WO1996028191A1 - Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesen verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik - Google Patents

Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesen verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik Download PDF

Info

Publication number
WO1996028191A1
WO1996028191A1 PCT/EP1996/001107 EP9601107W WO9628191A1 WO 1996028191 A1 WO1996028191 A1 WO 1996028191A1 EP 9601107 W EP9601107 W EP 9601107W WO 9628191 A1 WO9628191 A1 WO 9628191A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
microparticles
poly
solvent
ultrasound
lactide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/EP1996/001107
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Georg Rössling
Celàl ALBAYRAK
Matthias Rothe
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bayer Pharma AG
Original Assignee
Schering AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Schering AG filed Critical Schering AG
Priority to AT96908039T priority Critical patent/ATE241388T1/de
Priority to US08/913,312 priority patent/US6468506B1/en
Priority to EP96908039A priority patent/EP0822836B1/de
Priority to DE59610478T priority patent/DE59610478D1/de
Priority to JP52728696A priority patent/JP3943130B2/ja
Priority to CA002214778A priority patent/CA2214778C/en
Publication of WO1996028191A1 publication Critical patent/WO1996028191A1/de
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasonic imaging preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasonic imaging preparations
    • A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasonic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
    • A61K49/223—Microbubbles, hollow microspheres, free gas bubbles, gas microspheres
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/12—Powdering or granulating
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L67/00—Compositions of polyesters obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain; Compositions of derivatives of such polymers
    • C08L67/04—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids, e.g. lactones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2367/00—Characterised by the use of polyesters obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain; Derivatives of such polymers
    • C08J2367/04—Polyesters derived from hydroxy carboxylic acids, e.g. lactones

