WO2003077893A2 - Compositions pour le traitement de pathologies fonctionnelles digestives - Google Patents

Compositions pour le traitement de pathologies fonctionnelles digestives Download PDF

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Definitions

  • the present application relates to compositions and methods for the treatment of intestinal pathologies. It also relates to compositions and methods for regulating the paracellular permeability of the intestinal epithelium.
  • the compositions and methods of the invention are based in particular on the use of agents or conditions modulating the opening of tight junctions of the intestinal epithelium.
  • the invention can be used for the preventive or curative treatment of various pathologies, such as digestive functional disorders (TFD), more particularly intestinal functional disorders (TFI), and in particular irritable bowel syndrome (SU also called "Irritable” Bowel Syndrome ", IBS), hyperalgesia and other abdominal pain, etc., in mammals, especially humans.
  • the intestinal epithelium is the center of very important exchanges between the external environment and the organism. These exchanges can take place either through the cells of the epithelium, or through parallel networks.
  • the transport of water or electrolytes, or the absorption of small molecules (molecular weight generally less than about 1000 Da) at the level of the gastric, intestinal or colic mucosa is carried out by transcellular route, through epithelial cells or enterocytes.
  • the absorption of large molecules and the passage of antigens, toxins or immune cells takes place mainly by the paracellular route, at the level of "tight junctions", which are arranged between the epithelial cells.
  • JS epithelial tight junctions
  • TJ The epithelial tight junctions
  • JS epithelial tight junctions
  • These structures ensure and control the paracellular transepithelial transport, from the outside to the submucosa, of various macromolecules (allergens, irritants, toxins, microorganisms).
  • These structures also allow the migration of immune cells (eg, immunocytes) to the outside (digestive tract).
  • Tight junctions are flexible structures made up of a complex assembly of transmembrane proteins (occludins, claudins) and cytoplasmic proteins (shingles ocludens proteins ZO-1, ZO-2, ZO-3, proteins AF7, cinguline or 7H6, etc. ), which are associated with elements of the cytoskeleton (myosin, actin filaments, etc.).
  • abdominal pain without elimination disorder can be caused by food allergies or intolerances or manifest as part of celiac disease for example.
  • Functional intestinal disorders affect 15 to 20% of the population and result in dyspeptic and / or intestinal symptoms for which no organic cause has so far been identified and which require specific treatment.
  • the common characteristic of functional digestive disorders meeting ROME criteria is abdominal pain, present in the postprandial period, whether localized in the upper part (dyspepsia) or in the lower part of the abdomen.
  • One particular disorder that affects the lower abdomen is Irritable Bowel Syndrome (SU). The pain of functional bowel disorders is most often relieved by defecation.
  • SU Irritable Bowel Syndrome
  • Such a process of sensitizing the intestine to pain can be induced by factors such as stress, pathogens, allergens, enzymes of the trypsin or tryptase type for example, bile salts, xenobiotics, chemical molecules of glycerol type, TNBS or taurocholate for example and / or sequelae resulting from an infection or from a surgical operation.
  • factors such as stress, pathogens, allergens, enzymes of the trypsin or tryptase type for example, bile salts, xenobiotics, chemical molecules of glycerol type, TNBS or taurocholate for example and / or sequelae resulting from an infection or from a surgical operation.
  • allergens, pathogens and / or chemical molecules for example are absorbed, they come into contact with the intestinal epithelial wall which prevents their introduction into the body and their contact with the cells of immunity.
  • the present invention results from the demonstration of an in vivo role of tight junctions of the intestinal epithelium in the process of sensitization to pain.
  • the "opening" of tight junctions of the colon epithelium by different molecules or by stress leads to spontaneous hyperalgesia or hypersensitivity to distension (characteristic state of 1TB S).
  • the results obtained in the context of the present invention thus establish for the first time and surprisingly that the opening of tight junctions causes a state of lasting delayed hyperalgesia.
  • the present invention also stems from the development of new therapeutic strategies for the treatment of intestinal pathologies, based on a modulation of the paracellular permeability of the intestinal epithelium.
  • the present invention provides, for the first time, a therapeutic approach to intestinal pathologies based on the use of compounds or conditions making it possible to control the opening of tight junctions of the intestinal epithelium.
  • these compounds or conditions make it possible to modulate the tension of the cytoskeleton of the intestinal epithelial cells or to directly regulate, preferably decrease, or even block, the opening of the tight junctions of the intestinal epithelium.
  • This approach therefore makes it possible to control the opening and closing of the tight junctions of the intestinal epithelium, without necessarily resorting to de novo protein synthesis and / or to significant protein and / or structural degradations at the level of the epithelium.
  • This strategy makes it possible to regulate the permeability of the intestinal epithelium in a specific, fine and reactive manner, and thus to act on the transfer of allergens, pathogens and / or chemical molecules to the cells of immunity.
  • This strategy is particularly suitable for obtaining a rapid and controllable biological effect over time (reversible).
  • results presented below show that a substance capable of loosening the tight epithelial junctions (peptides activating the PAR-2 receptor) triggers delayed hyperalgesia and hypersensitivity to distension.
  • the intracolic infusion of bile salts increases the passage of macromolecules by opening the tight junctions and is accompanied by the same state of delayed hyperalgesia.
  • stress stress increases the permeability of tight junctions and leads to a state of rectal hyperalgesia.
  • results presented in the examples show that in all cases (peptide activating PAR-2, taurocholate or stress) the suppression of this increase in paracellular permeability by a chemical agent (TAP for example), which is fixed at the level of tight junctions and blocks tight junctions, or by molecules relaxing the cytoskeleton of epithelial cells (ML-7, PD98059) suppresses or reduces this hyperalgesia characteristic of TFD and in particular of SU.
  • TEP chemical agent
  • a first object of the invention therefore lies more particularly in the use of a compound controlling the opening of tight junctions of the intestinal epithelium, for the preparation of a medicament intended for the preventive or curative treatment of intestinal pathologies characterized by a state of hyperalgesia.
  • Another object of the invention resides in a method of preventive or curative treatment of intestinal pathologies characterized by a state of hyperalgesia, comprising the administration to a subject of an effective amount of a compound controlling the opening of tight junctions of the intestinal epithelium.
  • the compounds controlling the opening of the tight junctions of the intestinal epithelium are in particular compounds which modulate the tension of the cytoskeleton of intestinal epithelial cells or compounds which decrease, even block, the opening of the tight junctions of the intestinal epithelium.
  • the invention thus relies on the use of compounds modulating the tension and the state of contraction of the cytoskeleton of the cells of the intestinal epithelium or preventing too large an opening of the tight junctions which results in hyperalgesia or in hypersensitivity to distension. of the intestine.
  • the proteins making up the tight junctions are associated with the cytoskeleton of the cells they connect. It is proposed in the context of the invention that the tension of the cytoskeleton or the opening of tight junctions can be modulated in subjects suffering from intestinal diseases or disorders to act in a non-destructive and transient manner on the permeability of their intestinal epithelium. Thus, the contraction of the cytoskeleton must promote the opening of tight junctions, while a relaxation of the cytoskeleton (or an inhibition of contraction) must promote the closing of the junctions. It is also possible to directly modulate tight junctions, in particular on the proteins constituting them, by reducing or blocking their opening.
  • use is preferably made of compounds (or conditions) which modulate the contraction of the cytoskeleton of intestinal epithelial cells (especially human) or which directly control the opening of tight junctions of the intestinal epithelium (especially human) .
  • compounds which inhibit the contraction of the cytoskeleton of intestinal epithelial cells or which activate or promote it or compounds which directly decrease or block the opening of tight junctions or which increase the opening of these this.
  • the activity of the compound modulating the opening of the tight junctions of the intestinal epithelium, in particular by modulation of the tension of the cytoskeleton can be direct or indirect, that is to say directed on the constituents of the cytoskeleton or on voltage regulators.
  • the compounds which act directly on the tension of the cytoskeleton are preferred.
  • compounds with selective activity on the tension of the cytoskeleton are also preferred, that is to say typically compounds which do not directly affect the structure of the proteins constituting the tight junctions.
