TW201538982A - 檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統 - Google Patents

Abstract

　　一種檢測裝置，用於檢測體液，包括一基板以及複數個第十七型膠原蛋白。基板具有至少一反應區，反應區具有一纖維基材。第十七型膠原蛋白抗原固定於纖維基材。本發明另提供一種檢測生物體體液的檢測方法、檢測試片及檢測系統。本發明具有操作簡易、僅需少量試劑及快速分析之優勢。

Description

檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統 【0001】

本發明係關於一種檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統，特別關於一種用於檢測體液之檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統。

【0002】

類天疱瘡（Bullous Pemphigoid, 簡稱BP）是中年以後常見的全身水泡性皮膚自體免疫性疾病，其特徵為全身皮膚起泡，反覆發作。約三分之二的病例發生於老年人，屬於慢性疾病。類天疱瘡的臨床表現為全身性水泡、潰瘍、結痂及搔癢的蕁麻疹狀的斑塊等。類天疱瘡具有高度的致死率（19~26%），且需耗費昂貴的醫療照護花費，其起因於患者自體產生對抗第十七型膠原蛋白（COL17或稱BP180及BPAG2）的抗體，於COL17中的NC16A為最主要的抗原決定位（epitope）。

【0003】

近年在臨床上針對類天疱瘡的診斷主要是觀察臨床上的病理特徵，或者依賴組織切片及免疫螢光學檢查。而其中，利用傳統酵素連接免疫吸附反應（ELISA）針對NC16A區域的自體免疫抗體檢測已成功的應用在類天疱瘡疾病診斷以及疾病活性上的偵測，其結果有助於臨床醫師決定免疫抑制藥物的劑量。

【0004】

然而，傳統ELISA檢測需要透過抽血以採取患者的檢測樣本，且需要較大量試劑，所需的檢測時間較長，無形中延長了類天疱瘡的診斷時程，也同時增加了病人的負擔。甚至，傳統ELISA檢測在儀器及檢測的花費上相對昂貴。再者，由於傳統ELISA需要在實驗室的環境及特定設備的需求下進行，因此較不利於臨床上的檢測。

【0005】

因此，如何提供一種檢測裝置，其可減少樣本所需量，並具有操作簡易及快速之優勢，以提升臨床的應用性，已成為課題之一。

【0006】

有鑑於上述課題，本發明之目的為提供一種檢測裝置，其可減少樣本所需量，並具有操作簡易及快速之優勢，以提升臨床的應用性。

【0007】

為達上述目的，依據本發明之一種檢測裝置，其係用於檢測體液樣本。檢測裝置包括一基板以及複數個第十七型膠原蛋白。基板具有至少一反應區，反應區具有一纖維基材。第十七型膠原蛋白抗原固定於纖維基材。

【0008】

在一實施例中，體液樣本為體表體液樣本。

【0009】

在一實施例中，檢測裝置係為類天疱瘡檢測裝置。

【0010】

在一實施例中，基板具有至少一非反應區。非反應區係覆蓋有疏水材料。

【0011】

在一實施例中，基板具有二反應區，且反應區係被非反應區分隔開。

【0012】

在一實施例中，纖維基材為高密度纖維基材，其平均孔徑的範圍係介於0.7～12微米。

【0013】

為達上述目的，依據本發明之一種檢測方法，其係用於檢測一生物體之一體表體液樣本，檢測方法包括以下步驟：提供一檢測裝置，檢測裝置包括一基板，基板具有至少一反應區，反應區具有一纖維基材以及複數個第十七型膠原蛋白抗原，第十七型膠原蛋白抗原係固定於纖維基材；將檢測裝置接觸生物體之一患部，使位於患部之體表體液樣本附著於檢測裝置的反應區；以及偵測體表體液樣本與第十七型膠原蛋白抗原之交互反應。

【0014】

在一實施例中，該檢測方法係用於檢測類天疱瘡。

【0015】

在一實施例中，體表體液樣本包含能專一性辨識第十七型膠原蛋白抗原之一抗體或抗體片段。

【0016】

為達上述目的，依據本發明之一種檢測試片。其係用於檢測體液。檢測試片包括一採樣區、一傳送區以及一反應區。傳送區設置於採樣區以及反應區之間。反應區具有一纖維基材，且複數第十七型膠原蛋白抗原固定於反應區。

【0017】

在一實施例中，體液樣本為體表體液樣本。

【0018】

在一實施例中，檢測試片係為類天疱瘡檢測試片。

【0019】

在一實施例中，纖維基材為高密度纖維基材，其平均孔徑的範圍係介於0.7～12微米。

【0020】

為達上述目的，依據本發明之一種檢測系統。其係用於檢測一生物體之一體表體液樣本，該檢測系統包括一檢測試片以及一偵測裝置。檢測試片包括一採樣區、一傳送區以及一反應區。傳送區設置於採樣區以及反應區之間。反應區具有一纖維基材，且複數第十七型膠原蛋白抗原固定於反應區。偵測裝置偵測體表體液樣本與第十七型膠原蛋白抗原之交互反應。

【0021】

在一實施例中，該檢測系統係用於檢測類天疱瘡。

【0022】

在一實施例中，體表體液樣本包含能專一性辨識第十七型膠原蛋白抗原之一抗體或抗體片段。

【0023】

承上所述，本發明之檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統，係應用包含有纖維基材之反應區設置第十七型膠原蛋白（COL17）抗原，以有效檢測自類天疱瘡患者患部的體表體液樣本所包含的抗體，例如是能夠專一性辨識第十七型膠原蛋白的抗體，或是辨識第十七型膠原蛋白的NC16A結構域（domain）的抗體。由於本發明之檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統僅需透過接觸或直接貼覆於生物體之患部（如：類天疱瘡患者之水泡），即可達成體表體液樣本的取樣，故能減少傳統須利用抽血的方式採取患者的血液檢體，並加以分離處理的時間。更佳地，相較於以血液的做為待檢測樣本須經過額外的前處理或分離等程序，過程中會流失一定量的待檢測樣本，本發明直接以體表體液樣本吸附於檢測裝置，無須額外針對體表體液樣本進行處理，因此具有僅需較少樣本量的優勢，並提高檢測的效率及準確度。

【0059】

1、1a、1b‧‧‧檢測裝置
11、11a、11b‧‧‧基板
111、111a、111b‧‧‧非反應區
112、112a、112b‧‧‧反應區
2‧‧‧檢測試片
21‧‧‧採樣區
22‧‧‧傳送區
23‧‧‧反應區
A‧‧‧區域
A-A、a-a‧‧‧剖面線
C‧‧‧第十七型膠原蛋白抗原
S41～S45‧‧‧步驟

【0024】

 
圖1A為依據本發明較佳實施例之一種檢測裝置的示意圖。
圖1B為圖1A所示之檢測裝置的A區域局部放大示意圖。
圖1C為圖1A所示之A-A剖面線示意圖。
圖2A為依據本發明另一較佳實施例之一種檢測裝置的示意圖。
圖2B為圖2A所示之a-a剖面線示意圖。
圖3為依據本發明另一較佳實施例之一種檢測裝置的示意圖。
圖4為依據本發明較佳實施例之一種類天疱瘡的檢測方法的步驟流程圖。
圖5為依據本發明較佳實施例之一種檢測試片的示意圖。
圖6為以紙基檢測裝置應用ELISA檢測抗-NC16A的抗體之平均強度結果示意圖。
圖7為以紙基檢測裝置應用ELISA檢測病患之自體免疫所產生之抗-NC16A的抗體之相對強度結果示意圖。
圖8為以紙基檢測裝置應用ELISA檢測取自病患之血清之抗-NC16A的抗體之相對強度結果示意圖。
圖9為以紙基檢測裝置應用ELISA檢測取自病患之體表體液之抗-NC16A的抗體之相對強度結果示意圖。

【0025】

以下將參照相關圖式，說明依本發明較佳實施例之一種檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統，其中相同的元件將以相同的參照符號加以說明。

【0026】

本發明之檢測裝置係應用酵素連結免疫吸附分析法（Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）進行檢測，所採用之待測物係取自生物體的體液樣本，較佳係取自生物體的體表體液樣本。所稱之「體表體液」係指自生物體表面的完整組織，或生物體因疾病、外傷所造成的開放性孔洞而滲出之體表外液（如：血漿、淋巴液、或組織液）。

