WO2024242594A1 - Средство для лечения легочных гипертензий - Google Patents

Средство для лечения легочных гипертензий Download PDF

Info

Publication number
WO2024242594A1
WO2024242594A1 PCT/RU2024/050109 RU2024050109W WO2024242594A1 WO 2024242594 A1 WO2024242594 A1 WO 2024242594A1 RU 2024050109 W RU2024050109 W RU 2024050109W WO 2024242594 A1 WO2024242594 A1 WO 2024242594A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
pulmonary
formula
pressure
hypertension
riociguat
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Ceased
Application number
PCT/RU2024/050109
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Сергей Александрович СТАНКЕВИЧ
Владимир Валерьевич БЫКОВ
Валентин Владимирович ЛАРЧЕНКО
Вениамин Абрамович ХАЗАНОВ
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostju Iphar
Original Assignee
Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostju Iphar
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from RU2023113346A external-priority patent/RU2813890C1/ru
Application filed by Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostju Iphar filed Critical Obschestvo S Ogranichennoi Otvetstvennostju Iphar
Publication of WO2024242594A1 publication Critical patent/WO2024242594A1/ru
Anticipated expiration legal-status Critical
Ceased legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/422—Oxazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms

Definitions

  • the invention relates to the field of pharmacology and medicine, in particular to agents that can be used to treat pulmonary hypertension.
  • Pulmonary hypertension is a group of diseases characterized by a progressive increase in pulmonary vascular resistance and pulmonary artery pressure, which leads to the development of right ventricular failure and premature death.
  • the pathogenesis of pulmonary hypertension is based on the narrowing of blood vessels in the lungs, their thrombosis and remodeling (excessive cellular proliferation and fibrosis of the vascular wall), which worsens blood flow, increases pulmonary vascular resistance and pressure in the pulmonary artery.
  • the latter leads to an increase in the load on the right ventricle of the heart and its hypertrophy, but gradually the compensatory mechanisms prove insufficient and right ventricular heart failure occurs [1].
  • PAH pulmonary arterial hypertension
  • CTEPH chronic thromboembolic pulmonary hypertension
  • endothelial dysfunction which is manifested by a decrease in the synthesis of vasodilating factors (nitric oxide (NO), prostacyclin), hyperproduction of vasoconstrictor substances (endothelial-1, thromboxane A2, serotonin), the formation of prothrombotic conditions and the development of inflammatory reactions in the vascular wall, which ultimately leads to hypertension, smooth muscle hypertrophy, thrombosis and vascular remodeling [2].
  • NO-sGC-cGMP nitric oxide - soluble guanylate cyclase - cyclic guanosine monophosphate
  • the main elements of this signaling pathway are the enzymes endothelial NO synthase (eNOS), responsible for the synthesis of nitric oxide (NO), and soluble guanylate cyclase (sGC), responsible for the synthesis of cyclic guanosine monophosphate (cGMP) [3].
  • NO is synthesized by eNOS in the cells of the endothelium of blood vessels and activates sGC, which is present in many cells, including endothelial and smooth muscle cells of blood vessels, platelets, leukocytes, etc.
  • sGC a messenger molecule responsible for relaxation of vascular wall smooth muscle cells (vasodilating or antihypertensive effect).
  • cGMP a messenger molecule responsible for relaxation of vascular wall smooth muscle cells (vasodilating or antihypertensive effect).
  • cGMP also helps reduce inflammation, proliferation, and fibrosis.
  • Many cardiovascular diseases such as arterial hypertension, pulmonary hypertension, heart failure, and others, are associated with disruption of the NO-sGC-cGMP signaling pathway [4, 5].
  • the sGC stimulator BAY 63-2521 (code name) or riociguat (international nonproprietary name) was the first drug in this class approved for the treatment of patients with PAH and CTEPH.
  • Riociguat is methyl H-[4,6-diamino-2-[1-[(2-fluorophenyl)methyl]-1 H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]-5-pyrimidinyl]-N-methylcarbamate:
  • riociguat Due to stimulation of sGC, riociguat has a pronounced hypotensive and antihypertensive effect. Thus, in studies on spontaneously hypertensive SHR rats, riociguat, when administered orally once, led to a long-term and dose-dependent decrease in mean arterial pressure [7, Fig. 1]
  • SHR rats are a natural model of progressive arterial hypertension, which develops in them due to dysfunction of the vascular endothelium. Therefore, SHR rats are used as a standard model for studying sGC stimulators or activators, which, due to the mechanism of action, are able to restore the properties of the vascular wall under conditions of endothelial dysfunction.
  • sGC stimulators or activators which, due to the mechanism of action, are able to restore the properties of the vascular wall under conditions of endothelial dysfunction.
  • riociguat improves hemodynamic parameters in animals with a model of pulmonary hypertension and in patients with pulmonary hypertension - it reduces pulmonary vascular resistance, pressure in the pulmonary artery and the right ventricle of the heart.
  • riociguat reduces not only the pressure in the pulmonary artery (i.e., the pressure in the pulmonary circulation), but also the systemic arterial pressure in the systemic circulation.
  • riociguat at doses of 1 and 10 mg/kg dose-dependently reduced both the pressure in the pulmonary artery and the systemic arterial pressure by 5-15% [8, Fig. 2].
  • Riociguat is recommended for use as an antihypertensive agent for the treatment of a number of forms of pulmonary hypertension, such as pulmonary arterial hypertension and chronic thromboembolic pulmonary hypertension. Based on the results of clinical studies and clinical experience, it has been established that the most common and dangerous side effect of riociguat is hypotension (a decrease in systemic blood pressure), which manifests itself as headaches, dizziness, and peripheral edema [9].
  • sGC stimulator vericiguat
  • vericiguat Another sGC stimulator, vericiguat, was approved in 2021 for the treatment of patients with heart failure. It has much in common with riociguat in its chemical structure - it is methyl -[4,6-diamino-2-[5-fluoro-1-[(2-fluorophenyl)methyl]pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]pyrimidin-5-yl]carbamate:
  • vericiguat As well as riociguat, is hypotension, as evidenced by the results of clinical studies of vericiguat in patients with heart failure [10].
  • sGC stimulants including praliciguat, are at various stages of development.
  • praliciguat in doses from 0.3 to 10 mg/kg reduces arterial pressure not only in spontaneously hypertensive SHR rats (by approximately 27% at the maximum dose), but also in normotensive Wistar rats - by 10-12% from the initial level, which reflects the side hypotensive effect of the drug.
  • sGC activators are also known, which differ in the mechanism of binding to the target from sGC stimulators. Activators bind to oxidized, heme-free sGC, formed under the influence of oxidative stress in many cardiovascular diseases, and act independently of the presence of NO. Examples of sGC activators include cinaciguat
  • sGC activators exhibit a powerful vasodilatory effect at nanomolar concentrations.
  • clinical development of cinaciguat and ataciguat was discontinued precisely because of the pronounced side hypotensive effect on systemic arterial pressure [12].
  • sGC stimulators and activators have an antihypertensive effect, useful for the treatment of pulmonary hypertension and a number of other cardiovascular diseases.
  • all of them have a dangerous side hypotensive effect on systemic blood pressure, which greatly limits the use of such drugs.
  • the search for new compounds - sGC stimulators or activators for the treatment of pulmonary hypertension and other cardiovascular diseases capable of eliminating the manifestations of endothelial dysfunction, reducing high pressure in the pulmonary artery and right ventricle of the heart, having an antihypertensive effect at an elevated level of systemic blood pressure, but not having a negative hypotensive effect on systemic blood pressure at its normal level, is of great importance for modern pharmacology.
  • the antithrombotic and antiatherosclerotic agent 2-[2-[5-(hydroxymethyl)-3-methyl-1,3-oxazolidin-2-ylidene]-2-cyanoethylidene]indolin-3-one of formula I is known which is used as an activator of the enzyme soluble guanylate cyclase, an inhibitor of platelet aggregation with antihypertensive activity to obtain a drug for the treatment of cardiovascular diseases [13].
  • the technical problem to be solved is the elimination of the negative side hypotensive effect on systemic blood pressure in the treatment of pulmonary hypertension.
  • the technical result is the absence of a negative side hypotensive effect on systemic blood pressure while maintaining a positive therapeutic effect in the treatment of pulmonary hypertension, including the elimination of manifestations of endothelial dysfunction and normalization of hemodynamic parameters of the pulmonary circulation (reduction of increased pressure in the pulmonary artery and right ventricle of the heart, reduction of pulmonary vascular resistance, restoration of cardiac output of the right ventricle).
  • 2-[2-[5-(hydroxymethyl)-3-methyl-1,3-oxazolidin-2-ylidene]-2-cyanoethylidene]indolin-3-one of formula I for the treatment of chronic thromboembolic pulmonary hypertension.
  • 2-[2-[5-(hydroxymethyl)-3-methyl-1,3-oxazolidin-2-ylidene]-2-cyanoethylidene]indolin-3-one of formula I is administered orally at a dose of 1.5 to 200 mg.
  • the compound of formula I does not have a hypotensive effect on systemic BP in mammals, including humans, at its initially normal level (see examples 1 and 2).
  • the compound of formula I is at least as good as the known agents in terms of the strength and duration of the antihypertensive effect at an initially elevated BP level - in spontaneously hypertensive SHR rats (example 1).
  • the studies have also shown that the compound of formula I does not reduce systemic BP in animals with a pulmonary hypertension model (example 4).
  • the compound of formula I is as effective as riociguat - normalization of the hemodynamic parameters of the pulmonary circulation in standard models of various forms of pulmonary hypertension: PAH and CTEPH.
  • PAH standard models of various forms of pulmonary hypertension
  • CTEPH CTEPH
  • the compound of formula I does not affect systemic BP in normotensive rats or the BP value in healthy people with initially normal BP (examples 1 and 2).
  • PAH model (example 4) it was found that the compound of formula I even restored (increased to values close to the normal level) the reduced systemic BP in rats with PAH.
  • Riociguat on the contrary, reduced systemic BP even more, which is a dangerous side effect.
  • the antihypertensive action of the compound of formula I is based on its ability to eliminate manifestations of endothelial dysfunction, in particular, the impairment of the vasodilating (vasoconstricting) properties of the endothelium.
  • the compound of formula I is superior to riociguat in its effect on the vasodilating properties of the endothelium, which is manifested in the normalization of the parameters of endothelium-dependent vasodilation (example 4).
  • the compound of formula I unlike riociguat or other known sGC stimulators and activators, does not have a dangerous hypotensive effect on systemic BP at its normal or low value. This allows safe use of drugs based on the compound of formula I as an antihypertensive agent for the treatment of pulmonary hypertension, as well as other cardiovascular diseases.
