TW201924719A - 抑制腫瘤移轉的方法 - Google Patents

Abstract

一種抑制實體腫瘤移轉之凝血脂素A2受體拮抗劑，諸如伊非曲班(ifetroban)。其抑制表面及顯微肺移轉之形成。凝血脂素A2受體拮抗劑可抑制該腫瘤移轉過程，而不影響原發性腫瘤之生長或發展。

Description

抑制腫瘤移轉的方法

本發明提供用凝血脂素A2受體拮抗劑抑制實體腫瘤移轉之方法。

癌症在全球範圍內仍係發病率及死亡率之主要原因。對於大多數癌症而言，儘管靶向療法及免疫治療策略之新進展正改變一些癌症對化學療法之依賴性，但細胞毒素化學療法已持續數十年作為護理之標準。不管一些癌症之治療進展如何，癌症移轉及復發為貫穿初期診斷出之所有實體癌之普遍擔憂。

移轉癌診斷給各病患帶來影響生活品質之顯著的情感、社會及經濟負擔，在很大程度上此係因為此等診斷一般與早期死亡相關聯。即使當癌症處於緩解狀態(臨床靜默狀態)時，視癌症之類型而定，微觀移轉，甚至單個癌細胞可貫穿整個身體以臨床上不可偵測之狀態潛伏持續不定長之時段。甚至對最敏感之成像模式，此等潛在危險細胞仍為不可見的，直至其生長至臨床上明顯之水平。

幾乎沒有療法直接靶向腫瘤細胞侵入及/或移轉且當前均未被FDA批准用於此適應症之臨床使用。特定藉由中和或妨礙腫瘤細胞之問題分散來預防移轉之有意方法將為重要的，且可以數個不同形式表現：將細胞圍阻於原發性部位、使癌細胞無法存活於循環中、減少逃避免疫監視、預防血小板/腫瘤細胞聚集體、預防繼發性部位處之外滲及/或使繼發性部位不適於移轉性接種。特定地影響貫穿癌症之移轉性過程之藥劑將因此代表癌症管理之新範式，解決未滿足之醫學需要且最終旨在阻斷癌症播散-聚焦於超出原發性腫瘤。

移轉之阻斷同樣可具有額外間接益處。舉例而言，阻止癌症散佈之藥劑可允許以減少之劑量或較短持續時間使用習知化學療法。此為重要考慮因素，此係由於除了快速生長之腫瘤細胞以外，化學療法通常亦靶向快速生長之健康細胞，從而引起與治療相關聯之毒性、組織損傷及發病率。此外，旨在預防移轉性播散之治療可與分子靶向抗腫瘤劑組合使用。在此情境下，應注意對分子靶向藥劑之後天耐藥性通常產生於移轉性復發之部位處。因此，對移轉性播散之抑制可降低後天耐藥性之發生率及/或速率，從而提高精密癌症療法之臨床成效。

診斷患有實體癌之病患可接收包括手術、輻射療法、化學療法、疫苗、激素調節劑、免疫療法或分子靶向療法之治療中之任一者或其組合。在包括用輔助全身性療法治療任何微觀移轉性疾病之治療過程之後，病患可不具有癌症之剩餘臨床跡象。在此等情況下，認為癌症處於「緩解狀態」。此等病患、其家庭及其醫師依賴於觀察等待直至癌症之臨床跡象恢復之時間。預防任何剩餘腫瘤細胞之初始或繼發性移轉性散佈--藉由靶向移轉性過程本身--可用主動預防替代觀察等待。

因此需要阻斷或抑制實體腫瘤自原發性腫瘤部位散佈或移轉之有效療法。

在一個態樣中，本發明提供一種抑制實體腫瘤移轉之方法，該方法包含向有需要之個體投與有效抑制個體中之實體腫瘤的移轉之量之凝血脂素A2受體拮抗劑。

在另一態樣中，本發明提供凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，以用於治療或抑制個體中之實體腫瘤移轉。

在另一態樣中，本發明提供凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，以用於治療或抑制實體腫瘤移轉之方法中，其中該方法包含向有需要之個體投與凝血脂素A2受體拮抗劑。

在另一態樣中，本發明提供凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物用於製備用以治療或抑制個體中之實體腫瘤移轉的藥劑的用途。

本申請案主張2017年11月29日申請之美國臨時申請案第62/592,365號之優先權，其以全文引用之方式併人本文中。
癌移轉

與其他相比，癌症可以不同速率散佈且在一名病患中採用相異的分子及細胞路徑。此變化性中之一些可歸因於或多或少有利於移轉性散佈之宿主環境。相比於癌細胞之局部組織侵入，移轉需要經由血液及/或淋巴系統將癌細胞傳送至遠距離部位；神經周侵入亦可在數種癌症中起重要作用。移轉可能涉及腫瘤細胞聚集體之分離及栓塞，該等聚集體可經由與循環內之造血細胞之交互作用增加大小。移轉之其他態樣包括藉由與初始組織侵入中所涉及之彼等類似的機構之脈管(血液及淋巴兩者)內之腫瘤栓塞的循環、運輸通過循環且停滯於毛細管床中之腫瘤細胞之存活、及腫瘤栓塞之外滲。

如本文所使用之「腫瘤/癌細胞之移轉」係指腫瘤/癌細胞自原始部位播散/傳播至體內其他處的一或多個非臨近部位，例如，藉助於例如血管或淋巴管自一個器官或部分至不與其直接連接之另一者。腫瘤/癌細胞之移轉可例如導致繼發性或後續腫瘤在除原發性腫瘤之位置以外的部位處形成。本發明方法之腫瘤/癌細胞可為任何實體腫瘤/癌症(諸如本文所述者)之細胞。

與移轉過程(亦即，播散/傳播)不同的是繼發性部位處之移轉性腫瘤/癌症之生長，其可涉及產生移轉性病灶、血管形成機構及防禦宿主免疫反應之器官實質內之腫瘤細胞的增殖。

有可能經由藥理學藥劑為目標之移轉中之經選擇的血小板介導步驟包括：含血小板之腫瘤細胞聚集體之分離及栓塞；循環由聚集之血小板保護而免於宿主免疫反應之腫瘤細胞；及由P-選擇素介導之腫瘤細胞-血小板交互作用促進之腫瘤栓塞移生。

儘管數個研究指示血小板參與癌症移轉之路徑(參見圖6)，但以預防或中斷移轉性疾病為有意目標之探究操縱此等連接以抑制血小板活化之研究仍處於極初期。尚不存在此類經論證療法。血小板與腫瘤細胞相互作用之不同方式及彼等效果之複雜方向性尚未完全理解，且第6圖並不意欲為此領域之窮盡性表示；例如，關於血小板與腫瘤細胞之間的交互作用、其他因素可在整體疾病過程中發揮之作用及抗血小板療法之潛在益處的研究還有很多，包括諸如粒線體DNA之細胞間移轉及各種觀測到的表觀遺傳改變之因素。

凝血脂素A2受體拮抗劑可貫穿多個腫瘤/癌症類型在實體腫瘤移轉抑制或預防中具有廣泛效用。不受特定理論束縛，凝血脂素A2受體拮抗劑減少血小板凝集且可降低腫瘤細胞自血管內皮分離且附著至血小板之能力。經由用腫瘤細胞阻斷血小板凝集，凝血脂素A2受體拮抗劑可經由經減少之整合素介導及/或選擇素介導之細胞存活信號傳導降低循環腫瘤細胞存活率。凝血脂素A2受體拮抗劑可藉由影響P-選擇素介導之交互作用來預防移生。血小板可保護循環腫瘤細胞叢免受宿主免疫反應之影響。經由用腫瘤細胞阻斷血小板凝集，凝血脂素A2受體拮抗劑可中斷血小板與腫瘤細胞叢之間的交互作用，藉此增加循環腫瘤細胞對宿主免疫反應之曝露且抑制移轉。凝血脂素A2受體拮抗劑可抑制循環腫瘤細胞叢之形成、循環腫瘤細胞叢之移動及/或循環腫瘤細胞叢與血小板之聚集。
抑制腫瘤移轉之方法

本發明之一態樣涵蓋一種用於抑制個體中之腫瘤細胞移轉之方法。該方法包含投與有效抑制個體中之實體腫瘤之移轉的量之凝血脂素A2受體拮抗劑。

本發明亦提供凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，以用於治療或抑制個體中之實體腫瘤移轉。本發明亦提供凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，以用於治療或抑制實體腫瘤移轉之方法中，其中該方法包含向有需要之個體投與凝血脂素A2受體拮抗劑。實體腫瘤移轉之治療或抑制包含以有效抑制個體中之實體腫瘤的移轉之量使用凝血脂素A2受體拮抗劑。

