WO2019197173A1 - Extraits de plantes contenant du polygodial, compositions comprenant de tels extraits et leurs utilisations cosmetiques et/ou dermatologiques - Google Patents

Extraits de plantes contenant du polygodial, compositions comprenant de tels extraits et leurs utilisations cosmetiques et/ou dermatologiques Download PDF

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Marina Humbert
Sophie LAVOINE
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Definitions

  • the present invention relates to the field of cosmetic and / or dermatological active ingredients. It relates more particularly to an extract obtained from a plant chosen from Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella and Polygonum hydropiper, as well as its process of obtaining, compositions comprising extracts of such plants and their cosmetic uses and / or dermatological.
  • Tasmannia lanceolata also known as Drimys aromatica or Drimys lanceolata, commonly known as Georgian Pepper or Mountain Pepper
  • Drimys aromatica or Drimys lanceolata commonly known as North Pepper or Mountain Pepper
  • the leaves are lanceolate ⁇ , generally 4 to 8 cm long and 1 to 2 cm wide, dark green, very shiny, with a matt and clear back.
  • the young stems are red in color.
  • the small, cream-colored, 5-petal, narrow and waxy flowers appear clustered at the end of the branches.
  • the species is dioecious, each shrub is male or female.
  • the female flowers are easily recognized by their ovary, a small green ball in the center of the flower.
  • This flower is fertilized, the fruit rounds into two lobes and blushes. It becomes black at maturity. It is necessary to have both sexes to hope a fruiting and that Tasmannia lanceolata is adorned with beautiful bunches fleshy, red to black, very decorative.
  • Tasmannia lanceolata is mainly used in the food industry as a substitute for pepper substitute, for example for its dried and crushed leaves and berries.
  • Tasmannia lanceolata is also used in traditional Chinese medicine and is part of the complex formulation of compositions with many other plant extracts.
  • CN 1 07582791 discloses a composition comprising in particular roots of Tasmannia lanceolata for the treatment of amenorrhea.
  • CN 107412567 describes the use of Tasmannia lanceolata, in particular ripe fruit, in a composition for the treatment of cutaneous itches.
  • Garland et al. (“Sub-critical carbon dioxide extraction of hexane extract from the leaves of Tasmannia Lanceolata", The Journal of Essential Oil Research, vol.28 no.l, January 2, 2016) describes the subcritical CO2 extraction of a hexane extract of leaves of Tasmannia lanceolata, the extract containing polygodial.
  • JP2004083488 describes an extract of Polygonum hydroplper Linnaeus obtained by extraction in a solvent at 80 ° C for 3h with stirring, e ⁇ concentrated under reduced pressure at 40 ° C after filtration e ⁇ finally dried (Example 1).
  • JP2003073264 discloses an extract of Tasmannia lanceolata obtained by extraction of dried leaves in 10 volumes of methanol heated under reflux for 3 hours, filtration evaporation under reduced pressure and then adding distilled water to ethyl acetate to obtain extracted after separation.
  • KR20120031625 describes the plant Persicaria hydropiper L. Spach whose fruit is known to treat abdominal pain, edema and wounds. The fruit appears to contain 0.13% of essential oil whose main ingredients are tadeonone (polygodial), isotadeonal, confertifolin, polygonone.
  • US5523105 discloses a polygodial-containing plant extract by extracting a dry powder, for example from Polygonum hydroplper, Drimys lanceolata or Warburgia stublmannii, successively with petroleum ether and methanol, the extract obtained being furthermore purified by liquid chromatography.
  • This document also discloses a plant extract containing a polygodial obtained from a dry plant by the same method using other organic solvents such as hexane, ethyl ether, acetone, ethanol and the like. methanol e ⁇ concentration under reduced pressure.
  • corticosteroids an increase in appetite, weight gain, water retention, a tendency to aggression with insomnia and nervousness, worsening of depression, and frequently a transient imbalance of diabetes or high blood pressure.
  • retinoids are known to be photosensitive, especially isotretinoin. They are also potentially irritating, especially tretinoin.
  • hyaluronic acid Unlike other substances, hyaluronic acid has almost no risk of side effects. Nevertheless, allergic risks can occur. Also, the hyaluronic acid is often administered by injection.
  • active agents having an effect on skin healing such as allantoin, zinc oxide, D-panthenol or aloe vera and hydrocotyl, are known.
  • a problem to be solved by the invention is to develop a plant extract, non-phototoxic and non-irritating to the skin, which has a healing and anti-inflammatory activity aimed at reducing, partially or totally, the irregularities from the surface of the skin without presenting the side effects of the known treatments.
  • the invention therefore firstly relates to an extract of a plant chosen from Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella and Polygonum hydropiper, characterized in that it is capable of being obtained from the ground and dried leaves of said plant. by supercritical CO2 extraction at a pressure of between 1 and 350 bar and at a temperature between 35 and 60 ° C and containing polygodial.
  • the extracts according to the known prior art may contain polygodial, due to the specific properties of supercritical CO2, the extract obtained according to the invention has a composition different from those obtained by subcritical CO2 extraction of an extract. hexane or by the so-called methods conventional (solvent extraction, liquids or hydrodistillation), with increased quality.
  • a second object of the invention is a composition comprising, in a physiologically acceptable medium, an effective amount of an exfoliate obtained according to the invention for its use to promote healing and to reduce the inflammation of cutaneous disorders.
  • the subject of the invention is a process for obtaining an extract of a plant chosen from Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, and Spilanthes acmella e Polygonum hydropiper, characterized in that it comprises the following stages of:
  • FIG. 1 illustrates the HPLC-DAD profile (with detection at 233 nm) of an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention obtained according to the method of example 1;
  • FIG. 2 represents the anti-inflammatory activity of an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention on fibroblasts by the translocation of NFkB;
  • FIG. 3 represents the healing activity of an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention by the migration of fibroblasts;
  • FIG. 4 illustrates the healing activity of an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention (photo x4 of the healed surface after 24 hours in the presence or absence of the extract);
  • FIG. 5 shows the effectiveness of a composition comprising an extract of Tasmannia lanceolata obtained according to the invention on the reduction of the stretch mark depth measured by the LIFEVIZ® MICRO TM 3D Digital Dermatology Camera
  • FIG. 6 represents the effectiveness of a composition comprising an extract of Tasmannia lanceolata obtained according to the invention on the reduction of the stretch mark depth measured by clinical score (dermatologist);
  • composition 7 represents the efficacy of a composition comprising an extract of Tasmannia lanceolata obtained according to the invention on the reduction of stretch mark staining measured by clinical score (dermatologist);
  • the invention relates to an extract of a plant selected from Tasmannia lanceolata, Drimys w interi, Spilanthes acmella and Polygonum hydropiper.
  • the plant extracted preferentially chosen is Tasmannia lanceolata.
  • the extract according to the invention is obtained from a solid material, more particularly from the crushed and dried leaves of said plant by supercritical carbon dioxide (CO2 SC) extraction at a pressure of between 120 and 350 bar and at a temperature between 35 and 60 ° C.
  • CO2 SC supercritical carbon dioxide
  • Such an extract according to the invention entrusts polygodial.
  • Supercritical fluid extraction and more particularly supercritical CO2, is advantageously used as an alternative to solvent extraction processes or by subcritical CO2 extraction.
  • the principle of plant extraction using CO2 SC is based on the strong variation of the CO2 solvent power as a function of the operating conditions (temperature and pressure), which makes it possible to selectively extract the molecules according to their chemical nature.
  • Very weakly polar, CO2 is an excellent solvent for apolar or slightly polar molecules under supercritical conditions.
  • the pure extract by a simple depressurization which then causes the separation of CO2, which becomes gaseous again, e ⁇ of the extract, recovered in liquid or solid form.
  • the extract according to the invention is preferably obtained by supercritical CO2 extraction at a pressure of between 150 and 285 bar, for example 150, 170, 200, 230, 250 or 285 bar, at a temperature of between 40 and 50 ° C, for example 40, 45 or 50 ° C.
  • the extraction is advantageously carried out at a rate of CO2 per loading rate in a ratio of 10 to 40 kg / kg.
  • the extract according to the invention is preferably obtained from the leaves or berries of the plants chosen from Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella and Polygonum hydropiper.
  • the extract according to the invention is more preferably obtained from the leaves, advantageously milled, even more advantageously finely ground.
  • the leaves are used fresh, semi-dry (prefaned) or dried, preferably dried under standard conditions known to those skilled in the art.
  • An alcoholic co-solvent for example ethanol at a content of between 0 and 10%, may advantageously be used to obtain the extract according to the invention.
  • a fading step of the extract according to the invention thus obtained by supercritical CO2 extraction may also be subsequently performed.
  • the bleaching may be carried out with vegetable black, by molecular distillation, or by fractionation under vacuum.
  • the extract obtained according to the invention may be advantageously formulated in a suitable carrier, for example a lipophilic carrier, such as miglyol, triethylcitrate, glycerine, triacetin, monoprpylene glycol, vegetable oils.