  • Fig. 1 taken from publication [7], shows the effect of riociguat upon its single oral administration at doses from 0.03 to 3 mg/kg on systemic arterial pressure in spontaneously hypertensive SHR rats.
  • the abscissa axis shows the time after drug administration in hours, the ordinate axis shows the values of mean BP in percent. Shown are the average values for 6-12 animals for each group as a percentage of the initial values (131-142 mmHg).
  • Fig. 2 taken from publication [8], shows the effect of riociguat (BAY 63-2521) administered orally at doses of 1 and 10 mg/kg on pulmonary arterial pressure and systemic arterial pressure in rabbits with a model of pulmonary arterial hypertension.
  • the abscissa axis shows the test compounds: BAY 63-2521, sildenafil and their combination; the ordinate axis shows the values of systemic BP as a percentage of the initial level. Column designations in the figure: > - pulmonary arterial pressure; ⁇ - systemic arterial pressure; the * sign indicates statistically significant differences from the control (p ⁇ 0.05).
  • the presented data show that riociguat (BAY 63-2521) at doses of 1 and 10 mg/kg reduces both pulmonary arterial pressure and systemic arterial pressure to an equal extent in a rabbit model of pulmonary arterial hypertension.
  • Fig. 3 taken from publication [11], shows the effect of praliciguat (IW-1973) administered orally daily for 3 days at doses from 0.3 to 10 mg/kg on systemic arterial pressure in normotensive Wistar rats and spontaneously hypertensive SHR rats.
  • the abscissa axis shows the doses of IW-1973 in mg/kg (0 - vehicle, 0.3, 1, 3 and 10 mg/kg); the ordinate axis shows the values of the decrease in mean arterial pressure on the 3rd day relative to the initial level in mmHg. The number of animals in each group was 6.
  • Fig. 4 shows the results of a study of the effect of a compound of formula I upon its single oral administration at doses of 5, 10 and 20 mg/kg on systemic arterial pressure in normotensive CD rats and spontaneously hypertensive SHR rats.
  • the abscissa axis shows the time after administration of the drug in hours, and the ordinate axis shows the values of mean BP in mm Hg.
  • the data presented show that GRS causes a long-term and dose-dependent decrease in mean BP in spontaneously hypertensive rats, but does not have any effect on systemic BP in normotensive rats.
  • Fig. 5 schematically shows the approach to assessing the parameters of the vasodilatory function of the vascular endothelium based on the area of the triangle above the mean arterial pressure recovery curve, where one leg represents the magnitude of the decrease in mean arterial pressure (AmAP) in response to the introduction of a vasodilator, and the other leg represents the time of mean arterial pressure recovery.
  • AmAP mean arterial pressure
  • the animals were administered the compound of formula I (code name of the compound - GRS) intragastrically at doses of 5, 10 and 20 mg/kg.
  • a 0.5% solution of carboxymethylcellulose was used as a carrier for intragastric administration.
  • Animals of the control groups received only a 0.5% solution of carboxymethylcellulose.
  • Systemic arterial pressure indicators - systolic BP (SBP) and diastolic BP (DBP) were measured before administration and 1, 2, 4, 8 and 24 hours after a single administration of the substances.
  • MAP Mean arterial pressure
  • GRS exerted a pronounced dose-dependent antihypertensive effect in spontaneously hypertensive SHR rats.
  • the most pronounced effect in terms of amplitude and duration was observed with intragastric administration of GRS at doses of 10 and 20 mg/kg - the mean arterial pressure in SHR rats decreased by 45% after 1 hour, reaching the level of normotensive CD rats, the effect lasted for at least 24 hours.
  • the antihypertensive effect of GRS remained unchanged.
  • the arterial pressure of SHR rats returned to the initial level.
  • GRS did not affect the arterial pressure level of animals with normal pressure, which follows from the data shown in Fig. 4 and in Tables 1, 2.
  • the compound of formula I unlike riociguat and other known sGC stimulants and activators, does not have any effect on systemic blood pressure at its normal level, but at the same time has a pronounced antihypertensive effect in animals with elevated blood pressure (SHR rats).
  • the compound of formula I unlike riociguat and other known sGC stimulants and activators, does not have a negative side hypotensive effect on systemic blood pressure at its normal level in a healthy person.
  • Example 3 Effect of the compound of formula 1 on arterial pressure and other hemodynamic parameters in a model of chronic thromboembolic pulmonary hypertension in minipigs
  • CTEPH chronic thromboembolic pulmonary hypertension
  • CTEPH chronic obstructive pulmonary artery .
  • Histological studies in the tissues and vessels of the lungs revealed morphological changes characteristic of developing CTEPH of the precapillary type with the formation of extensive zones of atelectasis (collapse of lung tissue), obliteration of the lumen of small and medium-diameter blood vessels with the formation of intravascular thrombi, hypertrophy of the walls of small blood vessels with collagenization of the wall and the loss of its typical structure.
  • the animals were randomized into 3 groups.
  • the first group received treatment with the compound of formula I (40 mg divided into 20 mg twice daily, orally), the second received riociguat (4 mg divided into 2 mg 2 times a day, orally), the third (control group) of animals was observed without therapy (received the carrier - starch).
  • the duration of the course of therapy was 36 days.
  • a Corodyn catheter (B. Braun, Germany) was inserted into the right ventricle and then into the pulmonary artery through an introducer into the anesthetized animals under fluoroscopy control using a mobile X-ray unit OEC9900 (GE Healthcare, USA), with the help of which the hemodynamic parameters of the pulmonary circulation were measured: average pressure in the pulmonary artery, pulmonary artery wedge pressure and cardiac output.
  • the sign “ # ” indicates statistically significant differences with the indicator in the control group (P ⁇ 0.05).
  • a course of treatment with the compound of formula I has a pronounced therapeutic effect in CTEPH, normalizing the main parameters of hemodynamics of the pulmonary circulation, which are impaired in CTEPH - it reduces the increased mean pressure in the pulmonary artery and pulmonary vascular resistance, and also restores the reduced cardiac output of the right ventricle.
  • Example 4 Effect of compound of formula 1 on hemodynamic parameters and endothelial dysfunction in a model of pulmonary arterial hypertension in rats
  • GRS (10 mg/kg) and riociguat (1 mg/kg) as a suspension in 1% starch mucus were administered intragastrically daily for 2 weeks, starting from the 15th day after monocrotaline administration. Intact animals and control group rats received 1% starch mucus according to the same scheme.
  • the GRS dose used in the study (10 mg/kg) corresponds to the average effective dose at which its antihypertensive effect is manifested.
  • the riociguat dose used in the study (1 mg/kg) is close to the upper limit of the dose range (0.03-3 mg/kg) at which its antihypertensive effect is manifested, i.e. it even exceeds the average effective dose.
  • the maximum (Pmax, mmHg) and minimum (Pmm, mmHg) pressure in the right ventricle, the maximum rate of pressure change during a contraction cycle (dP/dtmax, mmHg/s), and the contractile index (CI, 1/s) were determined from the pressure curve.
  • RVW/BW right ventricular wall weight/body weight
  • RVW/HW right ventricular wall weight/heart weight
  • vascular endothelium To assess the vasodilatory activity of the vascular endothelium, a catheter was implanted into the left carotid artery of rats under inhalation anesthesia (isoflurane). Systemic arterial pressure was recorded using an MP150 high-speed data acquisition and analysis system (BiopacSystems, Inc., USA) with a DA100C general-purpose amplification module and a TSD104A pressure sensor. Data were recorded and processed on a computer using the AcqKnowledge 4.2 for MP 150 program.
  • MAP mean arterial pressure
  • the area of the triangle above the curve of MAP recovery was used, where one leg represented the magnitude of the decrease in MAP (AMAP) in response to the introduction of the vasodilator (mm Hg), and the other ⁇ the time of MAP recovery after the test (Fig. 5).
  • the degree of endothelial dysfunction in experimental animals was assessed by the endothelial dysfunction coefficient (EDC), which is the ratio of the area of the triangle above the curve of MAP recovery after the introduction of NP to the area of the triangle above the curve of MAP recovery after the introduction of ACh [18, 19].
  • the sign “ # ” means reliable differences compared to the values in animals of the control group (p ⁇ 0.05)
  • the control group rats showed a pronounced (2.25-fold) increase in pressure (Pmax) in the right ventricle of the heart, which is typical for PAH, compared to intact animals. Accordingly, the maximum rate of pressure change per contraction cycle (dP/dtmax) increased by 1.8 times.
  • the increase in pressure in the right ventricle in PAH reflects an increase in pressure in the pulmonary circulation (pressure in the pulmonary artery) due to an increase in pulmonary vascular resistance against the background of progressive damage to the vessels and tissues of the lung.
  • the compound of formula I (GRS) and riociguat have a comparable therapeutic effect in animals with a PAH model - they reduce the pressure in the right ventricle of the heart, which is elevated in PAH.
  • the sign “ # ” indicates reliable differences compared to the values in rats of the control group (p ⁇ 0.05).
  • the EDC value increased to 2.36 ⁇ 0.27 compared to 1.80 ⁇ 0.06 in the control, although this decrease did not reach the level of statistical significance.
  • ASmAP value was statistically significantly higher than in the control and did not differ from the value in the intact group
  • recovery time of MAP was statistically significantly higher compared to the value in the intact group and did not differ from the value in the control and the group with riociguat.
  • the ASmAP value was statistically significantly higher compared to the value in the animals of the group receiving riociguat and did not differ from the value in intact animals, and the recovery time of MAP was statistically significantly lower than in the group with riociguat and also did not differ from the values in the control and in intact animals.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области фармакологии и медицины, в частности к средствам для лечения легочных гипертензий. 2-[2-[5-(гидроксиметил)-3-метил-1,3-оксазолидин-2-илиден]-2-цианоэтилиден] индолин-3-он формулы I применяют в качестве средства для лечения легочных гипертензий без побочного гипотензивного действия в отношении системного артериального давления. Средство формулы I применяют для нормализации параметров гемодинамики малого круга кровообращения, включающих снижение повышенного давления в легочной артерии и правом желудочке сердца, снижение легочно-сосудистого сопротивления и восстановление сердечного выброса правого желудочка. Средство формулы I применяют при легочной артериальной гипертензии или при хронической тромбоэмболической легочной гипертензии. Оптимально средство формулы I применять для введения млекопитающим в дозах от 1,5 до 200 мг.