本發明亦提供凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物用於製備用以治療或抑制個體中之實體腫瘤移轉的藥劑的用途。本發明亦提供凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物用於製備治療或抑制實體腫瘤移轉之方法中的藥劑之用途，其中該方法包含向有需要之個體投與凝血脂素A2受體拮抗劑。實體腫瘤移轉之治療或抑制包含以有效抑制個體中之實體腫瘤的移轉之量使用凝血脂素A2受體拮抗劑。

腫瘤細胞移轉之抑制可藉由整體移轉性負擔之降低表明，例如，相對於未經治療個體之經治療個體中之移轉性腫瘤的數目、分佈或體積。在一個實施例中，移轉性腫瘤之數目可減少至少兩倍。在另一實施例中，移轉性腫瘤之數目可減少至少十倍。在另一實施例中移轉性腫瘤之數目可減少至少50倍。在另一實施例中移轉性腫瘤之數目可減少至少200倍。在另一實施例中，移轉性腫瘤之數目可減少至使得不可偵測到移轉性腫瘤之此類程度。在另一實施例中，移轉性腫瘤可受限於一個器官或組織，而非散佈至兩個或多於兩個器官或組織。

移轉之抑制可根據本發明藉由諸多參數量測，且例如可藉由繼發性腫瘤之延遲出現、繼發性腫瘤之減緩發展、繼發性腫瘤之降低發生率、疾病之次要作用的減緩或降低嚴重程度、停滯腫瘤生長、移轉性復發之較低速率及腫瘤之消退以及其他評估。極端地，完全抑制在本文中被稱作預防。此外，移轉抑制可藉由存在於動物中之移轉性病灶之減少來識別。在另一實施例中，移轉之抑制可表現為經治療個體之無移轉生存期。在一些實施例中，凝血脂素A2受體拮抗劑係以有效降低移轉性復發速率之量投與。

在一些實施例中，凝血脂素A2受體拮抗劑係以有效抑制個體中之實體腫瘤之移轉，而不抑制實體腫瘤自身(亦即，在原發性/繼發性部位處)之生長/發展之量投與。因此，凝血脂素A2受體拮抗劑可抑制腫瘤移轉過程，而不影響原發性/繼發性腫瘤之生長或發展。

個體可為哺乳動物，諸如人類病患。非人類動物包括伴侶動物，諸如貓、犬及馬。設想以用於根據本發明方法治療之其他類型的非人類動物包括商業上重要之動物，包括羊、豬、牛及其他動物。

原發性癌症可為因上皮細胞引起之癌症。原發性癌症類型可能係肺癌、非小細胞肺癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、胰臟癌、黑素瘤、肉瘤、子宮頸癌、子宮內膜癌、肝癌、子宮癌、腎癌(kidney/renal cancer)、胃食道癌、結腸癌、膀胱癌、口腔癌或喉癌。

可抑制及/或消除之移轉之類型包括移轉至肺及/或骨骼(諸如至脊柱)。設想本發明方法及製劑亦將發現在降低及/或預防腫瘤/癌細胞移轉至其他器官，諸如藉助於實例而非限制，移轉至卵巢、肝臟、腦、腎臟、脾臟、腸、腎上腺或任何其他組織及/或器官或組織及/或器官之組合方面的效用。

適用於所揭示之方法之凝血脂素A2受體拮抗劑包括但不限於伊非曲班、GR32191、SQ29548、磺曲苯(sulotroban)、達曲班(daltroban)、利諾曲班(linotroban)、雷馬曲班(ramatroban)、塞曲司特(seratrodast)、特魯曲班(terutroban)、Z-235、LCB-2853、SQ28668、ICI 192605、AH23848、ONO3708、CPI-211或蒎烷TXA₂ 。適合的凝血脂素A2受體拮抗劑亦描述於美國專利第5,100,889號中，其以引用之方式併入本文中。

舉例而言，凝血脂素A2受體拮抗劑可具有式(I)

包括其全部立體異構體，其中
m為1、2或3；
n為0、1、2、3或4；
Z為-(CH₂ )₂ -、-CH=CH-，或；
Y為O、單鍵或-CH=CH-；
R為CO₂ H、CO₂ C_{1 - 6} 烷基、CH₂ OH、-CONHSO₂ R³ 、-CONHR^3a 或 -CH₂ -四唑-5-基；
R³ 為C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)；
R^3a 為C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)；
X為O、S或NH；
R¹ 為氫、C_{1 - 8} 烷基、C_{2 - 8} 烯基、C_{2 - 8} 炔基、G¹ 、-L¹ -G¹ 、-(CH₂ )_t -C(O) -NHR^1a 或-(CH₂ )_t -NH-C(O)R^1a ；
G¹ 為6員至10員芳基、C_{3 - 12} 環烷基、5員至12員雜芳基或4員至12員雜環基；
L¹ 為C_{1 - 6} 伸烷基；
t為1至12；
R^1a 為C_{1 - 6} 烷基、C_{3 - 12} 環烷基、-L¹ -C_{3 - 12} 環烷基或6員至10員芳基；
R² 為氫、C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)；
或R¹ 及R² 與其附著之氮一起形成4員至8員雜環；
其中各芳基獨立地且視情況經1或2個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、氰基、C_{1 - 6} 烷基、C_{1 - 6} 鹵烷基、OH、-OC_{1 - 6} 烷基、 -OC_{1 - 6} 鹵烷基、-SC_{1 - 6} 烷基、-S(O)C_{1 - 6} 烷基、-S(O)₂ C_{1 - 6} 烷基、-OC_{1 - 6} 伸烷基-苯基、-S-苯基、-S(O)-苯基及-S(O)₂ -苯基；
其中各環烷基獨立地且視情況經1至4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C_{1 - 6} 烷基、C_{1 - 6} 鹵烷基、OH及-OC_{1 - 6} 烷基。

凝血脂素A2受體拮抗劑包括式(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)及(I-f)之化合物，其中Z¹ 為-(CH₂ )₂ -或-CH=CH-。

在一些實施例中，Z¹ 為-CH=CH-。在另外的實施例中，Z¹ 為-CH=CH-，m為1且n為2。在其他實施例中，Z¹ 為-CH=CH-且R為CO₂ H。

在式(I)中，Z可為。

在一些實施例中，式(I)具有式(I-g)，其中R、R¹ 、R² 、X、m及n如本文中所定義。

在一些實施例中，式(I)具有式(I-h)，其中R、R¹ 、R² 、X、m及n如本文中所定義。

包括於式(I)及(I-a)至(I-h)中之為m為1，n為2，R為CO₂ H，R² 為氫且R¹ 為C_{1 - 8} 烷基之化合物。根據式(I)、(I-g)或(I-h)之任何化合物為X為O之化合物。

凝血脂素A2受體拮抗劑可呈醫藥學上可接受之鹽之形式。舉例而言，在式(I)及(I-a)至(I-h)中，R處之基團CO₂ H可呈鹼金屬鹽，諸如鈉鹽(亦即，R = CO₂ Na)之形式。

化合物可以立體異構體之形式存在，其中存在非對稱或對掌性中心。視圍繞對掌性碳原子之取代基之組態而定，立體異構體為「R 」或「S 」。本文中所使用之術語「R 」及「S 」係如IUPAC 1974 Recommendations for Section E, Fundamental Stereochemistry, Pure Appl. Chem., 1976, 45: 13-30中所定義之組態。本發明涵蓋各種立體異構體及其混合物且此等特定包括在本發明之範疇內。立體異構體包括對映異構體及非對映異構體，及對映異構體或非對映異構體之混合物。化合物之個別立體異構體可自含有非對稱或對掌性中心之市售起始材料製備，或製備外消旋混合物後，接著如一般技術者所熟知之解析方法，以合成方式製備。此等解析方法為例如：(1)由對映異構體之混合物附接至對掌性輔劑，藉由再結晶或層析法分離非對映異構體之所得混合物，及視情況從輔劑釋放純光學性產物，如Furniss、Hannaford、Smith、及Tatchell，「Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry」，第5版(1989), Longman Scientific & Technical, Essex CM20 2JE, England中所述，或(2)於對掌性層析管柱上直接分離光學對映異構體之混合物；或(3)部分再結晶法。

本發明亦包括經同位素標記之化合物，該化合物係與式(I)中所列舉者相同，但其中一或多個原子被具有不同於通常在自然界中所發現之原子質量或質量數之原子質量或質量數的原子置換。適用於包括在本發明化合物中之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟及氯，分別例如但不限於² H、³ H、¹³ C、¹⁴ C、¹⁵ N、¹⁸ O、¹⁷ O、³¹ P、³² P、³⁵ S、¹⁸ F、³⁶ Cl。經諸如氘(亦即² H)之較重同位素取代可提供因代謝穩定性提高所產生之特定治療優勢，例如延長活體內半衰期或降低劑量需求，因此在一些情況下較佳。化合物中可併入用於醫學成像之發射正電子的同位素及用於確定受體分佈之發射正電子的斷層攝影法(PET)研究。可併入式(I)化合物中之適合的發射正電子之同位素為¹¹ C、¹³ N、¹⁵ O及¹⁸ F。經同位素標記之式(I)化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術，或藉由與隨附實例中所描述者類似之方法，使用適當之標記同位素之試劑替代未經標記之試劑來製備。

如本文中所使用之術語「烷基」意謂直鏈或分支鏈飽和烴鏈。術語「低碳數烷基」或「C_{1 - 6} 烷基」」意謂含有1至6個碳原子之直鏈或分支鏈烴。術語「C_{1 - 4} 烷基」意謂含有1至4個碳原子之直鏈或分支鏈烴。烷基之代表性實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基及正癸基。

如本文中所使用之術語「烯基」意謂含有至少一個碳碳雙鍵之直鏈或分支鏈烴鏈。

如本文中所使用之術語「伸烷基」係指衍生自例如具有1至6個碳原子之直鏈或分支鏈烴的二價基團。伸烷基之代表性實例包括但不限於-CH₂ CH₂ -、-CH₂ CH₂ CH₂ -、-CH₂ CH₂ CH₂ CH₂ -及 -CH₂ CH₂ CH₂ CH₂ CH₂ -。

如本文中所使用之術語「芳基」係指苯基或附接至母分子部分且稠合至環烷基(例如，二氫茚基)、苯基(亦即，萘基)或非芳族雜環(例如，苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯-5-基)之苯基。

如本文中所使用之術語「環烷基」係指含有作為環成員之所有碳原子且不含雙鍵的飽和環系統。環烷基可為單環環烷基(例如，環丙基)、稠合雙環環烷基(例如，十氫萘基)或環之兩個非鄰接原子由1、2、3或4個碳原子之伸烷基橋鍵聯的橋接環烷基(例如，雙環[2.2.1]庚烷基)。環烷基之代表性實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、環壬基、環癸基、金剛烷基及雙環[1.1.1]戊基。

如本文中所使用之術語「鹵素」或「鹵基」意謂Cl、Br、I或F。

如本文中所使用之術語「鹵烷基」意謂一個、兩個、三個、四個、五個、六個、七個或八個氫原子經鹵素置換之如本文中所定義的烷基。

如本文中所使用之術語「雜芳基」係指含有芳族單環雜原子之環(單環雜芳基)或含有至少一個單環雜芳基的雙環系統(雙環雜芳基)。單環雜芳基為含有至少一個獨立地選自由N、O及S組成之群的雜原子(例如獨立地選自O、S及N之1、2、3或4個雜原子)之五或六員環。五員芳族單環具有兩個雙鍵且六員芳族單環具有三個雙鍵。雙環雜芳基為具有稠合至單環芳族或碳環、單環雜芳基或單環雜環之單環雜芳基環之8至12員環系統。雙環雜芳基經附著至芳環原子處之母分子部分。雜芳基之代表性實例包括但不限於吲哚基(例如，吲哚-1-基、吲哚-2-基、吲哚-4-基)、吡啶基(包括吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、吡唑基(例如，吡唑-4-基)、吡咯基、苯并吡唑基、1,2,3-三唑基(例如，三唑-4-基)、1,3,4-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、咪唑基、噻唑基、(例如，噻唑-4-基)、異噻唑基、噻吩基、苯并咪唑基(例如，苯并咪唑-5-基)、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、呋喃基、噁唑基、異噁唑基、嘌呤基、異吲哚基、喹喏啉基、吲唑基(例如，吲唑-4-基、吲唑-5-基)、喹唑啉基、1,2,4-三嗪基、1,3,5-三嗪基、異喹啉基、喹啉基、6,7-二氫-1,3-苯并噻唑基、咪唑并[1,2-a ]吡啶基(例如，咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)、啶基、吡啶并咪唑基、噻唑并[5,4-b ]吡啶-2-基、噻唑并[5,4-d ]嘧啶-2-基。

如本文中所使用之術語「雜環」或「雜環的」意謂單環雜環、雙環雜環或三環雜環。單環雜環為含有至少一個獨立地選自由O、N及S組成之群之雜原子的三、四、五、六、七或八員環。三或四員環不含或含有一個雙鍵及一個選自由O、N及S組成之群之雜原子。五員環不含或含有一個雙鍵及一個、兩個或三個選自由O、N及S組成之群之雜原子。六員環含有零個、一個或兩個雙鍵及一個、兩個或三個選自由O、N及S組成之群之雜原子。七員及八員環含有零個、一個、兩個或三個雙鍵及一個、兩個或三個選自由O、N及S組成之群之雜原子。單環雜環之代表性實例包括但不限於氮雜環丁烷基、氮雜環庚烷基、氮雜環丙烷基、二氮雜環庚烷基、1,3-二氧雜環己烷基、1,3-二氧戊環基、1,3-二硫基、1,3-二噻烷基、咪唑啉基、咪唑啶基、異噻唑啉基、異噻唑啶基、異噁唑啉基、異噁唑啶基、嗎啉基、2-側氧基-3-哌啶基、2-側氧基氮雜環庚烷-3-基、噁二唑啉基、噁二唑啶基、噁唑啉基、噁唑啶基、氧雜環丁烷基、氧雜環庚烷基、氧雜環辛烷基、哌嗪基、哌啶基、哌喃基、吡唑啉基、吡唑啶基、吡咯啉基、吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、四氫噻吩基、噻二唑啉基、噻二唑啶基、1,2-噻嗪烷基、1,3-噻嗪烷基、噻唑啉基、噻唑啶基、硫代嗎啉基、1,1-二氧離子硫代嗎啉基(硫代嗎啉碸)、硫代哌喃基及三噻烷基。雙環雜環為稠合至苯基之單環雜環、稠合至單環環烷基之單環雜環，或稠合至單環環烯基之單環雜環，或稠合至單環雜環之單環雜環、稠合至單環雜芳基之單環雜環，或螺雜環基團，或環之兩個非鄰接原子由1、2、3或4個碳原子之伸烷基橋，或兩個、三個或四個碳原子之伸烯基橋鍵聯的橋接單環雜環環系統。雙環雜環經附著至非芳環原子處之母分子部分(例如，2-氧螺[3.3]庚-6-基、吲哚啉-1-基、六氫環戊[b]吡咯-1(2H) -基)。雙環雜環之代表性實例包括但不限於苯并哌喃基、苯并硫哌喃基、烷基、2,3-二氫苯并呋喃基、2,3-二氫苯并噻吩基、2,3-二氫異喹啉基、2-氮雜螺[3.3]庚-2-基、2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基、氮雜雙環[2.2.1]庚基(包括2-氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)、氮雜雙環[3.1.0]己基(包括 3-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)、2,3-二氫-1H -吲哚基、異吲哚啉基、八氫環戊并[c ]吡咯基、八氫吡咯并吡啶基及四氫異喹啉基。三環雜環例如稠合至苯基之雙環雜環，或稠合至單環環烷基之雙環雜環，或稠合至單環環烯基之雙環雜環，或稠合至單環雜環之雙環雜環，或雙環之兩個非鄰接原子由1、2、3或4個碳原子之伸烷基橋，或兩個、三個或四個碳原子之伸烯基橋鍵聯的雙環雜環。三環雜環之實例包括但不限於八氫-2,5-環氧并環戊二烯、六氫-2H -2,5-甲橋環戊并[b ]呋喃、六氫-1H -1,4-甲橋環戊并[c ]呋喃、氮雜-金剛烷(1-氮雜三環[3.3.1.13,7]癸烷)及氧雜-金剛烷(2-氧雜三環[3.3.1.13,7]癸烷)。單環、雙環及三環雜環連接至非芳環原子處之母分子部分。

諸如「烷基」、「環烷基」、「伸烷基」等之術語可放在指示存在於特定實例中之基團中的原子數目的指定之前(例如，「C_{1 - 4} 烷基」、「C_{3 - 6} 環烷基」、「C_{1 - 4} 伸烷基」)。如由熟習此項技術者通常所理解地使用此等指定。舉例而言，「C」繼之以下標數字之表述指示存在於隨後基團中的碳原子數。因此，「C₃ 烷基」為具有三個碳原子之烷基(亦即，正丙基、異丙基)。在指定範圍之情況下，如在「C_{1 - 4} 」中，隨後之基團之成員可具有落入所列舉範圍內的任何數目的碳原子。舉例而言，「C_{1 - 4} 烷基」為無論如何配置之具有1至4個碳原子之烷基(亦即，直鏈或分支鏈)。

在一些實施例中，抑制實體腫瘤移轉之方法包括與一或多種化學治療劑組合投與有效抑制移轉之量的凝血脂素A2受體拮抗劑。化學治療劑係指適用於治療癌症之化合物。化合物通常可為快速影響分裂細胞之細胞毒性劑，或其可為影響癌細胞之失調蛋白質之靶向治療劑。化學治療劑可為烷基化劑、抗代謝物、抗腫瘤抗生素、抗細胞骨架劑、拓樸異構酶抑制劑、抗激素劑、靶向治療劑、免疫療法或其組合。烷基化劑之非限制性實例包括六甲蜜胺、苯唑多巴、白消安、卡鉑、卡波醌、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、萘氮芥(chlomaphazine)、氯磷醯胺、氯脲菌素、順鉑、環磷醯胺、達卡巴嗪(DTIC)、雌氮芥、福莫司汀、異環磷醯胺、英丙舒凡、洛莫司汀、氮芥、氮芥、鹽酸甲氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、美法侖、美妥替哌(meturedopa)、尼莫司汀、新氮芥、苯芥膽甾醇、哌泊舒凡、潑尼氮芥(prednimustine)、雷莫司汀；替莫唑胺(temozolomide)、噻替派、三伸乙基三聚氰胺、三伸乙基磷醯胺、三伸乙基硫代磷醯胺、三甲基三聚氰胺、曲磷胺、尿嘧啶氮芥及烏瑞替哌(uredopa)。適合的抗代謝物包括但不限於胺基喋呤、安西他濱、阿紮胞苷、6-氮雜尿苷、卡培他濱、卡莫氟、阿糖胞苷或胞嘧啶阿拉伯糖苷(Ara-C)、雙去氧尿苷、迪諾特寧、去氧氟尿苷、依諾他濱、氟尿苷、氟達拉賓、5-氟尿嘧啶(5-FU)、吉西他濱(gemcetabine)、甲醯四氫葉酸(醛葉酸)、6-巰基嘌呤、甲胺喋呤、培美曲塞、蝶羅呤(pteropterin)、硫咪嘌呤、曲美沙特及硫鳥嘌呤。適合的抗腫瘤抗生素之非限制性實例包括阿克拉黴素(aclacinomysins)、放線菌素(actinomycin)、安麯黴素(authramycin)、偶氮絲胺酸(azaserine)、博來黴素(bleomycins)、放線菌素C (cactinomycin)、卡奇黴素(calicheamicin)、卡拉比辛(carabicin)、洋紅黴素(caminomycin)、嗜癌素(carzinophilin)、色黴素(chromomycins)、更生黴素(dactinomycin)、道諾黴素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮基-5-側氧基-L-正白胺酸、小紅莓(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊達比星(idarubicin)、麻西羅黴素(marcellomycin)、絲裂黴素(mitomycins)、黴酚酸(mycophenolic acid)、諾拉黴素(nogalamycin)、橄欖黴素(olivomycins)、培洛黴素(peplomycin)、潑非黴素(potfiromycin)、嘌呤黴素(puromycin)、三鐵阿黴素(quelamycin)、羅多比星(rodorubicin)、鏈黑黴素(streptonigrin)、鏈脲菌素(streptozocin)、殺結核菌素(tubercidin)、烏苯美司(ubenimex)、淨司他丁(zinostatin)及左柔比星(zorubicin)。適合的抗細胞骨架劑之非限制性實例包括秋水仙鹼(colchicine)、多西他賽(docetaxel)、大分子黴素(macromycin)、太平洋紫杉醇(taxol)、長春鹼、長春新鹼、長春地辛(vindesine)及長春瑞賓(vinorelbine)。適合的拓樸異構酶抑制劑包括但不限於安吖啶、依託泊苷(VP-16)、伊立替康、RFS 2000、替尼泊甙及拓朴替康。適合的抗激素劑之非限制性實例諸如胺魯米特(aminoglutethimide)、芳香酶抑制4(5)咪唑、比卡魯胺、非那雄安(finasteride)、氟他胺、戈舍瑞林(goserelin)、 4-羥基他莫昔芬、雷洛昔芬(keoxifene)、亮丙瑞林(leuprolide)、LYl 17018、米托坦、尼魯米特(nilutamide)、奧那司酮(onapristone)、雷諾昔酚(raloxifene)、他莫昔芬、托瑞米芬(toremifene)及曲洛司坦(trilostane)。靶向治療劑之非限制性實例包括單株抗體，諸如阿侖單抗(alemtuzumab)、貝伐單抗(bevacizumab)、卡培他濱、西妥昔單抗(cetuximab)、吉妥珠單抗(gemtuzumab)、海瑞古林(heregulin)、利妥昔單抗、曲妥珠單抗；酪胺酸激酶抑制劑，諸如甲磺酸伊馬替尼；及生長抑制多肽，諸如紅血球生成素、介白素、(例如，IL-1、IL-2 IL-3、IL-6)、白血病抑制因子、干擾素、血小板生成素、TNF-α、CD30配位體、4-1 BB配位體及Apo-1配位體。亦包括的係以上所列出之藥劑中之任一者之醫藥學上可接受之鹽、酸或衍生物。化學治療劑之投與模式可以且將視藥劑及腫瘤或贅瘤之類型變化。熟習此項技術者將能夠確定化學治療劑之適當劑量。

所揭示之化合物可以醫藥學上可接受之鹽形式存在。術語「醫藥學上可接受之鹽」係指水或油溶性或分散性、適用於治療病症且無異常毒性、刺激及過敏反應、與合理的效益/風險比相稱且對其預期用途有效之化合物的鹽或兩性離子。可於化合物之最終分離及純化期間或藉由使化合物之胺基與適合的酸分開反應來製備鹽。舉例而言，可將化合物溶解於適合的溶劑(諸如但不限於甲醇及水)中且用酸之至少一種等效物(如鹽酸)處理。所得鹽可沈澱出來且藉由過濾分離且在減壓下乾燥。替代地，可在減壓下移除溶劑及過量酸以得到鹽。代表性鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、甲酸鹽、羥乙磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲磺酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、草酸鹽、順丁烯二酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、丁二酸鹽、酒石酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、麩胺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽及其類似物。化合物之胺基亦可經烷基氯化物、溴化物及碘化物(諸如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、月桂基、十四烷基、十八烷基及其類似物)四級銨化。

可於所揭示化合物之最終分離及純化期間藉由羧基與適合的基質(諸如金屬陽離子(諸如鋰、鈉、鉀、鈣、鎂、或鋁)之氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽或有機一級、二級或三級胺)之反應製備鹼性加成鹽。可製備四級胺鹽，諸如彼等衍生自：甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基嗎啉、二環己胺、普魯卡因(procaine)、二苯甲基胺、N,N-二苯甲基苯乙基胺、1-二苯羥甲胺及N,N'-二苯甲基乙二胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶、哌嗪及其類似物。
劑量及投與

可將本發明中所用之組合物調配為用於經口、以噴霧劑形式、非經腸、皮下、靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、腹膜內、經鼻、經直腸、局部或經陰道投與之醫藥組合物或調配物。如本文中所使用之術語「非經腸」包括皮下、靜脈內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、肝內、病灶內及顱內注射或輸注技術。較佳地，組合物經口、腹膜內或靜脈內投與。

醫藥組合物及調配物可包括醫藥學上可接受之載劑。如本文中所使用之術語「醫藥學上可接受之載劑」意謂無毒、惰性之任何類型固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、囊封材料或調配助劑。可充當醫藥學上可接受之載劑之材料的一些實例為糖，諸如(但不限於)乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉，諸如(但不限於)玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，諸如(但不限於)羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；粉末狀黃蓍；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，諸如(但不限於)可可脂及栓劑蠟；油，諸如(但不限於)花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；二醇，諸如丙二醇；酯，諸如(但不限於)油酸乙酯及月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，諸如(但不限於)氫氧化鎂及氫氧化鋁；海藻酸；無熱原質水；等張生理食鹽水；林格氏溶液(Ringer's solution)；乙醇及磷酸鹽緩衝溶液；以及其他無毒相容潤滑劑，諸如(但不限於)月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂；以及根據調配者之判斷，組合物中亦可存在著色劑、釋放劑、塗佈劑、甜味劑、調味劑及芳香劑、防腐劑及抗氧化劑。

因此，可將化合物及其生理學上可接受之鹽調配用於藉由例如局部油基調配物中之固體給藥、滴眼劑、注射、吸入(經由口或鼻)、植入物的投與或經口、經頰、非經腸或直腸投藥。技術及調配物一般可發現於「Remington's Pharmaceutical Sciences」, (Meade Publishing Co., Easton, Pa.)中。治療性組合物典型地必須在製造及儲存條件下無菌且穩定。

所揭示之化合物之投與途徑及組合物的形式將指示待使用之載劑之類型。組合物可呈例如適用於全身性投與(例如，經口、經直腸、經鼻、舌下、經頰、植入物或非經腸)或局部投投與(例如，經肺、經鼻、經耳、經眼、脂質體遞送系統或離子導入療法)之各種形式。

用於全身性投與之載劑典型地包括以下中之至少一者：稀釋劑、潤滑劑、結合劑、崩解劑、著色劑、調味劑、甜味劑、抗氧化劑、防腐劑、滑動劑、溶劑、懸浮劑、濕潤劑、界面活性劑、其組合及其他載劑。

適用於經口投與之調配物可由(a)液體溶液；(b)作為固體或顆粒劑之各自含有預定量的活性成份膠囊、藥囊、錠劑、口含劑及糖衣錠；(c)散劑；(d)於適當液體中之懸浮液；及(e)適合的乳液組成。液體調配物可包括稀釋劑，諸如水及醇，例如乙醇、苄醇及含或不含添加醫藥學上可接受之界面活性劑之聚乙烯醇。膠囊形式可為含有例如界面活性劑、潤滑劑及惰性填充劑(諸如乳糖、蔗糖、磷酸鈣及玉米澱粉)之普通硬殼或軟殼明膠類型。錠劑形式可包括以下中之一或多者：乳糖、蔗糖、甘露醇、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、褐藻酸、微晶纖維素、阿拉伯膠、明膠、瓜爾豆膠、膠態二氧化矽、交聯羧甲纖維素鈉、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸、及其他賦形劑、著色劑、稀釋劑、緩衝劑、崩解劑、濕潤劑、防腐劑、調味劑及其他藥理學上相容的賦形劑。口含錠形式可包含於香料，通常蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍中之治療劑，以及包含於惰性基質(諸如明膠及丙三醇，或蔗糖及阿拉伯膠、乳液、凝膠及類似者，除了，亦含有此項技術中已知之此類賦形劑)中之治療劑之片劑。

可將單獨或與其它合適的組分組合之治療劑製成經由吸入劑投與之噴霧劑調配物。可將此等噴霧劑調配物放置於諸如二氯二氟甲烷、丙烷、氮氣及其類似物之可接受之加壓推進劑中。亦可將其調配為非按壓製劑，諸如在噴霧器或霧化器中。此類噴霧調配物亦可用於噴塗黏膜。

適用於非經腸投與之調配物包括可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及顯現調配物與打算接受者之血液等張之溶質的水性及非水性等張無菌注射溶液及可包括懸浮劑、增溶劑、增稠劑、穩定劑及防腐劑之水性及非水性無菌懸浮液。治療劑可以於醫藥學載劑中之生理學上可接受之稀釋劑形式投與，諸如無菌液體或液體之混合物，包括含或不含添加醫藥學上可接受之界面活性劑，諸如肥皂或清潔劑；懸浮劑，諸如果膠、卡波姆、甲基纖維素、羥基丙基甲基纖維素或羧基甲基纖維素；或乳化劑及其他醫藥佐劑的水；生理食鹽水；水性右旋糖及相關糖溶液；醇，諸如乙醇或十六烷基醇；二醇，諸如丙二醇或聚乙二醇；二甲亞碸；丙三醇；縮酮，諸如2,2-二甲基-1,3-二氧雜環戊烷-4-甲醇；醚；聚(乙二醇)400；油；脂肪酸；脂肪酸酯或甘油酯或乙醯化脂肪酸甘油酯。

可用於非經腸調配物中之油包括任何溫和不揮發性油，例如，石油、動物油、植物油、合成油或合成單或二甘油酯。脂肪酸(諸如油酸及其甘油酯衍生物)適用於製備可注射劑，天然醫藥學上可接受之油(諸如橄欖油或蓖麻油，尤其其聚氧乙烯化形式)亦然。油之特定實例包括花生油、大豆油、芝麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、石蠟脂及礦物油。用於非經腸調配物中之適合的脂肪酸包括油酸、硬脂酸及異硬脂酸。油酸乙酯及十四烷酸異丙酯為適合的脂肪酸酯之實例。此等油溶液或懸浮液亦可含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，諸如羧甲基纖維素或常用於調配醫藥學上可接受之劑型(包括乳液及懸浮液)的類似分散劑。

用於非經腸調配物中之適合的肥皂包括脂肪鹼金屬、銨及三乙醇胺鹽，且適合的清潔劑包括(a)陽離子清潔劑，諸如(例如)二甲基二烷基銨鹵化物及烷基吡啶鎓鹵化物；(b)陰離子清潔劑，諸如(例如)烷基、芳基及烯烴磺酸鹽、烷基、烯烴、醚及單甘油酯硫酸鹽及磺基丁二酸鹽；(c)非離子清潔劑，諸如(例如)氧化脂肪胺、脂肪酸烷醇醯胺及聚氧化乙烯聚丙烯共聚物；(d)兩性清潔劑，諸如(例如)烷基-β-胺基丙酸鹽及2-烷基 -咪唑啉四級銨鹽；及(e)其混合物。

非經腸調配物將通常含有約0.5重量%至約25重量%之呈溶液狀態之治療劑。可使用防腐劑及緩衝劑。為了使注射部位處之刺激降至最低或消除，此類組合物可含有親水親油平衡值(HLB)為約12至約17之一或多種非離子界面活性劑。此類調配物中之界面活性劑之量將通常在約5重量%至約15重量%的範圍內。適合的界面活性劑包括聚乙二醇脫水山梨糖醇脂肪酸酯，諸如脫水山梨糖醇單油酸酯及由將環氧丙烷與丙二醇縮合而形成之環氧乙烷與疏水性基質的高分子量加合物。非經腸調配物可存在於單位劑量或多劑量密封容器(例如安瓿及小瓶)中，且可在經冷凍乾燥(凍乾)條件下儲存，僅需要在即將使用之前添加用於注射之無菌液體賦形劑，例如水。可自無菌散劑、顆粒劑及錠劑製備即用型注射溶液及懸浮液。

另外，可藉由與多種基質(諸如乳化基質或水溶性基質)混合，將治療劑或包含治療劑之組合物製成栓劑。適用於經陰道投與之調配物可以呈子宮托、棉條、乳霜、凝膠、糊劑、發泡體或噴霧調配物形式呈現，除了含有活性成分以外，亦含有此項技術中已知為適當之此類載劑。

對於局部施用而言，可將所提供之醫藥學上可接受之組合物調配為含有懸浮或溶解於一或多種載劑中的活性組分之適合的軟膏形式。用於本發明之化合物之局部投與的載劑包括(但不限於)礦物油、液體石臘脂、白石蠟脂、丙二醇、聚環氧乙烷、聚環氧丙烷化合物、乳化蠟及水。替代地，可將所提供的醫藥學上可接受之組合物調配為含有懸浮或溶解於一或多種醫藥學上可接受之載劑中的活性組分之適合的洗劑或乳膏形式。適合的載劑包括(但不限於)礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、十六酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二醇、苄醇及水。

出於全部本發明方法之目的，治療劑之投與量或劑量應足以在合理時間範圍內在個體或動物中達成治療反應。舉例而言，治療劑之劑量應足以在從投藥時間之約2小時或長於2小時(例如，12至24或多於24小時)的時段內預防或抑制移轉。在某些實施例中，該時段可甚至更長。將藉由特定治療劑或藥劑之效能及動物(例如，人類)之病況以及待治療的動物(例如，人類)之體重確定劑量。用於確定投與劑量之諸多分析法為此項技術中已知。出於本發明之目的，可採用之分析法包括在投與指定劑量之治療劑之後，由癌細胞的移轉抑制程度與接受不同劑量之治療劑之一組哺乳動物中的哺乳動物進行比較，以確定投與哺乳動物之起始劑量。可藉由此項技術中已知之方法分析投與特定劑量之後的癌細胞之移轉抑制或腫瘤生長抑制之程度。

亦將藉由可能伴隨特定治療劑之投與之任何不良副作用的存在、性質及程度決定治療劑劑量。典型地，主治醫師將考慮多種因素，諸如年齡、體重、一般健康情況、膳食、性別、待投與之治療劑、投與途徑及所治療之病況的嚴重程度來決定用於治療各個別病患之治療劑劑量。藉助於實例且不意欲限制本發明，治療劑劑量可為約0.001至約1000 mg/kg被治療之個體之體重/天、約0.01至約10 mg/kg體重/天、約0.01 mg至約1 mg/kg體重/天、約1至約100 mg/kg體重/天、約10至約90 mg/kg體重/天、約20至約80 mg/kg體重/天、約30至約70 mg/kg體重/天、約40至約60 mg每公斤體重/天、約50 mg/kg體重/天、約100至約400 mg/kg體重/天、約200至約300 mg/kg體重/天或約250 mg/kg體重/天。
實例
凝血脂素 A2 受體功能獲得性及移轉之間的關聯性

來自Phenome Wide Association Study (PheWAS)之資料顯示基因TBXA2R 中之單核苷酸多形現象(SNP)引起凝血脂素A2受體中的功能獲得性變異體(T399A)與腫瘤移轉增加強烈相關N = 32；P = 0.003) (表1)。圖7顯示在具有功能獲得性變異體T399A之病患中產生移轉性散佈之原發性腫瘤部位。在一些實施例中，本發明提供一種抑制實體腫瘤移轉之方法，該方法包含向具有T399A變異體之個體投與有效抑制個體中之實體腫瘤移轉的量之凝血脂素A2受體拮抗劑。


表 1
伊非曲班降低移轉之 4T1 小鼠模型組織宏觀移轉及微觀移轉兩者

使用以下協定將1 × 10⁵ 個4T1-RFP-螢光素酶細胞植入至6週齡之原生WT Balb/C雌性小鼠之左側腹股溝乳房脂肪墊中。藉由胰蛋白酶消化收集乳房腫瘤細胞(4T1-RFP-螢光素酶細胞)、計數且再懸浮於總體積為100微升的50微升之無血清介質 + 50微升之減少基質膠(Matrigel)之成長因子中。用26-g針將細胞裝載至注射器中。將細胞注射至直接位於皮膚下方(且附著至皮膚)之腹股溝乳腺中。整個注入程序耗時約10秒/小鼠。當平均腫瘤體積達到200 mm³ 時，藉由用伊非曲班(50 mg/kg每日)或媒劑對照組口胃管灌食治療小鼠，在伊非曲班治療組使用8隻小鼠、在對照組中使用4隻小鼠及用於媒劑之於水中之4%蔗糖。在約3週後收集腫瘤、肺及血漿。藉由全形包埋蘇木精染色評估肺以枚舉表面移轉(宏觀移轉) (圖1)。將肺切片且用蘇木精及伊紅染色以確定蘇木精染色之節結為移轉性病變，且枚舉微觀移轉(圖2)。
伊非曲班降低 4T1 小鼠移轉模型中之宏觀移轉 ( 第二實驗 )

如上所述，將1 × 10⁵ 個4T1-RFP-螢光素酶細胞植入至6週齡的原生WT Balb/C雌性小鼠之左側腹股溝乳房脂肪墊中。如上所述，當平均腫瘤體積達到50 mm³ 時，藉由用伊非曲班(50 mg/kg每日)或媒劑對照組口胃管灌食治療小鼠。另外，用阿司匹林(12 mg/kg每日)治療第三組。在約4週後收集肺。藉由全形包埋蘇木精染色評估肺以枚舉表面移轉(宏觀移轉) (圖3)。

伊非曲班減少 MDA - MB - 231 小鼠中之移轉。 將小鼠隨機分為接收藉由用伊非曲班(50 mg/kg每日)或媒劑口胃管灌食治療之組，在伊非曲班及對照組兩者中皆使用10隻小鼠及用於媒劑之於水中的4%蔗糖。在藉由尾部靜脈注射血性遞送MDA-MB-231細胞(1 × 10⁵ 個細胞)之前，將小鼠治療48 h，且於其後將伊非曲班治療持續3週，此時自各小鼠收集肺，且對肉眼可見之肺移轉性病變計數(圖4)。
伊非曲班治療不影響培養物中之原發性腫瘤體積、小鼠體重或 4T1 細胞之存活率

使用用伊非曲班治療96小時之4T1細胞進行的細胞培養實驗(一式三份，重複三次)未顯現4T1細胞數目(自動細胞計數)或凋亡性4T1細胞(磷脂結合蛋白V染色)數目之伊非曲班介導的變化(圖5A)。針對細胞培養實驗，媒劑為PBS。

將1 × 10⁵ 個4T1-RFP-螢光素酶細胞植入至6週齡的原生WT Balb/C雌性小鼠之左側腹股溝乳房脂肪墊中。當平均腫瘤體積達到200 mm³ 時，藉由用伊非曲班(50 mg/kg每日；N = 8)或媒劑對照組(N = 4)口胃管灌食治療小鼠。3週之伊非曲班治療(50 mg/kg每日)並不影響原發性腫瘤體積(圖5B)。小鼠總體重不受3週之伊非曲班治療(50 mg/kg每日)影響(圖5C)。

伊非曲班降低乳房、胰臟及肺癌細胞之血性移轉。 將MDA-MB-231 (乳房)、MiaPaca2 (胰臟)及A549 (肺)癌細胞藉由尾部靜脈注射遞送至藉由用伊非曲班(50 mg/kg；N = 10/組)或媒劑(N = 10)口胃管灌食預治療24小時之nu/nu小鼠。使小鼠繼續每日治療，持續額外21天。在第21天，收集肺且評估移轉。N = 9，P值，史都登氏(Student's) t檢驗法。結果顯示於圖8中。
治療具有高風險之移轉性復發惡性實體腫瘤之病患的伊非曲班 ( 預示性實例 ).
概述

預備試驗研究伊非曲班在治療具有惡性實體腫瘤之病患方面之副作用，該等惡性實體腫瘤在治療之後具有復發且散佈於全身之高風險。血小板為有助於凝血之類型之血細胞。癌細胞黏附於血小板且乘於其上以達至身體之不同部分。諸如伊非曲班之藥物可幫助此等血小板變較不「黏」且降低癌細胞散佈至體內其他位置之機會。
詳細研究描述

主要目標：在完成所有計劃(新)輔助局部及全身性療法之後，評估在具有高風險之移轉性復發之惡性實體腫瘤的病患中伊非曲班鈉(伊非曲班)投與之安全性及可行性。

次要目標：在具有惡性實體腫瘤之病患中完成伊非曲班之後，評估移轉性復發率。

探索性目標：定量伊非曲班效果之藥力學標記。

概述：將60名病患隨機分至2組中之1組。第1組(伊非曲班)：病患每日一次(QD)經口(PO)接收250 mg伊非曲班鈉膠囊。在無疾病進展或不可接受之毒性存在下，每28天重複療程，持續12個月。第2組(安慰劑)：病患QDPO接收250 mg安慰劑膠囊。在無疾病進展或不可接受之毒性存在下，每28天重複療程，持續12個月。在完成研究治療之後，在第30天，接著高達12個月隨訪病患。

結果量測。 主要結果量測為：(1)不良事件之發生率(在完成治療之後之時間範圍高達30天)；(2)堅持治療(將為參與者提供丸劑日記以在其採取其藥療時記錄；研究人員將在其臨床訪視時自參與者收集丸劑日記) (時間範圍高達12個月)；及(3) FACT-G計分之概述變化(等級 = 0至4) (時間範圍高達12個月)。次要結果量測為(1)移轉性復發內之病患之百分比(在各同屬性群內) (在12個月之時間範圍)；及(2)無事件存活率(在各同屬性群內) (時間範圍高達12個月)。

合格準則
· 所有成人年齡為18歲或高於18歲。
包涵準則：
· 署名且註明日期之書面知情同意書。
· 東岸癌症臨床研究合作組織(Eastern Cooperative Oncology Group)機能狀態為0、1或2。
· 以下現行診斷中之一者：
o IIa期至III期三陰性乳癌(TNBC)。
o I期至II期胰臟癌。
o 肺癌階段：IIa期至III期非小細胞肺癌(NSCLC)或侷限期小細胞肺癌(SCLC)。
o IIa期至III期食道或胃食道(GE)結腸癌(鱗狀細胞癌[SCCA]或腺癌)。
o IIa期至III期胃癌。
· 病患必須已完成用於其癌症之所有標準局部及全身性療法。
· 需要在參與之前至少30天完成參與之前的研究性試劑投與。
· 病患必須已自局部(手術、輻射)或全身性治療之效果恢復(≤ 1級毒性)。
· 每mL血液血小板計數≥ 100,000。
· 血紅蛋白≥ 9 /g/dL (可已經輸注)。
· 如使用Cockcroft-Gault (CG)方程所計算，血清肌酐≤ 1.5 ×正常上限(ULN)或所估計肌酐清除≥50 mL/min。
· 總血清膽紅素≤ 1.5倍正常上限(ULN)。
· 天冬胺酸轉胺酶(AST/血清麩胺酸草醯乙酸轉胺酶[SGOT])及丙胺酸轉胺酶(ALT/血清麩胺酸-丙酮酸轉胺酶[SGPT]) ≤ 2.5 × ULN。
· 國際標準化比值(INR)低於正常上限(ULN)。
· 具生育潛力之女性病患及非不育男性必須同意自首次試驗治療投與之前15天使用至少兩種可接受之避孕方法，直至研究參與者之最後一劑研究藥物之後至少5個月。將具生育潛力之雌性定義為不以手術方式不育絕經後之彼等(亦即，病患尚未進行雙側輸卵管結紮、雙側卵巢切除或全子宮切除術；或在無替代醫學病因之情況下尚未停經12個月)。應用用於絕經後女性之實驗室參考範圍內的血清促濾泡素(FSH)水準確認55歲下之女性之絕經後狀態。非不育男性為尚未進行輸精管結紮且記錄射精中不存在精子之彼等。
· 儘管無法用英文讀/寫之病患有資格參與整體研究，但將在整個實驗中不參與病患報告結果調查表。
· 准許由於預治療篩檢失敗而已停止研究之個體(亦即並未接收研究藥物之同意病患)再次參與。若再次參與，則個體必須再次同意。僅必須重複超出協定指定之時序範圍所進行的篩檢程序。
排除準則：
· 完成標準治療之後之殘餘及遠處疾病的臨床跡象。
· 抗血小板藥物(乙醯水楊酸[ASA]、非類固醇消炎藥[NSAID]、克羅匹多、阿加曲班等)或抗凝血劑、(華法林、肝素產品等)之現行使用。
· 除極高治癒率之原位疾病或癌症(亦即睪丸癌等)以外之現行診斷之前5年內的活性惡性腫瘤。
· 在調查員觀點中可能損害治療安全性之不可控併發病性嚴重的全身性疾病。
· 無合併抗癌療法。所需自之前療法清除：
o 化學療法：21天。
o 大手術：14天(假設創傷癒合充分)。
o 輻射：7天。
o 研究性/生物療法：30天。
· 現行症狀性充血性心臟衰竭(New York Heart Association ＞ II級)、需要療法(例如藥療或起搏器)之不穩定心律不整、不穩定心絞痛(例如新、惡化或持久的胸不適)或不受控高血壓(收縮性 ＞ 160 mmHg或舒張性 ＞100 mmHg)。或以下中之任一者在研究藥物之第一劑量前6個月(180天)內發生：心肌梗塞、冠狀/周邊動脈繞道移植術、腦血管意外或暫時性腦缺血。(允許使用控制血壓之抗高血壓藥療。)
· 需要治療之持續性消化性潰瘍病。腸胃出血病史。需要治療之重度胃-食道逆流病。
· 出血素質之病史。
· 在服用伊非曲班時計劃選擇性大手術介入。
· 懷孕或哺乳女性。
· 犯人或受監禁之個體。
已知由病患之研究醫師合理地判斷為不可接受地增加研究參與之風險；或禁止理解或呈現知情同意書或預期遵守計劃訪視、治療計劃表、實驗室測試及其他研究需要的精神狀況、社會狀況或其他醫學病況。

儘管在本文中已描述且說明了本發明之若干實施例，但一般技術者將容易設想多種其他手段及/或結構來執行功能及/或獲得結果及/或一或多種本文所述之優勢，且此等變化及/或修改中之每一者可視為在本發明之範疇內。更一般而言，熟習此項技術者將容易地理解本文所述之所有參數、尺寸、材料及組態均意欲為例示性的且實際參數、尺寸、材料及/或組態將視使用本發明之教示內容的一或多個特定應用而定。熟習此項技術者將認識到，或能夠至多使用常規實驗來確定本文所述之本發明之特定實施例的諸多等效物。因此應瞭解，前述實施例僅藉助於實例呈現且在隨附申請專利範圍及其等效物之範疇內，本發明可以不同於特定描述及主張之其他方式來實施。本發明係關於本文所述之各個別特徵、系統、製品、材料、套組及/或方法。此外，若此類特徵、系統、製品、材料、套組及/或方法相互間無不一致，則兩種或多於兩種此類特徵、系統、製品、材料、套組及/或方法之任何組合包括於本發明之範疇內。

出於完整性之原因，本發明之各種態樣陳述於以下編號之條項中：

條項1. 一種抑制實體腫瘤移轉之方法，其包含向有需要之個體投與有效抑制該個體中之實體腫瘤移轉的量之凝血脂素A2受體拮抗劑。

條項2. 如條項1之方法，其中該量之該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物可有效抑制循環腫瘤細胞叢之形成。

條項3. 如條項1或2之方法，其中該量之該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物可有效抑制循環腫瘤細胞叢之移動。

條項4. 如條項1至3中任一項之方法，其中該量之該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物可有效抑制循環腫瘤細胞叢與血小板聚集。

條項5. 如條項1至4中任一項之方法，其中該量之該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物可有效抑制整合素介導及/或選擇素介導之細胞存活信號傳導。

條項6. 如條項1至5中任一項之方法，其中該量之該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物可有效降低移轉性復發率。

條項7. 如條項1至6中任一項之方法，其中該凝血脂素受體拮抗劑為伊非曲班、GR32191、SQ29548、磺曲苯、達曲班、利諾曲班、雷馬曲班、塞曲司特、特魯曲班、Z-235、LCB-2853、SQ28668、ICI 192605、AH23848、ONO3708、CPI-211或蒎烷TXA₂ 。

條項8. 如條項7之方法，其中該凝血脂素受體拮抗劑為伊非曲班。

條項9. 如條項1至6中任一項之方法，其中該凝血脂素受體拮抗劑為式(I)之化合物，

包括其全部立體異構體，其中
m為1、2或3；
n為0、1、2、3或4；
Z為-(CH₂ )₂ -、-CH=CH-，或；
Y為O、單鍵或-CH=CH-；
R為CO₂ H、-CO₂ C_{1 - 6} 烷基、CH₂ OH、-CONHSO₂ R³ 、-CONHR^3a 或 -CH₂ -四唑-5-基；
R³ 為C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)；
R^3a 為C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)；
X為O、S或NH；
R¹ 為氫、C_{1 - 8} 烷基、C_{2 - 8} 烯基、C_{2 - 8} 炔基、G¹ 、-L¹ -G¹ 、-(CH₂ )_t -C(O) -NHR^1a 或-(CH₂ )_t -NH-C(O)R^1a ；
G¹ 為6員至10員芳基、C_{3 - 12} 環烷基、5員至12員雜芳基或4員至12員雜環基；
L¹ 為C_{1 - 6} 伸烷基；
t為1至12；
R^1a 為C_{1 - 6} 烷基、C_{3 - 12} 環烷基、-L¹ -C_{3 - 12} 環烷基或6員至10員芳基；
R² 為氫、C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)；
或R¹ 及R² 與其附著之氮一起形成4員至8員雜環；
其中各芳基獨立地且視情況經1或2個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、氰基、C_{1 - 6} 烷基、C_{1 - 6} 鹵烷基、OH、-OC_{1 - 6} 烷基、 -OC_{1 - 6} 鹵烷基、-SC_{1 - 6} 烷基、-S(O)C_{1 - 6} 烷基、-S(O)₂ C_{1 - 6} 烷基、-OC_{1 - 6} 伸烷基-苯基、-S-苯基、-S(O)-苯基及-S(O)₂ -苯基；
其中各環烷基獨立地且視情況經1至4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C_{1 - 6} 烷基、C_{1 - 6} 鹵烷基、OH及-OC_{1 - 6} 烷基。

條項10. 如條項9之方法，其中該式(I)之化合物具有式 (I-h)
。

條項11. 如條項9或10之方法，其中R為CO₂ H或其鹼金屬鹽。

條項12. 如條項9至11中任一項之方法，其中m為1，n為2，R² 為氫，且R¹ 為C_{1 - 8} 烷基。

條項13. 如條項9至12中任一項之方法，其中X為O。

條項14. 如條項1至13中任一項之方法，其中該個體具有選自由以下組成之群之癌症的原發性腫瘤：肺癌、非小細胞肺癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、胰臟癌、黑素瘤、肉瘤、子宮頸癌、子宮內膜癌、肝癌、子宮癌、腎癌、胃食道癌、結腸癌、膀胱癌、口腔癌及喉癌。

條項15. 如條項1至14中任一項之方法，其中該量之該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物可有效抑制該個體中之該實體腫瘤之移轉，而不抑制該實體腫瘤之生長或發展。

條項16. 如條項1至15中任一項之方法，其進一步包含投與選自以下之至少一種化學治療劑：烷基化劑、抗代謝物、抗腫瘤抗生素、抗細胞骨架劑、拓樸異構酶抑制劑、抗激素劑、靶向治療劑、免疫療法及其組合。

條項17. 如條項1至16中任一項之方法，其中在化學療法治療方案之後投與該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物。

條項18. 如前述條項中任一者之方法，其中該個體具有該凝血脂素A2受體之T399A功能獲得性突變。

條項19. 一種凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，其用於治療或抑制個體中之實體腫瘤移轉。

條項20. 一種凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，其用於治療或抑制實體腫瘤移轉之方法中，其中該方法包含向有需要之個體投與該凝血脂素A2受體拮抗劑。

條項21.一種凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物之用途，其用於製備用以治療或抑制個體中之實體腫瘤移轉之藥劑。

圖1顯示伊非曲班(ifetroban)在小鼠中自正位原發性4T1腫瘤降低表面肺移轉之效果。

圖2顯示伊非曲班在小鼠中自正位原發性4T1腫瘤降低微觀肺移轉之效果。

圖3顯示伊非曲班及阿司匹林在移轉之4T1小鼠模型中降低移轉之效果。

圖4顯示伊非曲班在MDA-MB-231小鼠中降低肺移轉之效果。

圖5A顯示伊非曲班對4T1細胞生長及活體外成活力無效。

圖5B顯示4T1小鼠模型中之原發性腫瘤體積不受伊非曲班影響。

圖5C顯示總體小鼠體重不受伊非曲班影響。

圖6顯示所提議實體腫瘤移轉過程之概念性示意圖。

圖7顯示在具有凝血脂素A2受體之功能獲得性變異體T399A之病患中產生移轉性散佈的原發性腫瘤部位。

圖8顯示在投與伊非曲班後，乳房、胰臟及肺癌細胞之血性移轉降低。

Claims (20)

1. 一種凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物之用途，其用於製備用以治療或抑制個體之實體腫瘤移轉之藥劑。
2. 如請求項1之用途，其中該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物呈有效抑制循環腫瘤細胞叢形成之量。
3. 如請求項1之用途，其中該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物呈有效抑制循環腫瘤細胞叢移動之量。
4. 如請求項1之用途，其中該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物呈有效抑制循環腫瘤細胞叢與血小板聚集之量。
5. 如請求項1之用途，其中該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物呈有效抑制整合素介導及/或選擇素介導之細胞存活信號傳導的量。
6. 如請求項1之用途，其中該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物呈有效降低移轉性復發率的量。
7. 如請求項1至6中任一項之用途，其中該凝血脂素受體拮抗劑為伊非曲班(ifetroban)、GR32191、SQ29548、磺曲苯(sulotroban)、達曲班(daltroban)、利諾曲班(linotroban)、雷馬曲班(ramatroban)、塞曲司特(seratrodast)、特魯曲班(terutroban)、Z-235、LCB-2853、SQ28668、ICI 192605、AH23848、ONO3708、CPI-211或蒎烷TXA₂ 。
8. 如請求項7之用途，其中該凝血脂素受體拮抗劑為伊非曲班。
9. 如請求項1至6中任一項之用途，其中該凝血脂素受體拮抗劑為式(I)之化合物， 包括其全部立體異構體，其中 m為1、2或3； n為0、1、2、3或4； Z為-(CH₂ )₂ -、-CH=CH-，或； Y為O、單鍵或-CH=CH-； R為CO₂ H、-CO₂ C_{1 - 6} 烷基、CH₂ OH、-CONHSO₂ R³ 、-CONHR^3a 或 -CH₂ -四唑-5-基； R³ 為C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)； R^3a 為C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)； X為O、S或NH； R¹ 為氫、C_{1 - 8} 烷基、C_{2 - 8} 烯基、C_{2 - 8} 炔基、G¹ 、-L¹ -G¹ 、-(CH₂ )_t -C(O) -NHR^1a 或-(CH₂ )_t -NH-C(O)R^1a ； G¹ 為6員至10員芳基、C_{3 - 12} 環烷基、5員至12員雜芳基或4員至12員雜環基； L¹ 為C_{1 - 6} 伸烷基； t為1至12； R^1a 為C_{1 - 6} 烷基、C_{3 - 12} 環烷基、-L¹ -C_{3 - 12} 環烷基或6員至10員芳基； R² 為氫、C_{1 - 6} 烷基、6員至10員芳基或-L¹ -(6員至10員芳基)； 或R¹ 及R² 與其附著之氮一起形成4員至8員雜環； 其中各芳基獨立地且視情況經1或2個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、氰基、C_{1 - 6} 烷基、C_{1 - 6} 鹵烷基、OH、-OC_{1 - 6} 烷基、 -OC_{1 - 6} 鹵烷基、-SC_{1 - 6} 烷基、-S(O)C_{1 - 6} 烷基、-S(O)₂ C_{1 - 6} 烷基、-OC_{1 - 6} 伸烷基-苯基、-S-苯基、-S(O)-苯基及-S(O)₂ -苯基； 其中各環烷基獨立地且視情況經1至4個獨立地選自由以下組成之群之取代基取代：鹵素、C_{1 - 6} 烷基、C_{1 - 6} 鹵烷基、OH及-OC_{1 - 6} 烷基。
10. 如請求項9之用途，其中該式(I)之化合物具有式(I-h)。
11. 如請求項10之用途，其中R為CO₂ H或其鹼金屬鹽。
12. 如請求項11之用途，其中m為1，n為2，R² 為氫，且R¹ 為C_{1 - 8} 烷基。
13. 如請求項12之用途，其中X為O。
14. 如請求項8之用途，其中該個體具有選自由以下組成之群之癌症的原發性腫瘤：肺癌、非小細胞肺癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、胰臟癌、黑素瘤、肉瘤、子宮頸癌、子宮內膜癌、肝癌、子宮癌、腎癌、胃食道癌、結腸癌、膀胱癌、口腔癌及喉癌。
15. 如請求項1至6中任一項之用途，其中該凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物的量係有效抑制該個體中之該實體腫瘤的移轉，而不抑制該實體腫瘤之生長或發展。
16. 如請求項1至6中任一項之用途，其中該藥劑與選自以下之至少一種化學治療劑一起投與：烷基化劑、抗代謝物、抗腫瘤抗生素、抗細胞骨架劑、拓樸異構酶抑制劑、抗激素劑、靶向治療劑、免疫療法及其組合。
17. 如請求項1至6中任一項之用途，其中在化學療法治療方案之後投與該藥劑。
18. 如請求項1至6中任一項之用途，其中該個體具有該凝血脂素A2受體之T399A功能獲得性突變。
19. 一種凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，其用於治療或抑制個體中之實體腫瘤移轉。
20. 一種凝血脂素A2受體拮抗劑或其醫藥學上可接受之鹽或組合物，其用於治療或抑制實體腫瘤移轉之方法中，其中該方法包括向有需要之個體投與該凝血脂素A2受體拮抗劑。