermidi's gibi koagülaz-negatif Staphylococci de ilaca dirençli önemli nozokomiyal patojenler olarak ortaya çikmistir. Metisilin veya ilaca çok dirençli bakterilerin katkida bulundugu veya neden oldugu enfeksiyonlarin tedavi seçenekleri hali hazirda sinirlidir ve bu tür organizmalari inhibe eden veya öldüren yeni tedavileri kesfetmeye acil ihtiyaç bulunmaktadir. Özel ilgi konusu olan diger bakteriyel patojenler arasinda Mycobacteri'um spp., örnegin Mycobacteri'um tuberculosis; Enterobacter spp.; Campylobacter spp.; Salmonella spp.; Helicobacter spp., Örnegin Helicobcicter pylori; Neisseria spp., örnegin Neisseria gonorrhea, Neisseria meningitidis; Borrelia burgdoigferi; Shigella spp., Örnegin Shigellaflexnerii; Haemophilus spp., Örnegin Haemophilus influenzae; Chlamydia spp., Örnegin Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae, Chlamydia psittaci; Francisella mlarensis; Yersi'ni'a spp., Örnegin Yersini'a pestis; Treponema spp.; Biirkholderia spp.; Örnegin Burkholderia mallei ve B. pseudomallei bulunmaktadir. Pseudomonas aeruginosa, solunum yolu enfeksiyonlari, idrar yolu enfeksiyonlari, dermatit, yumusak doku enfeksiyonlari, bakteriyemi ve çesitli sistemik enfeksiyonlara, Özellikle siddetli yaniklari olan hastalarda ve kanser ve AIDS hastalarinda, immün sistemi baskilanmis bir patojendir. Pseudomonas aeruginosa'nin neden oldugu solunum yolu enfeksiyonlari, neredeyse yalnizca, düsük solunum yolu veya riskli sistemik bir savunma mekanizmasi (örnegin kistik fibroz veya kronik obstrüktif akciger hastaligi olan hastalarda) olan kisilerde görülür. Primer pnömoni, kronik akciger hastaligi ve konjestif kalp yetmezligi olan hastalarda görülür. Bakteriyemik pnömoni yaygin olarak kemoterapi gören nötropenik kanser hastalarinda görülür. Pseudomorias aeruginosa'nin mukoid suslari ile kistik fibroz hastalarinin alt solunum yolu kolonizasyonu yaygin ve tedavisi zordur. Pseudomonas aeruginosa enfeksiyonlarini tedavi etmek için etkili bir yöntem gelistirmeye ihtiyaç vardir. Staphylococcus aureus, normalde ciltte ve birçok saglikli insanin burnunda karsilasilan firsatçi bir patojendir, tamamen zararsiz bir sekilde yasar Bununla birlikte, S. aureus, kazara veya cerrahi olarak vücuda girdiginde, apse, kaynama, sivilce, impetigo ve yara enfeksiyonlarina neden olabilir. Enfeksiyon kan dolasimina girerse ve vücudun farkli bölgelerine giderse, kan zehirlenmesine (septisemi), kemik enfeksiyonuna (osteomiyelit), kalp kapakçik enfeksiyonuna (endokardit) ve akciger enfeksiyonuna (zatürree) neden olabilir. MRSA, reçete edilen birçok antibiyotige dirençli bir S. aureus türüdür, metisilin içerir (Birlesik Kralliktaki S. aureus enfeksiyonlarinin ~ %40'1, metisilin ve diger antibiyotiklere dirençlidir) ve genel olarak popüler basinda bir "superbug" olarak adlandirilir. MRSA, saglik hizmetleri ile iliskili enfeksiyonlarla ilgili en yaygin mikroplardan biridir. Enfeksiyonlar normal olarak hastanelerle ve özellikle yogun bakim ünitelerindeki, yanik ünitelerindeki ve ortopedik koguslardaki hastalar dahil, hassas ve/veya zayif hastalarla sinirlidir. MRSA'nin tedavisi daha zordur, çünkü birçok antibiyotik etkisizdir ve etkili olanlarin çogu zaman intravenöz olarak uzun süre (birkaç hafta) ve daha yüksek dozlarda verilmesi gerekir, bu da alternatif antimikrobiyal tedaviler gelistirme ihtiyacini vurgular. Mikrobiyal patojenler katyonik peptitlere karsi kolayca direnç kazanmadigindan, milyonlarca yillik bir arada varolustan kaynaklanan evrimsel baskiya ragmen, çekici terapötik hedefler olarak kalirlar. Ortak bekleyen uygulamalarimizda, WO 2006/018652 ve WO 2008/093058 sayili belgelerde, bakteriyel enfeksiyonlar dahil olmak üzere mikrobiyal enfeksiyonlari tedavi etmek için kullanilabilecek peptitlerin tanimini tarif etmekteyiz. Bir mikrobiyal biyofilm, polimerik maddelerin hücre disi bir matrisinde gömülü olan ve biyolojik veya biyotik olmayan bir yüzeye yapisan bir mikrobiyal hücre toplulugudur. Bu biyofilmlerde bir dizi mikroorganizma (bakteri, mantar ve/veya protozoa, bunlarla iliskili bakteriyofajlar ve diger virüsler) bulunabilir. Biyofilmler dogada her yerde bulunur ve genellikle çok çesitli ortamlarda bulunur. Biyofilmler, bilimsel ve tibbi topluluk tarafindan birçok enfeksiyonda rol oynamasi ve özellikle enfeksiyon tedavisinin kontrolsüzlügüne katkisi nedeniyle giderek daha fazla taninmaktadir. Biyofilm olusumu yalnizca mikroplarin bir yüzeye yapisma kabiliyeti ile sinirli degildir. Bir biyofilmde büyüyen mikroplar, biyofilmin baslangiçta gelistigi asil fiziksel substratta oldugundan birbirleri arasinda daha fazla etkilesime girebilir. Örnegin, bu fenomen, biyofilmlerdeki hücreler arasinda planktonik hücrelerden daha yüksek oranda meydana gelen konjugatif gen transferini desteklemektedir. Bu, bakteriler arasinda yatay gen transferi için arttirilmis bir firsati temsil eder ve antibiyotik direnci veya virülans belirleyici genlerin, dirençli mikroplardan duyarli mikroplara transferini kolaylastiracagi için önemlidir. Bakteriler, nispi algilama olarak bilinen, sinyalleme moleküllerinin çevreye salindigi ve konsantrasyonlari çevreleyen mikroplar tarafindan tespit edilebildigi bir sistemle birbirleriyle iletisim kurabilir. Çogunlugu algilama, bakterilerin davranislarini koordine etmelerini saglar, böylece hayatta kalma yeteneklerini arttirir. Çogunlugu algilamaya verilen yanitlar, besinlerin mevcudiyetine adaptasyon, ayni besin maddeleri için rekabet edebilecek diger mikroorganizmalara karsi savunma ve bakteriler için potansiyel olarak tehlikeli toksik bilesiklerin önlenmesini içerir. Bir konakçinin (örnegin, insanlar, diger hayvanlar veya bitkiler gibi) enfeksiyonu sirasinda patojenik bakterilerin, enfeksiyonun basarili bir enfeksiyon olusturabilmesi için konakçinin immün tepkisinden kaçmak amaciyla virülanslarini koordine etmesi çok önemlidir. Biyofilm olusumu, kistik fibroz ve periodontit gibi birçok bulasici hastaliklarda, kan dolasimi ve idrar yolu enfeksiyonlarinda ve kalici tibbi cihazlarin varliginin bir sonucu olarak kilit rol oynar. Biyofilm ile iliskili mikroorganizmalarin, konakçilarinda hastaliklari ortaya çikardigi önerilen mekanizmalar, asagidakileri içerir: (i) antimikrobiyal maddenin, biyofilm matrisi vasitasiyla penetrasyonunu geciktirme, (ii) hücre veya hücre agregalarinin, kalici tibbi cihaz biyofilmlerinden ayrilmasi, (iii) endotoksin üretimi, (iv) konakçi bagisiklik sistemine direnç, (v) antimikrobiyal direnç ve/veya virülans belirleyici genlerin yatay gen transferi yoluyla dirençli organizmalarin üretilmesi için bir nis saglanmasi ve (vi) degistirilmis büyüme hizi (yani metabolik uyusukluk) (Donlan and Costerton, Clin Microbiol Rev 15: 167-193, 2002; Parsek and Singh, Annu Rev Microbiol 57: 677-701, 2003; Costerton JW, Resistance of biofilms to stress. In 'The biofilm primer'. (Springer Berlin Heidelberg). pp. 56-64.2007). Son deneysel kanitlar, metabolize olmayan israrci hücrelerin (uyuyan hücreler) küçük bir alt popülasyonunun biyofilmleri içindeki varligini göstermistir. Bu hücrelerin, biyofilmin antimikrobiyal maddelere karsi yüksek direnç/toleransindan sorumlu olabilecegi düsünülmektedir. Çoklu ilaca toleransli israrci hücreler hem planktonik hem de biyofilm popülasyonlarinda bulunur ve mayalarin ve bakterilerin hayatta kalma fonksiyonunu bu alt popülasyona atayan benzer stratejiler gelistirdigi anlasilmaktadir. Polimerik matris tarafindan sunulan koruma, israrci hücrelerin eliminasyondan kaçmasina ve yeniden popülasyon için bir kaynak olarak kullanilmasina izin verir. Israrci hücrelerin mikrobiyal biyofilmlerin çoklu ilaç toleransindan büyük ölçüde sorumlu olabilecegine dair kanitlar vardir (LaFleur et al., Antimicrob Agents Chemother. 