WO1994019527A1 - Preparation de cellulase et son utilisation pour le traitement des fibres de cellulose - Google Patents

Description

明 細 書 セ ルラ ー ゼ製剤お よ びそれを用 い た セ ル ロ ー ス系繊維の処理方法 発明 の背景

技術分野

本発明 は、 セ ルラ 一 ゼを含んでな る 酵素製剤 （ enzyme preparation) ヽ すな わ ち セ ノレラ ー ゼ製剤 ( ce 11 u 1 se preparation ) 、 お よ び、 そ れを用 い た セ ノレ ロ ー ス系繊 維の処理方法 に関 し 、 更に詳 し く はセ ル ロ ー ス系繊維の 強度低下を抑制 し つつ、 セ ル ロ ー ス系繊維の色、 風合い を改善す る こ と がで き る セ ルラ ー ゼ製剤に関す る 。

背景技術

セ ル ロ ー ス系繊維をセ ルラ ー ゼを含有 し た水溶液で処 理 し 、 そ れに よ つ てセ ル ロ ー ス系繊維の色、 風合い な ど の諸性質が改善で き る こ と は広 く 知 ら れて い る 。 こ の処 理 は、 減量カ卩ェ ( loss in weight treatment) 、 ス ト 一 ン フ リ ー ス ト 一 ン ゥ ォ ッ シ ュ プ ロ セ ス （ stone-free sto ne-washed process ) な ど と 呼ばれ、 特に こ の よ う な加 ェが さ れた セ ル ロ ー ス系繊維は ス ト ー ン ゥ ォ ッ シ ュ ト デ ニ ム様 ( stone-washed d em i m l ike ) と 呼 ί れ る 。

こ の処理 に関 し て は、 例え ば繊維加工用製剤 と し て、 特開昭 6 2 - 1 7 4 2 9 8号、 特開平 4 — 8 2 8 7 号、 特表平 4 一 5 0 0 7 0 2号な どに記載の も のが提案 さ れ てお り 、 ま た繊維加工方法 と し て特開平 4 — 1 8 5 7 7

5号、 特公平 2 - 1 9 2 3 5号、 特開平 2 - 8 0 6 8 0 号、 特開平 3 - 1 6 7 3 7 8号、 特開平 2 — 8 0 6 7 3 号、 特公平 4 一 1 3 4 7 1 号、 特開平 3 — 1 6 7 3 6 6 号、 特開平 3 — 2 4 1 0 7 6号、 特開平 3 — 2 4 1 0 7 7 号、 特公平 2 — 2 0 7 5 1 号、 特公平 4 一 1 3 4 7 0 号に記載の も のが提案 さ れてい る。

し 力、 し なが ら 、 一般に、 セノレラ ー ゼに よ っ てセ ル 口 一 ス系繊維を処理す る と セ ル ロ ー ス系繊維の強度が低下 し て し ま う こ と 力 指摘 さ れて い る 。

こ の よ う な セ ル ロ ー ス系繊維の強度低下を防止す る た め、 例え ば処理時間を短縮す る 方法が提案 さ れて い る

(特公昭 5 2 — 4 8 2 3 6号） 。 し 力、 し な 力 ら 、 本発明 者の知 る 限 り では、 こ の方法で は、 繊維の強度低下は抑 え ら れ る が、 そ の繊維の改質の程度は十分で は な い。

さ ら に繊維強度の低下を抑制す る方法 と し て種々 の方 法が提案 さ れてい る 。 例え ば、 化学的前処理を施す方法

(例え ば、 特公平 1 — 2 3 5 9 1 号、 特公平 2 - 4 0 7 8 7 号、 特開平 2 - 2 1 6 2 8 2号、 特開平 3 — 5 1 3 7 6 号、 特開昭 6 0 — 9 9 0 8 4 号） 、 樹脂 ま た は塩類 をセル ラ ー ゼと と も に共存 さ せ る 方法 （例え ば、 特開平 2 — 2 1 6 2 8 3号、 特開平 4 一 5 0 3 8 0 号） 、 化学 的後処理を施す方法 （例え ば、 特開平 4 一 5 0 3 6 5号） 、 プラ ズマ を用 い た前処理を施す方法 （例え ば、 特開平

1 一 2 6 0 0 6 7 号） 、 非セ ル ロ ー ス系繊維 と 組み合わ せ る 方法 （例え ば、 特開平 3 - 9 7 9 7 2号、 特開平 3 — 2 3 4 8 7 6 号） 、 起毛処理 と 組み合わせ る 方法 （例 え ば、 特開平 4 — 1 8 1 7 4 号） な どが知 ら れて い る 。 し か し な力 ら 、 こ れ ら の方法 も 、 本発明者 ら の知 る 限 り では、 そ の処理の効果が十分でな い、 セ ル ラ ー ゼに よ る 処理に よ っ て本来得 ら れ る 風合い と は異な る も の に仕上 が る な ど、 改善の余地を残す も のであ っ た。 ま た、 各種 の薬品の添加は、 装置や機材の損傷、 作業の危険性な ど を伴 う こ と があ り 、 さ ら に、 廃水の処理が困難に な る な どの新た な課題を生む場合があ る ので好ま し く な い と い る 。

と こ ろで、 セ ルラ ー ゼ製剤は一方で衣料用洗剤への添 加剤 と し て も 開発力 な さ れて い る 。 こ の用途は、 セ ノレ ラ ー ゼの結晶性セ ル ロ ー ス に非吸着性の成分、 特に結晶性 セ ル ロ ー ス に非吸着性のェ ン ド グルカ ナ一 ゼ成分、 が結 晶性の高い領域に対 し て は見掛上ほ と ん ど作用せず、 汚 れを閉 じ込めてい る 繊維の非結晶部分のみ に作用 し こ れ を除去す る と の知見に基づ く も のであ る （ Agric. Biol .

Chem .. 53 ( 5 ) .1275 - 1281.1989 ) ₀ こ こ での セ ノレ ラ ー ゼ は、 セ ル ロ ー ス の非結晶部分 に の み作用 し てそ の汚れを 落 と す こ と を 目 的 と し てお り 、 こ の よ う な セ ルラ ー ゼで はセ ル ロ ー ス系繊維の風合い や色の改善の効果は無論期 待で き な い。

ま た、 特開昭 6 3 — 2 6 4 6 9 9 号に は、 セ ル ロ ー ス の結晶の程度 （すな わ ち 、 高結晶 ま た は非結晶 も し く は 低結晶性） と そ の分解性か ら セ ルラ 一 ゼを評価 し た と の 記述がな さ れて い る 。 し か し 、 こ の公報は衣料用洗剤組 成物を提案す る に ど どま る 。 事実、 こ の セ ルラ ー ゼに よ つ て はセ ル ロ ー ス系繊維の風合いや色の改善を行 う こ と は出来な い。

