WO2008015341A2 - Utilisation d'un extrait vegetal en tant qu'agent actif pour augmenter la synthese de melanine dans les melanocytes - Google Patents

Utilisation d'un extrait vegetal en tant qu'agent actif pour augmenter la synthese de melanine dans les melanocytes Download PDF

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    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations

Definitions

  • the present invention relates to the use of a plant extract in a cosmetic composition; the extract or the composition being intended to promote the increase of melanin synthesis in the melanocytes of the epidemic or hair bulb, with a view to giving it a tanned appearance, or to prepare the skin for exposure to the sun.
  • the present invention also relates to the use of a plant extract for the preparation of a pharmaceutical composition; the extract or the composition being intended to promote the increase of the synthesis of melanin in the melanocytes of the epidermis or of the hair bulb for therapeutic purposes, for repigmenting depigmented skin, for example in the case of vitiligo, or for pigmenting the hairs or hair, especially in the treatment and prevention of canities.
  • the plant extract is mainly composed of protein and peptide compounds and is obtained from plants selected from the genera Amaranthus or Oryza or the species Pisum sativum L. (pea), Phaseolus vulgaris (bean) and Theobroma cacao L. ( cocoa).
  • the color of human hair and skin is a function of various factors including seasons of the year, race, sex and age. It is mainly determined by the concentration of melanin produced by melanocytes. Melanocytes are specialized cells that, via particular organelles, melanosomes, synthesize melanin. The synthesis of melanin or melanogenesis is a complex process whose precise mechanisms are not yet elucidated and which schematically involves the following steps:
  • the melanocyte is involved in the epidermal melanic unit, which has a melanocyte surrounded by about 40 neighboring keratinocytes, as melanin is synthesized in melanosomes move from the perinuclear region to the end of the dendrites of melanocytes, and by phagocytosis the end of the dendrites is captured by keratinocytes, degraded membranes and redistributed melanosomes in the keratinocytes, where they will protection up to natural desquamation of the cells.
  • melanin as well as its transport, is regulated by various factors such as, for example, UV radiation, hormones or chemicals.
  • UV radiation an increase in exposure to UV radiation causes the synthesis of pigments and browning of the skin.
  • the pigmentation of hair and hair requires the presence of melanocytes in the bulb of the hair follicle.
  • the hair follicle is a tabular invagination of the epidemic that penetrates to the deep layers of the dermis.
  • the melanocytes in the bulb of the hair follicle are in an active state, that is, they synthesize melanin. These pigments are transmitted to the keratinocytes intended to form the hair shaft, which will lead to the growth of a pigmented hair or hair.
  • canitia naturally whitening of hair
  • melanin melanin
  • These new compounds are particularly useful as an alternative to sun exposure, to prepare the skin and protect it from the sun's rays, to obtain a tan more intense after exposure to the sun, to prolong the natural pigmentation of the skin after exposure to the sun. sun or to prevent and / or limit and / or stop the development of canities and even maintain the natural pigmentation of hair and / or gray or white hairs.
  • pigmentation of the skin is meant the coloring of the skin or hair determined by the melanin concentration.
  • exogenous dye a dye, or a chemical substance, is meant to react with the superficial layers of the epidemic to cause the appearance of a pigmentation of the skin completely independent of the presence of melanin.
  • exogenous dyes is dihydroxyacetone, or DHA.
  • DHA dihydroxyacetone
  • vitiligo which is an autoimmune disease characterized by the appearance on the skin of white patches related to a lack of pigmentation or pityriasis versicolor, a superficial mycosis. causing the appearance of light spots that may appear immediately or after exposure to the sun.
  • the main objective of the present invention is to provide a novel active agent that significantly promotes melanin synthesis in the melanocytes of the epidermis and hair bulb.
  • the inventors have indeed demonstrated a biological activity and, more particularly dermatological and cosmetic, plant extracts obtained from plants selected from the genera Amaranthus or Oryza or species Pisum sativum L. (pea), Phaseolus vulgaris (bean) ) and Theobroma cacao L. (cocoa).
  • pro-pigmenting active agent a compound capable of promoting the increase of melanin synthesis in the melanocytes of the epidermis or hair bulb.
  • hair and hair is meant all the hairy appendages and in particular also the eyelashes and the eyebrows.
  • compositions according to the invention may be applied by any appropriate route, in particular oral, parenteral or external topical, and their formulation will be adapted by those skilled in the art, in particular for cosmetic or dermatological compositions.
  • compositions according to the invention are intended for topical administration. They contain a physiologically acceptable medium, in particular a cosmetologically or pharmaceutically acceptable medium, in particular a dermatologically acceptable medium.
  • the subject of the invention is primarily the use in a cosmetic composition of a plant extract, consisting mainly of compounds of protein and peptide nature; the extract or the composition being intended to promote the increase of melanin synthesis in the melanocytes of the epidermis or hair bulb.
  • extract refers to any isolated substance or preparation obtained from plant material. It is obtained, for example, by dissolving the active components by means of solvents (such as water, alcohol, etc.) then by concentration and purification of these active ingredients, for example by evaporation of the solvents.
  • solvents such as water, alcohol, etc.
  • one of the many plants of the genus is used.
  • the species Amaranthus hypochondriacus (amaranth) can advantageously be used according to the invention.
  • the species Oryza sativa L. (rice) can advantageously be used according to the invention.
  • the plant material used will be the seed or the grain and preferably the seed freed from its envelope by a dehulling step.
  • the plant is ground using a plant grinder.
  • the powder thus obtained may subsequently be "delipidated” with the aid of a conventional organic solvent (such as, for example, an alcohol, hexane or acetone).
  • a conventional organic solvent such as, for example, an alcohol, hexane or acetone.
  • the extraction of proteins from the plant is then conventionally carried out (Osborne, 1924); the crushed plant being suspended in an alkaline solution.