Description

СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЛЕГОЧНЫХ ГИПЕРТЕНЗИЙ
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к области фармакологии и медицины, в частности к средствам, которые могут быть использованы для лечения легочных гипертензий.
Предшествующий уровень техники
Легочные гипертензии — группа заболеваний, характеризующихся прогрессивным повышением легочного сосудистого сопротивления, давления в легочной артерии, что ведёт к развитию сердечной правожелудочковой недостаточности и преждевременной смерти.
В основе патогенеза легочных гипертензий лежит сужение кровеносных сосудов в легких, их тромбоз и ремоделирование (чрезмерная клеточная пролиферация и фиброз сосудистой стенки), что ухудшает кровоток, повышает легочно-сосудистое сопротивление и давление в легочной артерии. Последнее приводит к увеличению нагрузки на правый желудочек сердца и его гипертрофии, однако постепенно компенсаторные механизмы оказываются недостаточными и возникает правожелудочковая сердечная недостаточность [1].
Важным звеном патогенеза различных легочных гипертензий, включая легочную артериальную гипертензию (далее - ЛАГ), хроническую тромбоэмболическую легочную гипертензию (далее - ХТЭЛГ) и другие формы легочных гипертензий, является эндотелиальная дисфункция, которая проявляется снижением синтеза вазодилатирующих факторов (оксид азота (NO), простациклин), гиперпродукцией вазоконстрикторных субстанций (эндотелии- 1 , тромбоксан А2, серотонин), формированием протромботических условий и развитием воспалительных реакций в сосудистой стенке, что в результате приводит к гипертензии, гипертрофии гладких мышц, тромбозу и ремоделированию сосудов [2].
Функциональное состояние эндотелия сосудов во многом определяется сигнальным путем NO-рГЦ-цГМФ (оксид азота - растворимая гуанилатциклаза - циклический гуанозинмонофосфат), который играет важную роль в организме, особенно в регуляции функций сердечно-сосудистой системы. Основными элементами этого сигнального пути являются ферменты эндотелиальная NO-синтаза (eNOS), ответственная за синтез оксида азота (NO), и растворимая гуанилатциклаза (рГЦ), ответственная за синтез циклического гуанозинмонофосфата (цГМФ) [3]. NO синтезируется eNOS в клетках эндотелия кровеносных сосудов и активирует рГЦ, которая представлена во многих клетках, включая эндотелиальные и гладкомышечные клетки сосудов, тромбоциты, лейкоциты и др. Активация рГЦ приводит к увеличению синтеза цГМФ - молекулы-мессенджера, которая ответственна за расслабление гладкомышечных клеток сосудистой стенки (вазодилатирующее или антигипертензивное действие). Кроме вазодилатирующего эффекта, цГМФ также способствует снижению воспаления, пролиферации и фиброза. Многие сердечно-сосудистые заболевания, такие как артериальная гипертензия, легочные гипертензии, сердечная недостаточность и другие связаны с нарушением сигнального пути NO-рГЦ-цГМФ [4, 5].
Компанией Bayer были открыты два разных класса веществ, усиливающих активность рГЦ независимо от NO, которые были названы стимуляторами и активаторами рГЦ. Оба класса веществ напрямую связываются с рГЦ и аллостерически модулируют активность фермента [6].
Стимулятор рГЦ BAY 63-2521 (кодовое наименование) или риоцигуат (международное непатентованное наименование) стал первым препаратом этого класса, одобренным для лечения пациентов с ЛАГ и ХТЭЛГ. Риоцигуат представляет собой метил Н-[4,6-диамино-2-[1-[(2- фторфенил)метил]-1 Н-пиразоло[3,4-Ь]пиридин-3-ил]-5- пиримидинил]-№-метилкарбаминат:
Figure imgf000004_0001
Благодаря стимуляции рГЦ риоцигуат оказывает выраженное гипотензивное и антигипертензивное действие. Так, в исследованиях на спонтанно-гипертензивных крысах SHR риоцигуат при однократном пероральном введении приводил к длительному и дозозависимому снижению среднего артериального давления [7, фиг.1]
Необходимо отметить, что крысы SHR являются естественной моделью прогрессирующей артериальной гипертензии, которая развивается у них вследствие дисфункции эндотелия сосудов. Поэтому крысы SHR используют как стандартную модель для изучения стимуляторов или активаторов рГЦ, которые благодаря механизму действия способны восстанавливать свойства сосудистой стенки в условиях дисфункции эндотелия. В доклинических и клинических исследованиях показано, что риоцигуат улучшает гемодинамические параметры у животных с моделью легочной гипертензии и у больных легочной гипертензией - снижает легочно-сосудистое сопротивление, давление в легочной артерии и правом желудочке сердца. Однако, риоцигуат снижает не только давление в легочной артерии (т.е. давление в малом круге кровообращения), но и системное артериальное давление в большом круге кровообращения. Так, у кроликов с моделью легочной артериальной гипертензии риоцигуат в дозах 1 и 10 мг/кг дозозависимо снижал на 5-15 % давление как в легочной артерии, так и системное артериальное давление [8, фиг.2].
Риоцигуат рекомендован для использования в качестве антигипертензивного средства для лечения ряда форм легочных гипертензий, таких как легочная артериальная гипертензия и хроническая тромбоэмболическая легочная гипертензия. По результатам клинических исследований и опыта клинического применения установлено, что наиболее частым и опасным побочным эффектом риоцигуата является гипотензия (снижение системного АД), которая проявляется головными болями, головокружениями, а также периферическими отеками [9].
Другой стимулятор рГЦ верицигуат в 2021 году одобрен для лечения пациентов с сердечной недостаточностью. Он имеет много общего с риоцигуатом по химической структуре - представляет собой метил -[4,6-диамино-2-[5-фтор-1-[(2- фторфенил)метил]пиразоло[3,4-Ь]пиридин-3-ил]пиримидин-5-ил]карбамат:
Figure imgf000005_0001
Наиболее распространенным побочным эффектом верицигуата, также как и риоцигуата, является гипотензия, о чем свидетельствуют результаты клинических исследований верицигуата у больных сердечной недостаточностью [ 10].
На разных стадиях разработки находятся другие стимуляторы рГЦ, в частности пралицигуат
Figure imgf000006_0001
которые значительно отличаются по химической структуре от риоцигуата, хотя и имеют отдельные общие структурные фрагменты.
Как следует из [11, фиг. 3], пралицигуат в дозах от 0,3 до 10 мг/кг снижает артериальное давление не только у спонтанно-гипертензивных крыс SHR (примерно на 27 % в максимальной дозе), но и у нормотензивных крыс Wistar - на 10-12 % от исходного уровня, что отражает побочный гипотензивный эффект препарата. Известны также активаторы рГЦ, которые отличаются по механизму связывания с мишенью от стимуляторов рГЦ. Активаторы связываются с окисленной, не содержащей гема рГЦ, образующейся под влиянием окислительного стресса при многих сердечнососудистых заболеваниях, и действуют независимо от наличия NO. В качестве примеров активаторов рГЦ можно привести цинацигуат
Figure imgf000007_0001
Активаторы рГЦ проявляют мощное сосудорасширяющее действие в наномолярных концентрациях. Однако клиническая разработка цинацигуата и атацигуата была прекращена именно из-за выраженного побочного гипотензивного эффекта в отношении системного артериального давления [12].
Таким образом, стимуляторы и активаторы рГЦ оказывают антигипертензивное действие, полезное для лечения легочных гипертензий и ряда других сердечно-сосудистых заболеваний. Однако, все они обладают опасным побочным гипотензивных действием на системное АД, что сильно ограничивает применение таких препаратов. В связи с вышеизложенным, важное значение для современной фармакологии приобретает поиск новых соединений - стимуляторов или активаторов рГЦ для лечения легочных гипертензий и других сердечно-сосудистых заболеваний, способных устранять проявления эндотелиальной дисфункции, снижать повышенное давление в легочной артерии и правом желудочке сердца, оказывать антигипертензивное действие при повышенном уровне системного АД, но не оказывать негативного гипотензивного действия на системное АД при его нормальном уровне. Известно антитромботическое и антиатеросклеро ическое средство 2-[2-[5- (гидроксиметил)-З -метил- 1 , 3 -оксазолидин-2-илиден] -2-цианоэтилиден] индолин-3 -он формулы I