50: 3839-46, 2006; Lewis, Nature Reviews Microbiology 5, 48-56 2007). Bu nedenle, mikrobiyal enfeksiyonlari tedavi etmek için kullanilabilecek baska ajanlara ihtiyaç vardir. Özel olarak, örnegin Staphylococci, Streptococci, Acinetobacter spp, Klebsiella spp., E coli' ve Pseudomonas sppfnin neden oldugu bakteriyel enfeksiyonlarin tedavisinde kullanilabilen baska antimikrobik aktif maddeler için ihtiyaç devam etmektedir. Biyofilrn olusumunu önlemek ve mikrobiyal biyofilmlerle iliskili kosullari tedavi etmek için daha iyi tedaviler için acil bir gereksinim bulunmaktadir. Chen et al., (2003), kisa hidrofobik ve balik-zengin peptitlerin antibakteriyel aktivitesini açiklamaktadir. Antibakteriyel aktivitenin (Ecoli, S. aureus, E. faecalis°a karsi) gösterilmis oldugu peptitler arasinda, LFB-RF (RRFFFRFRRF) peptidi bulunur. Mevcut bulus sahipleri, sasirtici bir sekilde, defensinler, kathelidinler, vb. gibi dogal antimikrobiyal peptitlere karsi antimikrobiyal aktiviteyi gelistiren peptitleri tanimlamislardir. Peptitler güçlü antimikrobiyal özelliklere sahipken, in vitro ve in vivo olarak hayvanlarda ve insanlarda düsük toksisite sergilerler. Bulusun Açiklamalari Mevcut bulusun bir birinci yönüne göre, RRRFRFFFRFRRR amino asit dizisinden olusan bir peptit saglanmistir. Bulusun peptidi, digerlerinin yani sira, mikrobiyal enfeksiyonlarin tedavisinde veya önlenmesinde, bunlarla sinirli olmamak üzere özellikle Staphylococcus Spp. ve Pseudomonas spp.`nin neden oldugu bakteriyel enfeksiyonlarin tedavisinde faydalidir. Mevcut bulusun peptitleri ayrica bu ve diger bakterilerin neden oldugu biyofilm enfeksiyonlarinin önlenmesi ve tedavisinde de faydalidir. Bir uygulamaya göre, peptitteki amino asitlerin tümü arginin ve fenilalanindir. Genel olarak, peptitteki amino asitlerin en az %55'i arginin amino asitleri, uygun sekilde peptitteki amino asitlerin en az %60'1 (örnegin %61) arginin amino asitleridir. Genel olarak, peptitteki amino asitlerin en az %20`si fenilalanin amino asitleri, uygun sekilde en az %25'i, daha uygun sekilde, peptitteki amino asitlerin en az %30'u, tipik olarak yaklasik %30 ila 40'] (örnegin %38) fenilalanin amino asitleridir. Mevcut bulusun peptidinin amino asitleri D veya L-amino asitleri olabilir. Amino asitler, burada tanimlandigi gibi katyonik bir amino asidin optik izomerleri, örnegin D veya L-amino asitler olabilir. Amino asitler dogal olarak olusan veya sentetik olabilir. Bulus ayrica bilinen izomerleri (yapisal, stereo, konformasyonel ve konfigürasyonel) ve yukaridaki amino asitlerin yapisal analoglari ve dogal olarak (örnegin, translasyon sonrasi modifikasyon) veya fosforilasyon, glikosilasyon, sülfonilasyon ve/veya hidroksilasyon dahil, ancak bunlarla sinirli olmayacak sekilde kimyasal olarak modifiye edilmisleri de içerir. Bir uygulamaya göre, peptit arginin ve fenilalanin amino asitlerinden olusur. Burada kullanildigi sekilde, "hidrofobik" terimi, fizyolojik pH'da yüklenmemis, polar olmayan ve genellikle sulu çözeltiyle püskürtülen bir yan zincire sahip olan bir amino asidi ifade eder. Genel olarak, bir hidrofobik amino rezidüsü, -l.lO'a esit veya bundan büyük hidrofobiklige ve O'a esit veya daha küçük bir yüke sahiptir. Burada kullanilan "katyonik" terimi, O'a esit veya daha büyük bir net yüke sahip olan amino asitleri ifade eder. Genel olarak "katyonik" terimi sifirdan büyük bir net yüke sahip olan amino asitleri ifade eder. Bir uygulamaya göre, peptit l3 amino asitten olusur. Peptit 5 fenilalanin amino asidi içerir. Genel olarak, peptit, içinde fenilalanin sübstitüsyonlarina sahip olan bir arginin omurgasi içerir. Genellikle, peptit, genellikle 3 bitisik arginin amino asidinin en az bir bölümünü içerir. Peptit, 3 bitisik fenilalanin amino asidin en az bir bölümünü içerir, uygun sekilde peptit, 3 bitisik fenilalanin amino asitin en az bir bölümünü içerir. Bir uygulamaya göre, peptit birden fazla fenilalanin bölümü içerir; burada her fenilalanin bölümü, bir veya daha fazla fenilalanin amino asit içerir. Genel olarak, peptit iki veya üç fenilalanin bölümü içerir. Bir uygulamaya göre, peptit terminal fenilalanin amino asitlerini içermez. Tipik olarak, peptit bir veya her iki ucunda arginin amino asit bölümlerini, 1 ila 5 arginin amino asitine sahip uygun sekilde arginin amino asit bölümlerini içerir. Bir uygulamaya göre, peptit N terminusunda bir dizi (örnegin 2 veya daha fazla) fenilalanin amino asit içermez. Mevcut bulusun peptidi simetrik olabilir. Tercihen, peptit asikliktir. Peptit düz Zincirli, diger bir deyisle dogrusal veya dallanmis olabilir. Burada kullanildigi sekliyle "peptit" terimi, genel olarak, peptit baglari ile birlestirilen çok sayida amino asit rezidüsü anlamina gelir. Birbirinin yerine kullanilir ve polipeptit ve protein ile ayni anlama gelir. Mevcut bulusun bir uygulamasina göre, peptit, RRRFRFFFRFRRR grubundan seçilen bir amino asit dizisini içermektedir. Bir uygulamaya göre, peptit fenilalanin ve arginin amino asitleri içerir. Bulusun peptitleri genellikle sentetik peptitlerdir. Peptitler izole edilebilir, saflastirilmis peptitler veya bunlarin varyantlari olabilir, örnegin in vitro olarak, örnegin bir kati faz peptit sentetik yöntemi, enzim katalizli peptit sentezi veya rekombinant DNA teknolojisi yardimiyla sentezlenebilir. Memeli hücreleri, ayri ayri peptitler ve peptit kütüphaneleri için arzu edilmeyen toksisiteye az veya hiç sahip olmayan aktif peptitleri tanimlamak için yapilabilir ve bu kütüphanelerden ayri ayri peptitler veya peptitler, antifungal, antibakteriyel, antiviral, antiprotozoal, anti-parazitik aktivite ve toksisite dahil, ancak bunlarla sinirli olmamak üzere, antimikrobiyal aktivite ve toksisite açisindan taranabilir. Tarifnamenin peptitleri, örnegin serbest asitler, serbest bazlar, esterler ve diger ön ilaçlar, tuzlar ve totomerler gibi farkli formlarda mevcut olabilir ve tarifname, bilesiklerin tüm degisken formlarini içerir. Dolayisiyla, tarifname bulusun bir peptit veya peptit varyantinin tuzunu veya ön ilacini kapsar. Ikinci bir yönüyle, bir ilaç olarak kullanilmak üzere bulusun bir peptidi saglanmistir. Bilesim Mevcut bulusun baska bir yönüne göre, yukarida tarif edildigi gibi peptitleri, bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici, adjuvan, eksipiyan veya seyreltici ile birlikte içeren bir bilesim saglanir. Avantajli olarak, bilesim mevcut bulusun bir peptidini içerir. Bulusun ajanlari, farmasötik olarak kabul edilebilir tuz formunda uygulanabilir. Bu bulusun farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlari, geleneksel kimyasal yöntemlerle bazik veya asidik bir molekül bölümü içeren ana bilesikten sentezlenebilir. Genel olarak, bu tür tuzlar, bu bilesiklerin serbest asit veya baz formlarinin, uygun stokiyometrik miktarda baz veya asit su veya bir organik çözücü içerisinde veya ikisinin bir karisimi içerisinde reaksiyona sokulmasi suretiyle hazirlanabilir; genellikle eter, etil asetat, etanol, izopropanol veya asetonitril gibi sulu olmayan ortamlar tercih edilir. Uygun tuzlarin listeleri, Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., US, 1985, p. 1418,de bulunabilir; ayrica bakiniz Stahl et al, Eds, "Handbook of Pharmaceutical Salts Properties Selection and Use", Verlag Helvetica Chimica Acta ve Wiley-VCH, 2002. Burada "farmasötik olarak kabul edilebilir" ifadesi, saglikli tibbi degerlendirme kapsaminda olan bu bilesiklere, materyallere, bilesimlere ve/veya dozaj formlarina referans vermek için kullanilir, insanlarin dokulari ile temas halinde kullanim için uygundur veya duruma göre, asiri toksisite, tahris, alerjik tepki veya diger sorun veya komplikasyonlara sahip bir hayvan, makul bir fayda/risk orani ile orantilidir. Bu nedenle bulus, ana bilesigin, örnegin inorganik veya organik asitlerden veya bazlardan olusturulan geleneksel toksik olmayan tuzlar veya kuatemer amonyum tuzlari gibi asit veya baz tuzlari yaparak modifiye edildigi, açiklanan bilesiklerin farmasötik olarak kabul edilebilir tuzlarini içerir. Bu tür asit ilaveli tuzlarin örnekleri arasinda asetat, adiat, aljinat, aspartat, benzoat, benzensülfonat, bisülfat, bütirat, sitrat, kamforrat, kamforsülfonat, siklopentanepropiyonat, diglükonat, dodesilsülfat, etansülfonat, fumerat, glikohetan, glikosfat, hemisülfat, heptanoat, heksanoat, hidroklorid, hidrobromid, hidroiyodid, 2-hidr0ksietansülfonat, laktat, maleat, metansülfonat, 2-naftalensülfonat, nikotinat, oksalat, patikat, persülfat, nikotrat, paterat, paterat, paterat, paterat, pirat, piratpaterat, paterat, paterat, pirat, pirataterat, piratikratpaterat; tiyosiyanat, tosilat ve undekanoat bulunur. Baz tuzlari arasinda amonyum tuzlari, sodyum ve potasyum tuzlari gibi alkali metal tuzlari, kalsiyum ve magnezyum tuzlari gibi alkali toprak metal tuzlari, disikloheksilamin tuzlari gibi organik bazlara sahip tuzlar, N -metil-D-glukamin ve bu tür amino asitlere sahip tuzlar bulunur arginin, lisin ve benzerleri bulunur. Ayrica, bazik nitrojen içeren gruplar metil, etil, propil ve bütil klorid, bromitler ve iyodidler gibi düsük alkil halojenürler; dimetil, dietil, dibütil gibi dialkil sülfatlar; ve diamil sülfatlar, desil, loril, miristil ve stearil kloridler