  • a compound is considered to modulate the tension of the cytoskeleton when it modulates the opening of tight junctions.
  • An inhibitory effect on the contraction or tension of the actin and / or myosin filaments need not be complete or total, but it is enough that it reduces the contraction or the tension of the cytoskeleton sufficiently to reduce the opening of the tight junctions.
  • the reduction in the opening of tight junctions preferably corresponds to a minimum reduction of approximately 25%, advantageously of approximately 30%, even more preferably of approximately 50% of the paracellular permeability of the intestinal epithelium.
  • Paracellular permeability can be measured using a marker such as 51 Cr-EDTA which, after passing through the blood, is measured in the urine for 24 hours (cf.: example 1).
  • the term “compound” must be taken in a broad meaning, that is to say, designating any agent, substance, composition, condition, treatment or process making it possible to modulate the opening of the tight junctions of the intestinal epithelium. It is advantageously an agent (eg, a molecule) or a combination or association of agents.
  • compounds are used which directly modulate the opening of the tight junctions, in particular by fixing, preferably in a reversible manner, on the proteins constituting the tight junctions.
  • TAP 2, 4, 6-triaminopyrimidine
  • compounds that inhibit (or modulate) the contraction or the tension of the light chain of myosin and / or actin are used, or compounds that inhibit (or modulate) the degradation of actin.
  • MLCK myosin light chain kinase
  • a particular example of selective inhibitors of MLCK is the compound ML-7 ⁇ 1- (5-iodonaphthalene-1-sulfonyl) -1H-hexahydro-1,4-diazepine ⁇ (Makishima M. et al. FEBS Lett. 1991; 287: 175).
  • Other examples of such inhibitors are in particular the compound ML-9 (Wilson DP. Et al. J Biol Chem. 2001; 13: 165) or other non-selective: Wortmannin (Warashina A. Life Sci 2000; 13: 2587 -93), H-7 (Piao Zf et al.
  • KT 7692 Warashina A. Life Sci 2000; 13: 2587-93.
  • Other targets acting on the tension of the cytoskeleton are in particular myosin-binding proteins, such as for example cingulin, or junction molecules, such as cadherin-E, catenin- ⁇ or desmosomes. Modulating the activity or expression of these proteins makes it possible to regulate the tension of the cytoskeleton, within the framework of the present invention.
  • a particular object of the invention therefore lies in the use of a modulator (in particular of an inhibitor) of the activity or of the structure or of the expression of the molecules of the cytoskeleton.
  • the compound can be for example an antisense nucleic acid, a synthetic molecule, an antibody fragment, etc.
  • the invention it is possible to use compounds that inhibit the synthesis of proteins or other molecules ensuring the connection between the proteins of the cytoskeleton and the proteins of the tight junctions.
  • proteins of tight junctions there may be mentioned in particular the occludin, claudin, ZO-1, ZO-2, ZO-3, AF7 and 7H6 proteins.
  • One means according to the invention for modulating the opening or closing of tight junctions therefore lies in regulating the synthesis of binding proteins between the cytoskeleton and the proteins of tight junctions. By stimulating this synthesis, it is expected that the bonds between the tight junctions and the cytoskeleton will be strengthened, leading to lower permeability of the epithelium.
  • MAPKK mitogen-activated kinases
  • kinase MEK1 or kinase-PI3 inhibitors of mitogen-activated kinases
  • compounds PD098,059 ⁇ 2- Amino-3-methoxyphenyl) -4H-1-benzopyran-4-one ⁇
  • LY294002 ⁇ 2- (4-Mo holinyl) -8-phenyl- 1 (4H) -benzopyran-4-one ⁇
  • HGF hepatic growth factor
  • EGF endothelial growth factor
  • IGF-1 or gamma interferon growth factors
  • Another approach enabling indirect regulation of the cytoskeleton tension is based on the use of the GLP2 peptide (“glucagon-like peptide 2”) or its derivatives, which can modify the permeability of the intestinal epithelium by an indirect effect on contraction of the cytoskeleton.
  • GLP2 peptide glucagon-like peptide 2
  • certain molecules acting on receptors located at the apical pole of epithelial cells can act indirectly on the cytoskeleton.
  • a preferred embodiment of the invention comprises the use of agents which act directly on the tension of the cytoskeleton, in particular molecules inhibiting the contraction of the cytoskeleton, in particular molecules inhibiting the contraction or the tension light chains of myosin and / or actin, or inhibitors of actin degradation.
  • the compounds used are advantageously molecules, which can be in isolated form or in the form of a combination, of biological extracts, etc. These molecules can be synthetic, semi-synthetic or biological, in particular of animal, viral, plant or bacterial origin.
  • the present invention can be used for the treatment or management of pathologies or disorders of the digestive system characterized by a state of hyperalgesia, in particular intestinal functional disorders, diseases inflammatory bowel disease (IBD), food intolerance (allergies, conditioning, etc.) characterized by chronic visceral pain.
  • IBD diseases inflammatory bowel disease
  • food intolerance allergies, conditioning, etc.
  • chronic visceral pain It is particularly suitable for the preventive or curative treatment of hyperalgesia and in particular of irritable bowel syndrome (SU) whatever its form (constipation, diarrhea or a combination of the two), but also chronic visceral pain not falling within in the context of SU, such as functional abdominal pain without faecal elimination disorder (F APS: Functional Abdominal Pain) and pain related to food intolerance and celiac disease.
  • SU irritable bowel syndrome
  • F APS Functional Abdominal Pain
  • compositions and methods of the invention make it possible to reduce the suffering of the subjects, to attenuate the symptoms or the cause of these disorders.
  • the present invention surprisingly demonstrates that the suppression of the increase in paracellular permeability associated with the opening of tight junctions prevents the onset of visceral hyperalgia.
  • a particular object of the invention lies in the use of a compound as defined above for the preparation of a medicament intended to control, in particular to reduce, the paracellular permeability of the intestinal epithelium in subjects suffering from intestinal diseases characterized by a state of hyperalgesia, in particular chronic inflammatory diseases characterized by an accumulation, in the submucosal layer, of immunocytes (for example mast cells and / or enterochromaffin cells), by an increased sensitivity of the parietal mechanoreceptors and possibly by an infiltration of colon bacteria into the submucosal layer, for example hyperalgesia and in particular irritable bowel syndrome.
  • intestinal diseases characterized by a state of hyperalgesia, in particular chronic inflammatory diseases characterized by an accumulation, in the submucosal layer, of immunocytes (for example mast cells and / or enterochromaffin cells), by an increased sensitivity of the parietal mechanoreceptors and possibly by an infiltration of colon bacteria into the submucos
  • Another particular object of the invention resides in the use of a compound as defined above for the preparation of a medicament intended to reduce sensitization to allergens, pathogens and / or chemical molecules in affected or sensitive subjects functional intestinal diseases, in particular intestinal disorders characterized by an accumulation, in the submucosal layer, of immunocytes, in particular for example mast cells and / or enterochromaffin cells, by an increased sensitivity of the parietal mechanoreceptors and possibly by an infiltration of colon bacteria in the submucosal layer, for example hyperalgesia and in particular irritable bowel syndrome.
  • functional intestinal diseases in particular intestinal disorders characterized by an accumulation, in the submucosal layer, of immunocytes, in particular for example mast cells and / or enterochromaffin cells, by an increased sensitivity of the parietal mechanoreceptors and possibly by an infiltration of colon bacteria in the submucosal layer, for example hyperalgesia and in particular irritable bowel syndrome.
  • Another particular object of the invention resides in the use of a compound as defined above for the preparation of a medicament intended to reduce the transepithelial migration of immunocytes and the accumulation of immunocytes in the layer mucosa of subjects suffering from a functional intestinal pathology, in particular an intestinal affection inducing visceral hyperalgesia, for example irritable bowel syndrome, characterized by an accumulation, in the submucosal layer of immunocytes, in particular of mast cells and / or enterochromaffin cells, by increased sensitivity of the parietal mechanoreceptors and possibly by infiltration of colon bacteria into the submucosal layer.
  • the invention also relates to methods of treatment of the conditions indicated above, comprising the administration to a subject suffering from an intestinal pathology or sensitive to intestinal pathologies, of a compound or treatment as defined above.
