WO2020002716A1 - Composition antiparasitaire comprenant de la βεταϊνε et des extraits d'echinacea purpurea et de curcuma longa - Google Patents

Composition antiparasitaire comprenant de la βεταϊνε et des extraits d'echinacea purpurea et de curcuma longa Download PDF

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Definitions

  • the invention relates to a composition and its use as a pest control.
  • Coccidiosis is one of the most common parasitic diseases in poultry. Caused by a specific parasite for birds of the Eimeria species, it can take many forms and is found worldwide and in all types of poultry farming.
  • Coccidiosis often results in chilly poultry, reduced appetite, stunted growth, listlessness or diarrhea. All these symptoms are the result of intestinal damage, which results in significant economic losses for the farmer. Especially since coccidiosis is very contagious.
  • the lesions if well marked, may be characteristic.
  • Coccidiosis represents a real health problem for breeders. Faced with the economic challenges it represents, the main means of control today remains in France, and more generally in Europe, the use of coccidiostats, administered via food. However, their continued and routine use has led to the emergence of resistant Eimeria serotypes. In addition, the anticoccidial agents used are potentially toxic for the treated animal, but also for third animals.
  • the intestinal health of birds can be influenced by many factors: genetics, quality of the chick, water quality, breeding conditions, etc. and food.
  • a poor mucosa / microflora / food balance can result in poor digestion of the food, increase in water in the digestive contents and therefore, as a consequence, diarrhea and wet litter problems, which can even lead to well-being problems (leg lesions, tarsi and breastbones), respiratory problems (excessive production of ammonia); or health problems (development of pathogenic bacteria in the litter).
  • the intestinal health of birds is therefore an essential problem in breeding, its degradation being able to lead to reductions in zootechnical performance, and to have a strong impact on production.
  • the invention aims to overcome these drawbacks.
  • One of the aims of the invention is to provide a new, more natural composition than the anticoccidial agents currently on the market.
  • Another object of the invention is to propose a new treatment for coccidiosis comprising effective natural ingredients.
  • the invention relates to a composition
  • a composition comprising from 20 to 60% of betaine, from 5 to 20% of extract of Echinacea purpurea, and from 10 to 30% of extract of Curcuma longa the percentages being expressed by mass relative to the total mass of the composition.
  • the above-mentioned composition can also contain from 5 to 54% of at least one support, the percentages being expressed by mass relative to the total mass of the composition.
  • Said at least one support is chosen from the following list of supports: clays including sepiolite, bentonite, clinoptilolite; bicarbonate; calcium carbonate; cereal co-products including co-products of wheat or corn, such as middling, draff, cobs; dextrose; flours; potato starch; lactose; yeasts and yeast walls; salt ; silica; calcium sulfate; sodium sulfate, etc.
  • the invention is based on the observation made by the inventors that a composition comprising betaine and extracts of Echinacea purpurea and Curcuma longa, exhibited anti-microbial, anti-parasitic and in particular anti-coccidial properties in birds of breeding and in particular poultry, and more generally made it possible to maintain good digestive health in any animal (not limited to birds), so that the composition according to the invention can be substituted in particular on the one hand anticoccidial, and secondly to anticoccidial vaccination.
  • mammals means all farm animals and companion animals, and in particular terrestrial farm animals, in particular cattle, sheep, pigs, goats, rabbits, equines, including birds, in particular farmed birds such as chickens, ducks, geese, turkeys, quail and other farmed gallinaceous animals as well as land animals in particular cats, dogs, and farmed aquatic animals such as fish and shrimp.
  • Betaine is a substance of formula (CH) N + CCOO, available in liquid or crystalline form.
  • Natural anhydrous betaine is extracted from the molasse or vinasse of plants and their roots, mainly beets (Beta vulgaris), in particular derived from the manufacture of sugar or bioethanol. Betaine is separated and purified by chromatography, with or without organic solvent (of methanol, dichloromethane, or chloroform type), in liquid phase or solid phase. Anhydrous betaines are available in solid or liquid form. Solid anhydrous betaines have a purity rate varying from 91 to 97%.
  • Synthetic betaine is obtained from chloroacetic acid and sodium carbonate, to which trimethylamine is added. Synthetic betaines are available in solid or liquid form. A distinction is made between betaine HCl or hydrochloride (addition of hydrochloride acid after a stage of concentration of the mixture of chloroacetic acid and sodium carbonate) from betaine monohydrate or anhydrate. Synthetic solid HCl betaines generally have a purity level of between 93 and 98%, solid monohydrates have a purity around 91% and solid anhydrates a purity around 96%.
  • Liquid betaines have a lower purity rate, between 38 and 47%.
  • betaine represents from 20 to 60% by mass relative to the total mass of the composition, which means that betaine represents
  • Echinacea pupurea or purple rudbeckia is a plant from North America known for its medicinal properties.
  • the extracts of this plant are obtained by alcoholic extraction of the components of the roots thereof, or by extraction with supercritical fluid.
  • the extract of Echinacea pupurea represents 5 at 20% by mass relative to the total mass of the composition, which means that the extract represents 5%, 5.5%, 6%, 6.5%, 7%, 7.5%, 8%, 8.5%, 9%, 9.5%, 10%,
  • Curcuma longa is a rhizomatous perennial herb native to India and Malaysia.
  • the extracts are obtained by first stages of drying and then homogenization of the rhizomes in alcohol (acetone, carbon dioxide, ethyl acetate, dichloromethane, n-butanol, methanol, ethanol, isopropanol and hexane). Then, several techniques and devices can be used or even combined to finalize the extraction: static maceration, dynamic maceration, percolation, extraction by supercritical fluid, as well as extractions assisted by ultrasound and microwaves.
  • the Curcuma longa extract represents from 10 to 30% by mass relative to the total mass of the composition, which means that the extract represents 10%, 10.5%, 11% , 11.5%, 12%, 12.5%, 13%, 13.5%, 14%, 14.5%, 15
  • the aforementioned composition may also comprise at least one support, in particular at least one support in an amount of 5 to 54% by mass relative to the total mass of the composition.
  • 5 to 54% by mass is meant: 5%, 5.5%, 6%,
  • the invention relates to the abovementioned composition further comprising from 1.5 to 15% of organic acid or of a mixture of organic acids, the percentages being expressed by mass relative to the total mass of the composition.
  • the organic acids of the invention are organic compounds, in particular carbonaceous, having acidic properties, that is to say capable of releasing protons. Such organic acids are well known to those skilled in the art.
  • the composition according to the invention it is possible to add one or more organic acids in order to promote the balance of the flora, thanks to their acidifying power of the digestive tract and their digestive antimicrobial effects.
  • the organic acid or the mixture of organic acids represents from 1.5 to 15% by mass relative to the total mass of the composition, which means that the extract represents 1.5 %, 2%, 2.5%,
  • the invention relates to the composition defined above, wherein said organic acid is chosen from benzoic acid (E210), fumaric acid (E297), sorbic acid (E200), DL-malic acid (E296), butyric acid, maslinic acid and citric acid (E330), or a mixture of these.
  • said organic acid is chosen from benzoic acid (E210), fumaric acid (E297), sorbic acid (E200), DL-malic acid (E296), butyric acid, maslinic acid and citric acid (E330), or a mixture of these.
  • each of the above organic acids can be used alone or in combination with one or more other organic acids.
  • the composition according to the invention it is therefore possible to obtain the following 120 mixtures of organic acids:
  • the invention relates to the aforementioned composition, further comprising up to 5% of a product comprising an extract of one or more alliacés, the percentages being expressed by mass relative to the total mass of the composition.
  • said product comprising an extract of one or more alliacs is in oily or powder form, the oily extract being deposited on a support in particular of clay or silica.
  • said product comprising an extract of one or more alliacés comprises from 17 to 30% by mass of garlic and onion extract, and optionally of leek, the percentages being expressed by mass relative to the total mass of the product comprising an extract of one or more alliates.
  • the extracts in liquid or solid form, are prepared by maceration in a hydro-alcoholic solution, then filtered by centrifugation.
  • composition of the products comprising an extract of one or more alliacés, such as leek, garlic, bear garlic, green onion or chives
  • the invention relates to the above-mentioned composition
  • the above-mentioned composition comprising:
  • the two above-mentioned compositions are particularly advantageous.
  • the first of these comprises approximately 24% by mass of betaine (or 25% of betaine 95%), 5% by mass of extract of Echinacea purpurea, 12.5% by mass of extract of Curcuma longa and 1 , 6% by mass of benzoic acid.
  • This first composition may also contain a support, in particular calcium carbonate at around 20% by mass relative to the total mass of the composition.
  • the support can also contain sepiolite, in particular in the form of semoulette, at a rate of 19% by mass relative to the total mass of the composition.
  • Sepiolite is a mineral from the group of clays with a fibrous structure.
  • ingredients can enter into the composition of the aforementioned composition, such as a raw material comprising 17% of garlic extracts at a rate of 1% by mass relative to the total mass of the composition or else the molding. of wheat at a rate of 15% by mass relative to the total mass of the composition.
  • the second composition mentioned above comprises approximately 48% by mass of betaine (or 50% of betaine 95%), 10% by mass of extract of Echinacea purpurea, 25% in mass of Curcuma longa extract, these three components forming a first mixture and 6% by mass of a second mixture.
  • the second mixture represents 6% of the total composition and is composed by mass relative to the mass of said second mixture of a combination of several organic acids: 19% fumaric acid, 11% sorbic acid, 9% by mass DL-malic acid and 9% by mass of citric acid.
  • a support such as calcium carbonate in an amount of 5% by mass relative to the total mass of the composition.
  • the invention further relates to the above composition as a medicament, in particular a medicament for veterinary use.
  • composition according to the invention is used as a medicament for treating pathologies as described below, but also for the prophylaxis of these types of pathologies.
  • compositions of the abovementioned medicament that the composition is associated with a pharmaceutically acceptable or veterinarily acceptable vehicle, according to the standards in force known to those skilled in the art.
  • a pharmaceutically acceptable or veterinarily acceptable vehicle according to the standards in force known to those skilled in the art.
  • the aforementioned supports can be considered as such vehicles.
  • the pharmaceutically acceptable or veterinally acceptable vehicle can be a simple support but can also play a specific galenical role such as the controlled release during the ingestion of the composition according to the invention, so that the active principles will be released in a delayed manner.
  • the invention relates to the aforementioned composition for its use in the context of the treatment or prevention of disturbances in the digestive health of animals.
  • said disturbances in the digestive health of animals are in particular parasitic diseases, in particular parasitic diseases of farm animals, in particular farm birds, in particular poultry.
  • composition according to the invention is particularly useful for the treatment and prevention of parasitic diseases. Its administration is mainly by ingestion, in particular in the form of an additive added to food, as defined below.
  • the present disclosure also relates to a method of treatment or prevention of parasitic infections of animals, in particular farmed birds, in particular poultry, comprising the administration, in particular oral, of an effective amount of the composition according to the above-mentioned invention animals, including farmed birds, in need.
  • digestive health is meant in the invention a better enhancement of the food bolus by the animal, under normal farming conditions.
  • digestive health is defined as being the result of a dynamic and fragile balance between mucosa, microflora or microbiota and food (Bach Knudsen KE et al, 2012); others add to this balance the impact of the digestive nervous and immune systems.
  • the invention relates to the above-mentioned composition, for the aforementioned use, in which said digestive health disorders are parasitic infections, in particular coccidial infections, or coccidioses.
  • the causative agent of coccidiosis is an obligate protozoan intracellular parasite most often belonging to the genus Eimeria.
  • the invention also relates to a food composition intended for animal nutrition comprising from 0.05 to 0.6% of composition as defined above, the percentages being expressed by mass relative to the total mass of the food composition.
  • the aforementioned composition can be added to food intended for animal nutrition in the form of a food supplement, or additive, at a rate of 0.05 to 0.6% by mass relative to the total mass of the food.
  • the composition according to the invention represents, in the food mentioned above,
  • said composition is used in a food composition at a rate of 0.1% or 0.2% by mass relative to the mass of the food composition (for example 2 kg of composition per 1 ton of food).
  • said composition is used in a food composition at a rate of 0.1% by mass relative to the mass of the food composition (for example 1 kg of composition per 1 ton feed).
  • the invention also relates to a premix essentially consisting of betaine, of Echinacea purpurea extract and of Curcuma longa extract, said premix being such that the proportion of betaine represents five times the proportion of extract of Echinacea purpurea and such that the proportion of betaine represents twice the proportion of Curcuma longa extract, the proportions being expressed by mass relative to the mass of the premix.
  • the aforementioned premix is particularly advantageous and contains for example 50% by mass of the betaine premix, 10% by mass of the premix of extract of Echinacea purpurea and 25% by mass of the premix of extract of Curcuma longa.
  • the aforementioned premix may also contain, for example, 25% by mass of the betaine premix, 5% by mass of the premix of Echinacea purpurea extract and 12.5% by mass of the premix of Curcuma longa extract.
  • Figure 1 represents a histogram showing the growth of broilers, corresponding to the GMQ (Average Daily Gain), expressed in grams per day, over the period 0-1 Oj for each of the groups studied: 1: Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to 30 days, then narasin from 30 days at slaughter); 2: Lot vaccinated with a vaccine comprising spore-forming oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP, without anticoccidial program; 4: Batch vaccinated, without anticoccidial program, + composition according to the invention; 5: Batch not vaccinated and without anticoccidial + competitive product and 6: Batch not vaccinated and without anticoccidial + composition according to the invention.
  • 1 Positive control group with anticoccidial program
  • the competing product consists of essential oil of garlic and phenols (molecules like carvacrol-thymol), saponin, diallyl sulfides and thiosulfinates.
  • FIG. 2 represents a histogram showing the food efficiency via the consumption index (CI), expressed in g of food per g of live weight, over the period 0-1 Oj for each of the groups studied: 1: Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to 30 days, then narasin from 30 days at slaughter); 2: Lot vaccinated with a vaccine comprising spore-forming oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP, without anticoccidial program; 4: Batch vaccinated, without anticoccidial program, + composition according to the invention; 5: Batch not vaccinated and without anticoccidial + competitive product and 6: Batch not vaccinated and without anticoccidial + composition according to the invention.
  • 1 Positive control group with anticoccidial program (nara
  • Figure 3 represents a histogram showing the GMQ, expressed in grams per day, over the period 0-39d for each of the groups studied: 1: Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to 30 days, then narasin 30 days at slaughter); 2: Lot vaccinated with a vaccine comprising spore-forming oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP, without anticoccidial program; 4: Batch vaccinated, without anticoccidial program, + composition according to the invention; 5: Batch not vaccinated and without anticoccidial + competing product) and 6: Batch not vaccinated and without anticoccidial + composition according to the invention.
  • 1 Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0
  • Figure 4 represents a histogram showing the consumption of food, expressed in grams per day, over the period 0-39 days for each of the groups studied: 1: Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to 30 days, then narasin from 30 days at slaughter); 2: Lot vaccinated with a vaccine comprising sporulated oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP, without anticoccidial program; 4: Vaccinated batch, without anticoccidial program, + composition according to the invention; 5: Batch not vaccinated and without anticoccidial + competing product) and 6: Batch not vaccinated and without anticoccidial + composition according to the invention.
  • 1 Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to
  • FIG. 5 represents a histogram showing the consumption index (CI) corrected over the period 0-39d for each of the groups studied: 1: Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to 30 days, then narasin 30 days at slaughter); 2: Lot vaccinated with a vaccine comprising spore-forming oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP, without anticoccidial program; 4: Batch vaccinated, without anticoccidial program, + composition according to the invention; 5: Batch not vaccinated and without anticoccidial + competing product) and 6: Batch not vaccinated and without anticoccidial + composition according to the invention.
  • 1 Positive control group with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to 30 days
  • FIG. 6 represents a stacked histogram showing the coccidial lesion indices associated with the species of coccidia Eimeria acervulina, measured by an independent laboratory according to the reference method described in Johnson and Reid EXPERIMENTAL PARASITOLOGY 28, 30-36, for each of the groups studied (ordinate: number): 1: Positive control group with anticoccidial program
  • the lesion indices are noted from 0 to 4: 0: absence of lesion (black), 1: lesions in white spots distributed on the duodenal wall only with less than 5 lesions per cm 2 (dark gray), 2: lesions closer together but non-coalescing, up to 20 cm below the duodenum, visible mucous and serous sides (light gray), 3: contiguous lesions, up to the yolk sac diverticulum, coated on the mucosa, intestinal liquid content (hatched) and 4 : whitish and very thickened intestinal mucosa, creamy exudate rich in oocysts (dotted lines).
  • Figure 7 is a graph showing the evolution of the weight of the animals of each of the groups studied according to their age (in days), reduced as a percentage of the change in weight of the animals treated with an anticoccidial program.
  • 1 Positive control batch with anticoccidial program (narasin / nicarbanazine from 0 to 30 days, then narasin from 30 days at slaughter);
  • 2 Lot vaccinated with a vaccine comprising sporulated oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP, without anticoccidial program;
  • 4 Vaccinated batch, without anticoccidial program, + composition according to the invention; 5: Batch not vaccinated and without anticoccidial + competing product and 6: Batch not vaccinated and without anticoccidial + composition according to the invention.
  • FIG. 8 represents a histogram showing the number of ducks having skipped a meal or having eaten half a meal per day of fattening: number of control ducks having eaten half a meal (A); number of trial ducks having eaten half a meal (B); number of Witness ducks having skipped a meal (C); number of test ducks having missed a meal (D).
  • FIG. 9 represents a stacked histogram showing the classification by number of livers for slaughter according to the criteria defined in example 2 for the two groups of ducks: the control group on the left, and the trial group on the right. Livers are divided into the following classes: Extra liver (A); Selection liver (B); Liver Coming (C).
  • Figure 10 represents the curves of evolution of water consumption of Label chickens (in g / animal present / day) over time (in days), between the establishment on D0 and the slaughter on D84 , the dashes A and B representing the instantaneous water consumption values, the curve A representing the moving average of the Control group, and the curve B representing the moving average of the Test group.
  • Figure 11 represents the average Reid index lesion scores of the 5 samples at 32 days for each of the Control (A) and Trial (B) groups for Eimeria Acervulina (1), Eimeria Maxima (2), Eimeria Necatrix (3 ) and Eimeria Tenella (4).
  • Figure 12 represents the evolution curves of the average weight of the animals of each of the groups studied, according to their age (in days: Oj, 12d, 21d, 35d and 42d), expressed as a percentage of the evolution of the mean weight of the negative control animals.
  • Negative control batch without anticoccidial program black
  • 2 Positive control batch, with anticoccidial program in the start-up, growth and finishing phases (narasin / nicarbanazine 0.35% from 0 to 20 days, then narasin 0.2% from 21 to 35 days) (dark gray)
  • 3 Lot without anticoccidial + competing product brought to 0.5 kg / T of food from 0 to 42 days of age (gray)
  • 4 Lot without anticoccidial + internal solution brought to 2 kg / T of food from 0 to 42 days of age (light gray).
  • FIG. 13 shows a stacked histogram showing the clues Coccidial lesions associated with the Eimeria maxima coccidia species, measured with a microscope by an independent laboratory according to the Health Tracking System (HTS) method, for each of the groups studied (on the abscissa): 1: Negative control batch without anticoccidial program; 2: Positive control batch, with anticoccidial program in the start-up, growth and finishing phases (narasin / nicarbanazine 0.35% from 0 to 20 days, then narasin 0.2% from 21 to 35 days); 3: Lot without anticoccidial + competing product brought to 0.5 kg / T of food from 0 to 42 days of age; and 4: Batch without anticoccidial + solution according to the invention brought to 2 kg / T of food from 0 to 42 days of age.
  • HTS Health Tracking System
  • the lesion indices are noted from 0 to 4 (5 shades of gray): 0: absence of lesion (lightest gray), 1: lesions in white dots distributed on the duodenal wall only with less than 5 lesions per cm 2 (gray clear month), 2: more close but not coalescing lesions, up to 20 cm below the duodenum, visible mucous and serous sides (gray), 3: contiguous lesions, up to the yolk sac diverticulum, coated on the mucous membrane , liquid intestinal content (dark gray) and 4: whitish and very thickened intestinal mucosa, creamy exudate rich in oocysts (very dark gray).
  • Figure 14 represents a stacked histogram showing the summary notes of the examination carried out by an independent laboratory according to the De Gussem method (2010), for each of the groups studied (on the abscissa): 1: Negative control batch without anticoccidial program; 2: Positive control batch, with anticoccidial program in the start-up, growth and finishing phases (narasin / nicarbanazine at 0.35% from 0 to 20 days, then narasin at 0.2% from 21 to 35 days); 3: Lot without anticoccidial + competing product brought to 0.5 kg / T of food from 0 to 42 days of age; and 4: Lot without anticoccidial + internal solution brought to 2 kg / T of food from 0 to 42 days of age.
  • the summary notes range from 0: absence of intestinal problem (very light gray) to 10: very large number of criteria illustrating the presence of digestive problems of dysbacteriosis type in animals (black).
  • Figure 15 represents a histogram showing the evolution of the number of Eimeria vejdovskyi oocysts per gram of rabbit faeces, in samples taken at 10d, 42d and 49d for each of the groups studied: 1: Positive control batch ( dark gray) ; 2: Lotsans anticoccidial + composition according to the invention (light gray).
  • the arrows represent the percentage decrease in the number of oocysts between lot 1 and lot 2 as a percentage.
  • the black line represents the alert threshold in breeding vis-à-vis the coccidian pressure.
  • FIG. 16 represents a histogram showing the number of oocysts per gram of rabbit feces, in samples at 49 days for each of the groups studied: 1: Negative control batch (dark gray); 2: Batch without anticoccidial + composition according to the invention (light gray).
  • the black line represents the alert threshold in livestock farming screw of the coccidian pressure.
  • the arrows represent the percentage decrease in the number of oocysts between lot 1 and lot 2 as a percentage.
  • B Eimeria media
  • C Eimeria irresidia.
  • the objective of the trial is to compare, compared to a treatment strategy with a conventionally used anticoccidial program, the effects of two alternative solutions to anticoccidials (a composition according to the invention, and a competing product) as well as the effects of a composition according to the invention used as an accompaniment to vaccination, on growth performance between 0 and 39 days of age and intestinal lesions of chickens at 21 days of age.
  • the zootechnical and economic performances of the different strategies were compared.
  • the test was carried out at a broiler farmer. 30 floors of 2.5 m 2 have been installed. The chickens were allotted at 0 days at the rate of 26 fast-growing male chickens per parquet, divided into 5 groups of 6 parquet, or 156 chickens per group.
  • the batching was done by collective weighing of the animals.
  • the animals were slaughtered at 39 days of age, i.e. 2.7 kg bodyweight.
  • the vaccinated animals of lots 2 and 4 were vaccinated in breeding, once the lot had been carried out, with a vaccine comprising spore-forming oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervuiina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP, without anticoccidial program.
  • the internal solution is one of the compositions according to the invention and comprises the aforementioned premix essentially consisting of betaine, Echinacea purpurea extract and Curcuma longa extract, said premix being such that the proportion of betaine represents five times the proportion of extract of Echinacea purpurea and such that the proportion of betaine represents two times the proportion of Curcuma longa extract, the proportions being expressed by mass relative to the mass of the premix.
  • the food program is the same for the 5 groups. Food is formulated to cover the nutritional needs of broilers. During each rearing period, the feeds are identical, the tested solutions replacing wheat according to the incorporation rates specified above.
  • the growth performance at 10 days is equivalent to the positive control, without modification of the indices of consumption.
  • the invention therefore makes it possible in this test to secure the start of the chickens vaccinated against coccidia at the establishment.
  • the GMQ is lower for the competing solution (Fig. 3) with higher consumption (Fig. 4), and therefore a degraded CI of 0.02 points (Fig. 5).
  • the GMQ is equivalent to the positive control and the consumption is slightly higher.
  • the IC is improved by 0.04 pts compared to a traditional anticoccidial strategy and compared to vaccination, and by 0.06 points compared to the competing solution.
  • Groups of vaccinated animals (2 and 4) tend to have higher injury scores.
  • the addition of additives does not reduce the average scores but modifies the distribution of the scores: more score 1 with the composition according to the invention.
  • Groups (5) and (6) have higher average scores than the group treated with an anticoccidial (1). But between the two solutions (5) and (6), we can observe a reduction in notes 3 and 4 (severe lesions) in favor of notes 0 (absence of lesion) and 1 (slightly marked lesions) with the composition according to the invention (6).
  • composition according to the invention made it possible, in this test carried out in field conditions with a breeder:
  • a pre-fattening period between 0 and 84 days is followed by a fattening period between 84 and 96 days, before slaughter.
  • the ducks successively receive a starter feed (0-30 days) and a growth / finish feed (30-84 days).
  • the objective of this trial is to study the impact of the contribution of a composition according to the invention during the pre-fattening phase in ducks on the fattening performance for the production of fatty liver, in absence of anticoccidial treatment and vaccination.
  • This test was carried out in an experimental device on a batch of ducks ready to fatten 1050 ducks, divided into two groups from the start: a Control group and a Test group. Fattening groups were monitored at the same site.
  • the batching was done by individual weighing of the animals.
  • Each group includes 525 male Mulard ducks at start-up.
  • the food program is the same for the Control and Trial groups, as well as the nutritional levels, the only difference being the presence or not of 0.1% of internal solution:
  • the internal solution is one of the compositions according to the invention and comprises the above-mentioned premix consisting essentially of betaine, of Echinacea purpurea extract and of Curcuma longa extract, said premix being such that the proportion of betaine represents five times the proportion of extract of Echinacea purpurea and such that the proportion of betaine represents twice the proportion of extract of Curcuma longa, the proportions being expressed by mass relative to the mass of the premix.
  • the internal solution is composed of:
  • the 2 groups receive the same corn flour.
  • the consumption index (CI) is thus improved by 0.17 pts for the Test batch.
  • feed efficiency improved by 0.17 points, due to a reduction in feed intake for ducks that received the internal solution.
  • This improved food efficiency could be linked to better digestive health, resulting in better enhancement of the food bowl, under the usual breeding conditions with access to the outdoors from 28 days, and therefore a setting potential contact with pathogenic flora and / or wild coccidia from 28 days.
  • the animals receive a block of corn flour, a weight predetermined by the breeder, twice a day (morning and evening).
  • 1040 ducks pre-fattened beforehand as seen previously at the rate of 520 control ducks and 520 trial ducks, were distributed at 84 days in 208 fattening cages, at the rate of 5 ducks per cage.
  • the Control and Test animals are distributed in the different rows of cages of the building, so as to limit the interactions of the test with the environmental conditions (“ranged effect”).
  • the quality of the fattening is evaluated thanks to the number of ducks having consumed only a half dose of mash (half meal) or not having consumed their dose during one of the meals of the day (sautéed meal ).
  • a Chi-square test 2 assesses the significance of the difference between the two groups over the total duration of fattening.
  • a sautéed meal generally corresponds to an animal that is sick, or has not digested the previous meal well.
  • the number of ducks having skipped a meal or received a half-meal is counted manually by the breeder, and validated at the end of the meal by comparison of the quantity of corn meal served and the quantity of corn meal provided by the farmer for a given distribution.
  • Slaughter data relate to 200 ducks taken from the 1036 remaining at the end of the trial, according to a predefined plan.
  • the slaughter data relate to 200 ducks taken from the 1036 remaining at the end of the test according to a predefined plan.
  • the livers are sorted according to weight, color, appearance, texture and smell criteria according to the following sorting grid:
  • composition according to the invention used during the pre-fattening period does not modify the growth curve of the test ducks which have a weight equivalent to the control group at the start of fattening, but markedly improves the consumption index (CI ) (-0.17 pts), via a drop in overall food consumption, over the overall period 0-84 days.
  • CI consumption index
  • the use of the pre-fattening solution significantly reduces the number of ducks having taken half a meal (-54%), without modifying the force-feeding performance, or the quality of the livers.
  • the objective of this test is to compare the impact of a composition according to the invention provided by the food on unvaccinated Label chickens, compared to a vaccine program conventionally used in poultry farming, to combat loss growth performance and intestinal lesions of chickens, linked to contamination by coccidia.
  • Each group of 4400 chickens is placed in a breeding building belonging to the same breeder.
  • the food program is the same for the Witness and Trial groups, as well as the nutritional levels.
  • the two groups differ, however, in that:
  • the animals of the Control group are vaccinated in the hatchery by nebulization, with a vaccine comprising spore-forming oocysts derived from five early lines of coccidia Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP and Eimeria tenella HP;
  • the Test group is not vaccinated, and receives a food, identical to the Control group, but on which the internal solution is raised up to 1 kg / tonne (addition of the solution on the top).
  • the internal solution is one of the compositions according to the invention and comprises the above-mentioned premix consisting essentially of betaine, of Echinacea purpurea extract and of Curcuma longa extract, said premix being such that the proportion of betaine represents five times the proportion of extract of Echinacea purpurea and such that the proportion of betaine represents twice the proportion of Curcuma longa extract, the proportions being expressed by mass relative to the mass of the premix.
  • the internal solution is composed of:
  • the CI is downgraded by 0.038pts, but the corrected CI at constant weight (2.2kg) is improved by 0.13pts compared to the Control group.
  • the objective of this trial is to compare the impact of a composition according to the invention provided by the withdrawal food from 28 days of age on standard unvaccinated chickens, compared to an anticoccidial program conventionally used in breeding poultry, to fight against loss of growth performance and intestinal lesions in chickens, linked in particular to contamination by coccidia.
  • This trial is a so-called mass trial, carried out on 22 control lots and 19 trial lots, spread across 29 different farms (10 farms have a witness and trial building). In total, this represents 493,612 control chickens and 443,344 test chickens (on average 22,853 chickens slaughtered per batch). All of the animals are fast growing Ross chickens.
  • the food program as well as the nutritional levels are the same for the 2 treatments, which are differentiated as follows:
  • the internal solution is one of the compositions according to the invention and comprises the above-mentioned premix consisting essentially of betaine, of Echinacea purpurea extract and of Curcuma longa extract, said premix being such that the proportion of betaine represents five times the proportion of extract of Echinacea purpurea and such that the proportion of betaine represents twice the proportion of Curcuma longa extract, the proportions being expressed by mass relative to the mass of the premix.
  • the internal solution is composed of:
  • the objective of the test is to compare the effects of two alternative solutions to anticoccidials (a composition according to the invention, and a competing product),
  • the test was carried out with a broiler farmer. 32 floors of 2.5 m 2 have been installed. 1,088 Ross 308 male chickens were allotted on day 0, at the rate of 34 chickens per floor, divided into 4 groups of 8 floors, or 272 chickens per group.
  • the batching was done by collective weighing of the animals of each parquet, so as to obtain average weights per parquet close to the installation.
  • the chickens were raised on straw bedding at start-up, with chaff re-ening at 21 days and 30 days.
  • Each parquet floor was mulched with a third of litter from the previous batch in order to increase the coccidial pressure (the time of the crawl space, fresh straw storage in a ventilated place, and control of the fermentation level twice a week).
  • the competing product is composed in this test of:
  • the internal solution is composed in this test of:
  • the food program was the same for the 4 groups. Water and food were distributed ad libitum.
  • the feed has been formulated to cover the nutritional needs of broilers. During each rearing period, the feeds were identical, the solutions tested were provided via premixes on ground wheat support, brought in replacement of wheat according to the incorporation rates specified above.
  • the animals were slaughtered at 42 days of age.
  • a collective weighing of each of the 32 floors was carried out at the establishment, at each dietary change (12, 21 and 35 days) and at slaughter (42 days).
  • the total weight obtained per floor is divided by the number of individuals present at the weighing age, which gives an average individual weight per floor.
  • the average of the individual average weights for the 8 floors of the same group gives the average individual weight per group.
  • the weight of the animals receiving the internal solution and the competing solution is greater than the negative and positive control animals.
  • the competing solution makes it possible to obtain weights equivalent to the positive control.
  • the internal solution makes it possible to obtain weights greater than the positive control, as well as the competing solution.
  • an HTS assessment was carried out on 2 animals per parquet and per batch, ie 16 chickens per batch, the chickens being selected visually from the average weight of the parquet.
  • HTS assessment Health Tracking System
  • Elanco Eli Lilly and company
  • a complete diagnosis of the health of chickens developed by the company Elanco (Eli Lilly and company), inspired in particular by the reference method of Johnson and Reid (1970) for parasitic examination. It is practiced by thorough examination of the hens: parasitic, abdominal, respiratory, locomotor and carcass examinations.
  • Notations of absence / presence type (0 or 1) or on severity scales are carried out in particular on the following criteria:
  • Figure 13 shows a reduction in the prevalence and severity of lesions with lot 2: positive control compared to lot 1: negative control: increase in the number of scores 0, reduction in scores 1 and 2, absence of grade 3. This observation confirms the effectiveness of the anticoccidial program in the context of the trial.
  • Lot 3 competitor's product shows a deterioration in the condition linked to Eimeria maxima: increase in scores 2 and 3, appearance of scores 4.
  • Lot 4 internal solution allows an intermediate lesion between lot 1: negative control and lot 2: positive control, with in particular an increase in scores 0, a reduction in scores 2 and the absence of grade 3.
  • a lesion score notation by the Gussem method was carried out on 2 animals per parquet and per batch, ie 16 chickens per batch, the chickens being selected visually from the average weight of the parquet.
  • De Gussem The method described by De Gussem (De Gussem, M. (2010). Macroscopy scoring System for bacterial enteritis in broiler chickens and turkeys. In WVPA Meeting 01/04/2010. Merelbeke, Belgium) is a macroscopic scoring method of the dysbiosis in chicken and turkey. Based on the observation of the digestive tract, it identifies a number of objective parameters related to intestinal health in the cranial and caudal part of the digestive tract (eg appearance and color of intestinal contents) as well as general parameters (swelling of the intestines) .
  • objective parameters related to intestinal health in the cranial and caudal part of the digestive tract eg appearance and color of intestinal contents
  • general parameters swelling of the intestines
  • Figure 14 gives the summary score (from 0 to 10), obtained by summing the scores on the 10 criteria related to the intestinal health status of the animals taken into account by the Gussem method and noted 0: absence or 1: presence , to know :
  • Figure 14 shows a reduction in the severity of digestive problems with lot 2: positive control compared to lot 1: negative control: reduction of notes 3 in favor of notes 2. We nevertheless note the disappearance of notes 0 (absence of problem intestinal). This observation confirms the effectiveness of the anticoccidial program in the context of the trial.
  • Lot 3 competing product also shows a reduction in notes 3 in favor of more favorable notes (notes 1 and 2); nevertheless, we note the appearance of notes 4, corresponding to more degraded intestinal health states.
  • Lot 4 internal solution allows a state of intestinal health between lot 1 and lot 2, with notably a maintenance of notes 0, a reduction of notes 3 in favor of more favorable notes (notes 1 and 2), absence of 'more degraded states (notes 4 or 5).
  • composition according to the invention made it possible, in this test carried out in field conditions with a breeder:
  • Tests have been carried out in breeding in the field in order to observe the effects of a composition according to the invention as an alternative solution to anticoccidians on coccidian pressure in rabbit breeding, and to compare these effects with those of a anticoccidial treatment conventionally used on the market (synthetic coccidiostat).
  • the animals were divided into two batches, a control batch and a test batch, of the same number of cages each, each cage having an identical density (8 and 6 rabbits / cage respectively for tests 1 and 2).
  • the rows of cages of each lot were arranged side by side in the buildings to avoid any bias that could be linked to a lack of ventilation in part of the rooms (identical atmosphere between the two lots).
  • Rabbits are rabbits from Hycole genetics. The rabbits are weaned at 35 days.
  • the rabbits were batched at 25 days so as to obtain identical average rabbit weights between the two batches.
  • the average range of rabbits who gave birth to the rabbits used for the test were also identical (the rabbits from primiparous mothers and from mothers from grandparent nuclei were not kept).
  • Robenidine is a synthetic coccidiostat. It is added via a premix, at 5 kg / T equivalent to 66 ppm in the maternity food, from 7 days before parturition (MB) until MB + 24 days. Then a food without supplementation is distributed from MB + 25d to MB + 49d.
  • a finished food without composition according to the invention is distributed from 50 days to slaughter (72 days).
  • balancing is carried out intra-batch in order to constitute homogeneous litters just after parturition (same number of rabbits under the mother, of identical average weight), no rabbit passes from one batch to another , nor does it exit or enter the test.
  • the number of young rabbits left in the mother was identical between the two lots (9 under secondiparous, between 10 and 11 rabbits under the 3 th in scope and more).
  • composition according to the invention is composed in these two tests of:
  • Eimeria E. media, E. irresidua, and / or E. vejgovskyi
  • the results of the enocyst count are expressed as the number of oocysts per gram of faeces collected.
  • Figure 15 illustrates the evolution over time, at 10 days, 42 days and 49 days, of the coccidial pressure in the positive control lots and test of test 2 with regard to
  • the number of E. vejdoskyi remains below the alert threshold (black line) for the test batch until the end of the test, unlike the positive control batch for which this threshold is exceeded from 42d.
  • composition according to the invention in rabbit farming makes it possible to better control the coccidial pressure compared to the absence of anticoccidial treatment (negative control) or in comparison to an anticoccidial treatment conventionally used in breeding (positive control) and this,
  • a complementary test was carried out with a 3 rd rabbit breeder, on two successive lots, of 3,000 animals each.
  • the 1st batch of animals received no treatment or anticoccidial alternative.
  • the 2 nd batch of animals received no anticoccidial treatment + composition according to the invention of Example 6 at 2 kg / T, from parturition at 49 days.
  • a count of oocysts in the faeces was carried out on a sample of animals representative of each of the lots at 49 days.
  • Eimeria magna numerical reduction of 67% between the negative control batch and the test batch, of the number of oocysts per gram of faeces removed.
  • Eimeria media numerical reduction of 50% between the negative control batch and the test batch, of the number of oocysts per gram of feces sampled.
  • Eimeria irresidua Insignificant numerical difference between the negative control batch and the test batch, of the number of oocysts per gram of faeces removed.
  • the objective of the test is to evaluate in vitro the antimicrobial activity of the compounds of interest of the composition according to the invention, alone or as a mixture, with respect to pathogenic microorganisms frequent in different animal species .
  • microorganisms used for in vitro tests originate from farming environments or have been isolated from animals of different species (poultry, pig, rabbit, aquaculture).
  • microorganisms are revivified under optimal conditions for their growth (culture medium, oxygenation, time, incubation temperature).
  • Table 10 presents the microorganisms tested, their origin and their optimal culture conditions.
  • inoculum 6 +/- 0.5 log CFU / mL.
  • the inoculum is verified by counting micromethod (Baron F., Cochet MF., Alain W., Grosset N., Maréchal MN., Gonnet F., Jan S., Gautier M., 2006. Rapid and cost-effective method for microorganism enumeration based on miniaturization of the conventional plate-counting technique. Milk 86, 251-257).
  • the inoculum is then brought into contact with the test solution at different concentrations of compounds of interest.
  • the compounds tested are YEchinacea purpurea, Curcuma longa and betaine. These compounds are tested: - only: Betaine or Curcuma longa or Echinacea purpurea
  • the ranges of concentrations of active compounds used for these two methodologies range from 4000 ppm to 32 ppm.
  • Tests to demonstrate antimicrobial activities are carried out using the liquid microdilution method for strains belonging to the genera Enterococcus, Streptococcus, Staphylococcus, Salmonella, Escherichia, Vibrio, Tenacibaculum, Aeromonas and Candida.
  • Microdilution method the preparation of the various concentrations of compounds is carried out by successive dilutions in a dilution buffer (Tryptone salt: Tryptone 1.0 g / L; Sodium chloride 8.5 g / L, pH 7.0) in 96-well microplates.
  • a dilution buffer Teryptone salt: Tryptone 1.0 g / L; Sodium chloride 8.5 g / L, pH 7.0
  • One hundred ⁇ L of inoculum is added to the wells containing 100 ⁇ L of each of the solutions to be tested. The microplate is then incubated for 24 hours at 25 ° C for strains from aquaculture or at 37 ° C for strains from other animal species.
  • Double layer method the preparation of the different concentrations of compounds is carried out by successive dilution in the TSC culture medium (tryptose agar, sulfite, cycloserine; VWR) in supercool (45 ° C-50 ° C) in 15 mL tubes. After introduction and solidification of 12mL of each dilution in a petri dish, a deposit of an inoculum volume of 5pL is made on the surface of the solidified medium. After 10 min of drying of the deposit, 5 ml of supercooling medium is added. The petri dishes are then placed in a jar and incubated at 37 ° C for 24 hours. Anaerobiosis is carried out by adding a previously moistened Anaerocult® A (VWR) to the jar.
  • VWR Anaerobiosis
  • the minimum inhibitory concentration is determined by demonstrating bacterial growth.
  • the MIC corresponds to the lowest concentration of compounds where no growth of microorganism is visible. This is manifested by the absence of clouding of the culture medium in microplates (Microdilution method) or the absence of visible colonies on agar medium (Double layer method).

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Abstract

L'invention concerne une composition comprenant de 20 à 60% de bétaïne, de 5 à 20% d'extrait d'Echinacea purpurea, et de 10 à 30% d'extrait de Curcuma longa, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.

Description

Description
COMPOSITION ANTIPARASITAIRE COMPRENANT DE LA BETAÏNE ET DES EXTRAITS D'ECHINACEA PURPUREA ET DE CURCUMA LONGA
L’invention concerne une composition et son utilisation en tant qu’antiparasitaire.
La coccidiose est parmi les maladies parasitaires les plus fréquentes chez les volailles. Causée par un parasite spécifique aux oiseaux de l’espèce Eimeria, elle peut prendre de nombreuses formes et se rencontre dans le monde entier et dans tout type d’élevage avicole.
Le diagnostic clinique est difficile, du fait des symptômes peu spécifiques, variés et de co-infections fréquentes. La coccidiose se traduit souvent par une frilosité des volailles, une baisse d’appétit, un retard de croissance, une apathie ou encore des diarrhées. Tous ces symptômes sont le résultat de dommages intestinaux, qui induisent des pertes économiques significatives pour l’éleveur. D’autant plus que la coccidiose est très contagieuse.
Les lésions, si elles sont bien marquées, peuvent être caractéristiques.
Classiquement, les lésions de coccidioses sont gradées à l’autopsie de 0 (normal) à 4 (coccidiose sévère). Le diagnostic se fait par grattages de la muqueuse intestinale en divers endroits et observation des coccidies au microscope entre lame et lamelle. Les œufs de E. brunetti, praecox, tenella et necatrix ne peuvent être identifiés sur la base de la seule mesure de la taille de l’oocyste. Le comptage des ookystes dans les fèces permet de suivre l’évolution de la contamination d’un élevage, mais ne permet pas de gérer seul le risque coccidien. Il faut toujours faire la part entre un portage de coccidies et l’expression clinique de la coccidiose.
La coccidiose représente une réelle problématique sanitaire pour les éleveurs. Face aux enjeux économiques qu’elle représente, le principal moyen de lutte reste aujourd’hui en France, et plus généralement en Europe, l’utilisation de coccidiostatiques, administrés via l’aliment. Cependant, leur utilisation continue et routinière a entraîné l’émergence de sérotypes d’Eimeria résistants. De plus, les anticoccidiens utilisés sont potentiellement toxiques pour l’animal traité, mais également pour les animaux tiers.
Plusieurs programmes de traitement anticoccidien existent et doivent être définis en prenant garde à l’apparition de résistances :
- Chez le poulet de chair : utilisation de la même molécule tout le long du lot (continu), ou 2 molécules utilisées en suivant dans une même bande (programme navette ou « dual » ou « shuttle »), ou changement d’anticoccidien au bout d’un certain nombre de bandes (rotation).
- Chez les pondeuses et les reproductrices : on favorise l’établissement de l’immunité en utilisant des vaccins vivants commerciaux, ou on utilise des anticoccidiens dont on réduit progressivement la dose avant l’entrée en ponte. - Chez la dinde : la toxicité des anticoccidiens est plus forte que chez le poulet, il faut donc les utiliser avec précaution.
La prévention passe aussi par l’utilisation de la vaccination : des vaccins vivants sont enregistrés en France et sont basés sur des souches précoces des espèces majeures de coccidies. La vaccination donne de bons résultats et l’utilisation de ces vaccins est maintenant répandue sur des productions à haute valeur économique (poulets labels, futures reproductrices, etc.) qui justifient ce coût de prophylaxie. Cette alternative pose cependant des problèmes aux éleveurs. Les souches vivantes, quelle que soit la virulence, doivent se répliquer dans les cellules hôtes épithéliales pour conférer à l’organisme une immunité active. Cette phase de multiplication entraîne de possibles baisses de performance et de prédisposition du tractus intestinal à des infections bactériennes gastro-intestinales opportunistes avec de l’entérite, des fientes humides et une augmentation des lésions aux pattes.
D’autres approches sont utilisées sur le terrain, sans réelle démonstration de leur efficacité : homéopathie, phytothérapie, isothérapie, ...
Le contexte réglementaire de plus en plus contraignant et la prise de conscience générale quant à la qualité sanitaire des aliments rendent indispensable le développement d’alternatives à l’utilisation des coccidiostatiques, qui soient mieux acceptées par le consommateur, tout en restant économiques pour l’éleveur.
Plus globalement, il est important de maintenir une bonne santé intestinale chez l’animal, afin d'assurer un fonctionnement efficace de la première barrière immunitaire et des mécanismes d'absorption digestive des nutriments.
Certains définissent la santé digestive chez la volaille comme étant le résultat d’un équilibre dynamique et fragile entre muqueuse, microflore ou microbiote et aliment (Bach Knudsen K.E. et al, 2012) ; d’autres, ajoutent à cet équilibre, l’impact des systèmes nerveux et immunitaire digestifs.
Ainsi, la santé intestinale des oiseaux peut-elle être influencée par de nombreux facteurs : génétique, qualité du poussin, qualité de l’eau, conditions d’élevage, etc. et alimentation.
On cherchera à assurer la mise en place précoce chez le jeune animal d’une flore intestinale bénéfique, à stabiliser cette flore chez l’animal en croissance, à favoriser son équilibre tout au long de la vie de l’animal, mais également, on cherchera à assurer le bon développement de la muqueuse digestive et le maintien de son intégrité.
Un mauvais équilibre muqueuse/ microflore/ aliment peut avoir pour conséquence une mauvaise digestion de l’aliment, l’augmentation de l’eau des contenus digestifs et donc, par voie de conséquence, des problèmes de diarrhée et de litière humide, pouvant eux- mêmes conduire à des problèmes de bien-être (lésions aux pattes, tarses et bréchets), des problèmes respiratoires (production excessive d’ammoniac), ou encore des problèmes sanitaires (développement de bactéries pathogènes dans la litière).
La santé intestinale des oiseaux est donc une problématique essentielle en élevage, sa dégradation pouvant entraîner des baisses de performances zootechniques, et impacter fortement la production.
Aussi, dans un contexte global d’usage raisonné d’antibiotiques, existe-t-il un besoin de fournir de nouvelles solutions pour maintenir une bonne santé digestive chez l’animal.
L'invention a pour but de pallier ces inconvénients.
Un des buts de l’invention est de fournir une nouvelle composition plus naturelle que les anticoccidiens proposés actuellement sur le marché.
Un autre but de l’invention est de proposer un nouveau traitement de la coccidiose comprenant des ingrédients naturels efficaces.
Aussi, l’invention concerne-t-elle une composition comprenant de 20 à 60% de bétaïne, de 5 à 20% d’extrait d’Echinacea purpurea, et de 10 à 30% d’extrait de Curcuma longa les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Avantageusement, la composition susmentionnée peut également contenir de 5 à 54% d’au moins un support, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Le dit au moins un support est choisi dans la liste de supports suivants : les argiles dont la sépiolite, la bentonite, la clinoptilolite ; le bicarbonate ; le carbonate de calcium ; les coproduits céréaliers dont les coproduits du blé ou du maïs, tels que le remoulage, les drêches, les rafles ; le dextrose ; les farines ; la fécule de pomme de terre ; le lactose ; les levures et les parois de levures ; le sel ; la silice ; le sulfate de calcium ; le sulfate de sodium, etc...
L’invention repose sur le constat fait par les inventeurs qu’une composition comprenant de la bétaïne et des extraits d’Echinacea purpurea et de Curcuma longa, présentait des propriétés anti-microbiennes, anti-parasitaires et notamment anti- coccidiennes chez les oiseaux d’élevage et notamment les volailles, et plus globalement permettait de maintenir une bonne santé digestive chez l’animal quel qu’il soit (non limité aux oiseaux), de sorte que la composition selon l’invention peut se substituer notamment d’une part aux anticoccidiens, et d’autre part à la vaccination anticoccidienne.
Dans l’invention, on entend par animaux tous les animaux d’élevage et de compagnie, et en particulier les animaux terrestres d’élevage notamment les bovins, les ovins, les porcins, les caprins, les lapins, les équidés, y compris les oiseaux, en particulier les oiseaux d’élevage tels que les poules, les canards, les oies, les dindes, les cailles et autres gallinacés d’élevage ainsi que les animaux terrestres de compagnie notamment les chats, les chiens, et les animaux aquatiques d’élevage tels que les poissons et les crevettes.
La bétaïne est une substance de formule (CH ) N+CCOO , disponible sous forme liquide ou cristalline.
La bétaïne anhydre d’origine naturelle, est extraite de la molasse ou la vinasse de plantes et des racines de celles-ci, principalement de betterave ( Beta vulgaris), en particulier dérivés de la fabrication de sucre ou de bioéthanol. La bétaïne est séparée et purifiée par chromatographie, avec ou sans solvant organique (de type méthanol, dichlorométhane, ou chloroforme), en phase liquide ou phase solide. Les bétaïnes anhydres se présentent sous une forme solide ou liquide. Les bétaïnes anhydres solides ont un taux de pureté variant de 91 à 97%.
La bétaïne de synthèse est obtenue à partir d’acide chloroacétique et de carbonate de sodium, auxquels on ajoute de la triméthylamine. Les bétaïnes de synthèse se présentent sous une forme solide ou liquide. On distingue la bétaïne HCl ou hydrochloride (ajout d’acide hydrochloride après une étape de concentration du mélange d’acide chloroacétique et de carbonate de sodium) de la bétaïne monohydrate ou anhydrate. Les bétaïnes de synthèse HCl solides ont de manière générale un taux de pureté compris entre 93 et 98%, les monohydrates solides ont une pureté aux alentours de 91 % et les anhydrates solides une pureté aux alentours de 96%.
Les bétaïnes liquides ont quant à elles un taux de pureté plus bas, compris entre 38 et 47%.
Dans la composition selon l’invention, la bétaïne représente de 20 à 60% en masse par rapport à la masse totale de la composition, ce qui signifie que la bétaïne représente
20 %, 20,5 %, 21 %, 21 ,5 %, 22 %, 22,5 %, 23 %, 23,5 %, 24 %, 24,5 %, 25 %, 25,5 %,
26 %, 26,5 %, 27 %, 27,5 %, 28 %, 28,5 %, 29 %, 29,5 %, 30 %, 30,5 %, 31 %, 31 ,5 %,
32 %, 32,5 %, 33 %, 33,5 %, 34 %, 34,5 %, 35 %, 35,5 %, 36 %, 36,5 %, 37 %, 37,5 %,
38 %, 38,5 %, 39 %, 39,5 %, 40 %, 40,5 %, 41 %, 41 ,5 %, 42 %, 42,5 %, 43 %, 43,5 %,
44 %, 44,5 %, 45 %, 45,5 %, 46 %, 46,5 %, 47 %, 47,5 %, 48 %, 48,5 %, 49 %, 49,5 %,
50 %, 50,5 %, 51 %, 51 ,5 %, 52 %, 52,5 %, 53 %, 53,5 %, 54 %, 54,5 %, 55 %, 55,5 %,
56 %, 56,5 %, 57 %, 57,5 %, 58 %, 58,5 %, 59 %, 59,5 % ou 60 % en masse par rapport à la masse totale de la composition. On privilégiera une bétaïne de pureté supérieure ou égale à 91 %.
L’Echinacea pupurea ou rudbeckie pourpre est une plante d’Amérique du Nord connue pour ses propriétés médicinales. Les extraits de cette plante sont obtenus par extraction alcoolique des composants des racines de celle-ci, ou encore par extraction par fluide supercritique.
Dans la composition selon l’invention, l’extrait d’Echinacea pupurea représente de 5 à 20% en masse par rapport à la masse totale de la composition, ce qui signifie que l’extrait représente 5 %, 5,5 %, 6 %, 6,5 %, 7 %, 7,5 %, 8 %, 8,5 %, 9 %, 9,5 %, 10 %,
10,5 %, 11 %, 11 ,5 %, 12 %, 12,5 %, 13 %, 13,5 %, 14 %, 14,5 %, 15 %, 15,5 %, 16 %,
16,5 %, 17 %, 17,5 %, 18 %, 18,5 %, 19 %, 19,5 %, 20 % en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Le Curcuma longa est une plante herbacée rhizomateuse vivace originaire d'Inde et de Malaisie. Les extraits sont obtenus par des premières étapes de séchage puis homogénéisation des rhizomes dans de l’alcool (acétone, dioxyde de carbone, acétate d’éthyle, dichlorométhane, n-butanol, méthanol, éthanol, isopropanol and hexane). Puis, plusieurs techniques et dispositifs peuvent être utilisés voire combinés pour finaliser l’extraction : macération statique, macération dynamique, percolation, extraction par fluide supercritique, ainsi que extractions assistées par ultrasons et microondes.
Dans la composition selon l’invention, l’extrait de Curcuma longa représente de 10 à 30% en masse par rapport à la masse totale de la composition, ce qui signifie que l’extrait représente 10 %, 10,5 %, 11 %, 11 ,5 %, 12 %, 12,5 %, 13 %, 13,5 %, 14 %, 14,5 %, 15
%, 15,5 %, 16 %, 16,5 %, 17 %, 17,5 %, 18 %, 18,5 %, 19 %, 19,5 %, 20 %, 20,5 %, 21
%, 21 ,5 %, 22 %, 22,5 %, 23 %, 23,5 %, 24 %, 24,5 %, 25 %, 25,5 %, 26 %, 26,5 %, 27
%, 27,5 %, 28 %, 28,5 %, 29 %, 29,5 % ou 30 %, en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Avantageusement, la composition susmentionnée peut comprendre en outre au moins un support, notamment au moins un support à raison de 5 à 54% en masse par rapport à la masse totale de la composition. On entend par 5 à 54% en masse : 5 %, 5,5 %, 6 %,
6,5 %, 7 %, 7,5 %, 8 %, 8,5 %, 9 %, 9,5 %, 10 %, 10,5 %, 11 %, 11 ,5 %, 12 %, 12,5 %,
13 %, 13,5 %, 14 %, 14,5 %, 15 %, 15,5 %, 16 %, 16,5 %, 17 %, 17,5 %, 18 %, 18,5 %,
19 %, 19,5 %, 20 %, 20,5 %, 21 %, 21 ,5 %, 22 %, 22,5 %, 23 %, 23,5 %, 24 %, 24,5 %,
25 %, 25,5 %, 26 %, 26,5 %, 27 %, 27,5 %, 28 %, 28,5 %, 29 %, 29,5 %, 30 %, 30,5 %,
31 %, 31 ,5 %, 32 %, 32,5 %, 33 %, 33,5 %, 34 %, 34,5 %, 35 %, 35,5 %, 36 %, 36,5 %,
37 %, 37,5 %, 38 %, 38,5 %, 39 %, 39,5 %, 40 %, 40,5 %, 41 %, 41 ,5 %, 42 %, 42,5 %,
43 %, 43,5 %, 44 %, 44,5 %, 45 %, 45,5 %, 46 %, 46,5 %, 47 %, 47,5 %, 48 %, 48,5 %,
49 %, 49,5 %, 50 %, 50,5 %, 51 %, 51 ,5 %, 52 %, 52,5 %, 53 %, 53,5 % ou 54 % en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Dans un mode de réalisation avantageux, l’invention concerne la composition susmentionnée comprenant en outre de 1 ,5 à 15% d’acide organique ou d’un mélange d’acides organiques, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Les acides organiques de l’invention sont des composés organiques, notamment carbonés, présentant des propriétés acides, c’est-à-dire capables de libérer des protons. De tels acides organiques sont bien connus de l’homme du métier. Dans la composition selon l’invention, il est possible d’ajouter un ou plusieurs acides organiques afin de favoriser l’équilibre de la flore, grâce à leur pouvoir d’acidification du tube digestif et leurs effets antimicrobiens digestifs. Dans la composition selon l’invention, l’acide organique ou le mélange d’acides organiques représente de 1 ,5 à 15% en masse par rapport à la masse totale de la composition, ce qui signifie que l’extrait représente 1 ,5 %, 2 %, 2,5 %,
3 %, 3,5 %, 4 %, 4,5 %, 5 %, 5,5 %, 6 %, 6,5 %, 7 %, 7,5 %, 8 %, 8,5 %, 9 %, 9,5 %, 10
%, 10,5 %, 11 %, 11 ,5 %, 12 %, 12,5 %, 13 %, 13,5 %, 14 %, 14,5 % ou 15 % en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Avantageusement, l’invention concerne la composition définie ci-dessus, où ledit acide organique est choisi parmi l’acide benzoïque (E210), l’acide fumarique (E297), l'acide sorbique (E200), l’acide DL-malique (E296), l’acide butyrique, l’acide maslinique et l’acide citrique (E330), ou un mélange de ceux-ci.
Chacun des acides organiques susmentionnés peut être utilisé seul ou en association avec un ou plusieurs autres acides organiques. Dans la composition selon l’invention il est donc possible d’obtenir les 120 mélanges d’acides organiques suivants :
[Tableau 1]
Figure imgf000007_0001
Figure imgf000008_0001
Figure imgf000009_0001
Avantageusement, l’invention concerne la composition susmentionnée, comprenant en outre jusqu’à 5% d’un produit comprenant un extrait d’un ou plusieurs alliacés, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
Avantageusement, ledit produit comprenant un extrait d’un ou plusieurs alliacés est sous forme huileuse ou de poudre, l’extrait huileux étant déposé sur support notamment d’argile ou de silice.
Avantageusement, ledit produit comprenant un extrait d’un ou plusieurs alliacés comprend de 17 à 30% en masse d’extrait d’ail et d’oignon, et éventuellement de poireau, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de le produit comprenant un extrait d’un ou plusieurs alliacés.
Les extraits, sous forme liquide ou solide, sont préparés par macération dans une solution hydro-alcoolique, puis filtrés par centrifugation.
Dans l’invention, il peut être avantageux d’ajouter à la composition des produits comprenant un extrait d’un ou plusieurs alliacés, tels que le poireau, l’ail, l’ail des ours, l’oignon vert ou la ciboulette
Encore plus avantageusement, l’invention concerne la composition susmentionnée comprenant :
- soit :
o environ 24 % en masse de bétaïne par rapport à la masse totale de la composition,
o 5 % en masse d’extrait d’Echinacea purpurea par rapport à la masse totale de la composition,
o 12,5% en masse d’extrait de Curcuma longa par rapport à la masse totale de la composition, et
o 1 ,6 % en masse d’acide benzoïque par rapport à la masse totale de la composition.
- soit :
o environ 48 % en masse de bétaïne par rapport à la masse totale de la composition,
o 10 % en masse d’extrait d’Echinacea purpurea par rapport à la masse totale de la composition,
o 25% en masse d’extrait de Curcuma longa par rapport à la masse totale de la composition, et
o 6 % en masse d’un mélange par rapport à la masse totale de la composition, ledit mélange comprenant
■ 19 % en masse d’acide fumarique par rapport à la masse totale du mélange,
■ 11 % en masse d'acide sorbique par rapport à la masse totale du mélange,
■ 9% en masse d’acide DL-malique par rapport à la masse totale du mélange, et
■ 9 % en masse d’acide citrique par rapport à la masse totale du mélange.
Les deux compositions susmentionnées sont particulièrement avantageuses. La première d’entre elles comprend environ 24% en masse de bétaïne (ou 25% de bétaïne 95%), 5% en masse d’extrait d’Echinacea purpurea, 12,5% en masse d’extrait de Curcuma longa et 1 ,6% en masse d’acide benzoïque. Cette première composition peut également contenir un support, notamment du carbonate de calcium à environ 20% en masse par rapport à la masse totale de la composition. Le support peut également contenir de la sépiolite, notamment sous forme de semoulette, à raison de 19% en masse par rapport à la masse totale de la composition. La sépiolite est un minéral du groupe des argiles à structure fibreuse. D’autres ingrédients peuvent entrer dans la composition de la composition susmentionnée, tels que d’une matière première comprenant 17% d’extraits d’ail à raison de 1 % en masse par rapport à la masse totale de la composition ou encore du remoulage de blé à raison de 15% en masse par rapport à la masse totale de la composition.
La seconde composition susmentionnée comprend environ 48 % en masse de bétaïne (ou 50% de bétaïne 95%), 10 % en masse d’extrait d’Echinacea purpurea, 25 % en masse d’extrait de Curcuma longa, ces trois composants formant un premier mélange et 6 % en masse d’un second mélange. Le second mélange représente 6% de la composition totale et est composé en masse par rapport à la masse dudit second mélange d’une association de plusieurs acides organiques : 19 % d’acide fumarique, 11 % d'acide sorbique, 9% en masse d’acide DL-malique et 9 % en masse d’acide citrique. Un support, tel que du carbonate de calcium à raison de 5% en masse par rapport à la masse totale de la composition. En outre, il est également possible d’ajouter à cette composition une matière première comprenant pour 30% d’extraits d’alliacés (ail) à hauteur de 2% de la composition totale.
L’invention concerne en outre la composition susmentionnée en tant que médicament, notamment un médicament à usage vétérinaire.
La composition selon l’invention est utilisée comme médicament pour traiter des pathologies telles que décrites ci-après, mais également pour la prophylaxie de ces types de pathologies.
Il peut être avantageux que dans la composition du médicament susmentionné que la composition soit associée à un véhicule pharmaceutiquement acceptable ou vétérinairement acceptable, selon les normes en vigueur connues de l’homme du métier. Les supports susmentionnés peuvent être considérés comme de tels véhicules.
Le véhicule pharmaceutiquement acceptable ou vétérinairement acceptable peut être un simple support mais peut également jouer un rôle galénique spécifique tel que la libération contrôlée lors de l’ingestion de la composition selon l’invention, de sorte que les principes actifs seront libérés de manière retardée.
Dans un autre aspect, l’invention concerne la composition susmentionnée pour son utilisation dans le cadre du traitement ou la prévention des dérèglements de la santé digestive des animaux.
Avantageusement, lesdits dérèglements de la santé digestive des animaux sont notamment les maladies parasitaires, notamment les maladies parasitaires des animaux d’élevage, notamment des oiseaux d’élevage, en particulier des volailles.
La composition selon l’invention est particulièrement utile pour le traitement et la prévention des maladies parasitaires. Son administration se fait essentiellement par ingestion, notamment sous la forme d’un additif ajouté à l’alimentation, comme défini ci- après.
La présente divulgation concerne également une méthode de traitement ou de prévention des infections parasitaires des animaux, notamment des oiseaux d’élevage, notamment des volailles, comprenant l’administration, notamment orale, d’une quantité efficace de la composition selon l’invention susmentionnée à des animaux, notamment des oiseaux d’élevage, dans le besoin. Par santé digestive on entend dans l’invention une meilleure valorisation du bol alimentaire par l’animal, dans les conditions d’élevage normales. Chez la volaille, le lapin et le porc, par exemple, la santé digestive est définie comme étant le résultat d’un équilibre dynamique et fragile entre muqueuse, microflore ou microbiote et aliment (Bach Knudsen K.E. et al, 2012) ; d’autres, ajoutent à cet équilibre, l’impact des systèmes nerveux et immunitaire digestifs.
De manière avantageuse, l’invention concerne la composition susmentionnée, pour l’utilisation susmentionnée, où lesdits dérèglements de la santé digestive sont des infections parasitaires, notamment des infections coccidiennes, ou coccidioses.
L’agent étiologique des coccidioses est un parasite obligatoire protozoaire intracellulaire appartenant le plus souvent au genre Eimeria. Il existe plusieurs espèces de coccidies pour chaque espèce aviaire. Les principales espèces de coccidies d’intérêt sont les suivantes :
- Coccidies du poulet : E. acervulina, E. necatrix, E. maxima, E. brunetti, E. tenella, E. mitis, E. praecox,
- Coccidies de la dinde : £. meleagrimitis, E. adenoeides, E. dispersa, E. gallopavonis
- Coccidies de l’oie : £. truncata (pouvant aussi toucher le canard de Barbarie et le cygne), £. anseris,
- Coccidies du canard : Tyzzeria perniciosa, E. mulardi (concernant principalement le canard mulard),
- Coccidies de la pintade : £. numidia, E. grenieri (plus fréquente mais au pouvoir pathogène inférieur), et
- Coccidies du pigeon : £. labbeana.
L’invention concerne également une composition alimentaire destinée à la nutrition animale comprenant de 0,05 à 0,6 % de composition telle que définie ci-dessus, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition alimentaire.
Dans le cadre de l’invention, la composition susmentionnée peut être ajoutée à des aliments destinés à la nutrition animale sous la forme d’un complément alimentaire, ou additif, à raison de 0,05 à 0,6 % en masse par rapport à la masse totale de l’aliment. Cela signifie que la composition selon l’invention représente, dans l’aliment susmentionné,
0,05 %, 0,06 %, 0,07 %, 0,08 %, 0,09 %, 0,1 %, 0,11 %, 0,12 %, 0,13 %, 0,14 %, 0,15
%, 0,16 %, 0,17 %, 0,18 %, 0,19 %, 0,2 %, 0,21 %, 0,22 %, 0,23 %, 0,24 %, 0,25 %,
0,26 %, 0,27 %, 0,28 %, 0,29 %, 0,3 %, 0,31 %, 0,32 %, 0,33 %, 0,34 %, 0,35 %,
0,36 %, 0,37 %, 0,38 %, 0,39 %, 0,4 %, 0,41 %, 0,42 %, 0,43 %, 0,44 %, 0,45 %,
0,46 %, 0,47 %, 0,48 %, 0,49 %, 0,5 %, 0,51 %, 0,52 %, 0,53 %, 0,54 %, 0,55 %,
0,56 %, 0,57 %, 0,58 %, 0,59 %, 0,6 % en masse par rapport à la masse totale de l’aliment.
Il est particulièrement avantageux que dans le cadre de la première composition susmentionnée, ladite composition soit utilisée dans une composition alimentaire à raison de 0,1 % ou 0,2% en masse par rapport à la masse de la composition alimentaire (par exemple 2kg de composition pour 1 tonne d’aliment). Dans le cadre de la seconde composition susmentionnée, il est particulièrement avantageux que ladite composition soit utilisée dans une composition alimentaire à raison de 0,1% en masse par rapport à la masse de la composition alimentaire (par exemple 1 kg de composition pour 1 tonne d’aliment).
L’invention concerne également un prémélange constitué essentiellement de bétaïne, d’extrait d’Echinacea purpurea et d’extrait de Curcuma longa, ledit prémélange étant tel que la proportion de bétaïne représente cinq fois la proportion d’extrait d’Echinacea purpurea et tel que la proportion de bétaine représente deux fois la proportion d’extrait de Curcuma longa, les proportions étant exprimées en masse par rapport à la masse du prémélange.
Le prémélange susmentionné est particulièrement avantageux et contient par exemple 50% en masse du prémélange de bétaïne, 10% en masse du prémélange d’extrait d’Echinacea purpurea et 25 % en masse du prémélange d’extrait de Curcuma longa. Le prémélange susmentionné peut également contenir par exemple 25% en masse du prémélange de bétaïne, 5% en masse du prémélange d’extrait d’Echinacea purpurea et 12,5 % en masse du prémélange d’extrait de Curcuma longa.
Toutes les formules suivantes ont été testées selon l’un ou l’autre des protocoles ci- dessus :
[Tableau 2]
Figure imgf000013_0001
Toutes les compositions susmentionnées permettent d’obtenir des résultats comparables, tels que définis dans l’invention.
L’invention sera mieux comprise à la lumière de l’exemple et des figures détaillés ci- après.
Brève description des figures
[Fig. 1 ] La figure 1 représente un histogramme montrant la croissance de poulets de chair, correspondant au GMQ (Gain Moyen Quotidien), exprimé en grammes par jour, sur la période 0-1 Oj pour chacun des groupes étudiés : 1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien (narasin/nicarbanazine de 0 à 30 jours, puis narasin de 30 jours à l’abattage) ; 2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien ; 4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + composition selon l’invention ; 5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent et 6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + composition selon l’invention.
Le produit concurrent est constitué d’huile essentielle d’ail et de phénols (molécules type carvacrol-thymol), de saponine, de diallyl sulfures et de thiosulfinates.
[Fig. 2] La figure 2 représente un histogramme montrant l’efficacité alimentaire via l’Indice de consommation (IC), exprimé en g d’aliment par g de poids vif, sur la période 0-1 Oj pour chacun des groupes étudiés : 1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien (narasin/nicarbanazine de 0 à 30 jours, puis narasin de 30 jours à l’abattage) ; 2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien ; 4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + composition selon l’invention ; 5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent et 6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + composition selon l’invention.
[Fig. 3] La figure 3 représente un histogramme montrant le GMQ, exprimé en grammes par jour, sur la période 0-39j pour chacun des groupes étudiés : 1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien (narasin/nicarbanazine de 0 à 30 jours, puis narasin de 30 jours à l’abattage) ; 2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien ; 4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + composition selon l’invention ; 5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent) et 6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + composition selon l’invention.
[Fig. 4] La figure 4 représente un histogramme montrant la consommation d’aliments, exprimée en gramme par jour, sur la période 0-39j pour chacun des groupes étudiés : 1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien (narasin/nicarbanazine de 0 à 30 jours, puis narasin de 30 jours à l’abattage) ; 2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien ; 4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + composition selon l’invention ; 5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent) et 6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + composition selon l’invention.
[Fig. 5] La figure 5 représente un histogramme montrant l’indice de consommation (IC) corrigé sur la période 0-39j pour chacun des groupes étudiés : 1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien (narasin/nicarbanazine de 0 à 30 jours, puis narasin de 30 jours à l’abattage) ; 2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien ; 4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + composition selon l’invention ; 5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent) et 6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + composition selon l’invention.
[Fig. 6] La figure 6 représente un histogramme empilé montrant les indices lésionnels coccidiens associés à l’espèce de coccidies Eimeria acervulina, mesurés par un laboratoire indépendant selon la méthode de référence décrite dans Johnson and Reid EXPERIMENTAL PARASITOLOGY 28, 30-36, pour chacun des groupes étudiés (ordonnée : effectifs) : 1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien
(narasin/nicarbanazine de 0 à 30 jours, puis narasin de 30 jours à l’abattage) ; 2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidiens ; 4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + composition selon l’invention ; 5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent) et 6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + composition selon l’invention.
Les indices lésionnels sont notés de 0 à 4 : 0 : absence de lésion (noir), 1 : lésions en points blancs répartis sur la paroi duodénale uniquement avec moins de 5 lésions au cm2 (gris foncé), 2 : lésions plus rapprochées mais non coalescentes, jusqu’à 20 cm en- dessous du duodénum, visibles côtés muqueux et séreux (gris clair), 3 : lésions jointives, jusqu’au diverticule du sac vitellin, enduit sur la muqueuse, contenu intestinal liquide (hachuré) et 4 : muqueuse intestinale blanchâtre et très épaissie, exsudât crémeux riche en oocystes (pointillés).
[Fig. 7] La figure 7 est un graphique montrant l’évolution du poids des animaux de chacun des groupes étudiés en fonction de leur âge (en jours), ramené en pourcentage de l’évolution du poids des animaux traités avec un programme anticoccidien. 1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien (narasin/nicarbanazine de 0 à 30 jours, puis narasin de 30 jours à l’abattage) ; 2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien ; 4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + composition selon l’invention ; 5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent et 6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + composition selon l’invention.
[Fig. 8] La figure 8 représente un histogramme montrant le nombre de canards ayant sauté un repas ou pris un demi-repas par jour d’engraissement : nombre de canards Témoin ayant pris un demi-repas (A) ; nombre de canards Essai ayant pris un demi-repas (B) ; nombre de canards Témoin ayant sauté un repas (C) ; nombre de canards Essai ayant sauté un repas (D).
[Fig. 9] La figure 9 représente un histogramme empilé montrant le classement en nombre des foies à l’abattage selon les critères définis à l’exemple 2 pour les deux groupes de canards : le groupe Témoin à gauche, et le groupe Essai à droite. Les foies sont répartis entre les classes suivantes : foie Extra (A) ; foie Sélection (B) ; foie Tout venant (C).
[Fig. 10] La Figure 10 représente les courbes d’évolution des consommations d’eau des poulets Label (en g/animal présent/jour) au cours du temps (en jours), entre la mise en place à J0 et l’abattage à J84, les tirets A et B représentant les valeurs instantanées de consommation d’eau, la courbe A représentant la moyenne mobile du groupe Témoin, et la courbe B représentant la moyenne mobile du groupe Essai.
[Fig. 11 ] La Figure 11 représente les scores lésionnels moyens d’indice de Reid des 5 prélèvements à 32j pour chacun des groupes Témoin (A) et Essai (B) pour Eimeria Acervulina (1 ), Eimeria Maxima (2), Eimeria Necatrix (3) et Eimeria Tenella (4).
[Fig. 12] La Figure 12 représente les courbes d’évolution du poids moyen des animaux de chacun des groupes étudiés, en fonction de leur âge (en jours : Oj, 12j, 21 j, 35j et 42j), exprimé en pourcentage de l’évolution du poids moyen des animaux témoin négatif. 1 : Lot témoin négatif sans programme anticoccidien (noir) ; 2 : Lot témoin positif, avec programme anticoccidien en phases de démarrage, de croissance et de finition (narasin/nicarbanazine à 0,35% de 0 à 20 jours, puis narasin à 0.2% de 21 à 35 jours) (gris foncé) ; 3 : Lot sans anticoccidien + produit concurrent apporté à 0,5 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge (gris) ; et 4 : Lot sans anticoccidien + solution interne apportée à 2 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge (gris clair).
[Fig. 13] La Figure 13 représente un histogramme empilé montrant les indices lésionnels coccidiens associés à l’espèce de coccidies Eimeria maxima, mesurés avec un microscope par un laboratoire indépendant selon la méthode Health Tracking System (HTS), pour chacun des groupes étudiés (en abscisse) : 1 : Lot témoin négatif sans programme anticoccidien; 2 : Lot témoin positif, avec programme anticoccidien en phases de démarrage, de croissance et de finition (narasin/nicarbanazine à 0,35% de 0 à 20 jours, puis narasin à 0.2% de 21 à 35 jours); 3 : Lot sans anticoccidien + produit concurrent apporté à 0,5 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge; et 4 : Lot sans anticoccidien + solution selon l’invention apportée à 2 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge.
Les indices lésionnels sont notés de 0 à 4 (5 nuances de gris) : 0 : absence de lésion (gris le plus clair), 1 : lésions en points blancs répartis sur la paroi duodénale uniquement avec moins de 5 lésions au cm2 (gris mois clair), 2 : lésions plus rapprochées mais non coalescentes, jusqu’à 20 cm en-dessous du duodénum, visibles côtés muqueux et séreux (gris), 3 : lésions jointives, jusqu’au diverticule du sac vitellin, enduit sur la muqueuse, contenu intestinal liquide (gris foncé) et 4 : muqueuse intestinale blanchâtre et très épaissie, exsudât crémeux riche en oocystes (gris très foncé).
[Fig. 14] La Figure 14 représente un histogramme empilé montrant les notes synthétiques de l’examen réalisé par un laboratoire indépendant selon la méthode De Gussem (2010), pour chacun des groupes étudiés (en abscisse) : 1 : Lot témoin négatif sans programme anticoccidien ; 2 : Lot témoin positif, avec programme anticoccidien en phases de démarrage, de croissance et de finition (narasin/nicarbanazine à 0,35% de 0 à 20 jours, puis narasin à 0.2% de 21 à 35 jours); 3 : Lot sans anticoccidien + produit concurrent apporté à 0,5 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge ; et 4 : Lot sans anticoccidien + solution interne apportée à 2 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge.
Les notes synthétiques vont de 0 : absence de problème intestinal (gris très clair) à 10 : très grand nombre de critères illustrant la présence de problèmes digestifs de type dysbactériose chez l’animal (noir).
[Fig. 15] La figure 15 représente un histogramme montrant l’évolution du nombre d’oocystes d’Eimeria vejdovskyi par gramme de fèces de lapins, dans des prélèvements réalisés à 10j, 42j et 49j pour chacun des groupes étudiés : 1 : Lot témoin positif (gris foncé) ; 2 : Lotsans anticoccidien + composition selon l’invention (gris clair). Les flèches représentent le pourcentage de diminution du nombre d’oocystes entre le lot 1 et le lot 2 en pourcentage. La ligne noire représente le seuil d’alerte en élevage vis-à-vis de la pression coccidienne.
[Fig. 16] La figure 16 représente un histogramme montrant le nombre d’oocystes par gramme de fèces de lapins, dans des prélèvements à 49j pour chacun des groupes étudiés : 1 : Lot témoin négatif (gris foncé) ; 2 : Lot sans anticoccidien + composition selon l’invention (gris clair). La ligne noire représente le seuil d’alerte en élevage vis-à- vis de la pression coccidienne. Les flèches représentent le pourcentage de diminution du nombre d’oocystes entre le lot 1 et le lot 2 en pourcentage. A : Eimeriamagna, B : Eimeria media et C : Eimeria irresidia.
EXEMPLES
EXEMPLE 1
I - PROBLEMATIQUE
L’objectif de l’essai est de comparer, par rapport à une stratégie de traitement avec un programme anticoccidien classiquement utilisé, les effets de deux solutions alternatives aux anticoccidiens (une composition selon l’invention, et un produit concurrent) ainsi que les effets d’une composition selon l’invention utilisée en accompagnement de la vaccination, sur les performances de croissance entre 0 et 39 jours d’âge et les lésions intestinales des poulets à 21 jours d’âge. Les performances zootechniques et économiques des différentes stratégies ont été comparées.
II - MATERIEL ET METHODE
11.1 - Dispositif expérimental et mise en lot
L’essai a été réalisé chez un éleveur de volailles de chair. 30 parquets de 2.5 m2 ont été installés. Les poulets ont été allotés à 0 jour à raison de 26 poulets mâles à croissance rapide par parquet, répartis en 5 groupes de 6 parquets, soit 156 poulets par groupe.
La mise en lot a été faite par pesée collective des animaux.
Les animaux ont été abattus à 39 jours d’âge soit 2.7 kg de poids vif.
Les groupes suivants ont été testés :
1 : Lot témoin positif avec programme anticoccidien (narasin/nicarbanazine à 100 ppm de 0 à 30 jours, puis narasin à 70 ppm de 30 jours à l’abattage) ;
2 : Lot vacciné avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervuiina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien ;
4 : Lot vacciné, sans programme anticoccidien, + solution interne apportée à 1 kg/T d’aliment de 0 à 39 jours d’âge ;
5 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + produit concurrent apporté à 1 kg/T d’aliment de 0 à 39 jours d’âge ;
6 : Lot non vacciné et sans anticoccidien + solution interne apportée à 1 kg/T d’aliment de 0 à 39 jours d’âge.
Les animaux vaccinés des lots 2 et 4 ont été vaccinés en élevage, une fois la mise en lot effectuée, avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervuiina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP, sans programme anticoccidien.
La solution interne est une des compositions selon l’invention et comprend le prémélange susmentionné constitué essentiellement de bétaïne, d’extrait d’Echinacea purpurea et d’extrait de Curcuma longa, ledit prémélange étant tel que la proportion de bétaïne représente cinq fois la proportion d’extrait dEchinacea purpurea et tel que la proportion de bétaine représente deux fois la proportion d’extrait de Curcuma longa, les proportions étant exprimées en masse par rapport à la masse du prémélange.
Plus précisément, la solution interne est composée dans cet essai de :
- 6% d’un mélange comprenant 19% d’acide fumarique, 11% d'acide sorbique, 9% en masse d’acide DL-malique et 9% en masse d’acide citrique,
- 2% d’une matière première comprenant pour 30% d’extraits d’ail ( Allium Sativum)
- 25% d’extrait de Curcuma longa,
- 10% d’extrait de Echinacea purpurea,
- 50% de Bétaïne HCL 95%,
- 2% de remoulage de blé,
- 5% de CaCû3.
Le programme alimentaire est le même pour les 5 groupes. Les aliments sont formulés de façon à couvrir les besoins nutritionnels des poulets de chair. Sur chaque période d’élevage, les aliments sont identiques, les solutions testées venant en substitution du blé selon les taux d’incorporation précisés ci-dessus.
II.2 - Mesures
11.2.1 - Mesures sur animaux à l’élevage :
- Poids des animaux : pesée collective des parquets à la mise en place, à chaque changement alimentaire (10, 21 et 31 jours) et à l’abattage (39 jours).
- Consommations d’aliment : pesée des sacs et des reliquats à la mise en place, à chaque changement alimentaire et en fin d’essai.
- Mortalité et morbidité : relevé du taux quotidien et des causes.
Les programmes d’élevage ont été respectés pour les groupes.
11.2.2 - Mesures de la pression coccidienne :
- A21 jours d’âge : mesure des indices lésionnels selon l’échelle de Johnson et Reid (1970) sur 6 poulets par groupe.
III - Résultats
III.1 - Période 0 à 10 jours
Sur la période de démarrage, les animaux du groupe vacciné sans additifs (2) ont de moindres performances de croissance par rapport au groupe recevant un programme anticoccidien classique (-2% de GMQ par rapport à (1 )) (Fig. 1 ), sans modification nette de l’efficacité alimentaire (Fig. 2).
Avec la vaccination + composition selon l’invention (4), les performances de croissance à 10 jours sont équivalentes au Témoin positif, sans modification des indices de consommation. L’invention permet donc dans cet essai de sécuriser le démarrage des poulets vaccinés contre les coccidies à la mise en place.
Sur les groupes (5) et (6), les performances de croissance à 10 jours sont légèrement en retrait (-1 .2% de GMQ par rapport à (1 )), avec un IC amélioré (-0.03 points) pour le groupe avec la composition selon l’invention.
III.2 - Période 0 à 39 jours
Les groupes vaccinés sans additifs (2) ou avec la solution interne (4) ont des gains moyens quotidiens (GMQ) plus faibles que le Témoin positif (1 ) (Fig. 3), les consommations sont plus fortes (Fig. 4) mais les IC sont proches (Fig. 5).
Sur les groupes (5) et (6), le GMQ est inférieur pour la solution concurrente (Fig. 3) avec une consommation plus élevée (Fig. 4), et donc un IC dégradé de 0.02 points (Fig. 5). Avec la composition selon l’invention, le GMQ est équivalent au Témoin positif et la consommation un peu plus élevée. L’IC est amélioré de 0.04 pts par rapport à une stratégie anticoccidienne classique et par rapport à la vaccination, et de 0.06 points par rapport à la solution concurrente.
III.3 - Poids (Fig. 7)
Comparé au T émoin positif (1 ), une forte baisse de croissance est observée après 10j de traitement avec le produit concurrent (5) ; alors que le traitement avec la composition selon l’invention (6) permet d’obtenir des poids comparables à ceux du groupe Témoin positif (1 ).
III.4 - Scores lésionnels (Fig. 6)
Afin de tester les scores lésionnels causés par Eimeria acervulina, maxima, tenella, brunetti, necatrix et mitis, des prélèvements d’un poulet / parquet à 21 jours ont été réalisés, soit 6 poulets / groupe (1 à 6).
Les groupes d’animaux vaccinés (2 et 4) ont tendance à avoir de plus forts scores lésionnels. L’apport d’additifs ne réduit pas les scores moyens mais modifie la répartition des notes : plus de score 1 avec la composition selon l’invention.
Les groupes (5) et (6) ont des notes moyennes plus élevées que le groupe traité avec un anticoccidien (1 ). Mais entre les deux solutions (5) et (6), on peut observer une réduction des notes 3 et 4 (lésions sévères) en faveur des notes 0 (absence de lésion) et 1 (lésions peu marquées) avec la composition selon l’invention (6).
IV - Conclusions
La composition selon l’invention a permis, dans cet essai réalisé en conditions terrain chez un éleveur :
- De maintenir des performances de croissance et une efficacité alimentaire équivalentes voire améliorées par rapport à un traitement anticoccidien classique, sans dégradation nette des scores lésionnels ; - De sécuriser la croissance des poulets au démarrage (0-10 jours) lorsqu’ils sont vaccinés à la mise en place, en compensant la baisse de poids vif à 10 jours associée au vaccin ;
- D’améliorer la croissance et l’efficacité alimentaire, tout en réduisant la fréquence des lésions associées à Eimeria acervulina à 21 jours lorsque la solution est apportée seule, par rapport à des animaux vaccinés ;
- D’améliorer sensiblement la croissance et l’efficacité alimentaire, tout en réduisant de manière notable la fréquence et l’intensité des lésions associées à Eimeria acervulina à 21 jours par rapport à la solution concurrente.
EXEMPLE 2
I - PROBLEMATIQUE
En élevage de canards gras, une période de pré-engraissement entre 0 et 84 jours est suivie d’une période d’engraissement entre 84 et 96 jours, avant abattage. Pendant la période de pré-engraissement, les canards reçoivent successivement un aliment démarrage (0-30 jours) et un aliment croissance/finition (30-84 jours).
L’objectif de cet essai est d’étudier l’impact de l’apport d’une composition selon l’invention durant la phase de pré-engraissement chez les canards sur la performance en engraissement pour la production de foie gras, en l’absence de traitement anticoccidien et de vaccination.
A partir de 28 jours et jusqu’au passage en engraissement, les canards vivent en extérieur et entrent donc potentiellement, voire de manière systématique, en contact avec des coccidies et des flores bactériennes sauvages.
Cet essai a été réalisé dans un dispositif expérimental sur un lot de canards prêts à engraisser de 1050 canards, divisé en deux groupes dès le démarrage : un groupe Témoin et un groupe Essai. Le suivi des groupes en engraissement a été réalisé sur le même site.
II - MATERIEL ET METHODE
La mise en lot a été faite par pesée individuelle des animaux.
Chaque groupe comprend au démarrage 525 canards Mulard mâles. Le programme alimentaire est le même pour les groupes Témoin et Essai, ainsi que les niveaux nutritionnels, la seule différence étant la présence ou non de 0,1% de solution interne :
[Tableau 3]
Figure imgf000021_0001
Figure imgf000022_0001
Aucun des groupes n’est vacciné, ni ne reçoit un programme anticoccidien sur toute la période de l’essai.
La solution interne est une des compositions selon l’invention et comprend le prémélange susmentionné constitué essentiellement de bétaïne, d’extrait d’Echinacea purpurea et d’extrait de Curcuma longa, ledit prémélange étant tel que la proportion de bétaïne représente cinq fois la proportion d’extrait dEchinacea purpurea et tel que la proportion de bétaine représente deux fois la proportion d’extrait de Curcuma longa, les proportions étant exprimées en masse par rapport à la masse du prémélange.
Plus précisément, la solution interne est composée de :
- 6% d’un mélange comprenant 19% d’acide fumarique, 11% d'acide sorbique, 9% en masse d’acide DL-malique et 9% en masse d’acide citrique,
- 2% d’une matière première ou produit comprenant pour 30% d’extraits d’ail ( Allium Sativum ),
- 25% d’extrait de Curcuma longa,
- 10% d’extrait de Echinacea purpurea,
- 50% de bétaïne HCL 95%,
- 2% de remoulage de blé,
- 5% de CaCC>3.
Après une période de 84 jours de pré-engraissement, les animaux restent dans leurs groupes respectifs, c’est-à-dire que les animaux qui se trouvaient en Essai dans la période Pré-engraissement sont toujours considérés comme des animaux Essai pour la période suivante Engraissement, même chose pour les animaux Témoins.
Durant la phase Engraissement, les 2 groupes reçoivent la même farine de maïs.
III - Résultats
III.1 - Résultats en phase de pré-engraissement (de 1 à 84 jours)
III.1.1 - Résultats
[Tableau 4]
Figure imgf000023_0001
Observations :
- Pas de différence significative de poids moyen ni de GMQ entre les groupes Témoin et Essai. (p=0.37)
Globalement, on observe une évolution des poids similaire entre le groupe Témoin et le groupe Essai. On notera cependant un avantage significatif de 24.5 grammes à 15 jours d’âge en faveur des canetons essai (p<1%), qui suggère une sécurisation de la phase de démarrage avec l’utilisation de la solution, par rapport au témoin. Les deux groupes sont équivalents ensuite.
- Sur la période 1-84 jours, la consommation d’aliment est moindre dans le lot Essai (-900g/canard).
- L’indice de consommation (IC) est ainsi amélioré de 0.17 pts pour le lot Essai.
111.1.2 - Conclusions
L’utilisation de la solution interne a permis une sécurisation du démarrage des canetons, qui se traduit par une amélioration significative du poids à 15 jours. Les courbes de poids sont ensuite similaires.
Sur la période globale, l’efficacité alimentaire est améliorée de 0,17 points, du fait d’une réduction de l’ingéré alimentaire pour les canards ayant reçu la solution interne. Cette efficacité alimentaire améliorée pourrait être mise en relation avec une meilleure santé digestive, se traduisant par une meilleure valorisation du bol alimentaire, dans les conditions d’élevage habituelles avec un accès à l’extérieur à partir de 28 jours, et donc une mise en contact potentielle avec des flores pathogènes et/ou des coccidies sauvages à partir de 28 jours.
111.2 - Résultats en phase d’engraissement (de 84 à 96 jours)
III.2.1 - Qualité de l’engraissement
Lors de la phase d’engraissement, les animaux reçoivent une pâtée de farine de maïs, d’un poids prédéterminé par l’éleveur, deux fois par jour (matin et soir). 1040 canards préalablement pré-engraissés comme vu précédemment (à raison de 520 canards Témoin et 520 canards Essai), ont été répartis à 84 jours dans 208 cages d’engraissement, à raison de 5 canards par cage. Les animaux Témoin et Essai sont répartis dans les différentes rangées de cages du bâtiment, de façon à limiter les interactions de l’essai avec les conditions environnementales (« effet rangée »).
La qualité de l’engraissement est évaluée grâce au nombre de canards n’ayant consommé qu’une demi-dose de pâtée (demi-repas) ou n’ayant pas consommé leur dose lors d’un des repas de la journée (repas sauté). Un test du Khi2 permet d’évaluer la significativité de la différence entre les deux groupes sur la durée totale de l’engraissement.
Un repas sauté correspond en général à un animal malade, ou n’ayant pas bien digéré le repas précédent.
Le nombre de canards ayant sauté un repas ou reçu un demi-repas est comptabilisé manuellement par l’éleveur, et validé en fin de repas par comparaison de la quantité de farine de maïs servie et la quantité de farine de maïs prévue par l’éleveur pour une distribution donnée.
Sur 12 jours d’engraissement, de 84 à 96 jours, on compte significativement moins de demi-repas dans le groupe Essai par rapport au groupe Témoin (11 vs 24, p<5%). On compte également moins de repas sautés dans le groupe Essai (3 vs 6) en fin d’engraissement, sans que cette différence soit significative. (Fig. 8)
III.2.2 - Poids de carcasses, de foies et de magrets
Les données issues de l’abattage portent sur 200 canards prélevés sur les 1036 restants en fin d’essai, selon un plan prédéfini.
La significativité des résultats est mesurée par une analyse de variance de type III.
[Tableau 5]
Figure imgf000024_0001
Aucune différence significative n’est à relever sur les performances c 'engraissement
(poids à l’abattage, poids de foie, poids et magret et indices de consommation correspondants) avec l’utilisation de la solution.
III.2.3 - Qualité des foies à l’abattoir
Les données issues de l’abattage portent sur 200 canards prélevés sur les 1036 restants en fin d’essai selon un plan prédéfini. Les foies sont triés sur des critères de poids, couleur, aspect, texture et odeur selon la grille de tri suivante :
[Tableau 6]
Figure imgf000025_0002
Sur la figure 9, on
Figure imgf000025_0001
une répartition quasi-identique des foies à l’abattage entre le groupe Témoin et le groupe Essai, selon les critères de tri portant sur les poids, couleur, aspect, texture et odeur définis précédemment.
III.2.4 - Conclusions
L’utilisation de la solution interne en phase de pré-engraissement a permis une meilleure qualité d’engraissement après 84 jours, comme en témoigne la réduction numérique du nombre de repas sautés et significative du nombre de demi-repas. On peut associer ce meilleur déroulement de l’engraissement à une amélioration de la santé digestive des canards. Les performances en engraissement (poids et qualité des foies gras) ne sont pas modifiées.
IV - Conclusions
La composition selon l’invention utilisée sur la période pré-engraissement ne modifie pas la courbe de croissance des canards Essai qui présentent un poids équivalent au groupe Témoin à l’entrée en engraissement, mais améliore de façon marquée l’indice de consommation (IC) (-0.17 pts), via une baisse de la consommation globale d’aliment, sur la période globale 0-84 jours. On notera de plus une sécurisation du démarrage des canetons, qui présentent à 15 jours un poids significativement supérieur avec l’utilisation de la solution.
Par la suite, l’utilisation de la solution en pré-engraissement réduit significativement le nombre de canards ayant pris en demi repas (-54%), sans modifier les performances de gavage, ni la qualité des foies.
L’utilisation de la solution par rapport à un témoin sans solution permet donc une amélioration des performances en pré-engraissement et de la qualité de l’engraissement, sans dégrader les performances en engraissement (poids et qualité des foies gras produits).
EXEMPLE 3
I - PROBLEMATIQUE
L’objectif de cet essai est de comparer l’impact d’une composition selon l’invention apportée par l’aliment sur des poulets Label non vaccinés, par rapport à un programme vaccinal classiquement utilisé en élevage de volailles, pour lutter contre la perte de performances de croissance et les lésions intestinales des poulets, liées à la contamination par les coccidies.
Cet essai a été réalisé dans un élevage de Poulets Label souche JA 657 tout venant (c’est-à-dire non sexés), sur 8800 poulets, soit 4400 poulets par groupe, répartis dans 2 bâtiments comparables.
II - MATERIEL ET METHODE
11.1 - Dispositif expérimental et mise en lot
Chaque groupe de 4400 poulets est disposé dans un bâtiment d’élevage appartenant au même éleveur.
Le programme alimentaire est le même pour les groupes Témoin et Essai, ainsi que les niveaux nutritionnels. Les deux groupes se différencient cependant par le fait que :
- les animaux du groupe Témoin sont vaccinés au couvoir par nébulisation, avec un vaccin comprenant des oocystes sporulés dérivés de cinq lignées précoces de coccidies Eimeria acervulina HP, Eimeria maxima CP, Eimeria maxima MFP, Eimeria mitis HP et Eimeria tenella HP ;
- le groupe Essai n’est pas vacciné, et reçoit un aliment, identique au groupe Témoin, mais sur lequel est dressée la solution interne à hauteur de 1 kg/tonne (ajout de la solution on the top).
La solution interne est une des compositions selon l’invention et comprend le prémélange susmentionné constitué essentiellement de bétaïne, d’extrait dEchinacea purpurea et d’extrait de Curcuma longa, ledit prémélange étant tel que la proportion de bétaïne représente cinq fois la proportion d’extrait d’Echinacea purpurea et tel que la proportion de bétaine représente deux fois la proportion d’extrait de Curcuma longa, les proportions étant exprimées en masse par rapport à la masse du prémélange.
Plus précisément, la solution interne est composée de :
- 25% de bétaïne HCl 95%,
- 5% d’extrait d’Echinacea purpurea,
- 12,5% d’extrait de Curcuma longa,
- 1 ,6% d’acide benzoïque
- 1 % d’une matière première comprenant 17% d’extraits aromatiques d’alliacés (ail & oignon)
- 15% de remoulage de blé,
- 19% de sépiolite semoulette,
- 20% de CaC03.
II.2 - Résultats
Performances estimées à 84 jours :
[Tableau 7]
Figure imgf000027_0001
A 84 jours, on observe, pour le groupe Essai, un poids vif supérieurs de +120g, une augmentation du GMQ de +1 ,43g/j, combinée à une consommation accrue d’aliment de +440g, par rapport au groupe Témoin.
L’IC est dégradé de 0,038pts, mais l’IC corrigé à poids constant sélectionneur (2,2kg) est amélioré de 0,13pts par rapport au groupe Témoin.
Sur toute la période de l’essai, on observe aucune différence notable d’évolution du poids des poulets tout venants.
On observe des niveaux de consommation d’eau (Fig. 10) équivalents pour les 2 groupes sur les périodes démarrage (avant 25j) et finition (après 50j)). Les consommations d’eau du groupe Essai sont un peu plus basses que celles du groupe Témoin sur la phase intermédiaire (entre 25 et 50j).
Ceci peut traduire une santé digestive au moins aussi bonne, voire meilleure pour le groupe Essai par rapport au groupe Témoin, une augmentation de la consommation d’eau pouvant être le signe d’un problème digestif.
III - Score lésionnel - Indice de Reid
A 32j, 5 animaux par lot sont autopsiés pour une évaluation du score lésionnel intestinal. Les lésions dues à Eimeria sont localisées et notées selon leur intensité, de 0 (normal) à 4 (coccidiose sévère), selon la grille Johnson et Reid (1970). La notation est effectuée sur E. Acervulina, E. Maxima, E. Tenella et sur E. Necatrix.
A 32 j (Fig. 11 ) :
- Pas de différence sur le score lésionnel entre les 2 groupes Témoin (A) et Essai (B) pour E. Acervulina (1 ) et E. Tenella (4) ; - Score lésionnel légèrement plus bas pour le groupe Essai pour E. Maxima (2) et E. Necatrix (3).
IV - Conclusions
Avec l’ajout de la Solution Interne via l’aliment, sont obtenus des résultats similaires à ceux obtenus grâce à la vaccination, en termes de performances techniques et de lésions coccidiennes intestinales.
EXEMPLE 4
I - PROBLEMATIQUE
L’objectif de cet essai est de comparer l’impact d’une composition selon l’invention apportée par l’aliment retrait à partir de 28j d’âge sur des poulets standards non vaccinés, par rapport à un programme anticoccidien classiquement utilisé en élevage de volailles, pour lutter contre la perte de performances de croissance et les lésions intestinales des poulets, liées notamment à la contamination par les coccidies.
Cet essai est un essai dit de masse, réalisé sur 22 lots Témoin et 19 lots Essai, répartis dans 29 élevages différents (10 élevages disposent d’un bâtiment Témoin et Essai). Au total, cela représente 493 612 poulets Témoin et 443 344 poulets Essai (en moyenne 22 853 poulets abattus par lot). Tous les animaux sont des poulets à croissance rapide de souche Ross.
II - DISPOSITIF EXPERIMENTAL
Le programme alimentaire ainsi que les niveaux nutritionnels sont les mêmes pour les 2 traitements, qui se différencient comme suit :
- les animaux des lots Témoin, non vaccinés, reçoivent un programme anticoccidien tout au long de l’essai (narasin/nicarbanazine à 100 ppm de 0 à 27 jours, puis narasin à 70 ppm de 27 jours à l’abattage) ;
- les animaux des lots Essai, non vaccinés, reçoivent un programme anticoccidien de 0 à 27 jours (narasin/nicarbanzine à 100 ppm) puis, de 28j à l’abattage, un aliment retrait sans anticoccidien, incorporant une solution interne à 2kg/tonne.
La solution interne est une des compositions selon l’invention et comprend le prémélange susmentionné constitué essentiellement de bétaïne, d’extrait dEchinacea purpurea et d’extrait de Curcuma longa, ledit prémélange étant tel que la proportion de bétaïne représente cinq fois la proportion d’extrait d’Echinacea purpurea et tel que la proportion de bétaine représente deux fois la proportion d’extrait de Curcuma longa, les proportions étant exprimées en masse par rapport à la masse du prémélange.
Plus précisément, la solution interne est composée de :
- 25% de bétaïne HCl 95%,
- 5% d’extrait d’Echinacea purpurea,
- 12,5% d’extrait de Curcuma longa, - 1 ,6% d’acide benzoïque
- 1 % d’une matière première comprenant 17% d’extraits aromatiques d’alliacés (ail & oignon)
- 15% de remoulage de blé,
- 19% de sépiolite semoulette,
- 20% de CaC03.
III. - Résultats
[Tableau 8]
Figure imgf000029_0001
A 35 jours, on observe :
- un poids légèrement réduit (-61 g), sans modification de l’indice technique, d’où une dégradation numérique de 0.027 points de l’indice corrigé. Ces différences ne sont cependant pas significatives ;
- des % mortalité et saisies améliorés numériquement pour les animaux des lots Essai.
IV - Conclusions
Avec l’ajout de la Solution Interne via l’aliment retrait, sont obtenus des résultats similaires à ceux obtenus grâce au programme complet anticoccidien classique, en termes de performances techniques. On notera que la Solution Interne permet une bonne maîtrise de la mortalité en élevage et des saisies à l’abattoir.
L'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation présentés et d'autres modes de réalisation apparaîtront clairement à l'homme du métier.
EXEMPLE 5
I - PROBLEMATIQUE
L’objectif de l’essai est de comparer les effets de deux solutions alternatives aux anticoccidiens (une composition selon l’invention, et un produit concurrent),
1- par rapport à une stratégie sans traitement (ni vaccin, ni coccidiostatiques) d’une part, et
2- par rapport à une stratégie de traitement avec un programme anticoccidien classiquement utilisé,
sur les performances de croissance et la santé digestive de poulets de chair, élevées en parcs dans un élevage sur le terrain.
Il - DISPOSITIF EXPERIMENTAL ET MISE EN LOT
L’essai a été réalisé chez un éleveur de poulets de chair. 32 parquets de 2.5 m2 ont été installés. 1088 poulets mâles Ross 308 ont été allotés au jour 0, à raison de 34 poulets par parquet, répartis en 4 groupes de 8 parquets, soit 272 poulets par groupe.
La mise en lot a été faite par pesée collective des animaux de chaque parquet, de façon à obtenir des poids moyens par parquet proches à la mise en place.
Les poulets ont été élevés sur litière paille au démarrage, avec repaillage en menue paille à 21 j et 30j. Chaque parquet a été paillé avec un tiers de litière du lot précédent afin d’augmenter la pression coccidienne (le temps du vide sanitaire, stockage de la paille au frais dans un lieu ventilé, et contrôle du niveau de fermentation 2 fois par semaine).
Tout a été techniquement mis en oeuvre pour éviter les contaminations entre les parquets.
Les groupes suivants ont été testés :
1 : Lot témoin négatif sans programme anticoccidien
2 : Lot témoin positif, avec programme anticoccidien en phases de démarrage, de croissance et de finition : narasin/nicarbanazine à 0,35% de 0 à 20 jours, puis narasin à 0.2% de 21 à 35 jours. L’aliment lourd (de 35j à 42j) est un aliment blanc, sans ajout d’anticoccidien ;
3 : Lot sans anticoccidien + produit concurrent apporté à 0,5 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge, conformément au mode d’emploi recommandé par le fournisseur ;
4 : Lot sans anticoccidien + solution interne apportée à 2 kg/T d’aliment de 0 à 42 jours d’âge.
Le produit concurrent est composé dans cet essai de :
- 40% d’un prémélange d’additifs naturels pour l’alimentation animale, riche en saponines stéroïdiques, extraits de Yucca schidifera et de Trigonella foenum-graecum,
- 0,15% d’acide propionique,
- 2,15% d’acide sorbique,
- 52% de sépiolite
- 5,7% de silice.
La solution interne est composée dans cet essai de :
- 12,5% d’extrait de Curcuma longa,
- 5% d’extrait de Echinacea purpurea,
- 20% de bétaïne anhydre,
- 1 % d’une matière première comprenant 17% d’extraits aromatiques d’alliacés (ail & oignon)
- 19% de sepiolite semoulette,
- 42,5% de CaCo3.
Le programme alimentaire était le même pour les 4 groupes. L’eau et l’aliment ont été distribués ad libitum. Les aliments ont été formulés de façon à couvrir les besoins nutritionnels des poulets de chair. Sur chaque période d’élevage, les aliments étaient identiques, les solutions testées ont été apportées via des prémélanges sur support blé broyé, apportés en substitution du blé selon les taux d’incorporation précisés ci-dessus.
Les animaux ont été abattus à 42 jours d’âge.
III - RESULTATS ET CONCLUSIONS
Il 1.1 - Mesures de performance :
Une pesée collective de chacun des 32 parquets a été réalisée à la mise en place, à chaque changement alimentaire (12, 21 et 35 jours) et à l’abattage (42 jours). Le poids total obtenu par parquet est divisé par le nombre d’individus présents à l’âge de la pesée, ce qui permet d’obtenir un poids moyen individuel par parquet. La moyenne des poids moyens individuels pour les 8 parquets d’un même groupe permet d’obtenir le poids moyen individuel par groupe.
Les résultats sont présentés à la figure 12.
A 10 jours, le poids des animaux recevant la solution interne et la solution concurrente est supérieure aux animaux témoins négatifs et positifs.
A partir de 21 jours,
- le programme anticoccidien (lot 2 : témoin positif) s’accompagne de poids supérieurs au témoin négatif, ce qui permet de valider le modèle de test utilisé.
- la solution concurrente permet d’obtenir des poids équivalents au témoin positif. - seule la solution interne permet l’obtention de poids supérieurs au témoin positif, ainsi qu’à la solution concurrente.
A l’abattage, les animaux du lot 4 : solution interne ont un poids moyen de près de 2% plus élevés que ceux du lot 2 : témoin positif.
III.2 - Mesures de la pression coccidienne :
A 21 jours, un bilan HTS a été réalisé sur 2 animaux par parquet et par lot, soit 16 poulets par lot, les poulets étant sélectionnés visuellement dans le poids moyen du parquet.
Un bilan HTS (Health Tracking System) est un diagnostic complet de l’état de santé des poulets, développé par la société Elanco (Eli Lilly and company), inspiré notamment de la méthode de référence de Johnson and Reid (1970) pour l’examen parasitaire. Il est pratiqué par examen approfondi des poules : examens parasitaire, abdominal, respiratoire, locomoteur et de la carcasse. Des notations de type absence / présence (0 ou 1 ) ou sur des échelles de gravité (de 0 à 3 ou de 0 à 4 selon le critère) sont réalisées notamment sur les critères suivants :
- Examen parasitaire :
o de 0 à 4 (0 : pas de lésion - 4 : lésion grave) : lésions provoquées par Eimeria acervulina, Eimeria maxima (observation macroscopique et microscopique à l’aide d’un microscope), Eimeria tenella, Eimeria brunetti, Eimeria necatrix ;
o de 0 à 1 (0 : absence - 1 : présence) : ténias, ascaris :
- Examen abdominal :
o de 0 à 3 (0 : absence - 3 : important) : érosion du gésier, proventriculite, hémorragie intestinale, atrophie de la bourse de Fabricius ;
o de 0 à 1 (0 : absence - 1 : présence) : ingestion de litière, ascite, mucus, aliments mal digérés, débris cellulaires, contenus aqueux, entérite nécrotique, tonicité intestinale, intestin mince, intestin épais, bile excessive ;
- Examen respiratoire : trachéite de 0 à 3, aérosacculite de 0 à 4 ;
- Examen locomoteur : décollement de cartilage (0 ou 1 ), nécrose de tête fémorale (0 ou 1 ), dyschondroplasie tibiale (0 à 3) ;
- Examen de la carcasse : poids des animaux, pododermatites de 0 (absence) à 2 lésion sévère), griffures (0 ou 1 ), inflammation (0 ou 1 ).
En outre, les résultats de l’examen parasitaire relatif aux lésions provoquées par Eimeria sont présentés à la Figure 13.
La Figure 13 montre une réduction de la prévalence et de la gravité des lésions avec le lot 2 : témoin positif par rapport au lot 1 : témoin négatif : augmentation du nombre de notes 0, réduction des notes 1 et 2, absence de note 3. Cette observation confirme l’efficacité du programme anticoccidien dans le contexte de l’essai.
Le lot 3 : produit concurrent montre une dégradation de l’état lésionnel lié à Eimeria maxima : augmentation des scores 2 et 3, apparition de notes 4.
Le lot 4 : solution interne permet un état lésionnel intermédiaire entre le lot 1 : témoin négatif et le lot 2 : témoin positif, avec notamment une augmentation des notes 0, une réduction des notes 2 et l’absence de note 3.
Les autres paramètres mesurés lors du bilan HTS ne montrent pas de différence notable entre les groupes.
A 21 jours, une notation de score lésionnel par la méthode Gussem a été réalisée sur 2 animaux par parquet et par lot, soit 16 poulets par lot, les poulets étant sélectionnés visuellement dans le poids moyen du parquet.
La méthode décrite par De Gussem (De Gussem, M. (2010). Macroscopie scoring System for bacterial enteritis in broiler chickens and turkeys. In WVPA Meeting 01/04/2010. Merelbeke, Belgium) est une méthode de score macroscopique de la dysbiose chez le poulet et la dinde. Basée sur l’observation du tractus digestif, elle recense un certain nombre de paramètres objectifs liés à la santé intestinale dans la partie crâniale et caudale du tube digestif (e.g. aspect et couleur du contenu intestinal) ainsi que des paramètres généraux (gonflement des intestins).
Les résultats sont montrés à la Figure 14.
La Figure 14 donne la note synthétique (de 0 à 10), obtenue par somme des notes sur les 10 critères liés à l’état de santé intestinale des animaux pris en compte par la méthode de Gussem et notés 0 : absence ou 1 : présence, à savoir :
- Observations sur la partie crâniale du tube digestif :
o Inflammation (0 ou 1 )
o Flaccidité (0 ou 1 )
o Contenu anormal (0 ou 1 )
o Fragilité (0 ou 1 )
- Observations sur la partie caudale du tube digestif :
o Inflammation (0 ou 1 )
o Flaccidité (0 ou 1 )
o Contenu anormal (0 ou 1 )
o Fragilité (0 ou 1 )
- Observations sur le tube digestif global :
o Ballonnement (0 ou 1 )
o Aliments non digérés (0 ou 1 )
La Figure 14 montre une réduction de la gravité des problèmes digestifs avec le lot 2 : témoin positif par rapport au lot 1 : témoin négatif : réduction des notes 3 au profit de notes 2. On note néanmoins la disparition des notes 0 (absence de problème intestinal). Cette observation confirme l’efficacité du programme anticoccidien dans le contexte de l’essai.
Le lot 3 : produit concurrent montre également une réduction des notes 3 au profit de notes plus favorables (notes 1 et 2) ; néanmoins, on relève l’apparition de notes 4, correspondant à des états de santé intestinale plus dégradé.
Le lot 4 : solution interne permet un état de santé intestinale entre le lot 1 et le lot 2, avec notamment un maintien des notes 0, une réduction des notes 3 au profit de de notes plus favorables (notes 1 et 2), absence d’états plus dégradés (notes 4 ou 5).
Ces résultats sont statistiquement significatif à 10% (p=0,053) au test du Chi2.
IV - Conclusions
La composition selon l’invention a permis, dans cet essai réalisé en conditions terrain chez un éleveur :
- d’atteindre des performances de croissance améliorées par rapport à une absence de traitement, à un traitement anticoccidien classique et à l’apport d’un produit concurrent utilisé en tant qu’alternatif aux anticoccidiens ;
- de maintenir un bon niveau de santé digestive comparable à celui obtenu via un traitement anticoccidien, et un état de santé digestive amélioré par rapport à l’absence de traitement ou l’apport d’un produit concurrent, riche en saponines stéroïdiques et en extraits de Yucca schidifera et de Trigonella foenum-graecum.
EXEMPLE 6
I - PROBLEMATIQUE
Des essais ont été réalisés en élevage sur le terrain afin d’observer les effets d’une composition selon l’invention en tant que solution alternative aux anticoccidiens sur la pression coccidienne en élevage de lapins, et de comparer ces effets à ceux d’un traitement anticoccidien classiquement utilisé sur le marché (coccidiostatique de synthèse).
II - MATERIEL ET METHODE
Deux essais ont été réalisés chez deux éleveurs de lapins, sur des lots dits contemporains, c’est-à-dire des lots d’animaux élevés de manière simultanée dans des conditions d’élevage strictement identiques (même bâtiment, même mode de distribution de l’eau et de l’aliment) afin de pouvoir isoler au mieux le simple effet lié à l’aliment sur les performances zootechniques obtenues à l’issue de ces deux essais.
Dans chacun de ces essais, les animaux étaient répartis en deux lots, un lot témoin et un lot essai, d’un même nombre de cages chacun, chaque cage ayant une densité identique (8 et 6 lapins / cage respectivement pour les essais 1 et 2). Les rangées de cages de chaque lot étaient disposées côte-à-côte dans les bâtiments afin d’éviter tout biais pouvant être lié à un défaut de ventilation d’une partie des salles (atmosphère identique entre les deux lots).
Les lapins sont des lapins issus de la génétique Hycole. Les lapins sont sevrés à 35 jours.
Pour l’essai n°1 , les groupes suivants ont été testés :
- Lot 1 : lot témoin négatif sans traitement anticoccidien ni solution alternative, de 25j à 72j.
- Lot 2 : lot essai sans traitement anticoccidien + composition selon l’invention à 2 kg/T, de 25 à 49j.
A partir de 50j et jusqu’à l’abattage (72j), les 2 lots, témoins positif et essai, ont reçu un aliment dit de « finition » identique, cet aliment étant dépourvu de composition selon l’invention.
La mise en lot des lapereaux a été réalisée, à 25J, de manière à obtenir des poids moyens de lapin identiques entre les deux lots. Le rang de portée moyen des lapines ayant fait naître les lapins utilisés pour l’essai étaient également identiques (les lapereaux issus de mères primipares et de mères issues de noyaux Grand-Parentaux n’ont pas été gardés).
Pour l’essai n°2 , les groupes suivants ont été testés :
- Lot 1 : lot témoin positif avec traitement anticoccidien.
La robénidine est un coccidiostatique de synthèse. Il est ajouté via un prémélange, à 5kg/T équivalent à 66 ppm dans l’aliment maternité, de 7j avant la mise-bas (MB) jusqu’à MB+24j. Puis un aliment sans supplémentation est distribué de MB+25j à MB+49j.
- Lot 2 : lot essai sans traitement anticoccidien + composition selon l’invention à 2kg/T de la MB+7j à MB+24j, puis à 1 kg/T de MB+25j à MB+49j.
- Pour les deux lots, un aliment finition sans composition selon l’invention est distribué de 50j à l’abattage (72j).
Après mise-bas, un équilibrage est réalisé intra-lot afin des constituer des portées homogènes juste après la mise-bas (même nombre de lapereaux sous la mère, de poids moyens identiques), aucun lapereau ne passe d’un lot dans un autre, ni ne sort ou ne rentre dans l’essai. Le nombre de lapereaux laissés sous la mère était identique entre les deux lots (9 sous les secondipares, entre 10 et 11 sous les lapines de 3e rang de portée et plus).
La composition selon l’invention est composée dans ces deux essais de :
- 3% d’un mélange comprenant des acides organiques, dont 19% en masse d’acide fumarique, 11 % en masse d'acide sorbique, 9% en masse d’acide DL-malique et 9% en masse d’acide citrique,
- 1 % d’une matière première comprenant pour 30% d’extraits d’ail ( Allium Sativum )
- 12,5% d’extrait de Curcuma longa,
- 5% d’extrait de Echinacea purpurea,
- 25% de Bétaïne HCL 95%,
- 19% de sepiolite semoulette,
- 15% de remoulage de blé,
- 19,5% de CaCû3.
Pour chaque lot, un contrôle de la contamination de la litière avec dénombrement d’oocystes est réalisé selon le protocole d’échantillonnage suivant :
- Des sacs sont installés sous les cages, leur contenu est collecté pendant 3 jours ;
- Le résultat de la collecte est ensuite mélangé entre les cages d’un même lot et ensachée en sachet d’environ 300-400 gr pour analyse.
Ce comptage est réalisé, pour différentes espèces d’Eimeria (E. media, E. irresidua, et/ou E. vejgovskyi) :
- pour l’essai 1 , à 44j, sur 32 cages / lot soit 256 lapins / lot (8 lapins par cage) ; - pour l’essai 2, à 10j, 42j et 49j, sur 33 cages / lot soit 198 lapins / lot (6 lapins par cage).
III - RESULTATS ET CONCLUSION :
Les résultats du dénombrement d’oocystes sont exprimés en nombre d’oocystes par gramme de fèces prélevées.
[Tableau 9]
Figure imgf000036_0001
Les résul :ats ci-dessus montrent une moindre excrétion d’oocystes par les animaux des lots essai que des lots témoins négatif ou positif.
La Figure 15 quant à elle illustre l’évolution dans le temps, à 10j, 42j et 49j, de la pression coccidienne dans les lots témoins positif et essai de l’essai 2 en ce qui concerne
Eimeria vejdovskyi.
Ainsi,
- malgré une excrétion comparable à 10j (200 oocystes / g de fèces pour les 2 lots), le nombre d’E. vejdoskyi reste en-dessous du seuil d’alerte (trait noir) pour le lot essai jusqu’à la fin de l’essai, contrairement au lot témoin positif pour lequel ce seuil est dépassé dès 42j.
- le nombre d’oocystes excrétés par les animaux progresse de +10% entre 42j et 49j pour le lot essai, contre +154% pour le lot témoin positif.
Conclusion :
L’utilisation de la composition selon l’invention en élevage de lapins permet de mieux maîtriser la pression coccidienne par rapport à l’absence de traitement anticoccidien (témoin négatif) ou en comparaison à un traitement anticoccidien classiquement utilisé en élevage (témoin positif) et ce,
- quelle que soit l’espèce d’Eimeria parmi E. media, E. irresidua, et/ou E. vejgovskyi, - et sur toute la durée de l’élevage. EXEMPLE 7
Un essai complémentaire a été réalisé chez un 3eme éleveur de lapins, sur deux lots successifs, de 3000 animaux chacun.
Tous les animaux ont été élevés dans un même bâtiment, sans procédure de désinfection particulière entre les 2 lots (c’est-à-dire entre le jour de retrait des lapins du lot 1 et le jour d’arrivée des lapins du lot 2).
Le 1er lot d’animaux n’a reçu aucun traitement anticoccidien ni solution alternative.
Le 2nd lot d’animaux n’a reçu aucun traitement anticoccidien + composition selon l’invention de l’exemple 6 à 2kg/T, de la mise-bas à 49j.
Un comptage des oocystes dans les fèces a été réalisé sur un échantillon d’animaux représentatif de chacun des lots à 49J.
Résultats :
Les résultats sont montrés en figure 16 :
Eimeria magna : diminution numérique de 67% entre le lot témoin négatif et le lot essai, du nombre d’oocystes par gramme de fèces prélevé.
Eimeria media : diminution numérique de 50% entre le lot témoin négatif et le lot essai, du nombre d’oocystes par gramme de fèces prélevé.
Eimeria irresidua : Différence numérique non significative entre le lot témoin négatif et le lot essai, du nombre d’oocystes par gramme de fèces prélevé.
- Maintien de E. media et E. irresidua sous le seuil d’alerte que ce soit pour le lot témoin négatif ou le lot essai.
Diminution du nombre d’oocystes d’E. magna jusqu’à une valeur proche du seuil d’alerte pour le lot essai.
Conclusion :
Cet essai confirme que l’apport de la solution selon l’invention, de la mise bas à l’abattage, permet une diminution de l’excrétion d’oocystes chez les lapins d’élevage, signe d’une diminution de la pression coccidienne.
EXEMPLE 8
I - PROBLEMATIQUE
L’objectif de l’essai est d’évaluer in vitro l’activité antimicrobienne des composés d’intérêts de la composition selon l’invention, seuls ou en mélange, vis-à-vis de micro- organismes pathogènes fréquents chez différentes espèces animales.
II - PROTOCOLE
Les micro-organismes utilisés pour les tests in vitro proviennent d’environnement d’élevages ou ont été isolés à partir d’animaux de différentes espèces (volailles, porc, lapin, aquaculture).
Ces micro-organismes sont revivifiés dans des conditions optimales à leur croissance (milieu de culture, oxygénation, temps, température d’incubation).
Le tableau 10 présente les micro-organismes testés, leur origine et leurs conditions optimales de culture.
[Tableau 10]
Figure imgf000038_0001
Après revivification, des dilutions dans les milieux de culture optimaux sont réalisées afin d’obtenir un inoculum de 6 +/- 0.5 log UFC/mL. L’inoculum est vérifié par microméthode de dénombrement (Baron F., Cochet MF., Alain W., Grosset N., Maréchal MN., Gonnet F., Jan S., Gautier M., 2006. Rapid and cost-effective method for microorganism énumération based on miniaturization of the conventional plate-counting technique. Lait 86, 251-257). L’inoculum est ensuite mis en contact de la solution à tester à différentes concentrations en composés d’intérêts. Les composés testés sont YEchinacea purpurea, du Curcuma longa et la bétaïne. Ces composés sont testés : - seuls : Bétaïne ou Curcuma longa ou Echinacea purpurea
- ou en mélange dans des proportions selon l’invention :
o Bétaïne + Curcuma longa
o Bétaïne + Echinacea purpurea
o Curcuma longa + Echinacea purpurea
o Bétaïne + Curcuma longa + Echinacea purpurea et notamment un mélange de Bétaïne + Curcuma longa + Echinacea purpurea dans des proportions respectives 25/12.5/5.
Les gammes de concentrations en composés actifs utilisées pour ces deux méthodologies vont de 4000 ppm à 32 ppm.
Les essais de mise en évidence des activités antimicrobiennes sont réalisés par la méthode des microdilutions en milieu liquide pour les souches appartenant aux genres Enterococcus, Streptococcus, Staphylococcus, Salmonella, Escherichia, Vibrio, Tenacibaculum, Aeromonas et de Candida.
Pour la souche de Clostridium perfringens, les essais de mise en évidence d’activité antibactérienne sont réalisés sur milieu gélosé en double couches.
Méthode des microdilutions : la préparation des différentes concentrations en composés est réalisée par dilutions successives dans un tampon de dilution (Tryptone sel : Tryptone 1 ,0 g/L ; Chlorure de sodium 8,5 g/L, pH 7,0) dans des microplaques 96 puits. Cent pL d’inoculum sont ajoutés dans les puits contenant 100pL de chacune des solutions à tester. La microplaque est ensuite incubée pendant 24h à 25°C pour les souches issues de l’aquaculture ou à 37°C pour les souches issues des autres espèces animales.
Méthode double couches : la préparation des différentes concentrations en composés est réalisée par dilution successive dans le milieu de culture TSC (Gélose tryptose, sulfite, cyclosérine ; VWR) en surfusion (45°C-50°C) dans des tubes de 15 mL. Après introduction et prise en masse de 12mL de chaque dilution dans une boîte de pétri, un dépôt d’un volume d’inoculum de 5pL est réalisé à la surface du milieu solidifié. Après 10 min de séchage du dépôt, 5 mL de milieu en surfusion est ajouté. Les boîtes de pétri sont alors placées dans une jarre et incubées à 37°C pendant 24h. L’anaérobiose est réalisée par ajout dans la jarre d’un Anaérocult® A (VWR) préalablement humidifié.
La concentration minimale inhibitrice (CMI) est déterminée par mise en évidence d’une croissance bactérienne. La CMI correspond à la plus faible concentration en composés ou aucune croissance de micro-organisme est visible. Ce qui se manifeste par l’absence de trouble du milieu de culture en microplaques (Méthode des microdilutions) ou l’absence de colonies visibles sur milieu gélosé (Méthode double couches).

Claims

Revendications
1. Composition comprenant
de 20 à 60% de bétaïne,
de 5 à 20% d’extrait d’Echinacea purpurea, et
de 10 à 30% d’extrait de Curcuma longa,
les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
2. Composition selon la revendication 1 , comprenant en outre de 1 ,5 à 15% d’acide organique ou d’un mélange d’acides organiques, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
3. Composition selon la revendication 2, où ledit acide organique est choisi parmi l’acide benzoïque, l’acide fumarique, l'acide sorbique, l’acide DL-malique et l’acide citrique, ou un mélange de ceux-ci.
4. Composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, comprenant en outre jusqu’à 5% d’un produit comprenant un extrait d’un ou plusieurs alliacés, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition.
5. Composition selon l’une quelconque des revendications 1 à 4 en tant que médicament.
6. Composition selon l’une quelconque des revendications précédentes, pour son utilisation dans le cadre du traitement ou la prévention des dérèglements de la santé digestive des animaux.
7. Compositions pour son utilisation selon la revendication 6, où lesdits dérèglements de la santé digestive sont des infections coccidiennes.
8. Composition alimentaire destinée à la nutrition animale comprenant de 0,05 à 0,6 % de composition telle que définie dans l’une quelconque des revendications 1 à 4, les pourcentages étant exprimés en masse par rapport à la masse totale de la composition alimentaire.
9. Prémélange constitué essentiellement de bétaïne, d’extrait d’Echinacea purpurea et d’extrait de Curcuma longa, ledit prémélange étant tel que la proportion de bétaïne représente cinq fois la proportion d’extrait d’Echinacea purpurea et tel que la proportion de bétaine représente deux fois la proportion d’extrait de Curcuma longa, les proportions étant exprimées en masse par rapport à la masse du prémélange.
PCT/EP2019/067646 2018-06-30 2019-07-01 Composition antiparasitaire comprenant de la βεταϊνε et des extraits d'echinacea purpurea et de curcuma longa Ceased WO2020002716A1 (fr)

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