WO2012115247A1 - 角層剥離促進剤 - Google Patents

角層剥離促進剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2012115247A1
WO2012115247A1 PCT/JP2012/054638 JP2012054638W WO2012115247A1 WO 2012115247 A1 WO2012115247 A1 WO 2012115247A1 JP 2012054638 W JP2012054638 W JP 2012054638W WO 2012115247 A1 WO2012115247 A1 WO 2012115247A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
extract
stratum corneum
mesotrypsin
corneum peeling
ectoine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/JP2012/054638
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
利彦 日比野
章子 山田
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shiseido Co Ltd
Original Assignee
Shiseido Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shiseido Co Ltd filed Critical Shiseido Co Ltd
Publication of WO2012115247A1 publication Critical patent/WO2012115247A1/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/16—Ginkgophyta, e.g. Ginkgoaceae (Ginkgo family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
    • A61K36/738—Rosa (rose)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/494—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom
    • A61K8/4953—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom containing pyrimidine ring derivatives, e.g. minoxidil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/63—Steroids; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9771—Ginkgophyta, e.g. Ginkgoaceae [Ginkgo family]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/12—Keratolytics, e.g. wart or anti-corn preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/20—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of the composition as a whole
    • A61K2800/28—Rubbing or scrubbing compositions; Peeling or abrasive compositions; Containing exfoliants

