WO2017146528A1 - 항암제에 의한 부작용 완화용 신규 펩타이드 및 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 - Google Patents

항암제에 의한 부작용 완화용 신규 펩타이드 및 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 Download PDF

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    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression

Definitions

  • the present invention relates to a novel peptide for mitigating side effects by an anticancer agent and a pharmaceutical composition comprising the same as an active ingredient, and more particularly, to bone marrow induced by an anticancer agent Including the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component having an effect of alleviating side effects such as damage, nerve damage or kidney damage, 1 to 5 amino acids added to the N-terminal or C-terminal of the peptide
  • the present invention relates to a linked polypeptide, a pharmaceutical composition for alleviating side effects by an anticancer agent comprising the same as an active ingredient, and a use and method thereof.
  • cancer causes death.
  • cancer treatment which accounts for most of the causes of death, includes surgery, radiation therapy, biotherapy and chemotherapy.
  • anticancer drugs used as chemotherapy intervene in the metabolic pathways of cancer cells and directly interact with DNA to block DNA replication, transcription, and translation processes, interfere with the synthesis of nucleic acid precursors, and inhibit cell division. Cytotoxicity against. Therefore, anticancer drugs cause fatal damage to normal cells when administered, resulting in bone marrow hematopoietic immunosuppression, hair loss, gastrointestinal disorders, liver, kidney toxicity, and so on.
  • Toxicity due to chemotherapy may be due to bone marrow destruction. Hypocytopenia of plate, red blood cells, hair loss due to hair follicle cell destruction, dysmenorrhea and male infertility due to side effects to ovaries and testicles, stomatitis, nausea and vomiting due to side effects from mucosal cell destruction of digestive organs Disorders, diarrhea symptoms, renal toxicity caused by tubular necrosis, peripheral neuritis and weakness caused by nervous system disorders, vascular disorders such as vascular pain and rash, and skin and nail discoloration.
  • Cisplatin which is used as an anticancer agent, is an effective chemotherapy agent for malignant tumors including testes, head and neck, ovaries, cervix, non-small cell tumors and various types of cancer.
  • Renal toxicity induced by cisplatin causes inflammatory reactions, direct microtubule toxicity, vascular disease, and oxidative stress (Ramesh and Reeves, 2002). Inflammatory reactions provide an important mechanism of renal toxicity induced by cisplatin (Davi s et al., 2001). Recent studies have reported that inflammation-inducing factors such as tumor necrosis factor-a (TNF-a), interleukin-6, and interleukin-1 ⁇ are associated with renal toxicity caused by cisplatin (Faubel et al., Ramesh and Reeves, 2002, 2004). The most common side effects of chemotherapy include nausea and vomiting. Nausea and vomiting vary depending on the anticancer drugs.
  • TNF-a tumor necrosis factor-a
  • interleukin-6 interleukin-6
  • interleukin-1 ⁇ interleukin-1 ⁇
  • Nausea and vomiting due to cisplatin administration which is frequently used for kidney and lung cancer, are very severe. In anorexia, vomiting is easily induced. Toxic to liver.
  • Various anti-emetic drugs are selected and combined according to clinical symptoms and used before and after chemotherapy, and vomiting can be successfully controlled by various paths and various time-of-day administration, but the quality of life is deteriorated.
  • Ondansetron used to suppress acute and delayed vomiting, causes allergic reactions, irregular heart rhythms, muscle spasms, secondary side effects that can't move, and metoclopramide is nerve hypersensitivity, breathing.
  • Diazepam (Di azepam) is part of bronchial pain, rash, hallucinations, etc. Action appears.
  • chemotherapy supplements are used for the purpose of alleviating the side effects of chemotherapy, increasing the efficacy of chemotherapy, increasing the survival rate of cancer patients and improving the quality of life, but chemotherapy supplements also cause secondary side effects.
  • Interferon and interleukin are excellent protein preparations with excellent antitumor and immunopotentiating effects.
  • Mesna TM which is used to prevent urine toxicity, has side effects such as nausea, vomiting, decreased appetite, gastrointestinal pain, diarrhea, fever, and dizziness. Aminfost ine TM Because of its antihypertensive action, continuous administration is not possible 24 hours before administration.
  • conventional techniques for mitigating the side effects of chemotherapy include:
  • Korean Laid-Open Patent Publication No. 2002-0015906 discloses a pharmaceutical composition comprising an extract of Gr if ola frondasa, which can suppress the side effects of an anticancer agent. It is disclosed to suppress renal toxicity, digestive toxicity, hematopoietic toxicity and the like caused by the administration of cisplatin, an anticancer agent.
  • Korean Patent Laid-Open Publication No. 2002-0015906 discloses a pharmaceutical composition comprising an extract of Gr if ola frondasa, which can suppress the side effects of an anticancer agent. It is disclosed to suppress renal toxicity, digestive toxicity, hematopoietic toxicity and the like caused by the administration of cisplatin, an anticancer agent.
  • 2004-0000757 discloses a herbal composition having an effect of inhibiting side effects of anticancer treatment, wherein the herbal composition has a dry weight ratio of 7-20 parts by weight of sucrose and 5-15 parts by weight, Angelica 5-15 parts, and Cheongung 5-15 It is composed of 5 parts by weight, 5 to 15 parts by weight, 3 to 10 parts by weight of cornus oil, 1.5 to 5 parts by weight of bark skin, 1.5 to 5 parts by weight of wolfberry, 0.5 to 2.0 parts by weight of safflower and 1 to 3 parts by weight of licorice.
  • 2002-0040532 discloses an antioxidant drink having a side effect inhibitory effect according to an anticancer therapy prepared by using a low molecular weight red ginseng saponin and a glutate (GMT) having an active oxygen inhibitory effect, and a method of preparing the same Doing.
  • the antioxidant drink exhibits excellent free radical scavenging ability and can suppress various side effects caused by free radicals.
  • Conventional anticancer drug side effects inhibitors are mostly active in the case of natural substances. In many cases, the powder is not clearly identified, and in the case of chemicals, the side effect of the desired anticancer agent is reduced, but it is pointed out as a problem that causes another toxicity. For example, to prevent cardiotoxicity of anthracycline-based drugs including doxorubicin
  • Dexrazoxane a derivative of ED hy 1 ened i am i ne t et r aacet ic acid, has been used, but transient thrombocytopenia, nausea, vomiting, liver failure and mutagenicity have been reported (Levine BS). et al. Cancer Treat Rep. 1980, vol. 64 (12), pp. 1211-1215; Von Hoff DD. etal. Cancer Treat Rep. 1981, vol. 65 (3-4), pp. 249-252; Whittaker , P. et al. Environ Mol Mutagen. 2001, vol. 38 (4), p.347-356; Levine, BS et al. Cancer Treat Rev. 1991, vol. 18 (4), pp.241-252) . Therefore, there is a need for the development of new substances to alleviate various side effects caused by anticancer drugs.
  • the present inventors have made intensive efforts to develop a drug that can alleviate the side effects of the anticancer agent, and as a result, the peptide having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 or 3 is caused by bone marrow damage, nerve damage or The present invention was completed by confirming that there is an effect of alleviating side effects such as kidney damage. Accordingly, it is an object of the present invention to provide a polypeptide comprising the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component, wherein 1 to 5 amino acids are additionally linked to the N-terminus or C-terminus of the peptide.
  • It is also an object of the present invention is to provide a polypeptide consisting of the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component, wherein 1 to 5 amino acids are additionally linked to the N-terminal or C-terminal of the peptide.
  • Another object of the present invention is a disease selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by an anticancer agent comprising the polypeptide as an active ingredient or It is to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of the condition.
  • Another object of the present invention is to provide a use for the preparation of a therapeutic agent for a disease or condition selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by the anticancer agent of the polypeptide.
  • Another object of the present invention to provide a method for treating a disease or condition selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by an anticancer agent, characterized in that the polypeptide is administered to an individual in need thereof in an effective amount.
  • an anticancer adjuvant comprising the poly3 ⁇ 4tide as an active ingredient.
  • the present invention includes a peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component, and provides a polypeptide in which 1 to 5 amino acids are additionally linked to the N-terminus or C-terminus of the peptide.
  • the present invention comprises a peptide consisting of the essential component of the peptide of SEQ ID NO: 1, provides a polypeptide in which 1 to 5 amino acids are additionally linked to the N-terminal or C-terminal of the peptide .
  • the present invention essentially consists of the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component in order to achieve the object of the present invention, a polypeptide wherein 1 to 5 amino acids are additionally linked to the N-terminal or C-terminal of the peptide To provide.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating a disease or condition selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by an anticancer agent comprising the polypeptide as an active ingredient. to provide.
  • the present invention provides a use for the preparation of a therapeutic agent for a disease or condition selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by the anticancer agent of the polypeptide.
  • the present invention is a disease selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by an anticancer agent, characterized in that the polypeptide is administered to an individual in need thereof.
  • the present invention provides an anticancer adjuvant comprising the polypeptide as an active ingredient.
  • the present invention includes a peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component, and provides a polypeptide in which 1 to 5 amino acids are additionally linked to the N-terminus or C-terminus of the peptide.
  • the present invention comprises a polypeptide consisting of the essential component of the 3 ⁇ 4 tide of SEQ ID NO: 1, and provides a polypeptide in which 1 to 5 amino acids are additionally connected to the N-terminus or C-terminus of the peptide.
  • the present invention consists essentially of the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component, and provides a polypeptide in which 1 to 5 amino acids are additionally linked to the N-terminus or C-terminus of the peptide.
  • polypeptide is characterized in that SEQ ID NO: 2, may comprise a polypeptide of SEQ ID NO: 3.
  • the peptide of the present invention and SEQ ID NO: 2 is a peptide consisting of an amino acid sequence in which Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro is linked to the peptide N-terminus of SEQ ID NO: 1, and the sequence
  • the peptide of No. 3 is a peptide consisting of an amino acid sequence in which Asp-Met-Ala-Arg-Tyr is linked to the C-terminus of Peptide of SEQ ID NO: 1.
  • the peptide of the present invention includes a specific sequence, and is a concept including a peptide with 1 to 50 amino acids additionally at the N- and / or C-terminal. It has not been reported previously that the peptide can improve the anti-cancer drug side effects, it will be disclosed for the first time in the present invention
  • the peptide of SEQ ID NO: 2 and 3 is a short fragment of neuropeptide Y (Neuropeptide Y, NPY, NCBI accesion No. P69101.1, SEQ ID NO: 6) consisting of 36 amino acids, one embodiment of the present invention According to the example, the peptide deganuro 3 ⁇ 4tide Y of SEQ ID NO: 2 and 3 showed better anti-cancer drug side effects.
  • the peptide represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1 consists of a total of 10 amino acids
  • the peptide represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 or 3 consists of a total of 15 amino acids, having a relatively short sequence It is very good in that it has fewer side effects, excellent drug efficacy, and relatively low production cost.
  • the polypeptide essentially comprising the peptide of SEQ ID NO: 1 of the present invention has a shorter amino acid sequence than neuropeptide Y, thereby minimizing immunogenicity, toxic side effects, etc. in human use, and is relatively easy to add. It can be easily mass-produced and cost-effective.
  • the small molecular weight has the advantage of being able to cross tissue barriers more quickly.
  • the peptide of the present invention essentially includes the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, and is understood as a concept including a functional equivalent of a peptide having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 or 3.
  • functional equivalent is meant a peptide that exhibits substantially homogeneous physiological activity with the peptide of SEQ ID NO: 2 or 3 above.
  • “Homogeneous bioactivity” refers to having an isomerization capability and having at least 60% amino acid sequence homology of at least 60%, preferably 703 ⁇ 4>, more preferably at least 90%.
  • “Functional Dong” also includes amino acid sequence variants in which some or all of the naturally occurring protein amino acids are substituted, or some of the amino acids are deleted or added. Substitutions of amino acids are preferably conservative substitutions. Examples of conservative substitutions of amino acids present in nature are Is the same; Aliphatic amino acids (Gly, Ala, Pro), hydrophobic amino acids (lie, Leu, Val), aromatic amino acids (Phejyr, Trp), acidic amino acids (Asp, G hi), basic amino acids (His, Lys, Arg, Gin, Asn ) And sulfur-containing amino acids (Cys, Met).
  • the peptide of the present invention can be prepared by a method known to those skilled in the art.
  • Such peptides can often be produced in prokaryotic or eukaryotic cells by expressing the polynucleotides encoding the peptide sequences of the invention as part of a larger polypeptide. Alternatively, such peptides can be synthesized by chemical methods.
  • the present invention is a pharmaceutical for the prevention or treatment of diseases or conditions selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by an anticancer agent comprising a polypeptide comprising the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component as an active ingredient Provide composition.
  • an anticancer agent comprising a polypeptide comprising the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component as an active ingredient
  • the term 'anticancer agent' refers to a chemotherapeutic agent used to treat malignant tumors, and most anticancer agents intervene in various metabolic pathways of cancer cells and mainly suppress the synthesis of nucleic acids to show anticancer activity. Means a drug.
  • Anticancer drugs use the difference in sensitivity to drugs between normal cells and cancer cells, which are relatively less toxic to normal cells and act more selectively on cancer cells, but because normal cells are damaged to some extent, side effects become worse. do. This is because the anticancer agent acts anywhere on fast dividing cells, so it does not only act on rapidly dividing cancer cells, but also bone marrow, gastrointestinal tract, and hair follicle cells, which are also fast dividing cells, are affected by the anticancer agent. Therefore, the common side effect of these drugs is temporary blood cell loss, nausea. Vagina, vomiting, diarrhea, loss of appetite, and hair loss will appear.
  • the anticancer agents currently used in cancer treatment are classified into six categories: alkylating agents, metabolic antagonists, antibiotics, mitosis inhibitors, hormonal agents and others according to biochemical mechanisms of action.
  • side effects of the anticancer agent include bone marrow damage, cytopenia due to bone marrow destruction, hair loss, menstrual irregularities, male infertility, stomatitis, vomiting, food swallowing disorders, digestive disorders, diarrhea, kidney damage, nerve damage, vascular disorders, skin or nails Discoloration, dyspnea, hearing loss, tinnitus, peripheral neuritis, convulsions, hypersensitivity reactions, cardiovascular reactions, neuromotor toxicity, neuroesthesia, myalgia, joint pain, nausea, fever, anemia, loss of appetite, weakness, nausea, constipation, fatigue , Infections, hematuria, proteinuria, allergies, abdominal cramps, cell necrosis, or tissue necrosis, without limitation.
  • the composition of the present invention may exhibit a mitigating effect on a disease or condition selected from the group consisting of bone marrow damage, neuropathy and kidney damage, which are side effects due to anticancer agents.
  • the bone marrow injury may be accompanied by symptoms such as leukopenia, platelets, erythrocytopenia due to bone marrow destruction.
  • the nerve injury includes peripheral neuritis, neuromotor toxicity, neurosensory toxicity, neuropathy, or neuropathic pain, and the like, without limitation.
  • the anticancer agents include cisplatin, doxorubicin, etoposide, pacl itaxel, doxetaxel, fluoropyrimidine, oxaliplatin, and oxaliplatin.
  • the anticancer agent may be cisplatin.
  • the anticancer agent may include ACTH producing tumor, acute lymphocytic or lymphoblastic leukemia, acute or chronic lymphocytic leukemia, acute nonlymphocytic leukemia, bladder cancer, brain tumor, breast cancer, cervical cancer, chronic myeloid leukemia, intestinal cancer, T-zone Lymphoma, Endometriosis, Esophageal cancer, Biliary bladder cancer, Ewing's sarcoma, Head and neck carcinoma, Tongue, Hopkins lymphoma, Kaposi's sarcoma, Kidney cancer, Liver cancer, Lung cancer, Mesothelioma, Multiple myeloma, Neuroblastoma, Non-Hopkin Lymphoma, osteosarcoma, ovarian cancer, neuroblastoma, mammary cancer, cervical cancer, prostate cancer, pancreatic cancer, colon cancer, penis cancer, retinoblastoma, skin cancer, stomach cancer, thyroid cancer, uterine cancer.
  • ACTH producing tumor acute lymphocytic or
  • the composition of the present invention can alleviate bone marrow damage, nerve damage or kidney damage caused by cisplatin administration.
  • Cisplatin is a chemotherapeutic agent for treating kidney cancer, and the drug is known to exhibit anticancer activity by inhibiting cell division. Tumor cells are characterized by uncontrolled cell proliferation and continually occurring. Treatment with cispulatin, which inhibits cell division of tumor cells, can prevent tumor cell proliferation in some cancers and may have anticancer effects. All. In some cases, it is known to reduce tumor cell proliferation as well as reduce the size of already existing tumor cells.
  • kidney toxicity (Cerosimo RJ, Ann. Pharm., 27: pp 438-441, 1993; Cavalli F. et al., Cancer Treat. Rep. , 62: pp 2125-2126, 1978; Pol lera CF et al. , J. Cl in. Oncol. , Pp. 318-319, 1987)
  • the term 'renal toxicity' is one of the side effects after administration of an anticancer agent, which includes a decrease in renal function, an increase in urea concentration in the blood, and an increase in the concentration of inflammatory factors in the kidney. Means status.
  • the degree of renal tubular damage caused by administration of cisplatin is alleviated by the administration of a peptide having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the peptide having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 or 3 was found to be effective in alleviating bone marrow damage or nerve damage caused by the administration of cisplatin.
  • the present inventors prepared a short fragment (SEQ ID NO: 4 and SEQ ID NO: 5) comprising a part of the amino acid sequence of neuropeptide Y in addition to the peptide of SEQ ID NO: 2 or 3 to evaluate the effect.
  • composition of the present invention may further include a pharmaceutically acceptable additive, and the pharmaceutically acceptable additive may include starch, gelatinized starch, microcrystalline salose, lactose, povidone, colloidal silicon dioxide and calcium hydrogen phosphate.
  • the pharmaceutically acceptable additive may include starch, gelatinized starch, microcrystalline salose, lactose, povidone, colloidal silicon dioxide and calcium hydrogen phosphate.
  • Lactose, Manni, Peeled, Araba rubber Pregelatinized starch, Corn starch, Powdered cellulose, Hydroxypropyl cellulose, Opadry, Sodium starch glycolate, Carnauba lead, Aluminum silicate, Stearic acid, Magnesium stearate, aluminum stearate, cala stearate, white sugar, dextrose, cattle Lerby and talc and the like can be used.
  • the pharmaceutically acceptable additive according to the present invention is preferably included in an amount of 0.01 to 90 parts by weight based on the composition, but is not limited thereto.
  • the composition of the present invention can be administered in a variety of oral and parenteral formulations during actual clinical administration, when formulated, diluents such as layering agents, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, surfactants, etc. that are commonly used Or excipients.
  • Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like. Such solid preparations include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose, and the like having a peptide having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • Oral liquid preparations include suspensions, solvents, emulsions, and syrups. Water, liquid paraffin, and other excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, may be used. have.
  • Formulations for parenteral administration may include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, suppositories.
  • non-aqueous solvents and suspensions propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injectable esters such as ethylate may be used.
  • injectables may include conventional additives such as solubilizers, isotonic agents, suspending agents, emulsifiers, stabilizers, and preservatives.
  • compositions of the present invention may be used in any physiologically acceptable carrier, excipient or stabilizer (Remington: The Science and Pract ice of Pharmacy, 19th Edion, Al fonso, R., ed, Mack Publishing Co. (Easton, PA: 1995)).
  • Acceptable carriers, excipients or stabilizers are nontoxic to recipients at the dosages and concentrations employed, and include buffers such as phosphoric acid, citric acid and other organic acids; Ascor Antioxidants, including formic acid; Low molecular weight (less than about 10 residues) polypeptides; Proteins such as serum albumin, gelatin or immunoglobulins; Hydrophilic polymers such as polyvinylpyridone; Amino acids such as glycine, glutamine, asparagine, arginine or lysine; Monosaccharides, disaccharides, and other carbohydrates including glucose mannose or dextrinol; Chelating agents such as EDTA; Sugar alcohols such as manny or sorbbi; Salt-forming counterions such as sodium; And / or nonionic surfactants such as tweenone, pluronics or polyethylene glycol (PEG).
  • buffers such as phosphoric acid, citric acid and other organic acids
  • Ascor Antioxidants including formic
  • the dosage of the pharmaceutical composition of the present invention to the human body may vary depending on the age, weight, sex, dosage form, health condition and degree of disease of the patient, and is generally 0.01-100 mg / kg / day, preferably 0.1-20 mg / kg / day, more preferably 1-5 mg / kg / day, but is not limited thereto. It may also be divided at regular intervals according to the judgment of the doctor or pharmacist.
  • the present invention provides an anticancer adjuvant comprising a polypeptide comprising the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component.
  • the anticancer adjuvant means improving the side effects exerted when the anticancer agent is administered, or enhancing the anticancer effect of the existing anticancer agent.
  • the adjuvant of the present invention may be administered simultaneously with the anticancer drug (simutaneous), separate (separate) or sequential (sequent i al).
  • the order of administration of the anticancer adjuvant according to the present invention that is, at which point in time at the same time, individually or sequentially, in the anticancer and anticancer adjuvant may be determined by a doctor or an expert. This order of administration can vary depending on many factors.
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer, comprising the anticancer adjuvant and an anticancer agent as an active ingredient.
  • the anticancer agent is cisplat in (cisplat in), doxorubicin (doxorubicin), etoposide, pacl itaxel, doxetaxel, fluoropyr imidine, oxaliplatin, campthotecan, belotecan, grape Podophyl lotoxin, vinblastine sulfate, cyclophosphamide, actinomycin, vincristine sulfate, methotrexate, bevacizumab bevacuzum ab, thalidomide, thai idomide, eriotinib, gefitinib, caraptothecin, tamoxifen, anasterozole, gleevec, 5- Fluorouracil (5-FU), Fluoxuridine, Leuprolide,
  • the anticancer adjuvant and the anticancer agent may be formulated in the form of a single composit ion or in the form of a separate composition.
  • the carrier, administration route, and the like, which may be additionally included in the pharmaceutical composition, are as described above.
  • the present invention includes the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component It provides a use for the manufacture of a therapeutic agent for a disease or condition selected from the group consisting of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage by an anticancer agent of the polypeptide.
  • the invention marrow hand by cancer which comprises administering to the "effective dose to an object that requires them to a composition comprising a polypeptide or a polypeptide comprising as an essential ingredient a peptide of the SEQ ID NO: 1, as an active ingredient
  • Provided is a method of treating a disease or condition selected from the group consisting of upper nerve injury and kidney injury.
  • the polypeptide is a peptide N-terminal of the amino acid further connected to the peptide N-terminal of the Tyr-Pn) -Ser-Lys-Pro to administer a polypeptide or a composition comprising the same as an active ingredient Can be.
  • the polypeptide may be SEQ ID NO: 2 or 3, the composition may be an anticancer adjuvant.
  • the anticancer adjuvant may be administered in combination with an anticancer agent, and the anticancer adjuvant may be administered simultaneously with the anticancer drug (sinmtaneous), separately (sparate), or sequentially.
  • the anticancer adjuvant and the anticancer agent are as described above.
  • the 'effective amount' of the present invention when administered to an individual, refers to an amount that shows an effect of improving, treating, preventing, detecting, or diagnosing bone marrow damage, nerve damage, and kidney damage by an anticancer agent.
  • a mammal especially an animal including a human, and may be a cell, tissue, organ or the like derived from the animal.
  • the subject may be a patient in need of the effect.
  • the 'treatment' of the present invention is a symptom of bone marrow damage, nerve damage and kidney damage caused by an anticancer agent or bone marrow damage, nerve damage and kidney damage related disease caused by an anticancer agent or bone marrow damage, nerve damage and kidney damage related disease caused by an anticancer agent
  • To improve the condition of the disease which may include treating, substantially preventing, or ameliorating the condition, including bone marrow damage caused by an anticancer agent, nerve damage and kidney damage, or bone marrow injury caused by an anticancer agent. Or alleviating, healing or preventing one or most of the symptoms resulting from neurological and kidney injury related diseases.
  • the term 'compr ising' of the present invention means 'containing' or 'features' It is used in the same way as, and does not exclude additional component elements or method steps, etc. which are not mentioned in the composition or method.
  • essential ly ly consi sting of includes a component element or step described in the scope of the composition or method, as well as a component element or step that does not substantially affect its basic properties, and the like. Means that.
  • composition comprising a polypeptide containing the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component of the present invention as an active ingredient has the effect of alleviating side effects caused by the administration of an anticancer agent, in particular bone marrow damage, nerve damage and kidney damage It can be used as an anticancer adjuvant that can alleviate the side effects of anticancer drugs and enhance the anticancer effects.
  • an anticancer agent in particular bone marrow damage, nerve damage and kidney damage It can be used as an anticancer adjuvant that can alleviate the side effects of anticancer drugs and enhance the anticancer effects.
  • FIG. 1 is a diagram showing that the neuropathy induced by cisplatin is alleviated by SEQ ID NOs: 2 and 3.
  • FIG. 2 is a diagram showing that myeloid apoptosis induced by cisplatin is alleviated by the peptides of SEQ ID NOs: 2 and 3.
  • FIG. 2 is a diagram showing that myeloid apoptosis induced by cisplatin is alleviated by the peptides of SEQ ID NOs: 2 and 3.
  • FIG. 3 is a diagram showing that the reduction of myeloid hematopoietic stem cells induced by cisplatin is inhibited by the peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3.
  • FIG. 4 is a diagram showing that the reduction of nerve fibers in the bone marrow by cispulatin is inhibited by the peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3.
  • FIG. 6 is a diagram showing that renal toxicity by cisplatin is alleviated by peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3.
  • FIG. 6 is a diagram showing that renal toxicity by cisplatin is alleviated by peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3.
  • mice Male or female C57BL / 6 from 6 to 8 weeks of age was purchased from the Jackson laboratory. Animals were divided into experimental groups using the block randomizat ion method. To remove the polarization, the inspectors were blinded to data collection and analysis. Mice were reared under 12 hour night-day cycles and under free access to water and feed pellets. All mouse studies were approved by Kyungpook National University Animal Ethics Committee.
  • Cisplatin (Enzo; 10 mg / kg per week) was used to induce sensory nervous system (SNS) damage. Mice were euthanized after intraperitoneal infusion (i.p) of cisplatin for 7 weeks. In order to confirm whether the peptides of SEQ ID NOs: 2 to 6 (50 y g / kg) could alleviate the anticancer side effects from cisplatin, the combination was administered daily for 7 weeks, which is the cisplatin treatment period.
  • hot-plate tests were conducted.
  • the hotplates were maintained at 50 ° C. and each mouse was placed at the end of the heated surface and the time to first nocicept ion, ie jump or foot lick, was measured. The cutoff time was 60 seconds. Between measurements, the heated surface was wiped with detergent and ethanol and the temperature was maintained at 50 ° C.
  • Bone marrow tissue of the mouse was cut to a thickness of 5 ⁇ using mi crotom and stained. TUNEL assays were performed using In Situ Cel l Detect ion Kit, Fluorescein (Roche Diagnost ic) according to manufacturer's instructions. Bone Marrow Nervous System Destruction To determine the degree, the tissue of the mouse was stained with Tyrosine hydroxylase (rabbit, 1: 250, Milipore). In addition, CD31 (mouse, 1:50, BD Bioscience) staining was performed on the bone marrow tissue of the mouse to confirm the degree of destruction of the bone marrow endothelial cells.
  • Fluoview SV1000 imaging software (Olympus FV1000, And a laser scanning confocal microscope equipped with Japan) or an Olympus BX51 microscope. Met amor ph sof tware (Molecular Devices) was used to quantify the percentage of area of stained area to area of total tissue.
  • Bone marrow was isolated from the tibia and femur of each mouse.
  • Red blood cells (RBCs, Red blood cells) were hemolyzed at 4 ° C for 5 minutes using 0.15 M NH 4 C1 (STEMCELLTechnologies), washed with PBS (Gibco) and counted using a hemocytometer.
  • Lin using magnetic d ⁇ letion using biotinylated lineage-specific antibodies (CD5, CD45R, CDllb, Gr-1, and Ter-119) to detect HSCs, MSCs, or osteoblasts + Cells were removed and subsequently reduced using MACs beads combined with monoclonal anti-biotin (Miltenyi Biotec).
  • Chemotherapy causes acute bone marrow damage and impairs hematopoietic stem cell (HSC) function or bone marrow regeneration in the bone marrow.
  • anticancer drugs such as ci spl at in reduce sympathetic neuropathy by reducing the expression of Th fibers in the bone marrow.
  • the present inventors evaluated whether the peptide having the amino acid sequence of SEQ ID NOS: 2 to 5 can prevent or treat neuropathy or bone marrow dysfunction induced by anticancer drug treatment.
  • the effect of the entire sequence of neuropeptide Y (NPY) of SEQ ID NO: 6 as a positive control group was also evaluated.
  • mice were intraperitoneally injected with cisplatin once a week for a total of seven weeks and peptides having an amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 to SEQ ID NO: 6 were injected intraperitoneally each day for seven weeks for seven weeks during injection of cisplatin. 1A and 2A).
  • the inventors conducted a hot-plate test and increased neuropathy in mice injected with cisplatin was used to detect peptides of SEQ ID NO: 2 and SEQ ID NO: 3. Significant decrease was observed in the mice injected (FIG. IB, p ⁇ 0.05).
  • Bone marrow apoptosis is one of the pathogenesis of bone marrow damage caused by cispulatin treatment.
  • Treatment with anticancer agents causes acute bone marrow damage and a decrease in the number of hematopoietic stem cells in the bone marrow.
  • LSK eel I s a hematopoietic stem progenitor cell labeled with Lineage- Sca-1 + c-ki t +, reduced by cisplatin It was alleviated by the peptides of numbers 2 and 3 (Fig. 3A, p ⁇ 0.05).
  • mice injected with peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3 compared to mice injected with Th (Tyrosine hydroxylase) reaction, which represents nerve fibers in bone marrow, were injected with cisplatin 4A and 4B, p ⁇ 0.05).
  • Th Tethyrosine hydroxylase
  • Endothelial cell marker CD31 staining was performed to confirm whether endothelial cell damage in bone marrow could be alleviated by peptides of SEQ ID NOs: 2 and 3 during bone marrow injury by cisplatin. As a result, it was confirmed that the peptides of SEQ ID NOs: 2 and 3 inhibit not only the nerve fibers in the bone marrow but also the reduction of endothelial cells in the bone marrow (FIGS. 5A and 5B, p ⁇ 0.05). These results indicate that the peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3 have a moderating effect on the reduction of endothelial cells in cispulatin-induced bone marrow.
  • Kidney toxicity is another side effect of anticancer drugs. Histological analysis using H & E staining was performed to determine whether this nephrotoxicity was alleviated by the peptides of SEQ ID NOs: 2 and 3. As a result, it was confirmed that apoptosis was increased in tubule cells in the neocortex by cispulatin treatment, which was reduced by the peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3 (Figs. 6A and 6B, p ⁇ 0.05). These results indicate that the peptides of SEQ ID NOS: 2 and 3 have a protective effect against cisplatin-induced kidney failure.
  • the renal toxicity alleviating effect of SEQ ID NO: 3 showed the same or better effect than the entire sequence of NPY, while SEQ ID NO: 4 and 5 was confirmed that the effect is not great (Fig. 6).
  • the results essentially include the peptide of SEQ ID NO.
  • Anticancer agents comprising the polypeptides of SEQ ID NO: 2 and SEQ ID NO: 3, which may be able to alleviate bone marrow damage, neurotoxicity and nephrotoxicity, which are side effects caused by cisplatin, Compared better.
  • the peptides of SEQ ID NOs: 2 and 3 have an amino acid sequence shorter than the entire NPY sequence, immunogenicity, toxic side effects can be minimized, and they can be synthesized relatively easily, which facilitates mass production and reduces costs. It can bring the effect of, and has the advantage of being able to cross the tissue barrier more quickly due to the small molecular weight.
  • a peptide having the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 or 3, 5'-chloro-3, 2'-dihydroxychalcone or 5'-chloro-2,3'-dihydroxychalcone; 250 g of hydrochloride It was mixed with 175.9 g of lactose, 180 g of potato starch, and 32 g of colloidal silicic acid. 103 ⁇ 4 gelatin solution was added to the mixture, which was then ground and passed through a 14 mesh sieve. It was dried and the mixture obtained by adding 160 g of potato starch, 50 g of talc and 5 g of stearic acid magnesium to tablets.
  • Composition comprising a polypeptide containing the peptide of SEQ ID NO: 1 as an essential component as an active ingredient has an effect of alleviating side effects caused by the administration of an anticancer agent, in particular bone marrow damage, nerve damage and kidney damage, It can be usefully used as an anticancer adjuvant that can alleviate side effects and enhance anticancer effects.

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Abstract

본 발명은 항암제에 의한 부작용 완화용 신규 펩타이드 및 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물에 관한 발명으로, 보다 상세하게는, 항암제에 의해 유발되는 골수손상, 신경손상 또는 신장손상 등의 부작용을 완화하는 효과가 있는 서서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하며, 상기 펩타이드의 Ν-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적으로 연결된 폴리펩타이드, 이를 유효성분으로 포함하는 항암제에 의한 부작용 완화용 약학적 조성물, 이의 용도 및 방법에 관한 것이다. 본 발명의 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하는 폴리펩타이드를 유효성분으로 포함하는 조성물은 항암제의 투여에 의하여 유발되는 부작용, 특히 골수손상, 신경손상 및 신장손상을 완화시키는 효과를 발휘하는 바, 항암제의 부작용을 완화하고 항암제 효과를 높일 수 있는 항암 보조제로서 유용하게 활용될 수 있다.

Description

【명세서】
【발명의 명칭】
항암제에 의한 부작용 완화용 신규 펩타이드 및 이를 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물
【기술분야】
본 출원은 2016년 2월 26일에 출원된 대한민국 특허출원 제 10-2016-0023016 호 및 2016년 2월 26일에 출원된 대한민국 특허출원 제 1(3-2016-0023019호를 우선권 으로 주장하고， 상기 명세서 전체는 본 출원의 참고문헌이다. 본 발명은 항암제에 의한 부작용 완화용 신규 펩타이드 및 이를 유효성분으 로 포함하는 약학적 조성물에 관한 발명으로， 보다 상세하게는， 항암제에 의해 유 발되는 골수손상， 신경손상 또는 신장손상 등의 부작용을 완화하는 효과가 있는 서 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하며， 상기 펩타이드의 N-말 단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적으로 연결된 폴리펩타이드, 이 를 유효성분으로 포함하는 항암제에 의한 부작용 완화용 약학적 조성물， 이의 용도 및 방법에 관한 것이다.
[배경기술】
최근 전체 사망원인 중 암으로 사망하는 원인은 . 4명 중 1명 꼴로 이는 계속 증가하는 추세에 있다. 이와 같이 사망원인의 대부분을 차지하는 암의 치료방법으 로는 외과수술， 방사선 요법， 생물요법 및 화학요법 등이 있다. 이 중에서 화학요 법으로 사용되는 항암제는 암세포의 대사경로에 개입하여 DNA와 직접 작용하여 DNA 의 복제， 전사, 번역과정을 차단하거나， 핵산 전구체의 합성을 방해하고， 세포의 분열을 저해함으로써 세포에 대한 세포독성을 나타낸다. 따라서 항암제는 투여시에 정상세포에도 치명적인 손상을 주어 골수조혈작용 면역억제, 탈모, 설 위장장 애， 간， 신장독성 등을 초래하므로 항암제에 의한 부작용을 최소화하면서 치료 효 과를상승시키기 위한 연구가 절실하다. 현재까지 항¾}제는 암에 대한 특이적 선택성이 없어서 치료적 효과와 독성효 과가 대부분 겹치는 특성을 보이며， 독성의 발생은 혈장 내에서 약물이 농축될 수 있는가 관련되어진다. 항암제 투여로 인한 독성은 골수 파괴로 인한 백혈구， 혈소 판， 적혈구 등의 혈구감소증, 모낭세포 파괴로 인한 탈모증상， 난소와 고환에 대한 부작용으로 월경불순 및 남성불임의 원인， 소화기의 점막 세포 파괴로 인한 부작용 으로 구내염, 오심구토 및 음식 연하장애와 소화 장애， 설사증상， 세뇨관 괴사에 의한 신장독성， 신경계 장애로 발생하는 말초 신경염과 쇠약감， 혈관통증 및 발진 등의 혈관장애， 피부 및 손발톱 변색 등의 다양한부작용이 나타난다. 한편， 항암제로 사용하는 시스플라틴은 고환， 두경부， 난소， 자궁경부， 비소 세포 종양 및 다양한 유형의 암을 포함한 악성 종양의 효과적인 화학요법 제제이다
(Pala and Dong, 2008； Wang and Lippard, 2005) . 그러나， 암 환자의 25~35¾>는 시 스플라틴의 1회투여 후 급격한 신장기능의 저하를 경험한다 (Luke et al . , 1992) . 신장기능의 가장 큰 부작용은 신장기능의 급격한 저하이다 (Ri es and lastersky, 1986) . 많은 연구에서 항염증제제나 항산화제가 시스플라틴으로 유발되는 신장독성 에 효과가 있는 것으로 보고되었다 (Aj i th et al . , 2007； Fat i ma et al . , 2007; Kuhad et al . , 2007) . 시스플라틴에 의해 유도되는 신장독성은 염증반웅， 직접적 미세소관 독성, 혈관질환， 산화스트레스 둥을 유발한다 (Ramesh and Reeves , 2002) . 염증반웅은 시스플라틴으로 유발되는 신장독성의 중요한 기전을 제공한다 (Davi s et al . , 2001) . 최근 연구결과에서는 종양괴사인자 - a (TNF- a ) , 인터루킨 -6 및 인터루 킨 -1 β와 같은 염증유발인자들이 시스플라틴에 의해 발생하는 신장독성과 관련이 있다고 보고되었다 (Faubel et al . , 2007； Ramesh and Reeves , 2002 , 2004) . 가장 흔한 항암제 투여에 의한 부작용으로 구역 , 구토가 있다. 항암제에 따 라 오심, 구토를 일으키는 정도가 다양한데， 신장암 및 폐암에 많이 쓰이는 시스플 라틴 투여로 인한 오심， 구토는 매우 심한 편에 속하며, 식욕부진 상태에서는 구토 의 유발이 쉽게 일어나고， 특히 신장과 간장에 독성을 나타낸다. 다양한 항구토 약 물이 임상증상에 따라 선택, 배합되어 항암요법 전후로 사용되고 있고， 다양한 경 로, 다양한 시간대 투여로 구토를 성공적으로 조절할 수 있으나， 삶의 질을 많이 저하시키고 있다. 급성 및 지연구토의 억제를 위하여 사용되는 온단세트론 (ondansetron)은 알 러지반웅， 불규칙한 심장박동, 근육경련， 몸을 움직일 수 없는 2차적 부작용을 유 발하며， 메토클로프라미드 (metoclopramide)는 신경과민，호흡곤란, 불면증， 심장발 작둥의 부작용이 있으며， 디아제팜 (Di azepam)은 기관지 통증， 발진, 환각 등의 부 작용이 나타난다. 또한， 항암제 부작용 완화， 항암치료의 효능 증가， 암환자의 생존율 증가 및 삶의 질 향상 등 목적으로 다양한 항암치료 보조제가 사용되나， 항암치료 보조제 역시 2차적인 부작용을 유발한다. 항종양작용 및 면역증강작용이 뛰어난 인터페론 ( interferon)， 인터루킨 ( inter leukin) 둥은 단백질 제제로서 가격이 비싸다는 단점 이 있다. 요독성 예방을 위하여 사용하는 메스나 (Mesna™)는 메스꺼움， 구토， 식욕 감소， 위장통증， 설사, 발열， 현기증 등의 부작용을 보이며, 자유기 청소작용을 하 는 아민포스틴 (Aminfost ine™)은 항고혈압성 작용으로 인해 투여 후 24시간 이전에 연속적인 투여가 불가능하다. 이외에， 항암 치료의 부작용을 완화시키기 위한 종래의 기술을 살펴보면 다 음과 같다:
대한민국공개특허 제 2002-0015906호는 항암제의 부작용을 억제할 수 있는 잎새 버섯 (Gr i f ola frondasa) 추출물을 포함하는 약제학적 조성물을 개시한 것으로 서， 보다 자세하게는 잎새 버섯 추출물이 현재 임상에서 널리 사용되고 있는 항암 제인 시스플라틴의 투여에 의해 야기되는 신장 독성， 소화기 독성， 조혈기의 독성 등을 억제함을 개시하고 있다. 대한민국공개특허 제 2004-0000757호는 항암치료 부작용을 억제하는 효능을 가진 한약재 조성물을 개시한 것으로서，상기 한약재 조성물은 건조중량비로 숙지황 7 내지 20 중량부， 당귀 5 내지 15 중량부, 천궁 5 내지 15 중량부， 백작약 5내지 15 중량부， 산수유 3 내지 10 증량부, 목단피 1.5 내지 5 중량부， 구기자 1.5 내지 5중량부， 홍화 0.5 내지 2.0중량부 및 감초 1 내지 3중량부로 이루어져 있다. 대한민국공개특허 제 2002-0040532호는 저분자화된 홍삼사포닌과 활성 산소 억제 효과를 갖는 글루메이트 (Glumate ,GMT)를 포함하여 제조된 항암 요법에 따른 부작용 억제 효과를 갖는 항산화 음료 및 그 제조방법을 개시하고 있다. 상기항산 화 음료는 우수한 자유 라디칼 소거능을 발휘하여 자유 라디칼에 의해 발생되는 여 러 가지 부작용을 억제할수 있다. 종래에 밝혀진 항암제 부작용 억제제는 천연물질인 경우에는 대부분 활성성 분이 뚜렷하게 밝혀지지 않은 것이 많고， 화학물질인 경우에는 목적하는 항암제의 부작용은 감소시키지만 또 다른 독성을 일으키는 것이 문제점으로 지적되고 있다. 일례로 독소루비신을 포함한 안트라사이클린계 약물의 심장독성을 방지하기 위하여
EDTA( et hy 1 ened i am i ne t et r aacet i c acid)의 유도체인 텍스라존 (dexrazoxane) 등이 사용되고 있으나 일시적인 혈소판감소증， 오심， 구토， 간기능 장애， 돌연변이원성 이 보고되고 있다 (Levine B.S. et al . Cancer Treat Rep. 1980, vol.64(12), pp.1211-1215； Von Hoff DD. etal. Cancer Treat Rep. 1981， vol.65(3-4), pp.249- 252； Whittaker, P. et al. Environ Mol Mutagen. 2001, vol .38(4) , p.347-356； Levine, B.S. et al. Cancer Treat Rev. 1991, vol.18(4), pp.241-252). 따라서， 항암제에 의해 유발되는 다양한 부작용들을 완화하기 위한 새로운 물질의 개발이 필요한 상황이다.
【발명의 상세한설명】
【기술적 과제】
이에， 본 발명자들은 상기와 같은 항암제의 부작용을 완화할 수 있는 약제의 개발을 위하여 예의 노력한 결과, 서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열을 갖는 펩타 이드가 항암제 투여에 의해 유발되는 골수손상， 신경손상 또는 신장손상 등의 부작 용을 완화하는 효과가 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다. 따라서， 본 발명의 목적은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하며， 상가펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가 적으로 연결된 폴리펩타이드를 제공하는 것이다.
또한 본 발명의 목적은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 구 성되며， 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적 으로 연결된 폴리펩타이드를 제공하는 것이다.
또한본 발명의 목적은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 필 수적으로 구성되며, 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노 산이 추가적으로 연결된 폴리펩타이드를 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 폴리펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항암제 에 의한 골수손상, 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 폴리펩타이드의 항암제에 의한 골수손상， 신경 손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태 치료제 제조를 위한 용도를 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 폴리펩타이드를 이를 필요로 하는 개체에 유효 량으로 투여하는 것을 특징으로 하는 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손 상으로 이루어진 군에서 선택된 질환또는 상태 치료 방법을 제공하는 것이다. 본 발명의 다른 목적은 상기 폴리 ¾타이드를 유효성분으로 포함하는 항암 보 조제를 제공하는 것이다.
【기술적 해결방법】
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하며， 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아 미노산이 추가적으로 연결된 폴리펩타이드를 제공한다.
또한본 발명의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 구성되며, 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적으로 연결된 폴리펩타이드를 제공한다.
또한 본 발명의 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 필수적으로.구성되며， 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단 에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적으로 연결된 폴리펩타이드를 제공한다. 본 발평의 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 상기 폴리펩타이드를 유 효성분으로 포함하는 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환또는 상태의 예방또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 상기 폴리펩타이드의 항 암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또 는 상태 치료제 제조를 위한용도를 제공한다. 본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 상기 폴리펩타이드를 이 를 필요로 하는 개체에 유효량으로 투여하는 것을 특징으로 하는 항암제에 의한 골 수손상， 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태 치료 방법을 제공한다. 본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 상기 폴리펩타이드를 유 효성분으로 포함하는 항암보조제를 제공한다. 이하본 발명을 상세히 설명한다. 본 발명은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하며， 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적으로 연결된 폴리펩타이드를 제공한다.
또한 본 발명은 서열번호 1의 ¾타이드를 필수적인 구성성분으로 구성되며， 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적으로 연 결된 폴리펩타이드를 제공한다.
또한본 발명은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 필수적으로 구성되며， 상기 펩타이드의 N-말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가 적으로 연결된 폴리펩타이드를 제공한다. 본 발명의 상기 서열번호 1의 펩타이드는
Asp-Asn-Pn)-Gly-GIu-Asp-AIa-Pro-AIa-GIu의 아미노산 서열로 이루어진 펩타 이드이다ᅳ 또한， 상기 특정 서열을 필수적으로 포함하며， N 말단 또는 C 말단에 1 내지 5개의 아미노산이 연결된 펩타이드이며， 바람직하게는 5개의 아미노산이 연결 된 펩타이드 일 수 있으며， 가장 바람직하게는 N-말단에 추가적으로 Tyr-Pro-Ser- Lys-Pro인 아미노산이 연결될 수 있다. 본 발명에서 상기 폴리펩타이드는 서열번호 2인 것을 특징으로 하며， 서열번 호 3인 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 본 발명와 상기 서열번호 2의 펩타이드는 서열번호 1의 펩타이드 N-말단에 Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro이 연결된 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드이고, 상기 서열 번호 3의 펩타이드는 서열번호 1의 펩타이드 C-말단에 Asp-Met-Ala-Arg-Tyr이 연결 된 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드이다. 또한， 본 발명의 상기 펩타이드는 상 기 특정 서열을 포함하며， N 말단 및 /또는 C 말단에 1 내지 50개의 아미노산이 추 가로 포 된 펩타이드를 포함하는 개념이다. 상기 펩타이드가 항암제 부작용을 개 선시킬 수 있다는 것에 대해서는 종래 보고된 바 없으며， 본 발명에서 최초로 공개 하는 것이다
한편， 상기 서열번호 2 및 3의 펩타이드는 36개의 아미노산으로 이루어져 있 는 뉴로펩타이드 Y (Neuropept ide Y , NPY , NCBI accesion No . P69101.1 , 서열번호 6)의 짧은 단편으로, 본 발명의 일실시예에 따르면 상기 서열번호 2 및 3의 펩타이 드가뉴로 ¾타이드 Y보다 더 우수한항암제 부작용 완화효과를 나타내었다. 본 발명에서 서열번호 1의 아미노산 서열로 표시되는 펩타이드는 총 10개의 아미노산으로 이루어져 있고， 서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열로 표시되는 펩타 이드는 총 15개의 아미노산으로 이루어져 있으며， 상대적으로 짧은 서열을 갖기 때 문에 부작용이 적고 약효가 우수하면서도 생산 단가가 상대적으로 낮다는 점에서 매우 우수하다. 뿐만 아니라， 본 발명의 상기 서열번호 1의 펩타이드를 필수적으로 포함하는 폴리펩타이드는 뉴로펩타이드 Y보다 아미노산 서열이 짧기 때문에 인체에 이용하는 데 있어서 면역원성， 독성 부작용 등을 최소화시킬 수 있으며， 상대적으로 쉽게 합 성이 가능하여 대량생산이 용이하고 비용절감의 효과를 가져올 수 있다. 또한， 작 은 분자량으로 인해 좀 더 빠르게 조직 장벽을 넘나들 수 있다는 장점이 있다. 본 발명의 상기 펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열을 필수적으로 포함 하며， 서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드의 기능적 동등물을 포 함하는 개념으로 이해된다. "기능적 동등물" 이란 상기 서열번호 2 또는 3의 펩타 이드와 실질적으로 동질의 생리활성을 나타내는 펩타이드를 의미한다. "동질의 생 리활성" 이란 이성화 능력이 있으며， 적어도 60% 이상의， 바람직하게는 70¾>， 더욱 바람직하게는 90%이상의 아미노산 서열 상동성을 갖는 것을 말한다. 또한 "기능적 동둥물 "에는 천연형 단백질 아미노산 중 일부 또는 전부가 치환되거나， 아미노산의 일부가 결실 또는 부가된 아미노산 서열 변형체가 포함된다. 아미노산의 치환은 바 람직하게는 보존적 치환이다. 천연에 존재하는 아미노산의 보존적 치환의 예는 다 음과 같다; 지방족 아미노산 (Gly, Ala, Pro), 소수성 아미노산 (lie, Leu, Val), 방 향족 아미노산 (Phejyr, Trp), 산성 아미노산 (Asp, G hi)， 염기성 아미노산 (His, Lys, Arg, Gin, Asn) 및 황함유 아미노산 (Cys, Met). 본 발명의 상기 펩타이드는 당해 분야의 숙련가가 공지된 방법에 의하여 제 조할 수 있다. 이러한 펩타이드는， 흔히 보다 큰 폴리펩타이드의 일부로서 본 발명 의 펩타이드 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 발현시켜 원핵 또는 진핵 세 포에서 생성시킬 수 있다. 다른 방법으로는, 이러한 펩타이드는 화학적 방법에 의 해 합성할 수 있다. 재조합 숙주내의 이종성 단백질의 발현， 폴리펩타이드의 화학 적 합성 및 시험관내 전사를 위한 방법은 당해 분야에 익히 공지되어 있으며 문헌 ( 참조 문헌 : Maniat is et al . , Molecular Cloning: A Laboratory Manual (1989) , 2nd Ed. , Cold Spr in Harbor , N.Y.； Berger and Kimmel , Methods in Enzymology, Volume 152, Guide to Molecular Cloning Techniques (1987), Academic Press, Inc., San Diego, Calif.； Merrif ield, J. (1969) J. Am. Chem. Soc. 91： 501； Chaiken I.M. (1981) CRC Crit. Rev. Biochem. 11： 255； Kaiser et a 1.(1989) Ann. Rev. Biochem. 57:957; and Offord, R.E. (1980) Semisynthetic Proteins, Wiley Publishing)에 추가로 기재되어 있다. 본 발명은 상기 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하는 폴리펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장 손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태의 예방 또는 치료용 약학적 조성 물을 제공한다. 본 발명에서 본 발명의 용어 '항암제 '란 악성종양을 치료하기 위해 사용되는 화학요법제를 총칭하는 것으로, 대부분의 항암제는 암세포의 각종 대사경로에 개입 하여 주로 핵산의 합성을 먹제하여 항암활성을 나타내는 약제를 의미한다. 항암제 는 정상세포와 암세포간의 약에 대한 감수성의 차를 이용하여， 정상세포에 대한 독 성은 비교적 적고， 암세포에 대해서는 보다 선택적으로 작용하지만， 정상세포도 어 느정도의 손상을 받기 때문에 부작용이 나파나게 된다. 이는 항암제가 분열이 빠른 세포에는 어디라도 작용하는 성질이 있기 때문에 빨리 분열하는 암세포에만 작용하 는 것이 아니라 역시 분열이 빠른 정상세포인 골수， 위장관， 모근세포도 항암제의 영향을 받게 된다. 따라서 이런 약의 공통된 부작용으로 일시적인 혈구감소， 구역 질， 구토， 설사， 식욕감퇴, 탈모 등이 나타나게 된다. 현재 암치료에 사용되고 있 는 항암제는 생화학적인 작용기전에 따라 알킬화제ᅳ 대사길항제， 항생물질， 유사분 열 억제제， 호르몬제 및 기타의 6개의 범주로 분류하고 있다. 상기 항암제의 부작용의 예로는 골수 손상， 골수 파괴로 인한 혈구감소증， 탈모， 월경불순， 남성불임， 구내염， 구토， 음식 연하장애， 소화 장애， 설사， 신장 손상， 신경 손상， 혈관장애, 피부 또는 손발톱 변색, 호흡곤란， 청력소실， 이명， 말초신경염， 경련, 과민반응， 심혈관계반웅， 신경운동독성, 신경감각동성， 근육통， 관절통,오심, 발열, 빈혈， 식욕 부진, 무력감, 메스꺼움， 변비, 피로， 감염， 혈뇨, 단백뇨, 알레르기, 복부경련， 세포괴사， 또는 조직 괴사가 있으며， 이를 제한하지 않는다. 특히 바람직하게 본 발명의 조성물은 항암제로 인한 부작용인 골수 손상， 신경장애 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태에 대한 완화 효 과를 나타낼 수 있다. 상기 골수 손상은 골수 파괴로 인한 백혈구， 혈소판， 적혈구둥의 혈구감소 증 등의 증상을 동반할 수 있다. 상기 신경손상은 말초신경염， 신경운동독성， 신경 감각독성， 신경병증， 또는 신경병증성 통증 등을 포함하며, 그 종류를 제한하지 않 는다. 상기 항암제의 예로서， 시스플라틴 (cisplatin), 독소루비신 (doxorubicin), 에토포사이드 (etoposide), 파클리탁샐 (pacl itaxel)， 도세탁샐 (doxetaxel), 불소 피리미딘 (fluoropyrimidine), 옥살리플라틴 (oxalplat in)， 캄토테칸 (campthotecan), 벨로테칸 (Belotecan), 포도필록특신 (podophyllotoxin) , 황산빈 블라스틴 (vinblastine sulfate), 사이클로포스파마이드 (cyclophosphamide), 악티 노마이신 (actinomycin), 빈크리스틴황산염 (vincristine sulfate), 메토트렉세이 트 (methotrexate), 베바시주맙 (bevacuzum ab), 탈리도마이드 (thai idomide) , 엘로 티닙 (eriotinib), 게피티닙 (gefitinib), 캠토세신 (caraptothecin)， 타목시펜 (Tamoxifen), 아나스테로졸 (Anasterozole)， 글리백 (Gleevec), 5-플루오로우라실 (5-FU), 플록슈리딘 (Floxuridine), 류프로리드 (Leuprolide), 플로타미드 (Flutamide), 졸레드로네이트 (Zoledronate)， 빈크리스틴 (Vincrist ine)， 젬시타빈 (Gemcitabine), 스트랩토조토신 (Streptozocin)， 카보플라틴 (Carboplatin)， 토포테 칸 (Topotecan), 이리노테칸 (Irinotecan)， 비노렐빈 (Vinorelbine) , 히도록시우레아 (hydroxyurea), 발루비신 (Valrubicin)， 레티노익산 (retinoic acid), 메클로레타민 (Meclorethamine), 클로람부실(( 10^1111311 1)， 부술판 (Busulfan)， 독시플루리단 (Doxifluridine), 빈블라스틴 (Vinblast in)， 마이토마이신 (Mitomycin)， 프레드니손 (Prednisone), 테스토스테론 (Testosterone)， 미 S산트론 (Mitoxantron) , 아스피린 (aspirin), 살리실레이트 (salicylates)， 이부프로펜 ( ibuprof en)， 나프로센 (naproxen) , 페노프로펜 (fenoprofen) , 인도메타신 (indomethacin)， 페닐부타존 (phenyl tazone) , 시클로포스파미드 (cyclophosphamide)， 메클로에타민
(mechloretharaine) , 덱사메타손 (dexamethasone)， 프레드니솔론 (prednisolone)， 셀 레콕시브 (celecoxib), 발데콕시브 (valdecoxib)， 니메슐리드 (nimesulide), 코르티손 (cortisone) 또는 코르티코스테로이드 (corticosteroid) 등이 있으며， 화합물， 호르 몬제， 항체 등 그 종류를 제한하지 않는다. 가장 바람직하게， 상기 항암제는 시스 플라틴일 수 있다. 또한， 상기 항암제는 ACTH 생성 종양， 급성 림프구성 또는 림프아구성 백혈 병 급성 또는 만성의 림포구성 백혈병， 급성 비림프구성 백혈병 , 방광암， 뇌종양， 유방암， 경관암, 만성 골수성 백혈병， 장암， T-존 림프종， 자궁내막증， 식도암， 담 즙 방광암， 에윙스 육종 (Ewing's sarcoma), 두 및 목암ᅳ 설암, 홉킨스 림프종， 카 포시스 육종， 신장암， 간암， 폐암， 중피종， 다발성 골수종， 신경아세포종， 비홉킨 림프종， 골육종， 난소암，신경아세포종， 유선암， 경관암, 전립선암， 췌장암， 대장 암， 페니스암， 레티노블라스토마， 피부암， 위암， 갑상선암， 자궁암,. 고환암， 월름 스 종양， 또는 트로포블라스토마등의 암에 대하여 복용될 수 있다. 가장 바람직하게 본 발명의 조성물은 시스플라틴 투여로 인한 골수 손상， 신 경 손상 또는 신장손상을 완화할 수 있다. 시스플라틴은 신장암을 치료하는 화학요 법제로， 상기 약제는 세포 분열 (cell division)을 저해함으로써 항암 작용을 나타 내는 것으로 알려져 있다. 종양 세포는 세포 증식이 조절되지 않고 계속적으로 일 어나는 특성을 보이는데， 이와 같은 종양 세포의 세포 분열을 저해하는 시스풀라틴 을 처리하면 일부 암의 경우 종양 세포의 증식을 막아서 항암 효과를 기대할 수 있 다. 어떤 경우에는 종양 세포의 증식 저해뿐만 아니라 이미 존재하는 종양 세포의 크기까지 감소시킬 수 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 시스플라틴은 신장암을 치 료하는데 사용되나 신장 독성 등 부작용을 일으키는 것으로 알려져 있다 (Cerosimo R. J., Ann. Pharm., 27： pp438-441 , 1993； Cavalli F.et al . , Cancer Treat . Rep . , 62： pp2125-2126 , 1978； Pol lera C. F. et al . , J . Cl in. Oncol . , 5： pp318- 319， 1987) 본 발명의 용어 '신장독성 '이란 항암제의 투여 후 나타나는 부작용의 하나로 신장기능의 저하， 혈액 내 요소 농도의 증가， 신장 내의 염증 유발인자들의 농도 증가 현상을 포함하는 상태를 의미한다. 본 발명의 일실시예에 따르면， 시스플라 틴의 투여에 의해 유발되는 신세뇨관 손상의 정도가 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드 투여에 의해 완화되는 것을 확인하였다. 본 발명의 다른 일실시예에 따르면， 서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드는 시스플라틴의 투여에 의해 유발되는 골수손상 또는 신경손상을 완 화화는 효과가 있는 것으로 확인되었다. 본 발명자는 상기 서열번호 2 또는 3의 펩타이드 이외에도 뉴로펩타이드 Y의 아미노산 서열 중 일부를 포함하는 짧은 단편 (서열번호 4 및 서열번호 5)을 제작하 여 그 효과를 평가해 보았다.
서열번호 4 ：
( Asp— A 1 a-Pr o— A 1 a-G 1 u-Asp-Me t -A 1 a_Ar g— Ty r— Ty r-Ser— A 1 a-Leu-Ar g )
서열번호 5 ：
(Tyr-Ser-Al aᅳ Leuᅳ Argᅳ Hi s一 Tyr 11 e-Asn-Leu-1 1 e-Thr-Ar g-G 1 n-Ar g-Tyr ) 그 결과， 서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드만이 시스플라 틴에 의해 유발된 골수손상， 신경손상 및 신장손상의 부작용을 완화하는 효과를 나 타냈을 뿐， 서열번호 4 또는 서열번호 5의 펩타이드는 이러한 효과를 전혀 나타내 지 못하는 것으로 확인되었다. 본 발명의 조성물은 약학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며， 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분， 미결정샐를로오스， 유 당， 포비돈， 콜로이달실리콘디옥사이드， 인산수소칼슘， 락토스， 만니를, 엿， 아라 바아고무， 전호화전분， 옥수수전분, 분말샐를로오스， 히드록시프로필셀를로오스， 오파드라이， 전분글리콜산나트륨， 카르나우바 납， 합성규산알루미늄， 스테아린산， 스테아린산마그네슘， 스테아린산알루미늄， 스테아린산칼슴, 백당， 덱스트로스， 소 르비를 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0. 1~90 중량부로 포함되는 것이 바람직하나 이에 제 한되는 것은 아니다. 또한， 본 발명의 조성물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데， 제제화할 경우에는 보통 사용하는 층진제， 증량제， 결 합제， 습윤제， 붕해제， 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제， 환제， 산제， 과립제， 캡슐제 등이 포함 되며， 이러한 고형제제는 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면， 전분， 칼슘 카보네이트， 수크로오스， 락토오스 또 는 젤라틴 둥을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슴 스티레 이트 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제， 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순회석제인 물， 리퀴 드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제， 예를 들면 습윤제, 감미제， 방향제， 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액， 비수성용제， 현탁제, 유제， 동 결건조제제， 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제， 현탁용제로는 프로필렌글리콜， 폴리에틸렌 글리콜， 올리브 오일과 같은 식물성 기름， 에틸을 레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용 될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (wi tepsol ) , 마크 로골， 트원 (tween) 61， 카카오지 라우린지， 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다. 한편， 주사제에는 용해제, 등장화제， 현탁화제， 유화제， 안정화제， 방부제 등과 같은 종래의 첨가제가포함될 수 있다. 또한， 본 발명의 조성물은 임의의 생리학적으로 허용가능한 담체， 부형제 또 는 안정화제 (Remington: The Science and Pract ice of Pharmacy , 19th Edi t ion, Al fonso , R. , ed, Mack Publ ishing Co . (Easton, PA: 1995) )를 추가로 포함할 수 있 다. 허용가능한 담체， 부형제 또는 안정화제는 사용된 투여량 및 농도에서 수용자 에게 비독성이고， 완충용액, 예를 들어 인산， 시트르산 및 다른 유기산; 아스코르 브산을 비롯한 항산화제; 저분자량 (약 10개 미만의 잔기) 폴리펩티드; 단백질, 예 를 들어 혈청 알부민， 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체， 예를 들어 폴리 비닐피를리돈; 아미노산， 예를 들어 글리신， 글루타민， 아스파라긴， 아르기닌 또는 리신; 단당류, 이당류， 및 글루코스 만노스 또는 덱스트린올 비롯한 다른 탄수화 물; 킬레이트제， 예를 들어 EDTA; 당 알콜， 예를 들어 만니를 또는 소르비를; 염- 형성 반대이온， 예를 들어 나트륨; 및 (또는) 비이온성 계면활성제， 예를 들어 트 원， 플루로닉스 또는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)이 포함된다. 본 발명의 약학적 조성물의 인체에 대한 투여량은 환자의 나이， 몸무게， 성 별, 투여형태， 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며， 일반적으로 0.01 - 100mg/kg/day이며， 바람직하게는 0.1 - 20mg/kg/day이며, 더욱 바람직하게는 1 - 5mg/kg/day일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 또한 의사 또는 약사의 판단 에 따라 일정 간격으로 분할투여할 수도 있다. 본 발명은 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하는 폴리펩 타이드를 유효성분으로 포함하는 항암 보조제를 제공한다. 본 발명에서 항암 보조제란 항암제 투여시 발휘되는 부작용을 개선하거나， 기존 항암제의 항암효과를 높일 수 있는 것을 의미한다. 즉， 본 발명의 항암 보조제를 항암제와 병용하여 투여함으로써 , 항암제에 의 해 유발되는 다양한 부작용들의 발생을 예방할 수 있다. 본 발명의 상기 보조제는 항암약물과 동시에 (simutaneous) , 별도로 (separate) 또는 순차적 (sequent i al )으로 투여될 수 있다. 상기 본 발명에 따른 항암 보조제의 투여 순서 즉， 항암제와 항암 보조제 증에서 어떤 것을 어느 시점에서， 동시에， 개별적 또는 순차적으로 투여할 것인지의 여부는 의사나 전문가에 의해 결정될 수 있다. 이러한 투여 순서는 많은 인자에 따라 달라질 수 있다. 본 발명은 또한 상기 항암 보조제 및 항암제를 유효성분으로 포함하는 암 예 방또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명에서 상기 항암제는 시스플라틴 (cisplat in) , 독소루비신 (doxorubicin), 에토포사이드 (etoposide), 파클리탁샐 (pacl itaxel )， 도세탁셀 (doxetaxel), 불소피리미딘 (fluoropyr imidine) , 옥살리플라틴 (oxalplat in) , 캄토 테칸 (campthotecan), 벨로테칸 (Belotecan), 포도필록특신 (podophyl lotoxin)， 황 산빈블라스틴 (vinblastine sulfate), 사이클로포스파마이드 (cyclophosphamide), 악티노마이신 (actinomycin), 빈크리스틴황산염 (vincristine sulfate), 메토트렉 세이트 (methotrexate), 베바시주맙 (bevacuzum ab), 탈리도마이드 (thai idomide)， 엘로티닙 (eriotinib), 게피티닙 (gefitinib), 캠토세신 (caraptothecin) , 타목시펜 (Tamoxifen), 아나스테로졸 (Anasterozole) , 글리백 (Gleevec), 5-플루오로우라실 (5-FU), 풀록슈리딘 (Floxuridine), 류프로리드 (Leuprolide), 플로타미드 (Flutamide), 졸레드로네이트 (Zoledronate)， 빈크리스틴 (Vincristine)， 젬시타빈 (Gemcitabine), 스트렙토조토신 (Streptozocin), 카보플라틴 (Carboplatin)， 토포테 칸 (Topotecan), 이리노테칸 (Ir inotecan)， 비노렐빈 (Vinorelbine)， 히도록시우레아 (hydroxyurea) , 발루비신 (Valrubicin) , 레티노익산 (retinoic acid), 메클로레타민 (Meclorethamine), 클로람부실 (Chlorambuci 1 )， 부술판 (Busulfan)， 독시플루리딘 (Doxif luridine), 빈블라스틴 (Vinblastin) , 마이토마이신 (Mitomycin), 프레드니손 (Prednisone), 테스토스테론 (Testost erone)， 미토산트론 (Mitoxantron)， 아스피린 (aspirin), 살리실레이트 (salicylates), 이부프로펜 ( ibuprofen) , 나프로센 (naproxen) , 페노프로펜 (fenoprofen) , 인도메타신 ( indomethacin)， 페닐부타존 (phenyltazone) , 시클로포스파미드 (cyclophosphamide) , 메클로에타민
(mechlorethamine) , 텍사메타손 (dexamethasone)， 프레드니솔론 (prednisolone)， 샐 레콕시브 (celecoxib), 발데콕시브 (valdecoxib)， 니메슐리드 (nimesulide)， 코르티손 (cortisone) 또는 코르티코스테로이드 (cort icosteroid) 등이 있으며, 화합물, 호르 몬제， 항체 등 그 종류를 제한하지 않는다. 본 발명의 상기 약학적 조성물은 항암 보조제와 항암제가 단일 조성물 (single composit ion)의 형태로 제제화되거나 또는 개별적인 조성물 (separate composition)의 형태로 제제화될 수 있다. 상기 약학적 조성물에 추가적으로 포함될 수 있는 담체， 투여경로 투여용량 등에 대해서는 전술한 바와 같다. 본 발명은 상기， 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하는 폴리펩타이드의 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에 서 선택된 질환또는 상태 치료제 제조를 위한 용도를 제공한다. 본 발명은 상기 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하는 폴리펩타이드 또는 상기 폴리펩타이드를 유효성분으로 포함하는 조성물을 이를 필 요로 하는 '개체에 유효량으로 투여하는 것을 특징으로 하는 항암제에 의한 골수손 상 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태 치료 방법 을 제공한다.
본 발명에서 상기 폴리펩타이드는 서열번호 1의 펩타이드 N—말단에 추가적으 로 연결된 아미노산이 Tyr-Pn)-Ser-Lys-Pro 인 것을 특징으로 하는 폴리펩타이드 또는 이를 유효성분으로 포함하는 조성물을 투여할 수 있다. 상기 폴리펩타이드는 서열번호 2 또는 3일 수 있으며， 상기 조성물은 항암 보조제일 수 있다. 또한， 본 발명에서 상기 항암 보조제를 항암제와 병용하여 투여할 수 있으며， 상기 항암 보 조제는 항암약물과 동시에 (sinmtaneous) , 별도로 (separate) 또는 순차적 (sequent ial )으로 투여될 수 있다. 상기 항암 보조제 및 항암제쎄 대해서는 전술한 바와 같다. 본 발명의 상기 '유효량' 이란 개체에게 투여하였을 때， 항암제에 의한 골 수손상， 신경손상 및 신장손상의 개선， 치료， 예방, 검출 또는 진단 효과를 나타내 는 양을 말하며， 상기 '개체' 란 동물, 바람직하게는 포유동물， 특히 인간을 포함 하는 동물일 수 있으며， 동물에서 유래한 세포, 조직, 기관 등일 수도 있다. 상기 개체는 상기 효과가 필요한환자 (pat ient ) 일 수 있다.
본 발명의 상기 '치료' 는 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상 또는 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상 관련 질환 또는 항암제에 의 한 골수손상， 신경손상 및 신장손상 관련 질환의 증상을 개선시키는 것을 포괄적으 로 지칭하고， 이는 이러한 질환을 치유하거나， 실질적으로 예방하거나， 또는 상태 를 개선시키는 것을 포함할 수 있으며 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신 장손상 또는 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상 관련 질환으로부터 비롯된 한 가지 증상또는 대부분의 증상을 완화시키거나， 치유하거나 예방하는 것 을 포함하나， 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명의 용어 '〜을 포함하며 (compr ising) ' 란 '함유하는' 또는 '특징으 로 하는' 과 동일하게 사용되며， 조성물 또는 방법에 있어서， 언급되지 않은 추가 적인 성분 요소 또는 방법 단계 등을 배제하지 않는다 . 용어 '〜로 구성되며
(cons i st ing of )' 란 별도로 기재되지 않은 추가적인 요소， 단계 또는 성분 등을 제외하는 것을 의미한다. 용어 '필수적으로 구성되며 (essent ial ly consi st ing of ) 란 조성물 또는 방법의 범위에 있어서 기재된 성분 요소 또는 단계와 더불어 이 의 기본적인 특성에 실질적으로 영향을 미치지 않는 성분 요소 또는 단계 등을 포 함하는 것을 의미한다.
【유리한 효과】
본 발명의 서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하는 폴리펩 타이드를 유효성분으로 포함하는 조성물은 항암제의 투여에 의하여 유발되는 부작 용， 특히 골수손상, 신경손상 및 신장손상을 완화시키는 효과를 발휘하는 바， 항암 제의 부작용을 완화하고 항암제 효과를 높일 수 있는 항암 보조제로서 유용하게 사 용될 수 있다.
【도면의 간단한 설명】
도 1은 시스플라틴에 의해 유도된 신경병증이 서열번호 2 및 3에 의해 완화 됨을 나타낸 도이다.
(A) 시스플라틴에 의한 골수손상 및 신경독성， 신장독성이 서열번호 2 및 3 에 의해 완화되는지 확인하기 위한실험 디자인.
(B) 시스플라틴 단독 또는 시스플라틴과 함께 서열번호 2 내지 6을 처리한 대조군 마우스에서의 감각 신경병증의 정량분석 결과를 나타낸 것으로， 잠복기 (Latency)는 마우스가 통증수용 (nocicept ion)의 신호， 즉 점프 또는 발 핥기까지 의 시간의 합으로 나타내었다. (n = 10-20 mice per group) 도 2는 시스플라틴에 의해 유도된 골수 세포자멸사가 서열번호 2 및 3의 펩 타이드에 의해 완화됨을 나타낸 도이다.
(A) 각 그룹에서의 골수 내 TUNEL+ 반웅을 나타내는 대표 사진 (scale bar ,
50 μ πι)
(Β) 각 그룹에서 골수 내 TUNEL+ 반웅을 나타내는 세포들의 정량 분석 (η = 4 per group) 도 3은 시스플라틴에 의해 유도된 골수조혈줄기세포의 감소가서열번호 2 및 3의 펩타이드에 의해 억제됨을 나타낸 도이다.
(A) 각 그룹의 골수에서 Lineage- Sca-1+ c-ki t+로 표지되는 LSK 세포 퍼센 트 (n=7 per group)
(B) 각 그룹에서 Lineage- Sca-1+ c_ki t+ CD48- CD150+로 표지되는 LT-HSC 세포 퍼센트. (n = 7 per group) 도 4는 시스풀라틴에 의한 골수 내 신경섬유 감소가서열번호 2 및 3의 펩타 이드에 의해 억제됨을 나타낸 도이다.
(A) 각 그룹에서의 골수 내 Th+ 신경섬유의 반응을 나타내는 대표 사진 (scale bar , 50 μ ιιι)
(Β) 각 그룹에서의 골수 내 단위면적 당 Th+ 신경섬유의 정량 분석. (n = 4- 5 per group) 도 5는 시스플라틴에 의한 골수 내 내피세포의 감소가서열！ 호 2 및 3의 펩 타이드에 의해 완화됨을 나타낸 도이다.
(A) 각 그룹에서의 골수 내 CD31+ 내피세포의 반응을 나타내는 대표 사진 (scale bar , 40 ηι)
(Β) 각 그룹에서의 골수 내 CD31+ 내피세포의 정량 분석. (η = 4-5 per group) 도 6은 시스플라틴에 의한 신장독성이 사열번호 2 및 3의 펩타이드에 의해 완화됨을 나타낸 도이다.
(A) 각 그룹에서 신장 조직 절편을 H&E로 염색하여 형태학적 구조를 나타내 는 대표사진 (scale bar , 20 m)
(B) 각 그룹에서 신피질 내 세관세포에서의 세포자멸사를 정량 분석 (n = 4 per group)
* p<0.05 , 모든 오차막대는 평균士 s . e .m으로 나타냄.
(전체서열 NPY =서열번호 6)
【발명의 실시를 위한 형태】
이하 본 발명을 상세히 설명한다. 단， 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐， 본 발명의 내용이 하기 실 시예에 한정되는 것은 아니다.
<실험방법>
1.1 ： 실힘 동물
6 내지 8주령의 수컷 또는 암컷의 C57BL/6를 Jackson laboratory로부터 구매 하였다. 무작위 배정 (block randomizat ion) 방법을 이용하여 동물을 실험군으로 나누었다. 편파성을 제거하기 위하여， 조사관은 데이터 수집 및 분석에 대하여 블 라인드 처리되었다. 마우스는 12시간의 밤-낮 사이클 하에서， 물과 사료 펠렛에 자 유롭게 접근할 수 있는 조건 하에서 사육되었다. 모든 마우스 연구는 경북대학교 동물윤리위원회에 승인을 받았다.
1.2 ： 약물 처리
시스플라틴 (Enzo ; 10 mg/kg per week)을 이용하여 감각신경계 (sensory nervous system, SNS) 손상을 유발하였다. 7주 동안 시스풀라틴을 복강 주입 ( i .p) 한 후 마우스를 안락사 시켰다. 서열번호 2~6 (50 y g/kg)의 펩타이드가 시스플라 틴으로부터의 항암제 부작용을 완화 시켜줄 수 있는지 확인하기 위해 시스플라틴 처리 기간인 7주 동안 매일 병용 투여하였다.
1.3 ： 가열 패드 어세이 (heated-pad assay)를 통한 감각신경병 (sensory neuropathy)의 정량화
감각 반웅에 대한 각기 상이한 처리의 효과를 측정하기 위하여， 핫-플레이트 테스트를 실시하였다. 핫플레이트를 50 °C로 유지시키고, 마우스 각각을 가열된 표 면 끝에 위치시키고, 제 1의 통증수용 (nocicept ion) , 즉 점프 또는 발 핥기까지의 시간을 측정하였다. 컷오프 시간은 60초로 하였다. 측정 사이에는， 가열된 표면을 세제 및 에탄올로 닦고， 50 °C로 온도가유지되도록 하였다.
1.4 ： 면역형광염색
상기 마우스의 골수 조직을 mi crotom을 이용하여 5 μ πι의 두께로 자른 후 염 색하였다. TUNEL 어세이를 In Situ Cel l Detect ion Ki t , Fluorescein (Roche Diagnost ic)을 이용하여 제조사의 지시에 따라 수행하였다. 골수 신경 조직 파괴 정도를 확인하기 위해 상기 마우스의 조직을 Tyrosine hydroxylase (rabbit, 1:250， Milipore) 염색을 실시하였다. 또한 골수 내피 세포의 파괴 정도를 확인하 기 위하여 상기 마우스의 골수 조직에서 CD31 (mouse, 1:50， BD Bioscience) 염색 을 실시하였다, 염색을 실시한 모든 골수 조직에서 Fluoview SV1000 이미징 소프트 웨어 (Olympus FV1000, Japan)를 장착한 레이저 스캐닝 공초점 현미경 또는 Olympus BX51 현미경을 이용하여 분석하였다. Met amor ph sof tware(Molecular Devices)를 이용하여 총 조직의 넓이에 대한 염색된 부위의 넓이의 퍼센트를 정량 화하였다.
1.5 ： H&E염색
포름알데히드로 고정된 신장을 단계희석된 알코올 시리즈로 탈수하고， 파라 핀화하였다. 5ym의 파라핀 절편을 H&E 염색하고， 신부전의 형태학적 관련 (morphological involvement) 정도를 광현미경으로 결정하였다. 시스플라틴 주사에 의한 신장의 형태학적 손상의 지표로서 하기의 파라미터를 선택하였다: 브러시 보 더 (brush border) 손실， 적혈구 유출， 세관 팽창 세관 퇴화， 세관 괴사， 및 세관 케스트 (cast) 형성. 각 파라미터는 5마리 이상의 동물로부터 결정하였다
1.6 ： 골수내 유세포측정
골수를 각 마우스의 경골 및 대퇴골로부터 분리하였다. 적혈구 (RBCs, Red blood cells)를 0.15 M NH4C1 (STEMCELLTechnologies)를 이용하여 4 °C에서 5분간 용 혈시키고, PBS (Gibco)로 세척하고, 혈구계 (hemocytometer)를 이용하여 계수하였 다. HSCs, MSCs, 또는 조골세포 검출하기 위하여， 비오틴화된 계통-특이적 항체 (CD5, CD45R, CDllb, Gr-1, 및 Ter-119)를 이용하여 자가 감소 (magnetic d印 letion)를 사용하여 Lin+세포를 제거하였으며， 뒤이어 단클론 항-비오틴 (Miltenyi Biotec)과 결합한 MACs 비드를 이용하여 감소시켰다. HSCs의 염색을 위 하예 Lin_세포를 Seal에 대한 phycoerythr in PE-Cy7-결합된 항체 (558162)， c-Kit 에 대한 APC-결합된 항체 (553356)， CD48에 대한 FTTC-결합된 항체 (557484) 및 CD150 에 대한 PE-결합된 항체 (561540) (모두 Science)로 염색하였다. 또한 세포 를 streptavidin-pacific blue (PB) (Invitrogen, S11222)로 더 염색하였다. 데이 터는 BD LSRII system 및 Arialll (BD Science)으로 수집하여 FlowJo software (Tress Star)를 이용하여 분석하였다. 1.7 ： 통계학적 분석
2개의 군 간의 비교를 Student' s -test를 이용하여 수행하였다. 2개 이상 의 군을 비교하는 경우, AN0VA 및 Tukey' s HSD 테스트를 이용하였다. 모든 통계학 적 분석은 SPSS 통계학적 소프트웨어를 이용하여 수행하였다. p < 0.05를 통계적으 로 유의적인 것으로 간주하였다.
<실험결과>
<실시예 1>
A1스폴라린에 의해 휴발된 시경병증의 와화효과
항암약물치료는 급성 골수 손상을 유발하고， 골수 내 조혈줄기세포 (HSC, hematopoiet ic stem cel l ) 기능 또는 골수 재생을 손상시킨다. 특히， 시스플라틴 (ci spl at in)과 같은 항암약물은 골수 내 Th 섬유의 발현을 감소시킴으로써 교감 신 경병증을 유발한다. 이러한 개념을 바탕으로 하여, 본 발명자들은 서열번호 2 내지 5의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드가 항암약물치료로 유발된 신경병증 또는 골수 기능장애를 예방 또는 치료할 수 있을지 여부를 평가하였다. 또한， 서열번호 6의 뉴로펩타이드 Y(NPY) 전체서열을 양성대조군으로서 그 효과를 함께 평가하였다. 구체적으로, 마우스에 시스플라틴을 매주 1회씩 총 7주를 복강 주입하고 시 스플라틴을 주입하는 7주 동안 서열번호 2 내지 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖 는 펩타이드를 각각 7주 동안 매일 복강 주입하였다 (도 1A 및 도 2A) . 발명자는 먼저 시스플라틴에 의하여 골수 신경 손상에 의한 감각 반웅에 대한 효과를 측정하 기 위하여， 핫-플레이트 테스트를 실시하였고 시스플라틴을 주입한 마우스에서 증 가한 신경병증이 서열번호 2 및 서열번호 3의 펩타이드를 주입한 마우스에서 유의 적으로 감소한 것을 확인하였다 (도 IB, p<0.05) . 이러한 결과는 서열번호 2 및 서 열번호 3의 펩타이드가 시스플라틴에 의해 유도된 신경 병증에 대한 완화효과가 있 음을 나타낸다.
한편, 서열번호 3의 신경병증 완화효과는 NPY 전체서열보다도 훨씬 우수하게 나타난 반면에， 서열번호 4 및 서열번호 5의 펩타이드는 신경병증 완화효과를 전혀 나타내지 못하는 것으로 확인이 되었다. <실시예 2>
시스폴라틴에 의한골수세포자멸사와화효과
골수 세포자멸사는 시스풀라틴 처리에 의한 골수 손상의 병인 중의 하나이 다. 서열번호 2 및 3의 펩타이드가 골수 내에서 시스플라틴에 의해 유도된 세포자 멸사를 감소시킬 수 있는지를 확인하기 위하여， TUNEL 어세이를 이용하여 골수 세 포자멸사를 확인하였다. 그 결과， 서열번호 2 및 3의 펩타이드를 주입한 마우스에 서 골수 세포자멸사가 감소하였음을 확인하였다 (도 2， p<0.05) . 이러한 결과들은 서열번호 2 및 3의 펩타이드가 시스플라틴에 의해 유도된 골수 세포자멸사를 억제 한다는 것을 나타낸다.
한편， 서열번호 4 및 5의 펩타이드는 시스플라틴에 의해 유도된 골수 세포자 멸사 완화효과가크지 않은 것으로 확인이 되었다 (도 2) .
<실시예 3>
시스플라틴에 의한골수조혈줄기세포의 감소 완화효과
항암제의 처리는 급성 골수손상과 더불어 골수 내 조혈줄기세포의 수적인 감 소를 야기한다. 이러한 현상이 서열번호 2 및 3의 펩타이드에 의해 억제되는지 확 인해본 결과， 시스플라틴에 의해 감소되었던 Lineage- Sca-1+ c-ki t+로 표지되는 골수 내 조혈줄기전구세포인 LSK eel I s이 서열번호 2 및 3의 펩타이드에 의해 완화 되었다 (도 3A, p<0.05) . 또한 Lineage- Sca~l+ c~ki t+ CD48- CD150+로 표지되는 조 혈줄기세포인 LT-HSC의 감소도 서열번호 2 및 3의 펩타이드에 의해 완화되었다 (도 3B p<0.05) . 이러한 결과는 서열번호 2 및 3의 펩타이드가 시스플라틴에 의한 골수 조혈줄기세포의 감소를 완화시켜줄 수 있음을 의미한다.
한편， 서열번호 3의 골수조혈줄기세포 감소 완화효과는 NPY 전체서열보다도 훨씬 우수하게 나타난 반면에, 서열번호 4 및 5는 이러한 효과를 거의 나타내지 않 는 것으로 확인이 되었다 (도 3) .
<실시예 4>
시스폴라틴에 의한골수내 신경섬유의 감소 억제 효과
시스플라틴에 의한 골수 손상 중 골수 내 신경섬유 손상이 서열번호 2 및 3 의 펩타이드에 의해 완화 될 수 있는지 확인하기 위하여 면역형광염색을 실시하였 다. 그 결과 골수 내 신경섬유를 나타내는 Th (Tyrosine hydroxylase) 반웅이 시스 플라틴을 주입한 마우스에 비하여 서열번호 2 및 3의 펩타이드를 주입한 마우스에 서 증가한 것을 확인하였다도 4A 및 4B , p<0.05) . 이러한 결과는 서열번호 2 및 3 의 펩타이드가 시스풀라틴에 의해 유도된 골수 내 신경섬유의 감소에 대한 완화 효 과가 있음을 나타낸다.
한편, 서열번호 3의 골수 내 신경섬유 감소 완화효과는 NPY 전체서열과 비교 해 현저히 우수한 것으로 나타난 반면에, 서열번호 4 및 5의 펩타이드는 이러한 효 과를 전혀 나타내지 못하는 것으로 확인이 되었다 (도 4) .
<실시예 5>
시스폴라틴에 의한골수 내 내피세포의 감소 억제 효과
시스플라틴에 의한 골수 손상 중 골수 내 내피세포 손상이 서열번호 2 및 3 의 펩타이드에 의해 완화 될 수 있는지를 확인하기 위하여 내피세포 표지인자인 CD31 염색올 실시하였다. 그 결과 서열번호 2 및 3의 펩타이드는 골수 내 신경 섬 유뿐만 아니라 골수 내 내피세포의 감소도 억제 하는 것을 확인하였다 (도 5A 및 5B , p<0.05) . 이러한 결과는 서열번호 2 및 3의 펩타이드가 시스풀라틴-유도된 골 수 내 내피세포의 감소에 대한 완화 효과가 있음을 나타낸다.
한편， 서열번호 3의 골수 내 내피세포의 감소 완화효과는 NPY 전체서열과 비 교해 동등한 정도로 나타난 반면에， 서열번호 4 및 5은 그 효과가 크지 않은 것으 로 확인이 되었다 (도 5) .
<실시예 6>
시스폴라틴에 의한신장독성 와화효과
신장독성은 항암제에 의한 또 다른 부작용 중 하나이다. 이러한 신장독성이 서열번호 2 및 3의 펩타이드에 의해 완화되는지 H&E 염색을 이용한 조직학적 분석 을 실시하였다. 그 결과 시스풀라틴 처리에 의해 신피질 내 세관세포에서 증가된 세포자멸사를 확인하였으며, 이것이 서열번호 2 및 3의 펩타이드에 의해 줄어듬을 확인하였다 (도 6A 및 6B , p<0.05) . 이러한 결과는 서열번호 2 및 3의 펩타이드가 시스플라틴에 의해 유도된 신장부전에 대한보호효과가 있음을 나타낸다.
한편， 서열번호 3의 신장독성 완화효과는 NPY 전체서열과 비교해 동등 또는 그 이상의 효과를 나타낸 반면에， 서열번호 4 및 5는 그 효과가 크지 않은 것으로 확인되었다 (도 6) . 상기의 결과들을 종합하여 볼 때， 서열번호 1의 펩타이드를 필수적으로 포함 하는 폴리펩티드인 서열번호 2 및 서열번호 3의 펩타이드를 포함하는 항암제는 시 스플라틴에 의한 부작용인 골수손상， 신경독성 및 신장독성을 완화시켜 줄 수 있음 올 알 수 있었으며， 이러한 효과는 NPY 전체서열과 비교해 더 우수한 것이었다. 뿐 만 아니라， 서열번호 2 및 3의 펩타이드는 NPY 전체서열보다 짧은 아미노산 서열을 갖고 있기 때문에 면역원성, 독성 부작용 등을 최소화시킬 수 있으며， 상대적으로 쉽게 합성이 가능하여 대량생산이 용이하고, 비용절감의 효과를 가져올 수 있으며， 작은 분자량으로 인해 좀 더 빠르게 조직 장벽을 넘나들 수 있다는 장점이 있다.
<제조예 >
항암보조제의 제조
서열번호 2 또는 3의 아미노산 서열을 갖는 펩타이드 100 mg , 5 '-클로로- 3 , 2' -디하이드록시찰콘 또는 5 '-클로로 -2，3' -디하이드록시찰콘 .염산염 250 g을 락토오스 175.9 g , 감자전분 180 g 및 콜로이드성 규산 32 g과 흔합하였다. 이 혼 합물에 10¾ 젤라틴 용액을 첨가시킨 후， 분쇄해서 14 메쉬체를 통과시켰다. 이것을 건조시키고 여기에 감자전분 160 g , 활석 50 g 및 스테아린산 마그네슴 5 g을 첨가 해서 얻은 흔합물을 정제로 만들었다.
【산업상 이용가능성】
서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하는 폴라펩타이드를 유효성분으로 포함하는 조성물은 항암제의 투여에 의하여 유발되는 부작용， 특히 골수손상， 신경손상 및 신장손상을 완화시키는 효과를 발휘하는 바， 항암제의 부작 용을 완화하고 항암제 효과를 높일 수 있는 항암 보조제로서 유용하게 사용될 수 있어 산업상 이용가능성이 매우 높다.

Claims

【청구의 범위】
【청구항 1】
서열번호 1의 펩타이드를 필수적인 구성성분으로 포함하며， 상기 펩타이드의
Nᅳ말단 또는 C-말단에 1개 내지 5개의 아미노산이 추가적으로 연결된 훌리펩타이
【청구항 2】
제 1항에 있어서， 상기 N-말단에 추가적으로 연결된 아미노산이 Tyr-Pro-Ser- Lys-Pro 인 것을 특징으로 하는 폴리펩타이드.
【청구항 3】
거 12항에 있어서, 상기 폴리펩타이드는 서열번호 2인 것을 특징으로 하는 폴 리펩타이드.
【청구항 4】
제 1항의 폴리펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항암제에 의한 골수손상， 신 경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태의 예방 또는 치료 용 약학적 조성물.
【청구항 5】
제 1항의 폴리펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항암보조제.
【청구항 6]
계 7항에 있어서, 상기 항암 보조제는 항암제와 병용하여 투여되는 것을 특징 으로 하는 보조제 .
【청구항 71
제 7항에 있어서， 상기 보조제는 항암약물과 동시에 (simutaneous) , 별도로 (separate) 또는 순차적 (sequent ial )으로 투여되는 것을 특징으로 하는 보조제.
【청구항 8】
제 1항의 폴리펩타이드의 항암제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환또는상태 치료제 제조를 위한 용도.
【청구항 91
제 1항의 폴리펩타이트 또는 제 1항의 폴리펩타이드를 유효성분으로 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 개체에 유효량으로 투여하는 것을 특징으로 하는 항암 제에 의한 골수손상， 신경손상 및 신장손상으로 이루어진 군에서 선택된 질환 또는 상태 치료 방법 .
【청구항 10】
제 9항에 있어서, N-말단에 추가적으로 연결된 아미노산이 Tyr-Pro-Ser-Lys- Pro 인 것을 특징으로 하는 폴리펩타이드 또는 이를 유효성분으로 포함하는 조성물 을 투여하는 것을 특징으로 하는 치료 방법 .
【청구항 11】
제 9항에 있어서， 상기 폴리펩타이드는 서열번호 2 또는 서열번호 3인 것을 특징으로 하는 치료 방법 .
【청구항 12]
계 9항에 있어서, 상기 조성물이 항암 보조제인 것을 특징으로 하는 치료 방 법.
【청구항 13】
제 12항에 있어서， 상기 항암 보조제를 항암제와 병용하여 투여하는 것을 특 징으로 하는 치료 방법 .
【청구항 14】
제 12항에 있어서 , 상기 항암 보조제는 항암약물과 동시에 (simutaneous) , 별 도로 (separate) 또는 순차적 (sequent ial )으로 투여되는 것을 특징으로 하는 치료 방법 .
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