WO2014122331A1 - Proceso de valorización de microorganismos fotosinteticos para el aprovechamiento integral de la biomasa - Google Patents

Proceso de valorización de microorganismos fotosinteticos para el aprovechamiento integral de la biomasa Download PDF

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Definitions

  • the present invention is included within the technical field of the production of biofuels from photosynthetic microorganisms. Specifically, it is part of the area of obtaining compounds of commercial interest from biomass produced in massive systems abroad for the biofuel market.
  • the object of the patent consists of an optimized process of obtaining products of interest from photosynthetic microorganisms comprising the sequence of stages and their optimal operating conditions to maximize the quantity and quality of products to be obtained, achieving an integral use of the biomass, all in a sustainable and economically viable way.
  • Microalgae are very useful organisms because they present a large number of beneficial applications in areas as different as the production of pharmaceutical and nutraceutical compounds, human and animal nutrition, wastewater treatment, and the production of biofuels (Spolaore, et al. 2006).
  • the advantages of the use of microalgae as a source of biofuels are numerous, such as the fact that microalgae crops can achieve productivities much higher than traditional crops, resulting in a greater CO2 fixation and a greater amount of biomass produced.
  • microalgae cultures have lower water needs and do not compete with traditional crops, since they do not need land or fertile water.
  • they are a legally accepted source of biofuels and, given the CO2 fixation that they entail, they present today one of the most sustainable sources of third-generation biofuels (Chisti 2007).
  • microalgae can be used to produce bioethanol because of its high carbohydrate content (Harun and Danquah 201 1). For this, it is necessary to carry out a liquefaction process of the carbohydrates contained in the biomass, and then a saccharification of them to obtain fermentable monosaccharides.
  • the proposed conditions to carry out this process of liquefaction and saccharification are usually extreme, working at pH between 1 and 3, and temperatures between 100 and 250 ° C (Harun and Danquah 201 1).
  • the conditions of fermentation with yeasts are softer, and must adapt to the optimum of the yeast used, varying between temperatures of 20 to 50 ° C and pH between 7 and 9 (Khaw, et al., 2006; Mesa, et al., 2010).
  • microalgae can be used to produce amino acid concentrates (Romero Garc ⁇ a, et al., 2012). Microalgae have high protein contents, up to 50% p.s., with high-quality amino acid profiles due to their nutritional quality (Rebolloso Fuentes, et al., 2000, Rebolloso-Fuentes, et al., 2001). Amino acid hydrolysates can be applied for human and animal food (Morris 2008), or as biofertilizers ( ⁇ rdóg, et al., 2004). They can be obtained by chemical or enzymatic means, being recommended the enzymatic route to maintain the optimal properties of the amino acids contained in the biomass. Previous cellular breakage and release of amino acids leads to the loss of carbohydrates, which is why it is not possible subsequently to produce bioethanol from the carbohydrates contained in the biomass.
  • microalgae can be used to produce oils and subsequently transesterify them as is usually done with vegetable oils, or alternatively a direct transfer of the complete biomass can be carried out (Belarbi, et al., 2000).
  • the extraction of oils and subsequent transesterification is hindered by the presence of water in the biomass of microalgae, which is why very polar solvents and aggressive extraction conditions must be used, as well as complex lipids due to the polar nature of most of the lipids contained in the microalgae biomass.
  • the biomass of photosynthetic microorganisms is a heterogeneous material, composed of biomass and water, since the available harvesting processes achieve maximum concentrations of dry matter of 20-30%, the rest being water.
  • Cells of photosynthetic microorganisms consist of a hard cell wall that must be broken to release the intracellular content and obtain the products of interest.
  • the use of aggressive chemicals or extreme conditions of pressure and temperature are penalized since they reduce the sustainability and economic viability of any process.
  • the present invention relates to an optimized process for obtaining products of interest from photosynthetic microorganisms comprising the sequence of stages and their optimum operating conditions to maximize the quantity and quality of products to be obtained, obtaining an advantage integrated biomass, all in a technically feasible and scalable, but above all sustainable and economically viable.
  • the proposed process includes:
  • a bioethanol production stage from the previous clarification by saccharification of the carbohydrates under moderate acidity (pH 1.5 - 2.5) and temperature (95 - 1 15 ° C) conditions, followed by fermentation with yeast of the genus Saccharomyces, during 24 h to transform the monosaccharides into bioethanol with high yields.
  • the yeast can be recovered by filtration and / or centrifugation for reuse, while in the liquid phase the bioethanol and remains of unmetabolized sugars are contained.
  • the bioethanol produced can be separated by vacuum distillation and then dried by means of molecular sieves.
  • a stage of production of peptide and amino acid concentrates through the use of proteolytic enzymes that break proteins, solubilizing them and transforming them into peptides and amino acids of lower molecular weight that can be used in food or as high-value agricultural fertilizers.
  • the obtained reaction mixture must be separated by a filtration and / or centrifugation process giving a clarification rich in peptides-amino acids and a concentrate containing the residual biomass.
  • the amino acid - peptide solution must be stabilized by adjusting to acidic or alkaline pH to avoid its decomposition.
  • a stage of production of biodiesel from the previous concentrate by which the transesterification of the fatty acids present in the biomass with sulfuric acids as a catalyst and methanol as reagent is obtained, obtaining the respective methyl esters that constitute.
  • the reaction is carried out under mild conditions without the previous drying of the biomass, using sulfuric acid at 2% and temperature between 90 - 1 10 ° C, during 2 h.
  • the biodiesel is extracted from the reaction mixture by hexane, which is subsequently evaporated to obtain the biodiesel.
  • the methanol not used is removed from the reaction mixture by vacuum distillation. In this way both solvents are recovered, their consumption is minimized, and both the sustainability and the economic viability of the process are increased.
  • the process is carried out in closed tanks under anaerobic conditions at temperatures between 30-40 ° C, with a residence time of approximately 5-8 days,
  • the proposed process can be carried out in all or some of its parts but always respecting the order and operating conditions identified as optimal to maximize the use of biomass and all its components.
  • the realization or not of a stage will be determined by the amount of compound to be valued present in the biomass (carbohydrates, proteins, lipids) and the interest or value of the product to be obtained (bioethanol, peptides and amino acids, biodiesel, biogas, lactic acid, high-value fatty acids).
  • the preferred embodiment of the invention is shown in the Error! The origin of the reference can not be found ..
  • the sludge of available photosynthetic microorganisms is introduced in a stirred tank where the temperature is adjusted to the optimal operating conditions of the cellulolytic enzymes to use Cellulase and an amount of enzyme (2%) is added (2), leaving to act for 2 h .
  • the liquefaction of sugars (3) occurs, releasing the carbohydrates contained in the biomass to the medium.
  • the concentration of carbohydrates in the medium can reach up to 60 g / l, although it rarely exceeds 30 g / l.
  • the sludge is removed from the stirred tank and filtered / centrifuged (4) to separate the clarified contained carbohydrates from the remaining biomass.
  • said concentrate is cooled to 30 ° C and the pH (7) is adjusted to the optimum conditions of operation of the yeast of the Saccharomyces genus.
  • 2% yeast is added and it is left to ferment with agitation and without aeration, under anoxic conditions for approximately 24 h.
  • the free sugars have been transformed into CO 2 and bioethanol (8), leaving the yeast in suspension.
  • the yeast can be recovered by filtration / centrifugation and recirculated to the process of a new batch.
  • the water can be eliminated if necessary by means of molecular sieves for its use as a direct biofuel in mixture with gasolines.
  • the resulting biomass (9) after the sugar extraction process can be used to obtain peptide and amino acid concentrates (10). If the previous stage has not been carried out, biomass can also be used directly to obtain peptide and amino acid concentrates, but in this case carbohydrates will accompany this solution and will not be recovered.
  • the first enzyme is added and at 2 h the second enzyme is added, both in the same amount of 2%.
  • the process is completed approximately in 4 h after which most of the protein fraction has been hydrolysed and the resulting peptides and amino acids are dissolved in the liquid phase. To separate them the reaction mixture is centrifuged (13) leaving a clarified
  • the clarified (14) must be stabilized to avoid its rapid decomposition since it is a perfect breeding ground for bacteria and yeasts. For this the simplest thing is to adjust the pH of the clarified to values that do not allow the growth of bacteria and yeasts, obtaining good results at both acid and alkaline pH. It is not recommended to stabilize at extreme pH values because, in addition to being more expensive and dangerous, since they are more corrosive materials, the peptides and amino acids themselves can be denatured, losing part of their properties.
  • the resulting residual biomass can be used to produce biodiesel. If the previous stages have not been previously carried out, the biomass can also be subjected to the process of biodiesel production, although the yield of the process will be lower and the quality of the products will be also, so it is recommended to do the previous stages and with it expand the quantity of products obtained from the same biomass.
  • the wet biomass with a dry matter content of 15-20%, is introduced into a stirred reactor where sulfuric acid is added as a 2% catalyst, and methanol (16) as reactant at a rate of 1 L for each liter of wet biomass, the mixture is subjected to a transesterification process (17).
  • the resulting residual biomass (21) is subjected to an anaerobic digestion process (22) for the production of biogas (23). If the previous stages are not carried out, the biomass can be subjected to anaerobic digestion to produce biogas but the yield of the process is lower since the biomass is not sufficiently broken, the nitrogen content is excessively high, and the chemical structure of the compounds present is too complex for the methanogenic bacteria to efficiently degrade organic matter.
  • Biogas production is carried out by introducing the wet biomass, with a dry matter content of 15-20%, in a continuous anaerobic digester, with a residence time of between 5-8 days.
  • the anaerobic digester is a closed reactor that must be previously stabilized at a suitable temperature and pH, without air intake, and with a bacterial flora adapted to the substrate to be metabolized.
  • the biogas formed is extracted through the upper part of the tank, removing the digestate (24), which has a minimum volume and which can also be used as a fertilizer product due to its high content of ammonium and phosphorus, and low COD.

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Abstract

Proceso que comprende las etapas de introducción de una biomasa de microorganismos fotosintéticos (1) en un tanque de agitado empleando de enzimas celulolíticas (2) para la licuefacción de los azúcares (3); la mezcla obtenida se separa mediante un proceso de filtración y/o centrifugación (4); una etapa de producción de bioetanol mediante sacarificación de los carbohidratos, seguido de una fermentación con levadura; una etapa de producción de concentrados de péptidos y aminoácidos (10) mediante el empleo de enzima proteolíticas (12) en un proceso de hidrólisis enzimática (11), la mezcla de reacción obtenida se debe separar mediante un proceso de filtración y/o centrifugación (13); una etapa de producción de biodiesel en la que se realiza la transesterificación (17) de los ácidos grasos presentes en la biomasa con ácidos sulfúrico y metanol y una etapa de producción de biogás, mediante un proceso de digestión anaerobia (22).

Description

PROCESO DE VALORIZACIÓN DE MICROORGANISMOS
FOTOSINTETICOS PARA EL APROVECHAMIENTO INTEGRAL DE LA
BIOMASA D E S C R I P C I Ó N
OBJETO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se incluye dentro del campo técnico de la producción de biocombustibles a partir de microorganismos fotosintéticos. En concreto, se enmarca en el área de la obtención de compuestos de interés comercial a partir de biomasa producida en sistemas masivos al exterior para el mercado de biocombustibles. El objeto de la patente consiste en un proceso optimizado de obtención de productos de interés a partir de microorganismos fotosintéticos que comprende la secuencia de etapas y sus condiciones óptimas de operación para maximizar la cantidad y calidad de productos a obtener, consiguiendo un aprovechamiento integro de la biomasa, todo ello de una forma sostenible y económicamente viable.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Las microalgas son organismos de gran utilidad debido a que presentan gran número de aplicaciones beneficiosas en áreas tan diferentes como la producción de compuestos farmacéuticos y nutracéuticos, la alimentación humana y animal, el tratamiento de aguas residuales, y la producción de biocombustibles (Spolaore, et al. 2006). Las ventajas del uso de microalgas como fuente de biocombustibles son numerosas tales como que los cultivos de microalgas pueden alcanzar productividades muy superiores a los cultivos tradicionales, dando como resultado una mayor fijación de CO2 y una mayor cantidad de biomasa producida. Además, los cultivos de microalgas tienen menores necesidades de agua y no compiten con los cultivos tradicionales, puesto que no necesitan terreno ni agua fértil. Por último, son una fuente legalmente aceptada de biocombustibles y dada la fijación de CO2 que conllevan presentan hoy día una de las fuentes mas sostenibles de obtención de biocombustibles de tercera generación (Chisti 2007).
Para producir biocombustibles a partir de microalgas se necesitan sistemas de producción a gran escala, en grandes extensiones de cientos de hectáreas, que den sentido a las inversiones necesarias, además de instalaciones industriales de suficiente envergadura. En la etapa de producción se deben emplear materiales de bajo coste, tecnologías altamente eficientes, y emplearse residuos de otras industrias como CO2 y efluentes contaminados con nitrógeno y fósforo, para conseguir un proceso sostenible y económicamente viable de producción (Olguín 2012; Pittman, et al. 201 1 ). Sin embargo, cualquiera que sea el proceso de producción instalado es imprescindible además disponer de un proceso de valorización de la biomasa que permita aprovechar por completo la misma y obtener la mayor cantidad posible de productos de calidad contrastada. Solo el aprovechamiento integral de la biomasa y su transformación en productos de valor puede hacer económicamente viable el proceso global de producción + valorización (Acién, et al. 2012; Molina Grima, et al. 2003; Singh, et al. 201 1 ).
Se ha descrito previamente que las microalgas pueden ser utilizadas para producir bioetanol dado su elevado contenido en carbohidratos (Harun and Danquah 201 1 ). Para ello es necesario realizar un proceso de licuefacción de los carbohidratos contenidos en la biomasa, y posteriormente una sacarificación de los mismos para obtener monosacáridos fermentables. Las condiciones propuestas para llevar a cabo este proceso de licuefacción y sacarificación son normalmente extremas, trabajando a pH entre 1 y 3, y temperaturas entre 100 y 250°C (Harun and Danquah 201 1 ). Las condiciones de fermentación con levaduras son mas suaves, y deben adaptarse al óptimo de la levadura empleada, variando entre temperaturas de 20 a 50°C y pH entre 7 y 9 (Khaw, et al. 2006; Mesa, et al. 2010). El mayor inconveniente de estos procesos es que desaprovechan el resto de compuestos presentes en la biomasa ya que durante la licuefacción y sacarificación se destruyen tanto los lípidos como las proteínas presentes, produciendo intermedios de degradación que pueden resultar tóxicos para los procesos de producción de biogás en condiciones anaerobias.
También se ha descrito que las microalgas se pueden emplear para producir concentrados de aminoácidos (Romero García, et al. 2012). Las microalgas presentan elevados contenidos en proteína, de hasta el 50%p.s., con perfiles de aminoácidos de alto interés por su calidad nutricional (Rebolloso Fuentes, et al. 2000; Rebolloso-Fuentes, et al. 2001 ). Los hidrolizados de aminoácidos pueden aplicarse para alimentación humana y animal (Morris 2008), o como biofertilizantes (Órdóg, et al. 2004). Pueden obtenerse por vía química o enzimática, siendo recomendable la vía enzimática por mantener las propiedades óptimas de los aminoácidos contenidos en la biomasa. La rotura celular previa y liberación de aminoácidos conlleva la pérdida de carbohidratos por lo que mediante este tipo de procesos no es posible posteriormente producir bioetanol a partir de los carbohidratos contenidos en la biomasa.
En cuanto a la producción de biodiesel, las microalgas se pueden emplear para producir aceites y posteriormente transesterificarlos como se hace habitualmente con aceites vegetales, o alternativamente se puede realizar una transeste ficación directa de la biomasa completa (Belarbi, et al. 2000). La extracción de aceites y posterior transesterificación está dificultada por la presencia de agua en la biomasa de microalgas, por lo que se deben emplear disolventes muy polares y condiciones de extracción agresivas, quedando además unos lípidos complejos por la naturaleza polar de la mayor parte de los lípidos contenidos en la biomasa de microalgas. Por otro lado la transesterificación directa se realiza en condiciones de alta temperatura y acidez, a temperaturas entre 100 y 300°C y pH entre 2 y 4, en presencia de metanol y ácido sulfúrico como catalizador, lo que provoca una desnaturalización completa de todos los compuestos presentes en la biomasa. Al igual que en el caso de la licuefacción y sacarificación de azúcares esto conlleva el no aprovechamiento del resto de compuestos presentes en la biomasa y un posible perjuicio para la producción de biogás por la formación de compuestos tóxicos.
Cualquiera que sea el proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos hay que tener en cuenta las siguientes consideraciones para lograr un máximo rendimiento:
• La biomasa de microorganismos fotosintéticos es un material heterogéneo, compuesto de biomasa y agua, ya que los procesos de cosechado disponibles consiguen concentraciones máximas de materia seca del 20-30%, siendo el resto agua.
« La presencia de agua se puede eliminar mediante operaciones de secado pero esto repercute negativamente, tanto en el consumo de energía como en la viabilidad económica, por el coste asociado al secado. Por tanto los procesos de valorización deben hacerse por vía húmeda.
· Las células de microorganismos fotosintéticos constan de una pared celular dura que se debe romper para liberar el contenido intracelular y poder obtener los productos de interés. El empleo de productos químicos agresivos o condiciones extremas de presión y temperatura están penalizados ya que reducen la sostenibilidad y viabilidad económica de cualquier proceso.
• La realización de cualquier proceso de extracción o transformación de los compuestos presentes en la biomasa afecta al resto de compuestos por lo que el rendimiento o calidad de los productos siguientes se verá siempre afectado por los tratamientos a los que se ha sometido previamente a la biomasa.
• La realización de cualquier proceso de obtención de compuestos a partir de la biomasa dará siempre lugar a unos residuos, cuya composición y condiciones vendrán determinadas por la secuencia de etapas previas. El aprovechamiento de dicho residuo y su eliminación como un objetivo simultáneo es imprescindible para mejorar la viabilidad completa del proceso desarrollado.
Referencias
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DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un proceso optimizado de obtención de productos de interés a partir de microorganismos fotosinteticos que comprende la secuencia de etapas y sus condiciones óptimas de operación para maximizar la cantidad y calidad de productos a obtener, consiguiendo un aprovechamiento integro de la biomasa, todo ello de una forma técnicamente realizable y escalable, pero sobre todo sostenible y económicamente viable.
El proceso propuesto comprende:
- Una primera etapa de extracción de carbohidratos mediante el empleo de enzimas celuloliticas que rompen la pared celular y liberan los carbohidratos solubles, permaneciendo el resto de componentes en la biomasa residual. Se consigue con ello la licuefacción de gran parte de los carbohidratos presentes en la biomasa, que servirán como materia prima en procesos posteriores, como por ejemplo ácido láctico o bioetanol. Para ello la mezcla obtenida se debe separar mediante un proceso de filtración y/o centrifugación dando un clarificado rico en carbohidratos y un concentrado contendiendo la biomasa residual.
Una etapa de producción de bioetanol a partir del clarificado anterior mediante sacarificación de los carbohidratos en condiciones de acidez (pH = 1.5 - 2.5) y temperatura (95 - 1 15°C) moderados, seguido de una fermentación con levadura del género Saccharomices, durante 24 h para transformar los monosacáridos en bioetanol con elevados rendimientos. La levadura se puede recuperar mediante filtración y/o centrifugación para su reutilización, mientras que en la fase líquida quedan contenidos el bioetanol y restos de azúcares sin metabolizar. El bioetanol producido se puede separar por destilación a vacío y posterior desecado mediante tamices moleculares.
Una etapa de producción de concentrados de péptidos y aminoácidos mediante el empleo de enzima proteolíticas que rompen las proteínas, solubilizándolas y transformándolas en péptidos y aminoácidos de menor peso molecular que se pueden emplear en alimentación o como fertilizantes agrícolas de alto valor. El proceso se lleva a cabo a partir de la biomasa residual de la etapa anterior en un tanque agitado a pH y temperatura controlados (pH = 7.7 - 8.1 , T= 40 - 55°C), durante 4 h, en condiciones suaves y sin emplear productos tóxicos ni condiciones agresivas. La mezcla de reacción obtenida se debe separar mediante un proceso de filtración y/o centrifugación dando un clarificado rico en péptidos-aminoácidos y un concentrado contendiendo la biomasa residual. La solución de aminoácidos - péptidos debe ser estabilizada mediante ajuste a pH ácido o alcalino para evitar su descomposición. - Una etapa de producción de biodiesel a partir del concentrado anterior mediante la cual se realiza la transesterificación de los ácidos grasos presentes en la biomasa con ácidos sulfúrico como catalizador y metanol como reactivo, obteniéndose los respectivos ésteres metílicos que constituyen. La reacción se realiza en condiciones suaves sin el previo secado de la biomasa, empleando ácido sulfúrico al 2% y temperatura entre 90 - 1 10°C, durante 2 h. Transcurrida la reacción el biodiesel se extrae de la mezcla de reacción mediante hexano, el cual se evapora posteriormente para obtener el biodiesel. Del mismo modo el metanol no empleado se retira de la mezcla de reacción mediante destilación a vacío. De esta forma se recuperan ambos disolventes, se minimiza el consumo de los mismos, y se incrementa tanto la sostenibilidad como la viabilidad económica del proceso.