Figure imgf000008_0001
которое применяется в качестве активатора фермента растворимая гуанилатциклаза, ингибитора агрегации тромбоцитов с антигипертензивной активностью для получения средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний [13].
Раскрытие изобретения
Решаемая техническая проблема --- устранение негативного побочного гипотензивного действия на системное АД при лечении легочных гипертензий.
Технический результат -- отсутствие негативного побочного гипотензивного действия на системное АД с сохранением позитивного лечебного эффекта при лечении легочных гипертензий, включая устранение проявлений эндотелиальной дисфункции и нормализацию параметров гемодинамики малого круга кровообращения (снижение повышенного давления в легочной артерии и правом желудочке сердца, снижение легочнососудистого сопротивления, восстановление сердечного выброса правого желудочка).
Технический результат достигается тем, что в качестве средства для лечения легочных гипертензий без побочного гипотензивного действия на системное АД применяется 2-[2-[5-(гидроксиметил)-3-метил-1,3-оксазолидин-2-илиден]-2- цианоэтилиден] индолин-3 -он формулы I
Figure imgf000008_0002
В одном из вариантов реализации изобретения возможно применение 2-[2-[5- (гидроксиметил)-З -метил- 1 , 3 -оксазолидин-2-илиден] -2-цианоэтилиден] индолин-3 -она формулы I для лечения легочной артериальной гипертензии.
В другом варианте реализации изобретения возможно применение 2-[2-[5- (гидроксиметил)-З -метил- 1 , 3 -оксазолидин-2-илиден] -2-цианоэтилиден] индолин-3 -она формулы I для лечения хронической тромбоэмболической легочной гипертензии. Предпочтительно применение 2-[2-[5-(гидроксиметил)-3-метил-1,3-оксазолидин-2- илиден]-2-цианоэтилиден]индолин-3-она формулы I пероральным введением дозы от 1,5 до 200 мг.
Проведенные эксперименты на лабораторных животных и клинические исследования показали, что соединение формулы I не оказывает гипотензивного действия на системное АД у млекопитающих, включая человека, при его исходно нормальном уровне (см. примеры 1 и 2). При этом соединение формулы I, как минимум, не уступает известным из уровня техники средствам по силе и продолжительности антигипертезивного при исходно повышенном уровне АД - у спонтанно гипертензивных крыс SHR (пример 1). Проведенные исследования также показали, что соединение формулы I не снижает системное АД у животных с моделью легочной гипертензии (пример 4). При этом соединение формулы I не уступает риоцигуату по эффективности - нормализации параметров гемодинамики малого круга кровообращения на стандартных моделях различных форм легочной гипертензии: ЛАГ и ХТЭЛГ. Так, на модели ЛАГ у крыс соединение формулы I, также как риоцигуат, снижает повышенное давление в правом желудочке сердца (пример 4). На модели ХТЭЛГ соединение формулы I, также как риоцигуат, снижает повышенное среднее давление в легочной артерии и легочнососудистое сопротивление, а также восстанавливает сниженный сердечный выброс (пример 3).
Ключевое отличие соединения формулы I, выявленное в процессе исследований, заключается в том, что соединение формулы I, в отличие от риоцигуата или других известных стимуляторов и активаторов рГЦ, не оказывает гипотензивного побочного эффекта на системное АД при его исходно нормальном уровне. Так, соединение формулы I совершенно не влияет на системное АД у нормотензивных крыс или на величину АД у здоровых людей с исходно нормальным уровнем АД (примеры 1 и 2). Более того, на модели ЛАГ (пример 4) было обнаружено, что соединение формулы I даже восстанавливало (увеличивало до значений, близких к нормальному уровню) пониженное системное АД у крыс с .ЛАГ. Риоцигуат, напротив, еще сильнее снижал системное АД, что является опасным побочным эффектом.
На модели ЛАГ показано, что в основе антигипертензивного действия соединения формулы I лежит его способность устранять проявления эндотелиальной дисфункции, в частности, нарушение вазодилатирующих (сосудосуживающих) свойств эндотелия. При этом соединение формулы I превосходит риоцигуат по влиянию на вазодилатирующие свойства эндотелия, что проявляется в нормализации параметров зависимой от эндотелия вазодилатации (пример 4). Таким образом, соединение формулы I, в отличие от риоцигуата или других известных стимуляторов и активаторов рГЦ, не обладает опасным гипотензивным действием на системное АД при его нормальном или пониженном значении. Это позволяет безопасно применять лекарственные средства на основе соединения формулы I в качестве антигипертензивного средства для лечения легочных гипертензий, а также других сердечно-сосудистых заболеваний.
На фиг. 1, использованной из публикации [7], представлены данные о влиянии риоцигуата при его однократном пероральном введении в дозах от 0,03 до 3 мг/кг на системное артериальное давление у спонтанно -гипертензивных крыс SHR. По оси абсцисс указано время после приема препарат в часах, по оси ординат - значения среднего АД в процентах. Показаны средние значения для 6-12 животных для каждой группы в процентах от исходных значений (131-142 мм рт. ст.). Обозначения групп: • - контроль, п = 12; Д - 0,03 мг/кг, п = 6; □ - 0, 1 мг/кг, п = 6; ▲ - 0,3 мг/кг, п = 12; о - 1,0 мг/кг, п = 6; ■ - 3,0 мг/кг, п = 6. Представленные данные показывают, что риоцигуат при однократном пероральном введении в дозах от 0,03 до 3,0 мг/кг вызывает длительное и дозозависимое снижение среднего АД у крыс SHR.
На фиг. 2, использованной из публикации [8] представлены данные о влиянии риоцигуата (BAY 63-2521) при его пероральном введении в дозах 1 и 10 мг/кг на давление в легочной артерии и системное артериальное давление у кроликов с моделью легочной артериальной гипертензии. По оси абсцисс представлены исследуемые соединения: BAY 63-2521, силденафил и их комбинация; по оси ординат - значения системного АД в процентах от исходного уровня. Обозначения столбцов на фигуре: > - давление в легочной артерии; ■ - системное артериальное давление; знак * означает статистически значимые различия с контролем (р < 0,05). Представленные данные показывают, что риоцигуат (BAY 63-2521) в дозах 1 и 10 мг/кг в равной степени снижает давление как в легочной артерии, так и системное артериальное давление у кроликов с моделью легочной артериальной гипертензии.
На фиг. 3, использованной из публикации [11] представлены о влиянии пралицигуата (IW-1973) при его ежедневном в течение 3-х дней пероральном введении в дозах от 0,3 до 10 мг/кг на системное артериальное давление у нормотензивных крыс Wistar и спонтанногипертензивных крыс SHR. По оси абсцисс представлены дозы IW-1973 в мг/кг (0 - носитель, 0,3, 1 , 3 и 10 мг/кг); по оси ординат - значения снижения среднего АД на 3-й день относительно исходного уровня в мм рт. ст. Количество животных в каждой группе - 6. Знаки *, ** и *** означают статистически значимые различия с контролем: * - р < 0,05, ** - p < 0.01; *** - p < 0.001. Представленные данные показывают, что пралицигуат (IW- 1973) в дозах от 0,3 до 10 мг/кг снижает среднее АД как у спонтанно-гипертензивных крыс SHR, так и у нормотензивных крыс Wistar, что отражает побочный гипотензивный эффект пралицигуата.
На фиг. 4 представлены результаты изучения влияния соединения формулы I при его однократном пероральном введении в дозах 5, 10 и 20 мг/кг на системное артериальное давление у нормотензивных крыс CD и спонтанно гипертензивных крыс SHR. По оси абсцисс указано время после приема препарат в часах, по оси ординат - значения среднего АД в мм рт. ст. Представленные данные показывают, что GRS вызывает длительное и дозозависимое снижение среднего АД у спонтанно гипертензивных крыс, но при этом не оказывает никакого влияния на системное АД у нормотензивных крыс.
На фиг. 5 схематически показан подход к оценке параметров вазодилатирующей функции эндотелия сосуда по площади треугольника над кривой восстановления СрАД, где один катет представляет собой величину снижения СрАД (АСрАД) в ответ на введение вазодилататора, а другой катет - время восстановления СрАД.
Заявляемый технический результат и новые выявленные свойства соединения формулы I подтверждаются следующими конкретными примерами его использования.