  • a lipophilic carrier such as miglyol, triethylcitrate, glycerine, triacetin, monoprpylene glycol, vegetable oils.
  • the extract according to the invention is formulated in 95% of lipophilic carrier.
  • the extract according to the invention, obtained by supercritical CO2 extraction thus contains a particularly unsaturated sesquiterpene dialdehyde of interest called polygodial (CAS 6754-20-7) of formula:
  • Exfra ⁇ according to the invention es ⁇ non-photo-toxic, non-irritating to the skin e ⁇ moderately irritating to the eyes (H and CAM).
  • the Ames test a biological test for determining the mutagenic potential of such an extract according to the invention has also classified the extract as non-mutagenic.
  • the present invention also relates to the cosmetic and / or dermatological fields, in particular that of cicatrizing and / or anti-inflammatory products.
  • another subject of the invention relates to a composition, for example a cosmetic and / or dermatological composition, comprising in a physiologically acceptable medium, an effective amount of an extract obtained according to the invention, for its use for promote healing and reduce the inflammation of skin disorders.
  • a composition for example a cosmetic and / or dermatological composition, comprising in a physiologically acceptable medium, an effective amount of an extract obtained according to the invention, for its use for promote healing and reduce the inflammation of skin disorders.
  • the extract used in the composition according to the invention obtained from such plants, contains polygodial.
  • a physiologically acceptable medium refers to a medium suitable for use in contact with human animal cells, in particular epidermal cells, without toxicity, irritation, undesired allergic response, and proportionate to a benefit / benefit ratio. reasonable risk.
  • a physiologically acceptable medium may comprise excipients known and used in the cosmetic and dermatological fields. Those skilled in the art will take care to choose the physiologically acceptable medium so that it does not harm the interesting properties of the extract and compositions according to the invention.
  • the extract used in the composition according to the invention can be obtained by any type of extraction.
  • extraction By way of non-limiting example of extraction, mention may be made of techniques known to those skilled in the art, such as hydrodistillation, dry vapor entrainment, extraction with volatile solvent (s) such as hexane, methanol, ethanol alone or mixed with water, maceration, infusion, decoction, percolation, supercritical CO2 extraction.
  • volatile solvent s
  • the extract used in the composition according to the invention is obtained according to a process comprising the following steps of:
  • the extract preferably used in the composition according to the invention comprises a polygodial concentration of between 0.1% and 10%, preferably between 0.2% and 5%, more preferably between 0.5% and 3% by weight of the total weight of the extract, for example 0.5%, 1%, 1, 5%, 2%, 2.5% or 3%.
  • the extract used in the composition according to the invention is preferably obtained from the leaves or berries of such plants chosen from Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella and Polygonum hydropiper, more preferably leaves, advantageously ground, even more advantageously finely. crushed.
  • the extract used in the composition according to the invention can be obtained from fresh, semi-dry (prefaned) or dried leaves, preferably from dried leaves under standard conditions known to those skilled in the art.
  • the composition used according to the invention comprises such an extract of a plant chosen from Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella and Polygonum hydropiper at a concentration of between 0.01 and 20% by weight of the total weight of the composition, preferably between 0.1% and 10%, for example 1%, 2%, 5% and 10%.
  • the composition used according to the invention is formulated to be administered orally or to be applied fopically to the skin.
  • the skin refers to an organ composed of several layers of tissue, which plays the role of protective envelope of the body. It provides a physical barrier that protects the underlying organs and tissues from physical, chemical, and external biological aggression.
  • the skin On an anatomical level, the skin consists of two main parts. The thin superficial part, the epidermis, attached to a thicker internal part: the dermis. A third layer, deeper, is the hypodermis but is not classically not assimilated to a layer of skin. The entire skin of the integuments (nails, hair, hair) constitutes the integument.
  • the skin may also refer to the scalp.
  • the skin does not therefore designate the underlying tissues in continuity with the skin such as the mucous membranes.
  • composition used according to the invention is therefore not intended to be applied to the mucous membranes.
  • composition used according to the invention may be formulated in a form suitable for oral administration, for example as a dietary supplement.
  • the oral dosage forms used may be solid or liquid.
  • Solid oral forms are generally tablets, hard capsules (capsules), soft capsules, sachets comprising a powder or granules.
  • Liquid oral forms are generally oral solutions, syrups, elixirs, oral emulsions, oral suspensions, drinkable drops.
  • the oral composition used according to the invention is in the form of a soft capsule.
  • composition used according to the invention may be in various forms acceptable for topical application, especially in solid form or in liquid form, depending on the physiologically acceptable medium used.
  • the topical composition may be in the form of a water-in-oil (W / O) or oil-in-water (O / W) emulsion, suspension, oil, gel, paste, cream, lotion, solution, serum, for example an aqueous, alcoholic, hydroalcoholic or fatty solution, powder.
  • W / O water-in-oil
  • O / W oil-in-water
  • the topical composition according to the invention is in the form of oil, cream, gel, serum.
  • the composition according to the invention comprising an effective amount of an exfoliate of a plant selected from Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella and Polygonum hydropiper is used to promote healing and reduce inflammation of skin disorders.
  • Skin disorders are understood to mean the alterations or irregularities of the surface of the skin, which may result from physiological problems that have been solved or not, or may be caused by physical or chemical treatments.
  • the alterations or disorders of the skin surface are for example chosen from those associated with acne skin, signs of skin aging, weight gain and weight loss. , or to a pregnancy. They may also be caused by physical or chemical treatments, whether cosmetic treatments or pharmaceutical treatments, or caused by skin conditions, which alterations or irregularities of the skin remain after said disorders are physiologically resolved.
  • the initial phase is accompanied by a strong vascular vasoconstrictor response followed by an increase in capillary permeability and vasodilatation.
  • Thrombin and extravascular collagen contribute to the aggregation and activation of platelets in the clot.
  • Many proteins are delivered by the influx of blood at the site of the injury, which allows the formation of the fibrin clot.
  • the fibrin-fibronectin network provides a reservoir for the many growth factors released in the wound (PDGF, bFGF, TGF ⁇ ,
  • the inflammatory phase is accompanied by vasodilation leading to redness and sensation of heat and pain.
  • Neutrophils and monocytes are attracted to the wound not only by factors released by platelets, but also by bacterial peptides, complement factors, and fibrin degradation products.
  • the neutrophils are the first leukocytes present in the wound; they release proteolytic enzymes such as elastase e ⁇ collagenases e ⁇ provide local anti-infectious function.
  • Monocytes bind to endothelial cells and migrate into the wound. Once in the tissue environment, they differentiate into macrophages and adhere to extracellular matrix proteins; but they are especially, like platelets, a source of cytokines such as IGF, TGF, TNF or PDGF. These substances amplify the inflammatory response and stimulate the proliferation of fibroblasts, the production of collagen and more broadly, the proliferation of granulation tissue.
  • This phase corresponds to the transition between inflammation and scarring by secreting growth factors that stimulate cell proliferation and matrix tissue formation.
  • the tissue repair phase then takes place with formation of the granulation tissue.
  • This phase lasts 10 to 15 days and corresponds to the proliferation of fibroblasts, to angiogenesis and to the synthesis of the extracellular matrix.
  • This phase is largely dependent on cytokines (IGF1, EGF, TNF ⁇ , TGF ⁇ , PDGF-BB) that promote the migration and proliferation of fibroblasts.
  • Fibroblasts synthesize a new extracellular matrix consisting mainly of early collagen type III, fibronectin, proteoglycans (hyaluronic acid, chondroitin sulfate ). They also participate in matrix remodeling by producing proteolytic enzymes including metalloproteinases.
  • the matrix also serves as a reservoir of growth factors.
  • Keratinocytes migrate to the matrix components and re-epithelialize the wound. Once the wound is closed by a monolayer of keratinocytes, they stop their migration, multiply and differentiate.
  • the final phase of healing of the skin corresponds to the maturation of the scar with a re-modeling of the tissues by the reorganization of the neosynthesized collagen fibers which will eventually reform a healthy tissue. Remodeling of the extracellular matrix passes through an inflammatory and proliferative phase lasting up to two months after closure of the wound. Little by little the granulation tissue becomes scarce into fibroblasts, a denser collagenous structure appears, while the vascular network is organized. Matrix remodeling will increase the resistance of the scar considerably up to 80-90% of its initial strength by the sixth week. Fibronectin and hyaluronic acid are gradually being replaced by collagens, elastic fibers and glycosaminoglycans (GAGs). Age, tension forces, pressure influence the synthesis and organization of collagen molecules. The scars are nevertheless, in all cases, less resistant and less elastic than the normal skin, partly because of a certain elastin deficiency.
  • composition of the extracellular matrix plays an important role in the migration of inflammatory cells, in the differentiation of conjunctive cells and epithelial cells.
  • the healing process is characterized by important modifications of the extracellular matrix.
  • the extracellular matrix contains GAGs, fibronectin and type III collagen.
  • Fibronectin stimulates the migration of endothelial cells and fibroblasts into the inflammatory focus.
  • composition according to the invention is preferably used to prevent and / or promote the reduction of scars.
  • composition according to the invention is also preferably used to prevent and / or promote the reduction of stretch marks.
  • the stretch marks are presented as parallel linear or spindle streaks of 1 or more cm in length and 1 mm to 1 cm in width. They are depressed and covered with a wrinkled epidermis of pearly white (in case of old stretch mark) or pink or purple (in case of recent stretch mark). They are almost always multiple and symmetrical and their direction is generally radiated on the breasts, vertical and oblique on the flanks, transverse on the lumbosacral region.
  • stretch mark formation mechanism was initially perceived as solely the result of the rupture of the elastic tissue after a large mechanical tension.
  • stretch marks seem to result first and foremost from fibroblast involvement. It was highlighted at the level of stretch marks overexpression of interferon gamma at the expense of TGF-6 thus preventing proper functioning of the fibroblast and healing of good quality.
  • the consequences are degeneration of collagen (stretched and atrophic collagen bundles) and elastic fibers (Thick and tortuous on the periphery of the stretch marks and decrease of the superficial network) responsible for a decrease in the thickness of the dermis.
  • composition according to the invention is more preferably used to reduce the depth and color of stretch marks as well as to increase the density and thickness of the dermis of stretch marks.
  • the invention is illustrated hereinafter, without any limiting character, by an exemplary embodiment, examples of formulations of a composition containing a Tasmannia lanceolata extract obtained according to the invention and the results of biological activities. .
  • the extract is obtained from leaves of Tasmannia lanceolata. 250 kg of ground dried leaves are extracted with supercritical CO2 at a pressure of 290 bars and a temperature of 45 ° C. with a co-solvent ratio of ethanol of 4%. The extract obtained is then concentrated and diluted in miglyol (25% extract / 75% miglyol): 77 kg of extract 25% on miglyol are obtained. This extract is then decolorized with 3% of activated carbon: 77 kg of extract are thus diluted with ethanol (385 kg) to which 3% of activated charcoal is added 2.31 kg. This discoloration is carried out with stirring. Then filtration is done, and the filtrate is concentrated.
  • the extract thus obtained is finally diluted on a support type miglyol to standardize the ingredient to 0.5% polygodial.
  • the analytical composition of the extract obtained according to Example 1 was determined by HPLC-DAD (with detection at 233 nm), ⁇ illustrated by the chromafogram of FIG. 1 under the operating conditions described below. .
  • the Polygodial content As illustrated by the chromafogram of FIG. 1, the Polygodial content of 0.53% by weight of the total weight of the extract.
  • the exfray ⁇ preferably used in the composition according to the invention comprises a polygodial concentration of between 0.1% and 10%, preferably between 0.2% and 5%, more preferably between 0.5% and 3%. by weight of the total weight of the extract, for example 0.5%, 1%, 1, 5%, 2%, 2.5% or 3%.
  • phase B add it to aqueous phase A. Homogenize until it is uniform.
  • the cells were pre-exposed to the extract of Tasmannia lanceolata obtained according to Example 1 at 5% in miglyol or in SN50 peptide (a reference inhibitor of NFkB translocation) prior to LPS exposure. 24 hours after the deposition of the cells, the fibroblasts were exposed to 5 concentrations of extracts of Tasmannia lanceolata or at a concentration of the SN50 peptide for 24 hours.
  • the cells were exposed for 3 and 24 hours to LPS extracts (1 ng / mL) and Tasmannia lanceolata extract or SN50 peptide. Finally, after 3 hours of exposure, cells were fixed and stained for quantification of NFkB.
  • the extract of Tasmannia lanceolata according to the invention thus reduces the inflammation of the skin.
  • LPS at 1 ng / mL induces moderate inflammation, characterized by a significant translocation of NFkB for 10% of the cell population compared to control alone.
  • the SN50 peptide significantly inhibits the translocation of NFKB induced bet ng / mL of LPS after 3 hours of exposure.
  • Tasmannia lanceolata extract at 1, 2.5, 5 and 10 ppm shows no cytotoxicity and induces a significant decrease of approximately 50% for the 2.5, 5 and 10 ppm NFkB in human fibroblasts.
  • the cells were pre-treated with the extract of Tasmannia lanceolata obtained according to Example 1 at 5% in miglyol and Nucblue (live cell assay nuclei dye) in growth medium without growth factor. After 24 hours of pre-treatment, the cells were mechanically scratched and the medium renewed. Images have been taken with x4 magnification for 24 hours.
  • the Kenyan pepper extract according to the invention induces a significant increase (+ 65% after 24 hours) of fibroblast migration compared to control (without growth factor) and this for concentrations of only 1 to 2.5 ppm.
  • TGF-b synthesized in particular by keratinocytes, is a stimulation factor for the dermal fibroblast that will synthesize collagen I and III.
  • the TGF-b assay was performed by an immunoassay technique with spectrophotometric concentration reading ( ⁇ g / ml) (BioTechne assay kits). The skin fragments having the same surface (checking the weight of each fragment), the assay was carried out from the culture supernatants.
  • a composition comprising an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention induces a significant increase, on average more than twice, in the concentration of TGF-B in the treated skin compared to the control.
  • the collected skin fragments were solubilized in tris-HCl buffer, 100 mM, 100 mM NaCl, Triton XI, 000.1%, pH 7.4. After grinding with a poffer, the amount of pro-collagen type I (pg / ml) was evaluated by ELISA (Human Pro-Collagen I alpha 1, BioTechne).
  • a composition comprising an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention induces a significant increase, on average of at least 30%, in the concentration of pro-collagen 1 in the treated skin compared to the control.
  • the amount of soluble elastin was measured by a spectrocolorimetric assay method at 513 nm, after fixation of the dye 5,10,15,20- ⁇ e-raphenyl-21,23-porphirine Tetrasulfonate (Fastin Elastin Assay Kit, Interchim).
  • composition comprising an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention induces a significant increase, on average of more than 10%, in the concentration of elastin in the treated skin compared to the control.
  • composition according to the invention comprising an extract of Tasmannia lanceolata promotes the healing of the skin and thus the reduction of scars and vertigo.
  • Example 10 Clinical study against placebo to prove the effectiveness of a composition comprising an extract of Tasmannia lanceolata according to the invention against vergefures
  • composition comprising an exfray of Tasmannia lanceolata according to the following invention: Table 6: TASMANOL TM Oil According to the Invention
  • composition was respectively applied twice daily in areas with stretch marks (thighs, hips, belly) for a period of two months.
  • composition according to the invention tested induces a significant reduction (p ⁇ 0.05) in the stretch mark depth measured by the 3D digital dermatology camera.
  • LIFEVIZ® MICRO TM as well as clinical score (p ⁇ 0.01) between 0 and 3 with:
  • composition according to the invention tested induces a significant reduction (p ⁇ 0.01) in stretch mark staining measured by clinical score between 0 and 3 with:
  • the composition according to the invention tested induces a significant increase in the density of the dermis of stretch marks after 4 weeks of treatment (p ⁇ 0.05) and after 8 weeks of treatment (p ⁇ 0, 01) measured by ultrasound.
  • composition according to the invention tested induced a significant increase in the thickness of the dermis of stretch marks after 8 weeks of treatment (p ⁇ 0.01) measured by ultrasound (miti).
  • the skin is smoother for 80% of subjects.
  • composition comprising an extract of Tasmannia Lanceolata obtained according to the invention reduces the appearance and coloring of stretch marks, reduces the depth of stretch marks, increases the density of the dermis and improves the softness of the skin.

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Abstract

L'invention concerne un extrait d'une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper. L'invention se caractérise en ce que l'extrait est susceptible d'être obtenu à partir des feuilles broyées et séchées de ladite plante par extraction au CO2 supercritique à une pression comprise entre 120 et 350 bars et à une température de 35 à 60°C et en ce qu'il contient du polygodial. L'invention concerne également un procédé d'obtention d'un tel extrait. L'invention concerne enfin une composition comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d'un extrait d'une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper, pour favoriser la cicatrisation et diminuer l'inflammation de désordres cutanés.

Description

EXTRAITS DE PLANTES CONTENANT DU POLYGODIAL, COMPOSITIONS COMPRENANT DE TELS EXTRAITS ET LEURS UTILISATIONS COSMETIQUES ET/OU
DERMATOLOGIQUES
La présente invention concerne le domaine des ingrédients actifs cosmétiques et/ou dermatologiques. Elle concerne plus particulièrement un extrait obtenu à partir d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper, ainsi que son procédé d’obtention, des compositions comprenant des extraits de telles plantes et leurs utilisations cosmétiques et/ou dermatologiques.
Tasmannia lanceolata (connue également sous le nom de Drimys aromatica ou de Drimys lanceolata, et communément appelée Poivre de Tasmanie ou Poivre des montagnes) est une plante sauvage de la famille des Winferacées, native du Nord de la Tasmanie.
C’est un arbuste aux feuilles persistantes. Les feuilles son† lancéolées, généralement de 4 à 8 cm de longueur pour 1 à 2 cm de large, ver† foncé, très luisantes, au revers mat et clair. Les jeunes tiges son† de couleur rouge. Courant juin généralement, les petites fleurs de couleur crème, à 5 pétales étroits et cireux, apparaissent regroupées au bout des branches. L’espèce est dioïque, chaque arbuste est mâle ou femelle. Les fleurs femelles se reconnaissent facilement avec leur ovaire, petite boule verte au centre de la fleur. Lorsque cette fleur est fécondée, le fruit s’arrondit en deux lobes et rougit. Il devient noir à maturité. Il faut avoir les deux sexes pour espérer une fructification et que Tasmannia lanceolata se pare de belles grappes charnues, rouges à noires, très décoratives.
Tasmannia lanceolata est principalement utilisée dans le domaine alimentaire comme condiment en tan† que substitut du poivre, par exemple pour ses feuilles séchées et broyées et ses baies.
Tasmannia lanceolata, notamment ses racines, est également utilisée en médecine traditionnelle chinoise et entre dans la formulation complexe de compositions avec de nombreux autres extraits végétaux.
A titre d’exemple, on peut citer le document CN 1 07582791 qui divulgue une composition comprenant notamment des racines de Tasmannia lanceolata pour le traitement de l’aménorrhée. On peu† également citer le document CN 107412567 qui décrit l’utilisation de Tasmannia lanceolata, notamment les fruits mûrs, dans une composition pour le traitement des démangeaisons cutanées.
En outre, le document Garland e† al. (« Sub-critical carbon dioxide extraction of †he hexane extrac† of †he leaves of Tasmannia Lanceolata », The Journal of Essential Oil Research, vol.28 no.l , 2 janvier 2016) décrit l’extraction au CO2 subcritique d’un extrait hexanique des feuilles de Tasmannia lanceolata, l’extrait contenant du polygodial.
Le document JP2004083488 décrit un extrait de Polygonum hydroplper Linné obtenu par extraction dans un solvant à 80°C pendant 3h sous agitation, e† concentré sous pression réduite à 40°C après filtration e† enfin séché (exemple 1 ) .
Le document JP2003073264 décrit un extrait de Tasmannia lanceolata obtenu par extraction de feuilles séchées dans 10 volumes de méthanol chauffé au reflux pendant 3h, filtration e† évaporation sous pression réduite puis ajout d’eau distillée e† d’acétate d’éthyle pour obtenir l’extrait après séparation.
Le document KR20120031625 décrit la plante Persicaria hydropiper L. Spach dont le fruit es† connu pour traiter les maux de l’abdomen, l’œdème e† les plaies. Le fruit apparaît contenir 0,13% d’huile essentielle dont les principaux ingrédients sont tadéonone (polygodial), isotadeonal, confertifoline, polygonone.
Le document US5523105 décrit un extrait de plante contenant du polygodial par extraction d’une poudre sèche par exemple de Polygonum hydroplper, Drimys lanceolata ou Warburgia stublmannii, successivement avec de l’éther de pétrole e† du méthanol, l’extrait obtenu étant en outre purifié par chromatographie en phase liquide. Ce document décrit également un extrait de plante contenant un polygodial obtenu à partir d'une plante sèche par ce même procédé en utilisant d’autres solvants organiques tels que l'hexane, l'éther éthylique, l'acétone, l'éthanol e† le méthanol e† concentration sous pression réduite.
De tels documents ne divulguent donc pas un extrait de plante contenant du polygodial pour traiter des désordres cutanés tels que des cicatrices et/ou vergetures.
Par ailleurs, pour traiter des désordres cutanés tels que des cicatrices et/ou vergetures, il existe de nombreux traitements topiques à base par exemple de silicone, de corticoïdes tels que la cortisone, de rétinoïdes tels que la trétinoïne ou d’acide hyaluronique. Le traitement occlusif avec un pansement de silicone nécessite néanmoins une utilisation sur plusieurs mois avec une occlusion d’au minimum 12 heures par jour. Les principaux effets indésirables retrouvés son† une irritation, un prurit et une macération cutanée.
Les principaux effets indésirables des corticoïdes à cour† terme son† une augmentation de l’appétit, une prise de poids, une rétention d’eau, une tendance à l’agressivité avec une insomnie et une nervosité, une aggravation d’une dépression, et fréquemment un déséquilibre transitoire d’un diabète ou d’une hypertension artérielle.
Concernant les rétinoïdes, ils son† connus pour être photosensibles, en particulier l’isotrétinoïne. Ils son† également potentiellement irritants, notamment la trétinoïne.
Contrairement à d'autres substances, l'acide hyaluronique ne présente quasiment pas de risques d'effets secondaires. Néanmoins, des risques allergiques peuvent survenir. Aussi, l’administration d’acide hyaluronique est souvent réalisée par injection.
On connaît d’autres actifs présentant un effet sur la cicatrisation de la peau tels que l’allantoïne, l’oxyde de zinc, le D-panthénol ou encore l’aloe vera et l’hydrocotyle.
Il existe aussi d’autres techniques relativement coûteuses et nécessitant l’intervention d’un spécialiste, don† les peelings, la micro-dermabrasion, la micro ponction, ainsi que le traitement au laser fractionné ablatif ou non ablatif.
Considérant ce qui précède, un problème que se propose de résoudre l'invention est de développer un extrait végétal, non phototoxique et non irritant pour la peau, qui possède une activité cicatrisante et anti-inflammatoire visant à réduire, partiellement ou totalement, les irrégularités de la surface de la peau sans présenter les effets secondaires des traitements connus.
L’invention a donc pour premier objet un extrait d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper, caractérisé en ce qu’il est susceptible d’être obtenu à partir des feuilles broyées et séchées de ladite plante par extraction au CO2 supercritique à une pression comprise entre 1 20 et 350 bars et à une température comprise entre 35 et 60°C et en ce qu’il contient du polygodial.
Toutefois, bien que les extraits selon l’art antérieur connu puissent contenir du polygodial, de par les propriétés spécifiques du CO2 supercritique, l’extrait obtenu selon l’invention a une composition différente de ceux obtenus par extraction au CO2 subcritique d’un extrait hexanique ou par les procédés dits classiques (extraction par solvant, liquides ou hydrodistillation), avec une qualité accrue.
En outre, l’invention a pour deuxième objet une composition comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d’un exfrai† obtenu selon l’invention, pour son utilisation pour favoriser la cicatrisation e† diminuer l’inflammation de désordres cutanés.
L’invention a pour dernier objet un procédé d’obtention d’un extrait d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella e† Polygonum hydropiper, caractérisé en ce qu’il comprend les étapes suivantes de :
- extraction des feuilles ou baies, préférentiellement feuilles, de ladite plante au CO2 supercritique à une pression comprise entre 120 e† 350 bars, préférentiellement entre 150 à 285 bars, e† à une température comprise entre 35 e† 60°C, préférentiellement entre 40 e† 50°C ; e†
- récupération dudit extrait contenant du polygodial.
Dans cette description, à moins qu'il ne soi† spécifié autrement, il es† entendu que, lorsqu'un intervalle es† donné, il inclut les bornes supérieure e† inférieure dudit intervalle.
L'invention e† les avantages qui en découlent seront mieux compris à la lecture de la description e† des modes de réalisation non limitatifs qui suivent, au regard des dessins annexés dans lesquels :
- la Figure 1 illustre le profil HPLC-DAD (avec détection à 233 nm) d’un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention obtenu selon le procédé de l’exemple 1 ;
- la Figure 2 représente l’activité anti-inflammatoire d’un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention sur des fibroblastes par la translocation du NFkB ;
- la Figure 3 représente l’activité cicatrisante d’un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention par la migration des fibroblastes ;
- la Figure 4 illustre l’activité cicatrisante d’un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention (photo x4 de la surface cicatrisée après 24h en présence ou non de l’extrait) ;
- la Figure 5 représente l’efficacité d’une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’invention sur la réduction de la profondeur des vergetures mesurée par la caméra pour dermatologie numérique 3D LIFEVIZ® MICRO™ ; - la Figure 6 représente l’efficacité d’une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’invention sur la réduction de la profondeur des vergetures mesurée par score clinique (dermatologue) ;
- la Figure 7 représente l’efficacité d’une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’invention sur la réduction de la coloration des vergetures mesurée par score clinique (dermatologue) ;
- la Figure 8 représente l’efficacité d’une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’invention sur l’augmentation de la densité du derme des vergetures mesurée par échographie ;
- la Figure 9 représente l’efficacité d’une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’invention sur l’augmentation de l’épaisseur du derme des vergetures mesurée par échographie ; et
- la Figure 10 représente l’amélioration de l'apparence des vergetures par auto-évaluation.
L’invention concerne un extrait d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys w interi, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper.
La plante extraite préférentiellement choisie est Tasmannia lanceolata.
L’extrait selon l’invention est obtenu à partir d'une matière solide, plus particulièrement à partir des feuilles broyées et séchées de ladite plante par extraction au dioxyde de carbone supercrifique (CO2 SC) à une pression comprise entre 120 et 350 bars et à une température comprise entre 35 et 60°C.
Un tel extrait selon l’invention confient du polygodial.
L'extraction par fluide supercrifique, et plus particulièrement par le CO2 supercrifique, est avantageusement utilisée comme alternative aux procédés d'extraction par solvants ou par extraction au CO2 subcrifique.
Le CO2 en fan† que fluide supercritique présente des avantages notables : il est neutre, non toxique, non polluant, non inflammable, ce qui en fait un solvant dit « ver†». Il est également largement disponible à de très hauts degrés de pureté et à des coûts modérés, est facile à éliminer et ne présente ainsi pas de résidus dans l’extrait. De plus, ses paramètres critiques son† faibles (Te = 31 °C, Pc = 73,8 bar).
Le principe de l'extraction végétale utilisant le CO2 SC repose sur la forte variation du pouvoir solvant du CO2 en fonction des conditions opératoires (température et pression), ce qui permet d'extraire sélectivement les molécules selon leur nature chimique. Très faiblement polaire, le CO2 se révèle être un excellent solvant des molécules apolaires ou peu polaires dans les conditions supercritiques. Partant de ce principe, une fois le composé désiré dissous dans le milieu CO2 SC, il es† aisé d'obtenir l'extrait pur par une simple dépressurisation qui entraîne alors la séparation du CO2, redevenu gazeux, e† de l'extrait, récupéré sous forme liquide ou solide.
Ce procédé permet d’éviter des opérations d'élimination des résidus de solvant (extraction, imprégnation, formulation), opérations indispensables lorsque ce solvant es† un composé organique. De plus, les faibles températures mises en œuvre, inférieures à 60°C, permettent de conserver l'intégrité chimique des molécules thermosensibles traitées e† de minimiser les coûts opératoires. Ces propriétés font de l'extraction au CO2 supercritique une alternative, écologiquement e† économiquement viable, aux procédés de distillation.
L’extrait selon l’invention es† préférentiellement obtenu par extraction au CO2 supercritique à une pression comprise entre 150 e† 285 bars, par exemple de 150, 1 70, 200, 230, 250 ou 285 bars, e† à une température comprise entre 40 e† 50°C, par exemple de 40, 45 ou 50°C.
L’extraction es† avantageusement réalisée à un taux de CO2 par taux de charge suivant un ratio de 10 à 40 kg/kg.
L’extrait selon l’invention es† préférentiellement obtenu à partir des feuilles ou des baies des plantes choisies parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella e† Polygonum hydropiper.
L’extrait selon l’invention es† plus préférentiellement obtenu à partir des feuilles, avantageusement broyées, encore plus avantageusement finement broyées.
Les feuilles sont utilisées fraîches, semi-sèches (préfanées) ou séchées, préférentiellement séchées dans des conditions standards connues de l’homme du métier.
Un co-solvant alcoolique, par exemple l’éthanol à une teneur comprise entre 0 e† 10% pourra être avantageusement utilisé pour obtenir l’extrait selon l’invention.
Avantageusement, une étape de décoloration de l’extrait selon l’invention ainsi obtenu par extraction au CO2 supercritique peu† également être ensuite réalisée.
A titre d’exemples illustratifs non limitatifs, la décoloration peu† être réalisée au noir végétal, par distillation moléculaire, ou par fractionnement sous vide.
L’extrait obtenu selon l’invention peu† être avantageusement formulé dans un support approprié, par exemple un support lipophile, tel que du miglyol, triéthylcitrate, glycérine, triacétine, monoprpylene glycol, huiles végétales. Par exemple, l’extrait selon l’invention es† formulé dans 95 % de support lipophile. L’extrait selon l’invention, obtenu par extraction au CO2 supercritique, contient ainsi un dialdéhyde sesquiterpène insaturé particulièrement d’intérêt appelé polygodial (CAS 6754-20-7) de formule :
Figure imgf000009_0001
L’innocuité d’un tel extrait selon l’invention, par exemple un extrait de feuilles avantageusement broyées e† séchées de Tasmannia lanceolata, a été démontrée à travers différents tests toxicologiques.
L’exfrai† selon l’invention es† non photo-toxique, non irritant pour la peau e† modérément irritant pour les yeux (H ET CAM).
En outre, le tes† d'Ames, un tes† biologique permettant de déterminer le potentiel mutagène d’un tel extrait selon l’invention a également classé l’extrait comme non mutagène.
La présente invention concerne également les domaines cosmétique et/ou dermatologique, en particulier celui des produits cicatrisants et/ou anti- inflammatoires.
A ce† effet, un autre objet de l’invention concerne une composition, par exemple une composition cosmétique et/ou dermatologique, comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d’un extrait obtenu selon l’invention, pour son utilisation pour favoriser la cicatrisation e† diminuer l’inflammation de désordres cutanés.
L’extrait utilisé dans la composition selon l’invention, obtenu à partir de telles plantes, contient du polygodial.
De façon surprenante, l’extrait obtenu à partir de telles plantes choisies parmi Tasmannia lanceolata, Drimys w interi, Spilanthes acmella e† Polygonum hydroplper, préférentiellement à partir de Tasmannia lanceolata e† plus préférentiellement à partir des feuilles, avantageusement broyées e† séchées, de Tasmannia lanceolata, a montré des activités cicatrisante e† anti inflammatoire inédites.
Un milieu physiologiquement acceptable désigne un milieu adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines e† animales, en particulier les cellules de l'épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue e† similaires, e† proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable. Un tel milieu physiologiquement acceptable peut comprendre des excipients connus et utilisés dans les domaines cosmétique et dermatologique. L'homme du métier veillera à choisir le milieu physiologiquement acceptable de manière à ce qu'il ne nuise pas aux propriétés intéressantes de l'extrait et des compositions selon l'invention.
L’extrait utilisé dans la composition selon l’invention peut être obtenu par tout type d’extraction.
A titre d’exemple non limitatif d’extraction, on peut citer des techniques connues de l’homme du métier telles qu’une hydrodistillation, entrainement à la vapeur sèche, extraction par solvant(s) volatil (s) tel (s) que l’hexane, méthanol, éthanol pris seul ou en mélange avec de l’eau, macération, infusion, décoction, percolation, extraction au CO2 supercrifique.
De manière préférée, l’extrait utilisé dans la composition selon l’invention est obtenu selon un procédé comprenant les étapes suivantes de :
- extraction au CO2 supercrifique à une pression comprise entre 120 et 350 bars, préférentiellement entre 150 et 285 bars, et à une température comprise entre 35 et 60°C, préférentiellement entre 40 et 50°C ; et
- récupération dudit extrait contenant du polygodial.
L’extrait préférentiellement utilisé dans la composition selon l’invention comprend une concentration en polygodial comprise entre 0,1 % et 10%, préférentiellement entre 0,2% et 5%, plus préférentiellement entre 0,5% et 3% en poids du poids total de l’extrait, par exemple 0,5%, 1 %, 1 ,5%, 2%, 2,5% ou 3%.
L’extrait utilisé dans la composition selon l’invention est préférentiellement obtenu à partir des feuilles ou des baies de telles plantes choisies parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper, plus préférentiellement des feuilles, avantageusement broyées, encore plus avantageusement finement broyées.
L’extrait utilisé dans la composition selon l’invention peut être obtenu à partir des feuilles fraîches, semi-sèches (préfanées) ou séchées, préférentiellement à partir des feuilles séchées dans des conditions standards connues de l’homme du métier.
La composition utilisée selon l’invention comprend un tel extrait d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper à une concentration comprise entre 0,01 et 20% en poids du poids total de la composition, préférentiellement entre 0,1 % et 10%, par exemple 1 %, 2%, 5% et 10%. La composition utilisée selon l’invention est formulée pour être administrée par voie orale ou être appliquée fopiquement sur la peau.
La peau désigne un organe composé de plusieurs couches de tissus, qui joue notamment le rôle d'enveloppe protectrice du corps. Elle constitue une barrière physique qui protège les tissus e† organes sous-jacents des agressions physiques, chimiques e† biologiques extérieures. Sur le plan anatomique, la peau comprend deux parties principales. La partie superficielle mince, l'épiderme, rattachée à une partie interne plus épaisse : le derme. Une troisième couche, plus profonde, constitue l'hypoderme mais n'es† classiquement pas assimilée à une couche de peau. L'ensemble peau e† phanères (/.e. ongles, poils, cheveux) constitue le tégument.
La peau peu† également désigner le cuir chevelu.
La peau ne désigne donc pas les tissus sous-jacents en continuité avec la peau telles que les muqueuses.
La composition utilisée selon l’invention n’es† donc pas destinée à être appliquée sur les muqueuses.
La composition utilisée selon l’invention peu† être formulée sous une forme adaptée pour une administration par voie orale, par exemple en tant que complément alimentaire.
Les formes galéniques orales utilisées peuvent être solide ou liquide. Les formes orales solides sont généralement des comprimés, capsules dures (gélules), capsules molles, sachets comprenant une poudre ou des granulés. Les formes orales liquides sont généralement des solutions buvables, sirops, élixirs, émulsions buvables, suspensions buvables, gouttes buvables.
Préférentiellement, la composition orale utilisée selon l’invention se présente sous forme de capsule molle.
La composition utilisée selon l'invention peu† se présenter sous diverses formes acceptables pour une application topique, notamment sous une forme solide ou sous une forme liquide, en fonction du milieu physiologiquement acceptable utilisé.
La composition topique peu† se présenter sous forme d’émulsion du type eau dans huile (E/H) ou huile dans eau (H/E), suspension, huile, gel, pâte, crème, lotion, solution, sérum, par exemple une solution aqueuse, alcoolique, hydro alcoolique ou grasse, poudre.
Préférentiellement, la composition topique selon l’invention se présente sous forme d’huile, crème, gel, sérum. La composition selon l’invention comprenant une quantité efficace d’un exfrai† d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella e† Polygonum hydropiper es† utilisée pour favoriser la cicatrisation e† diminuer l’inflammation de désordres cutanés.
Par désordres cutanés on entend les altérations ou irrégularités de la surface de la peau, pouvant résulter de problèmes physiologiques résolus ou non ou être provoquées par des traitements physiques ou chimiques.
Les altérations ou désordres de la surface de la peau, y compris les irrégularités de la peau, sont par exemple choisis parmi ceux associés à une à une peau acnéique, aux signes du vieillissement cutané, à une prise de poids, à une perte de poids, ou à une grossesse. Elles peuvent être également provoquées par des traitements physiques ou chimiques, qu'il s'agisse de traitements cosmétiques ou de traitements pharmaceutiques, ou encore provoquées par des affections de la peau, lesquelles altérations ou irrégularités de la peau demeurent après que lesdits désordres soient physiologiquement résolus.
Le processus de cicatrisation de la peau regroupe plusieurs phases distinctes.
La phase initiale es† accompagnée d’une vive réponse vasculaire de vasoconstriction suivie d’une augmentation de la perméabilité des capillaires e† d’une vasodilatation. La thrombine e† le collagène extravasculaire contribuent à l’agrégation e† à l’activation des plaquettes du caillot. De nombreuses protéines sont apportées par l’afflux de sang sur le site de la blessure, ce qui permet la formation du caillot de fibrine. Le réseau fibrine-fibronectine offre un réservoir aux nombreux facteurs de croissance libérés dans la plaie (PDGF, bFGF, TGFa,|3) qui sont responsables de l’activation des polynucléaires neutrophiles e† des macrophages. Ces cellules vont ensuite lutter contre l’infection, nettoyer la plaie e† participer à la renutrition locale.
Ensuite, la phase inflammatoire es† accompagnée d’une vasodilatation conduisant à des rougeurs e† des sensations de chaleur e† de douleur. Les neutrophiles e† les monocytes sont attirés sur la plaie non seulement par des facteurs libérés par les plaquettes, mais également par des peptides bactériens, des facteurs du complément e† des produits de dégradation de la fibrine. Les polynucléaires neutrophiles sont les premiers leucocytes présents dans la plaie ; ils libèrent des enzymes protéolytiques tels que l’élastase e† des collagénases e† assurent une fonction anti-infectieuse locale. Les monocytes se fixent sur les cellules endothéliales e† migrent dans la plaie. Une fois dans le milieu tissulaire, ils se différencient en macrophages ef adhèrent aux protéines de la matrice extracellulaire ; mais ils sont surtout, comme les plaquettes, une source de cytokines telles que I’ IGF, le TGF, le TNF ou le PDGF. Ces substances amplifient la réponse inflammatoire et stimulent la prolifération des fibroblastes, la production de collagène et plus largement, la prolifération du tissu de granulation.
Cette phase correspond à la transition entre l’inflammation et la cicatrisation en sécrétant des facteurs de croissance qui stimulent la prolifération cellulaire et la formation du tissu matriciel.
La phase de réparation tissulaire a alors lieu avec formation du tissu de granulation. Cette phase dure 10 à 15 jours et elle correspond à la prolifération de fibroblastes, à l’angiogenèse et à la synthèse de la matrice extracellulaire. Cette phase est largement dépendante des cytokines (IGF1 , EGF, TNFa, TGF^, PDGF-BB) qui favorisent la migration et la prolifération des fibroblastes. Les fibroblastes synthétisent une nouvelle matrice extra-cellulaire composée principalement au début, de collagène de type III, de fibronectine, de protéoglycanes (acide hyaluronique, chondroïtine sulfate...). Ils participent également au remodelage matriciel en produisant des enzymes protéolytiques dont les métalloprotéinases. La matrice sert également de réservoir de facteurs de croissance.
S’en suit une ré-épithélialisation qui se déroule en plusieurs phases : migration des cellules épithéliales à partir des berges ou des annexes, leur multiplication et la différenciation de l’épiderme reformé.
Les kératinocytes migrent sur les composants matriciels et permettent de ré-épithélialiser la plaie. Une fois la plaie fermée par une monocouche de kératinocytes, ceux-ci arrêtent leur migration, se multiplient et se différencient.
La phase finale de la cicatrisation de la peau correspond à la maturation de la cicatrice avec une re-modélisation des tissus par la réorganisation des fibres de collagènes néosynthétisées qui finiront par reformer un tissu sain. Le remodelage de la matrice extra-cellulaire passe par une phase inflammatoire et proliférative durant jusqu’à deux mois après la fermeture de la plaie. Peu à peu le tissu de granulation se raréfie en fibroblastes, une structure collagénique plus dense apparaît, tandis que le réseau vasculaire s’organise. Le remodelage matriciel va accroître la résistance de la cicatrice de façon considérable, jusqu’à 80-90% de sa force initiale vers la sixième semaine. La fibronectine et l’acide hyaluronique sont progressivement remplacés par les collagènes, les fibres élastiques et les glycosaminoglycanes (GAG). L’âge, les forces de tension, la pression influencent la synthèse et l’organisation des molécules de collagène. Les cicatrices sont néanmoins, dans tous les cas, moins résistantes et moins élastiques que la peau normale, en partie à cause d’un certain déficit en élastine.
La composition de la matrice extracellulaire joue un rôle important dans la migration des cellules inflammatoires, dans la différenciation des cellules conjonctives et des cellules épithéliales. Le processus de cicatrisation est caractérisé par d'importantes modifications de la matrice extracellulaire.
Lors de la cicatrisation, la matrice extracellulaire contient des GAG, de la fibronectine et du collagène de type III.
La fin du processus de cicatrisation est caractérisée par :
- une diminution progressive de la concentration en fibronectine ;
- une modification de la composition en GAG de la matrice extracellulaire ;
- une dégradation du collagène de type III, remplacé par du collagène de type I.
La fibronectine stimule la migration des cellules endothéliales et des fibroblastes dans le foyer inflammatoire.
La composition selon l’invention est préférentiellement utilisée pour prévenir et/ou favoriser la réduction des cicatrices.
La composition selon l’invention est également préférentiellement utilisée pour prévenir et/ou favoriser la réduction des vergetures.
Les vergetures se présentent comme des stries linéaires ou fusiformes parallèles de 1 ou plusieurs cm de longueur sur 1 mm à 1 cm de largeur. Elles sont déprimées et recouvertes d’un épiderme plissé de couleur blanc nacré (en cas de vergeture ancienne) ou de couleur rose ou pourpre (en cas de vergeture récente). Elles sont presque toujours multiples et symétriques et leur direction est en général radiée sur les seins, verticale et oblique sur les flancs, transversale sur la région lombo-sacrée.
Le mécanisme de formation des vergetures a été initialement perçu comme uniquement le résultat de la rupture du tissu élastique après une tension mécanique importante. En fait, la vergeture semble résulter d’abord et avant tout d’une atteinte du fibroblaste. Il a été mis en évidence au niveau des vergetures une surexpression de l’interféron gamma aux dépens du TGF-6 empêchant ainsi un fonctionnement correct du fibroblaste et une cicatrisation de bonne qualité. Les conséquences consistent en une dégénérescence du collagène (faisceaux de collagène étirés et atrophiques) et des fibres élastiques (épaisses e† tortueuses en périphérie des vergetures et diminution du réseau superficiel) responsable d’une diminution de l’épaisseur du derme.
La composition selon l’invention es† plus préférentiellement utilisée pour réduire la profondeur e† la coloration des vergetures ainsi que pour augmenter la densité e† l’épaisseur du derme des vergetures.
L'invention es† illustrée ci-après, sans aucun caractère limitatif, par un exemple de mode de réalisation, des exemples de formulations d’une composition contenant un extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’invention e† des résultats d’activités biologiques.
Exemple 1 : Procédé d’obtention d’un extrait de Tasmannia lanceolata par extraction au CO2 supercritiaue
Selon un exemple de mode de réalisation préféré de l’invention, l’extrait es† obtenu à partir de feuilles de Tasmannia lanceolata. 250 kg de feuilles séchées e† broyées sont extraits au CO2 supercritique à une pression de 290 bars e† une température de 45°C avec un rapport de co-solvant éthanol de 4%. L’extrait obtenu es† ensuite concentré e† dilué dans du miglyol (25% extrait / 75% miglyol) : on obtient 77 kg d’extrait à 25% sur miglyol. Ce† extrait es† alors décoloré avec 3% de charbon actif : 77 kg d’extrait sont ainsi dilués avec de l’éthanol (385 kg) auxquels on ajoute 3% de charbon actif soi† 2,31 kg. Cette décoloration es† réalisée sous agitation. Puis une filtration es† opérée, e† le filtra† es† concentré.
L’extrait ainsi obtenu es† enfin dilué sur un support type miglyol pour standardiser l’ingrédient à 0,5% en polygodial.
La détermination de la composition analytique de l’extrait obtenu selon l’exemple 1 es† réalisée par HPLC-DAD (avec détection à 233 nm) e† es† illustrée par le chromafogramme de la Figure 1 dans les conditions opératoires décrites ci-après.
Conditions opératoires HPLC-DAD :
Colonne Agilent Poroshell 120 S-C 18, 4.6 x 150 mm, 2.7 mΐti
Température colonne : 30°C
Débit : 1 ml/min
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000016_0004
Figure imgf000016_0002
Tel qu’illustré par le chromafogramme de la Figure 1 , la teneur en Polygodial es† de 0,53% en poids du poids total de l’extrait.
L’exfrai† préférentiellement utilisé dans la composition selon l’invention comprend une concentration en polygodial comprise entre 0,1 % et 10%, préférentiellement entre 0,2% e† 5%, plus préférentiellement entre 0,5% e† 3% en poids du poids total de l’extrait, par exemple 0,5%, 1 %, 1 ,5%, 2%, 2,5% ou 3%.
Exemple 2 : huile sèche
Figure imgf000016_0003
Préparer la phase A : mélanger jusqu’à ce que le mélange soi† uniforme. Exemple 3 : crème veraetures pour le corps
Figure imgf000017_0001
Préparer la A phase e† G homogénéiser.
Préparer la phase B e† l’ajouter à la phase aqueuse A. Homogénéiser jusqu’à ce que ce soit uniforme.
Faire fondre la phase Cl à 45°C, une fois liquide ajouter à la phase C et mélanger jusqu’à ce que ce soit uniforme.
Ajouter C+ Cl à A+B. Homogénéiser jusqu’à ce que ce soit uniforme.
Ajouter la phase D à la formule
Ajuster la formulation à pH 5,0 - 6,0 avec de l’acide citrique (50 % Aq.) Exemple 4 : crème cicatrisante acné
Figure imgf000018_0001
Préparer la phase A e† G homogénéiser
Préparer la phase B, l’ajouter à la phase aqueuse A. Homogénéiser jusqu’à ce que ce soit uniforme.
Préparer C et mélanger jusqu’à obtenir un mélange homogène
Ajouter C à A+B. Homogénéiser jusqu’à ce que ce soi† uniforme
Ajouter la phase D à la formule
Ajuster la formulation à pH 5,0 - 6,0 avec de l’acide citrique (50 % Aq.) Exemple 5 : capsule molle
Figure imgf000018_0002
Exemple 6 : capsule molle
Figure imgf000019_0001
Exemple 7 : Mise en évidence de l’activité anti-inflammatoire par la translocation du NFkB
Pour évaluer les propriétés d’un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention à moduler une inflammation induite, les cellules on† été pré-exposées à l'extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’exemple 1 à 5% dans du miglyol ou au peptide SN50 (un inhibiteur référence de la translocation de NFkB) avant l'exposition au LPS. 24 heures après le dépôt des cellules, les fibroblastes on† été exposés à 5 concentrations d'extraits de Tasmannia lanceolata ou à une concentration du peptide SN50 pendant 24 heures. Ensuite, les cellules on† été exposées pendant 3 et 24 heures à des extraits de LPS ( 1 ng / mL) et à l’extrait de Tasmannia lanceolata ou au peptide SN50. Finalement, après les 3 heures d'exposition, les cellules on† été fixées et colorées pour la quantification du NFkB.
Les résultats obtenus son† compilés dans le Tableau 1 ci-après et plus particulièrement illustrés par la Figure 2. Il apparaît que l’extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention induit une diminution significative de la translocation du NFkB comparé au contrôle avec LPS (CTRL-), notamment pour ces concentrations inférieures à 50 ppm.
L’extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention diminue ainsi l’inflammation de la peau.
Tableau 1 :
Figure imgf000019_0002
Figure imgf000020_0001
Figure imgf000020_0002
Le LPS à 1 ng/mL induit une inflammation modérée, caractérisée par une translocation significative de NFkB pour 10% de la population cellulaire comparé au contrôle seul.
Le peptide SN50 (CTRL +) inhibe significativement la translocation du NFKB induite pari ng/mL de LPS après 3 heures d’exposition.
L’extrait de Tasmannia lanceolata à 1 , 2,5, 5 et 10 ppm ne présente pas de cytotoxicité et induit une diminution significative, d’environ 50% pour les concentrations de 2,5, 5 et 10 ppm, de la translocation du NFkB dans les fibroblastes humains.
Exemple 8 : Mise en évidence de l’activité cicatrisante par la migration des fibroblastes
Les cellules on† été pré-traitées avec l’extrait de Tasmannia lanceolata obtenu selon l’exemple l à 5% dans du miglyol et du Nucblue (live cell assay nuclei dye) dans un milieu de culture sans facteur de croissance. Après 24h de pré-traitemen†, les cellules on† été mécaniquement griffées et le milieu renouvelé. Des images on† été prises avec un grossissement x4 pendant 24h.
Les calculs on† été faits comme suit :
D = surface cicatrisée = Surface TOH Surface T2 H où la Surface à T0 est la surface initiale après griffure et la Surface T24H est la même surface mesurée après 24h ; et D traitement
% de la surface cicatrisée par rapport au CTRL x 100 moyenne (D CTRL sans facteurs de croissance ) où le traitement correspond au puit recevant soit l’extrait de Tasmannia lanceolata à une concentration donnée ou un milieu contenant des facteurs de croissance comme contrôle positif.
Les résultats obtenus son† compilés dans le Tableau 2 ci-après. Une comparaison statistique a été réalisée entre le contrôle sans facteur de croissance et l’extrait de Tasmannia lanceolata en utilisant un T-test.
Tableau 2 :
Figure imgf000021_0001
Tel qu 'illustré par les Figures 3 et 4, l 'extrait de poivre de Tasmanie selon l 'invention induit une augmentation significative (+65% après 24h) de la migration des fibroblastes comparé au contrôle (sans facteur de croissance) et ce pour des concentrations de seulement 1 à 2,5 ppm.
Exemple 9 : Test ex-nino de l’activité de l’extrait de Tasmannia lanceolata sur des fragments de peau comportant des veraetures par dosage du TGF-b, du pro-collaaène I et de l’élastine
Des fragments de peau comportant des vergetures de 5 donneurs différents on† été déposés dans des inserts eux-mêmes positionnés sur des puits de culture. Du milieu de culture (antibiotiques, SVF) a été ajouté dans le fond des puits, un passage s'effectuant par diffusion lente entre les deux compartiments par l'intermédiaire d'une membrane poreuse ( 12 miti). Les fragments de peau on† été maintenus en survie pendant 1 2 jours à 37°C et en atmosphère air/CC>2. Les peaux on† été traitées quotidiennement par l’extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention obtenu selon l’exemple 1 à 5% dans du miglyol en topique (15 mI/cm2).
Une comparaison a été effectuée entre les 2 conditions suivantes :
- peau avec vergeture (témoin)
- peau avec vergeture + extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention à 2%.
Figure imgf000022_0001
Dosage du TGF-b :
Le TGF-b, synthétisé notamment par les kératinocytes, est un facteur de stimulation pour le fibroblaste dermique qui va synthétiser du collagène I et III. Le dosage du TGF-b a été réalisé par une technique d'immuno-essai avec lecture spectrophotométrique de la concentration (pg/ml) (kits de dosage BioTechne). Les fragments de peau ayant la même surface (vérification du poids de chaque fragment), le dosage a été réalisé à partir des surnageants de culture.
Les résultats obtenus (concentration en TGF-b en pg/ml) son† répertoriés dans le Tableau 3 ci-dessous :
Tableau 3 :
Figure imgf000022_0002
Figure imgf000023_0001
* comparaison statistique avec le groupe contrôle
Une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention induit une augmentation significative, en moyenne plus de 2 fois, de la concentration en TGF-B dans la peau traitée comparée au contrôle.
Dosage du pro-collaaène I :
Les fragments de peaux recueillis ont été solubilisés dans un tampon Tris- HCI, 100 mM, NaCI 100 mM, Triton XI 000,1 %, pH7,4. Après broyage à l’aide d’un poffer, la quantité de pro-collagène de type I (pg/ml) a été évaluée par une méthode ELISA (Human Pro-Collagen I alpha 1 , BioTechne).
Les résultats obtenus (concentration en pro-collagène I en pg/ml) sont répertoriés dans le Tableau 4 ci-dessous : Tableau 4 :
Figure imgf000023_0002
* comparaison statistique avec le groupe contrôle
Une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention induit une augmentation significative, en moyenne d’au moins 30%, de la concentration en pro-collagène 1 dans la peau traitée comparée au contrôle. Dosage biochimique de G élastine :
L'élastine insoluble es† extraite des biopsies par l'acide oxalique à 0,25M à 100°C sous forme de fragments solubles de polypeptides d'alpha élastine.
Après centrifugation pour éliminer les tissus non digérés, la quantité d’élastine soluble a été mesurée par une méthode de dosage spectrocolorimétrique à 513 nm, après fixation du colorant 5,10,15,20- †e†raphenyl-21 ,23-porphirine, tetrasulfonate (Fastin Elastin Assay kit, Interchim).
Les résultats obtenus (concentration en élastine en pg/mg) sont répertoriés dans le Tableau 5 ci-dessous :
Tableau 5 :
Figure imgf000024_0001
* comparaison statistique avec le groupe contrôle Une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention induit une augmentation significative, en moyenne de plus de 10%, de la concentration en élastine dans la peau traitée comparée au contrôle.
D’après les résultats ainsi obtenus, une composition selon l’invention comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata favorise la cicatrisation de la peau e† donc la réduction des cicatrices e† des vergefures.
Exemple 10 : Etude clinique contre placebo visant à prouver l’efficacité d’une composition comprenant un extrait de Tasmannia lanceolata selon l’invention contre les vergefures
L’étude a été réalisée sur 30 femmes, présentant un âge moyen de 47,7 ans.
15 femmes ont reçu la composition comprenant un exfrai† de Tasmannia lanceolata selon l’invention suivante : Tableau 6 : Huile de TASMANOL™ selon l’invention
Figure imgf000025_0001
15 autres femmes on† reçu la composition placebo suivante ; une femme est sortie d’étude pour des raisons indépendantes de l’étude.
Tableau 7 : Placebo
Figure imgf000025_0002
Chaque composition a été respectivement appliquée deux fois par jour au niveau des zones présentant des vergetures (cuisses, hanches, ventre) pendant une période de deux mois.
La profondeur et la coloration des vergetures on† été évaluées.
Des mesures de la densité et de l’épaisseur du derme des vergetures on† également été réalisées.
Enfin, une auto-évaluation de ces mêmes critères a été réalisée par les sujets.
Les résultats obtenus son† les suivants.
Tel qu’illustré par les Figures 5 et 6, après 8 semaines d’application quotidienne, la composition selon l’invention testée induit une réduction significative (p<0,05) de la profondeur des vergetures mesurée par la caméra pour dermatologie numérique 3D LIFEVIZ® MICRO™ ainsi que par score clinique (p<0,01 ) entre 0 et 3 avec :
0 = vergetures peu profondes - peau lisse ; 1 = vergetures légèrement profondes - peau presque lisse ;
2 = vergetures moyennement profondes - peau rugueuse ; et
3 = vergetures profondes - peau très rugueuse).
Une réduction de la profondeur des vergetures a été observée chez 80% des sujets avec la composition selon l’invention testée.
Tel qu’illustré par la Figure 7, après 8 semaines d’applications quotidiennes, la composition selon l’invention testée induit une réduction significative (p<0,01 ) de la coloration des vergetures mesurée par score clinique entre 0 et 3 avec :
0. = vergetures peu colorées ;
1 = vergetures légèrement colorées ;
2 = vergetures moyennement colorées ; et
3 = vergetures colorées
Une réduction de la coloration des vergetures a été observée chez 66,7 % des sujets avec la composition selon l’invention testée.
Tel qu’illustré par la Figure 8, la composition selon l’invention testée induit une augmentation significative de la densité du derme des vergetures après 4 semaines de traitement (p<0,05) et après 8 semaines de traitement (p<0,01 ) mesurée par échographie.
Une augmentation de la densité du derme au niveau des vergetures a été observée chez 87% des sujets avec la composition selon l’invention testée.
Tel qu’illustré par la Figure 9, la composition selon l’invention testée induit une augmentation significative de l’épaisseur du derme des vergetures après 8 semaines de traitement (p<0,01 ) mesurée par échographie (miti).
Une augmentation de l’épaisseur du derme au niveau des vergetures a été observée chez 87% des sujets avec la composition selon l’invention testée.
Tel qu’illustré par la Figure 10, après 8 semaines d’application quotidienne, les sujets on† noté une forte amélioration de l'apparence des vergetures :
- les vergetures son† moins visibles pour 80% des sujets ;
- les vergetures son† moins profondes pour 80% des sujets ;
- la peau est plus douce pour 93% des sujets ;
- la peau est plus lisse pour 80% des sujets.
D’après les résultats ainsi obtenus, une composition comprenant un extrait de Tasmannia Lanceolata obtenu selon l’invention réduit l'apparence et la coloration des vergetures, réduit la profondeur des vergetures, permet d’augmenter la densité du derme et d’améliorer la douceur de la peau.

Claims

REVENDICATIONS
1 . Extrait d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella et Polygonum hydropiper, caractérisé en ce qu’il est susceptible d’être obtenu à partir des feuilles broyées et séchées de ladite plante par extraction au CO2 supercritique à une pression comprise entre 1 20 et 350 bars et à une température comprise entre 35 et 60°C et en ce qu’il confient du polygodial.
2. Extrait selon la revendication 1 , caractérisé en qu’il est susceptible d’être obtenu par extraction au CO2 supercrifique à une pression comprise entre 150 et 285 bars et à une température comprise entre 40 et 50°C.
3. Extrait selon l’une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce qu’il est susceptible d’être obtenu à partir des feuilles broyées et séchées de Tasmannia lanceolata.
4. Composition comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d’un extrait selon l’une des revendications 1 à 3, pour son utilisation pour favoriser la cicatrisation et diminuer l’inflammation de désordres cutanés.
5. Composition pour son utilisation selon l’une des revendications 4 à 7, caractérisée en ce qu’elle comprend l’extrait à une concentration comprise entre 0,01 % et 20% en poids du poids total de la composition.
6. Composition pour son utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce qu’elle comprend l’extrait à une concentration comprise entre 0, 1 % et 10% en poids du poids total de la composition.
7. Composition pour son utilisation selon l’une des revendications 4 à 6, caractérisée en ce qu’elle se présente sous forme d’huile, crème, gel, sérum pour être appliquée topiquemen† sur la peau.
8. Composition pour son utilisation selon l’une des revendications 4 à 6, caractérisée en ce qu’elle est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale en fan† que complément alimentaire.
9. Composition selon l’une des revendications 4 à 8, pour son utilisation pour prévenir et/ou favoriser la réduction des cicatrices.
10. Composition selon l’une des revendications 4 à 8, pour son utilisation pour prévenir et/ou favoriser la réduction des vergefures.
1 1 . Composition selon la revendication 10, pour réduire la profondeur et la coloration des vergefures et pour augmenter la densité et l’épaisseur du derme des vergefures.
12. Procédé d’obtention d’un exfrai† d’une plante choisie parmi Tasmannia lanceolata, Drimys winteri, Spilanthes acmella e† Polygonum hydropiper, caractérisé en ce qu’il comprend les étapes suivantes de :
- extraction des feuilles ou baies de ladite plante au CO2 supercritique à une pression comprise entre 120 e† 350 bars, e† à une température comprise entre 35 e† 60°C ; e†
- récupération dudit extrait contenant du polygodial.
13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce qu’il comprend les étapes suivantes de :
- extraction des feuilles de ladite plante au CO2 supercritique à une pression comprise entre 150 e† 285 bars, e† à une température comprise entre 40 e† 50°C ; e†
- récupération dudit extrait contenant du polygodial.
14. Procédé selon la revendication 12 ou 13, caractérisé en ce que les feuilles de ladite plante sont broyées e† séchées avant leur extraction.
15. Procédé selon l’une des revendications 12 à 14, caractérisé en ce que ladite plante es† Tasmannia lanceolata.
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