gibi uzun zincirli halojenürler, bromitler ve iyodidler, benzil ve fenetil bromidler gibi aralkil halojenürler ve diger maddelerle kuaternize edilebilir. Bulusa ait bir peptit veya peptit varyantinin karboksil gruplarinin tuzlari, alisilmis sekilde örnegin bir metalik hidroksit bazi, örnegin; sodyum hidroksit; bir metal karbonat veya bikarbonat, örnegin sodyum karbonat veya bikarbonat; veya örnegin, trietilamin, trietanolamin ve benzerleri gibi bir amin bazi ile temas ettirilmesiyle hazirlanabilir. Bulusa ait peptit veya peptit varyantlarinin bir amino grubunun N-asil türevleri, nihai yogusma için bir N-asil korumali amino asit kullanilarak veya korumali veya korumasiz bir amino asidin asile edilmesiyle hazirlanabilir. O-asil türevleri, örnegin, bir serbest hidroksi peptidi veya peptit reçinesinin asilasyonu ile hazirlanabilir. Her iki asilasyon, asil halojenürler, anhidritler, asil imidazoller ve benzerleri gibi standart asilleyici reaktifler kullanilarak gerçeklestirilebilir. Tarifname, tarif edilen peptitlerin aktif farmasötik türleri için ön ilaçlar içerir, burada örnegin, bir veya daha fazla fonksiyonel grup korunur veya türetilir ancak karboksilik asitlerin esterleri durumunda in vivo olarak serbest aside veya korunmus aminler durumunda serbest amino grubuna dönüstürülebilen halde oldugu gibi in vivo olarak fonksiyonel gruba dönüstürülebilir. Bu tarifnamede kullanildigi haliyle, "ön ilaç" terimi, örnegin in vivo olarak parent yapiya, örnegin kandaki hidroliz yoluyla dönüstürülen özel yapilari temsil etmektedir. T. Higuchi ve V. Stella Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharrnaceutical Association and Pergamon Press, 1987; H Bundgaard, ed, Design of Prodrugs, Elsevier, 1985 ve Judkins, et al. Synthetic Communications, 26(23), 4351-4367 (l996)°da kapsamli bir tartisma yapilmistir. Bu nedenle ön ilaçlar, geri dönüsümlü bir türevine dönüstürülmüs fonksiyonel bir gruba sahip olan ilaçlari içerir. Tipik olarak, bu tür ön ilaçlar hidrolizle aktif ilaca dönüstürülür. Ön ilaçlar ayrica oksidatif veya indirgeyici bir reaksiyonla aktif ilaca dönüstürülebilen bilesikleri içerir. Örnek olarak asagidakilerden bahsedilebilir: oksidatif aktivasyon, - N- ve O-dealkilasyon, oksidatif deaminasyon, N-oksidasyon, epoksidasyon, indirgeyici aktivasyon, azo indirgeme, sülfoksit indirgeme, disülfit indirgeme, Bioredüktif alkilasyon ve - Nitro indirgemesi. Ön ilaçlarin metabolik aktivasyonlarini belirtilmek gerekirse, nükleotit aktivasyonu, fosforilasyon aktivasyonu ve dekarboksilasyon aktivasyonu bulunmaktadir. Koruyucu gruplarin kullanimi "Protective Groups in Organic Chemistry", edited by J W F McOmie, Plenum Press (1973) ve "Protective Groups iri Organic Synthesis", 2nd edition, T W Greene & F G M Wutz, Wiley-Interscience (1991) belgesinde tam olarak tarif edilmektedir. Dolayisiyla, teknikte uzman kisiler tarafindan, tarif edilen peptitlerin korumali türevleri farmakolojik aktiviteye sahip olmamalarina ragmen, örnegin parenteral veya oral yoldan verilebilir ve daha sonra farmakolojik olarak aktif olan bilesikler olusturmak için vücutta metabolize edilebilirler. Bu tür türevler bu nedenle "ön ilaç" örnekleridir. Tarif edilen bilesiklerin bütün ön ilaçlari tarifname kapsamindadir. Mevcut bulusun bilesimi ayrica bir veya daha fazla farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici, eksipiyan, adjuvan veya seyreltici içerir. Burada "farmasötik olarak kabul edilebilir" ifadesi, saglikli tibbi degerlendirme kapsaminda, insan dokulari, duruma göre makul bir fayda/risk orani ile orantili ve asiri toksisite, irritasyon, alerjik yanit veya baska bir problem veya komplikasyonu olmayan bir hayvan ile temas halinde kullanim için uygun olan bilesikler, malzemeler, bilesimler ve/veya dozaj formlarini belirtmek için kullanilir. Bulusun terapötik peptitleri oral uygulama için hazirlandiklarinda, genellikle farmasötik bir formülasyon veya birim dozaj formu olusturmak için farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici, seyreltici veya eksipiyan ile kombine edilebilirler. Oral uygulama için peptitler, bir toz, granül bir olusum, bir çözelti, bir süspansiyon, bir emülsiyon veya dogal veya sentetik bir polimer veya aktif içeriklerin bir sakizdan alinmasi için reçinede bulunabilir. Aktif peptitler ayrica bir bolus, elektuar veya macun halinde de sunulabilir. Oral olarak verilen bulusa ait terapötik peptitler ayrica sürekli salim için formüle edilebilir, örnegin peptitler kaplanabilir, mikro kapsüllenebilir veya baska bir sürekli dagitim cihazi içine yerlestirilebilir. Bu tür formülasyonlardaki toplam aktif içerikler, formülasyon agirliginin %01 ila 99.9'unu içerir. Böylece, bir veya daha fazla uygun birim dozaj formu; bulusun terapötik peptitleri oral, parenteral (subkütan, intravenöz, intramüsküler ve intraperitoneal dahil), rektal, dermal, transdermal, intratorasik, intrapulmoner, mukozal, intraoküler ve intranazal (solunum) yollari içeren çesitli yollarla uygulanabilir. Terapötik peptitler ayrica bir lipit formülasyonunda veya sürekli salim için formüle edilebilir (örnegin, mikro kapsülleme kullanilarak, bakiniz WO 94/07529 ve US Patent No. 4,962,091).Formülasyonlar, uygun durumlarda, ayri birim dozaj formlarinda uygun bir sekilde sunulabilir ve farmasötik tekniklerinde iyi bilinen yöntemlerden herhangi biriyle hazirlanabilir. Bu yöntemler, terapötik ajanin sivi tasiyicilar, kati matrisler, yari kati tasiyicilar, ince bölünmüs kati tasiyicilar veya bunlarin kombinasyonlari ile karistirilmasi ve daha sonra gerekirse ürünün arzu edilen dagitim sistemine dahil edilmesi veya biçimlendirilmesi asamasini içerebilir. Bulusun terapötik peptitlerini içeren farmasötik formülasyonlar, iyi bilinen ve hali hazirda mevcut olan içerikleri kullanarak teknikte bilinen prosedürlerle hazirlanabilir. Örnegin, peptit bilinen ekspisiyanlar, seyrelticiler veya tasiyicilarla formüle edilebilir ve tabletler, kapsüller, çözeltiler, süspansiyonlar, tozlar, aerosoller ve benzeri sekilde olusturulabilir. Bu tür formülasyonlar için uygun olan eksipiyanlarin, seyrelticilerin ve tasiyieilarin örnekleri arasinda tamponlar, ayrica nisasta, selüloz, sekerler, manitol ve silisik türevler gibi dolgu maddeleri ve genisleticiler bulunur. Baglayici maddeler ayrica karboksimetil selüloz, hidroksimetilselüloz, hidroksipropil metilselüloz ve diger selüloz türevlerini, aljinatlar, jelatin ve polivinilpirrolidon gibi maddeler içerilebilir. Gliserol gibi nemlendirici maddeler, kalsiyum karbonat ve sodyum bikarbonat gibi parçalayici maddelere dahil edilebilir. Parafin gibi çözülmeyi geciktirici ajanlar da dahil edilebilir. Kuaterner amonyum bilesikleri gibi emilim hizlandiricilari da dahil edilebilir. Setil alkol ve gliserol monostearat gibi yüzey aktif maddeler dahil edilebilir. Kaolin ve bentonit gibi adsorptif tasiyicilar dahil edilebilir. Talk, kalsiyum ve magnezyum stearat ve kati polietil glikoller gibi yaglayicilar da dahil edilebilir. Koruyucular da eklenebilir. Bulusun bilesimleri ayrica selüloz ve/veya selüloz türevleri gibi kalinlastirici maddeler içerebilir. Ayrica, ksantan, guar veya karbon zamki veya arap zamki veya alternatif olarak polietilen glikoller, bentonlar ve montmorillonitler ve benzerleri gibi zamklar içerebilirler. Örnegin, bulusun peptitlerini içeren tabletler veya kapletler, kalsiyum karbonat, magnezyum oksit ve magnezyum karbonat gibi tamponlama maddelerini içerebilir. Uygun tamponlama maddeleri ayrica bir tuzdaki asetik asit, bir tuzdaki sitrik asit, bir tuzdaki borik asit ve bir tuzdaki fosforik asiti içerebilir. Kapletler ve tabletler ayrica, selüloz, önceden jelatinize edilmis nisasta, silikon dioksit, hidroksil propil metil selüloz, magnezyum stearat, mikrokristalli selüloz, nisasta, talk, titanyum dioksit, benzoik asit, sitrik asit, misir nisastasi, mineral yag, polipropilen glikol, sodyum fosfat, çinko stearat ve benzerleri gibi aktif olmayan maddeleri de içerebilir. Bulusa ait en az bir peptit içeren sert veya yumusak jelatin kapsüller, jelatin, mikrokristalli selüloz, sodyum loril sülfat, nisasta, talk ve titanyum dioksit ve benzerleri gibi aktif olmayan içerikler ve ayrica polietilen glikoller (PEG'ler) ve bitkisel yag içerebilir. Ayrica, bulusun bir veya daha fazla peptidi içeren enterik kapli kapletler veya tabletler, midede parçalanmaya direnç gösterecek ve duodenumun daha nötr ila alkalin ortaminda çözünecek sekilde tasarlanmistir. Bulusun