Definitions

  • the invention relates to the subject characterized in the claims, that is, a process for the production of gas-containing microparticles for ultrasound diagnostics, the wall material of which is composed of polyesters of ⁇ -, ⁇ - or ⁇ -hydroxycarboxylic acids, particles which can be prepared by this process, and their Use in medical diagnostics.
  • Ultrasonic waves are reflected at interfaces from different types of tissue.
  • the resulting echo signals are electronically amplified and made visible.
  • EP 0 131 540 describes the stabilization of the gas bubbles by sugar. Although this improves the reproducibility and homogeneity of the contrast effect, these bubbles do not survive passage through the lungs.
  • EP 0 122 624 and 0 123 235 describe that the gas bubble stabilizing effect of sugars, sugar alcohols and salts is improved by adding surface-active substances.
  • These ultrasound contrast agents provide a capillary passability and the possibility of displaying the arterial thigh and various organs such as the liver or spleen.
  • the contrast effect is limited to the vessel lumen, since the vesicles are not absorbed by the tissue cells.
  • Encapsulation of gases such as air as an ultrasound contrast medium, is described in EP 0 224 934.
  • the wall material used here consists of protein, in particular human serum albumin with the known allergenic properties, to which cytoxic effects can be added by denaturation.
  • Patent specification EP 0 327 490 describes gas-containing microparticles for ultrasound diagnostics based on biodegradable, synthetic materials.
  • ⁇ -, ⁇ - or ⁇ -hydroxycarboxylic acids are also disclosed as biodegradable polymers. Although these agents have a sufficient in vivo lifespan and are enriched intracellularly in the reticuloendothelial system and thus also in the liver or spleen after intravenous administration, the particles based on hydroxycarboxylic acids prepared according to the examples of this application show only a relatively low backscattering coefficient. The diagnostic effectiveness of the contrast medium preparations prepared from it is therefore not satisfactory in all cases.
  • the object of the present invention was therefore to provide an improved process for the preparation of microparticles based on polyesters of ⁇ -, ⁇ - or ⁇ -hydroxycarboxylic acids, according to which it is possible to obtain particles which have a better backscatter coefficient than the particles of the prior art Technology.
  • the particles and the contrast agent preparations prepared from them should continue to meet the other requirements placed on a modern contrast agent, such as be sufficiently small and stable to reach the left half of the heart after intravenous administration without significant loss of gas and essentially quantitatively, be well tolerated without possessing an allergenic potential and not clump in the aqueous medium.
  • microparticles based on polyesters of ⁇ -, ⁇ - or ⁇ -hydroxycarboxylic acids can be produced by the respective polyester and optionally a surface-active substance in an organic solvent or solvent mixture, of which at least one solvent is readily miscible with water is dissolved, then a liquid perfluoro compound or water is dispersed in this solution and then this dispersion is dispersed in water containing a surface-active substance by means of a stirrer, the solvent being removed by introducing gas and applying a vacuum.
  • particles precipitate that initially still contain water or the liquid perfluoro compound. Then the particle containing
  • the suspension is mixed with a suitable pharmaceutically acceptable cyroprotector and freeze-dried, the liquid in the particles largely escaping and being replaced by the desired gas (usually air) after the lyophilizer has been aerated. Depending on the drying time, a small amount of the liquid (water or perfluoro compound) may remain in the particles as vapor.
  • Perfluoropentane, perfluorohexane, perfluoro-1, 3-dimethylcyclohexane, perfluorocyclohexene, perfluorodecalin or perfluoroether are preferably used as the perfluoro compound.
  • polymers Polyglycolide (PGA) and its copolymers with L-lactide (PGA / PLLA) or polylactide (PLA) as well as its stereocopolymers such as poly-L-lactide (PLLA), poly-DL-lactide or poly-L-lactide / DL-lactide or poly-ß-hydroxybutyrate (PHBA) and its copolymers with ß-hydroxy valerate (PHBA / HVA) or poly-ß-hydroxypropionate (PHPA) or poly-p-dioxanone (PDS) or poly- ⁇ -valerolactone or poly- ⁇ -caprolactone.
  • PGA Polyglycolide
  • PGA / PLLA polylactide
  • PLA polylactide
  • stereocopolymers such as poly-L-lactide (PLLA), poly-DL-lactide or poly-L-lactide / DL-lactide or poly-ß-hydroxybutyrate (PHBA) and
  • the molar ratio is in the range from 85:15 to 50:50, preferably 75:25.
  • organic solvent or solvent mixtures for the polymers are preferably used, dichloromethane, acetone, ethyl acetate, methyl acetate, triacetin, triethyl acetate, ethyl lactate, isopropyl acetate, propyl formate, butyl formate, ethyl formate and / or methyl lactate.
  • Substances from the group of Poloxamere ® or Poloxamine ® polyethylene glycol alkyl ethers, polysorbates, sucrose esters (Sistema The Netherlands), sucrose esters [Ryoto sugar ester, (Tokyo)], gelatin, polyvinyl pyrolidone, fatty alcohol polyglycoside, chaps ( Serva), Chap (Calbiochem), Chapso (Calbiochem), decyl- ⁇ -D-glycopyranoside, decyl- ⁇ -D-maltopyranoside, dodecyl- ⁇ -D-maltopyranoside, sodium oleate, polyethylene glycol, polyvinyl alcohol or mixtures thereof.
  • Air, nitrogen and oxygen are used as gases.
  • An alternative method for producing microparticles based on polyesters of ⁇ -, ⁇ - or ⁇ -hydroxycarboxylic acids is that the desired polymer (s) and optionally an amino acid is dissolved in at least one organic solvent ( ), this solution is sprayed through a nozzle into a column which is filled with or through which a supercritical gas flows, the solvent being taken up by the supercritical gas.
  • the same substances are used as polymers or copolymers as were mentioned in the first-mentioned production process.
  • An amino acid is preferably added to the dissolved polymer (polyester) used in each case instead of the surfactant.
  • L-lysine, L-phenylalanine, L-tryptophan and D, L-phenylalanine are preferably used as amino acids.
  • the solvents listed in the first process variant are suitable as solvents or solvent mixtures.
  • the supercritical gases used are nitrous oxide, carbon dioxide, halogenated hydrocarbons, saturated or unsaturated hydrocarbons, nitrogen dioxide and / or ammonia, carbon dioxide being preferred.
  • the supercritical gases can optionally contain up to 10% additives such as e.g. lower alcohols such as Ethanol, esters or gases such as Contain nitrogen
  • the size of the resulting particles can be controlled via the type, size and shape of the injection nozzle, working pressure and temperature in the column.
  • a particle size as required for an intravenously applied ultrasound contrast medium ( ⁇ 10 ⁇ m) can be used using a nozzle with a nozzle diameter of 0.5 mm and a spray angle of 10 ° at a working pressure between 90 and 100 bar, preferably 94-96 bar and a temperature of 36 ° C can be realized.
  • Another aspect of the invention relates to microparticles for ultrasound diagnostics which can be produced by the aforementioned methods.
  • Another aspect of the invention relates to contrast agents for ultrasound diagnostics containing microparticles that were produced by the aforementioned methods.
  • These agents can be obtained by resuspending the dried microparticles in a pharmaceutically acceptable suspension medium.
  • Possible pharmaceutically acceptable suspension media are, for example, water pi, aqueous solutions of one or more inorganic salts such as physiological electrolyte solutions and buffer solutions, such as Tyrode, aqueous solutions of mono- or disaccharides such as glucose or lactose, sugar alcohols such as mannitol, which may also contain an additional one surfactant, e.g. from the group of polysorbates or polysaccharides, polyvinylpyrrolidone, polyethylene glycol, sucrose mono- and diesters or substances from the group of poloxamers or poloxamines or their mixtures and / or a physiologically compatible polyhydric alcohol such as glycerol.
  • water suitable for injection purposes is water suitable for injection purposes.
  • the suspension can be filtered immediately before injection.
  • microparticles produced by the processes according to the invention based on polyesters of ⁇ -, ⁇ - or ⁇ -hydroxycarboxylic acids or contrast agents prepared therefrom meet all the requirements placed on an ultrasound contrast agent.
  • the particles contained in the agents are characterized by the following advantages:
  • Degradation products are toxicologically harmless, they circulate in the bloodstream for a sufficiently long time, they can be used in all modes of ultrasound diagnostics, especially also in modes in which nonlinear effects are used, they are well tolerated, they show a uniform, controllable size distribution, they are easy to manufacture, the polymeric particles have a narrow molecular weight distribution, • they are sufficiently stable to survive passage through the lungs and are therefore also suitable for contrasting the left heart and • they are absorbed by the reticuloendothelial system and are therefore also suitable for contrasting the liver and Spleen.
  • the particles produced by the process according to the invention show a larger backscattering coefficient in comparison to the particles disclosed in EP 0 327 490, which are likewise composed of ⁇ -, ⁇ -, ⁇ -hydroxycarboxylic acids. This could be shown in a comparative experiment. So for a freshly prepared suspension of the particles described in EP 0 327 490 (Example 1) in water (concentration 18.6 mg / ml) after 5 minutes
  • the backscatter coefficients are determined in an in vitro test setup in which the backscattered signal caused by a contrast medium in a cuvette is measured (see also "Standardization of the measurement of acoustical parameters of ultrasound contrast agents” First European Symposium on Ultrasound Contrast Imaging, January 25-26, 1996, Rotterdam).
  • the emulsion (0/0 / W) is transferred to a 2 1 three-necked flask equipped with a stirrer (300 rpm), the solvent is removed at 20 ° C. for 3 hours by ⁇ introduction, and at 25 ° C. for 3 hours .
  • the suspension is then mixed with a cryoprotector and freeze-dried.
  • the particle diameter was determined using an LS-130 from Coulter Electronics GmbH, which uses a combination of light scattering and Eisenhofer diffraction. The number of particles was determined using a Coulter Counter.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with perfluoropentane being replaced by perfluorodecalin.
  • the lyophilisate resuspended with the water contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with perfluoropentane being replaced by perfluorohexane.
  • the lyophilisate resuspended with 0.9% NaCl solution contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • the lyophilisate resuspended with 5% mannitol solution contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with perfluoropentane being replaced by perfluoroheptane.
  • the lyophilisate resuspended with 5% mannitol solution contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • Example 10 procedure is as in Example 1 using perfluoropentane is replaced by perfluorohexane and the polymer Resomer ® RG-502 by Resomer ® RG-858 and dissolved in 65 ml of methylene chloride / acetone (volume 63:37). That with water Lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • Example 13 The procedure is as in Example 1, with acetone being replaced by ethyl acetate.
  • the water-absorbed lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • the procedure is as in Example 1, the acetone being replaced by methyl acetate.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • Example 16 Procedure is as in Example 1, wherein the polymer Resomer ® RG-502 is replaced by Resomer ® RG-858 and acetone by ethyl acetate.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 - 8 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, the perfluoropentane being replaced by 10 ml of 20% glucose solution.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, using only 2 g of Polymer Resomer ® RG-502 instead of 3 g.
  • the lyophilisate taken up with 5% mannitol solution contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 8 ⁇ m.
  • Example 2 Is as in Example 1, wherein the polymer Resomer ® RG-502 by LG PHB / PHN copolymer (12% PHV, Biopol ICI), gelatin solution through 200 ml, 1%
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles of
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with the polymer Resomer ® RG 502 using 1 g PHB / PVB copolymer (18% PHV, Biopol ICI), gelatin solution using 200 ml 1% PVA solution in 30 ml methylene chloride / acetone (volume fraction 66: 34) is solved.
  • the lyophilisate resuspended with the water contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.4 to 8 ⁇ m.
  • Example 21 Procedure is as in Example 1, wherein the polymer Resomer ® RG 502 by 1 g Polycaprolactome [inherent vis: 1.26 dl / g in CHC1 3 at 30 ° C (Birmingham Polymers NC, USA], gelatin by 200 ml 1% PVA solution (MW 9-10 kDal), the polymer is dissolved in 30 ml methylene chloride / acetone (70:30 by volume) The water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.2 to 8 ⁇ m.
  • Example 21 Example 21
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with gelatin being replaced by 400 ml of 0.5% Na oleate solution.
  • the lyophilisate absorbed with 5% mannitol solution contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.5 to 8 ⁇ m.
  • Example 23 The procedure is as in Example 1, with gelatin being replaced by 400 ml, 1% octyl- ⁇ -D-glucopyranoside solution.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 8 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with the gelatin solution being mixed with 400 ml, 1% sucrose pitate P-1570 (Ryoto Sugarester).
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 7 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with gelatin solution being mixed with 400 ml, 1% sucrose stearate (Ryoto Sugarester) S-1670.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 7 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with 400 ml, 1% sucrose diester, SP 70 (Sisternen, The Netherlands) being used instead of gelatin solution.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 7 ⁇ m.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 5 ⁇ m.
  • the procedure is as in Example 1, with acetone being replaced by ethyl acetate.
  • the water-absorbed lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 7 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with acetone being replaced by methyl acetate.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 1 to 7 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with acetone being replaced by methyl lactate.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 1 to 6 ⁇ m.
  • EXAMPLE 31 The procedure is as in Example 1, acetone being replaced by ethyl acetate.
  • the water-absorbed lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 0.1 to 6 ⁇ m.
  • the procedure is as in Example 1, with acetone being replaced by triacetin.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 1 to 7 ⁇ m.
  • Example 2 The procedure is as in Example 1, with acetone being replaced by triethyl citrate.
  • the water-resuspended lyophilisate contains ultrasound-active microparticles with a diameter of 1 to 7 ⁇ m.
  • Example 34 0.375 g of L-lysine (Aldrich) are dissolved in 25 ml of glacial acetic acid (Merck); 2.5 g Resomer ® RG-756 (Böhringer Ingelheim) are dissolved in 75 ml dichloromethane (Merck). The combined solutions were further treated in an apparatus as shown in FIG. 1.
  • the combined solutions are first placed in a reservoir (17) and the system is filled with the gas from a supply bottle via valve (2) and line (30).
  • the solution is removed from the reservoir (17) by means of a piston stroke pump (16) after flowing through line (52), a heat exchanger (15), a line (54). a valve (20) and finally line (55) to the nozzle (118).
  • the copolymer-containing solution is sprayed into the column (12) through a conventional single-substance nozzle (118) [Schlick 121 V], while at the same time CO2 in the supercritical state at 90 bar / 36 ° C and a throughput of 8.9 kg / h in cocurrent, is passed through the column via inlet (8).
  • the nozzle has a diameter of 0.5 mm, the spray angle is 10 °.
  • the further steps essentially serve to clean and recycle the solvent-laden CO 2 , but have nothing to do with the production of the particles.
  • the CO 2 can be processed as follows.
  • the gas loaded with the solvent flows through lines (42) and (40), controlled by 2 solenoid valves (7 and 9), to the end of the column and is expanded to 60 bar.
  • the Valves are switched so that the amount of fluid gas flowing into the column per unit of time can escape while maintaining the working pressure of the column.
  • the CO 2 which has been cooled to 60 bar by the expansion and is loaded with solvent, is fed via line (62) into the separator (10), which is heated to 21 ° C., where the solvent mixture separates out in the CO as a result of the greatly reduced solubilities under these conditions.
  • the CO 2 freed from the solvent mixture is transferred again to the supercritical state by means of line (64 and 32) by increasing the pressure and temperature (3 and 4) (90 bar, 36 ° C.) and again to the column via line to further dry the resulting particles (34), LPG pump (4), line (36), heat exchanger (5), line (38) through inlet (8).
  • the solvent mixture separated in the separator (10) is removed after separating the separator (10) from the circuit by means of valves (6) and (13) and relaxing to atmospheric pressure via the valve (72).
  • Ultrasound-active, gas-containing microparticles with a diameter of 5-10 ⁇ m are obtained.
  • Example 34 Further microparticles are produced analogously to Example 34.
  • the polymers used in each case and further data are summarized in Table 1.
  • the ultrasound-active, hollow microparticles obtained are sterile and free from solvent residues, polymerization catalysts or initiator molecules. They have a uniform particle size distribution of 5 to 10 ⁇ m.
  • the polymers are each dissolved in 75 ml dichloromethane (Merck) and 25 ml glacial acetic acid, the respective amount of amino acid is added.
  • D, L-phenylalanine is suitably pre-dissolved in up to 50 ml of ethanol (Merck).