  • the soluble fraction is collected after centrifugation and filtration steps, this crude solution then constituting a first form of the extract containing the proteins, carbohydrates and optionally lipids.
  • Proteins are then precipitated by varying the ionic strength and acidifying the medium to remove soluble components and nucleic acids.
  • the precipitate is then washed with a solvent such as, for example, ethanol or methanol and the solvent is evaporated by drying in vacuo.
  • the protein-rich precipitate is redissolved in water or other solvent and then constitutes a more purified form of the extract.
  • the extraction can also be carried out in neutral or acidic medium.
  • the precipitation step is then carried out using a conventional precipitation agent such as salts (sodium chloride, ammonium sulfate).
  • the precipitate obtained can be separated from the precipitating agents by dialysis after redissolving in water or another solvent. At this stage, the extract obtained contains at least 70% of compounds of protein and peptide nature.
  • the isolated protein fraction according to the invention is then hydrolyzed under mild conditions to generate polypeptides and soluble peptides.
  • Hydrolysis is defined as a chemical reaction involving the cleavage of a molecule by water, this reaction being possible in a neutral, acidic or basic medium.
  • the hydrolysis is carried out chemically and / or advantageously by proteolytic enzymes.
  • endoproteases and exopeptidases of plant origin papain, bromelain, ficine
  • microorganisms Aspergillus, Rhizopus, Bacillus, etc.
  • the active extract may be further purified by fractionation, in particular by a method of the chromatographic type or purified and concentrated by a dialysis method. Any of the more or less purified forms of the extract are then solubilized in water or in any mixture containing water, then sterilized by ultrafiltration.
  • the plant extract obtained according to the invention is analyzed qualitatively and quantitatively for its content of compounds of protein and peptide nature.
  • Protein and peptide compounds are understood to mean protein fragments, peptides and free amino acids present in the mixture.
  • the peptides, amino acids and protein fragments are determined according to conventional techniques, which are well known to those skilled in the art.
  • the active plant extract contains a quantity of protein and peptide compounds representing between 30 and 90% of the total weight of the dry matter, more particularly this amount is between 60 and 90% of the total weight of the dry matter. and 80% of the total weight of the dry matter.
  • the invention has the second object the use of an extract according to the invention for the preparation of a pharmaceutical composition; the extract or the composition being intended to promote the increase of melanin synthesis in the melanocytes of the epidermis or hair bulb in order to repigment skin depigmented for example in the case of vitiligo, or in order to pigment hair or hair , especially in the treatment and prevention of canities.
  • the invention also relates to the use of a plant extract according to the invention for the preparation of a pharmaceutical composition; the extract or the composition being intended to attenuate the pigmentary disorders associated with skin hypopigmentation, in particular vitiligo.
  • the invention also relates to the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, of a plant extract according to the invention; the extract or the composition being intended to promote the pigmentation of the hairs and / or the hair.
  • the invention also relates to the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, of a plant extract according to the invention; the extract or the composition being intended to prepare the skin for exposure to the sun.
  • the invention also relates to the use in a cosmetic composition, or for the preparation of a pharmaceutical composition, a plant extract according to the invention; the extract or the composition being intended, by increasing melanin synthesis, to protect the skin from sunlight.
  • the use of the plant extract or of the composition containing it is intended to protect the skin from environmental stress.
  • the plant extract is first solubilized in one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents such as water, glycerol, propylene glycol, butylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, ethanol, propanol or isopropanol.
  • one or more cosmetically or pharmaceutically acceptable solvents such as water, glycerol, propylene glycol, butylene glycol, ethoxylated or propoxylated diglycols, ethanol, propanol or isopropanol.
  • the plant extract is first solubilized in a cosmetic or pharmaceutical vector such as liposomes or adsorbed on organic powdery polymers, mineral supports such as talcs and bentonites, and more generally solubilized in, or attached to, any cosmetically or pharmaceutically acceptable carrier.
  • a cosmetic or pharmaceutical vector such as liposomes or adsorbed on organic powdery polymers, mineral supports such as talcs and bentonites, and more generally solubilized in, or attached to, any cosmetically or pharmaceutically acceptable carrier.
  • the plant extract is used in an amount representing from 0.0001% to 20% of the total weight of the composition, and preferably in a quantity representing from 0.05% to 5% of the total weight of the composition.
  • the content of protein and peptide compounds in the compositions of the present invention will then be from 0.00003% to 18% and preferably from 0.015% to 9% of the total weight of the composition, for plant extracts containing between 30 and 90% of compounds of protein and peptide nature. Or, the content of protein and peptide compounds in the compositions of the present invention will be 0.0006% to
  • a pro-pigmenting compound according to the invention offers outlets in the self-tanning products and the products promoting tanning.
  • the invention relates to the use of plant extract for the manufacture of products for artificial tanning and / or browning of the skin.
  • the invention also relates to the use of plant extract to improve the intensity and / or the homogeneity and / or the persistence of the coloration produced on the skin and / or the hair.
  • compositions according to the present invention will be in a form suitable for topical administration to the skin, and cover all cosmetic or dermatological forms.
  • These compositions must therefore contain a cosmetically and / or dermatologically acceptable medium, that is to say compatible with the skin, hair or hair.
  • These compositions may especially be in the form of creams, O / W emulsions, W / O emulsions or multiple emulsions, solutions, suspensions, gels, milks, lotions, sticks or even powders, suitable for application to the skin, the lips and / or the hair.
  • These compositions comprise the excipients necessary for their formulation, such as solvents, thickeners, diluents, surfactants, antioxidants, dyes, preservatives, perfumes.
  • composition that may be used according to the invention may in particular consist of a composition for hair care, and in particular a shampoo, a conditioner, a setting lotion, a treatment lotion, a cream or a styling gel, a restructuring lotion for hair, a mask, etc.
  • the cosmetic composition according to the invention can be used in particular in treatments using an application that is followed or not followed by rinsing, or in the form of shampoo.