terapötik peptitleri ayrica uygun oral uygulama için iksirler veya çözeltiler halinde veya örnegin intramüsküler, subkütan, intraperitoneal veya intravenöz yollarla parenteral uygulama için uygun çözeltiler olarak formüle edilebilir. Bulusun terapötik peptitlerinin farmasötik formülasyonlari ayrica sulu veya susuz bir çözelti veya dispersiyon veya alternatif olarak bir emülsiyon veya süspansiyon veya merhem formunu alabilir. Dolayisiyla, terapötik peptitler parenteral uygulama için formüle edilebilir (örnegin enjeksiyon, örnegin bolus enjeksiyonu veya sürekli infüzyon) ve birim doz formunda ampuller, önceden doldurulmus siringalar, küçük hacimli infüzyon kaplari veya çok dozlu kaplar olarak sunulabilirler. Yukanda belirtildigi gibi, dozaj formunun raf ömrünün korunmasina yardimci olmak için koruyucu maddeler eklenebilir. Aktif peptitler ve diger içerikler, yagli veya sulu tasitlarda süspansiyonlar, çözeltiler veya emülsiyonlar olusturabilir ve askida birakma, stabilize edici ve/veya dagitici maddeler gibi formüle edici ajanlar içerebilir. Alternatif olarak, aktif peptitler ve diger içerikler, steril kati aseptik izolasyonu veya kullanimdan önce uygun bir vehikül, örnegin, steril, pirojen içermeyen su ile yapilanma için çözeltiden liyofilizasyon yoluyla elde edilen toz formunda olabilir. Gerektiginde, antioksidanlar, surfaktanlar, diger koruyucular, film Olusturucu, keratolitik veya komedolitik maddeler, parfümler, aromalar ve renklendiriciler arasindan seçilen bir adjuvan ilave edilebilir. T-bütilhidrokinon, bütillenmis hidroksianisol, bütillenmis hidroksitolüen ve a-tokofero] ve türevleri gibi antioksidanlar eklenebilir. Bu formülasyonlar, teknik alanda iyi bilinen farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyicilari, vehikülleri ve adjuvanlari içerebilir. Örnegin, suya ek olarak, aseton, asetik asit, etanol, izopropil alkol, dimetil sülfoksit gibi çözücüler, "Dowanol" adi altinda satilan ürünler gibi glikol eterler, poliglikoller ve polietilen glikoller, kisa Zincirli asitlerin Cl-C4 alkil esterleri, etil veya izopropil laktat, "Miglyol" adi altinda satilan ürünler gibi yag asidi trigliseritleri, izopropil mitrisat, hayvansal, mineral ve bitkisel yaglar ve polisiloksanlardan seçilen fizyolojik açidan kabul edilebilir bir veya daha fazla organik çözücü(1er) kullanan çözeltiler hazirlamak mümkündür. Tercihen, bilesim, bulusa ait terapötik peptitlerin farmasötik bir formülasyonu formundadir, ayrica pcptidi içeren bir çözücü veya seyreltici formunu da alabilir. Çözücüler veya seyrelticiler, asit çözeltileri, dimetilsülfon, N-(2- merkaptopropionil) glisin, 2-n-n0ni1-1,3-di0ksolan ve etil alkol içerebilir. Tercihen çözücü/seyreltici asitli bir çözücüdür, örnegin asetik asit, sitrik asit, borik asit, laktik asit, propiyonik asit, fosforik asit, benzoik asit, bütirik asit, malik asit, malonik asit, oksalik asit, süksinik asit veya tartarik asit olabilir. Mevcut bulusun farmasötik formülasyonlari, istege bagli bilesenler olarak, farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyicilari, seyrelticileri, çözündürücü veya emülsifiye edici ajanlari ve teknikte bulunan tipte tuzlari içerebilir. Bu tür maddelerin örnekleri, fizyolojik olarak tamponlanmis tuzlu su çözeltileri ve su gibi normal tuzlu su çözeltilerini içerir. Mevcut bulusun farmasötik formülasyonlarinda faydali olan vehiküllerin ve/veya seyrelticilerin spesifik sinirlayici olmayan örnekleri arasinda su ve fosfat tamponlu tuzlu çözeltiler pH 70-80 gibi fizyolojik olarak kabul edilebilir tamponlu tuzlu çözeltiler bulunur. Daha tercihen, çözücü bir asetik asit çözeltisidir. Çözücü, örnegin asetik asit çözeltisi, bilesimde %1, %0.5, %025, %01, %005 veya %001 daha az bir konsantrasyonda asit, örnegin asetik asit olarak bulunabilir. Mevcut bulusun bilesimi bir veya daha fazla ilave antimikrobiyal madde içerebilir. Özellikle, mevcut bulusun bilesimi bir veya daha fazla ilave antibakteriyel madde içerebilir. Ayni zamanda, mevcut bulusun bir veya daha fazla peptidini ve bir veya daha fazla baska antimikrobiyal, özellikle bir veya daha fazla baska antibakteriyel ajani içeren kombinasyon ürünleri de tasarlanmaktadir. Mevcut bulusun bilesimi, bir veya daha fazla sisteamin (NMOOl) ve 10 ila 20 kDa poli-L-lisin hidrobromid (NP108), 15 ila 30 kDa poli-L-lisin hidroklorid (NPIOI) ve 5 ila 15 kDa poli-L- arginin hidroklorid (NP121) gibi polilisin içerebilir. Ek olarak, peptitler Sürekli salimli dozaj formlari ve benzerleri olarak formülasyona çok uygundur. Formülasyonlar aktif peptidi, örnegin bagirsak veya solunum yolunun belirli bir bölümünde, muhtemelen bir süre zarfinda salacak sekilde olusturulabilir. Kaplamalar, zarflar ve koruyucu matrisler, örnegin polilaktid-glikolatlar, lipozomlar, mikroemülsiyonlar, mikropartiküller, nanopartiküller veya balmumlari gibi polimerik maddelerden yapilabilir. Bu kaplamalar, zarflar ve koruyucu matrisler, kalici cihazlari, örnegin stentler, kateterler, periton diyalizi borulari, bosaltma cihazlari ve benzerlerini kaplamak için yararlidir. Topikal uygulama için aktif ajanlar, teknikte bilindigi gibi bir hedef alana dogrudan uygulama için formüle edilebilir. Topikal uygulama için esas olarak sartlandirilmis formlar, örnegin kremler, sütler, jeller, tozlar, dispersiyon veya mikroemülsiyonlar, daha çok veya daha az kalinlastirilmis losyonlar, emprenye edilmis pedler, merhemler veya çubuklar, aerosol formülasyonlari (örnegin, spreyler veya köpükler), sabunlar, deterjanlar, losyonlar veya sabun kaliplari formunu alir. Bu amaç için diger geleneksel formlar, yara sargilarini, kaplanmis bandajlari veya diger polimer kaplamalari, merhemleri, kremleri, losyonlari, macunlari, jöleleri, spreyleri ve aerosolleri içerir. Dolayisiyla, bulusun terapötik peptitleri dermal uygulama için yamalar veya bandajlar yoluyla iletilebilir. Alternatif olarak, peptit, poliakrilat veya akrilat/vinil asetat kopolimer gibi yapiskan bir polimerin bir parçasi olarak formüle edilebilir. Uzun süreli uygulamalar için mikro gözenekli ve/veya nefes alabilen sirtli laminatlarin kullanilmasi arzu edilebilir, bu nedenle cildin hidrasyonu veya katlanmasi en aza indirilebilir. Sirt tabakasi, istenen koruyucu ve destek fonksiyonlarini saglayacak herhangi bir uygun kalinlikta olabilir. Uygun bir kalinlik genellikle yaklasik 10 ila yaklasik 200 mikron olacaktir. Topikal uygulamaya yönelik farmasötik formülasyonlar, örnegin yaklasik 0.001 mg/ml i1a yaklasik 100 mg/ml arasinda, örnegin 0.] mg/ml ila 10 mg/ml arasinda, tedavi edilecek endikasyon veya hastaliga Özgü mevcut bulusa ait peptitlerden bir veya daha fazla miktarda içeren fizyolojik olarak kabul edilebilir tamponlu bir salin çözeltisi içerebilir. Merhemler ve kremler, örnegin, uygun koyulastirici ve/veya jellestirici ajanlarin ilavesi ile sulu veya yagli bir baz ile formüle edilebilir. Losyonlar sulu veya yagli bir baz ile formüle edilebilir ve genel olarak ayrica bir veya daha fazla emülsifiye edici ajan, stabilize edici ajan, dagitici ajan, süspanse edici ajan, kalinlastirici ajan veya renklendirici ajan içerir. Aktif peptitler ayrica örnegin U.S. Patentleri No. 4,140,122, 4,383,529'da; veya 4,051,8423de açiklandigi gibi iyontoforez yoluyla da verilebilir. Topikal bir formülasyonda mevcut bulusa ait terapötik bir maddenin agirlikça yüzdesi, çesitli faktörlere bagli olacaktir, ancak genel olarak formülasyonun toplam agirliginin %001 ila 95`i ve tipik olarak agirlikça %0.l- 85'i olacaktir. Göz damlasi veya burun damlasi gibi damlalar, bir veya daha fazla dagitici ajan, çözündürücü ajan veya süspanse edici ajan içeren sulu veya sulu olmayan bir bazda bir veya daha fazla terapötik peptit ile formüle edilebilir. Sivi Spreyler pompalanabilir veya basinçli paketlerden rahatça uygulanir. Damlalar, basit bir damlalik kapakli sise ile, sivi içerigi damla damla vermek üzere uyarlanmis plastik bir sise veya özel olarak sekillendirilmis bir kapakla iletilebilir. Terapötik peptit ayrica agiz veya bogazda topikal uygulama için formüle edilebilir. Örnegin, aktif içerikler ayrica bir aromali baz, genellikle sükroz ve akasya veya kitre ihtiva eden bir hap; bilesimi jelatin ve gliserin veya sükroz ve akasya gibi inert bir bazda içeren pastiller; ve bu bulusun bilesimini uygun bir sivi tasiyici içinde içeren gargaralar olarak formüle edilebilir. Bulusun peptitleri ayrica solunum sistemine de uygulanabilir. Dolayisiyla, mevcut bulus ayrica, bulusun yöntemlerinde kullanim