UA44722C2 - Лікарський засіб пролонгованої дії для зниження рівня тестостерону - Google Patents

Abstract

Лікарський засіб пролонгованої дії для зниження рівня тестостерону містить фармакологічно ефективну кількість аналога рилізинг-гормону лютеїнізуючого гормону, обраного з групи, до якої входять ембонат сетрореліксу, ембонат антареліксу, ембонат нафареліну, ембонат триптореліну, ембонат ганіреліксу, ембонат антиду та ембонат А-75998 із розміром частинок між 5 та 200 мкм, і не містить полімеру, що зазнає біодеградації, та жирів.

Description

Опис винаходу

МИзобретение относится к иньекционньм суспензиям пролонгированного действия, содержащим 2 терапевтически активнье пептидь в виде плохо растворимьх, физиологически приемлемьх рентгеноаморфньх или кристаллических солей, а также к способу их получения.

В терапии пептидьй часто можно использовать надежно и с вьсокой биодоступностью только при парентеральном введений т.к. при оральном приеме они разлагаются ферментами; при назальном введений абсорбируется только небольшой процент дозьї, а при накожном введений вовсе не происходит абсорбции.

Поскольку пептидьй характеризуются только очень коротким периодом ополураспада в организме, парентеральное введение пептидньїх препаратов, например, аналогов рилизинг-г-ормона лютеинизирующего гормона (РГ-ЛГ), так назьіваемьїх суперагонистов и антагонистов РГ-ЛГ, должно применяться ежедневно для достижения желаемого зффекіа, состоящего для обеих групп веществ в подавлениий как лютеинизирующего гормона (ЛГ), так и фолликулостимулирующего гормона (ФСГ). 19 В результате у мужчин уменьшается образование тестостерона, а у женщин наблюдается снижение количества образуемого зстрадиола Зто назьівают химической кастрацией.

Аналоги РГ-ЛГ рассматриваются и как суперагонистьї, например гозерелин (Международное непатентованное название - МНН) или трипторелин (МНН), и как антагонистьії, например, цетрореликс(МНН), антид (МНН) или ганиреликс (МНН). Гозерелин и его синтез описанььй в ЮОгидве ої (Ше Ешіиге, 5(4), (1980), стр.191. Бузерелин и его синтез - там же, 4(3), (1979) стр.173 и Огоидв ої Тодау, 21,(305), (1985). Декапептил и его синтез - Огидз ої (пе Ешиге,З,(9), (1978), стр.645. Лейпролид и его синтез - там же, 7(12), (1982), стр.883.

Азалии В описан на стр.13-26 "СОНКН-Апафодцез - Те 5іайе ої (Пе Агі" (1993), Рагйпепоп Риризйпіпд Сгоирв

ЕЯ, В. І опептейй, М. Іпвіеї,

До сих пор не бьло удачньїх попьіток получить пролонгированнье фармацевтические препарать! аналогов с 29 РГ-ЛГ, обладающие замедленньім рилизинг-зффектом. Например, в патенте Великобританиий 2052258 описан. (У препарат с замедленньм рилизинг-зффектом, которьій содержит аналоги РГ-ЛГ в иньекционной форме из цинковой соли пептида, кунжутное масло и стеарат алюминия.

Различие между суперагонистами и антагонистами заключаеєтся в той что в случае применения супсрагонисюс механизм обратной связи приводит к нежелательному вьіделению большого количества сч гормонов в первьіе недели лечения, так назьіваемому внезапному обострению болезни, которое необходимо С преодолевать дополнительньмм лечением. В отличие от зтого, в случае применения антагонистов, например цетрореликса (МНН) фармакологический зффект проявляется немедленно, и без обострения Продолжение - снижения уровня половьїх гормонов в крови является стандартной терапией при паллиативном лечений «І карцином простать!ї и молочной железь! для снижения роста опухолей, зависимьїх от половьіїх гормонов, а также

Зо для лечения зндометриоза С химической точки зрения суперагонисть! РГ-ЛГ10 и антагонисть! являются нона- и т дека-пептидами. Зффективньм антагонистом РГ-ЛГ является цетрореликс, которьій представляет собой декапептид со следующей аминокислотной последовательностью:

Ас-ОМа!І-ОрсІ-Ріе-ОРа!І-Зег-Туг-ОСИ- ец-Агод-Рго-О-АІа-МН »5. Его синтез и фармакологические свойства описань! в «

Европейском патенте ЕР 299402. Цетрореликс ацетат является физиологически приемлемой солью. В З7З 70 предклинических и клинических исследованиях бьіло установлено, что, для снижения гормонального уровень с Іестостерона или зстрадиола до нужной степени вплоть до следующей иньекции, водньій раствор цетрореликса "з ацетата должен вводиться ежедневно. Длительность действия не может бьть увеличена из-за достижения пороговой дозь, хотя недельньй интервал введения вместо ежедневного уже бьл бьї заметньм положительньім шагом для хронических больньїх и негоспитализируемьїх пациентов. 75 До настоящего времени аналоги РГ-ЛГ применяются путем ежедневного однократного введения раствора те водорастворимьх солей в виде иньекционного раствора или многократное назальное введение бузерелина т» ацетата в виде носовьїх капель (Зиргеїтасі паза!) или нафарелина ацетата в виде носовьїх капель, которье производятся только в США. Как описано вьіше, для таких форм медицинских препаратов предопределена ї необходимость частого применения. Иньекции могут проводиться только врачом, носове капли могут должнь! ка 50 вводиться несколько раз в день. Обе лекарственнье формь плохо подходят для лечения хронических заболеваний. їз Патент ОБЕ-О5 4223282.1 оописьшвает получение микроинкапсулированием лекарственной /формь цетрореликса змбоната пролонгированного действия. Имплантатьь являются лекарственньми формами, позволяющими увеличить интервальі применения. Например, будучи введенной под кожу, цилиндрическая 59 капсула биологически разлагаемого сополимера поли(молочной-гликолевой кислотьї), содержащая гозелерин

ГФ) ацетат, может зффективно снижать уровень тестостерона (70іадех деро). Ежемесячнье иньекции суспензийи юю биологически разлагаемьх полимерньїх частиц, содержащих в качестве активного ингредиента лейпрорелин ацетат, таюке зффективно снижают уровень полового гормона в течениє зтого периода (Епаопе Мопаївдерої У),

Обе лекарственнье формь! пролонгированного действия описаньі в следующих патентах и патентньх бо заявках. Их прейимущество в интервалах между введениями сопровождается очевидньми недостатками, которье будут указань! ниже.

ЕР 0058481 описьіваєт состав и способ получения имплантатов. распространяемьїх под товарньім знаком 7оїадех?, Недостаток зтой лекарственной формь заключаєтся в дорогостоящем процессе получения б5 Милиндров, требующем зкструзионного оборудования и устройств для упаковки, которье вставляют цилиндрь! в специально сконструированнье шприць с очень толстой канюлей. Диаметр цилиндра составляет 1 мм, а длина

- несколько мм, что вьізьївает у пациентов болезненнье при введений ощущения и гематомьі. Желательно получение менее болезненньїх лекарственньїх форм.

ЕР 0052510 описьівает композицию и способ получения микрочастиц, содержащих, например, нафарелин ацетат. В присутствий хлорированньх углеводородов активньй ингредиент внедряеєется в сополимерь поли(молочной-гликолевой кислотьї). Применение в зтой композиции хлорированньїх углеводородов неизбежно, т.к. только в них растворимь! биоразрушаемье полимерь, необходимье іп мімо. Вьісокое остаточное содержание растворителей в лекарственной форме, полученной указанньм способом, составляет примерно 1000О0ррт и является недостатком. В соответствии с ранними представлениями хлорированнье углеводородь! 7/0 являются канцерогенами. Остаточное содержание растворителей в перевязочньїх материалах и медицинских препаратах сегодня ограничено значением «5Оррт в соответствии с Европейской фармакопеей (Рпагт Еигоре,

МоІ.4, М1, Магсп 1992). Указанньій способ обладаєт также тем недостатком, что вьїход активного вещества, заключенного в микрокапсуль, невелик из-за потерь пептида, в водной фазе, которая обязательно присутствует в процессе.

Уменьшение остаточного содержания растворителей ниже порогового значения для безопасности лекарств, если и возможно, то только при применениий трудоемких методов поледующей обработки. Например, заявлен способ снижения остаточного содержания растворителей с помощью субкритических концентраций СО».

В ОЕ 4023134 А1 использован аналогичньій описанному способ внедрения пептида в биоразлагающиеся полимерьі типа сополимеров поли(молочной-гликолевой кислоть). Согласно заявке, в зтом способе для го уменьшения потери активного ингредиента вместо ацетата пептида, внедренного в полизфир, применяют пептидную соль, нерастворимую в воде. Пептидньмми солями, нерастворимьми в воде, являются памоать, таннатьі. стеаратьь и пальмитать. Как уже упоминалось, недостатком способа является необходимость применения канцерогенньїх углеводородов, что создает проблему физиологически неприемлемого остаточньїх содержания растворителей хлорметана или хлороформа. с

В ЕР 145240 предложен другой способ внедрения водорастворимьїх солей пептидов. В усложненном способе активньій ингредиент внедряєется со значительньми потерями при переводе водного раствора і) активного ингредиента в биоразлагающиеся сополимерьй поли (молочной-гликолевой кислот) посредством множественной змульсии, при зтом недостатком способа остается применение хлорированньїх углеводородов.

В ЕР 505966 предложено внедрение бузерелина ацетата в сополимерь! поли(молочной-гликолевой кислоть) с зо посредством распьілительной сушки раствора: активньйй ингредиент-полимер, содержащего хлоруглеводородь!.

Недостатком указанного способа является применение канцерогенньїх хлоруглеводородов в качестве с растворителей. ї-

Недостатком применения хлоруглеводородов является не только вьісокое содержание остаточньх растворителей в готовой лекарственной форме, но и с зкологической точки зрения применение указанньх - з5 растворителей создает проблеми, связаннье с отходами производства и техникой безопасности. «г

В Международной заявке ММО 9214449 предложено внедрение бьістро растворимьїх пептидов, таких как гормонь! роста, в, например, лауриновую кислоту при смешиваний активного ингредиента с указанной кислотой, дальнейшем сплавлений и размальваний смеси после охлаждения в частиць, размером 10Омкм. В 05 5137669 предлагается получение таким же способом пролонгированьїхлекарственньїхформ антагонистов РГ-ЛГ для « последующего получения иньекционньйх суспензий с постепенньім вьіделением активного ингредиента. Общими 7-3) с факторами для обеих лекарственньїх форм является необходимость применения носителей для

Й пролонгированного действия, и только в результате трудоемкого процесса получают иньекционнье препарати. а До настоящего времени бьло невозможно доказать толерантность жировьїх носителей, их надежность и воспроизводимость вьіделения активного вещества. В случае внедерения в жировую оболочку возможнь! побочнье зффекть в виде инкапсуляции, что не допустимо при длительном лечений в течение нескольких лет. їх В ОЕ 3430852 для бромкриптин мезилата, активного ингредиента, для которого очень трудно получить пролонгированную лекарственную форму, синтезирован новьій полизфир в виде полиолозфира, например, о глюКкозьІ с молочнНой и гликолевой кислотой для получения желаемого режима вьіделения активного вещества. -І В зтом случае бьіло необходимо провести исчерпьівающее и дорогое исследование и токсикологические пробь! для получения лекарственной формь! с достаточно длительньмм временем действия, поскольку бьло ясно, что о никакая более простую и дешевую лекарственная форма не сможет дать такой же зффект,

Ге Змбоноваякислота(4,4"-метилен-бис-(3-окси-2-нафталиноваякислота) часто применяєтся в фармацевтических препаратах для получения слабо растворимьїх солей медицинских препаратов. Указаннье соли дольше расходуются в организме и таким образом проявляют пролонгированньй зффект. (Котррз дво Спетіев-І ехісоп, Зішндаг 1976, стр.1007).

Обнаружилось, что препарат по п. формуль! изобретения 1 проявляет неожиданное пролонгированное (Ф, действие и улучшенньй зффект без применения биоразлагаемьсх полимеров или жиров. Наблюдалось не ка только пролонгированное действиєе, измеренное по длительности подавления гормонов, но также подавлялся рост опухоли в непропорциональной степени. 60 Предложенньй препарат может бьіть также использован в качестве агониста РГ-ЛГ, например в лейпролиде, бузерелине, гозерелине и трипторелине. Он также может бьть использован и в качестве антагонистов бомбезина и соматостатина и аналогов Р-ФРГ(рилизинг-фактора ростового гормона).

Зкспериментальнье исследования проводились в соответствий со следующей методикой: Ингибиторньй зффект на карциноме молочной железь), вьзванной ДМБА (7,12-диметилбенз(Іа|-антраценом) у крьс 65 Зргадое-Оаулеу

Способ:

Крьісам-самкам Зргадце-Оаміеу в возрасте 50 дней (диета животньїх: Альтромин К, вода ай ІБ) вводили перорально 20мг ДМБА, растворенного в їмл оливкового масла, через желудочную трубку. Наблюдение за ростом опухоли проводилось еженедельно пальпацией животньїх. Примерно у 9095 животньїх наблюдались опухоли, подходящие для зкспериментального опьта, на 35-ьій - 70-ьій день после введения.

Вес опухоли определялся по методике ЮгисКгеу,Н., 5їеіппой,О МаКауата,М., Ргеиззтапп,К., Апдег,К.(1983).

ЕхрегітепієПе Вейгаде 20ит ОЮовіз-Ргобіет іп дег Кгерз-Спетоїпетріе па 2!иг УУйКипудвзулеізе моп Епаохап, (Зкспериментальньй вклад в изучение проблемь! доз в хемотерапиййи рака и механизма действия зндоксанла, рівсп.Меа Му/всіп.88:651 70 Способ бьл подтвержден сравнением данньїх о весе опухоли, определенньїх пальпацией, с данньми, полученньіми непосредственньім взвешиванием (после удаления опухоли). Козффициент корреляции составил 0,98. После того, как общий вес опухолей достиг примерно г, животнье бьіли случайньм образом распеределень! в группь! контроля по 7 животньїх каждая. Лечение начиналось немедленно после подкожного введения испьтуемьх веществ. Гормональное состояние животньїх определялось посредством мазка /5 Вагинальньх клеток, окрашенньх метиленовьм синим, и изучалось в соответствий с методикой опев,Т.С.,

Мой, Нипбк.С(1972): Те депіа! взувіет, іп: Моподгари5 оп раїйоіоду ої Іарогаїгу апітаів зропзогей Бу

Ше Іпіегпайопаї І бе Зсіепсе іпвійше (Зргіпдег, М.М. опдоп).

Зкспериментальнье даннье представлень! на рис.1. Кривая веса опухоли для нелеченньїх контрольньх животньїх показьівает отсутствие замедления роста. Кривье 1(7) и 2(0) соответствуют лечению цетрореликс 2о ацетатом в двух различньїх носителях. Протяженная кривая З показьівает резкое снижение веса опухоли после лечения змбонатом.

Поскольку в зтом случае лечение проводилось только разовой дозой, опухоль продолжала расти, т.к. при разовой дозе не происходит уничтожение всех опухолевьїх клеток.

Предложенньй препарат представляет собой ренттеноаморфньїй осадок декапептида цетрореликса в виде с об боли змбоновой кислоть. Водная суспензия зтого осадка, которая может содержать изотонизирующие добавки, о проявляет, по сравнению с водньм раствором пептида, существенное пролонгирование действия на подопьІтньІх животньІх. Неожиданно оказалось что продление действия бьло примерно таким же, как при иньекции суспензии, которая содержала осадок змбоната пептида в биоразлагаемом полимере, например, сополимерах поли(молочной, гликолевой кислоть)). В частности зтот результат оказался неожиданньм потому, су зо что, как указьівалось вьіше, только очень трудоемкие лекарственнье формь, которье, как правило, содержат активньій ингредиент в биоразлагающихся полимерах, до настоящего времени проявляли значительное с пролонгированное действие ї-

Зтот результат бьіл неожиданньм еще и потому, что, в соответствии с ).РПпапт РНагтамо). 47, 878-883 (1985), пуриметамин, производное 2,4-диаминопиримидина, не проявило различий по сравнению с его солью « з5 ЗМбоновой кислоть! сточки зрения фармакокинетики, изменений плазменного уровня и АОС (кривой «г зависимости концентрации от времени) после подкожного введения мьішам.

Аналогично, имипрамин НСІ не проявил различий по сравнению с имипрамин змбонатом после орального введения (Іпаіап Ддогпа! ої Ріпізіоюду апа РІагтасоЇоду 25,(4), 331-338(1989). Кристаллические иньекционнье суспензий непептидньїхх медицинских препаратов, таких как преднизолон или триамцинолон являются « известньми препаратами с пролонгированньм действиєем, также как кристаллические цинковье суспензии (7-3) с инсулина, применяемье для лечения диабетов. Инсулин содержит 51 аминокислоту. Все последние перечисленнье препарать! являются кристаллическими, о то время как предложенньій препараї по данньім ;» рентгеновского дифрактометрического анализа является аморфньім. Размер частиц предложенного препарата составляет 5 - 200мкм. Цетрореликс змбонат с размерами частиц меньше 5мкм проявляет пролонгирующий зффект меньший, чем у предложенного препарата. Аналогично, цетрореликс змбонат с размерами частиц ї5» больше 200мкм проявляет более слабьій пролонгирующий зффект, чем у предложенного препарата.

Другим преимуществом предложенного препарата является более вьісокая степень соответствия: качество о лекарства, полученного из данного препарата, более стабильно. -І Пример!1

Водньій раствор змбоновой кислотьї, содержащий избьток щелочи, добавили к ацетатному раствору о цетрореликса ацетата. При зтом взяли зквимолярное количество пептида (рассчитанное на свободное

Із основание) по отношению к змбоновой кислоте. В результате образовались желтье кристалль! змбоновой кислотьі. При добавлениий разбавленного раствора гидроксида натрия до рН 7-7,5 змбоновая кислота растворилась и соосадилась с декапептидом в виде водной соли змбоната цетрореликса. Молярное в боотношение пептид: змбоновая кислота составило 2:1 (моль/моль). Осадок отфильтровали, промьіли водой и вьсушили.

Ф) Пример2 ка Ацетат цетрореликса и змбоновую кислоту в зквимолярном соотношений растворили в диметилацетамиде, и раствор добавили по каплям в воду. Бельій осадок композиции цетрореликс змбонат пептид : змбоновая бо Кислота с соотношением 2:1 (моль/моль) отфильтровали и внісушили.

Примерз

Цетрореликс и змбоновую кислоту в молярном соотношений 1:1,6 растворили в диметилацетамиде, с возможньм содержанием водь, и полученньій раствор добавили по каплям в воду. Желтьій осадок отфильтровали и вьсушили. Полученньй осадок перевели в пастообразное состояние 7090 зтанолом, 65 Вьісушили при З35"С и просеяли через сито с размерами 80-125мМкм.

Примері

Щелочной раствор змбоната добавили к водному зтанольному раствору ацетата пептида в молярном соотношений пептид:змбоновая кислота, равном 2:1. Бельйй осадок отфильтровали и вьісушили. Сухой осадок смочили 5095 зтанолом, внісушили в вакуумной сушильной камере и пропустили через сито. Полученньїй бельй осадок содержит композицию пептид : змбонатная соль в соотношений 2:1 (моль/моль).

Примербо

Щелочной расі вор змбоната добавили к нодно-зтанольному раствору ацетата пептида в молярном соотношений пепжд:змбоновая кислоїа, равном 1:1,6. Желтьїй осадок отфильтровали и вьісушили. Вьісушенньй осадок смочили 5095 зтанолом, вьісушили в вакуумной сушильной камере при 357С и просеяли через сито. 7/0 Полученньй желтьй продукт содержал пептид-соль змбоната в соотношений 2:1 в избьтке змбоновой кислоть!.

Зксперименть! по продолжительности действия на животньх:

Суспензии осадков ввели подкожно криісам-самцам в дозе 0,5мг цетрореликса на кг веса тела и измеряли после введения действие пептида по уровням тестостерона в плазме. Действие цетрореликса заключается в снижении уровня тестостерона. МИньекционную суспензию тестировали в соответствий с ОЕ 40232134 А1. /5 Указанная суспензия содержала змбонат пептида в сополимерах поли(молочной, гликолевой кислот).

Продолжительность действия лекарственной формь! цетрореликса без рилизинг-зффекта определили при исследований водного раствора ацетата цетрореликса.

На фиг.3 показано значение уровня тестостерона, определенного после З00час. введения криісам-самцам водного раствора ацетата цетрореликса (0-20761). Зффект подавления тестостерона достигался в течение 6 го часов после введения. Подавление до значения ниже Інг/мл еще можно бьло отметить у двух животньх через 24час., а у трех других через 48час. или два дня

На фиг.2 показан уровень тестостерона после Зб0Очас. у четьірех животньх (М 11-14) после введения той же дозьі цетрореликса в виде суспензий змбоната цетрореликса (0-20762) без вязких добавок, полученной в

Примереї (0-20762). Подавление тестестерона также достигалось спустя бчас. после введения, уровни сч об повьішались вьіше нг/мл у одного животного спустя 192чабс. (восемь дней), у других трех животньїх достоверно о продолжалось до девятого дня.

На фиг.4 показаньї изменения уровня тестостерона у крьіс, при лечениий змбонатом согласно изобретению (размер частиц 80-125мкм).

Сравнение фиг.2-3 с фиг.4 убедительно показьівает преимущество предложенного препарата. с зо Формуль! пептмдов

Антареликс: с

Ас-0-МаІ-0-(рСІ)Р пе-О-Ра1І-Зег- Тут-О-Нсеі-І ец-І ув(іРг)-Рго-0-АІа-МН» М

Ганиреликс:

Ас-0-МаІ-0-(рСІ)Р пе-О-РаІ-Зег- Туг-О-пАга(ЕС)-Геш-пАга(Е)-Рго-О-Аїа-МН о «

Антид: «Е

Ас-0-МаІ-0-(рСІ)Р пе-О-Раї1-Зег-І ув(Міс)-О-І ув(Міс)-І ец-І ув(ІРг)-Рго-О-АІа-МН »

А-75998;

Ас-0-МаІ-0-(вСІ)Р пе-О-Раі-зег-ММетуг-О-І ув(Міс)-І ец-І ме(ІРг)-Рго-О-АІа-МН»

Бомбезим: « роїш-СіІп-Аго-Гец-сС1у-Азп-СІп-Ттр-АІа-МаІ-ст1у-Нівз-І еи-МеЇ-МН 2 з с Сокращения

ЕФ Дизтил ;» пАга Гомоаргинин

Нсі Гомоцитруллин

ІРг Изопропил їх Міс Никотинил

ММетуг М-Метил-тирозин щ»

Ше

Claims (3)

1. Формула винаходу з 50 ГК 1. Лекарственное средство пролонгированного действия для снижения уровня тестостерона, содержащее активное вещество на основе озмбоната аналога рилизингі--с-рмона лютеинизирующего гормона и фармацевтически приемлемьй носитель, отличающееся тем, что оно содержит фармацевтически зффективное Количество аналога рилизинг-гормона лютеинизирующего гормона, вьібранного из группьі, включающей змбонат Цетрореликса, змбонат Антареликса, змбонат Нафарелина, змбонат Трипторелина, змбонат Ганиреликса, (Ф; змбонат Антида и змбонат А-75998, размер частиц которого находится в интервале от 5 до 200 мкм, и не ГІ содержит биоразлагаемого полимера и жиров.
2. 2. Лекарственное средство по п. 1, отличающееся тем, что размер частиц указанного змбоната находится в бор Мнтервале от 10 до 150 мкм.
3. 3. Лекарственное средство по п. 1, отличающееся тем, что размер частиц указанного змбоната находится в интервале от 20 до 125 мкм. б5