Пример 1. Влияние соединения формулы I на артериальное давление у нормотензивных и спонтанно гипертензивных крыс
Исследование проводили с использованием самцов нормотензивных крыс стока CD Sprague Dawley) массой 330 - 400 г и спонтанно гипертензивных крыс SHR {Spontaneously Hypertensive Rat) массой 240 - 275 г. Животным внутр ижелудочно вводили соединение формулы I (кодовое наименование соединения - GRS) в дозах 5, 10 и 20 мг/кг. В качестве носителя для внутр ижелудочного введения использовали 0,5 % раствор карбоксиметилцеллюлозы. Животные контрольных групп получали только 0,5 % раствор карбоксиметилцеллюлозы. Показатели системного артериального давления - систолическое АД (САД) и диастолическое АД (ДАД) измеряли перед введением и через 1, 2, 4, 8 и 24 ч после однократного введения веществ. Далее GRS вводили 1 раз в сутки в течение 14 суток, затем измеряли систолическое и диастолическое АД через 1 ч, 1, 3 и 7 суток после 14-дневного введения. Среднее артериальное давление (СрАД) рассчитывали по формуле: СрАД = ДАД + (САД - ДАД)/3.
GRS оказывал выраженное дозозависимое антигипертензивное действие у спонтанно гипертензивных крыс SHR. Наиболее выраженный по амплитуде и продолжительности эффект наблюдался при внутр ижелудочном введении GRS в дозах 10 и 20 мг/кг - СрАД у крыс SHR уже через 1 ч снижалось на 45%, достигая уровня нормотензивных крыс CD, эффект продолжался не менее 24 ч. В течение 14 дней введения антигипертензивный эффект GRS оставался неизменным. Через 3 суток после окончания введения вещества, АД крыс SHR возвращалось к исходному уровню. При этом GRS не влиял на уровень АД животных с нормальным давлением, что следует из данных, приведенных на фиг. 4, и в таблицах 1, 2.
Таким образом, соединение формулы I, в отличие от риоцигуата и других известных стимуляторов и активаторов рГЦ, не оказывает никакого влияния на системное АД при его нормальном уровне, но при этом оказывает выраженное антигипертензивное действие у животных с повышенным АД (крысы SHR).
Таблица 1 - Результаты измерений Ср АД после однократного внутр ижелудочного введения соединения формулы I (GRS) (X ± SE)
Figure imgf000012_0001
Примечания'.
1. Количество животных в каждой группе п = 6; 2. Знак «*:» означает статистически значимые различия с показателем в группе «SHR Контроль»
(р < 0,05).
Таблица 2 - Результаты измерения Ср АД после многократного (14-дневного) внутрижелудочного введения соединения формулы I (GRS) (X ± SE)
Figure imgf000012_0002
Примечания'.
1. Количество животных в каждой группе п = 6;
2. Знак «*» означает статистически значимые различия с показателем в группе «SHR Контроль» (р < 0,05).
Пример 2. Влияние соединения формулы I на АД у здорового человека
Влияние соединения формулы I (GRS) на системное АД у человека оценивали в ходе клинических исследований фазы I, проведенных в соответствии с разрешением Министерства здравоохранения России по Протоколам № GRS-2018-02 Версия 1.1 от 25.06.2018 и № GRS-2020-08 Версия 1.0 от 01.08.2020, при однократном и многократном приеме лекарственного препарата GRS здоровыми добровольцами мужского пола.
Часть добровольцев (30 человек) принимала исследуемый препарат GRS в различных дозах (20, 40, 80, 120, 160 и 200 мг) или плацебо (0 мг) однократно. В каждой дозовой группе было по 4 человека, в группе плацебо - 6 человек. Показатели артериального давления (систолическое и диастолическое АД) оценивали до начала приема препарата (0 ч) и после приема препарата - через 1, 2, 6, 12 и 24.
Другая часть добровольцев (48 человек) принимала исследуемый препарат GRS в дозах 20, 40 и 60 мг/день ежедневно в течение 7 дней. В каждой дозовой группе было по 12 человек, в группе плацебо - 12 человек. Показатели системного артериального давления - систолическое АД (САД) и диастолическое АД (ДАД) оценивали до начала приема препарата (0 ч) и после приема препарата - через 0,75, 1,25, 1,5, 2, 3, 12 и 24 ч.
Результаты, представленные в таблицах 3 и 4, показывают, что соединение формулы I при однократном введении (в дозах 20 до 200 мг) и многократном введении (в дозах 20, 40 и 60 мг/день ежедневно в течении 7 дней) не влияет на АД у здорового человека с исходно нормальным уровнем АД --- ни в какой временной точке или в дозовой группе не отмечается достоверных отличий систолического или диастолического АД от исходных значений (до приема препарата) или от значений в группе плацебо.
Таким образом, соединение формулы I, в отличие от риоцигуата и других известных стимуляторов и активаторов рГЦ, не оказывает негативного побочного гипотензивного действия на системное АД при его нормальном уровне у здорового человека.
Т блица 3 - Результаты измерений АД после однократного приема соединения формулы I (GRS) добровольцами (X ± SE)
Figure imgf000013_0001
Figure imgf000014_0001
Таблица 4 - Результаты измерений АД на 1 и 7 сутки после многократного приема соединения формулы I (GRS) добровольцами (X ± SE)
Figure imgf000014_0002
Figure imgf000015_0001
Пример 3. Влияние соединения формулы 1 на артериальное давление и другие параметры гемодинамики на модели хронической тромбоэмболической легочной гипертензии у мини-свиней
Исследование было проведено на мини-свиньях, самцах возрастом 34,4 ± 7,4 мес. и весом 81,5 ± 7,0 кг. Моделирование хронической тромбоэмболической легочной гипертензии (ХТЭЛГ) было выполнено оригинальным методом, основанным на публикациях Mercier О. и соавт. [14], Aguero J. и соавт. [15] и Loisel F. и соавт. [16] путем эмболизации артерий, питающих нижние доли левого и правого легких, неадгезирующей клеевой композицией. Внутриартериальное введение композиции данного типа приводит к эффективному заполнению крупных и мелких артериол и артерий шарообразными эмболами, которые способны слипаться между собой и не рассасываются в течение всего периода исследования. Для формирования ХТЭЛГ у 15 животных была проведена селективная эмболизация нижнедолевых ветвей правых и левых легочных артерий. Эмболизация была выполнена путем введения неадгезирующей полимерной клеевой композиции в целевые артерии. Объем введенной композиции в каждом случае варьировался индивидуально в пределах 5-10 мл. Прекращение кровотока по эмболизированным артериям контролировалось ангиографией с контрастом.
Формирование ХТЭЛГ происходило в среднем в течение 42 суток после эмболизации, что регистрировалось с помощью УЗИ и зондирования сердца. Основным признаком формирующейся ХТЭЛГ являлось повышение давление в легочной артерии более 25 мм рт. ст. Гистологические исследования в тканях и сосудах легких выявили морфологические изменения, характерные для формирующейся ХТЭЛГ прекапиллярного типа с формированием обширных зон ателектазов (спадений тканей легкого), облитерацией просвета кровеносных сосудов малого и среднего диаметра с формированием внутрисосудистых тромбов, гипертрофией стенок малых кровеносных сосудов с коллагенизацией стенки и утратой ее типичного строения.
После подтверждения формирования ХТЭЛГ животные были рандомизированы на 3 группы. Первая группа получала лечение соединением формулы I (40 мг с разбивкой по 20 мг 2 раза в сутки, перорально), вторая получала риоцигуат (4 мг с разбивкой по 2 мг 2 раза в сутки, перорально), третья (контрольная группа) животных находилась под наблюдением без терапии (получала носитель - крахмал). Длительность курса терапии составляла 36 суток.
По истечении 36 суток животным выполнялось диагностическое зондирование сердца для оценки эффективности терапии. Для этого наркотизированным животным под контролем рентгеноскопии с помощью мобильной рентгеновской установки ОЕС9900 (GE Healthcare, США) через интродьюсер в правый желудочек и далее в легочную артерию проводился катетер Corodyn (В. Braun, Германия), с помощью которого измерялись параметры гемодинамики малого круга кровообращения: среднее давление в легочной артерии, давление заклинивания легочной артерии и сердечный выброс.