için aerosol farmasötik formülasyonlari ve dozaj formlari saglar. Genel olarak, bu tür dozaj formlari, spesifik bir enfeksiyon, endikasyon veya hastaligin klinik semptomlarini tedavi etmek veya önlemek için etkili olan bulusun ajanlarindan en az birinin bir miktarini içerir. Mevcut bulusun yöntemine göre tedavi edilmis bir enfeksiyon, endikasyon veya hastaligin bir veya daha fazla semptomunun herhangi bir sekilde istatistiksel olarak zayiflatilmasi, bulusun kapsami dahilinde bu türlü bir enfeksiyon, endikasyon veya hastaligin tedavisi olarak kabul edilir. Alternatif olarak, inhalasyon veya insüflasyon yoluyla uygulama için bilesim, kuru bir toz, örnegin terapötik ajanin bir toz karisimi ve laktoz veya nisasta gibi uygun bir toz baz formunda olabilir. Toz bilesimi, örnegin kapsül veya kartuslardaki birim dozaj formunda veya örnegin, tozun bir inhalatör, insüflatör veya ölçülü dozlu bir inhaler yardimi ile uygulanabilecegi jelatin veya blister paketleri olarak sunulabilir (örnegin, bakiniz Newinan, S. P. in Aerosols and the Lung, Clarke, S. W. ve Davia, D. eds., pp. 197-224, Butterworths, London, England, 1984°de açiklanan basinçli ölçülü doz inhaleri (MDI) ve kuru toz inhaleri). Mevcut bulusa ait terapötik peptitler, bir aerosol veya inhaler formda uygulandiginda sulu bir çözeltide de uygulanabilir. Bu nedenle, diger aerosol farmasötik formülasyonlari, örnegin, mevcut bulusa ait tedavi edilecek endikasyon veya hastalik için spesifik olan bu bulusa ait peptitlerin yaklasik 0.001 mg/ml ila yaklasik 100 mg/ml arasinda bir veya daha fazla içeren bir fizyolojik olarak kabul edilebilir tamponlu salin çözeltisi içerebilir. Ince bölünmüs kati peptit veya bir sivi içinde çözünmeyen veya süspanse edilmemis nükleik asit parçaciklari formundaki kuru aerosol de bu bulusun uygulamasinda yararlidir. Mevcut bulusun peptitleri toz haline getirme tozlari olarak formüle edilebilir ve ortalama parçacik büyüklügü yaklasik 1 ila 5 um, alternatif olarak 2 ila 3 um olan ince bölünmüs parçaciklar içerir. Ince bölünmüs parçaciklar, teknikte iyi bilinen teknikler kullanilarak toz haline getirme ve elekten süzme yoluyla hazirlanabilir. Parçaciklar önceden belirlenmis bir miktarda ince bölünmüs malzemenin solunmasi yoluyla verilebilir, bunlar toz halinde olabilir. Her dozaj formunun ayri bir aerosol dozunda bulunan aktif içerik veya içeriklerin birim içeriginin kendi basina belirli bir enfeksiyon, endikasyon veya hastaligi tedavi etmek için etkili bir miktar olusturmasi gerekmedigi için gerekli etkili miktara çok sayida dozaj biriminin uygulanmasi yoluyla ulasilabilecegi takdir edilecektir. Ayrica, etkili miktar, dozaj formundaki dozdan daha az kullanilarak, tek tek veya bir dizi uygulamada elde edilebilir. Soluma yoluyla üst (nazal) veya alt solunum yollarina tatbik etmek için, bulusun terapötik peptitleri bir nebülizörden veya basinçli bir paketten veya bir aerosol spreyi tatbik etmek için baska bir uygun araçtan uygun bir sekilde iletilir. Basinçli paketler diklorodiflorometan, trikloroflorometan, diklorotetrafloroetan, karbon dioksit veya diger uygun gazlar gibi uygun bir itici içerebilir. Basinçli bir aerosol durumunda, dozaj birimi ölçülü bir miktar verecek bir valf temin edilmesi suretiyle belirlenebilir. Nebulizatörler, bunlarla sinirli olmamak üzere, U.S. Patent No, 4,624,251; 3,703,173; 3,561,444; ve 4,635,62Tde açiklanmaktadir. Burada açiklanan tipte aerosol dagitim sistemleri, Fisons Corporation (Bedford, Mass), Schering Corp. (Kenilworth, NJ) ve American Pharmoseal Co. (Valencia, CA) dahil olmak üzere çok sayida ticari kaynaktan temin edilebilir. Intranazal uygulama için, terapötik madde ayrica burun damlalari, plastik bir sise atomizörü veya ölçülü dozlu bir inhaler gibi bir sivi sprey yoluyla da uygulanabilir. Tipik atomizörler Mistometre (Wintrop) ve Medihaler'dir (Riker). Ayrica, aktif içerikler, tarif edilen kosullar veya baska bir durum için olsun olmasin, diger terapötik maddeler, örnegin agri kesiciler, ainti-enflamatör ajanlar, antihistaminikler, bronkodilatörler ve benzerleri ile kombinasyon halinde de kullanilabilir. Bir uygulamada bilesim ayrica sisteamin ve/veya polilisin içerir. Baska bir yönüyle, bir ilaç olarak kullanilmak üzere bulusa ait bir bilesim saglanmaktadir. Antimikrobiyal Kullanim Mevcut tarifnamenin bir baska yönüne göre, terapide veya profilakside kullanim için yukarida tarif edildigi gibi bir peptit saglanmistir. Mevcut tarifnamenin bir baska yönüne göre, bir antimikrobiyal enfeksiyonun veya rahatsizligin tedavisinde veya önlenmesinde kullanim için yukarida tarif edildigi gibi bir peptit saglanmistir. Genel olarak, mevcut bulusun peptidi bir antimikrobiyal enfeksiyon veya rahatsizligin tedavisinde veya önlenmesinde kullanilmak üzere paketlenir ve sunulur. Mevcut tarifnamenin bir baska yönüne göre, bir antimikrobiyal enfeksiyonun veya rahatsizligin tedavisi veya önlenmesi için, mevcut bulusun bir peptidinin ihtiyaç duyan bir hastaya uygulanmasi asamasini içeren bir yöntem sunulmaktadir. Bulusun peptitleri, digerlerinin yani sira antimikrobiyal peptitler olarak, örnegin bakteri, mantar, maya, parazit, protozoa ve virüslere karsi da faydalidir. "Antimikrobiyal peptit" terimi, burada mikrobisidal ve/veya mikrobistatik aktiviteye sahip olan ve anti-bakteriyel, anti-fungal, antimikotik, anti-parazitik, anti-parazitik, anti-protozoal, anti-viral, anti-enfeksiyöz, anti-enfektif ve/veya antiseptik, algisidal, amoebisidal, mikrobisidal, bakterisilan(0)dal, fungisidal, parazitisidal protozoakidal, protozoisidal özellikleri ile sinirli olmayacak sekilde kapsayan herhangi bir peptidi tanimlamak için kullanilabilir. "Mikrobiyal enfeksiyon", bakteriyel, parazitik, protozoan, viral veya fungal patojenlerin neden oldugu bir enfeksiyon anlamina gelir. Bir "patojen" genellikle hastaliga neden olan herhangi bir organizma olarak tanimlanir. Özellikle, mevcut bulusun peptitleri antibakteriyel peptitler olarak yararlidir. Bu nedenle, bulus ayrica bir ilaç olarak kullanilmak üzere bulusa göre bir peptit saglar. Bulusun peptitleri hem in vivo, hem in vitvo hem de ex vivo olarak antimikrobiyal ajanlar olarak uygulamaya sahip olabilir. Bir bakteriyel patojen, asagidakilerden olusan gruptan seçilen bir bakteri türünden türetilebilir: Slaphylococcus spp., örnegin Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermi'dis; Enterococciis spp., Örnegin Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium; Strepmcoccus pyogenes; Listeria spp.; Pseudomonas spp. örnegin Pseudomonas aeruginosa; Mycobacteri'um spp., örnegin Mycobacterium tuberculosi's; Enterobacter spp.; Klebsi'ella spp., örnegin Klebsi'ella pneumonia; Campylobacter spp.; Salmonella spp.; Streptococcus spp., örnegin Streptococcus Group A veya B, Streptoccocus pneumoniae; Stenotrophomonas spp., Stenotrophomonas maltophilici; Helicobacter spp., örnegin Helicobacter pylori; Neisseria spp., örnegin Neisseria gonorrhea, Nei'sseri'a meningitidis; Borrelia burgdorferi; Shigella spp., örnegin Shigella flexneri; Escherichia coli; Haemophilus spp., örnegin Haemophi'lus influenzae; Chlamydia spp., Örnegin Chlamydia trachomatis, Chlamydi'a pneumoniae, Chlamydia psittaci; F rancisella fiilarensis; Bacillus spp., örnegin Bacillus anthraci's; Clostridia spp., örnegin Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Clostri'di'um dijý'icile; Yersini'a spp., örnegin Yersi'ni'a pestis; Treponema spp.; Burkholderia spp.; örnegin Burkholderia mallar', B. cepaci'a, B. cepaci'a kompleksi ve B. pseudomallei, Acinetobacter spp. örnegin A. baumanii ve A. calcoaceri'cus; Achromobacter spp., Achromobacter xylosoxidans. Bakteriyel patojen, Gram negatif bakteri veya Gram pozitif bakteri olabilir. Gram negatif bakteri, Pseudomonas spp. (özellikle Pseudomonas aeruginosa); Burkholderia Spp (özellikle Burkholderia cepacia), Acinetobacter spp. örnegin A. baumanii ve A. calcoaceticus; Streptococcus spp., örnegin Streptococcus Grup A veya B, Streptoccocus pneumoniae; Stenotrophomonas spp., Srenotrophomonas maltophi'lia ve Achromobacter spp., örnegin Achromobacter xylosoxidans içeren gruptan seçilebilir. Gram-pozitif bakteri, Stapliylococcus spp. (özellikle Staphylococcus aureus ve Staphylococcus epidermidis); Escherichia coli; Clostridia spp., örnegin Clostri'dium botulinum, Clostridi'um perfringens, Clostri'dium dijýîcile; ve Enterococcus spp., örnegin Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium içeren gruptan