Definitions

  • the present invention provides a mesotrypsin expression promoter selected from the group consisting of ginkgo biloba extract, saxifrage extract, Izayoi rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine, and a stratum corneum peeling promoter containing the same.
  • the outermost layer of the epidermis the stratum corneum (SC) consists of keratinized cells (keratinocytes) and a continuous extracellular lipid layer, forming a physiochemical barrier to effectively protect the body from environmental disasters.
  • SCs are created continuously through terminal differentiation of keratinocytes.
  • cell shedding occurs and the SC is maintained at a constant thickness.
  • individual keratinocytes or small aggregates detach from the skin surface. This process is undetectable in healthy people, but in some pathological conditions there is an imbalance between SC creation and ablation. The result is a visible excess scale. This is seen in inflammatory skin diseases such as psoriasis.
  • Non-patent Document 1 Lundstrom and Egelrud have reported that chymotrypsin-like serine protease exists in SC and is involved in detachment.
  • This enzyme was purified from human sole SC as a stratum corneum chymotrypsin enzyme, and a cDNA encoding the stratum corneum chymotrypsin enzyme was isolated from a human keratinocyte cDNA library (Non-patent document 2; Non-patent document). 3).
  • the present inventor has shown that not only chymotrypsin enzyme but also trypsin-like serine protease is involved in the SC exfoliation process other than the sole.
  • KLK7 stratum corneum chymotrypsin enzyme
  • KLK5 trypsin-like enzyme
  • KLK5 and KLK7 have a very important function in peeling.
  • trypsinogens are called cationic trypsinogen, anionic trypsinogen, and mesotrypsinogen based on their equipotential points. According to recent studies, these trypsinogens are encoded by different genes PRSS1, PRSS2, and PRSS3 (Non-patent Document 8). Trypsinogen 1 which is a PRSS1 gene product and trypsinogen 2 which is a PRSS2 gene product are major digestive pancreatic proteases. PRSS3 is a mesotrypsinogen gene and at least two splicing variants are generated (trypsinogen 3 and 4).
  • trypsinogens have the very highly conserved enteropeptidase-activated putative cleavage site sequence DDDDK-1 present in pancreatic trypsinogen from various species (Light and Janska, 1989) . Trypsinogen is expressed not only in the pancreas but also in other tissues, including epithelial cells of various tissues and the human brain. Interestingly, mesotrypsin differs from the other two trypsins in substrate specificity and inhibitor sensitivity. Mesotrypsin does not cleave protein substrates very much.
  • the inventor performed cDNA cloning of the trypsinogen gene from a human keratinocyte cDNA library, resulting in the isolation of two splicing isoforms of the mesotrypsinogen gene PRSS3, one of which is identical to trypsinogen 4 (brain trypsinogen), and The other was different only in the exon encoding the N-terminal region and was named trypsinogen 5 (Non-Patent Document 9).
  • Both isoforms have the activation sequence DDDDK-1.
  • DDDDK-1 is hardly cleaved by trypsin itself because of the presence of mainly negatively charged residues at the cleavage site.
  • enteropeptidase is highly specific for the DDDDK-1 sequence (Non-Patent Document 10).
  • the catalytic efficiency of enteropeptidase for bovine trypsinogen is 34,000 times that for bovine trypsin.
  • enteropeptidase is the only enzyme that physiologically converts trypsinogen to trypsin. It has also been found that enteropeptidase is present exclusively in the granular layer of the epidermis. The expression and location of these trypsinogens and their activating enzyme enteropeptidase is consistent with the view that mesotrypsin is involved in terminal differentiation of keratinocytes.
  • LEKTI serine protease inhibitor lympho-epithelial-casal-type 5 inhibitor
  • SPINK5-deficient mice show hyperproliferation of epidermal protease and show symptoms similar to Netherton syndrome through excessive degradation of desmoglen-1.
  • Multiple epidermal kallikreins may be involved in stratum corneum detachment through desmoglen 1 cleavage, and they are regulated by LEKTI.
  • stratum corneum detachment occurs when KLK acts on a desmosome that exhibits cell adhesion and decomposes it, and when LEKTI suppresses the action of KLK, stratum corneum detachment is also suppressed.
  • LEKTI suppresses the action of KLK
  • mesotrypsin was thought to promote stratum corneum peeling only by degrading LEKTI.
  • An object of the present invention is to provide a new stratum corneum peeling accelerator.
  • the stratum corneum peeling accelerator literally promotes the peeling of the stratum corneum, thereby exhibiting an effect of improving rough skin.
  • mesotrypsin not only degrades LEKTI, but surprisingly directly activates KLK7, which contributes to stratum corneum detachment. Therefore, as a result of screening candidate drugs that enhance the expression of mesotrypsin, it was found that Ginkgo biloba extract, Yukinosita extract, Izayoi rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine have an effect of enhancing mesotrypsin expression, thereby completing the present invention.
  • a stratum corneum peeling promoter comprising the mesotrypsin expression enhancer of (1).
  • a method for promoting exfoliation of stratum corneum by applying to the skin a component selected from the group consisting of Ginkgo biloba extract, Yukinoshita extract, Izayoi rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine to a subject who desires exfoliation promotion.
