WO2013107428A1

WO2013107428A1 - 7-位取代的汉防己乙素衍生物、及其制备方法和应用

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Publication number: WO2013107428A1
Application number: PCT/CN2013/070800
Authority: WO
Inventors: 荣风光; 徐荣臻; 赖洪喜; 谢福文
Original assignee: Hangzhou Bensheng Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Hangzhou Bensheng Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2012-01-21
Filing date: 2013-01-21
Publication date: 2013-07-25
Anticipated expiration: 2014-07-21
Also published as: EP2805954A1; US20140357647A1; EP2805954A4; JP2015504075A; US9328122B2; EP2805954B1; JP6298768B2; DK2805954T3

Description

7-位取代的汉防己乙素衍生物、及其制备方法和应用技术领域

本发明属于天然药物及药物化学领域，并涉及新型汉防己乙素衍生物，特别是 7-位取代的汉防己乙素衍生物，及制备这些化合物的方法、包含该化合物的组合物及其在制备抗肿瘤药物中的用途。背景技术

汉防己乙素 (Fangchinoline, FAN), 别名防己诺林碱，是从中药材粉防己根中提取而来的双苄基异喹啉生物碱。天然存在于防己科植物粉防己 (Stephania tetrandra S. Moore)的才艮，盾^ 轮环藤 (Cyclea peltata Diels)的根及唐松草人字果的根和根茎中。汉防己乙素是一种天然的钙拮抗剂，对多种疾病有显著的治疗效果，如具有广谱消炎抗菌作用，抗高血压、糖尿病、肝纤维化，对脑细胞具有保护作用。近年来的研究发现它还有明显的抗肿瘤作用，如对 W-256，艾氏腹水癌， S-45均有显著的抑制作用，对 KB细胞和 Hela细胞也有抑制作用，对人体移植性肝癌 7402和 7405细胞株呈较强的抑制作用。

有研究报道了汉防己乙素对人类结肠癌细胞系 LoVo的抑制作用。实验对荷瘤棵鼠连续给药 60天，结果显示，用药组与对照组相比，肿瘤明显缩小，生长减慢，微血管密度明显低于对照组。且用药期间，小鼠未出现不良反应。说明汉防己乙素具有体内抑制肿瘤的作用，而且副作用很小。（王振军等，防己诺林碱在抑制血管生成药物中的应用 [P]. CN 1511528A. 2004. )

Changdong Wang等人研究了汉防己乙素对人前列腺癌细胞 PC3的抑制作用。研究结果显示，汉防己乙素对 PC3细胞的抑制作用呈剂量和时间依赖性。对细胞周期进程研究表明，汉防己乙素对 PC3细胞的抑制作用与 G1/S期细胞的增加有关。此外，汉防己乙素具有体内抗肿瘤的活性，缩小肿瘤体积和促进凋亡，以及对棵鼠移植瘤 PC3的抑制作用。 ( Changdong Wang, et al. Fangchinoline induced Gl/S arrest by modulating expression of p27, PCNA, and cyclin D in human prostate carcinoma cancer PC 3 cells and tumor xenograft [J]. Biosci. Biotechnol. Biochem. 2010, 74(3):488-493. )

增加 G-四链体的稳定性，从而减弱细胞的增殖能力，促进细胞凋亡。体外抗癌细胞增殖实验结果表明， G-四链体 DNA与汉防己乙素结合后，对于人白血病细胞系 HL-60，人胃癌细胞系 BGC-823，人肝癌细胞系 Bel-7402以及人鼻咽癌细胞系 KB均有比较好的抑制效果。（唐亚林等，双苄基异喹啉类生物碱的新用途 [P]. CN 101371839A. 2009. )

目前，汉防己乙素的结构修饰及活性报道甚少，近年来有王锋鹏等人对汉防己乙素进行了结构修饰研究，但尚未见有相关的药效活性数据报道（王锋鹏等，双苄基异喹啉类生物碱及其制备方法和药物组合物 [P]. CN 1293196A. 2001. ) 。

本发明对汉防己乙素 7-位羟基进行结构修饰和抗肿瘤活性的测定，发现部分新化合物的抗肿瘤活性有明显的提高。发明内容

本发明的目的之一是提供特别是通式 (I)的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，

其中， W为 -OCHR -、 -OS0₂-、 -OC(O)-;

Z选自氢、任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 c₂-c 烯基、任选由取代基取代的 c₃-c₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基、 R₂R₃NCH₂CH(OH) -、或者 Z与以及它们连接的碳原子一起形成任选由取代基取代的 C₃-C₇ 环烷基；

为氢或与 Z以及它们连接的碳原子一起形成任选由取代基取代的 c₃-c₇环烷基；

R₂和 R₃独立地为氢，任选地由羟基、 C C₆烷基氧基、鹵素、 C₃-C₇环烷基或环烯基、芳基或杂芳基取代的 d-C₆烷基， C₂-C₆烯基，或者 R₂ 和 R₃以及它们所连接的氮原子一起形成 3-7元含氮杂环；所述含氮杂环任选地含有选自氧、硫和氮的另外的杂原子，且任选地被取代基取代；其中，所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 CrC₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、 c₃-c₇环烷基或环烯基、杂环基和含氮杂环基而言所述取代基还选自 C C₆烷基、羟基 C C₆烷基和 d-C₆ 鹵代烷基；

其中，当 W为 -OCH₂-时， Z不为乙基、正丙基或异丙基；当 W为 -OC(O)- 时， Z不为乙基或丙基。本发明的目的之二是提供制备本发明通式（I ) 7-位取代的汉防己乙素衍

FAN 1-1

式（ 1-1 )的 7-位取代汉防己乙素衍生物由汉防己乙素（FAN )与相应的烷基或芳香族磺酰氯（ SO l )在有碱的存在下，于室温下反应生成，其中 I 选自氢、任选由取代基取代的 C C₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆烯基、任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基，所述取代基如权利要求 1所定义;

FAN 1-2

式（1-2 )的 7-位取代汉防己乙素衍生物由汉防己乙素（FAN)先与强碱反应，再与相应的卤代烃 ₂，X)在有碱的存在下，于室温或加热条件下反应生成，其中 R₂，为 -CHR^ R^ Z如权利要求 1中所定义，但 Z不为 R₂R₃NCH₂CH(OH)-;

FAN 1-3

式（ 1-3)的 7-位取代汉防己乙素衍生物由汉防己乙素（FAN)与相应的有机酸（R₃，C0₂H)在有缩合剂和碱的存在下，于室温下反应生成，其中 R₃，为任选由取代基取代的 C_rC₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆ 烯基、任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基，所述取代基如权利要求 1所定义；

式（ 1-4 )的 7-位取代汉防己乙素衍生物可由两步反应制取：先由汉防己乙素与叔丁醇钾和氯甲基环氧丙烷反应生成中间体，再由此中间体与相应的有机胺反应即得产物，其中 R₄'和 R₅'如权利要求 1中对 R₂和 R₃ 的定义。

本发明的目的之三是提供包含本发明化合物的药物组合物，所述药物组合物包括至少一种本发明化合物，和任选的药学上可以接受的赋形剂。

本发明的目的之四是提供本发明化合物或包含该化合物的药物组合物在制备药物、特别是抗肿瘤药物中的用途。相应地，本发明提供一种治疗肿瘤患者的方法，包括给予需要治疗的患者治疗有效量的至少一种本发明的化合物。所述肿瘤特别选自白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、肝癌、胃癌、乳腺癌、胆管细胞癌、胰腺癌、肺癌、大肠癌、骨肉瘤、黑色素瘤、人宫颈癌、神经胶质瘤、鼻咽癌、喉癌、食管癌、中耳肿瘤、前列腺癌等。

本发明还涉及用于治疗肿瘤的本发明的化合物。附图简要说明

图 1是 BS-FC-308对棵鼠体重影响的动态曲线；

图 2是 BS-FC-308对棵鼠 Hep G2移植瘤体积影响的动态曲线；图 3显示 BS-FC-308对棵鼠 Hep G2移植瘤大小的影响；

图 4显示 BS-FC-308对棵鼠 Hep G2移植瘤重量的影响；

图 5显示 BS-FC-308对棵鼠 HepG2移植瘤的抑制作用；

图 6是 BS-FC-308对棵鼠体重影响的动态曲线；

图 7是 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤体积影响的动态曲线；图 8显示 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤大小的影响；

图 9显示 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤重量的影响；

图 10显示 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤的抑制作用。具体实施方式

本发明涉及一类具有抗肿瘤活性的新型汉防己乙素衍生物，特别是通式 (I)的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，

其中， W为 -OCHR -、 -OS0₂-、 -OC(O)-;

Z选自氢、任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 c₂-c₆ 烯基、任选由取代基取代的 c₃-c₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基、 R₂R₃NCH₂CH(OH) -、或者 Z与以及它们连接的碳原子一起形成任选由取代基取代的 C₃-C₇ 环烷基；

其中，当 W为 -OCH₂-时， Z不为乙基、正丙基或异丙基；当 W为 -OC(O)- 时， Z不为乙基或丙基。当 W为 -OS0₂-时，本发明式（ I )化合物相当于式（ 1-1 )

其中 Z= ，选自氢、任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆烯基、任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基，所述取代基如上述式 (I)中所定义。

当 W为 W为 -OCHR -， ^和 Z如上述式（ I ) 中所定义，但 Z不为 R₂R₃NCH₂CH(OH)-时，本发明的式（I )化合物为式（1-2 ) ，

其中 R₂，为- CHR^

当 W为 -OC(O)-时，本发明式（I )化合物相当于式（1-3 ) ，

其中 R₃'=Z，为任选由取代基取代的 C_rC₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆烯基、任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基，所述取代基如上述式（I ) 中所定义

当 W为- 0CH₂- , Z为 R₂R₃NCH₂CH(OH)-时，本发明式（ I )化合物为式（ 1-4 ) ，

其中 R₄，和 R₅，如上述式 ( I ) 中对 M口 R₃的定义。才艮据第一种实施方案，本发明涉及式（I )的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 W为- OS0₂-; Z选自氢、任选由取代基取代的 C C₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆烯基、任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基；其中所述取代基选自鹵素、氨基、 Ci-C₆ 烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、氰基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆ i¾代烷氧基、巯基、 d-C₆烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、 C₃-C₇ 环烷基或环烯基、杂环基而言所述取代基还选自 d-C₆烷基、羟基 d-C₆ 烷基和 (^-( ₆ |¾代烷基。

上述实施方案中，优选其中 Z选自任选由取代基取代的 C C₆烷基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基；其中所述取代基选自鹵素、氨基、 C 烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、氰基、羟基、 d-C₆烷氧基、 C 鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆烷硫基；对于所述芳基、杂芳基而言所述取代基还选自 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆鹵代烷基。

上述实施方案中，更优选其中 Z选自任选由取代基取代的 C C₆烷基、任选由取代基取代的苯基；其中所述取代基选自鹵素、 C C₆烷氧基和 CrC₆ l¾代烷氧基；所述苯基还可以被选自 C C₆烷基、羟基 C C₆ 烷基和 d-C₆鹵代烷基的取代基取代。

上述实施方案中，最优选其中 Z为任选由 C C₆烷基取代的苯基。在第二种实施方案中，本发明涉及式（I ) 的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 W为- OCH₂-; Z选自任选由取代基取代的 C C₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆烯基、任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基、 R₂R₃NCH₂CH(OH)-; R₂和 R₃独立地为氢，任选地由羟基、 d-C₆烷基氧基、鹵素、 C₃-C₇环烷基或环烯基、芳基或杂芳基取代的 d-C₆烷基， C₂-C₆烯基，或者 R₂和 R₃以及它们所连接的氮原子一起形成 3-7元含氮杂环；所述含氮杂环任选地含有选自氧、硫和氮的另外的杂原子，且任选地被取代基取代；

其中，所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 CrC₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、 C₃-C₇环烷基或环烯基、杂环基和含氮杂环基而言所述取代基还选自 C C₆烷基、羟基 C C₆烷基和 d-C₆ 鹵代烷基。

上述实施方案中，优选其中 Z选自任选由取代基取代的芳基或杂芳基；所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、氰基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 CrC₆ 烷硫基、 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆鹵代烷基。

上述实施方案中，更优选其中 Z选自任选由！ ¾素、 C C₆烷基、 Ci-C₆ 鹵代烷基、 C C₆烷氧基、羟基 C C₆烷基和 C C₆ |¾代烷氧基的取代基取代的苯基。

在第二种实施方案中，优选其中 Z为 R₂R₃NCH₂CH(OH)-; R₂和 R₃独立地为氢，任选地由羟基、 d-C₆烷基氧基、 |¾素、 C₃-C₇环烷基或环烯基、芳基或杂芳基取代的 C C₆烷基， C₂-C₆烯基，或者 R₂和 R₃以及它们所连接的氮原子一起形成 3-7元含氮杂环；所述含氮杂环任选地含有选自氧、硫和氮的另外的杂原子，且任选地被取代基取代；其中，所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 CrC₆ 烷硫基、 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆鹵代烷基。

在上述优选实施方案中，优选其中所述含氮杂环为哌啶子基、哌嗪基、吗啉基、噻嗪基、吡咯烷基、噁唑烷基或噻唑烷基，任选地所述基团由选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 d-C₆烷氧基、 Ci-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆烷硫基、 C 烷基、羟基 C C₆烷基和 CrC₆ l¾代烷基的基团取代；更优选其中所述含氮杂环为任选由 C C₆烷基取代的哌啶子基、 C C₆烷基取代的噻嗪基、任选 N-氰基取代的哌嗪基。

在上述优选实施方案中，优选其中所述 R₂和 R₃独立地为氢、甲基、乙基、羟乙基、环丙基甲基、烯丙基、甲氧基丙基、呋喃甲基。

在上述第二实施方案中，优选其中 Z为 C₂-C₆烯基或 C₃-C₇环烷基或环烯基，更优选 Z为乙烯基、 1-甲基乙烯基或环丙基。

在第三种实施方案中，本发明涉及式（I ) 的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 W为- OCHR -， 2与以及它们连接的碳原子一起形成任选由取代基取代的 c₃-c₇环烷基，其中所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆烷硫基、 C 烷基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆鹵代烷基。优选，所述 Z与以及它们连接的碳原子一起形成环戊基或环己基。

在第四种实施方案中，本发明涉及式（I )的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中， w为 -oc(o)-;

Z选自任选由取代基取代的 c c₆烷基、任选由取代基取代的 c₂-c₆烯基、任选由取代基取代的 c₃-c₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基；

其中所述取代基选自鹵素、氨基、 C C₆烷基氨基、二（C C₆烷基) 氨基、硝基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 CrC₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、 C₃-C₇环烷基或环烯基和杂环基而言所述取代基还选自 C C₆烷基、羟基 C C₆烷基和 C C₆鹵代烷基

在上述第四种实施方案中，优选其中 Z为苯基、吡啶基、哒嗪基，各自任选地被选自甲基、乙基、异丙基、氨基、甲基氨基、二甲氨基、二乙基氨基、甲氧基、三氟甲氧基、鹵素的取代基所取代。

本发明的部分 7-位取代的汉防己乙素衍生物如下所示。经测定发现，它们具有优于或至少与汉防己乙素相当的抗肿瘤活性。这些实施例举只对本发明做进一步说明，并不对本发明的范围构成任何限制。

BS-FC-102 BS-FC-104 BS-FC-105

BS-FC-201 BS-FC-202 BS-FC-203

///〇20z>I>d 8220Λν

上面所列化合物的部分数据如下表所示:

反应收率化合物编号分子式分子量外观状态

( % ) 粉末状

BS-FC-102 C44H46N2O8S 762.91 亮黄色 57 固体

粉末状

BS-FC-104 C43H44N2O8S 748.88 亮黄色 54 固体

粉末状

BS-FC-105 C38H39F3N2O8S 740.79 白色 60 固体

粉末状

BS-FC-201 C₄₄H₄₅FN₂0₆ 716.84 亮黄色 45 固体

粉末状

BS-FC-202 C₄₃H₄₅N₃0₆ 699.83 亮黄色 21 固体

粉末状

BS-FC-203 C45H45F3N2O7 782.84 白色 19 固体 /:/: O 0080/-020si>l£AV

、soi-aj-S3 、£0i-aj-sa ^i -o^-se ^u -o^-se ^o -o^-se ^o -o^-se izz-Di-S 、o^-aj-S3 、9idsa 、ndsa、 -aj-sa、 n 、w^-aj-sa、w)i-aj-sa ^oi-o^-se：^？^^^丄 ^^钟 ^^

0080.0/CT0ZN3/X3d 8Z L0l/£l0Z OAV BS-FC-409、 BS-FC-410、 BS-FC-417、 BS-FC-42U 发现它们至少对于一种

本发明最优选以下化合物，它们具有优良的、全面超越汉防己乙素的抗肿瘤活性。

BS-FC-403 BS-FC-405

-(1 -哌啶基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素 7-(1 -环丙甲胺基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素

BS-FC-409 BS-FC-410

-(1 -Ν-烯丙基甲胺基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素 7-(1 -(3-甲基)哌啶基 -²-羟基-丙氧基) -汉防己乙素

BS-FC-421

7-(1 -N-氰基哌嗪基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素本发明涉及以下形式的本发明的式 (I)化合物：它们的盐、溶剂化、水合物、加成物、复合物、多晶型物或前药。

如本文所使用，术语"烷基"是指含有指定碳原子数的直链或支链的烷基。所述烷基可以包含 1-6个、 1-5个、 1-4个或 1-3个碳原子。烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、正戊基和正己基。

术语"烯基"是指含有指定碳原子数的直链或支链的烯基。所述烯基可以包含 2-6个、 2-5个、 2-4个或 2-3个碳原子。烯基的例子包括但不限于乙烯基、烯丙基、丁烯基、异丁烯基。

术语"炔基"是指含有指定碳原子数的直链或支链的炔基。所述炔基可以包含 2-6个、 2-5个、 2-4个或 2-3个碳原子。炔基的例子包括但不限于乙炔基和丙炔基。

术语" C₃-C₇环烷基或环烯基"是指具有饱和或不饱和环的 3-7 元单环系统的烃基。 C₃-C₇环烷基或环烯基可以为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环丙烯基和环己烯基。

术语"芳基"是指含有 6- 14个（例如 6- 12个、 6-20个）碳原子的单碳环芳香基或稠合或非稠合的多碳环芳香基，在多碳环的情况下，只要一个碳环是芳香的即可。芳基也包括与杂环基稠合的芳基。所述芳基的例子有苯基、联苯基、萘基、 5,6,7,8-四氢萘基、 2.3-二氢苯并呋喃基等。

术语"杂芳基 "是指在环中含有 1 -4个杂原子（例如 1、 2、 3或 4 个杂原子）作为环成员的芳香环基团。杂原子是指氮、氧或硫。杂芳基可以是具有 5-7个环原子的单环杂芳基，或者具有 7-11个环原子的双环杂芳基。所述双环芳基中只要一个环是芳香杂环即可，另一个可以是芳香的或非芳香的、含杂原子的或不含杂原子的。杂芳基的例子有例如吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、吲哚基等。

术语"杂环基 "是指含有 1-4个杂原子（例如 1、 2、 3或 4个杂原子）作为环成员的非芳香环基团。杂原子是指氮、氧或硫。杂环基可以是具有 4-8个环原子的单环杂环基（例如 4-7元环、 5-7元环、 5-6 元环），或者具有 7- 1 1个环原子的双环杂环基。杂环基可以是芳香或非芳香的。杂环基的例子有氮杂环丁基、吡咯烷基、吡咯啉基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢吡喃基、四氢噻喻基等。

术语 "含氮杂环基" 指至少一个环原子为氮原子的如上所定义的杂环基。

术语" |¾素 "是指氟、氯、溴或碘。

术语"烷基氨基"是指被一个或两个如上所定义的烷基取代的氨基。

术语"烷氧基 "包括烷基 -0-基团，其中所述烷基如上所定义。

术语"烷硫基 "烷基 -S-基团，其中所述烷基如上所定义。

术语"式 (I)化合物的药学上可以接受的加合物和复合物"是指本发明的化合物进一步与其他小分子或生物大分子以非化学键或者非共价分子间力结合的产物。

如本文所使用，术语"式 (I)化合物的药学上可以接受的盐"的例子是由形成药学上可以接受的阴离子的有机酸形成的有机酸盐；这些有机酸盐包括但不限于甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苹果酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、 α-酮戊二酸盐和 (X-甘油磷酸盐；也可形成合适的无机盐；这些无机酸盐包括但不限于盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐等。

药学上可以接受的盐可使用本领域熟知的标准程序获得。例如，通过将足量的碱性化合物和提供药学上可以接受的阴离子的合适的^ 应生成。

如本文所使用，术语"多晶型物 "是指本发明的化合物或其复合物的固体晶体形式。相同化合物的不同的多晶型物可以显示不同的物理、化学和 /或光谱性质。不同的物理性质包括但不限于稳定性（例如，对热或光）、可压缩性和密度（对于配制制剂和产品生产是重要的）和溶解速率（其可以影响生物吸收度和利用度）。稳定性的不同会造成化学反应性（例如差异氧化，使得当由一种多晶型物构成时比由另一多晶型物构成时剂型更快地褪色）或机械性能（例如，储存时作为动力学有利的多晶型物的片剂碎末转化成热力学更加稳定的多晶型物）或两者（例如，一种多晶型物的片剂在高潮湿度时更加容易破碎）中的变化。多晶型物的不同的物理性质可以影响它们的加工。例如，一种多晶型物可能比另一种更可能形成溶剂化物或可能比另一种更加难以过滤或洗去杂质，这是由于例如其颗粒的形状或大小分布不同的缘故。

如本文所使用，术语"水合物 "是指本发明的化合物或其盐，其进一步包含通过非共价分子间力结合的化学计量的或非化学计量的水。

如本文所使用，除非另外说明，术语"前药"是指可以在生物学条件（体外或体内）下水解、氧化或进行其他反应以提供本发明的化合物的衍生物。前药仅在生物学条件下经过该反应成为活性化合物，或者它们在它们不反应的形式中具有活性。通常可以使用公知的方法制备前药，例如 1 Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery (1995) 172-178, 949-982 (Manfred E. Wolff editor, 5^th Ed)和 J. Rautio's Prodrugs and Targeted Delivery (201 1) 31-60 (Wiley-VCH, Methods and Principles in Medicinal Chemistry, Vol. 47) 和 G. Thomas's Fundamentals of Medicinal Chemistry (2003) 195-200(Wiley)中描述的那些方法。

本发明化合物中 7-位取代的汉防己乙素衍生物的两个手性中心具有式（I ) 结构式所显示的立体化学结构。本文使用的立体化学的定义和约定一般遵循 MCGRAW-HILL DICTIONARY OF CHEMICAL TERMS (S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Book Company, New York, 1984); ELIEL, E. 和 WILEN, S.， STEREOCHEMISTRY OF ORGANIC COMPOUNDS (John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994)„ 许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有旋转平面偏光的平面的能力。

本文所述 "抗肿瘤活性" 是指对肿瘤细胞或组织的直接抑制或杀伤作用。本申请实施例部分测定了本发明化合物的抗肿瘤活性。

本文使用的术语"治疗"一般是指获得需要的药理和 /或生理效应。该效应 #居完全或部分地预防疾病或其症状，可以是预防性的；和 / 或根据部分或完全稳定或治愈疾病和 /或由于疾病严生的副作用，可以是治疗性的。本文使用的"治疗"涵盖了对患者疾病的任何治疗，包括：

( a)预防易感染疾病或症状但还没诊断出患病的患者所发生的疾病或症状；（b)抑制疾病的症状，即阻止其发展；或（c)緩解疾病的症状，即，导致疾病或症状退化。发明的式 (I) 7-位取代的汉防己乙素衍生物的制备方法如下：

式（ I： 1-1 ) 的 7-位取代汉防己乙素衍生物可由汉防己乙素（FAN ) 与相应的烷基或芳香族磺酰氯（ SO l )在有碱的存在下，于室温下反应生成。

上述反应使用的碱可以是有机碱或无机碱。例如：三乙胺，二异丙基乙胺，氢氧化钠等。有机磺酰氯可以是商购的反应原料，也可使用有机磺酸自己制备。

上述反应一般在溶剂中进行。反应的溶剂包括但不限于二氯甲烷，乙氰， Ν,Ν-二甲基甲酰胺，四氢呋喃等。

FC 式（ I : 1-2 ) 的 7-位取代汉防己乙素衍生物可由汉防己乙素（FAN ) 先与强碱反应，再与相应的鹵代烃（R₂，X )在有碱的存在下反应生成。

上述反应使用的碱包括但不限于有机碱。例如：叔丁醇 4甲，乙醇钠，乙醇钾。氯代烃可以是商购的反应原料。

上述反应的温度取决于氯代烃的反应活性，可以是室温或加热条件，如 30 - 80。C.

上述反应一般在溶剂中进行。反应的溶剂包括但不限于二甲亚砜，乙氰， Ν,Ν-二甲基甲酰胺，四氢呋喃。

FC -3 式（ I： 1-3 ) 的 7-位取代汉防己乙素衍生物可由汉防己乙素（FAN ) 再与相应的有机酸（R₃，C0₂H )在有缩合剂和碱的存在下，于室温下反应生成。

上述反应使用的碱包括但不限于有机碱。例如：三乙胺，二异丙基乙基胺，二甲基胺基吡啶。有机酸可以是商购的反应原料。有机酰氯也可用于此反应。

上述反应的温度取决于有机酸的反应活性，可以是室温或加热条件，如 30-60。C.

上述反应一般在有缩合剂存在下进行。这里缩合剂可以是但不限于有机缩合剂。例如：二异丙基碳二亚胺，二环己基碳二亚胺等。

酯化反应一般在溶剂中进行，也可在无溶剂存在下进行。使用的溶剂包括但不限于有机极性溶剂。例如：二氯甲烷（DCM ) ，四氢呋喃 ( THF ) ， N， N-二甲基甲醜胺 ( DMF ) 二甲亚砜（DMSO )等。

式（ I： 1-4 ) 的 7-位取代汉防己乙素衍生物可由两步反应制取:

( 1 )将汉防己乙素与叔丁醇钾在低温下反应，而后将氯甲基环氧丙烷在水浴温度下滴加，反应 30 分钟至 2小时。经萃取分离得到取代的的中间体。

( 2 )此中间体与相应的有机胺反应即得产物。胺化反应的温度取决于有机胺的反应活性。一般需要加热，如 80 - 120 °C.

胺化反应一般在极性溶剂中进行。使用的溶剂包括但不限于乙醇，四氢呋喃（THF )， Ν,Ν-二甲基甲酰胺（DMF )，二甲亚砜（DMSO ) 等。

式 (1: 1- 1, 1-2, 1-3, 1-4)中 , R₂, R₃和与上文在通式 (I)中的定义相同.

上述反应的原料：有机酸、有机胺、有机磺酰氯、有机酰氯全部可以在市场上购买获得。汉防己乙素原料由天然产物提取分离得到，也可从市场购买获得。

常规的化学转换可用于实施本发明。本领域的技术人员可以决定用于这些化学转换的适当的化学试剂、溶剂、保护基和反应条件。相关信息描述于 R. Larock, Comprehensive Organic Transformations , VCH Publishers ( 1989); T. W. Greene and P.G.M. Wuts , Protective Groups in Organic Synthesis , 3rd Ed , John Wiley and Sons( 1999); L. Fieser and M. Fieser , Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis， John Wiley and Sons( 1994)； L. A. Paquette editor, Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis， John Wiley and Sons( 1995)及其后来的版本。保护基指那些一旦连接活性部分 (例如，羟基或氨基)，防止这些基保护基的例子包括但不限于，烷基、苯甲基、烯丙基、三苯甲基 (即，三苯基甲基）、酰基 (例如，苯甲酰基、乙酰基或 HOOC-X"-CO-， X" 为亚烷基、亚链烯基、亚环烷基或亚芳基)、甲硅烷基 (例如，三甲基硅烷基、三乙基硅烷基和叔丁基二甲基硅烷基)、烷氧基羰基、氨基羰基 (例如，二甲基氨基羰基、甲基乙氨基羰基和苯基氨基羰基)、烷氧甲基、苯甲氧甲基和烷基巯甲基。氨基保护基的例子包括但不限于，烷氧基羰基、烷酰基、芳氧基羰基、芳基取代的烷基等。羟基和氨基保护基已在 T.W. Greene and P.G..M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd Edition, John Wiley and Sons(1991)中讨论。 ¾ 基和氨基保护基都可在反应后通过常规的方法去除。本发明还提供了包含本发明式 I化合物的药物组合物。

本发明提供了这样的药物组合物，其中包含至少一种如上所述的本发明的式 I化合物，和任选的药学上可以接受的赋形剂。

制备各种含有一定量的活性成分的药物组合物的方法是已知的，

REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, Martin, E.W., ed" Mack Publishing Company, 19th ed. (1995)所述。制备所述药物组合物的方法包括掺入适当的药学赋形剂、载体、稀释剂等。

以已知的方法制造本发明的药物制剂，包括常规的混合、溶解或冻干方法。

本发明的化合物可以制成药物组合物，并向患者以适于选定的施用方式的各种途径施用，例如口服或肠胃外（通过静脉内、肌内、局部或皮下途径）。

因此，本发明的化合物结合药学上可以接受的载体（如惰性稀释剂或可食用的载体）可以全身施用，例如，口服。它们可以封闭在硬或软壳的明胶胶嚢中，可以压为片剂。对于口服治疗施用，活性化合物可以结合一种或多种赋形剂，并以可吞咽的片剂、颊含片剂、含片、胶嚢剂、酏剂、悬浮剂、糖浆、圆片等的形式使用。这种组合物和制剂应该包含至少 0.1%的活性化合物。这种组合物和制剂的比例当然可以变化，可以占给定的单位剂型重量的大约 1%至大约 99%。在这种治疗有用的组合物中，活性化合物的量使得能够获得有效剂量水平。

片剂、含片、丸剂、胶嚢剂等也可以包含：粘合剂，如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；赋形剂，如磷酸氢二钙；崩解剂，如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸等；润滑剂，如硬脂酸镁；和甜味剂，如蔗糖、果糖、乳糖或阿司帕坦；或调味剂，如薄荷、冬青油或樱桃香味。当单位剂型是胶嚢时，除了上面类型的材料，它还可以包含液体载体，如植物油或聚乙二醇。各种其他材料可以存在，作为包衣，或以其他方式改变固体单位剂型的物理形式。例如，片剂、丸剂或胶嚢剂可以用明胶、蜡、虫胶或糖等包衣。糖浆或酏剂可以包含活性化合物，蔗糖或果糖作为甜味剂，对羟苯甲酸甲酯或对羟苯甲酸丙酯作为防腐剂，染料和调味剂（如樱桃香料或桔子香料）。当然，用于制备任何单位剂型的任何材料应该是药学上可以接受的且以应用的量基本上无毒。此外，活性化合物可以掺入緩释制剂和緩释装置中。

活性化合物也可以通过输注或注射到静脉内或腹膜内施用。可以制备活性化合物或其盐的水溶液，任选可混的无毒的表面活性剂。也可以制备在甘油、液体聚乙二醇、甘油三乙酸酯及其混合物以及油中的分散剂。在普通的储存和使用条件下，这些制剂包含防腐剂以防止微生物生长。

适于注射或输注的药物剂型可以包括包含适于无菌的可注射或可输注的溶液或分散剂的即时制剂的活性成分（任选封装在脂质体中）的无菌水溶液或分散剂或无菌粉末。在所有情况下，最终的剂型在生产和储存条件下必须是无菌的、液体的和稳定的。液体载体可以是溶剂或液体分散介质，包括，例如水、乙醇、多元醇（例如，甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等）、植物油、无毒的甘油酯及其合适的混合物。可以维持合适的流动性，例如，通过脂质体的形成，通过在分散剂的情况下维持所需的粒子大小，或通过表面活性剂的使用。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂（如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等）产生预防微生物的作用。在许多情况下，优选包括等渗剂，如糖、緩冲剂或氯化钠。通过使用延緩吸收剂的组合物（例如，单硬脂酸铝和明胶）可以产生可注射的组合物的延长吸收。

通过将合适的溶剂中的需要量的活性化合物与需要的上面列举的各种其他成分结合，然后进行过滤灭菌，制备无菌可注射溶液。在用于制备无菌注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冷冻干燥技术，这会产生活性成分加上任何另外需要的以前无菌过滤溶液中存在的成分的粉末。

有用的固体载体包括 4分碎的固体（如滑石、粘土、 ^敖晶纤维素、二氧化硅、氧化铝等）。有用的液体载体包括水、乙醇或乙二醇或水 -乙醇

I乙二醇混合物，本发明的化合物可以任选在无毒的表面活性剂的帮助下以有效含量溶解或分散在其中。可以加入佐剂（如香味）和另外的抗微生物剂来优化对于给定用途的性质。

增稠剂（如合成的聚合物、脂肪酸、脂肪酸盐和酯、脂肪醇、改性纤维素或改性无机材料）也可和液体载体用于形成可涂覆的糊剂、凝胶、软膏、肥皂等，直接用于使用者的皮肤上。

化合物或其活性盐或衍生物的治疗需要量，不仅取决于选择的特定的盐，而且取决于施药方式、待治疗的疾病的本质和患者的年龄和状态，最终取决于在场医师或临床医生的决定。

上述制剂可以以单位剂型存在，该单位剂型是含有单位剂量的物理分散单元，适于向人体和其它哺乳动物体给药。单位剂型可以是胶嚢或片剂，或是很多胶嚢或片剂。根据所涉及的具体治疗，活性成分的单位剂量的量可以在大约 0.1到大约 1000亳克或更多之间进行变化或调整。

本发明还提供本发明的化合物或包含该化合物的组合物在制备药物、特别是抗肿瘤药物中的用途。相应地，本发明提供一种治疗肿瘤患者的方法，包括给予需要治疗的患者治疗有效量的至少一种本发明的化合物。本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，例如可用于治疗白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、肝癌、胃癌、乳腺癌、胆管细胞癌、胰腺癌、肺癌、大肠癌、骨肉瘤、黑色素瘤、人宫颈癌、神经胶质瘤、鼻咽癌、喉癌、食管癌、中耳肿瘤、前列腺癌等肿瘤。

在下列实施例中，将更加具体地解释本发明。但应理解，下列实施例旨在说明本发明而不对本发明的范围构成任何限制。的合成方法获得。实施例 1: 化合物 (BS-FC-102)的合成

Fangchinoline BS-FC-102

式中， DIPEA: N,N-二异丙基乙胺

向二氯甲烷（2 mL )中加入汉防己乙素（ 120 mg， 0.2 mmol ) ，对甲苯磺酰氯（56 mg， 0.29 mmol ) , 随后加入 Ν,Ν-二异丙基乙胺（ 51 mg， 0.39 mmol ) ，反应液加热升温至 40 °C，搅拌反应 2小时，反应结束后，反应液经饱和食盐水洗，分离得到的有机相用无水硫酸钠干燥，旋干，得到的粗产物经制备薄层色谱（二氯甲烷:甲醇 =8: 1 )分离纯化后得到亮黄色粉末状化合物 BS-FC-102 ( 73 mg, 收率 49% ) 。

LC-MS: 保留时间： 1.11 min (95.24%); m/z 763 [M+H]⁺, 382 [1/2M+H]⁺. ^lH NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 1.23(s, 3H, CH₃), 2.41(s, 3H, N-CH₃), 2.90(s, 3H, N-CH₃), 3.15(s, 3H, OCH₃), 3.41(s, 3H, OCH₃), 3.92(s, 3H, 12-OCH₃), 5.84(s, IH, 8'-H), 6.17(s, IH, 5-H), 6.28(d, IH, J=9Hz, l l'-H), 6.43(s, IH, H-苯环)， 6.59(s, IH, H-苯环), 6.88(m, 3H, H-苯不)， 7.1 l-7.17(m, 3H, H-苯不)， 7.41-7.50(m, 3H, H-苯不). 按照 BS-FC-102的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与苯磺酰氯反应，制备了 BS-FC-104:

LC-MS: 保留时间： 0.99 min (100%); m/z 749.0 [M+H]⁺, 374.9 [1/2M+H]⁺ 按照 BS-FC-102的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与三氟甲基磺酰氯反应，制备了 BS-FC-105:

LC-MS: 保留时间： 1.03 min (90.45%); m/z 741.0 [M+H]⁺, 371.1 [1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.73(s, 3H, N-CH₃ ), 3.01(s, 3H, N'-CH₃), 3.53(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.83(s, 3H, 6-OCH3), 3.96(s, 3H, I2-OCH3), 6.05(s, IH, 8'-H), 6.42(m, 2H, H-苯环)， 6.55(s, IH, H-苯环)， 6.71(s, IH, H-苯环)， 6.96(m, 2H, 2H-苯环)， 7.52(m, IH, 14'-H). 实

Fangchinoline BS-FC-206

中， t-BuOK: 叔丁基醇钾.

向二甲基亚砜 ( 2 mL ) 中加入汉防己乙素（80 mg， 0.13 mmol ) ，随后在 0°C条件下加入叔丁基醇甲（22.5 mg， 0.1971 mmol )，升至室温后搅拌 0.5小时。将溶有 3-氟 -4-氯氯苄 ( 26.5 mg， 0.12 mmol ) 的二甲基亚砜逐滴加入反应液中，反应液加热升温至 40°C，搅拌反应 2小时。反应结束后，向反应液中加水 (20 mL)，用二氯甲烷 (5 mL x 3)萃取，合并有机相，经饱和食盐水洗，旋干后得到的粗产物经制备薄层色谱（二氯甲烷：甲醇 =10: 1 ) 分离纯化后得到亮黄色粉末状化合物 BS-FC-206 ( 23.6 mg, 收率 24% ) 。

LC-MS: 保留时间： 1.10 min (99.12%); m/z 751 [M+H]⁺, 376 [1/2M+H]⁺. ¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.55(s, 3H, N-CH₃), 3.48(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.76(s, 3H, 6-OCH₃), 3.94(s, 3H, 12-OCH₃), 5.81(s, IH, 8'-H), 6.60(s, IH, H-苯环)， 6.74 (m, IH, H-苯环). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与对氟氯苄反应，制备了 BS-FC-201 :

LC-MS: 保留时间： 1.13 min (85.98%); m/z 717.0 [M+H]⁺, 359.0

[1/2M+H]⁺. ^lll NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.53(s, 3H, N-CH₃), 2.59(s, 3H, N-CH₃), 3.41(s, 3H, 6'-OCH₃),3.61(s, 3H, 6-OCH₃), 3.92(s, 3H, 12-OCHs), 5.77(s, IH, 8'-H), 6.36(s, IH, H-苯环)， 6.46(s, IH, H- 苯环)， 6.53(s, IH, H-苯环)， 6.78-6.89(m, 5H, H-苯环)， 7.1 l-7.36(m, 3H, H- 苯环). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 3-溴甲基吡啶反应，制备了 BS-FC-202:

LC-MS: 保留时间： 0.79 min (92.16%); m/z 700.1 [M+H]⁺, 350.5

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与对三氟甲氧基溴苄反应，制备了 BS-FC-203:

LC-MS: 保留时间： 1.21 min (94.06%); m/z 782.9 [M+H]⁺, 392.0

[1/2M+H]⁺. H NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.43(s, 3H, N-CH₃), 2.52(s, 3H, N-CH₃), 3.49(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.75(s, 3H, 6-OCH3), 3.94(s, 3H, I2-OCH3), 4.34(d, 1H, J=8.1 Hz), 4.70(d, 1H, J=8.1 Hz),5.89(s, 1H, 8'-H), 6.3 l(d, 1H, J=8.4, l l '-H), 6.40(s, 1H, H-苯环)， 6.47(s, 1H, H-苯环)， 6.60(s, 1H, H-苯环)， 6.86(d, 2H, /=8.7 Hz, H-苯环)， 6.93(m, 3H, H-苯环)， 7.06(d, 1H, / = 8.4 Hz, 13'-H),7.13(d, 1H, / = 8.1 Hz, 13'-H), 7.42(d, 1H, / =8.1 Hz, 14'-H). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 2,3-二氟溴苄反应，制备了 BS-FC-204:

LC-MS: 保留时间： 1.11 min (99.35%); m/z 735.0 [M+H]⁺, 368.0

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.36(s, 3H, N-CH₃), 2.55(s, 3H, N-CH₃), 3.37(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.74(s, 3H, 6-OCH3), 3.92(s, 3H, I2-OCH3), 4.46(d, 1H, J=8.1 Hz), 4.65(d, 1H, J=8.1 Hz), 5.75(s, 1H, 8'-H), 6.27(d, 1H, J=8.4, l l '-H), 6.35(s, 1H, H-苯环)， 6.46(s, 1H, H-苯环)， 6.51(s, 1H, H-苯环)， 6.86(m, 2H, H-苯环)， 6.95-7.13(m, 4H, H-苯环), 7.15(dd, 1H, /=2.1,8.1 Hz, 13'-H), 7.36(dd, 1H, / =2.1,8.1 Hz, 14'-H). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与

3-氯 -4-氟溴苄反应，制备了 BS-FC-205:

LC-MS: 保留时间： 1.09 min (96.28%); m/z 751.2 [M+H]⁺, 376.2

[1/2M+H]⁺. ^lR NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.4 l(s, 3H, N-CH₃ ), 2.61(s, 3H, N'-CH₃), 3.41(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.75(s, 3H, 6-OCH3), 3.94(s, 3H, I2-OCH3), 5.79(s, 1H, 8'-H), 6.32(m, 1H, l l'-H), 6.36(s, 1H, 5-H), 6.49(s, 1H, H-苯环)， 6.54(s, 1H, H-苯环)， 6.82-6.99(m, 3H, H-苯环), 7.11(m, 2H, H-苯不)， 7.34(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与溴甲基环丙烷反应，制备了 BS-FC-208:

LC-MS: 保留时间： 1.06 min (95.93%); m/z 663.0 [M+H]⁺, 332.0

[1/2M+H]⁺. ¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.7 l(s, 3H, N'-CHs), 3.41(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.75(s, 3H, 6-OCH₃), 3.94(s, 3H, 12-OCH₃), 5.79(s, 1H, 8'-H). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与溴丙烯反应，制备了 BS-FC-213:

LC-MS: 保留时间： 1.04 min (97.48%); m/z 649.1 [M+H]⁺, 324.9

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.39(s, 3H_; N-CH₃ ), 2.62(s, 3H, N'-CH₃), 3.39(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.75(s, 3H, 6-OCH₃)_; 3.93(s, 3H, 12-OCHs), 5.97(s, 1H, 8'-H), 6.30(m, 2H, H-苯环)， 6.53(m, 2H_; H-苯环)， 6.87(m, 3H, H-苯环)， 7.15(m, 1H, 13'-H), 7.38(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与对甲氧基溴苄反应，制备了 BS-FC-215:

LC-MS: 保留时间： 1.03 min (89.37%); m/z 729.2 [M+H]⁺, 365.1

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.56(s, 3H_; N-CH₃ ), 3.38(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.75(s, 6H, OCH₃), 3.93(s, 3H, 12-OCH₃)_; 5.79(s, 1H, 8'-H), 6.39(m, 1H, H-苯环)， 6.51(m, 2H, H-苯环)， 6.79(m, 1H_; H-苯环)， 6.91(m, H-苯环). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与对三氟甲氧基溴苄反应，制备了 BS-FC-216: LC-MS: 保留时间： 1.08 min (94.44%); m/z 767.1 [M+H]⁺, 384.0

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 6-氯 -2-氟溴苄反应，制备了 BS-FC-217:

LC-MS: 保留时间： 1.06 min (95.06%); m/z 751.2 [M+H]⁺, 376.2

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.46(s, 3H, N-CH₃ ), 2.76(s, 3H, N'-CH₃), 3.34(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.79(s, 3H, 6-OCH₃), 3.93(s, 3H, 12-OCHs), 6.26(m, IH, l l'-H), 6.34(s, IH, 5-H), 6.44(s, IH, H- 苯环)， 6.50(s, IH, H-苯环)， 6.74(m, IH, IO'-Η), 6.80(m, 2H, H-苯环), 7.16(m, 3H, H-苯环)， 7.40(m, 2H, H-苯环). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与碘代环戊烷反应，制备了 BS-FC-220:

LC-MS: 保留时间： 1.00 min (99.74%); m/z 677.1 [M+H]⁺, 339.0

[1/2M+H]⁺. ^lR NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.42(s, 3H, N-CH₃), 2.72(s, 3H, N'-CHs), 3.37(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.74(s, 3H, 6-OCH3), 3.93(s, 3H, 12-OCHs), 5.89(s, IH, 8'-H), 6.35(m, 2H, H-苯环)， 6.51(s, IH, H-苯环)， 6.53(s, IH, H-苯环)， 6.83(m, IH, H-苯环)， 6.89(d, IH, J=8.1 Hz, H-苯环)， 7.16(dd, IH, / = 2.1, 8.1 Hz, 13'-H), 7.42(dd, IH, / = 2.1, 8.1 Hz, 14'-H). 按照 BS-FC-206的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与

3-溴 -2-甲基丙烯反应，制备了 BS-FC-221 :

LC-MS: 保留时间： 1.00 min (99.72%); m/z 663.2 [M+H]⁺, 332.0

[1/2M+H]⁺. 实施例 3: 化合物 (BS-FC-304)的合成

Fangchinoline BS-FC-304

式中， DIC: N,N，-二异丙基碳二亚胺； DMAP: 4-二甲氨基吡啶

向二氯甲烷 ( 2 mL ) 中加入汉防己乙素（80 mg， 0.13 mmol ) ，环丙甲酸（17 mg， 0.2 mmol ) , 随后加入 Ν,Ν'-二异丙基碳二亚胺（ 34 mg， 0.26 mmol ) ， 4-二甲氨基吡啶（ 16 mg， 0.26 mmol ) ， N， N-二异丙基乙胺（34 mg， 0.26 mmol )。反应液加热升温至 4(TC，搅拌反应 2小时。反应结束后，向反应液中加入二氯甲烷 (20 mL)，饱和食盐水洗。分离得到的有机相经无水硫酸钠干燥，旋干，得到的粗产物经制备薄层色谱分离纯化后得到灰白色粉末状化合物 BS-FC-304 ( 54.7 mg, 收率 52% ) 。 LC-MS: 保留时间： 0.80 min (100.0%); m/z 677 [M+H]⁺, 338 [1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.52(s, 3H, N-CH₃), 2.77(s, 3H, N-CH₃), 3.45(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.85(s, 3H, 6-OCH3), 3.93(s, 3H, I2-OCH3), 5.99(s, IH, 8'-H), 6.29(m, IH, l l'-H), 6.40(s, IH, H- 苯环)， 6.48(s, IH, H-苯环)， 6.56(s, IH, H-苯环)， 6.87(m, IH, H-苯环), 6.90(d, IH, J=8.1Hz, H-苯环)， 6.95-7.13(m, 4H, H-苯环)， 7.13(d, IH, J=8.7 Hz, 13'-H), 7.36(d, 1H, J =8.7 Hz, 14'-H). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与

3-吡啶甲酸反应，制备了 BS-FC-301 :

LC-MS: 保留时间： 0.92 min (96.55%); m/z 714.2 [M+H]⁺, 357.6

[1/2M+H]⁺. H NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 3.73(s, 3H, 6-OCH3), 3.95(s, 3H, I2-OCH3), 6.45(s, 2H, H-苯环)， 6.90-7.12(m, 3H, H- 苯环)， 7.35(m, 1H, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与

4-吡啶甲酸反应，制备了 BS-FC-302:

LC-MS: 保留时间 :0.96 min (98.29%); m/z 714.0 [M+H]⁺, 357.5

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.03(s, 3H, N-CH₃), 2.53(s, 3H, N'-CH₃), 3.48(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.71(s, 3H, 6-OCH3), 3.93(s, 3H, I2-OCH3), 6.46(s, 2H, H-苯环)， 6.79(m, 1H, H-苯环)， 6.90(m, 1H, H-苯环)， 7.09-7.29(m, 2H, H-苯环)， 8.69(m, 2H, ). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 N-甲基 -D-丙氨酸反应，制备了 BS-FC-305:

LC-MS: 保留时间： 0.75 min (99.65%); m/z 694.2 [M+H]⁺, 347.5

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 Ν,Ν-二甲基甘氨酸反应，制备了 BS-FC-307:

LC-MS: 保留时间： 0.92 min (95.29.00%); m/z 694.0 [M+H]⁺. 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 Ν,Ν-二甲氨基苯甲酸反应，制备了 BS-FC-308:

LC-MS: 保留时间： 1.13 min (91.31%); m/z 756.0 [M+H]⁺, 378.5

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与对三氟甲氧基苯甲^ 应，制备了 BS-FC-309: LC-MS: 保留时间： 1.15 min (91.13%); m/z 797.2 [M+H]⁺, 399.2

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.07(s, 3H, N-CH₃ ), 2.39(m, 3H, N-CH₃), 3.54(s, 3H, 6'-OCH₃),3.72(s, 3H, 6-OCH₃), 3.95(s, 3H, 12-OCHs), 6.42(s, 2H, H-苯环)， 6.87(m, 2H, H-苯环)， 7.10(m, IH, H-苯环)， 7.17(m, IH, H-苯环)， 7.20(m, IH, H-苯环)， 7.66(m, IH, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 3,5-二氟苯甲酉应，制备了 BS-FC-310:

LC-MS: 保留时间： 1.1 1 min (98.02%); m/z 748.9 [M+H]⁺, 374.9 [1/2M+H]⁺. ^lR NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.12(s, 3H, N-CH₃), 2.23(s, 3H, N-CH₃), 3.67(s, 3H, 6-OCH3), 3.90(s, 3H, 12-OCH₃), 6.37(s, IH, H-苯环)， 6.86(m, 3H, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 3,5-二甲氧基苯甲应，制备了 BS-FC-31 1 :

LC-MS: 保留时间： 1.1 1 min (99.22%); m/z 773.0 [M+H]⁺, 387.0

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 4-哒嗪羧酸反应，制备了 BS-FC-313 :

LC-MS: 保留时间： 0.89 min (95.53%); m/z 715.1 [M+H]⁺, 358.1

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与四氢吡喃 -4-羧酸反应，制备了 BS-FC-314: LC-MS: 保留时间： 0.89 min (97.72%); m/z 721.1 [M+H]⁺, 361.0

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 6-氯 -2-氟苯甲酸反应，制备了 BS-FC-315:

LC-MS: 保留时间： 1.04 min (99.51%); m/z 765.2 [M+H]⁺, 383.2

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.38(s, 3H, N-CH₃), 3.47(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.69(s, 3H, 6-OCH₃), 3.94(s, 3H, 12-OCH₃), 6.03(s, IH, 8'-H), 6.50(m, 3H, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与氨基甲酸反应，制备了 BS-FC-318:

LC-MS: 保留时间： 0.73 min (95.42%); m/z 666.1 [M+H]⁺, 333.5

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与戊二酸酐反应，制备了 BS-FC-324:

LC-MS: 保留时间： 0.97 min (98.81%); m/z 723.0 [M+H]⁺, 362.0

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.84(s, 3H, N'-CH₃), 3.50(s, 3H, 6'-OCH₃),3.73(s, 3H, 6-OCH₃), 3.95(s, 3H, 12-OCH₃), 6.00(s, IH, 8'-H), 6.30(m, 2H, H-苯环)， 6.36(m, IH, H-苯环)， 6.40(m, IH, H-苯环)， 6.56(m, IH, H-苯环)， 6.90(s, 2H, H-苯环)， 7.25-7.37(m, 3H, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与苯甲酸反应，制备了 BS-FC-501 : ·+[Η+ ΐ] O'ZLi '+[Η+ ] O'Z L z/m '(%00ΐ) υ υ Z£'Z -[BI^^ S -Ο

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0080.0/CT0ZN3/X3d 8Z L0l/£l0Z OAV 丄 H NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.05 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 3.27-2.38 (m, 15H), 3.48 (s, IH), 3.63 (s, IH), 3.69 (s, 3H), 3.87-3.72 (m, 3H), 3.92 (s, 3H), 7.23-5.72 (m, 10H, H-苯环)， 8.12-7.31 (m, 4H, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与 4- (二乙氨基)苯甲酸反应，制备了 BS-FC-505:

LC-MS: 保留时间： 2.66 min (92.21%); m/z 784.1 [M+H]⁺, 392.6

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 1.18 (t, / = 7.0 Hz, 6H), 7.60 (dddd, 4H), 1.39-1.27 (m, 4H), 1.67 (dd, IH), 2.36 (s, 3H), 2.65 (dd, 5H), 2.98 (dd, 2H), 3.45 (dd, 6H), 3.67 (s, 3H), 3.90 (d, / = 16.6 Hz_: 3H), 4.31-4.11 (m, IH), 7.25-5.53 (m, 10H, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与对异丙基苯甲酸反应，制备了 BS-FC-506:

LC-MS: 保留时间： 2.72 min (99.20%); m/z 755.0 [M+H]⁺, 378.0

[1/2M+H]⁺.

^ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 1.26-1.17 (m_: 9H), 2.02-1.52 (m, 4H), 3.08-2.40 (m, 13H), 3.48 (s, IH), 3.63 (s, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 4.34-4.09 (m, IH), 7.24 - 5.38 (m, 11H, H-苯环), 8.25-7.29 (m, 3H, H-苯环). 按照 BS-FC-304的方法，使用上述同样的试剂，将汉防己乙素与对氨基苯甲酸反应，制备了 BS-FC-507:

LC-MS: 保留时间： 2.16 min (100%); m/z 728.0 [M+H]⁺, 364.0 [1/2M+H]⁺. ¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 1.42-1.26 (m_: 9H), 1.79-1.59 (m, 2H), 2.80- 2.48 (m, 4H), 3.04 (s, 3H), 3.56 (d, 3H), 3.77-3.67 (m, 3H), 3.95 (d, 3H), 4.25-4.18 (m, 3H), 6.60-5.69 (m, 4H， H-苯环)， 6.83 (dd, 2H, H-苯环)， 7.13 (s, IH, H-苯环)， 7.34 (d, / = 8.1 Hz, IH, H- 苯环) , 7.65-7.42 (m, 3H, H-苯环)， 7.70 (dd, J = 5.7, 3.3 Hz, IH, H-苯环), 8.23-8.02 (m, IH, H-苯环). 实施例 4: 化合物 (BS-FC-400)的合成

Fangchinoline BS-FC-400

向二甲基亚砜（5 mL ) 中加入汉防己乙素（l g， 1.64 mmol ) ，随后在 0°C条件下，加入叔丁基醇钾（ 560 mg， 4.91 mmol ) ，混合液室温下搅拌 0.5小时后，逐滴加入溶有环氯乙烷（ 180 mg， 1.97 mmol ) 的二甲基亚砜（2 mL )，反应液加热升温至 40°C：，搅拌 3小时。反应结束后，在（TC条件下，向反应液中加入水（50mL ) ，用二氯甲烷（ 10 mL*4 ) 萃取，合并有机相，经饱和食盐水洗，干燥，旋干后得到的产物 BS-FC-400 不经纯化直接用于下一步反应。

LC-MS: 保留时间： 0.88 min (92.01%); m/z 665.0 [M+H]⁺, 333.1

[1/2M+H]⁺.

ln NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.38(s, 3H, N-CH₃ ), 2.70(s, 3H, N'-CH₃), 3.38(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.70(s, 3H, 6-OCH₃), 3.90(s, 3H, 12-OCHs), 6.00(m, IH, 8'-H), 6.24(m, 2H, H-苯环)， 6.46(m, 2H, H-苯环)， 6.86-7.00(m, 3H, H-苯环)， 7.11(m, IH, 13'-H), 7.36(m, 1H,14'-H) 实施例 5: 化合物 (BS-FC-418)的合成

BS-FC-400 BS-FC-418

向乙醇（ 2 mL ) 中加入上一步得到的化合物 BS-FC-400 ( 100 mg, 0.15 mmol ) , 随后加入 N-甲基 -哌嗪（ 30 mg， 0.3 mmol ) , 密闭条件下，反应液加热升温至 120°C：，反应 3小时。反应结束后，将反应液浓缩得到的粗产物经制备薄层色谱分离纯化（二氯甲烷:甲醇 =8: 1 )后得到白色粉末状化合物 BS-FC-418 ( 30 mg, 收率 26% ) 。

LC-MS: 保留时间： 0.7 min (96%); m/z 764.9 [M+H]+. 383.2 [1/2M+H]⁺.

^[H NM (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.34 - 2.15 (m, 10H), 2.59 - 2.40 (m, 10H), 2.65 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.80― 2.70 (m, 3H), 2.96― 2.83 (m, 4H), 3.36― 3.22 (m, 6H), 3.45― 3.37 (m, 2H), 3.58― 3.45 (m, 3H), 3.73 (t, / = 3.2 Hz, 5H), 3.91 (s, 5H), 5.98 (d, J = 2.2 Hz, IH), 6.32 - 6.27 (m, 2H), 6.52 - 6.47 (m, 2H), 6.88 - 6.77 (m, 3H), 7.13 (dd, = 8.2, 2.4 Hz, IH), 7.34 (dt, = 8.1 , 2.5 Hz, IH). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 4-二甲氨基哌啶反应，制备了 BS-FC-401 :

LC-MS: 保留时间： 0.71 min (95.72%); m/z 793.1 [M+H]⁺, 397.4

[1/2M+H]⁺. ^lll NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.30(s, 3H, N-CH₃ ), 2.38(s, 6H, N-(CH₃)₂ )2.64(s, 3H, N'-C¾), 3.35(s, 3H, 6'-OC¾), 3.74(s, 3H, 6-OCH₃), 3.92(s, 3H, 12-OCH₃), 5.98(s, IH, 8'-H), 6.30(m, 2H, H-苯环)， 6.52(m, 2H, H-苯环)， 6.84-6.86 (m, 3H, H-苯环)， 7.14(m, IH, 13'-H), 7.34(m, 1H,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 3-羟基哌啶反应，制备了 BS-FC-402:

LC-MS: 保留时间： 0.74 min (93.36%); m/z 766.1 [M+H]⁺, 383.8

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.29(s, 3H, N-CH₃ ), 3.33(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.70(s, 3H,6-OCH₃), 3.89(s, 3H, 12-OCH₃), 6.03(m, 1H, 8'-H), 6.27(m, 2H, 5,1 Γ-Η), 6.46(m, 1H, H-苯环)， 6.52 (m, 1H, H圍苯环)， 6.80(m, 3H, H-苯环)， 7.12(m, 1H, 13'-H), 7.34(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与哌啶反应，制备了 BS-FC-403:

LC-MS: 保留时间： 0.75 min (88.00%); m/z 750.0 [M+H]⁺, 375.7

[1/2M+H]⁺. ¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.30(s,3H, N-CH₃ ), 2.62(s, 3H, N'-CH₃), 3.34(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.71(s, 3H, 6-OCH₃), 3.92(s, 3H, 12-OCHs), 5.97(s, 1H, 8'-H), 6.25(m, 2H, H-苯环)， 6 48(m, 2H, H-苯环)， 6.77(m, 3H, H-苯环)， 7.09(m, 1H, 13'-H), 7.33(m, 1H,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-异丙基哌嗪反应，制备了 BS-FC-404:

LC-MS: 保留时间： 0.73 min (95.62%); m/z 793.1 [M+H]⁺, 397.4

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 1.16(m, 6H, CH₃ ), 2.29(s, 3H, N-CH₃), 2.67(s, 3H, N'-CH₃), 3.39(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.70(s, 3H, 6-OCH3), 389(s, 3H, 12-OCH₃), 5.98(m, 1H, 8'-H), 6.24(m, 2H, H-苯环)， 6.48(m, 2H, H-苯环)， 6.86(m, 3H, H-苯环) ,7.1 l(m, 1H, 13'-H), 7.33(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与环丙甲胺反应，制备了 BS-FC-405:

LC-MS: 保留时间： 0.78 min (96.5%); m/z 736.1 [M+H]⁺, 368.8

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.32(s, 3H, N-CH₃ ), 2.91(m, 3H, N'-CH₃), 3.38(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.68(s, 3H, 6-OCH₃), 3.90(s, 3H, 12-OCHs), 6.08(d, IH, 8'-H), 6.29(m, 2H, H-苯环)， 6.50(s, 2H, H-苯环)， 6.76(m, IH, IO'-Η), 6.83(m, 2H, H-苯环)， 7.14(m, IH, 13'-H), 7.34(m, 1H,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-乙基甲基胺反应，制备了 BS-FC-406:

LC-MS: 保留时间： 0.72 min (86.27%); m/z 723.9 [M+H]⁺, 362.7

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-甲基乙醇胺反应，制备了 BS-FC-407:

LC-MS: 保留时间： 0.73 min (93.23%); m/z 740.1 [M+H]⁺, 370.8

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.28(s, 3H, N-CH₃ ), 2.38(s, 3H, N-CH₃ ), 2.68(m, 3H, N-CH₃), 3.35(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.73(s, 3H, 6-OCH3), 3.91(s, 3H, 12-OCH₃), 6.02(m, IH, 8'-H), 6.28(m, 2H, H-苯环)， 6.45(m, IH, 10-H), 6.52(s, IH, 5'-H), 6.84(m, 3H, H-苯环)， 7.13(m_: IH, 13'-H), 7.34(m, IH, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-甲基高哌嗪反应，制备了 BS-FC-408:

LC-MS: 保留时间： 0.69 min (94.45%); m/z 779.0 [M+H]⁺, 390.2 [1/2Μ+ΗΓ.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.31(s, 3H, N-CH₃ ), 2.39(s, 3H, N-CH₃ ), 2.53(m, 3H, N-CH₃), 3.34(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.72(s, 3H, 6-OCH3), 3.89(s, 3H, 12-OCH₃), 6.0 l(d, 1H, J=8.1 Hz, 8'-H), 6.29(m, 2H, H-苯环)， 6.49(m, 2H, H-苯环)， 6.76-6.83 (m, 3H, H-苯环), 7.13(m, 1H, 13'-H), 7.34(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-烯丙基甲胺反应，制备了 BS-FC-409:

LC-MS: 保留时间： 0.76 min (91.38%); m/z 736.1 [M+H]⁺, 368.8

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.33(s, 6H, N-CH₃ ), 2.60(m, 3H, N-CH₃), 3.35(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.73(s, 3H, 6-OCH3), 3.91(s, 3H, I2-OCH3), 6.02(s, 1H, 8'-H), 6.30(m, 2H, H-苯环)， 6.50(m, 2H, H-苯环)， 6.79-6.88 (m, 1H, H-苯环)， 7.13(m, 1H, 13'-H), 7.34(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 3-甲基哌啶反应，制备了 BS-FC-410:

LC-MS: 保留时间： 0.80 min (100.00%); m/z 764.1 [M+H]⁺, 382.9

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.28(s, 6H, N-CH₃ ), 2.6 l(m, 3H, N-CH₃), 3.25(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.64(s, 3H,6-OCH₃), 3.90(s, 3H, I2-OCH3), 5.99(s, 1H, 8'-H), 6.27(m, 2H, H-苯环)， 6.50(m, 2H, H-苯环）， 6.75-6.83 (m, 3H, H-苯环）， 7.12(m, 1H, 13'-H), 7.3 l(m, 1H,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与三氟乙胺反应，制备了 BS-FC-413: LC-MS: 保留时间： 0.70 min (81.20%); m/z 763.8 [M+H]⁺, 382.7

[1/2M+H]⁺. 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与乙醇胺反应，制备了 BS-FC-414:

LC-MS: 保留时间： 0.71 min (80.58%); m/z 725.9 [M+H]⁺, 363.7

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.32(s, 3H, N-CH₃ ), 2.69(m, 3H, N-CH₃), 3.35(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.72(s, 3H, 6-OCH₃), 3.91(s, 3H, 12-OCHs), 6.02(d, 1H, J=8.7Hz, 8'-H), 6.28(m, 2H, H-苯环), 6.48(s, 1H, H-苯环)， 6.52(d, 1H, J=1.8 Hz, H-苯环)， 6.85(m, 3H, H-苯环), 7.11(m, 1H, 13'-H), 7.36(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与吗啉反应，制备了 BS-FC-416:

LC-MS: 保留时间： 0.75 min (90.99%); m/z 752.1 [M+H]⁺, 376.8

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.32(s, 3H, N-CH₃ ), 2.63(m, 3H, N'-CH₃), 3.36(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.66(s, 3H,6-OCH₃), 3.93(s, 3H, 12-OCHs), 5.98(m, 1H, 8'-H), 6.33(m, 2H, H-苯环)， 6.5 l(m, 2H, H圍苯环)， 6.85(m, 3H, H-苯环)， 7.13(m, 1H, 13'-H), 7.35(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与硫代吗啉反应，制备了 BS-FC-417:

LC-MS: 保留时间： 0.78 min (100%); m/z 768.0 [M+H]⁺, 384.8 [1/2M+H]⁺. ¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.31(s, 3H, N-CH₃ ), 2.64(m, 3H, N'-CH₃), 3.31(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.73(s, 3H, 6-OCH3), 3.91(s, 3H, 12-OCHs), 5.98(s, 1H, 8'-H), 6.28(m, 2H, H-苯环)， 6.50(m, 2H, H圍苯环)， 6.83(m, 3H, H-苯环)， 7.1 l(m, 1H, 13'-H), 7.35(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 4-羟基哌啶反应，制备了 BS-FC-419:

LC-MS: 保留时间： 0.71 min (88.32%); m/z 765.9 [M+H]⁺, 383.7

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.27(s, 3H, N-CH₃ ), 2.62(m, 3H, N'-CH₃), 3.33(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.71(s, 3H, 6-OCH₃), 3.90(s, 3H, 12-OCHs), 5.97(s, 1H, 8'-H), 6.28(m, 2H, H-苯环)， 6.50(m, 2H, H-苯环)， 6.83(m, 3H, H-苯环)， 7.09(m, 1H, 13'-H), 7.34(m, 1H, 14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-乙基哌嗪反应，制备了 BS-FC-420:

LC-MS: 保留时间： 0.72 min (94.99%); m/z 779.1 [M+H]⁺, 390.3

[1/2M+H]⁺. ¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.29(s, 3H, N-CH₃ ), 2.50(m, 3H, N'-CH₃), 3.35(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.73(s, 3H, 6-OCH3), 3.91(s, 3H, 12-OCHs), 5.97(m, 1H, 8'-H), 6.29(m, 2H, H-苯环)， 6.50(m, 2H, H-苯环)， 6.84(m, 1H, IO'-Η), 6.84(m, 2H, H-苯环)， 7.14(m, 1H, 13'-H), 7.3 l(m, 1H,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-氰基哌嗪反应，制备了 BS-FC-421 :

LC-MS: 保留时间： 0.77 min (92.20%); m/z 775.1 [M+H]⁺, 388.3

[1/2M+H]⁺. ^lll NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.31(s, 3H, N-CH₃ ), 2.66(m, 3H, N'-CH₃), 3.34(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.71(s, 3H, 6-OCH3), 3.89(s, 3H, 12-OCHs), 5.96(s, 1H, 8'-H), 6.29(s, 2H, H-苯环)， 6.50(m, 2H, H-苯环)， 6.90(m, 3H, H-苯环)， 7.09(m, 1H, 13'-H), 7.32(m, 1H,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 N-羟乙基哌嗪反应，制备了 BS-FC-422:

LC-MS: 保留时间： 0.67 min (92.80%); m/z 794.9 [M+H]⁺, 398.2

[1/2M+H]⁺.

¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.28(s, 3H, N-CH₃ ), 2.66(m, 3H, N'-CH₃), 3.34(s, 3H, 6'-OCH₃), 3.71(s, 3H,6-OCH₃), 3.89(s, 3H, 12-OCHs), 5.96(s, IH, 8'-H), 6.28(s, 2H, H-苯环)， 6.48(m, 2H, H-苯环) ,6.82(m, 3H, H-苯环)， 7.09(m, IH, 13'-H), 7.32(m, 1H,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与 3-甲氧基丙胺反应，制备了 BS-FC-424:

LC-MS: 保留时间： 0.74 min (85.62%); m/z 753.9 [M+H]⁺, 377.7

[1/2M+H]⁺. ¾ NMR (301 MHz, partial assignment of signals in CDC1₃) δ 2.30(s, 3H, N-CH₃ ), 2.67(m, 3H, N'-CH₃), 3.30(s, 3H, O-CH3), 3.44(s, 3H, 0-CH₃),3-73(s, 3H,6 -OCH₃), 3.92(s, 3H, 12-OCH₃), 6.00(d, IH, J=9.6Hz, 8'-H), 6.29(m, 2H, H-苯环)， 6.50(s, IH, H-苯环)， 6.53(s, IH, H-苯环), 6.78(m, IH, IO'-Η), 6.86(s, 2H, 13,14-H), 7.19(dd, IH, J=2.1,8.4 Hz,13'-H), 7.36(dd, IH, J=2.1,8.4 Hz,14'-H). 按照 BS-FC-418的方法，使用上述同样的试剂，将化合物 BS-FC-4 与糠胺反应，制备了 BS-FC-425:

LC-MS: 保留时间： 0.77 min (87.94%); m/z 761.9 [M+H]⁺, 381.7

[1/2M+H]⁺. 实施例 6: 本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物抗白血病的活性测定

(1) 实验材料

白血病细胞株：白血病细胞株： K562/adr (耐药慢性髓系白血病， CML)、 NB4 (急性早幼粒细胞白血病， AML)、 Kasumi-1 (急性髓系白血病 M2型， AML-M2)、 Jurkat (急性淋巴细胞白血病， ALL)，以上细胞系均受赠于浙江大学肿瘤研究所； H9 (急性淋巴细胞白血病， ALL)，购自中国典型培养物保藏中心。

试剂：汉防己乙素 (FAN )标准品购自陝西慈缘生物技术有限公司，本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物。

主要仪器：细胞培养箱（型号： Thermo Scientific 3111 ) ，酶标仪 (型号： Bio-Rad iMark ) 。

(2) 实验方法

取生长良好的白血病细胞 6000个，接种到 96孔细胞培养板孔内。培养液为含 10%胎牛血清的 RPMI-1640细胞培养液。第二天加入不同浓度的 7-位取代的汉防己乙素衍生物，混匀后，置于二氧化碳（5%C0₂ ) 细胞培养箱 37。C培养 72小时。然后用 MTT法测定活细胞浓度。在本实验中对照组（不加化合物处理）细胞活力设为 100%，并计算出化合物作用后细胞活力（％ )和 72小时白血病细胞半数生长抑制浓度 (72小时 IC₅。值， g/mL：)。

(3) 实验结果

实验结果见表 1。

表 1显示本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物能诱导人慢性髓系白血病、急性髓系白血病和急性淋巴细胞白血病细胞死亡和抑制这些白血病细胞生长，与汉防己乙素本身比较，本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物抗白血病细胞活性明显增强，其中本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物 BS-FC-403， BS-FC-410抗 K562/adr (耐药慢性髓系白血病， CML) 活性尤为明显，活性较汉防己乙素提高 7倍以上； BS-FC-308抗 Jurkat (急性淋巴细胞白血病)和 H9 (急性淋巴细胞白血病）活性分别提高 4倍及 3倍以上； BS-FC-104, BS-FC-311和 BS-FC-410抗 NB4 (急性早幼粒细胞白血病)活性提高 2倍以上；此外， BS-FC-311抗 Kasumi-1 (急性髓系白血病 M2型)活性较汉防己乙素也提高将近 2倍。表 1: 汉防己乙素衍生物对白血病细胞，人多发性骨髓瘤和淋巴瘤细胞生长抑制浓度测定（ 72小时， IC₅o ( g/mL )值和 IC₉o ( g/mL )值）。

K562/ADR Kasumi- 1 NB4 Jurkat H9 化合

物 IC50 IC90 IC50 IC90 IC50 IC90 IC50 IC90 IC50 IC90

FAN 0.36 4.13 1.11 4.11 0.58 2.59 1.73 5.25 2.40 6.60

BS-FC

-102 0.40 3.03 1.93 4.32 0.38 0.94 0.72 1.97 2.40 6.40

BS-FC

-104 0.42 2.65 0.95 3.68 0.28 0.92 0.45 3.03 1.00 4.99

BS-FC

-204 0.38 1.92 1.29 3.16 0.39 2.57 2.23 3.86 2.20 3.70

BS-FC

-208 0.28 2.35 0.97 4.01 0.48 2.48 0.75 1.88 2.01 4.28

BS-FC

-213 0.38 1.72 0.93 3.66 0.66 2.32 0.64 3.29 2.20 4.00

BS-FC

-216 0.60 2.15 3.22 7.22 0.99 2.93 1.42 2.91 1.80 3.30

BS-FC

-220 0.43 4.00 1.15 3.72 0.66 3.16 0.93 3.09 3.23 6.64

BS-FC

-221 0.33 1.31 1.00 3.39 0.57 1.88 0.52 1.89 1.96 4.00

BS-FC

-304 0.44 3.00 1.54 3.94 1.24 3.99 0.81 2.94 3.60 7.05

BS-FC

-308 0.08 0.47 0.81 1.90 0.37 0.98 0.36 1.62 0.70 1.80

BS-FC

-311 0.48 2.83 0.57 1.85 0.22 0.96 0.51 0.98 1.20 2.00

BS-FC

-315 0.26 2.14 0.85 3.04 0.33 1.32 0.59 1.24 2.00 3.77

BS-FC

-403 0.05 0.83 0.88 2.00 0.30 0.78 0.58 0.96 0.88 1.90

BS-FC

-405 0.60 1.73 0.76 1.75 0.47 0.95 0.56 0.99 1.45 2.90

BS-FC

-409 0.16 1.38 1.46 4.82 0.59 1.76 1.02 3.33 0.90 2.00 BS-FC

-410 0.05 0.63 0.84 1.86 0.28 0.91 0.64 1.61 1.13 2.00

BS-FC

-417 0.19 2.15 1.45 3.63 0.99 2.86 1.24 5.47 1.30 3.60

BS-FC

-421 0.21 1.43 0.95 2.55 0.61 1.61 0.97 3.79 1.00 2.80

实施例 7: 本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物抗人多发性骨髓瘤细胞活性测定

(1) 实验材料

骨髓瘤细胞株： RPMI 8226(多发性骨髓瘤)，购自上海复祥生物科技有限公司。

试剂：同实施例 6。

主要仪器： Thermo Scientific 3111细胞培养箱， Bio-Rad iMark酶标仪。

(2) 实险方法

取生长良好的上述肿瘤细胞 6000个，接种到 96孔细胞培养板孔内。培养液为含 10%胎牛血清的 RPMI-1640细胞培养液。第二天加入不同浓度的 7-位取代的汉防己乙素衍生物，混匀后，置于二氧化碳（5%C0₂ ) 细胞培养箱 37。C培养 72小时。然后用 MTT法测定活细胞浓度。在本实验中对照组（不加化合物处理）细胞活力设为 100%，并计算出化合物作用后细胞活力（％ )和 72小时白血病细胞半数生长抑制浓度 (72小时 IC₅。值， g/mL：)。

(3) 实验结果

实验结果见表 2。

表 2显示本发明的部分 7-位取代的汉防己乙素衍生物能诱导人骨髓瘤细胞死亡和抑制这些肿瘤细胞生长。其中 7-位取代的汉防己乙素衍生物 BS-FC-417抗 RPMI 8226(多发性骨髓瘤）活性与汉防己乙素相比，提高 2倍实施例 8: 本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物抗人实体瘤作用测定

(1) 实验材料

人实体瘤细胞株：

Hep-2(喉癌）、 A549(人肺癌）、 CaEs-17(食道癌细胞)、 PC-3(前列腺癌）、 CNE (鼻咽癌细胞)、 SK-OV-3(卵巢癌细胞)均购自中国典型培养物保藏中心； RKO(人结肠腺癌细胞)、 MGC-803(人胃癌细胞)、 MG-63(骨肉瘤）、 U87-MG (恶性脑胶质瘤细胞)均购自上海复祥生物科技有限公司； PANC-1(胰腺癌）、 Becap-37(人乳腺癌细胞)、 Hela (人宫颈癌细胞)、 Hep G2(人肝癌细胞)均受赠于浙江大学肿瘤研究所。

试剂：同实施例 6.

(2) 实验方法

取生长良好的人实体瘤细胞 6000个，接种到％孔细胞培养板孔内。培养液为含 10%胎牛血清的 DMEM高糖细胞培养液。置于二氧化碳（ 5% C0₂ ) 细胞培养箱 37。C培养 24小时，然后，加入不同浓度的 7-位取代的汉防己乙素衍生物，混匀后，继续置二氧化碳（5%C0₂ ) 细胞培养箱 37。C培养 72小时。然后用 MTT法测定活细胞浓度。在本实验中对照组（不加化合物处理）细胞活力设为 100%，并计算出化合物作用后细胞活力（％ )和 72小时白血病细胞半数生长抑制浓度 (72小时 IC_5G值)。

(3) 实验结果

实验结果见表 2。

表 2显示本发明的 7-位取代的汉防己乙素衍生物能诱导人实体瘤细胞死亡和抑制这些肿瘤细胞生长，与汉防己乙素本身比较，本发明 7-位取代的汉防己乙素衍生物抗实体瘤细胞活性明显增强，其中本发明的 7- 位取代的汉防己乙素衍生物 BS-FC-403, BS-FC-405和 BS-FC-410尤为显著，抗 PANC-1(胰腺癌）， Becap-37(人乳腺癌细胞)和 Hep G2(人肝癌细胞)活性较汉防己乙素本身提高近 3倍或 3倍以上；抗 U87-MG (恶性脑胶质瘤细胞)活性提高 1.5 倍以上； BS-FC-403 抗 PC-3(前列腺癌）， SK-OV-3(卵巢癌细胞)和 RKO (人结肠腺癌细胞)活性较汉防己乙素本身提高近 3倍或 3倍以上； BS-FC-308抗 A549(人肺癌）活性提高 3倍以上； BS-FC-221 和 BS-FC-403 抗 MG-63(骨肉瘤）活性提高 2 倍以上； BS-FC-311抗 Hela (人宫颈癌细胞)， BS-FC-403和 BS-FC-405 CaEs-17(食道癌细胞)活性均提高近 4倍； BS-FC-403， BS-FC-405和 BS-FC-421抗 CNE (鼻咽癌细胞)活性提高近 3倍； BS-FC-311， BS-FC-403 , BS-FC-405 和 BS-FC-409抗 Hep-2(喉癌）活性提高 2倍以上；此外， BS-FC-403和 BS-FC-410抗 MGC-803(人胃癌细胞）活性较汉防己乙素本身也提高了 2 倍以上。表 2 汉防己乙素衍生物对人实体瘤细胞半数生长抑制浓度测定（ 72 小时， IC₅。 ( g/mL )值和 IC₉。 ( g/mL )值）。

//〇 0080/-020si>l>dM

BS-FC-417 2.36 6.03 1.49 12.89 3.68 9.36 4.60 12.91

BS-FC-421 1.92 8.95 0.84 4.44 2.72 6.07 2.36 11.01 实施例 9: 本发明汉防己乙素 7-位取代的衍生物 BS-FC-308抗体内肿瘤的活性测定和毒性的初步测试实验 9-1 : BS-FC-308对棵鼠肝癌移植瘤的抑制作用

( 1 ) 实验材料：

肝癌细胞株： Hep G2 (人肝癌细胞株）；

动物： BALB/c-nu棵鼠（免疫缺陷鼠）， 8周，雌性，购自中国科学院上海实验动物中心。

( 2 )试剂：

BS-FC-308 (实验合成 ) ；

盐酸厄洛替尼（山东淄博凯美远医药技术有限公司）

( 3 )主要仪器：

细胞培养箱 ( Thermo Scientific, 3111 ) ；

层流架（苏杭实验动物设备厂， DJ-2 ) 。

( 4 ) 实验方法

无菌条件下分别收集对数生长期 Hep G2细胞，以 2.3x l0⁷/0.2mL/ 只棵鼠的细胞量（活细胞率 >90% )，经皮下注射于棵鼠左腋下，建立肝癌的棵鼠移植瘤模型。接种后第二天开始用药，实验组按实验设计量灌胃，阴性对照组用无菌水灌胃，阳性对照以盐酸厄洛替尼灌胃，每只鼠每次灌胃 0.4 mL，每天用药 3次，用药时间为 8点， 14点， 20点，间隔时间为 6小时，连续用药 10天。以用药前一天为第 0天，每 5天测体重及瘤径，做出体重及肿瘤生长动态图（实验结果以 mean ± SD表示）。第 28天解剖取出瘤体称重，以对照组抑瘤率为 0，计算出药物作用后的肿瘤抑制率（％) 。

各组实 3 数据采用 SPSS 19.0统计软件中的 One-way ANOVA法分析，与对照组比较具有差异显著性。表 3 BS-FC-308对棵鼠体重的影响

, 剂量动物数体重（_{g )}

组别（mg/kg/ (只）主、 ^

次）始末始末

无菌水 ― 3 3 22.4±0.21 21.4±0.91 盐酸厄洛替尼 20 3 3 21.4±0.26 20.4±1.72

BS-FC-308 35 3 3 21.8±0.62 19.0±0.49

BS-FC-308对棵鼠 Hep G2移植瘤的影响

抑瘤

剂量

组别瘤块质量（mg ) 率（％)

(mg/kg/次）无菌水 ― 1281±353.53 -- 盐酸厄洛替尼 20 839±270.62 34.5

BS-FC-308 35 566±112.26* 55.82 注：与对照组比较， *为 PO.05 图 1显示了 BS-FC-308对棵鼠体重影响的动态曲线。

图 2显示了 BS-FC-308对棵鼠 Hep G2移植瘤体积影响的动态曲线。图 3显示了 BS-FC-308显著减小了棵鼠 Hep G2移植瘤的重量。图 4显示了 BS-FC-308对棵鼠 Hep G2移植瘤重量的影响。

图 5显示了 BS-FC-308对棵鼠 Hep G2移植瘤的抑制作用。如上述表和图所示，在动物体内试 3 中， BS-FC-308在剂量 35mg/kg/ 次下，一天三次的给药能够有效抑制肝癌细胞 Hep G2移植瘤的生长，对肝癌抑瘤率达到 55.82%; 给药期间，动物体重有降低，显示该化合物对动物有一定的毒副作用，但是停用后，动物体重会有所回升。实验 9-2: BS-FC-308对棵鼠白血病移植瘤的影响

( 1 ) 实验材料：

白血病细胞株： KCL-22M (人慢性粒细胞白血病突变株）动物： BALB/c-nu棵鼠（免疫缺陷鼠）， 8周，雌性，购自中国科学院上海实验动物中心。

( 2 )试剂：

BS-FC-308 (实验合成 ) 。

( 3 )主要仪器：

细胞培养箱 ( Thermo Scientific, 3111 ) ；

层流架（苏杭实验动物设备厂， DJ-2 ) 。

( 4 ) 实验方法

无菌条件下分别收集对 & '数生长期 KCL-22M细胞，以 lx l0⁷/0.2ml/ 只棵鼠的细胞量（活细胞率 >90% )，经皮下注射于棵鼠左腋下，建立白血病的棵鼠移植瘤模型。接种后第二天开始用药，实验组按实验设计量灌胃，阴性对照组用无菌水灌胃，每只鼠每次灌胃 0.4 mL，每天用药 3 次，用药时间为上午 8点， 14点， 20点，连续用药 10天。以用药前一天为第 0天，每 5天测体重及瘤径，做出体重及肿瘤生长动态图（实验结果以 mean士 SD表示）。第 25天解剖取出瘤体称重，以对照组抑瘤率为 0，计算出药物作用后的肿瘤抑制率（％) 。

各组实 3 数据采用 SPSS 19.0统计软件中的 One-way ANOVA法分析，与对照组比较具有差异显著性。表 5 BS-FC-308对棵鼠体重的影响

剂量

动（g

组别瘤块 (mg/kg/ (只物）数体 +重至、 g ) 次）始末始末

无菌水 ― 3 3 20.2±0.2 18.9±2.07

BS-FC-308 30 3 3 19.5士0.2 15.4士1.51 表 6 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤的影响

抑瘤

组别率

瘤块质量（g )

( % )

Control 2037.7±964.58

BS-FC-308 30 520.7士248.54* 74.45

注：与对照组比较， *为 PO.05 图 6显示了 BS-FC-308对棵鼠体重影响的动态曲线

图 7显示了 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤体积影响的动态曲线。

图 8显示了 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤大小的影响。

图 9显示了 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤重量的影响。

图 10显示了 BS-FC-308对棵鼠 KCL-22M移植瘤的抑制作用。如上表和图所示，在体内试验中，本实 3 检测了 BS-FC-308所用剂量 30 mg/kg/次的剂量下，一天三次的给药能够有效抑制白血病细胞 KCL-22M移植瘤的生长，抑瘤率达到 74.45%。给药期间，动物体重有 P条低，显示该化合物对动物有一定的毒副作用，但是停用后，动物体重会有所回升。

Claims

权利要求书

1. 通式 (I)的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐

其中， W为 -OCHRi -、 -OS0₂-、 -OC(O)-;

Z选自氢、任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 c₂-c₆ 烯基、任选由取代基取代的（¾-( ₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基、 R₂R₃NC¾CH(OH) -、或者 Z与以及它们连接的碳原子一起形成任选由取代基取代的 C₃-C₇ 环烷基；

Ri为氢或与 Z以及它们连接的碳原子一起形成任选由取代基取代的 (¾ ₇环烷基；

R₂和 R₃独立地为氢，任选地由羟基、 d-C₆烷基氧基、鹵素、（¾ ₇环烷基或环烯基、芳基或杂芳基取代的 -C6烷基， C₂-C₆烯基，或者 R₂ 和 R₃以及它们所连接的氮原子一起形成 3-7元含氮杂环；所述含氮杂环任选地含有选自氧、硫和氮的另外的杂原子，且任选地被取代基取代；其中所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、氰基、羟基、 d-C₆烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、 C₃-C₇环烷基或环烯基、杂环基和含氮杂环基而言所述取代基还选自 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 -C6 鹵代烷基；

其中当 W为 -OCH₂-时， Z不为乙基、正丙基或异丙基；当 W为 -OC(O)- 时， Z不为乙基或丙基。

2. 根据权利要求 1的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，

其中 W为- OS0₂-; Z选自氢、任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆烯基、任选由取代基取代的（¾ ₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基；其中所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 -C6烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、 C₃-C₇环烷基或环烯基、杂环基而言所述取代基还选自 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 -C6鹵代烷基。

3. 根据权利要求 2的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z选自任选由取代基取代的 -C6烷基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基；

其中所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 -C6烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基而言所述取代基还选自 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 -C6鹵代烷基。

4. 根据权利要求 3的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z选自任选由取代基取代的 -C6烷基、任选由取代基取代的苯基；

其中所述取代基选自 |¾素、 d-C₆烷氧基和 d-C₆ |¾代烷氧基；所述苯基还可以被选自 d-C₆烷基、羟基 -C6烷基和 d-C₆鹵代烷基的取代基取代。

5. 根据权利要求 5的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z为任选由 d-C₆烷基取代的苯基。

6. 根据权利要求 1的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中

W为 -OCH₂-;

Z选自任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 c₂-c₆烯基、任选由取代基取代的（¾-( ₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基、 R₂R₃NC¾CH(OH)-;

R₂和 R₃独立地为氢，任选地由羟基、 d-C₆烷基氧基、鹵素、（¾ ₇环烷基或环烯基、芳基或杂芳基取代的 -C6烷基， C₂-C₆烯基，或者 R₂ 和 R₃以及它们所连接的氮原子一起形成 3-7元含氮杂环；所述含氮杂环任选地含有选自氧、硫和氮的另外的杂原子，且任选地被取代基取代；其中，所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 -C6烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、 C₃-C₇环烷基或环烯基、杂环基和含氮杂环基而言所述取代基还选自 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 -C6 鹵代烷基。

7. 根据权利要求 6的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z选自任选由取代基取代的芳基或杂芳基；所述取代基选自鹵素、氨基、 -C6烷基氨基、二（ -C6烷基）氨基、硝基、 tt、羟基、 -C6烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆烷硫基、 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆鹵代烷基。

8. 根据权利要求 7的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z选自任选由鹵素、 d-C₆烷基、 -C6鹵代烷基、 d-C₆ 烷氧基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆鹵代烷氧基的取代基取代的苯基。

9. 根据权利要求 6的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z为 R₂R₃NCH₂CH(OH)-;

R₂和 R₃独立地为氢，任选地由羟基、 d-C₆烷基氧基、鹵素、（¾ ₇环烷基或环烯基、芳基或杂芳基取代的 -C6烷基， C₂-C₆烯基，或者 R₂ 和 R₃以及它们所连接的氮原子一起形成 3-7元含氮杂环；所述含氮杂环任选地含有选自氧、硫和氮的另外的杂原子，且任选地被取代基取代；其中，所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、羟基、 -C6烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆ 烷硫基、 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆鹵代烷基。

10. 根据权利要求 9的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中所述含氮杂环为哌啶子基、哌嗪基、吗啉基、噻嗪基、吡咯烷基、噁唑烷基或噻唑烷基，任选地所述基团由选自鹵素、氨基、 - 烷基氨基、二（d-C₆烷基）氨基、硝基、 tt、羟基、 d-C₆烷氧基、 - 鹵代烷氧基、巯基、 C C6烷硫基、 d-C₆烷基、羟基 d-C₆ 烷基和 - 鹵代烷基的基团取代。

11. 根据权利要求 10的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中所述含氮杂环为任选由 d- 烷基取代的哌啶子基、 -C6 烷基取代的噻嗪基、任选 N-氰基取代的哌嗪基。

12. 根据权利要求 9的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中所述 R₂和 R₃独立地为氢、甲基、乙基、羟乙基、环丙基甲基、烯丙基、甲氧基丙基、呋喃甲基。

13. 根据权利要求 6的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z为 C₂-C₆烯基或 (¾-( ₇环烷基或环烯基。

14. 根据权利要求 13的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z为乙烯基、 1-甲基乙烯基或环丙基。

15. 根据权利要求 1的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中

W为 -OCHRi -， Z与以及它们连接的碳原子一起形成任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基，其中所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（ -C6烷基）氨基、硝基、氰基、羟基、 -C6烷氧基、 d-C₆ 鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆烷硫基、 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 d-C₆ 鹵代烷基。

16. 根据权利要求 13的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中所述 Z与以及它们连接的碳原子一起形成环戊基或环己基。

17. 根据权利要求 1的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，

其中， w为 -oc(o)-;

Z选自任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 c₂-c₆烯基、任选由取代基取代的（¾-( ₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基；

其中所述取代基选自鹵素、氨基、 d-C₆烷基氨基、二（d-C₆烷基) 氨基、硝基、羟基、 -C6烷氧基、 d-C₆鹵代烷氧基、巯基、 d-C₆ 烷硫基；对于所述芳基、杂芳基、（¾-( ₇环烷基或环烯基和杂环基而言所述取代基还选自 d-C₆烷基、羟基 d-C₆烷基和 -C6鹵代烷基

18. 根据权利要求 1的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，其中 Z为苯基、吡、哒嗪基，各自任选地被选自甲基、乙基、异丙基、氨基、甲基氨基、二甲氨基、二乙基氨基、甲氧基、三氟甲氧基、鹵素的取代基所取代。

19. 根据权利要求 1的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐，选自下述化合物：

BS-FC-104 BS-FC-221

7-苯磺酸基 -汉防己乙素 7-异丁烯氧基 -汉防己乙素

BS-FC-403 BS-FC-405

7-(1-哌啶基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素 7-(1-环丙甲胺基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素

BS-FC-409 BS-FC-410

-(1-N-烯丙基甲胺基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素 7-(1 -(3-甲基)哌啶基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素

BS-FC-421

7-(1-N-氰基哌嗪基 -2-羟基-丙氧基) -汉防己乙素

20. 制备式（I) 7-位取代的汉防己乙素衍生物的方法，

FAN M

式（ 1-1 )的 7-位取代汉防己乙素衍生物由汉防己乙素（FAN)与相应的烷基或芳香族磺酰氯（R，S0₂C1 )在有碱的存在下，于室温下反应生成，其中选自氢、任选由取代基取代的（^ ₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆婦基、任选由取代基取代的 C₃-C₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基，所述取代基如权利要求 1所定义；

FAN 1-2

式（ 1-2 )的 7-位取代汉防己乙素衍生物由汉防己乙素（FAN)先与强碱反应，再与相应的卤代烃（R₂，X)在有碱的存在下，于室温或加热条件下反应生成，其中 R₂，为 -CHRiZ , R^ Z如权利要求 1中所定义，但 Z不为 R₂R₃NCH₂CH(OH)-;

FAN 1-3

式（ 1-3 )的 7-位取代汉防己乙素衍生物由汉防己乙素（ FAN )与相应的有机酸（R₃，C0₂H )在有缩合剂和碱的存在下，于室温下反应生成，其中 R₃'为任选由取代基取代的 d-C₆烷基、任选由取代基取代的 C₂-C₆ 烯基、任选由取代基取代的（¾-( ₇环烷基或环烯基、任选由取代基取代的杂环基、任选由取代基取代的芳基或杂芳基，所述取代基如权利要求 1所定义；

式（ 1-4 ) 的 7-位取代汉防己乙素衍生物可由两步反应制取：先由汉防己乙素与叔丁醇钾和氯甲基环氧丙烷反应生成中间体，再由此中间体与相应的有机胺反应即得产物，其中 R₄，和 R₅，如权利要求 1中对 R₂和 R₃的定义。

21. 一种药物组合物，其中包含权利要求 1-19中任一项的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐和任选的药学上可以接受的赋形剂。

22. 权利要求 1-19 中的任一项的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的用途。

23. 一种治疗肿瘤患者的方法，包括给予需要治疗的患者治疗有效量的 #居权利要求 1-19任一项的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐。

24. 作为抗肿瘤治疗剂的权利要求 1-9任一项的 7-位取代的汉防己乙素衍生物或其药学上可接受的盐。

25. #居权利要求 22、 23或 24的用途、方法或 7-位取代的汉防己乙素衍生物，其中，所述肿瘤选自白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、肝癌、胃癌、乳腺癌、胆管细胞癌、胰腺癌、肺癌、大肠癌、骨肉瘤、人宫颈癌、神经胶质瘤、鼻咽癌、喉癌、食管癌、中耳肿瘤、黑色素瘤和前列腺癌。