seçilebilir. Bakteriyel patojen, Staphylococcus spp. (özellikle Staphylococciis aiireus ve Staphylococcus epidermidi's); Pseudomonas spp. (özellikle Pseudomonas aeruginosa); Burkholderia spp (özellikle Burkholderia cepacia), Escheri'chi'a coli; Acinetobacter spp. örnegin A. baumanii ve A. calcoaceîicus; Clostridia spp., örnegin Clostri'dium botulinum, Closîridium perfringens, Clostri'dium dißcicile; Enterococciis spp., örnegin Enterococcus faecali's, Enterococcus faecium; Streptococcus spp., örnegin Streptococcus Grup A veya B, Streptoccocus pneumoniae; Stenotrophomonas spp., Stenotrophomonas maltophilia ve Achromobacter spp., Achromobacter xylosoxidans içeren gruptan seçilebilir. Bakteriyel patojen, Sraphylococcus spp. (özellikle Staphylococcus aureus ve Staphylococcus epidermi'dis) ve Pseudomonas spp. (özellikle Pseudomonas aeruginosa) içeren gruptan seçilebilir. Antimikrobiyal hastalik veya rahatsizlik/enfeksiyon, çibanlar, fronküller, selülit, impetigo, hastane enfeksiyonlari, bakteriyemi, pnömoni, osteomiyelit, endokardit, menenjit, apseler, kistik fibroz (özellikle kistik fibroz ile birlikte akciger enfeksiyonlari), gastrointestinal enfeksiyonlar, genitoüriner enfeksiyonlar, septisemi, farenjit, nekrotizan fasiit, akut glomerülonefrit, otitis media, yaralar, antraks, ensefalit, difteri, gaz kangreni, botulizm ve tetanozdan olusan gruptan seçilebilir. Alternatif olarak, mevcut tarifnamenin peptitleri, gonore, menenjit, zatürree, otitis media, osteomiyelit, kistik fibroz (özellikle kistik fibroza sahip hastalardaki akciger enfeksiyonlarindan olusan), genitoüriner enfeksiyonlar, peritonit, konjonktivit, septisemi, Zührevi hastalik, bakteriyemi, hastane enfeksiyonlari, dizanteri, gastrointestinal enfeksiyonlar, tifo, ates, pnömonik veba, yara, kolera, böbrek enfeksiyonu, meliodiozis, konjonktivit, perrus hastaligi, peptik ülser hastaligi, tifüs, farenjitten olusan gruptan seçilen bir hastaligi veya rahatsizligi tedavi etmek veya hafifletmek için kullanilabilir. Tedavi edilecek hastalik veya rahatsizlik, idrar yolu enfeksiyonlari, solunum yolu enfeksiyonlari, dermatit, yumusak doku enfeksiyonlari, bakteriyemi, kemik ve eklem enfeksiyonlari, mide bagirsak enfeksiyonlari ve ciddi yanik, kanser, kistik fibroz veya AIDS hastalarinda sistemik bakteriyel enfeksiyonlardan olusan gruptan seçilen hastaliklar veya kosullar dahil olmak üzere, firsatçi bir bakteriyel enfeksiyona katkida bulunabilir veya bunlardan kaynaklanabilir. Mevcut tarifnamenin peptitleri, Gram pozitif mikrobiyal patojenlere, özellikle bakteriyel patojenlere karsi minimum 32 tig/ml inhibitör konsantrasyonuna (MIC) sahip olabilir. Genellikle peptitler, Gram pozitif mikrobiyal patojenlere karsi 20 tig/ml veya daha az, tipik olarak 16 tig/ml veya daha az, uygun olarak 10 tig/ml veya daha az bir MIC degerine sahiptir. Avantajli olarak, mevcut tarifnamenin peptitleri, Gram pozitif mikrobiyal patojenlere, özellikle Gram pozitif bakteriyel patojenlere karsi yaklasik 8 tig/ml bir MIC degerine sahiptir. Mevcut tarifnamenin peptitleri, Gram negatif mikrobiyal patojenlere, Özellikle bakteriyel patojenlere karsi minimum 70 tig/ml veya daha az inhibe edici bir konsantrasyona (MIC) sahip olabilir. Genel olarak, peptitler, Gram negatif mikrobiyal patojenlere karsi, 50 ug/ml veya daha az, tipik olarak 40 tig/ml veya daha az, uygun olarak 30 tig/ml veya daha az bir MIC degerine sahiptir. Avantajli olarak, mevcut tarifnamenin peptitleri, Gram negatif mikrobiyal patojenlere, özellikle Gram negatif bakteriyel patojenlere karsi 30 11 g/m1°den daha az bir MIC degerine sahiptir. MIC, genellikle yaklasik 7 olan bir pH'ta ölçülür. Mevcut tarifnamenin peptitleri, Gram negatif ve Gram pozitif bakteriyel patojenlere karsi minimum 250 tig/ml veya daha az bir bakterisit konsantrasyonuna (MBC) sahip olabilir. Genellikle peptitler, Gram negatif ve Gram pozitif bakteriyel patojenlere karsi 125 u g/ml veya daha az, tipik olarak 100 ug/ml veya daha az, uygun olarak 60 tig/m1 veya daha az bir MIC degerine sahiptir. Avantajli olarak, mevcut tarifnamenin peptitleri 40 tig/ml°den daha az bir MIC degerine sahiptir. Bir viral patojen, asagidakilerden olusan gruptan seçilen bir virüsden türetilebilir: Insan Immün Yetmezlik Virüsü (HTVI & 2); Insan T Hücreli Lösemi Virüsü (HTLV 1 & 2); Ebola virüsü; insan papilloma virüsü (örnegin, HPV-2, HPV-5, HPV-8 HPV-16, HPV-18, HPV-31, HPV-33, HPV-52, HPV-54 ve HPV-56); papovavirüs; rinovirüs; çocuk felci virüsü; herpes virüsü; adenovirüs; Epstein Barr Virüsü; Grip virüsü, hepatit B ve C virüsleri, Variola virüsü, rotavirüs veya SARS koronavirüs. Bir parazitik patojen, Trypanosoma spp. (Trypanosoma cruzi, Trypansosoma brucei), Leishmania spp., Giardia spp., Trichomonas spp., Entamoeba Spp., Naegleri'a spp., Acanthamoebaspp., Schistosoma spp., Plasmo spp., Crytospor spp. , Loa Loa, Ascaris lumbri'coi'des, Dirofi'lari'a i'mmi'ri's, Toxoplasma ssp., örnegin, Toxoplasma gondii'den olusan gruptan seçilen bir parazitik patojenden türetilebilir. Bir mantar patojeni, Candida spp., (örnegin C. albicans), Epi'dermophyton spp., Exophiala spp., Microsporum spp., Trichophyton spp., (örnegin T. rubmm ve T. interdigi'tale), Tinea spp., Aspergi'llus spp., Blastomyces spp., Blasmschizomyces spp., Coccidi'oides spp., Cryplococcus spp., Histoplasma spp., Paracoccidiomyces spp., Sporothrix spp. Absi'di'a spp., Cladophi'aIOphora spp., Forzsecaea spp., Phialophora spp., Lacazi'aspp., Arthmgraphis spp., Acremonium spp., Actinomadum spp., Apophysomyces spp., Emmonsi'a spp., Basidiobolus spp., Beauveriaspp., Chrysosporium spp., Com'diobolus spp., Cunninghamella spp., Fusari'um spp., Conidio spp. spp., Geotrichum spp., Graphium spp., Leptosphaeria spp., Malassezia spp., Mucor spp., Neotestudina spp., Nacardia spp., Nacardiopsis spp., Paecilamyces spp., Phoma spp., Piedraia spp. , Pneumocystis spp., Pseudallescheria spp., Pyrenochaeta spp., Rhizomucor spp., Rhi'zopiis spp., Rhodotorula spp., Saccharomycesspp., Scedospori'um spp., Scopulari'opsis spp., Sporobolomyces spp., Syncephalastrum spp., Trichoderma Spp., Trichosporon spp., Ulvcladiumspp., Usrilago spp., Verticillium spp., Wangiella spp. cinsinden bir mantar patojenden türetilebilir. Mikrobiyal enfeksiyon, sistemik, topikal, subkütan, kutanöz veya mukozal bir mantar enfeksiyonu olabilir. Mantar enfeksiyonlari sistemik olarak siniflandirilabilir; bu, enfeksiyonun derin oldugu ve iç organlari etkiledigi veya kanla tasinan veya topikal (dermatofitik) oldugu anlamina gelir; bu, enfeksiyonun yüzeysel oldugu ve cilt üzerinde meydana geldigi anlamina gelir. Ek olarak, maya enfeksiyonlari vücudun mukoza zarini da etkileyebilir. Mantar enfeksiyonlari da sistemik olabilir (örnegin, kandidemi ve diger ölümcül durumlar). Derideki mantar enfeksiyonlari genellikle krem veya merhemlerle (topikal antifungal ilaçlar) tedavi edilir. Bununla birlikte, sistemik enfeksiyonlar, maya mantari enfeksiyonlari veya kremlerle veya merhemlerle yapilan tedaviden sonra temizlenmeyen topikal enfeksiyonlarin, sistemik antifungal ilaçlarla (oral veya IV) tedavi edilmesi gerekebilir. Bu ilaçlar, örnegin, cilt üzerinde meydana gelen tinea (yuvarlak kurt) gibi yaygin mantar enfeksiyonlarini veya bogazda, vajinada veya vücudun diger kisimlarinda ortaya çikabilecek kandidiyaz hastaligini (pamukçuk olarak da bilinen bir maya enfeksiyonu) tedavi etmek için kullanilir. Sistemik antifungal ilaçlar ayrica, akcigerleri ve diger organlari etkileyebilecek histoplazmoz, blastomikoz ve aspergilloz gibi diger derin mantar enfeksiyonlarini tedavi etmek için kullanilir. Bunlar bazen kemik iligi veya organ nakli hastalari ve HIV-AIDS hastalari gibi bagisiklik sistemi zayiflamis insanlarda mantar enfeksiyonlarini önlemek veya tedavi etmek için kullanilir. Topikal veya dermatofit mantar enfeksiyonlari, tipik olarak ölüm veya ciddi hastaliklara sebep olmamakla birlikte, yaygindir ve tedavi edilmeleri pahali olabileceginden ekonomik olarak önemlidir. Topikal veya yüzeysel mantar enfeksiyonlari, cilt, lamina, stratum korneum, tirnaklar ve saçtakileri içerebilir. Kutanöz enfeksiyonlar cilt, parmak tirnaklari ve ayak timaklarinin enfeksi yonlaridir. Tarifnamenin tercih edilen bir yönünde, mantar enfeksiyonu onikomikozdur. Onikomikoz, Trichop/zytori spp. cinsinden bir mantardan kaynaklanabilir, ancak bulunla sinirli degildir, örnegin mantar, Trichophyton interdigitale veya Trichophytori rubrum olabilir. "Onikomikoz" terimi, bunlarla