Курсовое введение соединения формулы I, как и риоцигуата, приводило к выраженному лечебному эффекту: снижению среднего давления в легочной артерии на 44- 45 % (с 27,8 до 15,6 и 15,3 ммрт. ст. соответственно) и легочно-сосудистого сопротивления в 2,4 раза (с 397,7 ммрт. ст. до 165,8 и 168,8 ммрт. ст. соответственно). Давление заклинивания легочных артерий достоверно не изменялось. Еще одним значимым критерием эффективности терапии ХТЭЛГ является изменение сердечного выброса. Этот параметр характеризует насосную функцию правого желудочка сердца. В ходе моделирования патологии наблюдалось снижение сердечного выброса и его восстановление после лечения обоими препаратами (таблица 5).
Таблица 5 - Динамика параметров гемодинамики малого круга кровообращения у минисвиней с моделью ХТЭЛГ после курсового 36-суточного введения соединения формулы I (GRS) и риоцигуата (X ± SE)
Figure imgf000016_0001
Примечания'. 1 . Знак «*» означает статистически значимые различия с показателем до операции (р < 0,05),
2. Знак «#» означает статистически значимые различия с показателем в контрольной группе (Р < 0,05).
Таким образом, курсовой прием соединения формулы I (GRS) оказывает выраженный лечебный эффект при ХТЭЛГ, нормализуя основные параметры гемодинамики малого крута кровообращения, нарушенные при ХТЭЛГ -- снижает повышенное среднее давление в легочной артерии и легочно -сосудистое сопротивление, а также восстанавливает сниженный сердечный выброс правого желудочка.
Пример 4. Влияние соединения формулы 1 на параметры гемодинамики и эндотелиальную дисфункцию на модели легочной артериальной гипертензии у крыс
Исследование проводили с использованием самцов крыс стока Wistar массой 250 - 320 г. Моделирование ЛАГ воспроизводили однократным подкожным введением монокроталина в дозе 60 мг/кг. Монокроталин (Sigma- Aldrich, США) растворяли в 0,5 н НС1, затем pH доводили до 7,4 с помощью 0,5 и NaOH [17].
Для изучения влияния GRS на показатели давления крови в правом желудочке сердца и гипертрофию правого желудочка часть крыс была разделены на 4 группы: интактные животные (п = 6), контрольные животные с ЛАГ без лечения (п=8), животные с ЛАГ, которым вводили соединение формулы I (введение GRS, п = 8) и животные с ЛАГ, которым вводили препарат сравнения риоцигуат (п = 8).
Для изучения влияния GRS на эндотелиальную дисфункцию другая часть крыс также была разделены на 4 группы: интактные животные (п :=: 6), контрольные животные с ЛАГ без лечения (п = 8), животные с ЛАГ, которым вводили соединение формулы I (введение GRS, п = 8) и животные с ЛАГ, которым вводили препарат сравнения риоцигуат (п = 8).
GRS (10 мг/кг) и риоцигуат (1 мг/кг) в виде взвеси в 1 % крахмальной слизи вводили внутрижелудочно ежедневно в течение 2 недель, начиная с 15-х суток после введения монокроталина. Интактные животные и крысы контрольной группы получали 1 % крахмальную слизь по той же схеме. Использованная в исследовании доза GRS (10 мг/кг) соответствует величине среднеэффективной дозы, при которой проявляется его антигипертензивное действие. Использованная в исследовании доза риоцигуата (1 мг/кг) близка верхней границе диапазона доз (0,03-3 мг/кг), при которых проявляется его антигипертензивное действие, т.е. даже превышает величину среднеэффективной дозы.
Хирургическое вмешательство для оценки параметров гемодинамики в правом желудочке сердца проводили под изофлурановым наркозом. Ингаляцию изофлурана осуществляли с помощью аппарата для изофлуранового наркоза Ugo Basile 21050. Измерение давления в правом желудочке проводили с использованием высокоскоростной системы сбора и анализа данных МР150 («BiopacSystems, Inc.», США) и блоком для измерения давления (“OpSens”, Канада) с микродатчиком TSD282. Крысам под изофлурановым наркозом через яремную вену вводили микродатчик давления в правый желудочек сердца. Запись и обработка данных производилась на компьютере с помощью программы «AcqKnowledge 4.2 for MP 150». По кривой давления определялись максимальное (Ртах, мм рт. ст.) и минимальное (Pmm, мм рт. ст.) давление в правом желудочке, максимальная скорость изменения давления за цикл сокращения (dP/dtmax, мм рт. ст./с), сократительный индекс (CI, 1/с).
После регистрации давления в правом желудочке сердца проводилась плановая процедура эвтаназии крыс с использованием ингаляции СОг. Затем сердце извлекали и определяли массы сердца и стенки правого желудочка. Гипертрофию правого желудочка оценивали по показателям: масса стенки правого желуд очка/ масса тела (МПЖ/МТ, мг/г) и масса стенки правого желуд очка/ масса сердца (МПЖ/МС мг/мг).
Для оценки вазодилатирующей активности эндотелия сосудов крысам под ингаляционным наркозом (изофлуран) имплантировали катетер в левую сонную артерию. Системное артериальное давление регистрировали с использованием высокоскоростной системы сбора и анализа данных МР150 («BiopacSystems, Inc.», США) с модулем усилительным общего назначения DA100C и датчиком для измерения давления TSD104A. Запись и обработка данных производилась на компьютере с помощью программы «AcqKnowledge 4.2 for MP 150». Регистрировали изменение среднего артериального давления (СрАД) в ответ на функциональные сосудистые пробы: эндотелий-зависимую вазодилатацию после внутривенного введения ацетилхолина (АХ) в дозе 5 мкг/кг и эндотелий-независимую вазодилатацию после внутривенного введения натрия нитропруссида (НП) в дозе 10 мкг/кг. Введение АХ и НП осуществляли в правую бедренную вену в объеме 100 мкл. Для оценки степени сосудистой дилатации при проведении проб использовали площадь треугольника над кривой восстановления СрАД, где один катет представлял собой величину' снижения СрАД (АСрАД) в ответ на введение вазодилататора (мм рт. ст.), а другой ~ время восстановления СрАД после проведения пробы (фиг. 5). Степень эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных оценивали по коэффициенту эндотелиальной дисфункции (КЭД), который представляет собой отношение площади треугольника над кривой восстановления СрАД после введения НП к площади треугольника над кривой восстановления СрАД после введении АХ [18, 19].
Результаты оценки влияния соединения формулы I на параметры гемодинамики в правом желудочке сердца представлены в таблице 6. Таблица 6 - Влияние соединения формулы I (GRS) на показатели давления крови в правом желудочке сердца у крыс с ЛАГ
Figure imgf000019_0001
Примечания'.
1. Знак «*» означает достоверные различия по сравнению со значениями у интактных животных (Р < 0,05).
2. Знак «#» означает достоверные различия по сравнению со значениями у животных контрольной группы (р < 0,05)
Через 4 недели после введения монокроталина у крыс контрольной группы наблюдалось характерное для ЛАГ выраженное (в 2,25 раза) увеличение давления (Ртах) в правом желудочке сердца в сравнении с интактными животными. Соответственно, максимальная скорость изменения давления за цикл сокращения (dP/dtmax) возрастала в 1,8 раза. Рост давления в правом желудочке при ЛАГ отражает увеличение давления в малом круге кровообращения (давления в легочной артерии) вследствие роста легочно- сосудистого сопротивления на фоне прогрессирующего поражения сосудов и тканей легкого.
У крыс с ЛАГ, получавших GRS и риоцигуат, величина Рпих в правом желудочке сердца была статистически значимо ниже по сравнению с контролем, хотя и не снижалась до уровня у интактных животных. Статистически значимых различий параметров Ртах, Pmin, CI и dP/dtmax между группами животных, получавших GRS и риоцигуат, не выявлено.
Таким образом, соединение формулы I (GRS) и риоцигуат оказывают сопоставимый лечебный эффект у животных с моделью ЛАГ - снижают давление в правом желудочке сердца, повышенное при ЛАГ.
Результаты оценки влияния соединения формулы I на показатели, характеризующие эндотелиальную дисфункцию, представлены в таблице 7. Таблица 7 - Влияние GRS на эндотелиальную дисфункцию у крыс с легочной артериальной гипертензией
Figure imgf000020_0001
Примечания'.
1. Знак «*» означает достоверные различия по сравнению со значениями у интактных животных (р < 0,05).
2. Знак «#» означает достоверные различия по сравнению со значениями у крыс контрольной группы (р < 0,05).
3. Знак < > означает достоверные различия по сравнению со значениями у крыс, получавших риоцигуат (р < 0,05).