  • It can also be in the form of dye or mascara to be applied with a brush or a comb, in particular on eyelashes, eyebrows or hair.
  • plant extracts according to the invention may be used as the only pro-pigmenting agent or in combination with at least one other active agent, in a cosmetic composition or for the preparation of a dermatological and / or pharmaceutical composition.
  • compositions that can be used according to the invention also contain at least one other agent that promotes the pigmentation of the skin, hair and / or hair.
  • Such compounds are in particular tyrosinase substrates, such as tyrosine or L-DOPA, prostaglandins, or activating compounds of the cAMP pathway such as pro-opiomelanocortin derivatives, adenosine, or forkoline or its derivatives. It may also be mentioned plant extracts such as bitter orange (citrus aurantiur) or chrysanthemum (Chrysanthemum morifolium), described in particular in patents FR 2845285 and EP1014934.
  • tyrosinase substrates such as tyrosine or L-DOPA
  • prostaglandins or activating compounds of the cAMP pathway
  • activating compounds of the cAMP pathway such as pro-opiomelanocortin derivatives, adenosine, or forkoline or its derivatives.
  • plant extracts such as bitter orange (citrus aurantiur) or chrysanthemum (Chrysanthemum morifolium),
  • Such compounds are also found in the family of exogenous dyes of the superficial layers of the epidemic, such as dihydroxyacetone (DHA), erythrulose, extracts of henna leaves, described in particular in patents EP 0742002 and FR2779958.
  • DHA dihydroxyacetone
  • erythrulose extracts of henna leaves
  • the active agent can be obtained from an extract of grains of the species Pisum sativum L. (pea), but of course the extract can be prepared from plants of minus any of the many varieties and species belonging to the genus Pisum.
  • the active agent can be obtained from a grain extract of the species Vhaseolus vulgaris (bean).
  • the extract can be prepared from plants of at least one of many varieties and species belonging to the genus Phaseolus.
  • the active agent can be obtained from an extract of beans (or grains) of the species Theobroma cacao L. (cocoa).
  • the extract may be prepared from plants of at least one of many varieties and species belonging to the genus Theobroma.
  • the active agent can be obtained from a seed extract of the species Amaranthus hypochondriacus (amaranth).
  • the extract can be prepared from plants of at least one of many varieties and species belonging to the genus Amaranthus.
  • the active agent can be obtained from an extract of grains of the species Oryza sativa L. (rice).
  • the extract can be prepared from plants of at least one of the many varieties and species belonging to the genus Oryza.
  • a first step 1 kg of shelled grains are delipidated by the action of an organic solvent: hexane.
  • the grains are then milled in a knife mill and then suspended in an aqueous alkaline solution (1/10 dilution). This mixture is stirred for a time long enough to allow the solubilization of the soluble fractions.
  • the extraction temperature is variable (between 4 and 80 ° C); preferably the operation will be performed cold.
  • the medium is clarified by centrifugation and then filtered through a plate filter.
  • This filtrate which contains the soluble fractions of the plant is then subjected to precipitation of the proteins by varying the ionic strength in neutral or acidic medium, which allows to eliminate soluble carbohydrate components, lipids and nucleic acids.
  • the supernatant is removed and the precipitate is then washed with a solvent such as, for example, ethanol or methanol and the solvent is evaporated by drying in vacuo.
  • a solvent such as, for example, ethanol or methanol
  • the protein-rich precipitate is dissolved in water or another solvent.
  • the extraction can also be carried out in neutral or acidic medium.
  • the crude protein extract is then subjected to a series of gentle and selective hydrolyses consisting of chemical and enzymatic hydrolyses.
  • hydrolysis in the presence of exopeptidases (papain, ficin).
  • the hydrolyzate is then purified and membrane-dialyzed to remove the high molecular weight compounds.
  • a light-colored hydrolyzate titrant of 15 to 30 g / l of dry extract and containing a quantity of protein and peptide compounds representing approximately 70% of the total weight of the dry matter is then obtained.
  • the hydrolyzed extract according to the invention is then diluted so that the protein concentration determined by the Lowry method is between 0.5 and 2 g / l.
  • compositions were obtained by simple mixing of the various components. The quantities indicated are given as a percentage of weight.
  • Aqueous phase Aqueous phase :
  • Aqueous phase B Dihydroxyacetone 2.00%

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Abstract

La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait végétal dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, en tant qu'agent actif destiné à favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épiderme ou du bulbe pileux. L'extrait végétal est principalement constitué de composés de nature protéique et peptidique et est obtenu à partir de plantes choisies parmi les genres Amaranthus ou Oryza ou les espèces Pisum sativum L. (pois), Phaseolus vulgaris (haricot) et Theobroma cacao L. (cacao).

Description

UTILISATION D'UN EXTRAIT VEGETAL EN TANT QU'AGENT ACTIF POUR AUGMENTER LA SYNTHESE DE MELANINE DANS LES MELANOCYTES
La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait végétal dans une composition cosmétique ; l'extrait ou la composition étant destinés à favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épidémie ou du bulbe pileux, en vue de lui donner un aspect bronzé, ou de préparer la peau à une exposition au soleil. La présente invention concerne également l'utilisation d'un extrait végétal pour la préparation d'une composition pharmaceutique ; l'extrait ou la composition étant destinés à favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de Pépiderme ou du bulbe pileux à des fins thérapeutiques, pour repigmenter la peau dépigmentée par exemple dans le cas du vitiligo, ou pour pigmenter les poils ou les cheveux, en particulier dans le traitement et la prévention de la canitie. L'extrait végétal est principalement constitué de composés de nature protéique et peptidique et est obtenu à partir de plantes choisies parmi les genres Amaranthus ou Oryza ou les espèces Pisum sativum L. (pois), Phaseolus vulgaris (haricot) et Theobroma cacao L. (cacao).
La couleur des cheveux et de la peau humaine est fonction de différents facteurs et notamment des saisons de l'année, de la race, du sexe et de l'âge. Elle est principalement déterminée par la concentration de mélanine produite par les mélanocytes. Les mélanocytes sont les cellules spécialisées qui, par l'intermédiaire d'organites particuliers, les mélanosomes, synthétisent la mélanine. La synthèse de la mélanine ou mélanogénèse est un processus complexe dont les mécanismes précis ne sont pas encore élucidés et qui fait intervenir schématiquement les étapes suivantes :
Tyrosine *" Dopa * Dopaquinone *" Dopachrome *" Mélanine Dans l'épiderme, le mélanocyte est impliqué dans l'unité mélanique épidermique qui comporte un mélanocyte entouré d'environ 40 kératinocytes voisins. Au fur et à mesure que la mélanine est synthétisée dans les mélanosomes, ceux-ci se déplacent de la région périnucléaire vers l'extrémité des dendrites des mélanocytes. Par phagocytose, l'extrémité des dendrites est capturée par les kératinocytes, les membranes dégradées et les mélanosomes redistribués dans les kératinocytes, où ils assureront une protection jusqu'à la desquamation naturelle des cellules. La production de mélanine, ainsi que son transport, sont régulés par différents facteurs tels que, par exemple, le rayonnement UV, les hormones ou les produits chimiques. Ainsi, une augmentation de l'exposition aux rayonnements UV provoque la synthèse de pigments et le brunissement de la peau. La pigmentation du cheveu et des poils requiert la présence de mélanocytes au niveau du bulbe du follicule pileux. Le follicule pileux est une invagination tabulaire de l'épidémie qui s'enfonce jusqu'aux couches profondes du derme. Les mélanocytes au niveau du bulbe du follicule pileux sont dans un état actif, c'est-à-dire qu'ils synthétisent de la mélanine. Ces pigments sont transmis aux kératinocytes destinés à former la tige pilaire, ce qui conduira à la pousse d'un cheveu ou d'un poil pigmenté.
Il est admis que la canitie (blanchiment naturel des cheveux) est associée à une diminution de mélanine dans la tige pilaire.
De nos jours, il est important d'avoir bonne mine et une peau bronzée est toujours signe de bonne santé. Cependant, le bronzage naturel n'est pas toujours sans risque dans la mesure où il nécessite des expositions prolongées aux rayonnements UV, qui sont susceptibles en contrepartie d'induire une altération des cellules cutanées, notamment dans le cas des individus de phototypes clairs. La peau vieillit prématurément, devient sèche et se caractérise par de nombreuses rides et taches de vieillesse. Il est donc souhaitable de trouver une alternative au bronzage naturel qui soit compatible avec les exigences de santé des individus. D'autre part, on sait que dans la plupart des populations le maintien d'une coloration constante de la chevelure, signe de jeunesse, est une aspiration forte. La recherche de composés pouvant favoriser la synthèse de la mélanine dans la peau et les cheveux est une préoccupation de la dermatologie et de la cosmétique. Ces nouveaux composés seraient notamment utiles comme alternative aux expositions solaires, pour préparer la peau et protéger celle-ci des rayons du soleil, pour obtenir un bronzage plus intense après une exposition au soleil, pour prolonger la pigmentation naturelle de la peau après une exposition au soleil ou pour prévenir et/ou limiter et/ou stopper le développement de la canitie et même maintenir la pigmentation naturelle des cheveux et/ou des poils gris ou blancs.
On entend par pigmentation naturelle de la peau, la coloration de la peau ou des cheveux déterminée par la concentration en mélanine.
A cet égard, il a été proposé de nombreuses solutions par apport de colorants exogènes. On entend par colorant exogène, un colorant, ou une substance chimique, capable de réagir avec les couches superficielles de l'épidémie pour provoquer l'apparition d'une pigmentation de la peau tout à fait indépendante de la présence de mélanine. L'un des colorants exogènes le plus connu est la dihydroxyacétone, ou DHA. Toutefois, seule la stimulation de la pigmentation de la peau et/ou des cheveux par la voie naturelle permet une réelle protection vis à vis des rayonnements UV et reste la voie idéale de stimulation de la pigmentation. Ainsi il a été proposé dans l'art antérieur la préparation et l'utilisation d'activateurs de la biosynthèse de la mélanine (FR828097, FR 2831438, FR 2845285) faisant intervenir des hormones (alpha MSH ou ses dérivés WO2006037188) ou des prostaglandines (WO9511003).
D'autre part, il existe des pathologies liées à la pigmentation comme le vitiligo qui est une maladie auto-immune se caractérisant par l'apparition sur la peau de plaques blanches liées à un déficit de pigmentation ou encore le pityriasis versicolor, une mycose superficielle provoquant l'apparition de taches claires pouvant se manifester d'emblée ou après une exposition au soleil.
La présente invention a pour principal objectif de fournir un nouvel agent actif favorisant de façon importante la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épiderme et du bulbe pileux. Les inventeurs ont en effet mis en évidence une activité biologique et, plus particulièrement dermatologique et cosmétique, d'extraits végétaux obtenus à partir de plantes choisies parmi les genres Amaranthus ou Oryza ou les espèces Pisum sativum L. (pois), Phaseolus vulgaris (haricot) et Theobroma cacao L. (cacao).
L'utilisation cosmétique d'extraits végétaux obtenus à partir de ce type de plantes a déjà été décrite dans de nombreux brevets. Ainsi les brevets FR 2 746 303, JP8012549, JP10330242 décrivent l'utilisation d'extraits d'amarante, dans le domaine de la cosmétique. De même, l'utilisation d'extraits de riz, dans le domaine de la cosmétique, a déjà été décrite, entre autre, dans les brevets US5853705 et JP9087133. D'autre part, des compositions cosmétiques pour contrôler la pigmentation de la peau, contenant des polyphénols de cacao ont été décrites (WO 2006/117465). Toutefois, à la connaissance de la demanderesse, l'utilisation d'extraits végétaux, principalement constitués de composés de nature protéique et peptidique, obtenus à partir de plantes choisies parmi les genres Amaranthus ou Oryza ou les espèces Pisum sativum L. (pois), Phaseolus vulgaris (haricot) et Theobroma cacao L. (cacao), pour favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épiderme ou du bulbe pileux, n'a pas encore été exposée.
Par agent actif pro-pigmentant, on entend un composé capable de favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épiderme ou du bulbe pileux.
Par poils et cheveux on entend l'ensemble des annexes pileuses et notamment également les cils et les sourcils.
Les compositions selon l'invention pourront être appliquées par toute voie appropriée, notamment orale, parentérale ou topique externe, et leur formulation sera adaptée par l'homme du métier, en particulier pour des compositions cosmétiques ou dermatologiques.
Avantageusement, les compositions selon l'invention sont destinées à une administration par voie topique. Elles contiennent un milieu physiologiquement acceptable, en particulier un milieu cosmétologiquement ou pharmaceutiquement, notamment dermatologiquement acceptable.
Ainsi, l'invention a pour objet premier l'utilisation dans une composition cosmétique d'un extrait végétal, principalement constitué de composés de nature protéique et peptidique ; l'extrait ou la composition étant destinés à favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épiderme ou du bulbe pileux.
Le terme "extrait" désigne toute substance ou préparation isolée, obtenue à partir de matière végétale. Il s'obtient, par exemple, par dissolution des composants actifs au moyen de solvants (comme l'eau, l'alcool, etc.) puis par concentration et purification de ces actifs, par exemple, par évaporation des solvants.
Plus particulièrement selon l'invention on utilise une des nombreuses plantes des genres
Amaranthus ou Oryza ou des espèces Pisum sativum L. (pois), Phaseolus vulgaris (haricot) ou Theobroma cacao L. (cacao).
Lorsque l'on utilise les plantes du genre Amaranthus on peut utiliser avantageusement selon l'invention l'espèce Amaranthus hypochondriacus (amarante).
Lorsque l'on utilise les plantes du genre Oryza, on peut utiliser avantageusement selon l'invention l'espèce Oryza sativa L. (riz).
Selon l'invention le matériel végétal utilisé sera la graine ou le grain et préférentiellement la graine débarrassée de son enveloppe par une étape de décorticage.
Toute méthode d'extraction ou de purification connue de l'homme du métier peut être utilisée afin de préparer l'hydrolysat selon l'invention.
Dans une première étape, la plante est broyée à l'aide d'un broyeur à plantes. La poudre ainsi obtenue peut ultérieurement être "délipidée" à l'aide d'un solvant organique classique (comme par exemple un alcool, un hexane ou de l'acétone).
On réalise ensuite classiquement l'extraction des protéines de la plante (Osborne, 1924) ; le broyât de plante étant mis en suspension dans une solution alcaline. La fraction soluble est recueillie après des étapes de centrifugation et de filtration, cette solution brute constituant alors une première forme de l'extrait contenant les protéines, les glucides et éventuellement des lipides. Les protéines sont ensuite précipitées en faisant varier la force ionique et en acidifiant le milieu, ce qui permet d'éliminer les composants solubles et les acides nucléiques. Le précipité est ensuite lavé à l'aide d'un solvant tel que, par exemple, l'éthanol ou le méthanol puis le solvant est évaporé par séchage sous vide. Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau ou un autre solvant et constitue alors une forme plus purifiée de l'extrait.
L'extraction peut également être réalisée en milieu neutre ou acide. L'étape de précipitation s'effectue alors à l'aide d'un agent classique de précipitation tel que les sels (chlorure de sodium, sulfate d'ammonium). Le précipité obtenu peut être séparé des agents de précipitation par dialyse après remise en solution dans de l'eau ou un autre solvant. A ce stade, l'extrait obtenu contient au minimum 70 % de composés de nature protéique et peptidique.
La fraction protéique isolée selon l'invention est ensuite hydrolysée dans des conditions ménagées pour générer des polypeptides et des peptides solubles. L'hydrolyse se définit comme étant une réaction chimique impliquant le clivage d'une molécule par de l'eau, cette réaction pouvant se faire en milieu neutre, acide ou basique. Selon l'invention, l'hydrolyse est réalisée par voie chimique et/ou de façon avantageuse par des enzymes protéolytiques. On peut alors citer l'utilisation des endoprotéases et exopeptidases d'origine végétale (papaïne, bromelaine, ficine) et de micro-organismes (Aspergillus, Rhizopus, Bacillus, etc.). La solution obtenue constitue l'extrait actif. L'extrait actif peut être encore purifié par fractionnement, notamment par une méthode de type chromatographique ou purifié et concentré par un procédé de dialyse. L'une quelconque des formes plus ou moins purifiées de l'extrait est alors solubilisée dans de l'eau ou dans tout mélange contenant de l'eau, puis stérilisée par ultrafiltration.
L'extrait végétal obtenu selon l'invention est analysé qualitativement et quantitativement pour sa teneur en composés de nature protéique et peptidique. On entend par composés de nature protéique et peptidique, les fragments de protéines, les peptides et les acides aminés libres présents dans le mélange. Les peptides, acides aminés et fragments de protéines sont dosés selon les techniques classiques, bien connues de l'homme du métier. Ainsi, selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait végétal actif contient une quantité de composés de nature protéique et peptidique représentant entre 30 et 90 % du poids total de la matière sèche, plus particulièrement cette quantité est comprise entre 60 et 80 % du poids total de la matière sèche.
L'invention a pour deuxième objet l'utilisation d'un extrait selon l'invention pour la préparation d'une composition pharmaceutique ; l'extrait ou la composition étant destinés à favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de Fépiderme ou du bulbe pileux afin de repigmenter la peau dépigmentée par exemple dans le cas du vitiligo, ou afin de pigmenter les poils ou les cheveux, en particulier dans le traitement et la prévention de la canitie.
L'invention se rapporte aussi à l'utilisation d'un extrait végétal selon l'invention pour la préparation d'une composition pharmaceutique ; l'extrait ou la composition étant destinés à atténuer les désordres pigmentaires associés à une hypopigmentation de la peau, notamment le vitiligo.
L'invention a également pour objet l'utilisation dans une composition cosmétique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'un extrait végétal selon l'invention ; l'extrait ou la composition étant destinés à favoriser la pigmentation des poils et/ou des cheveux.
L'invention se rapporte encore à l'utilisation dans une composition cosmétique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'un extrait végétal selon l'invention ; l'extrait ou la composition étant destinés à préparer la peau à une exposition au soleil.
L'invention se rapporte encore à l'utilisation dans une composition cosmétique, ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'un extrait végétal selon l'invention ; l'extrait ou la composition étant destinés, par l'augmentation de la synthèse de mélanine, à protéger la peau des rayonnements du soleil.
Selon une autre forme de l'invention, l'utilisation de l'extrait végétal ou de la composition le contenant est destinée à protéger la peau des stress environnementaux
Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait végétal est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptables comme l'eau, le glycérol, le propylène glycol, le butylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, l'éthanol, le propanol ou l'isopropanol.
Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait végétal est préalablement solubilisé dans un vecteur cosmétique ou pharmaceutique comme les liposomes ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites, et plus généralement solubilisé dans, ou fixé sur, tout vecteur cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable.
Pour donner un ordre de grandeur, dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques de la présente invention, l'extrait végétal est utilisé en une quantité représentant de 0,0001 % à 20 % du poids total de la composition, et préférentiellement en une quantité représentant de 0,05 % à 5 % du poids total de la composition.
Ainsi, la teneur en composés de nature protéique et peptidique, dans les compositions de la présente invention, sera alors de 0,00003 % à 18% et préférentiellement de 0,015 % à 9 % du poids total de la composition, pour des extraits végétaux contenant entre 30 et 90 % de composés de nature protéique et peptidique. Ou encore, la teneur en composés de nature protéique et peptidique dans les compositions de la présente invention, sera de 0,0006 % à
16 % et préférentiellement de 0,03 % à 8 % du poids total de la composition, pour des extraits végétaux contenant entre 60 et 80 % de composés de nature protéique et peptidique.
Outre l'intérêt majeur de la pigmentation de la peau dans la protection solaire, un composé pro-pigmentant selon l'invention offre des débouchés dans les produits auto-bronzants et les produits favorisant le bronzage. Pour cela, l'invention se rapporte à l'utilisation d'extrait végétal pour la fabrication de produits pour le bronzage et/ou le brunissage artificiels de la peau.
L'invention se rapporte aussi à l'utilisation d'extrait végétal pour améliorer l'intensité et/ou l'homogénéité et/ou la persistance de la coloration produite sur la peau et/ou les cheveux.
Préférentiellement, les compositions selon la présente invention se présenteront sous une forme adaptée à l'administration par voie topique cutanée, et couvrent toutes les formes cosmétiques ou dermatologiques. Ces compositions doivent donc contenir un milieu cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau, les poils ou les cheveux. Ces compositions pourront notamment être sous forme de crèmes, émulsions H/E, E/H ou émulsions multiples, solutions, suspensions, gels, laits, lotions, sticks ou encore poudres, adaptés à une application sur la peau, les lèvres et/ou les cheveux. Ces compositions comprennent les excipients nécessaires à leur formulation, tels que solvants, épaississants, diluants, tensioactifs, anti-oxydants, colorants, conservateurs, parfums.
Bien entendu, l'homme de métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et/ou leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l'adjonction envisagée.
La composition utilisable selon l'invention peut en particulier consister en une composition pour soins capillaires, et notamment un shampooing, un après-shampooing, une lotion de mise en plis, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une lotion restructurante pour les cheveux, un masque, etc. La composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée notamment dans les traitements mettant en oeuvre une application qui est suivie ou non suivie d'un rinçage, ou encore sous forme de shampooing.
Elle peut également se présenter sous forme de teinture ou de mascara à appliquer au pinceau ou au peigne, en particulier sur les cils, les sourcils ou les cheveux.
II est bien entendu évident que les extraits végétaux selon l'invention, principalement constitués de composés de nature protéique et peptidique, pourront être utilisés en tant que seul agent pro-pigmentant ou bien en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition dermatologique et/ou pharmaceutique.
Avantageusement, les compositions utilisables selon l'invention contiennent en outre au moins un autre agent favorisant la pigmentation de la peau, des cheveux et/ou des poils.
De tels composés sont notamment des substrats de la tyrosinase, tels que la tyrosine ou la L- DOPA, des prostaglandines, ou des composés activateurs de la voie de l'AMPc tels que des dérivés de pro-opiomélanocortines, l'adénosine, ou la forkoline ou ses dérivés. On peut également citer des extraits de végétaux tels que le bigaradier (citrus aurantiurή) ou de chrysanthème (Chrysanthemum morifolium), décrits notamment dans les brevets FR 2845285 et EP1014934.
De tels composés se trouvent également dans la famille des colorants exogènes des couches superficielles de l'épidémie, tels que la dihydroxyacétone (DHA), l'érythrulose, les extraits de feuilles de henné, décrits notamment dans les brevets EP 0742002, FR2779958.
D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples donnés à titre illustratif et non limitatif.
Exemple 1 : Préparation des extraits végétaux L'agent actif peut être obtenu à partir d'un extrait de grains de l'espèce Pisum sativum L. (pois), mais bien entendu l'extrait peut être préparé à partir de plantes d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Pisum. L'agent actif peut être obtenu à partir d'un extrait de grains de l'espèce Vhaseolus vulgaris (haricot). Bien entendu l'extrait peut être préparé à partir de plantes d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Phaseolus.
L'agent actif peut être obtenu à partir d'un extrait de fèves (ou grains) de l'espèce Theobroma cacao L. (cacao). Bien entendu l'extrait peut être préparé à partir de plantes d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Theobroma. L'agent actif peut être obtenu à partir d'un extrait de graines de l'espèce Amaranthus hypochondriacus (amarante). Bien entendu l'extrait peut être préparé à partir de plantes d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Amaranthus. L'agent actif peut être obtenu à partir d'un extrait de grains de l'espèce Oryza sativa L. (riz). Bien entendu l'extrait peut être préparé à partir de plantes d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Oryza.
Dans une première étape, 1 kg de grains décortiqués sont délipidés par l'action d'un solvant organique : l'hexane. Les grains sont ensuite broyés dans un broyeur à couteau puis sont mis en suspension dans une solution aqueuse alcaline (dilution au 1/10). Ce mélange est maintenu sous agitation pendant un temps suffisamment long pour permettre la solubilisation des fractions solubles. La température d'extraction est variable (comprise entre 4 et 80°C) ; préférentiellement l'opération sera réalisée à froid. Après cette phase d'extraction le milieu est clarifié par centrifugation puis filtré sur filtre à plaque. Ce filtrat qui contient les fractions solubles du végétal est ensuite soumis à une précipitation des protéines en faisant varier la force ionique en milieu neutre ou acide, ce qui permet d'éliminer les composants glucidiques solubles, les lipides et les acides nucléiques. Le surnageant est éliminé et le précipité est ensuite lavé à l'aide d'un solvant tel que, par exemple, l'éthanol ou le méthanol puis le solvant est évaporé par séchage sous vide. A ce stade, on obtient environ 50 grammes de poudre de couleur jaune clair d'extrait protéique brut contenant : Protéines : 75 % - Glucides : 20 %
Lipides : 5 %
Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau ou un autre solvant. L'extraction peut également être réalisée en milieu neutre ou acide. L'extrait protéique brut est alors soumis à une série d'hydrolyses ménagées et sélectives consistant en des hydrolyses chimiques et enzymatiques. A titre d'exemple on peut citer l'hydrolyse en présence d'exopeptidases (papaïne, ficine).
L'hydrolysat est ensuite purifié puis dialyse sur membrane pour éliminer les composés de haut poids moléculaire. On obtient alors un hydrolysat de couleur claire titrant de 15 à 30 g/1 d'extrait sec et contenant une quantité de composés de nature protéique et peptidiques représentant environ 70 % du poids total de la matière sèche. L'extrait hydrolyse selon l'invention est alors dilué de telle sorte que la concentration en protéines déterminée par la méthode de Lowry, soit comprise entre 0,5 et 2 g/1. Exemple 2 : Etude ex vivo de l'effet de l'extrait végétal selon l'exemple 1 sur la synthèse de mélanine
Le but de cette étude ex vivo est de mettre en évidence l'augmentation de la mélanisation apportée par l'extrait selon l'exemple 1. Protocole : Des biopsies de peau humaine de 6 mm de diamètre sont maintenues en culture ex vivo en présence d'un milieu spécifique (DMEM lg/L, HAMF 12, SVF et antibiotiques) sur des inserts déposés dans des plaques 6 puits. Les biopsies sont cultivées pendant 48 heures et reçoivent ou non 2 applications par jour d'extrait selon l'exemple 1 à une concentration de 1 %. Les biopsies sont ensuite fixées dans le formol 9 %, NaCl (150 mM) pendant 10 heures puis incluses dans la paraffine. Des coupes de peau de 3 μm d'épaisseur sont ensuite réalisées et la mélanine est colorée spécifiquement par la technique de Fontana-
Masson.
Résultats : Les coupes de peau n'ayant pas reçu l'application d'extrait selon l'exemple 1 présentent une coloration de faible intensité. Au contraire, les coupes de peau ayant reçu les applications d'extrait selon l'exemple 1 présentent une coloration d'intensité nettement augmentée. De plus, la mélanine est située dans la couche basale, mais aussi transportée dans les couches supra-basales.
Conclusions : 48 heures de traitement ont permis d'induire une forte augmentation de la synthèse de mélanine par les mélanocytes et de stimuler l'ensemble du processus de répartition de la mélanine dans l'épidémie.
Exemple 3 : Préparation de compositions
Ces compositions ont été obtenues par simple mélange des différents composants. Les quantités indiquées sont données en pourcentage de poids.
1-Emulsion huile-dans-eau
Phase huileuse :
B Montanov 68 (Cetearyl Alcohol and Cetearyl Glucoside) 5.00 %
B Huile de Jojoba 5.00 %
" Huile de Vaseline 5.00 %
" Isopropyl Palmitate 7.00 %
Phase aqueuse :
B Glycérine 5.00 % Allantoïne 0.10 %
Extrait selon l'exemple 1 1.00 %
Sepigel 305 (Polyacrylamide and C13-14 Isoparaffin and Laureth-7) 0.30 %
Conservateur 0.50 %
Parfum 0.50 %
Eau qsp 100 %
2- Gel a Carbopol Ultrez 10 (sol. à 2% ) 25.00 % " Triéthanolamine 0.50 %
• Extrait selon l'exemple 1 5.00 %
B Conservateur 0.20 %
B EDTA (séquestrant) 0.10 %
B Parfum 0.50 % B Eau qsp 100 %
3- Lotion
B Mono Propylène Glycol 1.00 %
B Allantoïne 0.30 % B Glycérine 1.00 %
B Cetiol HE (PEG-7 Glyceryl Cocoate) 1.00 %
B Extrait selon l'exemple 1 0.5 %
B Conservateur 0.20 %
B Parfum 0.50 % B Eau qsp 100 %
4-Emulsion autobronzante huile-dans-eau Phase huileuse :
B Mélange mono/distéarate de glycérol 2.00 % B Alcool stéarylique 1.00 %
B Acide stéarique d'huile de palme 1.50 % B PoIy diméthylsiloxane 2.00 %
B Mélange poly diméthylsiloxane alpha-omega 3.00 % dihydroxyle/cyclopentadiméthylsiloxane (14,7/85,3) • Lauroyl sarconisate d'isopropyle 15.00 % Phase aqueuse :
B Dihydroxyacétone 5.00 % m Glycérine . 5.00 % B Phosphate d'alcool hexadécylique, sel de potassium 1.00 %
B Acide polyacrylique 0.30 %
B Triéthanolamine qsp pH : 7
B Acétate de dl-alpha-tocopheryle 0.50 %
B Extrait selon l'exemple 1 1.00 % B Eau déminéralisée qsp 100.00 %
5-Emulsion autobronzante eau-dans-huile
Phase huileuse :
B Polydiméthyl 2.00 % B Phényl triméthylsiloxy trisiloxane 3.00 %
B Lauroyl sarcosinate d'isopropyle 10.00 %
B Isohexadecane 5.00 %
B Cyclopenta dimethylsiloxane 3.00 %
Phase aqueuse : B Dihydroxyacétone 2.00 %
B Glycérine 5.00 %
B Sulfate de magnésium 0.70 %
B Extrait selon l'exemple 1 1.00 %
B Eau déminéralisée qsp 100.00 %
6- Lotion autobronzante
B Dihydroxyacétone 5.00 %
B Extrait lyophilisé άΕclipta prostata 0.40 % m Ethanol à 96% 13.00 % B Ethoxydiglycol 7.00 %
B Eumulgin® L (PPG- l-PEG-9-Lauryl Glycol Ether) 5.00 %
B Parabens 0.25 %
B Extrait selon l'exemple 1 1.00 % Eau déminéralisée qsp 100.00 %
7- Emulsion huile-dans-eau autobronzante
B Eau 66.80 % B Ethoxydiglycol 5.00 %
B Xanthan gum 0.30 %
B Cetyl hydroxyethylcellulose 0.30 %
B Cetyl alcohol 2.00 %
B Stearyl alcohol 2.00 % m Octyl palmitate 2.00 %
B Glucam P-20 distearate 2.00 %
B Steareth-20 1.00 %
B Dimethicone 1.00 % m Polysorbate 60 1.00 % B Dimethicone Copolyol/IPDI Copolymer 1.00 %
B Glycerylstearate and PEG-100 stéarate 0.25 % m Actiplex 335 Lipo OP 0.1 %
" Tocopheryl acétate 0.1 % a Eau 10.975 % β Dihydroxyacetone 2.00 %
" Nipaguard MPA 0.60 % β Panthenol, 50% aqueux 0.40 %
" Sorbic acid 0.05 %
B Sodium metabisulfite 0.025 % a Extrait selon l'exemple 1 1.00 %

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation d'un extrait végétal obtenu à partir de plantes choisies parmi les genres Amaranthus ou Oryza ou les espèces Pisum sativum L. (pois), Phaseolus vulgaris (haricot) ou Theobroma cacao L. (cacao), principalement constitué de composés de nature protéique et peptidique, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition cosmétique, l'extrait ou la composition le contenant étant destinés à favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épiderme ou du bulbe pileux et à améliorer la pigmentation naturelle de la peau.
2. Utilisation d'un extrait végétal obtenu à partir de plantes choisies parmi les genres Amaranthus ou Oryza ou les espèces Pisum sativum L. (pois), Phaseolus vulgaris
(haricot) ou Theobroma cacao L. (cacao), principalement constitué de composés de nature protéique et peptidique, seul ou en association avec au moins un autre agent actif, pour la préparation d'une composition dermatologique et/ou pharmaceutique, l'extrait ou la composition le contenant étant destinés à favoriser l'augmentation de la synthèse de mélanine dans les mélanocytes de l'épiderme ou du bulbe pileux et à atténuer les désordres pigmentaires associés à une hypopigmentation de la peau.
3. Utilisation selon les revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que les plantes appartenant au genre Amaranthus sont de l'espèce Amaranthus hypochondriacus (amarante).
4. Utilisation selon les revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que les plantes appartenant au genre Oryza sont de l'espèce Oryza sativa L. (riz).
5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait végétal contient une quantité de composés de nature protéique et peptidique, représentant entre 30 % et 90 % du poids total de la matière sèche et plus particulièrement entre 60 % et 80 % du poids total de la matière sèche.
6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition se présente sous une forme adaptée à l'application par voie topique comprenant un milieu cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable.
7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait est utilisé en une quantité représentant de 0,0001 % à 20 % du poids total de la composition, et préférentiellement en une quantité représentant de 0,05 % à 5 % du poids total de la composition.
8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition contient en outre au moins un colorant exogène des couches superficielles de l'épiderme et/ou au moins un agent actif pro-pigmentant différent dudit extrait selon les revendications 1 à 5, choisi parmi les substrats de la tyrosinase ou les prostaglandines ou les composés activateurs de la voie de l'AMPc ou les extraits végétaux pigmentants.
9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que l'extrait ou la composition le contenant sont destinés, par l'augmentation de la synthèse de mélanine, à préparer la peau à une exposition au soleil ou à protéger la peau des rayonnements du soleil.
10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que l'extrait ou la composition le contenant sont destinés à protéger la peau des agressions extérieures, en particulier des rayons UV.
11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que l'extrait ou la composition le contenant sont destinés au bronzage et/ou au brunissage artificiels de la peau.
12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que l'extrait ou la composition le contenant sont destinés à améliorer l'intensité et/ou l'homogénéité et/ou la persistance de la pigmentation de la peau et/ou des cheveux.
13. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que l'extrait ou la composition le contenant sont destinés à prévenir ou à traiter le blanchiment des poils et/ou des cheveux.
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