  • the compound or treatment is administered in a dose effective to reduce the paracellular permeability of the intestinal epithelium and / or to reduce pain sensitivity and / or to reduce the transepithelial migration of allergens, toxins, irritants or microorganisms and thus the accumulation of immunocytes in the submucosal layer of the intestine.
  • the compound can be administered by different routes and in different forms.
  • the compound can be in liquid or solid form, typically in the form of a tablet, capsule, ampoule or oral solution, solution for injection, etc.
  • Compounds formulated in a form which can be administered orally oral solutions, tablets, ampoules, syrups, etc.) or rectally are preferred.
  • Suppository packaging is particularly preferred, where possible.
  • other forms of administration are possible, such as injections (intraperitoneal, intradermal, subcutaneous, intramuscular, intravenous, intra-arterial, etc.), pastes, gels, etc.
  • the compounds can be used alone or in combination and / or in combination with other active agents, such as, for example, other active substances used in the treatment of irritable bowel syndrome. Mention may be made, for example, of anti-cholinergic compounds, prokinetics, anti-diarrheal agents, modifiers of digestive motility, etc. These various agents can be used in therapeutic combination, and administered in a separate, combined, time-spread or concomitant form.
  • Another object of the invention lies in a pharmaceutical product or combination comprising at least one compound which modulates the opening of tight junctions of the intestinal epithelium and at least one other active agent selected from anti-cholinergic compounds, substances prokinetics, anti-diarrheal, laxatives or modifiers of motor skills, visceral sensitivity (or digestive sensitivity), for a combined use, separate or spaced over time.
  • Another subject of the invention resides in a pharmaceutical composition comprising at least one compound which modulates the opening of the tight junctions of the intestinal epithelium and a pharmaceutically acceptable excipient, said composition being preferably formulated for oral administration. or rectal.
  • the composition is in the form of a suppository, or in the form of an oral solution.
  • Figure 1 Influence of increasing doses of a PAR-2 receptor activating peptide (SLIGRL) on the absorption of a macromolecule ( 5l Cr-EDTA) evaluated by the percentage found in the urine collected for 24 hours in rats.
  • SLIGRL PAR-2 receptor activating peptide
  • FIG. 2 Influence of the concomitant administration of a “JS” blocker (TAP-100 mM) on the increase in paracellular permeability to 51 Cr- EDTA induced by the intracolic injection of SLIGRL (0.5 mg / rat). This increase is suppressed by the infusion (10 h) of a solution of 2, 4, 6 triaminopyrimidine (TAP) which blocks the tight junctions (JS).
  • TEP 2, 4, 6 triaminopyrimidine
  • Figure 3 Suppression, using a “JS” blocker (TAP-100 mM), of rectal hypersensitivity to distension induced by SLIGRL (0.2 mg).
  • Figure 4 Influence of intracolic perfusion of a “JS” blocker on rectal hyperalgesia at distension induced by stress stress in the female rat.
  • Figure 5 Effects of repeated administration of an inhibitor of MLCK on rectal hyperalgesia induced by intracolic administration of SLIGRL (200 ⁇ g) in rats. Regarding hyperalgesia induced by SLIGRL, only repeated administrations of ML-7 (3 doses 1 mg / kg at 12 h interval) reduce hyperalgesia for all volumes of distension.
  • Figure 6 Effects of repeated administration of an inhibitor of MLCK on rectal hyperalgesia induced by intracolic administration of SLIGRL (200 ⁇ g) in rats.
  • SLIGRL-induced hyperalgesia single administration of PD 098 059 (1 dose of 3 mg / kg) reduces hyperalgesia for all volumes of distension.
  • Figure 7 Comparison of the effects of ML-7 and PD 98059 on the increased permeability of tight epithelial junctions induced by a PAR-2 receptor activator (SLIGRL) in rats.
  • ML-7 direct MLCK inhibitors
  • PD 98059 indirect
  • Figure 8 Influence of a single administration of an inhibitory MLCK (ML-7) on the increase in the nociceptive response induced by taurocholate administered colically in rats.
  • ML-7 inhibitory MLCK
  • Figure 9 Effect of ML-7 on the increase in permeability of tight epithelial junctions induced by taurocholate in rats.
  • FIG 11 Myosin light chain kinase (MLCK) and myosine phosphatase (MP) act in an opposite direction to allow contraction and relaxation of the myosin light chain of the epithelial cell cytoskeleton (Fukata et al 2001).
  • MLCK Myosin light chain kinase
  • MP myosine phosphatase
  • Figure 12 Molecular targets to reduce the contraction of the myosin light chain (MLC) of epithelial cells (Fukata et al 2001).
  • MLC myosin light chain
  • CPI Protein inhibitor in the phosphorylated state of myosin phosphatase.
  • MBS Myosin binding subunit.
  • MP Myosine phosphatase
  • M20 20 Kda subunit
  • Cat Catalytic subunit of myosin phosphatase.
  • GEFs Exchange factors for guanine nucleotides.
  • AA Arachidonic acid
  • PLC Phospholipase C.
  • SR Sarcoplasmic reticulum.
  • Example 1 Reduction of rectal hyperalgesia using a tight junction blocker.
  • the intestinal epithelium has epithelial cell binding structures that provide controlled passage of immunocytes into the submucosal layer of the intestine.
  • This example shows that certain molecules known for their effect of increasing paracellular permeability at the intestinal level such as SLIGRL promote the accumulation of immunocytes in the intestinal submucosa (mast cells, enterochromaffin cells) and that this effect can be prevented. (eg, inhibited, reduced) by intracolic treatment involving a tight junction blocker.
  • SLIGRL PAR-2 activating peptide
  • Example 2 Reduction of rectal hyperalgesia using TAP.
  • Example 3 Reduction of rectal hyperalgesia using ML-7.
  • the protocol applied is the same as that described in Example 1 and relates to 3 ⁇ 3 lots of 7-8 rats receiving an intracolic administration of SLIGRL (200 ⁇ g) or of taurocholate (5 mM) but treated beforehand with ML-7 (MLCK inhibitor) administered intramuscularly.
  • the results presented in FIGS. 8 and 9 show that a single treatment with ML-7 at a dose of 1 mg / kg reduces hyparalgesia following intracolic administration of taurocholate.
  • the results presented in FIGS. 5 and 7 show that a single treatment with ML-7 at a dose of 1 mg / kg reduces hyparalgesia following the intracolic administration of SLIGRL.
  • Example 4 Reduction of rectal hyperalgesia using PD 98059.
  • the protocol applied is the same as that described in Example 1 and relates to 3 ⁇ 3 batches of 7-8 rats receiving an intracolic administration of SLIGRL (200 ⁇ g) or of taurocholate (5 mM) but treated beforehand with PD 98059 ( MEK inhibitor) administered intramuscularly.
  • the results presented in FIG. 6 show that a single treatment with PD 98059 at a dose of 3 mg / kg reduces hyparalgesia following the intracolic administration of SLIGRL.
  • Example 2 concerns the effects of a chemical blocker of tight epithelial junctions on rectal hyperalgesia following stress.
  • Example 5 a protocol identical to that of Example 2 was used but the animals were treated with an MLCK inhibitor, ML-7, reducing the contraction of the cytoskeleton.
  • ML-7 was administered, as in the previous example, in 3 treatments (1 mg / kglP) separated by 12 hours, within 36 hours. preceding stress.
  • Our results show that ML-7 suppresses stress-induced hyperalgesia, which confirms the advantage of targeting the MLCK enzyme to treat colonic hypersensitivity in humans (Figure 11).

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Abstract

La présente demande concerne des compositions et méthodes pour le traitement de pathologies intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie. Elle concerne également des compositions et méthodes permettant de réguler la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal. Les compositions et méthodes de l'invention reposent notamment sur l'utilisation d'agents ou de conditions modulant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal. L'invention est utilisable pour le traitement préventif ou curatif de pathologies variées, telles que les troubles fonctionnels intestinaux (TFI) entraînant une hyperalgésie et notamment le syndrome de l'intestin irritable (SII), chez les mammifères, notamment les humains.

Description

COMPOSITIONS POUR LE TRAITEMENT DE PATHOLOGIES FONCTIONNELLES DIGESTINES
La présente demande concerne des compositions et méthodes pour le traitement de pathologies intestinales. Elle concerne également des compositions et méthodes permettant de réguler la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal. Les compositions et méthodes de l'invention reposent notamment sur l'utilisation d'agents ou de conditions modulant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal. L'invention est utilisable pour le traitement préventif ou curatif de pathologies variées, telles que les troubles fonctionnels digestifs (TFD), plus particulièrement les troubles fonctionnels intestinaux (TFI), et notamment le syndrome de l'intestin irritable (SU encore appelé « Irritable Bowel Syndrome », IBS), les hyperalgésies et autres douleurs abdominales, etc., chez les mammifères, notamment les humains.
L'épithélium intestinal est le centre d'échanges très importants entre le milieu extérieur et l'organisme. Ces échanges peuvent s'effectuer soit à travers les cellules de l'épithélium, soit par des réseaux parallèles. Ainsi, le transport d'eau ou d'électrolytes, ou encore l'absorption de petites molécules (poids moléculaire généralement inférieur à 1000 Da environ) au niveau de la muqueuse gastrique, intestinale ou colique, s'effectue par voie transcellulaire, à travers les cellules épithéliales ou entérocytes. Par contre, l'absorption de grosses molécules et le passage d'antigènes, de toxines ou de cellules immunitaires se fait principalement par voie paracellulaire, au niveau de «jonctions serrées », qui sont disposées entre les cellules épithéliales.
Les jonctions serrées (« JS ») épithéliales (ou « tight junction », « TJ ») sont des structures de liaison entre les cellules bordant les épithéliums muqueux (tube digestif, poumons). Ces structures assurent et contrôlent le transport trans- epithélial paracellulaire, de l'extérieur vers la sous-muqueuse, de macromolécules variées (allergènes, irritants, toxines, microorganismes). Ces structures permettent également la migration de cellules immunitaires (e.g., immunocytes) vers l'extérieur (tube digestif). Les jonctions serrées sont des structures souples constituées d'un assemblage complexe de protéines transmembranaires (occludines, claudines) et de protéines cytoplasmiques (protéines zona ocludens ZO-1, ZO-2, ZO-3, protéines AF7, cinguline ou 7H6, etc.), qui sont associées à des éléments du cytosquelette (filaments de myosine, d'actine, etc.).
Parmi les troubles fonctionnels digestifs, on distingue les douleurs abdominales sans trouble de l'élimination et les troubles fonctionnels intestinaux. Les douleurs abdominales sans trouble de l'élimination peuvent être provoquées par des allergies ou des intolérances alimentaires ou se manifester dans le cadre de la maladie cœliaque par exemple. Les troubles fonctionnels intestinaux affectent 15 à 20% de la population et se traduisent par des symptômes dyspeptiques et/ou intestinaux pour lesquels aucune cause organique n'a jusqu'ici été identifiée et qui nécessitent un traitement spécifique. La caractéristique commune des troubles fonctionnels digestifs répondant aux critères de ROME est la douleur abdominale, présente en période postprandiale, qu'elle soit localisée en partie haute (dyspepsie) ou en partie basse de l'abdomen. Un trouble particulier qui affecte la partie basse de l'abdomen est le Syndrome de l'Intestin Irritable (SU). La douleur des troubles fonctionnels intestinaux est le plus souvent soulagée par la défécation. La physiopathologie des troubles fonctionnels digestifs (TFD) est mal connue mais les récentes investigations cliniques montrent l'existence chez ces patients d'un abaissement du seuil de perception douloureuse à la distension (hyperalgésie viscérale) traduisant un état d'hypersensibilité digestive. Celui-ci semble relever en premier lieu d'une sensibilisation de mécanorécepteurs pariétaux par des médiateurs pro-inflammatoires. En effet l'existence de modifications de structure ou de densité de certaines cellules du système immunitaire au niveau de la sous- muqueuse en particulier du colon plaide en faveur d'une altération de l'équilibre immunitaire avec la microflore résidente. Cet état micro-inflammatoire digestif favorise la sensibilisation des terminaisons des neurones afférents primaires et cette sensibilisation pourrait conduire à une facilitation secondaire de la transmission, vers le cerveau, des messages à caractère nociceptif.
Un tel processus de sensibilisation de l'intestin à la douleur peut être induit par des facteurs tels que le stress, des pathogènes, des allergènes, des enzymes de type trypsine ou tryptase par exemple, des sels biliaires, des xénobiotiques, des molécules chimiques de type glycérol, TNBS ou taurocholate par exemple et/ou des séquelles résultant d'une infection ou d'une opération chirurgicale. Toutefois, les mécanismes par lesquels ces facteurs sont capables d'initier le phénomène de sensibilisation ne sont pas clairement documentés in vivo. Lorsque des allergènes, des pathogènes et/ou des molécules chimiques par exemple sont absorbés, ils entrent en contact avec la paroi épithéliale intestinale qui empêche leur introduction dans l'organisme et leur mise en contact avec les cellules de l'immunité. Toutefois, pour qu'une sensibilité se développe, cela implique que certains allergènes, pathogènes et/ou molécule chimique sont capables de traverser cet epithelium pour interagir avec les cellules immunitaires. Les conditions dans lesquelles ce transfert est possible demeurent peu documentées in vivo. Ainsi, bien que certains rapports suggèrent, sur des cultures de cellules in vitro, un rôle des jonctions serrées dans ce processus, aucune démonstration n'a été apportée de l'implication de ces jonctions in vivo dans le développement d'une sensibilisation. De même, si Coremans et al (Ital J Gastroenterol 1991 (8) S 1 :39-40) suggèrent un lien entre les sels biliaires, perfusés par voie intra-colique, et les douleurs abdominales d'un sujet présentant un intestin irritable, aucun résultat présenté n'établit de corrélation entre les jonctions serrées et un processus de sensibilisation à la douleur de l'épithélium intestinal. Si la malabsorption des sels biliaires n'est observée que dans une faible proportion des sujets présentant un intestin irritable, des altérations de la perméabilité trans-epithéliale sont décrites chez les sujets développant un SU après gastro-entérite (SPILLER et al. Gut 2000 ; 47 : 804-11) mais sans qu'il soit fait mention de modifications de la perméabilité paracellulaire laquelle n'est pas étudiée. Une corrélation entre le syndrome de l'intestin irritable et la présence accrue de microorganismes au niveau de la sous-muqueuse a été mise en évidence au travers d'études expérimentales (AGA. 1999), de même qu'un lien a pu être constaté entre les maladies inflammatoire chroniques de l'intestin ou les troubles fonctionnels intestinaux et des modifications du degré d'activation immunitaire (inflammation) de la paroi intestinale. Cependant, ces observations préliminaires n'ont pas été confirmées ou n'ont pas donné lieu à de nouvelles approches thérapeutiques.
La présente invention résulte de la mise en évidence d'un rôle in vivo des jonctions serrées de l'épithélium intestinal dans le processus de sensibilisation à la douleur. L' "ouverture" des jonctions serrées de l'épithélium du colon par différentes molécules ou par le stress entraîne une hyperalgésie spontanée ou une hypersensibilité à la distension (état caractéristique de 1TB S). Les résultats obtenus dans le cadre de la présente invention établissent ainsi pour la première fois et de façon surprenante que l'ouverture des jonctions serrées provoque un état d'hyperalgésie retardé durable. La présente invention découle également de la mise au point de nouvelles stratégies thérapeutiques pour le traitement de pathologies intestinales, basées sur une modulation de la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal. En particulier, la présente invention propose, pour la première fois, une approche thérapeutique des pathologies intestinales basée sur l'emploi de composés ou conditions permettant de contrôler l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal. Ainsi, ces composés ou conditions permettent de moduler la tension du cytosquelette des cellules épithéliales intestinales ou de réguler directement, de préférence diminuer, voire bloquer, l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal. Cette approche permet donc de contrôler l'ouverture et la fermeture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal, sans nécessairement recourir à une synthèse protéique de novo et/ou à des dégradations protéiques et/ou structurales importantes au niveau de l'épithélium. Cette stratégie permet de réguler la perméabilité de l'épithélium intestinal de manière spécifique, fine et réactive, et ainsi d'agir sur le transfert d' allergènes, de pathogènes et/ou de molécules chimiques vers les cellules de l'immunité. Cette stratégie est particulièrement adaptée à l'obtention d'un effet biologique rapide et contrôlable dans le temps (réversible).