Через 4 недели после введения монокроталина у крыс контрольной группы показатель СрАД, а также показатели величины снижения СрАД (АСрАД) в ответ как на АХ, так и НП, были статистически значимо ниже, чем в интактной группе, что отражает формирование эндотелиальной дисфункции у животных с ЛАГ. В результате величина КЭД увеличилась до 2,36 ± 0,27 в сравнении с 1,80 ± 0,06 в контроле, хотя это снижение не достигало уровня статистической значимости.
Важно отметить, что у животных контрольной группы имела место системная гипотензия - исходное СрАД, регистрируемое до введения АХ или НП, было достоверно ниже, чем у животных интактной группы.
Курсовое введение риоцигуата вызывало разнонаправленные изменения АСрАД и времени восстановления СрАД в ответ на введение АХ и НП, что в итоге не привело к статистически значимому изменению КЭД по сравнению с показателем контрольной группы. Важно отметить, что у крыс, получавших риоцигуат, развивается еще более выраженная гипотензия - величина СрАД до введения АХ и НП составила соответственно 87 ± 3 и 88 ± 4, тогда как в контроле - 92 ± 3 и 97 ± 2, а у интактных животных -111 ± 4 и 114 ± 4. Это отражает описанный выше побочный гипотензивный эффект риоцигуата на системное АД.
При курсовом введении GRS животным с моделью ЛАГ величина СрАД статистически значимо не отличалась от значений в группе интактных животных, что говорит об отсутствии у GRS побочного гипотензивного действия на системное АД, в отличие от риоцигуата. Более того, введение GRS приводит к нормализации системного АД, пониженного у животных с ЛАГ - величина исходного СрАД у животных, получавших GRS, статистически значимо не отличилась от значений исходного СрАД у интактных животных (таблица 7).
У животных, получавших GRS, при введении АХ (эндотелий-зависимая вазодилатация) показатель АСрАД был статистически значимо выше, чем в контроле и не отличался от показателя интактной группы, а время восстановления СрАД было статистически значимо выше по сравнению с показателем интактной группой и не отличалось от величины показателя в контроле и группе с риоцигуатом. При введении НП (эндотелий-независимая вазодилатация) крысам, получавшим GRS, показатель АСрАД был статистически значимо выше по сравнению с показателем животных группы, получавших риоцигуат, и не отличался от показателя интактных животных, а время восстановления СрАД было статистически значимо ниже, чем в группе с риоцигуатом, и также не отличалось от значений в контроле и у интактных животных. Наблюдаемые изменения АСрАД и времени восстановления СрАД в ответ на эндотелий-зависимые и независимые стимулы привели к тому, что величина КЭД после курсового введения GRS статистически значимо снизилась до 1,59 ± 0,13 в сравнении с 2,36 ± 0,27 у контрольных животных, что свидетельствует о нормализации вазодилатирующей функции эндотелия (таблица 7).
Таким образом, курсовое введение соединения формулы I (GRS) у животных с моделью ЛАГ приводило к следующим эффектам:
1) нормализации гемодинамики в малом круге кровообращения - снижению повышенного при ЛАГ давления в правом желудочке сердца сопоставимому с действием риоцигуата;
2) нормализации пониженного при ЛАГ системного артериального давления, в отличие от риоцигуата, который, напротив, оказывал гипотензивное действие;
3) устранению признаков эндотелиальной дисфункции - нормализации вазодилатирующей функции эндотелия, сниженной при ЛАГ.
Источники информации
1. Humbert М, Guignabert С, Bonnet S, Dorfmuller Р, Klinger JR, Nicolls MR, Olschewski AJ, Pullamsetti SS, Schermuly RT, Stenmark KR, Rabinovitch M Pathology and pathobiology of pulmonary hypertension: state of the art and research perspectives. Eur Respir J. 2019 Jan 24;53(1): 1801887. doi: 10.1183/13993003.01887-2018.2 2. Huertas A, Guignabert C, Barbera JA, et al. Pulmonary vascular endothelium: the orchestra conductor in respiratory diseases: highlights from basic research to therapy. Eur Respir J. 2018 Apr 4;51(4): 1700745. doi: 10.1183/13993003.00745-2017.
3. Roberto B. Evora, P., M. Evora, P., C. Celotto, A., J. Rodrigues, A., & E. Joviliano, E.
(2012). Cardiovascular Therapeutics Targets on the NO sGC cGMP Signaling Pathway: A Critical Overview. Current Drag Targets, 13(9), 1207-1214. doi: 10.2174/138945012802002348.
4. Stasch J.P., Pacher P., Evgenov O.V. Soluble guanylate cyclase as an emerging therapeutic target in cardiopulmonary disease. Circulation 2011 May 24;123(20):2263-73. doi: 10.1161 /CIRCULATION AH A.110.981738.
5. Klinger J.R., Kadowitz P.J. The nitric oxide pathway in pulmonary vascular disease. Am J Cardiol. 2017 Oct 15;120(8S):S71-S79. doi: 10.1016/j.amjcard.2017.06.012.
6. Schmidt H.H., Schmidt P.M., Stasch J.P. NO- and haem-independent soluble guanylate cyclase activators. Handb Exp Pharmacol. 2009;(191):309-39. doi: 10.1007/978-3-540- 68964-5 14.
7. Mittendorf, J., Weigand, S., Alonso-Alija, C., Bischoff, E., Feurer, A., Gerisch, Mi, Stasch, J.-P. (2009) Discovery of riociguat (BAY 63-2521): a potent, oral stimulator of soluble guanylate cyclase for the treatment of pulmonary hypertension. ChemMedChem 4(5):853— 865. doi: 10.1002/cmdc.200900014.
8. Schermuly R. T., Stasch J-P., Pullamsetti S. S., Middendorff R., Muller D. et al. Expression and function of soluble guanylate cyclase in pulmonary arterial hypertension. European Respiratory Journal 2008 32: 881-891; DOI: 10.1183/09031936.00114407.
9. Khaybullina D., Patel A., Zerilli T. Riociguat (Adempas): a Novel Agent For the Treatment of Pulmonary Arterial Hypertension and Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension. P&T. 2014 Nov;39(l l):749-58. PMCID: PMC4218670.
10. Armstrong P.W., Pieske B., Anstrom K.J. et al. Vericiguat in Patients with Heart Failure and
Reduced Ejection Fraction. N Engl J Med 2020; 382: 1883-1893
DOI: 10.1056/NEJMoal915928.
11. Tobin J.V., Zimmer D.P., Shea C. et al. Pharmacological Characterization of IW-1973, a Novel Soluble Guanylate Cyclase Stimulator with Extensive Tissue Distribution, Antihypertensive, Anti-Inflammatory, and Antifibrotic Effects in Preclinical Models of Disease. J Pharmacol Exp Ther 365:664-675, June 2018 https://doi.org/10.1124/ipet.117.247429.
12. Gheorghiade M., Greene S.J Filippatos G. Cinaciguat, a soluble guanylate cyclase activator: results fromthe randomized, controlled, phase lib COMPOSE programme in acute heart failure syndromes. European Journal of Heart Failure (2012) 14, 1056-1066 doi: 10.1093/eurjhf/hfs093.
13. Патент RU 2483066 от 27.05.2013 «Новое антитромботическое и антиатероскл еретическое средство и способ его получения (варианты)».
14. Mercier О, Tivane A, Dorfmuller Р, de Perrot М, Raoux F, Decante В, et al. Piglet model of chronic pulmonary hypertension. Pulm Circ. (2013) 3:908-15. doi: 10.1086/674757
15. Aguero J, Ishikawa K, Fish KM, Hammoudi N, Hadri L, Garcia-Alvarez A, et al. Combination proximal pulmonary artery coiling and distal embolization induces chronic elevations in pulmonary artery pressure in Swine. PLoS ONE. (2015) 10:e0124526. doi: 10.1371/journal. pone.0124526
16. Loisel F, Provost B, Guihaire J, Boulate D, Arouche N, Amsallem M, et al. Autologous endothelial progenitor cell therapy improves right ventricular function in a model of chronic thromboembolic pulmonary hypertension. J Thorac Cardiovasc Surg. (2019) 157:655-66. e7. doi: 10.1016/j.jtcvs.2018.08.083.
17. Schermuly, R. T. / R. T. Schermuly, К. P. Kreisselmeier, H. A. Ghofrani, H. Yilmaz, et al. Chronic sildenafil treatment inhibits monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats. Am J Respir Crit Care Med. 2004 Jan 1 ; 169( 1 ): 39-45. doi: 10. 1164/rccm.200302-2820C.
18. Laursen J. B., Boesgaard S., Poulsen H. E., Aldershvile J. Nitrate tolerance impairs nitric oxide-mediated vasodilation in vivo. Cardiovasc Res. 1996 May;31(5):814-819. doi: 10.1016/0008-6363 (96)00027-2.
19. Покровский, M. В. Методические подходы для количественной оценки развития эндотелиальной дисфункции при LNAME-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте / М. В. Покровский, В. И. Кочкаров, Т. Г. Покровская - Текст: непосредственный /7 Рос. журн. иммунологии. - 2006. - Т. 96. - С. 60-61.