さ ら に、 セ ル ロ ー ス系繊維の処理に お い て、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を示すエ ン ド ダルカ ナー ゼ成分が重要 であ る と し た提案 も な さ れて い る （特開昭 5 7 — 2 3 6 9 9 号、 特表平 3 — 5 0 4 0 8 0号） 。 し 力、 し 、 こ れ ら の提案 も衣料用洗剤への添加剤につ い て の も のであ っ て、 減量加工 さ ら に は繊維の強度低下の抑制 と の観点か ら の も の で は な い 。 事実、 こ れ ら の セ ノレ ラ ー ゼ に よ っ て は繊 維の風合い や色を充分に改善す る こ と はで き す、 ま た そ の処理に は繊維の強度低下が伴 っ てい た。 確か に 、 木綿 の よ う な結晶化度の高い繊維の強度 と 、 結晶領域の状態 と の 間 に は関連があ る こ と が指摘 さ れて い る （繊維物理 学 7 0 〜 7 1 頁 ： 繊維学会編、 繊維便覧加工編 1 0 4 2 〜 1 0 4 3頁 ： 繊維学会編） 。 し か し 、 上記事実は、 結 晶性セ ル ロ ー ス への吸着性を示すェ ン ド グルカ ナ ー ゼ成 分の みを考慮 し た だけでは、 繊維の強度低下を防止で き な い こ と を示唆 し てい る。 以上の よ う に 、 セ ノレ ラ ー ゼを用 い た セ ノレ ロ ー ス系繊維 の風合い、 色を改善す る 方法 に お い て は、 そ の繊維の強 度低下の抑制が課題 と し て存在 し て い た と い え る 。 本発 明者等の知 る 限 り で は、 現在一般的 に用 い ら れて い る セ ルラ ー ゼ製剤を用 い た場合、 加工前 と 比較 し て 5 % の減 量率に お い て、 繊維強度 （番手あ た り の相対残存引 っ 張 り 強度） は加工前の 6 5 %程度ま で低下 し て し ま う 。

発明の概要

従 っ て、 本発明 はセ ル ロ ー ス系繊維の強度低下を抑制 し つつ、 セ ル ロ ー ス系繊維の色、 風合い を改善す る こ と がで き る セ ルラ ー ゼ製剤の提供をそ の 目 的 と し てい る 。

本発明者 ら は、 今般、 セ ル ロ ー ス系繊維の処理 に お い て、—結晶性セ ル ロ ー ス へ の吸着性を有す る セ ルラ ー ゼ成 分の特定の活性比が重要であ る と の知見を得た。 本発明 は こ の知見に基づ く も のであ る 。

具体的に は、 それに よ つ て処理 さ れた繊維が減量率 5 % に おい て番手あ た り 7 5 %以上の相対残存引 っ 張 り 強 度を保持す る こ と を特徴 と す る セ ルラ ー ゼ製剤であ る 。

よ り 好ま し い態様 に よ れば、 本発明 に よ る セ ノレ ロ ー ス 製剤は、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を有す る セ ルラ ー ゼ を 含有 し 、 かつ 、 該 セ ノレ ラ ー ゼの C M C a s e 活性 に 対 す る ア ビセ ラ ー ゼ活性の比 （ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C a s e 活性） が 0 . 1 以上であ る も の、 であ る 。 図面の簡単な説明

第 1 図は市販の セ ルラ ー ゼを陰イ オ ン交換ガ ラ ム を用 い濃度勾配をか け た N a C 1 溶液で溶出 し た 際の溶出パ タ ー ン を示す も のであ る 。

第 2 図 は本発明 に よ る セ ルラ ー ゼ製剤に よ っ てセ ノレ 口 ー ス系繊維を処理 し た と き の 、 ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C a s e 活性の比 と 、 繊維の残存強度の関係を示す グラ フ であ る。

発明 の具体的性説明

セ ルラ ー ゼ と はセ ル ロ ー ス を加水分解す る 作用 の あ る 酵素の総称であ る が、 本発明 に よ る セ ルラ ー ゼ製剤は、 ま ず、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を有す る セ ルラ ー ゼを 含んでな り 、 さ ら に そ の結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を有 す る成分は、 そ の C M C a s e 活性に対す る ア ビセ ラ ー ゼ 活性の比が 0 . 1 以上 と な る も のであ る 。

本発明 に お い て、 セ ルラ ー ゼ製剤中 に結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を有す る 成分が含ま れてい る か否かは、 後記 す る 「結晶性セル ロ ー ス に対す る 吸着性の評価」 に従 つ て評価す る 。 すな わ ち 、 セ ルラ ー ゼ と 結晶性セ ル ロ ー ス と を接触 さ せて、 後記す る 「結晶性セ ル ロ ー ス に対す る 吸着性の評価 J の条件の も と で結晶性セ ル ロ ー ス に吸着 す る 成分 と 吸着せずに上澄み に残 る 成分 と に分け、 最初 の セ ノレ ラ ー ゼ の タ ン パ ク 量力、 ら上澄み に残 っ た セ ノレ ラ ー ゼの タ ンパ ク 量を引 い た タ ンパ ク 量 と し て、 そ の存在を 確認す る こ と がで き る 。

本発明 に お い て は、 さ ら に上記結晶性セ ノレ ロ ー ス に吸 着性を有す る 成分 は、 そ の C M C ase 活性に対す る ア ビ セ ラ ー ゼ活性の比 （すな わ ち 、 ア ビセ ラ ー ゼ活性 （ U Z g ) を C M C ase 活性 （ U Z g ) で除 し た値 ： 以後、 「 ア ビ セ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性」 と 表す場合があ る ） 力 0 . 1 以上、 好ま し く は 0 . 2 5 以上、 最 も好ま し く は 0 . 4 以上 と な る も のであ る 。

こ こ で、 ア ビセ ラ ー ゼ活性 と は例え ば Bios ci . Biotec h. Bioehero. , 56 ( 10 ) , 1523— 1528 , 1992ま た は 「食司料添力 U 物の成分規格等収載書第 5 版」 、 55〜 56頁 （社団法人 日 本化学飼料協会発行） に記載の方法に よ っ て、 ま た C M C ase 活性 と は例え ば Pure & Appl . Chera. , vol .59, No. 2 , 257 - 268 , 1987に記載の方法に よ つ て測定す る こ と がで さ る ο

な お、 後記す る 理由か ら 、 本発明 に よ る セ ルラ ー ゼ製 剤は、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を示 さ な い成分の存在 を排除す る も のでは な い。 従 っ て、 あ る セ ルラ 一 ゼにつ い て結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を示す部分の ァ ビセ ラ ー ゼ活性 / C M C ase 活性の値の測定は次の よ う に行 う こ と が可能であ る 。 すな わ ち 、 あ る セ ノレラ ー ゼにつ い て、 こ の セ ノレ ラ ー ゼ 全 体 の ァ ビ セ ラ ー ゼ活性お よ び C M C ase 活性の値を測定す る 。 一方で、 後記す る 「結晶性セ ル ロ ー ス に対す る 吸着性の評価」 の条件の も と で、 結晶 性セ ル ロ ー ス へ の吸着性を示す成分を結晶性セ ル ロ ー ス と と も に沈殿 さ せ、 吸着性を示 さ な い成分を上澄み に存 在 さ せ る 。 次に、 こ の上澄み に存在す る成分の ア ピセ ラ ー ゼ活性お よ び C M C ase 活性を前記方法に準 じ て測定 す る 。 そ し て、 セルラ ー ゼ全体の ア ビセ ラ 一 ゼ活性お よ び C M C ase 活性の値か ら 、 上澄み に存在す る 成分の ァ ビセ ラ ー ゼ活性お よ び C M C ase 活性の値をそれぞれ引 く と 、 結晶性セ ルラ ー ゼに吸着性を有す る 成分の ア ビセ ラ ー ゼ活性お よ び C M C ase 活性の値がそれぞれ得 ら れ る こ と と な る 。 こ れ ら の値力、 ら 、 結晶性セ ノレ ロ ー ス に吸 着性を有す る 成分の ア ビセ ラ 一 ゼ活性 Z C M C ase 活性 の値を得 る こ と がで き る 。 よ り 具体的な活性の測定法は 後記す る 。

本発明 に よ る セルラ ー ゼ製剤に含ま れ る セ ルラ ー ゼ成 分 と し ては、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を示 し かつ そ の 成分の ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性が 0 . 1 以上 であ る よ う に、 で き る 限 り 精製 さ れた も のであ る のが好 ま し い。 し 力、 し なが ら 、 一方で結晶性セ ル ロ ー ス に吸着 性を示 さ な い成分は通常は結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を 示す成分の作用 を妨げず、 ま た繊維の強度低下を引 き 起 こ す こ と がな い こ と を本発明者 ら は確認 し て い る 。 さ ら に、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を有す る 成分の作用 に よ り 結晶構造に乱れが生 じ た場合に、 結晶性セ ル ロ ー ス に 吸着性を示 さ な い成分が存在す る こ と は、 結晶性セ ル 口 ー ス に吸着性を有す る 成分の作用 を よ り 有利にす る 場合 力 あ る と 考え ら れ る 。 従 っ て、 本発明 に よ る セ ノレ ラ ー ゼ 製剤にお い て は、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を示 さ な い 成分が含 ま れ る こ と を絶対的 に排除す る も の で は な い。

ま た、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を示 さ な い成分につ い て の ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性の値は上記 と 同様の理由か ら 特に 限定 さ れ る も の で は な い。

本発明 に お い て、 ア ビセ ラ ー ゼ活性 / C M C as e 活性 力《 0 . 1 以上で あ る と は、 そ のセ ルラ 一 ゼ製剤が用 い ら れ る 温度 お よ び p H な ど の 条件 に お い て前記活性比力 0 . 1 以上であ る こ と を意味す る。 すな わ ち 、 あ る 温度 お よ び p H条件に お い て結晶性セ ル ロ ー ス の吸着性を有 す る セ ノレラ ー ゼ成分の ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活 性が 0 . 1 未満であ っ て も 、 そ の セルラ ー ゼ製剤を実際 に使用す る 際の条件下に お い て前記活性比が 0 . 1 以上 であ る も の は全て本発明 に包含 さ れ る も の と す る 。

本発明 に よ る セ ルラ 一 ゼ製剤であ る と 、 それに よ つ て 処理 さ れた セ ル ロ ー ス系繊維は十分な風合い、 色な どの 改善が得 ら れ る 一方で、 そ の繊維強度が大 き く 低下す る こ と がな く 有利であ る 。 具体的 に は、 繊維の減量率 5 % に お い て、 セ ル ロ ー ス系繊維は番手あ た り 約 7 5 %以上、 よ り 好ま し い態様に よ れば 8 5 %以上、 の相対残存引 つ 張 り 強度を有す る こ と と な る 。

本発明 に よ る セ ル ラ ー ゼ製剤が適用で き る 繊維は、 い わ ゆ る セ ル ロ ー ス系繊維であ っ て、 具体的 に は デニム 、 木綿、 麻な どが含 ま れ る 。 本発明 に よ る セ ルラ ー ゼ製剤 で処理 さ れた こ れ ら セ ル ロ ー ス系繊維は、 そ の風合い、 色な どが改善 さ れ、 特に デニム に あ っ て は ス ト ー ン ゥ ォ ッ シ ュ 様加工が施 さ れ る 一方で、 処理後 も そ の繊維強度 を十分に保持す る 。

な お、 こ こ で繊維の減量率 と は、 次の式に よ り 定義 さ れ る も のであ る。

^^添加加工後の重量 職加工後の重量

' 率 (%) X 100

し 職無添加加工前の ί 職加工前の重量 ま た、 番手あ た り の 引 つ 張 り 強度 と は、 産業用繊維資 材ハ ン ドブ ッ ク 、 8頁 （ 日 本繊維機械学会 • 産業用繊維 資材研究会編） の記載に基づ く も のであ る 。 すな わ ち 、 試料を引 っ 張 り そ れが切断 し た時の荷重を初期断面積で 除 し た も のが一般的な 引 つ 張 り 強度であ る が、 こ

の断面積に代え て単位長 さ あ た り の重 さ を採用 し *_ 口 の値を、 「番手あ た り の 引 っ 張 り 強度」 と 呼ぶ こ と と す る 。 ま た、 繊維の番手あ た り の引 つ 張 り 強度の処理に よ る変化は、 次の式に よ り 定義 さ れ る 相対残存引 つ 張 り 強 度 ( elative Residual tenacity) と し て 、 本発明 に お い て は評価す る も の と す o 相対残存引っ張り強度 (%) = (酵素加工後の強度 無添加加工後の強度） XI 00 本発明 に よ る セ ルラ ー ゼ製剤は、 従来公知の セ ルラ ー ゼか ら 、 結晶性セ ル ロ ー ス への吸着性を有 し かつ ア ビセ ラ 一 ゼ活性を有す る成分を増強す る こ と に よ っ て得 る こ と がで き る 。 具体的 に は、 カ ラ ム ク ロ マ ト グラ フ ィ ー な どの手法に よ っ て、 ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性 が 0 . 1 を下回 る 成分を除 き 、 上記活性比が 0 . 1 以上 と な る 分画を回収す る こ と に よ っ て得 る こ と 力《で き る 。 さ ら に、 上記性質を有す る セ ルラ ー ゼを コ ー ドす る 遣伝 子を単離 し て遺伝子組換え の手法に よ っ て得 る 方法、 さ ら に そ の よ う な遺伝子の発現調節領域を操作す る こ と に よ っ て得 る 方法な どが挙げ ら れる 。

本発 明 に よ る セ ル ラ ー ゼ製剤 の 作用 温度お よ び作用 P H は使用す る セ ルラ ー ゼ成分 に よ っ て適宜決定で き 特 に 限定 さ れ る も のではな いが、 従来公知の セ ルラ ー ゼか ら 調製 さ れた セ ルラ ー ゼであ る場合、 酸性ま た は中性領 域で結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を有す る の が好ま し く 、 ま た、 好ま し い作用温度は 3 0 〜 8 0 °C、 よ り 好ま し く は 4 0 〜 7 0 で 、 最 も好ま し く は 4 5 〜 6 5 。Cであ り 、 ま た好ま し い作用 p H は 3 〜 8、 よ り 好ま し く は 4 〜 7 で あ る 。

従 っ て、 本発明の好ま し い態様に よ れば、 本発明 に よ る セ ノレ ラ ー ゼ製剤 は 、 3 0 〜 8 0 て 、 よ り 好 ま し く は 4 0 〜 7 0 、 最 も 好 ま し く は 4 5 〜 6 5 。Cの温度で、 ま た p H 3 〜 8、 よ り 好ま し く は 4 〜 7 の条件下で使用 さ れ る の力《好ま し い。

本発明 の好ま し い態様に よ れば、 好ま し い セ ルラ ー ゼ 成分 と し て、 ト リ コ デルマ 由来のセ ルラ ー ゼであ っ て、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を有 し かつ そ の成分の ァ ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性が 0 . 1 以上であ る 性質の 他に

♦ 平均分子量約 5 9 k d ( S D S — P A G E に よ る ） ♦ 等電点約 3 . 8 〜 4 . 2

• 1 0 0 単位 Z全固形成分 1 g 以上の ア ビセ ラ ー ゼ活 性

• 至適 p H約 4 . 2 〜 4 . 8

の性質を有す る も の が挙げ ら れ る 。

本発明 に お いてセ ルラ ー ゼは上記 し た よ う に 、 従来公 知の セ ルラ ー ゼか ら得て よ く 、 従来公知の セ ルラ ー ゼ と し て は動物、 植物、 微生物由来の も の を用 い る こ と がで さ る o

例え ば、 真核微生物に属す る セ ルラ ー ゼ生産菌 と し て は、

ァ ノレ 卜 ポ 卜 リ ス ♦ ス ペ ルノく ( Art hrobot rys superba) ァ ス ペ ル ギ ノレ ス · 7 ウ レ ウ ス （ Aspergil lus aureus) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス * フ ラ ビぺ ス （ Aspergil lus f 1 avi pes) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · フ ミ ガ タ ス （ Aspergil lus fumigatus ) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · フ チ ユ エ ニ ス （ Aspergil lus f uchue nis)、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · 二 デ ュ ラ ン ス （ Aspergil lus n i dulans) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · ニ ゲ ノレ （ Aspergi l lus n i ge r ) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス * 才 リ ゼ 一 （ Aspergi l lus oryzae) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス * ノレ ガ ロ シ ス （ Aspergi l lus rugu 1 osu s ) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ル ス · ソ ー ャ （ Aspergi l lus so j ae ) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · シ ド エ ( Aspergi l lus sydw i ) _N ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · 夕 マ リ ノレ （ Aspergi l lus tamar i 1 ) ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · テ レ ウ ス （ Aspergi l lus t er reus ) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · ゥ ン ガ イ ス （ Aspergi l lus unguis) 、 ァ ス ペ ル ギ ノレ ス 、 ウ ス タ ス （ Aspergi l lus ustus ) 、 タ カ ミ ネ セ ノレ ラ 一 ゼ ( Takamine-Cel lul ase) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス * サ ィ ト イ （ Aspergi l lus sai toi ) 、 ポ ト リ チ ス · シ ネ レ ア

( Botrytis c i nerea) 、 ボ 卜 リ オ デ ィ c: オ ア ィ ァ ♦ テ オ フ ロ マ エ ( Botryodipiodia theobromae ) 、 ク ラ ト ス ホ リ ゥ ム · ク ク メ リ ナ ム ( Cladosporium cucummer i num ) 、 ク ラ ド ス ポ リ ゥ ム · へ ノレパ、 ラ ム （ Cladosporium herbaru ID ) 、 コ コ ス ポ ラ · ァ グ リ コ ラ （ Coccospora agricola ) 、 ク ノレ ブ イ ア リ ア · ノレ ナ 夕 （ Curvuiaria lunata)、 カ ェ ト ミ ゥ ム * テ ノレ モ フ ィ レ ノ《 ノレ · コ ブ ロ フ ィ レ （ Chaetomi um thermophi 1 e var . coprophi 1 e ) 、 カ ェ 卜 ：； ク ム * テ ノレ モ フ ィ レ ノく ノレ ♦ デ ィ シ タ ム ( Chaetoniiuni thermophi le var . d i ss i turn ) 、 ス ポ ロ ト リ カ ム · テ ル モ フ ィ レ （ Sp orot r i chum thermophi 1 e) 、 夕 ロ マ イ セ ス 、 ァ メ ノレ ソ ニ 一 ( Tarorayces aniersoni i)、 テ ノレ モ ア ス カ ス * ォ 一 フ ン チ ア カ ス ( Thermoascus aurantiacus ) 、 フ ミ コ ラ ♦ 干

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5 - pa 1 niaruni ) 、 ぺ ス タ ロ チ ォ シ ス · ゥ エ ス テ ノレ デ ィ ズ キ

( Pestalotiopsis westerdijkii ) 、 フ ォ マ s p . ( Ph om a sp. ) 、 ス キ ゾ フ ィ ラ ム · コ ム 不 ( Schizophyl luni commune ) 、 ス コ ピ ユ ラ リ オ プ シ ス · ブ レ ビ カ ウ リ ス

( Scopu 1 ar i ops i s b rev i cau 1 is) 、 リ ゾ プ ス s p . Rh i zopus sp.) 、 ス ポ ロ ト リ カ ム · 力 ノレニ ス （ Sporotricu m carnis) 、 ス ポ ロ ト リ カ ム · プ ノレ イ ノ サ ム （ Sporotri cuDi prui nosum ) 、 ス タ チ ポ、 ト リ ス · ァ ト ラ （ Stachybo t rys at r a ) > ト ノレ ー ラ s p . (Torula sp. ) 、 ト リ コ デ ル マ · ビ リ デ （ レ ー セ ィ ） （ Trichoderma vi ride(ree sei ) ) 、 ト リ カ ラ ス · シ リ ン ド リ カ ス （Trichurus c 1 i ndricus ) 、 ベ ノレ チ シ リ ウ ム * ア ル ボ ア ト ラ ム （ Vertic il liura al bo at rum ) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ノレ ス · セ ノレ 口 サ ェ

( Aspergil lus eel 1 u 1 osae) 、 ぺ ニ シ リ ゥ ム · グ ラ ウ 力 ム （ Penieil liuni glaucura ) 、 力 ニ ン ガ メ ラ s p . ( Cu nni nghame 11 a sp.) 、 ム コ ー ノレ · セ ム ( Mucor mucedo) 、 リ ゾ プ ス * チ ネ ン シ ス （ Rhyzopus chinensis) 、 コ レ ミ エ ラ s p . ( Coremiel la sp. ) 、 カ ノレ リ ン ギ ア ♦ ロ ゼ ァ （ Karlingia rosea ) 、 フ ィ ト フ ト ラ · カ ク ト ラ ム

( Phytophthora eactorura ) 、 フ ィ ト フ ト ラ · シ ト リ コ ラ （ Phytophthora citricol a) 、 フ ィ ト フ ト ラ * パ ラ シ チ 力 （ Phytophthora parasitica ) 、 ヒ チ ウ ム s p .

( Pythium sp. ) 、 サ プ ロ レ グニ ァ · セ ァ （ Saprolegni a ceae) 、 セ ラ ト シ ス テ ス · ゥ レ ミ （ Seratocystis u 1 in

6 一 i ) 、 カ ェ ト ミ ゥ ム · グ ロ ボ サ ( Chaetofflium globosum ) 、 力 エ ト ミ ゥ ム · ι ン テ ィ カ ム ( Chaetofflium i nd i cum ) 、 ニ ュ ー ロ ス ポ ラ · ク ラ ッ サ ( eurospora c r as s a ) 、 ス ク レ ロ チ ウ ム ♦ 口 ノレ フ シ 一 （ Sclerotiuni rolfsii) 、 ァ ス ぺ ノレ ギ ル ス s ρ . ( Aspergil lus sp. ) 、 ク リ ソ シ ポ リ ウ ム * リ ク ノ ラ ム （ Chrysosporiuni 1 i gnoruni ) 、 ぺ ニ シ リ ウ ム * ノ タ テ ュ ム ( Penicil lium not at uni ) 、 ピ リ ク ラ リ ァ · ォ リ ザ ェ （ Pyricularia oryzae) 、 コ リ ビ ア • ベ ノレ チ ぺ ス （Col lybia veltipes ) 、 コ プ リ ナ ス * ス ク レ ロ ナ ケ ナ ス ( Coprinus sclerotigenus) 、 ヒ ド ナ ム • へ ニ ン ク シ (Hydnum henn i ngs i i ) 、 ィ ノレ ペ ッ ク ス * ラ ク テ ゥ ム （ Irpex 1 acteus ) 、 ポ リ ポ ラ ス ， ス ル フ エ レ ウ ス ( Polyporus s u 1 ph reus ) 、 ホ リ ホ ラ ス · ベ ト レ ウ ス （ Polyporus bet reus ) 、 ポ リ ス チ タ ク ス · ヒ ノレ フ タ ス （ Polustictus hirfutus) 、 ト ラ メ テ ス · ビ 夕 一 タ

( Trametes vitata ) 、 ィ ノレ ペ ッ ク ス · コ ン メ ラ ス （ Ι_Γ pex conso 1 us ) 、 レ ン チ 不 ス · レ ビ テ ウ ス （ Lentines 1 epi deus ) 、 ポ リ ァ ♦ パ' ポ ラ リ ァ （ Poria vaporar i a ) 、 フ ォ メ ス ♦ ピ ニ コ ラ （ Fonies pi ni co 1 a) 、 レ ン ジ テ ス ♦ ス チ ラ シ ナ ( Lenzites s t y rac i na) 、 メ ノレ リ ウ ス · ラ ク リ マ ン ス （ Merulius lacrimans) 、 ポ リ ポ ラ ス * パ ノレ ス ト リ ス （ Polyporus pal st ri s) 、 ポ リ ポ ラ ス · ア ン ノ サ ス （ Polyporus annosus ) 、 ポ リ ポ ラ ス ♦ ベ ノレ シ カ ラ

( Polyporus versicolor) 、 ポ リ ス テ ィ ク タ ス · サ ン ク イ ネ ウ ス （ Polystictus sanguineus) 、 ポ リ ス ♦ ノく イ ラ ン チ （ Poris vai lantii ) 、 プ シ 一 ニ ァ · グ ラ ミ ニ ス

( Puccinia graniinis ) 、 ト リ コ ロ メ · フ モ サ ム （ Trie ho 1 om e f umosum) 、 ト リ コ ロ メ * ヌ 一ダ ム （ Tricholome nudum ) 、 ト ラ メ テ ス · サ ン グ イ ネ ア （ Trametes sangu i nea) 、 ポ リ ポ ラ ス · シ ュ ワ イ ニ ッ チ ノレ F R ( Po 1 poru s schweinitzi 1 FR ) 、 コ ニ ジ オ フ オ ラ · カ レ ベ ラ （ Co n i d i ophora carebe 1 la) 、 ァ ス レ モ ニ ゥ ム s p . Acre mon i um s p . ) な ど力 挙げ ら れ る 。

ま た、 原核微生物に属す る セ ルラ 一 ゼ生産菌 と し て は、 ノく チ ノレ ス ♦ ヒ ド ロ リ チ カ ス （ Baci l lus hydrolyticus ) 、 セ ノレ D ノく チ ノレ ス · ム コ サ ス ( Ce 11 u 1 obaci 11 us mucosus ) 、 セ ル ロ ノ 、 チ ノレ ス · ミ ク ソ ゲ ナ ス （ Cel lulobaci l lus my xogenes ) 、 セ ノレ 口 モ ナ ス s p . ( Cel luloraonas s p . ) 、 セ ノレ ビ ブ リ オ · フ ノレノく ス （ Cel lvibrio f u 1 vus ) 、 セ ル ビ ブ リ オ ♦ フ ル ガニ ス （ Cel lvibrio vulgaris ) 、 ク ロ ス ト リ ジ ゥ ム · テ ノレ モ セ ノレ ラ セ ゥ ム （ Clostridiumn the rraoce 11 u 1 aseum) 、 ク ロ ス ト リ ジ ゥ ム · テ ノレ モ セ ラ ム

( Clostridiumn thernioce 11 UDI ) 、 コ リ ネ パ、 ク テ リ ゥ ム s p . ( CorynebacteriuiD s ρ . ) 、 サ イ ト フ ァ ー ガ * グ ロ ブ ロ サ （ Cytophaga globulosa ) 、 シ ュ 一 モ ナ ス ♦ フ ノレ ォ ロ ェ セ ン ス · ノく ノレ · セ ノレ ロ ザ （ Pseudoraoiias f 1 uo roescens var. cel lul isa) 、 シ ユ ー ド モ ナ ス · ソ ラ ナ セ ァ ラ ム ( Pseudonionas sol anacearum) 、 ノヽ ス テ リ ォ ァ ス · ス ク シ ノ ー ゲ ン （ Bacterioides succ i nogenes ) 、 ル ミ ノ コ カ ス ♦ ア ル パ' ス （ Ruminococcus a 1 bus ) 、 ノレ ミ ノ コ カ ス · フ ラ ベ フ ァ レ ア ン ス （ Ru inococcus f 1 avef a ciens ) 、 ソ ラ シ ジ ゥ ム · コ ン ポ ジ シ ョ ン （ S o r a n d i u m compos i t i on ) 、 ブ チ リ ビ ブ リ オ ク ロ ス ト リ ジ ゥ ム s p , ( Butyrivibrio. Clostridium s ρ . ) 、 キ 卜 ン 卜 モ ナ ス ♦ シ ァ モ フ ィ テ ィ ズ ( Xanthomonas cy amops i d i s ) 、 ス ク レ ロ チ ウ ム ♦ ノく 夕 チ コ ラ （ Selerotium bataticola ) 、 バ チ ノレ ス s p . ( Bacillus sp.) 、 テ ル モ ア ク チ ノ マ イ セ ス s p . ( Thennoactinomyces sp. ) 、 ァ ク チ ノ ビ フ ィ ダ s p , ( Act i nobi f ida sp.) 、 ァ ク チ ノ マ イ セ テ ス s p , ( Act i noiD y cet es sp. ) 、 ス ト レ プ ト マ イ セ ス s p . ( St reptomyces sp.) な ど力 挙げ ら れ る 。

本発明 に よ る セ ルラ ー ゼ製剤は、 上記セ ルラ ー ゼ成分 の み力、 ら な る も のであ っ て よ いが、 適当 な添加剤を含ん でいて も よ い。 添加剤の例 と し て は、 p H調整剤 （例え ば、 リ ン酸塩、 酢酸塩な ど） 、 安定化剤 （例え ば、 ダ リ セ ロ ー ノレ 、 シ ユ ー ク ロ ー ス な ど ） な ど が挙 げ ら れ る 。

本発明 に よ る セ ノレラ ー ゼ製剤に よ る セ ノレ ロ ー ス系繊維 の処理の態様は、 セ ルラ ー ゼ成分 と 、 セ ル ロ ー ス系繊維 と が接触す る 限 り 特 に 限定 さ れな いが、 好ま し く は本発 明 に よ る セ ル ラ ー ゼ製剤を水 に溶解 し水溶液 と し てセ ル ロ ー ス系繊維 と 接触 さ せ る のが好ま し い。 ま た、 セ ルラ ー ゼ成分を適当 な担体 （例え ば、 粒状、 板状な ど） に 固 定 し 、 固定化酵素 と し てセ ル ロ ー ス系繊維 と 接触 さ せて も よ い。

実 施 例

本発明 を以下の実施例 に よ っ て さ ら に詳細 に説明す る が、 本発明 は こ れ ら に 限定 さ れ る も の で は な い。

以下の実施例 に お い て、 結晶性セ ル ロ ー ス に対す る 吸 着性、 ア ビセ ラ ー ゼ活性お よ び C M C ase 活性は次の よ う に測定 し た。

結晶性セ ル ロ ー ス に対す る 吸着性の評価

微結晶性セ ル ロ ー ス （商品名 ： ア ビセ ル S F 、 旭化成 工業株式会社製） 0 . 2 g を 4 m l の緩衝液 （ 0 . 0 5 M緩街液 ： p H 3 〜 6 の範囲で は酢酸緩衝液、 p H 6 〜 7 の範囲では リ ン酸緩衝液） に懸濁 さ せた も の に 、 セ ノレ ラ ー ゼ 8 m g を混合す る 。 こ の混合液を L 字型試験管 (丸底） に いれ、 2 5 °C に保ち なが ら モ ノ ド型振 と う 器 に よ っ て振 と う 速度 6 0 回 /分で 3 ◦ 分間振 と う す る 。 次いで、 こ の懸濁液を 1 0 分間 3 0 0 0 rpni で遠心分離 す る 。 こ の結果、 結晶性セ ル ロ ー ス に対 し て吸着性を有 す る セ ルラ ー ゼは結晶性セ ル ロ ー ス に吸着 し た形で沈殿 し 、 吸着性を有 さ な い セ ルラ ー ゼは上澄み に分別で き る 。 こ こ で、 吸着 し た セ ルラ ー ゼの タ ンパ ク 量は、 最初の セ ノレ ラ ー ゼの量 と 上澄み に 回収 さ れた セ ノレ ラ ー ゼの タ ン ノ、。 ク 量 と の差力、 ら 、 U V 吸収法、 ロ ー リ ー法、 ブラ ッ ド フ ォ ー ド法な どに よ っ て求め る こ と がで き る 。 ア ビセ ラ ー ゼ活性

微結晶性セ ル ロ ー ス （商品名 ： ア ビセ ル S F 、 旭化成 工業株式会社製） を 2 % ( w / V ) に な る よ う に蒸留水 に懸濁 し た も の を基質懸濁液 と す る 。 基質懸濁液 2 . 5 m l に対 し て、 適当 な p H に調整 し た ◦ . 0 5 M緩衝液 2 . O m l を加え 、 L 字型試験管 （丸底） に いれ、 測定 条件 と すべ き 温度で 1 0 分間保温す る 。

分析すべ き 酵素試料 を 蒸 留水 に 溶解 し 、 そ の 0 . 5 m 1 を前記試験管に加え 、 測定条件温度 に保ち な が ら 、 モ ノ ド型振 と う 器 に よ っ て振 と う 速度 6 0 回 Z分で正確 に 3 0 分間振 と う し 、 反応を行 う 。 そ の後、 0 . 5 N の 水酸化ナ ト リ ウ ム溶液 0 . 5 m 1 を添加す る こ と に よ り 反応を停止 さ せ る 。

対照 と し て反応前に 0 . 5 N の水酸化ナ ト リ ゥ ム溶液 0 . 5 m l を添加 し 、 反応を進行 さ せな か っ た も の を用 意す る 。

反応停止後、 反応液の遠心分離 （ 3 0 0 0 rpDi X I 0 分） を行い、 上澄部の還元糖を以下の D N S ( 3.5-Dini trosal icyl ic acid ) 法に よ っ て測定す る 。 な お、 D N S 試薬は I U P A C に規定の方法に よ っ て調製す る 。

前記上澄部の 0 . 5 m l を試料 と し て短 6 分試験管 に 入れ、 D N S 試薬溶液 1 . 5 m l を加え る 。 ガ ラ ス キ ヤ ッ プに よ っ て蒸発を防 ぎなが ら 、 試験管を沸騰水浴中 に 5 分間静置 し て加熱 し 、 発色 さ せ る 。 反応溶液を流水中 で十分に冷却 し た後、 蒸留水 4 m 1 を添加 し 、 そ の吸光 度 （ 5 4 0 n m ) を測定す る 。 反応溶液中の還元糖量は、 検量線か ら 読み取 る こ と が で き る 。 検量線は、 無水 グル コ ー ス （特級） を用 い、 そ の 0、 0 . 2、 0 . 4 、 0 . 6、 0 . 8 お よ び 1 . 〇 m g / 1 の濃度か ら 作成す る 。 こ の検量線を用 い て、 上記試料 と 対照 と の還元糖量の 差を求め、 それを生成還元糖量 と す る 。

ア ビセ ラ ー ゼ活性 （ U Z g ) は、 生成還元糖量お よ び 反応 に用 い た酵素試料溶液中の酵素量 よ り 、 下記の式に 従 っ て求め る こ と 力 で き る 。

^J5¾ 元糖量 (mg)

アビセラーゼ活性 (U/g) = X11 X1000X1000/180 /30

酵 素 量 （mg)

( 1 11 2 = 1 〃 111 0 1 分 & )

C M C ase 活性

C M C ( Carboxyniethy 1 Cel l ul ose Sodium、 東， 化成 株式会社製、 n- 500 ) を 2 % ( w / V ) に な る よ う に、 適当 な p H に調製 し た 0 . 1 M緩衝液に溶解 し 、 こ れを 基質溶液 と す る 。 基質溶液 0 . 5 m l を短 6 分試験管に 入れ、 測定条件温度で 1 0 分間保温す る 。

分析すべ き 酵素試料 を 蒸留水 に 溶解 し 、 そ の 0 . 5 m 1 を前記試験管に加え 、 正確に 3 0 分間静置 し て反応 さ せ る 。 反応は D N S 試薬溶液 3 . O m l を添加す る こ と に よ っ て停止 さ せ る

対照 と し て反応前 に D N S 試薬溶液 3 . O m l を添加 し 、 反応を進行 さ せな か っ た も の を用意す る 。

反応停止後、 、 ガラ ス キ ヤ ッ プに よ っ て蒸発を防 ぎな が ら試験管を沸縢水浴中 に 5 分間静置 し て加熱 し 、 全試 料を加熱発色 さ せ る 。 反応溶液を流水中で十分 に冷却 し た後、 蒸留水 8 m 1 を添加 し 、 そ の吸光度 （ 5 4 0 n m ) を測定す る 。

反応溶液中 の還元糖量は、 検量線か ら読み取 る こ と が で き る 。 検量線は、 無水 グル コ ー ス （特級） を用 い、 そ の 0 、 0 . 2、 0 . 4 、 0 . 6、 0 . 8 お よ び 1 . O m g / m 1 の濃度か ら 作成す る 。

こ の検量線を用 い て 、 上記試料 と 対照 と の還元糖量の 差を求め、 そ れを生成還元糖量 と す る 。

C C ase 活性 （ U / g ) は、 生成還元糖量お よ び反 応に用 い た酵素試料溶液中の酵素量よ り 、 下記の式に従 つ て求 め る こ と がで き る

¾¾1元糖量 (mg)

CMCase活性（UZg) X 2 X1000X1000/180 /30 酵 素 量（mg)

(lU/g = l^mo 1Z分 Zg) 実施例 ト リ コ デルマ · ピ リ デ由来の セ ルラ ー ゼの分 市販の ト リ コ デルマ ♦ ビ リ デ由来の セ ルラ ー ゼ （商 名 ： 明治セ ルラ ー ゼ Τ Ρ 6 0 、 明治製菓株式会社） を固 形成分 と し て水に 1 0 % ( w / V ) で溶解 し た。 こ の水 溶液を陰イ オ ン交換カ ラ ム （ m o n o Q ( 6 0 / 1 0 0 ) 、 フ ァ ノレマ シ ア社製） に適用 し 、 5 0 m M酢酸ノく ッ フ ァ 一 ( H 5 . 8 ) に 0 〜 0 . 6 M の 濃度勾配を か け た N a C 1 水溶液で溶出 し 、 分画 し た。 そ の分画パ タ ー ン は第 1 図 に示 さ れ る 通 り であ っ た。 こ の う ち 、 0 . 3 5 〜 0 . 6 Mの濃度勾配の時の画分を分画番号 4 と し た。

次に こ の分画番号 4 中の結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を 有す る 成分の ア ビセ ラ ー ゼ活性 と C M C as e 活性 と を、 上記 し た測定法に従 っ てそれぞれ測定 し た。 すな わ ち 、 結晶性セ ル ロ ー ス に吸着性を示 さ な い成分の ア ビセ ラ ー ゼ活性 と C M C ase 活性を求め、 全体の ア ビセ ラ ー ゼ活 性 と C M C as e 活性 と の差を求め る こ と に よ り 上記値を 求め た。 測定条件は温度 4 5 、 p H 4 . 5 と し た。

そ の 結果 、 分 画番号 4 の ア ビ セ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性は 0 . 4 6 であ っ た。 一方、 未精製のセ ルラ ー ゼの ア ビセ ラ ー ゼ活性 / C M C ase 活性は 0 . 0 5 8 で め っ た。

ま た、 こ の分画番号 4 に は、 S D S — P A G E お よ び 等電点電気泳動 に よ れば、 分子量が約 5 9 k d 、 等電点 力《約 3 . 8 力、 ら 4 . 8 の セ ノレ ラ 一 ゼが含 ま れて い た。

実施例 2 繊維 （糸） 強度試験

実施例 1 に よ っ て得 ら れた分画番号 4 の セ ル ラ ー ゼを、 実施例 1 で用 い た市販の セ ル ラ 一 ゼに添加す る こ と に よ つ て、 ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性が 0 . 1 0 7 、 0 . 1 6 4 、 0 . 2 5 0 お よ び 0 . 4 8 0 U Z g で あ る セ ルラ 一 ゼを調製 し た。

試験糸 と し て 1 2 オ ン ス の デニ ム生地を ほ どい て、 正 確に 1 1 セ ン チ長 に 切 り 揃え た も の を用意 し た。

こ の試験糸を 5本ずつ試験管 に入れ、 バ ッ フ ァ ー

( 0 . 1 M酢酸バ ッ フ ァ 一 、 p H 4 . 5 ) と 、 予備試験 に よ っ て求め た繊維の減量率力 5 % と な る 量の上で調整 し た セ ルラ ー ゼ と を加え た。 さ ら に試験管に脱イ オ ン水 を最終 5 m 1 と な る ま で加え 、 ガラ ス キ ヤ ッ プ に よ り 密 封 し た。 こ の試験管を 4 5 で の湯浴中 に 1 6 時間静置 し た

反応終了後、 試験糸を脱イ オ ン水に よ っ て、 ボルテ ツ ク ス ミ キサ ー 中で 1 0 秒撹拌を二回繰 り 返す こ と に よ つ て洗 っ た。 遠心 （ 3 0 0 0 rpm X 1 0 分） 後、 5 ◦ °Cで 3 0 分乾燥 し 、 続い て室温に 3 0 分以上放置 し た後、 重 量を測定 し 、 そ の減量率を算出 し た。 試験糸の減量率は 全て 5 %で あ っ た 。

続い て試験糸の 引 っ 張 り 強度を測定 し た。 測定は レオ メ ー タ ー （不動工業株式会社製、 N R M— 2 0 1 0 J _ C W ) を用 い、 引 っ 張 り 強度 5 c m Z分、 2 K _g レ ン ジ 、 専用 ア ダプ タ ー No.19 (万能引 っ 張 り 型） の条件で測定 し た。 そ の結果 は第 2 図に示 さ れ る 通 り であ る 。

実施例 3 脱色 と 繊維強度試験

試験布 と し て 、 1 2 オ ン ス の デニ ム 生地を 1 2 X 4 c mの大 き さ に切断 し た も の を用 い た。 試験布は ほつれ を防止す る た め に周 囲を ジ グザグ縫い し た。

こ の試験布 と 実施例 1 で得 ら れた分画番号 4 の セ ル ラ 一ゼ と を次の よ う に反応 さ せた。 な お、 対照 と し て実施 例 1 で用 い た市販の セ ル ラ ー ゼを用 い て同様の反応を行 つ た o

ま ず、 ナ イ ロ ン バ ッ ク （ コ ス モバイ オ株式会社製 ： 品 番 S-1001を 10x 20emに切 っ た も の ） に 、 緩衝液 （ p H 4 . 5 ) と 、 予備試験に よ っ て求めた繊維の減量率が 5 % と な る量の セ ルラ ー ゼ と を入れ、 最終量が 5 O ralと な る よ う 脱イ オ ン水を加え、 ヒ 一 ト シ一ノレ に よ っ て密封 し た。 こ の ナ イ ロ ンバ ッ ク を 4 5 °Cの湯中 に沈め、 2 3 時 間静置 し て反応 さ せた。

反応後、 試験布を、 脱イ オ ン水中でス タ ー ラ ー を用 い 1 0 分間撹拌 し て洗い、 家庭用洗濯機の脱水槽で 1 分間 脱水 し た後、 5 0 °Cで乾燥 し た。

な お、 試験布の減量率は全て 5 %であ っ た。

乾燥後の試験布の 引 っ 張 り 強度を、 試験布を ほ ど き 糸 を一本取 り 出 し て、 実施例 2 に記載の方法に従 っ て測定 し た。 強度の測定は、 各試験区毎 に 5本ずつ測定 し 、 そ の平均値か ら 相対残存引 っ 張 り 強度を算出 し た。

ま た、 試験布の脱色度を次の よ う に測定 し た。

すな わ ち 、 色差計 Color analyzer TC- 1800 M K2 (東 京電色株式会社製） を用 い、 1^ 3 1) 表色系の 1^ 値 （明度） を、 試験布につ い て 5 点で測定 し た。 測定条件は、 測色 が反射光測定、 2度視野、 標準光が D 6 5 Z 2、 C Z 2 、 A / 2 と し た。 最大値 と 最小値を除い た 3 点の平均値を 求め、 対照試験布に対す る L 値の増加 （ 白色度の増加） △ L 値 と し て算出 し た。

そ の結果、 値力《 1 . 6 の脱色度に お い て、 分画番 号 4 の セ ル ラ ー ゼ処理の場合は 7 5 %の相対残存引 っ 張 り 強度が観察 さ れた の に対 し 、 対照で は 5 3 % の相対残 存引 っ 張 り 強度 し か観察 さ れな か っ た。

実施例 4 繊維 （布） 強度試験

試験布 と し て綿ブ ロ ー ド 4 ◦ 番を、 セ ノレラ ー ゼ と し て 実施例 1 で得 ら れた分画番号 4 を用 い た。

両者の反応は次の よ う に行 っ た。 すな わ ち 、 実施例 3 と 同様の ナ イ ロ ンバ ッ ク に試験布 5 枚 と 緩衝液 （ p H = 4 . 5 ) を入れ、 予備試験に よ っ て求めた布の減量率が 5 % と な る セ ノレラ ー ゼ量を添加 し た。 ナ イ ロ ンバ ッ ク を 4 5 °Cで 1 6 時間静置 し て反応 さ せた。

反応後、 試験布を流水で 5 分間洗い、 家庭用 洗濯機の 脱水槽で 5 分間脱水 し 、 そ の後 5 ◦ °Cで乾燥 し た。 な お 、 対照 と し て実施例 1 で用 い た市販の セ ノレ ラ ー ゼ を用 い て同様の反応を行 つ た。

な お、 試験布の減量率 は全て 5 %であ っ た。

布の 引 っ 張 り 強度お よ び引裂強度は ： ί I S 規格 （一般 織物試験方法 （ J I S L 1 0 9 6 、 引 っ 張 り 強 さ お よ び伸 び率測定法 （ A 法、 ス ト リ ッ プ法、 幅 5 c m ) 、 お よ び、 引 裂強度測定法 （ D 法、 ペ ン ジ ュ ラ ム 法） ） に 従 っ て測定 し た。

そ の結果 は次の表 に示 さ れ る 通 り であ る 。

つ 張 り 強度 （ k g f ) 縦 （相対値） 横 （相対値） 試 験 区 37.0 (80.4%) 27.2 (75.1%) 対 照 区 32.7 (71.1%) 18.1 (50.0%) 酵素無添加区 46.0 (100%) 36.2 (100%)

第 2 表

引 き 裂 き 強度 （ k g f ) 縦 （相対値） 横 （相対値） 試 験 区 0.73 (56.6%) 0.70 (81.4%)

対 照 区 0.66 (51.2%) 0.63 (73.3%) 酵素無添加区 1.29 (100%) 0.86 (100%) 実施例 5 ァ ク レ モニ ゥ ム 由来の セ ルラ 一 ゼ

ア ク レ モ ニ ゥ ム に属す る 菌株 （ F E R M P - 6 8 6 7 ) 由来の セ ルラ ー ゼを実施例 1 と 同様の方法で分画 し 、 ア ビセ ラ ー ゼ活性 Z C M C ase 活性が大 き な画分を得た。 そ の値は、 原末の そ れ力く ◦ . ◦ 7 6 であ っ た の に対 し 、 0 . 3 3 で あ っ た。

こ う し て得た 画分を用 い て実施例 2 と 同様の操作を行 つ た。 そ の結果、 減量率 2 . 5 %に お い て、 8 5 %の相 対残存引 っ 張 り 強度を有 し て い た。 な お、 上記セ ルラ ー ゼ原末を用 い た場合 は相対残存引 っ 張 り 強度 は 7 5 %で め っ た。

Claims

請 求 の 範 囲

1 . セ ルラ ー ゼ製剤であ っ て、 そ れに よ つ て処理 さ れた繊維が減量率 5 % に お い て番手あ た り 7 5 %以上の 相対残存引 っ 張 り 強度を保持す る こ と を特徵 と す る 、 セ ル ラ ー ゼ製剤。

2 . 繊維の減量加工に用 い ら れ る 、 請求の範囲第 1 項記載の セ ル ラ ー ゼ製剤。

3 . 結晶性セ ノレ ロ ー ス に吸着性を有す る セ ル ラ ー ゼ を含有 し 、 かつ、 該セ ルラ ー ゼの C M C ase 活性 に対す る ア ビセ ラ ー ゼ活性の比 （ ア ビセ ラ ー ゼ活性ノ C M C as e 活性） が 0 . 1 以上であ る 、 請求の範囲第 1 項記載の セ ルラ ー ゼ製剤。

4 . セ ルラ ー ゼが酸性ま た は中性領域に お い て結晶 性セ ル ロ ー ス に吸着性を有す る も のであ る 、 請求の範囲 第 1 項記載の セ ルラ ー ゼ製剤。

5 . セ ノレラ ー ゼが p H 3 〜 8 に作用 p H を有す る も の であ る 、 請求の範囲第 1 項記載の セ ル ラ ー ゼ製剤。

6 . セ ルラ ー ゼが微生物由来の も のであ る 、 請求の 範囲第 1 項記載の セ ルラ ー ゼ製剤。

7 . セ ルラ ー ゼが真核微生物由来の も のであ る 、 請 求の範囲第 6 項記載の セ ルラ ー ゼ製剤。

8 . 真核微生物が 卜 リ コ デルマ属 に属す る も の であ る 、 請求の範囲第 7 項記載の セ ル ラ ー ゼ製剤。

9 . セ ルラ ー ゼが下記の性質を有す る も のであ る 、 請求の範囲第 8 項記載の セ ル ラ ー ゼ製剤。

( a ) 平均分子量約 5 9 k d ( S D S — P A G E に よ る ）

( b ) 等電点約 3 . 8 〜 4 . 2

( c ) 1 0 0 単位 全固形成分 l g 以上の ア ビセ ラ ー ゼ活性

( d ) 至適 p H 約 4 . 2 〜 4 . 8

1 0 . 請求項 1 〜 9 いずれか一項記載の セ ルラ ー ゼ 製剤 と セ ル ロ ー ス系繊維を接触 さ せ る こ と を含んでな る 繊維の処理方法。

1 1 . セ ルラ ー ゼ製剤 と 繊維 と の接触を 3 0 〜 8 0 の温度に お い て行 う 、 請求項 1 0 記載の繊維の処理方

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