TW201701890A

TW201701890A - 具有血管鬆弛作用之酵母萃取物

Info

Publication number: TW201701890A
Application number: TW105116361A
Authority: TW
Inventors: Tomomi Saiki; Masato Omae; Kazuhiro Hamasawa
Original assignee: Kohjin Life Sciences Co Ltd
Priority date: 2015-05-29
Filing date: 2016-05-26
Publication date: 2017-01-16
Also published as: WO2016194778A1; CN107613996A; KR102797719B1; JPWO2016194778A1; KR20180012755A; JP6789214B2

Abstract

提供高血壓患者、被稱為高血壓危險群之健康者副作用少且來自安全食物之血管鬆弛劑。更一步地以提供含有該組成物之飲食品、健康食品、機能性食品、健康輔助食品等之食品類、飲料類為課題。以酵母之萃取物作為有效成分。就酵母萃取物而言，發現藉由將酵母進行熱水處理、酸或鹼處理、及酵素處理之簡單操作而獲得之酵母萃取物具有更優良之血管鬆弛作用。

Description

具有血管鬆弛作用之酵母萃取物

本發明提供含有來自圓酵母之水性溶劑萃取物作為有效成分，且血管鬆弛作用優良之食品組成物及醫藥組成物。

高血壓症因為缺乏自覺症狀，會在未察覺時惡化，有時也會對其他臟器造成不好的影響，作為併發症併發各種血管性疾病。就主要的併發症而言可列舉心絞痛、心肌梗塞、腦梗塞、腎功能低落、剝離性主動脈瘤等。此等中，也有若惡化嚴重時會致命者。

就高血壓症之治療方法而言，有生活習慣的改善及藥物治療。就生活習慣的改善一般而言可列舉飲食控制、減量、酒精的控制、適度的運動、禁菸等。此等係因為不使用藥物而有副作用的隱憂少或經濟上負擔少的優點，但如食物鹽分限制之類的飲食控制或減量係需要長時間才能使症狀有所改善，有時會成為患者的負擔。

另一方面，就藥物療法而言，係依據對象之血壓高低或併發症的有無來選擇適當之藥劑，可列舉利尿劑、血管張力素轉化酶抑制劑、鈣拮抗劑、交感神經阻斷藥等。此等醫藥品主要為醫療機關中於重症之高血壓患者上所使用者，雖然有效性高，但必須長期持續服用，且不能夠自行判斷而去服用或中止服用。另外，也有著副作用多的課題存在。

因此，為了高血壓患者、高血壓危險群之高血壓症的預防、改善，而有副作用少、安全且可持續地實施之方法的需求，到目前為止已有許多的健康食品開發出來。例如已知有裙帶菜肽(專利文獻1)、杜仲葉配糖體(專利文獻2)、鰹魚乾肽(專利文獻3)、乳三肽(專利文獻4)、沙丁魚肽(專利文獻5)、γ-胺基丁酸摻合食品等，但鮮少有人知道酵母萃取物具有血管鬆弛作用。 [先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]日本特開2002-138100號公報 [專利文獻2]日本特開2008-106008號公報 [專利文獻3]日本特開2014-5243號公報 [專利文獻4]日本特開平11-98978號公報 [專利文獻5]日本特開2006-56805號公報

[發明所欲解決之課題] 本發明提供對於高血壓患者、高血壓危險群副作用少，安全且低廉，在食品領域或醫藥品領域中之有效用之來自食物的血管鬆弛劑。 [解決課題之手段]

本發明中，對於從大鼠摘出之胸部主動脈血管確認了血管鬆弛作用，發現了藉由將酵母進行熱水處理、酸或鹼處理、酵素處理之簡單的操作而獲得之酵母萃取物具有血管鬆弛作用。 [發明之效果]

本發明之血管鬆弛劑因為是從已知為食品的酵母所萃取而得之萃取物，不僅生產較容易且價格低廉，而且高血壓患者、高血壓危險群為了高血壓症的預防、改善，可安全且長期持續地將本發明之血管鬆弛劑作為食品來攝取。

製造本發明之酵母萃取物所使用之酵母只要是一般使用之酵母即可使用。具體而言可列舉麵包酵母、啤酒酵母、圓酵母等。其中，尤其期望為圓酵母(Candida utilis)。本發明中使用之酵母萃取物係麩胱甘肽含量為15質量%以上、腺嘌呤含量為0.05質量%以上、腺苷含量為0.05質量%以上、甲基硫代腺苷含量為0.1質量%以上之酵母萃取物。更期望為麩胱甘肽含量為15質量%以上、腺嘌呤含量為0.1質量%以上、腺苷含量為0.1質量%以上、甲基硫代腺苷含量為0.2質量%以上之酵母萃取物。

如此之酵母萃取物係藉由從含有麩胱甘肽之酵母菌體萃取出酵母萃取物，而獲得麩胱甘肽含量為15質量%以上之酵母萃取物。酵母之培養形式雖然沒有特別之限制，一般而言可使用批式培養或連續培養之任一者。培養基也可使用一般所使用者。例如，就碳源而言使用葡萄糖、乙酸、乙醇、甘油、糖蜜、亞硫酸紙漿廢液等，就氮源而言使用尿素、氨、硫酸銨、氯化銨、硝酸鹽等。就磷酸、鉀、鎂源而言例如可使用過磷酸鈣、磷酸銨、氯化鉀、氫氧化鉀、硫酸鎂、氯化鎂等，其他還可添加鋅、銅、錳、鐵離子等無機鹽。除此之外，還可添加維生素、胺基酸、核酸相關物質等，或可添加酪蛋白、酵母萃取物、肉精、蛋白腖等有機物。培養溫度係21~37℃，宜為25~34℃，pH係3.0~8.0，尤其宜為3.5~7.0。

在酵母菌體培養後進行本發明之酵母萃取物的萃取。酵母萃取物之萃取法係沒有特別之限制，一般而言，可為自消化法、熱水萃取法、酵素萃取法、酸或鹼萃取法，或是可藉由此等之組合進行萃取。

藉由自消化來萃取酵母萃取物時，例如在55℃攪拌4小時。若是酵素萃取法，則以細胞壁溶解酵素或蛋白酶等進行攪拌萃取。若是酸萃取法，則以硫酸等調整至酸性後進行萃取。若是鹼萃取法，則調整至鹼性後進行萃取。或者，也可在自消化後，進行酵素萃取等組合此等方法來進行。

萃取出酵母萃取物後藉由離心分離而分離出酵母殘渣，濃縮後藉由冷凍乾燥或熱風乾燥可獲得含有麩胱甘肽之酵母萃取物。酵母萃取物中所含有之麩胱甘肽係指還原型麩胱甘肽。

本發明之酵母萃取物係酵母萃取物中麩胱甘肽含量為15質量%以上者。欲使酵母萃取物中麩胱甘肽含量為15%以上，盡可能地使用培養酵母中之麩胱甘肽含量高者，從該酵母菌體藉由上述之萃取法萃取出酵母萃取物則效率較良好。就使酵母中之麩胱甘肽含量提高的方法而言，可為公知方法。例如有在培養基中添加鋅離子之方法(日本特開2000-279164號公報)、以鎘耐性、巨環內酯系抗生素耐性作為指標之麩胱甘肽高含量酵母株的取得方法(日本特開2006-42637號公報、日本特開2006-42638號公報)。也可如日本特開2011-103789號公報，從變異酵母菌體進行萃取來獲得。此外，若為一般販售之酵母萃取物，例如有興人生命科學公司製之「HITHION™」YH-15。

本案發明之麩胱甘肽濃度之測定方法係進行DTNB-HPLC法(Journal of Chromatography, 194(1980)424-428)。其中，本案之麩胱甘肽含量係指還原型麩胱甘肽含量。

腺嘌呤、腺苷、甲基硫代腺苷濃度係可藉由下述之測定方法、條件進行定量。也就是說，將試料20mg以0.1w/w%甲酸混合定量至100mL，藉由液相層析串聯質譜儀分析法(LC-MS/MS)進行分析。將腺嘌呤、腺苷、甲基硫代腺苷(皆為自由態)之各試藥作為標準品，在相同條件下於LC-MS/MS進行測定，藉由該峰之面積製作檢量線，算出試料中之腺嘌呤、腺苷、甲基硫代腺苷之含量。分析條件可如同以下設定。＜LC條件＞・管柱:Inertsil ODS-3(2.1mm×150mm) ・流動相:A:0.1w/w%甲酸、B:0.1w/w%甲酸/乙腈、A→B:20分鐘線性梯度・流量:0.2mL/分鐘・管柱溫度:45℃ ＜MS/MS條件＞・測定機器:amazon(Bruker daltonics公司) ・離子化方法:ESI-Positive ・離子監測:腺嘌呤:m/z136→136、腺苷:m/z268→136、甲基硫代腺苷:m/z298→136

本發明中，酵母萃取物係使用麩胱甘肽15質量%以上，且腺嘌呤含量為0.05質量%以上、腺苷含量為0.05質量%以上、甲基硫代腺苷含量為0.1質量%以上者。只要是該含量，使用之酵母萃取物並沒有限制，例如也可將兩種以上之酵母萃取物混合成為麩胱甘肽含量15質量%以上、腺嘌呤含量0.05質量%以上、腺苷含量0.05質量%以上、甲基硫代腺苷含量0.1質量%以上之酵母萃取物。更期望酵母萃取物為麩胱甘肽含量15質量%以上、腺嘌呤含量0.1質量%以上、腺苷含量0.1質量%以上、甲基硫代腺苷含量0.2質量%以上之酵母萃取物。

本發明之血管鬆弛劑之有效成分係酵母萃取物，故可直接攝取酵母萃取物作為血管鬆弛劑，此外也可製成與其他素材的混合物後攝取。

本發明之血管鬆弛劑含有上述酵母萃取物作為有效成分，且指以食品、飲品、嗜好品、營養補充品、醫藥品等的方式經口攝取者。其形態沒有特別之限定。此外，就營養補充品或醫藥品之形態也沒有特別之限定，也可為錠劑、膠囊、軟膠囊、營養飲料狀之形態來攝取。

在飲食品中上述組成物之摻合量係只要具有血管鬆弛作用便沒有特別之限定，例如本發明之酵母萃取物係相對於飲食品之重量100g含有10μg~20g即可。其中適宜為100μg~2g，更適宜為1mg~1g。

醫藥品中組成物之摻合量沒有特別之限定，例如本發明之酵母萃取物係相對於組成物之重量100g含有10μg~20g即可。其中適宜為100μg~2g，更適宜為1mg~1g。 [實施例]

以下將列舉實施例來更詳細說明本發明，但本發明並非僅限定於此等實施例。

(實施例1) 1.血管張力測定方法 a.試藥、材料・大鼠:雄性SD大鼠(8~11週) ・緩衝液:PSS(pH7.4)[NaCl 145、KCl 5、Na₂ HPO₄ 1、CaCl₂ 2.5、MgSO₄ ・7H₂ O 0.5、葡萄糖 10、HEPES 5(mM)] ・收縮刺激劑:1.0μM脫羥腎上腺素(PE) b.製備・PE:溶解於PSS並使其成為10μM ・「HITHION™」YH-15:溶解於製備而得之10μM PE。使用之「HITHION™」YH-15係麩胱甘肽含量為19.0質量%、腺嘌呤含量為0.2質量%、腺苷含量為0.1質量%、甲基硫代腺苷含量為0.4質量%。

c.測定流程摘出大鼠胸部主動脈血管後，在37℃之PPS中，邊藉由混合氣體(95%O₂ 、5%CO₂ )起泡邊進行45分鐘達到了平衡化。之後，除去脂肪組織並切斷為2~3mm後，作為血管環標本。於以4.5mL之PSS裝滿之器官浴槽(Organ Bath)中的掛鉤對上放置血管環標本，給予2g之負荷45分鐘使其平衡化。其中，平衡化中每15分鐘以經起泡處理之PSS更換器官浴槽中之溶液。平衡化後添加0.5mL之10μM PE(最終濃度:1μM)，使血管收縮。在收縮後之張力安定了以後，藉由將器官浴槽中之溶液以一定量逐次地等量置換為「HITHION™」YH-15溶液，開始進行張力變化之測定。結果如圖1所示。血管鬆弛率定義為令添加1μM PE後之張力增加量(ΔTc)為100時之添加「HITHION™」YH-15溶液後之張力減少量(ΔTs)的比率，藉由下式算出。血管鬆弛率(%)=ΔTs/ΔTc×100 「HITHION™」YH-15之濃度與血管鬆弛率的關係表示於圖2。

2.血管張力測定結果確認了酵母萃取物「HITHION™」YH-15有濃度依存性的血管鬆弛作用 (圖1及圖2)。此外，獲得就抑制1.0μM PE之作用50%之濃度的EC₅₀ 值而言係7.16±5.48mg/mL。也就是說，可獲得具有血管鬆弛作用之酵母萃取物。而，針對作為陽性對照也同樣進行評價的血管鬆弛藥劑維拉帕米(Verapamil)，也確認有血管鬆弛效果(圖3及圖4)。EC₅₀ 值係1.66±0.74μg/mL。

(比較例1) 使用「NUCLEAMINE™」(興人生命科學(股)公司製)替代作為實施例1之酵母萃取物之「HITHION™」YH-15以外，與實施例1進行同樣之試驗。其中酵母萃取物「NUCLEAMINE™」係麩胱甘肽含量為0.8質量%、腺嘌呤含量為0.1質量%、腺苷含量為0.6質量%、甲基硫代腺苷含量為0.2質量%。對於「NUCLEAMINE™」所致之血管鬆弛作用進行評價，結果認定其不具有血管鬆弛作用。

(比較例2) 使用「AROMILD™ G」(興人生命科學(股)公司製)替代作為實施例1之酵母萃取物之「HITHION™」YH-15以外，與實施例1進行同樣之試驗。其中，酵母萃取物「AROMILD™ G」係麩胱甘肽含量為0.1質量%、腺嘌呤含量為0.1%、腺苷含量為0.2%、未檢出有甲基硫代腺苷。對於「AROMILD™ G」所致之血管鬆弛作用進行評價，結果認定其不具有血管鬆弛作用。 [產業上利用性]

本發明之酵母萃取物具有主動脈鬆弛作用，除此之外本發明者們深入研究之結果得知，本酵母萃取物中被吸附於ODS管柱之分子量500以下的低分子級分具有強力之作用。血管平滑肌之緊張性與血管病性之疾病(例如血管萎縮、高血壓、動脈硬化等)或狀態的關係已為周知，從具有血管鬆弛作用之藥劑對於高血壓症、心臟衰竭、心絞痛、缺血性心臟病或心肌梗塞之治療及預防有效果，可以設想本發明之酵母萃取物也對於此等之疾病或狀態有效果。

無

[圖1]圖1係添加「HITHION™」YH-15時之血管張力層析圖。 [圖2]圖2係添加「HITHION™」YH-15時之血管鬆弛率(%)。 [圖3]圖3係添加維拉帕米(Verapamil)時之血管張力層析圖。 [圖4]圖4係表示添加維拉帕米時之血管鬆弛率(%)。

無

Claims

一種血管鬆弛劑，含有酵母萃取物作為有效成分。
如申請專利範圍第1項之血管鬆弛劑，其中，含有麩胱甘肽含量為15重量%以上、腺嘌呤含量為0.05質量%以上、腺苷含量為0.05質量%以上、甲基硫代腺苷含量為0.1質量%以上之酵母萃取物作為有效成分。
一種具有血管鬆弛作用的酵母萃取物。
如申請專利範圍第3項之具有血管鬆弛作用的酵母萃取物，其中，麩胱甘肽含量為15重量%以上、腺嘌呤含量為0.05質量%以上、腺苷含量為0.05質量%以上、甲基硫代腺苷為含量0.1質量%以上。
如申請專利範圍第3或4項之具有血管鬆弛作用的酵母萃取物，其中，該酵母係圓酵母(Candida utilis)或啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。