- Una etapa de producción de biogás a partir de la mezcla de reacción resultante, exenta de metanol y hexano, mediante la cual la materia carbonosa residual contenida en la misma se transforma en metano, hidrógeno y CO2 por acción de bacterias metanogénicas. El proceso se realiza en tanques cerrados en condiciones anaerobias a temperaturas entre 30-40°C, con un tiempo de residencia de aproximadamente 5-8 días,
REALIZACIÓN PREFERENTE DE LA INVENCIÓN El proceso propuesto puede ser realizado en todas o algunas de sus partes pero siempre respetando el orden y las condiciones de operación identificadas como óptimas para maximizar el aprovechamiento de la biomasa y todos sus componentes. La realización o no de una etapa vendrá determinada por la cantidad de compuesto a valorizar presente en la biomasa (carbohidratos, proteínas, lípidos) y el interés o valor del producto a obtener (bioetanol, péptidos y aminoácidos, biodiesel, biogás, ácido láctico, ácidos grasos de alto valor). Cabe resaltar sin embargo que la no realización de una etapa lejos de facilitar las etapas posteriores las dificulta ya que la retirada de los diversos compuestos presentes en la biomasa reduce por un lado la presencia de compuestos que puedan interferir en las reacciones siguientes, y por otro incrementa la riqueza en los productos restantes contenidos en la biomasa, incrementando así el rendimiento de las etapas posteriores.
La realización preferente de la invención se muestra en la ¡Error! No se encuentra el origen de la referencia.. En la misma la biomasa de microorganismos fotosintéticos (1 ) procedente del sistema de cultivo y cosechado es acondicionada para obtener una concentración de materia seca entre el 15-20%. El lodo de microorganismos fotosintéticos disponible se introduce en un tanque agitado donde se ajusta la temperatura a las condiciones óptimas de operación de las enzimas celulolíticas a emplear Celulasa y se añade una cantidad de enzima (2%) (2), dejando actuar durante 2 h. En este tiempo se produce la licuefacción de los azúcares (3), liberándose los carbohidratos contenidos en la biomasa al medio. En función del contenido en carbohidratos de la biomasa la concentración de carbohidratos en el medio puede llegar hasta 60 g/l aunque raramente sobrepasa los 30 g/l. Al cabo de este tiempo de reacción el lodo se retira del tanque agitado y se filtra/centrifuga (4) para separar el clarificado contenido los carbohidratos de la biomasa restante. El clarificado (5) se somete entonces a un proceso de sacarificación mediante tratamiento acido-térmico a pH= 1.5 - 2.5 y T= 95 - 1 15°C durante 2 h (6). Ello se lleva a cabo en el mismo tanque u otro adicional, con agitación. Al cabo de este tiempo se enfría dicho concentrado hasta 30°C y se ajusta el pH (7), a las condiciones óptimas de operación de la levadura del genero Saccharomyces. Una vez estabilizadas las condiciones se añade un 2% de levadura y se deja fermentar con agitación y sin aireación, en condiciones anoxicas durante aproximadamente 24 h. Al cabo de este tiempo los azúcares libres se han transformado en CO2 y bioetanol (8), quedando la levadura en suspensión. La levadura se puede recuperar mediante filtración/centrifugación y recircularse al proceso de un nuevo lote. El clarificado contiene el bioetanol que se debe recuperar mediante destilación a vacio, (P=10-20 mbar, T=30 - 40°C) obteniéndose un azeótropo que contiene un 4% de agua y 96% de bioetanol. El agua se puede eliminar si es necesario mediante tamices moleculares para su empleo como biocombustible directo en mezcla con gasolinas.
En la realización preferente la biomasa resultante (9) tras el proceso de extracción de azúcares se puede emplear para la obtención de concentrados de péptidos y aminoácidos (10). Si no se ha llevado a cabo la etapa anterior igualmente la biomasa se puede emplear directamente para la obtención de concentrados de péptidos y aminoácidos pero en este caso los carbohidratos irán acompañando a dicha solución y no serán valorizados. Para la obtención de concentrados de péptidos y aminoácidos la biomasa húmeda, con entre un 15-20% de materia seca se añade a un tanque agitado dotado de control de pH y temperatura. Se ajusta el pH y la temperatura a las condiciones óptimas de la enzima (12) a utilizar, preferentemente endo y exo-proteasas, de pH= 7.7 - 8.1 y T= 40 - 55°C, en un proceso de hidrólisis enzimática (1 1 ). Se añade la primera enzima y a las 2 h se añade la segunda enzima, ambas en la misma cantidad del 2%. El proceso se completa aproximadamente en 4 h tras las cuales la mayor parte de la fracción proteica se ha hidrolizado y los péptidos y aminoácidos resultantes se encuentran disueltos en la fase liquida. Para separarlos la mezcla de reacción se centrifuga (13) quedando un clarificado
(14) conteniendo dichos péptidos y aminoácidos (10), y una biomasa residual
(15) . El clarificado (14) debe ser estabilizado para evitar su rápida descomposición ya que es un caldo de cultivo perfecto para bacterias y levaduras. Para ello lo mas sencillo es ajusfar el pH del clarificado a valores que no permiten el crecimiento de bacterias y levaduras, obteniéndose buenos resultados tanto a pH acido como alcalino. No se recomienda estabilizar a valores extremos de pH ya que además de resultar mas costoso y peligroso, al tratarse de materiales mas corrosivos, los propios péptidos y aminoácidos se pueden desnaturalizar perdiendo parte de sus propiedades.
En la realización preferente, tras el proceso de obtención de bioetanol y concentrados de azúcares, la biomasa residual (15) resultante se puede emplear para producir biodiesel. Si no se han realizado previamente las etapas anteriores la biomasa puede ser igualmente sometida al proceso de producción de biodiesel, si bien el rendimiento del proceso será inferior y la calidad de los productos también, por lo que se recomienda hacer las etapas anteriores y con ello ampliar la cantidad de productos obtenidos de la misma biomasa. Para llevar a cabo este proceso la biomasa húmeda, con un contenido en materia seca del 15-20%, se introduce en un reactor agitado donde se añade ácido sulfúrico como catalizador al 2%, y metanol (16) como reactivo a razón de 1 L por cada litro de biomasa húmeda, se somete la mezcla a un proceso de transesterificación (17). Se calienta la mezcla hasta una temperatura entre 90 - 1 10°C y se deja reaccionar durante 2 h. Ya que en este caso se trabaja con disolventes orgánicos el reactor a emplear debe ser cerrado y cumplir con las normas ATEX aplicables. Tras este tiempo a la mezcla resultante se le añade hexano y se agita (18) durante 0.5 h para conseguir la transferencia de los esteres metílicos formados de la fase acuosa- metanólica a la fase hexánica. Se retira la fase hexánica y se recupera el hexano mediante destilación a vacío (19) (P=10-20 mbar, T=30-40°C) resultando el biodiesel liquido (20). La fase acuosa-metanólica se debe tratar para recuperar el metanol en exceso añadido, para lo cual se somete también a destilación a vacío (P=10-20 mbar, T=30-40°C) hasta recuperación completa del metanol. De esta forma tanto el metanol como el hexano se recuperan y son recirculados al proceso. Queda de esta forma la biomasa residual (21 ) en fase liquida, junto con los restos de reacción de todas las etapas anteriores. Dicha biomasa se puede emplear para producir biogás.
En la realización preferente, después de las etapas de producción de bioetanol (8), péptidos-aminoácidos (10) y biodiesel (20), la biomasa residual (21 ) resultante se somete a un proceso de digestión anaerobia (22) para la producción de biogás (23). Si no se realizan las etapas anteriores la biomasa puede someterse a digestión anaerobia para producir biogás pero el rendimiento del proceso es mas bajo ya que la biomasa no está lo suficientemente rota, el contenido en nitrógeno es excesivamente alto, y la estructura química de los compuestos presentes es excesivamente compleja para que las bacterias metanogénicas puedan degradar eficientemente la materia orgánica. La producción de biogás se lleva a cabo introduciendo la biomasa húmeda, con un contenido en materia seca del 15-20%, en un digestor anaerobio en continuo, con un tiempo de residencia de entre 5-8 días. El digestor anaerobio es un reactor cerrado que debe estar previamente estabilizado a una temperatura y pH adecuados, sin entrada de aire, y con una flora bacteriana adaptada al sustrato a metabolizar. El biogás formado se extrae por la parte superior del tanque retirándose por la parte inferior el digestato (24), de mínimo volumen y que puede emplearse también como producto fertilizante por su elevado contenido en amonio y fósforo, y baja DQO.