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Acoustics & Sound (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von gasenthaltenden Mikropartikeln für die Ultraschalldiagnostik, deren Wandmaterial aus Polyestern von α-, β- oder η-Hydroxycarbonsäuren aufgebaut ist, nach diesem Verfahren hergestellte Partikel, sowie deren Verwendung in der medizinischen Diagnostik.

Description

Verfahren zur Herstellung von polymeren Mikropartikeln, nach diesen Verfahren hergestellte Mikropartikel sowie deren Verwendung in der medizinischen Diagnostik
Die Erfindung betrifft den in den Patentansprüchen gekennzeichneten Gegenstand, daß heißt ein Verfahren zur Herstellung von gasenthaltenden Mikropartikeln für die Ultraschalldiagnostik, deren Wandmaterial aus Polyestem von α-, ß- oder γ- Hydroxycarbonsäuren aufgebaut ist, Partikel die nach diesem Verfahren herstellbar sind, sowie deren Verwendung in der medizinischen Diagnostik.
Die Ultraschalldiagnostik hat in der Medizin wegen der komplikationslosen einfachen Handhabung sehr breite Anwendung gefunden. Ultraschallwellen werden an Grenzflächen von unterschiedlichen Gewebearten reflektiert. Die dabei entstehenden Echosignale werden elektronisch verstärkt und sichtbar gemacht.
Die Darstellung von Blutgefäßen und innerer Organen mittels Ultraschall erlaubt im allgemeinen nicht die Darstellung des darin vorhandenen Blutflusses. Flüssigkeiten, insbesondere Blut, liefern nur dann Ultraschallkontrast, wenn Dichte- und Kompresibilitätsunterschiede zur Umgebung bestehen. Als Kontrastmittel werden in der medizinischen Ultraschalldiagnostik z. B. Gase enthaltende oder Gas produzierende Substanzen verwendet, da der Impedanzunterschied zwischen Gas und umgebendem Blut wesentlich größer ist, als der von Flüssigkeiten oder Festkörpern und Blut [Levine R.A., J. Am. Coll. Cardiol. 3 (1989) 28 ; Machi I.J. CU 11 (1983) 3].
Roelandt et al. [Ultrasound Med. Biol. 8 (1982) 471-492] beschreiben, daß durch periphere Injektionen von Lösungen, die feine Gasblasen enthalten, cardiale Echokontraste erzielt werden können. Diese Gasblasen werden in physiologisch verträglichen Lösungen z.B. durch Schütteln, andere Agitation oder durch Zusatz von Kohlendioxid erhalten. Sie sind jedoch hinsichtlich Anzahl und Größe nicht standardisiert und können nur unzulänglich reproduziert werden. Auch sind sie in der Regel nicht stabilisiert, so daß ihre Lebensdauer gering ist. Ihre mittleren Durchmesser liegen meist über Erythrocytengröße, so daß keine Lungenkapillarpassage mit nachfolgender Kontrastierung von Organen wie linkes Herz, Leber, Niere oder Milz möglich ist. Darüber hinaus eignen sie sich nicht für Quantifizierung, da sich das von ihnen erzeugte Ultraschallecho aus mehreren, nicht voneinander zu trennenden Prozessen wie Blasenentstehung, Koaleszenz und Auflösung zusammensetzt. So ist es z.B. nicht möglich, mit Hilfe dieser Ultraschall- Kontrastmittel über die Messung des Kontrastverlaufs im Myokard, Aussagen über die Transitzeiten zu gewinnen. Hierzu sind Kontrastmittel notwendig, deren Streukörper eine ausreichende Stabilität aufweisen.
In der EP 0 131 540 ist die Stabilisierung der Gasblasen durch Zucker beschrieben. Damit wird zwar die Reproduzierbarkeit und Homogenität des Kontrasteffektes verbessert, eine Lungenpassage überstehen diese Blasen jedoch nicht.
In den EP 0 122 624 und 0 123 235 wird beschrieben, daß der gasblasenstabilisierende Effekt von Zuckern, Zuckeralkoholen und Salzen durch Zusatz von grenzflächenaktiven Substanzen verbessert wird. Eine Lungenkapillargängigkeit und die Möglichkeit zur Darstellung des arteriellen Gefäßschenkels und verschiedener Organe wie Leber oder Milz ist bei diesen Ultraschallkontrastmitteln gegeben. Der Kontrasteffekt ist hierbei jedoch auf das Gefaßlumen beschränkt, da die Bläschen nicht von den Gewebezellen aufgenommen werden.
Keines der beschriebenen Ultraschall-Kontrastmittel verbleibt längere Zeit unverändert im Körper. Eine Organdarstellung mit ausreichender Signalintensität durch selektive Anreicherung nach i.v. Gabe oder Quantifizierung sind mit diesen Mitteln nicht möglich.
Eine Verkapselung von Gasen, wie beispielsweise Luft als Ultraschall-Kontrastmittel wird in der EP 0 224 934 beschrieben. Das hierbei verwendete Wandmaterial besteht aus Protein, insbesondere menschliches Serumalbumin mit den bekannten allergenen Eigenschaften, zu denen durch eine Denatuierung cytoxische Effekte hinzukommen können.
In der Patentschrift EP 0 327 490 werden gasenthaltende Mikropartikel für die Ultraschall-Diagnostik auf der Basis von biologisch abbaubaren, synthetischen Materialien beschrieben. Als bioabbaubare Polymere werden u.a. auch α-, ß- oder γ- Hydroxycarbonsäuren offenbart. Diese Mittel weisen zwar eine ausreichende in vivo Lebensdauer auf und werden nach intravenöser Applikation intrazellulär im retikuloendothelialem System und damit auch in der Leber oder Milz angereichert, jedoch zeigen die gemäß den Beispielen dieser Anmeldung hergestellten Partikel auf Basis von Hydroxycarbonsäuren nur einen relativ geringen Rückstreukoeffizenten. Die diagnostische Wirksamkeit daraus bereiteter Kontrastmittelpräparationen ist daher nicht in allen Fällen befriedigend. Aufgabe der vorliegenden Erfindung war es daher ein verbessertes Verfahren zur Herstellung von Mikropartikeln auf der Basis von Polyestem von α-, ß- oder γ- Hydroxycarbonsäuren bereitszustellen, nach welchem es gelingt Partikel zu erhalten, die einen besseren Rückstreukoeffizienten aufweisen als die Partikel des Standes der Technik.
Die Partikel und daraus bereitete Kontrastmittelpräparationen sollten weiterhin die übrigen an ein modernes Kontrastmittel gestellten Anforderungen erfüllen, wie z.B. ausreichend klein und stabil sein, um ohne nennenswerten Gasverlust und im wesentlichen quantitativ die linke Herzhälfte nach intravenöser Applikation zu erreichen, eine gute Verträglichkeit aufweisen ohne ein allergenes Potential zu besitzen und nicht im wäßrigen Medium verklumpen.
Diese Aufgabe wird durch die vorliegende Erfindung gelöst.
Es wurde gefunden, daß Mikropartikeln auf der Basis von Polyestem von α-, ß- oder γ-Hydroxycarbonsäuren hergestellt werden können, indem der jeweilige Polyester und gegebenenfalls eine oberflächenaktive Substanz in einem organischen Lösungsmitteln oder Lösungsmittelgemischen, von denen mindestens ein Lösungsmittel mit Wasser gut mischbar ist, gelöst wird, anschließend eine flüssige Perfluoro- Verbindung oder Wasser in dieser Lösung dispergiert wird und anschließend diese Dispersion in Wasser, das eine oberflächenaktive Substanz enthält, mittels eines Rührers dispergiert wird, wobei das Lösungsmittel durch Gaseinleitung und Anlegen eines Vakuums entfernt wird. Hierbei fallen Partikel aus, die zunächst noch Wasser bzw. die flüssige Perfluoro- Verbindung enthalten. Anschließend wird die Partikel enthaltende
Suspension mit einem geeigneten pharmazeutisch akzeptablen Kyroprotektor vermischt und gefriergetrocknet, wobei die in den Partikeln befindliche Flüssigkeit weitgehend entweicht und nach Belüften des Lyophilisators durch das gewünschte Gas (in der Regel Luft) ersetzt wird. Je nach Trocknungsdauer verbleibt gegebenenfalls eine geringe Menge der Flüssigkeit (Wasser bzw. Perfluoro- Verbindung) als Dampf in den Partikeln.
Als Perfluoro- Verbindung kommen vorzugsweise zur Anwendung Perfluoropentan, Perfluorohexan, Perfluoro-1 ,3-Dimethylcyclohexan, Perfluorocyclohexen, Perfluorodecalin oder Perfluoroether.
Als Polymere werden in dem erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzt: Polyglycolid (PGA) sowie dessen Copolymere mit L-Lactid (PGA/PLLA) oder Polylactid (PLA) sowie dessen Stereocopolymere wie z.B. Poly-L-Lactid (PLLA), Poly-DL-Lactid oder Poly-L-Lactid/DL-Lactid oder Poly-ß-hydroxybutyrat (PHBA) sowie dessen Copolymere mit ß-Hydroxy valerat (PHBA/HVA) oder Poly-ß-hydroxypropionat (PHPA) oder Poly-p-dioxanon (PDS) oder Poly-δ- valerolacton oder Poly-ε-caprolacton.
Bei den Copolymeren zwischen Milchsäure (LA) und Glycolsäure (GA) liegt das Molverhältnis bezogen auf die Monomeren im Bereich von 85: 15 bis 50:50, vorzugsweise bei 75:25.
Als organische Lösungs- oder Lösungsmittelgemische für die Polymeren werden bevorzugt verwendet, Dichlormethan, Aceton, Ethylacetat, Methylacetat, Triacetin, Triethy leitrat, Ethyllactat, Isopropylacetat, Propylformiat, Butylformiat, Ethylformiat und/oder Methyllactat.
Als oberflächenaktive Substanz (Tensid) kommen zur Anwendung Substanzen aus der Gruppe der Poloxamere® oder Poloxamine®, Polyethylenglycol Alkylether, Polysorbate, Saccharoseester (Sistema The Netherlands), Saccharoseester [Ryoto sugarester, (Tokyo)], Gelatine, Polyvinylpyrolidon, Fettalkoholpolyglycosid, Chaps (Serva), Chap (Calbiochem), Chapso (Calbiochem), Decyl-ß-D-glycopyranosid, Decyl-ß-D-maltopyranosid, Dodecyl-ß-D-maltopyranosid, Natriumoleat, Polyethylenglykol, Polyvinylalkohol oder deren Gemische.
Als Gase kommen zur Anwendung Luft, Stickstoff, Sauerstoff. Edelgase, Distickstoffoxid, Kohlendioxid, Halogenkohlenwasserstoffe, gesättigte oder ungesättigte gasförmige Kohlenwasserstoffe, Stickstoffdioxid und/oder Ammoniak.
Ein alternatives Verfahren zur Herstellung von Mikropartikeln auf der Basis von Polyestem von α-, ß- oder γ-Hydroxycarbonsäuren, besteht darin, daß (die) gewünschte(n) Polymer(e) und gegebenenfalls eine Aminosäure in mindestens einem organischen Lösungsmittel gelöst wird (werden), diese Lösung über eine Düse in eine Kolonne gesprüht wird, die mit einem überkritischen Gas befüllt ist oder von diesem durchströmt wird, wobei das Lösungsmittel vom überkritischen Gas aufgenommen wird.