  • a component selected from the group consisting of ginkgo biloba extract, saxifrage extract, izayoi rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine for promoting stratum corneum peeling.
  • ginkgo biloba extract, saxifrage extract, izayoi rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine activate mesotrypsin, thereby exerting a stratum corneum peeling promoting effect, and as a result, rough skin is improved through peeling of the stratum corneum.
  • FIG. 5 shows that mesotrypsin has the ability to activate the precursor of KLK7 (proKLK7).
  • the mesotrypsin expression promotion effect of various crude drugs and drugs is shown.
  • the numerical value at the end of each herbal extract name represents the concentration ( ⁇ g / ml).
  • Corneal layer exfoliation promoter in one aspect, provides a stratum corneum exfoliation promoter comprising a mesotrypsin expression enhancer selected from the group consisting of ginkgo biloba extract, saxifrage extract, Isaiyo rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine.
  • a mesotrypsin expression enhancer selected from the group consisting of ginkgo biloba extract, saxifrage extract, Isaiyo rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine.
  • Izayoi rose extract has a ceramide synthesis promoting effect (Japanese Patent Laid-Open No. 2006-111560), a collagenase inhibitory effect (Japanese Patent Laid-Open No. 2006-241148), and the like.
  • dipotassium glycyrrhizinate and ectoin are also used for external preparations for skin, but none of the extracts is known to have a stratum corneum peeling promoting effect.
  • the above extract can be obtained by a conventional method.
  • a part or all of a plant that is the origin of the extract can be obtained by soaking or heating and refluxing together with an extraction solvent at room temperature or after heating, filtering and concentrating.
  • the extraction site may be dried.
  • the extraction solvent any solvent can be used as long as it is usually used for extraction.
  • organic solvents such as alcohols such as methanol, ethanol, propylene glycol, 1,3-butylene glycol and glycerin, hydrous alcohols , Chloroform, dichloroethane, carbon tetrachloride, acetone, ethyl acetate, hexane, or an aqueous solvent such as water, physiological saline, phosphate buffer, borate buffer, etc., either alone or in combination. it can.
  • one or more kinds selected from water, methanol, ethanol, and 1,3-butylene glycol are preferably used as the solvent.
  • the extract obtained by extraction with the above solvent can be used as it is or, for example, an extract concentrated by lyophilization or the like, and if necessary, an adsorbent method, for example, an ion exchange resin removed impurities, A polymer (eg, Amberlite XAD-2) adsorbed on a column, eluted with a desired solvent, and further concentrated can be used.
  • an adsorbent method for example, an ion exchange resin removed impurities,
  • a polymer eg, Amberlite XAD-2
  • Drugs such as Ginkgo biloba leaf extract, Yukinoshita extract, Isaiyoi rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and ectoine show mesotrypsin expression enhancing action in a concentration-dependent manner. Therefore, from such a viewpoint, the amount of ginkgo biloba extract, saxifrage extract, Izayoi rose extract, dipotassium glycyrrhizinate and / or ectoine in the stratum corneum peeling promoter of the present invention is 0.
  • the content is 0001 to 20.0 mass%, preferably 0.0001 to 10.0 mass%.
  • the stratum corneum peeling accelerator according to the present invention can be produced according to a conventional method, and as the component constituting the stratum corneum peeling accelerator, it can be prepared by one or more of the above-mentioned extracts.
  • Ingredients used in skin preparations such as cosmetics and pharmaceuticals including quasi drugs, such as oils, surfactants, powders, coloring materials, water, alcohols, thickeners, chelating agents, silicones, antioxidants UV absorbers, moisturizers, fragrances, various medicinal ingredients, preservatives, pH adjusters, neutralizers, and the like are appropriately blended as necessary.
  • the dosage form of the stratum corneum peeling accelerator of the present invention is not particularly limited, and for example, a solution system, a solubilization system, an emulsification system, a powder dispersion system, a water-oil two-layer system, a water-oil-powder three-layer system.
  • Arbitrary dosage forms such as systems, ointments, gels, aerosols and the like can be taken.
  • the form of use is not particularly limited, and can take any form such as lotion, milky lotion, cream, essence, jelly, gel, ointment, pack, mask, foundation, and the like.
  • the stratum corneum peeling promoter of the present invention can be applied to the skin and used in a cosmetic method for preventing and / or improving rough skin.
  • the usage and dosage of the stratum corneum peeling promoter of the present invention in such a cosmetic method is not particularly limited, and is appropriately determined depending on the dosage form and the state of wrinkles on the skin to be treated.
  • Appropriate amount eg 0.1 to 1 ml per square cm 2 , can be rubbed directly into the skin, or the appropriate amount can be soaked in gauze or the like and applied to the skin.
  • RT-PCR Total RNA 500 ng isolated from human keratinocytes cultured as described above was reverse transcribed using random hexamers and Superscript II RNase H-reverse transcriptase (Gibco-BRL, Getersberg, MD) Thereafter, PCR amplification was performed using Taq DNA polymerase (Takara, Kyoto, Japan) and the following primers. 40 amplification cycles of 94 ° C. for 30 seconds, 60 ° C. for 1 minute, and 72 ° C. for 1 minute were performed.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

　イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインから成る群から選ばれるメソトリプシン発現亢進剤及びそれを含む角層剥離促進剤の提供。

Description

角層剥離促進剤
　本発明は、イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム、エクトインから成る群から選ばれるメソトリプシン発現促進剤及びそれを含む角層剥離促進剤を提供する。
　表皮の最外層である角層（ＳＣ）は、角化した細胞（角質細胞）と、連続的な細胞外脂質層とからなり、生理化学的障壁を形成して環境災害から身体を効果的に保護している。ＳＣは、ケラチノサイトの最終分化を通じて継続的に作り出される。それと同時に細胞シェディング（剥離）も起こってＳＣが一定の厚さに維持される。正常な剥離では、個々の角質細胞すなわち小さな凝集体が皮膚表面から剥がれる。このプロセスは、健康な人では感知できないが、ある病的状態ではＳＣの創出と剥離の間に不均衡が存在する。その結果、目に見える過剰な鱗屑となる。これは、乾癬などの炎症性皮膚疾患で見られる。
　LundstromとEgelrudは、キモトリプシン様セリンプロテアーゼがＳＣに存在していて剥離に関与していることを報告している（非特許文献１）。この酵素は、ヒトの足裏のSCから角層キモトリプシン酵素として精製され、角層キモトリプシン酵素をコードしているcDNAは、ヒトケラチノサイトcDNAライブラリーから単離された（非特許文献２；非特許文献３）。本発明者は、キモトリプシン酵素だけでなく、トリプシン様セリンプロテアーゼも足裏以外でのＳＣの剥離プロセスに関与していることを示した。最近の研究により、15種類のセリンプロテアーゼ（それをカリクレイン１～15（KLK1～15）と呼ぶ）をコードしているヒト組織カリクレイン遺伝子ファミリーが染色体19q13.4にクラスターとして位置していることが明らかにされた（非特許文献４；非特許文献５）。これらセリンプロテアーゼの多くはヒト組織で広く発現しており、その中に皮膚が含まれる。剥離への関与が以前に明らかにされたこれらプロテアーゼは、カリクレインファミリーのメンバーとして新たな命名されている。すなわち、角層キモトリプシン酵素はカリクレイン７（KLK7、hK7）と命名され（非特許文献６）、トリプシン様酵素はカリクレイン5（KLK5、hK5）と命名された（非特許文献７）。ＫＬＫ５とＫＬＫ７が剥離において極めて重要な機能を有する。
　その一方で、異なる３種類のトリプシノーゲンがヒト膵液に存在する。これらトリプシノーゲンは、その等電位点に基づき、カチオン性トリプシノーゲン、アニオン性トリプシノーゲン、メソトリプシノーゲンと呼ばれている。最近の研究により、これらトリプシノーゲンは、それぞれ異なる遺伝子ＰＲＳＳ１、ＰＲＳＳ２、ＰＲＳＳ３によりコードされる（非特許文献８）。ＰＲＳＳ１遺伝子産物であるトリプシノーゲン１と、ＰＲＳＳ２遺伝子産物であるトリプシノーゲン２は、主要な消化性膵臓プロテアーゼである。ＰＲＳＳ３はメソトリプシノーゲン遺伝子であり、少なくとも２つのスプライシング変異体が生成される（トリプシノーゲン３と４）。これらのトリプシノーゲンはすべて、様々な種に由来する膵臓トリプシノーゲンに存在する非常に高度に保存された、エンテロペプチダーゼによって活性化される推定の切断部位配列ＤＤＤＤＫ－１を有する（LightとJanska、1989年）。トリプシノーゲンは膵臓だけでなく他の組織でも発現しており、その中にはさまざまな組織の上皮細胞とヒトの脳が含まれる。興味深いことに、メソトリプシンは他の２つのトリプシンとは基質特異性と阻害剤感受性が異なっている。メソトリプシンはタンパク質基質を余り切断しない。その最も特徴的な性質は、天然のトリプシンインヒビターであるα１－トリプシンインヒビター、膵臓分泌トリプシンインヒビター（Kazalタイプ）、ダイズトリプシンインヒビター（Kunitzタイプ）などに対する耐性である。これらの知見は、トリプシンの、腸での消化に加えて、さまざまな生理学的反応における関与の可能性を示唆している。
　本発明者は、ヒトケラチノサイトｃＤＮＡライブラリーからトリプシノーゲン遺伝子のｃＤＮＡクローニングを行い、その結果メソトリプシノーゲン遺伝子ＰＲＳＳ３の２つのスプライシングアイソフォームを単離し、その一方はトリプシノーゲン４（脳トリプシノーゲン）と同一であり、そして他方はＮ末端領域をコードするエキソンにおいてのみ相違して、それをトリプシノーゲン５の命名した（非特許文献９）。
　両アイソフォーム共に、活性化配列ＤＤＤＤＫ－１を有す。ＤＤＤＤＫ－１は、切断部位での主に負に帯電した残基の存在を理由に、トリプシン自身ではほとんど切断されない。対照的に、エンテロペプチダーゼはＤＤＤＤＫ－１配列に対して特異性が高い（非特許文献１０）。例えば、牛トリプシノーゲンに対するエンテロペプチダーゼの触媒効率は、牛トリプシンに対するそれの34,000倍である。したがって、エンテロペプチダーゼがトリプシノーゲンをトリプシンに生理学的に変換する唯一の酵素である。エンテロペプチダーゼが表皮の顆粒層にもっぱら存在することも見出された。これらのトリプシノーゲンとその活性化酵素エンテロペプチダーゼの発現及び存在箇所は、メソトリプシンがケラチノサイトの末端分化に関与する見解と一致する。
　末端分化の際、多くの現象がタンパク質分解作用に関連している。最外層の顆粒細胞において、核と全てのオルガネラは消失し、ケラチンの分子量は減少し、そしてプロフィラグリンはフラグリンへとプロセッシングされる。最近の研究では、セリンプロテアーゼインヒビターであるリンホ－エピセリアル－カザール－タイプ５インヒビター（ＬＥＫＴＩ）が角層剥離に重要であることが示されている。ＬＥＫＴＩ遺伝子の突然変異体ＳＰＩＮＫ５がNetherton症候群として知られる重篤な先天性魚鱗癬様紅皮症を有する患者の欠陥遺伝子として同定されている。主要角層剥離プロテアーゼ（ＫＬＫ５，ＫＬＫ７）はＬＥＫＴＩにより強力に阻害される（非特許文献１１）。ＳＰＩＮＫ５欠損マウスは表皮プロテアーゼの過剰亢進を示し、またデスモグレン１の過剰分解を通じてNetherton症候群に似た症状を示す。複数の表皮カリクレインがデスモグレン１の切断を通じて角層剥離に関与していることもあり、それらはＬＥＫＴＩにより調節される。
　角層剥離は、細胞接着の働きを示すデスモゾームにＫＬＫが作用してそれを分解すること生じ、ＬＥＫＴＩがＫＬＫの作用を抑制すると角層剥離も抑えられる。これまで、メソトリプシンはＬＥＫＴＩを分解することでのみ角層剥離を促進するものと考えられていた。
Arch. Dermatol. Res. 282:234-7 (1990) J. Invest. Dermatol. 101:200-4 (1993) Arch. Dermatol. Res. 283:108-12 (1991) J. Biol. Chem. 275:37397-406 (2000) Biol. Chem. 382:5-14 (2001) Gene 254:119-28 (2000) J. Invest. Dermatol. 122:1235-44 (2004) Protein Pept. Lett. 12:457-64 (2005) J. Invest. Dermatology, 130: 944-952 (2010) Trends. Biochem. Sci. 14:110-2 (1989) Biol. Chem. 386:1173-84 (2005)
　本発明の課題は、新たな角層剥離促進剤の提供にある。角層剥離促進剤は文字通り角層剥離を促進することで、肌荒れ改善効果などが発揮される。
　本発明者は、メソトリプシンが、ＬＥＫＴＩを分解するだけでなく、驚くべきことに角層剥離に寄与するＫＬＫ７を直接活性化することを見出した。よって、メソトリプシンの発現を亢進する候補薬剤をスクリーニングした結果、イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインがメソトリプシン発現亢進効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った：
（１）イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインから成る群から選ばれるメソトリプシン発現亢進剤。
（２）（１）のメソトリプシン発現亢進剤を含む角層剥離促進剤。
（３）角層剥離促進を所望する対象者にイチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインから成る群から選ばれる成分を肌に適用することにより角層剥離促進方法。
（４）イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインから成る群から選ばれる成分を肌に適用することで肌荒れの予防及び／又は改善のための美容方法。
（５）イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインから成る群から選ばれる成分の角層剥離促進のための使用。
　本発明によれば、イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインはメソトリプシンを活性化し、それにより角層剥離促進効果が発揮され、その結果角層の剥離を通じて肌荒れ改善などが図られる。
メソトリプシンがＫＬＫ７の前駆体（proKLK7）を活性化する能力を有することを示す。 各種生薬及び薬剤のメソトリプシン発現促進効果を示す。図中、各生薬エキス名の末尾の数値は濃度（μg/ml）を表わす。
角層剥離促進剤
　１つの観点において、本発明はイチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインから成る群から選ばれるメソトリプシン発現亢進剤を含む角層剥離促進剤を提供する。
　イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキスについては皮膚外用剤に使用されているものはあるが、いずれのエキスも角層剥離促進効果を有することは知られていない。尚、イザヨイバラエキスはセラミド合成促進効果（特開２００６－１１１５６０）、コラゲナーゼ阻害効果（特開２００６－２４１１４８）などを有することは公知である。グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインも同様に、皮膚外用剤に使用されているものはあるが、いずれのエキスも角層剥離促進効果を有することは知られていない。
　上記抽出物は常法により得ることができ、例えばその起源となる植物の一部又は全部を抽出溶媒とともに常温で又は加熱して浸漬または加熱還流した後、濾過し、濃縮して得ることができる。溶媒抽出の前に、抽出部位を乾燥させてもよい。抽出溶媒としては、通常抽出に用いられる溶媒であれば任意に用いることができ、例えば、有機溶媒、例えばメタノール、エタノール、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、グリセリン等のアルコール類、含水アルコール類、クロロホルム、ジクロルエタン、四塩化炭素、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン等、あるいは水性溶媒、例えば水、生理食塩水、リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液等を、それぞれ単独で、あるいは組み合わせて用いることができる。好ましくは、溶媒として、水、メタノール、エタノール、１，３－ブチレングリコールから選ばれる１種または２種以上が好適に使用される。
　上記溶媒で抽出して得られた抽出物をそのまま、あるいは例えば凍結乾燥などにより濃縮したエキスを使用でき、また必要であれば吸着法、例えばイオン交換樹脂を用いて不純物を除去したものや、ポーラスポリマー（例えばアンバーライトＸＡＤ－２）のカラムにて吸着させた後、所望の溶媒で溶出し、さらに濃縮したものも使用することができる。
　イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキスの抽出物やグリチルリチン酸ジカリウム、エクトインなどの薬剤は、濃度依存的にメソトリプシン発現亢進作用を示す。従って、このような観点からは、本発明の角層剥離促進剤中のイチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及び／又はエクトインの配合量は、剤全量中、乾燥物として０．０００１～２０．０質量％、好ましくは０．０００１～１０．０質量％である。
　本発明に係る角層剥離促進剤は、常法に従って製造することができ、また同角層剥離促進剤を構成する成分として、上記エキス１種又は２種以上単独でも調製可能であるが、通常医薬部外品を含む化粧品や医薬品等の皮膚外用剤等に用いられる成分、例えば油分、界面活性剤、粉末、色材、水、アルコール類、増粘剤、キレート剤、シリコーン類、酸化防止剤、紫外線吸収剤、保湿剤、香料、各種薬効成分、防腐剤、ｐＨ調整剤、中和剤等必要に応じて適宜配合される。
　本発明の角層剥離促進剤の剤型は特に限定されるものではなく、例えば、溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、水－油二層系、水－油－粉末三層系、軟膏、ゲル、エアゾール等の任意の剤型をとることができる。また、使用形態も特に限定されるものではなく、例えば、化粧水、乳液、クリーム、エッセンス、ゼリー、ジェル、軟膏、パック、マスク、ファンデーション等の任意の形態をとることができる。
　本発明の角層剥離促進剤は肌に適用することで、肌荒れの予防及び／又は改善を図るための美容方法に利用できる。かかる美容方法における本発明の角層剥離促進剤の用法、用量も特に限定されるものではなく、剤型や処置する肌のしわの状態により適宜決定されるが、典型的には、１日当たり数回、例えば１回～５回、適量、例えば１平方ｃｍ2当たり0.1ｍｌから１ｍｌ、肌に直接すり込むか、又その適量をガーゼなどに染み込ませてから肌に貼付することができる。
　次に実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。なお、本発明はこれにより限定されるものではない。
（１）メソトリプシンによるＫＬＫ７の活性化は、簡単には以下の手順で調べた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
 合成基質（chromogenic substrate）
1）S-2444：pyroGlu-Gly-Arg-p-nitroanilide
2）S2586:Arg-Pro-Tyr-p-nitroanilide
用いた酵素の濃度
エンテロペプチダーゼ:2 μg/ml
メソトリプシノーゲン：1 μg/ml
アッセイ法
　まず、上記１のメソトリプシノーゲンの活性化法により、エンテロペプチダーゼでメソトリプシノーゲンの活性化を行う。メソトリプシンの活性の確認には、合成基質Ｓ－２４４４などを用いるが、proKLK7の活性化においては、インキュベーション後、活性化されたメソトリプシンを含む溶液、5 μlをproKLK7とPBSを含む溶液に直接加えて室温で10分放置した後、基質溶液（S-2586）を加え37℃で30分インキュベーションし、遊離したp-ニトロアニリド（pNA）を405 nmで測定した。その結果、メソトリプシンが濃度依存式にＫＬＫ７を活性化することがわかった（図１）。
（２）メソトリプシン発現促進効果を示す生薬のスクリーニング
　正常な包皮に由来するヒトケラチノサイト（Cascade Biologics社、ポートランド、メリーランド州）を、上皮増殖因子（0.1ng/ml）、インスリン（10μg/ml）、ヒドロコルチゾン（0.5μg/ml）、ウシ下垂体抽出物（0.4％）、ゲンタマイシン（50μg/ml）、アンホテリシンB（50ng/ml）を補足したMCDB 153培地からなるケラチノサイト増殖培地の中で、各種生薬エキス（丸善製薬より入手）及び薬剤（4-20 μg/ml）の存在下で24時間室温で培養した。コントロールとしては、0.1% 1，3－ブチレングリコールを用いた。
ＲＴ－ＰＣＲ
　上記のとおりに培養したヒトケラチノサイトから単離した全RNA（500ng）を、ランダム・ヘキサマーとSuperscript II RNアーゼH-逆転写酵素（Gibco-BRL社、ゲサースバーグ、メリーランド州）を用いて逆転写した後、Taq DNAポリメラーゼ（Takara社、京都、日本国）と下記のプライマーを用いてPCR増幅した。94℃で30秒間、60℃で1分間、72℃で1分間という増幅サイクルを40回実行した。
　図２の結果より、コントロールと比較して、イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインが、メソトリプシンの発現を有意に亢進させることが分かる。従って、これらの抽出がいずれもメソトリプシンの発現を促進し、それ故ＫＬＫ７の活性を亢進させ、その結果角層剥離促進効果を示すことが示唆された。
フォワードプライマー: gacaatgacatcatgctgatcaaactctc　（配列番号１）
リバースプライマー： cctcaaggaagcccacacagaac　（配列番号２）

Claims (2)

  1. 　イチョウ葉エキス、ユキノシタエキス、イザヨイバラエキス、グリチルリチン酸ジカリウム及びエクトインから成る群から選ばれる１又は複数種のメソトリプシン発現亢進剤。
  2. 　請求項１記載のメソトリプシン発現亢進剤を含む角層剥離促進剤。
PCT/JP2012/054638 2011-02-25 2012-02-24 角層剥離促進剤 Ceased WO2012115247A1 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2011-039978 2011-02-25
JP2011039978 2011-02-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2012115247A1 true WO2012115247A1 (ja) 2012-08-30

Family

ID=46721019

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2012/054638 Ceased WO2012115247A1 (ja) 2011-02-25 2012-02-24 角層剥離促進剤

Country Status (2)

Country Link
TW (1) TW201309334A (ja)
WO (1) WO2012115247A1 (ja)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015143205A (ja) * 2013-12-27 2015-08-06 共栄化学工業株式会社 皮膚外用剤
JP2016003198A (ja) * 2014-06-16 2016-01-12 株式会社ファンケル カリクレイン７産生促進剤
WO2016063991A1 (ja) * 2014-10-24 2016-04-28 株式会社資生堂 角層剥離の抑制又は亢進に起因する肌状態を改善するための美容方法及び評価方法
JP2016108261A (ja) * 2014-12-04 2016-06-20 共栄化学工業株式会社 皮膚ターンオーバー改善剤
CN105919920A (zh) * 2016-06-23 2016-09-07 姹ゆ尝 一种抗皱抗衰美白祛斑面膜
WO2021018990A1 (en) * 2019-08-01 2021-02-04 Merck Patent Gmbh Prevention and reduction of cornification disorders and related cosmetic agents
JP2021091650A (ja) * 2019-05-23 2021-06-17 ポーラ化成工業株式会社 デスモグレイン減少剤

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000001421A (ja) * 1998-06-15 2000-01-07 Kanebo Ltd 皮膚老化防止化粧料
JP2002522367A (ja) * 1998-08-01 2002-07-23 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング エクトイン誘導体、酵素、ビタミンおよび／またはビタミン誘導体を含む化粧品製剤
JP2002302444A (ja) * 2001-04-02 2002-10-18 Shiseido Co Ltd 乾燥による皮膚傷害の抑制剤もしくは修復剤
JP2007119432A (ja) * 2005-10-31 2007-05-17 Ichimaru Pharcos Co Ltd ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体活性化剤
JP2007277149A (ja) * 2006-04-06 2007-10-25 Kao Corp インボルクリン発現促進剤
JP2008088075A (ja) * 2006-09-29 2008-04-17 Kose Corp プロフィラグリン／フィラグリン産生促進剤、表皮角化細胞増殖促進剤、表皮／角層正常化用皮膚外用剤、プロフィラグリン及び／又はフィラグリン産生促進方法、及び表皮角化細胞増殖促進方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000001421A (ja) * 1998-06-15 2000-01-07 Kanebo Ltd 皮膚老化防止化粧料
JP2002522367A (ja) * 1998-08-01 2002-07-23 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング エクトイン誘導体、酵素、ビタミンおよび／またはビタミン誘導体を含む化粧品製剤
JP2002302444A (ja) * 2001-04-02 2002-10-18 Shiseido Co Ltd 乾燥による皮膚傷害の抑制剤もしくは修復剤
JP2007119432A (ja) * 2005-10-31 2007-05-17 Ichimaru Pharcos Co Ltd ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体活性化剤
JP2007277149A (ja) * 2006-04-06 2007-10-25 Kao Corp インボルクリン発現促進剤
JP2008088075A (ja) * 2006-09-29 2008-04-17 Kose Corp プロフィラグリン／フィラグリン産生促進剤、表皮角化細胞増殖促進剤、表皮／角層正常化用皮膚外用剤、プロフィラグリン及び／又はフィラグリン産生促進方法、及び表皮角化細胞増殖促進方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOTARO NAKANISHI ET AL.: "Keratinocytes Synthesize Enteropeptidase and Multiple Forms of Trypsinogen during Terminal Differentiation", JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY, vol. 130, 19 November 2009 (2009-11-19), pages 944 - 952 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015143205A (ja) * 2013-12-27 2015-08-06 共栄化学工業株式会社 皮膚外用剤
JP2016003198A (ja) * 2014-06-16 2016-01-12 株式会社ファンケル カリクレイン７産生促進剤
WO2016063991A1 (ja) * 2014-10-24 2016-04-28 株式会社資生堂 角層剥離の抑制又は亢進に起因する肌状態を改善するための美容方法及び評価方法
JPWO2016063991A1 (ja) * 2014-10-24 2017-08-31 株式会社 資生堂 角層剥離の抑制又は亢進に起因する肌状態を改善するための美容方法及び評価方法
JP2016108261A (ja) * 2014-12-04 2016-06-20 共栄化学工業株式会社 皮膚ターンオーバー改善剤
CN105919920A (zh) * 2016-06-23 2016-09-07 姹ゆ尝 一种抗皱抗衰美白祛斑面膜
JP2021091650A (ja) * 2019-05-23 2021-06-17 ポーラ化成工業株式会社 デスモグレイン減少剤
WO2021018990A1 (en) * 2019-08-01 2021-02-04 Merck Patent Gmbh Prevention and reduction of cornification disorders and related cosmetic agents
CN114206300A (zh) * 2019-08-01 2022-03-18 默克专利股份有限公司 预防和减少角质化障碍及相关美容剂