【0027】

圖1A為依據本發明較佳實施例之一種檢測裝置的示意圖，圖1B為圖1A所示之檢測裝置的A區域局部放大示意圖，而圖1C為圖1A所示之A-A剖面線示意圖。請參考圖1A～圖1C所示，檢測裝置1具有一基板11及複數個第十七型膠原蛋白（Type XVII collagen）抗原C。其中，基板11具有至少一非反應區111及至少一反應區112，本實施例係以基板11具有一非反應區111為例說明，而由非反應區111的設置可定義出複數反應區112，亦即，該些反應區112係被非反應區111分隔開。惟關於反應區112之數目、形狀、尺寸皆非本發明限制性者，而可依據實驗所需之條件進行設計。

【0028】

同樣請參考圖1A及圖1B，於本實施例中，基板11的非反應區111覆蓋有疏水材料，因此亦可稱之為疏水區。詳細而言，本實施例之非反應區111係藉由蠟染（wax printing）的方式形成。關於利用蠟染形成疏水的非反應區111之方式，大致上係應用具有噴蠟功能之裝置，如印表機，依據使用者所設定之圖案、形狀、或大小，將蠟設置於基板11上。藉此具有疏水性非反應區111的設置，可有效地將體表體液限制於反應區112內，避免樣本的流失，進而提升檢測之精確度。

【0029】

然上述關於非反應區111的形成方式非限制性者，於實際應用時，亦可藉由於具有親水性的基板11塗佈光阻層；具體而言，例如當使用負型光阻SU-8負環氧樹脂（SU-8 epoxy-based negative photoresist）時，以UV光照射的區域不會溶於光阻顯影液，即可形成疏水的非反應區111，而未以UV光照射的區域則會形成親水性的反應區112。惟類似之形成方式係為本發明所屬技術領域之通常知識者所能理解者，於此不再贅述。

【0030】

基板11係選用纖維基材為其材料，例如選用植物性纖維，較佳係選用高密度纖維基材。於本實施例中，高密度纖維基材的平均孔徑的範圍係介於0.7～12微米（μm），較佳係介於1～10微米（μm），且上述關於高密度纖維基材的平均孔徑之實施範圍及較佳實施範圍皆分別包含上述範圍內任二整數數值的組合。其中，當選用的基材的孔徑較大時，可使流經其上的體液樣本受到虹吸力及毛細力的作用，因此可提供較快的流速；反之，當選用孔徑較小的基材時，由於體液樣本主要係受到虹吸力的作用，導致體液樣本的流動速度相對變慢。而若以檢測效果的角度來看，當流速較大時，較不利於檢測標的固定（Immobilized）於反應區112；然而當流速較小時，則可能產生較多的非專一性結合（non-specific binding）。因此，於實際應用時，端視體表體液所包含之成分及檢測需求而選用高密度纖維基材的平均孔徑，以及於實際情況及工程設計上的需求予以調整選擇。

【0031】

於本實施例中，由於反應區112係實際上為由疏水的非反應區111所圍繞定義形成的區域（即基板11的部分區域），因此反應區112同樣具有纖維基材之親水特性。其中，反應區112主要是利用纖維基材內所產生的毛細作用來保留並吸附體表體液；進一步而言，反應區112係依賴纖維基材之密度，以及纖維基材內的細微溝槽，使得體表體液能夠於其間產生蕊吸、擴散、及傳輸等作用，因此相較於傳統應用硝化纖維（Nitrocellulose）做為吸收待檢測樣本的材料而僅能於表面吸附待檢測樣本，本實施例所應用之高密度纖維基材具有較佳的透水性，有效提升後續應用酵素連結免疫吸附分析法進行檢測的準確度。

【0032】

然上述非限制性者，於其他實施例中時，反應區亦可額外將纖維基材設置於基材，請參考圖2A及圖2B所示，與前述實施例相同的是，檢測裝置1a的反應區112a同樣係由非反應區111a藉由蠟染的方式定義，惟反應區112a內係另外設置纖維基材以做為檢測體表體液樣本的區域，此時，基板11a之材料則非限制於選用高密度纖維基材進行製作。

【0033】

關於反應區的數目亦非本發明限制性者，於其他實施例中，如圖3所示，檢測裝置1b之檢測基板11b亦可僅具有一反應區112b及一非反應區111b，端視檢測時所需之條件進行設計。

【0034】

同樣請再參考圖1B，於本實施例中，檢測裝置1係應用於檢測類天疱瘡，由於類天疱瘡患者會自體產生對抗第十七型膠原蛋白（COL17或稱BP180及BPAG2）的抗體，因此，本實施例之檢測裝置1即應用第十七型膠原蛋白C做為檢測標的，以執行後續酵素連結免疫吸附分析法。於本實施例中，複數個第十七型膠原蛋白抗原C係固定（immobilized）於反應區112內的纖維基材，其中圖1B之第十七型膠原蛋白抗原C之數量僅為釋例性者，而非用以限制本發明第十七型膠原蛋白抗原C之數量。而關於將抗體設置於類似的檢測基材之方式係為本發明所屬技術領域之通常知識者所能理解者，例如直接將帶有第十七型膠原蛋白抗原C之溶液潤濕於反應區112，再去除其水分以達成固定目的之方式，於此不再贅述。

【0035】

完成檢測裝置1的設置後，則可進一步將檢測裝置1應用於檢測類天疱瘡。其具體實施方式如下，將檢測裝置1接觸生物體之一患部（如：類天疱瘡患者之水泡），使位於患部之體表體液樣本附著於檢測裝置1的反應區112，以利用反應區112內的纖維基材吸收患部的體表體液樣本。透過將檢測裝置1直接貼覆的方式，可減少傳統利用侵入式採樣（例如抽血）的方式採取患者的血液檢體，並加以分離處理的時間。此外，應用本發明之檢測裝置可減輕病患的疼痛感，因而提高患者（例如不易採取血液的年長者）受檢的意願；此外，由於檢測裝置1的使用方式簡單，更進一步提升醫護人員在操作上的便利性，而患者更能不受地點限制於需要時自行檢測。

【0036】

此外，相較於以血液的做為待檢測樣本須經過額外的前處理或分離等程序，過程中會流失一定量的待檢測樣本。是故，於採樣時需要採取較為大量的待檢測樣本以達到準確的檢測效果。而本發明直接以體表體液樣本吸附於檢測裝置1，無須額外針對體表體液樣本進行處理，因此具有僅需較少樣本量的優勢。

【0037】

完成體表體液樣本的採樣後，即可接著進行類天疱瘡的檢測。當所採樣之體表體液樣本係包含對抗第十七型膠原蛋白的抗體，則反應區112的第十七型膠原蛋白抗原C與體表體液內的該些抗體則會進一步產生交互反應，特別是體表體液中該些能夠與抗原之NC16A結構域（或稱之為非膠原16結構域，Non-collagenous 16A domain）專一性結合的抗體。關於利用酵素連結免疫吸附分析法進行檢測的方法非本發明限制性者，其具體檢測方法可如下所述，對抗第十七型膠原蛋白的抗體可專一性的辨識該些第十七型膠原蛋白抗原C，並產生專一性的結合。洗去多餘且未結合的體表體液，加入帶有酵素之二次抗體，與對抗第十七型膠原蛋白的抗體進行鍵結，並再次洗去多餘且未鍵結的二次抗體，加入酵素受質使酵素呈色，以評估患者是否確診為類天疱瘡，並藉由有色終產物的顏色即可測量對抗第十七型膠原蛋白的抗體的含量，以同時達到定性及定量之目的。

【0038】

需進一步說明的是，決定對抗第十七型膠原蛋白的抗體之含量包括但不限於呈色、螢光、冷光、輻射或其他方式。具體而言，酵素連結免疫吸附分析法係利用呈色酶及反應基質產生顏色變化以顯示抗原或是待側物，另外亦可利用螢光、冷光、及即時定量PCR（real-time PCR）等反應物而產生可是別的訊號。關於定量之方式非本發明所限制性者，上述及相關的定量方式皆可納入本發明所含蓋之範圍。

【0039】

圖4為依據本發明較佳實施例之一種類天疱瘡的檢測方法的步驟流程圖。請參考圖4所示，在本實施例中，類天疱瘡的檢測方法包含以下步驟：提供一檢測裝置，檢測裝置包括一基板，具有至少一反應區，反應區具有一纖維基材，以及複數個第十七型膠原蛋白抗原，該些第十七型膠原蛋白抗原係固定於纖維基材（S41）；將檢測裝置接觸生物體之一患部，使位於患部之體表體液樣本附著於檢測裝置的反應區（S43）；以及偵測體表體液樣本與該些第十七型膠原蛋白抗原之交互反應（S45）。其中，該體表體液樣本係為生物體的體表體液，且該樣本包含能專一性辨識該些第十七型膠原蛋白抗原之一抗體或抗體片段。惟上述關於應用檢測裝置進行檢測之細節及各步驟已於前述實施例中詳細說明，於此不再贅述。

【0040】

而為了提升本發明之檢測裝置的便攜性及應用性，檢測裝置1可具體實施於本發明所提供之一種檢測試片。請參考圖5所示，檢測試片2具有一採樣區21、一傳送區22以及一反應區23。傳送區22係設置於該採樣區21以及反應區23之間。其中該反應區23之結構係實質上與前述實施例之檢測裝置相同，其具有一纖維基材，且複數第十七型膠原蛋白抗原C係固定於纖維基材。

【0041】

詳細而言，於本實施例中，檢測試片2之採樣區21、傳送區22及反應區23係選用具有毛細力之材料，以提供自採樣區21採樣之體表體液樣本進行毛細管作用。本實施例並不限制採樣區21及傳送區22之材料，其可例如但不限於選自棉纖維、硝化纖維或玻璃纖維，亦可利用與反應區23相同的高密度纖維基材以提升其毛細能力。

【0042】

本實施例之檢測試片2的採樣區21同樣係直接接觸生物體之一患部，使位於該患部之體表體液附著或吸附於檢測試片2的採樣區21。接著，體表體液可進一步經由傳送區22傳送至反應區23。其中，傳送區22可進一步設置有過濾層，以進一步將自患部與體表體液一同採集時所取得之皮屑或是灰塵等雜質先行過濾，以免該些雜質影響檢測結果。

【0043】

惟由於檢測試片2之反應區23須進行定性或定量之檢測，因此，在材質的選用上，反應區23的材質較佳係選用高密度纖維基材，其平均孔徑的範圍係介於0.7～12微米（μm），較佳係介於1～10微米（μm），且上述關於高密度纖維基材的平均孔徑之實施範圍及較佳實施範圍皆分別包含上述範圍內任二整數數值的組合。以提供體表體液之樣本進行毛細管作用。傳送至反應區23的體表體液樣本同樣可藉由與前述實施例之檢測裝置相同之原理，進行類天疱瘡的檢測，於此不再贅述。

【0044】

本發明另提供一種用於檢測生物體之樣本的類天疱瘡的檢測系統，檢測系統包括一檢測試片以及一偵測裝置。其中，所述檢測試片細實質上與前述實施例之檢測試片2具有實質上相同之結構，包括一採樣區、一傳送區以及一反應區，於此不再贅述。而偵測裝置則可例如前述實施例所述用於偵測樣本與第十七型膠原蛋白抗原之交互反應，並予以定量及／或定性之用途。其具體實施方式係配合酵素連結免疫吸附分析法之定量手段而定，舉例而言，於一實施例中，若應用呈色酶與二次抗體進行結合，偵測裝置則為可接收如光訊號之儀器，以偵測呈色酶之呈色反應。其它偵測裝置之應用方法，如偵測冷光、螢光、冷光、輻射之方式係為本發明所屬技術領域具有通常知識者可理解並應用，於此不再贅述。

【0045】

接下來將以實驗例具體說明本發明之檢測裝置的實際操作方式及效果，以及應用該檢測裝置於檢測類天疱瘡之主要步驟中的相關細節。然需注意的是，以下之說明是用來詳述本發明以使此熟習該項技術者能夠據以實現，但並非用以限定本發明之範圍。

【0046】

實驗例1：以紙基檢測裝置應用ELISA檢測抗-NC16A的抗體

【0047】

提供一層吸濾紙檢測裝置，將其潤濕後，加入具有NC16A結構域的第十七型膠原蛋白抗原（0.1 μg），靜置5-7分鐘。接著加入牛血清蛋白（BSA）以進行阻絕，並避免專一性結合，予以靜置5-7分後，加入與HRP共軛結合的抗第十七型膠原蛋白的抗體，使其與抗原反應7-10分鐘。接著加入卵白素（Streptavidin），反應7-10分鐘後，進行沖洗。再加入含有3, 3’, 5, 5’-四甲基聯苯胺（3, 3’, 5, 5’-tetramethylbenzidine, TMB）及H2O2溶液直到乾燥。截取試紙。

【0048】

結果如圖6所示，藉由ELISA試驗中HRP的酵素作用後，偵測其呈色反應的平均強度，並測量每一測試區所吸附的抗第十七型膠原蛋白的抗體濃度對數（Log）值所產生的校正曲線圖。各數據皆為八重複（N=8）之平均，而誤差線所顯示的是測量結果的標準差。其中，可看出曲線中1.6 x 10-1～10-2的範圍存在線性關係。

【0049】

實驗例2：以紙基檢測裝置應用ELISA檢測病患之自體免疫所產生之抗-NC16A的抗體

【0050】

提供一層吸濾紙檢測裝置，將其潤濕後，加入具有NC16A結構域的第十七型膠原蛋白抗原（0.1 μg）。完成抗原的設置後，加入類天皰瘡患者的水泡檢體的原液，本實驗利採用未經稀釋、稀釋25倍與625倍的檢體（2 μl）作為樣本，並分別作用30分鐘，之後加入連接HRP的抗IgG抗體作用20分鐘，經過PBST清洗後，加入含有3, 3’, 5, 5’-四甲基聯苯胺（3, 3’, 5, 5’-tetramethylbenzidine, TMB）及H2O2溶液呈色。
結果如圖7所示，藉由ELISA試驗中HRP的酵素作用後，偵測其呈色反應的平均強度，比較未經稀釋、稀釋25倍與625倍的檢測結果，可看出隨著稀釋倍數的增加，其呈色反應的平均強度係隨之減少。

【0051】

實驗例3：以紙基檢測裝置應用ELISA檢測取自病患之血清之抗-NC16A的抗體

【0052】

提供一層吸濾紙紙盤，將其潤濕後，加入具有NC16A結構域的第十七型膠原蛋白抗原（0.1 μg）。加入類天皰瘡患者的血清檢體原液與尋常型天疱瘡以及健康受測者的血清。之後加入連接HRP的抗IgG抗體作用20分鐘，經過PBST清洗後，加入含有3, 3’, 5, 5’-四甲基聯苯胺（3, 3’, 5, 5’-tetramethylbenzidine, TMB）及H2O2溶液呈色。

【0053】

血清檢測組的檢測結果如圖8所示，血清檢測組之樣本細胞包括取自類天疱瘡患者之血清（代號：BP）、取自尋常型天疱瘡（Pemphigus Vulgaris）之血清（代號：PV）、以及健康受測者的血清（代號：H）。由圖8可得知，由於類天疱瘡患者之血清（BP組）中抗-NC16A的抗體含量較高，其相對強度的分佈明顯地高於尋常型天疱瘡（PV組）及健康受測者（H組）。亦證實抗-NC16A的抗體可有效應用於做為檢測類天疱瘡之檢測標的。

【0054】

實驗例4：以紙基檢測裝置應用ELISA檢測取自病患之體表體液之抗-NC16A的抗體

【0055】

提供一層吸濾紙紙盤，將其潤濕後，加入具有NC16A結構域的第十七型膠原蛋白抗原（0.1 μg）。加入類天皰瘡患者的水泡檢體原液與對照組水泡原液。對照組水泡原液取樣自燙傷、壓瘡或凍傷所產生的水泡。之後加入連接HRP的抗IgG抗體作用20分鐘，經過PBST清洗後，加入含有3, 3’, 5, 5’-四甲基聯苯胺（3, 3’, 5, 5’-tetramethylbenzidine, TMB）及H2O2溶液呈色。

【0056】

體表體液檢測組的檢測結果如圖9所示，體表體液檢測組之樣本細胞包括取自類天疱瘡患者之體表體液（代號：BP）、以及燒傷患者的體表體液（代號：B），所稱之體表體液係指類天疱瘡病人水泡患部的液體，以及燒傷患者患部的液體。由圖9可得知，即便二檢測組之檢測樣本皆取樣自患者患部（特別是水泡狀患部）的體液，類天疱瘡患者之體表體液（BP組）中抗-NC16A的抗體含量較高，其相對強度的分佈明顯地高於燒傷患者的體表體液（B組）。亦證實類天疱瘡患者之患部中的抗-NC16A的抗體確實可有效應用於做為檢測類天疱瘡之檢測標的。

【0057】

綜上所述，本發明之檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統，係應用包含有纖維基材之反應區設置第十七型膠原蛋白（COL17）抗原，以有效檢測自類天疱瘡患者患部的體表體液樣本所包含的抗體，例如是能夠專一性辨識第十七型膠原蛋白的抗體，或是辨識第十七型膠原蛋白的NC16A結構域（domain）的抗體。由於本發明之檢測裝置、檢測方法、檢測試片及檢測系統僅需透過接觸或直接貼覆於生物體之患部（如：類天疱瘡患者之水泡），即可達成體表體液樣本的取樣，故能減少傳統須利用抽血的方式採取患者的血液檢體，並加以分離處理的時間。更佳地，相較於以血液的做為待檢測樣本須經過額外的前處理或分離等程序，過程中會流失一定量的待檢測樣本，本發明直接以體表體液樣本吸附於檢測裝置，無須額外針對體表體液樣本進行處理，因此具有僅需較少樣本量的優勢，並提高檢測的效率及準確度。

【0058】

以上所述僅為舉例性，而非為限制性者。任何未脫離本發明之精神與範疇，而對其進行之等效修改或變更，均應包含於後附之申請專利範圍中。

 

1‧‧‧檢測裝置

11‧‧‧基板

111‧‧‧非反應區

112‧‧‧反應區

Claims (16)

1. 【第1項】

   一種檢測裝置，用於檢測一體液樣本，該檢測裝置包括：
   一基板，具有至少一反應區，該反應區具有一纖維基材；以及
   複數個第十七型膠原蛋白（COL17）抗原，固定於該纖維基材。
2. 【第2項】

   如申請專利範圍第1項所述之檢測裝置，其中該體液樣本為體表體液樣本。
3. 【第3項】

   如申請專利範圍第1項所述之檢測裝置，其係為類天疱瘡檢測裝置。
4. 【第4項】

   如申請專利範圍第1項所述之檢測裝置，其中該基板具有至少一非反應區，該非反應區係覆蓋有疏水材料。
5. 【第5項】

   如申請專利範圍第4項所述之檢測裝置，其中該基板具有二該反應區，且該些反應區係被該非反應區分隔開。
6. 【第6項】

   如申請專利範圍第1項所述之檢測裝置，其中該纖維基材為高密度纖維基材，其平均孔徑的範圍係介於0.7～12微米。
7. 【第7項】

   一種檢測方法，用於檢測一生物體之一體表體液樣本，該檢測方法包括以下步驟：
   提供一檢測裝置，該檢測裝置包括一基板，具有至少一反應區，該反應區具有一纖維基材，以及複數個第十七型膠原蛋白抗原，該些第十七型膠原蛋白抗原係固定於該纖維基材；
   將該檢測裝置接觸該生物體之一患部，使位於該患部之該體表體液樣本附著於該檢測裝置的該反應區；以及
   偵測該體表體液樣本與該些第十七型膠原蛋白抗原之交互反應。
8. 【第8項】

   如申請專利範圍第7項所述之檢測方法，係用於檢測類天疱瘡。
9. 【第9項】

   如申請專利範圍第7項所述之檢測方法，其中該體表體液樣本包含能專一性辨識該些第十七型膠原蛋白抗原之一抗體或抗體片段。
10. 【第10項】

    一種檢測試片，用於檢測體液樣本，該檢測試片包括：
    一採樣區；
    一傳送區；以及
    一反應區，該傳送區設置於該採樣區以及該反應區之間，該反應區具有一纖維基材，且複數第十七型膠原蛋白抗原固定於該纖維基材。
11. 【第11項】

    如申請專利範圍第10項所述之檢測試片，其中該體液樣本為體表體液樣本。
12. 【第12項】

    如申請專利範圍第10項所述之檢測試片，其係為類天疱瘡檢測試片。
13. 【第13項】

    如申請專利範圍第10項所述之檢測試片，其中該纖維基材為高密度纖維基材，其平均孔徑的範圍係介於0.7～12微米。
14. 【第14項】

    一種檢測系統，用於檢測一生物體之一體表體液樣本，該檢測系統包括：
    一檢測試片．該檢測試片包括一採樣區、一傳送區以及一反應區，該傳送區設置於該採樣區以及該反應區之間，該反應區具有一纖維基材，且複數第十七型膠原蛋白抗原固定於該反應區；以及
    一偵測裝置，偵測該體表體液樣本與該些第十七型膠原蛋白抗原之交互反應。
15. 【第15項】

    如申請專利範圍第14項所述之檢測系統，係用於檢測類天疱瘡。
16. 【第16項】

    如申請專利範圍第14項所述之檢測系統，其中該體表體液樣本包含能專一性辨識該些第十七型膠原蛋白抗原之一抗體或抗體片段。