Als Polymere bzw. Copolymere kommen in dieser Verfahrensvariante dieselben Substanzen zur Anwendung, wie sie im erstgenannten Herstellungsverfahren genannt wurden. Entsprechendes gilt für die Mischungsverhältnisse bei den Copolymeren. Vorzugsweise wird zu dem jeweils verwendeten gelösten Polymer (Polyester) anstelle des Tensids eine Aminosäure gegeben. Als Aminosäuren kommen vorzugsweise zum Einsatz L-Lysin, L-Phenylalanin, L-Tryptophan sowie D,L-Phenylalanin.
Als Lösungsmittel bzw. Lösungsmittelgemische eignen sich die in der ersten Verfahrensvariante aufgeführten Lösungsmittel.
Die Zugabe einer Perfluorverbindung ist in diesem Falle nicht erforderlich.
Als überkritische Gase werden verwendet, Distickstoffoxid, Kohlendioxid, Halogenkohlenwasserstoffe, gesättigte oder ungesättigte Kohlenwasserstoffe, Stickstoffdioxid und/oder Ammoniak, wobei Kohlendioxid bevorzugt ist. Die überkritischen Gase können gegebenenfalls bis zu 10% Zusätze wie z.B. niedere Alkohole wie z.B. Ethanol, Ester oder Gase wie z.B. Stickstoff enthalten
Die Größe der resultierenden Partikel kann über Art, Größe und Form der Einspritzdüse, Arbeitsdruck und Temperatur in der Kolonne gesteuert werden. Eine Partikelgröße wie sie für ein intravenös appliziertes Ultraschallkontrastmittel erforderlich ist ( < 10 μm) kann unter Verwendung einer Düse mit einem Düsendurchmesser von 0,5 mm und einem Sprühwinkel von 10° bei einem Arbeitsdruck zwischen 90 und 100 bar, vorzugsweise 94-96 bar und einer Temperatur von 36° C realisiert werden.
Ein weiterer Aspekt der Erfindung betrifft Mikropartikel für die Ultraschalldiagnostik herstellbar nach den vorgenannten Verfahren.
Ein weiterer Aspekt der Erfindung betrifft Kontrastmittel für die Ultraschalldiagnostik enthaltend Mikropartikel die nach den genannte Verfahren hergestellt wurden.
Diese Mittel können erhalten werden, indem die getrockneten Mikropartikel in einem pharmazeutisch akzeptablen Suspensionsmedium resuspendiert werden.
Als pharmazeutisch akzeptable Suspensionsmedien kommen beispielsweise infrage Wasser p.i., wäßrige Lösungen eines oder mehrere anorganische Salze wie physiologische Elektrolyt-Lösungen und Pufferlösungen, wie z.B. Tyrode, wäßrige Lösungen von Mono- oder Disacchariden wie Glucose oder Lactose, Zuckeralkoholen wie Mannit, die gegebenenfalls zusätzlich noch eine oberflächenaktive Substanz, z.B. aus der Gruppe der Polysorbate oder Polysaccharide, Polyvinylpyrrolidon, Polyethylenglykol, Saccharose Mono- und Diester oder Substanzen aus der Gruppe der Poloxamere oder Poloxamine oder deren Gemische und/oder einem physiologisch verträglichen mehrwertigen Alkohol wie Glycerin. Bevorzugt ist jedoch in für Injektionszwecke geeignetes Wasser.
Um die Sicherheit der Applikation zu erhöhen, kann unmittelbar vor Injektion eine Filtration der Suspension durchgeführt werden.
Die nach den erfindungsgemäßen Verfahren hergestellten Mikropartikel auf der Basis von Polyestem von α-, ß- oder γ-Hydroxycarbonsäuren bzw. daraus bereitete Kontrastmittel erfüllen alle Anforderungen die an ein Ultraschallkontrastmittel gestellt werden. Die in den Mitteln enthaltenen Partikel zeichnen sich durch die folgenden Vorteile aus:
Sie werden schnell in-vivo abgebaut,
Abbauprodukte sind toxikologisch unbedenklich, sie zirkulieren ausreichend lange im Blutkreislauf, sie sind in allen Modi der Ultraschalldiagnostik, insbesondere auch bei Modi bei denen nichtlineare Effekte ausgenutzt werden anwendbar, sie sind gut verträglich, sie zeigen eine einheitliche, steuerbare Größenverteilung, sie sind leicht herstellbar, die polymeren Partikel weisen eine enge Molekulargewichtsverteilung auf, • sie sind ausreichend stabil um auch eine Lungenpassage zu überstehen und eignen sich damit auch für die Kontrastierung des linken Herzens und • sie werden vom retikuloendothelialen System aufgenommen und eignen sich damit auch für die Kontrastierung der Leber und Milz.
Insbesondere zeigen die nach den erfindungsgemäßen Verfahren hergestellten Partikeln einen größeren Rückstreukoeffizenten im Vergleich zu den in der EP 0 327 490 offenbarten Partikeln, die ebenfalls aus α-, ß-, γ-Hydroxycarbonsäuren aufgebaut sind. Dieses konnte in einem Vergleichsversuch gezeigt werden. So wurde für eine frisch zubereitete Suspension der in der EP 0 327 490 (Beispiel 1) beschriebenen Partikel in Wasser (Konzentration 18,6 mg/ml) nach 5 Minuten ein
Rückstreukoeffizent von αs = 4 x 10* [dB/cm] bei 5 MHz Sendefrequenz gemessen, wohingegen für eine erfindungsgemäße Präparation (Partikel nach Beispiel 1 suspendiert in Wasser/Konzentration 0,18 mg/ml) unter sonst identischen Bedingungen ein Rückstreukoeffizient von αs = 2,7 x 10_1 [dB/cm] gemessen wurde. Berücksichtig man, daß die Konzentration der erfindungsgemäßen Präparation um den Faktor 100 geringer war als die Vergleichspräparation, so ergibt sich ein Anstieg der Rückstreukoeffizienten um fünf Zehnerpotenzen. Da der bildgebende Effekt direkt vom Rückstreukoeffizienten abhängig ist, stellen die erfmdungsgemäß hergestellten Partikel deutlich effektivere Kontrastmittel dar.
Die Bestimmung der Rückstreukoeffizienten erfolgt in einem in vitro Versuchsaufbau, bei dem der von einem in einer Küvette befindlichen Kontrastmittel verursachte rückgestreute Signal gemessen wird (siehe auch "Standardisation of the measurement of acoustical parameters of ultrasound contrast agents" First European Symposium on Ultrasound Contrast Imaging, January 25-26, 1996, Rotterdam).
Die nachfolgenden Beispiele dienen der näheren Erläuterung des Erfindungsgegenstandes, ohne ihn auf diese beschränken zu wollen.
Beispiel 1
3 g Polymer Resomer* RG-502 (Böhringer Ingelheim) werden in 40 ml Methylenchlorid/ Aceton (Volumenanteil 50:50) gelöst. 10 ml Perfluoropentan werden mittels Ultraturrax (10.000 Upm) 2 min lang in der Polymerlösung dispergiert. Die entstandene Emulsion (0/0) wird in 400 ml 1 %ige Gelatine Lösung, die auf 0°C temperiert ist, mittels eines mechanischen Rührers (Dispermat-FT, VMA-Getzmann GmbH), (1000 Upm) 30 min lang dispergiert. Die Emulsion (0/0/W) wird in einem 2 1 Dreihalskolben, versehen mit einem Rührer (300 Upm) überführt, 3 h lang bei 20°C durch ^-Einleitung, 3 Stunden lang bei 25 °C durch Vakuum das Lösungsmittel entfernt. Anschließend wird die Suspension mit einem Kryoprotektor vermischt und gefriergetrocknet .
Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält Mikropartikel (Durchmesser 0,2-8 μm) und zeigt einen hervorragenden in vitro Rückstreukoeffizienten [αs = 2,7 x 10 1 [dB/cm] bei 5 mHz Senderfrequenz und einer Teilchenzahl von C = 4 x 106]. Die Bestimmung der Partikeldurchmesser erfolgte na einem LS-130 der Firma Coulter Electronics GmbH, welche eine Kombination aus Lichtstreuung und Frauenhofer- Beugung ausführt. Die Bestimmung Teilchenanzahl erfolgte mit einem Coulter Counter.
Beispiel 2
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Perfluoropentan durch Perfluorodecalin ersetzt wird. Das mit dem Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 3
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Perfluoropentan durch Perfluorohexan ersetzt wird. Das mit 0,9%iger NaCl-Lösung resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 4
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Perfluoropentan durch Perfluoro- 1.3- Dimethylcyclohexan ersetzt wird.
Das mit 5%iger Mannitol-Lösung resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser. Beispiel 5
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Perfluoropentan durch Perfluoroheptan ersetzt wird. Das mit 5%iger Mannitol-Lösung resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 6
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer* RG-502 durch Resomer® RG-503 ersetzt wird. Das mit 0,9%iger NaCl-Lösung resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 7
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG-502 durch Resomer® RG-504 ersetzt und in 45 ml Methylchlorid/Aceton (Volumentanteil 55:45) gelöst wird. Das mit 0,9%iger NaCl-Lösung aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 8
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG-502 durch Resomer® RG-756 ersetzt und in 50 ml Methylchlorid/Aceton (Volumentanteil 60:40) gelöst wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 9
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG-502 durch Resomer® RG-858 ersetzt und in 65 ml Methylchlorid/Aceton (Volumentanteil 63:37) gelöst wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 10 Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Perfluoropentan durch Perfluorohexan und das Polymer Resomer® RG-502 durch Resomer® RG-858 ersetzt und in 65 ml Methylchlorid/Aceton (Volumentanteil 63:37) gelöst wird. Das mit Wasser aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 11
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Perfluoropentan durch Perfluorodecalin und das Polymer Resomer® RG-502 durch Resomer® RG-858 ersetzt und in 65 ml Methylchlorid/Aceton (Volumentanteil 63:37) gelöst wird. Das mit Wasser aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 12
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG-502 durch Resomer® R-208 ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 13 Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Aceton durch Ethylacetat ersetzt wird. Das mit Wasser aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0.2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 14
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Aceton durch Methylacetat ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 15
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG-502 durch Resomer® RG-858 und Aceton durch Ethylacetat ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 - 8 μm Durchmesser. Beispiel 16
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Perfluoropentan durch 10 ml 20% ige Glucose-Lösung ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 17
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei anstelle von 3 g lediglich 2 g Polymer Resomer® RG-502 eingesetzt wird. Das mit 5%iger Mannitol-Lösung aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0, 1 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 18
Es wird wie in Beispiel 1 Verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG-502 durch lg PHB/PHN Copolymer (12% PHV, Biopol ICI), Gelatine Lösung durch 200 ml, 1 %
PVA Lösung (MW 9 - 10 x 103 Dalton) ersetzt, das Polymer in 30 ml
Methylenchlorid/Aceton (Volumenanteil 66 : 34) gelöst wird.
Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von
0,4 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 19
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG 502 durch 1 g PHB/PVB Copolymer (18% PHV, Biopol ICI), Gelatine Lösung durch 200 ml 1 % PVA Lösung in 30 ml Methylenchlorid/ Aceton (Volumenanteil 66 : 34) gelöst wird. Das mit dem Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,4 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 20
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei das Polymer Resomer® RG 502 durch 1 g Polycaprolactome [inherent vis: 1.26 dl/g in CHC13 bei 30 °C (Birmingham Polymers NC, USA], Gelatine durch 200 ml 1 % PVA Lösung (MW 9 - 10 kDal) ersetzt, das Polymer in 30 ml Methylenchlorid/ Aceton (Volumentanteil 70 : 30 ) gelöst wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,2 bis 8 μm Durchmesser. Beispiel 21
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Gelatine durch 400 ml, 3% Pluronic® F 68 Lösung ersetzt wird. Das mit 5% Mannitollösung resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktiven Mikropartikel von 0,4 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 22
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Gelatine durch 400 ml, 0.5% Na-Oleat Lösung ersetzt wird. Das mit 5% Mannitollösung aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,5 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 23 Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Gelatine durch 400 ml, 1 % Octyl-ß-D- Glucopyranosid Lösung ersetzt wird.
Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0, 1 bis 8 μm Durchmesser.
Beispiel 24
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Gelatine Lösung durch 400 ml, 1 % Saccharosepaimitat P-1570 (Ryoto Sugarester) versetzt wird.
Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0, 1 bis 7 μm Durchmesser.
Beispiel 25
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Gelatine Lösung durch 400 ml, 1 % Saccharose Stearat (Ryoto Sugarester) S-1670 versetzt wird.
Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,1 bis 7 μm Durchmesser. Beispiel 26
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei anstelle von Gelatine Lösung, 400 ml, 1 % Saccharosediester, SP 70 (Sisternen, The Netherlands) eingesetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0, 1 bis 7 μm Durchmesser.
Beispiel 27
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Methylenchlorid/ Aceton Lösungsgemisch durch 70 ml Ethylacetat ersetzt, anstelle von 10 ml Perfluoropentan 18 ml Perfluropentan eingesetzt wird.
Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0, 1 bis 5 μm Durchmesser.
Beispiel 28
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Aceton durch Ethylacetat ersetzt wird. Das mit Wasser aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,1 bis 7 μm Durchmesser.
Beispiel 29
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Aceton durch Methylacetat ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 1 bis 7 μm Durchmesser.
Beispiel 30
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Aceton durch Methylactat ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 1 bis 6 μm Durchmesser.
Beispiel 31 Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Aceton durch Ethylactat ersetzt wird.
Das mit Wasser aufgenommene Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 0,1 bis 6 μm Durchmesser. Beispiel 32
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Aceton durch Triacetin ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 1 bis 7 μm Durchmesser.
Beispiel 33
Es wird wie in Beispiel 1 verfahren, wobei Aceton durch Triethylcitrat ersetzt wird. Das mit Wasser resuspendierte Lyophilisat enthält ultraschallaktive Mikropartikel von 1 bis 7 μm Durchmesser.
Beispiel 34 0,375 g L-Lysin (Aldrich) werden in 25 ml Eisessig (Merck) gelöst; 2,5 g Resomer® RG-756 (Böhringer Ingelheim) werden in 75 ml Dichlormethan (Merck) gelöst. Die vereinigten Lösungen in einer Apparatur wie in Figur 1 abbgebildet weiter behandelt.
Dazu werden die vereinigten Lösungen zunächst in ein Reservoir (17) gegeben und die Anlage über Ventil (2) und Leitung (30) aus einer Vorratsflaschen mit dem Gas befüllt. Mittels einer Kolbenhubpumpe (16) wird die Lösung aus dem Reservoir (17) nach Durchströmen von Leitung (52), einem Wärmetauscher (15), einer Leitung (54). einem Ventil (20) und schließlich Leitung (55), der Düse (118) zugeleitet. Mit einem Druck von 94-96 bar wird die Copolymer enthaltende Lösung durch eine konventionelle Einstoffdüse (118) [Typ Schlick 121 V] in die Kolonne (12) versprüht, wobei gleichzeitig CO2 im überkritischen Zustand mit 90 bar/36 ° C und einem Durchsatz von 8,9 kg/h im Gleichstrom, über Einlaß (8), durch die Kolonne geleitet wird. Die Düse hat einen Durchmesser von 0,5 mm, der Sprühwinkel beträgt 10°.
Entsprechend der hohen Affinität des überkritischen CO2 zum Lösungsmittel wird den primär gebildeten Tröpfchen Lösungsmittel entzogen. Zurück bleiben kugelförmige feste Polymerpartikeln.
Die weiteren Schritte dienen im wesentlichen der Reinigung und Rückführung des Lösungsmittelbeladenen CO2, haben aber mit der Herstellung der Partikel nichts mehr zu tun. Die Aufbereitung des CO2 kann wie folgt geschehen. Das mit dem Lösemittel beladene Gas entströmt durch Leitungen (42) und (40), gesteuert durch 2 Magnetventile (7 und 9), dem Kolonnenende und wird auf 60 bar entspannt. Die Ventile sind so geschaltet, daß die pro Zeiteinheit in die Kolonne einströmende Menge des fluiden Gases unter Aufrechthaltung des Arbeitsdruckes der Kolonne entströmen kann. Das durch die Entspannung auf 60 bar abgekühlte, mit Lösungsmittel beladene CO2 wird mittels Leitung (62) in den auf 21 ° C temperierten Separator (10) geleitet, wo sich das Lösungsmittelgemisch infolge der unter diesen Bedingungen stark verminderten Löslichkeiten im CO abscheidet. Das vom Lösungsmittelgemisch befreite CO2 wird mittels Leitung (64 und 32) durch Druck- und Temperaturerhöhung (3 und 4) erneut in den überkritischen Zustand überführt (90 bar, 36° C) und zur weiteren Trocknung der entstandenen Partikel erneut der Kolonne über Leitung (34), Flüssiggaspumpe (4), Leitung (36), Wärmetauscher (5), Leitung (38) durch Einlaß (8) zugeführt.
Die Entnahme des im Separator (10) abgetrennten Lösungsmitte lgemischs erfolgt nach Abtrennung des Separators (10) aus dem Kreislauf durch Ventile (6) und (13) und Entspannung auf Atmosphärendruck über das Ventil (72).
Nachdem die gesamte im Reservoir enthaltene Menge an gelöstem Polymer versprüht wurde (Zeitdauer je nach Druck 20 bis 50 min), wird noch solange CO2 durch die Kolonne geleitet, bis im Separator (10) keine Lösungsmittelreste mehr zurückgewonnen werden können.
Nach Abschluß des Trocknungsvorganges wird der CO2-Strom zur Kolonne abgestellt, die Kolonne über die Ventile (11) und (14) auf Atmosphärendruck entspannt und die Partikel am unteren Kolonnenende (19) entnommen.
Es werden ultraschallaktive, gashaltige Mikropartikel mit einem Durchmesser von 5-10 μm erhalten.
Beispiel 35
0,375 g L-Lysin (Aldrich), 2,5 g Polymer (RG-756) werden in 25 ml Eisessig (Merck) und 75 ml Dichlormethan (Merck) gelöst und solange gerührt, bis eine klare Lösung entstanden ist. Die weitere Umsetzung erfolgt analog zu Beispiel 34.
Es werden ultraschallaktive, gashaltige Mikropartikel mit einem Durchmesser von 5-10 μm erhalten. Beispiel 36-41
Die Herstellung weitere Mikropartikel erfolg analog zu Beispiel 34. Die jeweils verwendeten Polymeren sowie weitere Daten sind in Tabelle 1 zusammengefaßt.
In allen Fällen werden ultraschallaktive, gashaltige Mikropartikel erhalten.
Die erhaltenen ultraschallaktiven, hohlen Mikropartikeln sind steril und frei von Lösemittelrückständen, Polymerisationskatalysatoren oder Initiatormolekülen. Sie besitzen eine gleichmäßige Teilchengrößenverteilung von 5 bis 10 μm.
Die Polymere werden jeweils in 75 ml Dichlormethan (Merck) und 25 ml Eisessig gelöst, die jeweilige Menge Aminosäure wird zugegeben. D,L-Phenylalanin ist geeigneterweise in bis 50 ml Ethanol (Merck) vorzulösen.
Versuchs- Polymer bzw. Einwaage Aminosäure Einwaage Molverhältnis πummer Copolymer Polymer [g] Aminosäure [g] Lactid/Glycolid
36 Poly-(D,L)-lacti_ 2,0 L-Lysin 0,5
37 Poly-(D,L)-lactid- 1.0 L-Phenyl-alanin 0,25 75 : 25 coglycolid
38 Poly-(D,L)-lactid- 2,0 D,L-Phenyl-alanin 0,5 75 : 25 coglycolid
39 Poly-(D,L)-lactid- 2,2 L-Tryptophan 0,55 75 : 25 coglycolid
40 Poly-L-lactid 6,0 L-Lysin 0,9
41 Poly-L-lactid 3,0 L-Lysin 0,45
Tabelle 1

Claims

Patentansprüche
1. Verfahren zur Herstellung von gasenthaltenden Mikropartikeln für die Ultraschalldiagnostik, deren Wandmaterial aus Polyestem von α-, ß- oder γ- Hydroxycarbonsäuren aufgebaut ist, dadurch gekennzeichnet, daß
(i) der jeweilige Polyester und gegebenenfalls eine oberflächenaktive Substanz in einem organischen Lösungsmitteln oder Lösungsmittelgemischen, von denen mindestens ein Lösungsmittel mit Wasser gut mischbar ist, gelöst wird, anschließend eine perfluorierte Verbindung oder Wasser in dieser Lösung dispergiert wird und anschließend diese Dispersion in Wasser, das eine oberflächenaktive Substanz enthält, mittels eines Rührers dispergiert wird, wobei das Lösungsmittel durch Gaseinleitung und Anlegen eines Vakuums entfernt wird und abschließend die so erhaltene Suspension mit einem geeigneten pharmazeutisch akzeptablen Kryoprotektor vermischt und gefriergetrocknet wird oder daß
(ii) das (die) gewünschte(n) Polyester und gegebenenfalls eine Aminosäure in mindestens einem organischen Lösungsmittel gelöst wird (werden), diese Lösung über eine Düse in eine Kolonne gespüht wird, die mit einem überkritischen Gas befüllt ist oder von diesem durchströmt wird, wobei das
Lösungsmittel vom überkritischen Gas aufgenommen wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, daß das Wandmaterial aus Polyglycolid (PGA) sowie dessen Copolymere mit L-Lactid (PGA/PLLA) oder PolyLactid (PLA) sowie dessen Stereocopolymere wie z.B. Poly-L-Lactid
(PLLA), Poly-DL-Lactid oder L-Lactid/DL-Lactid oder Poly-ß-hydroxybutyrat (PHBA) sowie dessen Copolymere mit ß-Hydroxyvalerat (PHBA/HVA) oder Poly-ß-hydroxypropionat (PHPA) oder Poly-p-dioxanon (PDS) oder Poly-δ- valerolacton oder Poly-ε-caprolacton besteht.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß bei Copolymeren aus Milchsäure und Glycolsäure das Mischungsverhältnis im Bereich von 85:15 bis 50:50 liegt.
4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß als Lösungsmittel Dichlormethan, Aceton, Ethylacetat, Methylacetat, Triacetin, Triethylcitrat, Ethyllactat. Isopropylacetat, Propylformiat, Butylformiat, Ethylformiat und/oder Methyllactat verwendet werden. 4. Verfahren nach Anspruch 1 (i), dadurch gekennzeichnet, daß als perfluorierte Verbindungen Perfluoropentan, Perfluorohexan, Perfluoro- 1,3- Dimethylcyclohexan, Perfluorocyclohexen, Perfluorodecalin und/oder Perfluoroether verwendet wird.
5. Verfahren nach Anspruch 1 (i), dadurch gekennzeichnet, daß als oberflächenaktive Substanz Substanzen aus der Gruppe der Poloxamere oder Poloxamine, Polyethylenglycol Alkylether, Polysorbate, Saccharoseester, Saccharoseester, Gelatine, Polyvinylpyrolidon, Fettalkoholpolyglycosid,
Chaps, Chap, Chapso, Decyl-ß-D-glycopyranosid, Decyl-ß-D-maltopyranosid, Dodecyl-ß-D-maltopyranosid, Natriumoleat, Polyethylenglykol, Polyvinylalkohol oder deren Gemische verwendet werden.
6. Verfahren nach Anspruch 1 (ii), dadurch gekennzeichnet, daß als Aminosäure L-Lysin, L-Phenylalanin, L-Tryptophan und/oder D,L-Phenylalanin verwendet wird.
7. Verfahren nach Anspruch 1 (ii), dadurch gekennzeichnet, daß als überkritisches Gas Distickstoffoxid, Kohlendioxid, Halogenkohlenwasserstoffe, gesättigte oder ungesättigte gasförmige Kohlenwasserstoffe, Stickstoffdioxid und/oder Ammoniak verwendet wird.
8. Verfahren nach Anspruch 1 (ii) dadurch gekennzeichnet, daß die Lösung mit einem Oberdruck von 94-96 bar durch eine konventionelle Einstoffdüse mit einem Düsendurchmesser von 0,5 mm und einem Sprühwinkel von 10° versprüht wird.
9. Mikropartikel für die Ultraschalldiagnostik hergestellt nach dem in Anspruch 1 genannten Verfahren.
10. Mikropartikel für die Ultraschalldiagnostik hergestellt nach den in Anspruch 1 genannten Verfahren enthaltend als Gas Luft, Stickstoff, Sauerstoff, Edelgase, Distickstoffoxid, Kohlendioxid, Halogenkohlenwasserstoffe, gesättigte oder ungesättigte gasförmige Kohlenwasserstoffe, Stickstoffdioxid und/oder
Ammoniak.
PCT/EP1996/001107 1995-03-14 1996-03-14 Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesen verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik Ceased WO1996028191A1 (de)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AT96908039T ATE241388T1 (de) 1995-03-14 1996-03-14 Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesem verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik
US08/913,312 US6468506B1 (en) 1995-03-14 1996-03-14 Process for producing polymeric microparticles, microparticles produced by said process and the use of such particles in medical diagnostics
EP96908039A EP0822836B1 (de) 1995-03-14 1996-03-14 Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesem verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik
DE59610478T DE59610478D1 (de) 1995-03-14 1996-03-14 Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesem verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik
JP52728696A JP3943130B2 (ja) 1995-03-14 1996-03-14 ポリマー微粒子を製造するための方法、該方法により製造された微粒子及び医療診断におけるそれらの使用
CA002214778A CA2214778C (en) 1995-03-14 1996-03-14 Process for the production of polymeric microparticles, microparticles that are produced according to this process as well as their use in medical diagnosis

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19510690A DE19510690A1 (de) 1995-03-14 1995-03-14 Polymere Nano- und/oder Mikropartikel, Verfahren zu deren Herstellung, sowie Verwendung in medizinischen Diagnostik und Therapie
DE19510690.3 1995-03-14

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO1996028191A1 true WO1996028191A1 (de) 1996-09-19

Family

ID=7757539

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP1996/001108 Ceased WO1996028192A1 (de) 1995-03-14 1996-03-14 Mikropartikel, diese enthaltene mittel für die ultraschalldiagnostik sowie verfahren zur herstellung der partikel und mittel
PCT/EP1996/001107 Ceased WO1996028191A1 (de) 1995-03-14 1996-03-14 Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesen verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP1996/001108 Ceased WO1996028192A1 (de) 1995-03-14 1996-03-14 Mikropartikel, diese enthaltene mittel für die ultraschalldiagnostik sowie verfahren zur herstellung der partikel und mittel

Country Status (7)

Country Link
US (2) US6468506B1 (de)
EP (2) EP0822836B1 (de)
JP (2) JP4130926B2 (de)
AT (2) ATE229818T1 (de)
CA (2) CA2214778C (de)
DE (3) DE19510690A1 (de)
WO (2) WO1996028192A1 (de)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004069153A3 (en) * 2003-01-27 2006-11-09 Medrad Inc Apparatus, system and method for generating bubbles on demand
US8142814B2 (en) * 2003-02-07 2012-03-27 Ferro Corporation Method and apparatus for supercritical fluid assisted particle production

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5820850A (en) * 1995-06-07 1998-10-13 Molecular Biosystems, Inc. Gas-filled amino acid block co-polymer microspheres useful as ultrasound contrast agents
IL126073A (en) * 1996-03-05 2002-02-10 Acusphere Inc Microencapsulated fluorinated gases for use as imaging agents
US5611344A (en) * 1996-03-05 1997-03-18 Acusphere, Inc. Microencapsulated fluorinated gases for use as imaging agents
US5837221A (en) 1996-07-29 1998-11-17 Acusphere, Inc. Polymer-lipid microencapsulated gases for use as imaging agents
GB2340040B (en) * 1997-04-30 2001-11-28 Point Biomedical Corp Microparticles useful as ultrasonic contrast agents and for delivery of drugs into the bloodstream
GB9717542D0 (en) 1997-08-19 1997-10-22 Nycomed Imaging As Process
US20060165606A1 (en) 1997-09-29 2006-07-27 Nektar Therapeutics Pulmonary delivery particles comprising water insoluble or crystalline active agents
US6309623B1 (en) * 1997-09-29 2001-10-30 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Stabilized preparations for use in metered dose inhalers
US6565885B1 (en) 1997-09-29 2003-05-20 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Methods of spray drying pharmaceutical compositions
IT1298269B1 (it) * 1998-02-18 1999-12-20 Promefarm S R L Uso di un polietilenglicole come mezzo di contrasto in ecografia
US6234167B1 (en) * 1998-10-14 2001-05-22 Chrysalis Technologies, Incorporated Aerosol generator and methods of making and using an aerosol generator
AU6635900A (en) 1999-08-13 2001-03-13 Point Biomedical Corporation Microparticles useful as ultrasonic contrast agents and for lymphatic system
WO2001012069A1 (en) * 1999-08-13 2001-02-22 Point Biomedical Corporation Hollow microspheres with controlled fragility for medical use
US6883516B2 (en) 2000-04-27 2005-04-26 Chrysalis Technologies Incorporated Method for generating an aerosol with a predetermined and/or substantially monodispersed particle size distribution
MY136453A (en) * 2000-04-27 2008-10-31 Philip Morris Usa Inc "improved method and apparatus for generating an aerosol"
US8404217B2 (en) * 2000-05-10 2013-03-26 Novartis Ag Formulation for pulmonary administration of antifungal agents, and associated methods of manufacture and use
US7871598B1 (en) * 2000-05-10 2011-01-18 Novartis Ag Stable metal ion-lipid powdered pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of use
ES2525087T5 (es) 2000-05-10 2018-06-28 Novartis Ag Polvos basados en fosfolípidos para administración de fármacos
AU2001280934A1 (en) * 2000-07-28 2002-02-13 Alliance Pharmaceutical Corp. Methods and compositions to upregulate, redirect or limit immune responses to bioactive compounds
US7077130B2 (en) 2000-12-22 2006-07-18 Chrysalis Technologies Incorporated Disposable inhaler system
US6799572B2 (en) * 2000-12-22 2004-10-05 Chrysalis Technologies Incorporated Disposable aerosol generator system and methods for administering the aerosol
US6501052B2 (en) 2000-12-22 2002-12-31 Chrysalis Technologies Incorporated Aerosol generator having multiple heating zones and methods of use thereof
US6491233B2 (en) 2000-12-22 2002-12-10 Chrysalis Technologies Incorporated Vapor driven aerosol generator and method of use thereof
US6701921B2 (en) * 2000-12-22 2004-03-09 Chrysalis Technologies Incorporated Aerosol generator having heater in multilayered composite and method of use thereof
US6681998B2 (en) 2000-12-22 2004-01-27 Chrysalis Technologies Incorporated Aerosol generator having inductive heater and method of use thereof
US6640050B2 (en) 2001-09-21 2003-10-28 Chrysalis Technologies Incorporated Fluid vaporizing device having controlled temperature profile heater/capillary tube
US6568390B2 (en) 2001-09-21 2003-05-27 Chrysalis Technologies Incorporated Dual capillary fluid vaporizing device
US6804458B2 (en) 2001-12-06 2004-10-12 Chrysalis Technologies Incorporated Aerosol generator having heater arranged to vaporize fluid in fluid passage between bonded layers of laminate
US6681769B2 (en) 2001-12-06 2004-01-27 Crysalis Technologies Incorporated Aerosol generator having a multiple path heater arrangement and method of use thereof
JP2005514393A (ja) 2001-12-19 2005-05-19 ネクター セラピューティクス アミノグリコシドの肺への供給
US6701922B2 (en) 2001-12-20 2004-03-09 Chrysalis Technologies Incorporated Mouthpiece entrainment airflow control for aerosol generators
ATE374598T1 (de) * 2002-03-15 2007-10-15 Alrise Biosystems Gmbh Mikropartikel und verfahren zur deren herstellung
US20040247624A1 (en) * 2003-06-05 2004-12-09 Unger Evan Charles Methods of making pharmaceutical formulations for the delivery of drugs having low aqueous solubility
US7367334B2 (en) 2003-08-27 2008-05-06 Philip Morris Usa Inc. Fluid vaporizing device having controlled temperature profile heater/capillary tube
US8012457B2 (en) 2004-06-04 2011-09-06 Acusphere, Inc. Ultrasound contrast agent dosage formulation
US20080213593A1 (en) * 2005-01-21 2008-09-04 President And Fellows Of Harvard College Systems And Methods For Forming Fluidic Droplets Encapsulated In Particles Such As Colloidal Particles
US20090216117A1 (en) * 2005-04-15 2009-08-27 Shinshu University Novel method of using triacetin and auxiliary agent for ultrasonic diagnostic examination
US20070031342A1 (en) * 2005-06-22 2007-02-08 Nektar Therapeutics Sustained release microparticles for pulmonary delivery
US20070036842A1 (en) * 2005-08-15 2007-02-15 Concordia Manufacturing Llc Non-woven scaffold for tissue engineering
DE502006007655D1 (de) * 2005-10-25 2010-09-23 Evonik Degussa Gmbh Präparate umfassend hyperverzweigte polymere
DE102005051342A1 (de) * 2005-10-25 2007-04-26 Goldschmidt Gmbh Verkapselung und kontrollierte Freisetzung biologisch aktiver Wirkstoffe mit enzymatisch abbaubaren hyperverzweigten Trägerpolymeren
AU2008213911A1 (en) * 2007-02-09 2008-08-14 Newsouth Innovations Pty Limited Hollow microparticles
EP1982698A1 (de) * 2007-04-18 2008-10-22 Evonik Degussa GmbH Präparate zur gesteuerten Freisetzung von bioaktiven Naturstoffen
AU2008254328A1 (en) 2007-05-18 2008-11-27 The Johns Hopkins University A treatment simulator for brain diseases and method of use thereof
EP2103313A1 (de) * 2008-03-19 2009-09-23 Koninklijke Philips Electronics N.V. Verfahren für die Synthese von Hohlkugeln
CN101780285B (zh) * 2010-03-05 2012-08-29 中山大学 一种热增强型负载液态氟碳的聚合物纳米超声显像胶束及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0458745A1 (de) * 1990-05-18 1991-11-27 BRACCO International B.V. Mit Gas oder Luft gefüllte polymere Mikrokapseln, verwendbar in Form von Suspensionen bei flüssigen Trägern für Ultraschall-Echographie
DE4219723A1 (de) * 1992-06-13 1993-12-16 Schering Ag Mikropartikel, Verfahren zu deren Herstellung, sowie die Verwendung dieser in der Diagnostik
DE4232755A1 (de) * 1992-09-26 1994-03-31 Schering Ag Mikropartikelpräparationen aus biologisch abbaubaren Mischpolymeren

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4718433A (en) * 1983-01-27 1988-01-12 Feinstein Steven B Contrast agents for ultrasonic imaging
DE3313946A1 (de) * 1983-04-15 1984-10-18 Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen Mikropartikel und gasblaeschen enthaltende ultraschall-kontrastmittel
DE3313947A1 (de) * 1983-04-15 1984-10-18 Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen Mikropartikel und gasblaeschen enthaltende ultraschall-kontrastmittel
DE3324754A1 (de) * 1983-07-06 1985-01-17 Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen Ultraschallkontrastmittel sowie dessen herstellung
DE3744329A1 (de) * 1987-12-28 1989-07-06 Schwarz Pharma Gmbh Verfahren zur herstellung einer mindestens einen wirkstoff und einen traeger umfassenden zubereitung
DE4219724A1 (de) 1992-06-13 1993-12-16 Schering Ag Verwendung von Mikrokapseln als Kontrastmittel für die Farbdoppler-Sonographie
DE58908194D1 (de) * 1988-02-05 1994-09-22 Schering Ag Ultraschallkontrastmittel, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung als diagnostika und therapeutika.
US5425366A (en) * 1988-02-05 1995-06-20 Schering Aktiengesellschaft Ultrasonic contrast agents for color Doppler imaging
MX9205298A (es) * 1991-09-17 1993-05-01 Steven Carl Quay Medios gaseosos de contraste de ultrasonido y metodo para seleccionar gases para usarse como medios de contraste de ultrasonido
US5820850A (en) * 1995-06-07 1998-10-13 Molecular Biosystems, Inc. Gas-filled amino acid block co-polymer microspheres useful as ultrasound contrast agents
US5611344A (en) * 1996-03-05 1997-03-18 Acusphere, Inc. Microencapsulated fluorinated gases for use as imaging agents
US5837221A (en) * 1996-07-29 1998-11-17 Acusphere, Inc. Polymer-lipid microencapsulated gases for use as imaging agents

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0458745A1 (de) * 1990-05-18 1991-11-27 BRACCO International B.V. Mit Gas oder Luft gefüllte polymere Mikrokapseln, verwendbar in Form von Suspensionen bei flüssigen Trägern für Ultraschall-Echographie
DE4219723A1 (de) * 1992-06-13 1993-12-16 Schering Ag Mikropartikel, Verfahren zu deren Herstellung, sowie die Verwendung dieser in der Diagnostik
DE4232755A1 (de) * 1992-09-26 1994-03-31 Schering Ag Mikropartikelpräparationen aus biologisch abbaubaren Mischpolymeren

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004069153A3 (en) * 2003-01-27 2006-11-09 Medrad Inc Apparatus, system and method for generating bubbles on demand
US8142814B2 (en) * 2003-02-07 2012-03-27 Ferro Corporation Method and apparatus for supercritical fluid assisted particle production

Also Published As

Publication number Publication date
JP4130926B2 (ja) 2008-08-13
US6468506B1 (en) 2002-10-22
WO1996028192A1 (de) 1996-09-19
JPH11501646A (ja) 1999-02-09
DE59610478D1 (de) 2003-07-03
EP0814848B1 (de) 2002-12-18
CA2214778C (en) 2009-01-06
US6207135B1 (en) 2001-03-27
EP0822836A1 (de) 1998-02-11
ATE241388T1 (de) 2003-06-15
DE59610007D1 (de) 2003-01-30
CA2214737A1 (en) 1996-09-19
ATE229818T1 (de) 2003-01-15
JPH11501647A (ja) 1999-02-09
EP0822836B1 (de) 2003-05-28
JP3943130B2 (ja) 2007-07-11
CA2214778A1 (en) 1996-09-19
DE19510690A1 (de) 1996-09-19
CA2214737C (en) 2008-12-09
EP0814848A1 (de) 1998-01-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0822836B1 (de) Verfahren zur herstellung von polymeren mikropartikeln, nach diesem verfahren hergestellte mikropartikel sowie deren verwendung in der medizinischen diagnostik
DE69104264T3 (de) Mit Gas oder Luft gefüllte polymere Mikrokapseln, verwendbar in Form von Suspensionen bei flüssigen Trägern für Ultraschall-Echographie.
DE69526491T2 (de) Verfahren zur herstellung hohler mikrosphaeren
DE19508049C2 (de) Verwendung von Methylenmalondiesterderivaten zur Herstellung von gasenthaltenden Mikropartikeln
EP0662005B1 (de) Mikropartikelpräparationen aus biologisch abbaubaren mischpolymeren
EP0077752B1 (de) Flüssige Mischung zur Aufnahme und Stabilisierung von Gasbläschen zur Verwendung als Kontrastmittel für die Ultraschalldiagnostik und deren Herstellung
DE69838669T2 (de) Mikropartikel, geeignet als kontrastmittel im ultraschall und zur wirkstoffgabe in den blutkreislauf
DE69233489T2 (de) Verfahren zur Herstellung von Diagnostica
EP0717617B1 (de) Wirkstoffe und gas enthaltende mikropartikel
EP0644777B2 (de) Mikropartikel, verfahren zu deren herstellung, sowie die verwendung dieser in der diagnostik
DE69729088T2 (de) Mikroverkapselte fluorierte gase zur anwendung als bilderzeugende mittel
EP0644776B1 (de) Verwendung von mikrokapseln als kontrastmittel für die farbdoppler-sonographie
EP0889738A1 (de) Mikropartikel, verfahren zu deren herstellung, sowie deren verwendung in der ultraschalldiagnostik
DE19813174A1 (de) Mikropartikel aus Polymeren und mindestens einer gerüstbildenden Komponente und ihre Herstellung und Verwendung in der Ultraschalldiagnostik und zur ultraschallinduzierten Wirkstofffreisetzung
DE4330958A1 (de) Neue wirkstoffhaltige Mikropartikel, diese enthaltende Mittel, deren Verwendung zur ultraschallgesteuerten Freisetzung von Wirkstoffen sowie Verfahren zu deren Herstellung
DE4416818A1 (de) Neue wirkstoffhaltige Mikropartikel, diese enthaltende Mittel, deren Verwendung zur ultraschallgesteuerten Freisetzung von Wirkstoffen sowie Verfahren zu deren Herstellung

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): CA JP US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE

DFPE Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed before 20040101)
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 1996908039

Country of ref document: EP

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2214778

Country of ref document: CA

Ref country code: CA

Ref document number: 2214778

Kind code of ref document: A

Format of ref document f/p: F

ENP Entry into the national phase

Ref country code: JP

Ref document number: 1996 527286

Kind code of ref document: A

Format of ref document f/p: F

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 1996908039

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 08913312

Country of ref document: US

WWG Wipo information: grant in national office

Ref document number: 1996908039

Country of ref document: EP