WO2021253105A1

WO2021253105A1 - Composição agrícola para o tratamento e prevenção de doenças e distúrbios bacterianos

Info

Publication number: WO2021253105A1
Application number: PCT/BR2021/050257
Authority: WO
Inventors: Alessandra Alves DE SOUZA DELLA COLETTA; Helvecio DELLA COLETTA FILHO; Marco Aurelio TAKITA; Marcos Antonio Machado; Lígia Segatto MURANAKA; Simone Cristina PICCHI
Original assignee: Ciacamp Desenvolvimento E Inovacao Tecnologica Ltda; Instituto Agronomico Iac; Amazon Agrosciences Ltda
Current assignee: Ciacamp Desenvolvimento E Inovacao Tecnologica Ltda; Instituto Agronomico Iac; Amazon Agrosciences Ltda
Priority date: 2020-06-17
Filing date: 2021-06-14
Publication date: 2021-12-23
Anticipated expiration: 2022-12-17
Also published as: EP4169380A1; CN116347982A; EP4169380A4; MX2022016399A; US20210392886A1; BR112022025992A2

Abstract

A divulgação é fornecida para composições agrícolas para o rompimento eficaz de biofilmes bacterianos, para o tratamento e prevenção de doenças e distúrbios bacterianos. A presente invenção também fornece métodos para o tratamento e prevenção em uma planta ou parte da planta, compreendendo a aplicação à planta ou parte da planta da referida composição agrícola.

Description

“COMPOSIÇÃO AGRÍCOLA PARA O TRATAMENTO E PREVENÇÃO DE DOENÇAS E DISTÚRBIOS BACTERIANOS”

CAMPO DE INVENÇÃO

[001] A presente divulgação fornece composições agrícolas e métodos para o tratamento eficaz de doenças e distúrbios bacterianos, rompendo colónias bacterianas, reduzindo o estresse oxidativo e capturando os radicais livres. Mais especificamente, a presente divulgação se refere às composições indutoras de defesa de plantas e ao seu uso para melhorar certos aspectos da planta, incluindo o tratamento de doenças de plantas, melhorando a capacidade das plantas de lutarem contra a doença, reduzindo os sintomas da doença, controlando e tratando doenças bacterianas. As doenças bacterianas podem ser doença de Huanglongbing (doravante HLB) ou greening, doença de clorose variegada dos citros (doravante CVC) e cancro cítrico (doravante CCK).

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] A citricultura é uma cultura economicamente importante para pelo menos 140 países e o Departamento de Agricultura dos Estados Unidos estimou que a produção global de laranja durante 2018/2019 foi de 47,5 milhões de toneladas.

[003] No entanto, a citricultura é constantemente ameaçada por patógenos que causam perdas consideráveis e graves impactos económicos.

[004] Entre as principais doenças dos citros, estão o Huanglongbing (HLB), a clorose variegada dos citros (CVC) e o cancro cítrico (CCK), causado por membros de espécies bacterianas. As doenças causadas por bactérias são responsáveis por 20% das perdas agrícolas e, por isso, existe uma grande necessidade de produtos e tecnologias inovadoras para controlar essas doenças e reduzir as perdas.

[005] Portanto, doenças que afetam os pomares de citros, como a clorose variegada dos citros (CVC), causada por Xylella fastidiosa (Bové & Ayres, 2007), o cancro cítrico causado por Xanthomonas citrí subsp. citrí (Brunings & Gabriel, 2003) e Huanglongbing (HLB) ou greening, causado pela bactéria Candidatus Liberíbacter (Coletta-Filho, et al. 2004) têm sido o grande desafio para o setor citrícola, que necessita de produtos eficazes para o controle dessas doenças.

[006] Huanglongbing (HLB), comumente conhecida como doença "greening" dos citros, é causada por uma infecção bacteriana parcialmente sistémica de árvores cítricas e outras espécies agrícolas, levando à descoloração da folha e afetando a saúde da árvore, bem como o desenvolvimento, amadurecimento e qualidade das frutos cítricos e suco.

[007] Atualmente, Huanglongbing (HLB) é a doença cítrica mais grave, que afeta a longevidade e a produtividade dos pomares de citros, impactando fortemente a citricultura mundial. Os principais efeitos dessa doença são a diminuição do fluxo de nutrientes, fazendo com que as árvores afetadas não atinjam a produção, e as maduras, em produção, sofrerão uma grande queda de frutos prematuros e definharão com o tempo. A doença prejudica a capacidade da árvore madura de produzir adequadamente resultando em frutos menores, com deformidades e, eventualmente, sabor amargo, o que compromete o padrão de qualidade da produção.

[008] O psilídeo leva a bactéria para o seu corpo quando se alimenta de plantas infectadas por bactérias. A doença se espalha quando um psilídeo portador de bactérias voa para uma planta saudável e a injeta enquanto se alimenta.

[009] Está bem estabelecido que Huanglongbing está associado à presença de bactérias gram-negativas do gênero Candidatus Liberibacter (CL).

[0010] A estratégia atual de combate ao HLB é o controle químico dos psilídeos, associado à localização e remoção de árvores infectadas. Sua eficácia é limitada e, até o momento, nenhuma medida convencional forneceu supressão consistente e eficaz da doença.

[0011] Por sua rápida disseminação e severidade, Huanglongbing (HLB), é sem dúvida a doença cítrica que mais tem desafiado o setor (produção, extensão e pesquisa) no Estado de São Paulo, que faz parte do cinturão citrícola brasileiro, um dos a maior região produtora de citros do mundo. O principal agente causal do HLB na citricultura paulista é a bactéria Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas), que se caracteriza por ser intracelular com ocorrência restrita a vasos crivados com floema de plantas hospedeiras e não é cultivável rotineiramente em laboratório, até o presente momento (Machado et al., 2010).

[0012] O HLB é considerado a doença cítrica mais devastadora do mundo. De acordo com o Departamento de Agricultura (USDA) do Instituto Nacional da Alimentação e Agricultura (NIFA) dos Estados Unidos, o impacto económico do greening é medido em bilhões. Desde 2005, o HLB afetou a citricultura da Flórida, resultando em um declínio de 75% na citricultura.

[0013] O Departamento de Agricultura dos Estados Unidos (USDA) também afirma que a produção de laranja no estado da Flórida diminuiu mais rapidamente nos últimos cinco anos devido ao FILB, que dizimou os pomares e aumentou os custos de sua manutenção. Em 2000, os pomares de citros ocupavam 394 mil hectares e, atualmente, os pomares ocupam cerca de 110 mil hectares. Em termos de produção média de frutas, em 2012 o estado colheu cerca de 175 milhões de caixas. Em 2018, a colheita ficou entre 75 e 80 milhões de caixas. Além disso, outras importantes áreas produtoras de citros lidam com o mesmo problema. Por exemplo, segundo dados da Coordenação de Defesa Agropecuária (CDA) do Brasil, cerca de 50 milhões de plantas já foram erradicadas devido ao FILB desde o início dos levantamentos em 2007 (CDA, 2016), ou seja, 26% das 191 ,69 milhões de árvores cítricas cultivadas no Estado de São Paulo. Esse tipo de manejo tem causado impactos económicos, além de ambientais, fazendo com que muitos citricultores abandonem a atividade ou mesmo a erradicação de plantas infectadas.

[0014] A clorose variegada dos citros (CVC) é uma doença que afeta os pomares de laranja doce e pode ser encontrada em todos os estados produtores de citros do Brasil (Coleta-Filho & de Souza, 2014). Embora esta subespécie ainda não tenha sido encontrada nos Estados Unidos, outras subespécies do agente causal estão presentes no país. Alguns hospedeiros são conhecidos, por exemplo, porque outras subespécies desta bactéria causam a doença de Pierce em uvas e outras doenças do tipo queimadura em plantas como café e amêndoa.

[0015] O cancro cítrico (CCK) causa lesões nas folhas e frutos. A bactéria entra nas folhas principalmente através dos estômatos e feridas. O manejo do CCK foi baseado na erradicação de árvores e em produtos à base de cobre.

[0016] O controle do CVC é, praticamente, baseado no controle de insetos vetores (cigarrinhas) com repetidas aplicações de inseticidas, enquanto para o FILB, a única alternativa existente é a erradicação de árvores sintomáticas e o controle de inseticida de psilídeos. Estas medidas são limitadas e prejudicam a margem de lucro disponível para os produtores. [0017] Atualmente, grande parte das tecnologias mundiais utilizadas no agronegócio causam danos ao meio ambiente. São moléculas químicas tóxicas cujos resíduos são incorporados aos alimentos, solo e água.

[0018] Portanto, novas abordagens são urgentemente necessárias para melhorar a produção de citros. Assim, existe a necessidade de tratar de maneira eficaz as doenças bacterianas.

SUMARIO DA INVENÇÃO

[0019] A presente divulgação se refere a uma composição agrícola para o tratamento eficaz de doenças e distúrbios bacterianos, rompendo colónias bacterianas, reduzindo o estresse oxidativo e capturando os radicais livres, para tratar e prevenir doenças e distúrbios cítricos.

[0020] A presente divulgação também se refere a um método para o tratamento eficaz de desagregação de colónias bacterianas, redução do estresse oxidativo e captura de radicais livres em uma planta ou parte da planta.

[0021] As composições abrangem composições sólidas e líquidas compreendendo compostos de N-acetil-cisteína, análogos e combinações dos mesmos como um ingrediente ativo, fertilizantes e veículo agriculturalmente aceitável. Opcionalmente, a composição agrícola também pode ter um microbicida, um bacteriófago ou um ativador de defesa vegetal.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0022] As figuras anexas neste documento são usadas para fornecer uma compreensão adicional da presente divulgação. As modalidades ilustrativas e a descrição das mesmas são meramente exemplificativas e não limitam a presente divulgação. Nas figuras que acompanham:

[0023] Figuras 1 : Aborda as plantas que apresentam sintomas de HLB ( greening ) que receberam a composição da presente invenção, em que:

[0024] Figura 1A: Este gráfico apresenta um estudo quantitativo da população bacteriana aos 5 e 7 meses de tratamento com a composição da presente invenção representando a redução da população bacteriana em plantas de laranja. Tratadas por cinco meses e sete meses com a composição da presente invenção em três áreas A1 : área 1 ; A2: área 2; A3: área 3. [0025] Figura 1 B: é um gráfico que mostra a quantificação bacteriana e calosa avaliada em plantas com sintomas de doenças bacterianas e tratadas com a composição da presente invenção de março a dezembro, sendo que março corresponde ao quinto mês de aplicação / tratamento. Média de 10 folhas por avaliação.

[0026] A Figura 1C mostra a redução da calosidade por imagens microscópicas de cortes transversais de pecíolos foliares tratados com a composição da presente invenção de março a dezembro, em que março corresponde ao quinto mês de aplicação / tratamento.

[0027] Figuras 2: Aborda as plantas com cancro cítrico (CCK) que receberam a composição da presente invenção, em que:

[0028] As Figuras 2 (A, B, C) são gráficos que representam a curva de progressão e redução da doença bacteriana (CCK) em plantas tratadas com a composição da presente invenção: resultados baseados em uma média de 90 plantas por tratamento.

[0029] As Figuras 3 (A, B) são um gráfico que representa o número total de frutos colhidos com cancro cítrico (CCK) e, entre eles, aqueles que apresentaram sintoma de doença em plantas tratadas com a composição, em comparação ao tratamento convencional. A: O percentual refere-se à relação entre frutos sintomáticos e frutos totais, por tratamento. B: Peso total de frutos colhidos e peso de frutos colhidos com sintoma da doença, por planta. Média de 18 plantas.

[0030] Figuras 3C. Resultados do tratamento com a composição da presente invenção em plantas com HLB ( greening ), o gráfico mostra a produção de frutos de plantas tratadas com o produto convencional e com a composição da presente invenção.

[0031] Figuras 4. Resulta na redução do estresse oxidativo em plantas com doença de clorose variegada dos citros (CVC), em que:

[0032] A Figura 4A é um gráfico que representa a quantificação de peróxido de hidrogénio em plantas que apresentam CVC tratadas com a composição da presente invenção ou um fertilizante comum / padrão. Barras pretas: referem-se ao início do tratamento e barras cinzas: descrevem os resultados após três meses de tratamento. [0033] A Figura 4B é um gráfico que representa a quantificação da peroxidação lipídica mostrando as concentrações de malondialdeído (MDA) em plantas doentes tratadas com a composição da presente invenção ou outro fertilizante. Barras pretas: referem-se ao início do tratamento e barras cinzas: descrevem os resultados após três meses de tratamento.

[0034] A Figura 4C é um gráfico que representa a atividade da catalase (CAT) em plantas doentes tratadas com a composição da presente invenção ou outro fertilizante. Barras pretas: referem-se ao início do tratamento e barras cinzas: descrevem os resultados após três meses de tratamento.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0035] Os requerentes esclarecem especificamente que quando uma quantidade, concentração ou outro valor ou parâmetro é dado como um intervalo, intervalo preferencial ou uma lista de valores preferenciais superiores e valores preferenciais inferiores, isto deve ser entendido como revelando especificamente todos os intervalos formados a partir de qualquer par de qualquer limite superior da faixa ou valor preferencial e qualquer limite inferior da faixa ou valor preferencial, independentemente de as faixas serem divulgadas separadamente.

[0036] Quando um intervalo de valores numéricos é citado neste documento, a menos que indicado de outra forma, o intervalo se destina a incluir seus pontos finais e todos os números inteiros e frações dentro do intervalo. Não se pretende que o escopo da invenção seja limitado aos valores específicos citados ao definir um valor.

[0037] Deve-se notar ainda que os termos de "incluindo", "compreendendo" ou quaisquer outras variantes dos mesmos pretendem abranger uma inclusão não exclusiva, de modo que um processo, método, mercadoria ou dispositivo compreendendo uma série de elementos não compreende apenas esses elementos, mas também compreende outros elementos que não estão listados, ou compreende ainda elementos que são inerentes ao processo, método, mercadoria ou dispositivo. Quando não há nenhuma restrição adicional, os elementos definidos pela declaração "compreendendo um" não excluem elementos semelhantes adicionais em um processo, método, mercadoria ou dispositivo que compreende os elementos definidos. [0038] O termo modificador "cerca de" deve ser considerado como revelando o intervalo definido pelos valores absolutos dos dois pontos finais.

[0039] Deve ser entendido que certos aspectos da divulgação que são, para clareza, descritos neste documento no contexto de modalidades separadas, também podem ser fornecidos em combinação em uma única modalidade.

[0040] As modalidades nesta descrição são progressivamente descritas, sendo que cada modalidade se concentra nas diferenças das outras, e podem ser mutuamente referenciadas para partes idênticas ou semelhantes das mesmas.

[0041] As modalidades da presente divulgação são meramente exemplificativas e não se destinam a limitar a presente divulgação. Para um versado na técnica, as modalidades divulgadas podem ser modificadas ou alteradas de várias maneiras. Qualquer modificação, substituição equivalente ou melhoria feita dentro do escopo e princípio da presente divulgação deve ser abrangida pelas reivindicações da presente divulgação.

[0042] Os presentes inventores verificaram que a composição e o método divulgados neste documento com foco em pesquisa e desenvolvimento agrícola, desenvolveram produtos à base de N-acetil-cisteína, um análogo de cisteína, amplamente utilizado na saúde humana, devido à sua ação bactericida e antioxidante. Experimentos com essa molécula e os produtos desenvolvidos já foram estudados e validados, com resultados positivos no controle do CVC (causado pela bactéria Xylella fastidiosa), cancro cítrico (causado pela bactéria Xanthomonas citri) e na redução do título bacteriano em plantas infectadas com Candidatus Liberibacter asiaticus (CLas), uma bactéria que causa o HLB ( greening ).

[0043] O primeiro sequenciamento do genoma de uma bactéria fitopatogênica foi obtido e baseado em informações, a bactéria foi entendida e ao se multiplicar, causa a doença, pois bloqueia os vasos da planta formando um biofilme bacteriano (cluster), impedindo assim o fluxo de água e nutrientes da raiz à parte aérea das plantas. A solução, portanto, é desfazer esses biofilmes, desobstruindo os vasos, restaurando o fluxo de seiva nas plantas hospedeiras.

[0044] A presente divulgação fornece composições agrícolas com alta concentração de carbono orgânico, quelatado com aminoácidos, contém macronutrientes na fórmula balanceada para nutrição adequada das plantas. A composição possui em sua formulação aminoácidos especiais que atuam no fortalecimento das plantas, desaglomerando as colónias de bactérias e, assim, promovendo a liberação de seiva. Nesse sentido, a planta infectada é re-nutrida, incluindo um aumento em suas defesas ao ataque de bactérias.

[0045] As composições agrícolas fornecidas pela presente invenção podem diminuir a titulação bacteriana em plantas infectadas com doenças bacterianas, reduzindo os sintomas, mesmo em plantas em estágios avançados de infecção e possibilitando o uso de frutas para processamento de suco, enquanto, para cancro cítrico, mostrou ser uma alternativa ao uso do cobre, evitando a progressão da doença.

[0046] As composições agrícolas fornecidas pela presente invenção consistem em um produto sustentável que reduz a queda prematura da fruta nutre a planta, evita o estresse oxidativo e auxilia no controle de doenças bacterianas.

[0047] Composições agrícolas melhoradas são compreendidas neste documento. Em modalidades particulares, composições agrícolas para o tratamento eficaz de doenças e distúrbios bacterianos, rompendo colónias bacterianas, reduzindo o estresse oxidativo e capturando os radicais livres, compreendendo compostos de N- acetil-cisteína, análogos e combinações dos mesmos como um ingrediente ativo, fertilizantes, excipientes e um veículo agriculturalmente aceitável, um microbicida, um bacteriófago ou um possível ativador de defesa vegetal.

[0048] Em modalidades particulares, os compostos de N-acetil-cisteína, análogos e combinações dos mesmos estão presentes em uma faixa de concentração de 5 a 30% em peso da composição total, os análogos de compostos de N-acetil- cisteína podem ser selecionados a partir de DL-Homocisteína; L-cisteína metil éster; L- cisteína etil éster; N-carbamoil cisteína; N-(20mercaptoisobutiril)-L-cisteína; N-(2- mercaptopropionil)-L-cisteína A; N-(2-mercaptopropionil)-L-cisteína B; N-(3- mercaptopropionil)-L-cisteína; L-cisteína etil éster hidrocloreto; L-cisteína metil hidrocloreto; nacistetelina (um sal de lisina de N-acetilcisteína); N-acetilcisteína (NAC); e S-acetilcisteína (carbocisteína).

[0049] Em modalidades particulares, as composições compreendem compostos de N-acetil-cisteína, análogos e combinações dos mesmos que podem estar entre cerca de 5 a 30% em peso, entre cerca de 2 a 40% em peso de macronutrientes, entre cerca de 13 a 50% em peso de micronutrientes e um veículo aquoso agrícola ou sólido particulado agrícola aceitável.

[0050] O veículo agriculturalmente aceitável pode ser um veículo aquoso ou um veículo sólido em partículas.

[0051] Os veículos e adjuvantes adequados podem ser sólidos ou líquidos e são ingredientes úteis incluídos em uma formulação de tecnologia, por exemplo, substâncias minerais naturais ou regeneradas, solventes, dispersantes, agentes umectantes, agentes de aderência, espessantes, aglutinantes ou fertilizantes.

[0052] A composição, isto é, o composto ativo e, se desejado, um adjuvante sólido ou líquido, é preparada de uma maneira conhecida, tipicamente misturando intimamente e / ou triturando o composto com extensores, por exemplo, solventes, veículos sólidos e, opcionalmente, tensoativos compostos (surfactantes).

[0053] Variedades preferenciais de plantas e árvores, incluindo plantas cítricas incluem, mas não estão limitadas a todas as plantas cítricas, preferencialmente laranjas, tais como laranjas doces, laranjas sanguíneas, laranjas ácidas e limões, limas, toranjas, tangerinas, Clementinas, kumquat, limettas, etc.

[0054] "Parte da planta", conforme neste documento, refere-se a sementes, raízes, folhas, brotos, frutos, tubérculos, flores, caule, tronco, etc.

[0055] Os macronutrientes usados na composição são selecionados, independentemente, a partir de nitrogénio, fósforo, potássio, cálcio, magnésio, enxofre, carbono, oxigénio e hidrogénio ou qualquer combinação dos mesmos, preferencialmente os micronutrientes são, independentemente, selecionados a partir de carbono, zinco, ferro, manganês, boro, cloro, cobre, molibdênio, cobalto, níquel ou qualquer combinação dos mesmos.

[0056] Os fertilizantes compreendem extrato de algas, preferencialmente algas selecionadas a partir de Ascophyllum Nodosum, Lithothamnium, Uiva, Enteromorpha, Zostera, Ruppia, Potamogeton, Saccorhiza, Laminaria, Fucus, Codium, Palmaria, Gelidium Chondrus e combinações dos mesmos.

[0057] A composição pode opcionalmente compreender ácido fúlvico como fertilizante. O ácido fúlvico é um aditivo com um amplo intervalo de ações benéficas na planta. Os ácidos fúlvicos são usados como aditivos em fertilizantes, especificamente devido aos seus efeitos estimulantes no crescimento das plantas. Devido à combinação de componentes orgânicos de baixo peso molecular, constituídos por cátions metálicos, polissacarídeos, polipeptídeos, cadeias alifáticas e aromáticas de CHON, os ácidos fúlvicos favorecem e estimulam respostas equivalentes aos hormônios vegetais auxinas, giberelinas e citocininas.

[0058] Além disso, a composição da presente invenção pode, sinergicamente, promover a adesão ao nível molecular de vários nutrientes básicos essenciais, como oxigénio, carbono, hidrogénio e nitrogénio.

[0059] A composição agrícola descrita neste documento pode ser uma composição líquida ou uma composição sólida, a composição líquida tendo o pH ácido e sendo usada na forma de fertirrigação, pulverização ou "drench". A composição sólida sendo utilizada na forma de pó, granular ou encapsulada.

[0060] Em uma segunda modalidade, a presente invenção fornece um método para o tratamento eficaz, rompendo colónias bacterianas, reduzindo o estresse oxidativo e capturando os radicais livres em uma planta ou parte da planta, compreendendo a aplicação à planta ou parte da planta de uma quantidade eficaz da composição descrita neste documento.

[0061] A composição é aplicada ao solo na forma de fertirrigação, "drench" (inundando uma pequena área perto da planta) ou aplicada como fertilizante na forma encapsulada, incluindo absorção lenta, em que a composição da presente invenção pode ser absorvida pelas raízes e levadas ao xilema das plantas e, a seguir, iniciar a ação de desintegração do biofilme microbiano.

[0062] A composição fornecida pela presente divulgação é uma composição agrícola estável, com estabilidade suficiente para ter utilidade como um produto agrícola. A composição agrícola estável permite as condições de armazenamento a uma temperatura conveniente. As condições de armazenamento referem-se ao período em que a composição pode ser armazenada a uma determinada temperatura com uma determinada umidade sem apresentar impurezas / produtos de degradação. Por exemplo, a composição pode ser armazenada por até 24 meses e pode ser armazenada em uma faixa de temperaturas de cerca de 0 a cerca de 60°C, após fabricada. [0063] A doença bacteriana é selecionada a partir de doença de Huanglongbing (HLB) ou greening, doença de clorose variegada dos citros (CVC) e cancro cítrico (CCK).

Exemplos

[0064] A presente invenção é ainda definida nos seguintes Exemplos. Deve ser entendido que estes exemplos são dados a título de ilustração dos efeitos surpreendentes da composição aqui descrita. A partir da discussão acima e destes Exemplos, um versado na técnica pode determinar as características essenciais desta invenção e, sem se afastar do âmbito e escopo da mesma, pode fazer várias alterações e modificações na invenção para adaptá-la a vários usos e condições.

Exemplo 1 Quantificação de bactérias Candidatus Liberibacter asiaticus CLas e redução calosa em plantas com HLB ( greening )

[0065] O uso da composição da presente invenção em pomares de laranja mostrou uma redução na titulação da bactéria nas plantas. A Figura 1A representa a titulação bacteriana a partir da quinta aplicação mensal do produto em plantas tratadas com a composição da presente invenção em três áreas. A1 : área 1 ; A2: área 2; A3: área 3. No sétimo mês de aplicação do produto (barra laranja), houve diminuição da titulação bacteriana nas três áreas: na área 1 (A1) diminuiu 2,5 vezes, na área 2 (A2) diminuiu 4 vezes e na área 3 (A3) diminuiu 1 ,3 vezes.

[0066] A doença de Huanglongbing (HLB) ou sintomas de greening foram relacionados ao acúmulo de calosidade nas placas do floema. Portanto, a composição fornecida pela presente invenção foi testada para avaliar a diminuição da calosidade no floema. A Figura 1 B mostra a diminuição da população bacteriana e a quantidade de calosidade.

[0067] A Figura 1C mostra a redução da calosidade por imagens microscópicas de cortes transversais de pecíolos foliares tratados com a composição da presente invenção. As setas brancas mostram os pontos calosos presentes nos vasos do floema. É possível verificar uma diminuição da calosidade durante os meses de estudo.

Exemplo 2: Prevenção da doença

[0068] Foram comparados os resultados obtidos do tratamento com cobre (convencional) em plantas com cancro cítrico (CCK), do tratamento com a composição da presente invenção e do tratamento alternado cobre + composição da presente invenção.

[0069] Neste exemplo, verificou-se que o tratamento com cobre apresentou maior disseminação da doença (CCK) em comparação com outros tratamentos contendo a composição da presente invenção (Figura 2A). A progressão da doença foi menor no tratamento com a composição da presente invenção (Figura 2B) e evitou a disseminação e aumento dos sintomas nas plantas em 11 ,61% (Figura 2C). Em seguida, o tratamento alternativo (composição + Cu) se destacou, com redução de 10,52% da doença (Figura 2C).

Exemplo 3: Colheita de frutas com menos doenças bacterianas e aumento da produtividade

[0070] Os exemplos a seguir representam os frutos colhidos e o peso dos mesmos, em relação aos tratamentos realizados com uma solução de cobre (tratamento convencional), e com a composição da presente invenção, e a mistura de cobre com a composição da presente invenção em plantas com cancro cítrico.

[0071] A Figura 3 (A e B) mostra que as plantas com cancro cítrico tratadas com a Composição da presente invenção tiveram o maior número de frutos por planta e com 10% menos frutos sintomáticos (tratamento Composição e Composição + Cu) do que as plantas de tratamento de cobre (Cu) Em relação à colheita, as plantas tratadas com a composição da presente invenção mais Cobre tiveram um maior número de frutos colhidos. Esta quantidade foi 1 ,5 vezes maior no que diz respeito ao número de frutos colhidos nas plantas tratadas apenas com cobre e 1 ,7 vezes maior para as plantas tratadas apenas com a composição da presente invenção.

[0072] A Figura 3C mostra a produção de frutas de plantas com FILB, tratadas com o produto convencional e com a composição da presente invenção. Esta figura demonstra a comparação da produção de frutas por hectare em plantas (com uma doença bacteriana) que foram tratadas com o tratamento convencional e com a composição da presente invenção. Portanto, é possível verificar o aumento na produtividade de 42 caixas de frutas por hectare.

Exemplo 4: Redução do estresse oxidativo

[0073] O efeito da composição divulgada neste documento sobre o estresse oxidativo em plantas cítricas afetadas por doenças bacterianas; Doença de Huanglongbing (HLB ou greening), doença da clorose variegada dos citros (CVC) e cancro cítrico (CCK); foi estudado.

[0074] Portanto, a redução do estresse oxidativo foi avaliada antes e após a aplicação do (i) biofertilizante com a composição divulgada neste documento e antes e após a aplicação do (ii) biofertilizante sem a composição divulgada neste documento.

[0075] Foram realizadas análises das atividades enzimáticas relacionadas ao estresse oxidativo, bem como quantificação da peroxidação lipídica e peróxido de hidrogénio.

[0076] É bem conhecido pelos especialistas na técnica que, durante os períodos de doença bacteriana, o nível de espécies reativas de oxigénio aumenta nas plantas, levando a um estado de estresse oxidativo prejudicial ao desenvolvimento e à saúde da planta. O peróxido de hidrogénio é uma das espécies reativas de oxigénio geradas em resposta à presença de colónias bacterianas dentro da planta. Portanto, o acúmulo de H2O2 pode ser considerado uma evidência do estresse oxidativo sofrido pela planta.

Exemplo 4.1 : Quantificação de peróxido de hidrogénio

[0077] Neste exemplo, observou-se que plantas com CVC, tratadas com (i) biofertilizante com a composição divulgada neste documento apresentaram diminuição na concentração de H2O2 após três meses do início do experimento (Figura 4A).

[0078] Como já mencionado, as doenças bacterianas afetam os processos bioquímicos e ocorrem um aumento no espalhamento de elétrons resultando no aumento da produção de superóxido (O²) e um grupo hidroxila (OH-). As plantas tratadas com a composição descrita neste documento mostraram uma redução significativa em H2O2 (Figura 4A).

[0079] A Figura 4A mostra que a composição da invenção divulgada neste documento reduziu stress oxidativo devido à redução na quantidade de H2O2 em plantas com a doença de CVC.

Exemplo 4.2: Quantificação da peroxidação lipídica

[0080] O nível de peroxidação lipídica foi medido pela quantificação das concentrações de malondialdeído (MDA), amplamente utilizado para indicar lesão celular. [0081 ] A Figura 4B mostra que as plantas com doença CVC que receberam a composição divulgada neste documento apresentaram redução do teor de peroxidação lipídica (após três meses) e as plantas que não receberam este tratamento permaneceram com alto teor de peroxidação lipídica.

Exemplo 4.3: Atividade da catalase

[0082] Para desintoxicar o H2O2, existem diversos mecanismos, nos quais estão relacionados às atividades da Catalase (CAT) e das peroxidases (del Rio, 2015).

[0083] A Figura 4C mostra os resultados de plantas com doença CVC que receberam a composição divulgada neste documento em comparação com aquelas plantas tratadas com 0 biofertilizante sem a composição. Após três meses de tratamento, as plantas que receberam a composição apresentaram maior atividade da catalase, comparada à atividade apresentada pelas plantas que foram tratadas com 0 biofertilizante sem a composição, demonstrando que, na presença da composição, maior ativação da desintoxicação ocorreu H2O2 por esta enzima.

[0084] A descrição anterior ilustra exemplos da presente divulgação. Que não pretendem ser exaustivos. Em vez disso, foram escolhidos para ilustrar os princípios da presente divulgação e sua aplicação prática para permitir que um versado na técnica utilize a presente divulgação, incluindo suas várias modificações que se seguem naturalmente. Todas as modificações e variações são contempladas dentro do escopo da presente divulgação conforme determinado pelas reivindicações anexas. Modificações relativamente aparentes incluem combinar uma ou mais características de várias modalidades com características de outras modalidades.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1 . Composição agrícola para o tratamento eficaz de doenças e distúrbios bacterianos caracterizada por ser capaz de rompendo colónias bacterianas, reduzindo o estresse oxidativo e capturando os radicais livres, compreendendo compostos de N- acetil-cisteína, análogos e combinações dos mesmos como um ingrediente ativo, fertilizantes, excipientes e um veículo agriculturalmente aceitável, um microbicida, um bacteriófago ou um possível ativador de defesa vegetal.

2. Composição agrícola, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizada pelo fato de que os compostos de N-acetil-cisteína, análogos e combinações dos mesmos estão presentes em uma faixa de concentração de 5 a 30% em peso da composição total, os análogos de compostos de N-acetil-cisteína podem ser selecionados a partir de DL-Homocisteína; L-cisteína metil éster; L-cisteína etil éster; N-carbamoil cisteína; N-(20mercaptoisobutiril)-L-cisteína; N-(2-mercaptopropionil)-L-cisteína A; N-(2- mercaptopropionil)-L-cisteína B; N-(3-mercaptopropionil)-L-cisteína; L-cisteína etil éster hidrocloreto; L-cisteína metil hidrocloreto; nacistetelina (um sal de lisina de N- acetilcisteína); N-acetilcisteína (NAC); e S-acetilcisteína (carbocisteína).

3. Composição agrícola, de acordo com as reivindicações 1 a 2, caracterizada pelo fato de que os fertilizantes estão na forma de macronutrientes e/ou micronutrientes, em que os macronutrientes estão presentes em uma faixa de concentração de 2 a 40% em peso da composição total e os micronutrientes estão presentes em uma faixa de concentração de 13 a 50% em peso da composição total, preferencialmente os macronutrientes são independentemente selecionados a partir de nitrogénio, fósforo, potássio, cálcio, magnésio, enxofre, carbono, oxigénio e hidrogénio ou qualquer combinação dos mesmos, preferencialmente os micronutrientes são independentemente selecionado de carbono, zinco, ferro, manganês, boro, cloro, cobre, molibdênio, cobalto, níquel ou qualquer combinação dos mesmos.

4. Composição agrícola, de acordo com as reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os fertilizantes compreendem extrato de algas, preferencialmente algas selecionadas a partir de Ascophyllum Nodosum,

Lithothamnium, Uiva, Enteromorpha, Zostera, Ruppia, Potamogeton, Saccorhiza, Laminaria, Fucus, Codium, Palmaria, Gelidium Chondrus e combinações dos mesmos, opcionalmente, a composição compreende ácido fúlvico.

5. Composição agrícola, de acordo com as reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a composição pode ser uma composição líquida ou uma composição sólida, a composição líquida tendo um pH ácido e sendo usada na forma de fertirrigação, pulverização ou drench tendo um pH ácido, o a composição sólida estando na forma de pó, granular ou encapsulada.

6. Composição agrícola, de acordo com as reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que a doença bacteriana é selecionada a partir de doença de Huanglongbing (HLB) ou greening, doença de clorose variegada dos citros (CVC) e cancro cítrico (CCK).

7. Método para o tratamento eficaz de doenças e distúrbios bacterianos, rompendo colónias bacterianas, reduzindo o estresse oxidativo e capturando os radicais livres em uma planta ou parte da planta, caracterizado pelo fato de que compreende a aplicação à planta ou parte da planta de uma quantidade eficaz da composição de acordo com quaisquer reivindicações 1 a 6.

8. Método, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a composição é aplicada ao solo na forma de uma drench de fertirrigação (inundando uma pequena área perto da planta) ou alternativamente aplicada como um fertilizante na forma encapsulada.

9. Método, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a doença bacteriana é selecionada a partir de doença de Huanglongbing (HLB) ou greening, doença de clorose variegada dos citros (CVC) e cancro cítrico (CCK).