A cet égard, les résultats présentés ci-dessous montrent qu'une substance susceptible de relâcher les jonctions serrées épithéliales (peptides activateurs du récepteur PAR-2) déclenche une hyperalgésie retard et une hypersensibilité à la distension. De même la perfusion intracolique de sels biliaires (taurocholate par exemple) augmente le passage des macromolécules en ouvrant les jonctions serrées et s'accompagne du même état d'hyperalgésie retard. Enfin le stress de contrainte augmente la perméabilité des jonctions serrées et entraîne un état d'hyperalgésie rectale. Les résultats présentés dans les exemples montrent également que dans tous les cas (peptide activateur du PAR-2, taurocholate ou stress) la suppression de cette augmentation de la perméabilité paracellulaire par un agent chimique (TAP par exemple), qui se fixe au niveau des jonctions serrés et bloque les jonctions serrées, ou par des molécules relâchant le cytosquelette des cellules épithéliales (ML-7, PD98059) supprime ou réduit cette hyperalgésie caractéristique des TFD et en particulier des SU.
Un premier objet de l'invention réside donc plus particulièrement dans l'utilisation d'un composé contrôlant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement préventif ou curatif des pathologies intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie. Un autre objet de l'invention réside dans une méthode de traitement préventif ou curatif de pathologies intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie, comprenant l' administration à un sujet d'une quantité efficace d'un composé contrôlant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal.
Les composés contrôlant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal sont en particulier des composés qui modulent la tension du cytosquelette de cellules épithéliales intestinales ou des composés qui diminuent, voire bloquent, l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal.
L'invention repose ainsi sur l'utilisation de composés modulant la tension et l'état de contraction du cytosquelette des cellules de l'épithélium intestinal ou empêchant une ouverture trop importante des jonctions serrées qui aboutit à une hyperalgésie ou à une hypersensibilité à la distension de l'intestin.
Les protéines composant les jonctions serrées sont associées au cytosquelette des cellules qu'elles relient. Il est proposé dans le cadre de l'invention que la tension du cytosquelette ou l'ouverture des jonctions serrées puisse être modulée chez des sujets atteints de maladies ou désordres intestinaux pour agir de manière non destructrice et transitoire sur la perméabilité de leur epithelium intestinal. Ainsi, la contraction du cytosquelette doit favoriser l'ouverture des jonctions serrées, tandis qu'un relâchement du cytosquelette (ou qu'une inhibition de la contraction) doit favoriser la fermeture des jonctions. Il est possible également de moduler directement les jonctions serrées, en particulier sur les protéines les constituant, en diminuant ou en bloquant leur ouverture.
On utilise donc préférentiellement dans le cadre de l'invention des composés (ou conditions) qui modulent la contraction du cytosquelette de cellules épithéliales intestinales (notamment humaines) ou qui contrôlent directement l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal (notamment humain). Selon la condition à traiter, on utilise des composés qui inhibent la contraction du cytosquelette de cellules épithéliales intestinales, ou qui activent ou favorisent celle-ci ou des composés qui diminuent ou bloquent directement l'ouverture des jonctions serrées ou qui augmentent l'ouverture de celles-ci.
L'activité du composé modulant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal, notamment par modulation de la tension du cytosquelette, peut être directe ou indirecte, c'est-à-dire dirigée sur les constituants mêmes du cytosquelette ou sur des régulateurs de sa tension. Bien que non limitatif, on préfère les composés agissant de manière directe sur la tension du cytosquelette. En outre, on préfère également des composés présentant une activité sélective sur la tension du cytosquelette, c'est-à-dire typiquement des composés qui n'affectent pas directement la structure des protéines constitutives des jonctions serrées.
Un composé est considéré comme modulant la tension du cytosquelette lorsqu'il module l'ouverture des jonctions serrées. Un effet inhibiteur de la contraction ou de la tension des filaments d'actine et/ou de myosine ne doit pas nécessairement être complet ou total, mais il suffit qu'il diminue la contraction ou la tension du cytosquelette suffisamment pour réduire l'ouverture des jonctions serrées.
La réduction de l'ouverture des jonctions serrées correspond préférentiellement à une diminution minimale d'environ 25%, avantageusement d'environ 30%, de façon encore plus préférée d'environ 50% de la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal. La perméabilité paracellulaire peut être mesurée à l'aide d'un marqueur tel que le 51Cr-EDTA lequel après son passage dans le sang est mesuré dans les urines pendant 24 heures (cf. : exemple 1).
Différents types de composés peuvent être utilisés dans le cadre de la présente demande. Ainsi, au sens de l'invention, le terme « composé » doit être pris dans un sens large, c'est-à-dire comme désignant tout agent, substance, composition, condition, traitement ou procédé permettant de moduler l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal. Il s'agit avantageusement d'un agent (e.g., d'une molécule) ou d'une combinaison ou association d'agents.
Selon un premier mode de réalisation, on utilise des composés modulant directement l'ouverture des jonctions serrées, notamment en se fixant, de préférence de manière réversible, sur les protéines constituant les jonctions serrées. On peut notamment comme exemple citer le TAP (2, 4, 6- triaminopyrimidine) .
Selon un autre mode de réalisation, on utilise des composés inhibiteurs (ou modulateurs) de la contraction ou de la tension de la chaîne légère de la myosine et/ou de l'actine, ou des composés inhibiteurs (ou modulateurs) de la dégradation de l'actine.
Des exemples de tels composés sont notamment des inhibiteurs de la kinase de la chaîne légère de la myosine (MLCK). Il est à noter que les travaux rapportés dans l'art antérieur portent plutôt sur l'utilisation de composés destinés à ouvrir les jonctions serrées au niveau intestinal, pour favoriser le passage de grosses molécules, alors que la présente invention vise plus préférentiellement à exercer une activité opposée, destinée à diminuer la perméabilité des jonctions.
Un exemple particulier d'inhibiteurs sélectif de MLCK est le composé ML-7 {1- (5-iodonaphtalène-l-sulfonyl)-lH-hexahydro-l,4-diazepine} (Makishima M. et al. FEBS Lett. 1991; 287: 175). D'autres exemples de tels inhibiteurs sont notamment le composé ML-9 (Wilson DP.et al. J Biol Chem. 2001; 13: 165) ou d'autres non sélectifs: Wortmannin (Warashina A. Life Sci 2000; 13: 2587-93), H-7 (Piao Zf et al. Mol Cell Biol Res Commun 2001 ;4: 307-12) et KT 7692 (Warashina A. Life Sci 2000;13: 2587-93). D'autres cibles agissant sur la tension du cytosquelette sont notamment les protéines de liaison à la myosine, telles que par exemple la cinguline, ou les molécules de jonction, telles que la cadherine-E, la catenine-α ou les desmosomes. La modulation de l'activité ou de l'expression de ces protéines permet de réguler la tension du cytosquelette, dans le cadre de la présente invention.
Un objet particulier de l'invention réside donc dans l'utilisation d'un modulateur (notamment d'un inhibiteur) de l'activité ou de la structure ou de l'expression des molécules du cytosquelette. Le composé peut être par exemple un acide nucléique antisens, une molécule synthétique, un fragment d'anticorps, etc.
Selon un autre mode de réalisation, on peut utiliser des composés inhibiteurs de la synthèse de protéines ou autres molécules assurant la liaison entre les protéines du cytosquelette et les protéines des jonctions serrées. Parmi les protéines des jonctions serrées, on peut citer notamment les protéines occludines, claudines, ZO-1, ZO-2, ZO-3, AF7 et 7H6. Un moyen selon l'invention de moduler l'ouverture ou la fermeture des jonctions serrées réside donc dans la régulation de la synthèse des protéines de liaison entre le cytosquelette et les protéines des jonctions serrées. En stimulant cette synthèse, il est attendu un renforcement des liaisons entre les jonctions serrées et le cytosquelette, conduisant à une plus faible perméabilité de l'épithélium.
D'autres composés utilisables dans le cadre de l'invention sont par exemple des inhibiteurs de kinases activées par les mitogènes (MAPKK), notamment de la kinase MEK1 ou de la kinase-PI3, tels que les composés PD098,059 {2-(Amino- 3-methoxyphenyl)-4H-l-benzopyran-4-one}(Alessi et al. J.Biol.Chem.1995; 270, 27589) ou LY294002 {2-(4-Mo holinyl)-8-phenyl-l(4H)-benzopyran-4-one} (Nlahos et al.J.Biol.Chem 1994;269: 5241). D'autres molécules utilisables pour réguler, de manière indirecte, la tension du cytosquelette, sont des facteurs de croissance, tels que le facteur de croissance hépatique (HGF), le facteur de croissance endothélial (EGF) ou certaines cytokines susceptibles d'être libérées par les immunocytes, telles que les interleukines-1, -4, -13, ou les facteurs tels que IGF-1 ou l'interféron gamma.
Une autre approche permettant de réguler de manière indirecte la tension du cytosquelette repose sur l'utilisation du peptide GLP2 (« glucagon-like peptide 2 ») ou de ses dérivés, qui peuvent modifier la perméabilité de l'épithélium intestinal par un effet indirect sur la contraction du cytosquelette. De même, certaines molécules agissant sur des récepteurs situés au pôle apical des cellules épithéliales (ex: récepteurs aux protéinases; PAR-2) peuvent agir indirectement sur le cytosquelette.
Un mode préféré de mise en œuvre de l'invention comprend l'utilisation d'agents agissant de manière directe sur la tension du cytosquelette, notamment de molécules inhibitrices de la contraction du cytosquelette, en particulier de molécules inhibitrices de la contraction ou de la tension des chaînes légères de myosine et/ou d'actine, ou inhibitrices de la dégradation de l'actine.
Comme indiqué ci-avant, les composés utilisés sont avantageusement des molécules, qui peuvent être sous forme isolée ou sous forme de combinaison, d'extraits biologiques, etc. Ces molécules peuvent être synthétiques, semi- synthétiques ou biologiques, notamment d'origine animale, virale, végétale ou bactérienne.
La présente invention peut être utilisée pour le traitement ou la prise en charge de pathologies ou désordres du système digestif caractérisés par un état d'hyperalgésie, notamment de troubles fonctionnels intestinaux, de maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI), d'intolérances alimentaires (allergies, conditionnements, etc.) caractérisées par une douleur viscérale chronique. Elle est particulièrement adaptée au traitement préventif ou curatif des hyperalgésies et en particulier du syndrome de l'intestin irritable (SU) quelque soit sa forme (constipation, diarrhée ou une combinaison des deux), mais également de douleurs viscérales chroniques n'entrant pas dans le cadre du SU, telles que les douleurs abdominales fonctionnelles sans trouble de l'élimination fécale (F APS : Functional Abdominal Pain) et les douleurs liées aux intolérances alimentaires et à la maladie cœliaque. Elle est utilisable de manière préventive chez des sujets présentant des prédispositions ou une sensibilité à ce type de désordres, ou de manière curative, par exemple lors de crises ou sur des périodes plus longues. Les compositions et méthodes de l'invention permettent de réduire la souffrance des sujets, d'atténuer les symptômes ou la cause de ces désordres.
La présente invention démontre en effet de façon surprenante que la suppression de l'augmentation de la perméabilité paracellulaire associée à l'ouverture des jonctions serrées empêche l'apparition de l'hyperalgie viscérale.
Un objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un composé tel que défini ci-avant pour la préparation d'un médicament destiné à contrôler, notamment à réduire, la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal chez des sujets atteints de maladies intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie, notamment de maladies inflammatoires chroniques caractérisées par une accumulation, dans la couche sous-muqueuse, d'immunocytes (par exemple de mastocytes et/ou de cellules entérochromaffines), par une sensibilité accrue des mécanorécepteurs pariétaux et éventuellement par une infiltration de bactéries du colon dans la couche sous-muqueuse, par exemple les hyperalgésies et notamment le syndrome de l'intestin irritable. Un autre objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un composé tel que défini ci-avant pour la préparation d'un médicament destiné à réduire la sensibilisation aux allergènes, pathogènes et/ou molécules chimiques chez des sujets atteints ou sensibles aux maladies fonctionnelles intestinales, notamment aux affections intestinales caractérisées par une accumulation, dans la couche sous-muqueuse, d'immunocytes, notamment par exemple de mastocytes et/ou de cellules entérochromaffines, par une sensibilité accrue des mécanorécepteurs pariétaux et éventuellement par une infiltration de bactéries du colon dans la couche sous-muqueuse, par exemple les hyperalgésies et notamment le syndrome de 1 ' intestin irritable.
Un autre objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un composé tel que défini ci-avant pour la préparation d'un médicament destiné à réduire la migration transépithéliale d'immunocytes et l'accumulation d'immunocytes dans la couche sous-muqueuse de sujets atteints d'une pathologie fonctionnelle intestinale, notamment d'une affection intestinale induisant une hyperalgésie viscérale, par exemple le syndrome de l'intestin irritable, caractérisée par une accumulation, dans la couche sous-muqueuse d'immunocytes, notamment de mastocytes et/ou de cellules entérochromaffines, par une sensibilité accrue des mécanorécepteurs pariétaux et éventuellement par une infiltration de bactéries du colon dans la couche sous-muqueuse.
L'invention est également relative à des méthodes de traitement des conditions indiquées ci-dessus, comprenant l'administration à un sujet atteint d'une pathologie intestinale ou sensible aux pathologies intestinales, d'un composé ou traitement tel que défini ci-avant. De préférence, le composé ou traitement est administré dans une dose efficace pour réduire la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal et/ou pour réduire la sensibilité à la douleur et/ou pour réduire la migration transépithéliale d'allergènes, de toxines, d'irritants ou de microorganismes et ainsi l'accumulation d'immunocytes dans la couche sous- muqueuse de l'intestin.
Le composé peut être administré par différentes voies et sous différentes formes. Ainsi, le composé peut être sous forme liquide ou solide, typiquement sous forme de comprimé, gélule, ampoule ou soluté buvable, solution injectable, etc. On préfère des composés formulés sous une forme administrable par voie orale (solutés buvables, comprimés, ampoules, sirops, etc.) ou rectale. Le conditionnement en suppositoire est particulièrement préféré, lorsque cela est possible. Bien entendu, d'autres formes d'administration sont possibles, comme des injections (intrapéritonéale, intradermique, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, intra-artérielle, etc.), des pâtes, gels, etc.
Les composés peuvent être utilisés seuls ou en combinaisons et/ou en association avec d'autres agents actifs, comme par exemple d'autres substances actives utilisées dans le traitement du syndrome de l'intestin irritable. On peut citer par exemple les composés anti-cholinergiques, les prokinétiques, les anti- diarrhéiques, les modificateurs de la motricité digestive, etc. Ces différents agents peuvent être utilisés en combinaison thérapeutique, et administrés sous forme séparée, combinée, étalée dans le temps ou concomitante.
Un autre objet de l'invention réside dans un produit ou une association pharmaceutique comprenant au moins un composé modulateur de l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal et au moins un autre agent actif sélectionné parmi les composés anti-cholinergiques, les substances prokinétiques, les anti-diarrhéiques, les laxatifs ou les modificateurs de la motricité, de la viscéro-sensibilité (ou de la sensibilité digestive), en vue d'une utilisation combinée, séparée ou espacée dans le temps. Un autre objet de l'invention réside dans une composition pharmaceutique comprenant au moins un composé modulateur de l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal et un excipient acceptable sur le plan pharmaceutique, ladite composition étant formulée préférentiellement pour une administration par voie orale ou rectale. De préférence, la composition se présente sous forme de suppositoire, ou sous forme de solution buvable.
D'autres aspects et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.
LEGENDES DES FIGURES
Figure 1 : Influence de doses croissantes d'un peptide activateur des récepteurs PAR-2 (SLIGRL) sur l'absorption d'une macromolécule (5lCr-EDTA) évaluée par le pourcentage retrouvé au niveau des urines collectées pendant 24h chez le rat.
Figure 2 : Influence de l'administration concomitante d'un bloqueur de « JS » (TAP-100 mM) sur l'augmentation de la perméabilité paracellulaire au 51Cr- EDTA induite par l'injection intracolique de SLIGRL (0,5 mg/rat). Cette augmentation est supprimée par la perfusion (lOh ) d'une solution de 2, 4, 6 triaminopyrimidine (TAP) qui bloque les jonctions serrées (JS).
Figure 3 : Suppression, grâce à un bloqueur des « JS » (TAP- 100 mM), de l'hypersensibilité rectale à la distension induite par le SLIGRL (0,2 mg).
Figure 4 : Influence de la perfusion intracolique d'un bloqueur de « JS » sur l'hyperalgésie rectale à la distension induite par un stress de contrainte chez le rat femelle. Figure 5 : Effets de l'administration répétée d'un inhibiteur de la MLCK sur l'hyperalgésie rectale induite par administration intracolique de SLIGRL (200 μg) chez le rat. En ce qui concerne l'hyperalgésie induite par le SLIGRL, seules les administrations répétées de ML-7 (3 doses lmg/kg à 12h d'intervalle) réduisent l'hyperalgésie pour tous les volumes de distension.
Figure 6 : Effets de l'aclministration répétée d'un inhibiteur de la MLCK sur l'hyperalgésie rectale induite par l'administration intracolique de SLIGRL (200 μg) chez le rat. En ce qui concerne l'hyperalgésie induite par le SLIGRL, seule radministration de PD 098 059(1 dose de 3mg/kg) réduit l'hyperalgésie pour tous les volumes de distension.
Figure 7 : Comparaison des effets du ML-7 et du PD 98059 sur l'augmentation de la perméabilité des jonctions serrées épithéliales induite par un activateur des récepteurs PAR-2 (SLIGRL) chez le rat. Des mesures de perméabilité colique réalisées selon la technique et dans les conditions décrites dans l'exemple 1, ont montré, sur 6 lots de rats, qu'aux doses réduisant la douleur viscérale, les inhibiteurs de MLCK direct (ML-7) ou indirect (PD 98059) suppriment l'augmentation de la perméabilité des jonctions serrées induites par le SLIGRL.
Figure 8 : Influence d'une administration unique d' un MLCK inhibiteur (ML-7) sur l'augmentation de la réponse nociceptive induite par le taurocholate administré par voie colique chez le rat.
Figure 9 : Effet du ML-7 sur l'augmentation de la perméabilité des jonctions serrées épithéliales induite par le taurocholate chez le rat. Des mesures de perméabilité colique réalisées selon la technique et dans les conditions décrites dans l'exemple 1, ont montré, sur 6 lots de rats, qu'aux doses réduisant la douleur viscérale, ML-7 (inhibiteur de MLCK direct) supprime l'augmentation de la perméabilité des jonctions serrées induite par le taurocholate.
Figure 10 : Influence d'un inhibiteur de la contraction du cytosquelette des cellules épithéliales coliques agissant sur la MLCK (ML-7) sur l'hypersensibilité colique à la distension induite par un stress de contrainte chez le rat (moyenne ± sem, n=8).
Figure 11 : La kinase de la chaîne légère de la myosine (MLCK) et la myosine phosphatase (MP) agissent dans une direction opposée pour permettre la contraction puis la relaxation de la chaîne légère de la myosine du cytosquelette des cellules épithéliales (Fukata et al 2001).
Figure 12 : Cibles moléculaires permettant de réduire la contraction de la chaîne légère de la myosine (MLC) des cellules épithéliales (Fukata et al 2001).
CPI : Protéine inhibitrice à l'état phosphorylé de la myosine phosphatase.
MBS : Sous-unité de liaison de la myosine.
MP : Myosine phosphatase.
M20: Sous-unité de 20 Kda Cat : Sous-unité catalytique de la myosine phosphatase.
GEFs : Facteurs d'échange des nucléotides guanine.
AA : Acide arachidonique.
Ins (1,4,5) P3 : Inositol (1,4,5) triphosphate.
PLC: Phospholipase C. SR: Réticulum sarcoplasmique.
EXEMPLES
Exemple 1 : Réduction de l'hyperalgésie rectale à l'aide d'un bloqueur des jonctions serrées. L'épithélium intestinal possède des structures de liaison des cellules épithéliales qui assurent un passage contrôlé des immunocytes dans la couche sous- muqueuse de l'intestin. Cet exemple montre que certaines molécules connues pour leur effet d'augmentation de la perméabilité paracellulaire au niveau intestinal tel que le SLIGRL favorisent l'accumulation d'immunocytes dans la sous-muqueuse intestinale (mastocytes, cellules entérochromaffines) et que cet effet peut être prévenu (e.g., inhibé, réduit) par un traitement intracolique impliquant un bloqueur des jonctions serrées.
Pour réaliser cette étude, six lots de 8 rats mâles Wistar (200-250 g) ont été utilisés. Les animaux ont été munis d'un cathéter intracolique placé à demeure au niveau du côlon proximal (à 3 cm de la jonction caeco-colique). Au cours de ces essais, 4 lots de rats ont été perfusés par voie intracolique durant lOh avec une solution de 51Cr - EDTA (0.5 μc/h). Les animaux étant placés dans des cages individuelles, l'urine totale de 24h a été collectée et la mesure de sa radioactivité a permit d'évaluer la perméabilité de la muqueuse colique au 51Cr -EDTA. Des doses croissantes d'un peptide activateur du PAR-2 (SLIGRL) ont été injectées dans la lumière colique (lots 2, 3 et 4) au temps t = 0 (début de perfusion du 51Cr - EDTA) aux doses de 0,05, 0,2 et 0,5 mg/rat, le lot 1 recevant le solvant. La figure n°l montre l'augmentation dose-dépendante de la perméabilité au 5lCr- EDTA induite par le SLIGRL montrant son effet d'augmentation de la perméabilité paracellulaire.
Exemple 2 : Réduction de l'hyperalgésie rectale à l'aide de TAP.
Un stress de contrainte exercé pendant deux heures chez le rat femelle entraîne une hypersensibilité rectale à la distension. Il est également connu qu'un même stress de contrainte augmente la perméabilité colique aux macromolécules (perméabilité paracellulaire).
Cette étude a été réalisée sur 3 lots de 8 rats femelles Wistar (225-250 g) équipés d'électrodes implantées dans les muscles striés de l'abdomen permettant l'enregistrement graphique des crampes abdominales. En outre les animaux ont été équipés de cathéters intracoliques. Au temps t = 0 les animaux sont soumis à un stress de contrainte de 2h et à la perfusion intracolique pendant cette même période soit du solvant du TAP (tris - lot 1) soit du TAP (100 mM) (lot 2), soit de tris avec un stress fictif (lot 3).
Les résultats montrent que le stress de contrainte (stress) augmente significativement le nombre de crampes abdominales (hyperalgésie) à tous les volumes de distension (0,4, 0,8 et 1,2 ml) et que cet effet est supprimé par la perfusion intracolique concomitante de TAP (figure 4).
Exemple 3 : Réduction de l'hyperalgésie rectale à l'aide de ML-7.
Le protocole appliqué est le même que celui décrit dans l'exemple 1 et porte sur 3x3 lots de 7-8 rats recevant une administration intracolique de SLIGRL (200 μg) ou de taurocholate (5 mM) mais traités au préalable par le ML-7 (MLCK inhibiteur) administré par voie intramusculaire. Les résultats présentés dans les figures 8 et 9 montrent qu'un traitement unique par le ML-7 à la dose de lmg/kg réduit l'hyparalgésie consécutive à radministration intracolique de taurocholate. Les résultats présentés dans les figures 5 et 7 montrent qu'un traitement unique par le ML-7 à la dose de lmg/kg réduit l'hyparalgésie consécutive à l'administration intracolique de SLIGRL.
Exemple 4 : Réduction de l'hyperalgésie rectale à l'aide de PD 98059. Le protocole appliqué est le même que celui décrit dans l'exemple 1 et porte sur 3x3 lots de 7-8 rats recevant une administration intracolique de SLIGRL (200 μg) ou de taurocholate (5 mM) mais traités au préalable par le PD 98059 (MEK inhibiteur) administré par voie intramusculaire. Les résultats présentés dans la figure 6 montrent qu'un traitement unique par le PD 98059 à la dose de 3 mg/kg réduit l'hyparalgésie consécutive à l'administration intracolique de SLIGRL.
Exemple 5 : Réduction de l'hyperalgésie induite par le stress à l'aide de ML-
7.
L' exemple 2 concerne les effets d'un bloqueur chimique des jonctions serrées épithéliales sur l'hyperalgésie rectale consécutive à un stress. Dans l'exemple 5, un protocole identique à celui de l'exemple 2 a été utilisé mais les animaux ont été traités avec un inhibiteur de MLCK, le ML-7, réduisant la contraction du cytosquelette. Le ML-7 a été administré, comme dans l'exemple précédent, en 3 traitements (lmg/kglP) séparés de 12 heures, dans les 36h. précédant le stress. Nos résultats montrent que le ML-7 supprime l'hyperalgésie induite par le stress ce qui confirme l'intérêt de cibler l'enzyme MLCK pour traiter l'hypersensibilité colique chez l'homme (figure 11).

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'un composé contrôlant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement préventif ou curatif de pathologies intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie.
2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé contrôlant l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal est un composé qui module la tension du cytosquelette de cellules épithéliales intestinales ou un composé qui diminue, voire bloque, l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal.
3. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le composé module directement l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal.
4. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le composé module la contraction du cytosquelette des cellules épithéliales intestinales.
5. Utilisation selon la revendication 1, 2 ou 4, caractérisée en ce que le composé inhibe la contraction du cytosquelette des cellules épithéliales intestinales.
6. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le composé n'affecte pas directement la structure des protéines constitutives des jonctions serrées.
7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le composé est un inhibiteur de la contraction ou de la tension des chaînes légères de myosine et/ou d'actine, ou un inhibiteur de la dégradation de l'actine.
8. Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que le composé est un inhibiteur de MLCK.
9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que le composé est un inhibiteur de l'activité ou de l'expression des protéines de liaison à la myosine ou des molécules de jonction.
10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour la préparation d'un médicament destiné à contrôler la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal chez des sujets atteints de maladies fonctionnelles intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie.
11. Utilisation selon la revendication 10, pour la préparation d'un médicament destiné à réduire la perméabilité paracellulaire de l'épithélium intestinal chez des sujets atteints de maladies fonctionnelles intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie.
12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour la préparation d'un médicament destiné à réduire la sensibilité à la douleur chez des sujets atteints ou sensibles aux maladies fonctionnelles intestinales caractérisées par un état d'hyperalgésie.
13. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement préventif ou curatif des troubles fonctionnels intestinaux (TFI).
14. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que les troubles fonctionnels intestinaux sont choisis parmi le syndrome de l'intestin irritable (SU), les douleurs abdominales fonctionnelles sans trouble de l'élimination fécale et les douleurs liées aux intolérances alimentaires.
15. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le composé est administré par voie orale ou rectale.
16. Produit pharmaceutique comprenant au moins un composé modulateur de l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal et au moins un autre agent actif sélectionné parmi les composés anti-cholinergiques, les prokinétiques, les anti-diarrhéiques, les laxatifs, les modificateurs de la motricité ou de la viscéro-sensibilité, en vue d'une utilisation combinée, séparée ou espacée dans le temps.
17. Composition pharmaceutique comprenant au moins un composé modulateur de l'ouverture des jonctions serrées de l'épithélium intestinal et un excipient acceptable sur le plan pharmaceutique, ladite composition étant formulée pour une administration par voie orale ou rectale.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2865133A1 (fr) * 2004-01-19 2005-07-22 Rytek Compositions pour le traitement de pathologies digestives
JP2008501640A (ja) * 2004-04-21 2008-01-24 ザ ユニヴァーシティー オヴ シカゴ ミオシン軽鎖キナーゼ阻害剤及びその使用

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2879100B1 (fr) * 2004-12-09 2007-07-06 Lionel Bueno Compositions pour le traitement des pathologies oculaires de surface et de la retine
CA2778931A1 (fr) 2009-06-12 2010-12-16 Marianne Allard Composes se liant a un ribocommutateur guanine et leur utilisation en tant qu'antibiotiques

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2528451B2 (ja) * 1986-07-09 1996-08-28 北陸製薬株式会社 ナフタレンスルホンアミド誘導体
US5336503A (en) * 1992-03-31 1994-08-09 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Anti-peptic ulcer agent
JPH08268908A (ja) * 1995-03-29 1996-10-15 Green Cross Corp:The 消化管粘膜機能維持剤
JP3854657B2 (ja) * 1996-03-05 2006-12-06 雪印乳業株式会社 腸管保護剤
AU703540B2 (en) 1996-03-26 1999-03-25 Meddiss, Incorporated Methods for inducing analgesia or anesthesia and treating or preventing ischemic injury of tissues in general
GB9620390D0 (en) * 1996-09-30 1996-11-13 Eisai London Res Lab Ltd Substances and their uses
RU2148997C1 (ru) * 1996-10-01 2000-05-20 Фишер Ольга Алексеевна Способ лечения болевого синдрома
US5912323A (en) 1997-02-20 1999-06-15 University Of Maryland, Baltimore Zonula occludens toxin receptors
US6227658B1 (en) * 1997-06-23 2001-05-08 Kabushiki Kaisha Toshiba Apparatus and method for forming thin film using ink-jet mechanism
US20020045564A1 (en) * 1997-06-23 2002-04-18 Van Eyk Jennifer E. Methods of modulating muscle contraction
AU9495798A (en) * 1997-09-19 1999-04-05 Ludwig Institute For Cancer Research Asthma associated factors as targets for treating atopic allergies including asthma and related disorders
WO2000003746A2 (fr) 1998-07-14 2000-01-27 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Remise a niveau de la synthase dl'oxyde nitrique des cellules endotheliales de type iii par des agents venant disloquer l'organisation cytosquelettique de l'actine
US6423751B1 (en) * 1998-07-14 2002-07-23 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Upregulation of type III endothelial cell nitric oxide synthase by agents that disrupt actin cytoskeletal organization
US6458925B1 (en) * 1998-08-03 2002-10-01 University Of Maryland, Baltimore Peptide antagonists of zonulin and methods for use of the same
NL1011680C2 (nl) * 1999-03-26 2000-09-27 Nutricia Nv Voedingssamenstellen die licht negatief geladen, niet-verteerbare polysacchariden bevatten en gebruik ervan voor het verminderen van transport door tight junctions.
NL1014380C2 (nl) * 2000-02-14 2001-08-15 Friesland Brands Bv Darmwandversterkend voedingsmiddel.
ES2284678T3 (es) * 2000-08-15 2007-11-16 Immunex Corporation Polipeptidos de claudinas.
CA2435038A1 (fr) * 2001-01-25 2002-08-01 Board Of Regents, The University Of Texas System Inhibition de la erk reduisant ou prevenant a la fois la tolerance et la dependance aux analgesiques

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2865133A1 (fr) * 2004-01-19 2005-07-22 Rytek Compositions pour le traitement de pathologies digestives
WO2005077406A1 (fr) * 2004-01-19 2005-08-25 Rytek Inhibiteurs ded proteases pour le traitement de pathologies digestives
JP2007518779A (ja) * 2004-01-19 2007-07-12 リテック 消化管の病状の処置のためのプロテアーゼインヒビター
JP2008501640A (ja) * 2004-04-21 2008-01-24 ザ ユニヴァーシティー オヴ シカゴ ミオシン軽鎖キナーゼ阻害剤及びその使用

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