TW202604902A - 作為電壓閘控鈉通道抑制劑的化合物及其應用 - Google Patents

作為電壓閘控鈉通道抑制劑的化合物及其應用

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TW202604902A TW114114741A TW114114741A TW202604902A TW 202604902 A TW202604902 A TW 202604902A TW 114114741 A TW114114741 A TW 114114741A TW 114114741 A TW114114741 A TW 114114741A TW 202604902 A TW202604902 A TW 202604902A
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劉希樂
張鵬濤
文謙 楊
王慧
賴慶瑩
高翠
李捍雄
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大陸商廣州市聯瑞製藥有限公司
大陸商廣州一品紅製藥有限公司
大陸商廣州潤霖醫藥科技有限公司
大陸商一品紅生物醫藥有限公司
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Abstract

本申請關於電壓閘控鈉通道NaV1.8選擇性抑制劑及其在製備相關藥物上的用途。所述藥物用於治療抑制電壓閘控鈉通道NaV1 .8有回應的疾病，如慢性疼痛、腸痛、神經性疼痛、肌肉骨骼疼痛、急性疼痛、炎性疼痛、癌症疼痛、特發性疼痛、手術後疼痛、內臟疼痛、多發性硬化症、夏柯-馬利-杜斯氏病、失禁、病理性咳嗽或心律失常。具體關於式(X)所示化合物及其異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或前藥：

Description

作為電壓閘控鈉通道抑制劑的化合物及其應用
本申請關於化學醫藥技術領域，具體關於一種作為電壓閘控鈉通道抑制劑的化合物和應用。
疼痛對機體正常的生命活動具有不可或缺的保護作用，作為一種警戒信號，提醒機體注意潛在的危險，但同時疼痛也是一種常見的臨床症狀，在引發疼痛的外界刺激消失後，強烈或持久的疼痛會造成生理功能的紊亂，嚴重影響生命體的生活品質。
疼痛起源於周圍神經系統的傷害感受器，這是一種游離的神經末梢，廣泛分佈於全身的皮膚、肌肉、關節和內臟組織中，它可以將感受到的熱的、機械的或化學的刺激轉化為神經衝動(動作電位)並經由傳入神經纖維傳遞到其位於背根神經節(dorsal root ganglion，DRG)的胞體部分，最終傳遞到高級神經中樞，引起痛覺。而神經元中動作電位的產生和傳導又依賴於細胞膜上的電壓閘控鈉離子通道(NaV)。當細胞膜去極化時，鈉離子通道啟動，通道打開，引起鈉離子內流，使細胞膜進一步去極化，導致動作電位的產生。因此，抑制異常的鈉離子通道活動有助於疼痛的治療、緩解。
NaV1.8主要在周圍神經系統的感覺神經節，諸如背根神經節(DRG)中表達，表達NaV1.8的小DRG神經元包括關於疼痛信號傳導的疼痛感受器。NaV1.8在背根神經節的小神經元仲介導大振幅的動作電位，是疼痛感受器中的快速重複動作電位和受損神經元的自發性活動所必需的，敲低大鼠中的NaV1.8已經通過使用反義DNA或小干擾RNA實現並且在脊神經結紮和慢性壓迫性損傷模型中實現神經性疼痛的幾乎完全逆轉，因此NaV1.8通道被認為是用於止痛劑的有希望的標靶，有望在疼痛超越其有用性的適應症如神經性疼痛、炎性疼痛及術後/自發性疼痛等疾病中發揮作用，且由於NaV1.8主要限於感覺疼痛的神經元，因此選擇性NaV1.8抑制劑可能可以避免非選擇性NaV阻斷劑情況下常見的不良事件。
除疼痛外，NaV1.8通道也被認為多發性硬化症、心律失常、咳嗽、瘙癢等疾病有關。多發性硬化症是一種原發於中樞神經系統的炎症性脫髓鞘疾病，其確切的發病機制尚有待闡明。正常人的小腦浦肯野纖維不表達NaV1.8通道，多發性硬化症患者的小腦NaV1.8表達上調。在心血管系統中，NaV1.8已被證明在心臟神經如浦肯野纖維中表達，被認為可能是心律失常等心血管疾病潛在的治療靶點。NaV1.8在咳嗽相關的迷走神經叢中表達，病理性咳嗽過程中NaV1.8磷酸化水準和表達量升高，參與咳嗽反射。在哺乳動物的癢感受中，淋巴細胞、肥大細胞等釋放的組胺等致癢因數可啟動NaV1.8通道，敲除小鼠NaV1.8可有效緩解組胺和內皮素誘導的瘙癢行為。
目前，NaV1.8選擇性抑制劑，VERTEX公司的VX-150和 Suzetrigine已經在急性疼痛、糖尿病外周神經痛等患者的臨床試驗中取得積極效果，但目前尚無該靶點產品上市，開發高選擇性的電壓閘控鈉通道NaV 1.8抑制劑藥物在臨床上具有非常重要的意義。
本申請提供一種化合物，或其藥物組合物，其可作為NaV1.8選擇性抑制劑。本申請進一步關於所述化合物或其藥物組合物用於製備藥物的用途，該藥物通過所述化合物抑制NaV1.8治療疾病和/或病症。本申請又進一步描述了所述化合物的合成方法。本申請的化合物顯示出優良的生物活性及藥代動力學性質。
一方面，本申請提供一種化合物，其為如式(X)所示的化合物，或式 (X) 所示的化合物的立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或前藥，(X)；其中：環A為苯基、5-10元雜芳基或5-10元雜環基；各Re獨立地為D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、硝基、-N(Ra)2、-(C1-6亞烷基) N(Ra)2、-S(O)(=NH) C1-6烷基、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-(C1-6亞烷基)C(O)N(Ra)2、-C(O)Ra、-S(O)2NRa、、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6亞烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氨基、C1-3鹵代烷基、C1-3羥基烷基和C1-3烷氧基的取代基所取代；各Ra獨立地為H、D、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代和C1-3烷基的取代基所取代；R1、R2、R3、R4和R5各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、硝基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、硝基、氨基、羥基、C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C1-3羥基烷基和C1-3烷氧基的取代基所取代；或R3和R5與相連的碳原子一起形成C3-6環烷基；R6為CN、-S(O)C1-6烷基、-S(O)2C1-6烷基、-CH=N-O-C1-6烷基、C2-6炔基、C1-6烷硫基或-L1-L2-Rc，所述C1-6烷基、C2-6炔基和C1-6烷硫基可獨立任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、氧代和羥基的取代基所取代；L1為鍵、O或S；L2為鍵、C1-6亞烷基或-(C1-6亞烷基)- C1-6烷氧基，所述C1-6亞烷基和C1-6烷氧基可獨立任選地被1、或3個選自D、F、Cl、Br、I、氧代和羥基的取代基所取代；Rc為-O-N=、-P(O)(C1-6烷基)2、C2-6炔基或-O-(3-8元雜環基)，所述C1-6烷基、C2-6炔基和3-8元雜環基可獨立任選地被1、2、3、4、5或6個選自D、F、Cl、Br、I、羥基、氧代、硝基、氨基、烷氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基的取代基所取代；R7和R8各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基和C1-3烷氧基的取代基所取代。n為0、1、2或3。其中，環A可為苯基、噠嗪、吡嗪、吡啶或嘧啶。
在一些實施方案中，其為如式 (I)、(II)或(III)所示的化合物，或式 (I)、(II)或(III)所示的化合物的立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或前藥，(I)、(II)、(III)其中：X為CR10或N；Y為CR13或N；R9和R10各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基或C1-6鹵代烷氧基；R11、R12和R13各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、硝基、-N(Ra)2、-(C1-6亞烷基) N(Ra)2 、-S(O)(=NH) C1-6烷基、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-(C1-6亞烷基)C(O)N(Ra)2、-C(O)Ra、-S(O)2NRa、、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6亞烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氨基、C1-3鹵代烷基、C1-3羥基烷基和C1-3烷氧基的取代基所取代；各Ra獨立地為H、D、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代和C1-3烷基的取代基所取代。在一些實施方案中，其中R1、R2、R3、R4和R5各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、羥基、甲基、乙基、CH2F、CHF2、CF3、-CH2OCH3或-CH2OH。在一些實施方案中，其中R9、R10和R11各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、氨基、硝基、甲基、乙基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基；R12和R13各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、甲基、乙基、CH2F、CHF2 、-OCH3、-OCH2CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHOH、-C(O)NHOCH3、- CH2OH、 -CH(OH)CH2OH、-C(O)NHCH3、-CH(OH)(CH3)2、-S(O)(=NH) CH3 、-S(O)2NH2、、、、、或。
在一些實施方案中，其中R7和R8各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、羥基、甲基、乙基、CH2F、CHF2或CF3。
在一些實施方案中，其中R6為CN、-S(O)C1-3烷基、-S(O)2C1-3烷基 -CH=N-O-C1-3烷基、-C2-6炔基、C1-3烷硫基或-L1-L2-Rc，所述C1-3烷基、C1-3烷硫基和C2-6炔基可獨立任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、氧代和羥基的取代基所取代；L1為鍵、O或S；L2為鍵、C1-3亞烷基或-(C1-3亞烷基)- C1-3烷氧基；Rc為-O-N=、-P(O)(CH3)2、C2-6炔基或-O-(3-8元雜環基)；所述C2-6炔基和3-8元雜環基可獨立任選地被1、2、3、4、5或6個選自D、F、Cl、Br、I、羥基、氧代、硝基、氨基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基的取代基所取代。
在一些實施方案中，其中R6為CN、-S(O)CH3、-S(O)2CH3、、-P(O)(CH3)2 、 、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或。
在一些實施方案中，本申請所公開的化合物，其具有式(IV)或(V)所示結構：(IV)、(V)其中，Rc為C2-6炔基，所述C2-6炔基可獨立任選地被1、2、3、4、5或6個選自D、F、Cl、Br、I、羥基、硝基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基的取代基所取代。
在一些實施方案中，其為具有下列之一結構的化合物或具有下列之一結構的立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或前藥：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或。
一方面，本申請提供一種藥物組合物，該藥物組合物，包含本申請式 (I) 所述的化合物，或其立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或它們的前藥，及其藥學上可接受的載體、賦形劑、稀釋劑、輔劑、媒介物或它們的組合。
一方面，本申請提供一種所述化合物及藥物組合物在製備藥物中的用途，所述藥物用於治療抑制電壓閘控鈉通道NaV1.8有回應的疾病。所述疾病為慢性疼痛、腸痛、神經性疼痛、肌肉骨骼疼痛、急性疼痛、炎症 疼痛、癌症疼痛、特發性疼痛、手術後疼痛、內臟疼痛、多發性硬化症、夏柯-馬利-杜斯氏病、失禁、病理性咳嗽或心律失常。
前面所述內容只概述了本申請的某些方面，但並不限於這些方面。這些方面及其他的方面的內容將在下面作更加具體完整的描述。
定義和一般用語
本申請將會把確定的具體化的內容所對應的文獻詳細列出，實施例都伴隨有結構式和化學式的圖解。本申請有預期地涵蓋所有的選擇餘地、變體和同等物，這些可能像請求項所定義的那樣包含在現有申請領域。所屬領域的具有通常知識者將識別許多類似或等同於在此所描述的方法和物質，這些可以應用於本申請的實踐中去。本申請絕非限於方法和物質的描述。有很多文獻和相似的物質與本申請申請相區別或抵觸，其中包括但絕不限於用語的定義，用語的用法，描述的技術，或像本申請申請所控制的範圍。
本申請將應用以下定義除非其他方面表明。根據本申請的目的，化學元素根據元素週期表，CAS版本和化學藥品手冊，75，thEd，1994來定義。另外，有機化學一般原理見"Organic Chemistry," Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, and "March's Advanced Organic Chemistry," by Michael B. Smith and Jerry March, John Wiley&Sons, New York: 2007，因此所有的內容都融合了參考文獻。
用語「包含」為開放式表達，即包括本申請所指明的內容，但並不排除其他方面的內容。
像這裡所描述的化合物可以任選地被一個或多個取代基所取代，如本申請中的通式化合物，或者像實施例裡面特殊的例子，子類，和本申請所包含的一類化合物。應瞭解「任選取代的」這個用語與「取代或非取代的」這個用語可以交換使用。一般而言，用語「任選地」不論是否位於用語「取代的」之前，表示所給結構中的一個或多個氫原子被具體取代基所取代。除非其他方面表明，一個任選的取代基團可以有一個取代基在基團各個可取代的位置進行取代。當所給出的結構式中不只一個位置能被選自具體基團的一個或多個取代基所取代，那麼取代基可以相同或不同地在各個位置取代。其中所述的取代基可以是，但並不限於氫、F、Cl、Br、I、硝基、氰基、氧代 (=O)、羥基、烷基、羥基烷基、烷氨基、氨基烷基、鹵代烷氧基、環烷基、氨基、芳基、雜環基、雜芳基、烯基、炔基、環烷基氧基、烷氧基、烷氧基烷基、鹵代烷基、-COOH、-亞烷基-C(=O)O-烷基、-亞烷基-S(=O)2-烷基、-亞烷基-S(=O)2-氨基、-S(=O)2-烷基、-S(=O)2-氨基、-S(=O)2OH、-O-亞烷基-C(=O)O-烷基、-O-亞烷基-S(=O)2-烷基、-O-亞烷基-S(=O)2-氨基、-O-亞烷基-S(=O)2OH、-C(=O)NH2、-C(=O)NH-烷基、-C(=O)N(烷基)-烷基、-C(=O)NHS(=O)2-烷基、-C(=O)NHS(=O)2-氨基、-C(=O)NHS(=O)2OH、-N(鹵代烷基)-烷基、-N(烷基)-S(=O)2-烷基、-NHS(=O)2-烷基、-NHS(=O)2-鹵代烷基、-N(烷基)S(=O)2-鹵代烷基、-N(烷基)S(=O)2-烷氨基、-NHC(=O)-烷基、-NHC(=O)-鹵代烷基、-N(烷基)C(=O)-鹵代烷基、-N(烷基)C(=O)-烷氨基、-N(烷基)C(=O)O-烷基、-NHC(=O)O-烷基、-NHC(=O)O-鹵代烷基、-N(烷基)C(=O)O-鹵代烷基、-N(烷基)C(=O)O-氨基烷基、-NHC(=O)-NH2、-NHC(=O)NH-(烷基)、-NHC(=O)NH(鹵代烷基)、-NHC(=O)N(烷基)-烷基、-OC(=O)-烷基、-OC(=O)-氨基、-OC(=O)-烷氨基、-OC(=O)-氨基烷基、-OC(=O)-烷氧基、-C(=O)N(烷基)S(=O)2-烷基、-C(=O)N(烷基)S(=O)2-氨基、-C(=O)NH-S(=O)2OH、-C(=NH)NH2、-C(=NH)NH-烷基、-C(=NH)N(烷基)-烷基、-C(=N-烷基)-NH2、-C(=O)NH-亞烷基-S(=O)2OH、-C(=O)NHC(=O)OH、-C(=O)NHC(=O)O-烷基、-C(=O)N(烷基)C(=O)O-烷基、-C(=O)NH-亞烷基-C(=O)OH和-C(=O)NH-亞烷基-C(=O)O-烷基，等等。
本申請使用的用語「烷基」包括1-20個碳原子，或1-10個碳原子，或1-6個碳原子，或1-4個碳原子，或1-3個碳原子，或1-2個碳原子飽和直鏈或支鏈的單價烴基，其中烷基可以獨立任選地被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。烷基基團更進一步的實例包括，但並不限於甲基(Me，-CH3)、乙基 (Et，-CH2CH3)、正丙基(n-Pr，-CH2CH2CH3)、異丙基(i-Pr，-CH(CH3)2)、正丁基(n-Bu，-CH2CH2CH2CH3)、異丁基 (i-Bu，-CH2CH(CH3)2)、仲丁基(s-Bu，-CH(CH3)CH2CH3)、叔丁基(t-Bu，-C(CH3)3)、正戊基(-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH (CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、正己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2, 3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)、3, 3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3)、正庚基和正辛基等等。用語「烷基」和其首碼「烷」在此處使用，都包含直鏈和支鏈的飽和碳鏈。
用語「亞烷基」表示從飽和的直鏈或支鏈烴基中去掉兩個氫原子所得到的飽和的二價烴基基團。除非另外詳細說明，亞烷基基團含有1-12個碳原子。在一些實施方案中，亞烷基基團含有1-6個碳原子；在另一些實施方案中，亞烷基基團含有1-4個碳原子；在又一些實施方案中，亞烷基基團含有1-3個碳原子；還在一些實施方案中，亞烷基基團含有1-2個碳原子。這樣的實例包括亞甲基 (-CH2-)，亞乙基 (-CH2CH2-)，亞異丙基 (-CH(CH3)CH2-) 等等。
用語「烯基」表示2-12個碳原子，或2-8個碳原子，或2-6個碳原子，或2-4個碳原子的直鏈或支鏈的一價烴基，其中至少一個位置為不飽和狀態，即一個C-C為sp2雙鍵，其中烯基基團可以獨立且任選地被一個或多個本申請所描述的取代基所取代，包括基團有「反」，「順」或「E」，「Z」的定位，其中烯基具體的實例包括，但並不限於，乙烯基(-CH=CH2)、烯丙基(-CH2CH=CH2)等等。
用語「炔基」表示2-12個碳原子，或2-8個碳原子，或2-6個碳原子，或2-4個碳原子的直鏈或支鏈的一價烴基，其中至少一個位置為不飽和狀態，即一個C-C為sp三鍵，其中炔基基團可以獨立且任選地被一個或多個本申請所描述的取代基所取代，其中炔基具體的實例包括，但並不限於，乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(-CH2C≡CH)等等。
用語「雜原子」表示一個或多個O、S、N、P和Si，包括C，N，S和P任何氧化態的形式；伯、仲、叔胺和季銨鹽的形式；或者雜環中氮原子上的氫被取代的形式，例如，N (像3，4-二氫-2H-吡咯基中的N)，NH (像吡咯烷基中的NH) 或NR (像N-取代的吡咯烷基中的NR)；或雜環中的-CH2-被氧化，形成-C(=O)-的形式。
用語「鹵素」是指F、Cl、Br或I。
用語「氘」是指重氫，D。
在本申請中所使用的用語「不飽和的」表示部分含有一個或多個不飽和度。
本申請中所使用的用語「烷氧基」或「烷基氧基」，涉及到烷基，像本申請所定義的，通過氧原子連接到化合物分子的其它部分上。一些實施例中，烷氧基為C1-4烷氧基；這樣的實例包括，但並不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基等。並且所述烷氧基可以獨立地未被取代或被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。
本申請中所使用的用語「烷硫基」或「烷基硫基」，涉及到烷基，像本申請所定義的，通過硫原子連接到化合物分子的其它部分上。一些實施例中，烷硫基為C1-4烷硫基；這樣的實例包括，但並不限於甲硫基、乙硫基、丙硫基和丁硫基等。並且所述烷硫基可以獨立地未被取代或被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。
本申請中所使用的用語「烷氨基」或「烷基氨基」，涉及到烷基，像本申請所定義的，通過N原子連接到化合物分子的其它部分上。一些實施例中，烷氨基為C1-4烷氨基；這樣的實例包括，但並不限於甲氨基、乙氨基、丙氨基和丁氨基等。並且所述烷氨基可以獨立地未被取代或被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。
用語「環烷基」或「環烷烴」表示含有3-12個碳原子的，單價或多價的單環，雙環或三環碳環體系，為飽和環或含一個或多個不飽和鍵的環，但絕不包含芳香環。「環烷基」或「環烷烴」還可以為橋環和螺環。在一實施方案中，環烷基包含3-10個碳原子；在另一實施方案中，環烷基包含3-8個碳原子；在又一實施方案中，環烷基包含3-6個碳原子。這樣的實例包括，但並不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基和環己烯基等。所述環烷基基團可以獨立地未被取代或被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。
用語「雜環基」和「雜環」在此處可交換使用，都是指包含3-12個環原子的飽和或部分不飽和的單環、雙環或三環，絕不包含芳香環，其中至少一個環原子為雜原子。「雜環基」或「雜環」還可以為橋環雜環和螺環雜環。在一實施方案中，「雜環基」或「雜環」包含3-10個環原子；在一實施方案中，「雜環基」或「雜環」包含3-8個環原子；在另一實施方案中，「雜環基」或「雜環」包含5-8個環原子；在又一實施方案中，「雜環基」或「雜環」包含3-6個環原子；還在一實施方案中，「雜環基」或「雜環」包含5-6個環原子；再在一實施方案中，「雜環基」或「雜環」包含4-6個環原子；除非另外說明，雜環基可以是碳基或氮基，雜原子具有如本申請所述的含義。雜環基的實例包括，但不限於：環氧乙烷基、氮雜環丁基、氧雜環丁基、硫雜環丁基、吡咯烷基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、二氫噻吩基、1,3-二氧環戊基、二硫環戊基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、四氫噻喃基、呱啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、呱嗪基、二噁烷基、二噻烷基、噻噁烷基、高呱嗪基、高呱啶基、氧雜環庚烷基、硫雜環庚烷基、氧氮雜䓬基、二氮雜䓬基、硫氮雜䓬基、2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚-5-基、2-氧雜雙環[2.1.1]己烷、和1,2,3,6-四氫吡啶基。雜環基中-CH2-基團被-C(=O)-取代的實例包括，但不限於：2-氧代吡咯烷基、氧代-1,3-噻唑烷基、2-呱啶酮基、3,5-二氧代呱啶基、嘧啶二酮基和5,6-二氫吡啶-2(1H)-酮基。雜環基中硫原子被氧化的實例包括，但不限於環丁碸基和1,1-二氧代硫代嗎啉基。所述的雜環基基團可以任選地被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。
用語「芳基」表示含有6-14個環原子，或6-12個環原子，或6-10個環原子的單環、雙環和三環的碳環體系，其中，至少一個環是芳香族的，其中每一個環包含3-7個原子組成的環，且有一個或多個附著點與分子的其餘部分相連。用語「芳基」可以和用語「芳環」交換使用。芳基基團的實例可以包括苯基、萘基和蒽基。所述芳基基團可以獨立任選地被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。
用語「雜芳基」表示含有5-12個環原子，或5-10個環原子，或5-6個環原子的單環、雙環和三環體系，其中至少一個環體系是芳香環，且至少一個環體系包含一個或多個雜原子，其中每一個環包含5-7個原子組成的環，且有一個或多個附著點與分子其餘部分相連。用語「雜芳基」可以與用語「雜芳環」或「雜芳族化合物」交換使用。所述雜芳基基團任選地被一個或多個本申請所描述的取代基所取代。在一實施方案中，5-10個原子組成的雜芳基包含1、2、3或4個獨立選自O，S和N的雜原子，其中氮原子可以被進一步氧化。
雜芳基基團的實例包括，但並不限於：呋喃基、咪唑基(如N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基)、異噁唑基、惡唑基(如2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基)、吡咯基(如N-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基)、吡啶基、嘧啶基(如2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基)、噠嗪基、噻唑基(如2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、四唑基(如5-四唑基)、三唑基、噻吩基(如2-噻吩基、3-噻吩基)、吡唑基、異噻唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,3-硫代二唑基、1,3,4-硫代二唑基、1,2,5-硫代二唑基、吡嗪基、1,3,5-三嗪基；也包括以下的雙環，但絕不限於這些雙環：苯並咪唑基、苯並呋喃基、苯並噻吩基、吲哚基(如 2-吲哚基)、嘌呤基、喹啉基(如 2-喹啉基，3-喹啉基，4-喹啉基)、1,2,3,4-四氫異喹啉基、1,3-苯並二噁茂基、吲哚啉基、異喹啉基(如 1-異喹啉基、3-異喹啉基或4-異喹啉基)、咪唑並[1,2-a]吡啶基、吡唑並[1,5-a]吡啶基、吡唑並[1,5-a]嘧啶基、咪唑並[1,2-b]噠嗪基、[1,2,4]三唑並[4,3-b]噠嗪基、[1,2,4]三唑並[1,5-a]嘧啶基和[1,2,4]三唑並[1,5-a]吡啶基，等等。
用語「鹵代烷基」或「鹵代烷氧基」表示烷基或烷氧基基團被一個或多個鹵素原子所取代，這樣的實例包含，但並不限於，三氟甲基、三氟甲氧基等。
用語「鹵代環烷基」表示環烷基基團被一個或多個鹵素原子所取代，這樣的實例包含，但並不限於，1,1-二氟環丙烷、1-氯-2-氟環丙烷等。
像本申請所描述的，取代基畫一個鍵連接到環上形成的環體系代表取代基在該環上任何可取代的位置都可以取代。例如，式 (a) 代表取代基R可以在吡啶環上任何可能被取代的位置上單取代或多取代。(a)
像本申請所描述的，，與化學結構中的鍵相交的波浪線表示在化學結構中波狀鍵與其連接的原子與分子的其餘部分或與分子的片段的其餘部分連接的點。
另外，需要說明的是，除非以其他方式明確指出，在本文中通篇採用的描述方式「各…和…獨立地為」、「…和…各自獨立地為」和「…和…分別獨立地為」可以互換，應做廣義理解，其既可以是指在不同基團中，相同符號之間所表達的具體選項之間互相不影響，也可以表示在相同的基團中，相同符號之間所表達的具體選項之間互相不影響。
除非其他方面表明，本申請所描述的結構式包括所有的同分異構形式 (如對映異構，非對映異構，幾何異構或構象異構)：例如含有不對稱中心的R、S構型，雙鍵的(Z)、(E)異構體，和(Z)、(E)的構象異構體。因此，本申請的化合物的單個立體化學異構體或其對映異構體、非對映異構體、幾何異構體或構象異構體的混合物都屬於本申請的範圍。
除非其他方面表明，本申請所描述的結構式和所述的化合物包括所有的同分異構形式 (如對映異構，非對映異構，幾何異構或構象異構)、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽和前藥。因此，本申請的化合物的單個立體化學異構體、對映異構體、非對映異構體、幾何異構體、構象異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽和前藥的化合物也屬於本申請的範圍。另外，除非其他方面表明，本申請所描述的化合物的結構式包括一個或多個不同的原子的富集同位素。
「代謝產物」是指本申請所述的具體的化合物或其藥學上可接受的鹽、類似物或衍生物在體內通過代謝作用所得到的產物，其在體內或體外表現出與式 (I) 化合物類似的活性。一個化合物的代謝產物可以通過所屬領域公知的技術來進行鑒定，其活性可以通過如本申請所描述的那樣採用試驗的方法進行表徵。這樣的產物可以是通過給藥化合物經過氧化、還原、水解、醯氨化、脫醯氨作用、酯化、脫脂作用、或酶裂解等等方法得到。相應地，本申請包括化合物的代謝產物，包括將本申請的化合物與哺乳動物充分接觸一段時間所產生的代謝產物。
本申請中立體化學的定義和慣例的使用通常參考以下文獻：S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; and Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley&Sons, Inc., New York, 1994．本申請的化合物可以包含不對稱中心或手性中心，因此存在不同的立體異構體。本申請的化合物所有的立體異構形式，包括但絕不限於，非對映體，對映異構體，阻轉異構體，和它們的混合物，如外消旋混合物，組成了本申請的一部分。很多有機化合物都以光學活性形式存在，即它們有能力旋轉平面偏振光的平面。在描述光學活性化合物時，首碼D、L或R、S用來表示分子手性中心的絕對構型。首碼d、l或(+)、(-)用來命名化合物平面偏振光旋轉的符號，(-)或l是指化合物是左旋的，首碼(+)或d是指化合物是右旋的。這些立體異構體的化學結構是相同的，但是它們的立體結構不一樣。特定的立體異構體可以是對映體，異構體的混合物通常稱為對映異構體混合物。50：50的對映體混合物被稱為外消旋混合物或外消旋體，這可能導致化學反應過程中沒有立體選擇性或立體定向性。用語「外消旋混合物」和「外消旋體」是指等莫耳的兩個對映異構體的混合物，缺乏光學活性。
用語「互變異構體」或「互變異構的形式」是指不同能量的結構的同分異構體可以通過低能壘互相轉化。例如質子互變異構體(即質子移變的互變異構體)包括通過質子遷移的互變，如酮式-烯醇式和亞胺-烯胺的同分異構化作用。原子價(化合價)互變異構體包括重組成鍵電子的互變。
本申請所使用的「藥學上可接受的鹽」是指本申請化合物的有機鹽和無機鹽。藥學上可接受的鹽在所屬領域是為我們所熟知的，如文獻：S. M. Berge et al., describe pharmaceutically acceptable salts in detail in J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, 1977.所記載的。藥學上可接受的無毒的酸形成的鹽包括，但並不限於：與氨基基團反應形成的無機酸鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、高氯酸鹽；有機酸鹽，如乙酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、丙二酸鹽；或通過書籍文獻上所記載的其他方法如離子交換法來得到這些鹽。其他藥學上可接受的鹽包括，己二酸鹽、蘋果酸鹽、2-羥基丙酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、重硫酸鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊基丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡萄糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖醛酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、撲酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一酸鹽、戊酸鹽等。通過適當的堿得到的鹽包括，鹼金屬，鹼土金屬，銨和N+(C1-4烷基)4的鹽。本申請也擬構思了任何所包含N的基團的化合物所形成的季銨鹽。水溶性或油溶性或分散產物可以通過季銨化作用得到。可以形成鹽的鹼金屬或鹼土金屬包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等。藥學上可接受的鹽進一步包括適當的、無毒的銨，季銨鹽和抗平衡離子形成的胺陽離子，如鹵化物、氫氧化物、羧化物、硫酸化物、磷酸化物、硝酸化物、C1-8磺酸化物和芳香磺酸化物。
本申請的「水合物」是指溶劑分子是水所形成的締合物。
本申請的「溶劑化物」是指一個或多個溶劑分子與本申請的化合物所形成的締合物。形成溶劑化物的溶劑包括，但並不限於：水、異丙醇、乙醇、甲醇、二甲亞碸、乙酸乙酯、乙酸、氨基乙醇。
本申請的「酯」是指含有羥基的式 (I) 化合物形成體內可水解的酯。這樣的酯是例如在人或動物體內水解產生母體醇的藥學上可接受的酯。含有羥基的式 (I) 化合物體內可水解的酯的基團包括，但不限於：磷酸基、乙醯氧基甲氧基、2,2-二甲基丙醯氧基甲氧基、烷醯基、苯甲醯基、苯乙醯基、烷氧基羰基、二烷基氨基甲醯基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲醯基等。
本申請的「氮氧化物」是指當化合物含幾個胺官能團時，可將1個或大於1個的氮原子氧化形成N-氧化物。N-氧化物的特殊實例是叔胺的N-氧化物或含氮雜環氮原子的N-氧化物。可用氧化劑例如過氧化氫或過酸 (例如過氧羧酸) 處理相應的胺形成N-氧化物 (參見Advanced Organic Chemistry, Wiley Interscience, 第4版, Jerry March, pages)。尤其是，N-氧化物可用L.W.Deady 的方法製備 (Syn.Comm.1977, 7, 509-514)，例如在惰性溶劑(例如二氯甲烷中)，使胺化合物與間-氯過氧苯甲酸 (MCPBA) 反應。
本申請所使用的用語「前藥」，代表一個化合物在體內轉化為式 (I) 所示的化合物。這樣的轉化受前體藥物在血液中水解或在血液或組織中經酶轉化為母體結構的影響。本申請前體藥物類化合物可以是酯，在現有的申請中酯可以作為前體藥物的有苯酯類、脂肪族(C1-24)酯類、醯氧基甲基酯類、碳酸酯、氨基甲酸酯類和氨基酸酯類。例如本申請裡的一個化合物包含羥基，即可以將其醯化得到前體藥物形式的化合物。其他的前體藥物形式包括磷酸酯，如這些磷酸酯類化合物是經母體上的羥基磷酸化得到的。關於前體藥物完整的討論可以參考以下文獻：T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, J. Rautio et al, Prodrugs: Design and Clinical Applications, Nature Review Drug Discovery, 2008, 7, 255-270, and S. J. Hecker et al, Prodrugs of Phosphates and Phosphonates, Journal of Medicinal Chemistry, 2008, 51，2328-2345。
除非本文另有說明或者上下文清楚地有相反含義，否則本文所用的用語「一個」、「一種」、「該」以及本申請的上下文中(尤其是在請求項的上下文中)所使用的類似用語可以被解釋為既包括單數，又包括複數。
為描述本申請，以下列出了實施例。但需要理解，本申請不限於這些實施例，只是提供實踐本申請的方法。
一般地，本申請的化合物可以通過本申請所描述的方法製備得到，除非有進一步的說明，其中取代基的定義如本申請所述。下面的反應方案和實施例用於進一步舉例說明本申請的內容。
所屬領域的具有通常知識者將認識到：本申請所描述的化學反應可以用來合適地製備本申請的其他化合物，且用於製備本申請的化合物的其它方法都被認為是在本申請的範圍之內。例如，根據本申請那些非例證的化合物的合成可以成功地被所屬領域的具有通常知識者通過修飾方法完成，如適當的保護干擾基團，通過利用其他已知的試劑除了本申請所描述的，或將反應條件做一些常規的修改。另外，本申請所公開的反應或已知的反應條件也公認地適用於本申請其他化合物的製備。
下例實施例中所使用的原料、試劑等，如無特殊說明，均來源於市售或已知文獻的合成路線。
設備及檢測條件描述如下：1H NMR譜使用Bruker 500 MHz核磁共振譜儀記錄。1H NMR譜以CDCl3、DMSO-d6、CD3OD或丙酮-d6為溶劑(以ppm為單位)，用TMS (0 ppm) 或氯仿 (7.26 ppm) 作為參照標準。當出現多重峰的時候，將使用下面的縮寫：s (singlet，單峰)、d (doublet，雙峰)、t (triplet，三重峰)、q (quartet，四重峰)、m (multiplet，多重峰)、br (broadened，寬峰)、brs (broadened singlet，寬的單峰)、dd (doublet of doublets，雙二重峰)、dt (doublet of triplets，雙三重峰)。偶合常數J，用赫茲 (Hz) 表示。
低解析度質譜(MS)資料的測定條件是：Agilent G6125C四級杆HPLC-MS(色譜柱型號：XBridge BEH C18, 4.6 x 50 mm，2.5微米，6 min, 流速為1mL/min。流動相：0% - 95%(CH3CN)在(含0.1%甲酸的H2O:CH3CN=90:10)中的比例，採用電噴霧電離(ESI)，在210 nm/254 nm下，用DAD檢測。
化合物依據本領域常規命名原則或者使用軟體命名，市售化合物採用供應商目錄名稱。
實施例1
化合物1-2的製備
氮氣環境下，將化合物1-1 (40 g, 253 mmol) 溶於THF(200 mL)中，在零度下緩慢滴加甲基鋰溴化鋰乙醚溶液(506 mL, 759 mmol)，滴加完畢緩慢升溫至室溫，攪拌16小時。反應完畢後，反應液冷卻至0℃，滴加水(200 mL)淬滅反應，攪拌1小時後，用二氯甲烷(200 mL×5)萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，在60-100℃下進行蒸餾，直至無餾分滴出，瓶中剩餘即為化合物1-2的THF溶液。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 2.36 (s, 3H), 1.52 (s, 3H).
化合物1-3的製備
化合物1-3的製備路線如下：
將化合物1-4 (33.2 mL, 299.40 mmol)，化合物1-5 (61.90 g, 329.34 mmol)，碳酸鉀 (140.68 g, 1017.96 mmol)，氧化亞銅 (1.30 g, 8.98 mmol) 依次加入到甲苯(1000 mL)中，氮氣環境下加入四三苯基膦鈀 (10.38 g, 8.98 mmol)，混合物於25℃攪拌16 小時。反應液濃縮，加入水(500 mL)，用乙酸乙酯(500 mL×3)萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚 : 乙酸乙酯 = 8:1)純化，得化合物1-6。
將化合物1-6 (29 g, 126 mmol) 溶於THF(250 mL)中，加入氫氧化鋰水溶液(144.9 mL, 289.74 mmol, 2莫耳/升)，反應液升溫至50℃攪拌1小時。反應完畢後冷卻至室溫，混合物用二氯甲烷 (200 mL×1) 洗滌，水相用稀鹽酸(1莫耳/升)調pH=1，用二氯甲烷(100 mL×3)萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得化合物1-3。
化合物1-7的製備
氮氣環境下將化合物1-3 (7.72 g, 38.2 mmol) 溶於乙腈(80 mL)中，0℃下加入羰基二咪唑 (6.50 g, 40.08 mmol)，混合物攪拌1小時後，依次加入碳酸鉀 (6.59 g, 47.7 mmol)，化合物1-2 (26.6 g, 38.2 mmol, 22.4%含量)，反應液升溫至35℃，攪拌10小時。反應完畢後抽濾除去固體，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚 : 乙酸乙酯 = 10:1)純化，得到化合物1-7。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.00 - 6.87 (m, 2H), 3.92 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.76 (s, 3H).
化合物1-8的製備
氮氣環境下將鈀炭(3 g, 10%含量) 加入到17.5 mL的異丙醇中，室溫攪拌下加入化合物1-7(3 g, 9.31 mmol)。反應液在氫氣環境(225 psi)於30℃攪拌30小時。反應液用矽藻土過濾，濾餅依次用100 mL 異丙醇、20 mL 二氯甲烷洗滌，減壓濃縮後，用50 mL甲苯帶乾兩次，得到化合物1-8。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.00 - 6.93 (m, 1H), 6.92 - 6.84 (m, 1H), 4.49 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 2.9 Hz, 3H), 2.96 - 2.83 (m, 1H), 1.72 (s, 3H), 0.81 (dd, J = 2.1, 4.9 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+=325.1.
化合物1-9的製備
氮氣環境下，在-30℃將二異丁基氫化鋁 (13.0 mL, 13.0 mmol, 1莫耳/升甲苯溶液) 緩慢滴加入化合物1-8 (2.8 g, 8.64 mmol)的30 mL甲苯溶液中，滴加完畢後反應液於-30℃繼續攪拌1.5小時。反應完畢後加入100 mL乙酸乙酯稀釋，升溫至0℃，滴加飽和氯化銨水溶液淬滅，攪拌0.5小時，用矽藻土過濾後分液，有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到化合物1-9。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.95 - 6.89 (m, 1H), 6.89 - 6.80 (m, 1H), 5.80 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 4.00 (d, J = 2.6 Hz, 3H), 3.88 - 3.78 (m, 1H), 2.99 - 2.84 (m, 2H), 1.65 (s, 3H), 0.90 - 0.77 (m, 3H).
化合物1-10的製備
室溫攪拌下依次將化合物1-9 (2.4 g, 7.36 mmol)，4-二甲氨基吡啶 (1.35 g, 11.03 mmol)和乙酸酐 (1.0 mL, 11.0 mmol) 加入到40 mL的二氯甲烷中，反應液於20℃攪拌1小時。反應完畢後將反應液緩慢倒入30%氯化銨水溶液(100 mL)中淬滅。有機相用10%碳酸鈉水溶液(100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，得到化合物1-10。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.00 - 6.91 (m, 1H), 6.91 - 6.81 (m, 1H), 6.56 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.01 - 3.99 (m, 3H), 3.96 (dd, J = 2.0, 8.9 Hz, 1H), 2.96 - 2.86 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.62 (s, 3H), 0.87 (dd, J = 1.9, 7.6 Hz, 3H).
化合物1-11的製備
氮氣環境下將化合物1-10 (2.6 g, 7.06 mmol)加入到40 mL二氯甲烷中，降溫至-30℃後，將三甲氰化矽(2.8 mL, 21.2 mmol) 緩慢加入反應液中，攪拌5分鐘後滴加入三氟化硼乙醚 (7.8 mL, 28.2 mmol)，反應液於-30~0℃攪拌2小時。反應完畢後緩慢滴加氫氧化鉀水溶液 (2 mol/L, 100 mL)，混合物用二氯甲烷(50 mL×2)萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到化合物1-11。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.93 - 6.85 (m, 1H), 6.78 - 6.76 (m, 1H), 5.08 - 5.01 (m, 1H), 4.26 - 4.21 (m, 1H), 4.08 - 4.05 (m, 3H), 2.89 -2.81 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 0.83 - 0.79 (m, 3H).
化合物1-12的製備
將化合物1-11 (2.4 g, 7.16 mmol) 加入到20 mL乙醇中，攪拌下滴加入氫氧化鉀水溶液 (20 mL, 2 mol/L)，反應液升溫至75℃攪拌16小時。反應完畢冷卻後加入100 mL水稀釋，減壓濃縮除去乙醇。濃縮液中加入50 mL乙酸乙酯分液，水相用6 M鹽酸調節pH = 5，用乙酸乙酯(50 mL×2)萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得粗品，粗品經反相柱層析(流動相A: 水(0.1%甲酸)-B:乙腈; 洗脫梯度: B: 70%-80%; 洗脫15分鐘)純化得到化合物1-12。
1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 13.13 - 12.80 (m, 1H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 7.16 - 7.09 (m, 1H), 4.98 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.08 (dd, J = 7.9, 10.8 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.73 - 2.60 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 0.74 - 0.64 (m, 3H)。
m/z (ESI): [M-H]-= 353.2.
化合物1-13的製備
將化合物1-12 (2.1 g, 5.93 mmol)加入到4 mL甲苯中，攪拌升溫至60℃後，緩慢滴加R-苯乙胺(0.86 g, 7.11 mmol)的4 mL甲苯，滴加完畢後，將反應溫度降至50℃，攪拌1小時，反應溫度緩慢降溫至20℃，在20℃攪拌8小時，過濾，濾餅用5 mL甲苯洗滌，乾燥得到化合物1-13。
1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 7.50 - 7.41 (m, 5H), 7.13 (ddd, J = 2.1, 6.0, 8.6 Hz, 1H), 6.96 - 6.87 (m, 1H), 4.73 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.48 - 4.38 (m, 1H), 4.09 (dd, J = 8.3, 10.1 Hz, 1H), 3.96 (d, J = 2.1 Hz, 3H), 2.58 - 2.48 (m, 1H), 1.65 - 1.57 (m, 6H), 0.78 - 0.70 (m, 3H).
化合物1-14的製備
將化合物1-13 (2.25 g, 4.73 mmol) 加入到20 mL異丙醇和40 mL正庚烷的混合溶液中，攪拌下依次加入40 mL二氯甲烷和40 mL 鹽酸水溶液 (2 -mol/L)，反應液攪拌半小時，減壓濃縮除去低沸點溶劑，向殘餘液中加入50 mL乙酸乙酯，萃取分液，有機相用20 mL水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮得到油狀物 (1.76 g )。將奎寧(1.56 g, 4.80 mmol) 加入到溶有上述油狀物的4 mL二氯甲烷溶液中，加入4 mL異丙醇後升溫至70℃(蒸除低沸點二氯甲烷)，反應液溫度降至65度後緩慢加入12 mL正庚烷，65℃攪拌1小時後反應液緩慢降溫至20℃，20℃攪拌2小時後過濾，濾餅用異丙醇/正庚烷=1/3 (3 mL) 洗滌，減壓乾燥得到化合物1-14。
1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ 8.68 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 2.6, 9.3 Hz, 1H), 7.10 (ddd, J = 1.8, 6.1, 8.4 Hz, 1H), 6.84 - 6.75 (m, 2H), 6.16 (s, 1H), 5.52 (ddd, J = 6.7, 10.4, 17.2 Hz, 1H), 5.06 - 4.92 (m, 2H), 4.85 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.37 - 4.23 (m, 1H), 4.17 - 4.07 (m, 1H), 3.93 (d, J = 2.5 Hz, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.39 - 3.24 (m, 2H), 3.07 - 2.91 (m, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 2.58 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 2.15 - 2.04 (m, 1H), 2.03 - 1.93 (m, 2H), 1.80 - 1.68 (m, 1H), 1.65 (s, 3H), 1.27 - 1.10 (m, 1H), 0.78 (dd, J = 1.8, 7.3 Hz, 3H).
化合物1-15的製備
將20 mL稀鹽酸 (2.5 mol/L) 滴加到化合物1-14 (1.6 g, 2.36 mmol) 的20 mL二氯甲烷溶液中，混合物在20℃攪拌半小時後靜置分液，向有機相中再次加入30 mL 稀鹽酸 (2.5 mol/L) 後分液，合併的水相用二氯甲烷(20 mL×2)萃取，合併的有機相用20 mL水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得白色固體(600 mg)。氮氣環境，零度下，將DMF (0.1 mL, 0.34 mmol) 和草醯氯 (0.3 mL, 3.39 mmol) 依次滴加入溶有上述白色固體 (600 mg, 1.69 mmol)的10 mL二氯甲烷溶液中，反應液升溫至室溫，攪拌2小時，減壓濃縮得到化合物1-15。
化合物1-16的製備
氮氣環境，在零度下，將化合物1-15 (200 mg, 0.54 mmol)緩慢加入到溶有4-氨基-2-吡啶甲酸甲酯 (163.3 mg, 1.07 mmol) 和三乙胺 (0.2 mL, 1.61 mmol) 的4 mL二氯甲烷中，混合液升溫至20℃攪拌2小時。反應完畢後，滴加入20 mL水淬滅，用二氯甲烷 (10 mL×2) 萃取，合併後的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到粗品，粗品經反相柱層析純化(流動相A: 水(0.1%氨水)-B:乙腈; 洗脫梯度: B: 70%-80%; 洗脫15分鐘)得到化合物1-16。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.64 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.09 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 2.3, 5.5 Hz, 1H), 7.12 - 7.05 (m, 1H), 6.97 - 6.88 (m, 1H), 5.04 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.21 - 4.06 (m, 2H), 2.84 - 2.70 (m, 1H), 1.70 (s, 3H), 1.56 (s, 4H), 0.86 - 0.75 (m, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 489.2.
化合物1-17的製備
將化合物1-16 (210 mg, 0.43 mmol) 加入到7mol/L的氨/甲醇 (6.1 mL, 43.00 mmol) 溶液中，反應液在四氟悶罐中40℃反應24小時。反應完畢後濃縮得粗品，粗品經製備型高效液相分離純化(柱子型號：Phenomenex luna C18 150*25mm*10um; 流動相: [A: 水(0.1%甲酸)-B:乙腈; 洗脫梯度: B%:40%-70%洗脫10分鐘)得化合物1-17。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.74 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (br d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 2.1, 5.5 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.22 - 7.12 (m, 2H), 5.10 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.25 (dd, J = 7.9, 10.1 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 2.83 - 2.71 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.5 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 474.4.
化合物1-18的製備
氮氣環境，零度下，將三溴化硼(0.30 mL, 0.32 mmol)緩慢滴加入到溶有化合物1-17 (100 mg, 0.21 mmol) 的2 mL二氯甲烷溶液中，滴加完畢後在零度攪拌2小時。反應完畢後將反應液倒入50 mL飽和碳酸氫鈉水溶液中淬滅，水相用乙酸乙酯 (20 mL×2) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得粗產物，經薄層矽膠製備(二氯甲烷/甲醇=10:1) 純化得化合物1-18。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.74 (s, 1H), 10.53 - 10.41 (m, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.83 (dd, J = 2.1, 5.5 Hz, 1H), 7.62 (br s, 1H), 7.03 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 6.86 (q, J = 8.9 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 1H), 2.90 - 2.78 (m 1H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 2H), 1.60 (s, 3H), 0.71 (d, J = 6.3 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 460.2.
實施例1的製備
氮氣環境下，將溴丙炔(2.38 mg, 0.02 mmol) 緩慢滴加入到化合物1-18 (10 mg, 0.02 mmol)和碳酸鉀 (13.8 mg, 0.02 mmol)的1 mL DMF溶液中，滴加完畢升溫至60℃反應2小時，反應液冷卻過濾，濾液經製備型高效液相分離純化 (柱子型號: Waters Xbridge 150*25 mm*5 μm；流動相A: 水 (氨水)-B: 乙腈; 洗脫梯度: B%: 42%-72%; 洗脫11分鐘) 得實施例1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.68 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.16 (dd, J = 2.2, 5.6 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.19 - 7.11 (m, 1H), 7.05 - 6.94 (m, 1H), 5.67 - 5.56 (m, 1H), 5.02 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 4.93 - 4.74 (m, 2H), 4.26 (dd, J = 7.8, 11.3 Hz, 1H), 2.90 - 2.79 (m, 1H), 2.38 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 1.72 (s, 3H), 0.86 - 0.77 (m, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 498.2.
實施例2
氮氣環境下，將1-溴-2-丁炔 (14.5 mg, 0.11 mmol) 緩慢滴加入到溶有化合物1-18 (50 mg, 0.11 mmol) 和碳酸鉀 (75.2 mg, 0.54 mmol) 的1 mL DMF溶液中，反應液升溫至60℃反應2 小時。反應完畢後，反應液冷卻至室溫，過濾，濾液經製備型高效液相分離純化(柱子型號: Waters Xbridge 150*25 mm*5 μm; 流動相A: 水 (碳酸氫銨)-B: 乙腈; 洗脫梯度: B%: 50%-80%洗脫9分鐘)得到實施例2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.72 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.10 - 8.02 (m, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.28 - 7.14 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.93 - 4.78 (m, 2H), 4.37 (dd, J = 7.6, 10.3 Hz, 1H), 2.90 - 2.70 (m, 1H), 1.75 (t, J = 2.4 Hz, 3H), 1.62 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.4 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 512.2.
實施例3
化合物3-1的製備
氮氣環境下，將化合物1-18 (200 mg, 0.04 mmol) 和三乙胺 (0.1 mL, 0.65 mmol) 溶於3 mL二氯甲烷溶液中，混合物在零度下攪拌10分鐘，滴加三氟甲磺酸酐 (72.3 μL, 0.44 mmol)，滴加完畢後繼續在零度下反應1小時。反應完畢後，將反應液減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯 = 1:1)分離純化得化合物3-1。
m/z (ESI): [M + H]+= 592.1.
化合物3-2的製備
氮氣環境下，將1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II) (6.19 mg, 0.01 mmol)，碘化亞銅(3.22 mg, 0.02 mmol)和三乙胺(25.66 mg, 0.25 mmol)依次加入溶有化合物3-1(50 mg, 0.08 mmol) 和三異丙基矽基乙炔 (0.1 mL, 0.25 mmol)的0.5 mL DMF溶劑中，反應液升溫至100℃攪拌6小時。反應完畢後，將反應液冷卻至室溫，經短矽膠過濾(乙酸乙酯洗滌)，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經反相柱層析 (0.1%甲酸體系) 純化得到化合物3-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.61 (s, 1H), 8.47 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.18 (dd, J = 2.1, 5.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 5.59 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 5.03 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.32 (dd, J = 8.2, 11.0 Hz, 2H), 2.97 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.37 (s, 1H), 2.03 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 1.68 (s, 3H), 1.10 (s, 18H), 0.87 - 0.81 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 624.2.
實施例3的製備
氮氣環境下，將氟化銫(30.38 mg, 0.20 mmol) 加入溶有化合物3-2 (13 mg, 0.02 mmol) 的0.5 mL DMF溶液中，反應液在25℃攪拌1小時。反應完畢後過濾，濾液經製備型高效液相分離純化(Waters Xbridge 150*25mm* 5um; 流動相A: 水(碳酸氫銨)-B: 乙腈; 洗脫梯度: B%: 45% - 75%; 洗脫9分鐘)得到實施例3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.67 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.17 (dd, J = 2.0, 5.4 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.26 - 7.17 (m, 2H), 5.61 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.27 (dd, J = 7.9, 11.2 Hz, 1H), 3.64 (s, 1H), 2.97 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.71 (s, 3H), 0.88 - 0.74 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 468.2.
實施例4
化合物4-2的製備
化合物4-2的合成路線如下：
氮氣環境下，將化合物4-1 (3.00 g, 18.4 mmol) 滴加到溶有1, 2-二溴乙烷 (14.5 g, 77.2 mmol) 和三乙胺 (5.60 mL, 40.5 mmol) 的50 mL DMF溶液中，混合物在20℃攪拌16小時。反應完畢後，將反應液倒入100 mL水中，混合物用乙酸乙酯 (50 mL×2) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚洗脫)分離純化得化合物4-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.87 (s, 4H), 4.45 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.77 - 3.77 (m, 1H), 3.75 (t, J = 6.0 Hz, 1H).
化合物4-3的製備
氮氣環境下，將化合物4-2(58.8 mg, 0.22 mmol)加入到溶有化合物1-18(100 mg, 0.22 mmol)和碳酸鉀 (150 mg, 1.09 mmol)的2 mL DMF溶液中，反應液升溫至60℃攪拌6.5小時。反應完畢後，反應液冷卻至室溫，過濾， 濾液經反相柱層析純化(0.1%甲酸體系) 得化合物4-3。
1H NMR (400 MHz,CDCl3): δ 8.75 (s, 1H), 8.35 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.23 (dd, J = 2.4, 5.6 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.70 (s, 4H), 7.25 - 7.17 (m, 1H), 7.02 - 6.92 (m, 1H), 5.82 - 5.71 (m, 1H), 5.00 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.74 - 4.62 (m, 2H), 4.51 (dd, J = 8.0, 10.4 Hz, 1H), 4.44 - 4.25 (m, 2H), 3.07 - 2.97 (m, 1H), 1.78 (s, 3H), 0.80 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 649.2.
化合物4-4的製備
氮氣環境下，將水合肼 (14.2 mg, 0.28 mmol) 加入溶有化合物4-3 (90.0 mg, 0.14 mmol) 的3 mL 乙醇溶液中, 反應液升溫至65℃攪拌1小時。反應完畢後，反應液冷卻至室溫，過濾，濾液濃縮得化合物4-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.70 - 8.64 (m, 1H), 8.47 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.13 (dd, J = 2.4, 5.6 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.87 - 7.80 (m, 1H), 7.13 - 7.06 (m, 1H), 6.99 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.62 - 5.56 (m, 1H), 5.02 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.49 - 4.40 (m, 1H), 4.38 - 4.23 (m, 2H), 3.96 - 3.88 (m, 1H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 2.88 - 2.74 (m, 1H), 1.29 - 1.23 (m, 3H), 0.83 - 0.77 (m, 3H).
實施例4的製備
氮氣環境下，吡啶對甲苯磺酸鹽 (0.27 mg) 和多聚甲醛 (6.37 mg, 0.21 mmol) 依次加入溶有化合物4-4 (55 mg, 0.11 mmol) 的3 mL二氯甲烷溶液中，反應液升溫至40℃攪拌4小時。反應完畢後，向反應液中加水(20 mL)，用乙酸乙酯(10 mL×2)萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得粗品，粗品經製備型高效液相分離純化(柱子型號: Waters Xbridge 150*25 mm*5 um; 流動相A: 水(碳酸氫銨)-B:乙腈; 梯度: B: 48%- 78%洗脫10分鐘) 得實施例4。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.69 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.4, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.20 - 7.13 (m, 2H), 7.05 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.43 (dd, J = 4.8, 6.8 Hz, 1H), 4.37 - 4.23 (m, 4H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 0.70 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 531.2.
實施例5
化合物5-2的製備
化合物5-2的合成路線如下：
氮氣環境下，將叔丁基二甲基氯矽烷 (865 mg, 5.74 mmol) 加入到溶有化合物5-1 (300 mg, 2.87 mmol) 和咪唑 (586 mg, 8.61 mmol) 的5 mL DMF溶液中，反應液在20℃攪拌3 小時。反應完畢後，向反應液中加水(50 mL)，乙酸乙酯 (25 mL×2) 萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析 (石油醚洗脫) 分離純化得化合物5-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ 4.37 (t, J = 2.0 Hz, 2H), 4.18 (t, J = 2.0 Hz, 2H), 0.92 (s, 9H), 0.13 (s, 6H).
化合物5-3的製備
氮氣環境下，將化合物5-2 (28.6 mg, 0.13 mmol) 的DMF溶液 (1 mL) 緩慢加入到化合物1-18 (60 mg, 0.13 mmol) 和碳酸鉀 (90.3 mg, 0.65 mmol) 的DMF(1 mL)懸濁液中，反應液升溫至60℃攪拌2 小時。反應完畢後，反應液冷卻至室溫，過濾， 濾液經反相製備 (流動相A: 水(0.1%氨水)-B:乙腈; 洗脫梯度: B: 100%; 洗脫3分鐘) 分離純化得化合物5-3。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.73 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.95 (s, 4H), 7.84 (dd, J = 2.4, 5.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.17 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.04 - 4.92 (m, 2H), 4.33 (dd, J = 7.6, 10.2 Hz, 1H), 4.28 - 4.22 (m, 2H), 1.61 (s, 3H), 0.77 (s, 9H), -0.06 (s, 6H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 642.3.
實施例5的製備
將化合物5-3 (25 mg, 0.04 mmol) 溶解於氯化氫的甲醇溶液 (2 mL，2 mol/L) 中，在25℃下攪拌0.5小時。 反應完畢後濃縮，用2 mL甲醇稀釋，氨水調節到pH = 8, 經製備型高效液相分離純化(柱子型號:Waters Xbridge 150*25 mm*5 um; 流動相A: 水(碳酸氫銨)-B: 乙腈; 洗脫梯度: B:38%-68%; 洗脫9分鐘)得實施例5。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.73 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.63 (br d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.28 - 7.14 (m, 2H), 5.21 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 4.34 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.03 (m, 2H), 2.90 - 2.79 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.4 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 528.2.
實施例6
化合物6-2的製備
氮氣環境，-78℃下將甲基鋰 (5.3 mL, 8.41 mmol) 緩慢滴加到溶有化合物6-1 (1.0 g, 8.41 mmol) 的15 mL四氫呋喃中，反應液在-78℃下攪拌5 分鐘後緩慢滴加丙酮 (6.2 mL, 84.06 mmol)，滴加完畢後，反應液繼續在-78℃下攪拌10分鐘。反應完畢後加入30 mL的飽和氯化銨水溶液淬滅，水相用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取，合併後的有機相用50 mL飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析 (石油醚:乙酸乙酯 = 10: 1) 純化分離得化合物6-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3)：δ 3.94 (s, 2H), 1.53 (s, 6H).
實施例6的製備
氮氣環境下，將碳酸鉀 (63.18 mg, 0.46 mmol)和化合物6-2 (16.29 mg, 0.09 mmol) 加入到溶有化合物1-18 (50 mg, 0.09 mmol) 的1 mL DMF溶液中，反應液在60℃下攪拌2 小時。反應完畢後過濾，濾液經製備型高效液相色譜(柱子型號: Waters Xbridge 150* 25mm *5um; 流動相A: 水(碳酸氫銨)-B:乙腈; 洗脫梯度: B:35%~65%; 洗脫10分鐘) 純化分離得實施例6。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) ：δ 10.74 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.24 - 7.15 (m, 2H), 5.31 (s, 1H), 5.12 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.28 (dd, J = 7.2, 10.2 Hz, 1H), 2.85 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 1.24 (s, 3H), 0.74 (d, J = 5.6 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 556.3.
實施例7
氮氣環境下，將2-甲基-3-丁炔-2-醇 (0.1 mL, 0.89 mmol) 和K2CO3(451.27 mg, 3.27 mmol) 依次加入到溶有化合物1-18 (300 mg, 0.65 mmol) 的DMF(6 mL)溶液中，反應液在100℃下反應2 小時，向反應液中補加化合物2 (0.1 mL, 0.89 mmol)，反應液繼續在100℃下反應2 小時。反應完畢後反應液冷卻至室溫過濾，濾液經反相製備純化 (Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5um, water ( water( NH4HCO3)-ACN, 52% - 82%, 16 min) 得到實施例7。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.76 (br s, 1H)，8.48 (d, J = 5.52 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 1.88 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 5.40, 1.88 Hz, 1H), 7.63 (br s, 1H), 7.16 - 7.29 (m, 2H), 5.09 (d, J = 10.52 Hz, 1H), 4.43 (dd, J = 10.32, 7.60 Hz, 1H), 3.54 (s, 1H), 2.80 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 1.70 (s, 3H), 1.67 (s, 3H), 1.61 (s, 3H), 0.70 (br d, J = 5.12 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M+ H]+= 526.1.
實施例8
化合物8-2的製備
氮氣環境下，將甲磺酸酐 (0.80 mL, 6.42 mmol) 緩慢加入到溶有化合物8-1 (300 mg, 4.28 mmol)和三乙胺 (1.8 mL, 12.8 mmol) 的二氯甲烷(5 mL)溶液中，反應液在20℃下攪拌2 小時。反應完畢後，反應液減壓濃縮，加水(50 mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(25 mL × 2), 合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得化合物8-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 5.30 (dq, J = 2.0, 6.8 Hz, 1H), 3.13 (s, 3H), 2.71 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 1.67 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
實施例8的製備
氮氣環境下，將化合物8-2 (6.45 mg, 0.04 mmol) 的DMF(0.5 mL)溶液緩慢加入到化合物1-18 (100 mg, 0.22 mmol) 和碳酸鉀 (150 mg, 1.09 mmol) 的DMF(0.5 mL)溶液中，反應液在60℃攪拌16小時。反應完畢後反應液過濾，濾液經反相製備純化 (column: Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 um, water ( NH4HCO3)-ACN, 40%-70%, 15 min) 得實施例8。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.70 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (br d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.27 - 7.14 (m, 2H), 5.25 (dq, J = 2.0, 6.4 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 7.6, 10.8 Hz, 1H), 3.67 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.85 - 2.73 (m, 1H), 1.66 - 1.57 (m, 6H), 0.77 (br d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=512.2.
實施例9
氮氣環境下，將氰基亞甲基三正丁基膦 (132.4 mg, 0.55 mmol) 和 (S)-(-)-3-丁炔-2-醇 (38.45 mg, 0.55 mmol) 加入到溶有化合物1-18 (60 mg, 0.11 mmol) 的1, 4-二氧六環(2 mL)溶液中，反應液在40℃下攪拌16 小時。反應完畢後用水(40 mL)淬滅，乙酸乙酯 (30 mL ×2) 萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經反相製備純化 (Column: Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; Condition: water (NH4HCO3)-ACN; Begin B:43, End B:73; Gradient Time(min): 10;100%B Hold Time(min):4, Flow Rate(ml/min): 25) 分離得實施例9。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.72 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.63 (br s, 1H), 7.30 - 7.15 (m, 2H), 5.16 - 5.06 (m, 2H), 4.45 (dd, J = 7.2, 10.2 Hz, 1H), 3.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.91 - 2.79 (m, 1H), 1.66 - 1.59 (m, 6H), 0.70 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 512.1.
實施例10
化合物10-2的製備
氮氣環境下，將叔丁基二甲基氯矽烷 (1.92 g, 12.80 mmol) 加入到化合物10-1 (0.50 mL, 6.40 mmol) 和咪唑 (1.31 g, 19.2 mmol) 的DMF(10 mL)溶液中，反應液在20℃攪拌16小時。反應完畢後將反應液用水(100 mL)淬滅，乙酸乙酯 (50 mL × 2) 萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產物，經柱層析 (石油醚洗脫) 分離純化得化合物10-2。
1H NMR (400 MHz,CDCl3): δ 3.74 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.68 - 2.59 (m, 2H), 1.57 (s, 1H), 0.93 - 0.90 (m, 9H), 0.10 - 0.07 (m, 6H).
化合物10-3的製備
氮氣環境下，將三(二亞苄基丙酮)二鈀(31.0 mg, 0.03 mmol) 和4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽 (39.1 mg, 0.07 mmol) 加入到化合物3-1 (200 mg, 0.34 mmol)、化合物10-2 (130 mg, 0.68 mmol) 和N,N-二異丙基乙胺 (0.3 mL, 2.03 mmol) 的1,4-二氧六環(4 mL)溶液中，反應液在100℃下攪拌16小時。反應完畢後降至室溫，用水(50 mL)淬滅，乙酸乙酯萃取(20 mL × 2)，合併的有機相用鹽水(20 mL)洗滌分液後，無水硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮得粗產品，經柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1 至 2/1)分離純化得化合物10-3。
1H NMR (400 MHz,CDCl3): δ= 8.71 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.16 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.24 - 7.16 (m, 2H), 5.66 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.54 (dd, J = 8.0, 11.2 Hz, 1H), 3.73 - 3.65 (m, 2H), 3.15 (dq, J = 4.8, 7.2 Hz, 3H), 3.04 - 2.95 (m, 2H), 2.83 (m, 1H), 0.81 (s, 9H), 0.78 - 0.73 (m, 3H), 0.04 (d, J = 10.0 Hz, 6H)；
m/z(ESI): [M+ H]+= 634.1.
實施例10的製備
氮氣環境下，將化合物10-3 (95 mg, 0.15 mmol) 加入到鹽酸甲醇 (2N，5 mL) 溶液中，反應液在17℃下反應0.5 小時。反應完畢後將反應液減壓濃縮，殘餘物用甲醇(2 mL)稀釋，用氨水調節pH=8後經反相製備純化 (column: Waters Xbridge 150*25mm* 5um, water ( NH4HCO3)-ACN, 38%-68%, 15 min) 分離純化得實施例10。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.68 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.09 - 8.03 (m, 1H), 7.83 (dd, J = 2.4, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (br d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.55 - 7.43 (m, 1H), 7.29 (dd, J = 5.2, 8.0 Hz, 1H), 5.17 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.84 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.69 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 3.51 - 3.39 (m, 2H), 2.96 - 2.89 (m, 2H), 2.84 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 1.64 (s, 3H), 0.70 (br d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 520.2.
實施例11
化合物11-2的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (223.8 μL, 1.61 mmol) 和11-1 (81.67 mg, 0.54 mmol) 依次加入到溶有化合物1-15 (200 mg, 0.54 mmol) 的4 mL二氯甲烷中，反應液在25℃下攪拌1 小時。反應完畢後濃縮得粗產品，經反向製備 (0.1% FA ) 純化分離得化合物11-2。
m/z (ESI): [M + H]+= 489.1.
化合物11-3的製備
氮氣環境零攝氏度下，將三溴化硼 (0.1 mL, 0.24 mmol) 緩慢滴加入到溶有化合物11-2 (80 mg, 0.16 mmol) 的2 mL二氯甲烷中，反應液在25℃下攪拌1.5 小時。反應完畢後加入3 mL 二氯甲烷稀釋，滴加4 mL 飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷(5 mL × 3)萃取，合併後的有機相用20 mL飽和氯化鈉溶液洗滌後，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產物，經反向製備 (0.1% FA ) 純化分離得11-3。
LC-MS (ESI): [M + H]+=475.1.
實施例11的製備
氮氣環境下，將3-溴丙炔 (12.54 mg, 0.11 mmol) 加入到溶有化合物11-3 (50 mg, 0.11 mmol) 和K2CO3(72.82 mg, 0.53 mmol) 的1 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液在60℃下反應2 小時。反應完畢後反應液降至室溫過濾，濾液經反相製備純化 (Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5um, water ( water( NH4HCO3)-ACN, 45% - 75% over 10 min) 得到實施例11。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.54 (s, 1H), 8.34 (d, J = 5.52 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 1.88 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 5.52, 2.12 Hz, 1H), 7.11 - 7.28 (m, 2H), 5.18 (s, 1H), 5.09 (d, J = 10.52 Hz, 1H), 4.86 - 4.99 (m, 2H), 4.33 (dd, J = 10.36, 7.52 Hz, 1H), 3.65 (t, J = 2.36 Hz, 1H), 2.84 (t, J = 7.44 Hz, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.39 (s, 6H), 0.73 (d, J = 6.36 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M+ H]+= 513.1.
實施例12
化合物12-2的製備
氮氣環境下，在0℃下將氘代氫化鋰鋁 (2.6 mL, 5.12 mmol, 2 M THF溶液) 緩慢滴加到溶有化合物12-1 (1 g, 6.40 mmol) 的40 mL 四氫呋喃溶液中，反應液在0℃下攪拌1 小時。反應完畢後用1 mL氘水淬滅，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經柱層析純化 (石油醚:乙酸乙酯 = 10:1) 分離得化合物12-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ  1.67 (s, 1H), 0.20 - 0.17 (m, 9H).
化合物12-3的製備
氮氣環境下，將氰亞甲基磷酸三丁酯 (176.54 mg, 0.77 mmol) 和 化合物12-2 (95.28 mg, 0.73 mmol) 依次加入到溶有化合物1-18 (80 mg, 0.15 mmol) 的2 mL 二氧六環溶液中，反應液在40℃下攪拌16 小時。反應完畢後用10 mL水淬滅，乙酸乙酯 (10 mL ×3) 萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經矽膠柱層析純化 (石油醚:乙酸乙酯 = 2:1) 分離得到化合物12-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.71 - 8.67 (m, 1H), 8.47 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.18 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.88 (br d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.17 - 7.11 (m, 1H), 6.99 - 6.93 (m, 1H), 5.62 - 5.56 (m, 1H), 5.04 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.18 (dd, J = 6.8, 10.8 Hz, 1H), 2.91 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.72 (s, 3H), 0.84 - 0.80 (m, 3H), 0.09 (s, 9H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 572.2.
實施例12的製備
氮氣環境下，將四丁基氟化銨 (235 μL, 0.23 mmol, 1 M THF溶液) 加入到溶有化合物12-3 (60 mg, 0.08 mmol) 的2 mL 四氫呋喃溶液中，反應液在22.5℃下攪拌1.5 小時。反應完畢後用40 mL水淬滅，乙酸乙酯 (20 mL ×3) 萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經反相製備純化 (Column: Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; Condition: water (NH4HCO3)-ACN; Begin B:43, End B:73; Gradient Time(min): 10;100%B Hold Time(min):4, Flow Rate(ml/min): 25) 分離得實施例12。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.71 (br s, 1H), 8.48 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.28 - 7.15 (m, 2H), 5.11 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.2, 10.2 Hz, 1H), 3.63 (s, 1H), 2.90 - 2.78 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.8 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 500.1.
實施例13
氮氣環境下，將4-溴正丁炔(193.81 mg, 1.46 mmol) 和碳酸鉀 (225.64 mg, 1.63 mmol) 依次加入到溶有化合物1-18 (150 mg, 0.33 mmol) 的3 mL DMF溶液中，反應液在80℃下反應16 小時。反應完畢後反應液冷卻至室溫過濾，濾液經反相製備純化 (Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5um, water ( water( NH4HCO3)-ACN, 48% - 78% , 25 min) 得到實施例13。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.69 (s, 1H) , 8.49 (d, J = 5.52 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.00 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.84 (dd, J = 5.56, 2.20 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.24 Hz, 1H), 7.23 - 7.13 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.52 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 10.28, 7.64 Hz, 1H), 4.30 - 4.23 (m, 1H), 4.20 - 4.13 (m, 1H), 2.89 - 2.87 (m, 1H), 2.69 - 2.65 (m, 2H), 2.47 - 2.43 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 0.72 (d, J = 6.76Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M+ H]+ =512.1.
實施例14
化合物14-2的製備
氮氣保護0℃下，將氫化鈉 (14.5 mg, 0.36 mmol) 緩慢加入到溶有化合物14-1 (0.4 mL, 8.06 mmol) 的5 mL DMF溶液中，反應液在0℃下攪拌半小時後，滴加入溴丙炔 (642 mg, 5.40 mmol)，滴加完畢後反應液升溫至50 ℃繼續攪拌16 小時。反應完畢後將反應液逐滴加入到冰的飽和氯化銨(0.0 mL)中淬滅，乙酸乙酯萃取(20 mL × 2), 合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 2/1)分離純化得化合物14-2 。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 4.65 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.13 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 3.53 - 3.47 (m, 2H), 3.47 - 3.43 (m, 2H), 3.41 (t, J = 2.4 Hz, 1H).
實施例14的製備
氮氣環境下，將氰亞甲基磷酸三丁酯 (131 mg, 0.54 mmol) 加入到溶有化合物1-18 (50.0 mg, 0.11 mmol) 和化合物14-2 (54.5 mg, 0.54 mmol) 的2 mL二氧六環溶液中，反應液升溫至40℃反應2小時。反應完畢後反應液用50 mL 水淬滅，乙酸乙酯萃取 (20 mL*2), 合併的有機相經鹽水 (20 mL) 洗滌分液，水相再次用乙酸乙酯 (20 mL) 萃取一遍，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮，粗產品經反相製備純化 (column: Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 um, water ( NH4HCO3)-ACN, 40%-70%, 15 min)得到實施例14。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d6): δ 10.70 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.22 - 7.12 (m, 2H), 5.11 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.36 - 4.27 (m, 2H), 4.27 - 4.21 (m, 1H), 4.19 (t, J = 2.4 Hz, 2H), 3.75 (td, J = 2.8, 5.2 Hz, 2H), 3.44 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.91 - 2.80 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.71 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=542.2.
實施例15
化合物15-2的製備
氮氣環境下，於-78℃將正丁基鋰 (6.8 mL, 17.12 mmol, 2.5 M) 緩慢滴加到溶有化合物15-1 (1 g, 14.27 mmol)的四氫呋喃(10 mL)溶液中，反應液在-78℃下攪拌1 小時，加入多聚甲醛 (2.06 g, 22.83 mmol)，反應液緩慢升溫至25℃，攪拌16小時。反應完畢後，反應液降溫至0℃，用飽和氯化銨水溶液(50 mL)淬滅，乙酸乙酯 (50 mL ×3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯 = 2/1)分離得化合物15-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 5.19 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.12 - 4.08 (m, 4H), 3.25 (s, 3H).
實施例15的製備
氮氣環境下，將氰亞甲基磷酸三丁酯 (116.90 mg, 0.48 mmol) 和化合物15-2 (48.49 mg, 0.48 mmol) 依次加入到溶有化合物1-18 (50 mg, 0.10 mmol) 的二氧六環(2 mL)溶液中，反應液於40℃攪拌12 小時。反應完畢後，用水(40 mL)淬滅，乙酸乙酯 (20 mL ×2)萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗品，粗品經反相製備純化 (Column: Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; water (NH4HCO3)-ACN; Begin B:40, End B:70; Gradient Time(min): 10;100%B Hold Time(min):4, Flow Rate(ml/min): 25) 分離得實施例15。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.72 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.28 - 7.15 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.06 - 4.93 (m, 2H), 4.34 (dd, J = 7.2, 10.4 Hz, 1H), 4.12 - 4.01 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.88 - 2.80 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 542.2.
實施例16
化合物16-2的製備
氮氣環境0℃下，將叔丁基二苯基氯矽烷 (21.57 g, 78.47 mmol) 加到溶有化合物16-1 (5 g, 71.34 mmol)、4-二甲基氨基吡啶 (0.87 g, 7.13 mmol) 和三乙胺 (19.8 mL, 142.67 mmol) 的二氯甲烷(50 mL)溶液中，反應液升溫至25℃，攪拌12小時。反應完畢後，加飽和氯化銨水溶液(50 mL)淬滅反應，水相用二氯甲烷 (50 mL×3) 萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1) 分離純化得到化合物16-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.77 (td, J = 1.3, 7.9 Hz, 2H), 7.70 (td, J = 1.3, 7.9 Hz, 2H), 7.51 - 7.37 (m, 6H), 4.53 - 4.42 (m, 1H), 2.35 (dd, J = 0.6, 2.0 Hz, 1H), 1.41 (dd, J = 0.9, 6.4 Hz, 3H), 1.10 (d, J = 1.0 Hz, 9H).
化合物16-3的製備
氮氣環境下，於-70℃將甲基鋰乙醚溶液 (15.2 mL, 24.31 mmol, 1.6 M) 緩慢滴加至溶有化合物16-2(5 g, 16.21 mmol) 的四氫呋喃(100 mL)溶液中，反應液在-70℃下攪拌1小時後，將多聚甲醛 (0.73 g, 24.31 mmol) 分批加入到反應液中，混合液升溫至22℃，攪拌12小時。反應完畢後，反應液降溫至0℃，滴加飽和氯化銨水溶液 (50 mL) 淬滅，水相用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮乾得粗品，粗品經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1)分離純化得到化合物16-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.76 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 7.48 - 7.35 (m, 6H), 4.54 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.06 (m, 2H), 1.42 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.21 - 1.14 (m, 1H), 1.08 (s, 9H).
化合物16-4的製備
氮氣環境下，將氰亞甲基磷酸三丁酯 (236.44 mg, 0.98 mmol) 加入到溶有1-18 (150 mg, 0.33 mmol) 和化合物16-3 (1105.38 mg, 3.27 mmol) 的1,4-二氧六環(1.5 mL)溶液中，反應液在25℃下攪拌12小時。反應完畢後，反應液過濾，濾液通過反相柱 (0.1%甲酸體系) 純化得到化合物16-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.69 (s, 1H), 8.42 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.14 (dd, J = 2.1, 5.5 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.89 - 7.84 (m, 1H), 7.68 (dd, J = 1.5, 7.9 Hz, 2H), 7.61 (dd, J = 1.3, 7.9 Hz, 2H), 7.45 - 7.32 (m, 7H), 7.15 - 7.08 (m, 1H), 7.00 - 6.90 (m, 1H), 5.65 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 5.01 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.76 (q, J = 15.1 Hz, 2H), 4.42 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.29 - 1.27 (m, 3H), 1.01 (s, 9H), 0.82 - 0.77 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 780.2.
實施例16的製備
氮氣環境下，將氟化銨(189.98 mg, 5.13 mmol)加入到溶有化合物16-4 (200 mg, 0.26 mmol)的甲醇(4 mL)溶液中，反應液在25℃下攪拌12小時。反應完畢後反應液過濾，濾液經反相製備純化 (Phenomenex luna C18 150 × 40mm × 15um; mobile phase: water (FA)-ACN; B%: 42% - 72%, 15 min)得到實施例16。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.72 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.2, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.27 - 7.14 (m, 2H), 5.32 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.93 (s, 2H), 4.40 - 4.22 (m, 2H), 2.90 - 2.81 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.20 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.74 (d, J = 6.6 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 542.2.
實施例17
化合物17-2的製備
氮氣環境零度下，將叔丁基二苯基氯矽烷 (8.63 g, 31.39 mmol) 加到溶有化合物17-1 (2 g, 28.53 mmol)、4-二甲基氨基吡啶 (0.35 g, 2.85 mmol) 和三乙胺 (7.9 mL, 57.07 mmol) 的二氯甲烷(20 mL)溶液中，反應液在25℃下攪拌12小時。反應完畢後加飽和氯化銨水溶液(20 mL)淬滅反應，水相用二氯甲烷 (15 mL×3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮至乾得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1)分離純化得到化合物17-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.77 (dd, J = 1.3, 7.8 Hz, 2H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.48 - 7.36 (m, 6H), 4.47 (dq, J = 2.0, 6.5 Hz, 1H), 2.35 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 1.41 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.10 (s, 9H).
化合物17-3的製備
氮氣環境下，於-70℃將甲基鋰乙醚溶液 (4.9 mL, 7.78 mmol, 1.6 M) 緩慢滴加至溶有化合物17-2 (1.6 g, 5.19 mmol) 的四氫呋喃(30 mL)溶液中，反應液在-70℃攪拌1小時後，將多聚甲醛 (0.47 g, 15.56 mmol) 分批加入到反應液中，混合液升溫至27℃，攪拌12小時。反應完畢後反應液冷至0℃，滴加飽和氯化銨水溶液(15 mL)淬滅反應，水相用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取，合併後的有機相用無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮至乾得粗品，粗品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯 = 10/1)分離純化得到化合物17-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.77 (dd, J = 1.1, 7.6 Hz, 2H), 7.73 - 7.68 (m, 2H), 7.49 - 7.35 (m, 6H), 4.60 - 4.50 (m, 1H), 4.09 (d, J = 1.4 Hz, 2H), 1.42 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.08 (s, 9H).
化合物17-4的製備
氮氣環境下，將氰亞甲基磷酸三丁酯(157.62 mg, 0.65 mmol)加入到溶有1-18 (100 mg, 0.22 mmol)和化合物17-3 (736.92 mg, 2.18 mmol)的1,4-二氧六環(1 mL)溶液中，反應液於25℃攪拌12小時。反應液過濾，濾液經反相柱層析 (0.1%甲酸體系) 純化得到化合物17-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.61 (s, 1H), 8.36 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 2.2, 5.6 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 - 7.79 (m, 1H), 7.61 (dd, J = 1.3, 7.9 Hz, 2H), 7.58 - 7.52 (m, 2H), 7.39 - 7.23 (m, 7H), 7.09 - 7.02 (m, 1H), 6.94 - 6.83 (m, 1H), 5.56 (br d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 4.80 - 4.58 (m, 2H), 4.35 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 2.79 - 2.67 (m, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.20 (s, 3H), 0.95 (s, 9H), 0.70 (dd, J = 1.9, 5.3 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 780.3.
實施例17的製備
氮氣環境下，將氟化銨(132.98 mg, 3.59 mmol)加入到溶有化合物17-4(140 mg, 0.18 mmol) 的甲醇(3 mL)溶液中，反應液於25℃攪拌12小時。反應完畢後反應液過濾，濾液經反相製備純化 (Phenomenex luna C18 150*25mm* 10um; mobile phase: water (FA)-ACN; B%: 42% - 72%, 15 min) 得到實施例17。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ  10.73 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.1, 5.5 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.28 - 7.15 (m, 2H), 5.32 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 5.12 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.94 (s, 2H), 4.40 - 4.23 (m, 2H), 2.90 - 2.79 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.15 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.74 (d, J = 6.1 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 542.1.
實施例18
化合物18-2的製備
氮氣環境下，於0℃將氘代氫化鋰鋁 (0.34 g, 8.15 mmol) 緩慢分批次加到溶有化合物18-1 (1 g, 10.19 mmol) 的乙醚(15 mL)溶液中，反應液在0℃下攪拌1小時。向反應液中加氘水(1 mL)淬滅，加入無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產品，經矽膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯 = 10/1)分離得化合物18-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.85 (s, 3H).
實施例18的製備
氮氣環境下，將氰亞甲基磷酸三丁酯 (231.18 mg, 0.96 mmol) 和化合物18-2 (138.12 mg, 1.92 mmol) 加入到溶有化合物1-18 (100 mg, 0.19 mmol) 的二氧六環(1 mL)溶液中，反應液升溫至40℃攪拌16 小時。反應完畢後加水(30 mL)淬滅反應，乙酸乙酯 (30 mL ×2) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產品，經反相製備純化 (Column: Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; Condition: water (NH4HCO3)-ACN; Begin B:43, End B:73; Gradient Time(min): 15;100%B Hold Time(min):4, Flow Rate(ml/min): 25) 分離得實施例18。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.72 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.28 - 7.14 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 7.2, 10.8 Hz, 1H), 2.90 - 2.79 (m, 1H), 1.75 (s, 3H), 1.62 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 514.1.
實施例19
化合物19-2的製備
氮氣環境下，於-40℃將正丁基鋰 (14.1 mL, 35.2 mmol, 2.5 M) 緩慢地滴加入溶有化合物19-1 (5.00 g, 29.4 mmol) 的四氫呋喃(150 mL)溶液中，反應液在-40℃攪拌0.5小時後，滴加氯甲酸酯 (3.3 mL, 43.2 mmol)，混合液於-40℃繼續攪拌2小時。將反應液緩慢滴加到預冷至0℃的飽和氯化銨水溶液(50mL)中，水相經乙酸乙酯萃取 (150 mL ×2)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 50/1) 分離純化得化合物19-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.44 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.14 (s, 6H).
化合物19-3的製備
氮氣環境下，於-70℃將氘代氫化鋰鋁 (0.29 g, 7.01 mmol) 緩慢分批加入溶有化合物19-2 (2.00 g, 8.76 mmol) 的四氫呋喃(100 mL)溶液中，混合液在-70℃攪拌2 小時，升溫至0℃，緩慢滴加1 mL氘水淬滅，攪拌10分鐘後升溫至25℃，加入無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮至乾得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 10/1) 得化合物19-3。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 5.12 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 0.87 (s, 9H), 0.08 (s, 6H).
化合物19-4的製備
氮氣環境下，將甲磺酸酐 (194 mg, 1.11 mmol) 緩慢加入到化合物19-3 (300 mg, 1.48 mmol) 和三乙胺 (0.6 mL, 4.45 mmol) 的二氯甲烷(3 mL)溶液中，反應液在25℃下攪拌2 小時。反應完畢後加入20 mL 水淬滅反應，水相用二氯甲烷萃取 (10 mL ×2)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得化合物19-4。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 4.40 (s, 2H), 3.23 (s, 3H), 0.87 (s, 10H), 0.09 (s, 6H).
化合物19-5的製備
氮氣環境下，將化合物19-4 (183 mg, 0.65 mmol) 加入到化合物1-18 (100 mg, 0.22 mmol) 和碳酸鉀 (150 mg, 1.09 mmol) 的N-N,二甲基甲醯胺(2 mL)溶液中，反應液在60℃下攪拌12小時。反應完畢後反應液降至室溫，加20 mL水稀釋，水相用乙酸乙酯萃取 (10 mL × 2)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮至乾得粗品，經反相製備 (0.1% FA/ACN,80% to 90% over 10 min) 分離純化得化合物19-5。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.66 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.16 (dd, J = 2.4, 5.6 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.88 - 7.81 (m, 1H), 7.16 - 7.10 (m, 1H), 7.03 - 6.91 (m, 1H), 5.58 (br s, 1H), 5.02 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.21 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 2.93 - 2.84 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.83 - 0.78 (m, 3H), 0.02 (s, 6H);
m/z (ESI): [M+ H]+=644.3.
實施例19的製備
氮氣環境下，溶有化合物19-5 (60.0 mg, 0.09 mmol) 的3 mL鹽酸/甲醇 (2 M) 溶液在25℃攪拌0.5 小時，反應完畢後減壓濃縮得粗品，經反相製備 (column: Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 um,30% to 60% over 10 min)) 分離純化得實施例19。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.72 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.4, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.26 - 7.14 (m, 2H), 5.19 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 4.06 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 2.92 - 2.80 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M+ H]+=530.1.
實施例20
實施例20的製備
氮氣環境下，將氘水 (0.2 mL, 9.30 mmol) 和碳酸鉀 (15.42 mg, 0.11 mmol) 加入到溶有實施例12 (50 mg, 0.09 mmol) 的1 mL乙腈溶液中，反應液在24℃下攪拌12 小時。反應完畢後反應液過濾，濾液經反相製備 (column: Phenomenex 150 × 25 mm × 10 um, Condition: water(FA)-CAN; Begin B:48, End B: 78, Gradient Time(min):11, 100%B Hold Time(min):4, FlowRate(ml/min): 2) 分離純化得實施例20。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.71 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 2.4, 5.4 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.28 - 7.14 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.6, 10.2 Hz, 1H), 2.90 - 2.78 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M+ H]+= 501.1.
實施例21
化合物21-1的製備
氮氣環境下，將化合物1-15(200 mg, 0.54 mmol)加入到甲醇(2 mL)中，混合物於25°C攪拌2小時。反應液濃縮至乾，得到化合物21-1.
m/z (ESI): [M+ H]+= 369.0.
化合物21-2的製備
氮氣環境下，於0°C向化合物21-1(2.00 g, 5.43 mmol)的二氯甲烷(40 mL)中滴加三溴化硼(2.04 g, 8.15 mmol)，混合物於25°C攪拌1.5小時。向反應液中緩慢滴加飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL), 混合物用二氯甲烷萃取(30 mL× 3)，合併的有機相用飽和食鹽水洗滌(20 mL×2)，有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗品，粗品經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 5/1) 分離純化得化合物21-2.
m/z (ESI): [M+ H]+= 355.1.
化合物21-3的製備
將炔丙基溴(0.34 g, 2.82 mmol)加入到化合物21-2(1.00 g, 2.82 mmol)和碳酸鉀(1.95 g, 14.11)的DMF(10 mL)懸濁液中。混合物於60°C攪拌2小時。反應液過濾，濾液經反相柱層析純化(0.1%甲酸體系) 得化合物21-3.
m/z (ESI): [M+ H]+= 393.1.
化合物21-4的製備
向化合物21-3(930 mg, 2.37 mmol)的THF(12 mL)，甲醇(4 mL)和水(4 mL)溶液中加入氫氧化鋰(497.33 mg, 11.85 mmol)。混合物於25°C攪拌1小時。反應液加水(30 mL)稀釋，用稀鹽酸(1 mol/L)調pH至4，二氯甲烷萃取(30 mL× 3)，合併的有機相用飽和食鹽水洗滌(20 mL× 2)，有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到化合物21-4.
m/z (ESI): [M-H]-= 377.0.
化合物21-5的製備
向化合物21-4(70 mg, 0.19 mmol)的DCM(2 mL)溶液中加入DMF(2.9 μL, 0.04 mmol)和草醯氯(31.8 μL, 0.37 mmol)。混合物於25°C攪拌1小時。混合物濃縮，得到化合物21-5.
化合物21-6 的製備
化合物21-8的製備
氮氣環境下，將二碳酸二叔丁酯 (2.8 mL, 13.1 mmol) 和三乙胺 (1.8 mL, 13.1 mmol) 加入到溶有化合物21-7 (1.00 g, 6.57 mmol) 和4-二甲氨基吡啶 (0.40 g, 3.29 mmol) 的10 mL二氯甲烷溶液中，反應液在26°C下攪拌16 小時。補加二碳酸二叔丁酯 (2.8 mL, 13.1 mmol)，反應液升溫至40°C繼續攪拌16 小時。反應完畢後用200 mL 水稀釋，分層，水相用乙酸乙酯萃取 (100 mL × 2)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1 - 5/1) 分離純化得化合物21-8。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 1.54 (s, 9H);
m/z (ESI): [M+ H]+=253.0.
化合物21-9的製備
0°C下，將間氯過氧苯甲酸 (965.69 mg, 4.76 mmol, 85%含量) 緩慢分批加入到溶有化合物21-8 (600 mg, 2.38 mmol) 的10 mL二氯甲烷溶液中，反應液升溫到26°C攪拌16小時。反應完畢後反應液過濾，濾液緩慢滴加入到50 mL飽和亞硫酸鈉水溶液中淬滅，用澱粉碘化鉀試紙測量呈陰性後，水相用二氯甲烷萃取 (20 mL × 2)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1至100%甲醇洗脫) 得化合物21-9。
1H NMR (400 MHz,CDCl3): δ 8.13 ( d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.53 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 1.51 (s, 9H);
m/z (ESI): [M+ H]+=269.0.
化合物21-6的製備
氮氣環境下，將三氟乙酸 (2.00 mL, 26.9 mmol) 緩慢滴加到溶有化合物21-9 (170 mg, 0.63 mmol)的2 mL二氯甲烷溶液中，混合液在25°C攪拌2 小時後濃縮，殘餘物用三乙胺調節pH到10，經過反相製備 (0.1%FA/ACN,100% water over 3 min) 純化得化合物21-6。
化合物21-10的製備
氮氣環境下，將化合物21-5 (70.0 mg, 0.18 mmol) 加入到溶有化合物21-6 (148 mg, 0.88 mmol) 和三乙胺 (0.1 mL, 0.88 mmol) 的0.5 mL二氯甲烷溶液中，反應液在25°C下攪拌1.5 小時。反應完畢後反應液加20 mL 水淬滅，水相用二氯甲烷萃取 (10 mL × 2)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗品，經反相製備 (0.1% FA/ACN,50% to 60% over 5 min)分離純化得化合物21-10。
m/z (ESI): [M+ H]+=529.2.
實施例21的製備
氮氣環境下，將化合物21-10 (70.0 mg, 0.13 mmol) 加入到10 mL氨甲醇 (7 M) 中，反應液在25°C下攪拌16 小時後濃縮得粗品，經反相製備 (column: Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 um,32% to 62% over 11 min) 分離純化得實施例21。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 10.78 (s, 1H), 10.59 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 3.2, 7.2 Hz, 1H), 7.26 - 7.16 (m, 2H), 5.10 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.98 - 4.85 (m, 2H), 4.32 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 3.63 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.88 - 2.66 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=514.1.
實施例22、23
化合物22-2的製備
氮氣環境下，將碳酸銫 (20.55 g, 63.08 mmol)、[1,1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷 (1.29 g, 1.58 mmol) 加入到溶有化合物22-1 (5 g, 31.54 mmol) 和乙烯三氟硼酸鉀 (5.07 g, 37.85 mmol) 的150 mL 2-甲基四氫呋喃和15 mL水的混合溶液中，反應液升溫至90°C攪拌4小時。反應完畢後加反應液降至室溫，濃縮，向殘餘物中加入50 mL水稀釋，用乙酸乙酯 (50 mL × 3) 萃取，合併後的有機相用100 mL飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，依次經反相製備 (0.1% FA體系) 和矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 5/1 ~ 2/1) 分離純化得化合物22-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.39 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.44 (dd, J = 2.4, 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 10.8, 17.6 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 17.6 Hz, 1H), 5.75 (d, J = 10.8 Hz, 1H).
化合物22-3的製備
氮氣環境下，將四氧化鋨 (63.55 mg, 0.25 mmol) 的4.3 mL水溶液緩慢滴加到溶有N-甲基嗎啡啉氧化物 (4353.92 mg, 37.17 mmol)、化合物22-2 (1860.00 mg, 12.39 mmol) 的4.3 mL水和16 mL丙酮混合溶液中，滴加完畢後反應液在25℃下繼續攪拌3小時。反應完畢後將反應液冷卻到零度，加入50 mL 飽和亞硫酸鈉水溶液淬滅，攪拌15分鐘後，水相用乙酸乙酯 (50 mL × 15) 萃取，合併後的有機層經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 5/1~0/1) 純化分離得化合物22-3。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.29 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.58 (dd, J = 2.8, 8.8 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.76 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.79 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.72 (q, J = 5.2 Hz, 1H), 3.78 - 3.69 (m, 1H), 3.62 - 3.53 (m, 1H).
化合物22-4的製備
氮氣環境下，將對甲苯磺酸 (120 mg, 0.67 mmol) 和2,2-二甲氧基丙烷 (2.1 mL, 16.70 mmol)加入溶有化合物22-3 (1230.00 mg, 6.68 mmol) 的20 mL 2-甲基四氫呋喃和20 mL丙酮混合溶液中，反應液在25°C攪拌16小時。反應完畢加入10 mL飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，加50 mL水稀釋，水相用乙酸乙酯 (50 mL × 3) 萃取，合併後的有機相用100 mL飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 5/1) 分離純化得化合物22-4。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.32 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 2.4, 8.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.27 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 4.45 (dd, J = 7.2, 8.4 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 6.0, 8.4 Hz, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.43 (s, 3H)；
m/z (ESI): [M+ H]+= 224.9.
化合物22-5的製備
氬氣環境下，將10% 鈀炭催化劑(濕) (100 mg) 加入到溶有化合物22-4 (700 mg, 3.12 mmol) 的28 mL乙酸乙酯溶液中，氫氣置換三次後，反應液在氫氣 (15 psi) 環境下25°C攪拌6小時。反應完畢後反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得化合物22-5。
化合物22-6的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (559.4 μL, 4.02 mmol) 加入溶有化合物1-15 (500 mg, 1.34 mmol) 和化合物22-5 (260.56 mg, 1.34 mmol) 的10 mL二氯甲烷溶液中，反應液在25度反應1小時。反應完畢後向反應液中加入10 mL 水稀釋，水相用二氯甲烷 (15 mL × 3) 萃取，合併後的有機相用30 mL飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯= 5/1~2/1)分離純化得化合物22-6。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.44 (s, 1H), 8.70 (dd, J = 2.4, 5.2 Hz, 1H), 8.05 (ddd, J = 2.4, 5.2, 8.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 - 7.10 (m, 2H), 5.17 - 4.99 (m, 2H), 4.32 (dd, J = 6.8, 8.0 Hz, 1H), 4.23 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 2.0 Hz, 3H), 3.81 (dd, J = 6.8, 8.0 Hz, 1H), 2.79 - 2.72 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.38 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 531.2.
化合物22-7的製備
氮氣環境零度下，將三溴化硼 (0.8 mL, 1.67 mmol) 緩慢加入到溶有化合物22-6 (590 mg, 1.11 mmol) 的12 mL二氯甲烷中，反應液升溫至25°C攪拌1.5 小時。反應完畢後加入10 mL 飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應，水相用二氯甲烷 (20 mL × 3) 萃取，合併後的有機相用40 mL飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 5/1) 和反相柱層析(0.1%甲酸體系) 分離純化得化合物22-7。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.49 (br s, 1H), 8.66 (dd, J = 2.4, 9.2 Hz, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.99 (dt, J = 2.4, 8.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.01 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.80 (q, J = 8.8 Hz, 1H), 5.57 - 5.20 (m, 1H), 5.10 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.89 - 4.59 (m, 1H), 4.53 (dd, J = 4.4, 6.8 Hz, 1H), 4.22 (dd, J = 7.6, 10.0 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 4.0, 10.8 Hz, 2H), 2.83 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 1.58 (s, 3H), 0.70 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 477.2.
實施例22、23的製備
氮氣環境下，將溴丙炔 (32.6 μL, 0.38 mmol) 緩慢加入到溶有化合物22-7 (90 mg, 0.19 mmol) 和碳酸鉀 (130.54 mg, 0.94 mmol) 的1.5 mL N-N,二甲基甲醯胺溶液中，反應液升溫至60°C攪拌2小時。反應完畢後反應液降至室溫，過濾，濾液經反相製備純化 (Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; mobile phase: water (NH4HCO3)-ACN; B%: 40% - 60%, 25 min)得到實施例22和實施例23的混合物；混合物經SFC (Column: DAICEL CHIRALCEL OX (250mm × 30 mm × 10um); Condition: CO2-EtOH (0.1%NH3H2O); B%: 15-15; Gradient Time(min): 6.2; 100% B Hold Time (min): 0; FlowRate (ml/min): 150) 分離得到兩個單一異構體。
實施例22 (保留時間=1.505分鐘)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.36 (s, 1H), 8.63 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 2.4, 8.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.27 - 7.15 (m, 2H), 5.33 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.92 (dd, J = 2.4, 4.0 Hz, 2H), 4.64 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.53 (td, J = 4.4, 6.8 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 3.66 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 3.62 (ddd, J = 4.4, 6.0, 10.8 Hz, 1H), 3.43 (td, J = 6.4, 11.2 Hz, 1H), 2.83 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.60 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 515.3.
實施例23 (保留時間=1.649分鐘):
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10.35 (s, 1H), 8.66 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 2.4, 8.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.26 - 7.15 (m, 2H), 5.33 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.97 - 4.86 (m, 2H), 4.64 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.53 (td, J = 4.4, 6.8 Hz, 1H), 4.31 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 3.66 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 3.62 (ddd, J = 4.4, 6.4, 10.7 Hz, 1H), 3.43 (td, J = 6.4, 10.8 Hz, 1H), 2.89 - 2.77 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 5.8 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 515.2.
實施例24、25
化合物24-1的製備
氮氣環境下，將氰基亞甲基三正丁基膦 (7.15 g, 29.64 mmol) 加入到化合物21-2 (2.10 g, 5.93 mmol) 和化合物12-2 (3.86 g, 29.64 mmol) 的80 mL二氧六環溶液中，反應液升溫至40°C攪拌16 小時。反應完畢後反應液降至室溫，加入100 mL 水淬滅，水相用乙酸乙酯萃取 (50 mL × 2)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 50/1 - 30/1)純化得到化合物24-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.98 - 6.92 (m, 1H), 6.92 - 6.86 (m, 1H), 4.92 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.28 - 4.19 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 2.91 - 2.69 (m, 1H), 1.65 (s, 3H), 0.81 - 0.74 (m, 3H), 0.15 (s, 9H).
化合物24-2的製備
氮氣環境下，將氫氧化鋰 (1.01 g, 24.1 mmol) 的8 mL水溶液滴加到溶有化合物24-1 (2.25 g, 4.82 mmol) 的24 mL四氫呋喃和8 mL甲醇溶液中，反應液在26°C攪拌1 小時。反應完畢後減壓濃縮去除低沸點溶劑，殘餘物用2 M稀鹽酸調節pH到5，水相用乙酸乙酯 (20 mL ×2) 萃取，合併後有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯 = 10/1 ~ 乙酸乙酯/甲醇=5/1)純化得到化合物24-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.24 - 7.08 (m, 2H), 4.76 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.16 - 4.05 (m, 1H), 3.64 (s, 1H), 2.74 - 2.66 (m, 1H), 1.51 (s, 3H), 0.67 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M- H]-=379.1.
化合物24-3的製備
氮氣環境下，將草醯氯 (67.7 μL, 0.79 mmol) 緩慢滴加到溶有化合物24-2 (100 mg, 0.26 mmol)和N,N-二甲基甲醯胺 (2.0 μL, 0.03 mmol) 的2 mL二氯甲烷溶液中，反應液在26°C反應2 小時。反應完畢後減壓濃縮得到化合物24-3。
化合物24-5的製備
氮氣環境下，將溶有化合物24-3 (100 mg, 0.25 mmol) 的1mL二氯甲烷溶液滴加到化合物24-4 (70.3 mg, 0.5 mmol) 和三乙胺 (0.1 mL, 0.75 mmol) 的1 mL二氯甲烷溶液中，反應液在26°C攪拌1 小時。反應完畢後加50 mL 水稀釋後，水相用二氯甲烷 (20 mL × 2) 萃取，合併後有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 =10/1 ~ 5/1) 得到化合物24-5。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.39 - 8.28 (m, 2H), 7.52 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.16 - 7.11 (m, 1H), 7.09 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.03 - 6.95 (m, 1H), 4.99 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.37 (s, 1H), 1.70 (s, 3H), 0.84 - 0.76 (m, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 503.2.
實施例24、25的製備
氮氣環境下，將二乙酸碘苯 (216.7 mg, 0.67 mmol) 加入到溶有化合物24-5(160 mg, 0.32 mmol) 和乙酸銨 (39.27 mg, 0.51 mmol) 的4 mL甲醇溶液中，反應液在26°C攪拌1 小時。反應完畢後加20 mL 水稀釋，減壓濃縮除去低沸點溶劑，水相用乙酸乙酯 (10 mL × 2) 萃取，合併後有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經反相製備 (0.1% NH4OH, 40% to 50% over 10 min) 純化，再經過SFC拆分(column:DAICEL CHIRALPAK AD(250 mm×30 mm,10 μm), CO2-EtOH(0.1%NH3•H2O),25 % over 4.1 min, flow rate:60 mL/min) 兩個單一異構體。
實施例24 (保留時間=1.265分鐘)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.87 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.30 - 7.13 (m, 2H), 5.13 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.39 - 4.27 (m, 2H), 3.63 (s, 1H), 3.11 (s, 3H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.4 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=534.1.
實施例25 (保留時間=1.412分鐘)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.87 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.29 - 7.14 (m, 2H), 5.13 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.39 - 4.28 (m, 2H), 3.63 (s, 1H), 3.11 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.90 - 2.78 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=534.1.
實施例26
化合物26-2的製備
氮氣環境下，將化合物26-1 (380 mg, 2.55 mmol) 加入到10 mL 氨甲醇溶液(6 M)中，反應液在25°C攪拌20小時。反應液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 1/1 ~ 1/1，二氯甲烷/甲醇= 20/1 ~ 10/1) 分離純化得化合物26-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.83 (brs, 1H), 7.32 (brs, 1H), 7.06 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.58 (dd, J = 2.4, 8.0 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 5.07 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 5.6 Hz, 2H).
化合物26-3的製備
氮氣環境下，將咪唑 (40.97 mg, 0.60 mmol) 和叔丁基二甲基氯矽烷 (68.02 mg, 0.45 mmol)加入到溶有化合物26-2 (50.0 mg, 0.30 mmol) 的1 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液在25°C反應12小時。反應完畢加入20 mL水淬滅，水相用乙酸乙酯 (20 mL × 2) 萃取，合併後的有機相用20 mL飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯= 5/1 ~ 0/1) 分離純化得化合物26-3。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.61 (brs, 1H), 7.21 (brs, 1H), 7.09 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.58 (dd, J = 2.4, 8.0 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.65 (s, 2H), 0.86 (s, 9H), 0.04 (s, 6H).
化合物26-4的製備
氮氣環境下，將化合物26-3 (53.97 mg, 0.19 mmol) 和三乙胺 (87.1 μL, 0.63 mmol) 加入到溶有化合物24-3 (50.0 mg, 0.13 mmol) 的2 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在25°C反應1小時。反應完畢加入20 mL水淬滅，水相用二氯甲烷 (20 mL × 2) 萃取，合併後的有機相用20 mL飽和氯化鈉溶液洗滌，經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯= 5/1 ~ 1/1)分離純化得化合物26-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.47 (s, 1H), 8.03 - 7.93 (m, 2H), 7.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.20 - 7.15 (m, 1H), 7.02 - 6.94 (m, 1H), 5.68 (brs, 1H), 5.00 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.25 (dd, J = 7.6, 11.2 Hz, 1H), 2.88 - 2.75 (m, 1H), 2.38 (s, 1H), 1.71 (s, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.83 - 0.78 (m, 3H), 0.10 (s, 6H);
m/z (ESI): [M + H]+= 643.3.
實施例26的製備
氮氣環境下，將四丁基氟化銨四氫呋喃溶液 (133.4 μL, 0.13 mmol，1 M) 加入到溶有化合物26-4 (60.0 mg, 0.09 mmol) 的1 mL 四氫呋喃溶液中，反應液在25°C反應0.5小時。反應完畢後濃縮得粗產物，經反相製備(Phenomenex luna C18 150 × 25mm × 10um; mobile phase: water(FA)-ACN; B%: 45% - 75%, 25 min) 純化和二次反相製備(Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; mobile phase: water( NH4HCO3)-ACN; B%: 42% - 72%, 25 min) 純化得到實施例26。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.29 (s, 1H), 7.86 (brs, 1H), 7.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 2.0, 8.0 Hz, 1H), 7.48 - 7.37 (m, 2H), 7.27 - 7.12 (m, 2H), 5.24 (brs, 1H), 5.07 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 4.32 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 3.64 (s, 1H), 2.83 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 1.60 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M -17]+= 511.1.
實施例27
化合物27-1的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (365.5 μL, 2.63 mmol) 加入到化合物24-3(103.67 mg, 0.26 mmol)二氯甲烷(1 mL)溶液，隨後滴加入4-氨基吡啶-2-甲酸甲酯 (80.01 mg, 0.53 mmol)的二氯甲烷(0.5 mL)溶液，反應液在26°C下攪拌2小時。反應完畢後用30 mL 水稀釋，水相用二氯甲烷萃取 (10 mL × 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 1/1)分離純化得化合物27-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.63 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 5.6, 2.0 Hz, 1H), 7.05 - 7.19 (m, 1H), 6.93 - 7.05 (m, 1H), 5.03 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.21 - 4.32 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 2.73 - 2.94 (m, 1H), 2.38 (s, 1H), 1.72 (s, 3H), 0.76 - 0.87 (m, 3H);
m/z (ESI): [M - H]-= 513.2.
實施例27的製備
氮氣環境下，將氰化鉀 (2 mg, 0.03 mmol) 和羥胺水溶液 (0.5 mL, 8.16 mmol, 50%水溶液) 依次加入到溶有化合物27-1 (30 mg, 0.06 mmol) 的0.5 mL甲醇和0.5 mL四氫呋喃混合溶液中，反應液在26°C下攪拌12小時。反應完畢後將反應液倒入20 mL飽和碳酸氫鈉水溶液中淬滅，用二氯甲烷萃取 (10 mL x 3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經反相製備 (Column Phenomenex luna C18 150*25mm* 10um; mobile phase: water(TFA)-ACN; B%: 28% - 58%, 14 min) 純化得到實施例27。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.38 (s, 1H), 10.70 (s, 1H), 8.45 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 5.6, 2.0 Hz, 1H), 7.07 - 7.38 (m, 2H), 5.11 (d, J = 10.4 Hz, 1H). 4.10 - 4.45 (m, 1H), 3.63 (s, 2H), 2.84 (s, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 516.1.
實施例28
化合物28-1的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (348.6 μL, 2.51 mmol) 和4-氨基吡啶-2-甲腈 (59.75 mg, 0.50 mmol)依次加入到溶有化合物24-3 (100 mg, 0.25 mmol) 的1 mL二氯甲烷溶液中，反應液在26°C攪拌2小時。反應完畢後加10 mL 水稀釋，二氯甲烷萃取 (10 mL × 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液濃縮得粗品，經薄層矽膠製備(石油醚/乙酸乙酯= 1/1) 純化得化合物28-1.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.67 - 8.53 (m, 2H), 8.08 - 7.99 (m, 1H), 7.70 - 7.60 (m, 1H), 7.16 - 7.07 (m, 1H), 7.06 - 6.91 (m, 1H), 5.13 - 4.94 (m, 1H), 4.31 - 4.18 (m, 1H), 2.91 - 2.78 (m, 1H), 2.44 - 2.36 (m, 1H), 1.75 - 1.67 (m, 3H), 0.86 - 0.76 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 482.1.
實施例28的製備
氮氣環境下，將鹽酸羥胺 (7.69 mg, 0.11 mmol) 和碳酸鈉 (23.47 mg, 0.22 mmol) 依次加入到溶有化合物28-1(41 mg, 0.09 mmol)的2 mL乙醇溶液中，反應液在25°C攪拌1小時。反應完畢後過濾，濾液用2N 鹽酸調pH至5，經反相製備 (Column Phenomenex luna C18 150*25mm* 10um Condition water(FA)-CAN Begin B 43 End B 73 Gradient Time(min) 11 100%B Hold Time(min) 4 FlowRate(ml/min) 25) 純化得到實施例28.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.74 - 10.50 (m, 1H), 9.93 - 9.75 (m, 1H), 8.47 - 8.37 (m, 1H), 8.22 - 8.08 (m, 1H), 7.69 - 7.56 (m, 1H), 7.32 - 7.06 (m, 2H), 5.93 - 5.65 (m, 2H), 5.22 - 4.91 (m, 1H), 4.48 - 4.15 (m, 1H), 3.67 - 3.58 (m, 1H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 1.70 - 1.53 (m, 3H), 0.87 - 0.59 (m, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 515.2.
實施例29
實施例29的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (139.4 μL, 1.00 mmol) 加入到溶有化合物24-3 (100 mg, 0.25 mmol) 的0.5 mL二氯甲烷中，隨後加入4-氨基吡啶-2-磺醯胺 (45.17 mg, 0.26 mmol)，混合物在26°C下攪拌2小時。反應完畢後加20 mL水淬滅，用二氯甲烷萃取 (10 mL ×3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經反相製備 (Column Waters Xbridge 150*25mm* 5um; mobile phase: water(NH3H2O)-ACN; B%: 38% - 68%, 12 min) 純化得到實施例29。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.52 (s, 1H), 8.09 - 8.31 (m, 1H), 7.75 (dt, J = 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.44 - 7.61 (m, 2H), 7.36 (s, 2H), 7.08 - 7.28 (m, 2H), 5.10 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 10.32, 7.44 Hz, 1H), 3.64 (s, 1H), 2.85 (s, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.63 - 0.83 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 535.2.
實施例30、31
化合物30-1的製備
氮氣環境下，將溶有化合物24-3 (300 mg, 0.75 mmol) 的2 mL二氯甲烷溶液滴加到3-(甲硫基)苯胺(35.16 mg, 0.25 mmol)和三乙胺 (0.3 mL, 2.26 mmol) 的2 mL二氯甲烷溶液中，反應液在26°C攪拌2 小時。反應完畢後加50 mL 水稀釋，水相用二氯甲烷 (20 mL × 2) 萃取，合併後有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 20/1 ~ 5/1) 純化得到化合物30-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.30 (s, 1H), 7.57 - 7.51 (m, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 2H), 7.20 - 7.14 (m, 1H), 7.03 - 6.94 (m, 2H), 5.00 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 7.6, 11.2 Hz, 1H), 2.88 - 2.76 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.37 (s, 1H), 1.70 (s, 3H), 0.84 - 0.76 (m, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=502.1.
實施例30、31的製備
氮氣環境下，將二乙醯氧基碘苯 (407 mg, 1.26 mmol) 加入到溶有化合物30-1 (300 mg, 0.60 mmol) 和乙酸銨(73.8 mg, 0.96 mmol) 的5 mL甲醇溶液中，反應液在26°C攪拌1 小時。反應完畢後減壓濃縮除去低沸點溶劑得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=1/1 ~ 0/1) 純化和反相製備 (0.1% FA/ACN,50% to 60% over 5 min) 純化得到實施例30和實施例31的混合物；混合物經SFC拆分(column: DAICEL CHIRALPAK AD(250 mm × 30 mm,10 um),CO2-EtOH(0.1%NH3H2O),30% to 30% over 2.7 min, 60 mL/min)得到兩個單一異構體。
實施例30 (保留時間 = 0.915分鐘)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.53 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58 - 7.49 (m, 1H), 7.27 - 7.14 (m, 2H), 5.09 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 4.22 - 4.15 (m, 1H), 3.64 (s, 1H), 3.02 (s, 3H), 2.92 - 2.77 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=533.3.
實施例31 (保留時間 = 1.165分鐘)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.54 (s, 1H), 8.24 (t, J = 1.8 Hz, 1H), 7.88 - 7.82 (m, 1H), 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58 - 7.49 (m, 1H), 7.30 - 7.11 (m, 2H), 5.09 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 3.64 (s, 1H), 3.02 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 2.90 - 2.77 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=533.2.
實施例32
化合物32-2的製備
氮氣環境下，將叔丁基二甲基氯矽烷 (865 mg, 5.74 mmol) 加入到溶有化合物32-1 (300 mg, 2.87 mmol) 和咪唑 (586 mg, 8.61 mmol) 的5 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液在20°C反應3 小時。反應完畢後用50 mL水淬滅，乙酸乙酯 (25 mL ×2 ) 萃取，合併的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經柱層析 (石油醚洗脫)純化得到化合物32-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.37 (t, J = 2.0 Hz, 2H), 4.18 (t, J = 2.0 Hz, 2H), 0.92 (s, 9H), 0.13 (s, 6H).
化合物32-3的製備
氮氣環境下，將化合物32-2 (28.6 mg, 0.13 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺溶液 (1 mL) 緩慢加入到化合物1-18 (60 mg, 0.13 mmol) 和碳酸鉀 (90.3 mg, 0.65 mmol) 的1 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液升溫至60°C攪拌2 小時。反應完畢後反應液冷卻後過濾, 濾液經反相製備分離得到化合物32-3 。
實施例32的製備
將化合物32-3 (25 mg, 0.04 mmol) 溶解於鹽酸甲醇 (2 mL，2 M) 中，在25°C下攪拌0.5小時。 反應完畢後濃縮，用2 mL甲醇稀釋，氨水調節到pH=8, 經反相製備 (column:Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 um, water ( NH4HCO3)-ACN, 38%-68% over 9 min) 分離純化得實施例32。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.73 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.28 - 7.14 (m, 2H), 5.21 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.11 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 1.6 Hz, 2H), 4.34 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.03 (m, 2H), 2.91 - 2.79 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.4 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M+ H]+= 528.2。
實施例33
實施例33的製備
氮氣環境下，將[1,1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷 (13.81 mg, 0.02 mmol)、碘化亞銅 (6.48 mg, 0.03 mmol)、三乙胺 (117.5 μL, 0.85 mmol) 和化合物33-1 (142.23 mg, 1.69 mmol) 加入到溶有化合物3-1 (100 mg, 0.17 mmol) 的2 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液在100°C下攪拌16 小時。反應完畢後反應液降至室溫，用40 mL水淬滅，乙酸乙酯 (30 mL ×3) 萃取，合併後的有機相用50 mL飽和氯化鈉溶液洗滌、無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經反相製備純化 (Column: Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; Condition: water (NH4HCO3)-ACN; Begin B:38, End B:68; Gradient Time(min): 10;100%B Hold Time(min):4, Flow Rate(ml/min): 25) 分離得到實施例33。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.75 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.29 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.4 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 1H), 7.28 (dd, J = 4.0, 8.8 Hz, 1H), 5.69 (s, 1H), 5.22 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.36 (dd, J = 7.6, 10.2 Hz, 1H), 2.96 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.64 (s, 3H), 1.51 (s, 6H), 0.75 - 0.68 (m, 3H)；
m/z (ESI): [M - 17]+= 508.2。
實施例34
化合物34-2的製備
氮氣環境下，將苯甲醯氯 (322.7 μL, 2.78 mmol) 和三乙胺 (478.0 μL, 3.44 mmol) 加入到溶有化合物34-1(500 mg, 2.65 mmol) 的10 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在25°C下攪拌12 小時。反應完畢後用30 mL氫氧化鈉水溶液 (1N) 淬滅，水相用二氯甲烷 (20 mL ×3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1) 分離得到化合物34-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.79 (s, 2H), 8.14 (dd, J = 1.2, 8.0 Hz, 2H), 7.63 - 7.56 (m, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 5.53 (s, 2H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 294.4.
化合物34-3的製備
氮氣環境下，將碳酸銫(607.20 mg, 1.86 mmol)、(±)-2,2-雙(二苯膦基)-1,1-聯萘 (178.53 mg, 0.29 mmol)、醋酸鈀 (32.18 mg, 0.14 mmol) 和二苯甲酮亞胺 (312 mg, 1.72 mmol) 加入到溶有化合物34-2 (440 mg, 1.43 mmol) 的10 mL 甲苯溶液中，反應液在120°C下攪拌12 小時。反應完畢後反應液降至室溫，用60 mL水淬滅，乙酸乙酯 (30 mL ×3) 萃取，合併後的有機相用50 mL飽和氯化鈉溶液洗滌、無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 5/1) 分離得化合物34-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.18 (s, 2H), 8.14 - 8.10 (m, 2H), 7.81 - 7.74 (m, 2H), 7.58 - 7.55 (m, 1H), 7.52 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.48 - 7.42 (m, 4H), 7.38 - 7.32 (m, 3H), 7.13 (dd, J = 2.0, 7.2 Hz, 2H), 5.47 (s, 2H);
m/z (ESI): [M + H]+= 394.1.
化合物34-4的製備
氮氣環境下，將鹽酸羥胺 (250.83 mg, 3.61 mmol) 和乙酸鈉 (434.27 mg, 5.29 mmol) 加入到溶有化合物34-3(600 mg, 1.20 mmol) 的10 mL 甲醇溶液中，反應液在25°C下攪拌7 小時。反應完畢後反應液減壓濃縮得粗產品，經柱層析(石油醚/乙酸乙酯 = 5/1~1/1)分離得化合物34-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.22 (s, 2H), 8.12 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.60 - 7.54 (m, 1H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 5.47 (s, 2H)；
m/z (ESI): [M + 23]+= 252.1.
化合物34-5的製備
氮氣環境下，將2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (120.62 mg, 0.32 mmol)、N,N-二異丙基乙胺 (69.9 μL, 0.42 mmol) 和化合物34-4 (64.93 mg, 0.25 mmol) 加入到溶有化合物21-4 (80 mg, 0.21 mmol) 的2 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液在25°C下攪拌16 小時。反應完畢後用40 mL水淬滅，乙酸乙酯 (30 mL ×3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 5/1~3/1) 分離得化合物34-5。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.97 (s, 2H), 8.38 (s, 1H), 8.16 - 8.09 (m, 2H), 7.63 - 7.55 (m, 1H), 7.50 - 7.41 (m, 2H), 7.17 - 7.09 (m, 1H), 7.04 - 6.94 (m, 1H), 5.53 (s, 2H), 5.04 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.93 - 4.87 (m, 1H), 4.83 - 4.78 (m, 1H), 4.26 (dd, J = 7.6, 11.2 Hz, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.44 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 1.70 (s, 3H), 0.84 - 0.79 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 590.2.
實施例34的製備
氮氣環境下，將氫氧化鋰 (38.05 mg, 0.91 mmol) 加入到溶有化合物34-5 (110 mg, 0.18 mmol) 的3 mL 甲醇溶液中，反應液在25°C下攪拌1小時。反應完畢後減壓濃縮得粗產品，經反相製備純化 (Column: Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um; Condition: water (NH4HCO3)-ACN; Begin B:23, End B:53; Gradient Time(min): 10;100%B Hold Time(min):4, Flow Rate(ml/min): 25) 分離得實施例34。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.46 (s, 1H), 8.98 (s, 2H), 7.27 - 7.16 (m, 2H), 5.26 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.15 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.98 - 4.85 (m, 2H), 4.55 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.32 (dd, J = 7.2, 10.2 Hz, 1H), 3.67 (t, J = 2.0 Hz, 1H), 2.89 - 2.78 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 486.1.
實施例35
化合物35-2的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (94.1 mg, 0.93 mmol)、叔丁基二甲基(2-丙炔氧基)矽烷 (317 mg, 1.86 mmol)、(二苯基磷)二茂鐵氯化鈀 (13.6 mg, 0.02 mmol) 和碘化亞銅 (7.08 mg, 0.04 mmol) 依次加入溶有化合物3-1 (110 mg, 0.19 mmol) 的2 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液在80°C攪拌48 小時。反應完畢後反應液降至室溫，反應液用30 mL 水稀釋後，乙酸乙酯萃取 (15 mL × 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產物，經反相製備(0.1%FA/ACN,80% to 90% over 5 min) 分離純化得化合物35-2。
m/z (ESI): [M- H]+= 612.2
實施例35的製備
氮氣環境下，將化合物35-2 (14 mg, 0.02 mmol) 加入到2 M鹽酸甲醇 (2mL) 溶液中，反應液在25°C攪拌0.5 小時。反應完畢後反應液濃縮至乾得粗品，經反相製備(column: Phenomenex luna C18 150 × 25 mm × 10 um,35% to 65% over 9 min) and (column: Waters Xbridge 150 × 25mm × 5um, 35% to 65% over 11 min) 分離純化得實施例35。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.78 (br s, 1H), 8.47 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.08 - 8.03 (m, 1H), 7.83 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.52 - 7.45 (m, 1H), 7.30 (dd, J = 4.4, 8.5 Hz, 1H), 5.67 - 5.45 (m, 1H), 5.20 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.36 (dd, J = 7.6, 10.3 Hz, 1H), 3.04 - 2.92 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.71 (d, J = 6.4 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=498.2.
實施例36、37
化合物36-2的製備
氮氣環境下，將化合物36-1 (35.34 mg, 0.25 mmol) 加入到溶有化合物21-5 (100 mg, 0.25 mmol) 和 三乙胺 (105.1 μL, 0.76 mmol) 的2 mL二氯甲烷溶液中，反應液在25°C反應1小時。反應完畢後加入3 mL 水稀釋萃滅反應，水相用二氯甲烷 (10 mL × 3) 萃取，合併後的有機相用5 mL飽和氯化鈉溶液洗滌、無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經反相製備(0.1%甲酸體系) 分離純化得化合物36-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.38 - 8.29 (m, 2H), 7.51 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 1.6, 5.6 Hz, 1H), 7.03 - 6.96 (m, 1H), 4.99 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.92 - 4.86 (m, 1H), 4.83 - 4.77 (m, 1H), 4.25 (dd, J = 7.8, 11.2 Hz, 1H), 2.88 - 2.77 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.38 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 1.70 (s, 3H), 0.80 (dd, J = 1.6, 7.4 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 501.1。
實施例36、37的製備
氮氣環境下，將二乙酸碘苯 (40.80 mg, 0.13 mmol)、醋酸銨 (7.39 mg, 0.10 mmol) 依次加入溶有化合物36-2 (30 mg, 0.06 mmol) 的1 mL甲醇溶液中，反應液在25°C反應18小時。反應完畢後反應液濃縮得粗產物，經反相製備純化 (Waters Xbridge 150 × 25mm ×5um; mobile phase: water( NH4HCO3)-ACN; B%: 43% - 63%, 25 min) 純化得到實施例36和實施例37的混合物；混合物經SFC拆分 (Column DAICEL CHIRALPAK AD (250 × 50 mm × 10um); Condition: CO2-EtOH (0.1%NH3H2O); B%: 20-20; Gradient Time(min): 3.6; 100% B Hold Time (min): 0; FlowRate (ml/min): 120) 得到兩個單一異構體。
實施例36 (保留時間 =1.273分鐘)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.88 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.17 (m, 2H), 5.13 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.95 - 4.89 (m, 2H), 4.37 - 4.30 (m, 2H), 3.64 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 3.11 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 2.84 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.4 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 532.1.
實施例37 (保留時間 = 1.420分鐘)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.89 (s, 1H), 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.16 (m, 2H), 5.13 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.92 (t, J = 2.8 Hz, 2H), 4.39 - 4.29 (m, 2H), 3.64 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 3.11 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 5.6 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 532.2.
實施例38
實施例38的製備
氮氣環境下，將三(二亞苄基丙酮)二鈀 (7.74 mg, 0.01 mmol)、4,5-雙二苯基膦-9,9-二甲基氧雜蒽(4.89 mg, 0.01 mmol)、N,N-二異丙基乙胺 (41.9 μL, 0.25 mmol) 依次加入到溶有化合物3-1 (50 mg, 0.08 mmol) 和二甲基氧化磷 (13.20 mg, 0.17 mmol) 的2 mL 二氧六環溶劑中，反應液升溫至100 °C攪拌15小時。反應完畢後將反應液冷卻至室溫，經短矽膠柱過濾 (乙酸乙酯洗滌)，濾液減壓濃縮得粗產物，經反相製備純化 (Waters Xbridge 150 × 25mm ×5um; mobile phase: water( NH4HCO3)-ACN; B%: 23% - 53%, 25 min) 得到實施例38。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.60 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 2.2, 5.6 Hz, 1H), 7.72 - 7.59 (m, 2H), 7.46 - 7.39 (m, 1H), 5.48 (dd, J = 7.1, 10.8 Hz, 1H), 5.15 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.90 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 1.85 - 1.76 (m, 6H), 1.58 (s, 3H), 0.76 (d, J = 6.5 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 520.2.
實施例39
實施例39的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (139.4 μL, 1.00 mmol) 加入到溶有化合物24-3 (100 mg, 0.25 mmol) 的0.5 mL二氯甲烷中，隨後加入4-氨基吡啶-2-磺醯胺 (45.17 mg, 0.26 mmol)，混合物在26°C下攪拌2小時。反應完畢後加20 mL水淬滅，用二氯甲烷萃取 (10 mL × 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經反相製備 (Column Waters Xbridge 150*25mm* 5um; mobile phase: water(NH3H2O)-ACN; B%: 38% - 68%, 12 min) 純化得到實施例39。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.52 (s, 1H), 8.09 - 8.31 (m, 1H), 7.75 (dt, J = 7.6, 2.0 Hz, 1H), 7.44 - 7.61 (m, 2H), 7.36 (s, 2H), 7.08 - 7.28 (m, 2H), 5.10 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 10.32, 7.44 Hz, 1H), 3.64 (s, 1H), 2.85 (s, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.63 - 0.83 (m, 3H);
m/z (ESI): [M+H]+= 535.2.
實施例40
化合物40-2的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (57.5 μL, 0.41 mmol) 和化合物40-1 (43.28 mg, 0.21 mmol) 加入到化合物24-3 (55.0 mg, 0.14 mmol) 的1 mL二氯甲烷溶液中，反應液在25°C反應1小時。反應完畢後反應液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 3/1) 分離純化得化合物40-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.51 (s, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 3H), 7.20 - 7.12 (m, 1H), 7.03 - 6.94 (m, 1H), 5.02 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 7.6, 11.2 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 2.90 - 2.78 (m, 1H), 2.37 (s, 1H), 1.71 (s, 3H), 0.85 - 0.78 (m, 3H)；
m/z (ESI): [M+H]+= 572.2.
實施例40的製備
氮氣環境下，將化合物40-2 (50.0 mg, 0.08 mmol) 溶於5 mL 氨甲醇 (7M) 溶液中，反應液在60°C反應17小時。反應完畢後反應液減壓濃縮得粗產物，經反相製備 (Column Phenomenex luna C18 150 × 25mm × 10um; mobile phase: water(FA)-ACN; B%: 43% - 73%, 11 min) 分離純化得實施例40。
1H NMR (400 MHz, METHANOL-d4): δ 8.54 (s, 1H), 7.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 2.0, 8.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23 - 7.13 (m, 1H), 7.09 - 6.99 (m, 1H), 5.08 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.43 (dd, J = 8.0, 10.2 Hz, 1H), 2.93 (s, 1H), 2.90 - 2.84 (m, 1H), 1.68 (s, 3H), 0.83 (d, J = 5.6 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M+H]+=542.2.
實施例41
實施例41的製備
氮氣環境下，於0°C將間氯過氧苯甲酸 (55.0 mg, 0.32 mmol) 加入到溶有化合物24-5 (80 mg, 0.16 mmol) 的3 mL 二氯甲烷溶液中，反應液於0°C攪拌2小時。反應完畢後，將反應液緩慢加入到50 mL 飽和亞硫酸鈉水溶液淬滅，用澱粉碘化鉀試紙測量水相呈陰性後，二氯甲烷萃取 (20 mL × 2)，合併後的有機相用20 mL 飽和碳酸氫鈉洗滌、無水硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮得粗品，經反相製備(column: Waters Xbridge C18 150*25mm*5um;mobile phase: [A: H2O(10mM NH4HCO3);B: ACN]; B%: 48.00%-78.00%,15.00min; flow rate:25.00 ml/min) 分離純化得到實施例41。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.90 (s, 1H), 8.63 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.91 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.30 - 7.15 (m, 2H), 5.14 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.6, 10.4 Hz, 1H), 3.62 (s, 1H), 3.24 (s, 3H), 2.90 - 2.77 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.4 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 535.2.
實施例42
化合物42-2的製備
氮氣環境下，將化合物二甲基氧化膦 (676.69 mg, 8.67 mmol)、磷酸鉀 (3.07 g, 14.45 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀 (317.58 mg, 0.35 mmol) 和4,5-雙(二苯基膦)-9,9-二甲基氧雜蒽 (401.34 mg, 0.69 mmol) 加入到溶有化合物42-1 (1.0 g, 5.78 mmol) 的20 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液升溫至140°C反應16小時。反應完畢後反應液降至室溫，過濾，濾餅用10 mL乙酸乙酯洗滌兩次，濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析純化 (二氯甲烷/甲醇 = 10: 1) 分離得化合物42-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.09 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 2.4, 7.2 Hz, 1H), 6.52 (td, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 6.34 (s, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.53 (s, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 171.2.
實施例42的製備
氮氣環境下，將化合物42-2 (42.93 mg, 0.21 mmol) 和三乙胺 (57.5 μL, 0.41 mmol) 依次加入到溶有化合物24-3 (55 mg, 0.14 mmol) 的1 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在25°C反應1小時。反應完畢後減壓濃縮得粗產物，經反相製備 (色譜柱Waters Xbridge C18 150 × 25mm × 5um, 水相-有機相H2O(10mM NH4HCO3)-ACN, B%: 33% - 63%, 15 min) 純化得到實施例42。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.74 (s, 1H), 8.61 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.21 (dd, J = 2.0, 6.4 Hz, 1H), 7.77 (td, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.13 (m, 2H), 5.12 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 7.2, 10.2 Hz, 1H), 3.65 (s, 1H), 2.91 - 2.77 (m, 1H), 1.70 - 1.51 (m, 9H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 533.2.
實施例43
化合物43-3的製備
氮氣環境下，將化合物43-2 (2.69 g, 20.34 mmol)、三苯基膦 (5.34 g, 20.34 mmol) 和偶氮二甲酸二異丙酯 (4.0 mL, 20.34 mmol) 加入到溶有化合物43-1 (1.9 g, 13.56 mmol) 的30 mL 甲苯溶液中，反應液升溫至80°C下反應3小時。反應完畢後反應液降至室溫，反應液減壓濃縮得粗產品，經柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10: 1) 分離得化合物43-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.39 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.57 - 4.39 (m, 3H), 4.17 (dd, J = 6.4, 8.4 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 6.0, 8.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.41 (s, 3H).
化合物43-4的製備
氮氣環境下，將鐵粉 (2.42 g, 43.42 mmol) 和氯化銨 (2.32 g, 43.42 mmol) 加入到溶有化合物43-3 (2.3 g, 8.68 mmol) 的20 mL 乙醇和4 mL水溶液中，反應液升溫至80°C反應2小時。反應完畢後反應液降至室溫，加40 mL乙酸乙酯稀釋，過濾，濾液減壓濃縮得粗產品，經柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1~1/1) 分離得化合物43-4。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.59 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.17 (dd, J = 2.0, 6.0 Hz, 1H), 5.93 (s, 2H), 5.81 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.37 - 4.29 (m, 1H), 4.20 - 4.09 (m, 2H), 4.03 (dd, J = 6.4, 8.0 Hz, 1H), 3.69 (dd, J = 6.4, 8.0 Hz, 1H), 1.33 (s, 3H), 1.28 (s, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 225.2.
化合物43-5的製備
氮氣環境下，將化合物43-5 (86.97 mg, 0.38 mmol) 和三乙胺 (104.6 μL, 0.75 mmol) 加入到溶有化合物24-3 (100 mg, 0.25 mmol) 的1 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在25°C反應1小時。反應完畢後用20 mL水淬滅，二氯甲烷 (20 mL ×2) 萃取。合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、減壓濃縮得粗產品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1~3/1) 分離得化合物43-5。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.37 (s, 1H), 8.03 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.17 - 7.10 (m, 1H), 7.06 - 6.95 (m, 3H), 4.98 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.49 - 4.42 (m, 1H), 4.37 - 4.30 (m, 2H), 4.25 (dd, J = 8.0, 11.3 Hz, 1H), 4.12 (dd, J = 6.0, 8.4 Hz, 1H), 3.85 (dd, J = 6.0, 8.4 Hz, 1H), 2.89 - 2.77 (m, 1H), 2.37 (s, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 0.83 - 0.78 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 587.2.
實施例43的製備
氮氣環境下，將三氟乙酸 (0.2 mL, 2.69 mmol) 加入到溶有化合物43-5 (50 mg, 0.08 mmol) 的2 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在26°C反應1小時。反應完畢後反應液減壓濃縮得粗產品，經反相製備(column: Waters Xbridge C18 150*25mm*5um; mobile phase: [A: H2O (10mM NH4HCO3); B: ACN]; B%: 40.00%-70.00%, 15.00min; flow rate:25.00 ml/min)純化得到實施例43。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.49 (s, 1H), 8.01 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.26 - 7.19 (m, 1H), 7.17 - 7.10 (m, 3H), 5.08 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.87 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.60 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.32 (dd, J = 7.6, 10.0 Hz, 1H), 4.22 (dd, J = 4.4, 10.8 Hz, 1H), 4.09 (dd, J = 6.0, 10.8 Hz, 1H), 3.75 (qd, J = 5.6, 10.8 Hz, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.40 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.90 - 2.77 (m, 1H), 1.59 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 547.2.
實施例44
實施例44的製備
氮氣環境下，將化合物24-3 (424 mg, 1.06 mmol) 溶於二氯甲烷(6 mL)中，添加三乙胺(0.5 mL, 3.6 mmol)，隨後添加化合物44-1 (127 mg, 1.06 mmol)，反應液在室溫下攪拌3小時。反應完畢後反應液加入20 mL飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅，水相用二氯甲烷 (3 × 20 mL) 萃取，合併後的有機相用飽和食鹽水(1× × 30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮，粗品經柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1~1/1) 分離純化得到實施例44。
LC-MS (ESI): [M + H]+= 482.1.
實施例45
實施例45的製備
將化合物45-1 (17.95 mg, 0.16 mmol) 和三乙胺 (87.1 μL, 0.63 mmol)溶入DMF (1 mL)，室溫下攪拌5分鐘後，將化合物24-3 (50 mg, 0.13 mmol) 的DMF (1 mL)溶液緩慢滴加入混合物中，室溫下攪拌2小時。反應完畢後，反應液加入水(10 ml)，混合物用乙酸乙酯(10 ml × 3)萃取，有機相用飽和氯化鈉水溶液(10 ml × 3)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，有機相過濾後減壓濃縮，得到粗品。粗品經薄層矽膠製備(二氯甲烷: 甲醇=10:1)和反相製備(Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 47% - 67% B over 10 min; mobile phase A: 0.225% aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例45。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.42 - 8.27 (m, 1H), 7.15 - 6.94 (m, 3H), 6.75 - 6.62 (m, 2H), 5.06 - 4.93 (m, 1H), 4.36 - 4.20 (m, 1H), 2.88 - 2.78 (m, 1H), 2.47 - 2.40 (m, 1H), 1.36 - 1.18 (m, 3H), 0.80 (d, J = 5.2 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 473.1.
實施例46
實施例46的製備
氮氣環境下，將甲醇鈉甲醇(0.01 mL, 0.05 mmol) 溶液 加入到溶有實施例44 (100 mg, 0.21 mmol)的5 mL 甲醇溶液中，反應液在室溫下攪拌2小時，隨後添加氯化銨(23 mg, 0.42 mmol)，升溫至40°C繼續攪拌12小時。反應液濃縮，粗品經反向製備 ((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 23% - 53% B over 10 min; mobile phase A: 0.225% aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例46。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.61 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.47 - 8.44 (m, 2H), 7.89 - 7.87 (m, 1H), 7.23 - 7.21 (m, 2H), 5.19 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.38 - 4.33 (m, 1H), 3.66 (s, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.75 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 499.1.
實施例47
實施例47的製備
氮氣環境下，將實施例44 (100 mg, 0.21 mmol) 溶於2 mL 1,4-二氧六環中，依次添加三乙胺(0.058 mL, 0.42 mmol)和二甲胺鹽酸鹽(33.87 mg, 0.42 mmol)，反應液升溫至90°C攪拌16小時。反應液濃縮，粗品經反向製備((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 24% - 54% B over 10 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例47。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.55 - 11.48 (m, 1H), 8.57 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.04 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.78 - 7.76 (m, 1H), 7.30 - 7.26 (m, 1H), 7.23 - 7.17 (m, 1H), 5.26 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.37 - 4.33 (m, 1H), 3.66 (s, 1H), 3.02 (s, 6H), 2.87 - 2.78 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.75 (d, J = 6.4 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 527.2.
實施例48
化合物48-1的製備
將化合物12-2 (500 mg, 3.85 mmol)，咪唑 (800 mg, 11.76 mmol)和叔丁基二苯基氯矽烷(2.4 g, 8.73 mmol)溶解在無水DCM (30 mL)中，室溫攪拌12小時。反應也濃縮得到粗品，經矽膠柱層析(石油醚洗脫)純化得到化合物48-1。
化合物48-2的製備
將化合物48-1(900 mg, 2.44 mmol)和碳酸鉀 (1.1 g, 7.96 mmol)溶解在DMF (12 mL)，室溫攪拌24小時。反應液加入乙酸乙酯(100 mL)，水 (30 mL) 洗一次，飽和食鹽水(30 mL)洗滌一次，無水硫酸鈉乾燥有機相，過濾，旋乾，經矽膠柱層析純化得到化合物48-2.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.56 - 7.59 (m, 1H), 7.26 - 7.50 (m, 1H), 2.24 (s, 1H)，1.12 - 1.34 (m, 9H).
化合物48-3的製備
氮氣環境下，於-50°C將化合物48-2 (370 mg, 1.25 mmol)溶解在THF (1 mL)，緩慢加入正丁基鋰正己烷溶液(1.0 mL, 2.50 mmol)，攪拌0.5小時。加入氘代碘甲烷(370 mg, 2.55 mmol)的THF(1 mL)溶液，攪拌1小時。反應液倒入飽和氯化銨的水溶液(100 mL)淬滅，混合物用乙酸乙酯(100 mL×3)萃取。有機相合併飽和食鹽水(100 mL)洗滌一次，有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得化合物48-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.77 - 7.79 (m, 1H), 7.44 - 7.50 (m, 1H), 1.12 - 1.34 (m, 9H).
化合物48-4的製備
將化合物48-3(370 mg, 1.18 mmol)溶解在四丁基氟化銨的四氫呋喃溶液 (5 mL, 5.00 mmol)中，室溫攪拌0.5小時。反應液加入乙酸乙酯(100 mL)稀釋，然後水(100 mL)洗一次，飽和食鹽水(100 mL) 洗一次，有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，得到化合物48-4.
實施例48的製備
氮氣環境下，將三苯基膦 (70 mg, 0.11 mmol)，化合物1-18 (50 mg, 0.11 mmol)和化合物48-4 (10 mg, 0.13 mmol)溶解在THF (1.5 mL)，冰水浴下，加入偶氮二甲酸二異丙酯 (30 mg, 0.15 mmol)，室溫攪拌過夜。反應液加入乙酸乙酯(20 mL)，混合物用水(10 mL ×2)洗，飽和食鹽水洗(10 mL)一次，有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得粗品，經反向製備((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 48% - 78% B over 10 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例48.
m/z (ESI): [M + H]+= 517.1.
實施例49
實施例49的製備
將實施例24 (50 mg, 0.09 mmol)置於50 mL單口瓶中，室溫下加入DCM (3 mL)，置換氬氣，將三甲基氧鎓四氟硼酸 (7 mg, 0.05 mmol)加入溶液中，室溫攪拌6小時。反應液旋乾得粗品，經薄層矽膠層析(石油醚:乙酸乙酯=1:1)純化得到實施例49。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.91 (s, 1H), 8.62 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 8.32 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 5.5, 2.1 Hz, 1H), 7.32 – 7.12 (m, 2H), 5.14 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 10.4, 7.5 Hz, 1H), 3.63 (s, 1H), 3.16 (s, 3H), 2.93 – 2.76 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 1.62 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.2 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 548.4.
實施例50
化合物50-1的製備
氮氣環境下，於0°C將三溴化硼二氯甲烷溶液 (12.7 mL, 25.4 mmol) 緩慢滴入到溶有化合物1-12 (4.5 g, 12.7 mmol) 的60 mL二氯甲烷溶液，反應液升溫至25°C攪拌1 小時。反應完畢後，將反應液倒入100 mL飽和碳酸氫鈉水溶液中， 50 mL二氯甲烷萃取一次，丟棄有機相，用(30 mL, 3M)稀鹽酸調水相pH至3-4，水相用二氯甲烷萃取 (50 mL ×3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得化合物50-1。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.11 - 6.96 (m, 1H), 6.92 - 6.70 (m, 1H), 4.97 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.09 (dd, J = 10.4, 7.6 Hz, 1H), 2.73 (s, 1H), 1.52 (s, 3H), 0.67 (d, J = 6.0 Hz, 3H).
化合物50-2的製備
氮氣環境下，將2,2,2-三氯-1-[(2-甲基丙-2-基)氧基]乙烷-1-亞胺 (10.82 g, 49.52 mmol) 加入溶有化合物50-1 (3.37 g, 9.90 mmol) 的35 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在25 °C下攪拌1 小時。反應完畢後加入20 mL水淬滅，用二氯甲烷萃取 (50 mL× 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1 - 5/1) 分離純化得化合物50-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.04 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.91 - 6.74 (m, 1H), 4.90 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 10.8, 7.2 Hz, 1H), 2.70 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.52 (d, J = 2.0 Hz, 5H), 1.27 (s, 9H), 0.70 (d, J = 5.6 Hz, 3H).
化合物50-3的製備
氮氣環境下，於0°C將三氟甲磺酸酐 (4.409 g, 15.63 mmol) 加入溶有三乙胺 (3.163 g, 31.26 mmol) 和化合物50-2 (4.130 g, 10.42 mmol) 的40 mL二氯甲烷溶液中，反應液在0°C反應2小時。反應完畢後將反應液倒入100 mL水中，水相用二氯甲烷萃取 (50 mL × 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 5/1 - 2/1) 分離純化得化合物50-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.35 - 7.13 (m, 2H), 4.79 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.23 - 4.03 (m, 1H), 2.78 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.23 - 1.30 (m, 2H), 0.90 - 0.78 (m, 3H).
化合物50-4的製備
氮氣環境下，將乙烯基氟硼酸鉀 (2.23 g, 16.65 mmol)、碳酸銫 (5.426 g, 16.65 mmol) 和RuPhos Pd G3 (696 mg, 0.83 mmol) 依次加入到溶有化合物50-3 (4.4 g, 8.33 mmol) 的9 mL 水和45 mL甲苯溶液中，反應液升溫至85°C反應5 小時。反應完畢後反應液降至室溫，加入50 mL水稀釋，水相用乙酸乙酯萃取 (50 mL × 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 20/1 - 5/1) 分離純化得化合物50-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.15 - 6.98 (m, 2H), 6.56 (dd, J = 17.6, 11.6 Hz, 1H), 5.84 - 5.46 (m, 2H), 4.89 - 4.75 (m, 2H), 4.06 - 3.94 (m, 1H), 2.58 (s, 1H), 1.56 (s, 3H), 1.31 (s, 9H), 1.29 - 1.27 (m, 1H). 0.81 - 0.72 (m, 3H).
化合物50-5的製備
將臭氧通入溶有化合物50-4 (3.287 g, 8.09 mmol) 的50 mL二氯甲烷溶液中，待反應液變藍後，通入氮氣吹掃至溶液恢復黃色，加入三苯基磷 (3.18 g, 12.13 mmol)，反應液緩慢升溫至25 °C反應12 小時。反應完畢後反應液減壓旋乾得到粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 20/1 - 10/1) 分離純化得化合物50-5。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.52 (s, 1H), 7.47 - 7.38 (m, 1H), 7.27 (s, 2H), 4.88 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.76 - 4.63 (m, 1H), 2.87 (s, 1H), 1.68 (s, 3H), 1.32 (s, 9H), 0.78 - 0.69 (m, 3H).
化合物50-6的製備
氮氣環境下，於0 °C將硼氫化鈉 (92.64 mg, 2.45 mmol) 緩慢加入到溶有化合物50-5 (0.5 g, 1.22 mmol) 的6 mL四氫呋喃溶液，反應液升溫至25°C下攪拌1 小時。反應完畢後加入10 mL飽和氯化銨水溶液淬滅，水相用乙酸乙酯(10 mL × 3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1 - 5/1) 分離純化得化合物50-6。
化合物50-7的製備
氮氣環境下，於0°C將氫化鈉 (102 mg, 2.56 mmol, 60%含量) 緩慢加入溶有化合物50-6 (350 mg, 0.85 mmol) 的6 mL 四氫呋喃溶液中，攪拌10分鐘後加入(3-溴丙-1-炔基)三甲基甲矽烷 (244 mg, 1.28 mmol)，反應液升溫至25°C下攪拌6 小時。反應完畢後加入5 mL飽和氯化銨水溶液淬滅，用 0.5 M的鹽酸調至pH = 3-4，水相用二氯甲烷萃取 (10 mL × 3)，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 10/1 - 1/1) 分離純化得化合物50-7。
化合物50-8的製備
氮氣環境下，將N,N-二甲基甲醯胺 (2.3 μL, 0.03 mmol) 和草醯氯 (114.52 mg, 0.90 mmol) 依次加入到溶有化合物50-7 (118 mg, 0.30 mmol) 的4 mL二氯甲烷溶劑中，反應液在25°C 反應1 小時，得到含化合物50-8的溶液，直接用於下一步反應。
化合物50-9的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (416.2 μL, 2.99 mmol) 加入到上一步的反應液中(pH＞8)，隨後加入4-氨基吡啶-2-甲酸甲酯 (136.68 mg, 0.90 mmol)，反應液在25°C下攪拌1 小時。反應完畢後反應液減壓濃縮得到粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 5/1 - 1/2) 分離純化得化合物50-9。
實施例50的製備
氮氣環境下，將化合物50-9 (74 mg, 0.14 mmol) 加入到7.0 M氨甲醇溶液 (3 mL, 21 mmol) 中，反應液在25°C下反應12 小時。反應完畢後反應液減壓濃縮得粗產物，經反相製備 (column: Boston Green ODS 150*30mm*5um;mobile phase: [A: H2O(0.225% FA); B: ACN]; B%: 48.00%-78.00%, 11.00 min; flow rate:25.00mL/min) 純化得到實施例50。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.62 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 5.6, 2.0 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.51 - 7.37 (m, 1H), 7.35 - 7.23 (m, 1H), 5.16 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 4.40 - 4.30 (m, 1H), 4.24 (dd, J = 4.4, 2.4 Hz, 2H), 3.55 (s, 1H), 3.52 - 3.49 (m, 1H), 2.82 (s, 1H), 1.64 (s, 3H), 0.83 - 0.64 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 512.1.
實施例51
實施例51的製備
將化合物1-18 (200 mg, 0.44 mmol) 溶於DMF(2 mL), 加入碳酸鉀(180.50 mg, 1.31 mmol)和氯甲基甲硫醚(126.13 mg, 1.31 mmol)，碘化鉀 (72.27 mg, 0.44 mmol)，反應在25°C下反應 1小時。反應液加入20 mL水溶液中，二氯甲烷萃取，分液，有機相用飽和食鹽水洗，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾。粗品經反相製備純化((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 52% - 72% B over 10 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例51。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.71 (s, 1H), 8.49 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 5.48 - 5.38 (m, 1H), 5.37 - 5.31 (m, 1H), 5.12 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 7.6, 10.0 Hz, 1H), 2.83 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.62 (s, 3H), 0.73 (d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 520.1.
實施例52
實施例52的製備
將化合物52-1 (70 mg, 0.26 mmol)，化合物1-18 (120 mg, 0.26 mmol)，碳酸鉀(110 mg, 0.80 mmol)和碘化鈉(50 mg, 0.33 mmol)溶解在DMF(5 mL)中，室溫攪拌12小時。反應液倒入水(100 mL)中淬滅，然後乙酸乙酯(100 mL x 2)萃取。有機相再用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾。粗品經反向製備((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 45% - 75% B over 15 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例52。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.72 (s, 1H), 8.49 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.84 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.61 - 7.52 (m, 1H), 7.43 - 7.35 (m, 1H), 5.17 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.79 - 4.71 (m, 1H), 4.26 - 4.18 (m, 1H), 2.73 - 4.64 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 0.78 – 0.70 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 534.0.
實施例53、54
化合物53-1的製備
將乙炔基溴化鎂的四氫呋喃溶液 (1.9 mL, 0.96 mmol, 0.5 M)在 0°C下緩慢滴加入50-5 (300 mg, 0.73 mmol) 的THF (10 mL)溶液中，反應液由0°C自然升溫至25°C，攪拌2 小時。反應完成後，在0°C下向反應液緩慢滴加氯化銨水溶液(3 mL)淬滅反應，加入水(10 ml)稀釋，用乙酸乙酯萃取(10 ml × 3)反應, 有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾，粗品經矽膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯=5:1-3:1)純化得到化合物53-1.
化合物53-2的製備
將二乙胺基三氟化硫(0.1 mL, 607.73 μmol)在 -20°C下緩慢滴加入53-1 (220 mg, 506.45 μmol)的DCM (5 mL)溶液裡，反應液由0°C自然升溫至25°C，反應2 小時。將反應液緩慢滴加到飽和碳酸氫鈉中淬滅，用二氯甲烷(5 mL×3)萃取，有機相乾燥後濃縮，粗品經矽膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯=10:1~3:1)純化得到化合物53-2。
化合物53-3的製備
將化合物53-2 (195 mg, 0.45 mmol)溶入DCM (5  mL)中，加入三氟乙酸(1 mL)，25°C下反應1 小時。反應液直接濃縮，得到化合物53-3。
化合物53-4的製備
將化合物53-3(150 mg, 0.39 mmol)和DMF (3.1 μL, 0.04 mmol)溶解在DCM (5 mL)中，冰浴下慢慢加入草醯氯 (169.4 μL, 1.97 mmol)，反應液溫室攪拌3小時。反應液濃縮，得到化合物53-4。
化合物53-5的製備
將化合物53-4 (140 mg, 0.35 mmol)溶解在DCM (0.5 mL)中，冰浴下緩慢加入三乙胺 (0.2 mL, 1.76 mmol)和4-氨基吡啶-2-甲酸甲酯(53.42 mg, 0.35 mmol)，溫室攪拌3小時。反應液濃縮，粗品經矽膠柱層析(石油醚:乙酸乙酯=1:1)純化得到化合物53-5。
實施例53、54的製備
將化合物53-5(20 mg, 0.04 mmol)和氨甲醇(16.55 mg, 0.97 mmol)溶於MeOH (0.5 mL)中，反應液在25°C下攪拌3小時。反應液濃縮，粗品經反相製備((Phenomenex luna C18 150 ×2 5mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 49% – 69% B over 10 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid, mobile phase B: acetonitrile))純化得到兩個異構體。
實施例53 (保留時間較小)：
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.56 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 2.0, 5.2 Hz, 1H), 7.67 - 7.56 (m, 2H), 7.40 - 7.35 (m, 1H), 6.85 - 6.69 (m, 1H), 5.16 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.46 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 2.0, 5.0 Hz, 1H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 1.66 (s, 3H), 0.76 (d, J = 7.2 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 500.2.
實施例54 (保留時間較大)：
1H NMR: (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.58 (s, 1H), 8.48 (d, J = 5.2Hz, 1H), 8.27 (d, J =2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 2.2, 5.6 Hz, 1H), 7.65 - 7.56 (m, 2H), 7.40 (dd, J = 4.2, 8.8 Hz, 1H), 6.93 - 6.77 (m, 1H), 5.23 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.63 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 4.09 (dd, J = 2.2, 5.0 Hz, 1H), 2.67 - 2.61 (m, 1H), 1.67 (s, 3H), 0.69 (d, J = 6.4 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 500.2。
實施例55
化合物52-1的製備
在氮氣環境下，於-70°C將正丁基鋰正己烷 (33 mL, 82.50 mmol)溶液緩慢滴加到化合物55-1(13.3 mL, 71.28 mmol)的THF (80 mL)溶液中。攪拌1小時後，化合物55-2 (23 g, 109.62 mmol)緩慢滴加至反應體系中。恢復到20°C，繼續攪拌15小時。反應液倒入冰的氯化銨水溶液(100 mL)中，混合物用石油醚(200 mL ×2)萃取。有機相合併後，水洗一次，飽和食鹽水洗滌一次，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得粗品。粗品用50ml石油醚溶解，經矽膠粉(10釐米厚) 過濾，濾液濃縮乾得化合物52-1。
化合物55-3的製備
將化合物52-1 (10 g, 37.15 mmol)溶解在四氫呋喃 (10 mL)和水 (40 mL)中，加入銦粉(6 g, 52.26 mmol)後，超聲振動8小時，將甲醛水溶液 (16 g, 197.14 mmol)加入到反應液中，繼續攪拌32小時。反應液用乙酸乙酯(300 mL)稀釋，過濾，濾液靜置分層。分離出上層乙酸乙酯相，再用飽和食鹽水洗滌一次。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得租品，經矽膠柱層析純化得到化合物55-3。
化合物55-4的製備
將化合物55-3 (500 mg, 2.27 mmol)和吡啶 (0.5 mL, 6.18 mmol)溶解在DCM (10 mL)中，冰浴下緩慢加入三氟甲磺酸酸酐 (0.5 mL, 3.01 mmol)，溫室攪拌1小時。反應液加入乙酸乙酯(200 mL)稀釋，依次用水(100 mL ×2)、飽和食鹽水(100 mL)洗滌，有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得化合物55-4。
實施例55的製備
將化合物55-4 (130 mg, 0.37 mmol), 化合物1-18 (170 mg, 0.37 mmol)溶解在DMF (5 mL)，加入碳酸鉀 (180 mg, 1.30 mmol)，室溫攪拌12小時。反應液倒入水(100 mL)中，混合物用乙酸乙酯(100 mL x2)萃取。有機相經無水硫酸鈉乾燥，過濾，旋乾得粗品，經反向製備 ((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 42% - 72% B over 15 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例55。
m/z (ESI): [M + H]+= 548.1.
實施例56、57
化合物56-1的製備
氮氣環境下，將三乙胺 (1.1 mL, 7.87 mmol) 加入到24-3 (314 mg, 0.79 mmol) 的3mL二氯甲烷中，隨後加入溶有化合物22-5(198.83 mg, 1.02 mmol) 的3 mL DCM溶液，混合物在26度下攪拌2小時。反應完畢後加10 mL 水淬滅，用二氯甲烷(10 mL× 3) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗產物，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯 = 1/1)純化得化合物56-1。
實施例56、57的製備
氮氣環境下，將三氟乙酸 (800.8 μL, 10.78 mmol) 加入到溶有化合物56-1 (300 mg, 0.54 mmol) 的9 mL二氯甲烷溶液中，反應液在25 度反應2 小時。反應完畢後將反應液濃縮得到粗產物，經反相製備 (Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5um, water ( water( NH4HCO3)-ACN, 38% - 68% over 12 min) 純化得到實施例56和實施例57的混合物。經SFC拆分 (column: DAICEL CHIRALCEL OX (250mm*30mm,10um); mobile phase: [A: CO2;B: EtOH(0.1%NH3H2O)]; B%: 15.00%-15.00%,60.00min; flow rate:150.00g/min)得到兩個單一異構體。
實施例56 (保留時間=1.497分鐘)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.36 (s, 1H), 8.71 - 8.56 (m, 1H), 8.09 - 7.88 (m, 1H), 7.50 - 7.37 (m, 1H), 7.29 - 7.08 (m, 2H), 5.44 - 5.29 (m, 1H), 5.16 - 5.04 (m, 1H), 4.70 - 4.60 (m, 1H), 4.57 - 4.48 (m, 1H), 4.40 - 4.26 (m, 1H), 3.70 - 3.57 (m, 2H), 3.49 - 3.39 (m, 1H), 2.91 - 2.75 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.81 - 0.63 (m, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=517.3.
實施例57 (保留時間=1.655分鐘)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.37 (s, 1H), 8.72 - 8.59 (m, 1H), 7.97 (dd, J = 2.4, 8.6 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.29 - 7.10 (m, 2H), 5.34 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 4.64 (br t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.59 - 4.47 (m, 1H), 4.31 (dd, J = 7.5, 10.3 Hz, 1H), 3.71 - 3.57 (m, 2H), 3.44 (td, J = 5.9, 11.4 Hz, 1H), 2.83 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 1.61 (s, 3H), 0.74 (d, J = 6.0 Hz, 3H)；
m/z: [M+ H]+= 517.1.
實施例58、59
化合物58-1的製備
向化合物50-1(500 mg, 1.47 mmol)的DCM(5 mL)溶液中加入DMF(10 mg, 0.15 mmol)和草醯氯(0.4 mL, 4.41 mmol)。混合物於25°C攪拌1小時。混合物濃縮，氮氣環境下，將三乙胺 (0.6 mL, 4.35 mmol) 和上述濃縮物依次加入至化合物56-5 (337.89 mg, 1.74 mmol) 的10 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在26度攪拌16 小時。反應完畢後加入30 mL 水稀釋，用乙酸乙酯(30 mL ×2) 萃取，合併後有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1 ~1/1) 純化得到化合物58-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.56 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.13 (dd, J = 2.4, 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.09 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 6.83 - 6.72 (m, 1H), 6.31 (s, 1H), 5.18 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 5.14 - 5.03 (m, 1H), 4.44 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.91 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.92 - 2.79 (m, 1H), 1.70 (s, 3H), 1.51 (d, J = 14.4 Hz, 6H), 0.87 - 0.78 (m, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+=517.2.
化合物58-2的製備
氮氣環境下，於0℃將三氟甲磺酸酐 (83.5 μL, 0.50 mmol) 加入到溶有化合物58-1 (280 mg, 0.61 mmol) 的4 mL二氯甲烷溶液中，反應液在零度攪拌2 小時。反應完畢後加入20 mL水淬滅，用二氯甲烷(30 mL ×2)萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1 ~2/1) 純化得到化合物58-2。
化合物58-3的製備
氮氣環境下，將乙炔基[三(丙-2-基)]甲矽烷 (0.2 mL, 0.77 mmol)、碘化亞銅 (3.0 mg, 0.02 mmol)、三乙胺 (23.4 mg, 0.23 mmol) 和1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(8.46 mg, 0.01 mmol) 依次加入到溶有化合物58-2 (50 mg, 0.08 mmol) 的1.5 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液升溫至100 度攪拌16 小時。反應完畢後降至室溫，加20 mL 水和20 mL 乙酸乙酯稀釋，過濾，濾液用乙酸乙酯 (10 mL×2) 萃取，合併後的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾、濾液減壓濃縮得粗品，經薄層矽膠製備 (石油醚/乙酸乙酯=3/1) 純化得到化合物58-3。
化合物58-4的製備
氮氣環境下，將三氟乙酸 (262 μL, 3.53 mmol) 加入到溶有化合物58-3 (120 mg, 0.18 mmol) 的2 mL 二氯甲烷溶液中，反應液在25度攪拌0.5小時。反應完畢後將飽和碳酸氫鈉緩慢滴加到反應液中調節pH=7，水相用二氯甲烷 (20 mL ×2)萃取，合併後有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得到化合物58-4。
實施例58、59的製備
氮氣環境下，將氟化銫 (284 mg, 1.87 mmol) 加入到溶有化合物58-4 (120 mg, 0.19 mmol) 的2 mL N,N-二甲基甲醯胺溶液中，反應液在25度下攪拌0.5小時。反應完畢後將反應液過濾，濾液經反相製備 (0.1% FA/ACN, 55%-65% over 5 min) 純化得到實施例58和實施例59的混合物。經SFC拆分 (column: DAICEL CHIRALCEL OX (250 mm*30 mm,10 um); mobile phase: [A: CO2;B: EtOH(0.1%NH3H2O)]; B%: 20.00%-20.00%, 4.00min; flow rate:150.00g/min) 得到兩個單一異構體:
實施例58 (保留時間=1.587分鐘)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.39 (s, 1H), 8.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 2.4, 8.6 Hz, 1H), 7.61 - 7.50 (m, 1H), 7.42 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 4.4, 8.4 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.18 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.64 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.53 (td, J = 4.0, 6.8 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 7.8, 10.0 Hz, 1H), 3.68 - 3.58 (m, 1H), 3.43 (td, J = 6.0, 11.6 Hz, 1H), 2.97 - 2.84 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 0.73 (br d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z (ESI): [M+ H]+= 485.2.
實施例59 (保留時間=1.726分鐘)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.45 (s, 1H), 8.70 - 8.65 (m, 1H), 8.02 - 7.95 (m, 1H), 7.61 - 7.49 (m, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 4.4, 8.4 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.20 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.65 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.58 - 4.49 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 7.8, 9.8 Hz, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 1H), 3.48 - 3.41 (m, 1H), 2.96 - 2.82 (m, 1H), 1.60 (s, 3H), 0.73 (br d, J = 6.0 Hz, 3H);
m/z: [M+ H]+= 485.1.
實施例60
化合物60-2的製備
氮氣環境下，將化合物60-1 (0.64 g, 5.60 mmol) 的乙腈溶液滴加入溶有碘化亞銅 (0.1 g, 0.51 mmol)、乙炔基三甲基甲矽烷 (0.7 mL, 5.09 mmol)的乙腈(5 mL)溶液中，反應液在25度反應16小時。反應結束後反應液過濾，濾液減壓濃縮得粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1)得到化合物 60-2。
化合物60-3的製備
氮氣環境下，於0℃將氘代氫化鋰鋁 (0.13g, 3.04 mmol) 緩慢分批加入到溶有化合物60-2 (0.7 g, 3.80 mmol) 的20 mL THF 溶液中，反應液在零度反應1小時。反應完畢後在零度緩慢滴加1.5 mL氘水淬滅，攪拌10分鐘後升溫至26度，加入無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得到粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1) 純化得到化合物60-3。
化合物60-4的製備
氮氣環境下，將氰亞甲基三丁基膦 (210.17 mg, 0.87 mmol) 加入到溶有化合物1-18 (80 mg, 0.17 mmol) 和化合物60-3 (170.mg, 1.39 mmol)的2 mL 二氧六環溶液中，反應液升溫至40度攪拌16小時。反應完畢後反應液降至室溫，加入10mL水稀釋，用乙酸乙酯 (5 mL×3) 萃取三次，合併後的有機相用10 mL飽和氯化鈉溶液洗滌、無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液減壓濃縮得到粗品，經矽膠柱層析 (石油醚/乙酸乙酯=10/1~1/1)純化得到化合物60-4。
實施例60的製備
氮氣環境下，將四丁基氟化銨四氫呋喃溶液 (0.17 mL, 0.17 mmol) 加入到溶有化合物60-4 (50 mg, 0.09 mmol) 的1 mL THF 溶液中，反應液在25度反應1小時。反應完畢後加入10 mL水淬滅，用乙酸乙酯(5 mL×3) 萃取，合併後的的有機相經無水硫酸鈉乾燥、過濾，濾液濃縮得到粗品，經反相製備((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 42% - 72% B over 10 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例60。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.81 - 10.60 (m, 1H), 8.55 - 8.46 (m, 1H), 8.33 - 8.26 (m, 1H), 8.11 - 8.01 (m, 1H), 7.90 - 7.80 (m, 1H), 7.69 - 7.58 (m, 1H), 7.27 - 7.07 (m, 2H), 5.19 - 5.05 (m, 1H), 4.44 - 4.26 (m, 1H), 2.92 - 2.79 (m, 2H), 2.70 - 2.60 (m, 2H), 1.72 - 1.57 (m, 3H), 0.79 - 0.64 (m, 3H);
m/z (ESI): [M + H]+= 514.0。
實施例61
化合物61-1的製備
向化合物50-5 (500 mg, 1.22 mmol) 的四氫呋喃(5 mL)溶液中加碘單質(396.70 mg, 2.45 mmol)和氨水(2.5 mL, 30%含量)，反應液在30℃攪拌10小時。反應液用30 mL 水淬滅，乙酸乙酯萃取(30 mL × 2)，合併的有機相依次用飽和亞硫酸鈉水溶液(30 mL × 2)、飽和氯化鈉水溶液(30 mL × 1) 洗滌，有機相無水硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮，得到的粗品經過矽膠層析柱(石油醚:乙酸乙酯=10:1)純化得到化合物 61-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.45 (q, J = 9.0 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 4.3, 8.8 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.15 - 4.12 (m, 1H), 2.94 - 2.89 (m, 1H), 1.66 (s, 3H), 1.39 (s, 9H), 0.88 - 0.79 (m, 3H).
化合物61-2的製備
向化合物61-1 (300 mg, 0.74 mmol)的DCM (10 mL)溶液中加入三氟乙酸 (2.00 mL)，20℃下攪拌5小時。反應完成後，反應液直接減壓濃縮，得到化合物61-2。
m/z (ESI): [M-H]-= 348.0.
化合物61-3的製備
將化合物61-2 (260 mg, 0.74 mmol)和4-氨基吡啶-2-甲酸甲酯 (169.90 mg, 1.12 mmol)溶於乙腈 (5 mL)，加入N,N,N',N'-四甲基氯甲脒六氟磷酸鹽 (313.31 mg, 1.12 mmol)，20℃下反應16小時。向反應液中加入30 mL 水，用乙酸乙酯(30 mL × 3)萃取，合併的有機相用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥、過濾、濃縮，得到的粗品經過矽膠層析柱(石油醚/乙酸乙酯=3/7)純化得到化合物61-3。
m/z (ESI): [M + H]+= 484.2。
實施例61的製備
將化合物61-3 (100 mg, 0.21 mmol)加入到氨甲醇溶液 (2 mL, 6 M)中，20℃下反應16小時。反應完成後，反應液直接減壓濃縮，得到的粗品經反相製備((Phenomenex luna C18 150×25mm × 10um); flow rate: 25 mL/min; gradient: 42% - 62% B over 10 min; mobile phase A: 0.225%  aqueous methanoic acid , mobile phase B: acetonitrile)純化得到實施例61。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.68 (s, 1H), 8.50 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.95 - 7.87 (m, 1H), 7.85 (dd, J = 2.0, 5.6 Hz, 1H), 7.62 (br s, 1H), 7.49 (dd, J = 4.4, 8.8 Hz, 1H), 5.26 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 2.91 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 1.62 (s, 3H), 0.79 (d, J = 6.4 Hz, 3H)；
m/z (ESI): [M + H]+= 469.0。
實驗例1  手動膜片鉗法檢測本申請化合物對電壓閘控鈉通道NaV1.8的抑制活性
細胞培養和傳代：穩定表達人源NaV1.8的CHO細胞在含有10%胎牛血清和10微克/毫升Blasticidin、200微克/毫升 Hygromycin B以及100微克/毫升 Zeocin的Ham’s F-12培養基中培養。細胞培養溫度為37°C，二氧化碳濃度為5%。細胞傳代過程中，去除舊培養基並用PBS洗滌一次，然後加入0.25%-Trypsin-EDTA溶液，37°C孵育。觀察細胞從皿底脫落時，加入適量的37°C預熱的完全培養基。將細胞從皿底吹散後，轉移到無菌離心管中，1000 rpm離心5 min收集細胞，再將細胞接種於6 cm細胞培養皿(2.5×105個細胞/培養皿，5 mL培養基)，用於擴增或維持培養。為維持細胞的電生理活性，細胞密度不能低於80%。
膜片鉗檢測前，穩定表達人源NaV1.8的CHO細胞中加入0.25%-Trypsin-EDTA溶液分離細胞並計數，將6.5×103個細胞貼壁至蓋玻片上，在24孔板中培養(最終體積為500 μL)，18小時後進行檢測。
製備化合物樣品：將受試化合物用二甲基亞碸(DMSO)配置成100 mM的儲液，然後用含有100 nM河豚毒素(TTX)的細胞外液(140 mM NaCl，3.5 mM KCl，1 mM MgCl2•6H2O，2 mM CaCl2•2H2O，10 mM D-Glucose，10 mM HEPES，1.25 mM NaH2PO4•2H2O，NaOH調節pH=7.4)稀釋至不同濃度的工作液。DMSO在每個工作液中，濃度為0.1%。受試物工作液檢測前，超聲處理20 min。
膜片鉗檢測：膜片鉗操作時首先用微電極拉制儀將毛細玻璃管拉制成記錄電極，再將充灌細胞內液(50 mM CsCl，10 mM NaCl，10 mM HEPES，60 mM CsF，20 mM EGTA，CsOH調節pH=7.2)的電極裝入微電極夾持器，在倒置顯微鏡下操縱微電極操縱儀將記錄電極接觸到細胞上，給予負壓抽吸形成GΩ封接。此時執行快電容補償，然後繼續給予負壓，吸破細胞膜，形成全細胞記錄模式。最後進行慢電容補償並記錄相關參數。不給予漏電補償。
當全細胞記錄的鈉電流穩定後開始給藥，每個藥物濃度作用至5 min(或者電流至穩定)後檢測下一個濃度。將鋪有細胞的蓋玻片置於倒置顯微鏡下的記錄浴槽中，空白對照外液以及受試化合物工作液利用重力灌流的方法從低濃度到高濃度依次流經記錄浴槽從而作用於細胞，在記錄中利用蠕動泵進行液體交換。每一個細胞在不含化合物的外液中檢測到的電流作為自己的對照組。每個濃度獨立重複檢測 2次。所有電生理試驗在室溫下進行。具體而言，每個受試化合物設置2個濃度(初步篩選)或者5個濃度(計算IC50值)。通過計算受試化合物處理細胞後所產生的峰值電流與對照組細胞所產生的峰值電流的相對百分比來確定受試化合物對NaV1.8鈉通道的抑制活性。
全細胞膜片鉗記錄NaV1.8鈉電流的電壓刺激方案：當形成全細胞封接後，細胞電壓鉗制於-120 mV。首先將電壓從-130 mV 以10 mV 階躍至-10 mV，維持5 s，然後給予0 mV去極化脈衝以獲得半失活電壓(Vhalf)。鈉電流的靜息狀態(Resting state)和半失活狀態(Half-inactivated state)採用雙脈衝模式來檢測。首先給予第一個去極化脈衝(TP1)至 0 mV 持續50 ms，用於檢測靜息狀態的鈉電流。然後調整電壓為Vhalf，維持5 s，接著將電壓恢復至-120 mV，維持20 ms，再給予第二個去極化脈衝(TP2)至0 mV持續50 ms，用於檢測半失活的鈉電流。最後恢復至鉗制電壓-120 mV。每隔20 ms 重複採集資料，觀察藥物對兩種不同狀態鈉電流峰值的作用。
實施例化合物對NaV1.8通道的抑制活性通過上述試驗進行測定，測得的1 nM濃度下的抑制率及IC50見表1及表2。
表1、實施例化合物對NaV1.8通道抑制活性(抑制率)
實施例 1nM濃度抑制率/%
靜息狀態 半失活狀態
1 97.03 97.53
2 97.41 96.79
3 63.16 62.49
5 99.25 99.92
15 91.57 89.51
16 89.55 89.07
17 91.12 92.09
18 98.24 97.76
19 94.69 94.96
20 96.75 95.88
24 92.26 93.60
25 84.00 88.38
29 96.35 97.29
30 92.95 93.06
31 88.10 87.43
32 99.25 99.92
39 96.35 97.29
40 88.04 85.84
41 91.61 89.62
44 87.91 85.75
45 87.44 90.25
46 86.07 81.93
48 96.31 96.63
51 88.34 90.09
55 85.07 81.21
表2、實施例化合物對NaV1.8通道抑制活性(IC50)
實施例 IC50/nM
靜息狀態 半失活狀態
1 0.022 0.027
12 0.019 0.029
24 0.033 0.048
61 0.78 0.89
實驗結果顯示本申請實施例化合物對NaV1.8均有良好的抑制作用。
實驗例2：對大鼠通過單次靜脈注射或灌胃口服給藥進行體內藥代動力學研究。
實驗方法：取200～300 g雄性SD大鼠6隻，分為兩組，一組5 mg/kg口服單次給藥，一組1mg/kg尾靜脈單次給藥。口服給藥的動物禁食過夜，並在給藥4小時後恢復進食，靜脈注射給藥的動物自由飲食。分別於給藥後0.083、0.25、 0.5、 1、2、4、6、 8和 24 h采血，血漿樣本經前處理後，以LC/MS/MS在MRM模式下檢測，並建立合適的標準曲線對血漿樣品中目標化合物進行定量，以獲得藥物濃度-時間曲線。採用WinNonlin軟體的非房室膜型計算藥動學參數，實驗結果如下表所示：
表3、 本申請實施例化合物大鼠藥代動力學參數
大鼠PK參數 實施例3 實施例12 實施例24 實施例61
靜脈注射 給藥劑量(mg/kg) 1 1 1 1
清除率CL (mL/min/kg) 5.19 8.9 24.1 3.97
表觀分佈容積Vss (L/kg) 1.13 1.26 1.06 1.53
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 3032 1858 707 4494
半衰期T1/2(h) 3.51 2.17 0.771 5.32
口服 給藥劑量(mg/kg) 5 5 30 5
最大血藥濃度Cmax (ng/mL) 696 718 5023 1181
達峰時間Tmax(h) 4.67 6 7.33 6.67
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 8920 9600 69366 17898
半衰期T1/2(h) 4.46 2.81 2.4 6.24
口服生物利用度F(%) 56 98 - 83
實驗結果顯示本申請實施例化合物在大鼠體內血藥濃度高，暴露量高，清除率低，具有明顯的藥代動力學優勢。
實驗例3：對小鼠通過單次靜脈注射或灌胃口服給藥進行體內藥代動力學研究。
實驗方法：取20～30 g雄性C57BL/6小鼠6隻，分為兩組，一組5 mg/kg尾靜脈單次給藥，一組1 mg/kg口服單次給藥。兩組動物自由飲食。分別於給藥後0.083、0.25、 0.5、 1、2、4、6、 8和 24 h采血，血漿樣本經前處理後，以LC/MS/MS在MRM模式下檢測，並建立合適的標準曲線對血漿樣品中目標化合物進行定量，以獲得藥物濃度-時間曲線。採用WinNonlin軟體的非房室模型計算藥動學參數，實驗結果如下表所示：
表4、 本申請實施例化合物小鼠藥代動力學參數
小鼠PK參數 實施例3 實施例12 實施例24 實施例61
靜脈注射 給藥劑量(mg/kg) 1 1 1 1
清除率CL (mL/min/kg) 3.35 14.8 18.7 5.84
表觀分佈容積Vss (L/kg) 0.892 1.22 1.07 1.75
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 4998 1129 904 2807
半衰期T1/2(h) 2.33 1.22 0.89 4.62
口服 給藥劑量(mg/kg) 30 30 30 30
最大血藥濃度Cmax (ng/mL) 5145 5590 9563 5520
達峰時間Tmax(h) 1.25 2 2 1.67
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 76666 71639 84854 53267
半衰期T1/2(h) 10.2 2.17 3.1 4.26
實驗結果顯示本申請實施例化合物在小鼠體內血藥濃度高，暴露量高，具有藥代動力學優勢。
實驗例4：對犬通過單次靜脈注射或灌胃口服給藥進行體內藥代動力學研究。
實驗方法：取9～11 kg雄性比格犬6隻，分為兩組，一組0.5 mg/kg尾靜脈單次給藥，一組1 mg/kg口服單次給藥。靜脈注射給藥組的動物自由飲食，口服給藥組的動物禁食過夜，並在給藥4小時後恢復進食。靜脈注射給藥組於給藥後0.083、0.25、 0.5、 1、2、4、8、24和48 h采血，口服給藥組於給藥後0.25、 0.5、 1、2、4、8、24、32和48 h采血，血漿樣本經前處理後，以LC/MS/MS在MRM模式下檢測，並建立合適的標準曲線對血漿樣品中目標化合物進行定量，以獲得藥物濃度-時間曲線。採用WinNonlin軟體的非房室模型計算藥動學參數，實驗結果如下表所示：
表5、 本申請實施例化合物犬藥代動力學參數
犬PK參數 實施例3 實施例12 實施例24
靜脈注射 給藥劑量(mg/kg) 0.5 0.5 0.5
清除率CL (mL/min/kg) 0.202 1.96 1.61
表觀分佈容積Vss (L/kg) 0.835 0.866 0.587
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 21416 4612 5171
半衰期T1/2(h) 48.3 6.37 4.34
口服 給藥劑量(mg/kg) 1 1 1
最大血藥濃度Cmax (ng/mL) 1126 490 721
達峰時間Tmax(h) 2 2 2
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 42706 8650 9695
半衰期T1/2(h) 101 8.5 4.7
口服生物利用度F(%) ＞100 95.4 92.0
實驗結果顯示本申請實施例化合物在犬體內清除率低，暴露量高，口服生物利用度高，具有藥代動力學優勢。
實驗例5：對猴通過單次靜脈注射或灌胃口服給藥進行體內藥代動力學研究。
取3.0~3.3kg雄性食蟹猴6隻，分為兩組，一組1 mg/kg靜脈單次給藥，一組2 mg/kg口服單次給藥。靜脈注射給藥組的動物自由飲食，口服給藥組的動物禁食過夜，並在給藥4小時後恢復進食。靜脈注射給藥組於給藥後0.083、0.25、 0.5、 1、2、4、8、24和48 h采血，口服給藥組於給藥後0.25、 0.5、 1、2、4、8、24、32和48 h采血，血漿樣本經前處理後，以LC/MS/MS在MRM模式下檢測，並建立合適的標準曲線對血漿樣品中目標化合物進行定量，以獲得藥物濃度-時間曲線。採用WinNonlin軟體的非房室模型計算藥動學參數，實驗結果如下表所示：
表6、 本申請實施例化合物猴藥代動力學參數
猴PK參數 實施例24 實施例61
靜脈注射 給藥劑量(mg/kg) 1 1
清除率CL (mL/min/kg) 8.88 5.45
表觀分佈容積Vss (L/kg) 1.50 1.74
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 1876 3128
半衰期T1/2(h) 2.98 6.10
口服 給藥劑量(mg/kg) 2 2
最大血藥濃度Cmax (ng/mL) 279 307
達峰時間Tmax(h) 3.33 4.00
暴露量AUC0-last (h*ng/mL) 2364 3717
半衰期T1/2(h) 3.57 5.21
口服生物利用度F(%) 63.6 59.4
實驗結果顯示本申請實施例化合物在犬體內清除率低，暴露量高，口服生物利用度高，具有藥代動力學優勢
實驗例6：本申請化合物溶解度。
實驗方法：取15 μL的10 mM濃度DMSO儲備液，加入分別含有485 μL 磷酸鹽緩衝液(PBS pH 7.4)、模擬禁食後腸液(FaSSIF pH 6.5)、模擬進食後腸液(FeSSIF pH 5.0)和模擬禁食後胃液(FaSSGF pH 1.6)的96孔板中(n=2)，終濃度即為300 μM(含3%DMSO)。每孔加入攪拌棒後，密封，於恒溫振盪器中25°C 1100 rpm振盪2 h。振盪結束後，將樣品在過濾板中，使用真空抽濾器過濾。取過濾液5 μL濾液，加入5 μL DMSO，然後加入適量含有內標的超純水和乙腈混合(1:1)溶液稀釋相應倍數，混勻後待LC-MS/MS進樣分析。取300 μM DMSO標準品溶液5 μL，加入5 μL不同緩衝液，然後加入適量含有內標的超純水和乙腈混合(1:1)溶液稀釋相應倍數後，混勻，與樣品一同進行LC-MS/MS分析，實驗結果如下表所示。
待測樣品和標準對照物的溶解度值按照以下公式計算：
表7、本申請化合物的溶解度
實施例 不同體系動力學溶解度(μM)
FaSSIF FeSSIF FaSSGF
實施例3 33.4 293 32
實施例12 49.22 300 10.54
實施例24 284 315 106
實施例61 19.89 72.33 48.32
實驗結果顯示本申請實施例化合物在FaSSIF、FESSIF和FaSSGF溶液中具有良好的溶解度。
實驗例7：本申請化合物CYP抑制。
實驗方法：CYP450同工酶的特異性探針底物與人肝微粒體以及不同濃度的化合物共同孵育，加入還原型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)啟動反應，反應結束後，處理樣品並採用液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)法定量檢測探針底物產生的代謝物的濃度，從而計算出IC50值，實驗結果如下表所示：
表8、本申請實施例化合物對人肝微粒體細胞色素P450的活性影響
實施例 抑制活性IC50/μM
CYP1A2 CYP2B6 CYP2C8 CYP2C9 CYP2C19 CYP2D6 CYP3A-M CYP3A-T
實施例3 ＞30 28.4 9.2 12.7 6.25 12.6 ＞30 24.9
實施例24 ＞30 ＞30 21.3 28.5 27 ＞30 24.7 16.4
實施例61 ＞30 ＞30 11.6 7.3 15.8 ＞30 ＞30 20.0
實驗結果顯示本申請實施例化合物對細胞色素P450同工酶抑制較弱，藥物-藥物相互作用風險較低。
實驗例8：本申請化合物肝微粒體代謝穩定性。
實驗方法：在100 mM pH 7.4的磷酸緩衝鹽體系中，分別將適量體積的人、猴、犬、大鼠或小鼠肝微粒體(蛋白終濃度0.5 mg/mL)和還原型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH，終濃度1 mM)混合，在37℃振盪混勻預孵育10 min後，加入適量體積的目標化合物(終濃度為1 μM)啟動反應，其中有機溶劑不超過1%，分別於反應0.5、5、15、30和60 min後取相同體積的孵育液，加入適量含內標的冰乙腈溶液終止反應。樣品於3220 g離心40 min後，取上清液加超純水稀釋，採用LC/MS/MS進行定量分析。以0.5 min目標化合物與內標峰面積比作為100%，計算其餘時間點目標化合物相對剩餘百分比。將各時間點的目標化合物剩餘百分比的自然對數與孵育時間進行線性回歸分析，求得斜率(k)，通過公式t1/2＝-0.693/k計算半衰期。實驗結果如下表所示：
表9、本申請實施例化合物肝微粒體代謝穩定性
實施例 各種屬代謝半衰期T1/2(分鐘)
人 猴 犬 大鼠 小鼠
實施例3 ＞184 29 ＞184 73.4 58.9
實施例24 111 47.5 113 90 102
實施例61 176 26.8 ＞184 ＞184 ＞184
實驗結果顯示本申請實施例化合物在各種屬肝微粒體中較穩定。
實驗例9：本申請化合物肝細胞代謝穩定性。
實驗方法：將人、猴、犬、大鼠或小鼠肝細胞(細胞密度為0.5×106cells/mL)和目標化合物(終濃度為1 μM)混合，在37℃培養箱振盪孵育120 min，其中有機溶劑不超過1%，分別於反應0.5、15、30、60、90和120 min後取相同體積的孵育液，加入適量含內標的冰乙腈溶液終止反應。樣品於3220 g離心45 min後，取上清液加超純水稀釋，採用LC/MS/MS進行定量分析。以0.5 min目標化合物與內標峰面積比作為100%，計算其餘時間點目標化合物相對剩餘百分比。將各時間點的目標化合物剩餘百分比的自然對數與孵育時間進行線性回歸分析，求得斜率(k)，通過公式t1/2＝-0.693/k計算半衰期。實驗結果如下表所示：
表10、本申請實施例化合物肝細胞代謝穩定性
實施例 各種屬代謝半衰期T1/2(分鐘)
人 猴 犬 大鼠 小鼠
實施例3 107 96 ∞ 97 57
實施例24 463 121 286 72 77
實施例61 ∞ 91 ＞573 56 53
實驗結果顯示本申請實施例化合物在各種屬肝細胞中較穩定。
實驗例10：本申請化合物血漿蛋白結合率。
實驗方法：取10 mM的DMSO儲備液，以DMSO稀釋成1 mM的工作液。取3 μL受試物的工作液，加入597 μL預孵育過的血漿中，充分混合。受試物在血漿的終濃度為5 μM。孵育體系最終的有機溶劑含量為0.5%。混勻後立即轉移50 μL孵育體系轉移至新的96孔板中，作為0點樣品，其處理方式同孵育後的樣品。
將平衡透析板和透析膜組裝完成後，在透析膜兩側的空中分別加入120 μL的受試物血漿樣品和pH 7.4磷酸緩衝液，用膜封好，在渦旋振盪器上於孵箱中37℃、5% CO2條件下以300 rpm孵育6 h。孵育結束後，移除膜，分別從兩室吸取50 μL樣品轉移至新的96孔板中。剩餘孵育體系也在同等條件下孵育相應的時間，用於受試物的穩定性檢測。孵育結束後，轉移50 μL孵育體系進行處理，其處理方式同透析孵育血漿樣品一樣處理。
向已取出的緩衝液樣品中加入50 μL空白血漿，同樣向已取出的血漿樣品中加入等體積的空白緩衝液，渦旋2分鐘混勻加入400 μL淬滅劑(含0.5 μM甲苯磺丁脲的乙腈)沉澱蛋白。所有樣品渦旋10分鐘，之後於3000 g，4℃離心30分鐘。取100 μL上清液轉移至新的96孔板中於3000 g，4℃再次離心30分鐘。轉移150 μL上清液轉移至新的96孔板中，加入等體積純水混勻，用於LC-MS/MS分析。
所有的資料均通過Microsoft Excel進行計算。通過提取的離子色譜圖測定峰面積。游離百分數和結合百分數通過受試物與內標峰面積比計算，計算公式如下：
結合百分數(%)= 100 – 游離百分數，實驗結果如下表所示：
表11、本申請化合物的血漿蛋白結合率
實施例 人血漿蛋白結合率/%
實施例24 97.38
實施例61 96.93
實驗例11：實施例3、12和24藥效試驗1、 實驗目的選用雄性SD大鼠和雄性C57 BL/6J小鼠建立足底切口痛模型，通過測定動物的機械痛閾值變化，評價本公開化合物的鎮痛效果。2、 實驗藥品實施例3、實施例12和實施例24。依次加入5%DMSO, 10%solutol, 85%saline，渦旋混勻至澄清。3、實驗材料和實驗方法3.1 實驗動物種屬、品系、周齡、性別SD大鼠，6-8周齡，雄性；C57 BL/6J小鼠，6-8周齡，雄性。3.2 實驗動物分組SD大鼠適應性飼養後，分組如下：
組別 隻數 給藥劑量 (mg/kg) 給藥體積 (mL/kg) 給藥濃度 (mg/mL) 給藥頻率 給藥方式
溶媒對照 8 / 5 / 單次 灌胃
實施例3 8 30 5 6 單次 灌胃
實施例12 8 15 5 3 單次 灌胃
實施例12 8 30 5 6 單次 灌胃
實施例24 8 30 5 6 單次 灌胃
C57 BL/6J小鼠適應性飼養後，分組如下：
組別 隻數 給藥劑量 (mg/kg) 給藥體積 (mL/kg) 給藥濃度 (mg/mL) 給藥頻率 給藥方式
溶媒對照 8 / 10 / 單次 灌胃
實施例3 8 60 10 6 單次 灌胃
實施例12 8 60 10 6 單次 灌胃
實施例24 8 30 10 3 單次 灌胃
實施例24 8 15 10 1.5 單次 灌胃
3.3 實驗方法
足底切口痛造模：實驗動物麻醉，俯臥位固定在手術臺上。側後肢腳掌朝上展平，手術膠帶固定，消毒。在足底腳後跟處用消毒刀片向腳趾端劃開皮膚筋膜，作一縱向切口。用彎鑷的一端插入趾短屈肌的外側邊緣下方並將鑷子推入肌肉的內側，以抬起趾短屈肌。用刀片對肌肉進行一個縱向切口，確保將肌肉腹部切成兩半將皮膚。使用7-0縫合線進行縫合，消毒。動物放回原處，手術恢復過夜。口服灌胃給藥，動物給藥3小時後，進行機械痛測定。
機械痛測定(Ascending法)：將實驗動物放置在機械痛金屬網架上靜置30 min-60 min，待動物不再張望、探究、較安靜後開始測試。實驗動物安靜後用Von-Frey纖維絲緩慢輕柔的刺激待測後肢足底使纖維絲彎曲，持續2-3 s觀察動物縮足反應。按照纖維絲克數從小到大的順序逐一刺激受試動物，每一個克數的纖維絲連續刺激5次，每次刺激間隔至少10 s。若出現的陽性反應小於3次，則使用較大一級的纖維絲重複上述操作，當測試第一次出現3次或3次以上的陽性反應，則該纖維絲為該動物的疼痛閾值(每隻動物測試2次，取其平均值)。實驗動物若由於刺激而出現抬足、躲避或舔足動作反應，則標記為陽性(×)，由於身體活動而引起的縮足反應則不算在內；若沒有上述表現，則標記為陰性(○)。
纖維絲克數：大鼠0.6, 1.0, 1.4, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0, 15.0 (g)，切斷值為15.0 g；小鼠0.16、0.40、0.60、1.00、1.40、2.00 (g)，切斷值為2.00 g。
3.4 資料分析
資料匯總統計後，使用SPSS資料統計軟體(版本R26.0.0.0)進行平均值及標準誤分析，並根據SPSS統計結果，使用Graph Pad(版本8.0.2)軟體繪製圖像，採用one-way ANOVA和t-test對資料進行檢驗。
閾值升高百分比(%)= [(Gt-G0)/G0] × 100 (%)，其中Gt為給藥組動物足底疼痛閾值，G0為溶媒組動物足底疼痛閾值。
4、結果
實施例3、實施例12和實施例24在大鼠足底切口痛模型中的鎮痛藥效如表12所示。實施例3、實施例12和實施例24在小鼠足底切口痛模型中的鎮痛藥效如表13所示。
表12 本公開化合物在大鼠足底切口痛模型中的鎮痛藥效
組別 給藥劑量 (mg/kg) 疼痛閾值 (g) 閾值升高百分比(%) p(vs 溶媒對照) 給藥方式 隻數
溶媒對照 / 3.6±0.3 / / 灌胃 8
實施例3 30 7.1±0.2 97.2 ＜0.0001 灌胃 8
實施例12 15 7.0±0.3 94.4 ＜0.0001 灌胃 8
實施例12 30 7.5±0.2 108.3 ＜0.0001 灌胃 8
實施例24 30 8.1±0.3 125.0 ＜0.0001 灌胃 8
表13 本公開化合物在小鼠足底切口痛模型中的鎮痛藥效
組別 給藥劑量 (mg/kg) 疼痛閾值 (g) 閾值升高百分比(%) p(vs 溶媒對照) 給藥方式 隻數
溶媒對照 / 0.36±0.02 / / 灌胃 8
實施例3 60 0.70±0.05 94.4 0.0031 灌胃 8
實施例12 60 0.78±0.06 116.7 0.0002 灌胃 8
實施例24 30 0.74±0.08 105.6 0.0009 灌胃 8
實施例24 15 0.54±0.04 50.0 0.2468 灌胃 8
5、結論
大鼠術前基線疼痛閾值為：術後，給藥3小時後，實施例3化合物在30mg/kg的疼痛閾值為7.1±0.2 g，相比溶媒對照組的疼痛閾值明顯升高97.2% (p＜0.0001)；實施例12化合物在15和30mg/kg的疼痛閾值分別為7.0±0.3 g、7.5±0.2 g，相比溶媒對照組的疼痛閾值分別明顯升高94.4% (p＜0.0001)、108.3% (p＜0.0001)。實施例12化合物在30mg/kg的疼痛閾值略高於15mg/kg的疼痛閾值，鎮痛效果趨近於飽和；實施例24化合物在30mg/kg的疼痛閾值為8.1±0.3 g，相比溶媒對照組的疼痛閾值明顯升高125% (p＜0.0001)，鎮痛效果明顯高於實施例3化合物在30mg/kg的疼痛閾值(p＜0.05)。
小鼠術前基線疼痛閾值為：術後，給藥3小時後，實施例3化合物在60mg/kg的疼痛閾值為0.70±0.05 g，相比溶媒對照組的疼痛閾值明顯升高94.4% (p＜0.01)；實施例12化合物在60mg/kg的疼痛閾值為0.78±0.06 g，相比溶媒對照組的疼痛閾值明顯升高116.7% (p＜0.001)；實施例24化合物在30和15mg/kg的疼痛閾值分別為0.74±0.08 g、0.54±0.04 g，相比溶媒對照組的疼痛閾值分別明顯升高105.6% (p＜0.001)、50.0%。實施例24化合物在30mg/kg的疼痛閾值明顯高於15mg/kg的疼痛閾值(p＜0.05)，鎮痛作用具有明顯的劑量依賴性。
實驗例12：實施例61藥效試驗1、實驗目的用機械痛覺超敏測試評估化合物在小鼠足底切口痛模型中的藥效。2、實驗藥品實施例61化合物。依次加入5%DMSO, 10%solutol, 85%saline，渦旋混勻至澄清。3、實驗材料和實驗方法3.1 實驗動物種屬、品系、周齡、性別：C57 BL/6小鼠，6-8周齡，雄性。3.2 實驗動物分組C57 BL/6小鼠適應性飼養後，分組如下：
組別 隻數 給藥劑量 (mg/kg) 給藥體積 (mL/kg) 給藥濃度 (mg/mL) 給藥頻率 給藥方式
Naïve對照 10 / 10 / 單次 灌胃
溶媒對照 10 / 10 / 單次 灌胃
實施例61 10 30 10 3 單次 灌胃
實施例61 10 60 10 6 單次 灌胃
3.3實驗方法
足底切口痛造模：使用異氟烷麻醉動物，擠壓動物腳趾以確認動物手術前已經完全麻醉。在動物眼部塗抹眼用軟膏以防止動物角膜乾燥。使用碘伏和70%乙醇對左腳腳底消毒三遍，待皮膚乾燥後開始手術。距離腳後跟2 mm位置起，縱向向腳趾方向做一個約5 mm長的切口，切開皮膚後抬起趾短屈肌並造成縱向鈍性損傷。縫合傷口，消毒。等動物完全蘇醒後(可自由活動)將動物放回籠中。10隻動物未實施小鼠切口痛手術，作為Naïve對照。
機械痛覺超敏測試(up-down法)：在造模一天后，給藥後1小時、3小時和6小時對所有模型小鼠左後腳進行機械痛覺超敏測試。將小鼠單獨放置在有機玻璃盒中，盒子底部為網格以保證小鼠腳部可以測試。在測試前小鼠將適應15分鐘。適應完成後，使用測試纖維在小鼠左後腳腳底中心部位測試。測試纖維包括8個測試強度：2.36 (0.02g)，2.44 (0.04g)，2.83 (0.07 g)，3.22 (0.16 g)，3.61 (0.4 g)，3.84 (0.6 g)，4.08 (1 g)， 4.17 (1.4 g)。測試時，將測試纖維垂直壓向皮膚並施力使纖維彎曲6-8秒，每次測試間隔5秒。測試時，動物迅速縮腳被記為疼痛反應。測試纖維離開動物皮膚時動物縮腳也被記為疼痛反應。如果動物移動或走動，不記疼痛反應，應重複測試。測試時首先使用3.22 (0.16 g)，如果動物有疼痛反應，下一次測試使用力度小一級的測試纖維；如果動物沒有疼痛反應，下一次測試使用力度大一級的測試纖維。測試纖維的最大力度為4.17 (1.4 g)。測試結果記錄在如下的表格中，有疼痛反應記錄X，沒有疼痛反應記錄O。
機械痛覺超敏在小鼠行為學測試中表述為縮腳閾值(PWT)，按照如下公式計算：50% 反應閾值(g)= (10(Xf+kδ))/10,000Xf=測試中使用的最終測試纖維值k=表值(參照文獻Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. J Neurosci Methods. 1994 Jul;53(1):55-63.)δ=平均差3.4 資料分析資料匯總統計後，使用Prism(Graph pad software, Inc.)軟體分析資料，採用one-way ANOVA對資料進行檢驗。
4、結果
實施例61在小鼠足底切口痛模型中的鎮痛藥效如表14所示。
表14 本公開化合物在小鼠足底切口痛模型中的鎮痛藥效
組別 給藥劑量 (mg/kg) 50%反應閾值(g) 給藥方式 隻數
1 h 3 h 6 h
Naïve對照 / 1.28±0.05**** 1.25±0.05**** 1.15±0.05**** 灌胃 10
溶媒對照 / 0.32±0.02 0.32±0.04 0.32±0.04 灌胃 10
實施例61 30 0.58±0.07** 0.79±0.08**** 0.60±0.08* 灌胃 10
實施例61 60 0.87±0.07**** 1.07±0.09**** 0.70±0.09*** 灌胃 10
注：資料表示Mean±SEM，* vs 溶媒對照，* P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，****P＜0.0001。
5、結論
給藥後不同時間，實施例61化合物在小鼠足底切口痛模型中均具有顯著的鎮痛藥效，且具有明顯的劑量依賴性。
在本說明書的描述中，參考用語「一個實施例」、「一些實施例」、「示例」、「具體示例」、或「一些示例」等的描述意指結合該實施例或示例描述的具體特徵、結構、材料或者特點包含於本申請的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述用語的示意性表述不必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特徵、結構、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領域的具有通常知識者可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特徵進行結合和組合。
本申請主張如下優先權：
CN202410483482.4，申請日：2024年4月19日；CN202411125232.X，申請日：2024年8月15日。
無
無

Claims (13)

  1. 一種化合物，其為如式(X)所示的化合物，或式 (X) 所示的化合物的立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或前藥，(X)；其中：環A為苯基、5-10元雜芳基或5-10元雜環基；各Re獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、硝基、-N(Ra)2、-(C1-6亞烷基) N(Ra)2 、-S(O)(=NH) C1-6烷基、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-(C1-6亞烷基)C(O)N(Ra)2、-C(O)Ra、-S(O)2NRa、、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6亞烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氨基、C1-3鹵代烷基、C1-3羥基烷基和C1-3烷氧基的取代基所取代；各Ra獨立地為H、D、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代和C1-3烷基的取代基所取代；R1、R2、R3、R4和R5各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、硝基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、硝基、氨基、羥基、C1-3烷基、C1-3鹵代烷基、C1-3羥基烷基和C1-3烷氧基的取代基所取代；或R3和R5與相連的碳原子一起形成C3-6環烷基；R6為CN、-S(O)C1-6烷基、-S(O)2C1-6烷基、-CH=N-O-C1-6烷基、C2-6炔基、C1-6烷硫基或-L1-L2-Rc，所述C1-6烷基、C2-6炔基和C1-6烷硫基可獨立任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、氧代和羥基的取代基所取代；L1為鍵、O或S；L2為鍵、C1-6亞烷基或-(C1-6亞烷基)-C1-6烷氧基，所述C1-6亞烷基和C1-6烷氧基可獨立任選地被1、或3個選自D、F、Cl、Br、I、氧代和羥基的取代基所取代；Rc為-O-N=、-P(O)(C1-6烷基)2、C2-6炔基或-O-(3-8元雜環基)，所述C1-6烷基、C2-6炔基和3-8元雜環基可獨立任選地被1、2、3、4、5或6個選自D、F、Cl、Br、I、羥基、氧代、硝基、氨基、烷氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基的取代基所取代；R7和R8各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基和C1-3烷氧基的取代基所取代；n為1、2或3。
  2. 根據請求項1所述的化合物，其中，環A為苯基、噠嗪、吡嗪、吡啶或嘧啶。
  3. 根據請求項1所述的化合物，其為如式 (I)、(II)或(III)所示的化合物，或式 (I)、(II)或(III)所示的化合物的立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或前藥，(I)、(II)、(III)其中：X為CR10或N；Y為CR13或N；R9和R10各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、氨基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵代烷基或C1-6鹵代烷氧基；R11、R12和R13各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、硝基、-N(Ra)2、-(C1-6亞烷基) N(Ra)2 、-S(O)(=NH) C1-6烷基、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-(C1-6亞烷基)C(O)N(Ra)2、-C(O)Ra、-S(O)2NRa、、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6亞烷基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6羥基烷基、C1-6鹵代烷基、C1-6鹵代烷氧基、C1-6烷氨基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代、羥基、C1-3烷基、C1-3烷氨基、C1-3鹵代烷基、C1-3羥基烷基和C1-3烷氧基的取代基所取代；各Ra獨立地為H、D、羥基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基或3-6元雜環基，所述C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6環烷基和3-6元雜環基可任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、氧代和C1-3烷基的取代基所取代。
  4. 根據請求項1-3任一項所述的化合物，其中，R1、R2、R3、R4和R5各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、羥基、甲基、乙基、CH2F、CHF2、CF3、-CH2OCH3或-CH2OH。
  5. 根據請求項1-4任一項所述的化合物，其中，R9、R10和R11各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、氨基、硝基、甲基、乙基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基；R12和R13各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、CN、羥基、氨基、硝基、甲基、乙基、CH2F、CHF2 、-OCH3、-OCH2CH3、-C(O)NH2、-C(O)NHOH、-C(O)NHOCH3、- CH2OH、 -CH(OH)CH2OH、-C(O)NHCH3、-CH(OH)(CH3)2、-S(O)(=NH) CH3 、-S(O)2NH2、、、、、或。
  6. 根據請求項1-5任一項所述的化合物，其中，R7和R8各自獨立地為H、D、F、Cl、Br、I、羥基、甲基、乙基、CH2F、CHF2或CF3。
  7. 根據請求項1-6任一項所述的化合物，其中，R6為CN、-S(O)C1-3烷基、-S(O)2C1-3烷基 -CH=N-O-C1-3烷基、-C2-6炔基、C1-3烷硫基或-L1-L2-Rc，所述C1-3烷基、C1-3烷硫基和C2-6炔基可獨立任選地被1、2或3個選自D、F、Cl、Br、I、氧代和羥基的取代基所取代；L1為鍵、O或S；L2為鍵、C1-3亞烷基或-(C1-3亞烷基)- C1-3烷氧基；Rc為-O-N=、-P(O)(CH3)2、C2-6炔基或-O-(3-8元雜環基)；所述C2-6炔基和3-8元雜環基可獨立任選地被1、2、3、4、5或6個選自D、F、Cl、Br、I、羥基、氧代、硝基、氨基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C1-3烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基的取代基所取代。
  8. 根據請求項1-7任一項所述的化合物，其中，R6為CN、-S(O)CH3、-S(O)2CH3、、-P(O)(CH3)2 、 、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或。
  9. 根據請求項1-8所述的化合物，其具有式(IV)或(V)所示結構：(IV)(V)其中，Rc為C2-6炔基，所述C2-6炔基可獨立任選地被1、2、3、4、5或6個選自D、F、Cl、Br、I、羥基、硝基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C3-6環烷基和3-6元雜環基的取代基所取代。
  10. 一種化合物，其為具有下列之一結構的化合物或具有下列之一結構的化合物的立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或前藥：、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、、或。
  11. 一種藥物組合物，其包含請求項1-10任一項所述的化合物；其中，所述藥物組合物任選地進一步包含藥學上可接受的賦形劑、載體、佐劑或它們的任意組合。
  12. 一種根據請求項1-10任一項所述的化合物或者請求項11所述的藥物組合物在製備藥物中的用途，其中，所述藥物用於治療抑制電壓閘控鈉通道NaV1.8有回應的疾病。
  13. 根據請求項12所述的用途，其中，所述疾病為慢性疼痛、腸痛、神經性疼痛、肌肉骨骼疼痛、急性疼痛、炎性疼痛、癌症疼痛、特發性疼痛、手術後疼痛、內臟疼痛、多發性硬化症、夏柯-馬利-杜斯氏病、失禁、病理性咳嗽或心律失常。
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