sinirli olmamak üzere, distal lateral subungual, yüzeysel beyaz, proksimal beyaz subungual, sekonder distrofik, primer distrofik, endoniks, kandidal (örnegin, onikoliz ve kronik mukokutanöz hastalik) onikomikoz tiplerini içerir. Onikomikozun, kol/bacagin akut bakteriyel selüliti ve diger ikincil bakteriyel enfeksiyonlar gibi daha ciddi klinik komplikasyonlar için önemli bir risk faktörü oldugu gösterilmistir, dolayisiyla mevcut tarifname bu enfeksiyonlarin tedavisini kapsar. "Tedavi" terimi, burada tarif edilen peptitlerin, hastanin durumunda bir iyilesme veya hastaligin ilerlemesinde gecikme de dahil olmak üzere (bulasici) bir hastaligi olan hastalara bir fayda saglamasindaki etkileri ile ilgilidir. Tarifnamenin peptitleri, bunlarin tuzlari dahil olmak üzere, bir enfeksiyon, endikasyon veya hastalik ile iliskili en az bir semptomda bir azalma veya endikasyon veya hastalik ile iliskili antikor miktarinda bir düsüs elde etmek üzere uygulanir. Tarifnamenin peptitleri ayrica digerlerinin yani sira yaralar, ülserler ve lezyonlarin tedavisinde veya önlenmesinde, örnegin kesikler veya yaniklar gibi deri yaralarinin ve bunlarla iliskili kosullarin önlenmesinde de faydali olabilir. "Tedavi" terimi, burada tarif edilen peptitlerin, hasta durumunda bir iyilesme veya hastaligin ilerlemesinde gecikme de dahil olmak üzere (bulasici) bir hastaligi olan hastalara bir fayda saglamasinin etkileriyle ilgilidir. Bu tarifnamede kullanildigi haliyle, "bir yaranin tedavisi", yara iyilesmesi ve ilgili sartlar ve örnegin kozmetik sonrasi cerrahi ve organ nakli sonrasi doku iyilesmesini tesvik eden, arttiran veya hizlandiran ve postoperatif yara izi, yaniklar, sedef hastaligi, doku yeniden biçimlendirmesini hizlandiran terapiyi içerebilir. Böylece, bulusun baska bir yönünde, bulusa göre bir peptit veya bilesimin uygulandigi veya eklendigi bir substrat saglanir. Tercihen, substrat, yaralara uygulama veya yara bölgelerine uygulama için uygundur. Tercihen, substrat, bulusa ait peptitlerin, antibiyotik etkilerini elde etmek için substrattan bir yara yatagina transferine izin verir. Substrat, bir pansuman, örnegin yara pansumani olabilir. Pansuman bir kumas materyali içerebilir veya kollajen benzeri bir materyal olabilir. Bulusun peptitleri ayrica bir dezenfektan olarak/bir dezenfektanda uygulama bulabilir, bu baglamda, bulusun peptit veya farmasötik bilesimleri, tek basina veya diger dezenfektan maddelerle kombinasyon halinde tedavi edilecek bir yüzeye uygulanabilir. Burada kullanildigi sekliyle "tedavi edilecek olan yüzey", burada tanimlandigi gibi bir substrat veya tibbi bir cihaz olabilir. Baska bir yönden, bulus, bir denekte bir mikrobiyal enfeksiyonun tedavi edilmesine veya önlenmesine yönelik bir yöntem saglar ve bahsedilen denege bulusa göre terapötik olarak etkili bir miktarda peptit verilmesini içerir. Memeliler, kuslar ve diger hayvanlar, burada tarif edilen peptitler, bilesimler veya yöntemler ile tedavi edilebilir. Bu tür memeliler ve kuslar, at, sigir, koyun, keçi, tavuk ve hindi ve benzerleri gibi insanlari, köpekleri, kedileri ve besi hayvanlarini içerir. Ayrica bitkiler de, bulusa ait peptitler, bilesimler veya yöntemler ile tedavi edilebilir. Denegin bir hayvan olmasi durumunda, bulusun peptitleri topikal olarak veya sistemik olarak uygulanabilir. Özellikle, peptitler, hayvanin etine veya tirnaklar, pençeler ve paçalar dahil ancak bunlarla sinirli olmayacak sekilde tirnak benzeri özelliklere tatbik edilebilir. Bu bulusun peptitleri genellikle toksik degildir ve genellikle memeliler, kuslar, hayvanlar ve bitkiler tarafindan iyi tolere edilir. Tipik olarak, mevcut bulusun peptitleri 2 ila 10 mg/kg veya daha fazla, uygun sekilde 2 ila 6 mg/kg'lik dozlarda iyi tolere edilir. Örnegin, peptit NP432'nin, yaklasik 5 mg/kg'lik bir dozda fareler için öldürücü olmadigi bulunmustur. Arzu edilen etki(leri) elde etmek için, peptit, bunun bir varyanti veya bir kombinasyonu, örnegin en az yaklasik 0.01 mg/kg ila yaklasik 500 ila 750 mg/kg, en az yaklasik 0.01 mg/kg ila yaklasik 300 ila 500 mg/kg, en az yaklasik 0.1 mg/kg ila yaklasik 100 ila 300 mg/kg veya en az yaklasik 1 mg/kg ila yaklasik 50 ila 100 mg/kg. veya en az yaklasik 1 mg/kg ila yaklasik 20 mg/kg vücut agirligi olarak tekli veya bölünmüs dozajlar halinde uygulanabilmesine ragmen, diger dozajlar yararli sonuçlar saglayabilir. Uygulanan miktar, bunlarla sinirli olmamak üzere, seçilen peptit ve bunun klinik etkileri, hastalik, agirlik, fiziksel durum, saglik, memelinin yasi, önleme veya tedavinin elde edilebilir olup olmadigini ve peptidin kimyasal olarak degistirilmesini içeren çesitli faktörlere bagli olarak dcgiseccktir. Bu faktörler, klinik dcneylerden elde edilen ampirik verileri inceleyerek ve klinik öncesi hayvan modeli sonuçlarini veya teknikte bulunan diger test sistemlerini inceleyerek klinisyen tarafindan kolayca belirlenebilir. Mevcut tarifnameye uygun terapötik ajanlarin uygulanmasi, örnegin alicinin fizyolojik durumuna bagli olarak, uygulamanin amacinin terapötik veya profilaktik olup olmamasina ve yetenekli pratisyenler tarafindan bilinen diger faktörlere bagli olarak tek bir dozda, çoklu dozlarda, sürekli veya aralikli bir sekilde olabilir. Bulusa ait peptitlerin verilmesi, önceden seçilmis bir süre zarfinda esasen sürek1i olabilir veya bir dizi aralikli dozda olabilir. Hem lokal hem de sistemik uygulama tasarlanmistir. Bilesimi hazirlamak için, peptitler sentezlenir veya baska türlü elde edilir, gerekirse veya istendiginde saflastirilir ve daha sonra genel olarak liyofilize edilir ve stabilize edilir. Peptit daha sonra uygun konsantrasyona ayarlanabilir ve istege bagli olarak diger ajanlarla birlestirilebilir. Bir birim dozda yer alan belirli bir peptidin mutlak agirligi genis ölçüde degisebilir. Örnegin, bulusa göre en az bir peptitten yaklasik 0.01 ila yaklasik 2 g veya yaklasik 0.01 ila yaklasik 500 mg veya belirli bir hücre tipi için spesifik birçok peptit uygulanabilir. Alternatif olarak, birim dozaj, yaklasik 0.0] g ila yaklasik 50 g, yaklasik 0.0] g ila yaklasik g, yaklasik 01 g ila yaklasik 25 g, yaklasik 0.5 g ila yaklasik 12 g, yaklasik 0.5 g ila yaklasik 8 g, yaklasik 0.5 g ila yaklasik 4 g veya yaklasik 0.5 g ila yaklasik 2 g arasinda degisebilir. Bulusa ait peptitlerin günlük dozlari da degisebilir. Bu tür günlük dozlar, örnegin, günde yaklasik 0.001 g ila yaklasik 100 veya 50 g/gün, yaklasik 0.1 g/gün ila yaklasik 25 g/gün, yaklasik 0.1 g/gün ila yaklasik 12 g/gün, yaklasik 0.1 g/gün ila yaklasik 5 g/gün, yaklasik 0.1 g/gün ila yaklasik 2.5 g/gün, yaklasik 0.1 g/gün ila yaklasik 2 g/gün, yaklasik 0.5 g/gün ila yaklasik 8 g/gün, yaklasik 0.5 g/gün ila yaklasik 4 g/gün, yaklasik 0.5 g/gün ila yaklasik 2 g/gün ve yaklasik 0.5 g/gün ila yaklasik 1 g/gün arasinda degisebilir. Sinerjistik Etki Tercihen bilesim, mevcut bulusun peptidi ile sinerjistik olarak etki eden bir veya daha fazla antimikrobiyal madde içerir. Tipik olarak sinerjistik etki, antimikrobiyal etkinin artmasina neden olur. Genel olarak, kombine edilmis ajanlar, iki veya daha fazla ajanin ilave antimikrobiyal özelliklerinden en az %10 daha fazla antimikrobiyal özellikleri ile iliskilidir; iki veya daha fazla maddenin ilave antimikrobiyal özelliklerinden tipik olarak en az %20 daha fazla; uygun sekilde en az %30 daha fazla; avantajli olarak, en az %50 daha fazla antimikrobiyal özellikleri ile iliskilidir. Genel olarak, antimikrobiyal ajan bir antibakteriyel ajandir ve bilesim sinerjik açidan yüksek bir antibakteriyel etki sergiler. Sinerjistik olarak yüksek antibakteriyel etki, asagidakilerden olusan gruba ve bunlardan birine göre belirgin olabilir: Staphylococcus spp. Staphylococcus aureus, Sîaphylococcus epidermidis; Enterococcus spp., örnegin Enterococcus faecali's, Enterococcus faecium; Strepmcoccus pyogenes; Listeria spp Pseudomonas spp. örnegin. Pseudomonas aeruginosa; Mycobacterium spp., örnegin Tüberküloz; Enterobacter spp Klebsiella spp., örnegin Klebsiella pnömonisi; Campylobacter spp.; Salmonella spp Streptococcus spp., örnegin Streptococcus Grup A veya B, Streptoccocus pneumoniae; Stenotmphomonas spp., Stenotrophomonas maltophilia; Helicobacterspp., örnegin Helikobakter pilori'; Neisseria spp., örnegin Neisseria bel soguklugu, Neisseria meningitidis; Borrelia burgdoijfêri; Shigella spp., Örnegin Shigella _flexneri; Escheri'chia coli; Haemophilus spp., örnegin Haemophilus influenzae; Chlamydi'a spp., örnegin