Also Published As

Publication number Publication date
TW201309334A (zh) 2013-03-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11793864B2 (en) Use of serine protease inhibitors in the treatment of skin diseases
Lim et al. Flavonoids: broad spectrum agents on chronic inflammation
TW201309334A (zh) 角質層剝離促進劑
KR100844914B1 (ko) 탄력섬유형성의 불완전, 결여 혹은 해체로 인한 질병을제어하는 라이실 옥시다제의 동종효소의 활성 촉진
Kishibe et al. Kallikrein 8 is involved in skin desquamation in cooperation with other kallikreins
Hwang et al. Enzyme-modified Panax ginseng inhibits UVB-induced skin aging through the regulation of procollagen type I and MMP-1 expression
Di Paolo et al. The role of kallikreins in inflammatory skin disorders and their potential as therapeutic targets
CN107648341A (zh) 用于治疗和预防感染的植物提取物
AU2015296412A1 (en) Applications of surfactin in cosmetic products and thereof
Zani et al. Human tissue kallikreins-related peptidases are targets for the treatment of skin desquamation diseases
JP2021532064A (ja) デンドロビウム・ノビルを含有する組成物およびその使用方法
KR20230047688A (ko) 탈모 방지 또는 발모 촉진 활성을 갖는 펩타이드와 이의 용도
Li et al. Shikonin inhibits inflammatory responses in rabbit chondrocytes and shows chondroprotection in osteoarthritic rabbit knee
Chen et al. Roles of kallikrein-related peptidase in epidermal barrier function and related skin diseases
KR101151093B1 (ko) 항염 및 피부 재생 효과를 갖는 화장료 조성물
JP4583501B2 (ja) マイタケ抽出物及びこれを含むヒアルロン酸（ヒアルロナン）産生を促進するための組成物
JP4585342B2 (ja) 不全角化を抑制する物質のスクリーニング方法、同方法によりスクリーニングされた物質及び不全角化を抑制する方法
JP6738280B2 (ja) 角層剥離の抑制又は亢進に起因する肌状態を改善するための美容方法及び評価方法
WO2019131406A1 (ja) トロンビンの抑制作用を指標とした皮膚状態改善剤のスクリーニング方法、及びトロンビン作用阻害剤を含む皮膚状態改善剤
KR102675065B1 (ko) 코나루스 세미데칸드러스 잎 추출물을 함유하는 아토피 피부염 개선용 화장료 조성물
JP6970952B2 (ja) カリクレイン関連ペプチターゼ産生促進剤、ｌｅｋｔｉ産生促進剤、ｓｌｐｉ産生促進剤、角化正常化剤、コルネオデスモソーム分解正常化剤
KR20150108088A (ko) 능실 추출물을 유효성분으로 함유하는 스트레스 자극에 의한 피부노화 억제 또는 개선용 조성물
WO2012124738A1 (ja) ブレオマイシン水解酵素産生促進剤
JP2016135766A (ja) カリクレイン関連ペプチターゼ産生促進剤、ｌｅｋｔｉ産生促進剤、ｓｌｐｉ産生促進剤、角化正常化剤、コルネオデスモソーム分解正常化剤
CN119679655B (zh) 含棕榈酰三肽-5的组合物、护肤品和用途

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 12749399

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 12749399

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP