TW201414478A - 經修飾的透明質酸衍生物及其用途 - Google Patents

經修飾的透明質酸衍生物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
TW201414478A
TW201414478A TW102136212A TW102136212A TW201414478A TW 201414478 A TW201414478 A TW 201414478A TW 102136212 A TW102136212 A TW 102136212A TW 102136212 A TW102136212 A TW 102136212A TW 201414478 A TW201414478 A TW 201414478A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
hyaluronic acid
acid derivative
composition
treatment
derivative according
Prior art date
Application number
TW102136212A
Other languages
English (en)
Inventor
Pietro Antonino Di
Francesca Cavazza
Paolo Caliceti
Original Assignee
Sigma Tau Ind Farmaceuti
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sigma Tau Ind Farmaceuti filed Critical Sigma Tau Ind Farmaceuti
Publication of TW201414478A publication Critical patent/TW201414478A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/04—Drugs for disorders of the respiratory system for throat disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

本發明涉及式I的透明質酸衍生物、它們的合成及其在有需要的受試者中作為化粧品或作為藥劑的用途。□

Description

經修飾的透明質酸衍生物及其用途
本發明涉及透明質酸衍生物和它們在醫學和化粧品領域中的用途或作為飲食添加物的用途。本發明另外涉及含有這樣的衍生物的藥物組合物以及得到它們的方法。
長久以來，研究人員已經已經做出了大量努力來鑒別新的組織修復醫療裝置，以提供克服以前的裝置的某些缺點的新工具，或者更加適用於特定組織。近十年來，所述努力甚至已經增加，也因為人們渴望簡單地通過改變正常老化進程來改變他們的美學表像的需要日益增加。
公認的是，皮膚是可以被多種天然和非天然因素改變的感覺組織，所述因素諸如紫外線暴露、老化、吸煙、燒傷、痤瘡、疾病等...。
在健康的受試者中，組織修復或組織再生在傷害所述組織的損傷以後通過癒合過程而發生。在老化過程中，透明質酸和/或膠原在軟組織中的產生減少，伴隨著加速的降解速率。這樣的機制會導致凹陷區(depressed area)諸 如紋線、皺紋、紋理和褶皺的形成。
目前可得到的克服軟組織缺陷的方法包括外科手術(例如，自體或異種移植)或涉及使用真皮填充劑的更低侵襲性技術的應用。
皮膚是由3個主要層組成的高度機化的結構，每個層具有它自身的功能。被稱作表皮的外層主要由角質形成細胞組成，並且擔任保護免於外界因素(諸如病原體、由紫外線引起的氧化劑應激、化學試劑的侵害)的作用，同時調節通過經表皮損失從身體釋放的水的量。
中層是真皮，且是基本上由3種纖維蛋白蛋白質(即膠原、彈性蛋白和網硬蛋白)以及支持基質組成的緻密彈性纖維結締組織。所述支持基質由糖胺聚糖(即，GAG)組成，所述糖胺聚糖是能夠結合大量水的長鏈多糖。它們一起形成不會洩漏真皮的凝膠。
最後，被稱作下皮的內層是纖維脂肪層，其鬆散地連接至真皮，起隔斷層和保護墊的作用。
真皮-表皮連接決定了皮膚的表面。因而，具有錨定結構完整性的真皮-表皮連接會維持折疊，由此增加真皮和表皮之間的接觸的表面積，並促進這2種組織之間的可擴散因數的交換，從而強化它們的黏結力和改善皮膚的外觀。在改變錨定結構的情況下，特別是由於膠原IV、膠原VII、層黏連蛋白V的合成的缺乏和/或由於老化或疾病，這會造成真皮-表皮連接的扁平化。實際上，已經證實，膠原IV和膠原VII在創傷癒合過程中是非常重要的 (Betz P，等人，Int.J.Legal.Med.,1992,105,93)。
組織修復也涵蓋了慢性創傷和/或非癒合性創傷。這樣的創傷的患病率在年齡相關的疾病中、在受獲得性免疫缺陷綜合症(AIDS)影響的人中、或在癌症干預以後面臨輻射的患者中增加。慢性創傷(諸如靜脈腿潰瘍)需要長期護理，且花費非常大。此外，這樣的創傷經常在癒合的18個月內復發。在過去的40年中，潮濕創傷癒合的概念已經被普遍接受，從而產生了數百種不同的敷料技術，它們的目的在於改善癒合過程的時間和質量。除了傳統的紗布以外，大多數目前可得到的敷料屬於下述類別之一：泡沫、水膠體、水凝膠、海藻酸鹽和膜；前2種代表全球潮濕創傷敷料市場的最大份額。水膠體最常見地由羧甲纖維素、明膠或果膠製成，且可以與海藻酸鹽、透明質酸鹽或膠原或其混合物相組合。涉及生物材料(諸如膠原、透明質酸、殼聚糖、海藻酸鹽或彈性蛋白)的敷料被稱作生物敷料。
由於膠原是細胞外基質(ECM)的最豐富蛋白，基於膠原的生物敷料已經被廣泛地開發，但是已經逐漸被新生代的敷料替代。
已經證實，基於海藻酸鹽的敷料能夠促進細胞活性諸如附著和增殖(Thomas S.,J.Wound Care,2000,9,2,56；Thomas S.,J.Wound Care,2000,9,3,115；Thomas S.,J.Wound Care,2000,9,4,163)。
由於假定的成纖維細胞形成的刺激和增加的與癒合有 關的早期反應，殼聚糖多糖已經被用於治療燒傷和創傷(Paul W.，等人，Trends Biomater.Artif.Organs,2004,18,18)。
最後，存在多種含有透明質酸鹽的敷料，其中透明質酸已經經過化學修飾，並同時維持它的天然的生物相容性、生物可降解性和免疫原性缺乏。透明質酸是以高濃度存在於皮膚和結締組織中的內源多糖。在皮膚中，聚合的透明質酸可以結合水，從而形成輔助水合和充盈的黏稠物質。因此，透明質酸隨著老化的損失與增加的脫水和皮膚的起皺有關。除了皮膚以外，透明質酸(即，HA)作為細胞內基質的核心組分也天然地存在於身體的不同的其他組織(諸如肌腱、肌肉、軟骨和玻璃體液)中，從而使得它非常適合靶向這些組織的生物醫學應用。
基於HA的生物材料敷料的例子是這樣的，其中HA：
ˇ未經過修飾，如它的鈉鹽(例如，ialugen,Ibsa)，呈乳膏劑的形式或在含有4g ialugen的紗布墊中，用於局部施用。
ˇ如在專利EP0216453中描述的，經由羧酸部分而完全地或部分地酯化(例如，Hyaff®)，用於藥物(例如，外科手術皮膚病學、眼科學、牙醫學：Ballini A.，等人，Int.J.Med.Sci.,2009,6,2,65)或化粧品領域中。這些HA-酯可以被擠出以產生膜和纖維，被低壓凍乾以得到海綿狀物，或通過噴霧乾燥、提取和蒸發進行加工以產生 微球。
ˇ經由羥基部分而酯化(WO2004013182)。
ˇ與其他生物活性成分連接： ○紫杉醇，以防止外科手術後的黏着形成(Jackson J.K.，等人，Pharm.Res.,2002,19,4,411；WO02090390)；○氨苄西林(GB2207142)； ˇ與下述物質交聯以形成分子網絡 ○ α羥酸的聚合物諸如聚乳酸(WO2006069578)；1,4-丁二醇二縮水甘油基醚；1,3-二胺丙烷；多功能的環氧衍生物(EP0161887)；或可以 ○在葡萄糖胺殘基的脫乙醯化的氨基部分與葡糖醛酸部分的羧酸基團之間自交聯，或在葡糖醛酸部分的羧酸基團與任何單元的羥基基團之間自交聯(例如，US5676964B1,Hyalobarrier®，其在腹腔-骨盆外科手術以後充當保護和隔開組織的屏障，並由此避免黏着併發症)。
ˇ沈積在膜/紗布上。
有些敷料可以進一步含有補充性的生物活性成分諸如抗生素、抗炎藥、鎮痛藥或生長因子或它們的混合物。這樣的產品的非窮盡列表中的代表可以為：Solaraze®，它是含有3%雙氯芬酸(在2.5%透明質酸中)的局部用凝膠，最近被批准用於治療光化性角化病；或Regranex，即 含有重組人血小板衍生的生長因子-BB的凝膠，目前處於III期臨床試驗中，用於神經病的糖尿病性潰瘍。
WO2007048522公開了一種由透明質酸鈉(sodium hyaluronate acid)、甘氨酸和脯氨酸和可能含有的賴氨酸和亮氨酸組成的乳膏組合物，其在快速的創傷癒合過程中可有效地促進細胞再聚合。
WO2010003797公開了具有不同分子量的基於HA的組合物，其用於治療角膜創傷。它聲稱，低分子量HA級分(即，51kDa和320kDa)會增進癒合過程，同時高分子量HA級分(即，1500kDa)可能因為過於黏稠而不會促進的創傷癒合。
WO2008015249公開了由高分子量HA和多胺(例如，腐胺(putrecine))的顆粒製成的組合物，優選膠體，其用作填充劑(即，抗-皺紋填充劑或唇填充劑)，用於治療創傷癒合和用於保護人皮膚免於紫外(UVA)輻射，但是也用於保護人皮膚對抗自由基的有害作用。公開的唯一實驗數據關注不同組合物的吸光度結果，因此被指示用作皮膚保護組合物。
還已經將主要由交聯的HA製成的水凝膠報道為聚合基質，其可用於培養細胞(例如，形成軟骨的細胞、形成骨的細胞、肌細胞、成纖維細胞和器官細胞)和將所述細胞植入特定器官中(US6129761)。
真皮填充劑是本領域眾所周知，且通常由基於膠原和/或透明質酸的衍生物製成。在過去，最廣泛地使用的填 充劑是基於牛或人膠原，且傾向於持續3-6個月。更近的填充劑類別是基於透明質酸(HA)，它們之間在HA的交聯模式(即，類型和程度)、粒度和製劑方面存在差異。對這些參數中的每一種已經進行了大量研究和精細調節，以產生有目的地適合不同身體區域的填充劑。
為了克服HA不穩定性和/或容易被透明質酸酶降解，在過去的十年中出現了具有提高的半衰期的交聯HA填充劑。普遍接受的是，具有低黏度的基於HA的真皮填充劑(諸如輕度交聯的和/或由低分子量組成的那些)在體內的持續時間短於高度交聯的和/或由高分子量HA組成的那些真皮填充劑。從高度修飾的HA衍生出的第二類填充劑通常是優選的，因為所述填充劑不需要像低黏度填充劑那樣頻繁地注射給患者。
已經於2003年12月得到FDA批准的第一類基於HA的交聯的真皮填充劑是RestylaneTM，即它在歐洲被批准以後7年。RestylaneTM也被稱作非動物的穩定化的透明質酸(NASHA)，是由具有大約100萬分子量的透明質酸組成的可注射填充劑，其已經與兩臂交聯劑(即，1,4-丁二.醇二縮水甘油基醚(BDDE))交聯以形成HA分子的2個羥基之間的醚交聯。RestylaneTM特別適合用於矯正臉下部和眼下面的紋線以及增加唇大小。對Restylane®進行的最近組織病理學研究已經證實，它會刺激膠原I和III的合成(Wang F.，等人，Arch.Dermatol.,2007,143,155)。
另一類填充劑以由Hylan B凝膠組成的Hylaform家族為代表。該家族由Hylaform Fine系、Hylaform Plus和Hylaform(Inamed Corporation,California,USA)組成，且源自使用二乙烯基碸(DVS)的交聯方法，在該方法中，所述交聯也通過HA的羥基而發生，從而形成HA分子之間的磺醯基-二乙基-交聯。
基於HA的另一個交聯的真皮填充劑家族是由不同成員(即，Juvederm 18、Juvederm 24、Juvederm 24HV和Juvederm 30)組成的Juvederm，並且是借助於BDDE(如Restylane)交聯的HA產物。但是，Juvederm被宣稱為均勻的凝膠形式而不是顆粒形式。它的用途是，適合用於中間至深層真皮中，用於糾正中等至嚴重的面部皺紋和褶皺，諸如鼻唇溝。
除了Restylane®或JuvedermTM以外的、由更大的透明質酸凝膠顆粒組成的Perlane®被推薦用於更深的注射。臨床試驗證實，Perlane®的單次注射可以維持效果多達6個月。
在呈現更深陷入的面部紋線和皺痕的患者中，具有小粒度成分的製劑的應用傾向於更柔軟和更光滑，並且因此非常適用於諸如唇等區域。更大的顆粒具有更多的結構，並且最適合用於深褶皺諸如鼻唇溝。
已經在老化皮膚中證實，發生膠原VII表達的减少，所述膠原VII負責將基膜錨定至真皮膠原纖維(Chen Y.Q.，等人，J.Invest.Dermatol.,1994,102,205)。最近 已經發現，新的C-吡喃木糖苷衍生物會誘導糖胺聚糖和硫酸類肝素蛋白聚糖的皮膚表達(Pineau N.，等人，Eur.J.Dermatol.,2008,18,1,36)。
但是，除了由不同公司宣稱的一種真皮填充劑勝過另一種真皮填充劑的所有潛在優點以外，關於所述優點的科學證據仍然存在一些疑點。根據它們的組成對不同的基於HA的真皮填充劑的優點/缺點進行對比的綜述凸顯了下述事實：並非所有假定的、宣稱的不同填充劑的優點都經過科學地和徹底地評估(Alemman I.B.，等人，Clin.Interv.Aging,2008,3,4,629)。
最近已經公開了有包衣的透明質酸顆粒(WO2008147817)。
針注射是以最小副作用將填充劑遞送進靶位置的優選方法。
在下面報告了可以將基於HA的衍生物用於製藥領域中的用途的非窮舉列表。
Laserskin®(一種由自體角質形成細胞製成的表皮自體移植物複合材料，所述角質形成細胞生長在由100%酯化的HA(即，苄酯)製成的可生物降解的基質上)已經在有利於具有慢性糖尿病足的患者的完全潰瘍癒合方面表現出有前途的結果(Lobmann R.，等人，J.Diabetes Complications,2003,17,199)。
一種類似的自體移植物複合材料已經表現出對隱性營養不良性大疱性表皮松解患者的慢性皮膚潰瘍創傷癒合的 有益效果(Wullina U.，等人，J.Dermatol.,2001,28,4,217)。
已經證實，含有HA的凝膠(即，Gengivel®)的高分子量級分可用於治療牙周病諸如牙齦炎(Jentsch H.,等人，J.Clin.Periodontol.,2003,30,2,159)。
已經證實，Merogel®(一種由Hyaff®製成的紡織鼻敷料)會增強針對原發性慢性淚囊炎的鼻內內窺鏡淚囊鼻腔吻合術的癒合過程(Wu W.，等人，Eye,2011,25,6,746)，並且已經證實低壓凍乾的HA的乙酯可用於不同的耳病理學和用於實踐耳科的、耳神經外科手術的和牙口腔醫學的顯微外科手術，諸如鼓膜穿孔的修復(US5503848)。
在下面報告了可以將基於HA的衍生物用於化粧品領域中的用途的非窮舉列表。
唇增大，蜂窩組織，眼周的皺紋和暗圈，在眉毛和前額水平紋之間的皺紋，嘴角皺紋，由痤瘡瘢痕、鼻和下巴形成的不規則，面頰、顳顬中的凹陷區，隆乳。
單獨的L-肉鹼或與透明質酸一起的L-肉鹼在化粧品和醫學領域中的應用是已知的。
US4839159公開了L-肉鹼用於改善或治癒皮膚病症(包括起皺、乾燥的或剝脫的皮膚)和燒傷(特別是曬傷)以及用於治癒和預防瘢痕形成(特別是由病原體感染造成)的用途。
US7854939公開了凝膠化粧品用於治療皮膚障礙(諸 如蜂窩組織和皺紋)的用途，所述凝膠由聚合物諸如羧基乙烯基聚合物(例如，聚羧乙烯)、表面活性劑和丙醯基L-肉鹼甘氨酸鹽酸鹽的複合物製成。
US7763655公開了含有肉鹼肌酸(creatinate)的局部用組合物用於抑制皮膚中的蜂窩組織形成的用途。
WO2000029030公開了透明質酸和肉鹼或其具有2-20個碳原子的醯基衍生物的複合物用於化粧品(例如，美容洗劑或乳膏劑)和醫學應用(例如，腿潰瘍、乾眼綜合症)的用途。該專利申請要求保護含有重量比在1：3至3：1範圍內、優選等重量比的2種組分(即，HA和肉鹼或其一種醯基衍生物)的優選複合物。
儘管有大量產品可用於在醫學和化粧品領域中治療皮膚障礙，無論是從藥物觀點還是從化粧品觀點仍然認識到的需要是，獲得可用於預防或治療皮膚障礙的新活性成分。
我們現在已經令人驚訝地發現，用肉鹼或烷醯基肉鹼共價地官能化的透明質酸衍生物具有可用於醫學和化粧品領域中和作為飲食添加物的生物學特性。所述衍生物已經被證實會啟動身體自身膠原的再生。
本發明涉及透明質酸衍生物和它們在醫學和化粧品領域中和作為飲食添加物的用途。
本發明提供了包含(m+n)個重覆單元的式I的化合 物；
其中m和n是>0的整數，且70<(m+n)<5000且m>n；符號//是指，2個連續單元可以是未被取代的，或二者被取代或二者中僅一個被取代；R是H或含有2-20個碳原子的烷醯基部分，其中所述烷醯基部分可以是直鏈或支鏈；X是Cl、Br、Ac、MeSO3或H2PO4；A是H、Na、K或TBA；或者當X不存在時，A不存在。
式I的透明質酸衍生物的特徵在於作為重覆單元總數(即，m+n)和取代度(即，SD)的2個參數。後者儘管可借助於HPLC來計算，但是可以由下式表示。
優選的式I的透明質酸衍生物包含70-5000個重覆單 元。
更優選的式I的透明質酸衍生物被表徵為200<m+n<2000。
甚至更優選的式I的透明質酸衍生物被表徵為400<m+n<1800。
進一步甚至更優選的式I的透明質酸衍生物被表徵為500<m+n<1700。
此外，上述優選的式I的透明質酸衍生物中的每一種具有被包含在0.01至0.6之間的取代度SD。
甚至更優選的式I的透明質酸衍生物具有被包含在0.01至0.6之間的取代度SD。
術語“單元”或“重覆單元”是指被取代的或未被取代的、由D-葡糖醛酸部分和D-N-乙醯基葡糖胺部分構成的二聚體，所述D-N-乙醯基葡糖胺部分是被取代的或未被取代的。
表述“摩爾量”和術語“當量”應當關於由圖1表示的透明質酸二聚體單元進行解釋。
表述“結合的肉鹼的摩爾量”與參數n相關聯。
表述“聚二糖二聚體的摩爾量”與參數m相關聯。
表述“取代度”和它的首字母簡略詞“SD”表示下面方程式1的結果
表述“透明質酸”在本文中是透明質烷或它的縮寫HA的同義詞。HA的所有來源是有用的，包括細菌和禽來源。
表述“基於HA的衍生物”表示，由根據本發明的化學修飾的HA製成的化合物。
本發明的一個實施方案涉及用作化粧品領域中的填充劑的式I的化合物。
具體地，本發明涉及式I的化合物和它們的下述用途：
ˇ注射劑的填充劑，所述注射劑可用於修復、增大、強化需要改造的組織。
ˇ預防和/或治療蜂窩組織、疤痕或皺紋；增大發育不全的乳房、填充面頰的空洞從而恢復天然外觀。
ˇ防止老化。
在本發明的一個優選實施方案中，通過給需要的受試者施用式I的化合物，增量調節至少一種細胞外基質組分。
在本發明的一個更優選實施方案中，所述至少一種細胞外基質被增量調節了5-90%。
在本發明的一個更優選實施方案中，所述至少一種細 胞外基質被增量調節了10-70%。
在本發明的一個更優選實施方案中，從施用式I的化合物以後6小時到至少施用後第5天，所述至少一種細胞外基質被增量調節了10-70%。
在本發明的另一個更優選實施方案中，被增量調節的至少一種細胞外基質選自：膠原IV型、VII型、透明質烷合酶1和透明質烷合酶2。
在本發明的另一個更優選實施方案中，被增量調節的至少一種細胞外基質選自膠原IV型或VII型。
本發明的另一個主題是，用於恢復或維持皮膚彈力活性的式I的化合物。
本發明的另一個實施方案涉及用於醫學領域中的式I的化合物。
具體地，本發明涉及式I的化合物和它們的下述用途：ˇ飲食添加物和藥劑，其用於預防和/或治療皮膚和關節的障礙、關節病、克羅恩氏病、潰瘍性直腸結腸炎和眼病；ˇ生物敷料，其可用於治療急性和/或慢性創傷和/或非天然地癒合的創傷。可以導致這些類型的創傷的因素的非窮舉列表是：燒傷；輻照(在放射療法治療過程中或暴露於日光)；磨損；切割；撕裂；射擊；疾病諸如潰瘍(例如，腿和靜脈潰瘍)，特別是由糖尿病引起的潰瘍；乾眼綜合症；外科手術如剖腹產； ˇ醫療裝置，其用於矯正泌尿學障礙諸如尿失禁、胃液回流；或修復骨、軟骨或肌肉損傷；本發明的另一個主題是，用於支援皮下組織的纖維基質層的式I的化合物。
本發明的另一個主題是，用作食品添加物或用作藥劑的式I的化合物，所述藥劑用於預防和/或治療關節障礙、由骨關節炎或纖維肌痛引起的肌肉骨骼不適、滑膜炎、膝關節病、克羅恩氏病、潰瘍性直腸結腸炎和眼病諸如乾眼綜合症。
對於化粧品或藥物用途，根據本發明的式I的化合物可以適當地以液體、半液體、乳膏劑、固體、在脂質體中或洗劑的形式口服地或胃腸外地施用。胃腸外施用的非限制性途徑是：局部地、真皮內地、關節內地或以本領域衆所周知的任意其他胃腸外的合適途徑。
作為食品添加物，根據本發明的式I的化合物可以適當地口服施用。
對於眼用，根據本發明的式I的化合物可以適當地口服施用；或以局部施用於眼的滴眼劑、凝膠或軟膏劑的形式。
根據本發明，式I的化合物的胃腸外施用途徑包括、且不限於，在需要治療的身體的任何部位的局部和胃腸外施用途徑。
根據本發明，可以胃腸外地施用呈化粧品或藥物組合物的形式的式I的化合物，其含有劑量為0.1-30%(按重 量或體積計)、優選1-20%(按重量或體積計)、最優選2-10%(按重量或體積計)的活性成分，任選地與一種或多種合適的常規助劑或其他活性成分混合。
可以以0.2-200mg/天的劑量，口服地施用呈化粧品、食品添加物或藥物組合物形式的根據本發明的式I的化合物，優選的劑量是2-100mg/天，最優選的劑量是約25-50mg/天。
用於口服的式I的化合物可以包有腸溶衣以免於胃酸影響進入小腸中，它將在小腸中被吸收。
本發明的藥物組合物可以另外包含下述成分中的一種或多種：
a)藥學上可接受的表面活性劑，諸如穩定劑、填充劑、冷凍保護劑(cryo-protectant)、冷凍保護劑(lyo-protectant)、添加劑、媒介物、載體、稀釋劑或助劑。所述表面活性劑是技術人員衆所周知的，且報道在任意下述手冊中：Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(Ansel H.C.，等人，編，Lippincott Williams & Wilkins Publishers,1999年第7版)；Remington：The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro A.R.，編，Lippincott,Williams & Wilkins,2000年第20版)；Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics(Hardman J.G.，等人，編，McGraw-Hill Professional,2001年第10版)；和Handbook of Pharmaceutical Excipients(Rowe R.C.