Chlamydia trachomatis, Chlamydia pneumoniae, Chlamydia psittaci; F ranci'sella fiilarensis; Bacillus spp., örnegin Bacillus anthracis; Clostridia spp., örnegin Clostridium botulinum, Clostridium perfringens, Closrridium dißîcile; Yersinia spp., örnegin Yersim'a pestis; Treponema spp Burkholderia spp.: Örnegin. Burkholderia mallei', B. cepacia, B. cepacia kompleksi ve B. pseudomallei, Acinetobacter spp. Örnegin. A. baumanii ve A. calcoaceticus; Achromobacter spp., Achromobacter xylosoxidans. Bu tür bakteriyel patojenleri içeren bakteriyel biyofilmlere karsi durum dahil olmak üzere, sinerjistik etki, P. aeruginosa, S. epidermidis ve S. aureus bakterilerine göre özellikle belirgin olabilir. Alternatif olarak, sinerjistik etki, kombine ajanlarla iliskili sasirtici derecede düsük toksisite nedeniyle belirgin olabilir. Genel olarak, kombine edilmis ajanlar, iki veya daha fazla ajanin ilave iliskili toksisitesinden en az %10 daha az bir toksisite ile iliskilidir; iki veya daha fazla ajanin katki maddesi ile iliskili toksisitesinden tipik olarak en az %20 daha az; uygun sekilde en az %30 daha az; avantajli olarak en az %50 daha az bir toksisite ile iliskilidir. Sinerjistik bir etki, mevcut bulusa ait peptit ve bir veya daha fazla baska antibakteriyel peptidin bir kombinasyonu araciligiyla sergilenebilir. Bir örnege göre, antibakteriyel peptitler asagidaki Formül'e göre olabilir: ((X)1(Y)m)n burada 1 ve m, 1 ila 10 arasinda, örnegin 0 ila 5 arasinda bir tam sayidir; n, 1 ila arasinda bir tam sayidir; ayni veya farkli olabilen X ve Y, hidrofobik amino asitler ve/Veya katyonik amino asitlerden olusan gruptan seçilen bir amino asittir. Tarifnamenin tercih edilen bir yönünde, antibakteriyel peptit 3 ila 200 amino asit, örnegin 3, 4, 5, 6 veya 7 ila 100 ila amino asit içerir, örnegin 3, 4, 5, 6 veya 7 ila 25, 30, 35, 40 veya 42 amino asit dahildir. Antibakteriyel peptit, 100 ila 200 amino asit, 27 ila 100 amino asit, 28 ila 86 amino asit, 7 ila 27 amino asit veya 3 ila 14 amino asit içerebilir. Tipik olarak, antibakteriyel peptit, 3 ila 15 amino asit (örnegin 13 ila 15), örnegin 3 ila 7 amino asit içerir. X ve Y, fenilalanin ve arginin arasindan seçilebilir. X, bir fenilalanin amino asit olabilir ve Y, bir arginin amino asit olabilir. Bir uygulamaya göre, bir veya daha fazla sisteamin (NMOOl) ve 10 ila 20 kDa poli-L-lisin hidrobromid (NP108) gibi polilisin ile birlikte RRRFRFFFRFRRR grubundan seçilen bir amino asit dizisini içeren bir peptidi içeren sinerjik bir bilesim saglanmaktadir. Bir örnege göre, bilesim RRRFRFFFRFRRR (NP432) 'den birini ve 10 ila 20 kDa poli-L-lisin hidrobromid (NP108) gibi sisteamin ve polilisinden birini içerir. Bir örnege göre, bilesim RRRFRFFFRFRRR (NP432) ve sisteamin ve polilisin, örnegin 10 ila 20 kDa poli-L-lisin hidrobromid (NP108) içerir. Bu tarifnamenin tarifnamesi ve istemleri boyunca, "olusur" ve "içerir" kelimeleri ve örnegin "olusan" ve "içeren", "dahil ancak bunlarla sinirli olmamak kaydiyla" anlamina gelir ve diger molekül bölümlerini, katki maddelerini, bilesenleri, tam sayilari veya adimlari hariç tutmayi amaçlamaz (ve hariç tutmaz). Bu tarifnamenin tarifnamesi ve istemleri boyunca, tekil, baglam aksini gerektirmedikçe çogullari kapsar. Özellikle, belirsiz bir ürünün kullanildigi durumlarda, sartname, aksi belirtilmedikçe, tekilligi oldugu kadar, çogullugu da kapsayacak sekilde anlasilmalidir. Bulusun belirli bir yönü, uygulamasi veya örnegi ile birlikte açiklanan özellikler, tam sayilar, karakteristikler, bilesikler, kimyasal molekül bölümleri veya gruplarin, bunlarla uyumlu olmadikça, burada açiklanan herhangi bir baska yön, uygulama veya örnekte uygulanabilecegi anlasilmalidir. U) U) Mevcut bulus simdi sadece ekteki Sekillere referansla örnek yoluyla açiklanacaktir: Sekil 1, çesitli Gram pozitif bakteri türlerine (Sekil 1) ve Gram negatif bakteri türlerine (Sekil la, lb ve lc) karsi mevcut bulusa göre, peptitlerin minimum inhibitör konsantrasyonunu (MIC) ve minimum bakterisit konsantrasyonunu (MBC) detaylandiran bir tablo saglamaktadir; Sekil 2, Gram+ ve Gram - mikrobiyal türlere karsi mevcut bulusa göre peptitlerin ortalama minimum inhibitör konsantrasyonunu (MIC) detaylandiran bir tablo saglamaktadir; Sekil 3, P. aemginosa biyofilmine karsi degisen konsantrasyonlarda NP432, NP432 ve NMOOl ve NP432 ve NP108'in MIC degerini detaylandirmaktadir; Sekil 4, P. aemginosa biyofilmine karsi degisen konsantrasyonlarda NP445, NP445 ve NM001 ve NP445 ve NP108'in MIC degerini detaylandirmaktadir; Sekil 5, S. aureus biyofilmine karsi degisen konsantrasyonlarda NP432 ve N M001 ve N P432 ve N P108'in MIC degerini detaylandirmaktadir; Sekil 6, S. aureus biyofilmine karsi degisen konsantrasyonlarda NP445, NP445 ve NM001 ve NP445 ve NP108'in MIC degerini detaylandirmaktadir. Sekil 7 ve Sekil 7a, çesitli antimikrobiyal türlere karsi mevcut bulusa göre minimum inhibitör konsantrasyonunu (MIC) ve minimum bakterisit konsantrasyonunu (MBC) gösteren bir tablo sunmaktadir; Sekil 8, P. aeruginosabacterial biyofilmine karsi 0 ila 2500 tig/ml konsantrasyonlarinda kolistin, NP108 ve NP432'nin MBEC degerini göstermektedir; Sekil 9, P. aeruginosa biyofilmine karsi 0 ila 600 tig/ml konsantrasyonlarinda NP108-NM001, NP432-NM001 ve NP432-NP108'in MBEC kombinasyonlarini detaylandirmaktadir; Sekil 10, S. aureus bakteriyel biyofilmine karsi 0 ila 2500 tig/ml konsantrasyonlarinda kolistin, NP108 ve NP432'nin MBEC degerini göstermektedir; Sekil 11, S. aureus biyofilmine karsi 0 ila 600 ug/ml konsantrasyonlannda NP108 - NM001, NP432 - NMOOI ve NP432-NP108 kombinasyonlarinin MBEC degerini göstermektedir. Örnekler Örnek 1 P. aerugi'nosa bakteriyel biyofilmleri ve S. aiireiis bakteriyel biyofilmleri, Mueller-Hinton agar içinde ayri 96 kuyucuklu mikrotitre plakalarinda 21 saat boyunca 37 0C sicaklikta büyütüldü. Planktonik hücreler ve ortam daha sonra uzaklastirildi ve bakteriyel biyofilmler, 7 olan bir pH'ta üç kez fosfat tampon çözeltisi ile yikandi. Mueller Hinton besiyerinde üç farkli antimikrobiyal maddenin iki kat dilüsyonlari daha sonra bakteri biyofilmlerine ilave edildi. Mikrotitre plakalari, 24 saat boyunca 37 Santigrat derece sicaklikta inkübe edildi. Ortam daha sonra taze bir mikrotitre plakaya aktarildi ve bakteriyel biyofilmin optik yogunlugu bir mikrotitre plaka okuyucusu (BioTek Powerwave, XS, Winooski, USA) üzerinde 625 nm'de ölçüldü. Test edilen antimikrobiyal ajanlar, Colistin, NP108 ve NP432 idi. Ilk olarak, antimikrobiyal ajanlarin 0 ila 2500 ug/ml konsantrasyonlarindaki aktivitesi test edildi, daha sonra antimikrobiyal ajanlarin aktivitesi 0 ila 600 ug/ml konsantrasyonlarinda test edildi. Sonuçlar, Sekiller 8 ila ll'de özetlenmistir. Bu sekiller, mevcut bulusun bir peptidinin (NP432) P. aeruginosa bakteriyel biyofilmlerine ve S. aureus bakteriyel biyofilmine karsi antimikrobiyal etkisini göstermektedir. Antimikrobiyal etki bilinen antimikrobiyal ajanlarla karsilastirilir. Örnek 2 P. aeruginosa bakteriyel biyofilmleri ve S. aiireus bakteriyel biyofilmleri Mueller-Hinton agar içinde ayri 96 kuyucuklu mikrotitre plakalarinda 18 saat 37 OC'de büyütüldü. Planktonik hücreler ve ortam daha sonra çikarildi ve bakteriyel biyofilmler, 7 olan bir pH'ta üç kez fosfat tampon çözeltisi ile yikandi. Mueller Hinton besiyerinde üç farkli antimikrobiyal maddenin iki kat dilüsyonu daha sonra bakteri biyofilmlerine ilave edildi. Mikrotitre plakalari, 24 saat boyunca 37 Santigrat derece sicaklikta inkübe edildi. Ortam daha sonra taze bir mikrotitre plakaya aktarildi ve bakteriyel biyofilmin optik yogunlugu bir mikrotitre plaka okuyucusu (BioTek Powerwave, XS, Winooski, USA) üzerinde 625 nm'de ölçüldü. Test edilen antimikrobiyal ajanlar tek basina NP432, esit konsantrasyonda NP432 ve NMOOI'in bir kombinasyonu, esit konsantrasyonda NP432 ve NP108'in bir kombinasyonu, tek basina NP445 ve esit konsantrasyonda NP445 ve NMOOl'in bir kombinasyonu, esit konsantrasyonda NP445 ve NPlOS'in bir kombinasyonuydu. Antimikrobiyal ajanlar, P. aeruginosa bakteriyel biyofilmlerine ve S. aureus bakteriyel biyofilmlerine karsi 0 ila 1 mg/ml konsantrasyonlarda test edildi. Sonuçlar, Sekil 3 ila 6'da özetlenmistir. Bu sekiller, mevcut bulusa ait bir peptidin (NP432 ve NP445), P. aeruginosa bakteriyel biyofilmlerine ve S. aiireus bakteriyel biyofilmine karsi, tek basina ve NMOOl ve NP108 ile kombinasyon halinde antimikrobiyal etkisini göstermektedir. TR TR TR TR TR TR TR TR TR