Claims

Формула изобретения
1 . Применение 2-[2-[5-(гидроксиметил)-3-метил-1,3-оксазолидин-2-илиден]-2- цианоэтилиден]индолин-3-он формулы I
Figure imgf000024_0001
в качестве средства для лечения легочных гипертензий без побочного гипотензивного действия в отношении системного артериального давления.
2. Применение средства по и. 1 для нормализации параметров гемодинамики малого круга кровообращения, включающих снижение повышенного давления в легочной артерии и правом желудочке сердца, снижение легочно-сосудистого сопротивления и восстановление сердечного выброса правого желудочка.
3. Применение средства по п. 1 при легочной артериальной гипертензии
4. Применение средства по п. 1 при хронической тромбоэмболической легочной гипертензии.
5. Применение средства по п. 1, отличающееся тем, что его применяют для введения млекопитающим в дозах от 1,5 до 200 мг.
PCT/RU2024/050109 2023-05-23 2024-05-23 Средство для лечения легочных гипертензий Ceased WO2024242594A1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2023113346 2023-05-23
RU2023113346A RU2813890C1 (ru) 2023-05-23 Средство для лечения легочных гипертензий

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2024242594A1 true WO2024242594A1 (ru) 2024-11-28

Family

ID=93590247

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2024/050109 Ceased WO2024242594A1 (ru) 2023-05-23 2024-05-23 Средство для лечения легочных гипертензий

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2024242594A1 (ru)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2622386C2 (ru) * 2012-01-31 2017-06-15 Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. Производное ситаксентана
WO2017192553A1 (en) * 2016-05-02 2017-11-09 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for the treatment of pulmonary arterial hypertension
EA030938B1 (ru) * 2014-05-14 2018-10-31 Новартис Аг Производные карбоксамида
RU2763525C2 (ru) * 2016-10-27 2021-12-30 Пульмокин, Инк. Комбинированная терапия для лечения легочной гипертензии

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2622386C2 (ru) * 2012-01-31 2017-06-15 Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. Производное ситаксентана
EA030938B1 (ru) * 2014-05-14 2018-10-31 Новартис Аг Производные карбоксамида
WO2017192553A1 (en) * 2016-05-02 2017-11-09 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for the treatment of pulmonary arterial hypertension
RU2763525C2 (ru) * 2016-10-27 2021-12-30 Пульмокин, Инк. Комбинированная терапия для лечения легочной гипертензии

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NAHAR KAMRUN ET AL.: "Liposomal Aerosols of Nitric Oxide (NO) Donor as a Long-Acting Substitute for the Ultra-Short- Acting Inhaled NO in the Treatment of PAH", PHARMACEUTICAL RESEARCH, vol. 33, no. 7, 2016, pages 1696 - 1710, XP035927745, DOI: 10.1007/s11095-016-1911-7 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5757677B2 (ja) 門脈圧亢進症の予防及び／又は治療
JP2593879B2 (ja) ジピリダモル又はモピダモルと、０―アセチルサリチル酸とを含む製薬組成物、及びその製造方法
JP2002540144A (ja) 心血管及び関連病理学治療のためのピリドキシン化合物の使用
HUP0203249A2 (hu) Dipiridamol és mopidamol alkalmazása fibrinfüggő mikrokeringési rendellenességek kezelésére és megelőzésére szolgáló gyógyszer készítésére
WO1998004558A1 (en) Active oxygen scavengers containing pterin derivatives
Provotorov et al. Endothelio-and cardioprotective effects of vitamin В6 and folic acid in modelling methionine-induced hyperhomocysteinemia
Tessone et al. Effect of matrix metalloproteinase inhibition by doxycycline on myocardial healing and remodeling after myocardial infarction
JP5947316B2 (ja) 肺高血圧症を処置するための方法
JP2000501736A (ja) ロサルタンの新用途
JP6144775B2 (ja) 腎臓病の治療に使用されるアーテミシニンおよびその誘導体
TW201302203A (zh) Ａ２b腺苷受體拮抗劑於在心肌梗塞後之病患內治療心衰竭及心律不整上之用途
JP2016041766A (ja) 急性心不全の治療のための方法および組成物
JPH02121922A (ja) Ａｃｅ阻害剤の使用
RU2813890C1 (ru) Средство для лечения легочных гипертензий
WO2024242594A1 (ru) Средство для лечения легочных гипертензий
Vromen et al. Effects of S-isopropyl isothiourea, a potent inhibitor of nitric oxide synthase, in severe hemorrhagic shock
CN109369754B (zh) 硝酸酯类化合物及其应用
Knight et al. Prostacyclin and prostanoid modifiers aid ischemic skin flap survival
MONRAD et al. Assessment of long-term therapy with milrinone and the effects of milrinone withdrawal
US20080056993A1 (en) Compositions, Methods and Kits Using Adenosine and Inosine in Combination for Diagnosis and Treatment
JP2002506463A (ja) 利尿機能および腎機能を回復するためのアデノシンａ１レセプターアンタゴニスト含有組成物および方法
Kass et al. Dose dependence of chronic positive inotropic effect of vesnarinone in patients with congestive heart failure due to idiopathic or ischemic cardiomyopathy
JP2003503353A (ja) 冠状動脈移植片血管攣縮の治療または予防方法
Brown et al. Effect of early treatment with propranolol on left ventricular function four weeks after myocardial infarction.
JP2008530186A (ja) 心不全治療法

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 24811498

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE