UA30879C2 - Спосіб одержання комплексу біологічно активних речовин, що має гепатопротекторну дію, і засіб для лікування захворювань печінки "піфламін" - Google Patents

Abstract

Винахід відноситься до фармації, зокрема до способу одержання комплексу біологічно активних речовин з рослинної сировини та засобу на його основі в формі таблеток. Комплекс біологічно активних речовин, що має гепатопротекторну дію, одержують з трави гороху посівного шляхом екстракції етанолом, упарюванням та очищенням з подальшим сушінням. Засіб для лікування захворювань печінки складається з ядра, яке містить екстракт трави гороху посівного, та оболонки, яка містить допоміжні речовини.

Description

Опис винаходу

Винахід відноситься до фармації, зокрема до гепатозахисних лікарських засобів рослинного походження, і 2 може бути застосований у медицині при лікуванні захворювань печінки.

В наш час захворювання печінки займають значне місце (понад 4095) серед нозологічних форм, які відносяться до патології травної системи. Це пов'язано у першу чергу з загостренням екологічного стану, ураженнями печінки при гострих отруєннях та медикаментозному впливу тощо. Прогнозується збільшення таких захворювань на 3095. В зв'язку з цим постає необхідність створення гепатозахисних препаратів, які б мали 70 досить виражену лікувально-профілактичну дію і одночасно не справляли негативного впливу на функції життевоважливих органів і систем при тривалому їх вживанні. З цих позицій представляють інтерес рослинні екстракти і комплексні сумарні фітопрепарати, які містять у концентрованому вигляді біологічно активні речовини, що забезпечують специфічну дію на печінку і організм в цілому.

Відомий спосіб одержання комплексу речовин, шо мають гіпоглікемічну дію (А.С. Мо 1069224, МКВ АЄ1К, 12 1983р.) з трави гороху посівного. Спосіб передбачає подрібнення сухої сировини, її екстракцію 40 - 5090 етанолом при співвідношенні сировина: екстрагент 1:04 - 1 : б, упарювання екстракту до 1/12 - 1/14 попереднього обсягу з подальшим відстоюванням екстракту протягом 10 годин у холодильнику. Надосадову рідину зливають і обробляють рівною кількістю 9695 етанолу. Осадок, що випав після наступного З-годинного відстоювання відділяють, а спиртово-водний розчин концентрують під вакуумом і обробляють 4-кратною кількістю хлористого метилену. Далі водний розчин відділяють і упарюють під вакуумом до одержання сухого продукту. Вихід готового продукту 7,8 - 8,3590.

Відомий спосіб обумовлює одержання екстракту трави гороху посівного з гіпоглікемічною дією.

Задача, що вирішується даним винаходом, полягає у створенні способу одержання з трави гороху посівного комплексу біологічно активних речовин, який має гепатопротекторну дію, шляхом екстракції сировини етанолом с при певній сукупності операцій і технологічних параметрів, що дозволяє одержати сухий екстракт трави гороху. (3 посівного з вираженою гепатопротекторною дією, який може бути використаний при створенні нового засобу для лікування токсичних уражень печінки.

Поставлена задача вирішується таким чином, що у способі одержання комплексу біологічно активних речовин, який має гепатопротекторну дію, шляхом екстракції подрібненої трави гороху посівного етанолом, о упарюванням, очищенням хлористим метанолом з подальшим сушінням, додатково передбачено, що екстракцію ча здійснюють 10-кратною кількістю 49 - 51956 етанолу протягом 11 - 12 годин. Екстракт упарюють до водного залишку, який очищають хлористим метанолом при співвідношенні водний залишок хлористий метанол З: 4. со

Параметри запропонованого способу визначені дослідник шляхом. Даний спосіб дозволяє за допомогою о відомих операцій, але здійснених у заданій послідовності при заданих параметрах, одержати з тієї же сировини, які у випадку прототипу, комплекс біологічно активних речовин, який має нову виражену гепатопротекторну дію. о

Спосіб здійснюється таким чином. Подрібнену до розміру часток 2,5 - ЗОмм суху траву гороху посівного екстрагують методом перколяції 10-кратною кількістю 49 - 5195 етанолу протягом 11 - 12 годин. Одержаний екстракт упарюють під вакуумом при температурі 60 - 70 "С до водного залишку, який очищають від речовин « ліпофільної природи (знежирюють) при співвідношенні водний залишок : хлористий метанол 3 : 4 з подальшим З 70 сушінням до сухого залишку. с Вихід готового продукту 10 - 1296. з» Одержаний сухий екстракт трави гороху посівного - гігроскопічний порошок від світло-коричневого до коричневого кольору. Колір препарату залежить від ступеня зрілості сировини.

Приклад 1. 5Окг подрібненої шляхом вальцювання до розміру часток 2,5 - З,Омм сухої трави гороху посівного екстрагують 500л 5095 етанолу у перколяторі протягом 12 годин зі швидкістю збору екстракту 2О0л/год. о Одержаний екстракт упарюють при ГГ - 65"С під вакуумом у вакуум-циркуляційному апараті при розрідженні ав | 55Омм.рт.ст. до обсягу водного залишку ЗОл. Обробку водного залишку 40л хлористого метилену проводять в реакторі з мішалкою в З етапи, додаючи послідовно до очищеної водної фази відповідно 15л, 15л, 10л со хлористого метилену з подальшим перемішуванням протягом 10 хвилин і відстоюванням протягом 4 годин на -І 20 кожному етапі. Одержаний водний концентрат сушать у розпилювальній сушильці з температурою теплоносія на вході 160" і на виході - 807С до сухого екстракту трави гороху посівного. с Приклад 2. Гепатозахісні властивості сухого екстракту трави гороху посівного вивчалися на моделі гострого ураження печінки щурів; викликаного парацетамолом. Ураження печінки у щурів викликали введенням парацетамолу перорально у дозі 2,5г/кг протягом 2 днів. Сухий екстракт трави гороху посівного як лікувальну 25 субстанцію вводили внутрішньошлунково через 1 годину після введення парацетамолу.

ГФ) В сироватці крові, тканині печінки і в жовчі визначали біохімічні та функціональні показники.

Результати досліджень гепатопротекторної дії сухого екстракту трави гороху посівного представлені у о таблиці 1. Аналіз даних свідчить, що в умовах патології достовірно підвищується активність аспартатамінотрансферази (АсАТ), рівень малонового диальдегіду (МДА.) в печінці, достовірно знижується 60 інтенсивність жовчоутворення і вмісту жовчних кислот у жовчі щурів.

Результати досліджень показують, що сухий екстракт трави гороху посівного чинить гепатозахисний ефект в умовах токсичного ураження печінки щурів парацетамолом. Одержані дані можуть служити обгрунтуванням рекомендації використання сухого екстракту трави гороху посівного як засобу для лікування захворювань печінки. бо Коло засобів з гепатозахисними властивостями досить велике, але у відповідності з сучасною класифікацією лікарських засобів з їх числа виділяють відносно невелику групу гепатопротекторів, які здійснюють вибіркову терапевтичну дію на печінку.

Відомі лікарські засоби рослинного походження, які впливають на функцію печінки: "рламін, конвафлавін,

Ккарсил, сілібор (Н.П. Елинов, З.Г. Громова, Д.Н. Синев. Справочник по лекарственньм: препаратам с рецептурой, С.-Петербург, Гиппократ, 1994, С. 358,361).

Фламін в якості активної речовини містить суму флавонів сухого концентрату безсмертника піщаного.

Використовується при хронічних холециститах і гепатохолецеститах.

Конвафлавін містить суму флавоноїдів трави конвалії далекосхідної. 70 Обидва ці відомі, препарати мають переважно жовчогінну, а конвафлавін додатково спазмолітичну дію.

До недоліків цих препаратів можна віднести обмеженість їх фармакологічної дії, зокрема відсутність впливу на процеси перекисного окислення ліпідів (ПОЛ) в печінці.

Лікарський засіб карсил містить високоочищену суміш флавонолігнанів, виділену з розторопші плямистої, в якій активною речовиною є флавоноїдна субстанція сілімарин. Засіб має гепатопротекторну дію, впливає на 7/5 процеси ПОЛ в печінці, нормалізує показники її функціонального стану. парацетамолом

ПОСІВНОГО см 2 о

Примітка: о 2)" - відхилення вірогідне по відношенню до патології (Р « 0,05) с

В якості, препарату порівняння вибрано силібор, аналогом якого є карсил, як стандартний рослинний - гепатопротекторний засіб вітчизняного виробництва. В таблетках силібору активною речовиною є сума -

З5 флавоноїдів з плодів розторопші плямистої. Засіб має гепатопротекторну дію і застосовується при лікуванні со гепатитів і цирозу печінки, має виражену антиоксидантну активність.

Проте дефіцит номенклатури гепатопротекторів, а також збільшення кількості захворювань печінки різної етнології, потребують пошуку нових вітчизняних ефективних гепатопротекторів рослинного походження з рослин, які мають достатню вітчизняну сировинну базу. «

Задача передбачуваного винаходу полягає в створенні нового засобу для лікування захворювань печінки шщ с "Піфламін", що досягається шляхом використання сухого екстракту трави гороху посівного як активної речовини і й певної сукупності допоміжних речовин, які складають ядро таблетки і обумовлюють ефективну «» гепатопротекторну дію засобу. В результаті пропонується новий вітчизняний лікарський" препарат рослинного походження у формі таблеток, вкритих оболонкою, з дешевої доступної вітчизняної сировини, який матиме низьку вартість і може бути використаний як гепатопротектор. г) Вирішення поставленої задачі досягається тим, що в засобі для лікування захворювань печінки "Піфламін", що складається з ядра, яке містить активну речовину рослинного походження, та оболонки, передбачено, що як о активну речовину ядро містить сухий екстракт трави гороху посівного, як допоміжні речовини - лактозу,

Го) карбоксиметилцелюлозу, кальцію стеарат, магнію стеарат, а оболонка складається з метилцелюлози, титану двоокису, тропеоліну О при співвідношенні компонентів (г): -І

Ге) в ядрі: сухий екстракт трави гороху прсівного 0,124 -0,126 лактоза 0,230 - 0,240 карбоксиметилцелюлоза 0,031 - 0,033 кальцію стеарат 0,0039 - 0,0041 (Ф) магнію стеара 0,0039 - 0,0041 ке в оболонці: метилцелюлоза 0,0119 - 0,0121 60 титану двоокис 0,0029 - 0,0031 тропеолін ОО 0,00049 - 0,00051

Гепатопротекторна фармакологічна дія сухого екстракту трави гороху посівного як активної речовини (субстанції) таблетованого препарату "Піфламін" обумовлена вмістом в першу чергу комплексу флавоноїдів, а до також амінокислот, пептидів, цукрів. Сумарний вміст цих речовин у препараті становить не менше 1695. Фізичні властивості сухого екстракту трави гороху посівного не дають змоги одержати таблетку пресуванням самої лише активної речовини внаслідок її сипучості. До того ж дослідним шляхом встановлено, що біологічно активна доза сухого екстракту трави, гороху посівного становить 0,125г на таблетку. Тому при створенні таблетованої лікарської форми засобу "Піфламін" використані наповнювачі і допоміжні речовини, які поліпшують технологічні властивості маси для таблетування. Проте допоміжні компоненти, які входять до складу лікарської форми і постійно контактують з активною речовиною не є індиферентними формотворювачами, а чинять складний багатогранний вплив на лікарський засіб і його терапевтичний ефект.

Оптимальний склад допоміжних речовин засобу "Піфламін" визначено дослідним шляхом, виходячи з умов одержання таблетованого препарату з максимальною терапевтичною активністю, мінімальною побічною дією та 7/0 високими технологічними властивостями.

Вибір лактози, карбометилцелюлози, кальцію та магнію стеарату як допоміжних речовин у заявлених межах було здійснено дослідним шляхом. Маса для таблетування, що містить вибрані допоміжні речовини, є технологічною. В процесі таблетування вона не прилипає до прес-інструменту, рівномірно надходить до матриці пресу, утворює ядра-таблетки з рівною поверхнею та цільними краями без пощерблених місць.

Для визначення впливу допоміжних речовин на фармакологічну активність таблеток "Піфламін" була досліджена гепатопротекторна дія сухого екстракту трави гороху посівного (субстанції) і таблеток "Піфламін".

В якості критерію гепатозахисного ефекту вибрана активність окислювального гідроксилювання амідопірину мікросом в умовах ураження печінки щурів ССІ) (гострий гепатит). Дані наведені в таблиці 2.

Аналіз даних таблиці 2 свідчить, що, як субстанція, так і таблетки "Піфламін" вірогідно підвищують 2о активність мікросом, тобто сприяють відновленню функціональної активності мікросом ураженої печінки, причому активність таблетки дещо перевищує активність субстанції. Таким чином, заявлена сукупність допоміжних речовин підсилює фармакологічну дію субстанції у складі таблетки.

З метою зберігання в таблетованій лікарській формі засобу "Піфламін" високої біологічної активності і забезпечення розпадання таблетки у певному відділі шлунково-кишкового тракту для досягнення оптимальної сч терапевтичної дії, таблетки "Піфламін" вкриті кислоторозчинною оболонкою, склад якої вибрано дослідним о шляхом. : амідопірину мікросом в умовах ураження печінки щурів ССід

Умови експерименту М мідоп. че

Унад Ф н; со о з Фо

Примітка: « 1) 7" - відхилення вірогідне по відношенню до контролю (Р « 0,05); 2)77- відхилення вірогідне по відношенню до патології (Р«0,05) | шо | | шщ с 3) М амід вп. 7 відношення швидкості поглинання кисню мікросомами при окисленні НАД'Ф'Н2о в присутності амідопірину до швидкості . "Над оф Н й » поглинання кисню мікросомами при окисленні НАД'Ф'Но.

За винятком сухого екстракту трави гороху посівного гепатопротекторної дії, інгредієнти, що входять до (95) складу ядра та оболонки таблеток нового засобу, відомі, але саме їх сукупність і кількісне співвідношення о забезпечують одержання таблеток "Піфламін" з високими " заданими фармакологічними та технологічними властивостями і не є відомими з доступних джерел інформації. Очевидним є ефект підсилення дії активної (ее) речовини (сухого екстракту трави гороху посівного) допоміжними речовинами, коли останні не лише зберігають - 50 активність субстанції, а й посилюють її, про що свідчать дані таблиці 2.

Таблетки одержують таким чином.

Ме, Сухий екстракт трави гороху посівного та допоміжні речовини - лактозу, карбоксицелюлозу, кальцію стеарат, магнію стеарат - подрібнюють, просівають, змішують у заданому співвідношенні. Таблетування одержаної маси проводять на таблеточному пресі шляхом прямого пресування. В результаті одержують таблетки-ядра, з гладенькою поверхнею без пощербленого краю.

Ге! Для покриття ядер оболонкою готують спиртово-водну суспензію інгредієнтів оболонки. В процесі покриття спиртово-водна фаза випарюється. Оболонка таблетки має оранжевий колір. де Винахід ілюструється прикладами.

Приклад 3. Оптимальний склад засобу "Піфламін" на одну таблетку: 60 Склад ядра (г): вв магнію стеарат 0,004

Склад оболонки (г):

Маса таблетки без оболонки 0,4г, маса таблетки, вкритої оболонкою, 0,4155Гг.

Таблетки з зазначеним складом технологічні у виготовленні, максимально зберігають біологічну активність субстанції, розпадаються у заданому відділі шлунково-кишкового тракту.

Приклад 4.

Склад ядра (г):

Склад оболонки (г): с о (22)

Таблетки наведеного складу мають виражену терапевтичну активність, технологічні у виготовленні.

Приклад 5. -

Склад ядра (г): с

Фо зв не ч - с Склад оболонки (г):

Й о ав) Як і у попередньому прикладі таблетки мають високі фармакологічні та технологічні властивості. Вміст інгредієнтів зокрема активної речовини, лежить у межах заявлених інтервалів. бо Приклад 6. -І 20 Склад ядра (г):

Фо о ще

Склад оболонки (г): 60 б5

Таблетки даного складу не мають ефективної терапевтичної дії внаслідок недостатньої дози активної речовини, бо визначена оптимальна доза сухого екстракту трави гороху посівного становить 0,125г на одну таблетку. До того ж маса для таблетування у даному випадку має підвищену сипучість внаслідок підвищеного вмісту кальцію та магнію стеарату, що негативно впливає на міцність таблетки.

Приклад 7.

Склад ядра (г): й

Склад оболонки (г):

Склад одержаної таблетки відзначається підвищеним вмістом сухого екстракту трави гороху посівного, але фармакологічна активність засобу при цьому суттєво не змінюється. Зниження вмісту лактози змінює вологосорбційні властивості маси таблетування, що негативно впливає на технологічні властивості таблетки.

Приклад 8. З метою визначення специфічної фармакологічної активності засобу "Піфламін" вивчали його с 29 гепатопротекторну активність в умовах гострого ураження печінки щурів СС, у порівнянні з силібором. ге)

Дослідних тварин "було поділено на контрольну та дослідні групи. В досліді використовували безпородних щурів масою 200 - 220г. Гострий гепатит викликали шляхом внутрішньошлункового введення 5095 масляного розчину ССІі/ в дозі 0,7мл/100г маси тіла протягом 2 днів. Засіб "Пірламін" вводили тваринам дослідної групи внутрішньошлунково в дозах 25, 50, 100мг/кг через 1 годину після введення ССі у. В якості препарату Ме. порівняння використовували силібор у дозі 25мг/кг. Через 24 години після останнього введення ССІ 2 щурів забивали. В сироватці крові визначали активність АсАТ, рівень лужної фосфатази, глікоген печінки, МДА, відновлений глютатіон (ВГ), печінки, фібріноген, церулоплазмін, загальні ліпіди, холестерин сироватки, со швидкість секреції жовчі, жовчні кислоти, холестерин жовчі. Дані досліду наведені у таблиці 3. о

Як свідчать дані таблиці З, в умовах патології вірогідно підвищується рівень фібріногену і вірогідно знижується рівень загальних ліпідів та концентрація жовчних кислот в жовчі. "Піфламін" в дозі 10Омг/кг на тлі і, патології сприяє підвищенню вмісту жовчних кислот і холестерину в жовчі. Сил і бор в меншій мірі ніж "Піфламін" підвищує вміст жовчних кислот в жовчі, але вірогідно знижує концентрацію холестерину в жовчі в порівнянні з патологію. « 2 з я и викликаного ССІід

Контроль | Патологія (гострий | Лікування силібором в дозі о з мкмоль/секл й

Тл ь

Ге) 15,68 3472 13,96

Й

(Ф. 2,18 " ммоль/л і мг/хв/100 60,37 128,67 7214 115,88

Холестерин жовчі, мг/9о 28,8 жк 6,58 24,36 5 2,12 10,879,087 11,070,44 47,65 х 29,85 5 3,99 2,58 б5

Примітка:1)" - відхилення вірогідне по відношенню до контролю (Р«0,05);2)"" - відхилення вірогідне по відношенню до патології (Р«0,05)

Таким чином, одержані дані свідчать про те, що в умовах патології "Піфламін" проявляє гепатопротекторний 2 ефект на рівні препарату порівняння силібор.

Результати всебічного вивчення токсичного впливу субстанції і таблеток "Піфламін" на окремі органи, системи і організм в цілому на З видах тварин показали, що тривале введення препарату "Піфламін" в терапевтичній дозі 100мг/кг не чинить несприятливого впливу на функції життєвоважливих органів.

Таким чином, заявляється ефективний засіб рослинного походження для лікування захворювань печінки "Піфламін", який проявляє гепатопротекторну дію на рівні препарату порівняння силібору, виготовляється з доступної сировини, має необмежену-вітчизняну сировинну базу, виготовляється за економічною технологією на стандартному обладнанні, що зробить його доступним для широких верств населення.

Claims (2)

Формула винаходу

1. Спосіб одержання комплексу біологічно активних речовин, що має гепатопротекторну дію, шляхом екстракції подрібненої трави гороху посівного етанолом, упарювання, очищення хлористим метанолом з подальшим сушінням, який відрізняється тим, що екстракцію здійснюють 10-кратною кількістю 49 - 51 95 етанолу протягом 11 - 12 годин, екстракт упарюють до водного залишку, який очищують хлористим метанолом при співвідношенні водний залишок : хлористий метанол 3: 4.

2. Засіб для лікування захворювань печінки, який вміщує даний комплекс що складається з ядра, яке містить активну речовину рослинного походження, та оболонки, який відрізняється тим, що в якості активної речовини ядро містить сухий екстракт трави гороху посівного, в якості допоміжних речовин-лактозу, с карбоксиметилцелюлозу, кальцію стеарат, магнію стеарат, а оболонка складається з метилцеллюлози, титану о двоокису, тропеоліну О при співвідношенні компонентів (г): В ядрі (г): сухий екстракт трави гороху посівного 0,124 - 0,126 Ге) лактоза 0,230 - 0,240 їм карбоксиметилцелюлоза 0,031 - 0,033 кальцію стеарат 0,0039 - 0,0041 (ее) магнію стеарат 0,0039 - 0,0041 о В оболонці (г): Зо метилцелюлоза 0,0119 - 0,0121 о титану двоокис 0,0029 - 0,0031 тропеолін ОО 0,00049 - 0,00051 Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних т с мікросхем", 2003, М 6, 15.06.2003. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і ч науки України. и? (95) («в) (ее) -і іЧе) іме) 60 б5