，等人，APhA Publications,2003年第4版)，和b)選自下述的可用於預防或治療皮膚障礙的至少一種活性成分：-支持微循環的試劑，包括、但不限於銀杏(Gingko biloba)、假葉樹屬(ruscus)、草木犀屬(melilot)、落葵屬(red vine)、莢速屬(viburnum)的提取物；-用於活化脂解的試劑，包括、但不限於連錢草(Ground ivy)(活血丹屬，Glechoma)的提取物、當歸根、瓜拉那屬木質藤本植物(Paulinia)的提取物、黃嘌呤類鹼或其衍生物(Subdued or of the xanthic bases)(例如，咖啡因、可可鹼和茶鹼)；-抗炎化合物，包括、但不限於迷迭香酸、甘草酸酯衍生物、α沒藥醇、環戊並環庚五烯及其衍生物、積雪草苷、sericoside、魯斯可皂苷元、七葉素、escolin、槲皮素、蘆丁、白樺脂酸及其衍生物、兒茶素及其衍生物；-皮膚增白化合物，包括、但不限於阿魏酸、氫醌、熊果苷、和曲酸；-抗氧化劑和抗皺紋化合物，包括、但不限於視黃醇和衍生物、生育酚和衍生物、水楊酸酯類及其衍生物；-改進常見的抗蜂窩組織劑的皮膚穿透和效力的試劑，包括、但不限於單羧酸類，包括乳酸、羥乙酸、扁桃酸及其混合物；-通過進入表皮的脂質生物合成並且為表皮的屏障形成提供脂質而在皮膚對抗氧化性應激的防禦中發揮重要作 用的必需脂肪酸(EFA)；優選的必需脂肪酸選自亞油酸、γ-亞麻酸、高-γ-亞麻酸、多聚乙醯神經氨酸(columbinic acid)、二十碳-(正-6,9,13)-三烯酸、花生四烯酸、γ-亞麻酸、二十碳五烯酸、六烯酸及其混合物；或者-合適的防曬劑，其選自：對氨基苯甲酸(PABA)的衍生物；肉桂酸酯和二苯甲酮衍生物諸如甲氧基-肉桂酸辛酯、2-羥基-4-甲氧基-二苯甲酮；3-羥基犬尿氨酸O-β-DL-葡萄糖苷或其衍生物，其選自：3-羥基犬尿氨酸O-β-D-葡萄糖苷；3-羥基犬尿氨酸O-β-L-葡萄糖苷；3-羥基犬尿氨酸；4-(2-氨基-3-羥基苯基)-4-氧代丁酸O-β-D-葡萄糖苷；4-(2-氨基-3-羥基苯基)-4-氧代丁酸O-β-DL-葡萄糖苷；4-(2-氨基-3-羥基苯基)-4-氧代丁酸O-β-L-葡萄糖苷；3-HKG的谷胱甘肽加成化合物；或其對映異構衍生物；或其混合物；或其鹽。
c)任選的至少一種賦形劑或稀釋劑，其選自：-本領域技術人員公知的任何適合比例的增稠劑；示例性的增稠劑是樹膠諸如黃原膠、角叉菜膠、明膠、卡拉牙膠、果膠和刺槐豆莢膠；可以保護所述基於水的化粧用組合物；-防止微生物生長的防腐劑；合適的防腐劑包括對羥基苯甲酸的烷基酯、乙內醯脲衍生物、丙酸鹽、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、咪唑烷基脲、脫羥基乙酸鈉、苄醇、和各種季銨化合物。如果存在防腐劑，則以本 領域技術人員公知的任何合適的比例添加。
-有機矽聚合物，其以本領域技術人員公知的任何合適的比例添加；-既作為用於促進活性成分分散的載體又作為皮膚軟化劑起作用的潤膚劑(emollients)，潤膚劑可以以本領域技術人員公知的任何合適的比例摻入到本發明的化粧品組合物中；合適的潤膚劑可以在一般化學分類下分類為例如酯、脂肪酸和醇、多元醇和烴類；脂肪酸二酯的例子包括：己二酸二丁酯、癸二酸二乙酯、二聚酸二異丙酯(diisopropyl dimerate)、丙二醇肉豆蔻基醚乙酸酯、己二酸二異丙酯、和琥珀酸二辛酯；支鏈脂肪酸酯的例子包括肉豆蔻酸-2-乙基-己酯、硬脂酸異丙酯和異硬脂醇棕櫚酸酯；三元酸酯的例子包括三亞油酸三異丙酯、檸檬酸三月桂酯、三丁酸甘油酯(tributirrine)、和飽和或不飽和的植物油；直鏈脂肪酸酯的例子包括月桂醇棕櫚酸酯、乳酸肉豆蔻酯、油醇芥酸酯(oleyl eurcate)、油酸硬脂基酯、椰子-辛酸酯/癸酸酯、和辛酸鯨蠟酯(cetyl octanoate)；脂肪醇和酸的例子為C10-C20化合物，諸如鯨蠟基、肉豆蔻基、棕櫚基和硬脂基的醇和酸；多元醇的例子是直鏈和支鏈的烷基多羥基化合物，例如丙二醇和丁二醇、山梨醇、甘油、以及聚合的多元醇例如聚丙二醇和聚乙二醇；烴類的例子為直鏈的C12-C30烴鏈，諸如礦物油、石油膠、角鯊烯和異鏈烷烴；-水； -著色劑，-遮光劑；-香料。
本發明的局部用皮膚處理組合物可以配製為用於美容護理的所有局部用形式：洗劑、流體乳膏劑、乳膏劑或凝膠。所述組合物可以根據其黏度和使用者的預定用途而被包裝在合適的容器中。例如，洗劑或流體乳膏劑可以被包裝在瓶子、滾珠塗佈器、膠囊、貼劑、推進劑驅動的氣霧劑裝置、或配備有適合於手指操作的泵的容器中。
當所述組合物是乳膏劑時，可以簡單地將其儲存在不變形的瓶子中或儲存在擠壓容器(例如管或有蓋的罐)中。
對於每種具體形式，可以使用合適的賦形劑。
這些賦形劑必須具有所有通常需要的性質。例如，可以舉例通常使用的丙二醇、甘油、鯨蠟醇、多元醇、被置於或未被置於脂質體中的磷脂、油類(植物油、動物油、礦物油)、防腐劑、濕潤劑(dampener)、增稠劑、穩定劑和乳化劑。
根據本發明的表述“化粧上可接受的成分”是適合於其在化粧處理中的用途的產品，例如被包括在由歐洲化粧用具和香水協會(European Cosmetic Toiletry and Perfumery Association,COLIPA)提出並在96/335/EC“Annexto Commission Decision of 8 May 1996”中發表的INCI列表中的那些。
可以首先在細胞培養物測定中或在動物模型(通常是小鼠或大鼠)中估計要施用的式I的化合物的治療有效劑量。
所述動物模型也可以用於確定適當的濃度範圍和給藥途徑。然後可以使用這樣的資訊來確定在人類中有用的劑量和給藥途徑。
人受試者的精確有效劑量將取決於疾病或病症狀態的嚴重程度、受試者的一般健康、受試者的年齡、重量和性別、飲食、給藥時間和頻率、藥物組合、反應敏感性和對治療的耐受性/應答。
這暗示著，本領域的專家可以利用標準的臨床前試驗和臨床試驗或者利用關於美容用飲食產品的製劑的一般考慮來確定組分的劑量。
下述舉例說明的實施例絕非本發明意圖保護的窮盡列表。
圖1：它顯示了與對照相比，用本發明的組合物處理組織以後釋放的LDH的量。
圖2：它顯示了通過qRT-PCR測得的HAS-1在不同的時間點的基因表達。
圖3：它顯示了通過qRT-PCR測得的HAS-2在不同的時間點的基因表達。
圖4：它顯示了通過qRT-PCR測得的COL7A1在不 同的時間點的基因表達。
圖5：它顯示了通過qRT-PCR測得的COL4A1在不同的時間點的基因表達。
圖6：它顯示了通過qRT-PCR測得的SPAM1在不同的時間點的基因表達。
圖7：它顯示了HA-肉鹼在pH 7.4的PBS中的釋放。
實施例1
透明質酸鈉向四丁基透明質酸銨(TBA-HA/CA)的轉化
步驟A：透明質酸
將300mg透明質酸鈉(關於二糖單元，0.75mmol)溶解在300ml去離子水中，並以1ml/min的流速穿過裝有Amberlite IR 120樹脂(H-Form)的4×40cm柱進行洗脫。
步驟B：四丁基透明質酸銨
然後將357μl四丁基氫氧化銨(55%的在H2O中的溶液)加入步驟A的收集的含有HA的滲濾液中，以產生具有pH 7的HA和TBA的化學計量混合物。然後用5l去離子的H2O將該溶液穿過3kDa截止膜透析7小時。將該過程重複2次。隨後，將溶液合併，並使用Amicon系統(使用10kDa截止值纖維素膜，施加2.5巴氮壓)借助於 超濾進一步純化。冷凍乾燥如此得到的TBA-HA，以得到期望的加合物，為紡織樣白色固體。
圖1：TBA-HA的NMR譜。
圖2：TBA-HA的IR波譜。
實施例2/1
步驟A：(2-羥基-4-咪唑-1-基-4-氧代-丁基)-三甲基-銨
將273mg羰基二咪唑(1.69mmol)加入500mg L-肉鹼鹽酸鹽(2.53mmol,1.5當量)在5ml無水DMSO中的溶液中。將反應混合物在室溫在氮氣氛下攪拌3小時，直到反應結束。在真空下濃縮溶液樣品，並通過NMR進行分析。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ：8.48(m,1H)；7.75(m,1H)；7.11(m,1H)；4.441(m,1H)；3.55(m,2H)；3.13(m,9H)；2.41(m,2H)。
步驟B：
將得自步驟A的含有1.69mmol活化的肉鹼的溶液加入攪拌的1.05g TBA-HA(1.69mmol)在60ml無水DMSO中的溶液中。將反應混合物在氮氣氛下攪拌5天。然後將該溶液倒入乙醇/乙醚(600ml,50/50)中。過濾得到的沈澱物，並用1/1乙醇/乙醚溶液沖洗。
步驟C：
將得自步驟B的TBA-HA-CA鹽溶解在5% NaCl水溶液中，並以5-10KDa截止值進行切向流過濾(TFF)透析，其中先使用5%氯化鈉溶液，然後使用純水。冷凍乾燥如此得到的TBA-HA-CA，以得到期望的加合物，為紡織樣白色固體。
實施例2/2
將得自實施例2/1的步驟A的、含有1.69mmol活化的肉鹼的溶液加入攪拌的640mg HA(1.69mmol)在60ml無水甲醯胺中的溶液中。將反應混合物在氮氣氛下攪拌5天。然後將該溶液倒入乙醇/乙醚(1l,50：50)中。過濾得到的沈澱物，並用1/1乙醇/乙醚溶液沖洗，最後在真空下乾燥，然後根據在實施例2/1步驟C中描述的操作進行純化。
實施例2/3
按照在實施例2/2中描述的操作，將HA和活化的肉鹼之間的比例從1/1改為1：10，合成實施例2/3的被取代的HA/CA。
實施例2/4
按照在實施例2/3中描述的操作，將HA和活化的肉鹼之間的比例從1/1改為1：5，合成實施例2/4的被取代的HA/CA。
實施例2/5
按照在實施例2/3中描述的操作，將HA和活化的肉鹼之間的比例從1/1改為2/1，合成實施例2/5的被取代的HA/CA。
實施例2/6
按照在實施例2/3中描述的操作，在步驟B中將HA和得自步驟A的活化的肉鹼之間的比例從1/1改為5/1，合成實施例2/6的被取代的HA/CA。
實施例3
步驟A：
(3-氯羰基-2-羥基-丙基)-三甲基-銨
將L-肉鹼鹽酸鹽(10.5mmol)在800μl亞硫醯氯(11mmol)中的溶液在氮氣氛下攪拌1.5h。然後，在減壓下除去亞硫醯氯，以得到透明的油。該粗產物溶解在MeOH中的樣品的MS分析證實，從預期的醯基氯與MeOH的反應形成了(2-羥基-3-甲氧基羰基-丙基)-三甲基-銨。
步驟B：
將1.08g(3-氯羰基-2-羥基-丙基)-三甲基-氯化銨(5mmol)在DMSO(5ml)中的溶液加入HA(379 mg，關於二糖單元為1mmol)在40ml甲醯胺中的溶液中。將得到的混合物攪拌1h，然後倒入EtOH中。過濾得到的沈澱物，並用EtOH和Et2O沖洗，並隨後在減壓下乾燥，然後根據在實施例2/1步驟C中描述的操作進行純化。
實施例4
肉鹼取代度確定
借助於HPLC定量分析，進行肉鹼取代度確定。
溶劑和試劑
H2O：蒸餾，並穿過Millipore Milli-Q篩檢程式過濾；AcCN：HPLC級；KH2PO4：試劑級；
設備
1ml和100ml的玻璃容量瓶；準確至0.1mg的天平
超聲浴槽
HPLC系統，其配有：ˇ色譜儀：Waters Alliance 2690型或等功能儀器ˇ注射器系統，其能夠注射10μl ˇ紫外檢測器(Waters 2487型或等功能儀器)；ˇ資料系統(Waters“Empower 2”或等功能儀器)；ˇ柱：Spherisorb SCX 5μm(250*4.6mm內徑)。
色譜條件
流速：0.7ml/min；注射體積：10μl；洗脫模式：等度；總洗脫時間：25min；柱溫度：30℃；檢測器波長：205nm。
流動相
50mM KH2PO4/CH3CN 40/60(v/v)。將400ml 50mM KH2PO4溶液加入600ml AcCN中。通過加入濃H3PO4，將得到的混合物的pH調至pH 4.2。然後，借助於超聲浴槽或通過用純氦氣鼓泡，將所述溶液脫氣。
樣品溶液製備
將10mg被取代的HA-CA的樣品溶解在1ml 0.1N NaOH中。30min後，通過加入1ml 0.1N HCl來中和溶液。
參照溶液製備
將10mg L-肉鹼樣品溶解在100ml流動相(即，50mM KH2PO4/CH3CN 40/60(v/v))中。使用相同的流動相，將1ml該溶液樣品進一步稀釋至100倍體積，以便達到0.001mg/ml L-肉鹼的濃度。
操作
ˇ用流動相調節色譜柱60min。
ˇ注射10μl空白溶液。將該注射重複2次。
ˇ注射10μl參照溶液。將該注射重複2次。
ˇ注射10μl樣品溶液。將該注射重複2次。
計算方法
使用下面的方程式1，定量在NaOH水解後從所述聚合物釋放出的肉鹼的量： 其中：
SD：取代度
As：樣品溶液中的肉鹼的峰面積(2次注射的平均值)
Ar：參照溶液中的肉鹼的峰面積(2次注射的平均值)
Wr：參照樣品的重量(mg)
Ws：樣品的重量(mg)
S：參照樣品的濃度百分比
實施例5
將冷凍乾燥的上述實施例的HA-CA懸浮於1l無菌水性磷酸鈉緩衝溶液(0.1-30%)中，並攪拌至得到凝膠。
實施例5/1
使用10g得自實施例2/2的HA-CA(SD=0.11,MW=900KDa)和0.5%水性磷酸鈉緩衝溶液，得到含有1%的HA-CA的凝膠。
實施例5/2
使用20g得自實施例2/4的HA-CA(SD=0.48,MW=900KDa)和1%水性磷酸鈉緩衝溶液，得到含有2%的HA-CA的凝膠。
實施例6
HA-肉鹼在PBS(pH 7.4)中的釋放
將16.8mg實施例2/2的聚合物溶解在3.4ml PBS中，以便得到終濃度為5mg/ml的溶液。將如此得到的溶液放入37℃水浴中。使用與在實施例4中所述相同的實驗方案，通過HPLC監測釋放。
在圖7中報告的結果指示在生理pH時非常好的穩定性。
實施例7
為了評價本發明的藥物組合物的效果，已經在Phenion®全厚度皮膚模型上進行了體外生物學試驗。該模型被公認為人全厚度皮膚等同物。借助於注射器，將本發明的組合物(150μl)注射進表皮和真皮之間的組織的3個不同點(即，每次注射50μl)。用未修飾的HA和僅用鹽水溶液重複相同的實驗方案，同時，在第4個平行實驗運行中，僅用鹽水溶液局部地處理組織。
膜完整性確定
通過測量細胞外培養基中的乳酸脫氫酶(LDH)的水平，確定膜完整性。實際上，LDH是一種存在於所有細胞中的穩定的細胞質酶。它在細胞外的存在的證據，必然是決定它的快速釋放的細胞損傷的結果(Korzeniewski,C., 等人，J.Immunol.Methods,1983,64,313)。借助於商購可得的比色測量試劑盒(即，Cytotoxicity Detection KIT-LDH,Roche，批號1253300)進行所述確定，所述試劑盒是基於甲臢鹽(λ492nm，利用在690nm的參照)的檢測。收集培養物上清液，並與在試劑盒中包含的反應混合物一起在室溫在暗處溫育20min。死細胞或質膜受損傷的細胞的量的增加會導致培養基中的LDH酶活性的增加，所述增加與形成的甲臢的量直接相關。以前已經確定了使用8種LDH濃度的標準曲線：500mU/ml、250、125、75、62、5、31、25、15、62、7和8mU/ml。
如圖1所示，任一組的LDH值不是統計上不同的，這意味著，在用本發明的組合物處理以後的良好細胞完整性證實了所述組合物的良好生物相容性。
基因表達水平的變化
為了評估用本發明的組合物注射組織的藥理學作用，考慮5種不同的靶標(即，HAS1、HAS/2、COL4A1、COL7A1、SPAM1，它們分別編碼透明質酸合酶-1、透明質酸合酶-2、膠原IV型α1、膠原VII型α1、透明質酸酶)，運行即時PCR實驗。
HAS1基因
在注射HA-CA後直到第5天，HAS1基因表達沒有受到顯著影響，同時未修飾的HA的注射會引起在36小時 時的強烈過表達，隨後在第5天快速減量調節(即，圖2)。這樣的行為證實，未修飾的HA會在培養基中放鬆效力至長期，同時證實了HA-CA會促進新HA的合成，因此能夠實現更快速的癒合過程。
HAS2基因
HAS2基因表達在6h時被增量調節，此後恢復至正常水平。當使用未修飾的透明質酸替代HA-CA時，觀察到類似的趨勢(即，圖3)。
COL7A1基因
證實了COL7A1基因表達從包含HA-CA注射的實驗的第5天高度增加，同時它的水平保持對於未修飾的HA而言是明顯穩定的(即，圖4)。
COL4A1基因
COL4A1基因表達在6h時間點被增量調節，此後恢復至正常水平(即，36h和5天)。有趣的是觀察到(即，圖5)，未修飾的透明質酸的注射會引起COL4A1與對照組相比在第5天的減量調節，同時在更早的時間點(即，6h)觀察到由HA-CA引起的類似的增量調節。
SPAM1
未修飾的透明質酸的注射會導致SPAM1基因在第5 天的強增量調節，同時HA-CA在相同時間點的作用強度低得多，並且甚至小於當使用鹽水溶液時(即，圖6)。

Claims (13)

  1. 一種包含(m+n)個重覆單元的式I的透明質酸衍生物， 其中m和n是>0的整數，且70<(m+n)<5000且m>n；符號//是指，2個連續單元可以是未被取代的，或二者被取代或二者中僅一個被取代；R是H或含有2-20個碳原子的烷醯基部分，其中所述烷醯基部分可以是直鏈或支鏈，只要它含有3-20個碳原子；X是Cl、Br、Ac、MeSO3或H2PO4；A是H、Na、K或TBA；或者當X不存在時，A不存在。
  2. 如請求項1所述的透明質酸衍生物，其中200<(m+n)<2000。
  3. 如請求項1所述的透明質酸衍生物，其呈現被包含在0.01至0.60之間的取代度SD。
  4. 如請求項1-3中任一項所述的透明質酸衍生物， 其係用作注射劑填充劑。
  5. 如請求項1-3中任一項所述的透明質酸衍生物，其係用作化粧品。
  6. 如請求項1-3中任一項所述的透明質酸衍生物，其係用作食品添加物。
  7. 如請求項1-3中任一項所述的透明質酸衍生物，其係用作藥劑。
  8. 一種組合物，其包含如請求項1-3中任一項所述的式I的透明質酸衍生物作為活性成分，且任選地包含一種或多種稀釋劑或賦形劑。
  9. 如請求項8所述的組合物，其可腸內或胃腸外施用。
  10. 如請求項8所述的組合物，其係用於口服、局部、真皮內、關節內、注射或眼科應用。
  11. 如請求項8所述的組合物，其係呈液體、半液體、乳膏劑、固體、在脂質體中或洗劑形式。
  12. 如請求項9所述的組合物，其係用於口服的腸溶衣。
  13. 如請求項7所述的組合物，其係用於下述用途：a)修復需要改造的組織的缺陷或損傷；或者b)增大和強化軟組織；或者c)增大發育不全的乳房；或者d)矯正由聲帶痳痺造成的失聲或發聲困難；或者e)治療胃液回流；或者 f)治療缺陷性肛門括約肌；或者g)治療泌尿學障礙諸如膀胱輸尿管回流或尿失禁；或者h)修復唇缺陷或面頰空洞缺陷；或者i)預防或治療蜂窩組織或皺紋；j)預防或治療關節障礙、骨關節炎、纖維肌痛、滑膜炎、膝關節病、克羅恩氏病、潰瘍性直腸結腸炎和眼病。
TW102136212A 2012-10-09 2013-10-07 經修飾的透明質酸衍生物及其用途 TW201414478A (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP12187828 2012-10-09

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201414478A true TW201414478A (zh) 2014-04-16

Family

ID=47022522

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW102136212A TW201414478A (zh) 2012-10-09 2013-10-07 經修飾的透明質酸衍生物及其用途

Country Status (21)

Country Link
US (1) US20150252120A1 (zh)
EP (1) EP2906193B1 (zh)
JP (1) JP2015533190A (zh)
KR (1) KR20150065861A (zh)
CN (1) CN104703583A (zh)
AR (1) AR092922A1 (zh)
AU (1) AU2013328842A1 (zh)
BR (1) BR112015007823A2 (zh)
CA (1) CA2886144A1 (zh)
CL (1) CL2015000803A1 (zh)
EA (1) EA201590708A1 (zh)
HK (1) HK1210941A1 (zh)
IL (1) IL238103A0 (zh)
IN (1) IN2015DN02358A (zh)
MX (1) MX2015004386A (zh)
PE (1) PE20150713A1 (zh)
PH (1) PH12015500585A1 (zh)
SG (1) SG11201501992XA (zh)
TW (1) TW201414478A (zh)
WO (1) WO2014056841A1 (zh)
ZA (1) ZA201503171B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI614005B (zh) * 2014-05-26 2018-02-11 National Taipei University Of Technology 水膠組合物的用途

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102014016158A1 (de) * 2014-07-11 2016-01-14 Maria Clementine Martin Klosterfrau Vertriebsgesellschaft Mbh Zusammensetzung zur Behandlung von Magenbeschwerden
JP2019501221A (ja) * 2015-12-30 2019-01-17 アレクサンドル・ヴィレノヴィチ・アサフォフＡＳＡＦＯＶ， Ａｌｅｘａｎｄｅｒ Ｖｉｌｅｎｏｖｉｃｈ 末梢関節、脊椎関節および／または結合組織の細胞外マトリックス構成要素の処置のための製剤、製造方法および使用
RU2625766C1 (ru) * 2016-07-19 2017-07-18 Александр Ливиевич Ураков Средство для экстренного восстановления голоса при внезапной афонии
CN116891540A (zh) * 2018-03-22 2023-10-17 持田制药株式会社 连接有非甾体抗炎化合物的海藻酸衍生物
WO2019222461A1 (en) * 2018-05-16 2019-11-21 Emory University Palladium hyaluronic acid particles and methods of managing cancer or angiogenic conditions
CN119176959B (zh) * 2024-09-18 2025-07-04 云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司 一种透明质酸-聚乳酸共聚物交联凝胶及其制备方法和应用

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4716224A (en) 1984-05-04 1987-12-29 Seikagaku Kogyo Co. Ltd. Crosslinked hyaluronic acid and its use
US4851521A (en) 1985-07-08 1989-07-25 Fidia, S.P.A. Esters of hyaluronic acid
GB8713662D0 (en) 1987-06-11 1987-07-15 Skandigen Ab Hyaluronic acid derivatives
US4839159A (en) 1988-02-08 1989-06-13 Topicarn, Inc. Topical L-carnitine composition
IT1219587B (it) 1988-05-13 1990-05-18 Fidia Farmaceutici Polisaccaridi carbossiilici autoreticolati
IT1251151B (it) 1991-08-05 1995-05-04 Fidia Spa Materiale spugnoso essenzialmente costituito da acido ialuronico,o suoi derivati
US6129761A (en) 1995-06-07 2000-10-10 Reprogenesis, Inc. Injectable hydrogel compositions
AU1295200A (en) * 1998-11-13 2000-06-05 Continental Projects Limited Complexes of hyaluronic acid/carnitines and pharmaceutical and cosmetic compositions
EP1401875A4 (en) 2001-05-04 2005-01-26 Univ Utah Res Found HYALURONIC ACID-CONTAINING BIOKON JUGATES: TARGETED DELIVERY OF ANTIBODIES TO CANCER CELLS
ITMI20021666A1 (it) 2002-07-26 2004-01-26 Jasper Ltd Liability Co Derivati dell'acido ialuronico
US20110027357A1 (en) * 2004-02-18 2011-02-03 Isaac Gilinski Compositions and methods for timed release of water-soluble nutritional supplements
US20060134147A1 (en) 2004-12-21 2006-06-22 Avon Products, Inc. Cosmetic compositions having carnitine creatinate and methods for using
WO2006069578A1 (en) 2004-12-30 2006-07-06 Novozymes Biopolymer A/S Hyaluronic acid linked with a polymer of an alpha hydroxy acid
JP5047507B2 (ja) * 2005-09-30 2012-10-10 昭和電工株式会社 カルニチン誘導体及びその塩、皮膚外用剤ならびに化粧料
ITMI20052035A1 (it) 2005-10-26 2007-04-27 Professional Dietetics Srl Composizioni farmaceutiche cicatrizzanti sotto forma di crema a base di amminoacidi e sodio ialuronato
EP1884231A1 (en) 2006-08-01 2008-02-06 Auriga International S.A. Cosmetic or pharmaceutical composition containing hyaluronic acid
EP2152225A1 (en) 2007-05-11 2010-02-17 SIGMA-TAU Industrie Farmaceutiche Riunite S.p.A. Gel useful for the delivery of cosmetic active ingredients
JP2010528039A (ja) 2007-05-23 2010-08-19 アラーガン、インコーポレイテッド 被覆されたヒアルロン酸粒子
WO2010003797A1 (en) 2008-07-09 2010-01-14 Novozymes Biopharma Dk A/S Hyaluronic acid for corneal wound healing

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI614005B (zh) * 2014-05-26 2018-02-11 National Taipei University Of Technology 水膠組合物的用途

Also Published As

Publication number Publication date
CA2886144A1 (en) 2014-04-17
EP2906193B1 (en) 2016-09-28
IN2015DN02358A (zh) 2015-09-04
ZA201503171B (en) 2016-11-30
KR20150065861A (ko) 2015-06-15
EP2906193A1 (en) 2015-08-19
CN104703583A (zh) 2015-06-10
CL2015000803A1 (es) 2015-08-07
PE20150713A1 (es) 2015-05-16
BR112015007823A2 (pt) 2017-07-04
HK1210941A1 (zh) 2016-05-13
EA201590708A1 (ru) 2015-07-30
MX2015004386A (es) 2015-06-10
AU2013328842A1 (en) 2015-04-09
US20150252120A1 (en) 2015-09-10
AR092922A1 (es) 2015-05-06
SG11201501992XA (en) 2015-04-29
IL238103A0 (en) 2015-05-31
JP2015533190A (ja) 2015-11-19
WO2014056841A1 (en) 2014-04-17
PH12015500585A1 (en) 2015-05-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6995946B2 (ja) 抗酸化物質を含む皮膚充填剤組成物
FI94767C (fi) Ei-terapeuttisesti käytettävät hyaluronihapon täydelliset ja osittaiset esterit
RU2733444C2 (ru) Модифицированная гиалуроновая кислота, способ ее получения и ее применения
EP2906193B1 (en) Modified hyaluronic acid derivatives and use thereof
Al-Halaseh et al. A review of the cosmetic use and potentially therapeutic importance of hyaluronic acid
US20100298259A1 (en) Pharmaceutical or cosmetic preparations for topical and/or parenteral application, preparation methods thereof and use of same
AU2015254602B2 (en) Combination of a hyaluronic acid and of a sulphated polysaccharide
WO2014044808A2 (en) Fast-penetration cosmetic dermal filler for topical application
JPH02504163A (ja) 架橋したカルボキシ多糖類
KR101571385B1 (ko) 산성 다당체의 부티르산-포름산 에스테르 혼합물, 및 그의 제조 및 피부 화장료로서의 용도
US20240358743A1 (en) Cosmetic/dermatological composition
US20100323983A1 (en) Pharmaceutical or cosmetic preparations for topical and/or parenteral application, preparation methods thereof, and uses thereof
KR101003687B1 (ko) 히알루론산계 화합물, 그 제조방법 및 용도
KR101917026B1 (ko) 피부 주름 개선 또는 예방용 화장료 조성물
CN115215948A (zh) 一种低分子的乙酰透明质酸脱羧肌肽衍生物、制备方法及应用
Onwubu et al. Biobased materials in skin rejuvenation
EP3863725B1 (en) Nail compositions having antifungal properties
JP2026512119A (ja) ヒアルロン酸分解遅延活性を有する新規ペプチド及びその用途
HK40059997A (zh) 具有抗真菌特性的指甲组合物
HK40059997B (zh) 具有抗真菌特性的指甲组合物
FR2932381A1 (fr) Composition cosmetique ou pharmaceutique contenant une association de hyaluronane reticule ou non reticule et d&#39;heparine et/ou un ou plusieurs derives heparinoides pour voie topique et injectable
IT201900010545A1 (it) Composizione cosmetica per prevenire e ritardare l’invecchiamento della pelle