Claims

REIVINDICACIONES
1 . -Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa caracterizado por que comprende las etapas de:
- Una primera etapa en la que partiendo de una biomasa de microalgas (1 ) se introduce en un tanque de agitado en la que mediante el empleo de enzimas celulolíticas (2) se produce la licuefacción de los azúcares (3) que rompen la pared celular y liberan los carbohidratos solubles, permaneciendo el resto de componentes en la biomasa residual; la mezcla obtenida se debe separar mediante un proceso de filtración y/o centrifugación (4) dando un clarificado (5) rico en carbohidratos y un concentrado contendiendo la biomasa residual (9).
- Una etapa de producción de bioetanol y otros productos derivados, como el acido láctico, a partir del clarificado (5) anterior mediante sacarificación (6) de los carbohidratos, seguido de una fermentación alcohólica (7) con levadura para transformar los monosacáridos en bioetanol (8) con elevados rendimientos.
- Una etapa de producción de concentrados de péptidos y aminoácidos (10) mediante el empleo de enzimas proteolíticas (12) que rompen las proteínas, solubilizándolas, en un proceso de hidrólisis enzimática (1 1 ), y transformando las proteínas en péptidos y aminoácidos de menor peso molecular que se pueden emplear en alimentación o como fertilizantes agrícolas de alto valor, a continuación la mezcla de reacción obtenida se debe separar mediante un proceso de filtración y/o centrifugación (13) dando un clarificado (14) rico en péptidos-aminoácidos y un concentrado contendiendo la biomasa residual (15). - Una etapa de producción de biodiesel a partir del concentrado (15) anterior mediante la cual se realiza la transesterificación (17) de los ácidos grasos presentes en la biomasa con ácido sulfúrico como catalizador y metanol como reactivo (16), obteniéndose los respectivos ésteres metílicos que lo constituyen. Transcurrida la reacción el biodiesel (20) se extrae de la mezcla de reacción mediante hexano (18), el cual se evapora posteriormente para obtener el biodiesel (20).
- Una etapa de producción de biogás, en la que la biomasa residual (21 ) de la etapa anterior se somete a un proceso de digestión anaerobia (22) por acción de bacterias metanogénicas, para la producción de biogás (23) a partir de la mezcla de reacción resultante (21 ), exenta de metanol y hexano, mediante la cual la materia carbonosa residual contenida en la misma se transforma en metano, hidrógeno y CO2.
2 - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 caracterizado por que en la etapa de producción de bioetanol (8) la sacarificación (6) de los carbohidratos se produce en condiciones de acidez en un rango de pH y temperatura moderados (pH= 1.5 - 2.5 T= 95 - 1 15°C) 3.- Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 ó 2 caracterizado por que la levadura empleada en la fermentación pertenece al género Saccharomices y tiene lugar durante 24 h. 4.- Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 ó 2 ó 3 caracterizado por que la etapa de fermentación alcohólica (7) empleado en la etapa de obtención de bioetanol (8) se realiza enfriando el concentrado hasta 30°C y ajusfando el pH hasta 8.
5. - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado por que la levadura se recupera mediante filtración y/o centrifugación para su reutilización, mientras que en la fase liquida quedan contenidos el bioetanol y restos de azucares sin metabolizar.
6. - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 caracterizado por que el bioetanol (8) producido se separa por destilación a vacío y posterior desecado mediante tamices moleculares.
7. - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 caracterizado por que el proceso de hidrólisis enzimática (1 1 ) se lleva a cabo a partir de la biomasa residual (9) en un tanque agitado a pH y temperatura controlados (pH= 7.7 - 8.1 T= 40 - 55°C), durante aproximadamente 4 h, en condiciones suaves y sin emplear productos tóxicos ni condiciones agresivas
8. - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 caracterizado por que el concentrado de péptidos y aminoácidos (10) se estabiliza mediante ajuste a pH ácido o alcalino para evitar su descomposición.
9. - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 caracterizado por que la transesterificación (17), se realiza en condiciones suaves sin el previo secado de la biomasa, empleando ácido sulfúrico al 2% y temperatura entre 90 - 1 10°C, durante 2 h
10. - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 caracterizado por que en la etapa de obtención del biodiesel (20), el metanol no empleado se retira de la mezcla de reacción mediante destilación a vacío.
1 1. - Proceso de valorización de microorganismos fotosintéticos para el aprovechamiento integral de la biomasa, según la reivindicación 1 caracterizado por que el proceso de digestión anaerobia (22) de la etapa de obtención de biogás se realiza en tanques cerrados en condiciones anaerobias a temperaturas entre 30-40°C, con un tiempo de residencia de aproximadamente 5-8 días,
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