UA31464C2 - Мікроелементно-вітамінна композиція, яка має антистресорну активність та здатність до підвищення резистентності організму - Google Patents

Abstract

Винахід стосується мікроелементно-вітамінної композиції, яка має антистресорну активність та здатність до підвищення резистентності організму. Композиція містить іони металів мікроелементів (Fe(III), Zn(II), Mn(II), Cu(II), Co(II), Cr(III)) і N-2,3-диметилфенілантранілової кислоти у вигляді їх комплексів, а також вітамінів групи В (В1 - тіаміну хлорид, В2 - рибофлавін, В3 - нікотинамін, В5 - кальцію пантотенат, B6 - піридоксину гідрохлорид) в присутності відомих допоміжних речовин.

Description

Опис винаходу

Винахід стосується нового лікарського засобу, а саме - композиції певних співвідношень іонів металів 2 мікроелементів (Ре), 2и(І), Маи(І), Сщі), Со(І), Ст) ї М-2,3-діметилфенілантранілової кислоти у вигляді їх комплексів, а також вітамінів групи В (В, В», Вз, В5, Вб) у присутності відомих допоміжних речовин, яка має антистресорну активність та здатність до підвищення резистентності організму, і призначений для використання у фармації й медицині.

Доцільність створення нових засобів фармакологічної корекції реакцій організму на стреси та 70 перенавантаження обумовлена актуальністю проблеми спрямованої регуляції наслідків таких реакцій та підвищення "якості життя" в умовах реального впливу негативних факторів середовища існування людини (психо-фізичних, екологічних, дієтних, катастрофальних та ін.).

Відповідно до обгрунтування значущості металів-мікроелементів і вітамінів в регуляції гомеостазу , запропоновано застосування для корекції порушень останнього при стрес-реакціях мікроелементно-вітамінних 12 композицій, як основи низки фармакологічних агентів. Серед таких включені до фармакопей та реєстрів лікарських засобів різних країн відомі об'єкти фармацевтичного ринку: колекції Юнікап (Оріойп, США), Таксофіт (Кіозіептац, Німеччина), Енизіл, Малтіньютріент (Ргезсгібіпд Віоспет. ЦІ, Австралія), Аминовіт, Максавіт,

Мегавіт (Оаїї Ріапт., Австралія), Мульгатол, Біовітал ( КПопе-Роцшіепс, Франція), Супрадін (Га Коспе,

Швейцарія), Мульті-табс (Реггозап, Данія), Комплівіт (Уфімський вітамінний завод, Росія).

Разом з тим, відомі мікроелементно-вітамінні засоби не обумовлюють нормалізацію діапазону показників гомеостазу, які є патологічне зміненими при стресах різної етнології. Ці агенти дозволяють часткову компенсацію мінерально-вітамінної недостатності, але мало відповідають регуляції тонких механізмів наслідку стресу, коли реакція організма впливає вже як патогенний фактор.

Недоліки відомих мікроелементно-вітамінних агентів, поруч із інколи невиправдано розширеним с компонентним складом (що підвищує складність їх одержання), пов'язані, в першу чергу, із невідповідною Ге) фармакологічною якістю внаслідок традиційного введення мікроелементів у вигляді тривіальних простих солей або оксидів. Тим самим, склад відомих композицій не враховує характерні для останніх сполук негативні фізико-хімічні та фізіологічні прояви (ліпофобність та низька проникливість крізь мембрани, прооксидантні прояви, висока токсичність, нераціональна біодоступність - до 2095 від введеної кількості та ін.) в

За прототип цього винаходу обрано мікроелементно-полівітамінний засіб "Комплівіт", склад якого відповідає Ге) наступному співвідношенню компонентів (мас.ч.): «

Ретинола ацетат 1,135 - 1,476 «-

Кальцію пантотенат 50-65

Зо Кислота аскорбінова БО - 55 о

Кислота ліпоєва 2,0-24А4

Кислота фолієва 0,1-0,12

Нікотинамід 7,5- 8,25 «

Піридоксину гідрохлорид 50-55

Рібофлавін мононуклеотид 1,27 -1,40 в с Рутин 25,0-27,5 :з» Тіаміну хлорид 1,0-1,3 о-токоферолу ацетат 10 - 11

Цианокобаламін 0,0125-0,0163 с 15 Іон заліза!) (за рахунок заліза сірчанокислого семиводного) 50-5,65 (24,89 - 27,40) шо Іон цинку (Ії) (за рахунок цинку сірчанокислого семиводного) 20-22 (8,795 - 9,676) ї- Іон марганцю (Ії) (за рахунок марганцю сірчанокислого п'ятиводного) 2,5-2,15 (10,96 - 12,06)

Ф Іон міді (ІІ) (за рахунок міді сірчанокислої п'ятиводної) 0,75 - 0,825 (2,946 - 3,241) «г» Іон кобальту) (за рахунок кобальту сірчанокислого семиводного) 0,1-0,11 (0,477 - 0,524)

Кальцію фосфат 217,0 -238,7

Магній фосфорнокислий двозаміщений 117,6 - 129,4 о Магнію карбонат основний 72,2 - 79,42 ко Комплівіт зареєстрований як лікарський засіб (ТФС 42 1673-86), який має здатність до компенсації мінерально-вітамінної недостатності та підвищення резистентності організму, і обраний прототипом заявляємого во об'єкту як найбільш близький його аналог за сумою ознак, а саме: суттєвою близькістю природи Іонно-мікроелементної компоненти (заліза, цинку, марганцю, міді); близькістю якісного складу за певними вітамінними інгредієнтами (кальцію пантотенат, нікотинамід, піридоксину гідрохлорид, рібофлавін, тіаміну и хлорид); специфікою фармакологічної активності. в5 Фармакологічна активність прототипу - Комплівіта забезпечується включенням до його складу надзвичайно широкого числа інгредієнтів: 12-и вітамінів, 2-х солей магнію й кальцію, 5-й солей мікроелементів. В такому -Д-

складі відбувається дублювання деяких діючих елементів: магнію - в фосфаті й основному карбонаті; кобальту - у складі вітаміну Ві» та сульфата. Останній факт відображає неоптимальну біодоступність мікроелементів у вигляді простих солей. Цей недолік поширюється й на інші метали, наслідком чого є завищений вміст їх Іонів у складі прототипу, а також пов'язана з нефективним метаболізмом мікроелементів потреба в підвищеному вмісті вітамінів.

Відзначений розширений склад та високий кількісний вміст інгредієнтів Комплівіту здатні обумовити також відносне зниження його нешкідливості з точки зору вимог до сучасних антистресорних засобів. Перш за все, це пов'язане з невідповідністю складу прототипу принципу мінімізації вмісту заліза в зв'язку із відомою 7/о кардіотоксичністю надлишку заліза, а саме - накопиченням заліза в м'язових волокнах міокарда, детермінованим стресом (т.з. гістохімічна реакція Перлса). Досить високий вміст заліза в Комплівіті обмежує його відповідність фізіологічним наслідкам стресу, коли априорно необхідне тривале вживання лікарського агента створює додатковий "залізообумовлений" серцевий дискомфорт. Ці фактори обмежують контингент споживачів препарату.

Відзначені недоліки знижують ефективність композиції препарату за прототипом, маючи на увазі рівень його активності як фармакологічного, в першу чергу - антистресорного, агента та ареал його лікувально-профілактичної застосовності.

Задачею винаходу є підвищення рівня антистресорної активності та здатності до підвищення резистентності організму мікроелементно-вітамшним засобом. який виявляє ці ефекти та має високу нешкідливість.

Реалізація цієї задачі досягається запропонованою композицією, яка містить 5 вітамінів - В 4, Во, Вз, В, Вб, а також Іони металів мікроелементів (Рец), 2, Мп), СщІ), Соц), С) і

М-2,3-діметилфенілантрУнілової кислоти у вигляді комплексів останньої із введеними металами. Включення мікроеле-ментної компоненти композиції в комплекси з М-2,3-діметилфенілантраніловою кислотою (субстанція препарату "мефенамінова кислота", далі НІ), є фактором, що може забезпечити вирішення задачі винаходу. сч

В літературі не відомі засоби на основі композиції вітамінів, Іонів мікроелементів («|і

М-2,3-діметилфенілантранілової кислоти. Відповідно, немає відомостей про фармакологічні властивості таких (8) композицій та їх можливі переваги в плані антистресорно-прорезистентних ефектів.

Для коректної оцінки рівня фармакологічної активності заявляемо"" композиції відповідно сучасному рівню в цій галузі як аналог (об'єкт порівняння), поруч з прототипом, використаний лікарський засіб "Юнікап-М" - «г зо усталений об'єкт фармацевтичного ринку (Рпагтасіа 85 Оріойп, США) - комбінований препарат, який містить наступні кількості вітамінів, макро- й мікроелементів (мас.ч.): ісе) ретинола ацетат 1,5 ч кальцію пантотенат Б ьо кислота аскорбінова БО со нікотинамід 20 піридоксину гідрохлорид 0,5 рібофлавін 2,5 тіаміну хлорид 2,5 « ціанокобаламш 0,002 шщ с залізо (у формі фумарата) 10 ц кальцій (у формі карбоната) 3,5 и » магній (у формі оксиду) 6 марганець (у формі сульфата) 1 мідь (у формі сульфата) 1

ОО йод (у формі калію йодиду). 0,15 - Далі наводимо конкретні приклади створення композиції, що пропонується, та композиції-прототипу. їх Приклад 1. Заявляємий об'єкт. в кристалізатор вміщують точну наважку 16,5г 0 М-2,3-діметилфенілантранілової кислоти (0,067г-екв мефенаміно-вої кислоти фармакопейної), додають 90 мл

Ме. водного розчину гідроксиду натрію, який містить 2,61г 9895 Маон (0,06б4г-екв) і перемішують до практично ї» повного розчинення кислоти Ні (в розчині може бути слабка опалесценція). До одержаного розчину одномоментно додають суміш О0,5М водних розчинів хлоридів металів: 20,7мл РесСіз(на 0,1 МНС) (або 0,58г

БеЗ");20,9мл 7пСІз(На 0,02. МНС) (або 0,68г 7п2"); 5,8мл Мпсі» (або 0,16г Мп"); 4,7мл Сисі» (або 0,15г Си");

О047мл Сосіь (або 0,014г Со2")та 047мл ССЗ (або 0,012г Ст), Суміш переміщують протягом 20(25)хв, після

Ге! чого додають 25г крохмалю картопляного, знову перемішують до гомогенного стану. Одержану масу висушують при кімнатній температурі або в сушильній шафі при 80(-10)С2 до остаточної вологості 5(ж2)95 і гранулюють о просіюванням на сітці з діаметром отворів мм.

В просіяну суміш безпосередньо вносять точні кількості вітамінів: В у (тіаміну хлорид) - 2,0г; Во (рібофлавін) 60 -1,0г; Вз (нікотинамід) - 8,03г; Ве (кальцію пантотенат) - 8,0; Ве (піридоксину гідрохлорид) -1,0г, а також допоміжні речовини: крохмаль картопляний - 29,5г; кальцій стеарат - 8,0г; лактоза (цукор молочний) -1,Ог; полівінілпірролідон - 0,2г; тальк - 2,0г.

Інгредієнти перемішують протягом 10(12)хв та просіюють крізь сито з діаметром отворів 1 - 2мм.

Приклад 2. Заявляємий об'єкт. Цільовий продукт - композицію, одержану згідно із описом за прикладом Мо1, бо відомим способом поміщають в стандартні тверді желатинові капсули по 250мг/капсула (отримують 380 капсул).

Відхилення за масою окремих капсул не перевищує х 1095.

В прикладах З - б заявляєму композицію одержували, додержуючись методів та прийомів відповідно прикладу Мо 1, однак змінюючи співвідношення інгредієнтів. Зміни відображено в таблиці 1.

Цільовий продукт, який одержано за способом, що пропонується, є гранульованим порошком світло-сірого з фіолетовим відтінком кольору (з точковими жовтими вкрапленнями) в розсипу або в твердих желатинових капсулах (приклад Мо 2). Вихід продукту складає 9895 (втрати тільки механічні);

Приклад 7. Прототип у фарфоровій ступці ретельно перемішують точні наважки вітамінів: С (кислота аскорбінова) - 50,0г, В. (тіаміну хлорид) - 0,4г, Ве (піридоксину гідрохлорид) - 2,0г, Р (рутин) - 25,0г та 46,8г фосфата кальцію. Одержану суміш зволожують водним розчином, який містить 2,596 метилцелюлози (МЦ) і 595 7/0 полівініл піролідону (ПВП), гранулюють на сітці з діаметром отворів 1 - 2мм та висушують в сушильній шафі при 40 - 5022; до остаточної вологості 1(20,5)90.

У фарфоровій ступці ретельно перемішують точні наважки вітамінів: В; (кальцію пантотенат) - 2,0г, Во (кислота фолієва) - 0,04г, Во (рібофлавін мононуклеотид) - 0,50г, а також ліпоєвої кислоти - 0,8г та 40,0г фосфата кальцію. Одержану суміш зволожують тим же водним розчином, 2,590 МЦ і 5956 ПВП, до якого 7/5 попередньо внесено 4,0г вітаміну Е (о0-токоферолу ацетат) у вигляді 9895 розчину в олії (4,08г розчину). Вологу суміш гранулюють на сітці з діаметром отворів 1 - 2мм та висушують в сушильній шафі при 40 - 509С до остаточної вологості 1(ж0,5)90.

Сірчанокислі солі металів: заліза (семиводного), цинку (семиводного), марганцю (п'ятиводного), міді (п'ягиводного), кобальту (семиводного) сушать в сушильній шафі при 902 протягом ЗОхв та подрібнюють. Точні наважки цих сірчанокислих солей металів: заліза - 9,956бг; цинку -3,518г; марганцю -4,384г; міді -1,178Гг, кобальту - 0,191г змішуюють з точною наважкою 47,04г двозаміщеного фосфата магнію та зволожують водним розчином, який містить 10950 ПВП та 5095 лимонної кислоти. Вологу суміш гранулюють на сітці з діаметром отворів 1 - 2мм та висушують в сушильній шафі при 702 протягом 20 - ЗОхв.

Одержані три грануляти об'єднують, додають 0,454г вітаміну А (ретинол ацетат), 0,005г вітаміну В» «СМ тритурацією 1 : 100, крохмаль, тальк та пресують відомим методом таблетки середньої маси 0,57г. Таблетки о покрівають оболонкою відомим методом, наносячи при покритті 28,88г магнію карбоната основного.

Отримують 400 таблеток засобу Комплівіт - прототипу.

Для створення заявляемої композиції та прототипу використані фармакопейні вітаміни, мефенамінова кислота та допоміжні речовини, солі металів марки "ч.д.а". «І

Заявляема композиція, в цілому, не розчиняється ні у воді, ні в органічних розчинниках. Окремі ж «со інгредієнти композиції мають різну природу розчинності: вітаміни екстрагуються водою, а метали у вигляді комплексів з кислотою НІ. - органічними розчинниками. Тому якісну та кількісну ідентифікацію продукта, який « одержано за прикладами Мо 1-6, проведено на підставі фізико-хімічних характеристик як самої композиції та «- продуктів її "мокрого озолення", так й її водного та органічного екстрактів, а також твердого залишку після екстрагування. (зе)

Для ідентифікації продукт попередньо розтирали у ступці (вміст капсул за прикладом Мо 2 перед цим вивільняли з оболонок). Вітаміни визначали у профільтрованому водному екстракті з точної наважки розтертої композиції методом рідинної хроматографії. Реєстрували час удержання та площини відповідних піків на « хроматограммах використовуючи як стандарти порівняння розчини точних концентрацій індивідуальних фармакопейних вітамінів В., В», Вз, Во, Вв. Як рухому фазу використовували суміш Хрозчин літія хлорнокислого т с в розчин гептилсульфонату натрію) т метанол), 9: 1. ч Визначення вмісту іонів металів проведене атомно-адсорбційним методом після "мокрого озолення" » цільового продукту, його водних і діоксанових екстрактів та твердого залишку після екстрагування. Атомізація здійснювалась при температурі 2100 - 25002С, а довжини хвиль детектування складали (нм): 243,3; 307,6; 279,5; 324,7; 240,7 та 357,9 для залізу, цинку, марганцю, міді, кобальту і хрому, відповідно. Для і ідентифікації стану мікроелементів у вигляді комплексів з кислотою НІ. залучено незалежні спектральні методи. - Якісний і кількісний аналіз вмісту аніону /М-2,3-діметилфенілантранілової кислоти проведено

УФ-спектроскопічним методом за характеристичним поглинанням екстракта цільового продукту у хлороформі пи при 282нм у порівнянні із стандартним розчином фармакопейної кислоти. Визначення Іонів металів проведено на б 20 ААС Регкіп-ЕІтег 3110, електронні спектри реєстрували на приладі Зресога-Оу-МІ5, спектри ЕПР - на приладі

Магіап-МХ, ІЧ спектри - на приладі ОК-20 (в -таблетках КВг). ї» Встановлено (таблиця 2) повний кількісний перехід усіх введених компонентів до цільового продукту при достовірному збереженні їх масового співвідношення відносно вихідного (крім води, що видаляється при висушуванні, та механічних втрат). Зберігається нативність вихідних вітамінів. Всі введені метали та аніон 29 М-2,3-діметилфенілантранілової кислоти кількісно переходять до екстракту в хлороформі (не детектуються у

ГФ! водній витяжці та твердому залишку) без змін вихідного масового співвідношення і ступеню окислення та ідентифікуються у формі їх комплексів незалежними методами. Про існування в продукті таких комплексів ю свідчать: стабільний інтенсивний коричнево-червоний колір його екстракту в хлороформі; бо положення смуг у ІЧ спектрах композиції (м сор? - 1615сМм7!; Мооо? - 1390см') та електронних спектрах (інтенсивна смуга при 5бб5нм з плечем при 660 - бдОнм - спектри відбиття композиції; 4б5нм - спектри поглинання діоксанового екстракту), характерне для індивідуальних комплексів металів з

М-2,3-діметилфенілантраніловою кислотою та близьке, в цілому, для комплексів а-металів в кисневому оточенні октаедричного типу ; бо спектри ЕПР заявляемого продукту й його діоксанового екстракта з д-факторами сигналів, характерними для парамагнітних октаеєдричних комплексів Ре), Ми(І), Сщ(іІ), Со() та Сп) (суперпозиція д-факторів 4,0; 2,0; 2,2; 2,6) з кисеньвміщуючими лігандами , в тому числі - для індивідуальних комплексів металів з

М-2,3-діметилфенілантраніловою кислотою.

Таким чином, заявляємий об'єкт є композицією обраних вітамінів (В 4 - тіаміну хлорид, Во - рібофлавін, Вз - нікотинамід, В5 - кальцію пантотенат, Во -піридоксину гідрохлорид), а також Іонів металів Ре(Ш), 7п(пП), Мп(п),

СщП), Со(П), СИШ) та аніону М-2,3-діметилфенілантранілової кислоти у вигляді його комплексів з введеними металами в присутності відомих допоміжних речовин при масовому вмісті компонентів, яке вказано в таблиці 2.

Деякі фізико-хімічні характеристики продукта, який одержано при вихідних співвідношеннях компонентів, що 70 Відрізняються від таких у прикладах 1 - 4, зазнають певних змін. Конкретно, для приклада Моб характерна присутність слідів металів у водному екстракті з цільового продукта та у твердому залишку після екстрагування з одночасним викривленням спектральніх характеристик (уширення смуги 565нм в спектрі відбиття та сигналів в спектрі ЕПР, зменшення короткохвильового зсуву Мсоо В ІЧ спектрі), а для прикладу Мо5 - присутність слідів вільної кислоти НІ. Такі зміни дозволяють вважати, що вихід масових співвідношень інгредієнтів за межі 7/5 параметрів, зазначених прикладами Мої - 4, призводить до існування в кінцевому продукті домішок гідроксосполук металів з "неоктаегдричною" будовою координаційної сфери або незв'язаної в комплекс кислоти

НІ. Вміщення цільового продукту, одержаного у вигляді грануляту в розсипу, до желатинових капсул (порівн. приклади Мо1 та Мо2) не викликає будь-яких змін його фізико-хімічних властивостей.

Відповідно до задачі винаходу, оцінка ефективності заявляємої мікроелементно-вітамінної композиції проведена на підставі визначення її антистресорної активності та здатності підвищувати резистентність організму при різних типах подразнювачів в порівнянні з прототипом - полівітамінно-мікроелементним засобом "Комплівіт, а також аналогом - засобом "Юнікап". Визначали вплив введення цих продуктів на макро-характеристики стану організму, показники лейкоцитарної формули периферічної крові та кістково-мозкового кровотворення, а також на вміст заліза як фактор гісто-морфологічної картини міокарду при с стресах внаслідок нервово-м'язового подразнення та впливу іонізуючого опромінення.

Конкретно, активність заявляемого об'єкту, прототипу та аналога оцінена за наступними показниками, які о різнобічне характеризують їх властивості: динаміка тривалості плавання після нервово-м'язового стреса; фактори "якості життя" в умовах пост-радіаційного стресового синдрому; «І динаміка вмісту лейкоцитів, нейтрофілів та еозинофілів в периферічній крові при нервово-м'язовому та радіаційному стресі; о кількість мієлокаріоцитів, лімфоїдних та еритроїдних клітин в кістковому мозку при радіаційному стресі; «І динаміка вмісту заліза в тканині серця при нервово-м'язовому стресі.

Нервово-м'язовий стрес відтворювали в моделі 12-годинного голодування з одночасною імобілізацією в -

Зз5 останні З години експерименту (фізичною фіксацією, що виключала можливість рухатись). Радіаційний стрес «У створювали однократним рентгенівським опроміненням тварин в апараті РУМ-37 при стандартних технічних умовах. Доза, яка була поглинена, складала бГр для м'яких тканин.

В усіх експериментах піддослідними тваринами були білі щури обох статей масою 180 - 220г. В кожній дослідній групі (контроль - інтакт; тварини, яких піддавали стресу; стресовані тварини, яким вводили, «

Відповідно, цільовий продукт за запропонованим способом, цільовий продукт за способом-прототипом та Пд с аналог-Юнікап) було по 11 - 21 тварині. й Досліджені об'єкти вводили перорально в дозах 22,5мг/кг (заявляема коту.-позиція), З2мг/кг (прототип) та "» 25мг/кг (аналог) в крохмальному клейстері: тваринам з нервово-м'язовим стресом - перед голодуванням та перед фіксацією, тваринам з радіаційним стресом - протягом 7 діб перед опроміненням і потім раз на добу протягом З0 днів (або 7-й в експериментах з кістковім мозком) спостереження. Контрольні стресовані тварини о (контроль) одержували в ті ж терміни тільки крохмальний клейстер. з Резистентність до навантаження оцінювали за тривалістю плавання після стресу, яку враховували з моменту вміщення тварини у воду (кип'ячену з температурою 28 - З0"С) до повного її знесилення із зануренням на дно. ьч Для стандартизації перед плаванням до проксимальної частини хвосту тварини прикріплювали вантаж (1095 від маси тіла). б Всі тварини підлягали систематичному клінічному спостереженню: протягом 1-ї доби після нервово-м'язового «з» стреса, протягом ЗО діб - з моменту опромінення при радіаційному стресі. Вплив досліджених засобів на резистентність організму при опроміненні оцінювали за критеріями: ЗО-добова виживаємість, середня гармонійна тривалість життя, частота розвитку характерних пост-променевих ознак (геморагічні явища, загальний задовільний стан). Контрольовані характеристики крові визначали стандартними методами через 3, 9 й 12 годин (нервово-м'язовий стрес) та на 7,14 й ЗО добу (опроміненення) після впливу подразнювача. При визначенні о показників кістково-мозкового кровотворення тварин декапітували на 7-му добу після опромінення та відмивали ко кістковий мозок із стегнової кістки фізіологічним розчином.

При гісто-морфологічних дослідженнях серце фіксували в 1095 нейтральному формаліні й виготовляли бо заморожені зрізи, які фарбували за Перлсом. Для визначення вмісту заліза в міокарді тварин декапітували в підгрупах через 15хв, ЗОхв та 24 години після зняття імобілізації, здійснювали через аорту перфузію серця фізіологічним розчином до повного знебарвлення промивних вод та витримували 1Охв в фізіологічному розчині.

Після цього серця сушили на повітрі протягом 24 годин, потім у сушильній шафі при 1057 до втрати маси 75 (ї 2) і зважували. Далі проводили кислотний гідроліз гомогенату тканини серця в соляній кислоті (1:1) й 65 фільтрували гідролізат крізь паперовий фільтр, попередньо демінералізований в 195 НС1. Визначення катіону заліза в одержаних розчинах проведено відносно холостої проби атомно-адсорбційним методом на ААС

Регкіп-ЕІтег 3110 при довжині хвилі 248,Знм.

Оцінювали також фармакологічну нешкідливість заявляемої композиції, прототипу й аналога за показником гострої токсичності. Препарати вводили перорально тваринам двох видів (білі миші та щури) в крохмальному клейстері в дозах 1580 - 630Омг/кг, відповідно до методики встановлення середньолетальних доз. Токсичний ефект враховували протягом 5 діб.

Для заявляемої композиції, прототипу й аналога при всіх досліджених дозах не виявлено летальних наслідків, що обумовило неможливість оцінки середньосмертельної дози ЛДвьо. Навіть у максимальних використаних дозах заявляема композиція та Юнікап не викликали будь-яких симптомів отруєння. Для прототипу 7/0 7 Комплівіта максимальна доза викликала слабкі аномалії поведінкових реакцій тварин, що свідчить про його відносно меншу гостру нешкідливість.

В межах вивчення хронічної токсичності заявляємої композиції не встановлено її негативного впливу на реєстровані в динаміці показники функціонального стану органів та систем організму піддослідних тварин (білі щури та собаки - перорально, щоденно протягом З місяців в дозах 22 та 13Омг/кг): змін природного статусу маси у75 Тіла, функцій печінки та нирок, складу периферічної крові, а також тератогенної, ембріотоксичної, місцевоподразнюючої й алергізуючої дії. Патоморфологічними дослідженнями за результатами хронічного експеримента не виявлено змін внутрішніх органів тварин.

Таким чином, заявляема композиція, для якої за даними гострого та хронічного експерименту встановлено високу нешкідливість, згідно прийнятої класифікації, відноситься до групи практично нетоксичних речовин. Це є 2о вагомим підгрунтям розгляду переваг її специфічної фармакологічної активності відповідно до задачі винаходу.

В таблицях 3 - 8 наведено порівняльні дані з активності заявляемої композиції, протипа та аналога, яка виражена в здатності до нормалізації стрес- та резистентно-компетентніх параметрів стану тварин.

Після нервово-м'язового стреса працездатність тварин різко падає (таблиця 3). Лікувально-профілактичне введення всіх досліджених засобів підвищує опірність організму стресованих тварин до навантаження. При сч ов цьому переваги здатності заявляємої композиції підвищувати резистентність є чітко вираженими. Це виявляється у (1,8 - 2,2) -кратному підвищенні працездатності, порівняно із контролем, яка одночасно в (1,4 - і) 1,5) рази перевищує таку для прототипа та аналога.

Ефективність заявляемої композиції в підвищенні резистентності організму особливо виражена в макро-показниках активності в умовах радіаційного стресу (таблиця 4). Пост-променевий синдром «г зо характеризується суттєвим погіршенням факторів загального стану (рухомості, апетиту, стану шерстного покриву, зниження маси тіла, виникнення геморрагії та ін.) аж до вираженої загибелі. Стосовно цих факторів ісе) для заявляемого об'єкту характерно: «Е підвищення виживаємості тварин в 2,1, 2,3 й 3,6 рази в порівнянні із прототипом, аналогом та стрес-контролем, відповідно; -- підвищення середньої гармонійної тривалості життя в 1,3 рази в порівнянні із прототипом та аналогом, в со 1,4 рази - із стрес-контролем; зниження геморагічних проявів в 1,5, 1,6 й 2,5 рази в порівнянні із прототипом, аналогом та стрес-контролем, відповідно; підвищення загального задовільного стану тварин в 1,4 рази в порівнянні із прототипом та аналогом, в 1,8 « 400 7 із стрес-контролем. в с Ці дані підтверджують переваги заявляемої композиції у здатності підвищувати резистентність організму, як стосовно суттєвого зниження летальності, так і стосовно значного покращення "якості життя" тварин, які вижили. ;» Із врахуванням специфічності пост-стресових аномалій гемопоезу принципово важливі порівняльні дані впливу досліджених засобів на стан клітинних клонів периферічної крові та кісткового мозку (таблиці 5 - 7).

Вплив нервово-м'язового та радіаційного чинників викликає виражене викривлення лейкоцитарної формули 2) периферічної крові та мієлограми, характерне для наслідків стреса . В периферічній крові виникають нейтрофільоз, лімфопенія та еозинопенія. В кістковому мозку спостерігаються явища інгібіції проліферації та - зміни диференціації клітинних клонів, які обумовлюють вражаюче падіння вмісту мієлокаріоцитів, а також їх зменшення клітин еритрону та лімфоцитів.

Лікувально-профілактичне введення всіх досліджених засобів у всі терміни спостереження знижує

Ме, вираженість стресорних проявів. При цьому антистресорна активність заявляемо! композиції: ї» за усуванням стресового нейтрофільоза в периферічній крові в 1,3 - 1,8 рази та 1,9 - 3,8 рази вище, ніж у прототипа і аналога, відповідно, при нервово-м'язовому стресі тав 1,2 і в 1,2 - 1,5 рази - при радіаційному стресі; за усуванням стресової лімфопенії в периферічній крові в 1,1 - 1,3 рази та 1,2 - 1,4 рази вище, ніж у дв протототипа і аналога, відповідно, при нервово-м'язовому стресі та в 1,1 - 1,66 та в 1,2 - 1,5 рази - при радіаційному стресі;

Ф) за усуванням стресової еозинопенії в периферійній крові в 1,1 - 1,3 рази та 1,2 - 1,6 рази вище, ніж у ка протототипа й аналога, відповідно, при нервово-м'язовому стресі та в 1,3 - 1,8 та в 2,3 - 2,5 рази - при радіаційному стресі; во за попередженням стресового падіння вмісту мієлокаріоцитів в кістковому мозку в 1,8 - 2,0 рази та 2,0 - 2,2 рази вище, ніж у протототипа й аналога, відповідно; за попередженням стресового зменшення долі клітин еритрону в мієлограмі кісткового мозку в 1,2 - 1,4 рази вище, ніж у протототипу і аналога; за попередженням стресової лімфопенії в мієлограмі кісткового мозку в 1,4 - 1,6 рази вище, ніж у 65 протототипу і аналога.

Одержано принципові дані, які доводять позитивну антистресову кардіо-компетентність заявляемої композиції, у порівнінні із об'єктами порівняння.

Внаслідок стресу в м'язових волокнах спостерігається реакція на залізо за Перлсом у вигляді виразних зерен синього кольору, яка повністю відсутня у інтактніх нестресованих тварин. Ця реакція є результатом накопичення ионного заліза, має відчутно динамічний характер й на З - бгодину спостереження набуває дифузного характеру.

Введення заявляємої композиції обумовлює практичне нівелювання гістохімічних проявів накопичення заліза: в терміни 0 - бгодин після стресу при забарвленні за Перлсом видно лише псодинокі дрібні сині зернята, а на 24годину позитивна реакція на залізо в міокарді відсутня зовсім. 70 При цьому введення прототипу-Комплівіту та аналога-Юнікапу практично не запобігає накопиченню заліза в міокарді, як показника стрес-реакції: в усі терміни спостереження в міокарді залишаються дрібні сині гранули, а для аналога - навіть зберігається дифузний характер реакції.

Описаній морфологічній картині відповідають й переваги впливу цільового продукту на кількісний вміст заліза в тканині серця (таблиця 8 ).

Заявляема композиція обумовляює стійкий захист серцевого фону заліза при нормалізуючій його динаміці протягом всього періоду спостереження. В тих же обставинах введення продукту за прототипом (приклад 7) та аналога-Юнікапу залишає вміст заліза в міокарді суттєво підвищеним відносно норми в усі терміни спостереження. На 24годину після стресу цей показник для заявляємої композиції достовірно нормалізується, а для прототипу та аналога - в 1,3 та 1,8 рази перевищує норму і навіть стрес-контроль. Така активність, 2о нехарактерна для прототипу і аналога, може розглядатись як ефект винаходу, що непрогнозувався.

За сумою всіх функціональних показників заявляема композиція має суттєві переваги перед прототипом - засобом "Комплівіт" і препаратом "Юнікап-М" як аналогом. При цьому високий рівень активності заявляемого об'єкту забезпечується відносно звуженим діапазоном та зменшеним вмістом інгредієнтів, ніж в прототипі.

Максимальний антистресорний ефект та здатність до підвищення резистентності організму досягається сч ов Заявляемою композицією за прикладами Мо 1 - 4, тобто при наступному співвідношенні компонентів (мас. ч.): о

Тіаміну хлорид 1,5-2,5

Рибофлавін 08-12

Нікотинамід 6,0-9,0 «г зо Кальцію пантотенат 6,0-9,0

Піридоксину гідрохлорид 08-12 (Се)

Іон заліза(Ш) 0,50 - 0,65 «І

Іон цинку (П) 0,30 - 0,68

Іон марганцю (П) 0,06 -0,16 -

Іон міді (П) 0,07 - 0,15 с

Іон кобальту (П) 0,007 - 0,014

Іон хрому(Ш) 0,006 - 0,012

М-2,3-діметилфенілантранілат іон 11,80 - 16,50 «

За межами вказаних співвідношень цільова фармакологічна активність композиції дещо знижується (приклад ств) с 5) або зберігається на рівні, вже досягнутому при відносно меншому вмісті компонентів (приклад 6). На рівень ефекту композиції не впливає обрана для її застосування лікарська форма: гранульований порошок (приклади 1, з З та 4) або капсула (приклад 2).

Таким чином, внаслідок створення мікроелементно-вітамінної композиції, яка заявляється, досягається більш високий антистресорний ефект та можливість суттєвого підвищення резистентності організму, ніж у відомих с лікарських препаратів, в т.ч. у прототипа - засобу "Комплівіт" та аналога "Юнікап-М", при забезпеченні високої нешкідливості заявляемого об'єкту. Сполучення високої специфічної активності та нешкідливості - достеменно обумовлює відповідність заявляємої композиції принципам лікувально-профілактичного їх застосування з метою попередження наслідків стресів та підвищення резистентності організму людини.

Фо

І»

СТ г нн о ю С трзов| зов зв о» ве в во нн вв -маоне| 2,81) 2,61) 1,96). 2,0) 1,76) 2,65 п ва; ло ло ов 12) тв) от ваз во во во во ев в вв во во ео во Б ов 77 вело) ло ов ло) ча) ол 70 Примітки: 7) Приклад Ме2 є композицією, створеною за прикладом Мо1, яку розфасовано в капсули. "5 Об'єм водного розчину Маон однаковий для всіх прикладів і складає 9Омл. ие Якісний та кількісний склад допоміжних речовин однаковий для всіх прикладів і аналогічний вказаному в описі прикладу Мо1. 02 - - нти с то ОТ 29 п

Матрос» бив бив оо оо, ол 05, сч о п « зо їі « о воболу ло) ло, ов; 12.14 ов, вано») вот9, 625.95 5е, - з вві») 78 во, 8855593, Фо і весвому ло! ов ов| їз, лоб

Примітки: « 7) Приклад Ме2 є композицією, створеною за прикладом Мо1, яку розфасовано в капсули. "ху Якісний та кількісний склад допоміжних речовин однаковий для всіх прикладів і аналогічний вказаному в - с описі прикладу Мо1.

І» ще щ 0 моя лазять 11000000 ї» ще ї» пн ПЕ З Я ПО 0000 оПрототмпзаприладом! 111111 25

ПОП ПОЛОН КОНЯ НО о м бо фттаншшнннтннннтфнпнннншшшш

Композиція, яка заявляється: Виживаємість| геморагічні прояви) загальн. задовільний стан

00000000, во 00008696 ввів вв пн ТУ У ПО ПО нини ' периферійної крові в умовах нервово-м'язового стресу щі

Обектзаприкладоммю 11111111 Вміствкрові(бдо норми) на годину після стресу:

ПОН п ПОН НН НН З НН НС НС 31110191 96150 во юю 69611196 р01000060009,000008000000086о шов юю0ю05, р0100000800000008,00000800во, р, вр т

Пт НЄ т НЕТ ПОН НН ПОС НН НА 39000011 Корольов 0030 )0000460000000009000000005000000800000000о,

Фо - й периферійної крові в умовах радіаційного стресу з5 Фо « 940,1; б; - 0800000000100000з5о0110яви0111о80000зв г» є ПОН ПОЕТ ПОН У ОН НОЯ НОЯ п вовввязв6111мт08111ов 5000в6310000000100111ю80011яа6011006000000 23, и поп ПОН У ПОН У НОННННЄ К НОННННННЄ НОННННеК НННННННУ - г - ДН ИН т НН У ПОН У ННЯ орма-інтакт 36,3 48,0 3,0 «з» 00001171 мелоюроциютою клиниоритроюу тою 0 лифоцим (25) в 00000000 Кемлозиця яазаяаляєтья 00000000 й 00000100 вв вв 1000011 Пееттттатритадомі 0000011 7 131 хз 45 12,9 14,4 серця при стресі о 0 емподиця яазаядятя 11000000 й 00008844 0 прятядадмі 00000000 - о ормаянаюіо/11111111111111111111111ю с о

Claims (1)

1. Формула винаходу Мікроелементно-вітамінна композиція, яка має антистресорну активність та здатність до підвищення резистентності організму, що містить тіаміну хлорид, рибофлавін, нікотинамід, кальцію пантотенат, піридоксину в гідрохлорид і іони заліза(Ії), цинку (Ії), марганцю (ІІ), міді (І) та кобальту (Ії) в присутності відомих «о допоміжних речовин, яка відрізняється тим, що вона додатково містить іон хрому (П) і М-2,3-диметилфенілантранілат іон у вигляді його комплексів з іонами введених металів при наступному в співвідношенні компонентів, мас. ч.: «-- Тіаміну хлорид 1,5-2,5 (зе) Рибофлавін 0,8-1,2 Нікотинамід 6,0-9,0 Кальцію пантотенат 6,0-9,0 « Піридоксину гідрохлорид 0,8-1,2 Іон заліза(И) 0,50-0,65 З с Іон цинку (1) 0,30-0,68 ; з» Іон марганцю (Ії) 0,06-0,16 Іон міді () /0,07-015 Іон кобальту (Ії). 0,007-0,014 Іон хрому) 0,006-0,012 о м-2,3-диметилфенілантранілат іон 11,80-16,50. - о Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних Ф 20 мікросхем", 2002, М 5, 15.05.2002. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. «з»

   Ф) іме) 60 б5